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一種荒漠土壤微滴灌微生物菌肥的制備方法_2

文檔序號:9283560閱讀:來源:國知局
O 1L,pH 7.0的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,接種量2.0%,180r/min,28°C發(fā)酵36小時(shí)而成。
[0021]膠質(zhì)芽孢桿菌(Bacillus mucilaginosus)發(fā)酵原液制備:選擇與模式菌株膠質(zhì)芽抱桿菌(Bacillus mucilaginosus ASl.3714 ;DQ898309)喊基序列相似度在 99%及以上的菌種中的一種,在蔗糖 5.0g/L, Na2HPO40.2g/L,MgSO4.7H20 0.5g/L,F(xiàn)eCl30.005g/L,CaCO30.lg/L, KCl 0.5g/L,H2O 1L,pH 7.0 的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,接種量 2.0%, 180r/min, 29°C發(fā)酵36小時(shí)而成。
[0022]沼澤紅假單胞菌(Rhodoseudanonas palustris)發(fā)酵原液制備:選擇與模式菌株膠質(zhì)芽孢桿菌(Bacillus mucilaginosus ACCC10649)堿基序列相似度在99%及以上的菌種中的一種,在酵母粉 3.0g/L, MgS04.7H20 0.5g/L,蛋白胨 3.0g/L, CaCl20.3g/L,H2O 1L,pH 6.8的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,接種量2.0%,180r/min,28°C發(fā)酵36小時(shí)而成。
[0023]維涅蘭德固氮菌(Azotobacter vinelandii Lipman)發(fā)酵原液制備:選擇與模式菌株膠質(zhì)芽孢桿菌(Bacillus mucilaginosus ACCC10087)堿基序列相似度在99%及以上的菌種中的一種,在 KH2PO40.2g/L,K2HPO40.8g/L,MgSO4.7H20 2.0g/L, CaSO4.2H20 0.lg/L, Na2MoO4.2H20 0.05g/L,酵母膏 0.5g/L,甘露醇 20.0g/L, FeCl30.05g/L,H2O 1L,pH 7.2的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,接種量2.0%,180r/min,29°C發(fā)酵36小時(shí)而成。
[0024]實(shí)施例1:將地衣芽抱桿菌(Bacillus licheniformis),枯草芽抱桿菌(Bacillussubtilis subsp.subtilis),波茨坦芽抱桿菌(Brevibacillus borstelensis),膠質(zhì)芽抱桿菌(Bacillus mucilaginosus),沼澤紅假單胞菌(Rhodop seudanonas palustris),維捏蘭德固氮菌(Azotobacter vinelandii Lipman)6種發(fā)酵原液按體積比I:1:1:2:2 ;3的比例混合,在(NH4) S042.0g/L、NaH2PO4L 5g/L、pH6.5,質(zhì)量百分含量為2.0%的淀粉水溶液中,經(jīng)34°C,48h的條件下通氣攪拌發(fā)酵,直至培養(yǎng)液中微生物含量不低于4.0X 18CFU (菌落形成單位)ML,即得到荒漠土壤微滴灌生物液體菌肥,或經(jīng)噴霧干燥得到荒漠土壤微滴灌生物粉狀菌肥。
[0025]實(shí)施例2:將地衣芽抱桿菌(Bacillus licheniformis),枯草芽抱桿菌(Bacillussubtilis subsp.subtilis),波茨坦芽抱桿菌(Brevibacillus borstelensis),膠質(zhì)芽抱桿菌(Bacillus mucilaginosus),沼澤紅假單胞菌(Rhodop seudanonas palustris),維捏蘭德固氮菌(Azotobacter vinelandii Lipman)6種發(fā)酵原液按體積比I:1:1:2:2 ;3的比例混合,在(NH4) S044.0g/L、NaH2P043.0g/L、pH7.5,質(zhì)量百分含量為2.0%的淀粉水溶液中,經(jīng)28°C,36h的條件下通氣攪拌發(fā)酵,直至培養(yǎng)液中微生物含量不低于4.0X 18CFU (菌落形成單位)/mL,即得到荒漠土壤微滴灌生物液體菌肥,或經(jīng)噴霧干燥得到荒漠土壤微滴灌生物粉狀菌肥。
[0026]實(shí)施例3:將地衣芽抱桿菌(Bacillus licheniformis),枯草芽抱桿菌(Bacillussubtilis subsp.subtilis),波茨坦芽抱桿菌(Brevibacillus borstelensis),膠質(zhì)芽抱桿菌(Bacillusmucilaginosus),沼澤紅假單胞菌(Rhodop seudanonas palustris),維捏蘭德固氮菌(Azotobacter vinelandii Lipman)6種發(fā)酵原液按體積比I:1:1:2:2 ;3的比例混合,在(NH4) S043.0g/L、NaH2P042.5g/L、pH7.0,質(zhì)量百分含量為2.0%的淀粉水溶液中,經(jīng)30°C,42h的條件下通氣攪拌發(fā)酵,直至培養(yǎng)液中微生物含量不低于4.0X 18CFU (菌落形成單位)/mL,即得到荒漠土壤微滴灌生物液體菌肥,或經(jīng)噴霧干燥得到荒漠土壤微滴灌生物粉狀菌肥。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種荒漠土壤微滴灌微生物菌肥的制備方法,其特征在于,依次包括如下步驟: A、配料:將地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、波茨坦芽孢桿菌、膠質(zhì)芽孢桿菌、沼澤紅假單胞菌、維涅蘭德固氮菌6種發(fā)酵原液按體積比1:1:1:2:2:3的比例充分混勻; B、接種:按總量為10.0%的接種量接種于(NH4) SO4 2.0?4.0g/L,NaH2PO4 1.5?3.0g/L,質(zhì)量百分含量為2.0%的淀粉水溶液中,pH7.0的發(fā)酵培養(yǎng)基中; C、發(fā)酵:經(jīng)28?34°C,36?48h的條件下通氣攪拌發(fā)酵,直至培養(yǎng)液中微生物含量不低于4.0X 10sCFU/mL,即得到荒漠土壤微滴灌生物液體菌肥;或經(jīng)噴霧干燥得到荒漠土壤微滴灌粉狀生物菌肥。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的荒漠土壤微滴灌微生物菌肥的制備方法,其特征在于,它的發(fā)酵原液各組分體積份配比為:地衣芽孢桿菌發(fā)酵原液I份,枯草芽孢桿菌發(fā)酵原液I份,波茨坦芽孢桿菌發(fā)酵原液I份,膠質(zhì)芽孢桿菌發(fā)酵原液2份,沼澤紅假單胞菌發(fā)酵原液3份。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的荒漠土壤微滴灌微生物菌肥的制備方法,其特征在于,所述的地衣芽孢桿菌發(fā)酵原液為與模式菌株地衣芽孢桿菌堿基序列相似度在90%及以上的菌種中的一種,在蛋白胨20.0g/L,酵母粉10.0g/L,NaCl 5.0g/L, H2O IL,pH 7.0的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,接種量2.0%,180r/min,37°C發(fā)酵36小時(shí)而成。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的荒漠土壤微滴灌微生物菌肥的制備方法,其特征在于,所述的枯草芽孢桿菌為與模式菌株枯草芽孢桿菌堿基序列相似度在90%及以上的菌種中的一種,在牛肉膏 20.0g/L,蛋白胨 16.0g/L,葡萄糖 12.0g/L,NaCl 5.0g/L, H2O IL,ρΗ7.2的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,接種量2.0%,180r/min,28°C發(fā)酵36小時(shí)而成。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的荒漠土壤微滴灌微生物菌肥的制備方法,其特征在于,所述的波茨坦芽孢桿菌為與模式菌株波茨坦芽孢桿菌堿基序列相似度在99%及以上的菌種中的一種,在牛肉膏5.(^/1,蛋白胨8.(^/1,他(:1 5.0g/L, H2O I L,pH 7.0的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,接種量2.0%,180r/min,28°C發(fā)酵36小時(shí)而成。6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的荒漠土壤微滴灌微生物菌肥的制備方法,其特征在于,所述的膠質(zhì)芽孢桿菌為與模式菌株膠質(zhì)芽孢桿菌堿基序列相似度在99%及以上的菌種中的一種,在蔗糖 5.0g/L, Na2HPO4 0.2g/L,MgSO4.7H20 0.5g/L,F(xiàn)eCl3 0.005g/L,CaCO3 0.lg/L,KCl 0.5g/L,H2O I L , pH 7.0的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,接種量2.0%,180r/min,29°C發(fā)酵36小時(shí)ntjD7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的荒漠土壤微滴灌微生物菌肥的制備方法,其特征在于,所述的沼澤紅假單胞菌為與模式菌株膠質(zhì)芽孢桿菌堿基序列相似度在99%及以上的菌種中的一種,在酵母粉 3.0g/L, MgS04.7H20 0.5g/L,蛋白胨 3.0g/L, CaCl2 0.3g/L,H2O I L,pH6.8的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,接種量2.0%,180r/min,28°C發(fā)酵36小時(shí)而成。8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的荒漠土壤微滴灌微生物菌肥的制備方法,其特征在于,所述的維涅蘭德固氮菌為與模式菌株膠質(zhì)芽孢桿菌堿基序列相似度在99%及以上的菌種中的一種,在 KH2PO4 0.2g/L,K2HPO4 0.8g/L,MgSO4.7H20 2.0g/L, CaSO4.2H20 0.lg/L,Na2MoO4.2H20 0.05g/L,酵母膏 0.5g/L,甘露醇 20.0g/L, FeCl3 0.05g/L,H2O I L,pH 7.2的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,接種量2.0%,180r/min,29°C發(fā)酵36小時(shí)而成。
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種荒漠土壤微滴灌微生物菌肥的制備方法。它是將地衣芽孢桿菌、枯草芽孢桿菌、波茨坦芽孢桿菌、膠質(zhì)芽孢桿菌、沼澤紅假單胞菌、維涅蘭德固氮菌6種菌相似菌株中的一種,在各自基礎(chǔ)培養(yǎng)基中按接種量2.0%,28~37℃,180r/min發(fā)酵36小時(shí)得到各菌種的發(fā)酵原液;再將6種發(fā)酵原液按體積比1:1:1:2:2;3的比例混合,在(NH4)SO4?2.0~4.0g/L、NaH2PO4?1.5~3.0g/L、pH6.5~7.5,質(zhì)量百分含量為2.0%的淀粉水溶液中,經(jīng)28~34℃,36~48h的條件下通氣攪拌發(fā)酵,直至培養(yǎng)液中微生物含量不低于4.0×108CFU菌落形成單位/mL而得到的。
【IPC分類】C05G3/04
【公開號】CN105001017
【申請?zhí)枴緾N201510333876
【發(fā)明人】張宇, 曾雪
【申請人】西南科技大學(xué)
【公開日】2015年10月28日
【申請日】2015年6月16日
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