專利名稱：：用于診斷微生物感染的組合物和裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及用于診斷、檢測(cè)和/或表征微生物感染或污染的組合物、平臺(tái)、試劑盒和方法。尤其是，本發(fā)明涉及用于診斷、檢測(cè)和/或表征尿路感染的這種組合物、平臺(tái)、試劑盒和方法。
背景技術(shù)：
：尿路感染(UTI):尿路感染是通常實(shí)踐中最常見的感染之一以及西方世界最常見的醫(yī)院感染。總患病率是3_5%，每年在18/1，000居民發(fā)生1。感染在女性最為普遍(風(fēng)險(xiǎn)比男性高六倍)，這通常解釋為這樣的事實(shí)，即尿道的開口處于與陰道菌群直接接觸，且女性尿道相當(dāng)短，相反男性尿道長(zhǎng)4-5倍，從而保護(hù)了尿道。至于年齡組，感染在生命的早期即一歲以下、和生命的晚期即>60歲的年齡最為常見。盡管大多數(shù)感染是簡(jiǎn)單的下UTI即膀胱感染，通常不經(jīng)抗菌素治療而自身痊愈，但UTI還可以是復(fù)雜的，帶有上行的腎感染，可以擴(kuò)散到血液，導(dǎo)致敗血癥和敗血性休克。大約50%的大腸桿菌(Escherichiacoli)菌血癥以尿道為病灶，盡管有有效的抗菌素，這些感染的死亡率是大約20%。尿毒癥和透析治療的腎損傷在超過三分之一的病例中是由慢性尿路感染導(dǎo)致的。對(duì)尿道的操作步驟和其它醫(yī)原性的操作諸如膀胱鏡檢查、導(dǎo)管插入術(shù)等導(dǎo)致大量感染，如膀胱導(dǎo)管插入術(shù)導(dǎo)致一周后30-50%的患者的、一個(gè)月后幾乎100%的菌尿。致病機(jī)理和病原學(xué)UTI可以是由諸如腺病毒的病毒和由鞭毛蟲類諸如陰道毛滴蟲(Trichomonasvaginalis)導(dǎo)致的，但大多數(shù)的感染(>98%)是由細(xì)菌導(dǎo)致的，在多數(shù)病例中該細(xì)菌來(lái)源于患者自身直腸的菌群。由于偶然或衛(wèi)生差，細(xì)菌可以從直腸和肛門經(jīng)由會(huì)陰擴(kuò)散到陰道，細(xì)菌可以在陰道和尤其是尿道外周圍的區(qū)域形成菌落。根據(jù)這一點(diǎn)，由諸如如抑制局部免疫功能的低溫等因素或由物理因素諸如性交幫助，細(xì)菌獲得進(jìn)入尿道的機(jī)會(huì)。如果該細(xì)菌含有特異性致病因子，幫助它們粘附到尿道和膀胱的粘膜上，細(xì)菌就可以滲入上皮并穿過上皮，進(jìn)入下方的組織。傳染過程接著發(fā)生的是細(xì)胞內(nèi)微菌落形成，上皮細(xì)胞凋亡，細(xì)胞物質(zhì)和細(xì)菌釋放到膀胱腔，有重新感染的危險(xiǎn)。在許多情況，免疫系統(tǒng)將大體上除去細(xì)菌并恢復(fù)膀胱壁組織的正常功能，但膀胱腔中的細(xì)菌可以提供足夠時(shí)間經(jīng)由輸尿管再次上升到腎盂，在腎盂中細(xì)菌可以進(jìn)一步擴(kuò)散到腎臟的髓質(zhì)和皮質(zhì)，導(dǎo)致腎盂腎炎、腎周膿腫或腎內(nèi)膿腫或其它不幸事件。免疫反應(yīng)可以通過尿和牽涉到的組織中增加數(shù)目的白細(xì)胞，大多數(shù)是粒細(xì)胞而觀察到。在大多數(shù)持續(xù)病例中，在2-3周后也可以測(cè)量到針對(duì)侵入者的特定抗體。大腸桿菌是主要起因，造成60-90X的UTI，因?yàn)檫@種細(xì)菌通常保持有造成UTI必需的致病因子，即粘附性質(zhì)(對(duì)膀胱上皮上的受體有特別嗜好的纖毛或菌毛)、細(xì)胞移動(dòng)(鞭毛)和大量其它致病因子，這使得該細(xì)菌規(guī)避免疫功能并滲入人類組織。其余的感染是由其它腸桿菌科(Enterobacteriaceae)(克雷伯氏菌屬(Klebsiella)禾口腸桿菌屬(Enterobacterspp.)、變形桿菌屬(Proteusspp.))和一些革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌(腸球菌(Enterococci)、腐生性葡萄球菌(Staphylococcussaprophytics)、氣球菌屬(Aerococcusspp.))禾口很少的念珠菌屬(Candidaspp.)導(dǎo)至文的。支原體(Mycoplasma)禾口脲原體屬(Ureaplasmaspp)在UTI中的可能作用仍有爭(zhēng)論。細(xì)菌可能見于不具有癥狀或其它體征(如白細(xì)胞尿)的患者的尿中，即所謂的無(wú)癥狀菌尿。這在老年患者尤其常見，在許多研究中已發(fā)現(xiàn)10_15%的普遍性。臨床表現(xiàn)膀胱感染導(dǎo)致局部疼痛，可以在恥骨后感覺到，或可能在腰部感覺到-但這通常是牽涉到腎的體征，以及排泄期間疼痛。還有，膀胱中的剌激將導(dǎo)致頻繁排泄。還可演變?yōu)榘l(fā)熱，盡管這通常在腎盂腎炎的情形常見。尿?qū)⒏淖冾伾蜏啙岫?，變得發(fā)暗、渾濁和有時(shí)伴有血尿，即由于從受創(chuàng)的膀胱上皮的少量出血而存在紅細(xì)胞。如果繼發(fā)菌血癥，患者將發(fā)展敗血癥的體征，伴有全身痛和不舒服、高熱和戰(zhàn)栗。即使是患上簡(jiǎn)單的UTI，患者也將由于該疾患而喪失工作能力，因此將留在家里無(wú)法工作并尋求醫(yī)學(xué)幫助。UTI的診斷因?yàn)槟虻劳ǔＪ菬o(wú)菌的并帶有低數(shù)目白細(xì)胞，細(xì)菌和增加數(shù)目的白細(xì)胞的存在指示感染。UTI的診斷是基于典型癥狀以及無(wú)菌地獲得的尿樣中細(xì)菌和增加數(shù)目的白細(xì)胞的存在。由于尿道外部分通常形成菌落，難以在排泄期間獲得樣品而不污染樣品。為了避免這種污染，獲得無(wú)菌尿樣的最佳途徑是通過恥骨弓上穿剌，或經(jīng)由膀胱導(dǎo)管或在腎盂感染的情形經(jīng)由經(jīng)皮膚的腎造口術(shù)。但因?yàn)楹竺孢@些方法是相當(dāng)麻煩和通常在絕大多數(shù)情況下對(duì)患者是疼痛的，還需要入院，多數(shù)情況下收集的尿是中段尿(MSU)，即用無(wú)菌鹽水潤(rùn)濕的棉簽清潔尿道口，隨后患者排泄少量第一部分的尿來(lái)清潔尿道，之后排泄_中段_在無(wú)菌容器中收集的樣品_最后排泄剩余的尿體積到廁所。還獲取其它樣品諸如尿道拭子或血培養(yǎng)物來(lái)指示尿道炎(如淋病)或菌血癥。用于診斷UTI的定量標(biāo)準(zhǔn)由于當(dāng)以MSU獲取尿樣時(shí)污染和隨后評(píng)價(jià)結(jié)果的問題，以及一些患者可能具有無(wú)癥狀菌尿的事實(shí)，直到十九世紀(jì)六十年代才在EdwardKass2的研究中發(fā)現(xiàn)，為了辨別無(wú)癥狀患者和腎盂腎炎患者，至少10s細(xì)菌/ml尿的一種可能的尿病原體(見上述)必須存在于間隔至少24h獲取的兩份尿樣中。后來(lái)發(fā)現(xiàn)，低至103細(xì)菌/ml尿的計(jì)數(shù)的典型尿病原體(見上述)指示患者中的感染，該患者具有典型癥狀的UTI3，即Kass-標(biāo)準(zhǔn)2用于患有無(wú)癥狀菌尿的患者。目前使用的診斷尿中細(xì)菌的方法a)直接方法1.^^:細(xì)菌可以通過對(duì)濕涂片的相差鏡檢術(shù)或通過對(duì)革蘭氏染色制品的簡(jiǎn)單光鏡檢術(shù)在尿樣中可見。在濕涂片中，可觀察到細(xì)菌的形狀和可能的移動(dòng)，但當(dāng)然觀察不到細(xì)菌的革蘭氏類型。這可以通過對(duì)革蘭氏染液的光鏡檢術(shù)來(lái)分辨，在兩種情況都可以觀察到白細(xì)胞并大致地定量。鏡檢術(shù)的問題是缺少特異性，即只能提供假定的細(xì)菌診斷，和敏感性，即細(xì)菌只有當(dāng)以至少105細(xì)菌/ml尿的數(shù)目存在時(shí)才可見。此外，鏡檢術(shù)將不揭示細(xì)菌的抗菌素敏感性。關(guān)于以^1Q5細(xì)菌/ml的定量培養(yǎng)物作為UTI的標(biāo)準(zhǔn)4，相差鏡檢術(shù)具有58%的陽(yáng)性預(yù)測(cè)值。2.:診斷UTI的金標(biāo)準(zhǔn)。在實(shí)驗(yàn)室中，這通過定量培養(yǎng)進(jìn)行，即標(biāo)準(zhǔn)化的環(huán)施加1iU或10iU尿到瓊脂平板上。這允許通過計(jì)數(shù)培養(yǎng)的平板上菌落數(shù)目(菌落形成單位，CFU)來(lái)定量細(xì)菌。如果預(yù)期低數(shù)目的細(xì)菌(如恥骨弓上穿剌或?qū)Ч軜悠?，可以培養(yǎng)達(dá)lml尿，允許計(jì)數(shù)低至l-2CFU/ml尿。培養(yǎng)可導(dǎo)致通過生化和其它類型的實(shí)驗(yàn)室檢查進(jìn)一步診斷細(xì)菌。此外，可進(jìn)行敏感性檢驗(yàn)。方法的敏感性是通過定義100%，但在一些情況如果未使用特定的培養(yǎng)基、大氣或溫度條件，細(xì)菌可能不生長(zhǎng)(一些氣球菌屬菌株可能只在血瓊脂上和C02中生長(zhǎng))，或如果患者已經(jīng)開始抗菌素治療，由于抗菌素阻遏，細(xì)菌可能不生長(zhǎng)。特異性不是100%，因?yàn)殛?yáng)性培養(yǎng)物仍然可能包含污染物-這一結(jié)果應(yīng)該聯(lián)合癥狀和體征以及尿中增加數(shù)目的白細(xì)胞的存在。定量環(huán)有+/-1/2108CFU/ml的偏差，這表示只能進(jìn)行計(jì)數(shù)的大致估計(jì)5。實(shí)驗(yàn)室中定量培養(yǎng)物的缺點(diǎn)是尿必須被保持在這樣的條件下其中細(xì)菌在培養(yǎng)之前不繁殖；這可以通過在轉(zhuǎn)移過程中冷卻尿(即<4°C)來(lái)獲得或通過使用保存細(xì)菌而不促進(jìn)生長(zhǎng)的轉(zhuǎn)移培養(yǎng)基，如通過使用硼酸來(lái)獲得。因此近年來(lái)用于轉(zhuǎn)移的包含硼酸的管已經(jīng)變得常見，但這種方法具有固有的問題，即硼酸對(duì)人類有毒，如致癌。其它培養(yǎng)方法:具有在一側(cè)或兩側(cè)攜帶瓊脂培養(yǎng)基、浸入尿中的塑料平板骨架的浸片(dipslide)已經(jīng)使用了20-30年(如Uricult(Orion))。這些的優(yōu)點(diǎn)是便于接種，且直接接種可以通過比較細(xì)菌生長(zhǎng)與用于已知量細(xì)菌的培養(yǎng)物的浸片圖片來(lái)定量。浸片還可用作轉(zhuǎn)移培養(yǎng)基。已經(jīng)開發(fā)了敏感性檢驗(yàn)，其中在接種后將包含抗菌素的盤放在瓊脂表面上(如Sensicult(Orion))。在一些情形中，敏感性檢驗(yàn)的陽(yáng)性預(yù)測(cè)值(PPV)已經(jīng)低至0.6，這可以解釋為缺少標(biāo)準(zhǔn)化的接種物和難以將盤周圍的區(qū)域詮釋在圓表面上，因?yàn)榄傊桨宀皇峭耆馄降?。同樣，浸片的小表?即大約2X5cm)使得難以評(píng)價(jià)細(xì)菌的生長(zhǎng)特征，尤其是細(xì)菌是否是多于一種物種。此外，沒有對(duì)細(xì)菌物種的了解，難以評(píng)價(jià)敏感性。最近Novamed在以色列銷售了在一側(cè)上帶有顯色瓊脂的浸片(DipStreak)。3.^E^M:近年來(lái)嘗試了多種方法來(lái)定量尿中的細(xì)菌，諸如由分光光度法測(cè)量濁度、細(xì)胞離心法、ATP-測(cè)量法及其它方法。迄今為止，就我們所知，這些方法都不能適用于常規(guī)實(shí)驗(yàn)室，由于其成本和對(duì)技術(shù)技巧的需求，尤其是不能適用于基礎(chǔ)醫(yī)療。b)間接方法1.用于亞硝酸鹽和白細(xì)胞-酯酶的浸漬片尿中亞硝酸鹽的確定用于診斷UTI，因?yàn)橹挥挟?dāng)尿中存在產(chǎn)硝酸鹽還原酶的細(xì)菌時(shí)才存在這種物質(zhì)。硝酸鹽來(lái)自蛋白代謝，并取決于當(dāng)天取樣前蛋白的攝入，以不同濃度見于尿。然而，如果存在產(chǎn)生亞硝酸鹽-還原酶的細(xì)菌(如大腸桿菌可包含兩種類型的酶)，亞硝酸鹽可能被除去。該檢驗(yàn)不是很敏感，因?yàn)樵摲磻?yīng)需要培養(yǎng)約3小時(shí)，一些細(xì)菌產(chǎn)生亞硝酸鹽_還原酶，而一些尿病原體根本不產(chǎn)生硝酸鹽還原酶，如葡萄球菌。白細(xì)胞_酯酶檢驗(yàn)更相關(guān)，因?yàn)檫@是證明白細(xì)胞存在的最容易方式；該酶只能來(lái)自白細(xì)胞，酶的量與白細(xì)胞數(shù)目相關(guān)。完整白細(xì)胞容易地和快速地裂解，這表示為了實(shí)現(xiàn)相關(guān)定量鏡檢術(shù)，對(duì)白細(xì)胞的尿鏡檢術(shù)必須在取樣后一小時(shí)內(nèi)進(jìn)行，而由于酶的穩(wěn)定性，酶檢驗(yàn)可以在數(shù)小時(shí)后進(jìn)行。然而，白細(xì)胞的存在僅僅預(yù)測(cè)50%患者的感染，因?yàn)榘准?xì)胞尿可見于未感染的許多患者。共同地，由于上述因素，對(duì)組合的兩種酶的檢驗(yàn)(即一種陽(yáng)性或兩種陽(yáng)性)具有相當(dāng)?shù)偷腜PV(60-80%)。2.僅癥狀在一般實(shí)踐的許多情況，全科醫(yī)生(GP)將僅根據(jù)癥狀就開始治療。這可能是由于因?yàn)槌杀?、地理或傳統(tǒng)、對(duì)病原體敏感性的了解和/或使用推測(cè)覆蓋所有可能病原體的廣譜抗菌素而對(duì)診斷檢查有所保留。UTI的治療在30X的簡(jiǎn)單UTI病例，感染將會(huì)自愈，即不經(jīng)抗菌素治療而消失6。但在大多數(shù)病例，尤其是在復(fù)雜病例，即除了14-60歲的年齡組中的女性以外的所有其它患者，抗菌素治療是標(biāo)準(zhǔn)治療。取決于疾患和所使用的抗菌素，簡(jiǎn)單感染將在3-7天后治愈，而腎盂腎炎需要10-14天的治療，更慢性的病例需要更長(zhǎng)時(shí)間的治療，在一些病例可以是數(shù)月到數(shù)年。效果取決于細(xì)菌病原體的敏感性6'7。在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行的標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)花費(fèi)時(shí)間，尤其是當(dāng)進(jìn)行盤敏感性檢驗(yàn)時(shí)，因?yàn)樵摍z驗(yàn)是基于多個(gè)條件被保持在某些限制中(接種物、培養(yǎng)時(shí)間、檢驗(yàn)的讀取、培養(yǎng)大氣等等)。最重要的因素是接種物，其必須在某個(gè)狹窄的限值內(nèi)以確保檢驗(yàn)的質(zhì)量，這就是難以直接在最初尿樣進(jìn)行有意義的盤擴(kuò)散敏感性檢驗(yàn)的原因，因?yàn)椴恢兰?xì)菌的準(zhǔn)確數(shù)目。WO99/18232(Chen等人)提供了一種多區(qū)室檢測(cè)裝置，其基于組合使用能夠維持全部微生物體生長(zhǎng)的培養(yǎng)基、對(duì)特定目標(biāo)有機(jī)體選擇性的培養(yǎng)基和包含抗微生物劑敏感性解釋培養(yǎng)基的培養(yǎng)基。這一申請(qǐng)教導(dǎo)使用液體培養(yǎng)基，沒有提出允許區(qū)分同一樣品中多個(gè)種群和/或菌株的微生物的存在并確定所述微生物的每個(gè)種群或菌株的抗微生物劑敏感性的設(shè)置。后來(lái)Chen等人在W003106696中公開了用于檢測(cè)致病微生物和其抗微生物劑敏感性的方法和裝置?？砂晒獾孜锘蛏孜锏氖褂靡垣@得微生物存在的視覺信號(hào)，但未提到使用多種不同物質(zhì)來(lái)確定不同物種。W00106000公開了用于鑒定和區(qū)分腸桿菌科的檢驗(yàn)培養(yǎng)基。該培養(yǎng)基包含抗菌素來(lái)阻止腸桿菌科以外的微生物生長(zhǎng)。US6750038描述了一種快速抗菌素敏感性檢驗(yàn)。色原的使用沒有用來(lái)鑒定微生物。US6251624公開了用于檢測(cè)、定量和表征微生物的裝置和方法?？咕孛舾行酝ㄟ^生長(zhǎng)區(qū)抑制來(lái)檢驗(yàn)。W02004050675公開了一種多室生長(zhǎng)平板，其培養(yǎng)基中帶有選擇性肉湯以鑒定特定微生物，帶有抗菌素用于檢驗(yàn)敏感性。因此，用于診斷、檢測(cè)和表征微生物感染或污染，并提供區(qū)分這樣的多個(gè)種群和/或菌株的微生物的可能性的改進(jìn)技術(shù)將是有利的。尤其是，如果以合理的成本制造的有效、可靠和可能的平臺(tái)形式提供，這樣的技術(shù)將是有利的。發(fā)明才既述因此，本發(fā)明的一個(gè)目的涉及用于診斷、檢測(cè)和/或表征微生物感染或污染的組合物、平臺(tái)、試劑盒和方法。因此，本發(fā)明的一方面涉及包含半固體微生物生長(zhǎng)培養(yǎng)基、兩種或多種生色物質(zhì)或熒光物質(zhì)(或底物)和抗微生物劑的組合物。本發(fā)明的另一方面涉及包含根據(jù)本發(fā)明的組合物的平臺(tái)。本發(fā)明的又另一方面提供包含根據(jù)本發(fā)明的組合物的試劑盒。本發(fā)明的進(jìn)一步方面提供—種包含根據(jù)本發(fā)明的平臺(tái)的試劑盒。12根據(jù)本發(fā)明的組合物在檢測(cè)和/或鑒定致病的微生物、尤其是致尿道病的微生物中的應(yīng)用。根據(jù)本發(fā)明的組合物在檢測(cè)和/或診斷選自以下組成的組的感染的應(yīng)用尿路感染、皮膚和軟組織感染、金黃色葡萄球菌(S.aureus)(包括耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌)感染、腦膜炎球菌(meningococci)感染、淋球菌(gonococci)感染、包括肺炎球菌(pneumococci)感染的鏈球菌(streptococci)感染。用于檢測(cè)和/或診斷選自以下組成的組的感染的根據(jù)本發(fā)明的組合物尿路感染、皮膚和軟組織感染、金黃色葡萄球菌(包括耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌)感染、腦膜炎球菌感染、淋球菌感染、包括肺炎球菌感染的鏈球菌感染?！N診斷、檢測(cè)和/或表征微生物感染或污染的方法，包括以下步驟i)提供可能有微生物感染或污染的樣品；并ii)將所述樣品與根據(jù)本發(fā)明的平臺(tái)接觸。—種診斷、檢測(cè)和/或表征微生物感染或污染的方法，包括以下步驟i)提供可能有微生物感染或污染的樣品；并ii)將所述樣品與包含半固體微生物生長(zhǎng)培養(yǎng)基、兩種或多種生色物質(zhì)或熒光物質(zhì)(或底物)和抗微生物劑的檢驗(yàn)組合物(諸如兩種或多種檢驗(yàn)組合物)接觸，并與包含所述半固體生長(zhǎng)培養(yǎng)基和所述兩種或多種生色物質(zhì)或熒光物質(zhì)(或底物)但不包含任何抗微生物劑/所述抗微生物劑的對(duì)照組合物接觸?！N制造根據(jù)本發(fā)明的組合物的方法，包括組合半固體微生物生長(zhǎng)培養(yǎng)基、兩種或多種生色物質(zhì)(或底物)和抗微生物劑的步驟?！N制造根據(jù)本發(fā)明的平臺(tái)的方法，包括組合半固體微生物生長(zhǎng)培養(yǎng)基、兩種或多種生色物質(zhì)(或底物)和抗微生物劑的步驟。—種制造根據(jù)本發(fā)明的診斷試劑盒的方法，包括組合半固體微生物生長(zhǎng)培養(yǎng)基、兩種或多種生色物質(zhì)(或底物)和抗微生物劑的步驟。附圖簡(jiǎn)述圖1顯示關(guān)于根據(jù)本發(fā)明的平臺(tái)，目前兩種優(yōu)選的實(shí)施方案根據(jù)圖1A，該平臺(tái)包括能夠作為可能有微生物感染或污染的樣品的容器的一個(gè)凹槽(10)。該凹槽借助一個(gè)或多個(gè)一體的分隔組件(17)被分為分開的區(qū)室(11、12、13、14、15和16)。每個(gè)區(qū)室包含含有半固體微生物生長(zhǎng)培養(yǎng)基、兩種或多種生色物質(zhì)或熒光物質(zhì)或底物以及抗菌素的組合物；或含有半固體微生物生長(zhǎng)培養(yǎng)基、兩種或多種生色物質(zhì)或熒光物質(zhì)或底物、但不包含抗微生物劑的組合物。根據(jù)圖1B，該平臺(tái)包括多個(gè)凹槽(18)，每個(gè)凹槽能夠作為可能有微生物感染或污染的樣品的容器。每個(gè)凹槽包含含有半固體微生物生長(zhǎng)培養(yǎng)基、兩種或多種生色物質(zhì)或熒光物質(zhì)或底物以及抗菌素的組合物；或含有半固體微生物生長(zhǎng)培養(yǎng)基、兩種或多種生色物質(zhì)或熒光物質(zhì)或底物、但不包含抗微生物劑的組合物。圖2說明本發(fā)明目前優(yōu)選的實(shí)施方案之一，根據(jù)該方案該平臺(tái)包括包含甲氧芐啶的根據(jù)本發(fā)明的組合物(19)、包含磺胺甲噻二唑的根據(jù)本發(fā)明的組合物(20)、包含氨芐西林的根據(jù)本發(fā)明的組合物(21)、包含美西林的根據(jù)本發(fā)明的組合物(22)和包含呋喃妥因的根據(jù)本發(fā)明的組合物(23)。該平臺(tái)還包括其中沒有抗微生物劑的根據(jù)本發(fā)明的組合物(24)。最后，該圖說明又一優(yōu)選的實(shí)施方案，根據(jù)該方案包含不含有抗微生物劑的所述組合13物的凹槽或區(qū)室的大小是任何其它凹槽或區(qū)室的大小的兩倍。圖3顯示使用根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方案的(圖2中說明的)平臺(tái)確定分析的樣品中大腸桿菌的量或滴度的標(biāo)準(zhǔn)。照片顯示大腸桿菌以不同量的細(xì)菌血l尿的生長(zhǎng)。示意的大腸桿菌對(duì)磺胺甲噻二唑和氨芐西林是耐藥性的，因?yàn)樵谶@兩個(gè)抗菌素區(qū)室有生長(zhǎng)，但其對(duì)甲氧芐啶、呋喃妥因和美西林敏感。圖4顯示使用根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方案的平臺(tái)確定分析的樣品中尿病原體不同菌落類型的標(biāo)準(zhǔn)。普通尿道致病細(xì)菌的生長(zhǎng)條件和顏色和其對(duì)Flexicult平板中五種抗菌素的敏感性/耐藥性。<table>tableseeoriginaldocumentpage14</column></row><table>本發(fā)明將在以下更詳細(xì)描述。發(fā)明詳述定義在更詳細(xì)地討論本發(fā)明之前，首先定義以下術(shù)語(yǔ)和慣用語(yǔ)微生物在本上下文中，術(shù)語(yǔ)"微生物的"寬泛地解釋為是指"有關(guān)微生物的"。術(shù)語(yǔ)"微生物"共同地是指細(xì)菌、真菌、古細(xì)菌和原生生物。半固體生長(zhǎng)培養(yǎng)基本文所用的表述"半固體生長(zhǎng)培養(yǎng)基"是指允許微生物在其表面上形成菌落的生長(zhǎng)培養(yǎng)基，諸如具有凝膠樣外觀或以凝膠形式的培養(yǎng)基，凝膠是一種膠態(tài)系統(tǒng)，其中互連顆粒的多孔網(wǎng)絡(luò)存在于整個(gè)液體培養(yǎng)基體積中。進(jìn)一步應(yīng)理解的是，凝膠主要是組合物中的液體，因此表現(xiàn)出于具體液體類似的稠度，然而具有固體的結(jié)構(gòu)一致性。優(yōu)選地，本文所用的半固體生長(zhǎng)培養(yǎng)基是通過向液體生長(zhǎng)培養(yǎng)基加入足量的物質(zhì)來(lái)制備，該物質(zhì)在加熱時(shí)融化并當(dāng)再次冷卻時(shí)固化，諸如明膠或瓊脂。應(yīng)理解的是，培養(yǎng)基中互連顆粒的多孔網(wǎng)絡(luò)將允許營(yíng)養(yǎng)物和抗微生物劑在培養(yǎng)基中擴(kuò)散，變得微生物可獲得的。生長(zhǎng)培養(yǎng)基在本發(fā)明上下文中，術(shù)語(yǔ)"生長(zhǎng)培養(yǎng)基"是指在其中或在其上微生物可以生長(zhǎng)的物質(zhì)。該術(shù)語(yǔ)尤其包括營(yíng)養(yǎng)肉湯(液體營(yíng)養(yǎng)培養(yǎng)基)或Lysogeny肉湯(L_B培養(yǎng)基)和瓊脂，瓊脂對(duì)于微生物是最常見的生長(zhǎng)培養(yǎng)基。類似地，該術(shù)語(yǔ)涵蓋其中微生物可以懸液生長(zhǎng)的液體培養(yǎng)基，以及如上界定、允許微生物在其表面上形成菌落的半固體培養(yǎng)基。術(shù)語(yǔ)"生長(zhǎng)培養(yǎng)基"還包括專門培養(yǎng)基，其有時(shí)是包括難養(yǎng)生物的某些微生物生長(zhǎng)所需的，這些微生物由于復(fù)雜的營(yíng)養(yǎng)需求而需要專門的環(huán)境。大體上，生長(zhǎng)培養(yǎng)基將包括用于細(xì)菌生長(zhǎng)的碳源諸如葡萄糖或琥珀酸鹽、水、提供微生物生長(zhǎng)所需的必要元素的各種鹽諸如鎂、允許細(xì)菌合成蛋白和核酸的氮、磷和硫、以及氨基酸和氮的來(lái)源(如，牛肉、酵母提取物)。還應(yīng)理解的是，術(shù)語(yǔ)"生長(zhǎng)培養(yǎng)基"包括確定成分培養(yǎng)基，也稱為確定化學(xué)成分培養(yǎng)基，以及成分不確定培養(yǎng)基，也稱為基礎(chǔ)或復(fù)合培養(yǎng)基。微生物的確定成分培養(yǎng)基將具有已知量的所有成分，包括微生物所需的微量元素和維生素，和尤其是確定成分的碳源諸如葡萄糖或甘油，以及確定成分的氮源諸如銨鹽或硝酸鹽。相反，成分不確定培養(yǎng)基具有一些復(fù)雜成分，諸如酵母提取物或酪蛋白水解物，其由未知比例的許多化學(xué)物質(zhì)的混合物組成。生色底物在本發(fā)明上下文中，術(shù)語(yǔ)"生色底物"、"生色物質(zhì)"和"色原"互換地使用，是指生化色素的前體。尤其應(yīng)理解的是，色原可以是底物、化合物或物質(zhì)，其被微生物代謝時(shí)產(chǎn)生特有的顏色或色素，可用作檢測(cè)和/或鑒定所述微生物的手段。熒光底物術(shù)語(yǔ)"熒光底物"與"熒光物質(zhì)"互換地使用，是指熒光化合物的前體。熒光化合物是這樣一種化合物，其中光子的分子吸收激發(fā)發(fā)射具有更長(zhǎng)波長(zhǎng)的另一光子，且其中吸收的光子與發(fā)射的光子之間的能量差以分子振動(dòng)或熱來(lái)結(jié)束。尤其是，吸收的光子在紫外線范圍，發(fā)射的光子在可見光范圍。因此熒光化合物的檢測(cè)通常可以通過將其暴露于紫外光(UV光)，隨后記錄由熒光化合物發(fā)射的光(通常是可見光)來(lái)進(jìn)行。尤其應(yīng)理解的是，熒光底物可以是底物、化合物或物質(zhì)，其被微生物代謝時(shí)發(fā)射光，可用作檢測(cè)和/或鑒定所述微生物的手段?？刮⑸飫┍旧暾?qǐng)中術(shù)語(yǔ)"抗菌素"和"抗微生物劑"互換地使用，界定抑制或廢除微生物諸如細(xì)菌、真菌或原生動(dòng)物生長(zhǎng)的化合物，即具有抗_細(xì)菌、抗_真菌和/或抗_寄生活性的化合物。該術(shù)語(yǔ)包括從活的生物體產(chǎn)生和分離的抗菌素或抗微生物化合物，例如，青霉菌屬(Penicilli咖)中的真菌產(chǎn)生的青霉素類或來(lái)自鏈霉菌屬(Str印tomyces)的細(xì)菌的鏈霉素。該術(shù)語(yǔ)還包括通過化學(xué)合成獲得的抗菌素或抗微生物化合物，諸如磺胺類藥物。該術(shù)語(yǔ)尤其包括抗-細(xì)菌的抗菌素，其是不具有針對(duì)病毒、真菌和其它非細(xì)菌微生物的活性的抗菌素。抗-細(xì)菌的抗菌素包括破壞細(xì)菌的殺菌抗菌素，和阻止細(xì)菌繁殖的抑菌抗菌素。抗細(xì)菌的抗菌素進(jìn)一步包括靶向特定類型細(xì)菌諸如革蘭氏陰性或革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌的"窄譜的"抗菌素，和影響寬范圍細(xì)菌的廣譜抗菌素。類似地，抗細(xì)菌的抗菌素包括用于吞服的抗菌素，以及通常用于治療嚴(yán)重感染諸如深部系統(tǒng)感染的用于靜脈施用的抗菌素，和用于局部施用的抗菌素?？辜?xì)菌的抗菌素包括目前公認(rèn)的以下類中的抗菌素氨基糖苷類、安莎霉素類、P-內(nèi)酰胺抗菌素(包括碳頭孢烯、碳青霉烯類、頭孢菌素類(第一代、第二代、第三代和第四代)、單酰胺菌素類和青霉素)、糖肽類、大環(huán)內(nèi)酯、林可酰胺類、多肽類、喹諾酮類、磺胺類、四環(huán)素類、環(huán)狀脂肽類、甘氨酰環(huán)素類、噁唑烷酮類、二氨基嘧啶類、硝基呋喃類、利福霉素類、抗菌肽類、酰胺醇類、硝基咪唑類、鏈陽(yáng)性菌素類和磷霉素類。本發(fā)明的各方面和實(shí)施方案在第一和最寬的方面，本發(fā)明提供包含半固體微生物生長(zhǎng)培養(yǎng)基、兩種或多種生色物質(zhì)或熒光物質(zhì)或底物和抗微生物劑的組合物。根據(jù)本發(fā)明采用半固體微生物生長(zhǎng)培養(yǎng)基的事實(shí)具有微生物的生長(zhǎng)可在所述培養(yǎng)基表面上作為單菌落觀察的益處。生色物質(zhì)或熒光物質(zhì)或底物的組合使用，通過菌落中產(chǎn)生的色素顏色或熒光提供區(qū)別培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的微生物的多個(gè)類型或物種的可能性。同時(shí)，可能確定每個(gè)微生物類型或物種針對(duì)根據(jù)本發(fā)明的組合物中存在的抗微生物劑的敏感性。本發(fā)明的另一益處是當(dāng)該平臺(tái)用于檢驗(yàn)?zāi)虻母腥緯r(shí)，半固體微生物生長(zhǎng)培養(yǎng)基上形成的菌落數(shù)目直接與加入到平臺(tái)的每體積尿的細(xì)菌數(shù)目相關(guān)。從而使得容易確定尿中細(xì)菌的濃度。在本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方案，該半固體培養(yǎng)基包含色氨酸。包含色氨酸的益處在于，使得容易檢測(cè)變形桿菌屬-摩根氏菌屬(Morganella)-普羅威登斯菌屬(Providencia)的腸細(xì)菌，同時(shí)色氨酸不干擾抗菌素敏感性的確定。在另一優(yōu)選實(shí)施方案，根據(jù)本發(fā)明的組合物中的半固體培養(yǎng)基包含半乳糖聚合物(瓊脂)或明膠。優(yōu)選地根據(jù)本發(fā)明的組合物包括選自以下組成的組的微生物生長(zhǎng)培養(yǎng)基Iso—sensitest瓊月旨、Danish血瓊月旨、Discovery培養(yǎng)基禾口Mueller—Hinton培養(yǎng)基。X寸于不固有地包含色氨酸的培養(yǎng)基，在這些培養(yǎng)基中包括色氨酸可能是進(jìn)一步的益處。培養(yǎng)基中的色氨酸濃度可以在0.25-3.0克/升之間。Iso-sensitest瓊月旨目前可從0xoid獲得，其組成列舉在0xoid手冊(cè)1998。Iso-sensitest瓊脂包括蒸餾水中的llg/1水解酪蛋白、3g/l蛋白胨、2g/1葡萄糖、3g/1氯化鈉、lg/1可溶淀粉、2g/1磷酸氫二鈉、lg/1乙酸鈉、0.2g/1甘油磷酸鎂、0.lg/1葡萄糖酸牽丐、0.OOlg/1硫酸鈷、0.OOlg/1硫酸銅、0.OOlg/1硫酸鋅、0.OOlg/1硫酸亞鐵、0.002g/1氯化鎂、0.OOlg/1甲萘醌、0.OOlg/1氰鈷胺、0.02g/lL-鹽酸半胱氨酸、0.02g/l色氨酸、0.003g/l吡哆醇、0.003g/l泛酸鹽、0.003g/l煙酰胺、0.0003g/l生物素、0.00004g/l硫胺、0.Olg/1腺嘌呤、0.Olg/1鳥嘌呤、0.Olg/1黃嘌呤、0.Olg/1尿嘧啶、8g/1瓊脂。對(duì)于Danish血瓊脂，本領(lǐng)域技術(shù)人員已知其具有如下組成每250升蒸餾水中2gNa2HP0412H20、625g胰蛋白胨、250g淀粉、833.6g氯化鉀、2.5g去垢劑、74.8g肉湯(OxoidCM975K)、800gD(+)葡萄糖-一水合物、1.75g葉黃素、1.75g鳥嘌呤、17.5g硫酸鎂7H20、19.2gCaCl22H20、2，720g瓊脂、5NHC1調(diào)至pH7.4、維生素溶液、和12.51馬血。Discovery培養(yǎng)基由Oxoid制造(產(chǎn)品號(hào)CM1087)。根據(jù)制造商，該培養(yǎng)基具有以下組成14.5g/l蛋白胨、2g/1葡萄糖、5.5g/1鹽混合物、lg/1可溶淀粉、1.5g/1發(fā)色混合物和8g/1瓊脂。Mueller-Hinton培養(yǎng)基包括2g/1牛肉提取粉件肉提取物、17.5g/1酪蛋白的酸消化液、1.5g/1淀粉和17g/l瓊脂。應(yīng)理解的是，所述培養(yǎng)基中每種成分的量有一些變化是可以接受的；大體上±20%的變化是可以接受的。然而，如本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解的，某些組分可以改變甚至更大的程度瓊脂的量可以大致改變諸如從4-25g/1而不顯著改變培養(yǎng)基的性能。因此通常優(yōu)選地，根據(jù)本發(fā)明的組合物中的培養(yǎng)基包括從4-25g/1的半乳糖聚合物。這些培養(yǎng)基連同其它合適的培養(yǎng)基的特征是，當(dāng)用于確定對(duì)抗微生物劑的敏感性時(shí)提供大的可靠性。這種可靠性不是所有培養(yǎng)基都具有的，因?yàn)橐恍┡囵B(yǎng)基包括干擾抗菌素的化合物，從而影響使用這些培養(yǎng)基來(lái)檢驗(yàn)抗菌素敏感性的能力。大的可靠性例如由在這些培養(yǎng)基上的事實(shí)來(lái)證實(shí)i)加入16mg/l氨芐西林導(dǎo)致由參考菌株大腸桿菌ATCC25922形成的菌落的生長(zhǎng)或菌落的數(shù)目減少至少51ogCFU/ml，如將該組合物與包含105CFU/ml的懸液接觸并在37°C和環(huán)境大氣培養(yǎng)該組合物18-24小時(shí)后確定的；ii)加入32mg/l呋喃妥因?qū)е掠蓞⒖季旮云咸亚蚓鶤TCC49907形成的菌落的生長(zhǎng)或菌落的數(shù)目減少至少41ogCFU/ml，如將該組合物與包含105CFU/ml的懸液接觸并在37t:和環(huán)境大氣培養(yǎng)該組合物18-24小時(shí)后確定的；iii)加入700mg/l磺胺甲噻二唑?qū)е掠蓞⒖季甏竽c桿菌ATCC25922形成的菌落的生長(zhǎng)或菌落的數(shù)目減少至少31ogCFU/ml，如將該組合物與包含105CFU/ml的懸液接觸并在37t:和環(huán)境大氣培養(yǎng)該組合物18-24小時(shí)后確定的；iv)加入16mg/l甲氧芐啶導(dǎo)致由參考菌株大腸桿菌ATCC25922形成的菌落的生長(zhǎng)或菌落的數(shù)目減少至少31ogCFU/ml，如將該組合物與包含105CFU/ml的懸液接觸并在37t:和環(huán)境大氣培養(yǎng)該組合物18-24小時(shí)后確定的；v)加入16mg/l美西林導(dǎo)致由參考菌株大腸桿菌ATCC25922形成的菌落的生長(zhǎng)或菌落的數(shù)目減少至少51ogCFU/ml，如將該組合物與包含105CFU/ml的懸液接觸并在37°C和環(huán)境大氣培養(yǎng)該組合物18-24小時(shí)后確定的。在進(jìn)一步的實(shí)施方案，該微生物生長(zhǎng)培養(yǎng)基是能夠?qū)ζ渖仙L(zhǎng)的有機(jī)體施加選擇壓的選擇培養(yǎng)基，諸如對(duì)革蘭氏陰性細(xì)菌或?qū)Ω锾m氏陽(yáng)性細(xì)菌選擇性的培養(yǎng)基。半固體培養(yǎng)基可進(jìn)一步包括磺胺抑制劑和/或金屬離子，因?yàn)檫@些可以影響抗菌素敏感性。例如182+或0!2+的濃度變化可以影響以氨基糖苷類和四環(huán)素檢驗(yàn)銅綠假單胞菌(Ps.Aeruginosa)的結(jié)果。此外，過量鋅離子可以減小碳青霉烯類的區(qū)域大小。過量的陽(yáng)離子含量將減少抗菌素活性，而低的陽(yáng)離子含量可以導(dǎo)致活性增強(qiáng)。尤其是Ca2+和Mg2+離子可以以可溶鹽的形式存在于半固體培養(yǎng)基中。磺胺被胸苷抑制，細(xì)菌可以藉以使用胸苷并因此不顧磺胺而生長(zhǎng)。胸苷-磷酸化酶的存在將抑制胸苷并因此恢復(fù)磺胺的功能。需要的胸苷_磷酸化酶濃度將取決于培養(yǎng)基中胸苷的濃度。半固體培養(yǎng)基的另一參數(shù)是胸苷的濃度，因?yàn)槠淇赡苡绊憣?duì)葡萄球菌的甲氧芐啶和甲氧西林耐藥性的檢驗(yàn)。大多數(shù)瓊脂培養(yǎng)基包含可能影響以培養(yǎng)基中低含量的抗菌素的敏感性檢驗(yàn)結(jié)果的少量磺胺和甲氧芐啶拮抗劑(尤其是如果沒有加入血液)。因此在特定實(shí)施方案，敏感性檢驗(yàn)培養(yǎng)基應(yīng)包含少于0.03mg/l胸苷，否則在甲氧芐啶瓊脂上會(huì)觀察到小的菌落。如果培養(yǎng)基包含比推薦的略微多的胸苷，可能通過加入胸苷_磷酸化酶來(lái)減少濃度0.025至O.1IU酶/ml培養(yǎng)基或包含相同酶的5X溶血的馬血。盡管對(duì)于一些抗菌素和為了一些目的，根據(jù)本發(fā)明的組合物中僅存在一種抗菌素可以是期望的，根據(jù)本發(fā)明的組合物還可以包含2種或更多種抗微生物劑、諸如3種或更多種抗微生物劑、諸如4種或更多種抗微生物劑、或諸如5種或更多種抗微生物劑。根據(jù)本發(fā)明的組合物特征為抗微生物劑，或如果存在多于一種抗微生物劑，則至少一種該抗微生物劑，諸如2、3、4、5或更多種抗微生物劑或所有抗微生物劑選自以下組成的組阿米卡星、阿莫西林、阿莫西林_克拉維酸、兩性霉素_8、氨芐西林、氨芐西林_舒巴坦、安普霉素、阿奇霉素、氨曲南、桿菌肽、芐青霉素、卡泊芬凈、頭孢克洛、頭孢羥氨芐、頭孢氨芐、頭孢噻吩、頭孢唑林、頭孢地尼、頭孢吡肟、頭孢克肟、頭孢甲肟、頭孢哌酮、頭孢哌酮-舒巴坦、頭孢噻肟、頭孢西丁、頭孢匹羅、頭孢泊肟、頭孢泊肟-克拉維酸、頭孢泊月虧-舒巴坦、頭孢丙烯、頭孢喹后、頭孢他啶、頭孢布烯、頭孢噻呋、Ceftobiprole、頭孢曲松、頭孢呋辛、氯霉素、氟苯尼考、環(huán)丙沙星、克拉霉素、克林沙星、克林霉素、氯唑西林、粘菌素、復(fù)方磺胺甲噁唑(甲氧芐啶/磺胺甲噁唑)、達(dá)巴萬(wàn)星(Dalbavancin)、達(dá)福普汀/Quinopristin、達(dá)托霉素、地貝卡星、雙氯西林、多利培南、多西環(huán)素、恩氟沙星、爾他培南(Ert即enem)、紅霉素、氟氯西林、氟康唑、氟胞嘧啶、磷霉素、夫西地酸、加雷沙星、加替沙星、吉米沙星、慶大霉素、亞胺培南、伊曲康唑、卡那霉素、酮康唑、左氧氟沙星、林可霉素、利奈唑胺、氯碳頭孢、美西林(氮卓西林)、美羅培南、雙唑泰栓、美洛西林、美洛西林-舒巴坦、米諾環(huán)素、莫西沙星、莫匹羅星、萘啶酸、新霉素、奈替米星、呋喃妥因、諾氟沙星、氧氟沙星、苯唑西林、培氟沙星、青霉素V、哌拉西林、哌拉西林舒巴坦、哌拉西林-三唑巴坦、利福平、羅紅霉素、司帕沙星、大觀霉素、螺旋霉素、鏈霉素、舒巴坦、磺胺甲噁唑、替考拉寧、特拉萬(wàn)星(Telavancin)、泰利霉素、替莫西林、四環(huán)素、替卡西林、替卡西林_克拉維酸、替加環(huán)素、妥布霉素、甲氧芐啶、曲伐沙星、泰洛星、萬(wàn)古霉素、維吉霉素和伏立康唑?？梢詥为?dú)或組合地?fù)饺敫鶕?jù)本發(fā)明的組合物的抗微生物劑的完整列表顯示在表1。瓊脂中使用的濃度優(yōu)選地與具體藥物的S/R分界點(diǎn)有關(guān)，然而，確定為了特定目的所需的確切濃度在本領(lǐng)域技術(shù)人員能力范圍中。表1.抗菌素、IUPAC編碼和用在瓊脂中的可能濃度的濃度范圍列表。18<table>tableseeoriginaldocumentpage19</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage20</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage23</column></row><table>美洛西林(2&5fi,6R)-3,3-二甲基-6-[[(2R)-2-[(3-甲基磺?；?2-氧代-咪唑烷-1-羰基)氨基]-2-苯基-乙酰基]氨基]-7-氧代-4-硫代-l-氮雜雙環(huán)[3.2.0]庚烷-2-羧酸0.5-512美洛西林-舒巴坦美洛西林(25,5i,6R)-3,3-二甲基"6-[[(2R)-2-[(3-甲基橫?；?2-氧代-咪唑烷-l-羰基)氨基]-2-苯基-乙酰基]氨基]-7-氧代-4~疏代-1-氮雜雙環(huán)[3.2.0]庚烷-2-羧酸舒巴坦:(2K,5i)-3,3-二甲基-4,4,7-三氧代-4X、疏代-l-氮雜雙壞[3.2.0]庚烷-2-羧酸0.5-512米諾環(huán)素2-(氨基-羥基-亞甲基)4,7-雙(二甲基氨基)-10,11,12a-三羥基-4a,5,5a,6-四氬4H-并四苯-1，3,12-三酮(別名7-二甲基氨基-6-去甲基-6-脫氧四環(huán)素)0.1-256莫西沙星1-環(huán)丙基-7-[(1S,6S)-2,8-二氮雜雙壞[4.3.0]壬-8-基]-6-氟-S-甲氧基-4-氧代-喹啉-3-羧酸0.01-32莫匹羅星9-[[(2Z>3-甲基-l-氧代-4^[(2S,3R,4R，5S)-四氫-3，4-二羥基-5-[[(25,33)-3-[(13,23)-2-羥基-1-曱基丙基]-2-環(huán)氧乙坑基]甲基]-2H-吡喃-2-基]-2-丁蜂-1-基]氧]-壬酸0.1-256萘啶酸1國(guó)乙基陽(yáng)7-甲基斗氧代-[],8]萘啶國(guó)3-羧酸4陽(yáng)024新霉素￡23&6&込3(分子量614.644^mo1)0.5-256奈替米星0-3-脫氧-4-C-甲基-3-(甲基氨基)-b-L-吡喃阿拉伯糖基-(l->6)-0-[2,6-二氨基-2,3,4,6-四脫氧-a-D-甘油-己-4-烯吡喃糖基-(1->4)]-2-脫氧-N1-乙基-D-鏈霉胺，Q2辺41&Q7(分子量475.58g/mo1)0.5-512呋喃妥因1-[(5-硝基-2-呋喃基)亞甲基氨基]咪唑烷-2,4-二酮1-1028諾氟沙星l-乙基-6-氟-4-氧代-7-哌喚-l-基-/y-喹啉-3-羧酸0.5-128氡氟沙星(+/-)-9-氟-2,3-二氬-3-甲基-10-(4-甲基-l-哌喚基)-7-氣代-7/7-吡啶并[1，2,3-去]-1,4-苯并噁嗪-6-羧酸0.01-32苯唑西林(2fl,5i,6<S>3,3-二甲基-6-[(5-曱基-3-苯基-1,2-噁唑-豐羰基)氨基]-7-氣代4-好1<代-1-氮雜雙壞[3.2.0]庚烷-2-羧酸0.25-128培氟沙星1-乙基-6-氟-7-(4-甲基派喚-1-基>4-氣代-喹啉-3-羧酸0.01_32青霉素V苯氧甲基青霉素0.1-256p瓜扭西林(2S;5i,6R)-6"[(2/)-2-[(4-乙基-2,3-二氧代-哌喚-l-羰基)氨基]-2-苯基-乙?；鵠氨基}-3:3-二甲基-7-氧代4-硫代-1-氮雜雙環(huán)[3.2.0]庚烷-2-羧酸2-10245^_扭西林-舒巴坦!^i西林(2S;5A,6fi)-6-{[(2R>2-[(4-乙基-2,3-二氧代-哌嗪-1-羰基)氨基]-2-苯基-乙酰基]氨基卜3,3-二甲基-7-氧代-豐疏代-l-氮雜雙環(huán)[3.2.0]庚烷-2-羧酸舒巴坦(2R，5i)-3,3-二甲基-4,4,7-三氧代-4X6-硫代-l-氮雜雙壞[3.2.0]庚烷-2-羧酸2-0249M立西林-三唑巴坦9Mi西林同上；三喳巴坦(2S,3S,5R)-3-甲基-4,4,7-三氡代-3-(三唑-1-基甲基)-4$1^6}-硫代-1-氮雜雙環(huán)[3.2.0]庚烷-2-羧酸2-1024利福平5,6,9,17,19,21-六羥基-23-甲氣基-2,4,12,16,18,20,22-七甲基-8-[W-(4-甲基-l-哌噪基)亞胺曱基]-2,7-(環(huán)氧基十五[1>11,13]三烯亞胺)-萘并[2,1-&]呋喃-1,1(2^>二酮21-乙0.005-12824<table>tableseeoriginaldocumentpage25</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage26</column></row><table>在包括大腸桿菌的所有細(xì)菌，抗菌素耐藥性的流行已經(jīng)增加并且正在繼續(xù)增加，即使在基礎(chǔ)醫(yī)療中，現(xiàn)在變得越來(lái)越需要聯(lián)合尿培養(yǎng)物與敏感性檢驗(yàn)。在最近調(diào)查來(lái)自北美(USA和加拿大)的大腸桿菌的耐藥率的研究中8，收集的1142大腸桿菌中，75.5%(862)從USA收集，280(24.5%)從加拿大收集?？傊?，對(duì)氨芐西林的耐藥性是37.7X，隨后是對(duì)SMX/TMP(21.3X)、呋喃妥因(1.1%)、環(huán)丙沙星(5.5%)和左氧氟沙星(5.1%)的耐藥性。該研究報(bào)告門診患者尿分離物中大腸桿菌的抗菌素耐藥性，US比加拿大人比例更高，并證實(shí)對(duì)抗微生物劑耐藥性的持續(xù)進(jìn)化。在2002-3的歐洲人調(diào)查Eco-Sens研究中9，在一定范圍的歐洲國(guó)家的大腸桿菌確定抗菌素耐藥率。結(jié)果顯示在表2。表2.Eco-Sens研究中歐洲國(guó)家的大腸桿菌的抗微生物劑耐藥性9。國(guó)家抗微生物劑。(耐藥性百分比)AMPAMCMECCFRTMPSULSXTNALCIPNITFOFGEN奧地利12617.52.41.60.89.525.49.52.400.800.8比利時(shí)13730.72.91.50.713.932.814.66.62.90.70.70.7加拿大16629.53.61.21.810.825.312.00.601.20.60.6丹麥8522.41.21.21.210.621.28.23.501.21.20芬蘭8219.84.90.51.65.515.44.91.60.50.51.10.5法國(guó)19927.61.51.51.015.631.715.13.52.01.01.00德國(guó)13829.02.22.21.422.534.821.03.62.20.700.7希臘13222.00.80.83.013.619.711.46.81.53.01.50.8愛爾蘭15444.85.80.60.622.140.320.81.9001.30.6盧森堡2441.700016.725.016.78.34.24.200荷蘭19528.72.61.54.6〗2.325.610.35.]2.11-00.50.5挪威16823.83.602.413.125.011.31.2001.20葡萄牙8645.39.32.32.326.744.226.711.65.85.803.5西班牙19153.94.21.03.125.148.725.726.714.74.20.54.7瑞典19315.55.71.65.28.816.68.32.6000.50瑞士1222702.500.818.93U18.96.62.50.80.83.3英國(guó)18037.22.81.71.713.331.712.22.20.6000共計(jì)247829.83.41.22.114.829.114.15.42.31.20.71.0aAMP，氨節(jié)西林；AMC，復(fù)合阿莫西克拉維；MEC，美西林；CFR，頭孢羥氨節(jié)；TMP，甲氧節(jié)啶；SUL，磺胺甲噁唑；SXT，甲氧節(jié)啶/磺胺甲噁唑；NAL，萘啶酸；CIP，環(huán)丙沙星；NIT，呋喃妥因；F0F，磷霉素；GEN，慶大霉素。如同可以從這些數(shù)據(jù)演繹的，常用抗菌素諸如氨芐西林、磺胺和甲氧芐啶的耐藥率現(xiàn)在如此高(即15-45%)，以致這些藥物不能不經(jīng)敏感性檢驗(yàn)就根據(jù)經(jīng)驗(yàn)使用。在一些國(guó)家仍然覆蓋大多數(shù)尿病原體的有效廣譜藥物氟喹諾酮的使用與耐藥性的發(fā)展直接相關(guān)，這即使在短期的規(guī)模也是有問題的，由于這些藥物在醫(yī)院用于治療嚴(yán)重感染的重要性。由于耐藥率在各地理區(qū)域之間變化，取決于使用根據(jù)本發(fā)明的組合物的目的，不同抗微生物27劑可能是優(yōu)選的。在目前優(yōu)選的實(shí)施方案，根據(jù)本發(fā)明的組合物包含一種或多種抗微生物劑，其中該抗微生物劑/至少一種抗微生物劑選自以下組成的組氨基糖苷類、哌拉西林/三唑巴坦、碳青霉烯類、頭孢菌素類、糖肽類、脂肽類和抗微生物肽(如多霉素或粘菌素)以及這些的組合。在同等優(yōu)選的實(shí)施方案，開發(fā)根據(jù)本發(fā)明的組合物用于在丹麥和斯堪的那維亞國(guó)家診斷尿路感染。這些組合物中一種或多種抗微生物劑優(yōu)選地選自以下組成的組氨芐西林/阿莫西林、磺胺、甲氧芐啶、呋喃妥因、美西林和環(huán)丙沙星(或其它氟喹諾酮)以及這些的組合。為了同樣的目的，優(yōu)選地該抗微生物劑選自以下組成的組甲氧芐啶、磺胺甲二唑、氨芐西林、呋喃妥因和美西林(氮卓西林)以及這些的組合。為了類似的原因，為了在斯堪的那維亞以外的歐洲用于UTI診斷，已經(jīng)開發(fā)了組合物。這些組合物中一種或多種抗微生物劑優(yōu)選地選自以下組成的組阿莫西林、克拉維酸/氨芐西林、舒巴坦、環(huán)丙沙星(或其它氟喹諾酮)、磺胺甲噁唑、甲氧芐啶、頭孢氨芐/頭孢呋辛/頭孢羥氨芐(或其它口服頭孢菌素)、呋喃妥因和磷霉素(磷霉素-trometerole)以及這些的組合。為了在美國(guó)診斷UTI的目的，優(yōu)選選自以下組成的組的一種或多種抗微生物劑阿莫西林、克拉維酸/氨芐西林、舒巴坦、環(huán)丙沙星(或其它氟喹諾酮)、磺胺甲噁唑、甲氧芐啶、頭孢氨芐/頭孢呋辛/頭孢羥氨芐/頭孢克洛(或其它口服頭孢菌素)、呋喃妥因和磷霉素(磷霉素-trometerole)以及這些的組合。尤其應(yīng)理解的是，可單獨(dú)地包括阿莫西林或聯(lián)合克拉維酸。類似地，可單獨(dú)地包括氨芐西林或聯(lián)合舒巴坦，可單獨(dú)使用磺胺甲噁唑或聯(lián)合甲氧芐啶。為了診斷UTI以外的目的，該一種或多種抗微生物劑還可以選自以下組成的組阿莫西林/克拉維酸(或舒巴坦)、苯氧甲基-青霉素、頭孢菌素(如頭孢呋辛酯、頭孢氨節(jié))、環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、氧氟沙星、氟羅沙星、磺胺甲噁唑和甲氧節(jié)啶(任選地組合用于口服治療)、四環(huán)素(多西環(huán)素或任何其它四環(huán)素組)、氯霉素、磷霉素、大環(huán)內(nèi)酯/克林霉素、和利福平以及這些的組合。如果該檢驗(yàn)將在醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室使用，還可以考慮用于靜脈使用的抗菌素，包括選自以下組成的組的抗微生物劑氨基糖苷類、頭孢菌素類(頭孢噻肟、頭孢他啶、頭孢吡肟、頭孢泊肟、頭孢曲松及其它)、哌拉西林/三唑巴坦、碳青霉烯類、頭孢菌素類、糖肽類、脂肽類、利奈唑胺和抗微生物肽(如多霉素或粘菌素)以及這些的組合。選擇培養(yǎng)基的重要添加劑磺胺抑制劑和金屬離子Mg和Ca的變化將影響以氨基糖苷類和四環(huán)素檢驗(yàn)銅綠假單胞菌的結(jié)果。過量鋅離子可以減小碳青霉烯類的區(qū)域大小。過量的陽(yáng)離子含量將減少抗菌素活性，而低的陽(yáng)離子含量可以導(dǎo)致活性增強(qiáng)。Ca和Mg應(yīng)當(dāng)以可溶鹽的形式在半固體培養(yǎng)基中可獲得。培養(yǎng)基的胸苷含量影響對(duì)葡萄球菌的甲氧芐啶和甲氧西林_耐藥性檢驗(yàn)。大多數(shù)瓊脂培養(yǎng)基包含可能影響以培養(yǎng)基中低含量的抗菌素的敏感性檢驗(yàn)結(jié)果的少量磺胺和甲氧芐啶拮抗劑(尤其是如果沒有加入血液)。敏感性檢驗(yàn)培養(yǎng)基應(yīng)包含少于0.03mg/l胸苷，否則在甲氧芐啶瓊脂上會(huì)觀察到小的菌落。如果培養(yǎng)基包含比推薦的略微多的胸苷，可能通過加入胸苷-磷酸化酶來(lái)減少濃度0.025至O.1IU酶/ml培養(yǎng)基或包含相同酶的5%溶血的馬血。在將抗菌素加入半固體培養(yǎng)基之前，溶解抗菌素可能是有益處的。尤其是用于溶解抗微生物劑的溶劑可能包括以下一種或多種水生理鹽水O.85%磷酸鹽緩沖劑，pH6.O，O.lmol/L磷酸鹽緩沖劑，pH8.O，O.lmol/L磷酸鹽緩沖劑，pH7.2，0.01mol/L碳酸氫鈉飽和溶液碳酸氫鈉水溶液O.1%乙醇95%甲醇冰醋酸二甲基甲酰胺(DMF)二甲基亞砜(DMS0)DMS0l/10volDMS0加冰醋酸1/2體積水加數(shù)滴lmol/L氫氧化鈉1/2體積水加數(shù)滴0.lmol/L氫氧化鈉1/2體積水加數(shù)滴2.5mol/L氫氧化鈉氫氯酸0.04mol/L溶于水的聚山梨酯-80(0.002%)半固體培養(yǎng)基中抗微生物劑的穩(wěn)定性可能取決于PH值。pH值必須不超出某些限值，因?yàn)檫@將影響抗微生物劑作用。通過調(diào)整半固體培養(yǎng)基的pH值到6.0，已經(jīng)改進(jìn)了氨芐西林和美西林的穩(wěn)定性。根據(jù)本發(fā)明，該組合物中存在的兩種或多種生色物質(zhì)優(yōu)選地選自以下組成的組5_溴-4-氯-3-吲哚基磷酸酯、5-溴-6-氯-3-吲哚基磷酸酯對(duì)甲苯胺、3，3'-(3，3'-二甲氧基-4，4'-聯(lián)苯亞基)-雙-2-(對(duì)硝基苯基)-5-苯基-2H-氯化四唑、5-溴-4-氯-3-吲哚基_13-D-吡喃型半乳糖苷、5-溴-6-氯-3-吲哚基-13-D-吡喃型半乳糖苷、5-溴-3-吲哚基-P-D-吡喃型半乳糖苷、6-溴-2-萘基-|3-0-吡喃型半乳糖苷、6-氯-3-吲哚基-13-D-吡喃型半乳糖苷、6-溴-3-吲哚基-13-D-吡喃型半乳糖苷、1_甲基-3-吲哚基-13-D-吡喃型半乳糖苷、鄰硝基苯基-13-D-吡喃型半乳糖苷、對(duì)硝基苯基-13-D-吡喃型半乳糖苷、3，4-環(huán)己酮七葉苷-l3-D-半乳糖苷、8-羥基喹啉-l3-D-半乳糖苷、5_溴-4-氯-3-吲哚基-a-D-吡喃型半乳糖苷、5-溴_4_氯_3_吲哚基-P-D-吡喃型葡萄糖苷、5_溴-4-氯-3-吲哚基-13-D-葡萄糖醛酸苷、5-溴-6-氯-3-吲哚基-P-D-葡萄糖醛酸苷、8-羥基喹啉-13-D-葡萄糖醛酸苷、2，2'-連氮基-雙(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)、4-氯-1-萘酚、3，3'-二氨基聯(lián)苯胺四鹽酸鹽、鄰苯二胺、3，3'，5，5'-四甲基聯(lián)苯胺、4-[2-(4-辛?；?3，5-二甲氧基苯基)-乙烯基]-喹啉鎗-1-(丙烷_3-基-羧酸)-溴化物、5_溴-6-氯-3-噴哚基-辛酸酯、和5-溴-4-氯-3-噴哚氧基_肌_肌醇-1-磷酸酯以及這些的組合。如本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解的，以上列出的組分通常以0.001-1.Og/1的量使用。在下表3中，根據(jù)其用作底物的酶列出這些色原<table>tableseeoriginaldocumentpage30</column></row><table>表3.發(fā)色酶底物為了檢測(cè)或診斷尿路感染的目的，所述兩種或多種生色物質(zhì)的至少一種優(yōu)選地選自以下組成的組5-溴-4-氯-3-吲哚基-|3-0-吡喃型半乳糖苷、6-氯-3-吲哚基-13-D-吡喃型半乳糖苷、5_溴-4-氯-3-吲哚基-13-D-吡喃型葡萄糖苷、5_溴-4-氯-3-吲哚基-13-D-葡萄糖醛酸苷、和5-溴-6-氯-3-吲哚基-磷酸酯或這些的組合。該組合物包含2、3、4或5種都選自該組的生色物質(zhì)可以是優(yōu)選的。根據(jù)本發(fā)明的組合物的熒光物質(zhì)可以選自以下組成的組4-甲基傘形基磷酸酯、4_甲基傘形基-e-D-吡喃型半乳糖苷"-甲基傘形基P-D-吡喃型乳糖苷和4-甲基傘形基b-D-葡萄糖醛酸苷或這些的組合。如此前描述的，特定實(shí)施方案中的半固體培養(yǎng)基可能包括色氨酸，諸如L-色氨酸。半固體培養(yǎng)基中存在的L-色氨酸將被表達(dá)色氨酸酶的細(xì)菌降解為吲哚、丙酮酸鹽和氨。變形桿菌屬_摩根氏菌屬_普羅威登斯菌屬的腸細(xì)菌形成來(lái)自L-色氨酸的色素，將菌落周圍的瓊脂染色成微紅的棕色到棕色。屬于變形桿菌屬種群的細(xì)菌奇異變形桿菌(Proteusmirabilis)、普通變形桿菌(P.vulgaris)、彭氏變形桿菌(P.penneri)和產(chǎn)粘變形桿菌(P.myxofaciens)。屬于摩根氏菌屬種群的細(xì)菌摩氏摩根氏菌(Morganellamorganii)。屬于普羅威登斯菌屬種群的細(xì)菌雷氏普羅威登斯菌(Providenciarettgeri)、斯氏普羅威登斯菌(P.stuartii)、產(chǎn)堿普羅威登斯菌(P.alcalifaciens)、拉氏普羅威登斯菌(P.rustigianii)、和亨氏普羅威登斯菌(P.heimbachae)。產(chǎn)生色氨酸脫氨酶的變形桿菌屬、摩根氏菌屬和普羅威登斯菌屬將氨基酸L-色氨酸脫氨基為吲哚丙酮酸和氨。培養(yǎng)基中的吲哚丙酮酸、鐵離子和肼化合物在培養(yǎng)基中產(chǎn)生微紅到棕色的顏色。通過加入紙盤到皮氏培養(yǎng)皿的蓋，可以進(jìn)一步檢測(cè)降解L-色氨酸為吲哚的細(xì)菌。隨著培養(yǎng)期間形成吲哚蒸汽，以Ehrlich-B6hme試劑(溶于乙醇/HCl中的對(duì)二甲基氨基苯甲醛)制備的紙盤將提供紅色。在進(jìn)一步的實(shí)施方案，本發(fā)明的半固體培養(yǎng)基可以包括一種或多種誘導(dǎo)物，誘導(dǎo)物是可能積極地調(diào)節(jié)一種或多種基因表達(dá)的物質(zhì)。誘導(dǎo)在導(dǎo)致物質(zhì)的分解代謝的代謝途徑中是常見的，誘導(dǎo)物通常是該途徑的底物。誘導(dǎo)物的作用對(duì)許多常規(guī)測(cè)定的功能和敏感性可以是關(guān)鍵的。向培養(yǎng)基加入誘導(dǎo)物可增加著色。常用誘導(dǎo)物顯示在下表4:31<table>tableseeoriginaldocumentpage32</column></row><table>表4誘導(dǎo)物如本領(lǐng)域技術(shù)人員將理解的，以上列出的成分通常以0.001-1.Og/1的量使用。根據(jù)本發(fā)明的組合物可以包含3種或更多種生色底物或熒光底物，諸如4種或更多種生色底物或熒光底物、5種或更多種、6種或更多種、7種或更多種、8種或更多種、9種或更多種、或10種或更多種生色底物或熒光底物。尤其是根據(jù)本發(fā)明的組合物可以包含2、3、4、5、6、7、8、9、10或11種生色底物或熒光底物。根據(jù)本發(fā)明的組合物的特殊益處是其高穩(wěn)定性。在優(yōu)選實(shí)施方案，當(dāng)在4t:或更低的溫度儲(chǔ)存時(shí)該組合物穩(wěn)定長(zhǎng)達(dá)12個(gè)月的期間，諸如長(zhǎng)達(dá)11個(gè)月的期間、長(zhǎng)達(dá)11個(gè)月的期間、長(zhǎng)達(dá)9個(gè)月、長(zhǎng)達(dá)8個(gè)月、長(zhǎng)達(dá)7個(gè)月、達(dá)6個(gè)月、長(zhǎng)達(dá)5個(gè)月、長(zhǎng)達(dá)4個(gè)月、長(zhǎng)達(dá)3個(gè)月、長(zhǎng)達(dá)2個(gè)月、或諸如長(zhǎng)達(dá)1個(gè)月的期間。本發(fā)明的進(jìn)一步方面提供用于診斷、檢測(cè)和/或表征微生物感染或污染的平臺(tái)，其包含如上界定的組合物。尤其是，根據(jù)本發(fā)明的平臺(tái)可能包含如上界定的多種組合物，諸如2、3、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、20、50或90種組合物，其中至少2種組合物包含不同的抗微生物劑，諸如其中至少3、至少4、至少5、至少6、至少7、至少8、至少9、至少10、至少11、至少12、至少13、14、15、20、50種組合物包含不同的抗微生物劑或其中每種組合物包含不同的抗微生物劑。在進(jìn)一步的實(shí)施方案，根據(jù)本發(fā)明的平臺(tái)包含以下i)檢驗(yàn)組合物，其包含如上界定的半固體微生物生長(zhǎng)培養(yǎng)基、和兩種或多種生色物質(zhì)或熒光物質(zhì)(或底物)，諸如如上界定的生色物質(zhì)或熒光物質(zhì)(或底物)，以及一種或多種抗菌素，諸如如上界定的一種或多種抗菌素；ii)對(duì)照組合物，其包含如上界定的半固體微生物生長(zhǎng)培養(yǎng)基和如上界定的兩種或多種生色物質(zhì)或熒光物質(zhì)(或底物)，但不包含抗微生物劑，諸如如上界定的抗微生物劑。不包括任何抗微生物劑、或至少不包括以上界定的任何抗微生物劑(即不同于檢驗(yàn)組合物中存在的抗菌素的抗菌素)的對(duì)照組合物可用于確定給定樣品中微生物的數(shù)目以及微生物的物種和/或種群。包括一種或多種抗菌素的檢驗(yàn)組合物可用于確定這些物種和/或種群的微生物對(duì)檢驗(yàn)組合物中存在的任何抗菌素的敏感性。為了方便起見，根據(jù)本發(fā)明的平臺(tái)包含固體支持物，使得容易操縱根據(jù)本發(fā)明的組合物。尤其是，根據(jù)本發(fā)明的平臺(tái)可能基于固體支持物，其中所述固體支持物包括以下i)凹槽(IO)，其能夠作為可能有微生物感染或污染的樣品的容器，所述凹槽被分為兩個(gè)或多個(gè)分開的區(qū)室(11-16)，每個(gè)區(qū)室包含如上界定的檢驗(yàn)組合物或如上界定的對(duì)照組合物，即不包含上述任何抗微生物劑或完全不包含任何抗微生物劑的培養(yǎng)基；和一個(gè)或多個(gè)用于將所述凹槽分隔為所述分開的區(qū)室的一體的分隔組件(17)，或ii)多個(gè)凹槽(18)，每個(gè)凹槽能夠作為可能有微生物感染或污染的樣品的容器，每個(gè)凹槽包含如上界定的檢驗(yàn)組合物或如上界定的對(duì)照組合物。數(shù)字是指圖1中的圖解，圖1是根據(jù)本發(fā)明的平臺(tái)的代表性實(shí)例。根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方案，該平臺(tái)包括包含選自以下組成的組的抗微生物劑的檢驗(yàn)組合物氨芐西林/阿莫西林、磺胺、甲氧芐啶、呋喃妥因、美西林、環(huán)丙沙星(或其它氟喹諾酮)。根據(jù)該實(shí)施方案，該平臺(tái)可能包括包含氨芐西林/阿莫西林的一種檢驗(yàn)組合物、包含磺胺的一種檢驗(yàn)組合物、包含甲氧芐啶的一種檢驗(yàn)組合物、包含呋喃妥因的一種檢驗(yàn)組合物、包含美西林的一種檢驗(yàn)組合物、和/或包含環(huán)丙沙星(或其它氟喹諾酮)的一種檢驗(yàn)組合物。這樣的平臺(tái)對(duì)于在斯堪的那維亞診斷UTI的目的可能是優(yōu)選的。類似地，該平臺(tái)可包括包含甲氧節(jié)啶的一種檢驗(yàn)組合物、包含磺胺甲二唑的一種檢驗(yàn)組合物、包含氨芐西林的一種檢驗(yàn)組合物、包含呋喃妥因的一種檢驗(yàn)組合物和包含美西林(氮卓西林)的一種檢驗(yàn)組合物。為了在非斯堪的那維亞的歐洲國(guó)家診斷UTI的目的，包括含有阿莫西林、克拉維酸/氨芐西林、舒巴坦、環(huán)丙沙星(或其它氟喹諾酮)、磺胺甲噁唑、甲氧芐啶、頭孢氨芐/頭孢呋辛/頭孢羥氨芐(或其它口服頭孢菌素)、呋喃妥因和磷霉素(磷霉素-trometerole)的檢驗(yàn)組合物的平臺(tái)可以是優(yōu)選的。最后，為了在北美/美國(guó)診斷UTI的目的，包括含有阿莫西林、克拉維酸/氨芐西林、舒巴坦、環(huán)丙沙星(或其它氟喹諾酮)、磺胺甲噁唑、甲氧芐啶、頭孢氨芐/頭孢呋辛/頭孢羥氨芐/頭孢克洛(或其它口服頭孢菌素)、呋喃妥因和磷霉素(磷霉素-trometerole)的檢驗(yàn)組合物的平臺(tái)可以是優(yōu)選的。為了服務(wù)于其目的，平臺(tái)的凹槽或所述多個(gè)凹槽必須具有足夠大以容納合適體積樣品的容積。在特定實(shí)施方案，該凹槽或所述多個(gè)凹槽具有從l-40mm，諸如從l-35mm、從l-30mm、從l-25mm、從5-40mm、從5-35mm、從5-30mm、從5-25mm、從10-40mm、從10-35mm、從3310-30mm、從10-25mm、從15-40mm、從15-35mm、從15_30mm或諸如從25_25mm的深度。對(duì)于尿路感染以及許多其它感染，考慮到一般實(shí)踐中診斷的使用，施用特殊的策略。全科醫(yī)生(GP)治療經(jīng)歷UTI的大多數(shù)患者，治療UTI的抗菌素消耗達(dá)到醫(yī)院之外抗菌素使用總量的約25%—且因?yàn)槲鞣缴鐣?huì)中使用的抗菌素總量的90X是在社區(qū)使用，UTI的抗菌素使用是可觀的。對(duì)于患者，有充足證據(jù)說明盡可能早地接受包括細(xì)菌敏感性的正確診斷是有益的。因此GP在診所進(jìn)行UTI診斷有很多好的原因通過減少向遠(yuǎn)處、中心實(shí)驗(yàn)室運(yùn)輸?shù)臅r(shí)間，并避免運(yùn)輸對(duì)培養(yǎng)物質(zhì)量的影響，它縮短了治療的時(shí)間。由于GP對(duì)微生物學(xué)的經(jīng)驗(yàn)很少，培養(yǎng)方法應(yīng)容易接種和讀取，敏感性檢驗(yàn)應(yīng)當(dāng)獨(dú)立于接種物并也容易讀取，即GP或其助手幾乎沒有時(shí)間來(lái)測(cè)量抑制區(qū)并將其解讀到敏感性組。同時(shí)，如果需要更精密的細(xì)菌診斷檢查，培養(yǎng)系統(tǒng)應(yīng)當(dāng)容易轉(zhuǎn)移到實(shí)驗(yàn)室。其它重要因素該檢驗(yàn)應(yīng)能夠測(cè)量和讀取低至103CFU/ml的計(jì)數(shù)，并應(yīng)能夠區(qū)分病原體和污染物。所有這些因素包括在根據(jù)本發(fā)明的平臺(tái)中。為了滿足這些需求，根據(jù)本發(fā)明的平臺(tái)優(yōu)選地具有帶有檢驗(yàn)組合物的區(qū)室，每個(gè)區(qū)室具有從4-9cm2、諸如從5-8cm2、從6.5_7.5cm2的面積。類似地，優(yōu)選地帶有對(duì)照組合物的一個(gè)或多個(gè)區(qū)室具有從15-25cm2、諸如從17-23cm2、或從19.5-21.5cm2的面積。目前最優(yōu)選版本的平臺(tái)具有帶有檢驗(yàn)組合物的凹槽或區(qū)室，其具有6.93cm2的面積和6.24cm3的容積，并具有帶有對(duì)照組合物的區(qū)室或凹槽，其具有20.78cm2的面積和18.7cm3的容積。這一具體設(shè)計(jì)適于用在檢測(cè)、診斷和/表征尿路感染中，基于經(jīng)驗(yàn)如果平臺(tái)將用于檢測(cè)包括尿路感染的微生物感染，其中微生物/細(xì)菌以103cfu/ml樣品/尿的量存在，這些面積和容積是足夠的。所述檢驗(yàn)組合物和對(duì)照組合物可能以對(duì)應(yīng)凹槽或區(qū)室容積的從5-75%的量，諸如從10-75%、從10-65%、從10-55%、從10-45%、從10-35%、從20-75%、從20-65%、從20-55%、從20-45%、從20-35%、諸如從25-75%、從25-65%、從25-55%、從25-45%、從25-35%、或諸如以對(duì)應(yīng)凹槽或區(qū)室容積的從25-35%的量在各自凹槽或區(qū)室中存在。根據(jù)某些實(shí)施方案，在根據(jù)本發(fā)明的平臺(tái)中所述凹槽可能被分隔為3個(gè)或更多個(gè)區(qū)室，諸如4個(gè)或更多個(gè)、5個(gè)或更多個(gè)、6個(gè)或更多個(gè)、7個(gè)或更多個(gè)、8個(gè)或更多個(gè)、9個(gè)或更多個(gè)、10個(gè)或更多個(gè)、15個(gè)或更多個(gè)、20個(gè)或更多個(gè)、40個(gè)或更多個(gè)、60個(gè)或更多個(gè)、或90個(gè)或更多個(gè)區(qū)室。進(jìn)一步地，根據(jù)本發(fā)明的平臺(tái)可能具有3個(gè)或更多個(gè)凹槽，諸如4個(gè)或更多個(gè)、5個(gè)或更多個(gè)、6個(gè)或更多個(gè)、7個(gè)或更多個(gè)、8個(gè)或更多個(gè)、9個(gè)或更多個(gè)、10個(gè)或更多個(gè)、15個(gè)或更多個(gè)、20個(gè)或更多個(gè)、40個(gè)或更多個(gè)、60個(gè)或更多個(gè)、或90個(gè)或更多個(gè)凹槽。根據(jù)某些有希望的實(shí)施方案，根據(jù)本發(fā)明的平臺(tái)包括用于將所述凹槽分隔為分開的區(qū)室的分隔組件，其中所述分隔組件已被處理以防止抗微生物劑在區(qū)室之間擴(kuò)散。預(yù)料當(dāng)將根據(jù)本發(fā)明的組合物倒入平臺(tái)的凹槽或孔時(shí)，如果沒有特別小心，組合物中存在的表面張力導(dǎo)致抗微生物劑在區(qū)室之間擴(kuò)散。為了避免這樣，所述一個(gè)或多個(gè)分隔組件可被磨光以具有平滑表面。其它用于減少表面張力和抗微生物劑擴(kuò)散的手段包括向根據(jù)本發(fā)明的組合物加入去垢劑諸如吐溫。盡管可能涵蓋許多可用的設(shè)計(jì)，所述固體支持物優(yōu)選地是以封閉或開放容器的形式，諸如盤、試管、瓶、多孔板、微量滴定板、條(stick)(浸漬條)或載玻片。該固體支持物可以尤其是從塑料/聚合物基質(zhì)、從玻璃基質(zhì)或從金屬基質(zhì)制造的，所述塑料/聚合物基質(zhì)諸如聚氯乙烯基質(zhì)、聚乙烯基質(zhì)、聚丙烯基質(zhì)、聚碳酸酯基質(zhì)、丙烯腈丁二烯苯乙烯基質(zhì)、聚甲基丙烯酸甲酯基質(zhì)或聚苯乙烯基質(zhì)。根據(jù)目前優(yōu)選的實(shí)施方案，根據(jù)本發(fā)明的平臺(tái)包含固體支持物，其是以皮氏培養(yǎng)皿的形式，諸如具有從50至150mm、從60-130mm、從70-110mm、或從80-100mm的直徑的皮氏培養(yǎng)皿。根據(jù)一個(gè)具體實(shí)施方案，該支持物是以90mm皮氏培養(yǎng)皿的形式。本發(fā)明的平臺(tái)可適于用于尤其是檢測(cè)和/或診斷選自以下組成的組的感染尿路感染、皮膚和軟組織感染、金黃色葡萄球菌(包括耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌)感染、腦膜炎球菌感染、淋球菌感染和鏈球菌感染。其它檢驗(yàn)可以并入該平臺(tái)，例如粘貼到覆蓋所述支持物的蓋子的內(nèi)表面，粘貼到支持物內(nèi)側(cè)或粘貼到支持物中間部分上，例如所述分隔組件接合的部分。為了在這樣的檢驗(yàn)中使用，該平臺(tái)可包括酶，諸如白細(xì)胞酯酶。當(dāng)并入該平臺(tái)時(shí)，白細(xì)胞酯酶使得能夠相伴地診斷白細(xì)胞尿(也可對(duì)亞硝酸鹽檢驗(yàn)進(jìn)行)。據(jù)此，酶可包含在所述支持物的分開的或一體的組件中。例如如此前描述的，可進(jìn)一步檢測(cè)降解L-色氨酸為吲哚的細(xì)菌，通過向皮氏培養(yǎng)皿的蓋加入紙盤。隨著培養(yǎng)期間形成吲哚蒸汽，以Ehrlich-B6hme試劑(溶于乙醇/HC1中的對(duì)二甲基氨基苯甲醛)制備的紙盤將提供紅色。本發(fā)明的另一方面提供包含如上所述組合物的試劑盒。相關(guān)方面提供包含如上所述平臺(tái)的試劑盒。這種試劑盒可尤其用于診斷、檢測(cè)和/或表征微生物感染或污染。根據(jù)任一方面，該試劑盒可進(jìn)一步包含顯示在如上界定的平臺(tái)上生長(zhǎng)量的標(biāo)準(zhǔn)，所述標(biāo)準(zhǔn)是將所述平臺(tái)與具有預(yù)先確定滴度的微生物參考菌株的懸液接觸獲得的。代表性標(biāo)準(zhǔn)在本申請(qǐng)的圖3闡釋。該試劑盒還可包含顯示在如上界定的平臺(tái)上生化色素和/或熒光顯色的標(biāo)準(zhǔn)，所述標(biāo)準(zhǔn)是在一種或多種微生物參考菌株平臺(tái)上生長(zhǎng)獲得的。代表性標(biāo)準(zhǔn)在本申請(qǐng)的圖4闡釋。為了方便起見，該標(biāo)準(zhǔn)優(yōu)選地是如上界定的平臺(tái)的照相或印刷復(fù)制。根據(jù)特定實(shí)施方案，通過將根據(jù)本發(fā)明的平臺(tái)與大腸桿菌細(xì)菌的參考菌株諸如大腸桿菌(ATCC29522)細(xì)菌、和/或金黃色葡萄球菌的參考菌株諸如金黃色葡萄球菌ATCC25913接觸產(chǎn)生顯示平臺(tái)上生長(zhǎng)量的所述標(biāo)準(zhǔn)。根據(jù)進(jìn)一步特定實(shí)施方案，已經(jīng)通過將根據(jù)本發(fā)明的平臺(tái)與選自以下組成的組的一種或多種參考菌株接觸而產(chǎn)生顯示平臺(tái)上生化色素和/或熒光的顯現(xiàn)的所述標(biāo)準(zhǔn)大腸桿菌，諸如大腸桿菌菌株ATCC25922、肺炎克雷伯氏菌(K.pneumoniae)，諸如肺炎克雷伯氏菌菌株ATCC10031、陰溝腸桿菌(E.cloacae)諸如陰溝腸桿菌菌株ATCC13047、奇異變形桿菌諸如奇異變形桿菌菌株ATCC12453、普通變形桿菌諸如普通變形桿菌菌株ATCC13315、摩氏摩根氏菌諸如ATCC25830、弗氏擰檬酸細(xì)菌(C.freundii)諸如弗氏檸檬酸細(xì)菌菌株8090、銅綠假單胞菌諸如銅綠假單胞菌菌株ATCC27853、糞腸球菌(E.faecalis)諸如糞腸球菌菌株ATCC29212、屎腸球菌(Efaecium)諸如屎腸球菌菌株ATCC35667、腐生性葡萄球菌諸如腐生性葡萄球菌菌株49907、白色念珠菌(C.albicans)諸如白色念珠菌菌株ATCC200955?？捎糜诒景l(fā)明上下文的標(biāo)準(zhǔn)顯示在圖4。顯示生長(zhǎng)量的標(biāo)準(zhǔn)可由包括以下的方法產(chǎn)生i)提供密度為0.9%鹽水中0.5McFarland/l+E08CFU/mL所述一種或多種參考菌株的懸液；ii)提供i)中所述懸液的一系列10倍稀釋液，最低密度為+E03CFU/mL;iii)將ii)中的每種所述稀釋液與根據(jù)本發(fā)明的平臺(tái)接觸2-3秒，隨后輕輕倒出所述溶液；iv)在35t:在環(huán)境大氣培養(yǎng)每個(gè)平臺(tái)過夜。根據(jù)進(jìn)一步的實(shí)施方案，該試劑盒包含一種或多種分別包裝的抗微生物劑。這樣一種或多種抗菌素可被包括以由使用者實(shí)地加入平臺(tái)的一個(gè)或多個(gè)區(qū)室。根據(jù)目前優(yōu)選的實(shí)施方案，根據(jù)本發(fā)明的試劑盒是用于醫(yī)療點(diǎn)(point-of-care)診斷和檢驗(yàn)?zāi)虻啦≡w的敏感性的試劑盒。試劑盒開發(fā)為用于基礎(chǔ)衛(wèi)生醫(yī)療環(huán)境中的尿培養(yǎng)物。優(yōu)選地將其設(shè)計(jì)為分為六個(gè)區(qū)室的9cm皮氏培養(yǎng)皿所述六個(gè)區(qū)室為定量分析的一個(gè)較大區(qū)室和用于敏感性檢驗(yàn)的五個(gè)較小區(qū)室。每個(gè)小區(qū)室中的瓊脂包含以調(diào)整到分界點(diǎn)的濃度的五種抗微生物劑之一(對(duì)于丹麥和斯堪的那維亞優(yōu)選地是甲氧芐啶、磺胺甲二唑、氨芐西林、呋喃妥因和美西林(氮卓西林))，以使這些區(qū)室中的生長(zhǎng)表示耐藥性，不生長(zhǎng)表示敏感性。皮氏培養(yǎng)皿優(yōu)選地具有比通常培養(yǎng)皿即大約1.48cm更高的邊緣，大約2.48cm。這允許將更大量、最多100ml的尿倒入培養(yǎng)皿用于接種。平板中的瓊脂優(yōu)選地包括以下生色物質(zhì)，Isosensitest瓊月旨，五個(gè)區(qū)室的瓊脂中混雜的抗菌素磺胺甲二唑甲氧芐啶氨節(jié)西林呋喃妥因美西林該實(shí)施方案的闡釋見于圖2。通過將尿(5-10ml足夠)傾倒在平板上并用一只手轉(zhuǎn)動(dòng)平板以使液體覆蓋所有力個(gè)區(qū)域而發(fā)生接種。此后倒掉尿；尿存在2-3秒足夠接種。立即培養(yǎng)平板，優(yōu)選地在35-37°C培養(yǎng)18-24h(室溫對(duì)于大多數(shù)尿病原體是足夠的，但生長(zhǎng)較慢)。對(duì)平板的讀取分為三個(gè)階段1)評(píng)價(jià)生長(zhǎng)量如果存在任何生長(zhǎng)，將其與顯示以103、104、105、106和107CFU/ml的大腸桿菌的不同CFU量的圖片方案比較。2)通過再次與顯示不同類型尿病原體的圖片/顏色方案比較可以立刻評(píng)價(jià)生長(zhǎng)類型。還記錄不同菌落類型的數(shù)目，和根據(jù)以上方案的不同菌落類型的量。可以由顏色和菌落類型來(lái)區(qū)分細(xì)菌科/物種，如表5說明的表5:Flexicult平板上不同尿病原體的菌落和瓊脂的顏色編碼36<table>tableseeoriginaldocumentpage37</column></row><table>3)讀取細(xì)菌生長(zhǎng)的敏感性單獨(dú)讀取每種細(xì)菌(如果多于一種)將每種抗菌素區(qū)域中的生長(zhǎng)與對(duì)照瓊脂上的生長(zhǎng)比較。如果抗菌素瓊脂上有任何生長(zhǎng)，且生長(zhǎng)量與對(duì)照瓊脂上的相似，那么認(rèn)為該細(xì)菌對(duì)瓊脂上的抗菌素耐藥。如果沒有生長(zhǎng)(或顯著地少于對(duì)照瓊脂)，那么認(rèn)為該細(xì)菌對(duì)該抗菌素敏感。如果生長(zhǎng)是多于不生長(zhǎng)和少于顯著少的生長(zhǎng)，則需要考慮是哪種抗菌素和哪種細(xì)菌對(duì)于是抑菌藥的磺胺甲二唑和甲氧芐啶，稀疏的微小菌落可能覆蓋整個(gè)瓊脂，但生長(zhǎng)與對(duì)照瓊脂相比顯著減少這記錄為對(duì)所討論的抗菌素敏感。當(dāng)呋喃妥因和美西林用作抗菌素時(shí)，可觀察到與對(duì)照瓊脂上細(xì)菌相同類型的一些單菌落這些不認(rèn)為是耐藥性突變體而是"耐藥株"，即如果重復(fù)測(cè)試它們將表現(xiàn)為敏感。這還通常因?yàn)楸P擴(kuò)散而觀察到，尤其對(duì)于美西林。4)不同細(xì)菌的敏感性/耐藥性還可用于診斷不同致病物種，因?yàn)橐恍┘?xì)菌"天生"對(duì)一些抗菌素耐藥；即它們固有地對(duì)一種或多種抗菌素耐藥，相反耐藥性細(xì)菌是因?yàn)楸┞队诳咕囟@得的。這些耐藥性-"模式"可見于表6。表6:常見尿病原體的正常敏感性/耐藥性。大多數(shù)細(xì)菌可以通過突變或轉(zhuǎn)移含有耐藥性機(jī)制的基因而變得對(duì)所討論的抗菌素有耐藥性<table>tableseeoriginaldocumentpage38</column></row><table>樣品、動(dòng)物飼料樣品和微生物(如細(xì)菌)純培養(yǎng)物。在優(yōu)選實(shí)施方案，尤其是關(guān)于診斷、檢測(cè)和/或表征尿路感染的實(shí)施方案，該樣品是尿樣。如此提供的方法可進(jìn)一步包括優(yōu)選地在15-39t:的溫度，且優(yōu)選地在環(huán)境大氣下培養(yǎng)所述平臺(tái)10小時(shí)或更久，諸如11小時(shí)或更久、12小時(shí)或更久、13小時(shí)或更久、14小時(shí)或更久、15小時(shí)或更久、16小時(shí)或更久、17小時(shí)或更久、或18小時(shí)或更久的時(shí)期步驟。該方法可進(jìn)一步以包括目視檢查平臺(tái)的微生物生長(zhǎng)的步驟為特征。這一目視檢查組合物的微生物生長(zhǎng)的步驟可尤其包括i)評(píng)價(jià)所述對(duì)照組合物上任何微生物生長(zhǎng)的量，任選地通過參考顯示不同量的菌落形成單位的標(biāo)準(zhǔn)；并ii)評(píng)價(jià)包含所述半固體生長(zhǎng)培養(yǎng)基和所述兩種或多種生色物質(zhì)或熒光物質(zhì)(或底物)，但不包含任何抗微生物劑/不同于檢驗(yàn)組合物中存在的抗微生物劑的抗微生物劑的所述對(duì)照組合物上任何微生物生長(zhǎng)的類型，任選地通過參考顯示微生物不同種群或不同菌株生長(zhǎng)的標(biāo)準(zhǔn)(諸如圖片和/或顏色方案)；并iii)通過比較所述檢驗(yàn)組合物(諸如兩種或更多種、3種或更多種、4、5、6、7、8、9、10、11、12、13、14、15、20、30、50或90種或更多種檢驗(yàn)組合物)上的生長(zhǎng)量與所述對(duì)照組合物上的生長(zhǎng)量來(lái)確定所述微生物生長(zhǎng)的抗微生物劑敏感性。顯示不同量的菌落形成單位的合適的標(biāo)準(zhǔn)和顯示微生物不同種群或不同菌株生長(zhǎng)的標(biāo)準(zhǔn)如上所述。目視檢查組合物的微生物生長(zhǎng)的步驟可進(jìn)一步包括確定如此前界定的所述檢驗(yàn)組合物(諸如兩種或更多種、3種或更多種、4種或更多種、5種或更多種、6種或更多種、或7種或更多種組合物)上或所述對(duì)照組合物上不同菌落類型的數(shù)目和任選地每種類型的菌落的量。該方法可進(jìn)一步包括確定所述樣品中的微生物是否對(duì)所述檢驗(yàn)組合物中的抗微生物劑敏感，存在的敏感性由以下表示i)在所述檢驗(yàn)組合物上或在一種或多種所述檢驗(yàn)組合物上不存在微生物生長(zhǎng)，而在所述對(duì)照組合物上存在微生物生長(zhǎng)，或ii)在所述檢驗(yàn)組合物上或在一種或多種所述檢驗(yàn)組合物上以及所述對(duì)照組合物上存在微生物生長(zhǎng)，在所述檢驗(yàn)組合物上或在一種或多種所述檢驗(yàn)組合物上的菌落數(shù)目或面積比所述對(duì)照組合物上的數(shù)目或面積小至少100倍。在進(jìn)一步的方面，本發(fā)明提供制造根據(jù)本發(fā)明的組合物的方法，包括組合半固體微生物生長(zhǎng)培養(yǎng)基、兩種或多種生色物質(zhì)或熒光物質(zhì)(或底物)和抗微生物劑的步驟。類似地本發(fā)明公開制造根據(jù)本發(fā)明的平臺(tái)的方法，包括組合半固體微生物生長(zhǎng)培養(yǎng)基、兩種或多種生色物質(zhì)或熒光物質(zhì)(或底物)和抗微生物劑的步驟。最后本發(fā)明提供制造根據(jù)本發(fā)明的診斷試劑盒的方法，包括組合半固體微生物生長(zhǎng)培養(yǎng)基、兩種或多種生色物質(zhì)或熒光物質(zhì)(或底物)和抗微生物劑的步驟。應(yīng)注意的是，在本發(fā)明多個(gè)方面的一個(gè)方面上下文中描述的實(shí)施方案和特征也適用于本發(fā)明的其它方面。本申請(qǐng)中引用的所有專利和非專利參考文獻(xiàn)通過引用其全文并入本文。在以下非限制性實(shí)施例，現(xiàn)在將進(jìn)一步詳細(xì)地描述本發(fā)明。實(shí)施例實(shí)施例1:基于6-區(qū)室皮氏培養(yǎng)皿(Flexicult)制備平臺(tái)制備Iso-sensitest瓊脂并將其與包含5_溴_4_氯_3_吲哚基_|3_D_吡喃型半乳糖苷、6_氯-3-吲哚基-13-D-吡喃型半乳糖苷、5-溴-4-氯-3-吲哚基-13-D-吡喃型葡萄糖苷、5_溴-4-氯-3-吲哚基-13-D-葡萄糖醛酸苷、5-溴-6-氯-3-吲哚基-磷酸酯的1.5g/l生色底物混合物組合?？蛇x地使用Discovery瓊月旨(Oxoid，CM1087)。制備抗菌素溶液甲氧芐啶、磺胺甲噻二唑、氨芐西林、呋喃妥因和美西林。制備熱平板，由PT-100傳感器調(diào)節(jié)溫度1.將裝有Iso-sensitest/Discovery瓊脂的瓶在105。C融化60min。融化后，將瓶放置在56t:水浴大約60min。2.準(zhǔn)備填充Flexicult的設(shè)備Variomag(MultithermStirringBlock恒溫器禾口Telemodul40CT互連，然后連接到插座。Telemodul40CT是控制溫度和加熱塊的攪拌速度的部件。借助PT-100傳感器調(diào)節(jié)溫度，該傳感器安裝在Telemodul40CT背面。3.從水浴取出裝有Iso-sensitest/Discovery瓊脂的瓶并放置在MultithermStirringBlock上；每個(gè)瓶備有無(wú)菌磁鐵。4.PT-100傳感器的纜線安裝在Telemodul40CT背面，烤焦接觸點(diǎn)，隨后以外科用酒精潤(rùn)濕的無(wú)菌布徹底地擦拭。隨后將接觸點(diǎn)放在裝有美西林的燒瓶中。Telemodul40CT立刻調(diào)節(jié)瓊脂中的溫度到所需的設(shè)定點(diǎn)大約50.(TC士2.(TC。磁力攪拌器的速率隨著燒瓶的內(nèi)容物調(diào)整(起始)235/min。準(zhǔn)備分液器準(zhǔn)備分液器(Fill-Master251和Fill-Master311)。向Fill-Master251連接一個(gè)4mm無(wú)菌硅膠管，向Fill-Master311連接五個(gè)2mm無(wú)菌硅膠管。將各分液器設(shè)置在正確的管大小(分別是2mm和4mm)。設(shè)置填充體積以使填充的體積+培養(yǎng)皿的重量在31_33g的范圍中。經(jīng)常檢查它。加入抗菌素溶液注意直到溫度低于54.0。C，才應(yīng)將5種抗菌素溶液加入瓊脂。由TelemodulCT40的顯示，檢查瓊脂的溫度。甲氧節(jié)啶(16iig/mL):用有刻度的移液管將甲氧芐啶母液加入到Iso-sensitest/Discovery瓊脂。在Multitherm熱平板上徹底混合溶液。將吸管放入瓶中并與合適的填充針頭連接?；前芳奏缍?700iig/mL):用有刻度的移液管將磺胺甲噻二唑母液加入到Iso-sensitest/Discovery瓊脂。在Multitherm熱平板上徹底混合溶液。將吸管放入瓶中并與合適的填充針頭連接。氨節(jié)西林(32iig/mL):40用有刻度的移液管將氨芐西林母液加入到Iso-sensitest/Discovery瓊脂。在Multitherm熱平板上徹底混合溶液。將吸管放入瓶中并與合適的填充針頭連接。呋喃妥因(32iig/mL):用有刻度的移液管將呋喃妥因母液加入到Iso-sensitest/Discovery瓊脂。在Multitherm熱平板上徹底混合溶液。將吸管放入瓶中并與合適的填充針頭連接。美西林(16ug/mL):用有刻度的移液管將美西林母液加入到Iso-sensitest/Discovery瓊脂。在Multitherm熱平板上徹底混合溶液。將吸管放入瓶中并與合適的填充針頭連接。無(wú)抗菌素的Iso_sensitest/Discovery瓊月旨將吸管放入瓶中并與合適的填充針頭連接。填充皮氏培養(yǎng)皿中的6個(gè)部分將6個(gè)填充針頭放入分液器頭，確保劑量與圖2符合。實(shí)施例2:穩(wěn)定性檢驗(yàn)Flexicult中發(fā)色瓊脂的穩(wěn)定性通過檢驗(yàn)在冰箱(<4°C)中保存達(dá)4個(gè)月的Flexicult瓊脂來(lái)確定，并在產(chǎn)生表2中提到的所有細(xì)菌的臨床菌株1、2、3和4個(gè)月后檢驗(yàn)了生長(zhǎng)狀況(量、菌落大小、菌落和瓊脂的顏色)，產(chǎn)生后長(zhǎng)達(dá)4個(gè)月(與產(chǎn)生后第l天出現(xiàn)的)觀察到關(guān)于以下相同結(jié)果瓊脂穩(wěn)定性(水含量/干燥、形式)細(xì)菌菌落的顯色對(duì)抗菌素(磺胺甲二唑、甲氧芐啶、氨芐西林、呋喃妥因和美西林的敏感性/耐藥性。實(shí)施例3:臨床驗(yàn)證已在兩個(gè)GP診所檢驗(yàn)了Flexicult瓊脂試劑盒。兩個(gè)診所都有9-10位GP在診所工作，并由臨床生化技師員工進(jìn)行常規(guī)尿培養(yǎng)(由浸片或瓊脂平板，隨后在某些病例進(jìn)行抗菌素盤擴(kuò)散敏感性)。對(duì)于該研究，將Flexicult平板接種來(lái)自基于病史和癥狀懷疑患有UTI的患者的尿，并對(duì)每個(gè)診所的常規(guī)培養(yǎng)系統(tǒng)平行地進(jìn)行。在35-37t:的環(huán)境大氣中培養(yǎng)平板18-24h(在周五進(jìn)行的檢驗(yàn)，在周六不能讀取而未包括)。由技師讀取平板并記錄結(jié)果(通過使用來(lái)自StatensSerumInstitut的平板一起提供的材料顯示Flexicult平板上細(xì)菌量的圖片方案，參見圖3，和顯示尿病原體不同菌落類型的圖片方案，參見圖4)。此后將平板轉(zhuǎn)移到國(guó)家抗微生物劑和感染控制中心、StatensSerumInstitut，在這里再次讀取平板，將來(lái)自具有一種或兩種可能的尿病原體相關(guān)生長(zhǎng)的平板的菌落處理用于根據(jù)實(shí)驗(yàn)室常規(guī)使用API-20E、Vitec或生化檢驗(yàn)的診斷。進(jìn)一步地，通過在Mueller-Hinton瓊脂中的瓊脂稀釋物根據(jù)CSLI(以前稱為NCCLS)確定對(duì)于所有相關(guān)細(xì)菌，針對(duì)磺胺甲二唑、甲氧芐啶、氨芐西林、呋喃妥因和美西林的MIC。MS:細(xì)菌的診斷記錄在表7，顯示試驗(yàn)性和實(shí)際的診斷、以及正確診斷的百分比(在種群水平或物種水平)。表7.臨床驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果，檢驗(yàn)讀數(shù)的試驗(yàn)性診斷相比于隨后細(xì)菌的最終診斷。<table>tableseeoriginaldocumentpage42</column></row><table>關(guān)于敏感性的確定，即比較細(xì)菌的測(cè)量的MIC與檢驗(yàn)的讀數(shù)，表7和8顯示表8中革蘭氏陰性細(xì)菌和表9中革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌的結(jié)果。根據(jù)如下分析了結(jié)果結(jié)果的讀數(shù)和報(bào)告是否可被分為皿(即對(duì)I是S、對(duì)R是1、對(duì)I是R、或?qū)是I的結(jié)果)、大的錯(cuò)誤(即記錄為R，但實(shí)際上是S，這表示患者可能被用另一種藥物治療)和非常大的錯(cuò)誤(即報(bào)告為S但實(shí)際上是R，這可能帶有使得患者被用不具有作用的抗菌素治療的風(fēng)險(xiǎn))。表8:Flexicult瓊脂上生長(zhǎng)的革蘭氏陰性細(xì)菌的敏感性/耐藥性的讀數(shù)結(jié)果，相比于隨后由瓊脂-稀釋物確定的MIC。數(shù)字表示記錄的結(jié)果的菌株數(shù)目(總數(shù)的％)。<table>tableseeoriginaldocumentpage43</column></row><table>表9:Flexicult瓊脂上生長(zhǎng)的革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌的敏感性/耐藥性的讀數(shù)結(jié)果，相比于隨后由瓊脂-稀釋物確定的MIC。數(shù)字表示記錄的結(jié)果的菌株數(shù)目(總數(shù)的％)。<table>tableseeoriginaldocumentpage43</column></row><table>臨床驗(yàn)證的結(jié)論:結(jié)果顯示Flexicult關(guān)于在尿病原體種群或物種水平的診斷的高度準(zhǔn)確性。而且，并入Flexicult檢驗(yàn)的敏感性檢驗(yàn)的結(jié)果與盤_擴(kuò)散檢驗(yàn)相當(dāng)，具有<5%的非常大的錯(cuò)誤。當(dāng)然，檢驗(yàn)可用于診斷患者的UTI，通過發(fā)現(xiàn)在所有相關(guān)計(jì)數(shù)的細(xì)菌的量以診斷尿病原體(多達(dá)約90%的病原體被正確地診斷到種群或物種水平)。對(duì)此前患有過UTI的患者的再檢驗(yàn)將幫助顯示是否存在相同或新類型的病原體，即在某些程度上將可能區(qū)分復(fù)發(fā)或新感染。當(dāng)包括所討論的分離株的敏感性時(shí)，通過觀察發(fā)現(xiàn)的分離株的"resisto-型"，這可以幫助診斷可能的復(fù)發(fā)/再感染。實(shí)施例4:基礎(chǔ)醫(yī)療中Flexicult相比于其它診斷方法。比較Flexicult與一般實(shí)踐中用于診斷的其它可獲得的方法和尿病原體的敏感性檢驗(yàn):對(duì)基礎(chǔ)醫(yī)療中UTI不同診斷檢驗(yàn)的比較。檢驗(yàn)水平可能的診斷病原體直接檢驗(yàn)評(píng)論CFU/ml和敏感性結(jié)果的診斷敏感性的速度鏡檢術(shù)浸片105浸漬片105(亞石肖酸鹽/白細(xì)月包)瓊脂平板，隨后盤擴(kuò)散取決于環(huán)Flexicult103NA*NA3天3天2天NANANA是NANA是的，一些浸片NA使用發(fā)色瓊脂NA是敏感性檢驗(yàn)的PPV差氺NA，不適用參考文獻(xiàn)(l)LauplandKB等人.Infection,2007，35:150-3.(2)KassEHAnnInternMed.1962,56:46—53.(3)StammWE等人NEnglJMed1982,307(8):463-468.(4)Frimodt-M0llerN等人.UgeskrLaeger1989，151:3062-4(5)Frimodt誦M0llerN等人APMIS2000，108:525-30.(6)MabeckCE.PostgraduateMedicalJournal1972，48:69_75.(7)FerryS等人ScandJPrimHealthCare1989，7:123-128(8)ZhanelGG等人.IntJAntimicrobAgents.2006,27:468-75.(9)KahlmeterG等人.JAntimicrobChemother.2003,51:69-76.4權(quán)利要求一種組合物，其包含半固體微生物生長(zhǎng)培養(yǎng)基、兩種或多種生色物質(zhì)或熒光物質(zhì)(或底物)和抗微生物劑。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的組合物，其中所述半固體生長(zhǎng)培養(yǎng)基包含色氨酸。3.根據(jù)前述權(quán)利要求的任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述半固體微生物生長(zhǎng)培養(yǎng)基是這樣一種培養(yǎng)基，在其上i)加入16mg/l氨芐西林導(dǎo)致由參考菌株大腸桿菌(Escherichiacoli)ATCC25922形成的菌落的生長(zhǎng)或菌落的數(shù)目減少至少51ogCFU/ml，如將該組合物與包含105CFU/ml的懸液接觸并在37t:和環(huán)境大氣培養(yǎng)該組合物18-24小時(shí)后確定的；ii)加入32mg/l呋喃妥因?qū)е掠蓞⒖季旮?s即rophytics)ATCC49907形成的菌落的生長(zhǎng)或菌落的數(shù)目減少至少41ogCFU/ml，如將該組合物與包含105CFU/ml的懸液接觸并在37t:和環(huán)境大氣培養(yǎng)該組合物18-24小時(shí)后確定的；iii)加入700mg/l磺胺甲噻二唑?qū)е掠蓞⒖季甏竽c桿菌ATCC25922形成的菌落的生長(zhǎng)或菌落的數(shù)目減少至少31ogCFU/ml，如將該組合物與包含105CFU/ml的懸液接觸并在37t:和環(huán)境大氣培養(yǎng)該組合物18-24小時(shí)后確定的；iv)加入16mg/l甲氧芐啶導(dǎo)致由參考菌株大腸桿菌ATCC25922形成的菌落的生長(zhǎng)或菌落的數(shù)目減少至少31ogCFU/ml，如將該組合物與包含105CFU/ml的懸液接觸并在37°C和環(huán)境大氣培養(yǎng)該組合物18-24小時(shí)后確定的；v)加入16mg/l美西林導(dǎo)致由參考菌株大腸桿菌ATCC25922形成的菌落的生長(zhǎng)或菌落的數(shù)目減少至少51ogCFU/ml，如將該組合物與包含105CFU/ml的懸液接觸并在37。C和環(huán)境大氣培養(yǎng)該組合物18-24小時(shí)后確定的。4.根據(jù)前述權(quán)利要求的任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述半固體培養(yǎng)基包含半乳糖聚合物(瓊脂)或明膠。5.根據(jù)前述權(quán)利要求的任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述微生物生長(zhǎng)培養(yǎng)基選自以下組成的組lso—sensitest瓊月旨、Danish血瓊月旨禾口Mueller—Hinton培養(yǎng)基。6.根據(jù)權(quán)利要求4或5所述的組合物，其中所述培養(yǎng)基包含從4-25g/l半乳糖聚合物。7.根據(jù)前述權(quán)利要求的任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述微生物生長(zhǎng)培養(yǎng)基是對(duì)其上生長(zhǎng)的有機(jī)體(被處理以施加)或(能夠施加)選擇壓的選擇培養(yǎng)基，諸如對(duì)革蘭氏陰性細(xì)菌或?qū)Ω锾m氏陽(yáng)性細(xì)菌選擇性的培養(yǎng)基。8.根據(jù)前述權(quán)利要求的任一項(xiàng)所述的組合物，所述組合物包含2種或更多種抗微生物劑，諸如3種或更多種抗微生物劑，諸如4種或更多種抗微生物劑，或諸如5種或更多種抗微生物劑。9.根據(jù)前述權(quán)利要求的任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述抗微生物劑或至少一種所述抗微生物劑選自以下組成的組阿米卡星、阿莫西林、阿莫西林_克拉維酸、兩性霉素_B、氨芐西林、氨芐西林-舒巴坦、安普霉素、阿奇霉素、氨曲南、桿菌肽、芐青霉素、卡泊芬凈、頭孢克洛、頭孢羥氨芐、頭孢氨芐、頭孢噻吩、頭孢唑林、頭孢地尼、頭孢吡肟、頭孢克肟、頭孢甲肟、頭孢哌酮、頭孢哌酮舒巴坦、頭孢噻肟、頭孢西丁、頭孢匹羅、頭孢泊肟、頭孢泊肟_克拉維酸、頭孢泊肟_舒巴坦、頭孢丙烯、頭孢喹肟、頭孢他啶、頭孢布烯、頭孢噻呋、Ceftobiprole、頭孢曲松、頭孢呋辛、氯霉素、氟苯尼考、環(huán)丙沙星、克拉霉素、克林沙星、克林霉素、氯唑西林、粘菌素、復(fù)方磺胺甲噁唑(甲氧芐啶/磺胺甲噁唑)、達(dá)巴萬(wàn)星、達(dá)福普汀/Quinopristin、達(dá)托霉素、地貝卡星、雙氯西林、多利培南、多西環(huán)素、恩氟沙星、爾他培南、紅霉素、氟氯西林、氟康唑、氟胞嘧啶、磷霉素、夫西地酸、加雷沙星、加替沙星、吉米沙星、慶大霉素、亞胺培南、伊曲康唑、卡那霉素、酮康唑、左氧氟沙星、林可霉素、利奈唑胺、氯碳頭孢、美西林(氮卓西林)、美羅培南、雙唑泰栓、美洛西林、美洛西林-舒巴坦、米諾環(huán)素、莫西沙星、莫匹羅星、萘啶酸、新霉素、奈替米星、呋喃妥因、諾氟沙星、氧氟沙星、苯唑西林、培氟沙星、青霉素V、哌拉西林、哌拉西林-舒巴坦、哌拉西林-三唑巴坦、利福平、羅紅霉素、司帕沙星、大觀霉素、螺旋霉素、鏈霉素、舒巴坦、磺胺甲噁唑、替考拉寧、特拉萬(wàn)星、泰利霉素、替莫西林、四環(huán)素、替卡西林、替卡西林_克拉維酸、替加環(huán)素、妥布霉素、甲氧芐啶、曲伐沙星、泰洛星、萬(wàn)古霉素、維吉霉素、伏立康唑。10.根據(jù)前述權(quán)利要求的任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述抗微生物劑或至少一種所述抗微生物劑選自以下組成的組氨基糖苷類、哌拉西林/三唑巴坦、碳青霉烯類、頭孢菌素類、糖肽類、脂肽類、抗微生物肽(如多霉素或粘菌素)。11.根據(jù)前述權(quán)利要求的任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述抗微生物劑選自以下組成的組氨芐西林/阿莫西林、磺胺、甲氧芐啶、呋喃妥因、美西林、環(huán)丙沙星(或其它氟喹諾酮)。12.根據(jù)前述權(quán)利要求的任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述抗微生物劑選自以下組成的組甲氧芐啶、磺胺甲二唑、氨芐西林、呋喃妥因和美西林(氮卓西林)。13.根據(jù)權(quán)利要求l-10任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述抗微生物劑選自以下組成的組阿莫西林、克拉維酸/氨芐西林、舒巴坦、環(huán)丙沙星(或其它氟喹諾酮)、磺胺甲噁唑、甲氧芐啶、頭孢氨芐/頭孢呋辛/頭孢羥氨芐(或其它口服頭孢菌素)、呋喃妥因和磷霉素(磷霉素-trometerole)。14.根據(jù)權(quán)利要求1-10任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述抗微生物劑選自以下組成的組阿莫西林、克拉維酸/氨芐西林、舒巴坦、環(huán)丙沙星(或其它氟喹諾酮)、磺胺甲噁唑、甲氧芐啶、頭孢氨芐/頭孢呋辛/頭孢羥氨芐/頭孢克洛(或其它口服頭孢菌素)、呋喃妥因禾口磷霉素(磷霉素-trometerole)。15.根據(jù)權(quán)利要求1-10任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述抗微生物劑選自以下組成的組阿莫西林/克拉維酸(或舒巴坦)、苯氧甲基-青霉素、頭孢菌素(如頭孢呋辛酯、頭孢氨芐)、環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、氧氟沙星、氟羅沙星、磺胺甲噁唑/甲氧芐啶(任選地組合用于口服治療)、四環(huán)素(多西環(huán)素或任何其它四環(huán)素組)、氯霉素、磷霉素、大環(huán)內(nèi)酯/克林霉素和利福平。16.根據(jù)權(quán)利要求1-10任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述抗微生物劑選自以下組成的組氨基糖苷類、頭孢菌素類(頭孢噻肟、頭孢他啶、頭孢吡肟、頭孢泊肟、頭孢曲松及其它)、哌拉西林/三唑巴坦、碳青霉烯類、頭孢菌素類、糖肽類、脂肽類、利奈唑胺、抗微生物肽(如多霉素或粘菌素)。17.根據(jù)前述權(quán)利要求的任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述兩種或多種生色物質(zhì)選自以下組成的組5-溴-4-氯-3-吲哚基磷酸酯、5-溴-6-氯-3-吲哚基磷酸酯對(duì)甲苯胺、3，3'-(3，3'-二甲氧基-4，4'-聯(lián)苯亞基)-雙-2-(對(duì)硝基苯基)-5-苯基-211-氯化四唑、5_溴-4-氯-3-吲哚基-13-D-吡喃型半乳糖苷、5-溴-6-氯-3-吲哚基-|3-D-吡喃型半乳糖苷、5_溴-3-吲哚基-13-D-吡喃型半乳糖苷、6-溴-2-萘基-13-D-吡喃型半乳糖苷、6-氯-3-吲哚基-13-D-吡喃型半乳糖苷、6-溴-3-吲哚基-13-D-吡喃型半乳糖苷、1-甲基-3-吲哚基-13-D-吡喃型半乳糖苷、鄰硝基苯基_13-D-吡喃型半乳糖苷、對(duì)硝基苯基-13-D-吡喃型半乳糖苷、3，4-環(huán)己酮七葉苷-13-D-半乳糖苷、8-羥基喹啉-13-D-半乳糖苷、5_溴_4-氯-3-吲哚基-a-D-吡喃型半乳糖苷、5-溴_4_氯_3_吲哚基_|3_D_吡喃型葡萄糖苷、5-溴-4-氯-3-吲哚基-e-D-葡萄糖醛酸苷、5-溴-6-氯-3-吲哚基-P-D-葡萄糖醛酸苷、8-羥基喹啉-13-D-葡萄糖醛酸苷、2，2'-連氮基-雙(3-乙基苯并噻唑啉_6-磺酸)、4-氯-1-萘酚、3，3'-二氨基聯(lián)苯胺四鹽酸鹽、鄰苯二胺、3，3'，5，5'_四甲基聯(lián)苯胺、4-[2-(4-辛?；?3，5-二甲氧基苯基)-乙烯基]_喹啉鎗-l-(丙烷_3-基_羧酸)_溴化物、5-溴-6-氯-3-吲哚基-辛酸酯、5-溴-4-氯-3-吲哚氧基-肌-肌醇-l-磷酸酯。18.根據(jù)前述權(quán)利要求的任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述兩種或多種生色物質(zhì)的至少一種選自以下組成的組5-溴-4-氯-3-吲哚基-13-D-吡喃型半乳糖苷、6-氯-3-吲哚基-13-D-吡喃型半乳糖苷、5-溴-4-氯-3-吲哚基-13-D-吡喃型葡萄糖苷、5_溴-4-氯-3-吲哚基-13-D-葡萄糖醛酸苷、5-溴-6-氯-3-吲哚基-磷酸酯。19.根據(jù)前述權(quán)利要求的任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述熒光物質(zhì)選自以下組成的組4_甲基傘形基磷酸酯、4-甲基傘形基-P-D-吡喃型半乳糖苷"-甲基傘形基13-D-吡喃型乳糖苷和4-甲基傘形基b-D-葡萄糖醛酸苷。20.根據(jù)前述權(quán)利要求的任一項(xiàng)所述的組合物，其中每種所述生色物質(zhì)或熒光物質(zhì)以0.001-1.0g/1的量存在。21.根據(jù)前述權(quán)利要求的任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述組合物包含3種或更多種生色物質(zhì)或熒光物質(zhì)，諸如4種或更多種生色物質(zhì)或熒光物質(zhì)、5種或更多種、6種或更多種、7種或更多種、8種或更多種、9種或更多種、或10種或更多種生色物質(zhì)或熒光物質(zhì)。22.根據(jù)前述權(quán)利要求的任一項(xiàng)所述的組合物，其中所述組合物包含2、3、4、5、6、7、8、9、10或11種生色物質(zhì)或熒光物質(zhì)。23.根據(jù)前述權(quán)利要求的任一項(xiàng)所述的組合物，其中當(dāng)在4t:或更低的溫度儲(chǔ)存時(shí)所述組合物穩(wěn)定長(zhǎng)達(dá)12個(gè)月的期間。24.—種平臺(tái)，其包含根據(jù)權(quán)利要求1-23任一項(xiàng)所述的組合物。25.根據(jù)權(quán)利要求24所述的平臺(tái)，其中所述平臺(tái)是為了診斷、檢測(cè)和/或表征微生物感染或污染。26.根據(jù)權(quán)利要求24或25任一項(xiàng)所述的平臺(tái)，其包含多種根據(jù)權(quán)利要求1-23任一項(xiàng)所述的組合物，其中至少2種組合物包含不同的抗微生物劑包含不同的抗微生物劑或其中每種組合物包含不同的抗微生物劑。27.根據(jù)權(quán)利要求24-26任一項(xiàng)所述的平臺(tái)，其中所述平臺(tái)包含以下i)檢驗(yàn)組合物，其包含半固體微生物生長(zhǎng)培養(yǎng)基，諸如權(quán)利要求2-7任一項(xiàng)界定的半固體微生物生長(zhǎng)培養(yǎng)基，和兩種或多種生色物質(zhì)或熒光物質(zhì)(或底物)，諸如權(quán)利要求17-22任一項(xiàng)界定的生色物質(zhì)或熒光物質(zhì)(或底物)，以及抗微生物劑，諸如權(quán)利要求9-16任一項(xiàng)界定的抗微生物劑，禾口ii)對(duì)照組合物，其包含半固體微生物生長(zhǎng)培養(yǎng)基，諸如權(quán)利要求2-7任一項(xiàng)界定的半固體微生物生長(zhǎng)培養(yǎng)基，和兩種或多種生色物質(zhì)或熒光物質(zhì)(或底物)，諸如權(quán)利要求17-22任一項(xiàng)界定的生色物質(zhì)或熒光物質(zhì)(或底物)，但不包含抗微生物劑，諸如權(quán)利要求9-16任一項(xiàng)界定的抗微生物劑。28.根據(jù)權(quán)利要求24-27任一項(xiàng)所述的平臺(tái)，其中所述平臺(tái)包含固體支持物。29.根據(jù)權(quán)利要求28所述的平臺(tái)，其中所述固體支持物包括以下i)凹槽(io)，其能夠作為可能有微生物感染或污染的樣品的容器，所述凹槽被分為兩個(gè)或多個(gè)分開的區(qū)室(11-16)，每個(gè)區(qū)室包含如權(quán)利要求l-23任一項(xiàng)界定的組合物(檢驗(yàn)組合物)、或如權(quán)利要求27ii)界定的對(duì)照組合物，和一個(gè)或多個(gè)用于將所述凹槽分隔為所述分開的區(qū)室的一體的分隔組件(17)，或ii)多個(gè)凹槽18，每個(gè)凹槽能夠作為可能有微生物感染或污染的樣品的容器，每個(gè)凹槽包含如權(quán)利要求1-23任一項(xiàng)界定的組合物、或如權(quán)利要求27ii)界定的對(duì)照組合物。30.根據(jù)權(quán)利要求29所述的平臺(tái)，其中所述凹槽或所述多個(gè)凹槽具有從l-40mm，諸如從l-35mm、從l-30mm、從l-25mm、從5-40mm、從5-35mm、從5-30mm、從5-25mm、從10-40mm、從10-35mm、從10-30mm、從10-25mm、從15-40mm、從15-35mm、從15_30mm或諸如從25_25mm的深度。31.根據(jù)權(quán)利要求29-30任一項(xiàng)所述的平臺(tái)，其中所述組合物以對(duì)應(yīng)所述凹槽或孔容積的從5-75%的量，諸如從10-75%、從10-65%、從10-55%、從10-45%、從10-35%、從20-75%、從20-65%、從20-55%、從20-45%、從20-35%、諸如從25-75%、從25-65%、從25-55%、從25-45%、從25-35%、或諸如以對(duì)應(yīng)凹槽或區(qū)室容積的從25-35%的量在每個(gè)凹槽或每個(gè)孔中存在。32.根據(jù)權(quán)利要求29i)所述的平臺(tái)，其中所述凹槽被分隔為3個(gè)或更多個(gè)區(qū)室，諸如4個(gè)或更多個(gè)、5個(gè)或更多個(gè)、6個(gè)或更多個(gè)、7個(gè)或更多個(gè)、8個(gè)或更多個(gè)、9個(gè)或更多個(gè)、10個(gè)或更多個(gè)、15個(gè)或更多個(gè)、20個(gè)或更多個(gè)、40個(gè)或更多個(gè)、60個(gè)或更多個(gè)、或90個(gè)或更多個(gè)區(qū)室。33.根據(jù)權(quán)利要求29ii)所述的平臺(tái)，所述平臺(tái)具有3個(gè)或更多個(gè)凹槽，諸如4個(gè)或更多個(gè)、5個(gè)或更多個(gè)、6個(gè)或更多個(gè)、7個(gè)或更多個(gè)、8個(gè)或更多個(gè)、9個(gè)或更多個(gè)、10個(gè)或更多個(gè)、15個(gè)或更多個(gè)、20個(gè)或更多個(gè)、40個(gè)或更多個(gè)、60個(gè)或更多個(gè)、或90個(gè)或更多個(gè)凹槽。34.根據(jù)權(quán)利要求29i)所述的平臺(tái)，其中所述分隔組件已被處理以防止抗微生物劑在區(qū)室之間擴(kuò)散。35.根據(jù)權(quán)利要求28-34任一項(xiàng)所述的平臺(tái)，其中所述固體支持物是以封閉或開放容器的形式，諸如盤、試管、瓶、多孔板、微量滴定板、條(浸漬條)和載玻片。36.根據(jù)權(quán)利要求28-35任一項(xiàng)所述的平臺(tái)，其中所述固體支持物是從塑料/聚合物基質(zhì)、從玻璃基質(zhì)或從金屬基質(zhì)制造的，所述塑料/聚合物基質(zhì)諸如聚氯乙烯基質(zhì)、聚乙烯基質(zhì)、聚丙烯基質(zhì)、聚碳酸酯基質(zhì)、丙烯腈丁二烯苯乙烯基質(zhì)、聚甲基丙烯酸甲酯基質(zhì)或聚苯乙烯基質(zhì)。37.根據(jù)權(quán)利要求28-36任一項(xiàng)所述的平臺(tái)，其中所述固體支持物是皮氏培養(yǎng)皿，諸如具有從50至150mm的直徑的皮氏培養(yǎng)皿。38.根據(jù)權(quán)利要求28-37任一項(xiàng)所述的平臺(tái)，其中所述平臺(tái)適于用于檢測(cè)和/或診斷選自以下組成的組的感染尿路感染、皮膚和軟組織感染、金黃色葡萄球菌(S.aureus)(包括耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌)感染、腦膜炎球菌(meningococci)感染、淋球菌(gonococci)感染禾口鏈球菌(str印tococci)感染。39.根據(jù)權(quán)利要求24-38任一項(xiàng)所述的平臺(tái)，所述平臺(tái)包含酶。40.根據(jù)權(quán)利要求39所述的平臺(tái)，其中所述酶是白細(xì)胞酯酶。41.根據(jù)權(quán)利要求39-40任一項(xiàng)所述的平臺(tái)，其中所述酶包含在所述支持物的分開的或一體的組件中。42.—種試劑盒，其包含根據(jù)權(quán)利要求1-23任一項(xiàng)所述的組合物。43.—種試劑盒，其包含根據(jù)權(quán)利要求24-41任一項(xiàng)所述的平臺(tái)。44.根據(jù)權(quán)利要求42或43任一項(xiàng)所述的試劑盒，其中所述試劑盒用于診斷、檢測(cè)和/或表征微生物感染或污染。45.根據(jù)權(quán)利要求42-44任一項(xiàng)所述的試劑盒，所述試劑盒還包含顯示在如權(quán)利要求24-41任一項(xiàng)界定的平臺(tái)上生長(zhǎng)量的標(biāo)準(zhǔn)，所述標(biāo)準(zhǔn)是將所述平臺(tái)與具有預(yù)先確定滴度的微生物參考菌株的懸液接觸獲得的。46.根據(jù)權(quán)利要求42-44任一項(xiàng)所述的試劑盒，所述試劑盒還包含顯示在如權(quán)利要求24-41任一項(xiàng)界定的平臺(tái)上生化色素和/或熒光顯色的標(biāo)準(zhǔn)，所述標(biāo)準(zhǔn)是在一種或多種微生物參考菌株平臺(tái)上生長(zhǎng)獲得的。47.根據(jù)權(quán)利要求45-46任一項(xiàng)所述的試劑盒，其中所述標(biāo)準(zhǔn)是如權(quán)利要求24-41任一項(xiàng)界定的平臺(tái)的照相或印刷復(fù)制。48.根據(jù)權(quán)利要求45-46任一項(xiàng)所述的試劑盒，其中通過將如權(quán)利要求24-41任一項(xiàng)界定的平臺(tái)與以下接觸而產(chǎn)生所述標(biāo)準(zhǔn)i)大腸桿菌細(xì)菌的參考菌株，諸如大腸桿菌(ATCC29522)細(xì)菌、和/或金黃色葡萄球菌(St即hylococcusaureus)的參考菌株，諸如金黃色葡萄球菌ATCC25913。49.根據(jù)權(quán)利要求45所述的試劑盒，其中通過以下步驟產(chǎn)生所述標(biāo)準(zhǔn)i)提供密度為0.9%鹽水中0.5McFarland/l+E08CFU/mL所述參考菌株的懸液；ii)提供i)中所述懸液的一系列10倍稀釋液，最低密度為+E03CFU/mL;iii)將ii)中的每種所述稀釋液與如權(quán)利要求24-41任一項(xiàng)界定的平臺(tái)接觸，優(yōu)選地2-3秒，隨后輕輕倒出所述溶液；iv)在35t:在環(huán)境大氣培養(yǎng)每個(gè)平臺(tái)過夜。50.根據(jù)權(quán)利要求42-49任一項(xiàng)所述的試劑盒，所述試劑盒還包含一種或多種分別包裝的抗微生物劑。51.根據(jù)權(quán)利要求1-23任一項(xiàng)所述的組合物在檢測(cè)和/或鑒定致尿道病的微生物中的應(yīng)用。52.根據(jù)權(quán)利要求1-23任一項(xiàng)所述的組合物在檢測(cè)和/或診斷選自以下組成的組的感染的應(yīng)用尿路感染、皮膚和軟組織感染、金黃色葡萄球菌(包括耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌)感染、腦膜炎球菌感染、淋球菌感染、包括肺炎球菌(pneumococci)感染的鏈球菌感染。53.用于檢測(cè)和/或診斷選自以下組成的組的感染的根據(jù)權(quán)利要求l-23任一項(xiàng)所述的組合物尿路感染、皮膚和軟組織感染、金黃色葡萄球菌(包括耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌)感染、腦膜炎球菌感染、淋球菌感染、鏈球菌感染和肺炎球菌感染。54.—種診斷、檢測(cè)和/或表征微生物感染或污染的方法，包括以下步驟i)提供可能有微生物感染或污染的樣品；并ii)將所述樣品與如權(quán)利要求24-41任一項(xiàng)界定的平臺(tái)接觸。55.—種診斷、檢測(cè)和/或表征微生物感染或污染的方法，其包括以下步驟i)提供可能有微生物感染或污染的樣品；并ii)將所述樣品與如權(quán)利要求27i)界定的、包含半固體微生物生長(zhǎng)培養(yǎng)基、兩種或多種生色物質(zhì)或熒光物質(zhì)(或底物)、和抗微生物劑的檢驗(yàn)組合物接觸，并與如權(quán)利要求27ii)界定的、包含所述半固體生長(zhǎng)培養(yǎng)基和所述兩種或多種生色物質(zhì)或熒光物質(zhì)(或底物？)但不包含任何抗微生物劑或所述抗微生物劑的對(duì)照組合物接觸。56.根據(jù)權(quán)利要求55所述的方法，其中所述樣品選自以下組成的組體液樣品、糞便樣品、粘液樣品、皮膚樣品、軟組織樣品、食物或食物成分樣品、動(dòng)物飼料樣品和微生物(如細(xì)菌)純培養(yǎng)物。57.根據(jù)權(quán)利要求55或56所述的方法，其中所述樣品是尿樣。58.根據(jù)權(quán)利要求55-56任一項(xiàng)所述的方法，所述方法包括在15-37t:的溫度、優(yōu)選地在環(huán)境大氣培養(yǎng)所述平臺(tái)18小時(shí)或更久時(shí)期的另外步驟。59.根據(jù)權(quán)利要求55-58任一項(xiàng)所述的方法，所述方法包括目視檢查平臺(tái)的微生物生長(zhǎng)。60.根據(jù)權(quán)利要求59所述的方法，其中所述目視檢查所述組合物的微生物生長(zhǎng)的步驟包括iv)評(píng)價(jià)所述對(duì)照組合物上任何微生物生長(zhǎng)的量，任選地通過參考顯示不同量的菌落形成單位的標(biāo)準(zhǔn)；并v)評(píng)價(jià)如權(quán)利要求27ii)界定的、包含所述半固體生長(zhǎng)培養(yǎng)基和所述兩種或多種生色物質(zhì)或熒光物質(zhì)(或底物)但不包含任何抗微生物劑或所述抗微生物劑的所述對(duì)照組合物上任何微生物生長(zhǎng)的類型，任選地通過參考顯示微生物不同種群或不同菌株生長(zhǎng)的標(biāo)準(zhǔn)(諸如圖片和/或顏色方案)；并vi)通過比較如權(quán)利要求27i)界定的所述檢驗(yàn)組合物上的生長(zhǎng)量與所述對(duì)照組合物上的生長(zhǎng)量來(lái)確定所述微生物生長(zhǎng)的抗微生物劑敏感性，任選地通過參考標(biāo)準(zhǔn)。61.根據(jù)權(quán)利要求59-60任一項(xiàng)所述的方法，其中所述目視檢查組合物的微生物生長(zhǎng)的步驟包括確定如權(quán)利要求1-22任一項(xiàng)界定的所述組合物上或所述對(duì)照組合物上不同菌落類型的數(shù)目，和任選地每種類型菌落的量。62.根據(jù)權(quán)利要求60-61任一項(xiàng)所述的方法，其中所述標(biāo)準(zhǔn)是如權(quán)利要求45-49任一項(xiàng)界定的標(biāo)準(zhǔn)。63.根據(jù)權(quán)利要求54-62任一項(xiàng)所述的方法，其包括確定所述樣品中的微生物是否對(duì)所述檢驗(yàn)組合物中的抗微生物劑敏感，存在的敏感性由以下表示i)在所述檢驗(yàn)組合物上或在一種或多種所述檢驗(yàn)組合物上不存在微生物生長(zhǎng)，而在所述對(duì)照組合物上存在微生物生長(zhǎng)，或ii)在所述檢驗(yàn)組合物上或在一種或多種所述檢驗(yàn)組合物上以及所述對(duì)照組合物上存在微生物生長(zhǎng)，在所述檢驗(yàn)上或在一種組合物上的菌落數(shù)目或面積比所述第一組合物上的數(shù)目或面積小至少100倍。64.制造根據(jù)權(quán)利要求l-23任一項(xiàng)所述的組合物的方法，其包括組合半固體微生物生長(zhǎng)培養(yǎng)基、兩種或多種生色物質(zhì)(或底物)和抗微生物劑的步驟。65.制造根據(jù)權(quán)利要求24-41任一項(xiàng)所述的平臺(tái)的方法，其包括組合半固體微生物生長(zhǎng)培養(yǎng)基、兩種或多種生色物質(zhì)(或底物)和抗微生物劑的步驟。66.制造根據(jù)權(quán)利要求42-50任一項(xiàng)所述的診斷試劑盒的方法，其包括組合半固體微生物生長(zhǎng)培養(yǎng)基、兩種或多種生色物質(zhì)(或底物)和抗微生物劑的步驟。全文摘要本發(fā)明關(guān)于對(duì)在人類和動(dòng)物中診斷微生物感染的、包括檢測(cè)和表征微生物感染的新型、可靠、快速和廉價(jià)方法的需求，或?qū)τ糜谠诟鞣N環(huán)境諸如食物或飼料樣品中檢測(cè)和表征微生物感染的方法的需求。本發(fā)明提供用于診斷、檢測(cè)和/或表征微生物感染或污染的組合物、平臺(tái)、試劑盒和方法。尤其是，本發(fā)明涉及用于診斷、檢測(cè)和/或表征尿路感染的這種組合物、平臺(tái)、試劑盒和方法。文檔編號(hào)G01N33/52GK101790683SQ200880104753公開日2010年7月28日申請(qǐng)日期2008年8月26日優(yōu)先權(quán)日2007年8月31日發(fā)明者尼爾斯·弗瑞莫特-莫勒申請(qǐng)人:國(guó)立血清研究所