專利名稱：使皮膚和毛發(fā)變黑的組合物的制作方法
技術(shù)領域：
本發(fā)明涉及一種使皮膚和/或毛發(fā)變黑的美容用組合物。本發(fā)明還涉及一種將本發(fā)明的用于使皮膚/毛發(fā)變黑的組合物局部施用于皮膚和/或毛發(fā)上的方法。
在紫外線下暴曬而使皮膚曬成棕褐色是一個眾所周知的現(xiàn)象。然而從文獻中也可得知，在紫外線下暴曬可導致皮膚老化速度的加快和皮膚癌發(fā)病率的上升。因而現(xiàn)已出現(xiàn)了另一種可使皮膚變成棕褐色的替代方法。在現(xiàn)有技術(shù)中，使用二羥基丙酮(DHA)作為一種可使皮膚變成棕褐色的非紫外線的輔助藥物。然而，為了讓皮膚變成棕褐色而使用的二羥基丙酮，卻產(chǎn)生了并非我們所希望的一種很不自然的日光棕褐色。而且這種由DHA所產(chǎn)生的人工的棕褐色不能象天然的棕褐色那樣保護皮膚免受紫外線的照射。
黑色素是毛發(fā)和皮膚中的黑色顏料，它是通過黑素體從酪氨酸合成的。黑素體是黑素細胞中的細胞器，一類位于真皮一表皮連接處的細胞。酪氨酸是通過一種酶即酪氨酸酶來起作用的，這是在黑色素的生成中的關(guān)鍵步驟。
在黑素體中，黑色素由單體合成，并被轉(zhuǎn)移到鄰近的角化細胞中。角化細胞分裂，變異，并將黑色素運送到皮膚的表面。黑色素的數(shù)量，大小，含量，形成率及將黑色素遷移/運送到角化細胞的比例，直接影響到皮膚顏色的深淺。
已知某些特定序列的多聚氨基酸和肽殘基可抑制黑色素的沉著，并可使皮膚變白(JP 6345797；JP 6321757；JP 6321755；JP 5170636；US 5，126，327)。
現(xiàn)有技術(shù)中所描述的肽包含有高比例的基礎的疏水氨基酸，且等電點(pI)的值遠大于5.5。這些主要是用于減輕與皮膚異常情況有關(guān)的過多的色素沉著面積。
在共同申請的英國專利申請9719195.1的申請人公開了一種使皮膚顏色變淺的美容用組合物，它包含0.1-10％(重量)的等電點為2-5.5的肽。等電點(pI)即凈電荷數(shù)為零時的pH值。肽包含大量的低等電點的酸性氨基酸，如谷氨酸，天冬氨酸等，和那些高等電點的基礎氨基酸，如賴氨酸，精氨酸，組氨酸。
申請人現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)了一種組合物，它包含有等電點(pI)為6-11的肽序列，能使皮膚/毛發(fā)變黑。
因此，本發(fā)明涉及一種美容用的使皮膚/毛發(fā)變黑的組合物，它包含有0.1％-10％(重量)其等電點(pI)為6.0-11的肽。
本發(fā)明的組合物對皮膚/毛發(fā)變黑的作用是可逆的，且沒有副作用。本發(fā)明的組合物在白天和黑夜都是有活性的。
本發(fā)明中的肽是分子量為200-20,000道爾頓(Da)，pI為6.0-11.0的氨基酸序列。此肽可與疏水氨基酸或靶分子或載體任意選擇地連接。
由氨基酸殘基形成的肽序列可以天然地存在或人工合成，可以是左旋或右旋的形式，并且包括其任何衍生物。肽序列中必須包含一定比例的基礎氨基酸，以使所得到的肽序列在本質(zhì)上是基礎的序列。肽序列可以是直鏈的，或是環(huán)狀的。
肽序列的分子量為200-20,000 Da，優(yōu)選200-2000 Da。
肽序列的等電點為6.0-11.0。
疏水氨基酸可以從丙氨酸，異亮氨酸，亮氨酸，蛋氨酸，苯丙氨酸，脯氨酸，色氨酸，或纈氨酸中選出的任何一種，優(yōu)選為色氨酸。優(yōu)選的靶分子為一種肽，最優(yōu)選的為六肽，尤其是基本序列為天冬氨酸-谷氨酸-脯氨酸-亮氨酸-亮氨酸-蘇氨酸，且位于活性肽的末端羧基的27氨基酸殘基中，靶賦形劑如膠束和/或可逆膠束也可以被應用。
本發(fā)明的優(yōu)選方案提供一種美容用的使皮膚/毛發(fā)變黑的組合物，它包含0.5-5.0％(重量)的肽。
本發(fā)明還涉及一種使皮膚/毛發(fā)變黑的美容方法，它包括將本發(fā)明中的組合物局部施用于皮膚和/或毛發(fā)。此組合物還可以包含一種用于皮膚的曬成褐色劑。這種皮膚曬褐劑可以從目前已知的用于此目的的二羥基丙酮，茶堿，葡萄糖酸銅，從紫檀木中獲取的天然活性物質(zhì)，及任意選擇的其它已知的皮膚曬黑劑中選出。
本發(fā)明的組合物還可以包含美容上可接受的載體。它可以包含防腐劑，乳化劑，增稠劑，香料，色素，有益于皮膚的材料如增濕劑，潤膚劑和抗衰老的化合物。
可構(gòu)成該美容用組合物一部分的賦形劑，是一種或多種可與多聚氨基酸序列相容且不會傷害皮膚/毛發(fā)的在美容上可接受的物質(zhì)。用于本發(fā)明組合物中的賦形劑可以包含粉末吸收劑，粘合劑，載體，及液體如潤膚劑，噴射劑，溶劑，保濕劑及增稠劑。簡單的賦形劑如乙醇，PEG，丙二醇等，也可以使用。
實施例中的增濕劑和保濕劑包含多元醇，甘油，鯨蠟醇，聚羧乙烯934，乙烷基蓖麻油，石蠟油，羊毛脂及其衍生物。聚硅氧烷化合物，如聚硅氧烷表面活性劑如DC3225C(道康寧)和/或聚硅氧烷潤膚劑，硅油也可以使用。
本發(fā)明的組合物可以制備成局部施用于皮膚/毛發(fā)以簡單溶液或普通的leave-on或wash-off產(chǎn)品的形式如洗劑，乳劑，軟膏，洗發(fā)劑和/或噴霧劑。
除非另有說明，本文和所附權(quán)利要求中指出的所有的百分比都是以組合物的重量為準。
現(xiàn)通過實施例對本發(fā)明作出進一步地說明。實施例僅用于詳細說明，而不是以任何方式來限制本發(fā)明的范圍。
實施例1促進黑色素形成的體外證明對于用等電點為11.0的肽序列在pH5的體外系統(tǒng)中對黑色素形成的影響與在一定pH值的黑素體系統(tǒng)中對黑色素形成的影響相比較并進行分析。在體外系統(tǒng)中黑色素形成的測定條件如下。
測定方法對照測定混合物是在裝有pH 5.0的醋酸緩沖溶液的試管中包含5μmol的DL-DOPA(二羥基苯丙氨酸)，20nmol的溶菌酶和3.2個單位的酪氨酸酶。一個單位定義為在1分鐘內(nèi)轉(zhuǎn)化1nmol的DOPA所需的酪氨酸酶的量。在試驗設備中除了如在對照中限定的其它成分之外，還應用了11nmol多聚賴氨酸，一種等電點11.0的多聚氨基酸序列。用醋酸緩沖溶液沖洗已形成的黑色素，將其懸浮在1N的氫氧化鈉中，在60℃下加熱5分鐘使其溶解。測量的吸光度為400nm。
表1
上述結(jié)果表明，在多聚賴氨酸的序列的存在下，黑色素產(chǎn)物顯著地提高。
現(xiàn)參照下述美容用的軟膏來詳細說明本發(fā)明。
在對照實施例和實施例2中，對本申請中美容用軟膏的描述表明，實施例2的產(chǎn)品與對照實施例的產(chǎn)品相比，可顯著地使皮膚變黑。
這樣，由本發(fā)明提供的一種可逆的、無副作用的皮膚/毛發(fā)變黑用組合物成為可能。此組合物在白天和黑夜都是具有活性的。
表中數(shù)字代表組合物的重量百分比。
實施例3促進黑色素形成的體外證明將在pH5的體外系統(tǒng)中，含有pI為2.5的多聚谷氨酸，pI為10.9的多聚精氨酸，或pI為11.0的多聚賴氨酸的多聚氨基酸序列對黑色素形成的影響與在一定pH值的黑素體系統(tǒng)中對黑色素形成的影響相比較并進行分析。在體外系統(tǒng)中黑色素形成的測定條件如下。
測定方法對照測定混合物在裝有pH 5.0的醋酸緩沖溶液的試管中包含5mmol的DL-DOPA(二羥基苯丙氨酸)，20nmol的溶菌酶和0.45mg的酪氨酸酶。在試驗設備中，除了如在對照中限定的其它成分之外再加入18nmol的多聚谷氨酸，一種等電點為2.5的多聚氨基酸序列，或等電點為10.9的多聚精氨酸，或等電點為11.0的多聚賴氨酸。用醋酸緩沖溶液沖洗已形成的黑色素，將其懸浮在1N的氫氧化鈉中，在60℃下加熱5分鐘使其溶解。測量的吸光度為400nm。
表2
上述結(jié)果表明，具有堿性等電點或等電點大于5.0的多聚氨基酸序列可使黑色素產(chǎn)物顯著地提高，而等電點在酸性范圍內(nèi)的多聚氨基酸序列則不能使黑色素產(chǎn)物同樣地提高。
實施例4促進黑色素形成的體表證明挑選12名女性志愿者，她們的皮膚光潔，沒有疤痕，前臂沒有明顯的毛發(fā)。用模型在手掌一側(cè)的前臂上作一面積為1平方厘米的標記。使用分子量為14K道爾頓，等電點為11.2，在適宜的賦形劑中濃度為2％的肽的混合物。施用上述每微升含有0.3微克的蛋白質(zhì)的溶液10天。用未作治療的和安慰劑(賦形劑)作為對照。在第0天和第11天，由不知道此治療任務的專家對上述作標記的位置評出等級。表3中的數(shù)據(jù)表明，甚至是在體內(nèi)系統(tǒng)中，等電點大于5.0的肽與對照組，即未作治療的和賦形劑相比，也可使皮膚顯著地變黑。其臨界差值為0.12。
表3
對專家評價的說明顯著變淺-1.0 顯著變黑 +1.0明確變淺-0.75明確變黑 +0.75適當變淺-0.5 適當變黑 +0.50輕微變淺-0.25輕微變黑 +0.25無差別0
權(quán)利要求
1．一種使皮膚和/或毛發(fā)變黑的美容用組合物，它包含0.1-10％(重量)的其等電點為6-11的肽。
2．根據(jù)權(quán)利要求1的美容用組合物，它可局部施用于皮膚和/或毛發(fā)。
3．根據(jù)權(quán)利要求1或2的美容用組合物，其中肽的分子量為200-20，000Da。
4．根據(jù)上述權(quán)利要求中的任一項權(quán)利要求的美容用組合物，其中的肽連接在a)從丙氨酸，異亮氨酸，亮氨酸，蛋氨酸，苯丙氨酸，纈氨酸，脯氨酸和色氨酸中選出的一種疏水氨基酸上，或者連接在b)靶分子或賦形劑上。
5．根據(jù)權(quán)利要求4的美容用組合物，其中所述的疏水氨基酸為色氨酸。
6．根據(jù)權(quán)利要求4或5的美容用組合物，其中的靶分子是一種肽。
7．根據(jù)權(quán)利要求4的美容用組合物，其中的靶分子是其基本序列為下述(1)的六肽(1)Asx-Glm-Pro-Leu-Leu-Thr
8．根據(jù)權(quán)利要求4的美容用組合物，其中所述的靶賦形劑是膠束或可逆膠束。
9．一種使皮膚/毛發(fā)變黑的美容方法，該方法包括將前面任意一項權(quán)利要求所述的組合物局部施用于皮膚/毛發(fā)。
全文摘要
本發(fā)明提供一種局部施用于皮膚和/或毛發(fā)上使其變黑的美容用組合物,它包含0.1—10%(重量)的其等電點為6—11的肽。
文檔編號A61Q5/10GK1283987SQ98813240
公開日2001年2月14日 申請日期1998年11月9日 優(yōu)先權(quán)日1998年1月20日
發(fā)明者S·拉格胡帕蒂, A·拉麥爾, G·拉曼, S·S·瓦格 申請人:荷蘭聯(lián)合利華有限公司