本發(fā)明屬于食用菌栽培領(lǐng)域，尤其涉及一種側(cè)耳屬食用菌快速增殖營養(yǎng)液及其栽培種的預(yù)處理方法。

背景技術(shù)：

食用菌出菇袋接種是食用菌生產(chǎn)中一個重要的技術(shù)環(huán)節(jié)，接種速度、接種質(zhì)量關(guān)系到出菇袋成品率、菌絲生長速度、質(zhì)量及最終的生物學(xué)轉(zhuǎn)化率。目前常用的出菇袋接種方法主要有超凈工作臺接種、人工接種箱接種，它們的不足之處在于：

(1)接種場所每天都需要用紫外線燈輻射處理空氣或者用甲醛、苯酚等熏蒸。輻射處理及化學(xué)熏蒸殺死空氣中微生物的同時，對接種人員的身體也有一定程度的傷害，同時超凈工作臺投入成本較高，普通菇農(nóng)也難以承受。

(2)由于超凈工作臺及接種箱工作界面有限，接種操作時菌袋進(jìn)出超凈臺與接種箱，以及菌袋接種時開口、封口耗費(fèi)時間較多，這些都降低了接種速度。

(3)表面長滿菌種的栽培種放于新培養(yǎng)基上時，由于接種時菌塊的切割，菌絲體受到一定的傷害，在新培養(yǎng)基上需要有5-7天的適應(yīng)期才能恢復(fù)生長，這不僅延長了菌絲培養(yǎng)時間，也給雜菌侵染提供了機(jī)會；同時由于袋口通過塞棉花方式封口，透氣性較差，致使菌絲后期生長速度變慢。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種側(cè)耳屬食用菌快速增殖營養(yǎng)液及其栽培種的預(yù)處理方法，該法快速、高產(chǎn)且無害，可提高菌袋接種效率、減少接種時化學(xué)藥劑對工作人員與環(huán)境的影響、縮短菌種定植時間、縮短出菇袋菌絲長滿所用時間。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：

側(cè)耳屬食用菌快速增殖營養(yǎng)液，每1000ml營養(yǎng)液中含有蔗糖3-5g，海藻糖5g，葡萄糖0.5-1g，綠原酸0.05-0.1g，VB₂0.05g，VB₆0.05g，余量為水，pH7.0。

側(cè)耳屬食用菌快速增殖培養(yǎng)基，包括栽培種培養(yǎng)基、菌絲快速增殖營養(yǎng)液和出菇袋培養(yǎng)基，按以下配方制成：

栽培種培養(yǎng)基，每1000g培養(yǎng)基中含有桑枝200-300g、甘蔗渣200-300g、棉籽殼200-300g、玉米芯100-200g、米糠40-80g、泥炭土0-50g、石膏粉5-20g、過磷酸鈣5-20g g，海藻糖5-20g，綠原酸0.01-1g，余量為水；

菌絲快速增殖營養(yǎng)液，每1000ml營養(yǎng)液中含有蔗糖3-5g，海藻糖5g，葡萄糖0.5-1g，綠原酸0.05-0.1g，VB₂0.05g，VB₆0.05g，余量為水，pH7.0；

出菇袋培養(yǎng)基，每1000g培養(yǎng)基中含有桑枝250-450g、甘蔗渣200-300g、棉籽殼100-250g、玉米芯150-250g、石膏粉5-20g、過磷酸鈣5-20g，綠原酸0.01-1g，余量為水。

側(cè)耳屬食用菌快速增殖培養(yǎng)基，按以下步驟配制：

栽培種培養(yǎng)基，按質(zhì)量稱取各成分，將桑枝、甘蔗渣、棉籽殼、玉米芯、米糠、石膏粉6種成分混合拌勻成混合物，將過磷酸鈣、海藻糖、綠原酸溶于適量水中為混合液，將混合物和混合液混合拌勻，最后加入余量水?dāng)嚢杈鶆?，即得?/p>

菌絲快速增殖營養(yǎng)液，按質(zhì)量稱取各成分，將蔗糖、海藻糖、葡萄糖、綠原酸、VB₂、VB₆6種成分混合，最后加入余量水?dāng)嚢杈鶆?，用KOH溶液調(diào)節(jié)pH至7.0，即得；

出菇袋培養(yǎng)基，按質(zhì)量稱取各成分，將桑枝、甘蔗渣、棉籽殼、玉米芯、石膏粉5種成分混合拌均稱混合物，將過磷酸鈣、綠原酸溶于適量水中為混合液，將混合物和混合液混合拌勻，最后加入余量水?dāng)嚢杈鶆?，即得?/p>

側(cè)耳屬食用菌栽培種的預(yù)處理方法，將在栽培種培養(yǎng)基中長滿菌絲的栽培種菌塊從培養(yǎng)瓶掏出，分成菌種塊；將菌絲快速增殖營養(yǎng)液加入菌塊，并拌勻；拌勻的菌塊放入保鮮膜中，24℃左右培養(yǎng)3-5天，得到增壯的菌種；菌絲快速增殖營養(yǎng)液每1000ml營養(yǎng)液中含有蔗糖3-5g，海藻糖5g，葡萄糖0.5-1g，綠原酸0.05-0.1g，VB₂0.05g，VB₆0.05g，余量為水，pH7.0。

營養(yǎng)液按8ml營養(yǎng)液/100g菌塊的比例添加。

側(cè)耳屬食用菌出菇菌袋接種與封口方法，在普通工作環(huán)境打開出菇袋袋口，將權(quán)利要求4增壯的菌種接種于出菇袋袋口，出菇袋袋口對折，訂書機(jī)封口，接完種的出菇袋在24-26℃的溫度下在培養(yǎng)室培養(yǎng)至菌絲長滿。

接種按料種比例25g菌塊/1kg培養(yǎng)料接入菌塊。

針對目前側(cè)耳屬食用菌栽培存在的問題，發(fā)明人研制了一種側(cè)耳屬食用菌快速增殖營養(yǎng)液，每1000ml菌絲快速增殖營養(yǎng)液中含有蔗糖3-5g，海藻糖5g，葡萄糖0.5-1g，綠原酸0.05-0.1g，VB₂0.05g，VB₆0.05g，余量為水，pH7.0。據(jù)此，發(fā)明人還建立相應(yīng)栽培種的預(yù)處理方法。發(fā)明人利用添加了不同種類糖份、維生素、抗菌劑的增殖營養(yǎng)液對栽培種菌絲進(jìn)行預(yù)處理，增強(qiáng)了菌種本身的活力，縮短了菌絲體定植時間并提高其抗菌力，如此確保了采用開放式接種方式時雜菌污染率的降低。同時，發(fā)明人采用訂書機(jī)透氣式封口方式，加強(qiáng)出菇袋培養(yǎng)時氧氣的供應(yīng)，縮短了菌絲生長周期。應(yīng)用本發(fā)明可實現(xiàn)側(cè)耳屬食用菌栽培快速、高產(chǎn)且無害。

相對于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明的突出優(yōu)點(diǎn)在于：

(1)本發(fā)明不用超凈工作臺與接種箱，在普通工作桌上開放式操作，因此接種速度快，設(shè)備投入成本很低；一個工人平均每小時可接55袋左右，而常規(guī)方法每個工人最多只能接22袋左右。

(2)本發(fā)明無需在接種室照射紫外線、熏甲醛等，對環(huán)境及人體健康有益；

(3)采用本方法接種時，菌絲恢復(fù)生長速度快，菌絲長滿菌袋的時間比常規(guī)方法縮短4-5天，菌袋成品達(dá)90％，總生物轉(zhuǎn)化率達(dá)170％，各項指標(biāo)與超凈臺及接種箱下所接菌袋相當(dāng)；

(4)訂書機(jī)透氣式封口替代常規(guī)的袋口扎繩、塞棉花等封口方法，不僅省工省力，也提高了菌袋的通氣性，加快了菌絲生長；

(5)本發(fā)明適用于各種側(cè)耳屬食用菌，如杏鮑菇、風(fēng)尾菇等。

具體實施方式

實施例1 杏鮑菇生產(chǎn)應(yīng)用

(1)培養(yǎng)基配制

栽培種培養(yǎng)基(用于栽培種菌絲培養(yǎng))——配方：每1000g培養(yǎng)基中含有桑枝320g、甘蔗渣250.0g、棉籽殼200.0g、玉米芯150g、米糠50g、石膏粉10.0g、過磷酸鈣10.0g，海藻糖10g，綠原酸0.05g，余量為水；制法：按質(zhì)量稱取各成分，將桑枝、甘蔗渣、棉籽殼、玉米芯、米糠、石膏粉6種成分混合拌勻成混合物，將過磷酸鈣、海藻糖、綠原酸溶于適量水中為混合液，將混合物和混合液混合拌勻，最后加入余量水?dāng)嚢杈鶆颍吹谩?/p>

菌絲快速增殖營養(yǎng)液(用于栽培種菌絲預(yù)處理)——配方：每1000ml營養(yǎng)液中含有蔗糖5g，海藻糖5g，葡萄糖1g，綠原酸0.05g，VB₂0.05g，VB₆0.05g，余量為水，pH7.0；制法：按質(zhì)量稱取各成分，將蔗糖、海藻糖、葡萄糖、綠原酸、VB₂、VB₆6種成分混合，最后加入余量水?dāng)嚢杈鶆?，用KOH溶液調(diào)節(jié)pH至7.0，即得；其中，綠原酸，VB₂，VB₆均事先配制為1％母液，使用時從母液中抽取。

出菇袋培養(yǎng)基(用于出菇袋菌絲培養(yǎng))——配方：每1000g培養(yǎng)基中含有桑枝320g、甘蔗渣250.0g、棉籽殼200.0g、玉米芯210g、石膏粉10.0g、過磷酸鈣10.0g，綠原酸0.05g，余量為水；制法：按質(zhì)量稱取各成分，將桑枝、甘蔗渣、棉籽殼、玉米芯、石膏粉5種成分混合拌均稱混合物，將過磷酸鈣、綠原酸溶于適量水中為混合液，將混合物和混合液混合拌勻，最后加入余量水?dāng)嚢杈鶆?，即得?/p>

(2)培養(yǎng)基/營養(yǎng)液的分裝、消毒滅菌、接種

將栽培種培養(yǎng)基分裝于500ml的玻璃瓶，每瓶培養(yǎng)料200g，120℃滅菌60分鐘，滅菌后冷卻至室溫，接入大約0.5cm×0.5cm×0.5cm大小的固體母種，28℃室溫下培養(yǎng)，培養(yǎng)時間20天，得到長滿菌絲的栽培種。

將配好的出菇袋培養(yǎng)基分裝到規(guī)格32cm×17cm的聚丙烯塑料袋中，并將一直徑1cm、長20cm的木棒插入培養(yǎng)料中間。每袋裝干料400g；在120℃下消毒滅菌60分鐘，然后取出，冷卻至室溫待用。

將配好的菌絲快速增殖營養(yǎng)液分裝于200ml的玻璃瓶，每瓶100ml溶液，120℃滅菌20分鐘，滅菌后冷卻待用。

(3)栽培種預(yù)處理

將在栽培種培養(yǎng)基中長滿菌絲的栽培種菌塊從培養(yǎng)瓶掏出，分成1-2cm大小的菌種塊；按8ml營養(yǎng)液/100g菌塊的比例，用噴壺以噴霧的方式將菌絲快速增殖營養(yǎng)液加入菌塊，并拌勻；拌勻的菌塊放入500ml大小的保鮮膜中，24℃左右培養(yǎng)3-5天，得到增壯的菌種。

(4)出菇菌袋接種與封口

直接在工作桌面(普通工作環(huán)境，無需超凈工作臺與接種箱)上打開出菇袋袋口，先拔去袋中央的木棒，在袋中央形成一直徑1cm、深約20cm的洞。按料種比例25g菌塊/1kg培養(yǎng)料接入菌塊，將增壯的菌種接種于出菇袋袋口與洞中。出菇袋袋口對折，訂書機(jī)封口，接完種的出菇袋在24-26度的溫度下在培養(yǎng)室培養(yǎng)至菌絲長滿。

(5)出菇管理

將長滿菌絲的菌袋剝?nèi)ニ芰洗?，放入底部帶孔塑料框中，框底鋪一?mm厚的紙板，將菌袋接種一頭向上，垂直放置框中，每框9個菌袋，菌袋之間間隔2-3cm，在塑料框表面蓋一層塑料地膜，室溫控制在25-28℃，維持3-4天。每天掀開薄膜二次以通風(fēng)換氣，每次掀開時間10分鐘。將處理過的菌框移入溫度控制在10-18℃的出菇棚，菌袋表面蓋上1-2cm厚的含水量60％的營養(yǎng)土，蓋土后3天淋一次透水，直到采收。整個出菇期空氣濕度控制在80-90％。結(jié)果見表1。

表1 應(yīng)用本發(fā)明生產(chǎn)杏鮑菇菌袋生長與生物轉(zhuǎn)化率

表中，生物轉(zhuǎn)化率(％)＝子實體鮮重/菌袋培養(yǎng)料干重×100％；接種時只接菌袋的一頭。

從表中可見，三次應(yīng)用本發(fā)明方法進(jìn)行杏鮑菇栽培，累計試驗菌袋5700袋，平均菌接種速度達(dá)56.8袋/人/小時，成品率90.6％，菌絲長滿出菇袋所用時間32.2天，總生物學(xué)轉(zhuǎn)化率167.2％。

實施例2 常規(guī)接種方法與本發(fā)明對比試驗

常規(guī)接種方法1(簡稱常規(guī)1)：采用常規(guī)栽培種配方培養(yǎng)的栽培種，在超凈工作臺上接種；

常規(guī)接種方法2(簡稱常規(guī)2)：采用常規(guī)栽培種配方培養(yǎng)的栽培種，在人工接種箱接種；

常規(guī)接種方法3(簡稱常規(guī)3)：采用常規(guī)栽培種配方培養(yǎng)的栽培種，在消毒房開放式接種；

本發(fā)明接種方法(簡稱本發(fā)明)。

其中，常規(guī)接種方法所用栽培種配方：桑枝32.0％、甘蔗渣25.0％、棉籽殼20.0％、玉米芯15.0％、米糠5.0％、石膏粉1.0％、過磷酸鈣1.0％；常規(guī)接種方法所用出菇袋配方：桑枝32.0％、甘蔗渣25.0％、棉籽殼20.0％、玉米芯21.0％、石膏粉1.0％、過磷酸鈣1.0％。

參照實施例1做好出菇袋培養(yǎng)基，并裝袋(袋規(guī)格17cm×34cm)、滅菌，然后取剛長滿菌絲的栽培種接種，菌袋在25-28℃培養(yǎng)室培養(yǎng)。

菌袋菌絲長滿后，將長滿菌絲的菌袋剝?nèi)ニ芰洗?，放入底部帶孔塑料框中，框底鋪一?mm厚的紙板，將菌袋接種一頭向上，垂直放置框中，每框9個菌袋，菌袋之間間隔2-3cm，在塑料框表面蓋一層塑料地膜，室溫控制在25-28℃，維持3-4天。每天掀開薄膜二次以通風(fēng)換氣，每次掀開時間10分鐘。

將處理過的菌框移入溫度控制在10-18℃的出菇棚，菌袋表面蓋上1-2cm厚的含水量60％的營養(yǎng)土，蓋土后3天淋一次透水，直到采收。整個出菇期空氣濕度控制在80-90％。結(jié)果見表2。

表2 常規(guī)接種方法與本發(fā)明接種方法比較

表中試驗每個處理300袋，重復(fù)3次，接種時只接菌袋的一頭；試驗結(jié)果采用鄧肯氏新復(fù)極差(DMRT)法進(jìn)行分析，數(shù)據(jù)后相同大小寫字母表示在1％和5％水平上差異不顯著；表中生物轉(zhuǎn)化率(％)＝子實體鮮重/菌袋培養(yǎng)料干重×100％。

從表2中可見，在常規(guī)接種方法1、2下，采用常規(guī)栽培種配方培養(yǎng)的栽培種，菌袋成品率達(dá)91.6-93.5％，總生物轉(zhuǎn)化率達(dá)172.4-179.4％；在常規(guī)接種方法3下，采用常規(guī)栽培種配方培養(yǎng)的栽培種，菌袋成品率只有73.4-93.5％，總生物轉(zhuǎn)化率僅123.4％。采用本發(fā)明處理明顯的特點(diǎn)是在菌袋成品率(90.4％)、總生物轉(zhuǎn)化率(170.6％)與在常規(guī)接種方法1、2下相當(dāng)，成品率遠(yuǎn)高于常規(guī)接種方法3，同時菌接種速度(袋/人/小時)遠(yuǎn)高于超凈臺與接種箱下的接種速度，菌絲長滿菌袋的時間縮短4-5天。

試驗表明，應(yīng)用本發(fā)明確實在提高接種速度、縮短菌絲生長時間方面具有一定優(yōu)勢，同時菌袋成品率與生物轉(zhuǎn)化率不受影響。

實施例3 鳳尾菇生產(chǎn)應(yīng)用

(1)培養(yǎng)基配制

栽培種培養(yǎng)基(用于栽培種菌絲培養(yǎng))——配方：每1000g培養(yǎng)基中含有桑枝220g、甘蔗渣250.0g、棉籽殼250.0g、玉米芯150g、米糠60g、泥炭土50g、石膏粉10.0g、過磷酸鈣10.0g，海藻糖10g，綠原酸0.05g，余量為水；制法：按質(zhì)量稱取各成分，將桑枝、甘蔗渣、棉籽殼、玉米芯、米糠、泥炭土、石膏粉6種成分混合拌勻成混合物，將過磷酸鈣、海藻糖、綠原酸溶于適量水中為混合液，將混合物和混合液混合拌勻，最后加入余量水?dāng)嚢杈鶆?，即得?/p>

菌絲快速增殖營養(yǎng)液(用于栽培種菌絲預(yù)處理)——配方：每1000ml營養(yǎng)液中含有蔗糖5g，海藻糖5g，葡萄糖1g，綠原酸0.05g，VB₂0.05g，VB₆0.05g，余量為水，pH7.0；制法：按質(zhì)量稱取各成分，將蔗糖、海藻糖、葡萄糖、綠原酸、VB₂、VB₆6種成分混合，最后加入余量水?dāng)嚢杈鶆颍肒OH溶液調(diào)節(jié)pH至7.0，即得；其中，綠原酸，VB₂，VB₆均事先配制為1％母液，使用時從母液中抽取。

出菇袋培養(yǎng)基(用于出菇袋菌絲培養(yǎng))——配方：每1000g培養(yǎng)基中含有桑枝400g、甘蔗渣250.0g、棉籽殼140.0g、玉米芯210g、石膏粉10.0g、過磷酸鈣10.0g，綠原酸0.05g，余量為水；制法：按質(zhì)量稱取各成分，將桑枝、甘蔗渣、棉籽殼、玉米芯、石膏粉5種成分混合拌均稱混合物，將過磷酸鈣、綠原酸溶于適量水中為混合液，將混合物和混合液混合拌勻，最后加入余量水?dāng)嚢杈鶆颍吹谩?/p>

(2)培養(yǎng)基/培養(yǎng)液的分裝、消毒滅菌、接種

將栽培種培養(yǎng)基分裝于500ml的玻璃瓶，每瓶培養(yǎng)料200g，120℃滅菌60分鐘，滅菌后冷卻至室溫，接入大約0.5cm×0.5cm×0.5cm大小的固體母種，28℃室溫下培養(yǎng)，培養(yǎng)時間20天。

將配好的出菇袋培養(yǎng)基，分裝到規(guī)格32cm×17cm的聚丙烯塑料袋中，并將一直徑1cm、長20cm的木棒插入培養(yǎng)料中間。每袋裝干料400g；在120℃下消毒滅菌60分鐘，然后取出，冷卻至室溫待用。

將配好的菌絲快速增殖營養(yǎng)液分裝于200ml的玻璃瓶，每瓶100ml溶液，120℃滅菌20分鐘，滅菌后冷卻待用；

(3)栽培種預(yù)處理

將在栽培種培養(yǎng)基中長滿菌絲的栽培種菌塊從培養(yǎng)瓶掏出，分成1-2cm大小的菌種塊；按8ml營養(yǎng)液/100g菌塊的比例，用噴壺以噴霧的方式將菌絲快速增殖營養(yǎng)液加入菌塊，并拌勻；拌勻的菌塊放入500ml大小的保鮮膜中，24℃左右培養(yǎng)3-5天，得到增壯的菌種。

(4)出菇菌袋接種與封口

直接在工作桌面(普通工作環(huán)境，無需超凈工作臺與接種箱)上打開出菇袋袋口，先拔去袋中央的木棒，在袋中央形成一直徑1cm、深約20cm的洞。按料種比例25g菌塊/1kg培養(yǎng)料接入菌塊，將增壯的菌種接種于出菇袋袋口與洞中。出菇袋袋口對折，訂書機(jī)封口，接完種的出菇袋在24-26度的溫度下在培養(yǎng)室培養(yǎng)至菌絲長滿。

(5)出菇管理

將塑料袋袋口打開，菌袋垛成菌墻，室溫控制在15-25℃，空氣濕度控制在80-90％。袋口打開后7天左右菇蕾開始形成，繼續(xù)進(jìn)行空氣濕度與溫度的管理，同時菇棚每天通風(fēng)2次，每次20分鐘直至采收。結(jié)果見表3。

表3 應(yīng)用本發(fā)明生產(chǎn)鳳尾菇菌袋生長與生物轉(zhuǎn)化率

表中，接種時只接菌袋的二頭。從表中可見，三次應(yīng)用本發(fā)明方法進(jìn)行鳳尾菇栽培，累計試驗菌袋4600袋，二頭接種平均菌接種速度達(dá)26.4袋/人/小時，成品率91.2％，菌絲長滿出菇袋所用時間33.0天，總生物學(xué)轉(zhuǎn)化率136.1％。