本發(fā)明涉及一種含紅車軸草提取物的作物營(yíng)養(yǎng)液的制備方法，屬于肥料生產(chǎn)技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)：

紅車軸草又名紅三葉、紅菽草、紅花苜蓿、紅花車子、三葉草、金花菜等。原產(chǎn)于小亞西亞及歐洲西南部，是歐洲、美國(guó)東部、新西蘭等海洋性氣候地區(qū)的最重要的牧草和飼料之一，我國(guó)南、北方均有栽培。紅車軸草全草含多種黃酮類成分化合物如鷹嘴豆芽素a(bionchanina)和b(formonetin)、芒柄花素(formononetin)、刺芒柄花苷(ononin)、染料木素(genistein)、大豆素(daidzein)、大豆甙元、大豆甙、染料木甙等，其中以鷹嘴豆芽素a和芒柄花素含量最高。

研究表明紅車軸草提取物具有多種生物活性，在醫(yī)藥、保健品、化妝品領(lǐng)域廣泛應(yīng)用。專利cn200510031097.3涉及一種紅車軸草素和櫻黃素藥物組合物具有預(yù)防和治療心血管系統(tǒng)疾病和骨質(zhì)疏松等作用。專利cn201210334753.7公開了一種預(yù)防和治療雞腹水癥的飼料添加劑,它是以紅車軸草異黃酮和苜蓿皂甙兩種活性成分組合而成。專利cn201610447032.5涉及將紅車軸草提取物與其他植物提取物復(fù)配制備化妝品，具有補(bǔ)水、保濕、舒緩肌膚顯著功效。截止目前紅車軸草在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域尤其是肥料領(lǐng)域應(yīng)用報(bào)道極少。

紅車軸草提取物傳統(tǒng)制備工藝主要包括浸提、吸附分離、萃取等，但都存在明顯缺陷。專利cn200810151104.7通過揉切機(jī)、壓榨機(jī)、破碎機(jī)、烘干機(jī)處理將紅車軸草加工為粉末，一定程度提高了醇溶液提取效率，但前處理工序復(fù)雜，設(shè)備投入多。專利cn03128286.5、cn200410013189.4利用高溫活化硅膠粉或氧化鋁吸附紅車軸草提取物。柱層析方法產(chǎn)品純度較高，但吸附量小，解析率低，生產(chǎn)效率不高。專利cn201110371742.1向紅車軸草粗提液中按比例加入硫酸銨和乙醇，使異黃酮類物質(zhì)主要分配在含乙醇的上相。雙水相萃取可在一定程度上提高產(chǎn)品純度，但分離度不高，且會(huì)產(chǎn)生大量含鹽廢水。

高純度提取物制備是近年來研發(fā)熱點(diǎn)。專利cn201010603892.6涉及一種高純度刺芒柄花素的制備工藝，以乙醇水溶液為溶劑，通過微波輔助超聲提取，進(jìn)一步通過大孔樹脂純化。專利cn201310349360.8涉及將紅車軸草粉碎后利用二氧化碳超臨界萃取制備車軸草醇的方法。專利cn201410681182.3利用氨基化石墨烯吸附萃取紅車軸草提取物中黃酮類成分，分離速度快、產(chǎn)品純度高。上述三種工藝生產(chǎn)成本極高，極大限制了紅車軸草提取物使用范圍。

總之，紅車軸草提取物規(guī)?；a(chǎn)難度較高，造成紅車軸草提取物生產(chǎn)成本居高不下，因而限制了紅車軸草提取物在更廣泛領(lǐng)域的應(yīng)用。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明公開了一種含紅車軸草提取物作物營(yíng)養(yǎng)液制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

1)紅車軸全草加水清洗后瀝干，轉(zhuǎn)移至敞口容器內(nèi)，適量牛奶、蜂蜜及酵母粉攪拌均勻，倒入容器內(nèi)，維持容器溫度25℃-40℃，發(fā)酵5-7天；

2)向步驟1)容器內(nèi)加入2倍體積50％乙醇溶液，升溫至45℃-55℃，浸提2-3h，固液分離得清液；

3)將步驟2)清液進(jìn)行超濾處理，收集透出液；

4)透出液中繼續(xù)加入95％乙醇至溶液乙醇濃度達(dá)到75％，控制溫度5℃-10℃，靜置3h-4h，加2％助濾劑過濾得到濾液；

5)步驟4)濾液進(jìn)行納濾處理，純化水頂洗至符合要求，停止頂洗，收集濃縮液；

6)步驟5)濃縮液復(fù)配1％-5％氨基酸、2％-3％磷酸二氫鉀、1％-1.5％蔗糖，灌裝即得作物營(yíng)養(yǎng)液。

進(jìn)一步，步驟1)牛奶、蜂蜜、酵母粉用量分別為紅車軸草的2％-3％、1％-2％、0.2％-0.3％。

進(jìn)一步，步驟1)發(fā)酵過程保持空氣暢通。

進(jìn)一步，步驟3)超濾膜孔徑為10000-30000道爾頓分子量。

進(jìn)一步，步驟4)使用助濾劑為珍珠巖、硅藻土、膨潤(rùn)土的一種或幾種混合。

進(jìn)一步，步驟5)納濾膜孔徑為300-500道爾頓分子量。

進(jìn)一步，步驟5)透出液電導(dǎo)率低于25μs/cm，停止頂洗。

進(jìn)一步，步驟5)納濾濃縮液體積控制為原液的0.2-0.25倍。

進(jìn)一步，步驟6)所述氨基酸為色氨酸、蛋氨酸、谷氨酸的一種或幾種混合。

本發(fā)明還要求保護(hù)使用上述方法制備得到的含紅車軸草提取物作物營(yíng)養(yǎng)液及其在蘋果、草莓、葡萄、柑橘、冬棗、桃、櫻桃等品種上的應(yīng)用。

本發(fā)明的有益效果是：

1)本發(fā)明制備生產(chǎn)工藝簡(jiǎn)單高效，發(fā)酵工藝與膜分離技術(shù)相結(jié)合，保證產(chǎn)品生物活性前提下，極大提高生產(chǎn)效率。同時(shí)設(shè)備要求低，易于規(guī)模化生產(chǎn)。

2)進(jìn)一步豐富紅車軸草提取物的使用范圍用途。本工藝制備紅車軸草提取物稀釋后葉面噴施果蔬，能夠顯著提高果品質(zhì)量，果實(shí)表光好、上色快、口感佳，這一應(yīng)用增加了紅車軸草的在農(nóng)業(yè)肥料上的應(yīng)用。

3)原料來源豐富，安全綠色。紅車軸草被作為牧草在我國(guó)廣泛種植，儲(chǔ)備豐富且價(jià)格低廉，紅車軸草提取物天然無害，是有機(jī)果蔬種植的理想肥料。

具體實(shí)施方式

以下結(jié)合實(shí)例對(duì)本發(fā)明的原理和特征進(jìn)行描述，所舉實(shí)例只用于解釋本發(fā)明，并非用于限定本發(fā)明的范圍。

實(shí)施例1

1)紅車軸全草加水清洗后瀝干取200kg，轉(zhuǎn)移至敞口容器內(nèi)，添加4kg牛奶、2kg蜂蜜及0.4kg酵母粉攪拌均勻，倒入容器內(nèi)，維持容器溫度30℃，發(fā)酵5天；

2)向步驟1)容器內(nèi)加入400l50％乙醇溶液，升溫至45℃，浸提2-3h，固液分離得清液約320l；

3)將步驟2)清液進(jìn)行超濾處理，超濾膜孔徑為10000道爾頓分子量，收集透出液270l；

4)透出液中繼續(xù)加入95％乙醇至溶液乙醇濃度達(dá)到75％，控制溫度5℃，靜置3h，加2％珍珠巖過濾得到濾液250l；

5)步驟4)濾液進(jìn)行納濾處理，納濾膜孔徑為300道爾頓分子量，純化水頂洗，至透出液電導(dǎo)率低于25μs/cm時(shí)，停止頂洗，收集濃縮液50l；

6)步驟5)濃縮液復(fù)配0.5kg氨基酸(色氨酸、蛋氨酸1:1混合)、1kg磷酸二氫鉀、0.5kg蔗糖，灌裝即得作物營(yíng)養(yǎng)液。

7)將作物營(yíng)養(yǎng)液稀釋200倍噴施于草莓果實(shí)膨大期，每次間隔7天共3次，采摘前一周加噴一次，可看到草莓果實(shí)顏色艷麗，上色均勻，果個(gè)正，果實(shí)品質(zhì)得到明顯提升。

實(shí)施例2

1)紅車軸全草加水清洗后瀝干取600kg，轉(zhuǎn)移至敞口容器內(nèi)，添加18kg牛奶、12kg蜂蜜及1.8kg酵母粉攪拌均勻，倒入容器內(nèi)，維持容器溫度35℃，發(fā)酵7天；

2)向步驟1)容器內(nèi)加入1200l50％乙醇溶液，升溫至50℃，浸提3h，固液分離得清液約1000l；

3)將步驟2)清液進(jìn)行超濾處理，超濾膜孔徑為20000道爾頓分子量，收集透出液730l；

4)透出液中繼續(xù)加入95％乙醇至溶液乙醇濃度達(dá)到75％，控制溫度8℃，靜置4h，加2％助濾劑(硅藻土與珍珠巖1:1混合)過濾得到濾液650l；

5)步驟4)濾液進(jìn)行納濾處理，納濾膜孔徑為500道爾頓分子量，純化水頂洗，至透出液電導(dǎo)率低于25μs/cm時(shí)，停止頂洗，收集濃縮液160l；

6)步驟5)濃縮液復(fù)配4.5kg氨基酸(色氨酸、蛋氨酸、谷氨酸1:1:1混合)、4.8kg磷酸二氫鉀、1.6kg蔗糖，灌裝即得作物營(yíng)養(yǎng)液。

7)將作物營(yíng)養(yǎng)液稀釋300倍噴施于櫻桃果實(shí)膨大期，每次間隔10天共3次，采摘前一周加噴一次，可看到櫻桃果實(shí)表皮光亮，上色多且均勻，果個(gè)相比對(duì)照整體偏大，果實(shí)品質(zhì)好。

實(shí)施例3

1)紅車軸全草加水清洗后瀝干取1000kg，轉(zhuǎn)移至敞口容器內(nèi)，添加30kg牛奶、20kg蜂蜜及3kg酵母粉攪拌均勻，倒入容器內(nèi)，維持容器溫度30℃，發(fā)酵7天；

2)向步驟1)容器內(nèi)加入2000l50％乙醇溶液，升溫至55℃，浸提3h，固液分離得清液約1600l；

3)將步驟2)清液進(jìn)行超濾處理，超濾膜孔徑為30000道爾頓分子量，收集透出液1400l；

4)透出液中繼續(xù)加入95％乙醇至溶液乙醇濃度達(dá)到75％，控制溫度10℃，靜置4h，加2％助濾劑(硅藻土與膨潤(rùn)土1:1混合)過濾得到濾液1300l；

5)步驟4)濾液進(jìn)行納濾處理，納濾膜孔徑為500道爾頓分子量，純化水頂洗，至透出液電導(dǎo)率低于25μs/cm時(shí)，停止頂洗，收集濃縮液300l；

6)步驟5)濃縮液復(fù)配15kg氨基酸(蛋氨酸、谷氨酸1:1混合)、9kg磷酸二氫鉀、4kg蔗糖，灌裝即得作物營(yíng)養(yǎng)液。

7)將作物營(yíng)養(yǎng)液稀釋200倍噴施于蘋果果實(shí)膨大期，間隔10天，共噴施3次，采摘前半個(gè)月每7天噴一次，共噴2次。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示處理組蘋果果實(shí)上色快、均勻，果個(gè)正，表光好，優(yōu)質(zhì)果率明顯增加。

以上所述僅為本發(fā)明的較佳實(shí)施例，并不用以限制本發(fā)明，凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)，所作的任何修改、等同替換、改進(jìn)等，均應(yīng)包含在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。