一種用于角膜組織移植的plga纖維膜的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明用靜電紡絲的方法制備了一種用于角膜組織移植、可生物可降解的PLGA纖維膜。本發(fā)明涉及一種合成的、無菌的可以快速降解的纖維膜，該纖維膜支持分離的角膜上皮細(xì)胞快速生長，將完好的組織移植物直接放到膜上時角膜上皮細(xì)胞具有向外生長的能力，分離的細(xì)胞或者從角膜移植物上向外生長的細(xì)胞在所本發(fā)明制備的膜上有很好的傳輸性能。本發(fā)明制備的纖維膜可以直接用作人體羊膜的代替物，在臨床角膜再生領(lǐng)域中具有廣闊的應(yīng)用前景。
【專利說明】 —種用于角膜組織移植的PLGA纖維膜的制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種纖維膜的制備方法，尤其涉及一種用于角膜組織移植、可生物可降解的PLGA纖維膜的制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002]目前世界上僅僅有幾個?？蒲劭茖?shí)驗(yàn)室可以用纖維蛋白或者人體羊膜實(shí)現(xiàn)角膜上皮細(xì)胞到角膜的轉(zhuǎn)移。一種用人工培養(yǎng)細(xì)胞的方法就是讓細(xì)胞在角膜移植物上原位生長，這樣至少可以在實(shí)驗(yàn)室水平上對那些單一角膜干細(xì)胞不足的病人來說可以避免角膜上皮細(xì)胞擴(kuò)展的需要。
[0003]全厚度的角膜移植可以暫時修復(fù)患有角膜干細(xì)胞缺乏的病人的視力，但是最終因?yàn)楸匦璧慕悄じ杉?xì)胞的缺乏將會使移植失敗。為了代替喪失的干細(xì)胞，角膜上皮細(xì)胞的培養(yǎng)及轉(zhuǎn)移，是世界上很多?？浦行闹委煵∪说囊环N可以選擇的方法，任何可能的時候可以從病人的另一只沒有感染的眼睛進(jìn)行細(xì)胞的培養(yǎng)，或者從捐獻(xiàn)者的眼中提取，后者往往需要經(jīng)歷更長時間的免疫反應(yīng)。
[0004]現(xiàn)有技術(shù)已經(jīng)用合成的或天然的材料來代替人體羊膜。這樣的材料包括纖維蛋白、膠原蛋白膜、熱響應(yīng)型基底和合成高分子膜，這些材料中只有人體角膜和纖維蛋白膜可以用作臨床角膜再生中細(xì)胞轉(zhuǎn)移的載體。
[0005]用于傳輸角膜干細(xì)胞的膜所必須有的特征就是它可以牢固的粘附細(xì)胞并且支撐它們的增殖和轉(zhuǎn)移。另外，這種膜必須具有臨床上最低的危險性，而且能夠固定到細(xì)胞培養(yǎng)的眼睛上并且在幾周之后將角膜干細(xì)胞牢固地附著到角膜上之后自身降解掉且不會引起免疫反應(yīng)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006]本發(fā)明的目的是簡化和安全化用于角膜干細(xì)胞不足造成視力喪失的病人的角膜上皮細(xì)胞再生的方法，建立一種合成的、無菌的可以快速降解的膜，這種膜可以直接用作人體羊膜的代替物以開發(fā)實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)細(xì)胞和小的角膜移植物上的細(xì)胞生長?，F(xiàn)成的膜和角膜上皮細(xì)胞培養(yǎng)的結(jié)合可以使這項技術(shù)對很多手術(shù)和原來只有在很少的角膜干細(xì)胞治療中心才可以接受治療的病人來說都變得可取。
[0007]本發(fā)明中用靜電紡絲的方法制備了一種用于角膜組織移植、可生物降解的PLGA纖維膜的制備方法，具體步驟如下:
[0008](I)聚丙交酯共聚乙交酯(PLGA) (60: 40，分子量為60kg / mol)溶解在二氯甲烷中配制成50wt %的溶液。然后將溶液裝入到四個IOmL的注射器中，注射針的內(nèi)徑為0.4mm ；注射器與注射泵連接，靜電紡絲的參數(shù)為:聚合物溶液的流速為0.8?1.2mL / h，紡絲電壓為20?35kV，接收端裝置為覆蓋有聚四氟乙烯纖維布的轉(zhuǎn)速為3500?5000rpm的轉(zhuǎn)筒；最后得到的膜的厚度為80?120 μ m。
[0009](2)在25°C和溫和的攪拌前提下將聚合物溶解在1，1，I, 3，3，3_六氟異丙醇中配制成不同濃度(40wt%、60wt%)的紡絲液。將聚合物溶液裝入到IOmL的塑料注射器中，連接的注射針的內(nèi)徑為0.4mm。紡絲參數(shù)如下:紡絲電壓為20?35kV，接收裝置為旋轉(zhuǎn)的圓筒(直徑100mm，長度300mm)，紡絲距離為150mm。得到的膜在25°C下真空干燥48h以徹底地去除掉溶劑。
[0010]本發(fā)明涉及的纖維膜支持分離的角膜上皮細(xì)胞快速生長，將完好的組織移植物直接放到膜上時角膜上皮細(xì)胞具有向外生長的能力。分離的細(xì)胞或者從角膜移植物上向外生長的細(xì)胞在本發(fā)明所制備的膜上有很好的傳輸性能。
【具體實(shí)施方式】
[0011]為了加深對本發(fā)明的理解，下面結(jié)合具體實(shí)例對本發(fā)明做進(jìn)一步的詳述:
[0012](I)聚丙交酯共聚乙交酯(PLGA) (60: 40，分子量為60kg / mol)溶解在二氯甲烷中配制成50wt%的溶液，然后將溶液裝入到四個IOmL的注射器中，注射針的內(nèi)徑為0.4mm ；注射器與注射泵連接，靜電紡絲的參數(shù)為:聚合物溶液的流速為0.8mL / h，紡絲電壓為20kV，接收端裝置為覆蓋有聚四氟乙烯纖維布的轉(zhuǎn)速為3500rpm的轉(zhuǎn)筒；最后得到的膜的厚度為80?120 μ m。
[0013](2)在25°C和溫和的攪拌前提下將聚合物溶解在1，1，I, 3，3，3_六氟異丙醇中配制成不同濃度(40wt%、60wt%)的紡絲液。將聚合物溶液裝入到IOmL的塑料注射器中，連接的注射針的內(nèi)徑為0.4mm ;紡絲參數(shù)如下:紡絲電壓為20kV，接收裝置為旋轉(zhuǎn)的圓筒(直徑100mm，長度300mm)，紡絲距離為150mm，得到的膜在25°C下真空干燥48h以徹底地去除掉溶劑。
【權(quán)利要求】
1.一種用于角膜組織移植的PLGA纖維膜的制備方法，其步驟如下: (1)聚丙交酯共聚乙交酯(PLGA)(60: 40，分子量為60kg / mol)溶解在二氯甲烷中配制成50wt %的溶液，然后將溶液裝入到四個IOmL的注射器中，注射針的內(nèi)徑為0.4mm,注射器與注射泵連接；靜電紡絲的參數(shù)為:聚合物溶液的流速為0.8~1.2mL / h，紡絲電壓為20~35kV，接收端裝置為覆蓋有聚四氟乙烯纖維布的轉(zhuǎn)速為3500~5000rpm的轉(zhuǎn)筒；最后得到的I吳的厚度為80~120 μ m ； (2)在25°C和溫和的攪拌前提下將聚合物溶解在1，1，1，3，3，3_六氟異丙醇中配制成不同濃度(40wt%、60wt% )的紡絲液，將聚合物溶液裝入到IOmL的塑料注射器中，連接的注射針的內(nèi)徑為0.4mm ;紡絲參數(shù)為:紡絲電壓為20~35kV，接收裝置為旋轉(zhuǎn)的圓筒，紡絲距離為150mm，得到的膜在25°C下真空干燥48h。
2.如權(quán)利要求1所述的PLGA纖維膜的制備方法，其特征在于:所述紡絲電壓為20kV。
3.如權(quán)利要求1所述的PLGA纖維膜的制備方法，其特征在于:所述旋轉(zhuǎn)的圓筒的直徑為100mm,長度為300mm。
【文檔編號】D04H1/435GK103603138SQ201310585879
【公開日】2014年2月26日 申請日期:2013年11月15日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月15日
【發(fā)明者】韓志超, 許杉杉, 佴剛 申請人:無錫中科光遠(yuǎn)生物材料有限公司