一種用于蛹蟲草子實(shí)體栽培的培養(yǎng)基及其制備和使用方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及食用菌培養(yǎng)領(lǐng)域，具體為一種用于蛹蟲草子實(shí)體栽培的培養(yǎng)基及其制 備和使用方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 蛹蟲草（Cordycepsmilitaris)又叫北冬蟲夏草，它與冬蟲夏草（Cordyceps sinensis)同屬于真菌門子囊菌亞門蟲草屬，因此被業(yè)內(nèi)專家稱為冬蟲夏草的同屬"兄弟"。 蛹蟲草生活史的有性階段包括菌絲體生長(zhǎng)和子實(shí)體生長(zhǎng)。鱗翅目、鞘翅目、雙翅目等昆蟲 幼蟲或蛹感染到擬青霉的孢子，當(dāng)環(huán)境條件適宜時(shí)，孢子便萌發(fā)形成菌絲體，菌絲體吸取蟲 (蛹）體內(nèi)的營(yíng)養(yǎng)作為其生長(zhǎng)發(fā)育的物質(zhì)和能源。當(dāng)菌絲把蟲（蛹）體內(nèi)的各種組織和器 官分解完畢后，菌絲體發(fā)育由營(yíng)養(yǎng)生長(zhǎng)轉(zhuǎn)為生殖生長(zhǎng)，菌絲體逐漸扭結(jié)分化形成菌核并穿 出體外成為橘黃色或橘紅色的頂部略膨大的、呈棒狀的子座（子實(shí)體），子座多從蟲體的頭 部、胸部、近尾部等處伸出。
[0003] 野生的北冬蟲夏草與傳統(tǒng)的冬蟲夏草相似，在自然界中極為稀少。許多學(xué)術(shù)論文 的研宄結(jié)果表明，北冬蟲夏草在藥效成分上與天然冬蟲夏草相近，其藥用和食用價(jià)值可與 天然的冬蟲夏草媲美。在已報(bào)道的350余種蟲草菌中，蛹蟲草是少有的能形成大量蟲草素 的蟲草菌。因?yàn)榕c冬蟲夏草親緣關(guān)系最近、有效成分相當(dāng)甚至更高，且可以人工栽培，北冬 蟲夏草成為天然冬蟲夏草的理想代用品。工廠化生產(chǎn)的北冬蟲夏草素含量高于天然冬蟲夏 草，其蛋白質(zhì)、氨基酸、維生素和微量元素的含量均達(dá)到甚至超過了天然冬蟲夏草的水平。 在2009年，中華人民共和國(guó)國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì)批準(zhǔn)蛹蟲草為新資源食品。
[0004] 隨著野生冬蟲夏草資源日益枯竭和價(jià)格飛漲，人們一直致力于蛹蟲草子實(shí)體的人 工栽培，以蛹蟲草子實(shí)體作為冬蟲夏草的替代品。目前，在生產(chǎn)實(shí)踐中應(yīng)用的蛹蟲草子實(shí)體 栽培培養(yǎng)基主要有以下幾種：①大米l〇〇〇g，葡萄糖30g，磷酸二氫鉀lg，硫酸鎂0. 2g，維生 素Bl片，水500ml。②小麥1000g，葡萄糖30g，磷酸二氫鉀lg，硫酸鎂0. 2g，維生素Bl片， 水500ml。③大米500個(gè)，小麥500g，葡萄糖30g，磷酸二氫鉀lg，硫酸鎂0. 2g，維生素Bl 片，水500ml。④大米900,蠶蛹粉25,蔗糖5,蛋白胨1. 5,酵母粉0. 5,VBl微量，水500ml。
[0005] 野生蛹蟲草是在含有大量昆蟲蛋白的蠶蛹體內(nèi)生長(zhǎng)的，表明培養(yǎng)基中含有蠶蛹組 分（如蠶蛹蛋白質(zhì)）對(duì)提高蛹蟲草子實(shí)體質(zhì)量和產(chǎn)量更有利。然而，因?yàn)樾Q蛹原料成本高、 操作難度大等原因，在實(shí)際生產(chǎn)中難以采用蠶蛹或其組分做培養(yǎng)基，從而導(dǎo)致人工栽培生 產(chǎn)中的蛹蟲草產(chǎn)量及有效成分均大幅下降等問題。因此，亟需開發(fā)一種可用于蛹蟲草子實(shí) 體栽培、具有蠶蛹組分類似物（或替代物）、營(yíng)養(yǎng)豐富且價(jià)格低廉的新型培養(yǎng)基，以滿足實(shí) 際生產(chǎn)的需求。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的在于提供一種用于蛹蟲草子實(shí)體栽培的培養(yǎng)基及其制備和使用方 法，該培養(yǎng)基可有效提高蛹蟲草子實(shí)體的產(chǎn)量和質(zhì)量，且可減少大米、小麥、牛肉膏或蛋白 胨用量，有效降低生產(chǎn)成本。
[0007] 為實(shí)現(xiàn)本發(fā)明的上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案是：
[0008] -種用于蛹蟲草子實(shí)體栽培的培養(yǎng)基，采用以下原料組成之一：
[0009] (1)小麥或大米100?900g，葡萄糖2?20g，磷酸二氫鉀0? 1?I. 0g，硫酸鎂 0? 05?0? 5g，維生素Bl:1?10mg，稻草粉100?500g，Vc發(fā)酵廢棄醪液50?500ml，水 0 ?250ml;
[0010] (2)小麥或大米300?1000g，Vc發(fā)酵廢棄醪液100?700ml，水0?250ml;
[0011] (3)小麥100?600g，大米100?600g，Vc發(fā)酵廢棄醪液100?700ml，水0? 250ml〇
[0012] 所述的用于蛹蟲草子實(shí)體栽培的培養(yǎng)基，由以下原料組成：
[0013] 小麥或大米500g，葡萄糖10g，磷酸二氫鉀0? 5g，硫酸鎂0?lg，維生素BI:2mg，稻 草粉300g，Vc發(fā)酵廢棄醪液250ml，水250ml。
[0014] 所述的用于蛹蟲草子實(shí)體栽培的培養(yǎng)基，由以下原料組成：小麥或大米900g，Vc 發(fā)酵廢棄醪液500ml，水0?250ml。
[0015] 所述的用于蛹蟲草子實(shí)體栽培的培養(yǎng)基，由以下原料組成：小麥450g，大米450g， Vc發(fā)酵廢棄醪液500ml，水0?250ml。
[0016] 所述的用于蛹蟲草子實(shí)體栽培的培養(yǎng)基，稻草粉采用花生殼粉、玉米芯粉、小麥秸 桿粉或經(jīng)粉碎后闊葉樹的枯萎落葉代替。
[0017] 所述的用于蛹蟲草子實(shí)體栽培的培養(yǎng)基，稻草粉、花生殼粉、玉米芯粉、小麥秸桿 粉或經(jīng)粉碎后闊葉樹的枯萎落葉的大小范圍為0. 1?5. 0_。
[0018] 所述的用于蛹蟲草子實(shí)體栽培的培養(yǎng)基，Vc發(fā)酵廢棄醪液呈灰褐色、粘稠狀，COD 值7?10萬mg/L，它是維生素C第二步發(fā)酵的發(fā)酵液在后續(xù)提取步驟中經(jīng)過超濾膜截留后 剩余的10萬道爾頓以上的大分子物質(zhì)的水溶液，主要成分為巨大芽孢桿菌和生酮基古龍 酸菌的菌體、菌體碎片、剩余培養(yǎng)基如玉米漿、尿素，Vc發(fā)酵廢棄醪液中干物質(zhì)重量占10? 15%，而粗蛋白重量占干物質(zhì)的60?65%。
[0019] 所述的用于蛹蟲草子實(shí)體栽培的培養(yǎng)基的制備方法，具體步驟為：
[0020] 1)裝瓶：取容積1000?5000ml、高10?30cm的器具，加入所述的培養(yǎng)基，用聚丙 烯薄膜和皮筋包扎封口；
[0021] 2)滅菌及接種：常壓滅菌100°C維持8?10h，或者高壓0.IMPa滅菌121°C滅菌 Ih;滅菌后的培養(yǎng)基、接種用具均進(jìn)接種室；液體菌種接種使用配置噴頭的移液槍，每瓶接 種3ml液體菌種。
[0022] 所述的用于蛹蟲草子實(shí)體栽培的培養(yǎng)基的使用方法，蛹蟲草子實(shí)體的栽培過程如 下：
[0023] (1)發(fā)菌階段：時(shí)間10?14d，溫度保持在16?20°C，相對(duì)濕度控制在55?65%;
[0024] (2)轉(zhuǎn)色階段：菌絲發(fā)滿后就要光照，光照強(qiáng)度為150?2501ux，每天不少于2h， 培養(yǎng)溫度20?25 °C，2?3d從白色轉(zhuǎn)為橘黃色；
[0025] (3)催芽及出草階段：催芽階段溫度白天保持為20?25°C、晚上為10?12°C，催 芽一至兩個(gè)星期恢復(fù)正常培養(yǎng)溫度20?25°C;出草初期的濕度保持75?85%，待子實(shí)體 生長(zhǎng)至Icm時(shí)，用消毒過的牙簽等尖銳物在封口膜上戳4?6個(gè)孔，加大濕度至85?95% 每天早、中、晚三次通風(fēng)，通風(fēng)時(shí)間為30min，每天12h以上光照；
[0026] (4)采收及保存：蛹蟲草子實(shí)體長(zhǎng)至8?12cm時(shí)，頭部表面出現(xiàn)粒狀粉末時(shí)，表明 子實(shí)體成熟，進(jìn)行采收；采收后的子實(shí)體40°C溫度以下烘干或晾干，密封于塑料袋中，短期 保存置陰涼干燥處，長(zhǎng)期保存置于低溫冰柜中。
[0027] 本發(fā)明的設(shè)計(jì)思想是：
[0028] 本發(fā)明培養(yǎng)基中添加維生素C發(fā)酵的廢棄醪液，其中含有大量菌體蛋白及殘余培 養(yǎng)基，既可以全部或部分替代栽培培養(yǎng)基中蠶蛹蛋白、牛肉膏或蛋白胨，也可以大幅減少小 麥或大米用量，使蛹蟲草子實(shí)體的產(chǎn)量和質(zhì)量獲得提高，又同時(shí)把維生素C發(fā)酵工業(yè)的廢 棄醪液予以資源化利用，降低生產(chǎn)成本和環(huán)保壓力。維生素C的工業(yè)生產(chǎn)采用生物發(fā)酵工 藝，排放出大量廢棄發(fā)酵醪液。該廢棄發(fā)酵醪液呈灰褐色、略粘稠狀，COD值7?10萬mg/ L，它是維生素C第二步發(fā)酵的發(fā)酵液在后續(xù)提取步驟中經(jīng)過超濾膜截留后剩余的10萬道 爾頓以上的大分子物質(zhì)的水溶液，主要成分為巨大芽孢桿菌和生酮基古龍酸菌的菌體、菌 體碎片、剩余培養(yǎng)基如玉米漿、尿素等，其中干物質(zhì)重量占10?15%，而粗蛋白重量占干物 質(zhì)的60?65 %，故又稱醪液蛋白渣。發(fā)酵醪液雖在發(fā)酵生產(chǎn)中被視為廢物，但其含有多種 蛋白、脂肪、生長(zhǎng)素、礦物質(zhì)等營(yíng)養(yǎng)素，可做為蛹蟲草子實(shí)體栽培培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)元素再利用。 采用簡(jiǎn)便有效的提取方法，不僅可以獲得優(yōu)質(zhì)蛋白培養(yǎng)基，同時(shí)也解決了困擾工業(yè)生物發(fā) 酵廠的廢物處理問題。
[0029] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)及有益效果如下：
[0030] 1、本發(fā)明提供一種用于蛹蟲草子實(shí)體栽培的培養(yǎng)基及其制備和使用方法，在培養(yǎng) 基中添加維生素C發(fā)酵工業(yè)的廢棄醪液，該醪液中含有巨大芽孢桿菌和生酮基古龍酸菌的 菌體蛋白及殘余發(fā)酵培養(yǎng)基，與蛹蟲草培養(yǎng)基中的蠶蛹粉、牛肉膏和蛋白胨組分近似，因此 可以部分甚至全部替代培養(yǎng)基中蠶蛹粉、牛肉膏和蛋白胨，同時(shí)又以稻草粉來補(bǔ)充碳源并 提供固體材料。
[0031] 2、本發(fā)明既可大幅度減少小麥或大米用量，使蛹蟲草子實(shí)體栽培的產(chǎn)量和質(zhì)量獲 得提高，又同時(shí)把維生素C發(fā)酵工業(yè)的廢棄醪液予以資源化利用，有效降低了生產(chǎn)成本。
【具體實(shí)施方式】
[0032] 在【具體實(shí)施方式】中，本發(fā)明用于蛹蟲草子實(shí)體栽培的培養(yǎng)基，由以下原料組成：
[0033] (1)小麥（或大米）100?900g(500g最佳），葡萄糖2?20g(IOg最佳），磷酸二 氫鉀0? 1?I.Og(0? 5g最佳），硫酸鎂0? 05?0? 5g(0?Ig最佳），維生素BI:1?IOmg(2mg 最佳），稻草粉100?500g(300g最佳，且不僅限于稻草粉），Vc發(fā)酵廢棄醪液50? 500ml(250ml最佳），水250ml。
[0034] (2)小麥（或大米）300?IOOOg(900g最佳），Vc發(fā)酵廢棄醪液100?700ml(500ml 最佳），水0?250ml。
[0035] (3)小麥100?600g(450g最佳），大米100?600g(450g最佳），Vc發(fā)酵廢棄醪 液100?700ml(500ml最佳），水0?250ml。
[0036] 其中，稻草粉（不僅限于稻草粉）為4_以下長(zhǎng)度稻草秸桿粉碎物，也可以是花生 殼粉、玉米芯