本發(fā)明屬于酒糟處理及發(fā)酵型肥料制備，具體涉及一種通過酒糟發(fā)酵得到的有機肥料及其制備方法。

背景技術(shù)：

1、白酒酒糟是釀造白酒的最主要副產(chǎn)物，約占制酒原料的65～80％。它由大曲、小曲或麩曲等糖化發(fā)酵劑對小麥、大麥、玉米和高粱等糧谷物進行發(fā)酵后剩余的殘渣組成。在我國，白酒釀造產(chǎn)量大，市場需求量高，每年能產(chǎn)出約2000萬噸白酒酒糟，由于白酒酒糟的酸度高、易腐敗，因此白酒酒糟的再開發(fā)對環(huán)境保護和資源利用的意義重大。白酒酒糟中含有豐富的粗蛋白、纖維素、氨基酸以及各種微量元素等，讓白酒酒糟的綜合利用成為了可能。當(dāng)前，白酒酒糟用于制造肥料主要是通過自然堆肥的方式，此方法生產(chǎn)出的肥料易使農(nóng)作物染病。

2、專利cn102653477b公開了一種酒糟型生物有機肥的制備方法，包括如下步驟：(1)煙曲霉種子培養(yǎng)液的制備：a.種子培養(yǎng)基配制；b.種子復(fù)活；c.種子活化；d.種子擴培；(2)生物有機肥的制備：按酒糟與水質(zhì)量比1∶1～1∶2混合均勻得培養(yǎng)基基質(zhì)，按液固比ml/g接種2～6％的煙曲霉種子培養(yǎng)液，通氣量15～30％，42～48℃下培養(yǎng)4～7天即可。由于煙曲霉菌是一種環(huán)境致病性絲狀真菌，可導(dǎo)致免疫功能低下者致命性的疾病，無論是在酒糟型生物有機肥的制備過程中還是酒糟型生物有機肥的使用過程中均可能對人員產(chǎn)生危害。

3、專利cn114774288a公開了哈茨木霉菌及其應(yīng)用和抗炭疽病促進草莓生長發(fā)育的微生物菌劑。哈茨木霉菌cm-26，分類命名為哈茨木霉(trichodermaharzianum)，保藏號為cgmcc?no.40010。所述微生物菌劑包含所述哈茨木霉菌的發(fā)酵液，還可以進一步包含海藻酸鉀或/和覆盆子葉子提取液。該哈茨木霉制備的微生物菌劑在促進草莓生長、促進光合以及防控草莓炭疽病方面均表現(xiàn)出顯著的功效。

4、霉菌在生物發(fā)酵領(lǐng)域，具有重要作用。霉菌種類繁多，不是所用霉菌都適合用于白酒酒糟有機肥料的發(fā)酵生產(chǎn)中。木霉菌在植物抗病害領(lǐng)域中具有較為突出的應(yīng)用，原因在于大多數(shù)木霉菌可產(chǎn)生多種對植物病原真菌、細菌具有拮抗作用的生物活性物質(zhì)，比如幾丁質(zhì)酶、β-1,3-葡聚糖酶、纖維素酶和蛋白酶等來分解植物病原真菌的細胞壁或分泌葡萄糖苷酶等胞外酶。木霉菌不產(chǎn)生抗藥性，無用藥安全間隔期，無農(nóng)殘，相較于其他化學(xué)農(nóng)藥和生物農(nóng)藥降低了對土地環(huán)境和人體的不良影響。木霉菌的培養(yǎng)通常需要通過多次單獨的發(fā)酵擴增，從而控制木霉菌的繁殖迭代速率，使各種營養(yǎng)物質(zhì)不會在木霉菌前幾次迭代中全部吸收，導(dǎo)致后續(xù)木霉菌活細胞數(shù)驟降。但對于大規(guī)模的有機化肥料工業(yè)化生產(chǎn)來說，多次單獨的發(fā)酵擴增過于繁瑣，不易實施。

5、因此研究一種具有抗病功效的酒糟發(fā)酵制備的有機肥料，擁有廣闊的應(yīng)用前景。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明通過玉米粉、蛋白胨、葡萄糖、瓊脂和無菌水的合適配比，得到利于哈茨木霉復(fù)活的玉米固體培養(yǎng)基，對哈茨木霉進行復(fù)活。然后通過玉米粉、七水硫酸鎂、硫酸銨、紅糖和無菌水的合適配比，得到利于哈茨木霉擴增的玉米液體培養(yǎng)基并對哈茨木霉進行擴增。再對含有大量蛋白質(zhì)、氨基酸和纖維素的白酒酒糟進行改性，將蛋白質(zhì)、氨基酸、纖維素同一水合檸檬酸進行交聯(lián)，進而實現(xiàn)對白酒酒糟營養(yǎng)物質(zhì)的包裹，包裹后的營養(yǎng)物質(zhì)相比于未包裹的營養(yǎng)物質(zhì)，能實現(xiàn)緩慢分解進而對哈茨木霉的發(fā)酵代謝起到調(diào)控，一方面，能夠達到控制哈茨木霉繁殖迭代速率的作用，實現(xiàn)了一次性持續(xù)發(fā)酵；另一方面，能夠更好的保留白酒酒糟有機肥料中的營養(yǎng)物質(zhì)不過多的被哈茨木霉所吸收而引起發(fā)酵異常的問題。最后將哈茨木霉種子液、改性白酒酒糟溶液與麥稈混合均勻后平鋪至玻璃板上進行發(fā)酵。麥稈的中空管狀結(jié)構(gòu)和平鋪至玻璃板能夠使好氧的哈茨木霉與氧氣的接觸面積增大，從而提高哈茨木霉的活率和抗病物質(zhì)的表達，解決了背景技術(shù)中提出的技術(shù)問題。具體地，本發(fā)明的技術(shù)方案包括以下內(nèi)容：

2、將玉米粉、蛋白胨、葡萄糖和瓊脂加入到無菌水中混合，然后加熱至50℃并攪拌到完全溶解后倒入培養(yǎng)皿，經(jīng)自然冷卻固化得到玉米固體培養(yǎng)基；

3、將哈茨木霉接種到所述玉米固體培養(yǎng)基中培養(yǎng)得到孢子平皿；

4、用無菌水沖洗所述孢子平皿得到孢子混懸液；

5、將玉米粉、七水硫酸鎂、硫酸銨和紅糖加入到無菌水中混合，然后加熱至50℃并攪拌到完全溶解后倒入錐形瓶得到玉米液體培養(yǎng)基；

6、將所述孢子混懸液接種到所述玉米液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)得到哈茨木霉種子液；

7、將白酒酒糟和水以質(zhì)量比1：1混合得到白酒酒糟溶液，在白酒酒糟溶液中加入一水合檸檬酸、氫氧化鈉后調(diào)節(jié)ph至7.0～8.0并加熱至50℃攪拌反應(yīng)1～1.5h得到改性白酒酒糟溶液；

8、將所述哈茨木霉種子液、所述改性白酒酒糟溶液、麥稈混合后發(fā)酵得到所述有機肥料。

9、進一步地，所述玉米固體培養(yǎng)基中的玉米粉：蛋白胨：葡萄糖：瓊脂：無菌水的質(zhì)量比為10：8：1：12：1000。使用玉米粉和蛋白胨的作用在于：相較常規(guī)的馬鈴薯葡萄糖固體培養(yǎng)基，制作更方便，且對哈茨木霉的復(fù)活效果更好。

10、進一步地，所述孢子平皿是將哈茨木霉接種到所述玉米固體培養(yǎng)基中在溫度28℃、濕度80％的環(huán)境下培養(yǎng)1天得到的含有哈茨木霉的平皿。

11、進一步地，所述無菌水沖洗孢子平皿的過程包括用5ml無菌水連續(xù)沖洗兩次孢子平皿。

12、進一步地，所述玉米液體培養(yǎng)基中的玉米粉：七水硫酸鎂：硫酸銨：紅糖：無菌水的質(zhì)量比為10：1：2：4：1000。使用紅糖的作用在于：相較常規(guī)的使用葡萄糖的培養(yǎng)基，對哈茨木霉的擴增效果更好。

13、進一步地，所述孢子混懸液接種到所述玉米液體培養(yǎng)基中培養(yǎng)的過程是將所述孢子混懸液接種到所述玉米液體培養(yǎng)基中在溫度24℃、濕度65％的環(huán)境下震蕩培養(yǎng)5～8天。

14、進一步地，所述一水合檸檬酸的使用量為每1000g所述白酒酒糟溶液加入0.5mol一水合檸檬酸。

15、進一步地，所述哈茨木霉種子液：所述改性白酒酒糟溶液、麥稈的質(zhì)量比為1：20：10。

16、進一步地，所述哈茨木霉種子液、所述改性白酒酒糟溶液和麥稈混合發(fā)酵后烘干的過程包括將所述哈茨木霉種子液、所述改性白酒酒糟溶液、麥稈混合均勻后平鋪至玻璃板上并在溫度28℃的環(huán)境中發(fā)酵20～25天后烘干。使用麥稈的作用在于：麥稈的成分有利于哈茨木霉的發(fā)酵，同時麥稈的中空管狀結(jié)構(gòu)有利于通氣，增強哈茨木霉有氧發(fā)酵，提高了有機肥料中哈茨木霉活性，進而提高了有機肥料的抗病功效。

17、進一步地，所述所述哈茨木霉種子液：所述改性白酒酒糟溶液：麥稈的質(zhì)量比為1：20：10。

18、進一步地，所述混合發(fā)酵的過程中需要保持含水量在30％以上。

19、一種通過酒糟發(fā)酵得到的有機肥料的制備方法制備得到的有機肥料。

20、與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果如下：

21、(1)本發(fā)明通過使用對哈茨木霉復(fù)活培養(yǎng)更有效的玉米粉、蛋白胨作為固體培養(yǎng)基，提高了復(fù)蘇的效果和效率。并使用對哈茨木霉擴增培養(yǎng)有促進作用的紅糖加入玉米粉液體培養(yǎng)基，提高了擴增的效果和效率。最后將哈茨木霉種子液、改性白酒酒糟溶液與麥稈混合均勻后平鋪至玻璃板上進行發(fā)酵。麥稈的中空管狀結(jié)構(gòu)和平鋪至玻璃板能夠使好氧的哈茨木霉與氧氣的接觸面積增大，從而提高哈茨木霉的活率和抗病物質(zhì)的表達能力。

22、(2)本發(fā)明通過對含有大量蛋白質(zhì)、氨基酸和纖維素的白酒酒糟進行改性，通過檸檬酸在堿性環(huán)境下可以與羥基基團和氨基集團分別發(fā)生交聯(lián)反應(yīng)，使蛋白質(zhì)、氨基酸與纖維素交聯(lián)形成籠式或爪式的包裹結(jié)構(gòu)，并將其他物質(zhì)包裹在其中。這種包裹的交聯(lián)結(jié)構(gòu)使得白酒酒糟中的營養(yǎng)物質(zhì)不能快速被哈茨木霉吸收，需通過發(fā)酵的過程逐漸分解成小分子物質(zhì)并釋放，來調(diào)控哈茨木霉的發(fā)酵代謝。一方面，能夠通過限制哈茨木霉繁殖所需營養(yǎng)物質(zhì)的釋放，從而達到控制哈茨木霉繁殖迭代速率的作用，實現(xiàn)一次性持續(xù)發(fā)酵的目的；另一方面，能夠更好的保留白酒酒糟有機肥料中植物所需營養(yǎng)物質(zhì)不會過多的被哈茨木霉所吸收而引起的發(fā)酵異常問題。

23、(3)通過實施例6與實施例1～5的有機肥料活菌數(shù)、植物所需營養(yǎng)物質(zhì)含量、抗病功效結(jié)果可以發(fā)現(xiàn)，對白酒酒糟溶液進行改性時，交聯(lián)反應(yīng)時間過長會讓蛋白質(zhì)、氨基酸與纖維素交聯(lián)的包裹結(jié)構(gòu)數(shù)量過多且不易被分解，導(dǎo)致哈茨木霉在迭代初期無法獲取足夠的營養(yǎng)物質(zhì)用于繁殖，使哈茨木霉的活菌數(shù)減少，且在迭代后期無法獲取足夠的營養(yǎng)物質(zhì)用于表達具有抗病功效的代謝物，使有機肥料的抗病效果變差，并影響到白酒酒糟溶液的進一步發(fā)酵，使植物所需營養(yǎng)物質(zhì)的含量降低。