專利名稱：標(biāo)貼式生物切片制作工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種生物切片技術(shù)，尤其是一種標(biāo)貼式生物切片制作工藝。
背景技術(shù)：
傳統(tǒng)的生物切片技術(shù)于上世紀(jì)初期傳入我國，長期以來在生物學(xué)科研究與教學(xué)等領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用。我國相繼建立了許多生物切片標(biāo)本廠，為全國農(nóng)、醫(yī)、生物類有關(guān)大專院校及中小學(xué)校提供了大量的生物學(xué)、醫(yī)學(xué)等切片標(biāo)本。但現(xiàn)有的生物切片制作工藝由于受載體的限制，切片標(biāo)本不能集中處理，每個載玻片只能放一至數(shù)個切片標(biāo)本，由于載玻片的限制，這在一定程度上影響了切片標(biāo)本染色、封片的一致性，更重要的是每次只能制作一張標(biāo)本，制作效率低下。再次，制作者較長時(shí)間受到二甲苯等有害藥品的毒害，至今無法解決。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種可大規(guī)模集中處理，制作效率高的標(biāo)貼式生物切片制作工藝。
本發(fā)明的技術(shù)方案是一種標(biāo)貼式生物切片制作工藝，主要步驟(1)取材動物或植物器官材料；(2)固定將所取材料用甲醛或冰乙酸或乙醇藥液其中一種快速殺死并固定，使其保持原來的生活狀態(tài)；(3)水洗材料經(jīng)殺死固定后，用水或50％乙醇洗滌液洗去材料中的固定液；(4)脫水用乙醇或正丁醇或叔丁醇或丙酮其中一種藥劑把材料中的水分全部替代出來；(5)透明材料脫水后，常用二甲苯作為透明劑，這是因?yàn)樗饶芘c脫水劑又能與石蠟混合，便于包埋劑滲入到材料組織中去；(6)浸蠟材料完全透明后，用石蠟替換材料中的二甲苯，并使石蠟滲透到材料組織中去；(7)包埋將材料與石蠟同時(shí)倒入一紙盒內(nèi)并擺放好材料，然后冷卻；(8)切片經(jīng)分割修整，蠟快材料即可上機(jī)切片，切片厚度一般調(diào)整為10微米左右；(9)展片切片機(jī)所切出的切片有縐折，因此要在盛有溫水的容器內(nèi)進(jìn)行展片；(10)移片采用環(huán)氧樹脂材料作為切片載體，將展好的切片一一擺放上去，每張載體可放置一百至數(shù)百個切片；(11)脫蠟切片擺放好后，經(jīng)過幾小時(shí)的晾干，即可在一個容器內(nèi)用二甲苯集中脫蠟；(12)染色切片上的蠟被二甲苯完全溶去后，用無水乙醇和從95％至50％濃度梯度的乙醇處理，然后進(jìn)行集中染色，如此，可保證染色均勻一致；(13)透明切片被染色后，用50％至無水乙醇濃度梯度的乙醇處理，再用二甲苯進(jìn)行集中透明；(14)封片將通過二甲苯透明的切片，采用高光樹脂噴膜封片，然后經(jīng)過烘干、分割，并根據(jù)需要，象貼標(biāo)簽一樣將其貼在載玻片的中部，這樣，一次就可制作出一百至數(shù)百張切片來。
本發(fā)明標(biāo)貼式生物切片工藝的優(yōu)點(diǎn)(1)解決了長期以來展好后的切片不能大規(guī)模集中擺放的問題。生物切片材料集中排列于某一新型載體上，并在脫蠟、染色、透明封片等過程中進(jìn)行大規(guī)模集中處理，這在生物切片技術(shù)領(lǐng)域尚屬首創(chuàng)。
(2)解決了切片不能集中進(jìn)行脫蠟、染色、透明、封片的問題。
(3)采用此工藝制作的生物切片標(biāo)本為標(biāo)貼式產(chǎn)品，此產(chǎn)品新穎、獨(dú)特，適合工業(yè)化生產(chǎn)，大大提高了切片標(biāo)本的制作效率。
(4)集約化處理技術(shù)降低了二甲苯等藥品對環(huán)境和人的污染和危害。
具體實(shí)施例方式
現(xiàn)有生物切片技術(shù)及其不足(以石蠟切片為例)(1)現(xiàn)有生物切片技術(shù)的主要步驟取材因制作目的而定，但無論是動物或植物器官材料，取材時(shí)都應(yīng)本著″小而精″的原則，以利于快速固定。
固定將所取材料用甲醛或冰乙酸、乙醇藥液快速殺死并固定，使其保持原來的生活狀態(tài)。
水洗材料經(jīng)殺死固定后，用水或50％乙醇洗滌液洗去材料中的固定液。
脫水用乙醇、正丁醇、叔丁醇、丙酮其中一種藥劑把材料中的水分全部替代出來。
透明材料脫水后，常用二甲苯作為透明劑，這是因?yàn)樗饶芘c脫水劑又能與石蠟混合，便于包埋劑滲入到材料組織中去。
浸蠟材料完全透明后，用石蠟替換材料中的二甲苯，并使石蠟滲透到材料組織中去。
包埋將材料與石蠟同時(shí)倒入一紙盒內(nèi)并擺放好材料，然后冷卻。
切片經(jīng)分割修整，蠟快材料即可上機(jī)切片，切片厚度一般調(diào)整為10微米左右。
展片切片機(jī)所切出的切片有縐折，因此要在盛有35℃溫水的容器內(nèi)進(jìn)行展片。
移片通過展片并冷卻的切片移至載玻片的中部。每個載玻片放1-2個切片。
脫蠟通常用二甲苯將蠟脫去。
染色切片上的蠟被完全溶去后，用無水乙醇和(從95％降至50％)的乙醇處理，然后進(jìn)行染色。
透明組織被染色后，用不同濃度梯度的乙醇(從50％至無水乙醇)處理，然后再用二甲苯作透明。
封片在透明好的組織上面滴一滴樹膠，蓋上潔凈的蓋玻片，如此一張動植物切片標(biāo)本即制作完畢。
2.本發(fā)明標(biāo)貼式生物切片的方法與步驟(以石蠟切片為例)本發(fā)明標(biāo)貼式生物切片工藝從取材固定到展片等步驟與現(xiàn)有生物切片技術(shù)相同。而從移片到封片等步驟采用特有的方法，其具體方法如下移片采用551 A B-3環(huán)氧樹脂材料(市場有售)作為切片載體，將展好的切片一一擺放上去，每張載體可放置一百至數(shù)百個切片。
脫蠟切片擺放好后，經(jīng)過幾小時(shí)的晾干，即可在一個容器內(nèi)用二甲苯集中脫蠟。
染色切片上的蠟被二甲苯完全溶去后，用無水乙醇和不同濃度梯度(從95％至50％)的乙醇處理，然后進(jìn)行集中染色。如此，可保證染色均勻一致。
透明切片被染色后，用不同濃度梯度的乙醇(由50％至無水乙醇)處理，再用二甲苯進(jìn)行集中透明。
封片將通過二甲苯透明的切片，采用高光樹脂噴膜封片。然后經(jīng)過烘干、分割，并根據(jù)需要，象貼標(biāo)簽一樣將其貼在載玻片的中部。這樣，一次就可制作出一百至數(shù)百張切片來。
本發(fā)明標(biāo)貼式生物切片技術(shù)是在現(xiàn)有生物切片技術(shù)的基礎(chǔ)上發(fā)明和發(fā)展起來的。該制作工藝運(yùn)用超常思維方式，用樹脂材料作為載體，并采用集約排列、集中處理等技術(shù)，使切片標(biāo)本的制作質(zhì)量和效率大幅度提高。本發(fā)明是生物切片技術(shù)的一個飛躍。
權(quán)利要求
1.一種標(biāo)貼式生物切片制作工藝，其特征是主要步驟(1)取材動物或植物器官材料；(2)固定將所取材料用甲醛或冰乙酸或乙醇藥液其中一種快速殺死并固定，使其保持原來的生活狀態(tài)；(3)水洗材料經(jīng)殺死固定后，用水或50％乙醇洗滌液洗去材料中的固定液；(4)脫水用乙醇或正丁醇或叔丁醇或丙酮其中一種藥劑把材料中的水分全部替代出來；(5)透明材料脫水后，常用二甲苯作為透明劑，這是因?yàn)樗饶芘c脫水劑又能與石蠟混合，便于包埋劑滲入到材料組織中去；(6)浸蠟材料完全透明后，用石蠟替換材料中的二甲苯，并使石蠟滲透到材料組織中去；(7)包埋將材料與石蠟同時(shí)倒入一紙盒內(nèi)并擺放好材料，然后冷卻；(8)切片經(jīng)分割修整，蠟快材料即可上機(jī)切片，切片厚度一般調(diào)整為10微米左右；(9)展片切片機(jī)所切出的切片有縐折，因此要在盛有溫水的容器內(nèi)進(jìn)行展片；(10)移片采用環(huán)氧樹脂材料作為切片載體，將展好的切片一一擺放上去，每張載體可放置一百至數(shù)百個切片；(11)脫蠟切片擺放好后，經(jīng)過幾小時(shí)的晾干，即可在一個容器內(nèi)用二甲苯集中脫蠟；(12)染色切片上的蠟被二甲苯完全溶去后，用無水乙醇和從95％至50％濃度梯度的乙醇處理，然后進(jìn)行集中染色，如此，可保證染色均勻一致；(13)透明切片被染色后，用50％至無水乙醇濃度梯度的乙醇處理，再用二甲苯進(jìn)行集中透明；(14)封片將通過二甲苯透明的切片，采用高光樹脂噴膜封片，然后經(jīng)過烘干、分割，并根據(jù)需要，象貼標(biāo)簽一樣將其貼在載玻片的中部，這樣，一次就可制作出一百至數(shù)百張切片來。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的標(biāo)貼式生物切片制作工藝，其特征是第(9)展片步驟中的溫水溫度為30℃-40℃。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的標(biāo)貼式生物切片制作工藝，其特征是第(10)移片步驟中環(huán)氧樹脂為551A B-3。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種標(biāo)貼式生物切片制作工藝，其特征是主要步驟(1)取材，(2)固定，(3)水洗，(4)脫水，(5)透明，(6)浸蠟，(7)包埋，(8)切片經(jīng)分割修整，蠟快材料即可上機(jī)切片，切片厚度一般調(diào)整為10微米左右；(9)展片，本發(fā)明從取材、固定到展片等步驟與現(xiàn)有生物切片技術(shù)相同；而從移片到封片等步驟采用特有的方法，其具體方法如下(10)移片采用環(huán)氧樹脂材料作為切片載體，每張載體可放置一百至數(shù)百個切片；(11)脫蠟，(12)染色切片上的蠟被二甲苯完全溶去后，用無水乙醇和從95％至50％濃度梯度的乙醇處理，(13)透明切片被染色后，用50％至無水乙醇濃度梯度的乙醇處理，再用二甲苯進(jìn)行集中透明；(14)封片將通過二甲苯透明的切片，采用高光樹脂噴膜封片，然后經(jīng)過烘干、分割。本發(fā)明是生物切片技術(shù)的一個飛躍，一次就可制作出一百至數(shù)百張切片來。
文檔編號G09B23/00GK1916590SQ20051001788
公開日2007年2月21日 申請日期2005年8月15日 優(yōu)先權(quán)日2005年8月15日
發(fā)明者段增強(qiáng), 高致明, 賀德先, 田朝陽 申請人:段增強(qiáng)