一種羥基積雪草苷脂質(zhì)體及其制備方法與應(yīng)用的制作方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明屬于藥物制劑和化妝品領(lǐng)域，特別是涉及羥基積雪草苷脂質(zhì)體及其制備方法與應(yīng)用。本發(fā)明將羥基積雪草苷與脂質(zhì)成分通過(guò)有機(jī)溶劑溶解或加熱熔融，經(jīng)濃縮或干燥，再加入含有羥基積雪草苷的水合介質(zhì)進(jìn)行水合，制成脂質(zhì)分散水溶液，經(jīng)均質(zhì)處理，形成羥基積雪草苷脂質(zhì)體。所述羥基積雪草苷脂質(zhì)體可制成乳液、乳霜、膏體、栓劑或凍干粉的形式，以及所有被采用的傳統(tǒng)使用方式。本發(fā)明以脂質(zhì)成分為載體，可提高羥基積雪草苷的透皮性能、緩釋和生物利用率，使羥基積雪草苷可最大程度地保留在皮膚中，從而有效地發(fā)揮功效，尤其是能夠通過(guò)皮膚局部或粘膜涂抹實(shí)現(xiàn)透皮吸收。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種羥基積雪草苷脂質(zhì)體及其制備方法與應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于藥物制劑和化妝品領(lǐng)域，具體涉及一種羥基積雪草苷脂質(zhì)體及其制備方法與應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]羥基積雪草苷是傘形科植物積雪草(Centella asiatica(L.)Urban)中主要的三萜皂苷成分之一。積雪草具有清熱利濕，消腫解毒的功效，能治療燒傷、皮膚潰瘍，如頑固性創(chuàng)傷、皮膚結(jié)核、麻風(fēng)病等。羥基積雪草苷為積雪草治療皮膚疾病主要有效成分之一，其生物活性為:(I)促進(jìn)傷口愈合和疤痕修復(fù)的作用，羥基積雪草苷可促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)(LiuM, Dai Y, Li Y et al.Planta Med, 2008，74(8):809-815.); (2)抗氧化作用，提高細(xì)胞活力，提高谷胱甘肽水平，降低乳酸脫氫酶水平，保護(hù)人內(nèi)皮臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞不被氧化(DifeiBian, Mei Liu, Ying L1.J Biochem Molecular Toxicology, 2012, 26(10):399-406.) ； (3)抗?jié)冏饔?，防止傷口感染化膿，縮短傷口愈合時(shí)間(Cheng CL, Guo JS, Luck J et al.LifeSciences, 2004，74(18):2237-2249.) ； (4)治療皮膚疾病，通過(guò)抑制SVK-14角化細(xì)胞的生長(zhǎng)達(dá)到治療牛皮癖效果(Sampson JH, Raman A, Karlsen G et al.Phytomedicine, 2001,8(3):230-235.) ; (5)消除皺紋，促進(jìn)真皮層中膠原蛋白形成，纖維蛋白再生，可以緊致表皮與真皮的連接部分，增強(qiáng)肌膚基底層細(xì)胞的活力，使肌膚達(dá)到緊致光滑的效果(ZhangQG, Wang L, Lu L et al.Jiangsu Med J, 2003, 29 (6):91-93.) ; (6)抗炎作用，能夠減輕小鼠的膠原免疫性關(guān)節(jié)炎(Hongzhong Li, Xia Gong, Li Zhang et al.Phytomedicine, 2009, 16 (10):538 - 546) ; (7)其它，抗抑郁，免疫調(diào)節(jié)等作用(Liu MR, Han T, Chen Y et al.Journalof Chinese Integrative Mdeicine, 2004，12(2):440-443)。
[0003] 除了表皮層外，多種皮膚損傷和皮膚疾病常發(fā)生于真皮層，因此，用于治療皮膚疾病的藥物必須能透過(guò)表皮，需要有一定的滲透率和積累量。盡管羥基積雪草苷對(duì)于皮膚疾病和損傷表現(xiàn)了出色的治療作用，但因其結(jié)構(gòu)中含有多個(gè)羥基和3個(gè)糖基，使其具有較大的分子量，并表現(xiàn)出較強(qiáng)的極性，無(wú)法穿透皮膚表皮的脂質(zhì)膜和角質(zhì)層，并達(dá)到需要治療的真皮部位，從而限制其有效發(fā)揮治療作用。
[0004]脂質(zhì)體是1965年英國(guó)學(xué)者Bangham等將磷脂分散在水中進(jìn)行電鏡觀(guān)察時(shí)發(fā)現(xiàn)并命名的。脂質(zhì)體作為藥物載體，在皮膚局部應(yīng)用和外用藥有多方面的優(yōu)越性:(I)磷脂雙分子層與角質(zhì)層的磷脂雙分子層結(jié)構(gòu)相似，可以改善藥物或活性成分在皮膚角質(zhì)層的通透性，促進(jìn)藥物滲透；(2)載藥脂質(zhì)體可以達(dá)到真皮層，直接作用到皮膚病變部位，起到藥物儲(chǔ)庫(kù)的作用，使藥物持續(xù)釋放，提高藥物的利用率。
[0005]由于羥基積雪草苷分子量大，難于透皮吸收，應(yīng)用存在限制，導(dǎo)致目前羥基積雪草苷在外用藥及化妝品的應(yīng)用較少。因此，對(duì)羥基積雪草苷的外用藥劑組分形態(tài)進(jìn)行研究開(kāi)發(fā)具有重要的應(yīng)用前景及經(jīng)濟(jì)效益。

【發(fā)明內(nèi)容】
[0006]為了使羥基積雪草苷更好地發(fā)揮功效，擴(kuò)大其應(yīng)用范圍并改善其應(yīng)用效果，本發(fā)明的首要目的在于提供一種羥基積雪草苷脂質(zhì)體。
[0007]本發(fā)明所述的羥基積雪草苷脂質(zhì)體采用納米脂質(zhì)體技術(shù)制備，使羥基積雪草苷包裹在脂質(zhì)成分內(nèi)。所述的羥基積雪草苷脂質(zhì)體利用脂質(zhì)成分雙分子層結(jié)構(gòu)與細(xì)胞膜的相似性，促進(jìn)極性且分子量較大的羥基積雪草苷的通透性，有助于肌膚的深層修復(fù)，增加局部效應(yīng)，提高藥物對(duì)機(jī)體特定部位的靶向性；另一方面本發(fā)明所述的羥基積雪草苷脂質(zhì)體用于經(jīng)皮吸收，可使更多的羥基積雪草苷存留在表皮或真皮之間，促進(jìn)羥基積雪草苷透皮吸收、緩釋和生物利用度，延長(zhǎng)羥基積雪草苷的作用時(shí)間，減少羥基積雪草苷進(jìn)入血液循環(huán)的量，可有效避免全身性不良反應(yīng)，也能避免由于羥基積雪草苷一次大量釋放而引起的毒副作用。
[0008]本發(fā)明的另一目的在于提供上述羥基積雪草苷脂質(zhì)體的制備方法；
[0009]本發(fā)明的再一目的在于提供上述羥基積雪草苷脂質(zhì)體的應(yīng)用。
[0010]本發(fā)明的目的通過(guò)下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn):
[0011 ] 一種羥基積雪草苷脂質(zhì)體，所述羥基積雪草苷脂質(zhì)體主要由羥基積雪草苷與脂質(zhì)成分組成；所述脂質(zhì)成分具有雙分子層結(jié)構(gòu)，所述羥基積雪草苷包裹于脂質(zhì)成分的雙分子層結(jié)構(gòu)中；所述羥基積雪草苷的質(zhì)量占羥基積雪草苷脂質(zhì)體總質(zhì)量的10~70%，所述脂質(zhì)成分的質(zhì)量占羥基積雪草苷脂質(zhì)體總質(zhì)量的30~90%。
[0012]上述 羥基積雪草苷脂質(zhì)體的粒徑為100~400nm ;優(yōu)選的，所述羥基積雪草苷脂質(zhì)體的粒徑為200~300nm ；
[0013]所述脂質(zhì)成分為磷脂；優(yōu)選的，所述磷脂為蛋黃卵磷脂、大豆卵磷脂、二硬脂酰磷脂酰膽堿、磷脂酰膽堿或磷脂酰乙醇胺中的一種以上；
[0014]優(yōu)選的，所述脂質(zhì)成分還包括膽固醇，磷脂與膽固醇的質(zhì)量比為(2~12):1 ；
[0015]優(yōu)選的，所述羥基積雪草苷脂質(zhì)體還包括非離子表面活性劑或油脂抗氧劑中的一種以上；
[0016]優(yōu)選的，所述非離子表面活性劑為單糖、雙糖、糖醇類(lèi)或聚山梨酯中的一種以上；非離子表面活性劑的添加量占羥基積雪草苷脂質(zhì)體總質(zhì)量的1%~5%。
[0017]非離子表面活性劑可在所述羥基積雪草苷脂質(zhì)體的表面成膜，提高所述羥基積雪草苷脂質(zhì)體的穩(wěn)定性，并且能提高包封率，使羥基積雪草苷不易泄露；
[0018]優(yōu)選的，所述油脂抗氧劑為維生素E醋酸酯(VE醋酸酯)、丁基羥基茴香醚(BHA)或2，6- 二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT)中的一種以上；所述油脂抗氧劑的添加量占羥基積雪草苷脂質(zhì)體總質(zhì)量的1%~5%。
[0019]油脂抗氧劑能夠防止所述脂質(zhì)成分因氧化而導(dǎo)致變質(zhì)，延長(zhǎng)所述羥基積雪草苷脂質(zhì)體的保質(zhì)期。
[0020]所述羥基積雪草苷脂質(zhì)體以常規(guī)的外用藥或化妝品原料形態(tài)進(jìn)行保存及使用；優(yōu)選的，所述羥基積雪草苷脂質(zhì)體的形態(tài)為乳液、乳霜、凝膠、膏體、栓劑或凍干粉。
[0021]上述羥基積雪草苷脂質(zhì)體的制備方法，包括如下步驟:
[0022](I)將脂質(zhì)成分溶解或熔融于有機(jī)溶劑中，制成脂質(zhì)溶液；
[0023]優(yōu)選的，所述有機(jī)溶劑為三氯甲烷、二氯甲烷、乙醚、叔丁醇、甲醇或乙醇中的一種以上，或者所述有機(jī)溶劑為三氯甲烷、二氯甲烷、乙醚、叔丁醇、甲醇或乙醇中的一種以上與水的混合溶液；
[0024](2)將脂質(zhì)溶液經(jīng)減壓蒸發(fā)制成脂質(zhì)薄膜，或?qū)⒅|(zhì)溶液經(jīng)干燥處理得到脂質(zhì)干燥粉末；
[0025]優(yōu)選的，所述干燥處理為冷凍干燥或噴霧干燥；
[0026](3)將所述脂質(zhì)薄膜或所述脂質(zhì)干燥粉末與含有羥基積雪草苷的水合介質(zhì)混合震蕩，水化成乳液，制得脂質(zhì)分散水溶液；
[0027]優(yōu)選的，所述水合介質(zhì)的pH為5~8 ;
[0028]優(yōu)選的，水合介質(zhì)為水、三羥甲基氨基甲烷緩沖液(Tris緩沖液)或磷酸鹽緩沖液(PBS)中的一種；
[0029](4)將脂質(zhì)分散水溶液進(jìn)行均質(zhì)處理，得到所述羥基積雪草苷脂質(zhì)體；
[0030]優(yōu)選的，所述均質(zhì)處理的方法為超聲分散、均質(zhì)儀乳化或微孔擠壓過(guò)濾。
[0031]上述羥基積雪草苷脂質(zhì)體在制備藥物制劑或化妝品中的應(yīng)用；
[0032]優(yōu)選的，上述羥基積雪草苷脂質(zhì)體在制備治療皮膚燒傷、皮膚損傷、粘膜損傷或瘢痕的透皮或粘膜吸收藥物制劑中的應(yīng)用；
[0033]優(yōu)選的，上述羥基積雪草苷脂質(zhì)體在制備用于疤痕修復(fù)、皮膚損傷或美白的化妝品中的應(yīng)用。
[0034]本發(fā)明相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)具有如下的優(yōu)點(diǎn)及效果:
[0035](I)本發(fā)明所述的羥基積雪草苷脂質(zhì)體可提高羥基積雪草苷的穩(wěn)定性。羥基積雪草苷被包裹于脂質(zhì)成分的雙分子層中，避免光線(xiàn)、空氣等外界不確定因素對(duì)羥基積雪草苷的破壞，從而提高其穩(wěn)定性，延長(zhǎng)其作用時(shí)間。
[0036](2)本發(fā)明所述的羥基積雪草苷脂質(zhì)體可提高羥基積雪草苷的透皮性能、緩釋性能和生物利用率。由于羥基積雪草苷易溶于水，而脂溶性較差，不利于皮膚吸收，而脂質(zhì)成分的雙分子層結(jié)構(gòu)與皮膚角質(zhì)層的磷脂雙分子層有較大的相似性和組織相溶性，可以提高羥基積雪草苷對(duì)皮膚皮膚穿透性及生物利用率，能夠通過(guò)皮膚局部或粘膜涂抹實(shí)現(xiàn)透皮吸收。脂質(zhì)成分不僅能提高羥基積雪草苷的皮膚穿透性及生物利用率，而且能使更多的羥基積雪草苷滯留在表皮和真皮之間，延長(zhǎng)其作用時(shí)間，進(jìn)而減少進(jìn)入血液循環(huán)系統(tǒng)的羥基積雪草苷的量，可有效避免全身性不良反應(yīng)，也能避免由于羥基積雪草苷一次大量釋放而引起的毒副作用。
[0037](3)本發(fā)明所述的羥基積雪草苷脂質(zhì)體可與藥物制劑和化妝品配方中其他組分調(diào)配，對(duì)于大部分藥物制劑和化妝品配方，其基質(zhì)為親水性或乳劑型基質(zhì)，因此配方中的組分應(yīng)為親水性或親脂性的成分。由于羥基積雪草苷的親脂性不強(qiáng)，使含有羥基積雪草苷的親脂性藥物制劑和化妝品的配制存在困難。脂質(zhì)成分是一種親水親脂性高的藥物載體，將羥基積雪草苷用脂質(zhì)成分包封，能明顯提高羥基積雪草苷的親脂性，可與配方中其他組分調(diào)配，使含有羥基積雪草苷的藥物制劑和化妝品的配制更為簡(jiǎn)單方便。
【專(zhuān)利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0038]圖1為所述羥 基積雪草苷脂質(zhì)體在不同溫度下的穩(wěn)定性測(cè)定曲線(xiàn)圖(n=3)。
[0039]圖2為所述羥基積雪草苷脂質(zhì)體在不同溫度下的泄露性測(cè)定曲線(xiàn)圖(n=3)。
[0040]圖3為所述羥基積雪草苷脂質(zhì)體的形貌電鏡掃描圖。[0041]圖4為所述羥基積雪草苷脂質(zhì)體的粒徑大小分布圖。
【具體實(shí)施方式】
[0042]下面結(jié)合實(shí)施例及附圖對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的描述，但本發(fā)明的實(shí)施方式不限于此。
[0043]實(shí)施例1
[0044]一種羥基積雪草苷脂質(zhì)體，采用如下方法制得:
[0045](1)稱(chēng)取4.0g蛋黃卵磷脂與0.5g膽固醇置于100mL的爺形瓶?jī)?nèi)，加入30ml三氯甲烷將其配制成脂質(zhì)溶液；
[0046](2)將上述茄形瓶置于30°C恒溫水浴中，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上減壓蒸發(fā)除去三氯甲烷，在茄形瓶?jī)?nèi)壁形成一層脂質(zhì)薄膜；
[0047](3)往茄形瓶?jī)?nèi)加入30ml溶解有1.0g羥基積雪草苷的pH=6.5的磷酸鹽緩沖溶液，旋轉(zhuǎn)振搖使脂質(zhì)薄膜從茄形瓶?jī)?nèi)壁上脫落，水化形成均勻的乳液；
[0048](4)將上述乳液通過(guò)水浴式超聲儀在冰水浴中超聲60s，得所述羥基積雪草苷脂質(zhì)體，放置于4°C下保存。
[0049]實(shí)施例2
[0050]一種羥基積雪草苷脂質(zhì)體，采用如下方法制得:
[0051](I)稱(chēng)取蛋黃卵磷脂4.0g、膽固醇0.5g、VE醋酸酯0.1g置于100mL的茄形瓶?jī)?nèi)，加入30ml三氯甲烷將其配制成脂質(zhì)溶液；
[0052](2)將上述茄形瓶置于30°C恒溫水浴中，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上減壓蒸發(fā)除去三氯甲烷，在茄形瓶?jī)?nèi)壁形成一層脂質(zhì)薄膜；
[0053](3)稱(chēng)取1.5g磷酸二氫鈉，于250ml容量瓶中定容，加氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值為6.5，得到pH=6.5的磷酸鹽緩沖溶液；
[0054](4)往步驟(2)所述茄形瓶加入30ml溶解有1.0g羥基積雪草苷的上述磷酸鹽緩沖溶液，旋轉(zhuǎn)振搖使脂質(zhì)薄膜從內(nèi)壁上脫落，水化脂質(zhì)薄膜形成均勻的乳液；
[0055](5)將上述乳液通過(guò)水浴式超聲儀在冰水浴中超聲60s，得所述羥基積雪草苷脂質(zhì)體，放置于4°C下保存。
[0056]實(shí)施例3
[0057]—種羥基積雪草苷脂質(zhì)體，采用如下方法制得:
[0058](I)稱(chēng)取4.0g蛋黃卵磷脂、0.5g膽固醇、0.1g VE醋酸酯溶于30ml無(wú)水乙醇中，加熱振搖燒瓶使添加物完全溶解，配制成脂質(zhì)溶液。
[0059](2)將裝有脂質(zhì)溶液的燒瓶置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上，于50°C減壓蒸發(fā)除去乙醇，形成脂質(zhì)薄膜；
[0060](3)將1.0g羥基積雪草苷加入30ml磷酸鹽緩沖溶液(PBS，pH=6.5)，制成羥基積雪草苷溶液；將羥基積雪草苷溶液加入步驟(2)的燒瓶中，振搖以水化脂質(zhì)薄膜，形成乳液；
[0061](4)將上述乳液過(guò)微孔濾膜擠壓處理，得所述羥基積雪草苷脂質(zhì)體。
[0062]實(shí)施例4
[0063]一種羥基積雪草苷脂質(zhì)體，采用如下方法制得:
[0064](I)稱(chēng)取4.0g大豆卵磷脂、0.5g膽固醇、0.1g VE醋酸酯溶于20ml叔丁醇中，配制成脂質(zhì)溶液。
[0065](2)將上述脂質(zhì)溶液進(jìn)行冷凍干燥，得到脂質(zhì)干燥粉末。
[0066](3)將1.0g羥基積雪草苷溶于30ml磷酸鹽沖溶液(pH=6.0)中，制成羥基積雪草苷溶液；將步驟(2)所述脂質(zhì)干燥粉末加入所述羥基積雪草苷溶液中，震蕩分散，經(jīng)微射流均質(zhì)儀處理，得到所述羥基積雪草苷脂質(zhì)體。
[0067]實(shí)施例5
[0068]一種羥基積雪草苷脂質(zhì)體，采用如下方法制得:
[0069](1)稱(chēng)取4.0g蛋黃卵磷脂置于100mL的茄形瓶?jī)?nèi)，加入20ml三氯甲烷將其配制成脂質(zhì)溶液；
[0070](2)將上述茄形瓶置于30°C恒溫水浴中，在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上減壓蒸發(fā)除去三氯甲烷，在茄形瓶?jī)?nèi)壁形成一層脂質(zhì)薄膜；
[0071](3)往茄形瓶?jī)?nèi)加入30ml溶解有0.4g羥基積雪草苷的水溶液，旋轉(zhuǎn)振搖使脂質(zhì)薄膜從茄形瓶?jī)?nèi)壁上脫落，水化形成均勻的乳液；
[0072](4)將上述乳液通過(guò)水浴式超聲儀在冰水浴中超聲60s，得所述羥基積雪草苷脂質(zhì)體，放置于4°C下保存。
[0073]實(shí)施例6
[0074]一種羥基積雪草苷脂質(zhì)體，采用如下方法制得:
[0075](1)稱(chēng)取0.6g 二硬脂酰磷脂酰膽堿、0.1g膽固醇、0.05g 丁基羥基茴香醚溶于IOml叔丁醇溶液中，加熱振搖燒瓶使添加物完全溶解，配制成脂質(zhì)溶液。
[0076](2)將上述裝有脂質(zhì)溶液的燒瓶置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上，于50°C減壓蒸發(fā)除去乙醇，形成脂質(zhì)薄膜；
[0077](3)將0.4g羥基積雪草苷加入到10ml三羥甲基氨基甲烷緩沖液(pH=8.0)中，制成羥基積雪草苷溶液；將羥基積雪草苷溶液加入步驟(2)的燒瓶中，振搖以水化脂質(zhì)薄膜，形成乳液；
[0078](4)將上述乳液過(guò)微孔濾膜擠壓處理，得所述羥基積雪草苷脂質(zhì)體。
[0079]實(shí)施例7
[0080]一種羥基積雪草苷脂質(zhì)體，采用如下方法制得:
[0081](I)稱(chēng)取1.2g磷脂酰膽堿、0.1g膽固醇、0.05g2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚溶于IOml甲醇中，加熱振搖燒瓶使添加物完全溶解，配制成脂質(zhì)溶液。
[0082](2)將上述裝有脂質(zhì)溶液的燒瓶置于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上，于30°C減壓蒸發(fā)除去甲醇，形成脂質(zhì)薄膜；
[0083](3)將0.4g羥基積雪草苷加入到IOml三羥甲基氨基甲烷緩沖液(pH=7.0)，制成羥基積雪草苷溶液；將羥基積雪草苷溶液加入步驟(2)的燒瓶中，振搖以水化脂質(zhì)薄膜，形成乳液；
[0084](4)將上述乳液過(guò)微孔濾膜擠壓處理，得所述羥基積雪草苷脂質(zhì)體。
[0085]實(shí)施例8
[0086]一種羥基積雪草苷脂質(zhì)體，采用如下方法制得:
[0087](I)稱(chēng)取4.0g蛋黃卵磷脂、0.1g山梨糖醇20置于100mL的茄形瓶?jī)?nèi)，加入20ml乙醇將其配制成脂質(zhì)溶液；[0088](2)將上述脂質(zhì)溶液進(jìn)行冷凍干燥，得到脂質(zhì)干燥粉末。
[0089](3)將0.6g羥基積雪草苷溶于30ml 磷酸鹽沖溶液(pH=6.0)中，制成羥基積雪草苷溶液；將步驟(2)所述脂質(zhì)干燥粉末加入所述羥基積雪草苷溶液中，震蕩分散，經(jīng)微射流均質(zhì)儀處理，得到所述羥基積雪草苷脂質(zhì)體。
[0090]實(shí)驗(yàn)例I
[0091]穩(wěn)定性是脂質(zhì)體的重要評(píng)價(jià)指標(biāo)，它在很大程度上決定了脂質(zhì)體的存放和使用期限。脂質(zhì)體的粒徑和分布與其穩(wěn)定性有關(guān)，在不需要定量測(cè)定顆粒大小的分布時(shí)，濁度法是一種測(cè)定脂質(zhì)體相對(duì)大小非常實(shí)用的方法，通常用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定脂質(zhì)體吸光度的改變，吸光度越大表明脂質(zhì)體粒徑相對(duì)較大。
[0092]取三組上述實(shí)施例1制備的羥基積雪草苷脂質(zhì)體，分別避光放置于4°C、25°C、37°C環(huán)境下，在60天內(nèi)多次取樣，以蒸餾水為空白對(duì)照，用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)(ShimadzuUV-2450, Japan)在500nm下測(cè)定羥基積雪草苷脂質(zhì)體的吸光度，以反應(yīng)脂質(zhì)體相對(duì)大小的變化情況。羥基積雪草苷脂質(zhì)體于4°C、25°C、37°C下不同時(shí)間的吸光度測(cè)定結(jié)果如圖1所示，結(jié)果表明，隨著時(shí)間的增長(zhǎng)和溫度的升高，吸光度值逐漸增大，說(shuō)明溫度的升高加速了分子的熱運(yùn)動(dòng)，促使其聚集、融合，使得羥基積雪草苷脂質(zhì)體粒徑變大。因此，本發(fā)明所述羥基積雪草苷脂質(zhì)體于低溫(4°C )保存比較穩(wěn)定。
[0093]實(shí)驗(yàn)例2
[0094]泄漏率是脂質(zhì)體除包封率外的另一重要評(píng)價(jià)指標(biāo)，用透析法測(cè)定所述羥基積雪草苷脂質(zhì)的泄露性，計(jì)算公式為:
[0095]泄漏率(%)=(存儲(chǔ)期間羥基積雪草苷的泄露量/制備時(shí)包封的羥基積雪草苷的量)X 100%,
[0096]取三組實(shí)施例2制備的羥基積雪草苷脂質(zhì)體，用蒸餾水透析11小時(shí)，測(cè)定其包封量，將此透析袋放入重置的蒸餾水中，分別避光放置于4°C、25°C、37°C下，不同時(shí)間點(diǎn)取樣，并加入同量的蒸餾水。用高效液相色譜(AgilentllOO)測(cè)定泄漏出的羥基積雪草苷的含量。所述羥基積雪草苷脂質(zhì)體在不同溫度下泄漏率-時(shí)間曲線(xiàn)如圖2所示，結(jié)果表明，隨著時(shí)間的增長(zhǎng)和溫度的升高，泄漏率逐漸增大，說(shuō)明溫度的升高加速脂質(zhì)分子的熱運(yùn)動(dòng)，使膜的通透性變大，羥基積雪草苷易泄露，直到在8h時(shí)達(dá)到包封和泄露平衡，泄露率不再變化。因此，本發(fā)明所述羥基積雪草苷脂質(zhì)體置于低溫(4°C )保存比較穩(wěn)定。
[0097]實(shí)驗(yàn)例3
[0098]將實(shí)施例3制備的羥基積雪草苷脂質(zhì)體稀釋后放在載玻片上，在室溫下自然風(fēng)干，用掃描電鏡(LE01530VP，Germany LEO Ltd)測(cè)定粒徑，并描述羥基積雪草苷脂質(zhì)體外觀(guān)，得到掃描電鏡照片(原圖X5000)如圖3所示。由圖3可知，本發(fā)明所述羥基積雪草苷脂質(zhì)體外觀(guān)為球形，粒徑相對(duì)集中在200-300nm。
[0099]實(shí)驗(yàn)例4
[0100]將實(shí)施例4 中制備的羥基積雪草苷脂質(zhì)體，稀釋后進(jìn)行激光粒度測(cè)定(Malvernzeta-size Nano ZS, Malvern Instrument Ltd, UK),測(cè)定其粒徑分布和相應(yīng)的 Zeta 電勢(shì)，其平均粒徑為260nm，zeta電勢(shì)為-33.6mV。測(cè)定的羥基積雪草苷脂質(zhì)體的粒度大小及分布圖如圖4所示。
[0101]上述實(shí)施例為本發(fā)明較佳的實(shí)施方式，但本發(fā)明的實(shí)施方式并不受上述實(shí)施例的限制，其他的任何未背離本發(fā)明的精神實(shí)質(zhì)與原理下所作的改變、修飾、替代、組合、簡(jiǎn)化，均應(yīng)為等效 的置換方式，都包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種羥基積雪草苷脂質(zhì)體，其特征在于:所述羥基積雪草苷脂質(zhì)體主要由羥基積雪草苷與脂質(zhì)成分組成；所述脂質(zhì)成分具有雙分子層結(jié)構(gòu)，所述羥基積雪草苷包裹于脂質(zhì)成分的雙分子層結(jié)構(gòu)中；所述羥基積雪草苷的質(zhì)量占羥基積雪草苷脂質(zhì)體總質(zhì)量的10~70%，所述脂質(zhì)成分的質(zhì)量占羥基積雪草苷脂質(zhì)體總質(zhì)量的30~90%。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的羥基積雪草苷脂質(zhì)體，其特征在于:所述羥基積雪草苷脂質(zhì)體的粒徑為100~400nm ;所述脂質(zhì)成分為磷脂。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的羥基積雪草苷脂質(zhì)體，其特征在于:所述羥基積雪草苷脂質(zhì)體的粒徑為200~300nm ;所述磷脂為蛋黃卵磷脂、大豆卵磷脂、二硬脂酰磷脂酰膽堿、磷脂酰膽堿或磷脂酰乙醇胺中的一種以上。
4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的羥基積雪草苷脂質(zhì)體，其特征在于:所述脂質(zhì)成分還包括膽固醇，所述磷脂與膽固醇的質(zhì)量比為(2~12):1。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的羥基積雪草苷脂質(zhì)體，其特征在于:所述羥基積雪草苷脂質(zhì)體還包括非離子表面活性劑或油脂抗氧劑中的一種以上；所述非離子表面活性劑為單糖、雙糖、糖醇類(lèi)或聚山梨酯中的一種以上；所述油脂抗氧劑為維生素E醋酸酯、丁基羥基茴香醚或2，6-二叔丁基-4-甲基苯酚中的一種以上。
6.根據(jù)權(quán)利要求1~5任一項(xiàng)所述的羥基積雪草苷脂質(zhì)體，其特征在于:所述羥基積雪草苷脂質(zhì)體的形態(tài)為乳液、乳霜、凝膠、膏體、栓劑或凍干粉。
7.根據(jù)權(quán)利要求1~6任一項(xiàng)所述的羥基積雪草苷脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于包括如下步驟: (1)將脂質(zhì)成分溶解或熔融于有機(jī)溶劑中，制成脂質(zhì)溶液； (2)將脂質(zhì)溶液經(jīng)減壓蒸發(fā)制成脂質(zhì)薄膜，或?qū)⒅|(zhì)溶液經(jīng)干燥處理得到脂質(zhì)干燥粉末； (3)將所述脂質(zhì)薄膜或所述脂質(zhì)干燥粉末與含有羥基積雪草苷的水合介質(zhì)混合震蕩，水化成乳液，制得脂質(zhì)分散水溶液； (4)將脂質(zhì)分散水溶液進(jìn)行均質(zhì)處理，得到所述羥基積雪草苷脂質(zhì)體。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的羥基積雪草苷脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于: 步驟(1)所述有機(jī)溶劑為三氯甲烷、二氯甲烷、乙醚、叔丁醇、甲醇或乙醇中的一種以上，或者所述有機(jī)溶劑為三氯甲烷、二氯甲烷、乙醚、叔丁醇、甲醇或乙醇中的一種以上與水的混合溶液； 步驟(2)所述干燥處理為冷凍干燥或噴霧干燥； 步驟(3)所述的水合介質(zhì)的pH值為5~8 ; 步驟(3)所述的水合介質(zhì)為水、三羥甲基氨基甲烷緩沖液或磷酸鹽緩沖液中的一種； 步驟(4)所述均質(zhì)處理的方法為超聲分散、均質(zhì)儀乳化或微孔擠壓過(guò)濾。
9.根據(jù)權(quán)利要求1~6任一項(xiàng)所述的羥基積雪草苷脂質(zhì)體在制備藥物制劑或化妝品中的應(yīng)用。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于:所述羥基積雪草苷脂質(zhì)體在制備治療皮膚燒傷、皮膚損傷、粘膜損傷或瘢痕的透皮或粘膜吸收藥物制劑中的應(yīng)用，或所述的羥基積雪草苷脂質(zhì)體在制備用于疤痕修復(fù)、皮膚損傷或美白的化妝品中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】A61Q19/00GK103893122SQ201410123927
【公開(kāi)日】2014年7月2日 申請(qǐng)日期:2014年3月28日 優(yōu)先權(quán)日:2014年3月28日
【發(fā)明者】劉美鳳, 王慧娟 申請(qǐng)人:華南理工大學(xué)