專利名稱：含有突變體淀粉酶和氧漂白劑的洗滌劑組合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及在浸泡條件下，即織物被浸泡在含有水和洗滌劑組分的浸泡液中的條件下織物的清洗，該過程作為一般洗滌操作的第一步驟，或者作為一個(gè)單獨(dú)步驟。
背景技術(shù)：
織物浸泡操作已描述于本領(lǐng)域中。在這樣的浸泡操作中，將織物與浸泡液接觸幾小時(shí)到過夜的一段長時(shí)間。此洗衣方法具有的優(yōu)點(diǎn)是使得織物與浸泡液中主要活性組分間的接觸時(shí)間最大化。它還具有的優(yōu)點(diǎn)是減少或免除了包括機(jī)械攪拌在內(nèi)的一般洗衣操作的需要，或者它提高了后續(xù)一般洗衣操作的效率。
這樣的浸泡操作對除去包括蛋白物質(zhì)和淀粉混合物的粘著污漬，如血跡和食物污漬，特別有效。因此，浸泡組合物中應(yīng)包括一種蛋白酶和一種淀粉酶是期望的。但是，與這樣的浸泡組合物一起使用，當(dāng)浸泡組合物溶解形成浸泡液時(shí)，淀粉酶本身會受到解蛋白進(jìn)攻。在浸泡過程中這是一個(gè)特別嚴(yán)重的問題，因?yàn)橥ǔ８鹘M分之間，特別是淀粉酶和蛋白酶之間的接觸時(shí)間一般要比典型洗衣操作中長得多。因此，本發(fā)明組合物的一個(gè)目的就是提供包括一種淀粉酶和一種蛋白酶的浸泡組合物，其中淀粉酶在一段相當(dāng)長的時(shí)間內(nèi)將抗擊解蛋白進(jìn)攻。
對浸泡組合物的另一要求是它們應(yīng)該包括一種氧漂白劑，優(yōu)選高含量的這種漂白劑。實(shí)際上，氧漂白劑可在組合物的活性物與帶污垢的織物之間的接觸時(shí)間最大的浸泡操作中找到合適的高效條件，但是，漂白劑的存在也會在整個(gè)的浸泡操作過程中不利于酶的穩(wěn)定性。實(shí)際上，漂白劑，特別是在高含量時(shí)，易于使酶的四級結(jié)構(gòu)變性，將淀粉酶暴露于甚至更具有威脅性的解蛋白進(jìn)攻中。
對浸泡組合物還有另一個(gè)要求是它們應(yīng)該包括大量的助洗劑。實(shí)際上，助洗劑的存在對于有效地控制水的硬度是必需的。與通常的洗滌相比，在織物與洗滌溶液接觸時(shí)間更長的浸泡條件下，助洗劑甚至是更加必需的，因此必須在更長的時(shí)間內(nèi)控制水的硬度。為了適應(yīng)浸泡方法的特殊性，浸泡組合物必須含有高含量的助洗劑。然而，高含量助洗劑的存在也會不利于酶的活性。確實(shí)是這樣，這些助洗劑易于結(jié)合存在于浸泡溶液中的所有的鈣，而有些鈣是保證適當(dāng)?shù)拿富钚运枰摹?br> 最后，對浸泡組合物的另一要求是它們應(yīng)該包括一種大量的陰離子表面活性劑。考慮到成本和效果的原因，一類優(yōu)選的陰離子表面活性劑為烷基苯磺酸鹽，特別是直鏈烷基苯磺酸鹽。但是，某些陰離子表面活性劑，特別是直鏈烷基苯磺酸鹽(LAS)似乎不利于酶的穩(wěn)定性。
因此本發(fā)明的一個(gè)目的是提供適合于浸泡操作的浸泡組合物，其包括一種與一種蛋白酶、一種漂白體系、一種高含量的助洗劑和一種優(yōu)選LAS的陰離子表面活性劑組合的淀粉酶，其中所說的淀粉酶在一段長時(shí)間內(nèi)保持其活性，與浸泡操作的特征相符合。
發(fā)明概述在一種實(shí)施方案中，本發(fā)明包括含有下列的組合物——一種氧漂白劑；——占總組合物重量5％(50％的助洗劑；——占總組合物重量0.5％(20％的一種陰離子表面活性劑，優(yōu)選直鏈烷基苯磺酸鹽；——一種蛋白酶；和——一種穩(wěn)定性提高的淀粉酶，所說的穩(wěn)定性的提高相對于所說淀粉酶的母體/非突變體形式。
在另一種實(shí)施方案中，本發(fā)明包括一種浸泡織物的方法，其中所說的織物被浸泡于含有水和有效量的上述組合物的浸泡液中。
發(fā)明詳述本發(fā)明包括一種組合物和一種浸泡織物的方法。此組合物，此后稱之為浸泡組合物，用于浸泡方法中。
A-組合物在其第一實(shí)施方案中，本發(fā)明包括一種組合物，其含有一種漂白劑、一種助洗劑、一種陰離子表面活性劑、一種蛋白酶和一種淀粉酶。
1-氧漂白劑作為第一必要的組分，本發(fā)明的組合物含有一種氧漂白劑。組合物中合適的氧漂白劑可來自于多種來源，如過氧化氫或過氧化氫的任何加合物，或有機(jī)過氧酸，或其混合物。過氧化氫的加合物是指將過氧化氫加入到第二種化合物中以提供加合物而形成的化合物，第二種化合物可以是，例如一種無機(jī)鹽、尿素或有機(jī)羧酸鹽。過氧化氫的加合物的實(shí)例包括無機(jī)過水合物鹽、過氧化氫與有機(jī)羧酸鹽、尿素形成的化合物、和包合了過氧化氫的化合物。
無機(jī)過水合物鹽的實(shí)例包括過硼酸鹽、過碳酸鹽、過磷酸鹽和過硅酸鹽。無機(jī)過水合物鹽一般為堿金屬鹽。過碳酸、過硼酸的堿金屬鹽或其混合物是優(yōu)選用于本發(fā)明的無機(jī)過水合物鹽。優(yōu)選的堿金屬過碳酸鹽為過碳酸鈉。
其它合適的氧漂白劑包括過硫酸鹽，特別是過硫酸鉀K2S2O8和過硫酸鈉Na2S2O8。
本發(fā)明中的浸泡組合物可含有以組合物的重量計(jì)1％～60％的過氧化氫源，優(yōu)選為2％～40％，更優(yōu)選為15％～40％。
2-助洗劑作為第二必要的組分，本發(fā)明組合物含有一種助洗劑或其混合物，其量為總組合物重量的5％～50％，優(yōu)選10％～40％，最優(yōu)選15％～30％。用于本發(fā)明的合適的助洗劑包括無機(jī)和有機(jī)助洗劑。
無機(jī)或含磷洗滌劑助洗劑包括，但并不限于，聚磷酸鹽(以三聚磷酸鹽、焦磷酸鹽和玻璃態(tài)聚合偏磷酸鹽為例)、膦酸鹽、肌醇六磷酸、硅酸鹽、碳酸鹽(包括碳酸氫鹽和倍半碳酸鹽)、硫酸鹽和硅鋁酸鹽的堿金屬鹽、銨鹽和鏈烷醇銨鹽。但是，在某些地區(qū)要求非磷酸鹽助洗劑。重要的是，本發(fā)明的組合物即使在所謂的弱助洗劑(與磷酸鹽相比而言)例如檸檬酸鹽的存在下，或者在使用沸石或?qū)訝罟杷猁}助洗劑時(shí)會發(fā)生的所謂的欠復(fù)配(underbuilt)條件下也會發(fā)揮好得令人驚奇的功能。
硅酸鹽助洗劑的實(shí)例為堿金屬硅酸鹽，特別是SiO2∶NaO2比率在1∶6∶1(3∶2∶1范圍內(nèi)的那些堿金屬硅酸鹽和層狀硅酸鹽，如描述于1987年5月12日授權(quán)于H.P.Rieck的美國專利4,664,839中的層狀硅酸鈉。NaSKS-6(一般此處縮寫為“SKS-6”)是Hoechst出售的結(jié)晶層狀硅酸鹽的商標(biāo)。與沸石助洗劑不同，NaSKS-6硅酸鹽助洗劑不含鋁。NaSKS-6具有層狀硅酸鹽的δ-Na2SiO5無定形的形式。它可以通過如描述于德國DE-A-3417649和DE-A-3742043中的那些方法制備。SKS-6是用于本發(fā)明的非常優(yōu)選的層狀硅酸鹽，但是其它這樣的層狀硅酸鹽也可用于本發(fā)明，如具有通式NaMSixO2x+1yH2O的那些，其中M為鈉或氫，x為1.9～4的數(shù)字，優(yōu)選2，且y為0～20的數(shù)字，優(yōu)選0。可從Hoechst購得的各種其它層狀硅酸鹽包括α、β和γ形式的NaSKS-5、NaSKS-7和NaSKS-11。如上所述，δ-Na2SiO5(NaSKS-6形式)最優(yōu)選用于本發(fā)明。其它的硅酸鹽也是有用的，例如硅酸鎂，它在粒狀制劑中可用作松脆劑、用作氧漂白劑的穩(wěn)定劑和用作泡沫控制體系的一種組分。
碳酸鹽助洗劑的實(shí)例為堿土金屬和堿金屬碳酸鹽，如描述于1973年11月15日公開的德國專利申請No.2321001中的那些。
硅鋁酸鹽助洗劑在本發(fā)明中是有用的。硅鋁酸鹽助洗劑在現(xiàn)今出售的大多數(shù)重垢粒狀洗滌劑組合物中是非常重要的，并且也是液體洗滌劑制劑中的重要助洗劑組分。硅鋁酸鹽助洗劑包括具有下列經(jīng)驗(yàn)式的那些Mz[(zAlO2)y]xH2O其中z和y為至少是6的整數(shù)，z與y的摩爾比在1.0～約0.5范圍內(nèi)，x為約15～約264的整數(shù)。
有用的硅鋁酸鹽在結(jié)構(gòu)上可以是結(jié)晶的或無定形的，可以是天然存在的硅鋁酸鹽或通過合成得到。一種生產(chǎn)硅鋁酸鹽離子交換材料的方法描述于1976年10月12日頒布的Krummel等人的美國專利3985669中。優(yōu)選的用于本發(fā)明的合成結(jié)晶硅鋁酸鹽離子交換材料可在名稱沸石A、沸石P(B)、沸石MAP和沸石X下購得。在一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，結(jié)晶硅鋁酸鹽離子交換材料具有式Na12[(AlO2)12(SiO2)12]xH2O其中x為約20～約30，特別是約27。這種材料稱為沸石A。脫水沸石(x＝0～10)也可用于本發(fā)明。優(yōu)選地，硅鋁酸鹽具有直徑為約0.1～10微米的粒子尺寸。
適用于本發(fā)明目的的有機(jī)洗滌劑助洗劑包括，但并不限于，多種聚羧酸鹽化合物。本發(fā)明所用的聚羧酸鹽指的是具有多個(gè)羧基基團(tuán)的化合物，優(yōu)選至少3個(gè)羧基基團(tuán)。聚羧酸鹽助洗劑一般以酸的形式加到組合物中，但也可以以中和的鹽的形式加入。當(dāng)以鹽的形式使用時(shí)，堿金屬鹽，如鈉鹽、鉀鹽和鋰鹽或鏈烷醇銨鹽是優(yōu)選的。
聚羧酸鹽助洗劑中包括多種有用的材料。一類重要的聚羧酸鹽助洗劑包括醚聚羧酸鹽，包括氧聯(lián)琥珀酸鹽，如1964年4月7日授權(quán)的Berg的美國專利3128287和1972年1月18日授權(quán)的Lamberti等人的美國專利3635830中所公開。還參見1987年5月5日授權(quán)給Bush等人的美國專利4663071中的“TMS/TDS”助洗劑。合適的醚聚羧酸鹽也包括環(huán)狀化合物，特別是脂環(huán)化合物，如描述于美國專利3923679、3835163、4120874和4102903中的那些。
其它有用的脫垢助洗劑包括醚羥基聚羧酸鹽，如1，3，5-三羥基苯基-2，4，6-三磺酸和羧甲氧基琥珀酸，聚乙酸如乙二胺四乙酸和次氮基三乙酸的各種堿金屬鹽、銨鹽和取代銨鹽，還有聚羧酸鹽如苯六甲酸、琥珀酸、氧聯(lián)琥珀酸、聚馬來酸、苯1，3，5-三羧酸、羧甲氧基琥珀酸及其可溶鹽。
用于本發(fā)明的其它有用的聚羧酸鹽助洗劑包括式I的助洗劑或其混合物

其中Y為共聚用單體或共聚用單體混合物；R1和R2為漂白劑和堿穩(wěn)定的聚合物末端基團(tuán)；R3為H、OH或C1-4烷基；M為H、堿金屬、堿土金屬、銨或取代銨；p為0～2；n至少為10。
優(yōu)選用于本發(fā)明的聚合物分為兩類。第一類屬于共聚物類型，其由不飽和聚羧酸如馬采酸、檸康酸、衣康酸、中康酸及其鹽作為第一單體，不飽和一元羧酸如丙烯酸或α-Cl-4烷基丙烯酸作為第二單體形成。參考上式I，屬于所說的第一類的聚合物為p不為0且Y選自以上所列舉的酸的那些。優(yōu)選的這類聚合物為根據(jù)上式I，其中Y為馬來酸的那些。還有，在優(yōu)選的實(shí)施方案中，R3和M為H，且n的值使得聚合物具有1000～400000原子質(zhì)量單位的分子量。
第二類優(yōu)選用于本發(fā)明的聚合物屬于參考上式I，p為0且R3為H或C1-4烷基的一類聚合物。在優(yōu)選實(shí)施方案中，n的值使得聚合物具有1000～400000原子質(zhì)量單位的分子量。在非常優(yōu)選的實(shí)施方案中，R3和M為H。
上式I中的堿穩(wěn)定聚合物末端基團(tuán)R1和R2適當(dāng)?shù)匕ㄍ榛?、氧烷基和烷基羧酸基及其鹽和酯。
上述n值-聚合物的聚合度-可通過重均聚合物分子量除以平均單體分子量而測定。因此，對于重均分子量為15500、包含摩爾百分?jǐn)?shù)為30％的馬來酸衍生單元的馬來酸-丙烯酸共聚物來說，n為182(即15500/(116×0.3+72×0.7))。
相對于聚苯乙烯磺酸鈉聚合物標(biāo)準(zhǔn)，該標(biāo)準(zhǔn)得自英國Shropshire的聚合物實(shí)驗(yàn)室有限公司，溫度控制塔在40℃下，該聚合物標(biāo)準(zhǔn)為在pH7.0、80/20的水/乙腈中，0.15M磷酸二氫鈉和0.02M四甲基氫氧化銨。
在以上所有的聚合物中，非常優(yōu)選用于本發(fā)明的是n平均為100～800，優(yōu)選為120～400的第一類聚合物。
檸檬酸鹽助洗劑，例如檸檬酸及其可溶性鹽(特別是鈉鹽)，是特別重要的聚羧酸鹽助洗劑，因其可從可再生的來源中得到及其生物降解能力。檸檬酸鹽還能與沸石和/或?qū)訝罟杷猁}助洗劑結(jié)合使用。氧聯(lián)琥珀酸鹽也是在該組合物和結(jié)合中特別有用的。
還適用于本發(fā)明洗滌劑組合物中的是1986年1月28日授權(quán)的Bush的美國專利4566984中公開的3，3-二羧基-4-氧雜-1，6-己二酸鹽和相關(guān)化合物。有用的琥珀酸助洗劑包括C5-C20烷基和鏈烯基琥珀酸及其鹽。一種特別優(yōu)選的該類化合物為十二碳烯基琥珀酸。琥珀酸鹽助洗劑的具體實(shí)例包括十二烷基琥珀酸鹽、十四烷基琥珀酸鹽、十六烷基琥珀酸鹽、2-十二碳烯基琥珀酸鹽(優(yōu)選)、2-十五碳烯基琥珀酸鹽等。十二烷基琥珀酸鹽是該組中優(yōu)選的助洗劑，并且描述于1986年11月5日公開的歐洲專利申請86200690.5/0200263中。
其它合適的聚羧酸鹽公開于1979年3月13日授權(quán)的Crutchfield等人的美國專利4144226和1967年3月7日授權(quán)的Diehl的美國專利3308067中。還參見Diehl的美國專利3723322。
脂肪酸，例如C12-C18一元羧酸，也可單獨(dú)摻入到組合物中，或者與以前所說的助洗劑，特別是檸檬酸鹽和/或琥珀酸鹽助洗劑，結(jié)合使用以提供附加的助洗劑活性。
在可使用磷基助洗劑的情況下，并且尤其是在用于手洗操作的制劑中，可使用各種堿金屬磷酸鹽，如眾所周知的三聚磷酸鈉、焦磷酸鈉和正磷酸鈉。也可使用如乙烷-1-羥基-1，1-二膦酸鹽和其它已知的膦酸鹽(例如，參見美國專利3159581；3213030；3422021；3400148和3422137)的膦酸鹽助洗劑。
3-陰離子表面活性劑作為第三種必要的元素，本發(fā)明的組合物含有一種陰離子表面活性劑或其混合物，其含量為總組合物重量的0.5％～20％，優(yōu)選3％～15％，最優(yōu)選5％～10％。
用于本發(fā)明的合適的陰離子表面活性劑包括式ROSO3M的水溶性鹽或酸，其中R優(yōu)選地為C10～C24的烴基，優(yōu)選具有C10～C20烷基組分的烷基或羥烷基，更優(yōu)選C12～C18的烷基或羥烷基，且M為H或陽離子，如堿金屬陽離子(如鈉、鉀、鋰)或銨或取代銨(例如，甲基、二甲基、三甲基銨陽離子和季銨陽離子，如四甲基銨和二甲基基啶鎓陽離子和得自烷基胺如乙胺、二乙胺、三乙胺及其混合物等的季銨陽離子)。一般說來，C12-16的烷基鏈對較低的洗滌溫度(例如低于約50℃)是優(yōu)選的，C16-18烷基鏈對較高的洗滌溫度(例如約50℃以上)是優(yōu)選的。
其它適用于本發(fā)明的陰離子表面活性劑為式RO(A)mSO3M的水溶性鹽或酸，其中R為未取代C10～C24烷基或含有C10～C24烷基組分的羥烷基，優(yōu)選C12～C20烷基或羥烷基，更優(yōu)選C12～C18烷基或羥烷基，A為乙氧基或丙氧基單元；m大于0，一般在約0.5～約6之間，更優(yōu)選在約0.5～約3之間，且M為H或陽離子，例如金屬陽離子(如鈉、鉀、鋰、鈣、鎂等)、銨或取代銨陽離子。乙氧化的烷基硫酸鹽和丙氧化的烷基硫酸鹽在本發(fā)明中是期望的。取代銨陽離子的具體實(shí)例包括甲基、二甲基、三甲基銨和季銨陽離子，如四甲基銨和二甲基基啶鎓和得自鏈烷醇胺如乙胺、二乙胺、三乙胺及其混合物等的季銨陽離子。表面活性劑的實(shí)例為C12～C18烷基聚乙氧基(1.0)硫酸鹽(C12～C18E(1.0)M)，C12～C18烷基聚乙氧基(2.25)硫酸鹽(C12～C18E(2.25)M)，C12～C18烷基聚乙氧基(3.0)硫酸鹽(C12～C18(3.0)M)和C12～C18烷基聚乙氧基(4.0)硫酸鹽(C12～C18E(4.0)M)，其中M方便地選自鈉和鉀。
其它用于洗滌用途的陰離子表面活性劑也可用于本發(fā)明。它們包括皂鹽(例如，包括鈉鹽、鉀鹽、銨鹽和取代銨鹽如單、二和三乙醇胺鹽)、C9～C20直鏈烷基苯磺酸鹽、C8～C22伯或仲烷基磺酸鹽、C8～C24油基磺酸鹽、通過如描述于英國專利說明書No.1082179中的磺化堿土金屬檸檬酸鹽的熱解產(chǎn)物而制備的磺化聚羧酸、C8～C24烷基聚乙二醇醚硫酸鹽(含有高達(dá)10摩爾的環(huán)氧乙烷)、烷基酯磺酸鹽如C14-16甲基酯磺酸鹽、?；叶蓟撬猁}、脂肪油基乙二醇硫酸鹽、烷基酚環(huán)氧乙烷醚硫酸鹽、石蠟磺酸鹽、烷基磷酸鹽、羥乙磺酸鹽如?；u乙磺酸鹽、N-?；；撬猁}、烷基琥珀酰胺酸鹽和磺基琥珀酸鹽、磺基琥珀酸單酯(特別是飽和和不飽和的C12～C18單酯)、磺基琥珀酸二酯(特別是飽和和不飽和的C6～C14二酯)、?；“彼猁}、烷基多糖硫酸鹽如烷基聚葡糖苷硫酸鹽(以下描述的非離子非硫酸化化合物)、支化伯烷基硫酸鹽、烷基聚乙氧基羧酸鹽如式RO(CH2CH2O)kCH2COO-M+的那些，其中R為Cx～C22烷基，k為0～10的整數(shù)，M為形成可溶鹽的陽離子。樹脂酸和氫化樹脂酸也是合適的，如松香、氫化松香和存在于或得自于妥爾油的樹脂酸和氫化樹脂酸。進(jìn)一步的實(shí)例在“表面活性劑和洗滌劑”(第I卷和第II卷，Schwartz、Perry和Berch)中給出。各種這樣的表面活性劑也一般地公開于1975年12月30日授權(quán)給Laughlin等人的美國專利3929678中的23欄58行到29欄23行中(引入本文作為參考)。
用于本發(fā)明組合物中的非常優(yōu)選的表面活性劑為烷基苯磺酸鹽，特別是直鏈烷基苯磺酸鹽。
4-蛋白酶作為第四種必要的元素，本發(fā)明的組合物含有一種蛋白酶或其混合物。在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案中，蛋白酶通常以足以提供每克組合物具有0.005～0.2Anson單位(AU)活性的量存在。蛋白酶可來源于動物、植物或優(yōu)選地微生物。更優(yōu)選的是細(xì)菌來源的色氨酸蛋白酶?？墒褂眉兓幕蛭醇兓问降拿?。根據(jù)定義，包括由化學(xué)或基因改性突變體生產(chǎn)的蛋白酶，如封閉結(jié)構(gòu)的酶變體。特別優(yōu)選的蛋白酶是得自芽孢桿菌、枯草芽胞桿菌和/或地衣形芽孢桿菌的細(xì)菌絲氨酸蛋白酶。適用的商業(yè)蛋白酶包括Alcalase、Esperase、Durazym、Savinase、Maxatase、Maxacal和Maxapem15(蛋白質(zhì)工程Maxacal)；Purafect和枯草溶菌素BPN和BPN′也是商業(yè)上可以購得的。優(yōu)選的蛋白酶還包括改性的細(xì)菌絲氨酸蛋白酶，如描述于1987年4月28日申請的歐洲專利申請系列號87303761.8中的那些(特別是第17、24和98頁)，其在此處被稱為“蛋白酶B”，和描述于1986年10月29日公開的Venegas的歐洲專利申請199404中的那些，其指的是改性的細(xì)菌絲氨酸蛋白酶，在此處被稱為“蛋白酶A”。更優(yōu)選的是在此處被稱為“蛋白酶C”的蛋白酶，它是得自芽胞桿菌的堿性絲氨酸蛋白酶的三重變體，其中在104位上酪氨酸替代纈氨酸，在123位上絲氨酸替代天冬氨酸，在274位上丙氨酸替代蘇氨酸。蛋白酶C描述于EP 9091 5958.4中，對應(yīng)于1991年5月16日公開的WO9l/06637，其在此處引入作為參考。基因改性變體，特別是蛋白酶C的變體，也包括在本發(fā)明中。
還適用于本發(fā)明的是在此處被稱為“蛋白酶D”的蛋白酶，它是具有自然界中沒有發(fā)現(xiàn)的氨基酸序列的羰基水解酶變體，其得自一種前體羰基水解酶，所述蛋白酶是通過將該羰基水解酶中等同于+76位的多種氨基酸殘基以及等同于選自解淀粉芽孢桿菌枯草桿菌蛋白酶中+99、+101、+103、+107和+123位的一種或多種氨基酸殘基用一不同的氨基酸取代而得到的，其描述于A.Baeck、C.K.Ghosh、P.P.Greycar、R.R.Bott和L.J.Wilson的共同申請的題為“含有蛋白酶的洗滌組合物”且具有美國系列號08/136797(P&G案號5040)和題為“含有蛋白酶的漂白組合物”且具有美國系列號08/136626的專利申請中，其在本文被引入作為參考。
一些優(yōu)選的蛋白酶選自Savinase、Esperase、Maxacal、Purafect、BPN′、蛋白酶A和蛋白酶B及其混合物。得自枯草芽孢桿菌和/或地衣形芽孢桿菌的細(xì)菌絲氨酸蛋白酶是優(yōu)選的。特別優(yōu)選的是Savinase、Alcalase、蛋白酶A和蛋白酶B。
5-淀粉酶作為第五種必要的元素，本發(fā)明的組合物含有一種淀粉酶。提高酶穩(wěn)定性，如氧化穩(wěn)定性的酶工程是已知的。例如，參見1985年6月的生物化學(xué)雜志(J.Biological Chem.)260卷11期第6518～6521頁。
此后的“參比淀粉酶”指的是在本發(fā)明淀粉酶組分范圍之外的淀粉酶，通過與它對比，可測得本發(fā)明內(nèi)的任何淀粉酶的穩(wěn)定性。
因此，本發(fā)明使用在洗滌劑中穩(wěn)定性提高，特別是氧化穩(wěn)定性提高的淀粉酶。相對于本發(fā)明中所用的淀粉酶顯示可測量的改進(jìn)的一個(gè)方便的絕對穩(wěn)定性參比點(diǎn)為1993年商業(yè)上使用的從Novo Nordisk A/S購得的TERMAMYL(R)的穩(wěn)定性。該TERMAMYL(R)淀粉酶為“參比淀粉酶”。在本發(fā)明精神和范圍內(nèi)的淀粉酶享有“穩(wěn)定性提高”的淀粉酶的特征，其特征在于具有至少一種或多種可測量的以下性能的提高氧化穩(wěn)定性，例如對pH9～10的緩沖溶液中過氧化氫/四乙酰基乙二胺的氧化穩(wěn)定性；熱穩(wěn)定性，例如，在通常的洗滌溫度如約60℃下；或堿穩(wěn)定性，例如在pH約8～約11，相對于以上指出的參比淀粉酶進(jìn)行所有的測量。本發(fā)明優(yōu)選的淀粉酶相對于更富于挑戰(zhàn)性的參比淀粉酶表現(xiàn)出更大的提高，后一參比淀粉酶通過任何淀粉酶的前體淀粉酶來說明，其中本發(fā)明內(nèi)的淀粉酶為這一前體淀粉酶的變體。這樣的前體淀粉酶可本身是天然的或基因工程的產(chǎn)品。穩(wěn)定性可采用任何本技術(shù)中公開的技術(shù)試驗(yàn)來測量。參見公開在WO94/02597中的參考文獻(xiàn)，在此引入作為參考。
一般說來，本發(fā)明中穩(wěn)定性提高的淀粉酶可從Novo Nordisk A/S或Genencor Intertional得到。
本發(fā)明優(yōu)選的淀粉酶具有共性不管是一種、兩種或多種淀粉酶菌種作為直接前體，淀粉酶通過使用定點(diǎn)誘變從一種或多種芽孢桿菌淀粉酶，特別是從芽孢桿菌α-淀粉酶得到。
象已經(jīng)指出的那樣，“氧化穩(wěn)定性提高的”淀粉酶優(yōu)選用于本發(fā)明。這樣的淀粉酶非限定性地解釋如下(a)根據(jù)上文提到的Novo Nordisk A/S的1994年2月3日公開的WO/94/02597中的一種淀粉酶，由通過取代后的突變體進(jìn)一步說明，其中用丙氨酸或蘇氨酸(優(yōu)選蘇氨酸)取代已知為TERMAMYL(R)的地衣形芽孢桿菌α-淀粉酶上位于197位的蛋氨酸殘基，或者用一種類似的母體淀粉酶的同源位置變種，如解淀粉芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、嗜熱脂肪芽孢桿菌進(jìn)一步說明。
(b)由Genencor International描述的C.Mitchinson于1994年3月13-17日在第207屆美國化學(xué)會國家會議上提出的題為“耐氧化的α-淀粉酶”中穩(wěn)定性提高的淀粉酶。其中指出自動餐具洗滌劑中的漂白劑使α-淀粉酶失活，但氧化穩(wěn)定性提高的淀粉酶已由Genencor從地衣形芽孢桿菌NCIB8061制得。蛋氨酸(Met)被識別為最有可能被改性的殘基。蛋氨酸在8、15、197、256、304、366和438位置上每次一個(gè)被取代產(chǎn)生特定的突變體，特別重要的是M197L和M197T，M197T變體是最穩(wěn)定表達(dá)的變體。穩(wěn)定性在CASCADE(R)和SUNLIGHT(R)中測定；這樣的酶商業(yè)上可在商品名Plurafact Oxam下從Genencor購得。
(c)此處特別優(yōu)選的是從Novo Nordisk A/S購得的具有直接母體附加改性的淀粉酶變體。這些淀粉酶沒有商品名，而是指被出售者稱為QL37+M197T的那些。這樣的酶在商業(yè)上以商品名SP 703從Novo購得。
可使用任何其它的氧化穩(wěn)定性提高的淀粉酶，例如，從已知的可購得的淀粉酶的嵌合體、雜種或簡單的母體突變體形式通過定點(diǎn)誘變得到的淀粉酶。
6-任選組分本發(fā)明的浸泡組合物可進(jìn)一步包括各種其它組分。
任選的卻是優(yōu)選用于本發(fā)明的組分是漂白活化劑。該類合適的化合物的實(shí)例公開于英國專利GB1586769和GB2143231中。這類化合物優(yōu)選的實(shí)例為描述于如US4818425中的四乙酰乙二胺(TAED)、3，5，5-三甲基己酰氧基苯磺酸鈉、雙過氧十二酸和描述于如US4259201中的過氧己二酸的壬酰胺和描述于歐洲專利申請91870207.7中的正壬酰氧基苯磺酸鹽(NOBS)和乙酰三乙基檸檬酸鹽(ATC)。特別優(yōu)選的還有選自取代或非取代苯甲酰己內(nèi)酰胺、辛酰己內(nèi)酰胺、壬酰己內(nèi)酰胺、己酰己內(nèi)酰胺、癸酰己內(nèi)酰胺、十一碳烯酰己內(nèi)酰胺、甲酰己內(nèi)酰胺、乙酰己內(nèi)酰胺、丙酰己內(nèi)酰胺、丁酰己內(nèi)酰胺、戊酰己內(nèi)酰胺的N-?；簝?nèi)酰胺。此處的浸泡組合物可包括所說的漂白活化劑的混合物。
本發(fā)明優(yōu)選的漂白活化劑混合物包括正壬酰氧基苯磺酸鹽(NOBS)和具有低的產(chǎn)生二?；^氧化物傾向卻主要放出過酸的第二種漂白活化劑。所說的第二種漂白活化劑可包括四乙酰乙二胺(TAED)、乙?；一鶛幟仕猁}(ATC)、乙酰己內(nèi)酰胺、苯甲酰己內(nèi)酰胺等或其混合物。所說的漂白活化劑的混合物優(yōu)選用于浸泡液的pH值控制在低于9.5的本發(fā)明的實(shí)施方案中。實(shí)際上，已發(fā)現(xiàn)包括正壬酰氧基苯磺酸鹽和所說的第二種漂白活化劑的漂白活化劑混合物可提高粒狀污垢的清洗效果，并同時(shí)顯示了對二?；^氧化物敏感的污垢(如β-胡蘿卜素)和對過酸敏感的污垢(如身體污垢)的好的效果。
因此，本發(fā)明的浸泡組合物可含有總組合物重量0％～15％，優(yōu)選1％～10％且更優(yōu)選3％～7％的正壬酰氧基苯磺酸鹽和總組合物重量0％～15％，優(yōu)選1％～10％且更優(yōu)選3％～7％的所說的第二種漂白活化劑。
組合物進(jìn)一步含有螯合劑是期望的，螯合劑有助于控制浸泡液中游離重金屬離子的量，因此避免了從所說的有效氧源中釋放出氧的快速分解?？捎糜诒景l(fā)明的合適的氨基羧酸鹽螯合劑包括二亞乙基三氨基五乙酸、乙二胺四乙酸鹽(EDTA)、N-羥乙基乙二胺三乙酸鹽、次氮基三乙酸鹽、乙二胺四丙酸鹽、三亞乙基四胺六乙酸鹽和乙醇二甘氨酸，其堿金屬鹽、銨鹽和取代銨鹽或其混合物。進(jìn)一步的合適螯合劑包括乙二胺-N，N＇-雙琥珀酸(EDDS)或其堿金屬、堿土金屬、銨或取代銨鹽。特別合適的EDDS化合物為游離酸形式和鈉鹽或鎂鹽或其配合物。其它合適的螯合劑還可為有機(jī)膦酸鹽，包括氨基亞烷基聚(亞烷基膦酸鹽)、堿金屬乙烷1-羥基雙膦酸鹽、次氮基三亞甲基膦酸鹽、乙二胺四亞甲基膦酸鹽和二亞乙基三胺五亞甲基膦酸鹽。膦酸鹽化合物可以以其酸的形式或以其堿金屬鹽的形式存在。優(yōu)選地，有機(jī)膦酸鹽化合物以其鎂鹽的形式存在。
因此本發(fā)明浸泡組合物可含有總組合物重量0％～5％的所說的螯合劑，優(yōu)選0％～3％，更優(yōu)選0.05％～2％。
本發(fā)明的浸泡組合物可進(jìn)一步包括其它的任選組分，如其他的不是陰離子的表面活性劑、填料、熒光增白劑、附加酶、去污劑、光活化漂白劑如酞菁磺酸鋅、染料、染料轉(zhuǎn)移抑制劑、顏料和香料的表面活性劑。所說的任選組分可在所需的不同量下加入。
此處的組合物以固態(tài)，優(yōu)選以顆粒狀，或液態(tài)形式生產(chǎn)。
B-方法在第二實(shí)施方案中，本發(fā)明包括一種浸泡織物的方法。正如此處所用的，術(shù)語“浸泡織物的方法”指的是將織物浸泡于含有水和以上所描述的組合物的浸泡液中至一段足夠的時(shí)間以清洗所說的織物的行為。浸泡方法可不與任何其它方法，如一般的洗衣操作一起而獨(dú)立操作，或者作為第二一般洗衣步驟之前的第一步驟。在本發(fā)明優(yōu)選的浸泡方法中，將織物浸泡10分鐘～24小時(shí)的一段時(shí)間，優(yōu)選30分鐘～24小時(shí)，最優(yōu)選4小時(shí)～24小時(shí)。在織物浸泡于所說的浸泡液中至一段足夠的時(shí)間后，將它們?nèi)〕鲇盟?。在浸泡后，可按通常的洗衣操作洗滌織物，在浸泡操作和后續(xù)的洗衣操作之間可漂洗或不漂洗織物。
在此處的浸泡操作中，以上所描述的浸泡組合物可用適量的水進(jìn)行稀釋以制備浸泡液。合適的劑量可為在3.5～5升水中含45～50克浸泡組合物至在20～45升水中含90～100克浸泡組合物。通常濃縮浸泡(桶/槽)的劑量為3.5～5升水中含45～50克。對洗衣機(jī)浸泡而言，劑量為約20升(歐洲)～45升(美國)水中含90～100克。然后，將待浸泡的織物浸泡于浸泡液中一段合適的時(shí)間。
有些因素會影響粒狀污物/污垢洗滌方法的綜合效果。這些因素包括延長的浸泡時(shí)間。確實(shí)是這樣，織物的浸泡時(shí)間越長，最終效果越好。理想的浸泡時(shí)間為浸泡過夜，即12小時(shí)到24小時(shí)。另一個(gè)因素是初始溫?zé)釡囟然蛭釡囟?。?shí)際上，較高的浸泡液初始溫度保證了大益處的效果實(shí)施例以下的組合物是通過將所列舉的組分在列舉的比例下混合而制得的。通過每一次將45克所說的組合物稀釋到3.5升～5.0升水中形成浸泡液。然后，每一次將0.5～2千克織物在所說的浸泡液中浸泡10分鐘～24小時(shí)一段時(shí)間。最后，將織物從浸泡液中取出，用水漂洗且用通常的洗滌方法，如手洗或洗衣機(jī)，用通常的洗滌劑，重新使用或不重新使用浸泡液進(jìn)行洗滌，然后將所說的織物放置干燥。組分1 2 3(％w/w)(％w/w) (％w/w)Plurafact Oxam(或SP 703 0.29 0.29 0.29(@4％活性蛋白質(zhì))蛋白酶B；@4％活性蛋白質(zhì)0.26 0.52 0.52過硼酸鈉單水合物 29 29 29過碳酸鈉 0 0 0檸檬酸 11 11 11沸石A 12 12 12聚丙烯酸鹽(Acusol445ND)10 10 10硅酸鈉(無定形；1.6r) 0.30.30.3陰離子表面活性劑(LAS) 7 7 7NOBS 10 10 5TAED 0 0 5DTPA 0.20.20.2其它，惰性和微量組分直到100 直到10直到100組分 4 5 6(％w/w)(％w/w)(％w/w)Plurafact Oxam(或SP 7030.26 0.26 0.26(@4％活性蛋白質(zhì))蛋白酶B；@4％活性蛋白質(zhì) 1.00 0.50 0.50過硼酸鈉單水合物 0 0 0過碳酸鈉 31 31 31檸檬酸10 10 10沸石A 0 0 0聚丙烯酸鹽(Acusol 445ND) 11 11 11硅酸鈉(無定形； 16r) 0.40.40.4陰離子表面活性劑(LAS) 4 4 4NOBS 6 6 0TAED 6 6 12DTPA 0.20.20.2其它，惰性和微量組分 直到100直到100直到100
權(quán)利要求
1.一種組合物，其含有-一種氧漂白劑；-總組合物重量5％(50％的助洗劑；-總組合物重量0.5％(20％的陰離子表面活性劑；-一種蛋白酶；和-一種穩(wěn)定性提高的淀粉酶，所說的穩(wěn)定性提高相對于所說淀粉酶的母體/非突變體形式。
2.一種根據(jù)權(quán)利要求1的組合物，其中所說的陰離子表面活性劑為直鏈烷基苯磺酸鹽。
3.一種根據(jù)上述權(quán)利要求中任何一項(xiàng)的組合物，其含有3％～15％，優(yōu)選5％～10％的所說的陰離子表面活性劑。
4.一種根據(jù)上述權(quán)利要求的清洗組合物，其中所說的穩(wěn)定性提高的淀粉酶是氧化穩(wěn)定性的提高。
5.一種根據(jù)權(quán)利要求4的清洗組合物，其中所說的氧化穩(wěn)定性是通過用蘇氨酸取代地衣形芽孢桿菌上位于197位的蛋氨酸殘基，或通過相似母體淀粉酶的同源位置變種而提高。
6.一種根據(jù)上述權(quán)利要求中任何一項(xiàng)的組合物，其含有10％～40％，優(yōu)選15％～30％的所說的助洗劑。
7.一種根據(jù)上述權(quán)利要求中任何一項(xiàng)的組合物，其含有1％～60％，優(yōu)選15％～40％的所說的氧漂白劑。
8.一種根據(jù)上述權(quán)利要求中任何一項(xiàng)的組合物，其中所說的氧漂白劑為過硼酸或過碳酸堿金屬鹽。
9.一種根據(jù)上述權(quán)利要求中任何一項(xiàng)的組合物，其還含有一種漂白活化劑。
10.一種根據(jù)上述權(quán)利要求中任何一項(xiàng)的組合物，其中所說的蛋白酶為Savinase、Alcalase、蛋白酶A和蛋白酶B。
11.一種浸泡織物的方法，其中所說的織物浸泡于含有根據(jù)上述權(quán)利要求中任何一項(xiàng)的有效量組合物的浸泡液中一段有效的時(shí)間，然后從所說的浸泡液中取出。
12.一種根據(jù)權(quán)利要求11的一種方法，其中所說的時(shí)間在10分鐘～24小時(shí)的范圍內(nèi)。
全文摘要
本發(fā)明公開了浸泡組合物,其包括漂白劑、助洗劑、陰離子表面活性劑、蛋白酶和穩(wěn)定性提高的淀粉酶。也公開了一種浸泡織物的方法,其中所說的織物被浸在含有水和有效量的上述組合物的浸泡液中。
文檔編號C11D3/386GK1185800SQ96194280
公開日1998年6月24日 申請日期1996年3月12日 優(yōu)先權(quán)日1995年4月3日
發(fā)明者L·比斯卡里尼, M·特拉尼 申請人:普羅格特-甘布爾公司