本發(fā)明屬于大葉千斤拔種植
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種用于提高大葉千斤拔組培苗黃酮類化合物和多糖的培養(yǎng)基。
背景技術(shù)：
：大葉千斤拔(m.ghaniamacrophylla(willd.)o.kuntze)為豆科植物大葉千斤拔的干燥根?！吨腥A人民共和國(guó)藥典》（2010版一部）附錄中收載其為藥材千斤拔的品種來(lái)源之一。千斤拔始載于《植物名實(shí)圖考》，味甘，性澀、平。歸肝、腎經(jīng)。具有補(bǔ)肝腎、祛風(fēng)濕、強(qiáng)腰膝的作用。用于治療風(fēng)濕痹痛、腰腿痛、慢性氣管炎、慢性腎炎、小兒疳積、遺精、婦科病、坐骨神經(jīng)痛、風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、子宮脫垂等疾病。亦為傣族、彝族、瑤族習(xí)用的民族藥。藥食兩用，民間尤其廣東奧北等地常將其做成藥膳用以滋補(bǔ)強(qiáng)壯、舒經(jīng)活絡(luò)。關(guān)于大葉千斤拔的研究，多見(jiàn)于對(duì)其藥用成分的分析與作用研究，大葉千斤拔的主要有效成分以黃酮類化合物和多糖為主，具有調(diào)節(jié)血脂水平，抑制血栓的形成等作用；而大葉千斤拔的醇提取液也被證明有明顯的抗炎鎮(zhèn)痛的效果。當(dāng)前市場(chǎng)上，大葉千斤拔被廣泛應(yīng)用于婦科、風(fēng)濕痹痛等類型的中成藥生產(chǎn)，如婦科千金片、千斤拔飲、金雞膠囊（沖劑）、補(bǔ)血調(diào)經(jīng)片和壯腰健腎丸等中成藥。近年來(lái)由于千斤拔藥材需求大幅增長(zhǎng)，對(duì)資源開(kāi)發(fā)量大，符合入藥標(biāo)準(zhǔn)的大葉千斤拔由于長(zhǎng)期遭受大量不合理采挖，資源已日益匱乏，而通過(guò)開(kāi)發(fā)組織培養(yǎng)技術(shù)，可以加速其繁殖速度獲得大量組培苗，為人工種植提供充足種苗，緩解野生資源壓力。如專利申請(qǐng)文獻(xiàn)“一種大葉千斤拔的組織培養(yǎng)繁殖方法（公開(kāi)號(hào)：cn105309317a）”公開(kāi)了一種以ms為基本培養(yǎng)基，添加各種植物激素的培養(yǎng)基，達(dá)到了快速組培大葉千斤拔組培苗的效果，然而未能促進(jìn)大葉千斤拔組培苗黃酮類化合物的積累和多糖的提高。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明提供一種用于提高大葉千斤拔組培苗黃酮類化合物和多糖的培養(yǎng)基，以解決現(xiàn)有組織培養(yǎng)基如何提高大葉千斤拔的主要有效成分黃酮類化合物和多糖的含量，提高經(jīng)濟(jì)效益等問(wèn)題。本發(fā)明的大葉千斤拔組培苗培養(yǎng)基，搭配合理，營(yíng)養(yǎng)全面，能夠快速促根生莖，提高移栽存活率，同時(shí)也能促進(jìn)黃酮類化合物和多糖的積累，提高經(jīng)濟(jì)效益。為解決以上技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：一種用于提高大葉千斤拔組培苗黃酮類化合物和多糖的培養(yǎng)基，以重量份為單位，包括以下原料：糖26-42份、銀杏黃酮10-20份、鉀鹽2-3份、磷鹽1-3份、氮鹽1-2份、鈣鹽0.6-0.8份、鎂鹽0.6-0.8份、碘鹽0.2-0.4份、硼鹽0.2-0.4份、鉬鹽0.2-0.4份、鋅鹽0.2-0.4份、錳鹽0.2-0.4份、銅鹽0.2-0.4份、鐵鹽0.2-0.4份、維生素0.1-0.25份、氨基酸0.08-0.24份、生長(zhǎng)素0.05-0.12份、赤霉素0.06-0.09份、丁二酰亞胺0.04-0.08份、細(xì)胞分裂素0.03-0.07份、激動(dòng)素0.04-0.09份、調(diào)理劑0.12-0.25份、分散劑1.2-2.3份、增效劑0.02-0.06份、穩(wěn)定劑0.9-1.8份、抗菌劑1.5-2.6份、水2000-3000份；所述糖為蔗糖；所述鉀鹽包括氯化鉀、硫酸鉀、硝酸鉀、碳酸鉀、碳酸氫鉀中的一種或多種；所述磷鹽包括磷酸鈣、磷酸鎂、磷酸鐵、磷酸鋅中的一種或多種；所述氮鹽包括碳酸氫銨、碳酸銨、氯化銨、硫酸銨、硝酸銨中的一種或多種；所述鈣鹽包括甘氨酸鈣、氯化鈣、硫酸亞鈣中的一種或多種；所述鎂鹽包括甘氨酸鎂、氯化鎂、硫酸亞鎂中的一種或多種；所述碘鹽包括碘化鉀、碘化鈉、碘酸鉀中的一種或多種；所述硼鹽包括硼酸鉀、硼酸鈉、硼酸鈣、硼酸鎂中的一種或多種；所述鉬鹽包括鉬酸鉀、鉬酸鈉中的一種或多種；所述鋅鹽包括氯化鋅、甘氨酸鋅、硫酸亞鋅中的一種或多種；所述錳鹽包括甘氨酸錳、氯化錳、硫酸亞錳、一水硫酸錳中的一種或多種；所述銅鹽包括甘氨酸銅、氯化銅、硫酸銅中的一種或多種；所述鐵鹽包括硫酸亞鐵、甘氨酸鐵、氯化鐵、磷酸鐵中的一種或多種；所述調(diào)理劑為腐殖酸；所述分散劑以重量份為單位，包括以下原料：羧甲基纖維素鈉3-5份、改性淀粉4-7份、聚丙烯酸鉀2.5-4.6份、海藻酸鉀1.2-3.4份；所述用于提高大葉千斤拔組培苗黃酮類化合物和多糖的培養(yǎng)基，其制備方法包括以下步驟：s1：銀杏黃酮的制備，包括以下步驟：s11：將干銀杏葉進(jìn)行粉碎并過(guò)40-80目篩子，制得銀杏葉粉末；s12：將步驟s11制得的銀杏葉粉末采用62-75℃的水進(jìn)行浸提，浸提中固液比為1:12-16（w/v），微波功率為200-800w，提取時(shí)間為15-30min，提取2-3次，提取后過(guò)濾、合并濾液，制得混合浸提液；s13：將步驟s12制得的混合浸提液濃縮干燥，制得浸提膏，采用于浸提膏5.5-6倍體積的52-55℃的水進(jìn)行溶解，采用水飽和的正丁醇進(jìn)行萃取2-3次，繼續(xù)用水飽和的正丁醇進(jìn)行多次結(jié)晶處理，結(jié)晶過(guò)程中固液比為1:5.2-5.5（w/v），制得結(jié)晶粗品；s14：將步驟s13制得的結(jié)晶粗品經(jīng)過(guò)超臨界co2萃取，萃取的條件：萃取釜壓力為21-23mpa，萃取溫度為51-54℃，萃取時(shí)間為25-28min，制得銀杏黃酮；s2：將步驟s1制得的銀杏黃酮、糖、鉀鹽、磷鹽、氮鹽、鈣鹽、鎂鹽、碘鹽、硼鹽、鉬鹽、鋅鹽、錳鹽、銅鹽、鐵鹽、維生素、氨基酸、生長(zhǎng)素、赤霉素、丁二酰亞胺、細(xì)胞分裂素、激動(dòng)素、調(diào)理劑、分散劑、增效劑、水混合，在微波功率為120-160w，溫度為45-49℃，轉(zhuǎn)速為200-300r/min下攪拌18-32min，制得混合液a；s3：向步驟s2制得的混合液a中加入穩(wěn)定劑、抗菌劑，在溫度為40-45℃，轉(zhuǎn)速為100-200r/min下攪拌9-14min，制得混合液b；s4：將步驟s3制得的混合液b的ph值調(diào)節(jié)至5.4-6.5，接著采用脈動(dòng)真空壓力蒸氣滅菌器，在溫度為134-136℃，壓力為210-230kpa下滅菌1-1.4min，制得用于提高大葉千斤拔組培苗黃酮類化合物和多糖的培養(yǎng)基。進(jìn)一步地，所述維生素包括生素a、維生素b1、維生素b2、維生素c中的一種或多種。進(jìn)一步地，所述氨基酸包括甘氨酸、胱氨酸、脯氨酸、酪氨酸、絲氨酸中的一種或多種。進(jìn)一步地，所述增效劑為增效胺胺鮮酯。進(jìn)一步地，所述穩(wěn)定劑為黃原膠。進(jìn)一步地，所述抗菌劑為富馬酸糠醇甲酯。進(jìn)一步地，步驟s12中銀杏葉粉末的浸提條件為：采用70℃的水進(jìn)行浸提，浸提中固液比為1:14（w/v），微波功率為600w，提取時(shí)間為22min，提取3次。進(jìn)一步地，步驟s14中萃取的條件為：萃取釜壓力為22mpa，萃取溫度為53℃，萃取時(shí)間為26min。進(jìn)一步地，步驟s4中所述溫度為136℃，壓力為230kpa下滅菌1min。本發(fā)明培養(yǎng)基部分成分的作用如下：糖的添加有利于多糖含量的積累。銀杏黃酮可以促進(jìn)黃酮積累。鉀元素的營(yíng)養(yǎng)功效可以提高光合作用的強(qiáng)度，促進(jìn)作物體內(nèi)淀粉和糖的形成，增強(qiáng)作物的抗逆性和抗病能力，還能提高作物對(duì)氮的吸收利用。磷是形成細(xì)胞核蛋白、卵磷脂等不可缺少的元素。磷元素能加速細(xì)胞分裂，促使根系和地上部加快生長(zhǎng)，促進(jìn)花芽分化，提早成熟，提高果實(shí)品質(zhì)。氮是蛋白質(zhì)構(gòu)成的主要元素，蛋白質(zhì)是細(xì)胞原生質(zhì)組成中的基本物質(zhì)。氮元素能促進(jìn)蛋白質(zhì)和葉綠素的形成，使葉色深綠，葉面積增大，促進(jìn)碳的同化，有利于產(chǎn)量增加，品質(zhì)改善。缺少鈣植物分生組織的生長(zhǎng)變慢，缺鈣和癥初在生長(zhǎng)點(diǎn)和幼葉，嚴(yán)重時(shí)，葉子變形和失綠，在葉子的邊緣出現(xiàn)壞死斑點(diǎn)。鎂是葉綠素的組成成分。如果缺少鎂，葉片失去了綠色，不能制造營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。碘是植物生長(zhǎng)不可缺少的元素，被譽(yù)為生命元素、智慧元素。硼在植物體內(nèi)比較集中于莖尖、根尖、葉片和花器官中，雙子葉植物中的含量常常高于單子葉植物。硼可以提高豆科作物根瘤菌的固氮活性，增加固氮量，缺硼時(shí)，根留不發(fā)達(dá)，影響固氮量。硼還能增強(qiáng)作物抗逆性。鉬是固氮微生物，特別是與豆科作物共生的根瘤菌固定大氣氮素時(shí)所必需的。同時(shí)又能增進(jìn)葉片光合作用強(qiáng)度。缺鉬時(shí)植株矮小，葉片脈間失綠，葉緣枯焦，向內(nèi)卷曲，成萎蔫態(tài)。鋅能促進(jìn)作物進(jìn)行光合作用，它是多種酶的組成成分，缺鋅時(shí)作物生長(zhǎng)發(fā)育出現(xiàn)停滯。植物葉綠體中含有錳，錳能促進(jìn)種子發(fā)芽和幼苗時(shí)期生長(zhǎng)，缺錳時(shí)影響作物的光合作用、呼吸作用、硝態(tài)氮在體內(nèi)的積累。表現(xiàn)為葉片脈間失綠黃化，有褐色斑點(diǎn)。銅參加植物的光合作用、呼吸作用、氮代謝、增強(qiáng)植物的抗性。缺銅時(shí)植株生長(zhǎng)瘦弱，新葉發(fā)黃，凋萎干枯，葉尖卷曲發(fā)白，有壞死斑點(diǎn)。鐵是葉綠素形成不可缺少的，在植株體內(nèi)很難轉(zhuǎn)移，所以葉片“失綠癥”是植物缺鐵的表現(xiàn)，并且這種失綠首先表現(xiàn)在幼嫩葉片上。維生素對(duì)植物的生根有效應(yīng)，能夠促進(jìn)植物生根。氨基酸是植物生長(zhǎng)所必需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，由于氨基酸本身的特性，對(duì)植物生長(zhǎng)特別是光合作用具有獨(dú)特的促進(jìn)作用，它可以增加植物葉綠素含量，提高酶的活性，促進(jìn)二氧化碳的滲透，使光合作用更加旺盛，對(duì)提高作物品質(zhì)，增加vc和糖的含量都有著重要作用。生長(zhǎng)素能促進(jìn)細(xì)胞伸長(zhǎng)生長(zhǎng)。赤霉素，是廣泛存在的一類植物激素。其化學(xué)結(jié)構(gòu)屬于二萜類酸，由四環(huán)骨架衍生而得，可刺激葉和芽的生長(zhǎng)。丁二酰亞胺是一種植物生長(zhǎng)刺激素，可促進(jìn)植物細(xì)胞生長(zhǎng)，提高氨基酸的含量。細(xì)胞分裂素促進(jìn)胞質(zhì)分裂的物質(zhì)，促進(jìn)多種組織的分化和生長(zhǎng)，與植物生長(zhǎng)素有協(xié)同作用。激動(dòng)素是一種非天然的細(xì)胞分裂素，化學(xué)名稱為6-糖基氨基嘌呤(或n6-呋喃甲基腺嘌呤)。不溶于水，溶于強(qiáng)酸、堿及冰醋酸中；除具有促進(jìn)細(xì)胞分裂的作用外，還具有延緩離體葉片和切花衰老，誘導(dǎo)芽分化和發(fā)育及增加氣孔開(kāi)度的作用。調(diào)理劑可以促進(jìn)根系的發(fā)育和有益微生物的活動(dòng)。分散劑可防止絮凝，防止沉降。增效劑具有廣譜和突破性效果的高能植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑。它能提高植物過(guò)氧化物酶和硝酸還原酶的活性，提高葉綠素的含量加快光合速度，促進(jìn)植物細(xì)胞的分裂和伸長(zhǎng)，促進(jìn)根系的發(fā)育，調(diào)節(jié)體內(nèi)養(yǎng)分的平衡。穩(wěn)定劑能增加溶液、膠體、固體、混合物的穩(wěn)定性?？咕鷦┦悄軌蛟谝欢〞r(shí)間內(nèi)，使某些微生物（細(xì)菌、真菌、酵母菌、藻類及病毒等）的生長(zhǎng)或繁殖保持在必要水平以下的化學(xué)物質(zhì)。本發(fā)明具有以下有益效果：（1）本發(fā)明中銀杏黃酮能促進(jìn)大葉千斤拔黃酮類化合物的積累；（2）糖能促進(jìn)大葉千斤拔多糖的積累；同時(shí)在培養(yǎng)基無(wú)糖，或糖與其他培養(yǎng)基組分伍配作用下，對(duì)大葉千斤拔組培苗高度增長(zhǎng)作用不大；（3）本發(fā)明的培養(yǎng)基有利于提高大葉千斤拔組培苗的移栽存活率，達(dá)到99%-100%。具體實(shí)施方式為便于更好地理解本發(fā)明，通過(guò)以下實(shí)施例加以說(shuō)明，這些實(shí)施例屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍，但不限制本發(fā)明的保護(hù)范圍。在實(shí)施例中，所述用于提高大葉千斤拔組培苗黃酮類化合物和多糖的培養(yǎng)基，以重量份為單位，包括以下原料：糖26-42份、銀杏黃酮10-20份、鉀鹽2-3份、磷鹽1-3份、氮鹽1-2份、鈣鹽0.6-0.8份、鎂鹽0.6-0.8份、碘鹽0.2-0.4份、硼鹽0.2-0.4份、鉬鹽0.2-0.4份、鋅鹽0.2-0.4份、錳鹽0.2-0.4份、銅鹽0.2-0.4份、鐵鹽0.2-0.4份、維生素0.1-0.25份、氨基酸0.08-0.24份、生長(zhǎng)素0.05-0.12份、赤霉素0.06-0.09份、丁二酰亞胺0.04-0.08份、細(xì)胞分裂素0.03-0.07份、激動(dòng)素0.04-0.09份、調(diào)理劑0.12-0.25份、分散劑1.2-2.3份、增效劑0.02-0.06份、穩(wěn)定劑0.9-1.8份、抗菌劑1.5-2.6份、水2000-3000份；所述糖為蔗糖；所述鉀鹽包括氯化鉀、硫酸鉀、硝酸鉀、碳酸鉀、碳酸氫鉀中的一種或多種；所述磷鹽包括磷酸鈣、磷酸鎂、磷酸鐵、磷酸鋅中的一種或多種；所述氮鹽包括碳酸氫銨、碳酸銨、氯化銨、硫酸銨、硝酸銨中的一種或多種；所述鈣鹽包括甘氨酸鈣、氯化鈣、硫酸亞鈣中的一種或多種；所述鎂鹽包括甘氨酸鎂、氯化鎂、硫酸亞鎂中的一種或多種；所述碘鹽包括碘化鉀、碘化鈉、碘酸鉀中的一種或多種；所述硼鹽包括硼酸鉀、硼酸鈉、硼酸鈣、硼酸鎂中的一種或多種；所述鉬鹽包括鉬酸鉀、鉬酸鈉中的一種或多種；所述鋅鹽包括氯化鋅、甘氨酸鋅、硫酸亞鋅中的一種或多種；所述錳鹽包括甘氨酸錳、氯化錳、硫酸亞錳、一水硫酸錳中的一種或多種；所述銅鹽包括甘氨酸銅、氯化銅、硫酸銅中的一種或多種；所述鐵鹽包括硫酸亞鐵、甘氨酸鐵、氯化鐵、磷酸鐵中的一種或多種；所述維生素包括生素a、維生素b1、維生素b2、維生素c中的一種或多種；所述氨基酸包括甘氨酸、胱氨酸、脯氨酸、酪氨酸、絲氨酸中的一種或多種；所述調(diào)理劑為腐殖酸；所述分散劑以重量份為單位，包括以下原料：羧甲基纖維素鈉3-5份、改性淀粉4-7份、聚丙烯酸鉀2.5-4.6份、海藻酸鉀1.2-3.4份；所述增效劑為增效胺胺鮮酯；所述穩(wěn)定劑為黃原膠；所述抗菌劑為富馬酸糠醇甲酯；所述用于提高大葉千斤拔組培苗黃酮類化合物和多糖的培養(yǎng)基，其制備方法包括以下步驟：s1：銀杏黃酮的制備，包括以下步驟：s11：將干銀杏葉進(jìn)行粉碎并過(guò)40-80目篩子，制得銀杏葉粉末；s12：將步驟s11制得的銀杏葉粉末采用62-75℃的水進(jìn)行浸提，浸提中固液比為1:12-16（w/v），微波功率為200-800w，提取時(shí)間為15-30min，提取2-3次，提取后過(guò)濾、合并濾液，制得混合浸提液；s13：將步驟s12制得的混合浸提液濃縮干燥，制得浸提膏，采用于浸提膏5.5-6倍體積的52-55℃的水進(jìn)行溶解，采用水飽和的正丁醇進(jìn)行萃取2-3次，繼續(xù)用水飽和的正丁醇進(jìn)行多次結(jié)晶處理，結(jié)晶過(guò)程中固液比為1:5.2-5.5（w/v），制得結(jié)晶粗品；s14：將步驟s13制得的結(jié)晶粗品經(jīng)過(guò)超臨界co2萃取，萃取的條件：萃取釜壓力為21-23mpa，萃取溫度為51-54℃，萃取時(shí)間為25-28min，制得銀杏黃酮；s2：將步驟s1制得的銀杏黃酮、糖、鉀鹽、磷鹽、氮鹽、鈣鹽、鎂鹽、碘鹽、硼鹽、鉬鹽、鋅鹽、錳鹽、銅鹽、鐵鹽、維生素、氨基酸、生長(zhǎng)素、赤霉素、丁二酰亞胺、細(xì)胞分裂素、激動(dòng)素、調(diào)理劑、分散劑、增效劑、水混合，在微波功率為120-160w，溫度為45-49℃，轉(zhuǎn)速為200-300r/min下攪拌18-32min，制得混合液a；s3：向步驟s2制得的混合液a中加入穩(wěn)定劑、抗菌劑，在溫度為40-45℃，轉(zhuǎn)速為100-200r/min下攪拌9-14min，制得混合液b；s4：將步驟s3制得的混合液b的ph值調(diào)節(jié)至5.4-6.5，接著采用脈動(dòng)真空壓力蒸氣滅菌器，在溫度為134-136℃，壓力為210-230kpa下滅菌1-1.4min，制得用于提高大葉千斤拔組培苗黃酮類化合物和多糖的培養(yǎng)基。實(shí)施例1一種用于提高大葉千斤拔組培苗黃酮類化合物和多糖的培養(yǎng)基，以重量份為單位，包括以下原料：糖30份、銀杏黃酮15份、鉀鹽2.5份、磷鹽2份、氮鹽1.5份、鈣鹽0.7份、鎂鹽0.7份、碘鹽03份、硼鹽0.3份、鉬鹽0.3份、鋅鹽0.3份、錳鹽0.3份、銅鹽0.3份、鐵鹽0.3份、維生素0.18份、氨基酸0.18份、生長(zhǎng)素0.08份、赤霉素0.08份、丁二酰亞胺0.06份、細(xì)胞分裂素0.05份、激動(dòng)素0.07份、調(diào)理劑0.18份、分散劑1.7份、增效劑0.04份、穩(wěn)定劑1.4份、抗菌劑2份、水2500份；所述糖為蔗糖；所述鉀鹽為氯化鉀、硫酸鉀、硝酸鉀、碳酸鉀、碳酸氫鉀；所述磷鹽為磷酸鈣、磷酸鎂、磷酸鐵、磷酸鋅；所述氮鹽為碳酸氫銨、碳酸銨、氯化銨、硫酸銨、硝酸銨；所述鈣鹽為甘氨酸鈣、氯化鈣、硫酸亞鈣；所述鎂鹽為甘氨酸鎂、氯化鎂、硫酸亞鎂；所述碘鹽為碘化鉀、碘化鈉、碘酸鉀；所述硼鹽為硼酸鉀、硼酸鈉、硼酸鈣、硼酸鎂；所述鉬鹽為鉬酸鉀、鉬酸鈉；所述鋅鹽為氯化鋅、甘氨酸鋅、硫酸亞鋅；所述錳鹽為甘氨酸錳、氯化錳、硫酸亞錳、一水硫酸錳；所述銅鹽為甘氨酸銅、氯化銅、硫酸銅；所述鐵鹽為硫酸亞鐵、甘氨酸鐵、氯化鐵、磷酸鐵；所述維生素為生素a、維生素b1、維生素b2、維生素c；所述氨基酸為甘氨酸、胱氨酸、脯氨酸、酪氨酸、絲氨酸；所述調(diào)理劑為腐殖酸；所述分散劑以重量份為單位，包括以下原料：羧甲基纖維素鈉4份、改性淀粉6份、聚丙烯酸鉀3.5份、海藻酸鉀2.3份；所述增效劑為增效胺胺鮮酯；所述穩(wěn)定劑為黃原膠；所述抗菌劑為富馬酸糠醇甲酯；所述用于提高大葉千斤拔組培苗黃酮類化合物和多糖的培養(yǎng)基，其制備方法包括以下步驟：s1：銀杏黃酮的制備，包括以下步驟：s11：將干銀杏葉進(jìn)行粉碎并過(guò)80目篩子，制得銀杏葉粉末；s12：將步驟s11制得的銀杏葉粉末采用70℃的水進(jìn)行浸提，浸提中固液比為1:14（w/v），微波功率為600w，提取時(shí)間為22min，提取3次，提取后過(guò)濾、合并濾液，制得混合浸提液；s13：將步驟s12制得的混合浸提液濃縮干燥，制得浸提膏，采用于浸提膏6倍體積的55℃的水進(jìn)行溶解，采用水飽和的正丁醇進(jìn)行萃取2次，繼續(xù)用水飽和的正丁醇進(jìn)行多次結(jié)晶處理，結(jié)晶過(guò)程中固液比為1:5.5（w/v），制得結(jié)晶粗品；s14：將步驟s13制得的結(jié)晶粗品經(jīng)過(guò)超臨界co2萃取，萃取的條件：萃取釜壓力為22mpa，萃取溫度為53℃，萃取時(shí)間為26min，制得銀杏黃酮；s2：將步驟s1制得的銀杏黃酮、糖、鉀鹽、磷鹽、氮鹽、鈣鹽、鎂鹽、碘鹽、硼鹽、鉬鹽、鋅鹽、錳鹽、銅鹽、鐵鹽、維生素、氨基酸、生長(zhǎng)素、赤霉素、丁二酰亞胺、細(xì)胞分裂素、激動(dòng)素、調(diào)理劑、分散劑、增效劑、水混合，在微波功率為140w，溫度為46℃，轉(zhuǎn)速為200r/min下攪拌32min，制得混合液a；s3：向步驟s2制得的混合液a中加入穩(wěn)定劑、抗菌劑，在溫度為42℃，轉(zhuǎn)速為100r/min下攪拌12min，制得混合液b；s4：將步驟s3制得的混合液b的ph值調(diào)節(jié)至6，接著采用脈動(dòng)真空壓力蒸氣滅菌器，在溫度為135℃，壓力為220kpa下滅菌1.2min，制得用于提高大葉千斤拔組培苗黃酮類化合物和多糖的培養(yǎng)基。實(shí)施例2一種用于提高大葉千斤拔組培苗黃酮類化合物和多糖的培養(yǎng)基，以重量份為單位，包括以下原料：糖26份、銀杏黃酮10份、鉀鹽2份、磷鹽1份、氮鹽1份、鈣鹽0.6份、鎂鹽0.6份、碘鹽0.2份、硼鹽0.2份、鉬鹽0.2份、鋅鹽0.2份、錳鹽0.2份、銅鹽0.2份、鐵鹽0.2份、維生素0.1份、氨基酸0.08份、生長(zhǎng)素0.05份、赤霉素0.06份、丁二酰亞胺0.04份、細(xì)胞分裂素0.03份、激動(dòng)素0.04份、調(diào)理劑0.12份、分散劑1.2份、增效劑0.02份、穩(wěn)定劑0.9份、抗菌劑1.5份、水2000份；所述糖為蔗糖；所述鉀鹽為氯化鉀；所述磷鹽為磷酸鈣；所述氮鹽為碳酸氫銨；所述鈣鹽為甘氨酸鈣；所述鎂鹽為甘氨酸鎂；所述碘鹽為碘化鉀；所述硼鹽為硼酸鉀；所述鉬鹽為鉬酸鉀；所述鋅鹽為氯化鋅；所述錳鹽為甘氨酸錳；所述銅鹽為甘氨酸銅；所述鐵鹽為硫酸亞鐵；所述維生素為生素a；所述氨基酸為甘氨酸；所述調(diào)理劑為腐殖酸；所述分散劑以重量份為單位，包括以下原料：羧甲基纖維素鈉3份、改性淀粉4份、聚丙烯酸鉀2.5份、海藻酸鉀1.2份；所述增效劑為增效胺胺鮮酯；所述穩(wěn)定劑為黃原膠；所述抗菌劑為富馬酸糠醇甲酯；所述用于提高大葉千斤拔組培苗黃酮類化合物和多糖的培養(yǎng)基，其制備方法包括以下步驟：s1：銀杏黃酮的制備，包括以下步驟：s11：將干銀杏葉進(jìn)行粉碎并過(guò)40目篩子，制得銀杏葉粉末；s12：將步驟s11制得的銀杏葉粉末采用62℃的水進(jìn)行浸提，浸提中固液比為1:12（w/v），微波功率為200w，提取時(shí)間為30min，提取2次，提取后過(guò)濾、合并濾液，制得混合浸提液；s13：將步驟s12制得的混合浸提液濃縮干燥，制得浸提膏，采用于浸提膏5.5倍體積的52℃的水進(jìn)行溶解，采用水飽和的正丁醇進(jìn)行萃取3次，繼續(xù)用水飽和的正丁醇進(jìn)行多次結(jié)晶處理，結(jié)晶過(guò)程中固液比為1:5.5（w/v），制得結(jié)晶粗品；s14：將步驟s13制得的結(jié)晶粗品經(jīng)過(guò)超臨界co2萃取，萃取的條件：萃取釜壓力為21mpa，萃取溫度為51℃，萃取時(shí)間為25min，制得銀杏黃酮；s2：將步驟s1制得的銀杏黃酮、糖、鉀鹽、磷鹽、氮鹽、鈣鹽、鎂鹽、碘鹽、硼鹽、鉬鹽、鋅鹽、錳鹽、銅鹽、鐵鹽、維生素、氨基酸、生長(zhǎng)素、赤霉素、丁二酰亞胺、細(xì)胞分裂素、激動(dòng)素、調(diào)理劑、分散劑、增效劑、水混合，在微波功率為120w，溫度為45℃，轉(zhuǎn)速為200r/min下攪拌32min，制得混合液a；s3：向步驟s2制得的混合液a中加入穩(wěn)定劑、抗菌劑，在溫度為40℃，轉(zhuǎn)速為100r/min下攪拌14min，制得混合液b；s4：將步驟s3制得的混合液b的ph值調(diào)節(jié)至5.4，接著采用脈動(dòng)真空壓力蒸氣滅菌器，在溫度為134℃，壓力為210kpa下滅菌1.4min，制得用于提高大葉千斤拔組培苗黃酮類化合物和多糖的培養(yǎng)基。實(shí)施例3一種用于提高大葉千斤拔組培苗黃酮類化合物和多糖的培養(yǎng)基，以重量份為單位，包括以下原料：糖42份、銀杏黃酮20份、鉀鹽3份、磷鹽3份、氮鹽2份、鈣鹽0.8份、鎂鹽-0.8份、碘鹽-0.4份、硼鹽-0.4份、鉬鹽0.4份、鋅鹽0.4份、錳鹽0.4份、銅鹽0.4份、鐵鹽0.4份、維生素0.25份、氨基酸0.24份、生長(zhǎng)素0.12份、赤霉素0.09份、丁二酰亞胺0.08份、細(xì)胞分裂素0.07份、激動(dòng)素0.09份、調(diào)理劑0.25份、分散劑2.3份、增效劑0.06份、穩(wěn)定劑1.8份、抗菌劑2.6份、水3000份；所述糖為蔗糖；所述鉀鹽為硫酸鉀、硝酸鉀；所述磷鹽為磷酸鈣、磷酸鎂；所述氮鹽為碳酸氫銨、碳酸銨；所述鈣鹽為甘氨酸鈣、氯化鈣；所述鎂鹽為甘氨酸鎂、氯化鎂；所述碘鹽為碘化鉀、碘化鈉；所述硼鹽為硼酸鉀、硼酸鈉；所述鉬鹽為鉬酸鉀、鉬酸鈉；所述鋅鹽為氯化鋅、甘氨酸鋅；所述錳鹽為甘氨酸錳、氯化錳；所述銅鹽為甘氨酸銅、氯化銅；所述鐵鹽為硫酸亞鐵、甘氨酸鐵；所述維生素為生素a、維生素b1；所述氨基酸為甘氨酸、胱氨酸；所述調(diào)理劑為腐殖酸；所述分散劑以重量份為單位，包括以下原料：羧甲基纖維素鈉5份、改性淀粉7份、聚丙烯酸鉀4.6份、海藻酸鉀3.4份；所述增效劑為增效胺胺鮮酯；所述穩(wěn)定劑為黃原膠；所述抗菌劑為富馬酸糠醇甲酯；所述用于提高大葉千斤拔組培苗黃酮類化合物和多糖的培養(yǎng)基，其制備方法包括以下步驟：s1：銀杏黃酮的制備，包括以下步驟：s11：將干銀杏葉進(jìn)行粉碎并過(guò)60目篩子，制得銀杏葉粉末；s12：將步驟s11制得的銀杏葉粉末采用70℃的水進(jìn)行浸提，浸提中固液比為1:14（w/v），微波功率為500w，提取時(shí)間為25min，提取3次，提取后過(guò)濾、合并濾液，制得混合浸提液；s13：將步驟s12制得的混合浸提液濃縮干燥，制得浸提膏，采用于浸提膏5.8倍體積的53℃的水進(jìn)行溶解，采用水飽和的正丁醇進(jìn)行萃取3次，繼續(xù)用水飽和的正丁醇進(jìn)行多次結(jié)晶處理，結(jié)晶過(guò)程中固液比為1:5.3（w/v），制得結(jié)晶粗品；s14：將步驟s13制得的結(jié)晶粗品經(jīng)過(guò)超臨界co2萃取，萃取的條件：萃取釜壓力為23mpa，萃取溫度為54℃，萃取時(shí)間為25min，制得銀杏黃酮；s2：將步驟s1制得的銀杏黃酮、糖、鉀鹽、磷鹽、氮鹽、鈣鹽、鎂鹽、碘鹽、硼鹽、鉬鹽、鋅鹽、錳鹽、銅鹽、鐵鹽、維生素、氨基酸、生長(zhǎng)素、赤霉素、丁二酰亞胺、細(xì)胞分裂素、激動(dòng)素、調(diào)理劑、分散劑、增效劑、水混合，在微波功率為160w，溫度為49℃，轉(zhuǎn)速為300r/min下攪拌18min，制得混合液a；s3：向步驟s2制得的混合液a中加入穩(wěn)定劑、抗菌劑，在溫度為45℃，轉(zhuǎn)速為200r/min下攪拌9min，制得混合液b；s4：將步驟s3制得的混合液b的ph值調(diào)節(jié)至6.5，接著采用脈動(dòng)真空壓力蒸氣滅菌器，在溫度為136℃，壓力為230kpa下滅菌1min，制得用于提高大葉千斤拔組培苗黃酮類化合物和多糖的培養(yǎng)基。為驗(yàn)證本發(fā)明培養(yǎng)基的效果，通過(guò)以下實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。每組選用規(guī)格基本一致的2-3cm的大葉千斤拔帶芽莖段數(shù)量100，對(duì)照組1以糖、鉀鹽、磷鹽、氮鹽、鈣鹽、鎂鹽、碘鹽、硼鹽、鉬鹽、鋅鹽、錳鹽、銅鹽、鐵鹽、維生素、氨基酸、生長(zhǎng)素、赤霉素、丁二酰亞胺、細(xì)胞分裂素、激動(dòng)素、調(diào)理劑、分散劑、增效劑、穩(wěn)定劑、抗菌劑、水組成的培養(yǎng)基，對(duì)照組2單獨(dú)以銀杏黃酮為培養(yǎng)基，其他采用實(shí)施例1-3的培養(yǎng)基。培養(yǎng)110天后測(cè)量大葉千斤拔組培苗黃酮類化合物平均得率和長(zhǎng)度，結(jié)果見(jiàn)表1。表1培養(yǎng)基組培大葉千斤拔組培苗黃酮類化合物平均得率和長(zhǎng)度情況實(shí)施例實(shí)驗(yàn)組培苗數(shù)黃酮類化合物的平均得率（%）大葉千斤拔組培苗長(zhǎng)度（cm）11001.045.7921001.005.7631001.095.82對(duì)照組11000.886.02對(duì)照組2100/幾乎不變由表1可知，實(shí)施例1-3的大葉千斤拔組培苗黃酮類化合物平均得率比對(duì)照組1的大葉千斤拔組培苗黃酮類化合物平均得率高13.63%-23.86%；實(shí)施例1-3的大葉千斤拔組培苗長(zhǎng)度比對(duì)照組1的大葉千斤拔組培苗長(zhǎng)度短3.32%-4.32%，對(duì)照組2大葉千斤拔幾乎不生長(zhǎng)，說(shuō)明了銀杏黃酮的存在能大大提高大葉千斤拔組培苗黃酮類化合物平均得率。每組選用規(guī)格基本一致的2-3cm的大葉千斤拔帶芽莖段數(shù)量100，對(duì)照組以銀杏黃酮、鉀鹽、磷鹽、氮鹽、鈣鹽、鎂鹽、碘鹽、硼鹽、鉬鹽、鋅鹽、錳鹽、銅鹽、鐵鹽、維生素、氨基酸、生長(zhǎng)素、赤霉素、丁二酰亞胺、細(xì)胞分裂素、激動(dòng)素、調(diào)理劑、分散劑、增效劑、穩(wěn)定劑、抗菌劑、水組成的培養(yǎng)基，其他采用實(shí)施例1-3的培養(yǎng)基。培養(yǎng)110天后測(cè)量組培苗的多糖平均得率和長(zhǎng)度，結(jié)果見(jiàn)表2。表2培養(yǎng)基組培大葉千斤拔組培苗平均得率和長(zhǎng)度情況實(shí)施例實(shí)驗(yàn)組培苗數(shù)多糖平均得率（%）大葉千斤拔組培苗長(zhǎng)度（cm）110014.265.79210014.125.76310014.315.82對(duì)照組10011.925.73由表2可知，實(shí)施例1-3的大葉千斤拔組培苗多糖平均得率比對(duì)照組的大葉千斤拔組培苗多糖平均得率高18.46%-20.05%；實(shí)施例1-3的大葉千斤拔組培苗長(zhǎng)度比對(duì)照組的大葉千斤拔組培苗長(zhǎng)度短0.52%-1.57%，說(shuō)明了培養(yǎng)基無(wú)糖，或糖與其他培養(yǎng)基組分伍配作用下，對(duì)大葉千斤拔組培苗高度增長(zhǎng)作用不大。表3是實(shí)施例1-3培養(yǎng)基組培大葉千斤拔組培苗移栽存活情況。表3培養(yǎng)基組培大葉千斤拔組培苗移栽存活情況實(shí)施例實(shí)驗(yàn)組培苗數(shù)組培苗移栽存活數(shù)移栽存活率（%）11009999210099993100100100由表3可以知道，以本發(fā)明的培養(yǎng)基組培大葉千斤拔組培苗的平均移栽存活率為99%-100%，說(shuō)明了本發(fā)明培養(yǎng)基有利于提高大葉千斤拔組培苗的移栽存活率。以上內(nèi)容不能認(rèn)定本發(fā)明的具體實(shí)施只局限于這些說(shuō)明，對(duì)于本發(fā)明所屬
技術(shù)領(lǐng)域：
的普通技術(shù)人員來(lái)說(shuō)，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干簡(jiǎn)單推演或替換，都應(yīng)當(dāng)視為屬于本發(fā)明由所提交的權(quán)利要求書(shū)確定的專利保護(hù)范圍。當(dāng)前第1頁(yè)12