專利名稱：吡咯烷羰基氨基環(huán)狀二硫化物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明廣義上涉及在炎性疾病治療中用作有效治療劑的吡咯烷基環(huán)狀二硫化物類化合物。
血管細胞粘附分子-1(VCAM-1)是免疫球蛋白(Ig)超基因家族的一員，其表達在活化的內(nèi)皮上。整聯(lián)蛋白VLA-4(α4β1)是VCAM-1的主要受體。VLA-4表達在多種細胞類型上，包括循環(huán)淋巴細胞、嗜曙紅細胞、嗜堿性粒細胞和單核細胞。VCAM-1還結(jié)合第二整聯(lián)蛋白LPAM-1(淋巴集結(jié)粘附分子)并且表達在B和T細胞上。整聯(lián)蛋白LPAM-1也可以結(jié)合另一種稱作粘膜定址細胞粘附分子(MadCAM)的細胞粘附分子。整聯(lián)蛋白VLA-4和LPAM-1與細胞粘附分子VCAM-1或MadCAM的結(jié)合在正常情況下允許大分子和循環(huán)細胞從血液通過到達組織。然而，整聯(lián)蛋白與細胞粘附分子的結(jié)合可能導(dǎo)致所不期望的炎癥，其中上述種類的細胞會浸潤組織并導(dǎo)致組織損傷。
因此，那些抑制整聯(lián)蛋白與細胞粘附分子的結(jié)合的細胞粘附分子/整聯(lián)蛋白拮抗劑能夠預(yù)防不期望的炎癥。例如，需要上述拮抗劑來預(yù)防炎性腸病引起的組織損傷、關(guān)節(jié)炎中T細胞遷出、嗜曙紅細胞積聚和哮喘中支氣管收縮，并且延長組織同種異體移植物的存活時間。
所以，本發(fā)明的目的在于提供下面通式I的化合物
其中R2和R3各自獨立地是低級烷基，或與其所連的碳原子一起構(gòu)成含有4-6個碳原子的脂族碳環(huán)；R5是氫、低級烷基、R-SO2-、R6-(CH2)m-CO-或R8-X-(CH2)y-CO-；R是低級烷基；R6和R8是氫或低級烷基；X為-O-或-NH-；m是1-7的整數(shù)，y是0-7的整數(shù)，和n是1-3的整數(shù)；同時a、b、c和d表示不對稱碳原子；和及其可水解酯或醚。
R2和R3與其所連的碳原子一起構(gòu)成含有4-7個碳原子的環(huán)烷基或環(huán)烯基，例如環(huán)戊烷、環(huán)戊烯、環(huán)丁烷、環(huán)丁烯、環(huán)己烷或環(huán)己烯。
下面是本發(fā)明的優(yōu)選實施方式(i)式I的化合物，其中R2和R3與其所連的碳原子一起構(gòu)成含有4-6個碳原子的脂族環(huán)烷環(huán)或其藥學(xué)可接受的鹽。
(ii)按照(i)的化合物，其中R2和R3與其所連的碳原子一起構(gòu)成環(huán)戊烷環(huán)或其藥學(xué)可接受的鹽。
(iii)按照(ii)的化合物，具有下式結(jié)構(gòu) 或其藥學(xué)可接受的鹽。
(iv)按照(iii)的化合物，其是(8R，13R)-13-[[[3-(R)-(4-羥苯基)-2-(S)-吡咯烷基]羰基]氨基]-6，14-二氧代-10，11-二硫雜-7，15-二氮雜螺[4.12]十七烷-8-甲酸或其藥學(xué)可接受的鹽。
(v)按照(iii)的化合物，其中R5是R6-(CH2)mCO-或其藥學(xué)可接受的鹽。
(vi)按照(v)的化合物，其是(8R，13R)-13-[[[1-乙酰基-3-(R)-(4-羥苯基)-2-(S)-吡咯烷基]羰基]氨基]-6，14-二氧代-10，11-二硫雜-7，15-二氮雜螺[4.12]十七烷-8-甲酸或其藥學(xué)可接受的鹽。
(vii)按照(v)的化合物，其是(8R，13R)-13-[[[1-(2，2-二甲基-1-氧代丙基)-3-(R)-(4-羥苯基)-2-(S)-吡咯烷基]-羰基]氨基]-6，14-二氧代-10，11-二硫雜-7，15-二氮雜螺[4.12]十七烷-8-甲酸或其藥學(xué)可接受的鹽。
(viii)按照(iii)的化合物，其中R5是R8-X-(CH2)y-CO-或其藥學(xué)可接受的鹽。
(ix)按照(viii)的化合物，其中X是氧或其藥學(xué)可接受的鹽。
(x)按照(iii)的化合物，其中R5是氫或其藥學(xué)可接受的鹽。
(xi)按照(x)的化合物，其是(8R，13R)-13-[[[3-(R)-(4-羥苯基)-2-(S)-吡咯烷基]羰基]-2-(S)-吡咯烷基]羰基]氨基]-6，14-二氧代-10，11-二硫雜-7，15-二氮雜螺[4.12]十七烷-8-甲酸或其藥學(xué)可接受的鹽。
(xii)按照(iii)的化合物，其中R5是R-SO2-或其藥學(xué)可接受的鹽。
(xiii)按照(iii)的化合物，其中R5是低級烷基或其藥學(xué)可接受的鹽。
(xiv)按照(xii)的化合物，其是(8R，13R)-13-[[[1-甲磺?；?3(R)-(4-羥苯基)-2(S)-吡咯烷基]羰基]氨基]-6，14-二氧代-10，11-二硫雜-7，15-[4.12]十七烷-8-甲酸或其藥學(xué)可接受的鹽。
(xv)按照(i)的化合物，其中R2和R3與其所連的碳原子一起構(gòu)成環(huán)己烷環(huán)或其藥學(xué)可接受的鹽。
(xvi)按照(xv)的化合物具有下式結(jié)構(gòu)
(xvii)按照(xvi)的化合物，其是(9R，14R)-14-[[[3-(R)-(4-羥苯基)-2-(S)-吡咯烷基]羰基]氨基]-7，15-二氧代-11，12-二硫雜-8，16-二氮雜螺[5.12]十八烷-9-甲酸或其藥學(xué)可接受的鹽。
(xviii)按照(xvi)的化合物，其中R5為R6-(CH2)m-CO-或其藥學(xué)可接受的鹽。
(xix)按照(xviii)的化合物，其是(9R，14R)-14-[[[1-乙?；?3(R)-(4-羥苯基)-2-(S)-吡咯烷基]羰基]氨基]-7，15-二氧代-11，12-二硫雜-8，16-二氮雜螺[5.12]十八烷-9-甲酸或其藥學(xué)可接受的鹽。
(xx)通式″A″的化合物 其中R1與其所連的氧構(gòu)成可水解酯基；R2和R3各自獨立地是低級烷基，或與其所連的碳原子一起構(gòu)成含有4-6個碳原子的脂族碳環(huán)；R9是氨基保護基；R10和R10’是硫基保護基；和n是1-3的整數(shù)。
(xxi)按照(xx)的化合物，其中R2和R3與其所連碳原子一起構(gòu)成環(huán)戊烷環(huán)。
(xxii)按照(xxi)的化合物，其是2(R)-[[[1-[[2(R)-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-1-氧代-3-[(三苯甲基)硫代]丙基]氨基]乙基]環(huán)戊基]羰基]氨基-3-[(三苯甲基)硫代]丙酸1，1-二甲基乙酯。
(xxiii)通式″B″的化合物 其中R1與其所連的氧構(gòu)成可水解酯基；R2和R3各自獨立地是低級烷基，或與其所連的碳原子一起構(gòu)成含有4-6個碳原子的脂族碳環(huán)；R9是氨基保護基；和n是1-3的整數(shù)。
(xxiv)按照(xxiii)的化合物，其中R2和R3與其所連的碳原子一起構(gòu)成環(huán)戊烷環(huán)。
(xxv)(xxiv)的化合物，其是(8R，13R)-13-[[(1，1-二甲基-乙氧基]羰基]氨基]-6，14-二氧代-10，11-二硫雜-7，15-二氮雜螺[4.12]十七烷-8-甲酸1，1-二甲基乙酯。
(xxvi)通式″C″的化合物 其中R1與其所連的氧構(gòu)成可水解酯基；R2和R3各自獨立地是低級烷基，或與其所連的碳原子一起構(gòu)成含4-6個碳原子的脂族碳環(huán)；和n是1-3的整數(shù)；和其可水解酯和醚。
(xxvii)按照(xxvi)的化合物，其中R2和R3與其所連的碳原子一起構(gòu)成環(huán)戊烷環(huán)。
(xxviii)按照(xxvii)的化合物，其是(8R，13R)-13-氨基-6，14-二氧代-10，11-二硫雜-7，15-二氮雜螺[4.12]十七烷-8-甲酸1，1二甲基乙酯。
本發(fā)明的化合物是有效的抗炎劑。根據(jù)本發(fā)明，該環(huán)狀二硫化物通過抑制α4整聯(lián)蛋白表達細胞與內(nèi)皮的粘附作用達到抗炎。環(huán)狀二硫化物的一般性機理是抑制α4整聯(lián)蛋白表達細胞與內(nèi)皮的細胞粘附分子的結(jié)合。此類化合物還可以抑制這些細胞在炎癥位點如肺部的局部活化。本發(fā)明的化合物特別適合炎癥的治療，例如與慢性炎性疾病有關(guān)的炎癥，其包括肺炎、哮喘、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化癥(MS)和炎性腸病(IBD)。
本申請中所用的術(shù)語“低級烷基”包括含有1-7個碳原子的直鏈和支鏈烷基，例如甲基、乙基和丙基，優(yōu)選甲基。在此所用的術(shù)語“低級烷氧基”包括具有1-7個碳原子的直鏈或支鏈烷氧基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基等。在此所用的術(shù)語“低級鏈烷酸”包括2-7個碳原子的鏈烷酸，例如丙酸和乙酸。在此所用的術(shù)語“鹵素”或“鹵代”除非另外說明，包括氟、氯、溴和碘。
術(shù)語“取代低級烷基”是指被一個或多個獨立選自羥基、鹵素、氰基、低級烷氧基、低級烷?；?、低級烷硫基、低級烷基亞磺?；?、低級烷基磺?；腿〈被幕鶊F取代的低級烷基。取代低級烷基的實例包括2-羥基乙基、2，2，2，-三氟乙基、氰基甲基和2-硝基丙基。
術(shù)語“低級烷?；被颉磅；北硎居?-7個碳原子的脂族羧酸衍生的基團，例如乙?；?、丙?；取Ｐg(shù)語“?；背耸侵浮暗图壨轷；币酝膺€包括芳?；绫郊柞；?。
在此所用的術(shù)語“芳基”表示單環(huán)芳香烴基，例如苯基、甲苯基等，其可以未取代或在一個或多個位置被低級亞烷基二氧基、鹵素、硝基、低級烷基或低級烷氧基取代基取代；和多環(huán)芳基，如萘基、蒽基、菲基、薁基等，其可以被一個或多個上述基團取代。優(yōu)選該芳基是取代和未取代的單環(huán)芳基，特別是苯基。術(shù)語“芳烷基”表示烷基，其烷基為低級烷基，其中一個氫原子被芳基取代，芳烷基的實例是芐基、2-苯基乙基、3-苯基丙基、4-氯-芐基、4-甲氧基芐基等。
在此所用的術(shù)語“可水解酯或醚基”表示任何可以水解生成羥基和/或羧基的酯或醚。適于此目的的示例酯基為其中?；苌缘图夋溚樗?、芳基低級鏈烷酸或低級烷二羧酸的那些。其中，可以用來生成上述酯基的活化酸是酸酐和酰鹵化物，優(yōu)選由芳基或低級鏈烷酸衍生的酰氯化物或酰溴化物。酸酐的實例包括乙酸酐、己酸酐、苯甲酸酐、低級烷二羧酸酐，例如琥珀酸酐。此外，可水解酯可以由氯甲酸酯生成，例如氯甲酸三氯乙酯。
適用的醚保護基例如是四氫吡喃基醚或4-甲氧基-5，6-二氫-2H-吡喃基醚。其他是芳基甲基醚類化合物，如芐基、二苯甲基或三苯甲基醚；或α-低級烷氧基低級烷基醚，例如甲氧基甲基或烯丙基醚，或烷基甲硅烷基醚，如三甲基甲硅烷基醚。
此外，術(shù)語“可水解酯基”表示可以水解生成羧基的酯。通常，烷氧基部分衍生自低級醇或取代低級醇。其中，可以用來構(gòu)成所述酯基的鏈烷醇是取代或未取代的伯、仲和叔鏈烷醇，例如乙醇、甲醇、異丙醇、叔丁醇和2-(二甲基氨基)乙醇。
術(shù)語“硫基保護基”表示任何可以裂解生成自由硫基的基團。其中，優(yōu)選的硫基保護基是三芳基甲烷、三烷基甲烷、芳烷基如芐基。優(yōu)選的?；堑图壨轷；头减；?，特別是苯甲?；?。一般地，優(yōu)選采用酸可裂解的硫基保護基，例如三芳基甲基，例如尤其優(yōu)選三苯甲基。
術(shù)語“氨基保護基”表示任何可以裂解生成游離氨基的基團。氨基保護基可以是任何肽合成所用的常規(guī)氨基保護基。一般地，優(yōu)選氨基保護基是能夠在約pH 2.0-3.0的溫和酸性條件下裂解的那些氨基保護基。特別優(yōu)選的氨基保護基是叔低級烷基、低級烷基和三低級烷基甲基。
術(shù)語“藥學(xué)可接受的鹽”包括無機和有機藥學(xué)可接受的鹽的鹽，例如鹽酸、氫溴酸、硝酸、硫酸、磷酸、檸檬酸、甲酸、馬來酸、乙酸、琥珀酸、酒石酸、甲磺酸、對甲苯磺酸等。所屬領(lǐng)域技術(shù)人員利用標(biāo)準(zhǔn)技術(shù)可以相當(dāng)容易地制得上述鹽。
在本申請所提供的化合物的圖示中，深色錐形線()表示取代基位于不對稱碳所屬環(huán)的平面上方，虛線(---)表示取代基位于不對稱碳所屬環(huán)的平面的下方，和波浪線(～)表示取代基可以位于分子的平面的上方或下方。應(yīng)理解本說明書提供化合物的圖示目的在于方便，而且可以推斷包含其他形式，包括立體異構(gòu)體、對映異構(gòu)體和消旋體，并且不限于所示的具體形式。
式1的化合物及其藥學(xué)可接受的鹽，和式1的化合物的中間體表現(xiàn)出立體異構(gòu)現(xiàn)象。本發(fā)明的化合物可以是式1化合物的任何異構(gòu)體或這些異構(gòu)體的混合物。本發(fā)明具有一個或多個不對稱碳原子的化合物和中間體可以作為立體異構(gòu)體的消旋混合物得到，其可以在本發(fā)明方法的適當(dāng)步驟中、利用所屬領(lǐng)域熟知的方法拆分，得到指定的立體異構(gòu)體或具有預(yù)期立體構(gòu)型的純對映異構(gòu)體。另外，利用所屬領(lǐng)域的已知方法可以直接合成所需的異構(gòu)體。
不對稱碳原子在本發(fā)明化合物中表示為a、b、c和d。表示為a、b、c和d的不對稱碳原子的各個立體構(gòu)型可以根據(jù)其所示的具體立體異構(gòu)體來指定。本發(fā)明的化合物包括那些其中表示為“a”的碳原子具有S、R或R，S-構(gòu)型；表示為“b”的碳原子具有S、R或R，S-構(gòu)型；表示為“c”的碳原子具有S、R或R，S-構(gòu)型；和表示為“d”的碳原子具有S、R或R，S-構(gòu)型。
本發(fā)明化合物優(yōu)選的立體構(gòu)型是式1化合物的純立體異構(gòu)體。具有這種優(yōu)選立體構(gòu)型的化合物為式1a的化合物 其中在上述化合物中R2和R3與所連碳原子一起構(gòu)成環(huán)戊烷環(huán)，優(yōu)選構(gòu)型為下式的化合物 式1的化合物和尤其是由純的式1化合物的吡咯烷的(+)-反式異構(gòu)體衍生的類似物作為抗炎劑表現(xiàn)出非常高的效價。一種測定這些抗炎劑效價的方式是通過評估其抑制整聯(lián)蛋白VLA-4與細胞粘附分子VCAM-1的結(jié)合的能力。例如，可以通過VLA-4/VCAM-1結(jié)合試驗、利用有關(guān)抑制半數(shù)VLA-4/VCAM-1結(jié)合作用時該化合物的濃度(IC50)來測定本發(fā)明化合物的效價。本發(fā)明的化合物，尤其是基本純的(+)-反式異構(gòu)體(即含有小于約5％相應(yīng)立體異構(gòu)體的(+)-反式異構(gòu)體)表現(xiàn)出高于現(xiàn)有已知VCAM/VLA4拮抗劑的效價。
按照本發(fā)明，可以利用任何所屬領(lǐng)域的已知方法來測定對VCAM-1/VLA-4結(jié)合的抑制。例如，固相雙重抗體ELISA或基于分枝細胞(Ramos cell)的篩選試驗可以用來測定對VCAM-1/VLA-4結(jié)合的抑制作用。
尤其優(yōu)選的式1化合物是(8R，13R)-13-[[[1-乙酰基-3-(R)-(4-羥苯基)-2-(S)-吡咯烷基]-羰基]氨基]-6，14-二氧代-10，11-二硫雜-7，15-二氮雜螺[4.12]十七烷-8-甲酸；(9R，14R)-14-[[[1-乙?；?3-(R)-(4-羥苯基)-2-(S)-吡咯烷基]-羰基]氨基]-7，15-二氧代-11，12-二硫雜-8，16-二氮雜螺[5.12]十八烷-9-甲酸；(8R，13R)-13-[[[1-甲磺?；?3-(R)-(4-羥苯基)-2-(S)-吡咯烷基]羰基]氨基]6，14-二氧代-10，11-二硫雜-7，15-二氮雜螺[4.12]十七烷-8-甲酸；(8R，13R)-13-[[[1-(2，2-二甲基-1-氧代丙基)-3-(R)-(4-羥苯基)-2-(S)-吡咯烷基]羰基]氨基]-6，14-二氧代-10，11-二硫雜-7，15-二氮雜螺[4.12]十七烷-8-甲酸；和(8R，13R)-13-[[[3-(R)-(4-羥苯基)-2-(S)-吡咯烷基]羰基]氨基]-6，14-二氧代-10，11-二硫雜-7，15-二氮雜螺[4.12]十七烷-8-甲酸。
本發(fā)明的化合物可以經(jīng)口服、直腸或非腸道如靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、皮下、鞘內(nèi)或經(jīng)皮給藥；經(jīng)舌下給藥；或眼科制劑；或成為治療肺炎的氣溶膠。膠囊、片劑、混懸液或口服給藥用溶液、栓劑、注射溶液、滴眼劑、軟膏或噴霧溶液為給藥形式的示例。
靜脈內(nèi)、肌肉內(nèi)、口服或吸入給藥是優(yōu)選的給藥形式。以有效量施用的本發(fā)明化合物的劑量取決于特定活性成分的特性、患者的年齡和需要以及給藥的方式。通過常規(guī)途徑如利用劑量-極限臨床試驗可以測定出劑量。所以，本發(fā)明進一步涉及一種治療患病或損傷宿主的方法，其中VCAM-1或纖連蛋白與VLA-4-表達細胞結(jié)合在該病癥或損傷中是一個致病因素，該方法通過施用足以抑制VCAM-1或纖連蛋白結(jié)合VLA-4-表達細胞量的本發(fā)明化合物由此減輕所說的癥狀或損傷。一般地，優(yōu)選劑量為約0.1-100mg/kg體重/天，特別優(yōu)選劑量為1-25mg/kg體重/天，尤其優(yōu)選劑量為1-10mg/kg體重/天。
本發(fā)明還涉及含有藥學(xué)有效量的本發(fā)明化合物和藥學(xué)可接受載體的藥物組合物。通過任何常規(guī)方式可以配制該組合物。片劑和顆粒劑可以含有一系列的粘合劑、填充劑、載體或稀釋劑。液體組合物可以是例如滅菌水可混溶溶液的形式。膠囊除了含有活性成分以外可以含有填充劑或增稠劑。此外，矯味添加劑以及常用作防腐劑、穩(wěn)定劑、保濕劑和乳化劑的物質(zhì)和改變滲透壓的鹽、緩沖劑和其它添加劑也可以存在于組合物中。
本發(fā)明化合物在制備含有所述化合物作為活性劑用于治療炎性疾病的藥物中的應(yīng)用，尤其是治療由不利的整聯(lián)蛋白與細胞粘附分子的結(jié)合作用所介導(dǎo)的疾病(如哮喘)的藥物中的應(yīng)用也是本發(fā)明的一個目的。
上述載體物質(zhì)和稀釋劑可以含有任何常規(guī)藥學(xué)可接受有機或無機物質(zhì)，例如水、明膠、乳糖、淀粉、硬脂酸鎂、滑石、阿拉伯膠、聚乙二醇類化合物等。
任何通過本發(fā)明的方法制備的化合物也是本發(fā)明的一個目的。按照本發(fā)明，式1的化合物是通過式13的環(huán)狀肽核化合物 其中R1與其所連氧構(gòu)成可水解酯基和R2和R3如上定義與式19的化合物反應(yīng)制備得到 其中R15為低級烷基、R-SO2-、R6-(CH2)m-CO-或R8-X-(CH2)y-CO-和R、R6和R8如上定義。
適于制備本發(fā)明化合物的環(huán)狀肽核13可以通過式2和3按照下面反應(yīng)路線I反應(yīng)制得。
其中R1與其所連的氧構(gòu)成可水解酯基；R2和R3定義如上；R7與其所連的氧構(gòu)成可水解酯基；R9為氨基保護基；R10和R10’為硫基保護基；和n如上所述。
式2的化合物中R7由相應(yīng)的酸通過酯化該酸保護游離羧基生成。R7優(yōu)選為低級烷基，例如甲基。在式2化合物的制備中，式2的化合物中相應(yīng)的游離酸與烷基鹵化物反應(yīng)生成保護酯?？梢圆捎萌魏螌⑹?的相應(yīng)游離酸基轉(zhuǎn)化為標(biāo)準(zhǔn)可水解酯保護基的常規(guī)方法。
在反應(yīng)路線I中，式2的酯通過式2的化合物與式3的二溴烷反應(yīng)被烷基化。這種烷基化反應(yīng)一般通過用強堿如二異丙基氨化鋰處理式2的酯、在惰性溶劑如THF中、于維持低溫下通常為-40至-78℃下進行，并且此后反應(yīng)混合物與式3的二溴烷在此溫度下反應(yīng)，得到式4的溴化物。式4的溴化物與堿金屬疊氮化物反應(yīng)生成式5的疊氮化物。在這個步驟的反應(yīng)中可以采用任何使鹵化物轉(zhuǎn)化為疊氮基的常規(guī)途徑。例如，疊氮化鈉在適當(dāng)惰性溶劑如DMF中、于室溫至80℃的溫度下生成式5的疊氮化物。
式5的疊氮化物通過由R7構(gòu)成的酯保護基的水解轉(zhuǎn)化為式6的化合物。這種生成式6化合物的水解反應(yīng)可以利用任何常規(guī)的酯水解方式進行，式6的化合物為式5的疊氮化物的相應(yīng)游離酸。例如，通過用過量的氫氧化鋰在含水甲醇中、于室溫至溶劑回流溫度下處理可以實現(xiàn)式5的酯基的水解，生成式6的酸。
在下步反應(yīng)中，式6的游離酸與式7的胺反應(yīng)在式6的游離酸基和式7的游離氨基之間生成酰胺鍵，由此得到式8的疊氮化物，可以利用任何常規(guī)酰胺形成方法來進行該反應(yīng)。式6和7的化合物的縮合反應(yīng)優(yōu)選采用肽化學(xué)中所用的常規(guī)偶聯(lián)劑如HBTU、在叔堿如二異丙基乙基胺的存在下、于適當(dāng)溶劑如DMF中、在室溫下完成。
在式7的化合物中，羧基由R1保護。優(yōu)選采用叔丁基，因為它在該路線的后續(xù)反應(yīng)中很容易脫除且不影響環(huán)上其它保護基。另外，在式7的化合物中，R10是硫基保護基。如本申請所述，可以采用任何適宜的保護基。
具有表示為“d”的不對稱碳原子的化合物7可以具有特有的立體構(gòu)型。另一方面，化合物7可以是立體異構(gòu)體的混合物。化合物7的立體構(gòu)型貫穿于該整個反應(yīng)路線。所以，終產(chǎn)物化合物1的立體構(gòu)型取決于化合物7的立體構(gòu)型。也就是說，在表示為“d”的不對稱碳原子處，化合物1將具有與化合物7相同的特定立體構(gòu)型；或者，如果化合物7是立體異構(gòu)體的混合物，則生成的化合物1也是立體異構(gòu)體的混合物。
通過把疊氮基還原為相應(yīng)的伯胺，式8的化合物轉(zhuǎn)化成為式9的化合物?？梢岳萌魏问汞B氮化物還原為相應(yīng)伯胺的常規(guī)方法。通常，疊氮化物8轉(zhuǎn)化為式9的胺的還原反應(yīng)采用常規(guī)還原劑優(yōu)選膦(如三甲基或三苯基膦)、在適當(dāng)惰性溶劑如在二氯甲烷中、于室溫下反應(yīng)。
在下步的反應(yīng)中，式9的伯胺與式10的半胱氨酸衍生物的游離碳環(huán)酸偶聯(lián)，生成酰胺鍵，其得到式11的肽鍵構(gòu)成化合物。通過任何常規(guī)肽偶聯(lián)方法如上述方法式9的氨基與半胱氨酸衍生物10的游離酸偶聯(lián)。在生成式11的化合物中，化合物10的R9可以是肽合成中所用的任何常規(guī)氨基保護基。一般地，優(yōu)選的氨基保護基是那些在約pH 2.0-3.0的溫和酸性條件下可裂解的氨基保護基。特別優(yōu)選的氨基保護基是叔低級烷氧基羰基，例如Boc基團。另外，在式10的化合物中，R10為硫基保護基。如本申請所述，可以采用任何適宜的硫基保護基。
化合物10在其表示為“c”的不對稱碳原子可以具有特有的立體構(gòu)型。另一方面，化合物10可以是立體異構(gòu)體的混合物?；衔?0的立體構(gòu)型貫穿于該整個反應(yīng)路線。所以，終產(chǎn)物化合物1的立體構(gòu)型取決于化合物10的立體構(gòu)型。也就是說，在表示為“c”的不對稱碳原子處，化合物1將具有與化合物10相同的特定立體構(gòu)型；或者，如果化合物10是立體異構(gòu)體的混合物，則生成的化合物1也是立體異構(gòu)體的混合物。
可以進行式9和10的化合物的酰胺偶聯(lián)，其中化合物9和10兩者或之一具有特有立體構(gòu)型或是其混合物。優(yōu)選兩種混合物均衍生自L-半胱氨酸。當(dāng)采用立體異構(gòu)體的混合物時，生成化合物11為整個反應(yīng)路線所保持的立體異構(gòu)體的混合物。另外，當(dāng)化合物11生成為一種立體異構(gòu)體時，該立體異構(gòu)體在整個反應(yīng)路線中始終保持該特定立體構(gòu)型。
式11的化合物環(huán)化生成式12的化合物。一般地，化合物11的環(huán)化可以通過在室溫下用碘的二氯甲烷溶液處理其0.5-2g/L的稀釋溶液來實現(xiàn)，得到式12的環(huán)狀二硫化物。在這些條件下，脫除式11化合物的硫基保護基R10和R10’使兩個硫基偶聯(lián)，式11的化合物環(huán)化生成式12的環(huán)狀二硫化物。
在下步的反應(yīng)中，通過選擇性脫除環(huán)狀二硫化物的化合物12上的R9氨基保護基可以得到式13的化合物。環(huán)狀二硫化物12含有氨基保護基R9和酯保護基R1。所以，應(yīng)在酸性條件下、于低溫下進行，優(yōu)選0-20℃、在存在于乙酸乙酯內(nèi)的1N HCl中處理12的化合物以便脫除R9氨基保護基，同時保留不受影響的R1酯保護基，得到適合下面偶聯(lián)步驟的游離胺衍生物13。在有利的情況中，產(chǎn)物13可以沉淀自反應(yīng)混合物，在其它情況中，通過加入溶劑如醚或己烷沉淀或通過小心濃縮可以進行分離。
化合物11中不對稱碳原子“c”和“d”的特定立體構(gòu)型被化合物13攜帶。所以，化合物13的立體構(gòu)型取決于用于制備化合物11的化合物7和10的立體構(gòu)型。
化合物19可以按照下面的反應(yīng)路線2制備。
反應(yīng)路線2 其中R11是醚保護基；Z是離去基團；R25是低級烷基；R35是R-SO2-；R55是R6-(CH2)m-CO-或R8-X-(CH2)y-CO-；R8-X-(CH2)y-CO-；R、R6、R8、X、y和m如上所述。
式19的化合物首先通過式14的化合物與式15的化合物反應(yīng)得到式16的化合物來制備。根據(jù)該反應(yīng)，通過1，4烯醇加成將反應(yīng)化合物15交叉加成在式14化合物的雙鍵上。任何交叉雙鍵的烯醇加成的常規(guī)方法均可用來完成該反應(yīng)。例如，在進行該1，4烯醇加成中，化合物14通過常規(guī)方式轉(zhuǎn)化為其烯醇化鋰，例如通過式14的化合物與化合物15的R-二內(nèi)酰亞胺二甲基醚和n-BuLi反應(yīng)。在-60至-78℃下進行化合物14的反應(yīng)得到預(yù)期產(chǎn)物16。
對于表示為“a”的不對稱碳原子，化合物14可以作為兩種可能幾何異構(gòu)體之一或那兩種幾何異構(gòu)體的混合物存在。同樣地，由于表示為“e”的不對稱碳原子，化合物15可以作為一種特定立體異構(gòu)體或立體異構(gòu)體的混合物存在。所以，根據(jù)化合物14和15的特定立體構(gòu)型，可能產(chǎn)生化合物16的四種可能性立體異構(gòu)體中的一種或其混合物。化合物18最終具有這些不同的立體構(gòu)型。
優(yōu)選的化合物16的立體構(gòu)型如下所示 其中R11定義如上。
在式16的化合物中，優(yōu)選R11是甲基。通過把化合物16的羧甲基還原為相應(yīng)的CH2OH基，并且隨后將CH2OH基上的OH轉(zhuǎn)化為離去基團Z，可以令式16的化合物轉(zhuǎn)化為式17的化合物。通常，該還原反應(yīng)采用鋰鋁或鋰硼氫化物還原劑如LiBH4或LAH在適當(dāng)惰性溶劑如THF中、于-20℃至室溫的溫度下進行，得到化合物，該化合物一般不經(jīng)分離，但其通過與適當(dāng)試劑反應(yīng)生成離去基團Z可以直接轉(zhuǎn)化為化合物17，該離去基團Z可以是任何常規(guī)離去基團，如甲磺酰氧基或甲苯磺酰氧基。任何使化合物17反應(yīng)生成離去基團Z的常規(guī)方式都可以采用，例如在二氯甲烷中、于叔胺堿如二異丙基乙基胺的存在下用甲磺酰氯處理。
化合物17在碘化鈉的存在下在DMF中于60-130℃的溫度下通過環(huán)化轉(zhuǎn)化為內(nèi)酰胺18。一般地，該反應(yīng)適宜通過蒸餾除去低沸點二氯甲烷溶劑同時反應(yīng)溫度升高至完成該反應(yīng)的溫度進行。利用常規(guī)方法可以分離內(nèi)酰胺18，例如硅膠色譜。在制備內(nèi)酰胺18中，附著在化合物17的雜環(huán)含氮環(huán)中碳上兩個甲氧基轉(zhuǎn)化為羰基。
內(nèi)酰胺18通過水解轉(zhuǎn)化為式19a的化合物。任何能夠同時水解式18化合物中的內(nèi)酰胺基和由R11構(gòu)成的保護基的已知方法均可以采用。例如，用存在于乙酸中的48％HBr在100-130℃的溫度下處理內(nèi)酰胺18數(shù)小時可以脫除R11基，并且打開內(nèi)酰胺環(huán)得到19a。所以，化合物19a的立體構(gòu)型得自于制備化合物16所采用的化合物14和15的立體構(gòu)型。
化合物19的優(yōu)選立體異構(gòu)體如下所示 按照本發(fā)明，式19a的化合物通過與乙酰氯在弱有機堿如碳酸氫鈉的存在下反應(yīng)，式19a的化合物轉(zhuǎn)化為式19b的化合物。以這種方式，式19b的化合物中的游離氨基得以保護。
通過用存在于甲醇中的無水鹽酸在40-80℃的溫度下處理式19c的化合物，式19b的化合物可以轉(zhuǎn)化為式19c的化合物。以這種方式，式19b的化合物轉(zhuǎn)化為19c的保護酸現(xiàn)在具有游離氨基。該游離氨基可以獨立轉(zhuǎn)化為取代基R25、R55和R35。
在式19c的化合物轉(zhuǎn)化為其中R25為烷基的式22化合物過程中，式19c的化合物處理反應(yīng)的低級烷基醛形成中間體胺，其隨后用適宜還原劑如氰基硼氫化鈉處理，一般在弱有機酸如乙酸的存在下進行，得到式22的化合物。通過在堿性條件下水解，例如用堿性堿如氫氧化鈉處理，式22的化合物轉(zhuǎn)化為式19g的化合物。
另一方面，式19c的化合物通過與低級烷基磺酰氯反應(yīng)可以轉(zhuǎn)化為式19e的化合物。以這種方式，式19c轉(zhuǎn)化為式20的化合物。任何能夠縮合仲胺和低級烷基磺酰氯的常規(guī)方法可以用來把式19c的化合物轉(zhuǎn)化為式20的化合物。式20的化合物通過在堿性條件下例如用堿性堿(如氫氧化鈉在含水條件下)水解可以轉(zhuǎn)化為式19e的化合物。以這種方式，可以生成式19e的化合物，其中R35是低級烷基磺?；?br> 式19的化合物通過與?；瘎貏e是下面的反應(yīng)性衍生物反應(yīng)，式19c的化合物可以轉(zhuǎn)化為式21的化合物 反應(yīng)性衍生物包括酰鹵和酸酐。該方法中可以采用任何用這些酸酐或酰鹵化物酰化仲胺的常規(guī)方法。以這種方式，可以制備式19f的化合物。
式19的化合物由式19f、19g和19e的化合物組成。該化合物可以通過下面的反應(yīng)路線3轉(zhuǎn)化為式Ig的化合物 其中R1、R2、R3，、R4、R5、R6和R15如上所述。
如上所示，利用標(biāo)準(zhǔn)酰胺合成可以將式13和19的化合物轉(zhuǎn)化為式1a的化合物，例如用略微過量的HBTU和二異丙基乙基胺在非質(zhì)子極性溶劑如DMF中室溫至+45℃的溫度下處理13和19可以得到式1a的化合物。R1與其所連的氧原子構(gòu)成上述的可水解酯基。在適合可水解酯裂解的酸性條件下進一步處理1a，例如用4N鹽酸在二噁烷/二氯甲烷中在室溫下處理，并且在該反應(yīng)結(jié)束后，產(chǎn)物用醚沉淀得到本發(fā)明的化合物I。
在式1a的化合物向其中R15為叔丁氧基羰基(Boc基)的式1化合物轉(zhuǎn)化中，也就是R15為R8-X-(CH2)y-CO-；和R8是叔丁基，X為0和Y為0，該R15基團通過酸水解從式1a的化合物脫除生成式1的化合物，其中R5是氫。另一方面，通過其中R5為氫的式1化合物與Boc酐、在和從式19c的化合物制備式21的化合物所采用的相同條件下反應(yīng)，可以使其中R5為氫的式1化合物再次轉(zhuǎn)化為Boc基團。如果在反應(yīng)路線3中用式19g的化合物代替式19a的化合物作為起始原料，將生成氨基被R25取代的式1化合物。另一方面，如果在反應(yīng)路線3中用式19f的化合物代替式19a的化合物，將生成具有取代基R55的式1化合物。另一方面，如果在反應(yīng)路線3中用式19e的化合物代替式19a的化合物，將生成具有取代基R35的式1化合物。
本發(fā)明進一步通過下列實施例舉例說明。實施例中所用所術(shù)語定義如下THF為四氫呋喃，DMF為N，N-二甲基甲酰胺，HOBT為1-羥基苯并三唑，BOP是[(苯并三唑-1-基)氧基]三(二甲基氨基)鏻六氟磷酸鹽，HATU為O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-1，1，3，3-四甲基脲六氟磷酸，HBTU為O-苯并三唑-N，N，N′，N′，-四甲基脲六氟磷酸，DIPEA為二異丙基乙基胺，DMAP為4-(N，N-二甲基氨基)吡啶，DPPA為二苯基磷酰疊氮化物，DBU為1，8-二氮雜雙環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯NaH為氫化鈉，鹽水為飽和氯化鈉水溶液，TLC為薄層層析，LiOH為氫氧化鋰，LDA為二異丙基氨化鋰，BOP-Cl是雙(2-氧代-3-噁唑烷基)次膦酰氯，NMP為N-甲基吡咯烷酮，
Fmoc為(9-芴基甲氧基)羰基，TFA為三氟乙酸，HOAc是乙酸，HRMS是高分辨質(zhì)譜，Trityl為三苯甲基，LAH為氫化鋰鋁，DCM為二氯甲烷Boc為[[(1，1-二甲基)乙氧基]羰基]-，Boc酐為二碳酸二叔丁酯，Boc2O為二碳酸二叔丁酯，HRP為辣根過氧化物酶，DMSO為二甲基亞砜，BSA為牛血清白蛋白，CHO為中國倉鼠卵巢，EDTA為乙二胺四乙酸，PMSF為對甲苯磺酰氟，PBS為磷酸鹽緩沖溶液。
0℃和氬氣氛下，向甲醇(0.15mL，3.8mmol)在5mL乙酸乙酯中的混合物內(nèi)加入乙酰氯(0.27mL，3.8mmol)。將該溶液在0℃下攪拌10分鐘，室溫下攪拌30分鐘。向該溶液中加入(8R，13R)-13-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-6，14-二氧代-10，11-二硫雜-7，15-二氮雜螺[4.12]十七烷-8-甲酸1，1-二甲基乙酯(130mg，0.25mmol)。將該混合物攪拌7小時。在玻璃料上收集沉淀并且用乙醚洗滌。高真空干燥后，得到92mg的(8R，13R)-13-氨基-6，14-二氧代-10，11-二硫雜-7，15-二氮雜螺[4.12]十七烷-8-甲酸1，1-二甲基乙酯(收率96％，基于蒸發(fā)濾液和洗滌后回收的起始原料)。
將上式油3(R)-[(2S，5R)-2，5-二氫-3，6-二甲氧基-5-(1-甲基乙基)-2-吡嗪基]-3-(4-甲氧基苯基)丙醇(28)(17.7g)溶于300mL二氯甲烷中。-5℃向該溶液中加入鉀磺酰氯(8.02g，5.42mL，70mmol)，隨后在約10分鐘內(nèi)滴加二異丙基乙基胺(DIPEA，12mL，70mmol)。該反應(yīng)在0℃下攪拌2小時。淺黃色溶液用2L乙醚稀釋，用水(3×200mL)和鹽水(2×200mL)洗滌。硫酸鈉干燥后，20℃真空下濃縮該溶液至體積為160mL。TLC在EA/H(＝1∶1)中Rf＝0.74，為主要斑點；Rf＝0.21，為次要斑點。
室溫下，向這種酯(3.01g)在15mL干燥二氯甲烷中的溶液內(nèi)一次性加入含在二噁烷(50mL)中的4N HCl。室溫下將所得溶液攪拌4.5小時得到混懸液?；鞈乙河?0mL混合溶劑(3∶7二氯甲烷∶乙醚)稀釋，過濾。淺黃色濾餅依次用上述混合溶劑(2×20mL)、乙醚(2×20mL)洗滌。真空下干燥濾餅，得到淺黃色粉末(2.51g，HLPC純度＞85％)。利用RP-HPLC進行純化得到(8R，13R)-13-氨基-6，4-二氧代-10，11-二硫雜-7，15-二氮雜螺[4.12]十七烷-8-甲酸白色固體(1.55g，2.61mmol)，收率52％。HRMS(M+H)實測值593.209，計算值593.2103。
粗品胺溶于乙酸乙酯(10mL)并且向該混合物中加入Boc2O(1.0g，4.6mmole)。將所得混合物攪拌過夜。將反應(yīng)混合物傾入含乙酸乙酯(75mL)和水(25mL)的分液漏斗中，分離水層，再用乙酸乙酯(1×50mL)提取。合并的有機層用飽和鹽水洗滌，MgSO4干燥，過濾，真空濃縮。通過閃式柱色譜純化，用己烷-乙酸乙酯(6∶1，隨后4∶1)洗脫，得到N-[[(1-[(2-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]乙基]-環(huán)己烷]羰基]-S-三苯甲基-L-半胱氨酸甲酯(23)(0.88g，62％)。高分辨質(zhì)譜m/z 653.3007[(M+Na)+；計算值C37H46N2O5SNa653.3025]。
向?qū)嵤├?5制備的酯23(0.88g，1.4mmole)在二氯甲烷(10mL)中的溶液內(nèi)加入TFA(5mL)。將該混合物攪拌45分鐘，真空濃縮。TFA鹽在高真空下干燥2小時。
向粗品TFA鹽、Fmoc-Cys(Acm)-OH(575mg，1.4mmol)和二異丙基乙基胺(1mL，excess)在DMF(10mL)中的溶液內(nèi)加入HBTU(595mg，1.6mmole)。將所得混合物攪拌過夜。將反應(yīng)混合物傾入含乙酸乙酯(150mL)的分液漏斗中，用0.3M HCl(2×30mL)洗滌。合并水層，再用乙酸乙酯(1×50mL)提取。合并的有機層用飽和NaHCO3(1×30mL)洗滌，用MgSO4干燥，過濾和真空濃縮。通過閃式柱色譜純化，用己烷-乙酸乙酯(1∶1，隨后2∶3)洗脫，得到2(R)[[[1-[2-[[3-[[(乙酰基氨基)甲基]硫基]-2(R)-[[(9H-芴-9-基甲氧基)羰基]氨基]-1-氧代丙基]-氨基]乙基]環(huán)己基]羰基]氨基]-3-[(三苯基甲基)硫基]丙酸甲酯(24)(1.05g，80％)。HRMS(C53H58N4O7S2)實測值，m/z 949.3636(M+Na)+。計算值949.3645。
向上述胺(50mg，0.07mmol)、(2S，3R)-1-乙?；?3-(4-羥基)苯基脯氨酸(32)(18mg，0.07mmole)和二異丙基乙基胺(0.05mL，過量)在DMF(1mL)的溶液內(nèi)加入HBTU(30mg，0.08mmole)。將所得混合物在室溫下攪拌3.5小時。將反應(yīng)混合物傾入含有乙酸乙酯(50mL)的分液漏斗中，用0.5M HCl(2×15mL)洗滌。合并水層，再用乙酸乙酯(1×20mL)洗滌。合并的有機層用飽和NaHCO3(1×15mL)洗滌，用MgSO4干燥，過濾，真空下濃縮，得到50mg粗品25。該物質(zhì)難以提純，所以全面的定性是在水解該甲酯后進行。
向(2S，3R)-1-(2，2-二甲基-1-氧代丙基)-3-(4-羥苯基)吡咯烷-2-甲酸(45mg，0.15mmol)和實施例6中制得的(8R，13R)-13-氨基-6，14-二氧代-10，11-二硫雜-二氮雜螺[4.12]十七烷-8-甲酸1，1-二甲基乙酯氫氯化物(70mg，0.15mmol)在0.5mL DMF作的混合物內(nèi)加入DIPEA(58mg，0.45mmol)和HBTU(59mg，0.15mmol)。將該溶液在室溫下攪拌3小時，用水稀釋至3mL。收集所得白色沉淀，減壓下干燥過夜，得到98mg的(8R，13R)-13-[[[1-(2，2-二甲基-1-氧代丙基)-3-(R)-(4-羥苯基)-2-(S)-吡咯烷基]羰基]氨基]-6，14-二氧代-10，11-二硫雜-7，15-二氮雜螺[4.12]十七烷-8-甲酸1，1-二甲基乙酯，其為白色固體。將該干燥的固體溶于1mL二氯甲烷，溶液用含在二噁烷中的4N HCl(2mL)處理。將該溶液攪拌過夜，濃縮。殘余物通過反相HPLC純化(5-95％的乙腈，存在于含0.75％TFA的水中，約40分鐘內(nèi)線性梯度)，得到(8R，13R)-13-[[[1-(2，2-二甲基-1-氧代丙基)-3(R)-(4-羥苯基)-2(S)-吡咯烷基]羰基]氨基]-6，14-二氧代-10，11-二硫雜-7，15-二氮雜螺[4.12]十七烷-8-甲酸，其為白色固體(9mg)。HRMS(M+H)實測值635.2543，計算值635.2573。
方法VLA-4(α4β1整聯(lián)蛋白)拮抗劑活性被定義為與細胞表面VLA-4競爭結(jié)合固定VCAM-1的能力，該活性利用分枝-VCAM-1細胞粘附試驗定量分析。帶有細胞表面VLA-4的分枝細胞用熒光染料(鈣黃綠素-AM)標(biāo)記，并且允許在試驗化合物存在或不存在下結(jié)合VCAM-1。與粘著細胞有關(guān)的熒光強度的降低(％抑制)反映出試驗化合物對VLA-4介導(dǎo)的細胞粘附的競爭性抑制作用。
首先，這需要用重組人VCAM-1(100ng存在于100μlPBS中)涂層96孔平板(Nunc Maxisorp)，密封各平板，隨后將平板置于4℃下18小時。VCAM涂層的平板進而用含0.05％Tween-20的PBS洗滌2次，隨后用200μl的封閉緩沖液(1％BSA/0.02％硫汞撒)封阻1小時(室溫)以結(jié)束非特異性結(jié)合。隨后用封閉緩沖液培育，反轉(zhuǎn)平板，印跡并且吸除殘余緩沖液。隨后用300μl的PBS沖洗各個平板，反轉(zhuǎn)并且吸除殘余PBS。
將試驗化合物溶于100％DMSO，隨后在VCAM細胞粘附試驗緩沖液(4mM CaCl2、4mM MgCl2，存在于50mM TRIS-HCI中，pH 7.5)(最終DMSO＝4％)中1∶25稀釋。對各個化合物進行一系列的8次1∶4稀釋(一般的濃度范圍為1nM-12,500nM)。將100μl/孔的各稀釋液加入VCAM涂層的平板中，隨后加入100μl的分枝細胞(200,000個細胞/孔，存在于1％BSA/PBS)中。令含有試驗化合物和分枝細胞的平板在室溫下溫育45分鐘，此后加入165μl/孔PBS。反轉(zhuǎn)平板除去未粘著細胞，印跡并且加入300μl/孔。再次反轉(zhuǎn)平板，印跡，輕輕吸除殘余緩沖液。向各孔中加入100μl溶胞緩沖液(0.1％SDS，存在于50mM TRIS-HCl，pH 8.5)，在旋轉(zhuǎn)震動平臺上攪動2分鐘。隨后在Cytofluor 2300(Millipore)熒光測定系統(tǒng)(激發(fā)＝485nm，發(fā)射＝530nm)上讀取平板的熒光強度。
權(quán)利要求
1.通式I的化合物 其中R2和R3各自獨立地是低級烷基，或與其所連的碳原子一起構(gòu)成含有4-6個碳原子的脂族碳環(huán)；R5是氫、低級烷基、R-SO2-、R6-(CH2)m-CO-或R8-X-(CH2)y-CO-；R是低級烷基；R6和R8是氫或低級烷基；X為-O-或-NH-；m是1-7的整數(shù)，y是0-7的整數(shù)，和n是1-3的整數(shù)；同時a、b、c和d表示不對稱碳原子；和及其可水解酯或醚，或其藥物可接受的鹽。
2.按照權(quán)利要求1的化合物，其中R2和R3與其所連的碳原子一起構(gòu)成含有4-6個碳原子的脂族環(huán)烷環(huán)或其藥學(xué)可接受的鹽。
3.按照權(quán)利要求2的化合物，其中R2和R3與其所連的碳原子一起構(gòu)成環(huán)戊烷環(huán)或其藥學(xué)可接受的鹽。
4.按照權(quán)利要求3的化合物，具有下式 或其藥學(xué)可接受的鹽。
5.按照權(quán)利要求4的化合物，其是(8R，13R)-13-[[[3-(R)-(4-羥苯基)-2-(S)-吡咯烷基]羰基]氨基]-6，14-二氧代-10，11-二硫雜-7，15-二氮雜螺[4.12]十七烷-8-甲酸或其藥學(xué)可接受的鹽。
6.按照權(quán)利要求4的化合物，其中R5是R6-(CH2)mCO-或其藥學(xué)可接受的鹽。
7.按照權(quán)利要求6的化合物，其是(8R，13R)-13-[[[1-乙?；?3-(R)-(4-羥苯基)-2-(S)-吡咯烷基]羰基]氨基]-6，14-二氧代-10，11-二硫雜-7，15-二氮雜螺[4.12]十七烷-8-甲酸或其藥學(xué)可接受的鹽。
8.按照權(quán)利要求6的化合物，其是(8R，13R)-13-[[[1-(2，2-二甲基-1-氧代丙基)-3-(R)-(4-羥苯基)-2-(S)-吡咯烷基]-羰基]氨基]-6，14-二氧代-10，11-二硫雜-7，15-二氮雜螺[4.12]十七烷-8-甲酸或其藥學(xué)可接受的鹽。
9.按照權(quán)利要求4的化合物，其中8是R8-X-(CH2)y-CO-或其藥學(xué)可接受的鹽。
10.按照權(quán)利要求9的化合物，其中X是氧或其藥學(xué)可接受的鹽。
11.按照權(quán)利要求4的化合物，其中R5是氫或其藥學(xué)可接受的鹽。
12.按照權(quán)利要求11的化合物，其是(8R，13R)-13-[[[(3-(R)-(4-羥苯基)-2-(S)-吡咯烷基]羰基]氨基]-6，14-二氧代-10，11-二硫雜-7，15-二氮雜螺[4.12]十七烷-8-甲酸或其藥學(xué)可接受的鹽。
13.按照權(quán)利要求4的化合物，其中R5是R-SO2-或其藥學(xué)可接受的鹽。
14.按照權(quán)利要求4的化合物，其中R5為低級烷基或其藥學(xué)可接受的鹽。
15.按照權(quán)利要求13的化合物，其是(8R，13R)-13-[[[1-甲磺?；?3(R)-(4-羥苯基)-2(S)吡咯烷基]羰基]氨基]-6，14-二氧代-10，11-二硫雜-7，15-二氮雜螺[4.12]十七烷-8-甲酸或其藥學(xué)可接受的鹽。
16.按照權(quán)利要求2的化合物，其中R2和R3與其所連的碳原子一起構(gòu)成環(huán)己烷環(huán)或其藥學(xué)可接受的鹽。
17.按照權(quán)利要求16的化合物，具有下式
18.按照權(quán)利要求17的化合物，其是(9R，14R)-14-[[[3-(R)-(4-羥苯基)-2-(S)-吡咯烷基]羰基]氨基]-7，15-二氧代-11，12-二硫雜-8，16-二氮雜螺[5.12]十八烷-9-甲酸或其藥學(xué)可接受的鹽。
19.按照權(quán)利要求17的化合物，其中R5為R6-(CH2)m-CO-或其藥學(xué)可接受的鹽。
20.按照權(quán)利要求19的化合物其是(9R，14R)-14-(([1-乙?；?3-(R)-(4-羥苯基)-2-(S)-吡咯烷基]羰基]氨基]-7，15-二氧代-11，12-二硫雜-8，16-二氮雜螺[5.12]十八烷-9-甲酸或其藥學(xué)可接受的鹽。
21.下面通式的化合物 其中R1與其所連的氧構(gòu)成可水解酯基；R2和R3各自獨立地是低級烷基，或與其所連的碳原子一起構(gòu)成含有4-6個碳原子的脂族碳環(huán)；R9是氨基保護基；R10和R10’是硫基保護基；和n是1-3的整數(shù)。
22.按照權(quán)利要求21的化合物，其中R2和R3與其所連的碳原子一起構(gòu)成環(huán)戊烷環(huán)。
23.權(quán)利要求22的化合物，其是2(R)-[[[1-[[2(R)-[[(1，1-二甲基乙氧基)羰基]氨基]-1-氧代-3-[(三苯甲基)硫基]丙基]氨基]乙基]環(huán)戊基]羰基]氨基-3-[(三苯甲基)硫基]丙酸1，1-二甲基乙酯。
24.下面通式的化合物 其中R1與其所連的氧構(gòu)成可水解酯基；R2和R3各自獨立地是低級烷基，或與其所連碳原子一起構(gòu)成含有4-6個碳原子的脂族碳環(huán)；R9是氨基保護基；和n是1-3的整數(shù)。
25.按照權(quán)利要求24的化合物，其中R2和R3與其所的連碳原子一起構(gòu)成環(huán)戊烷環(huán)。
26.權(quán)利要求25的化合物，其是(8R，13R)-13-[[(1，1-二甲基-乙氧基]羰基]-6，14-二氧代-10，11-二硫雜-7，15-二氮雜螺[4.12]十七烷-8-甲酸1，1-二甲基乙酯。
27.下面通式的化合物 其中R1與其所連的氧構(gòu)成可水解酯基；R2和R3各自獨立地是低級烷基，或與其所連的碳原子一起構(gòu)成含4-6個碳原子的脂族碳環(huán)；和n是1-3的整數(shù)；和其可水解酯和醚。
28.按照權(quán)利要求27的化合物，其中R2和R3與其所的連碳原子一起構(gòu)成環(huán)戊烷環(huán)。
29.權(quán)利要求28的化合物，其是(8R，13R)-13-氨基-6，14-二氧代-10，11-二硫雜-7，15-二氮雜螺[4.12]十七烷-8-甲酸1，1-二甲基乙酯。
30.一種藥物組合物，其含有藥學(xué)有效量的所述權(quán)利要求1-20中任一項的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽，如果需要還含有藥學(xué)惰性載體。
31.一種制備權(quán)利要求1的化合物的方法，其特征在于式13的環(huán)狀核化合物 其中R1與其所連的氧構(gòu)成可水解酯基；并且R2和R3如權(quán)利要求1中定義，與式19的化合物反應(yīng) 其中R15是低級烷基、R-SO2-、R6-(CH2)m-CO-或R8-X-(CH2)y-CO-，和R、R6和R8如權(quán)利要求1中定義。
32.按照權(quán)利要求31所要求的方法制備的權(quán)利要求1-20任一項所要求的化合物。
33.作為治療劑的權(quán)利要求1-20任一項所要求的化合物。
34.權(quán)利要求1-20任一項所要求的化合物在制備含有此類化合物作為活性劑的用于治療炎性疾病、尤其是由整聯(lián)蛋白和細胞粘附分子的不利結(jié)合所介導(dǎo)的疾病如哮喘的藥物中的應(yīng)用。
35.本發(fā)明業(yè)已描述如上。
全文摘要
本發(fā)明描述了式(I)的化合物是具有活性的抗炎劑。提供抑制細胞和內(nèi)皮結(jié)合的環(huán)狀二硫化物。此類化合物可以有效治療炎性疾病,例如哮喘,其癥狀和/或損傷與細胞粘附分子與整聯(lián)蛋白表達細胞的結(jié)合有關(guān)。
文檔編號C07K5/02GK1347419SQ00806460
公開日2002年5月1日 申請日期2000年4月17日 優(yōu)先權(quán)日1999年4月20日
發(fā)明者陳力, 納德爾·福圖希, 達維德·揚·雅克松, 杰斐遜·賴特·蒂利 申請人:霍夫曼-拉羅奇有限公司