本發(fā)明涉及草菇栽培技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種采收茬數(shù)多的草菇栽培方法。

背景技術(shù)：

食用菌兼具營(yíng)養(yǎng)和藥用價(jià)值。其味道鮮美，具有富含蛋白質(zhì)、碳水化合物、礦物質(zhì)和維生素以及低脂肪等特點(diǎn)，受到廣大消費(fèi)者青睞，市場(chǎng)需求量巨大。草菇又名稻草菇、稈菇、美味草菇、麻菇等，是一種珍貴的食用真菌，富含蛋白質(zhì)、氨基酸、不飽和脂肪酸、多種活性成分、維生素、微量元素和礦物質(zhì)及多糖和核酸等，還具有高活性的大分子物質(zhì)，而且具有醫(yī)療保健作用，在抗腫瘤、抗病毒和降血糖以及降血壓等方面均有輔助療效。食用菌一般都是依靠分解培養(yǎng)基中的粗纖維、粗蛋白生長(zhǎng)的，分解基質(zhì)主要依靠其分泌的酶類(lèi)，如纖維素酶、半纖維酶、木質(zhì)素酶等。胞外酶是食用菌生長(zhǎng)發(fā)育的關(guān)鍵因素之一，然而其分泌量有限，故基質(zhì)的利用率受到一定限制，制約了產(chǎn)量的提高，當(dāng)前，利用生物酶轉(zhuǎn)化生物物質(zhì)以生產(chǎn)酒精或其他化工產(chǎn)品已取得長(zhǎng)足進(jìn)步，而添加外源酶類(lèi)以促進(jìn)基物降解從而提高食用菌對(duì)其基物的利用率，目前還缺少相應(yīng)的應(yīng)用研究。目前草菇的產(chǎn)量較低，而栽培成本不斷上漲，經(jīng)濟(jì)效益難以提高。

辛宇在《兩種食用菌栽培基質(zhì)中酶制劑的施用效果研究》一文中在食用菌栽培過(guò)程中投入一定量的外源酶促進(jìn)其對(duì)基質(zhì)的分解，提高基質(zhì)的利用率，以期達(dá)到提高產(chǎn)量或縮短生長(zhǎng)周期的目的。作者選取草菇和杏鮑菇為試驗(yàn)材料，將不同濃度的酶制劑分別加入到草菇栽培料（一次發(fā)酵前和一次發(fā)酵后）和杏鮑菇的栽培料中，結(jié)果表明，在一次發(fā)酵前添加0.5%酸性纖維素酶、0.5%中性纖維素酶和0.25%半纖維素酶的酶制劑，其菌絲及原基的性狀指標(biāo)、菌絲生長(zhǎng)速度、菇蕾大小及生物學(xué)效率的綜合評(píng)價(jià)指標(biāo)最優(yōu)，有助于草菇產(chǎn)量的提高和品質(zhì)的保證，提高了經(jīng)濟(jì)效益。由上述期刊中可以看出在栽培料中添加外源酶制劑對(duì)草菇的質(zhì)量有所提高，但是液態(tài)酶效價(jià)低、用量大，成本較高，加上精致困難，保存期短，且回收困難，不適宜用于大規(guī)模草菇種植使用，所以必須選擇合適的載體將酶制劑固定在其上，提高酶的利用率，同時(shí)減少外源性物質(zhì)對(duì)草菇的污染，實(shí)現(xiàn)酶的回收和重復(fù)利用，達(dá)到連續(xù)化操作、降低生產(chǎn)成本的目的。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明目的就是為了彌補(bǔ)已有技術(shù)的缺陷，提供一種采收茬數(shù)多的草菇栽培方法。

本發(fā)明是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：

一種采收茬數(shù)多的草菇栽培方法，由下列重量份的原料制備制成：稻草47-55、板栗葉20-25、濾泥10-13、花生殼16-18、石灰1.5-2、腐熟的雞糞3-4、EM菌劑0.3-0.4、石膏1-1.2、殼聚糖3.5-4、錳鐵氧體2.4-2.8、石蠟2.3-2.5、司盤(pán)80 4.3-4.5、吐溫80 1.1-1.4、3%戊二醛0.2-0.4、木質(zhì)素酶0.5-0.7、酸性纖維素酶0.4-0.6、中性纖維素酶0.4-0.6、半纖維素酶0.2-0.4、稀氫氧化鈉適量、丙酮適量、無(wú)水乙醇適量、蒸餾水適量。

所述一種采收茬數(shù)多的草菇栽培方法，由下列具體步驟制成：

（1）將脫乙酰度為94%的殼聚糖加到體積濃度為2%的乙酸溶液中制成4wt%的殼聚糖溶液，再加入錳鐵氧體于40KHz下超聲15-25min后待用；

（2）將液體石蠟、司盤(pán)80和吐溫80加到燒瓶中，以300r/min的轉(zhuǎn)速攪拌15-20min，分散均勻后緩慢加入步驟（1）制備的產(chǎn)物，以1000r/min的轉(zhuǎn)速持續(xù)攪拌30-50min，然后加入3%的戊二醛溶液于50-60℃下反應(yīng)1-1.5h，用稀氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值為9-10，升高溫度至70℃繼續(xù)反應(yīng)2-2.5h，反應(yīng)結(jié)束后用無(wú)水乙醇、蒸餾水洗滌數(shù)次，用磁鐵分離產(chǎn)物，置于40℃烘箱中干燥，粉碎后備用；

（3）將木質(zhì)素酶、酸性纖維素酶、中性纖維素酶和半纖維素酶分別用蒸餾水稀釋成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.8%、0.5%、0.5%、0.25%酶溶液，將步驟（3）制備的產(chǎn)物加到不同酶制劑的溶液中，在30℃轉(zhuǎn)速為120rpm的搖床內(nèi)反應(yīng)4-5h，反應(yīng)結(jié)束后用永久磁鐵分離，用蒸餾水洗滌多次后室溫自然干燥備用；

（4）將干稻草切成2-5cm的大小，用1%的石灰水預(yù)濕，將板栗葉、濾泥、花生殼、石膏和步驟（3）制備的產(chǎn)物混合攪拌均勻成混合料，然后在300高斯以上的磁場(chǎng)中將預(yù)濕后的稻草鋪在最下層，再均勻的撒上一層混合料、石灰、腐熟的雞糞和EM菌劑，堆到10-12層，最上面撒些石灰覆蓋稻草，蓋上薄膜，待料溫升至70℃時(shí)，過(guò)10h后翻堆進(jìn)行巴氏消毒，翻堆后料溫再次達(dá)到65℃時(shí)再經(jīng)10h后播種，此時(shí)控制培養(yǎng)料的含水量在70-75%之間，pH值為7.5-8；

（5）當(dāng)步驟（4）制備的培養(yǎng)料料溫降至38℃時(shí)接種草菇菌種，將菌種均勻的撒在培養(yǎng)料上，接種量以覆蓋料面為宜，菌絲期使料溫保持在32-35℃，相對(duì)濕度為80-85℃，出菇期料溫控制在30-32℃，相對(duì)濕度控制在90-95℃，給予適宜光照和氧氣，定期采收即可。

本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)是：食用菌的栽培規(guī)律不僅受其外在特性的影響，更因其內(nèi)在的本質(zhì)而產(chǎn)生變化，酶是具有生物催化功能的生物大分子，在活細(xì)胞內(nèi)合成的具有高效、高度專(zhuān)一的催化活性的蛋白質(zhì)，食用菌生長(zhǎng)發(fā)育過(guò)程中菌絲不斷向其周?chē)姝h(huán)境分泌多種胞外酶，將栽培基質(zhì)中的纖維素大分子物質(zhì)降解成小分子物質(zhì)，以便吸收，胞外酶是食用菌生長(zhǎng)發(fā)育的關(guān)鍵因素之一，然而其分泌量有限，故基質(zhì)的利用率受到一定限制，制約了產(chǎn)量的提高，本發(fā)明利用殼聚糖廉價(jià)易得、無(wú)毒、可生物降解的特點(diǎn)，同時(shí)具有良好的生物相容性、富含氨基、羥基等基團(tuán)、容易修飾的優(yōu)點(diǎn)，利用殼聚糖包埋錳鐵氧體實(shí)現(xiàn)磁性化，通過(guò)共價(jià)、交聯(lián)反應(yīng)固定纖維素酶和木質(zhì)素酶，負(fù)載量高，穩(wěn)定性好，避免了酶與其他物質(zhì)接觸，使其活力降低，效果有限，并且制備的酶載體能夠在外加磁場(chǎng)作用下分離回收，穩(wěn)定性好，便于重復(fù)利用，并且本發(fā)明在磁場(chǎng)的作用下配置培養(yǎng)料，通過(guò)磁場(chǎng)的作用使培養(yǎng)料的結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，分子結(jié)夠增大，滲透壓增大，蒸餾水的溶氧量增大，有益于培養(yǎng)料的生物發(fā)酵，使有益物質(zhì)能夠快速的被草菇菌絲細(xì)胞吸收，促進(jìn)生長(zhǎng)，本發(fā)明提供的草菇栽培方法培養(yǎng)料病原雜菌減少，營(yíng)養(yǎng)容易被吸收，菌絲粗壯濃白，長(zhǎng)勢(shì)好，抗逆性強(qiáng)，原基形成多，草菇商品性好，產(chǎn)量高，應(yīng)用前景廣泛。

具體實(shí)施方式

一種采收茬數(shù)多的草菇栽培方法，由下列重量份（公斤）的原料制備制成：稻草47、板栗葉20、濾泥10、花生殼16、石灰1.5、腐熟的雞糞3、EM菌劑0.3、石膏1、殼聚糖3.5、錳鐵氧體2.4、石蠟2.3、司盤(pán)80 4.3、吐溫80 1.1、3%戊二醛0.2、木質(zhì)素酶0.5、酸性纖維素酶0.4、中性纖維素酶0.4、半纖維素酶0.2、稀氫氧化鈉適量、丙酮適量、無(wú)水乙醇適量、蒸餾水適量。

所述一種采收茬數(shù)多的草菇栽培方法，由下列具體步驟制成：

（1）將脫乙酰度為94%的殼聚糖加到體積濃度為2%的乙酸溶液中制成4wt%的殼聚糖溶液，再加入錳鐵氧體于40KHz下超聲15min后待用；

（2）將液體石蠟、司盤(pán)80和吐溫80加到燒瓶中，以300r/min的轉(zhuǎn)速攪拌15min，分散均勻后緩慢加入步驟（1）制備的產(chǎn)物，以1000r/min的轉(zhuǎn)速持續(xù)攪拌30min，然后加入3%的戊二醛溶液于50℃下反應(yīng)1h，用稀氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)pH值為9，升高溫度至70℃繼續(xù)反應(yīng)2h，反應(yīng)結(jié)束后用無(wú)水乙醇、蒸餾水洗滌數(shù)次，用磁鐵分離產(chǎn)物，置于40℃烘箱中干燥，粉碎后備用；

（3）將木質(zhì)素酶、酸性纖維素酶、中性纖維素酶和半纖維素酶分別用蒸餾水稀釋成質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.8%、0.5%、0.5%、0.25%酶溶液，將步驟（3）制備的產(chǎn)物加到不同酶制劑的溶液中，在30℃轉(zhuǎn)速為120rpm的搖床內(nèi)反應(yīng)4h，反應(yīng)結(jié)束后用永久磁鐵分離，用蒸餾水洗滌多次后室溫自然干燥備用；

（4）將干稻草切成2cm的大小，用1%的石灰水預(yù)濕，將板栗葉、濾泥、花生殼、石膏和步驟（3）制備的產(chǎn)物混合攪拌均勻成混合料，然后在300高斯以上的磁場(chǎng)中將預(yù)濕后的稻草鋪在最下層，再均勻的撒上一層混合料、石灰、腐熟的雞糞和EM菌劑，堆到10層，最上面撒些石灰覆蓋稻草，蓋上薄膜，待料溫升至70℃時(shí)，過(guò)10h后翻堆進(jìn)行巴氏消毒，翻堆后料溫再次達(dá)到65℃時(shí)再經(jīng)10h后播種，此時(shí)控制培養(yǎng)料的含水量在70%之間，pH值為7.5；

（5）當(dāng)步驟（4）制備的培養(yǎng)料料溫降至38℃時(shí)接種草菇菌種，將菌種均勻的撒在培養(yǎng)料上，接種量以覆蓋料面為宜，菌絲期使料溫保持在32℃，相對(duì)濕度為80℃，出菇期料溫控制在30℃，相對(duì)濕度控制在90℃，給予適宜光照和氧氣，定期采收即可。

為了體現(xiàn)胞外酶對(duì)草菇生長(zhǎng)的影響，按照實(shí)施例的培養(yǎng)料配方和采取不添加胞外酶的實(shí)施例培養(yǎng)料配方分別對(duì)草菇培養(yǎng)，結(jié)果如下：

A：實(shí)施例培養(yǎng)料

B：不添加胞外酶的實(shí)施例培養(yǎng)料

A B

菌種萌發(fā)（d） 2 3

菌絲長(zhǎng)勢(shì) ++++ ++

原基出現(xiàn)（d） 7 9

原基長(zhǎng)勢(shì) ++++ ++

“+”號(hào)表示菌絲密度，“+”越多表示密度越大

子實(shí)體的性狀特征

菌柄直徑/cm 菌柄長(zhǎng)度/cm 單菇重/g 生物學(xué)轉(zhuǎn)化率/%

A 1.4 7.8 29.36 34.2

B 0.9 6.4 24.64 21.8