專利名稱：用于制備經(jīng)處理的虛擬分析板的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于制備定位在分析板上的細胞學(xué)樣本的虛擬(virtual)分析板以便允許對所述樣本的細胞分析的方法，所述類型的方法包括以下步驟-執(zhí)行對樣本的處理，執(zhí)行所述處理以將樣本中的病態(tài)細胞與健康細胞區(qū)分出來，-執(zhí)行對定位在分析板上的樣本的圖像采集，以便獲得多幅圖像，每幅圖像表示分析板的一區(qū)域，所述圖像并排布置以形成整個樣本的圖像來生成虛擬分析板。本發(fā)明特別適用于細胞學(xué)分析方法。
背景技術(shù)：
樣本分析例如用于病理診斷，通過刮取(子宮頸、陰道或者其他刮拭)、通過對器官(胸部、甲狀腺、神經(jīng)節(jié)或者其他器官)的穿刺或者進一步通過收集(尿、氣管肺泡灌洗或者其他體液)來采樣細胞，以便檢測任何類型的病變，并且尤其是癌癥前期或癌癥狀態(tài)。在已知的方式中，由專業(yè)的和受過培訓(xùn)的觀察者來檢查樣本以檢測定位在分析板或載物片上的樣本中的可能病變的細胞。為了允許檢測潛在的病變細胞，樣本經(jīng)過處理，諸如為其染色，即其可能顯示出細胞的細胞核和細胞質(zhì)的特征，以便輔助定位和診斷病變的細胞。當(dāng)觀察樣本時，潛在的病變細胞則在染色親合性、大小和形狀方面相對于正常細胞的細胞核和細胞質(zhì)兩者顯示出差別。在沒有任何特殊輔助設(shè)備的情況下，可以手動地完成所述分析。在這種情況下，醫(yī)師或?qū)I(yè)技術(shù)人員在顯微鏡下移動(scroll)樣本板并通過視力來觀察其中的每一個，以檢測指示出例如可能與癌癥前期或癌癥狀態(tài)對應(yīng)的病變細胞的形態(tài)畸形。這種分析方法是乏味的并且對應(yīng)耗時。此外，其未提供任何令人滿意的結(jié)果，特別是帶有估計為大約30%的大量“假陰性”，即，雖然在患者中存在病變但是樣本被認為是正常的，特別是癌癥前期或癌癥病變，具有隨后在錯誤地打消疑慮的患者中癌癥發(fā)展的風(fēng)險。為了改善分析結(jié)果，提出了改進采樣，即細胞的數(shù)量、它們的定色、它們的染色和它們在分析板上的展開，并且還例如通過計算機分析裝置，諸如圖像處理軟件以及其他裝置，來在醫(yī)師或?qū)I(yè)技術(shù)人員的分析過程中對其進行輔助。為此目的，使用攝像機或相機來采集定位在分析板上的樣本的不同區(qū)域的圖像， 并且將這些圖像的數(shù)據(jù)傳送給計算機系統(tǒng)，然后所述計算機系統(tǒng)在《虛擬》分析板上操作。計算機系統(tǒng)允許進行信號處理、圖像預(yù)處理以及利用任選新近生成的或現(xiàn)有的數(shù)據(jù)庫來對比分析圖像，以便加速分析處理，并且因此允許分析更大數(shù)量的待分析樣本并輔助醫(yī)師或?qū)I(yè)技術(shù)人員。例如，自動地檢查樣本的圖像，并且如果記錄到具有異常狀態(tài)的某些區(qū)域，則將對應(yīng)的圖像呈遞給醫(yī)師或?qū)I(yè)技術(shù)人員，其然后可以確定這些區(qū)域是否顯示出病變細胞。因此，醫(yī)師或?qū)I(yè)技術(shù)人員在沒有分析計算機系統(tǒng)認定為正常區(qū)域的情況下無非是觀察病變區(qū)域。這種方法實際上允許加速分析并使診斷更為可靠。然而，醫(yī)師或?qū)I(yè)技術(shù)人員則不再具有觀察正常樣本或具有不重要的形態(tài)變異的樣本的機會，這對于其對樣本鑒定并且特別是對于其學(xué)習(xí)曲線甚至對于其診斷敏銳性的保
4護是不利的。實際上，樣本的分析是基于醫(yī)師或?qū)I(yè)技術(shù)人員在檢查樣本和在比較正常區(qū)域與異常區(qū)域中的訓(xùn)練和實踐的。通過計算機輔助分析抑制該實踐的事實可能導(dǎo)致醫(yī)師或?qū)I(yè)技術(shù)人員喪失其技術(shù)并且從而導(dǎo)致分析誤差。此外，與逐視野掃描相反，彩色圖像的逐行掃描需要刪除或者紅/綠/藍(RGB)配準(zhǔn)，這對于圖像的對準(zhǔn)需要高的調(diào)節(jié)水平，這一高的調(diào)節(jié)水平對最輕微的振動敏感。因此， 因為在掃描期間應(yīng)用到載物片上的處理操作，針對彩色圖像的這種逐行掃描可能需要很長的時間。此外，彩色圖像的掃描需要顯著的圖像壓縮時間。此外，對于包含細胞的三維團(cluster)(即《細胞?！?，特別是病變細胞)的樣本掃描是精密的。實際上，在團處由一個或多個焦點限定的團的厚度處完成了攝像機的聚焦， 而使其他更深或更淺的點不清晰。為了獲得適當(dāng)?shù)摹洞笠曇啊穲D像，即整個分析板的圖像，對于在單個虛擬板上讀出的篩查或診斷，需要具有盡可能小(小于5%)的“模糊”表面。此外，分割工具更難以處理影響隔離的細胞和三維團的模糊區(qū)域。因此，細胞和細胞核的分析變得相關(guān)性更小并且甚至可能導(dǎo)致很差的細胞分類。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明旨在通過提出一種分析方法來克服上述缺陷，所述方法允許在掃描過程中節(jié)約時間的同時，在與診斷檢查點相關(guān)的更多有關(guān)質(zhì)量控制和醫(yī)師或?qū)I(yè)技術(shù)人員的診斷訓(xùn)練點的范圍內(nèi)，使其就可被分析的表面而言更好地執(zhí)行，并且就計算機輔助分析的異常細胞的檢測質(zhì)量而言更好地執(zhí)行。為此目的，本發(fā)明目的涉及一種上述類型的方法，其特征在于，其包括以下步驟-定位包括載物片或定位在載物片上方的薄片的分析板的基準(zhǔn)面，用于采集圖像， 所述基準(zhǔn)面是通過載物片或者薄片的表面來限定的；以及-至少執(zhí)行第二圖像采集，所述第二采集在不同于第一采集的樣本的厚度處進行， 以便獲得與在不同厚度處的樣本部分對應(yīng)的多幅圖像。利用這種方法可能以特別簡單的方式產(chǎn)生樣本的至少一幅圖像，以允許檢測潛在病變細胞并且獲得關(guān)于樣本的大量信息，如在稍后描述的。根據(jù)制備方法的其他特征-分析板的基準(zhǔn)面的位置伴隨有采集載物片或薄片的地形圖像，-分析板包括至少一個測試圖形(pattern)，布置其以便與定位在分析板上的樣本厚度無關(guān)地定位圖像采集的基準(zhǔn)面，在與由測試圖形限定的載物片或薄片的基準(zhǔn)面相關(guān)的限定厚度處執(zhí)行所述圖像采集，-分析板包括圍繞樣本定位的至少四個測試圖形，-所述或者每個測試圖形被印制在分析板上，-用于圖像采集的樣本的厚度是可調(diào)節(jié)的，-所述方法還包括將圖像采集期間所采集的圖像的數(shù)據(jù)與處理所采集的圖像期間經(jīng)修改的所采集圖像的數(shù)據(jù)進行疊加的步驟，以便僅產(chǎn)生單個大視野虛擬圖像照片，-根據(jù)灰度級制來執(zhí)行定位在分析板上的樣本的圖像的采集，-所述方法還包括以下步驟-在虛擬分析板上執(zhí)行對所采集圖像的處理，以便獲得樣本的細胞的細胞質(zhì)和/或細胞核的顏色和顏色亮度的虛擬復(fù)原，所述顏色和所述亮度能夠根據(jù)負責(zé)分析的人的偏好而改變，-對樣本的處理是核染色步驟或者細胞學(xué)染色，所述處理布置來使細胞質(zhì)幾乎透明并增強細胞的細胞核和/或細胞質(zhì)的RNA與細胞質(zhì)的對比，-對所采集圖像的處理對應(yīng)于對這些采集圖像的Papanicolaou、Schorr、May Grunwald Giemsa或者Giemsa類型的多色虛擬重顯色或單色類型的顯色，-采集圖像的虛擬重顯色水平是可調(diào)節(jié)的，-所述方法包括顯示虛擬分析板的步驟，-所述方法包括以下步驟-在無需顯示附加數(shù)據(jù)的情況下，自動地移動來自樣本采集的大視野圖像；以及-如果通過自動分析系統(tǒng)檢測到至少一個可能預(yù)示存在病變細胞的異常，則自動地停止移動，-如果檢測到可能預(yù)示存在病變細胞的至少一個異常狀態(tài)則自動停止移動，包括顯示異常處的放大的分析板以及其次顯示所顯示的采樣區(qū)域和/或整個樣本和/或患者上的信息的步驟，在患者身上進行采樣和/或在樣本上執(zhí)行附加檢查的結(jié)果，-所述方法包括放大虛擬分析板以便允許觀察所述板的詳情的步驟。


本發(fā)明的其他方面和優(yōu)點將在閱讀僅作為一個例子給出的并且參照附圖的下列說明后變得顯而易見，在附圖中-圖1是根據(jù)本發(fā)明的用于制備虛擬分析板的方法的不同步驟的示意圖；-圖2是樣本分析板和用于掃描載物片的裝置的示意性剖面圖，以及-圖3是圖示說明分析虛擬板的不同步驟的圖解。
具體實施例方式參見圖1，通過對由計算機系統(tǒng)來輔助其細胞分析的視圖描述了一種制備虛擬分析板2的方法。通過虛擬板2意味著與樣本4有關(guān)的一組成組的信息和數(shù)字數(shù)據(jù)。例如，通過刮取(子宮頸、陰道或者其他刮拭)、通過穿刺器官(胸部、甲狀腺、神經(jīng)節(jié)或者其他)或者進一步通過收集(尿、氣管肺泡灌洗或者其他體液)來獲得樣本4。在第一步驟A期間，樣本例如暫時存放到采樣管或燒瓶6中。在步驟B期間，樣本4定位到分析板8上。以已知方式中，例如通過傾析完成細胞在板8上的沉積。將樣本傾注到傾析室10中，傾析室10的底部通向分析板8。吸收裝置 12允許在細胞沉積到分析板8上時逐漸吸收溶液。這種沉積方法是已知的并且將不詳細地描述。在步驟C期間，樣本經(jīng)歷了通過非常明顯地增強與同一細胞的細胞質(zhì)的對比而旨在標(biāo)記/染色細胞的細胞核、DNA和/或RNA的處理。這種標(biāo)記允許適當(dāng)?shù)胤指罴毎艘员銖男螒B(tài)上研究它們并測定DNA (例如倍性分析)和/或RNA以定位潛在的病變細胞。例如，該標(biāo)記借助于設(shè)有移液管裝置的機器人來自動地完成，所述移液管裝置用于將樣本4放入到溶液中并將細胞懸液沉積到分析板8上。
用于細胞懸液傾析的步驟B可以在如上所述的標(biāo)記/染色步驟C之前或之后完成。該標(biāo)記優(yōu)選利用蘇木紫來完成。可以使用不同于用于DNA定量分析的標(biāo)記物的標(biāo)記物，例如，金絲桃素或者繁殖或病原體的特異性標(biāo)記物，例如在宮頸刮片情況中的人乳頭狀瘤病毒類型的致癌病毒。可以使用現(xiàn)有技術(shù)中使用的其他著色法，但是其具有缺點。因此，可以預(yù)期計量染色，其提供了與DNA的數(shù)量成比例的細胞核染色，這允許對其進行定量分析，并且從而在倍性范圍內(nèi)標(biāo)記和分析病變的細胞。然而，例如當(dāng)其是福爾根O^ulgen)染色反應(yīng)時，該特殊的染色是《技術(shù)上》與巴氏(Papanicolaou)染色不兼容的，并且因此需要在載物片上重新展開細胞，用于由醫(yī)師或?qū)I(yè)技術(shù)人員來分析。某些產(chǎn)業(yè)家已經(jīng)試圖使計量染色法與巴氏染色關(guān)聯(lián)，并且從而已經(jīng)使用了包含勞氏紫的染色劑，并且利用有毒的甲醇來定色，并且特別是在其說明中改進了巴氏染色法，特別是利用其染色質(zhì)看來像是《黑》的細胞核，用于所述細胞核的組分的精細分析，因此在診斷癌癥前期或癌癥狀態(tài)的分析中導(dǎo)致了困難。在步驟D期間，分析板8，其包括通過已知的核染劑或已知的但未修改的細胞染劑來染色以便使得細胞質(zhì)幾乎為透明的樣本4，受白色光14照射，以便借助于圖像采集裝置 16來采集樣本4的圖像。在白色光下的圖像采集賦予了通過核染劑或者經(jīng)修改的細胞染劑來獲取著色的樣本的圖像的可能性，保持細胞質(zhì)為透明的以便增強與細胞核的對比。利用圖像采集裝置16，有可能獲得黑白圖像，更具體而言，以灰度級表示的圖像。 利用這種選擇，與按顏色來執(zhí)行采集相比，有可能具有更快的圖像采集和更好的分辨率。在白色光下采集圖像需要預(yù)先定位基準(zhǔn)面。分析板的該基準(zhǔn)面限定了基準(zhǔn)厚度， 相對于所述測量樣本厚度，并且作為表面和其不平坦度的地形度量。參見圖2，分析板8包括載物片20和定位在載物片20上方的薄片22。待測物的樣本4被定位在載物片20和薄片22之間，并且通過粘合劑M來保持。分析板8的基準(zhǔn)面或者限定在載物片20的頂面，通過厚度&來表示，或者限定在薄片22的頂面，通過厚度&來表示。根據(jù)實施例，通過采集載物片或薄片的圖像來獲得對基準(zhǔn)面的定位，例如在對載物片進行或不進行特殊處理的情況下通過超聲波或光在載物片或薄片上的反射來采集。該處理例如包括使載物片或薄片至少局部地反射。在白色光下采集圖像之前，分析板的基準(zhǔn)面的定位步驟使得可以避免在細胞上的聚焦步驟和用于玻璃薄片的粘合劑的聚合作用或者樣本中存在潛在氣泡的問題。在白色光下采集圖像賦予了在相對于基準(zhǔn)面的不同厚度處獲得用于聚焦步驟的若干平面的可能性， 其次進行處理，以使其最優(yōu)。還賦予了擺脫裝置的水平調(diào)整的問題的可能性。實際上，基準(zhǔn)面的定義允許相對于該平面來《對準(zhǔn)》圖像。因此，相對于板，裝置的調(diào)節(jié)不需要現(xiàn)有技術(shù)中的所述高精度。根據(jù)另一實施例，分析板8包括至少一個測試圖形13，布置測試圖形13，以便在采集樣本的圖像之前定位分析板的基準(zhǔn)面。根據(jù)備選方案，分析板8包括至少四個測試圖形13，布置測試圖形13，以便圍繞樣本均勻地分布，例如四個方位基點。根據(jù)實施例，所述或每個測試圖形13被印制到分析板 8上。根據(jù)另一實施例，所述或每個測試圖形13在載物片或者薄片上附接到分析板8上。此外，為了在掃描期間適當(dāng)?shù)赜^察三維細胞團，在樣本的一個或幾個不同厚度處執(zhí)行圖像采集?？梢栽诓杉斑x擇執(zhí)行圖像采集的所述不同厚度，并且可以相對于基準(zhǔn)面來在由測試圖形或載物片或薄片的表面圖像所限定的分析載物片上定位所述不同厚度。圖像采集裝置16允許以非常高的分辨率來掃描樣本4，并且可以從板8處獲取白色光下的圖像。如許多產(chǎn)業(yè)家提出逐行地掃描分析板8。因此，各幅采集的圖像表示具有預(yù)定寬度的分析板8的條18，例如，選擇小值的寬度以便獲得大數(shù)量的圖像并因此獲得更好的分辨率。圖像并排放置賦予了獲取整個樣本板的圖像或獲取《更大視野》圖像的可能性， 因此獲取整個樣本以形成如圖1中的步驟E中所示的虛擬分析板2。必要時，通過采集，有可能在樣本的不同厚度處獲得整個樣本板的圖像。因此，利用同一裝置并且以非常簡單的方式獲得的圖像是與白色光中的大量信息相關(guān)的樣本4的真實表現(xiàn)。利用裝置16在白色光中獲得的數(shù)字數(shù)據(jù)經(jīng)過計算機處理，以便獲得由圖像形成的經(jīng)修改的虛擬分析板2，所述圖像已經(jīng)經(jīng)歷了 Papanicolaou、Schorr、May Grunwald Giemsa或Giemsa的多色虛擬重著色或者如通常描述的并且本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的細胞學(xué)或形態(tài)分析的旨在給細胞染色的單色類型的顯色。根據(jù)計算機處理模式，虛擬重著色是巴氏著色法，巴氏著色法已知了很長時間，并且在文獻中廣泛描述的，其癥狀學(xué)允許可能識別細胞質(zhì)和例如與存在與癌癥前期或者癌細胞對應(yīng)的細胞核的異常。利用這種重著色，還可能識別不同種類的細胞和其序號以確定樣本的代表性質(zhì)量以及例如確定樣本是否是代表性的。該虛擬重著色允許通過如下所述的細胞分析法來分析虛擬板。當(dāng)巴氏重著色是虛擬的時，可以預(yù)期福爾根類型的著色法沒有任何兼容性問題。細胞分析伴隨有通過委托醫(yī)師或?qū)I(yè)技術(shù)人員利用檢測病變細胞進行樣本圖像檢查，以便提出可能引起更廣泛的檢查乃至治療的診斷。為了質(zhì)量保證的原因，委托醫(yī)師或?qū)I(yè)技術(shù)人員，以便不會完全自動地檢測病變的細胞。參見圖3，詳述了用于觀察經(jīng)歷過重著色的圖像的過程和用于診斷的過程。在步驟F期間，經(jīng)修改的虛擬分析板2與在待測物的不同厚度處的一幅或多幅圖像一起形成的圖像30，已經(jīng)經(jīng)歷虛擬重著色，被投影到例如屏幕的顯示裝置上。可以調(diào)節(jié)用于細胞質(zhì)和細胞核兩者的顏色和其強度的虛擬恢復(fù)，以便就著色的強度和品質(zhì)而言，盡可能密切地與每位讀者，即醫(yī)師或?qū)I(yè)技術(shù)人員的習(xí)慣一致。在操作者授權(quán)之后，例如通過在步驟F期間致動虛擬按鈕32，通過將關(guān)于患者的信息31輸入到數(shù)據(jù)庫中并使其與不同厚度處的圖像、與在其上提取樣本4的患者對應(yīng)的樣本4相關(guān)聯(lián)，可以這一信息與虛擬分析板2關(guān)聯(lián)。在步驟G期間，在醫(yī)師或?qū)I(yè)技術(shù)人員的注視下移動樣本的圖像34以用于檢查。 圖像34的移動是由計算機系統(tǒng)來組織并且自動地完成的。在不顯示附加數(shù)據(jù)的情況下，在整個區(qū)域顯示每幅圖像34，以便避免醫(yī)師或?qū)I(yè)技術(shù)人員在分析(《篩查》)期間分心，并且這針對計算的預(yù)定時間，以便醫(yī)師或?qū)I(yè)技術(shù)人員觀察每幅投影圖像的全體并檢測圖像中可能的異常。每幅圖像的顯示時間可以由醫(yī)師或?qū)I(yè)技術(shù)人員根據(jù)其技術(shù)或者根據(jù)其他信息來調(diào)整。例如，如果為患者提取的樣本具有顯示病變細胞的更大概率的《風(fēng)險》，則可以調(diào)整顯示時間使得更長以便對樣本進行更徹底的檢查。因此，被移動的圖像34是經(jīng)修改的虛擬分析板和不同厚度處的圖像形成的那些圖像，其已經(jīng)經(jīng)歷了 Papanicolaou、Schorr、May Grunwald Giemsa 或者 Giemsa 類的重著色。在這種著色法下的圖像34賦予了檢測可能存在例如與存在癌癥前期或者癌細胞對應(yīng)的異常的可能性，并且其已知了很久，并在文獻中被廣泛地描述，并且檢查樣本是否實際上符合Bethesda標(biāo)準(zhǔn)，例如處在在宮頸刮片的范圍內(nèi)。軟件還可以采集關(guān)于細胞展開的其他信息。這一信息通過計算機系統(tǒng)與圖像(或者不同厚度處的圖像)鏈接以便完成虛擬分析板2。醫(yī)師或?qū)I(yè)技術(shù)人員觀察屏幕上的每幅顯示的圖像，并確定是否存在異常。該檢測還可以通過借助于圖像分析軟件包的計算機系統(tǒng)來自動地執(zhí)行。在當(dāng)步驟H期間既不是醫(yī)師或?qū)I(yè)技術(shù)人員也不是細胞分析計算機系統(tǒng)來檢測顯示圖像中的任何異常的情況下，在預(yù)先調(diào)整的顯示時間已經(jīng)過去之后診斷方法通過投影下一圖像而繼續(xù)。根據(jù)細胞分析的實施例，提供了一步驟，在該步驟期間，計算機系統(tǒng)自動地停止在沒有檢測到異常的圖像上的圖像移動并且等待由醫(yī)師或?qū)I(yè)技術(shù)人員來驗證以便重新開始移動。通過停止在所述圖像上，有可能詳細地分析所謂的參考圖像以便確定什么樣的是被認為是正常的樣本。在所謂的正常圖像上的該停止可以隨機地實現(xiàn)或者在一定數(shù)量的顯示圖像之后實現(xiàn)。以下結(jié)合具有異常的圖像的分析來說明圖像的詳細分析。如果醫(yī)師或?qū)I(yè)技術(shù)人員和/或計算機系統(tǒng)在圖像40中發(fā)現(xiàn)異常，則在步驟I期間通過中斷圖像36的移動而繼續(xù)執(zhí)行所述方法。如果計算機系統(tǒng)檢測到異常，則由計算機系統(tǒng)自動地實行中斷移動，或者如果醫(yī)師或?qū)I(yè)技術(shù)人員更詳細地觀察圖像或者其發(fā)現(xiàn)異常則其手動地實行中斷移動。然后，利用更大的放大級來顯示圖像42以便詳細地觀察異常。例如，在移動期間可以利用xlO的放大級來實行圖像的顯示，而在當(dāng)檢測到異常的情況中，可以加倍(x20)， 如圖3的步驟J中所示。包含異常的圖像的顯示可能伴隨有關(guān)于顯示樣本面積和/或整個樣本和/或患者的信息顯示44，在患者上提取樣本和/或?qū)颖具M行附加檢查的結(jié)果，特別是分子生物學(xué)檢查。在虛擬重著色下顯示的并且其移動已經(jīng)中斷的圖像與在沒有虛擬著色的情況下相同區(qū)域的圖像有關(guān)。通過該顯示，對于醫(yī)師或?qū)I(yè)技術(shù)人員而言，有可能考慮其對所顯示的細胞的分析并且確認其中的某些是否可能是病變的。此外，利用在沒有虛擬重著色情況下的圖像顯示，可以同時顯示其他信息，例如定量數(shù)據(jù)、譜或者與提取樣本的患者有關(guān)的信息等，通過該精密分析與自動停止移動結(jié)合，有可能減少假陰性的數(shù)量。此外，在宮頸刮片的范圍內(nèi)，例如，通過醫(yī)師或?qū)I(yè)技術(shù)人員檢查過的系統(tǒng)所選擇區(qū)域的診斷，在該情況下有可能維持細胞學(xué)診斷的高度特異性。因此，篩查涂抹物的敏感性和特異性變的更緊密和更尚ο只得由醫(yī)師或?qū)I(yè)技術(shù)人員例如通過按壓確認按鈕46來控制重新開始移動。這提供了確保如果移動自動地終止，則由醫(yī)師或?qū)I(yè)技術(shù)人員已經(jīng)檢查過可能具有異常的顯示圖像。同樣應(yīng)用于所顯示的正常圖像。在步驟F到步驟J的過程期間，醫(yī)師或?qū)I(yè)技術(shù)人員可以在具有虛擬重著色的區(qū)域和沒有虛擬重著色的區(qū)域上自由地執(zhí)行顯示圖像的特殊區(qū)域的放大。醫(yī)師或?qū)I(yè)技術(shù)人員還可以依照要求將具有虛擬重著色的圖像轉(zhuǎn)換為沒有虛擬重著色的圖像。如上所述的方法允許快速和高效地分析樣本，減小《假陰性》的風(fēng)險。此外，由于識別了與治療和顯示的細胞和/或組織制劑的虛擬圖像有關(guān)的顏色和其亮度，所以在診斷質(zhì)量方面并且尤其是專一性而言，保護了醫(yī)師或?qū)I(yè)技術(shù)人員的經(jīng)驗。利用所述方法，其還可能使所述分析板適應(yīng)醫(yī)師或?qū)I(yè)技術(shù)人員優(yōu)選負責(zé)分析。 實際上，醫(yī)師或?qū)I(yè)技術(shù)人員可以按其偏好選擇虛擬分析板的亮度和顏色。利用該方法，還可能以灰度級獲得比顏色采集更佳分別率的圖像。此外，所述方法允許借助于基準(zhǔn)面來在樣本的不同厚度處采集精確的圖像而維持清晰，通過其有可能擺脫裝置的水平調(diào)整的問題。因此，即使裝置不允許因沒有調(diào)節(jié)而充分地水平移動載物片，但是有可能獲得可以解釋的高質(zhì)量圖像。裝置的調(diào)節(jié)不再需要所述高精度，所述方法提供了來得及趕上數(shù)字化的第一解決法。以灰度級進行采集還允許比顏色更快的采集，特別是在樣本的不同厚度處的采集期間。實際上，當(dāng)醫(yī)師或?qū)I(yè)技術(shù)人員負責(zé)分析的愿望以在細胞的厚度(10微米)中每隔2 微米進行一次拍攝時，獲得物長物倍，其對單個樣本來說太長。在灰度級方面，實質(zhì)上減少了采集時間。最后，允許虛擬分析板的重著色的這種方法允許節(jié)約染色劑同時確?？焖俸透咝У胤治鰳颖?。
權(quán)利要求
1.一種用于針對定位在分析板(8)上的細胞學(xué)樣本(4)制備虛擬分析板O)以允許對所述樣本進行細胞分析的方法，所述方法包括以下步驟-執(zhí)行對所述樣本的處理，執(zhí)行所述處理以允許將所述樣本中病變的細胞與健康的細胞區(qū)分開來，-執(zhí)行對定位在所述分析板(8)上的所述樣本(4)的至少一次第一圖像采集，以便獲得多幅圖像，每幅圖像表示所述分析板的一區(qū)域(18)，所述圖像并排設(shè)置來形成整個所述樣本的圖像，以便創(chuàng)建虛擬分析板0)，其特征在于，其包括以下步驟-定位包括載物片或定位在所述載物片上方的薄片的所述分析板的基準(zhǔn)面，用于采集圖像，所述基準(zhǔn)面是由所述載物片或所述薄片的表面限定的；以及-執(zhí)行至少第二圖像采集，所述第二采集在不同于第一采集的所述樣本的厚度處執(zhí)行， 以獲得與在不同厚度處獲得的樣本的部分對應(yīng)的多幅圖像。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于，通過采集所述載物片或所述薄片的地形圖像來實現(xiàn)對所述分析板的所述基準(zhǔn)面的定位。
3.根據(jù)權(quán)利要求1至2中的任一項所述的制備方法，其特征在于，所述分析板(8)包括至少一個測試圖形(13)，布置其以便定位用于所述圖像采集的與定位在所述分析板上的所述樣本的厚度無關(guān)的所述基準(zhǔn)面，在相對于由所述測試圖形限定的所述載物片或薄片的所述基準(zhǔn)面限定的厚度處執(zhí)行所述圖像采集。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述分析板(8)包括圍繞所述樣本 (4)定位的至少四個測試圖形(13)。
5.根據(jù)權(quán)利要求3至4中的任一項所述的制備方法，其特征在于，所述或每個測試圖形 (13)被印制到所述分析板(8)上。
6.根據(jù)權(quán)利要求1至5中的任一項所述的制備方法，其特征在于，所述圖像采集的所述樣本的厚度是能調(diào)節(jié)的。
7.根據(jù)權(quán)利要求1至6中的任一項所述的制備方法，其特征在于，其還包括將在所述圖像的采集期間所采集圖像的數(shù)據(jù)與在對所采集圖像的處理期間修改的所采集圖像的數(shù)據(jù)疊加，以便僅產(chǎn)生單個大視野虛擬圖像照片。
8.根據(jù)權(quán)利要求1至7中的任一項所述的制備方法，其特征在于，根據(jù)灰度級等級來執(zhí)行對定位在所述分析板(8)上的所述樣本的所述圖像采集。
9.根據(jù)權(quán)利要求1至8中的任一項所述的制備方法，其特征在于，其還包括以下步驟-在虛擬分析板( 上執(zhí)行對所采集圖像的處理，以便獲得所述樣本的細胞的細胞質(zhì)和/或細胞核的顏色和顏色強度的虛擬復(fù)原，所述顏色和所述強度能夠根據(jù)負責(zé)所述分析的人的偏好進行修改。
10.根據(jù)權(quán)利要求1至9中的任一項所述的制備方法，其特征在于，對所述樣本的處理是核染色步驟或細胞學(xué)染色，布置所述處理以便使得所述細胞質(zhì)幾乎透明并增強所述細胞的細胞核和/或細胞質(zhì)RNA與所述細胞質(zhì)之間的對比。
11.根據(jù)權(quán)利要求9或10中的任一項所述的制備方法，其特征在于，對所采集圖像的所述處理對應(yīng)于對這些所采集圖像的Papanicolaou、khorr、May Grunwald Giemsa或Giemsa 的多色重著色或單色類型的顯色。
12.根據(jù)權(quán)利要求9到11中的任一項所述的制備方法，其特征在于，所采集圖像的虛擬重著色水平是能調(diào)節(jié)的。
13.根據(jù)權(quán)利要求1到12中的任一項所述的制備方法，其特征在于，其包括用于顯示所述虛擬分析板的步驟。
14.根據(jù)權(quán)利要求13所述的制備方法，其特征在于，其包括以下步驟-在無需顯示附加數(shù)據(jù)的情況下，自動地移動所采集的所述樣本的大視野圖像，以及-如果通過自動分析系統(tǒng)檢測到可能預(yù)示存在病變細胞的至少一個異常，則自動地停止所述移動。
15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的制備方法，其特征在于，如果檢測到可能預(yù)示存在病變細胞的至少一個異常則自動停止所述移動，包括如下步驟顯示在所述異常處放大的所述分析板以及其次顯示關(guān)于所顯示的采樣區(qū)域的信息、和/或關(guān)于整個樣本的信息、和/或關(guān)于在其身上獲取所述樣本的患者的信息、和/或關(guān)于在所述樣本上獲得的附加檢查的結(jié)果的 fn息ο
16.根據(jù)權(quán)利要求13至15中的任一項所述的制備方法，其特征在于，其還包括放大所述虛擬分析板以便允許觀察所述板的細節(jié)的步驟。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種包括以下步驟的方法執(zhí)行對樣本的處理，執(zhí)行所述處理以用于在樣本(4)中將病變的細胞與健康的細胞區(qū)分開來；執(zhí)行設(shè)置在分析板(8)上的樣本(4)的至少一個第一圖像采集，以便獲得多幅圖像，每幅圖像表示分析板的一區(qū)域(18)，所述圖像并排設(shè)置來形成整個樣本的圖像以產(chǎn)生一虛擬分析板(2)；定位包括載物片和設(shè)置在該載物片上面用于圖像采集的薄片的分析板的基準(zhǔn)面，所述基準(zhǔn)面通過所述載物片或者薄片的表面限定；以及執(zhí)行至少第二圖像采集，在不同于與第一采集有關(guān)的樣本的厚度處執(zhí)行所述第二采集，以便獲得許多與在不同厚度處的樣本剖面對應(yīng)的圖像。
文檔編號G02B21/36GK102369473SQ201080014636
公開日2012年3月7日 申請日期2010年1月25日 優(yōu)先權(quán)日2009年2月13日
發(fā)明者E·佩爾蒂埃 申請人:諾瓦西特公司