本發(fā)明屬于納米復(fù)合材料及其應(yīng)用技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種金納米星/磷酸鈣納米粒子及其制備方法。

背景技術(shù)：

癌癥給人類的健康帶來嚴(yán)重的威脅,常規(guī)的治療方法(如手術(shù)切除和化療)有很大的副作用?；诮t外光—熱能轉(zhuǎn)換的光熱診療技術(shù)是一種副作用小的癌癥治療新方法,引起了高度重視。光熱轉(zhuǎn)換材料是一種能吸收某種光尤其是近紅外光（因?yàn)樗牟ㄩL(zhǎng)范圍賦予了它的獨(dú)特光學(xué)安全性質(zhì)，可透過人體皮膚和深組織，是病灶部位的天窗）通過等離子體共振或者能量躍遷帶產(chǎn)生的熱，從而在局部導(dǎo)致高溫，最終殺死腫瘤細(xì)胞的功能材料，光熱轉(zhuǎn)化的功能材料由于能將近紅外光轉(zhuǎn)換成高熱而倍受青睞，在生物應(yīng)用上成為研究熱點(diǎn)。很多生物材料學(xué)者致力于合成這種材料，將它應(yīng)用于光熱治療等。光熱轉(zhuǎn)換材料在生物醫(yī)學(xué)上具有很大的應(yīng)用潛能。

眾所周知，金納米材料具有一定的光熱轉(zhuǎn)換效應(yīng)。如實(shí)心的金納米棒，納米籠及納米星等都可將吸收的光能量通過反射轉(zhuǎn)化為熱能、進(jìn)而產(chǎn)生高溫，有望實(shí)現(xiàn)一種新型的療法—光熱療法，逐漸開始吸引人們的興趣。進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，金納米星因其具有獨(dú)特的表面等離子體增強(qiáng)效應(yīng)而使熱轉(zhuǎn)換效率明顯提高。表面等離子體（surfaceplasmons，sps）是指在金屬表面存在的自由振動(dòng)的電子與光子相互作用而產(chǎn)生的沿著金屬表面（截面）傳播的電子疏密波，它能夠被電子或光波激發(fā)，進(jìn)而增強(qiáng)周邊熒光發(fā)射及產(chǎn)生光熱轉(zhuǎn)換效應(yīng)，通過高溫可以有效地殺死癌細(xì)胞，從而達(dá)到治療的目的。但納米粒子作為異物進(jìn)入機(jī)體，會(huì)引起一系列機(jī)體反應(yīng)，影響固有免疫細(xì)胞的活性，促進(jìn)免疫分子的分泌，而且納米粒子對(duì)抗原遞呈細(xì)胞具有活化作用，可促進(jìn)其對(duì)抗原的遞呈，還可誘導(dǎo)激活抗原特異性cd8+t細(xì)胞免疫應(yīng)答，從而介導(dǎo)抗原特異性細(xì)胞毒效應(yīng)。此外，納米粒子可增強(qiáng)體液免疫應(yīng)答，并導(dǎo)致嚴(yán)重的炎癥反應(yīng)。而選用高生物相容性納米粒子為藥物載體則會(huì)在最大程度上避免這些問題的產(chǎn)生。磷酸鈣是人體中骨骼與牙齒的主要成份，并且在血液中存在一定量的鈣離子與磷酸根離子，因此磷酸鈣納米粒子具體極好的生物相容性，可作為藥物等的理想載體材料。所以如何將高生物相容性的磷酸鈣和光熱轉(zhuǎn)換功能的金納米星復(fù)合在一起，開發(fā)一種簡(jiǎn)單易行的方法，制備單分散新型多功能金納米星/磷酸鈣納米粒子是一個(gè)具有挑戰(zhàn)性的新課題。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明目的是提供一種金納米星/磷酸鈣納米粒子及其制備方法，利用該方法制備的金納米星/磷酸鈣納米粒子具有分散性好、粒徑均勻、光熱轉(zhuǎn)換效率高、生物相容性好等特點(diǎn)，可用于藥物輸送及生物成像等領(lǐng)域。

一種金納米星/磷酸鈣納米粒子，它用下述方法制備，包括：

1）將30mm四氯金酸溶液5-10ml、5-20mg氫氧化鈣、5-20mg氫氧化鈉和10-50mg聚丙烯酸依次加入到去離子水25-50ml中，攪拌，直至混合溶液澄清；

2）在磁力攪拌下將20-100ml異丙醇緩慢滴加入步驟1）的混合溶液中，滴加完畢后，向溶液中加入3mm硝酸銀水溶液50-200μl和0.1m抗壞血酸水溶液10-100μl，在室溫條件下攪拌，獲得混合溶液；

3）向步驟2）中的混合溶液中加入5-30mg磷酸氫二氨，經(jīng)室溫?cái)嚢柚筮M(jìn)行離心分離，獲得固體粒子，用去離子水洗滌，獲得金納米星/磷酸鈣復(fù)合結(jié)構(gòu)納米粒子；

所述的步驟1）中的四氯金酸溶液為5-8ml，氫氧化鈣為10-20mg，氫氧化鈉8-10mg，聚丙烯酸為20-40mg；所述的步驟2）中的異丙醇為50-80ml，硝酸銀水溶液100-200μl，抗壞血酸水溶液10-100μl，攪拌時(shí)間2-5h；所述的步驟3）中的磷酸氫二氨為10-20mg，攪拌時(shí)間12-20h，離心分離轉(zhuǎn)速為6000-8000rpm，時(shí)間5-8min；

所述的步驟1）中的四氯金酸溶液為5ml，氫氧化鈣為10mg，氫氧化鈉8mg，聚丙烯酸為20mg，去離子水為25ml；所述的步驟2）中的異丙醇為50ml，硝酸銀水溶液100μl，抗壞血酸水溶液50μl，攪拌時(shí)間2h；所述的步驟3）中的磷酸氫二氨為10mg，攪拌時(shí)間12h，離心分離轉(zhuǎn)速為6000rpm，時(shí)間8min；

所述的步驟1）中的四氯金酸溶液為8ml，氫氧化鈣為20mg，氫氧化鈉8mg，聚丙烯酸為40mg，去離子水為25ml；所述的步驟2）中的異丙醇為50ml，硝酸銀水溶液200μl，抗壞血酸水溶液10μl，攪拌時(shí)間2h；所述的步驟3）中的磷酸氫二氨為20mg，攪拌時(shí)間15h，離心分離轉(zhuǎn)速為8000rpm，時(shí)間8min；

所述的步驟1）中的四氯金酸溶液為7ml，氫氧化鈣為15mg，氫氧化鈉8mg，聚丙烯酸為20mg，去離子水為25ml；所述的步驟2）中的異丙醇為50ml，硝酸銀水溶液100μl，抗壞血酸水溶液50μl，攪拌時(shí)間3h；所述的步驟3）中的磷酸氫二氨為15mg，攪拌時(shí)間12h，離心分離轉(zhuǎn)速為7000rpm，時(shí)間6min。

一種金納米星/磷酸鈣復(fù)合結(jié)構(gòu)納米粒子在制備藥物載體及生物成像劑方面的應(yīng)用。

本發(fā)明提供了一種金納米星/磷酸鈣納米粒子，它用下述方法制備，包括：將30mm四氯金酸溶液5-10ml、5-20mg氫氧化鈣、5-20mg氫氧化鈉和10-50mg聚丙烯酸依次加入到去離子水25-50ml中，攪拌，直至混合溶液澄清；在磁力攪拌下將20-100ml異丙醇緩慢滴加入混合溶液中，滴加完畢后，向溶液中加入3mm硝酸銀水溶液50-200μl和0.1m抗壞血酸水溶液10-100μl，在室溫條件下攪拌；向上述混合溶液中加入5-30mg磷酸氫二氨，經(jīng)室溫?cái)嚢柚筮M(jìn)行離心分離，獲得固體粒子，用去離子水洗滌，獲得金納米星/磷酸鈣復(fù)合結(jié)構(gòu)納米粒子；本發(fā)明合成方法簡(jiǎn)單，采用一鍋法合成，得到的金納米星/磷酸鈣納米粒子粒徑均勻、分散性好，具有良好的生物相容性，可用于藥物輸送及生物成像；金納米星/磷酸鈣納米粒子光熱轉(zhuǎn)換效率高，在藥物輸送的同時(shí)實(shí)現(xiàn)腫瘤部位熱成像。

附圖說明

圖1單分散金納米星/磷酸鈣復(fù)合結(jié)構(gòu)納米粒子透射電鏡圖片；

圖2單個(gè)金納米星/磷酸鈣復(fù)合結(jié)構(gòu)納米粒子的透射電鏡圖片（a）；金納米星/磷酸鈣復(fù)合結(jié)構(gòu)納米粒子高分辨透射電鏡圖片（b）；

圖3金納米星/磷酸鈣復(fù)合結(jié)構(gòu)納米粒子面電鏡圖片；

圖4hela細(xì)胞在不同濃度的納米粒子溶液培養(yǎng)24h后的細(xì)胞活性結(jié)果；

圖5注射pbs和納米粒子的荷瘤小鼠，用808nm近紅外激光照射后的紅外熱成像圖；

圖6處理10天后從小鼠體內(nèi)剖出的腫瘤圖片。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1單分散金納米星/磷酸鈣復(fù)合結(jié)構(gòu)納米粒子的制備方法

取5mlhaucl4(30mm)溶液、10mg氫氧化鈣、8mg氫氧化鈉和20mg聚丙烯酸先后加入到25ml去離子水中，攪拌混合均勻，直至溶液澄清。隨后在磁力攪拌下將50ml異丙醇緩慢滴加入溶液中，滴加完畢后再向溶液中加入100μl(3mm)硝酸銀水溶液和50μl(0.1m)抗壞血酸水溶液，在25^oc條件下攪拌反應(yīng)2h。然后，再向溶液中加入10mg磷酸氫二氨，室溫?cái)嚢?2h，隨后對(duì)溶液進(jìn)行離心分離（6000rpm，8min），所得固體再用去離子水洗滌數(shù)次，即得金納米星/磷酸鈣復(fù)合結(jié)構(gòu)納米粒子。

實(shí)施例2單分散金納米星/磷酸鈣復(fù)合結(jié)構(gòu)納米粒子的制備方法

取8mlhaucl4(30mm)溶液、20mg氫氧化鈣、8mg氫氧化鈉和40mg聚丙烯酸先后加入到35ml去離子水中，攪拌混合均勻，直至溶液澄清。隨后在磁力攪拌下將50ml異丙醇緩慢滴加入溶液中，滴加完畢后再向溶液中加入200μl(3mm)硝酸銀水溶液和10μl(0.1m)抗壞血酸水溶液，在25^oc條件下攪拌反應(yīng)2h。然后，再向溶液中加入20mg磷酸氫二氨，室溫?cái)嚢?5h，隨后對(duì)溶液進(jìn)行離心分離（8000rpm，8min），所得固體再用去離子水洗滌數(shù)次，即得金納米星/磷酸鈣復(fù)合結(jié)構(gòu)納米粒子。

實(shí)施例3單分散金納米星/磷酸鈣復(fù)合結(jié)構(gòu)納米粒子的制備方法

取7mlhaucl4(30mm)溶液、15mg氫氧化鈣、8mg氫氧化鈉和20mg聚丙烯酸先后加入到25ml去離子水中，攪拌混合均勻，直至溶液澄清。隨后在磁力攪拌下將50ml異丙醇緩慢滴加入溶液中，滴加完畢后再向溶液中加入100μl(3mm)硝酸銀水溶液和50μl(0.1m)抗壞血酸水溶液，在25^oc條件下攪拌反應(yīng)3h。然后，再向溶液中加入15mg磷酸氫二氨，室溫?cái)嚢?2h，隨后對(duì)溶液進(jìn)行離心分離（7000rpm，6min），所得固體再用去離子水洗滌數(shù)次，即得金納米星/磷酸鈣復(fù)合結(jié)構(gòu)納米粒子。