專利名稱：13－甲基紅霉素衍生物的制作方法
背景技術：
本發(fā)明涉及新穎的大環(huán)內酯化合物，它們可用作包括人在內的哺乳動物以及魚和鳥類的抗細菌與抗原生動物劑。本發(fā)明也涉及用于制備該新穎化合物的方法和含有該新穎化合物的藥物組合物。另外，本發(fā)明包括通過將該新穎化合物對需要治療的哺乳動物、魚和鳥類給藥來治療細菌和原生動物感染的方法。
盡管以前已經報道了一些13-甲基紅霉素(也稱15-去甲紅霉素)(Kibwage等《抗生素雜志》vol.40，pp.1-6，(1987)；Weber &McAlpine美國專利5,141,926)，不過它們僅限于15-去甲紅霉素C和6-脫氧-15-去甲紅霉素B和D。而且，不僅發(fā)現這些15-去甲紅霉素在高水平的“天然”紅霉素(13-乙基紅霉素)中所占的成分極少，而且以前還從未將13-甲基對應物(15-去甲紅霉素A和B)分離為最可取的生物活性“天然”紅霉素(紅霉素A和B)。
“天然”紅霉素的化學修飾已經證實是增強“天然”分子生物功效的極為有效的手段。因而，人們期望新穎的紅霉素經過化學修飾，類似地制備具有可取的和增強了的生物功效的化合物。1997年7月4日提交、1998年1月15日公布的國際專利申請WO98/01546在一般意義上描述了通過重組DNA技術制備新穎的聚酮化合物(polyketide)。1997年7月4日提交、1998年1月15日公布的未決國際專利申請WO98/01571描述了這些技術應用于生成新穎的紅霉素，其中很多起始單元不同于“天然”紅霉素所特有的丙酸酯起始單元。1998年12月21日提交、1999年7月15公布的未決國際專利申請WO99/35156和1999年7月15日公布的WO99/35157也描述了這些新穎紅霉素的化學修飾。
大環(huán)內酯抗生素已知可用于哺乳動物(包括人)、魚和鳥類廣譜細菌與原生動物感染的治療。各種可用作抗生素的紅霉素A衍生物參見1997年6月11日提交的美國專利申請系列號60/049,349；1997年5月9日提交的美國專利申請系列號60/046,150；1997年10月29日提交的美國專利申請系列號60/063,676；1998年6月3日提交的美國專利申請系列號60/087,798；1997年8月6日提交的美國專利申請系列號60/054,866；1997年10月29日提交的美國專利申請系列號60/063,161；1999年1月27日提交的美國專利申請系列號60/117,342；1999年4月23日提交的美國專利申請系列號60/130,809；1999年4月23日提交的美國專利申請系列號60/130,912；和1999年4月23日提交的美國專利申請系列號60/130,913。每篇上述美國專利申請均全文引用在此作為參考文獻。象其他大環(huán)內酯抗生素一樣，本發(fā)明的新穎的紅霉素衍生物具有對抗由各種革蘭氏陽性與革蘭氏陰性細菌以及原生動物所導致的感染的活性，如下所述。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及新穎的紅霉素衍生物，它們可用作哺乳動物(包括人)、魚和鳥類的抗細菌與抗原生動物劑。確切地，本發(fā)明化合物包括新穎的13-甲基紅霉素衍生物，通過由直接發(fā)酵產生的13-甲基紅霉素的化學修飾而制備。本發(fā)明進一步涉及用于制備所要求保護的化合物的方法、含有該化合物的藥物組合物和利用該化合物和組合物的治療方法。
確切地，本發(fā)明涉及式1化合物
及其藥學上可接受的鹽、前體藥物和溶劑化物，其中A是H或鹵素；X選自-C(O)-、-CH(NR8R9)-、-CHR8NR9-、-NR9CHR8-、-C(＝NR8)-和-C(＝N-OR8)-，其中每個上述X基團的前一條短線連接式1化合物的C-10碳，每個基團的后一條短線連接式1化合物的C-8碳；Y選自CH2、C(O)、CHF、CF2、C＝C(RaRb)、CHSR7、CHR7、C＝S、-C(＝NR8)-、-C(＝N-OR8)、CH(OR8)、CH(OC(O)R8)、CH(OC(O)Ar)、CH(OC(O)NR8R9)、CH(O(CRaRb)nAr)、CH(OC(O)(CRaRb)nAr)、CH(OC(O)(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr)、CH(OC(O)NR8NR8R9)、CH(OC(O)NR8(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr)、CH(OC(O)NR8NR8(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr)、-CH(NR8R9)-、CH(NR8C(O)R8)、CH(NR8C(O)NR8R9)、CH(NR8C(O)OR8)、CH(S(CRaRb)nAr)、-CH(NH(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr)和CH(NH(CRaRb)nAr)，其中n是從0至10的整數；或者Y具有下列結構 R1和R2可以是單獨連接的或連接在一起的；當單獨連接時，R1獨立地選自OR8、OC(O)R8、OC(O)NR8R9、NR8R9、NR8C(O)R8、NR8C(O)NR8R9、O(CRaRb)nAr、S(CRaRb)nAr和N(CRaRb)nAr，其中n是從0至10的整數；當單獨連接時，R2獨立地選自OR8、O-甲磺酰基、O-甲苯磺?；?、OC(O)R8、OC(O)NR8R9、NR8R9、NR8C(O)R8、NR8C(O)NR8R9、O(CRaRb)nAr、S(CRaRb)nAr和NH(CRaRb)nAr，其中n是從0至10的整數；Ra和Rb每個獨立地選自H、鹵素和C1-C6烷基；Ra和Rb與它們所連接的碳一起可以構成3-至10-元環(huán)狀或雜環(huán)狀雙基，其中所述雙基的一個或兩個碳可選地被獨立地選自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(C1-C6)烷基-和-C(O)-的雙基置換，并且可選地被1至3個獨立地選自S組取代基的取代基取代；(CRaRb)n是亞烷基，其中n是從0至10的整數，它是不間斷的或者被獨立地選自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(C1-C6)烷基-和-C(O)-的雙基中斷，并且可選地被1至3個獨立地選自S組取代基的取代基取代；當連接在一起時，R1和R2與中間原子一起構成另外一個具有下列結構之一的環(huán) B1選自O、(CRaaRbb)m、SO2、O和NR7，其中m是0或1；Z選自(CRaaRbb)m、C(O)、C(NRaa)、P-ORaa、P(O)ORaa、P(O)NRaaRbb、Si(RcRd)、SO、SO2、(CRaaRbb)mCO和CO(CRaaRbb)m，其中m是1或2；Rc和Rd獨立地選自C1-C8烷基、C6-C10芳基和C4-C10雜環(huán)基；Raa和Rbb獨立地選自H和C1-C6烷基；Raa和Rbb與它們所連接的碳一起可以構成3-至10-元環(huán)狀或雜環(huán)狀雙基，其中所述雙基的一個或兩個碳可選地被獨立地選自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(C1-C6)烷基-和-C(O)-的雙基置換，并且可選地被1至3個獨立地選自S組取代基的取代基取代；當B1是NR7時，B1和R6與它們所連接的氮一起可以構成3-至10-元環(huán)，其中所述環(huán)的一個或兩個碳可選地被獨立地選自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(C1-C6)烷基-和-C(O)-的雙基置換，并且可選地被1至3個獨立地選自S組取代基的取代基取代；當B1是NR7時，B1和R6與它們所連接的氮一起可以構成-N＝C(R7)(RaRb)nAr，其中n是從0至10的整數；R1、R2和X可以連接在一起；當連接在一起時，R1、R2和X與中間原子一起構成另外兩個具有下列結構之一的環(huán)
D、E、F和G每個獨立地選自H、鹵素、C1-C12烷基、C3-C10烯基、C3-C10炔基和CH2(RaRb)nAr，其中n是從0至10的整數，其中所述烷基的一個或兩個碳可選地被獨立地選自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(C1-C6)烷基-和-C(O)-的雙基置換，并且可選地被1至3個獨立地選自S組取代基的取代基取代；D和E或F和G與它們所連接的碳一起可以構成3-至10-元環(huán)狀或雜環(huán)狀雙基，其中所述雙基的一個或兩個碳可選地被獨立地選自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(C1-C6)烷基-和-C(O)-的雙基置換，并且可選地被1至3個獨立地選自S組取代基的取代基取代；J、J1和K每個獨立地選自C(O)R8、C(O)NR8R9、C(O)OR8、(CRaRb)nAr、S(CRaRb)nAr和NH(CRaRb)nAr，其中n是從0至10的整數；L、M、Q和V每個獨立地選自S組取代基；其中L、M、Q和V被連接的苯環(huán)的一個或兩個碳可以被氮置換；R1和X可以連接在一起；當連接在一起時，R1和X與中間原子一起構成另外一個具有下列結構之一的環(huán) R2和X可以連接在一起；當連接在一起時，R2和X與中間原子一起構成另外一個具有下列結構之一的環(huán)
R3是OR10；R3和X可以連接在一起；當連接在一起時，R3和X與中間原子一起構成另外一個具有下列結構之一的環(huán) R3和Y可以連接在一起；當連接在一起時，R3和Y與中間原子一起構成另外一個具有下列結構之一的環(huán) R4選自H、C(O)(C1-C18)烷基、C(O)Ar、OC(O)(C1-C18)烷基和OC(O)Ar，其中上述R4基團的烷基部分可選地被獨立地選自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(C1-C6)烷基-和-C(O)-的雙基置換，并且可選地被1至3個獨立地選自S組取代基的取代基取代；R5選自H、鹵素、C1-C10烷基、C3-C10烯基、C3-C10炔基、-C(RaRb)-C(Ra)＝C(Rb)-Ar、(CRaRb)nAr、OR8、O(CO)R8、OC(O)NR8R9、NR8R9、NR8C(O)R8、NR8C(O)NR8R9、O(CRaRb)nAr、S(CRaRb)nAr和NR8(CRaRb)nAr，其中n是從0至10的整數，其中所述烷基、烯基和炔基的一個或兩個碳可選地被獨立地選自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(C1-C6)烷基-和-C(O)-的雙基置換，并且可選地被1至3個獨立地選自S組取代基的取代基取代；R5和Y可以連接在一起；當連接在一起時，R5和Y與中間原子一起構成下列結構 R6選自H、C1-C12烷基、C3-C10烯基、C3-C10炔基和CH2(RaRb)nAr，其中n是從0至10的整數，其中所述烷基的一個或兩個碳可選地被獨立地選自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(C1-C6)烷基-和-C(O)-的雙基置換，并且可選地被1至3個獨立地選自S組取代基的取代基取代；R7、R8和R9每個獨立地選自H和C1-C12烷基，其中所述烷基的一個或兩個碳可選地被獨立地選自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(C1-C6)烷基-和-C(O)-的雙基置換，并且可選地被1至3個獨立地選自S組取代基的取代基取代；R8和R9與它們所連接的氮一起可以構成3-至10-元環(huán)，其中一個或兩個碳可選地被獨立地選自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(C1-C6)烷基-和-C(O)-的雙基置換，并且可選地被1至3個獨立地選自S組取代基的取代基取代；R10選自C1-C10烷基、C3-C10烯基、C3-C10炔基、-C(RaRb)-C(Ra)＝C(Rb)-Ar和(CRaRb)nAr，其中n是從1至10的整數，其中所述烷基、烯基和炔基的一個或兩個碳可選地被獨立地選自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(C1-C6)烷基-和-C(O)-的雙基置換，并且可選地被1至3個獨立地選自S組取代基的取代基取代，只要R10不是未取代的甲基；R11是H或OCH3；R12和R13與它們所連接的碳一起可以構成-C(O)-、-C(＝NR8)-或-C(＝N-OR8)；R12和R13與它們所連接的碳一起可以構成3-至10-元環(huán)，其中所述環(huán)的一個或兩個碳可選地被獨立地選自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(C1-C6)烷基-和-C(O)-的雙基置換，并且可選地被1至3個獨立地選自S組取代基的取代基取代；R12選自H、C1-C10烷基、C3-C10烯基、C3-C10炔基、-C(RaRb)-C(Ra)＝C(Rb)-Ar和(CRaRb)nAr，其中n是從0至10的整數，其中所述烷基、烯基和炔基的一個或兩個碳可選地被獨立地選自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(C1-C6)烷基-和-C(O)-的雙基置換，并且可選地被1至3個獨立地選自S組取代基的取代基取代；R13選自H、C1-C10烷基、C3-C10烯基、C3-C10炔基、OR8、OC(O)R8、OC(O)(CRaRb)nAr、OC(O)(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr、OC(O)NR8R9、OC(O)NR8NR8R9、OC(O)NR8(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr、OC(O)NR8NR8(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr、NR8R9、NR8(CO)R8、NR8C(O)NR8R9、NR8C(O)OR8、O(CRaRb)nAr、O(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr、S(CRaRb)nAr、NH(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr和NH(CRaRb)nAr，其中n是從0至10的整數；R14和R15每個獨立地選自H、C1-C12烷基、芳基取代的C1-C12烷基和雜芳基取代的C1-C12烷基，其中所述烷基的一個或兩個碳可選地被獨立地選自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(C1-C6)烷基-和-C(O)-的雙基置換，并且可選地被1至3個獨立地選自S組取代基的取代基取代；R14和R15與它們所連接的碳一起可以構成3-至10-元環(huán)，其中一個或兩個碳可選地被獨立地選自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(C1-C6)烷基-和-C(O)-的雙基置換，并且可選地被1至3個獨立地選自S組取代基的取代基取代；R17是C1-C20烷基，其中所述烷基的一個或兩個碳可選地被獨立地選自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(C1-C6)烷基-和-C(O)-的雙基置換，并且可選地被1至3個獨立地選自S組取代基的取代基取代，只要R17不是未取代的乙基；R18選自由芳基、取代的芳基、雜芳基、取代的雜芳基和雜環(huán)烷基組成的組；R19和R20每個獨立地選自由C1-C12烯基、C1-C12炔基、芳基、C3-C8環(huán)烷基、雜環(huán)烷基和雜芳基組成的組，其中所述烯基、炔基、芳基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基和雜芳基是取代的或未取代的；
R19和R20與它們所連接的碳一起可以構成可以被一個或更多取代基取代的3-至10-元雜環(huán)烷基環(huán)，所述取代基獨立地選自由鹵素、羥基、C1-C3烷氧基、C1-C3烷氧基-C1-C3烷氧基、氧代、C1-C3烷基、鹵代-C1-C3烷基和C1-C3烷氧基-C1-C3烷基組成的組；每個Ar獨立地是4-至10-元雜環(huán)基或C6-C10芳基，其中所述雜環(huán)基和芳基可選地被一個或更多獨立地選自S組取代基的取代基取代；S組取代基選自下組(a)硝基；(b)鹵素；(c)羥基；(d)N3；(e)CN；(f)CHO；(g)C1-C10烷氧基；(h)C1-C3烷氧基-C1-C3烷氧基；(i)氧代；(j)C1-C10烷?；?；(k)C1-C10烷基；(l)被芳族雜環(huán)取代的C1-C12烷基；(m)被O-SO2取代的C1-C6烷基；(n)C2-C10烯基；(o)C2-C10炔基；(p)C3-C10環(huán)烷基；(q)取代的C3-C10環(huán)烷基；(r)雜環(huán)基；(s)取代的雜環(huán)基；(t)芳基；(u)取代的芳基；(v)三烷基甲硅烷基；(w)-C(O)R8；(x)-C(O)R18；(y)-C(O)OR8；(z)-C(O)NR8R9；(aa)-NR8R9；(bb)-NR19R20；(cc)-NHC(O)R8；(dd)-NHC(O)NR8R9；(ee)＝N-O-R8；(ff)＝N-NR8R9；(gg)＝N-NR19R20；(hh)＝N-R8；(ii)＝N-R18；(jj)＝N-NHC(O)R8；(kk)＝N-NHC(O)NR8R9；(ll)-C≡N；*(mm)-S(O)n，其中n是0、1或2；(nn)-S(O)nR8，其中n是0、1或2；(oo)-O-S(O)nR8，其中n是0、1或2；和(pp)-SO2NR8R9。
本發(fā)明涉及式1A化合物 及其藥學上可接受的鹽、前體藥物和溶劑化物，其中Rf選自H、-C(O)-咪唑基、C1-C12烷基、C3-C10烯基、C3-C10炔基、-C(O)(C1-C18)烷基、-C(O)O(C1-C18)烷基、-C(O)NR8R9和CH2(RaRb)nAr，其中n是從0至10的整數，其中所述烷基的一個或兩個碳可選地被獨立地選自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(C1-C6)烷基-和-C(O)-的雙基置換，并且可選地被1至3個獨立地選自S組取代基的取代基取代；R3選自H和OR10；R10選自H、C1-C10烷基、C3-C10烯基、C3-C10炔基、-C(RaRb)-C(Ra)＝C(Rb)-Ar和(CRaRb)nAr，其中n是從1至10的整數，其中所述烷基、烯基和炔基的一個或兩個碳可選地被獨立地選自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(C1-C6)烷基-和-C(O)-的雙基置換，并且可選地被1至3個獨立地選自S組取代基的取代基取代，只要R10不是未取代的甲基；以及A、Y、R4、R5、R7、R8、R9、R11、R12、R13、R14、R15、R17、R18、R19、R20、Ra、Rb、Ar和S組取代基是如式1所定義的。
本發(fā)明更具體的實施方式包括這樣的式1化合物，其中A是H或F。在該子集化合物中，所有其他變量是如最初所定義的。
本發(fā)明更具體的實施方式包括這樣的式1化合物，其中X選自-C(O)-、-CH(NH2)-、-CH2NR9-、-NR9CH2-和-C(＝N-OR8)-，其中每個上述X基團的前一條短線連接式1化合物的C-10碳，每個基團的后一條短線連接式1化合物的C-8碳。在該子集化合物中，所有其他變量是如最初所定義的。
本發(fā)明更具體的實施方式包括這樣的式1化合物，其中X選自-CH2NH-、-CH2N(Me)-、-N(Me)CH2-、-C(＝N-OH)-、-C(＝N-OMe)-和-C(＝N-OCH2CH2OMe)-，其中每個上述X基團的前一條短線連接式1化合物的C-10碳，每個基團的后一條短線連接式1化合物的C-8碳。在該子集化合物中，所有其他變量是如最初所定義的。
本發(fā)明更具體的實施方式包括這樣的式1化合物，其中R1是OH。在該子集化合物中，所有其他變量是如最初所定義的。
本發(fā)明更具體的實施方式包括這樣的式1化合物，其中R2是OH。在該子集化合物中，所有其他變量是如最初所定義的。
本發(fā)明更具體的實施方式包括這樣的式1化合物，其中R1是OH，R2是OH。在該子集化合物中，所有其他變量是如最初所定義的。
本發(fā)明更具體的實施方式包括這樣的式1化合物，其中R1是OH，R2是OH，A是H，X選自-CH2NH-、-CH2N(Me)-、-N(Me)CH2-、-C(＝N-OH)-、-C(＝N-OMe)-和-C(＝N-OCH2CH2OMe)-，其中每個上述X基團的前一條短線連接式1化合物的C-10碳，每個基團的后一條短線連接式1化合物的C-8碳。在該子集化合物中，所有其他變量是如最初所定義的。
本發(fā)明更具體的實施方式包括這樣的式1化合物，其中R1是OH，R2是OH，A是F，X選自-CH2NH-、-CH2N(Me)-、-N(Me)CH2-、-C(＝N-OH)-、-C(＝N-OMe)-和-C(＝N-OCH2CH2OMe)-，其中每個上述X基團的前一條短線連接式1化合物的C-10碳，每個基團的后一條短線連接式1化合物的C-8碳。在該子集化合物中，所有其他變量是如最初所定義的。
本發(fā)明更具體的實施方式包括這樣的式1化合物，其中R1和R2與中間原子一起構成另外一個具有下列結構之一的環(huán) 其中Z是CH2或C(＝O)；B1選自NH、NMe和CH2；R6是(CH2)nAr，其中n是從0至10的整數。在該子集化合物中，所有其他變量是如最初所定義的。
本發(fā)明更具體的實施方式包括這樣的式1化合物，其中R1和X與中間原子一起構成另外一個具有下列結構的環(huán) 在該子集化合物中，所有其他變量是如最初所定義的。
本發(fā)明更具體的實施方式包括這樣的式1化合物，其中R1和X與中間原子一起構成另外一個具有下列結構的環(huán) 在該子集化合物中，所有其他變量是如最初所定義的。
本發(fā)明更具體的實施方式包括這樣的式1化合物，其中R1和R2與中間原子一起構成另外一個具有下列結構之一的環(huán) 其中Z是CH2或C(＝O)；B1選自NH、NMe和CH2；R6是(CH2)3Ar，其中n是從0至10的整數。在該子集化合物中，所有其他變量是如最初所定義的。
本發(fā)明更具體的實施方式包括這樣的式1化合物，其中R1和R2與中間原子一起構成另外一個具有下列結構之一的環(huán)
其中Z是CH2或C(＝O)；B1選自NH、NMe和CH2；R6是(CH2)3Ar；Ar選自喹啉-4-基、4-苯基-咪唑-1-基、咪唑并(4，5-b)吡啶-3-基和4-吡啶-3-基-咪唑-1-基。在該子集化合物中，所有其他變量是如最初所定義的。
本發(fā)明更具體的實施方式包括這樣的式1化合物，其中R3選自O(C1-C4)烷基、OCH2CH＝CH-Ar和O(CH2)nAr。在該子集化合物中，所有其他變量是如最初所定義的。
本發(fā)明更具體的實施方式包括這樣的式1化合物，其中Y選自CH2、C(O)、C＝S、CH(OR8)、CH(OC(O)R8)、CH(OC(O)Ar)、CH(OC(O)NR8R9)和CH(O(CRaRb)nAr)，其中n是從0至10的整數。
本發(fā)明更具體的實施方式包括這樣的式1化合物，其中Y具有下列結構 本發(fā)明更具體的實施方式包括這樣的式1化合物，其中Y具有下列結構 其中R12是H，R13選自OR8、OC(O)R8、O(CRaRb)nAr、OC(O)(CRaRb)nAr、OC(O)(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr、OC(O)NR8R9、OC(O)NR8NR8R9、OC(O)NR8(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr、OC(O)NR8NR8(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr、NR8R9、NR8(CO)R8、NR8C(O)NR8R9、NR8C(O)OR8、O(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr、S(CRaRb)nAr、NH(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr和NH(CRaRb)nAr，其中n是從0至10的整數，所有其他變量是如最初所定義的；
或者R13是OH，R12選自CH2N3、CH2NH2、CH2NR8(CRaRb)nAr、CH2NR8R9、CH2NR8NR8R9、CH2NR8(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr、CH2NR8NR8(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr、CH2NR8C(O)OR8、CH2NR8C(O)NR8R9、CH2NR8C(O)OR8、CH2O(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr、CH2S(CRaRb)nAr和CH2NH(CRaRb)nAr，其中n是從0至10的整數，所有其他變量是如最初所定義的；或者R13是OH，R12選自H、C1-C10烷基、C3-C10烯基、C3-C10炔基、-C(RaRb)-C(Ra)＝C(Rb)-Ar和(CRaRb)nAr，其中n是從0至10的整數，其中所述烷基、烯基和炔基的一個或兩個碳可選地被獨立地選自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(C1-C6)烷基-和-C(O)-的雙基置換，并且可選地被1至3個獨立地選自S組取代基的取代基取代，所有其他變量是如最初所定義的；或者R12和R13與它們所連接的碳一起可以構成-C(O)-、-C(＝N-OR8)-或-C(＝N-R8)-，所有其他變量是如最初所定義的。
本發(fā)明更具體的實施方式包括這樣的式1化合物，其中R14和R15與它們所連接的碳一起構成下列結構 其中n和m每個獨立地是從1至6的整數；R16選自R8、C(O)R8、C(O)Ar、C(O)OR8、(CRaRb)nAr、C(O)(CRaRb)nAr、C(O)(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr、C(O)NR8R9、C(O)NR8NR8R9、C(O)NR8(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr、C(O)NR8NR8(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr、NR8NR8R9、(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr和(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr，其中n是從0至10的整數，所有其他變量是如最初所定義的。
本發(fā)明更具體的實施方式包括這樣的式1化合物，其中R4是H或Ac。在該子集化合物中，所有其他變量是如最初所定義的。
本發(fā)明更具體的實施方式包括這樣的式1化合物，其中R5是H或F。在該子集化合物中，所有其他變量是如最初所定義的。
本發(fā)明更具體的實施方式包括這樣的式1A化合物，其中A是H或F。在該子集化合物中，所有其他變量是如最初所定義的。
本發(fā)明更具體的實施方式包括這樣的式1A化合物，其中Rf選自H、-C(O)-咪唑基、-C(O)OR8、-C(O)(CH2)nAr、-C(O)NR8R9和-C(O)NR8NR8R9，其中n是從0至10的整數。在該子集化合物中，所有其他變量是如最初所定義的。
本發(fā)明更具體的實施方式包括這樣的式1A化合物，其中R3選自OH、O(C2-C4)烷基、OCH2CH＝CH-Ar和O(CH2)nAr，其中n是從1至10的整數。在該子集化合物中，所有其他變量是如最初所定義的。
本發(fā)明更具體的實施方式包括這樣的式1A化合物，其中Y選自CH2、C(O)、C＝S、CH(OR8)、CH(OC(O)R8)、CH(OC(O)Ar)、CH(OC(O)NR8R9)和CH(O(CRaRb)nAr)，其中n是從0至10的整數。在該子集化合物中，所有其他變量是如最初所定義的。
本發(fā)明更具體的實施方式包括這樣的式1A化合物，其中Y具有下列結構 在該子集化合物中，所有其他變量是如最初所定義的。
本發(fā)明更具體的實施方式包括這樣的式1A化合物，其中Y具有下列結構
其中R12是H，R13選自OR8、OC(O)R8、O(CRaRb)nAr、OC(O)(CRaRb)nAr、OC(O)(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr、OC(O)NR8R9、OC(O)NR8NR8R9、OC(O)NR8(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr、OC(O)NR8NR8(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr、NR8R9、NR8(CO)R8、NR8C(O)NR8R9、NR8C(O)OR8、O(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr、S(CRaRb)nAr、NH(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr和N(CRaRb)nAr，其中n是從0至10的整數，所有其他變量是如最初所定義的；或者R13是OH，R12選自CH2N3、CH2NH2、CH2NR8(CRaRb)nAr、CH2NR8R9、CH2NR8NR8R9、CH2NR8(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr、CH2NR8NR8(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr、CH2NR8C(O)R8、CH2NR8C(O)NR8R9、CH2NR8C(O)OR8、CH2O(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr、CH2S(CRaRb)nAr和CH2NH(CRaRb)nAr，其中n是從0至10的整數，所有其他變量是如最初所定義的；或者R13是OH，R12選自H、C1-C10烷基、C3-C10烯基、C3-C10炔基、-C(RaRb)-C(Ra)＝C(Rb)-Ar和(CRaRb)nAr，其中n是從0至10的整數，其中所述烷基、烯基和炔基的一個或兩個碳可選地被獨立地選自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(C1-C6)烷基-和-C(O)-的雙基置換，并且可選地被1至3個獨立地選自S組取代基的取代基取代，所有其他變量是如最初所定義的；或者R12和R13與它們所連接的碳一起可以構成-C(O)-、-C(＝N-OR8)-或-C(＝N-R8)-，所有其他變量是如最初所定義的。
本發(fā)明更具體的實施方式包括這樣的式1A化合物，其中R14和R15與它們所連接的碳一起構成下列結構 其中n和m每個獨立地是從1至6的整數；R16選自R8、C(O)R8、C(O)Ar、C(O)OR8、(CRaRb)nAr、C(O)(CRaRb)nAr、C(O)(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr、C(O)NR8R9、C(O)NR8NR8R9、C(O)NR8(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr、C(O)NR8NR8(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr、NR8NR8R9、(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr和(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr，其中n是從0至10的整數。在該化合物的子集中，所有其他變量是如最初所定義的。
本發(fā)明更具體的實施方式包括這樣的式1A化合物，其中R4是H或Ac。在該子集化合物中，所有其他變量是如最初所定義的。
本發(fā)明更具體的實施方式包括這樣的式1A化合物，其中R5是H或F。在該子集化合物中，所有其他變量是如最初所定義的。
本發(fā)明優(yōu)選的化合物實例包括下列化合物這樣的式1化合物，其中R1是OH；R2是OH；A是F；X選自-C(O)-、-CH2NH-、-CH2NMe-、-NHCH2-、-N(Me)CH2-、-CH(NH2)-、-C(＝N-OMe)-和-C(＝N-OCH2O(CH2)2OMe)-；R4是H；R5是H；Y是CH(O-克拉定糖)，其中O-克拉定糖代表下列結構 這樣的式1化合物，其中R1和R2一起構成-OC(O)O-；A是F；X選自-C(O)-、-CH2NH-、-CH2NMe-、-NHCH2-、-N(Me)CH2-、-CH(NH2)-、-C(＝N-OMe)-和-C(＝N-OCH2O(CH2)2OMe)-；R3是OH；R4是H；R5是H；Y是CH(O-克拉定糖)；這樣的式1化合物，其中R1和R2一起構成-OCH2O-；A是F；X選自-C(O)-、-CH2NH-、-CH2NMe-、-NHCH2-、-N(Me)CH2-、-CH(NH2)-、-C(＝N-OMe)-和-C(＝N-OCH2O(CH2)2OMe)-；R4是H；R5是H；Y是CH(O-克拉定糖)；具有下式的化合物
其中X選自-C(O)-、-CH2NH-、-CH2NMe-、-NHCH2-、-N(Me)CH2-、-CH(NH2)-、-C(＝N-OMe)-和-C(＝N-OCH2O(CH2)2OMe)-；以及R10選自Et、n-Pr、環(huán)丙基、環(huán)丁基、COCH3、CH2CH2CH2-(4-吡啶基)、CH2CH＝CH2-(4-吡啶基)、CH2CH2CH2-(4-喹啉基)、CH2CH＝CH-(4-喹啉基)、CH2CH2CH2-(5-喹啉基)、CH2CH＝CH2-(5-喹啉基)、CH2CH2CH2-(4-苯并咪唑基)、CH2CH＝CH-(4-苯并咪唑基)、CH2CH2CH2-(8-喹啉基)、CH2CH＝CH-(8-喹啉基)、CH2CH2NHCH2-(4-吡啶基)和CH2CH2NHCH2-(4-喹啉基)；具有下式的化合物 其中X選自-C(O)-、-CH2NH-、-CH2NMe-、-NHCH2-、-N(Me)CH2-、-CH(NH2)-、-C(＝N-OMe)-和-C(＝N-OCH2O(CH2)2OMe)-；R10選自Et、n-Pr、環(huán)丙基、環(huán)丁基、COCH3、CH2CH2CH2-(4-吡啶基)、CH2CH＝CH2-(4-吡啶基)、CH2CH2CH2-(4-喹啉基)、CH2CH＝CH-(4-喹啉基)、CH2CH2CH2-(5-喹啉基)、CH2CH＝CH-(5-喹啉基)、CH2CH2CH2-(4-苯并咪唑基)、CH2CH＝CH-(4-苯并咪唑基)、CH2CH2CH2-(8-喹啉基)、CH2CH＝CH-(8-喹啉基)、CH2CH2NHCH2-(4-吡啶基)和CH2CH2NHCH2-(4-喹啉基)；R8選自NH(CH2)2N(Me)CH2Ar、NH(CH2)2NHCH2Ar、O(CH2)N(Me)CH2Ar和O(CH2)2NHCH2Ar；以及Ar選自苯基、2-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、喹啉-4-基、7-甲氧基-喹啉-4-基、4-苯基-咪唑-1-基、吡啶-4-基、吡啶-3-基、吡啶-2-基、4-吡啶-3-基-咪唑-1-基、咪唑并(4，5-b)吡啶-3-基、2-苯基-噻唑-5-基、2-吡啶-3-基-噻唑-4-基和苯并咪唑-1-基；具有下式的化合物
其中X選自-C(O)-、-CH2NH-、-CH2NMe-、-NHCH2-、-N(Me)CH2-、-CH(NH2)-、-C(＝N-OMe)-和-C(＝N-OCH2O(CH2)2OMe)-；R10選自Et、n-Pr、環(huán)丙基、環(huán)丁基、COCH3、CH2CH2CH2-(4-吡啶基)、CH2CH＝CH2-(4-吡啶基)、CH2CH2CH2-(4-喹啉基)、CH2CH＝CH-(4-喹啉基)、CH2CH2CH2-(5-喹啉基)、CH2CH＝CH-(5-喹啉基)、CH2CH2CH2-(4-苯并咪唑基)、CH2CH＝CH-(4-苯并咪唑基)、CH2CH2CH2-(8-喹啉基)、CH2CH＝CH-(8-喹啉基)、CH2CH2NHCH2-(4-吡啶基)和CH2CH2NHCH2-(4-喹啉基)；R12選自H、Me、Et、丙基、環(huán)丙基、環(huán)丁基、CH2N3、CH2NH2、CH2NHMe、CH2NHEt、CH2NH-n-pr、CH2NH-環(huán)丙基、CH2NH-異丙基、CH2NH(CH2)2NH2、CH2NH(CH2)2NHCH2Ar和CH2NH(CH2)2N(Me)CH2Ar；以及Ar選自苯基、2-甲氧基苯基、4-甲氧基苯基、喹啉-4-基、7-甲氧基-喹啉-4-基、4-苯基-咪唑-1-基、吡啶-4-基、吡啶-3-基、吡啶-2-基、4-吡啶-3-基-咪唑-1-基、咪唑并(4，5-b)吡啶-3-基、2-苯基-噻唑-5-基、2-吡啶-3-基-噻唑-4-基和苯并咪唑-1-基；具有下式的化合物
其中R10選自Et、n-Pr、環(huán)丙基、環(huán)丁基、COCH3、CH2CH2CH2-(4-吡啶基)、CH2CH＝CH2-(4-吡啶基)、CH2CH2CH2-(4-喹啉基)、CH2CH＝CH-(4-喹啉基)、CH2CH2CH2-(5-喹啉基)、CH2CH＝CH-(5-喹啉基)、CH2CH2CH2-(4-苯并咪唑基)、CH2CH＝CH-(4-苯并咪唑基)、CH2CH2CH2-(8-喹啉基)、CH2CH＝CH-(8-喹啉基)、CH2CH2NHCH2-(4-吡啶基)和CH2CH2NHCH2-(4-喹啉基)；R5是H或F；以及X選自-C(O)-、-CH2NH-、-CH2NMe-、-NHCH2-、-N(Me)CH2-、-CH(NH2)-、-C(＝N-OMe)-和-C(＝N-OCH2O(CH2)2OMe)-；具有下式的化合物 其中B1選自NH、O和CH2；X選自-C(O)-、-CH2NH-、-CH2NMe-、-NHCH2-、-N(Me)CH2-、-CH(NH2)-、-C(＝N-OMe)-和-C(＝N-OCH2O(CH2)2OMe)-；R5是H或F；以及Ar選自喹啉-4-基、7-甲氧基-喹啉-4-基、4-苯基-咪唑-1-基、吡啶-4-基、吡啶-3-基、吡啶-2-基、4-吡啶-3-基-咪唑-1-基、苯基、咪唑并(4，5-b)吡啶-3-基、2-苯基-噻唑-5-基、2-吡啶-3-基-噻唑-4-基和苯并咪唑-1-基；具有下式的化合物 其中Ar選自喹啉-4-基、7-甲氧基-喹啉-4-基、4-苯基-咪唑-1-基、吡啶-4-基、吡啶-3-基、吡啶-2-基、4-吡啶-3-基-咪唑-1-基、苯基、咪唑并(4，5-b)吡啶-3-基、2-苯基-噻唑-5-基、2-吡啶-3-基-噻唑-4-基和苯并咪唑-1-基；以及R5是H或F；具有下式的化合物 其中Ar選自喹啉-4-基、7-甲氧基-喹啉-4-基、4-苯基-咪唑-1-基、吡啶-4-基、吡啶-3-基、吡啶-2-基、4-吡啶-3-基-咪唑-1-基、苯基、咪唑并(4，5-b)吡啶-3-基、2-苯基-噻唑-5-基、2-吡啶-3-基-噻唑-4-基和苯并咪唑-1-基；以及R5是H或F；具有下式的化合物 其中Ar選自喹啉-4-基、7-甲氧基-喹啉-4-基、4-苯基-咪唑-1-基、吡啶-4-基、吡啶-3-基、吡啶-2-基、4-吡啶-3-基-咪唑-1-基、苯基、咪唑并(4，5-b)吡啶-3-基、2-苯基-噻唑-5-基、2-吡啶-3-基-噻唑-4-基和苯并咪唑-1-基；以及R5是H或F；具有下式的化合物 其中Ar選自喹啉-4-基、7-甲氧基-喹啉-4-基、4-苯基-咪唑-1-基、吡啶-4-基、吡啶-3-基、吡啶-2-基、4-吡啶-3-基-咪唑-1-基、苯基、咪唑并(4，5-b)吡啶-3-基、2-苯基-噻唑-5-基、2-吡啶-3-基-噻唑-4-基和苯并咪唑-1-基；以及R5是H或F；具有下式的化合物 其中Ar選自喹啉-4-基、7-甲氧基-喹啉-4-基、4-苯基-咪唑-1-基、吡啶-4-基、吡啶-3-基、吡啶-2-基、4-吡啶-3-基-咪唑-1-基、苯基、咪唑并(4，5-b)吡啶-3-基、2-苯基-噻唑-5-基、2-吡啶-3-基-噻唑-4-基和苯并咪唑-1-基；以及R5是H或F；具有下式的化合物 其中R5是H或F；D選自CH2Ar、CH2NH2、CH2NHCH2Ar、CH2OH、(CH2)3Ar、CH2OCH2Ar、CH2SCH2Ar、CH2NHCH2Ar、CH2N(Me)CH2Ar和CH2OCH2-Ar；以及Ar選自喹啉-4-基、7-甲氧基-喹啉-4-基、4-苯基-咪唑-1-基、吡啶-4-基、吡啶-3-基、吡啶-2-基、4-吡啶-3-基-咪唑-1-基、苯基、咪唑并(4，5-b)吡啶-3-基、2-苯基-噻唑-5-基、2-吡啶-3-基-噻唑-4-基和苯并咪唑-1-基；具有下式的化合物 其中R16選自H、Me、Et、正丙基、環(huán)丙基、環(huán)丁基、C(O)Me、C(O)Ar、C(O)OMe、(CH2)3Ar、(CH2)2Ar、(CH2)2NHCH2Ar和(CH2)2N(Me)CH2Ar；以及Ar選自苯基、喹啉-4-基、7-甲氧基-喹啉-4-基、4-苯基-咪唑-1-基、吡啶-4-基、吡啶-3-基、吡啶-2-基、4-吡啶-3-基-咪唑-1-基、苯基、咪唑并(4，5-b)吡啶-3-基、2-苯基-噻唑-5-基、2-吡啶-3-基-噻唑-4-基和苯并咪唑-1-基；這樣的式1A化合物，其中Rf是H或-C(O)-咪唑基；A是H或F；R3選自OH、OEt、O-環(huán)丙基和O-正丙基；R4選自H、Ac和三甲基甲硅烷基；R5是H或F；Y選自CH(O-克拉定糖)、CH(O-(4”-O-乙?；?-克拉定糖)、CH(OH)、C＝O和CH(OAc)。
某些式1和1A化合物可能含有一個或更多不對稱的碳，因此可以存在不同的異構形式。本發(fā)明包括式1和1A化合物的所有純的各對映體和各非對映體，和包含任意這些異構體的任意組合的混合物。每種立體的碳都可能是R或S構型。確切地，本發(fā)明包括式1大環(huán)內酯環(huán)C-2、C-8、C-9、C-10和C-11的R和S構型。本發(fā)明進一步包括式1和1A化合物的所有E和Z構型及其混合物。盡管本申請所例證的具體化合物可以被描述為特定的立體化學構型，不過在任意給定手性中心具有任一反向立體化學的化合物或其混合物也是預料中的。式1和1A化合物可以另外存在互變異構體。本發(fā)明包括所有這樣的純互變異構體及其混合物。本發(fā)明包括任意上述化合物或化合物的混合物的用途。
本發(fā)明的化合物可以通過適當的官能度加以修飾，以增強選擇性生物學性質。本發(fā)明包括式1和1A化合物的所有藥學上可接受的衍生物或前體藥物。本發(fā)明也包括式1和1A化合物的所有藥學上可接受的鹽。
本發(fā)明包括式1和1A化合物的所有同位素標記形式及其藥學上可接受的鹽。這些同位素標記的化合物可用作研究或診斷工具。
本發(fā)明也涉及用于制備式1化合物的方法。 一種這樣的方法包括將其中R8是氫的式3化合物用甲磺酰氯處理或者用甲磺酰氯和一種堿處理，堿例如DBU、吡啶或三乙胺。 另一種方法包括在一種酸的存在下，將式50化合物用一種適當的親核試劑處理，以打開4”位的環(huán)氧化物部分。 另一種方法包括將式63化合物用R6B1NH2或NH2C(D)(E)C(F)(G)NH2處理。 另一種方法包括在一種酸的存在下，例如乙酸，將式69化合物用C(D)(E)(O)處理。 另一種方法包括在一種路易斯酸的存在下，將式82化合物用一種疊氮化物試劑處理，例如TMS-N3。 另一種方法包括在一種酸的存在下，例如對-甲苯磺酸，將式87化合物用R14R15C(O)處理。 本發(fā)明也涉及用于治療細菌或原生動物感染、或與細菌或原生動物感染有關的病癥的藥物組合物。該藥物組合物包含治療學上有效量的式1或1A化合物或其藥學上可接受的鹽、前體藥物或溶劑化物，和藥學上可接受的載體或稀釋劑。該藥物組合物可以包含另外一種或更多具有抗生素作用或其他治療或預防作用的藥物。
本發(fā)明進一步包括治療需要治療的人、其他哺乳動物、魚或鳥類細菌或原生動物感染、或與細菌或原生動物感染有關的病癥的方法。本發(fā)明的方法包括將治療學上有效量的式或1A化合物、其藥學上可接受的鹽、前體藥物或溶劑化物、或包含如上所定義的化合物的藥物組合物對所述人、其他哺乳動物、魚或鳥給藥。本發(fā)明涵蓋其中將本發(fā)明化合物作為單獨藥劑或與其他治療劑結合給藥的治療方法。
可用式1和1A化合物、其藥學上可接受的鹽、溶劑化物和前體藥物、或包含該化合物的藥物組合物治療的患者包括被各種微生物、包括革蘭氏陽性與革蘭氏陰性細菌感染的哺乳動物(特別是人)、魚和鳥類。
本文所用的術語“感染”除非另有指定，包括“細菌感染”、“原生動物感染”和“與細菌感染或原生動物感染有關的病癥”。這些術語包括存在于哺乳動物、魚和鳥類中的細菌感染和原生動物感染，以及與細菌感染或原生動物感染有關的病癥，可以通過本發(fā)明化合物的給藥加以治療或預防。這些細菌感染、原生動物感染和與這些細菌和原生動物感染有關的病癥包括如下與肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌、粘膜炎摩拉克氏菌、金黃色葡萄球菌、糞腸球菌、屎腸球菌、鉛黃腸球菌、表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌或消化鏈球菌感染有關的肺炎、中耳炎、鼻竇炎、支氣管炎、扁桃體炎和乳突炎；與釀膿鏈球菌、C族與G族鏈球菌、白喉梭狀芽孢桿菌、白喉棒狀桿菌或溶血性放線桿菌感染有關的咽炎、風濕熱和腎小球性腎炎；與肺炎支原體、嗜肺軍團菌、肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌或肺炎衣原體感染有關的呼吸道感染；血液與組織感染，包括心內膜炎和骨髓炎，由金黃色葡萄球菌、溶血性葡萄球菌、糞腸球菌、屎腸球菌或耐久腸球菌導致，包括耐受已知抗菌劑的菌株，例如但不限于β-內酰胺、萬古霉素、氨基葡糖苷、喹諾酮、氯霉素、四環(huán)素和大環(huán)內酯；與金黃色葡萄球菌、凝固酶陽性葡萄球菌(即表皮葡萄球菌、溶血性葡萄球菌等)、釀膿鏈球菌、無乳鏈球菌、C-F族鏈球菌(微小菌落鏈球菌)、綠色鏈球菌、極小棒狀桿菌、梭狀芽孢桿菌或漢氏巴爾通氏體感染有關的非并發(fā)性皮膚與軟組織感染與膿腫和產褥熱；與金黃色葡萄球菌、腐生葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌或腸球菌感染有關的非并發(fā)性急性尿道感染；尿道炎與宮頸炎；與沙眼衣原體、杜氏嗜血菌、梅毒密螺旋體、解脲尿支原體或淋病奈瑟氏球菌感染有關的性傳播疾??；與金黃色葡萄球菌(食物中毒和中毒性休克綜合征)或A、B與C族鏈球菌感染有關的毒素疾??；與幽門螺桿菌感染有關的潰瘍；與回歸熱疏螺旋體感染有關的全身發(fā)熱綜合征；與布氏疏螺旋體感染有關的萊姆病；與沙眼衣原體、淋病奈瑟氏球菌、金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、釀膿鏈球菌、流感嗜血桿菌或李斯特氏菌感染有關的結膜炎、角膜炎與淚囊炎；與鳥分枝桿菌或胞內分枝桿菌感染有關的播散性鳥分枝桿菌復征(MAC)??；由結核分枝桿菌、麻風分枝桿菌、副結核分枝桿菌、堪薩斯分枝桿菌或龜分枝桿菌導致的感染；與空腸彎曲桿菌感染有關的胃腸炎；與隱孢子蟲感染有關的腸內原生動物；與綠色鏈球菌感染有關的牙原性感染；與百日咳博德特氏桿菌感染有關的持續(xù)性咳嗽；與產氣莢膜梭狀芽胞桿菌或擬桿菌感染有關的氣性壞疽；和與幽門螺桿菌或肺炎衣原體感染有關的動脈粥樣硬化或心血管疾病?？梢员恢委熁蝾A防的動物細菌感染和原生動物感染以及與這些感染有關的病癥包括如下與溶血性巴斯德氏菌、出血敗血性巴斯德氏菌、牛支原體或博德特桿菌感染有關的牛呼吸疾?。慌c大腸桿菌或原生動物(即球蟲、隱孢子蟲等)感染有關的母牛腸疾病；與金黃色葡萄球菌、乳房鏈球菌、無乳鏈球菌、停乳鏈球菌、克雷白氏桿菌、棒狀桿菌屬或腸球菌感染有關的乳牛乳腺炎；與大葉性放線桿菌、出血敗血性巴斯德氏菌或支原體感染有關的豬呼吸疾??；與大腸桿菌、Lawsonia intracellularis、沙門氏菌屬或豬痢疾小蛇菌感染有關的豬腸疾?。慌c梭形桿菌感染有關的牛蹄壞疽?。慌c大腸桿菌感染有關的母牛子宮炎；與壞死梭桿菌或節(jié)擬桿菌感染有關的母牛毛疣；與牛摩拉克氏菌感染有關的母牛紅眼??；與原生動物(即neosporium)感染有關的母牛早產；與大腸桿菌感染有關的狗和貓尿道感染；與表皮葡萄球菌、中間葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌或出血敗血性巴斯德氏菌感染有關的狗和貓皮膚與軟組織感染；以及與產堿桿菌、擬桿菌、梭狀芽胞桿菌、腸桿菌、真桿菌屬、消化鏈球菌屬、卟啉單胞菌屬或普雷沃氏菌屬感染有關的狗和貓牙或口腔感染。按照本發(fā)明的方法，其它可以被治療或預防的細菌感染、原生動物感染和與細菌或原生動物感染有關的病癥參見J.P.Sanford等《Sanford抗微生物療法指南》第26版，Antimicrobial Therapy，Inc.，1996。
發(fā)明的詳細說明本發(fā)明包含新穎的式1和1A化合物及其藥學上可接受的鹽、前體藥物和溶劑化物，它們是抗細菌和/或抗原生動物劑。本發(fā)明進一步包含制備所要求保護的化合物的方法、包含該化合物的藥物組合物和利用這些化合物和組合物的治療方法。
在本文所描述的化學結構中，波浪線表示與該波浪線連接的手性中心的立體化學是R或S構型，其中該波浪線是與碳原子連接的。式1化合物中，大環(huán)內酯環(huán)2、8、10和11位上的波浪線表示這些碳具有R或S構型。與肟氮連接的波浪線表示該肟的幾何學是E或Z構型。
本文所用的術語“鹵代”除非另有指定，指的是氟、氯、溴或碘。優(yōu)選的鹵代基團是氟、氯和溴。
本文所用的術語“烷基”除非另有指定，包括飽和的一價烴原子團，具有直鏈、環(huán)狀或支鏈部分或上述部分的組合。所述烷基可以包括一條或兩條雙鍵或叁鍵。關于環(huán)烷基，在所述烷基中需要至少三個碳原子。所述環(huán)烷基可以包括單環(huán)或多環(huán)的烷基原子團。烷基原子團的實例包括但不限于甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、異戊基、正己基、環(huán)己基、金剛烷基、降冰片基等。
本文所用的術語“烯基”除非另有指定，包括直鏈或支鏈的單或多不飽和的脂族烴原子團，含有至少一條碳-碳雙鍵。烯基原子團的實例包括但不限于乙烯基、E-與Z-丙烯基、異丙烯基、E-與Z-丁烯基、E-與Z-異丁烯基、E-與Z-戊烯基、E-與Z-己烯基、E，E-、E，Z-、Z，E-與Z，Z-己二烯基等。
本文所用的術語“炔基”除非另有指定，包括直鏈或支鏈的單或多不飽和的脂族烴原子團，含有至少一條碳-碳叁鍵。炔基原子團的實例包括但不限于乙炔基、E-與Z-丙炔基、異丙炔基、E-與Z-丁炔基、E-與Z-異丁炔基、E-與Z-戊炔基、E-與Z-己炔基等。
本文所用的術語“烷氧基”除非另有指定，包括烷基醚原子團，其中術語“烷基”是如上所定義的。適合的烷基醚原子團的實例包括但不限于甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、異丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基等。
本文所用的術語“烷?；背橇碛兄付?，包括-C(O)-烷基，其中“烷基”是如上所定義的。
本文所用的術語“芳基”除非另有指定，包括從芳烴除去一個氫而衍生的有機原子團。芳基原子團的實例包括但不限于苯基、萘基、茚基、2，3-二氫化茚基、薁基、芴基、蒽基等。
術語“取代”無論前邊有無術語“可選”，和本發(fā)明結構式中所含有的取代指的是用指定取代基的原子團置換給定結構中的一個或更多的氫。當給定結構中的一個以上位置可以被選自指定組的一個以上取代基取代時，每個位置上的取代基都可以是相同或不同的。在有些情況下，給定結構中的兩個位置可以被一個共享的取代基取代。最優(yōu)選的取代基是增強抗細菌或抗原生動物活性的那些。
本文所用的“Ac”除非另有指定，表示乙?；?。
本文所用的“Me”除非另有指定，表示甲基。
本文所用的“Et”除非另有指定，表示乙基。
本文所用的術語“4-至10-元雜環(huán)”除非另有指定，包括芳族和非芳族雜環(huán)基，含有一個或更多各自選自O、S和N的雜原子，其中每個雜環(huán)基在其環(huán)系中具有4至10個原子。非芳族雜環(huán)基包括在其環(huán)系中僅具有3個原子的基，但是芳族雜環(huán)基在其環(huán)系中必須具有至少5個原子。雜環(huán)基包括苯并稠合的環(huán)系和被一個或更多氧代部分取代的環(huán)系。4-元雜環(huán)基的實例是氮雜環(huán)丁烷基(從氮雜環(huán)丁烷衍生)。5-元雜環(huán)基的實例是噻唑基，10-元雜環(huán)基的實例是喹啉基。非芳族雜環(huán)基的實例是吡咯烷基、四氫呋喃基、四氫噻吩基、四氫吡喃基、四氫噻喃基、哌啶子基、嗎啉代、硫代嗎啉代、噻噁烷基、哌嗪基、氮雜環(huán)丁烷基、氧雜環(huán)丁烷基、硫雜環(huán)丁烷基、高哌啶基、氧雜環(huán)庚烷基、硫雜環(huán)庚烷基、氧氮雜基、二氮雜基、硫氮雜基、1，2，3，6-四氫吡啶基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、二氫吲哚基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、二噁烷基、1，3-二氧雜環(huán)戊烷基、吡唑啉基、二噻烷基、二硫雜環(huán)戊烷基、二氫吡喃基、二氫噻吩基、二氫呋喃基、吡唑烷基、咪唑啉基、咪唑烷基、3-氮雜二環(huán)[3.1.0]己烷基、3-氮雜二環(huán)[4.1.0]庚烷基、3H-吲哚基和喹嗪基。芳族雜環(huán)基的實例是吡啶基、咪唑基、嘧啶基、吡唑基、三唑基、吡嗪基、四唑基、呋喃基、噻吩基、異噁唑基、噻唑基、噁唑基、異噻唑基、吡咯基、喹啉基、異喹啉基、吲哚基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、噌啉基、吲唑基、中氮茚基、酞嗪基、噠嗪基、三嗪基、異吲哚基、蝶啶基、嘌呤基、噁二唑基、噻二唑基、呋咱基、苯并呋咱基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基和呋喃并吡啶基?？赡艿脑?，從上面列舉的化合物衍生的上述基團可以是C-連接的或N-連接的。例如，從吡咯衍生的基團可以是吡咯-1-基(N-連接的)或吡咯-3-基(C-連接的)。
術語“保護基團”指的是這樣一種適合的化學基團，它可以連接到官能團上，并且可以在后面的階段中被除去，以露出完整的官能團。T.W.Greene和P.G.M.Wuts《有機合成中的保護基團》第2版JohnWiley and Sons(1991)、L.Fieser和M.Fieser《Fieser氏有機合成試劑》John Wiley and Sons(1994)和L.Paquette等人《有機合成試劑百科全書》John Wiley and Sons(1995)描述了適合于各種官能團的保護基團實例。
術語“酸”指的是電子對受體。
術語“堿”指的是電子對供體。
術語“治療學上有效量”指的是作為單一療法或者與其他藥物結合，對治療或改善患者細菌感染或原生動物感染、或涉及細菌或原生動物感染的病癥有效的量。本文所用的術語“治療”指的是患者細菌感染或原生動物感染、或涉及細菌感染或原生動物感染的特定病癥癥狀的減輕，或者與這樣一種病癥有關的可查明的量度的好轉。本文所用的術語“患者”指的是患有細菌感染或原生動物感染、或涉及細菌感染或原生動物感染的病癥的哺乳動物(包括人)、魚和鳥類。
本文所用的動詞“治療”除非另有指定，指逆轉、減輕、抑制該術語所適用的病癥或疾病的進展或預防該病癥或疾病，或者針對該病癥或疾病的一種或更多癥狀。本文所用的名詞“治療”除非另有指定，指如剛才所定義的動詞“治療”的治療行為。
術語“藥學上可接受的載體”指的是可以與本發(fā)明化合物一起對患者給藥的載體。當按足以釋放治療量化合物的劑量給藥時，載體不破壞化合物的藥理活性，并且是無毒的。
本文所用的包括式1和1A化合物在內的本發(fā)明化合物被定義為包括其藥學上可接受的衍生物或前體藥物。“藥學上可接受的衍生物或前體藥物”指本發(fā)明化合物的任意藥學上可接受的鹽、酯、酯的鹽或其他衍生物，一旦對接受者給藥即能夠(直接或間接)提供本發(fā)明化合物或其代謝產物或殘余物。特別可取的衍生物和前體藥物是在對患者給藥后增加本發(fā)明化合物的生物利用度(例如允許口服給藥以更容易吸收進入血液)、增強母體化合物釋放到給定生物腔、增加溶解度以便注射給藥、改變代謝或改變排泄速率的那些。
式1和1A化合物例如能夠通過游離氨基、酰氨基、羥基或羧基而轉化為前體藥物。這些前體藥物的實例包括這樣的化合物，其中一個氨基酸殘基或兩個或更多(例如兩個、三個或四個)氨基酸殘基的多肽鏈通過酰胺或酯鍵共價結合到式1或1A化合物的游離氨基、羥基或羧酸基上。氨基酸殘基包括但不限于常用三字母符號表示的20種天然來源氨基酸，也包括4-羥基脯氨酸、羥基賴氨酸、鎖鏈素、異鎖鏈素、3-甲基組氨酸、正纈氨酸、β-丙氨酸、γ-氨基丁酸、瓜氨酸、高半胱氨酸、高絲氨酸、鳥氨酸和甲硫氨酸砜。
其他類型的前體藥物也涵蓋其中。例如，游離羧基可以衍生為酰胺或烷基酯。該酰胺和酯部分可以結合包括但不限于醚、胺和羧酸官能度在內的基團。游離羥基可以利用包括但不限于半琥珀酸酯、磷酸酯、二甲氨基乙酸酯和磷酰氧基甲氧羰基在內的基團加以衍生，如D.Fleisher等《藥物釋放進展評論》vol.19，p.115(1996)所述。羥基和氨基的氨基甲酸酯前體藥物也包括其中，以及羥基的碳酸酯和硫酸酯前體藥物。羥基衍生為(酰氧基)甲基與(酰氧基)乙基醚也涵蓋其中，其中的?；梢允峭榛?，并且可選地被包括但不限于醚、胺和羧酸官能度在內的基團取代，或者其中的酰基是如上所述的氨基酸酯。R.P.Robinson等《醫(yī)藥化學雜志》vol.39，p.10(1996)描述了這種類型的前體藥物。
本發(fā)明化合物也包括式1和1A化合物的藥學上可接受的鹽。本文所用的術語“藥學上可接受的鹽”除非另有指定，包括可以存在于本發(fā)明化合物中的酸性或堿性基團的鹽。
堿性的本發(fā)明化合物能夠與各種無機和有機酸生成多種不同的鹽。可用于制備這些式1和1A堿性化合物的藥學上可接受的酸加成鹽的酸生成無毒的酸加成鹽，也就是含有藥學上可接受的陰離子的鹽，例如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、硝酸鹽、硫酸鹽、硫酸氫鹽、磷酸鹽、酸式磷酸鹽、異煙酸鹽、乙酸鹽、乳酸鹽、水楊酸鹽、檸檬酸鹽、酸式檸檬酸鹽、酒石酸鹽、泛酸鹽、酒石酸氫鹽、抗壞血酸鹽、琥珀酸鹽、馬來酸鹽、龍膽酸鹽、富馬酸鹽、葡萄糖酸鹽、葡萄糖醛酸鹽、糖質酸鹽、甲酸鹽、苯甲酸鹽、谷氨酸鹽、甲磺酸鹽、乙磺酸鹽、苯磺酸鹽、對-甲苯磺酸鹽和撲酸鹽(即1，1’-亞甲基-雙-(2-羥基-3-萘甲酸鹽))。除了上述酸以外，包括堿性部分、例如氨基的本發(fā)明化合物還可以與各種氨基酸生成藥學上可接受的鹽。
酸性的本發(fā)明化合物能夠與各種藥學上可接受的陽離子生成堿鹽。這些鹽的實例包括本發(fā)明化合物的堿金屬或堿土金屬鹽，確切地是鈣鹽、鎂鹽、鈉鹽和鉀鹽。
本發(fā)明也包括同位素標記的化合物及其藥學上可接受的鹽，它們等同于式1和1A所述的那些，但是事實上一個或更多原子被原子質量或質量數不同于自然界中通常存在的原子質量或質量數的原子所置換。可以結合在本發(fā)明化合物中的同位素實例包括氫、碳、氮、氧、磷、氟和氯的同位素，分別例如2H、3H、13C、14C、15N、18O、17O、35S、18F和36Cl。含有上述同位素和/或其他原子的其他同位素的本發(fā)明化合物、其前體藥物和所述化合物與所述前體藥物的藥學上可接受的鹽屬于本發(fā)明的范圍。某些同位素標記的本發(fā)明化合物、例如其中結合有放射性同位素、例如3H和14C的那些可用于藥物和/或底物組織分布測定。氚、即3H、和碳-14、即14C同位素是特別優(yōu)選的，因為它們易于制備和檢測。用較重的同位素取代，例如氘、即2H，由于代謝穩(wěn)定性更高而能夠帶來某些治療上的優(yōu)點，例如體內半衰期延長或劑量需求減少，因此在某些情況下可能是優(yōu)選的。同位素標記的本發(fā)明式1和1A化合物及其前體藥物一般可以按照下列流程和/或實施例所公開的操作進行制備，用易于得到的同位素標記試劑置換非同位素標記試劑即可。
本發(fā)明化合物是易于制備的?？捎糜谑?和1A化合物制備的原料例如可以利用下列公開方法進行制備1998年1月15日公布的國際申請WO98/01571、1998年1月15日公布的國際申請WO98/01546、1999年7月15日公布的國際申請WO99/35156和1999年7月15日公布的國際申請WO99/35157，所有這些均全文引用在此作為參考文獻。確切地說，原料可以通過發(fā)酵適合的生物進行制備。這些原料的制備涉及聚酮化合物生物合成基因或其部分的操作，它們可以從不同的聚酮化合物生物合成基因簇衍生。
聚酮化合物是一大類結構不同的天然產物，包括很多具有抗生素或其他藥理性質的化合物，例如紅霉素、四環(huán)素、雷怕霉素、阿凡曼菌素、聚醚實電解質和FK506。確切地說，鏈霉菌屬和有關放線菌產生豐富的聚酮化合物。它們是通過反復的逐步的?；虼狨タs合作用而合成的，其方式類似于脂肪酸的生物合成。在天然聚酮化合物中所發(fā)現的更大的結構多樣性來自于(通常)選擇乙酸酯或丙酸酯作為“起始”或“伸展”單元，來自于在每次縮合作用之后都能觀察到的不同程度的β-酮基加工。加工步驟的實例包括還原為β-羥基酰基-、還原后脫水為2-烯酰基-、和完全還原為飽和的?；虼狨?。這些加工步驟的立體化學結果因每個鏈伸展周期而異。
聚酮化合物的生物合成是由一組鏈形成酶引發(fā)的，已知為聚酮化合物合酶。在放線菌中已經描述了兩類聚酮化合物合酶(“PKS”)。一類稱為I型，包括用于合成大環(huán)內酯紅霉素、竹桃霉素、阿凡曼菌素和雷怕霉素的PKS。在I型PKS中，不同集合或“模塊”的酶負責每個聚酮化合物鏈伸展周期(Cortes，J.等《自然》vol.348，pp.176-178(1990)；Donadio，S.等《科學》vol.252，pp.675-679(1991)；Swan，D.G.等《Mol.Gen.Genet.》vol.242，pp.358-362(1994)；MacNeil，D.J.等《基因》vol.115，pp.119-125(1992)；Schwecke，T.等《美國國家科學院院報》vol.92，pp.7839-7843(1995))。
本文所用的術語“伸展模塊”指的是連續(xù)結構域的集合，從酮基?；?ACP合酶(“AKS”)結構域至下一個?；d體蛋白(“ACP”)結構域，完成一個聚酮化合物鏈伸展周期。術語“載入模塊”用來指任意組鄰近的結構域，它完成起始單元載入到PKS上，使其可以為第一個伸展模塊的β-酮基酰基合酶(“KS”)結構域所利用。在紅霉素生物合成的情況下，通過含有鏈釋放性硫代酸酯酶/環(huán)化酶活性的紅霉素產生性PKS酶結構域的特異性再定位作用，所生成的聚酮化合物的長度已經改變了(Cortes等《科學》vol.268，pp.1487-1489(1995)；Kao，C.M.等《美國化學會志》vol.117，pp.9105-9106(1995))。
正如1998年1月15日公布的國際申請WO98/01571所述，I型PKS基因裝配體編碼載入模塊，繼之以伸展模塊。紅霉素產生性PKS(稱為6-脫氧紅諾霉素B合酶“DEBS”)基因含有三個編碼DEBS多肽的可譯框架?；驑嫵稍诹鶄€重復的單元，稱為模塊中。第一個可譯框架編碼第一個多酶或盒(DEBS1)，它由三個模塊組成載入模塊和兩個伸展模塊(模塊1和2)。載入模塊包含AT和ACP。
DEBS載入模塊比單獨的丙酸酯具有略寬的特異性。確切地說，當含有該載入模塊的PKS是在產紅霉素天然宿主Saccharopolysporaerythraea(例如參見Cortes等《科學》vol.268，pp.1487-1489(1995))內表達或者在異種宿主例如Saccharopolysporacoelicolor(Kao.C.M.等《美國化學會志》vol.116，pp.11612-11613(1994)；Brown，M.J.B.等《英國化學會志化學通訊》pp.1517-1519(1995))內表達的PKS的一部分時，在體外和體內都使用乙酸酯起始單元。使用純化DEBS1-TE的體外實驗已經證明，丙酰-CoA和乙酰-CoA是向載入模塊分別有效供應丙酸酯和乙酸酯單元的替換性底物(Wiessmann，K.E.H.等《化學與生物學》vol.2，pp.583-589(1995)；Pieper，R.等《美國化學會志》vol.117，pp.11373-11374(1995))。乙酸酯與丙酸酯起始單元之間的競爭結果受到在所用宿主細胞內丙酰-CoA與乙酰-CoA各自的細胞內濃度誰更占優(yōu)勢的影響(例如參見Kao，C.M.等《科學》vol.265，pp.509-512(1994)；Pereda，A.等《微生物學》vol.144，pp.543-553(1995))。它還取決于宿主PKS的表達水平。例如正如1998年1月15日公布的國際申請WO98/01546所公開的，當含有DEBS載入模塊的重組DEBS或另一種雜種PKS在S.erythraea內過度表達時，產物一般是混合物，其組分的區(qū)別僅在于是存在乙酸酯起始單元還是存在丙酸酯起始單元。
DEBS內模塊5酮基還原酶結構域的DNA編碼部分的框架內缺失已經顯示導致紅霉素類似物5，6-二脫氧-3-碳霉糖基-5-氧紅諾霉素B、5，6-二脫氧-5-氧紅諾霉素B和5，6-二脫氧-6，6-環(huán)氧-5-氧紅諾霉素B的生成(Donadio，S.等《科學》vol.252，pp.675-679(1991))。同樣，DEBS內模塊4烯酰基還原酶結構域的活性位點殘基被相應的編碼PKS的DNA基因工程及其引入S.erythraea所改變，已經顯示導致6，7-脫水紅霉素C的產生(Donadio，S.等《美國國家科學院院報》vol.90，pp.7119-7123(1993))。國際申請WO93/13663全文引用在此作為參考文獻，它描述了其他類型的能夠產生變化了的聚酮化合物的DEBS基因操作。不過，很多這樣的努力據報道是非生產性的(Hutchinson C.R.和Fuji，I.《微生物學年評》vol.49，pp.201-238，見p.231(1995))。
關于編碼支配雷怕霉素生物合成的模塊I型PKS的吸濕性鏈霉菌基因，已經公開了完整的DNA序列，雷怕霉素是一種大環(huán)免疫抑制性聚酮化合物(Schwecke，T.等《美國國家科學院院報》vol.92，pp.7839-7843(1995))。該DNA序列已經描述在EMBL/Genbank數據庫中，入藏號為X86780。
關于支配16-元大環(huán)內酯聚酮化合物產生的若干I型PKS基因簇，也已經公開了DNA序列，包括產自新霉素鏈霉菌的泰洛星PKS(EP0791655A2)、產自Streptomyces caelestis的尼達霉素PKS(Kavakas，S.J.等《細菌學雜志》vol.179，pp.7515-7522(1998))和產自Streptomyces ambofaciens的螺旋霉素PKS(EP0791655A2)。這些PKS基因簇的載入模塊不同于DEBS和阿凡曼菌素PKS的載入模塊之處在于除了通常的AT結構域和ACP以外，它們還包括一個類似于伸展模塊KS結構域的結構域。另外的N-端KS-樣結構域已被命名為KSq，因為它每種情況下不同于伸展KS的是具有谷氨酰胺殘基(單字母符號為Q)，代替了β-酮基?；?ACP合酶活性所必需的活性位點半胱氨酸殘基。這里所用的縮寫ATq僅用來區(qū)分KSq C-端AT結構域與伸展AT；該符號沒有其他含義。
某些14-元大環(huán)內酯的PKS(特別是產自抗菌素鏈霉菌的竹桃霉素PKS)和某些聚醚離子載體聚酮化合物的PKS(特別是公認產自Streptomyces cinnamonensis的莫能星PKS)類似地具有包含KSq結構域、ATq結構域和ACP的載入結構域。
泰洛星PKS的KSq結構域和有關的ATq結構域都負責丙酸酯起始單元的高度特異性產生。也就是說，ATq對甲基丙二酰-CoA的載入是特異性的，KSq負責與酶聯甲基丙二酸酯單元的高度特異性脫羧作用，生成丙酸酯單元。該丙酸酯單元與載入模塊的ACP結構域連接，經過適當定位，轉移到伸展模塊1的KS上，用于引發(fā)鏈的伸展。按照同樣的方式，螺旋霉素與尼達霉素PKS的ATq和相鄰的KSq負責丙二酸酯單元的特異性載入及其隨后的特異性脫羧作用，為聚酮化合物鏈的伸展提供乙酸酯起始單元。
第二類PKS稱為II型，包括芳族化合物的合酶。II型PKS含有關于鏈伸展的單一的酶活性，它們酌情在連續(xù)的周期中重新使用(Bibb，M.J.等《EMBO J.》vol.8，pp.2727-2736(1989)；Sherman，D.H.等《EMBO J.》vol.8，pp.2717-2725(1989)；Fernandez-Moreno，M.A.等《生物化學雜志》vol.267，pp.19278-19290(1992))。關于II型PKS的“伸展”單元通常是乙酸酯單元。特異性環(huán)化酶的存在賦予完整鏈的優(yōu)選環(huán)化途徑，生成芳族產物(Hutchinson，C.R.和Fuji，I.《微生物學年評》vol.49，pp.201-238(1995))。
當在S.coelicolor宿主細胞內表達時，II型PKS上聚酮化合物鏈伸展所需的最少結構域數例如在國際申請WO95/08548中已經被定義為含有下列三種多肽，它們是actl基因的產物(1)KS；(2)稱為CLF的多肽，具有與KS的首尾氨基酸序列相似性，但是其中KS的必要活性位點殘基、即半胱氨酸殘基被谷氨酰胺殘基取代，或者在孢子色素、例如whiE基因產物的PKS的情況下(Chater，K.F.和Davis，N.K.《分子微生物學》vol.4，pp.1679-1691(1990))，被谷氨酸殘基取代；和(3)ACP。
通過將含有編碼一個II型PKS的DNA的克隆引入到另一種含有不同II型PKS基因簇的菌株中，得到雜種聚酮化合物。例如，已經將從產自S.coelicolor的藍色聚酮化合物放線菌紫素基因簇衍生的DNA引入到產生蒽醌聚酮化合物的菌株Streptomyces galileus中(Bartel，P.L.等《細菌學雜志》vol.172，pp.4816-4826(1990))。
另外，國際申請WO95/08548描述了雜種聚酮化合物的產生，即用來自其他II型PKS基因簇的異種DNA置換放線菌紫素PKS基因。國際申請WO95/08548還描述了S.coelicolor菌株的構建，該菌株基本上缺少放線菌紫素的天然基因簇，描述了從低拷貝數載體SCP2*衍生的質粒載體pRM5在該菌株中的用途，SCP2*是從S.coelicolor中分離的(Bibb，M.J.和Hopwood，D.A.《遺傳微生物學雜志》vol.126，p.427(1981))，其中編碼異種PKS的DNA可以在放線菌紫素基因簇的趨異性actl/actlll啟動子區(qū)的控制之下被表達(Fernandez-Moreno，M.A.等《生物化學雜志》vol.267，pp.19278-19290(1992))。質粒pRM5也含有來自編碼特異性激活蛋白Actll-orf4的放線菌紫素生物合成基因簇的DNA。Actll-orf4蛋白是置于actl/actll雙向啟動子控制之下的基因轉錄所需的，激活營養(yǎng)菌絲體內從生長期過渡到穩(wěn)定期期間的基因表達(Hallam，S.E.等《基因》vol.74，pp.305-320(1988))。
鏈霉菌屬中的II型簇已知是被途徑特異性激活基因所激活的(Narva，K.E.和Feitelson，J.S.《細菌學雜志》vol.172，pp.326-333(1990)；Stutzman-Engwall，K.J.等《細菌學雜志》vol.174，pp.144-154(1992)；Fernandez-Moreno，M.A.等《細胞》vol.66，pp.769-780(1991)；Takano，E.等《分子微生物學》vol.6，pp.2797-2804(1992)；Takano，E.等《分子微生物學》vol.7，pp.837-845(1992))。Dnrl基因產物補充S.coelicolor的actll-orf4基因突變，意味著Dnrl和Actll-orf4蛋白作用于相似的目標。EP0524832A2已經描述了這樣一種基因(srmR)，它位于大環(huán)內酯聚酮化合物螺旋霉素的I型PKS基因簇附近。該基因特異性地激活大環(huán)內酯抗生素螺旋霉素的產生，但是沒有發(fā)現這樣一種基因的其他實例。而且，沒有描述過作用于I型PKS基因的Actll-orf4/Dnrl/RedD族激活物同系物。
1998年1月15日公布的國際申請WO98/01571、1998年1月15日公布的國際申請WO98/01546、1999年7月15日公布的國際申請WO99/35156和1999年7月15日公布的國際申請WO99/35157描述了雜種PKS基因裝配體的構建和這些裝配體用于提供各種聚酮化合物的用途，這些聚酮化合物可用作本發(fā)明化合物的制備原料。例如，1998年1月15日公布的國際申請WO98/01546在一般意義上描述了包含載入模塊和至少一個伸展模塊的雜種PKS基因裝配體的產生。PKS基因模塊可以被視為用于構建所需類型酶系統(tǒng)的構件，因而是新穎的紅霉素產物。這一般涉及模塊的截斷與裝配和多模塊分組。形成和打斷模塊間連接的邏輯位置位于模塊之間的連接區(qū)。不過，也可以是優(yōu)選的是在結構域內(即酶編碼部分)接近其邊緣處進行實際的截斷和連接。這里，在所有模塊PKS中，DNA是非常守恒的，這有助于構建可以被轉錄的雜種體。這也可有助于維持被編碼酶的活性位點間距，這可能是很重要的。例如，1998年1月15日公布的國際申請WO98/01571描述了通過用avr載入模塊置換ery載入模塊來產生雜種基因，其中除去了ery模塊以及少量其后的KS結構域。KS結構域起始處(遠離活性位點)是非常守恒的，因此提供了適合的剪接位點，也可充當載入結構域與KS結構域起始處之間的連接區(qū)。然后用ayr載入模塊置換所切除的ery模塊。
事實上，當取代載入模塊時，可能需要不僅置換載入模塊結構域(一般是AT和ACP)，而且置換其后伸展模塊起始處的KS。通常，所切除的載入模塊本來將提供丙酸酯起始子，置換者打算提供一種或更多不同的起始子。不過，可以從宿主細胞內的丙酸酯庫向伸展模塊的KS供應丙酸酯，導致所需產物的稀釋。取代包括所有或大多數KS結構域的所伸展的載入模塊可以大大防止這一點。剪接位點可以位于KS基因的末端區(qū)域、其后AT基因的早期或它們之間的連接區(qū)。
可以構建不同類型的雜種PKS基因裝配體，以提供相應的各種新穎的聚酮化合物，可用作本發(fā)明的原料。例如，1998年1月15日公布的國際申請WO98/01546描述了含有廣泛特異性載入模塊的雜種PKS基因裝配體的構建(另見Marsden，A.F.A.等《科學》vol.279，pp.199-202(1998))。確切地說，1998年1月15日公布的國際申請WO98/01546描述了廣泛特異性avr載入模塊移植到DEBS的第一種多酶組分上，代替了正常的載入模塊。1998年1月15日公布的國際申請WO98/01571描述了可以利用這種雜種PKS基因裝配體制備的某些新穎的聚酮化合物。
1998年1月15日公布的專利申請WO98/01546進一步描述了雜種PKS基因裝配體的構建，即將雷怕霉素PKS的載入模塊移植到DEBS的第一種多酶組分上，代替了正常的載入模塊。雷怕霉素PKS的載入模塊不同于DEBS和阿凡曼菌素PKS的載入模塊之處在于它包含CoA連接酶結構域、烯酰基還原酶(ER)結構域和ACP。適合的包括天然起始單元3，4-二羥基環(huán)己烷羧酸的有機酸可以在PKS載入結構域上被就地激活，同時被轉移到ACP上的ER結構域還原或者不被其還原，用于伸展模塊1的KS的分子內載入。
1998年1月15日公布的國際申請WO98/01571教導了有可能測定天然載入模塊關于非天然起始單元的特異性，并且使用具有亞特異性的載入模塊生成新穎的聚酮化合物。因而，1998年1月15日公布的國際申請WO98/01571描述了ery載入模塊在僅含有DEBS基因的紅霉素產生性菌株內結合非天然羧酸及其衍生物以產生新穎紅霉素的意外能力。
人們還可以對聚酮化合物產物進行修飾，用提供具有不同氧化態(tài)和/或具有不同立體化學的酮化合物單元者置換伸展模塊。一般假定聚酮化合物鏈中的甲基的立體化學是由AT所決定的。事實上，該立體化學是其他PKS結構域的特征，因而僅對分別置換這些結構域或置換模塊這樣的修飾是開放的。通過AT結構域置換或全體模塊置換，可以加入或除去甲基和其他取代基。
有可能將伸展模塊置換工藝與載入模塊置換工藝結合，或者利用亞底物特異性ery載入模塊生產多種新穎的紅霉素。1998年1月15日公布的國際申請WO98/01571描述了在非轉化生物內利用這些工藝生產新穎的紅霉素。1998年1月15日公布的國際申請WO98/01571還描述了基因裝配體、含有這些基因裝配體的載體和能夠表達它們以生產新穎紅霉素的轉化生物。
2000年1月6日公布的國際申請WO00/00500教導了人們可以構建雜種PKS基因裝配體，即用編碼可取起始單元的基因置換編碼天然起始單元的遺傳材料。這種工藝可以用于制備具有所需起始單元的14-元大環(huán)內酯，同時減少含有不同起始單元的副產物的生成。確切地說，2000年1月6日公布的國際申請WO00/00500公開了合成新穎的、基本上唯一地具有乙酸酯起始單元的14-元聚酮化合物的方法，即提供結合有KSq-ATq-ACP形式的載入模塊的PKS多酶，該載入模塊特異性地提供所需的乙酸酯起始單元。這種方法可以包括提供編碼PKS多酶的核酸，再將其引入生物內，在那里它能夠被表達。另外，2000年1月6日公布的WO00/00618公開了其他方法，引用在此作為參考文獻。
在KSq-ATq-ACP型載入模塊中，結構域或其部分可以從相同或不同的來源衍生，并且可以包含天然的或經過工程學處理的結構域。例如，ATq結構域可以被從具有對丙二酸酯單元載入的特異性的I型PKS的任意伸展模塊衍生的AT結構域所置換，只要所選擇的KSq結構域具有對丙二酸酯單元的匹配特異性即可。特別適合該目的的是用于紅霉素、甲基霉素(methylmycin)、竹桃霉素、泰洛星、螺旋霉素、麥迪霉素和尼達霉素生物合成的PKS組分，所有這些的基因與模塊構成至少在部分程度上是已知的。特別適合的編碼KSq-ATq-ACP型載入模塊的基因來源是竹桃霉素、螺旋霉素、尼達霉素、甲基霉素和莫能星的載入模塊，它們對丙二酸酯單元的載入是特異性的，隨后脫羧為乙酸酯起始單元。
作為替代選擇，2000年1月6日公布的國際申請WO00/00500教導了KSq-ATq-ACP型載入模塊的KSq結構域可以被II型PKS的CLF多肽取代。除了任意其他可能具有的活性以外，CLF是KSq結構域的類似物，能夠充當所鍵合的丙二酸酯單元的脫羧酶。
KSq-ATq-ACP型載入模塊可以連接到所產生的雜種PKS上，例如1998年1月15日公布的國際申請WO98/01546和1998年1月15日公布的國際申請WO98/01571所述。特別有用的是將這樣一種載入模塊連接到編碼雜種PKS的基因裝配體上，產生新穎的14-元大環(huán)內酯衍生物。
例如1998年1月15日公布的國際申請WO98/01546所述，用作本發(fā)明原料的新穎聚酮化合物的產生也可以涉及轉化生物的使用，轉化生物能夠修飾最初的產物，例如攜帶所有或一些在紅霉素合成中常見的生物合成變體?？梢允褂猛蛔兩铮渲杏行┱５耐緩奖蛔钄嗔?，例如以產生沒有一個或更多“天然”羥基或糖基的產物。例如參見國際申請WO91/16334或Weber等《細菌學雜志》vol.164，pp.425-433(1985)，二者均全文引用在此作為參考文獻。作為替代選擇，可以使用其中有些正常途徑被過度表達的生物，以克服所需產物產生中潛在的限速步驟。例如參見國際申請WO97/06266，引用在此作為參考文獻。
1998年1月15日公布的國際申請WO98/01571、1998年1月15日公布的國際申請WO98/01546、1999年7月15日公布的國際申請WO99/35156、1999年7月15日公布的國際申請WO99/35157和2000年1月6日公布的國際申請WO00/00500描述了可借助前述方面獲得的各種新穎的紅霉素類似物。這些申請還描述了這些新穎聚酮化合物的制備方法。在最簡單的方法中，將非天然起始單元(優(yōu)選為但不限于非天然起始單元的羧酸類似物)引入到能夠產生紅霉素的未轉化生物內。優(yōu)選的方法涉及將起始單元引入到產紅霉素生物的發(fā)酵肉湯中。這種方法對能夠產生紅霉素的轉化生物來說是更有效的。作為替代選擇，可以將起始單元類似物引入未轉化或轉化的產紅霉素生物制劑中，例如分餾或未分餾的破碎細胞制劑。
在另一種方法中，可以使用一個或更多編碼異種I型PKS(“供體”PKS)內各模塊或結構域的DNA片段，分別置換產紅霉素生物中的編碼DEBS基因內各模塊或結構域的DNA。從天然或非天然PKS提取的載入模塊和伸展模塊適合于這種“供體”PKS。特別適合于該目的的是用于紅霉素、雷怕霉素、阿凡曼菌素、替取那新、竹桃霉素、莫能星、兩性霉素和利福霉素生物合成的I型PKS組分，根據基因序列分析，它們的基因與模塊構成至少在部分程度上是已知的。特別可取的供體PKS載入模塊實例是顯示亞特異性的載入模塊，例如產生阿凡曼菌素的Streptomyces avermitilis PKS載入模塊；具有異常特異性的載入模塊，例如產生雷怕霉素、FK506和子囊霉素的PKS載入模塊；它們都天然地接受莽草酸酯類起始單元；或優(yōu)先產生具有所需起始單元、例如乙酸酯的多肽的載入模塊，例如KSq-ATq-ACP型載入模塊。意外地是，當在適合的條件下培養(yǎng)時，發(fā)現未轉化的生物和經過遺傳工程處理的產紅霉素生物都產生非天然紅霉素，在適當情況下，發(fā)現產物經歷與天然紅霉素相同的加工過程。
另外一種方法要求將含有“供體”PKS DNA的質粒引入到宿主細胞內。宿主細胞可能僅庇護該質粒，或者該質?？赡苷系郊毎娜旧w組中。具有int序列的質粒將整合到宿主染色體的特異性連接位點(att)中。因而，1998年1月15日公布的國際申請WO98/01571描述了這樣一種質粒通過同源重組作用整合到產紅霉素菌株染色體上的DEBS基因中，創(chuàng)建雜種PKS。優(yōu)選的實施方式是，供體PKS DNA以這樣一種方式包括編碼載入模塊的片段，使該載入模塊與染色體上的DEBS基因連接。當在適合的條件下培養(yǎng)時，這樣一種雜種PKS產生有價值的和新穎的紅霉素產物，例如1998年1月15日公布的國際申請WO98/01571所述。為了舉例說明之，當DEBS載入模塊被avr載入模塊置換時，新穎的紅霉素產物含有通常為阿凡曼菌素PKS所用的起始單元。
1998年1月15日公布的國際申請WO98/01571描述了意外和驚人的發(fā)現，即當置于與II型PKS基因啟動子的特異性激活基因連接的該啟動子的控制之下時，可以特異性地和顯著地增加任意雜種紅霉素基因的轉錄。置于II型PKS啟動子和激活基因的控制之下的天然紅霉素PKS也見到這種有價值的紅霉素產物收率的增加。
在一種實施方式中，將存在于SCP2*-衍生質粒上的所需基因置于從S.coelicolor的放線菌紫素生物合成基因簇衍生的雙向actl啟動子的控制之下。在這種實施方式中，載體還含有編碼特異性激活蛋白Actll-orf4的結構基因。在所引入的PKS基因或已經存在于宿主菌株內的PKS基因在actl啟動子的控制之下表達的條件下，將重組質粒引入到S.erythraea中。這些菌株產生所需的紅霉素產物，激活基因僅要求特異性啟動子的存在，目的是增強從啟動子的轉錄效率。
與相同PKS基因在天然啟動子的控制之下相比，重組菌株能夠產生十倍以上水平的紅霉素產物。特異性紅霉素產物也在生長培養(yǎng)基中早熟產生，而不是僅在從生長期過渡到穩(wěn)定期期間。因而，當經過遺傳工程處理的細胞是S.erythraea時，激活物和啟動子是從放線紫菌素PKS基因簇衍生的，在低拷貝數質粒載體的位點特異性整合作用之后，actl/actll-orf4-調節(jié)的ery PKS基因簇被收藏在染色體內，與不在這種異種控制之下的可比菌株相比，在適合條件下培養(yǎng)細胞能夠產生十倍以上數量的14-元大環(huán)內酯產物。當在這樣一種經過遺傳工程處理的細胞內時，在這種異種控制之下的PKS基因是雜種I型PKS基因，其構建是如本文所述的，與不在這種控制之下的相同雜種I型PKS基因相比，能夠獲得十倍以上的聚酮化合物產物。具體來說，當雜種I型PKS基因簇是DEBS時，其中ery載入模塊已經被avr載入模塊置換，經過遺傳工程處理的細胞在適合的條件下培養(yǎng)后，所產生的新穎的14-元大環(huán)內酯總量增加十倍，如1998年1月15日公布的國際申請WO98/01571所述。
1998年1月15日公布的國際申請WO98/01571例如更充分地描述了適合于生長未轉化的和經過遺傳工程處理的產紅霉素細胞的優(yōu)選手段和適合于分離、鑒別與應用新穎紅霉素的優(yōu)選手段。
可用于上述方法并且能夠產生紅霉素的未轉化或轉化的生物包括但不限于Saccharopolyspora種、Streptomyces griseoplanus、諾卡氏菌屬、小單孢子菌屬、Arthobacter sp.和抗生素螺旋霉素，但是排除S.coelicolor。在這點上特別適合的是未轉化與轉化的S.erythraea菌株，例如NRRL2338、18643、21484。優(yōu)選的轉化菌株是其中紅霉素載入模塊已經被來自產生阿凡曼菌素的S.avermitilis或產生雷怕霉素的吸濕性鏈霉菌的載入模塊所置換的那些。
優(yōu)選用于生產本發(fā)明起始化合物的方法要求在式R17CO2H的適當羧酸的存在下，進行適當生物的發(fā)酵，其中R17是如權利要求1所定義的。在接種時或者在發(fā)酵期間按一定時間間隔，將羧酸加入到發(fā)酵物中。可用于本發(fā)明化合物制備的聚酮化合物的產生可以這樣監(jiān)測，從發(fā)酵物中取樣，用有機溶劑提取，用色譜法檢查起始化合物的外觀，例如高效液相色譜法。繼續(xù)培養(yǎng)，直到起始化合物的收率已經最大化時為止，一般為4至10天。每次加入羧酸或其衍生物的優(yōu)選水平在0.05與4.0g/L之間。一般通過向發(fā)酵物中逐漸加入酸或衍生物而獲得起始化合物的最佳收率，例如每日加入，歷經若干天。發(fā)酵用培養(yǎng)基可以是常規(guī)的復合培養(yǎng)基，其中含有可同化的碳源、氮源和痕量元素。
應當認為，1998年1月15日公布的國際申請WO98/01571、1998年1月15日公布的國際申請WO98/01546、1999年7月15日公布的國際申請WO99/35156、1999年7月15日公布的國際申請WO99/35157和2000年1月6日公布的國際申請WO00/00500中所描述的用于制備原料的方法并不限于這些申請實施例的具體細節(jié)。
下列流程1至20闡述本發(fā)明化合物的制備。
流程1流程1描述其中X是-C(＝N-OR8)-或-CH(NR8R9)-的式1化合物的通用合成。利用本領域技術人員已知的常規(guī)方法，通過各種合成途徑可以從13-甲基紅霉素A制備式2起始化合物。在一種堿的存在下，例如三乙胺或吡啶，將式2化合物用R8O·NH2HCl處理，可以得到式3化合物。將其中R8是H的式3化合物用一種還原劑還原或者通過催化氫化作用還原，可以提供式4胺，后者經由還原性烷基化作用或直接的烷基化作用可以轉化為式5化合物。
流程1
流程2流程2描述其中X是NR9CHR8-的式1化合物的合成。按照流程1可以制備式6起始化合物。如Yamamoto等所述，借助貝克曼重排作用，式6化合物可以經由式7化合物轉化為式8化合物(參見B.M.Trost《綜合有機轉化》vol.4，pp.763-794(以下稱“Trost”)；Yamamoto等《美國化學會志》p.7368(1981)(以下稱“Yamamoto 1981”))。按照基本上與Yamamoto等《四面體快報》vol.24，p.4711(1983)(以下稱“Yamamoto 1983”)所述相同的操作，可以制備其中R8是氫的式8化合物。式8化合物可以經歷還原性烷基化作用或直接的烷基化作用，得到式9化合物。
流程2
流程3流程3描述其中X是-CHR8NR9-的式1化合物的合成。式10起始化合物可以按照流程1制備，或者經由堿誘發(fā)的差向異構化作用從式6肟制備(參見R.R.Wilkening等《生物有機與醫(yī)藥化學快報》vol.3，pp.1287-1292(1993)(以下稱“Wilkening”))。如Yamamoto等所述，借助貝克曼重排作用，式10化合物可以經由式11化合物轉化為式12化合物(參見Trost，pp.763-794；Yamamoto 1981，p.7368)。按照基本上與Yamamoto 1983，p.4711所述相同的操作可以制備其中R8是氫的式12化合物。式12化合物可以經歷還原性烷基化作用或直接的烷基化作用，得到式13化合物。
流程3 流程4流程4描述其中X是-NR9CH2-的式1化合物的合成。按照流程1，可以從13-甲基紅霉素A制備式14起始化合物。按照基本上與S.Djokic等《英國化學會志柏爾金匯刊I》pp.1881-1890(1986)和M.Bright等《抗生素雜志》vol.41，p.1029(1998)所述相同的操作，可以進行式14化合物向式17化合物的轉化。經由貝克曼重排作用可以從式14化合物得到式15化合物。式15化合物的還原作用可以得到式16化合物，后者可以經歷還原性烷基化作用或直接的烷基化作用，得到式17化合物。利用本領域技術人員已知的常規(guī)方法，通過各種合成途徑可以從式17化合物制備式18化合物。
流程5流程5描述其中X是-NR9CH2-的式1化合物的另一種合成。按照下述流程8，可以從13-甲基紅霉素A制備其中R10不是氫的式19起始化合物。按照基本上與A.Dennis等《生物有機與醫(yī)藥化學快報》pp.2427-2432(1998)和S.T.Waddell等《生物有機與醫(yī)藥化學快報》pp.1321-1326(1998)所述相同的操作，可以實現式19化合物向式22化合物的轉化。式19化合物可以經歷貝克曼重排作用，得到式20化合物，后者可以還原得到式21化合物。還原性烷基化作用或直接的烷基化作用可以生成式22化合物。利用本領域技術人員已知的常規(guī)方法，通過各種合成途徑可以從式22化合物制備式18化合物。
流程6流程6描述其中X是-CH2NR9-的式1化合物的合成。按照流程1，式23起始化合物可以從13-甲基紅霉素A制備，或者通過堿引發(fā)的式14肟的差向異構化作用加以制備(參見Wilkening，pp.1287-1292)。按照基本上與Wilkening，pp.1287-1292所述相同的操作，可以完成式23化合物向式27化合物的轉化。式23化合物的貝克曼重排作用可以得到式24與25化合物的混合物，二者都可以通過催化氫化作用或者用一種還原劑還原得到式26化合物。式26化合物的還原性烷基化作用或直接的烷基化作用得到式27化合物，利用本領域技術人員已知的常規(guī)方法，通過各種合成途徑可以轉化為式28化合物。
流程7流程7描述其中X是-CH2NR9-的式1化合物的另一種合成。按照下述流程8，或者通過堿引發(fā)的其中R10不是氫的式19肟的差向異構化作用，可以從13-甲基紅霉素A制備其中R10不是氫的式29起始化合物(參見Wilkening，pp.1287-1292)。按照基本上與Wilkening，pp.1287-1292所述相同的操作，可以完成式29化合物向式33化合物的轉化。式29化合物的貝克曼重排作用可以得到式30與31化合物的混合物，二者都可以通過催化氫化作用或者用一種還原劑還原得到式32化合物。式32化合物的還原性烷基化作用或直接的烷基化作用得到式33化合物，利用本領域技術人員已知的常規(guī)方法，通過各種合成途徑可以轉化為式28化合物。
流程7
流程8流程8概括式1化合物的合成。按照流程1，可以從13-甲基紅霉素A制備起始化合物，即式14肟。按照基本上與Y.Watanabe等《抗生素雜志》pp.1163-1167(1993)所報道相同的操作，可以完成式14化合物向式37化合物的轉化。利用T.W.Greene和P.G.M.Wuts《有機合成中的保護基團》第2版，John Wiley & Sons，pp.10-142(1992)(以下稱“Greene和Wuts”)所總結的方法，可以保護式14化合物的9-肟羥基、2’羥基和4”羥基，得到其中P1、P2和P3代表相同或不同保護基團的式34化合物。優(yōu)選的保護基團是甲硅烷基醚、例如三甲基甲硅烷基醚，或酯、例如乙酸酯或苯甲酸酯。式34化合物6-羥基的烷基化作用可以生成式35化合物，按照Greene和Wuts，pp.10-142所總結的方法，借助去保護作用可以轉化為式36化合物。式36化合物的去肟化作用可以得到式37化合物。利用本領域技術人員已知的常規(guī)方法，通過各種合成途徑可以從式37化合物制備式1化合物。
流程8
流程9流程9描述其中Y是CH(O-4”-O-?；死ㄌ?的式1化合物的合成，如式39所示。通過本領域技術人員已知的各種方法，可以從13-甲基紅霉素A制備式38起始化合物。利用本領域技術人員已知的常規(guī)方法，可以進行式38化合物的?；饔?，得到式39化合物。酰化反應可能需要保護其他羥基。這可以通過保護為甲硅烷基醚、酯、混合的碳酸酯或本領域技術人員熟知的任意各種羥基保護基團來完成。
流程9
流程10流程10描述其中Y是CH(O-4”-O-酰化克拉定糖)的式1化合物的另一種合成，如式41和42所示。通過本領域技術人員已知的各種方法，可以從13-甲基紅霉素A制備式38起始化合物。利用本領域技術人員已知的常規(guī)方法，可以進行式38化合物的?；饔?，得到式40化合物，其中L代表離去基團，例如甲磺?；?、甲苯磺酰基或鹵素。酰化反應可能需要保護其他羥基。這可以通過保護為甲硅烷基醚、酯、混合的碳酸酯或本領域技術人員熟知的任意各種羥基保護基團來完成。利用本領域技術人員熟知的方法，式40化合物可以經歷親核取代，得到式41和42化合物。
流程10
流程11流程11描述其中Y是CH(O-4”-O-氨基甲酸酯化克拉定糖)的式1化合物的合成，如式44、45和46所示。通過本領域技術人員已知的各種方法，可以從13-甲基紅霉素A制備式38起始化合物。將式38化合物用羰基二咪唑和一種堿處理，可以得到式43化合物。該反應可能需要保護其他羥基。這可以通過保護為甲硅烷基醚、酯、混合的碳酸酯或本領域技術人員熟知的任意各種羥基保護基團來完成。利用本領域技術人員熟知的方法，式43化合物可以轉化為式44和45化合物。式45化合物的還原性烷基化作用或直接的烷基化作用可以得到式46化合物。
流程11
流程12流程12描述其中Y是CH(4”-取代的-3”-去甲氧基克拉定糖)的式1化合物的合成，如式49所示。通過本領域技術人員已知的各種方法，可以從13-甲基紅霉素A制備式38起始化合物。利用本領域技術人員熟知的方法，式38化合物的氧化作用可以得到式47化合物(參見Yang等《有機化學雜志》vol.61，pp.5149-5152(1996)(以下稱“Yang”))。該氧化反應可能需要保護其他羥基。這可以通過保護為甲硅烷基醚、酯、混合的碳酸酯或本領域技術人員熟知的任意各種羥基保護基團來完成。按照基本上與Yang，pp.5149-5152所述相同的操作，可以除去3”甲氧基，得到式48化合物。利用本領域技術人員熟知的方法，式48化合物可以轉化為其中R12和R13是如前文所定義的式49化合物。
流程12
流程13流程13描述其中Y是CH(4”-取代的克拉定糖)的式1化合物的合成，如式54和55所示。式47起始化合物可從流程12獲得。利用本領域技術人員熟知的方法，式47化合物可以轉化為式52化合物。將式47化合物用硫內鎓鹽類(sulfur ylides)二甲氧基.亞甲基硫和二甲基.亞甲基硫處理，可以生成式50環(huán)氧化物，見J.March《有機化學進展》第4版，John Wiley and Sons，pp.974-975(1992)。經由與疊氮化物試劑、例如疊氮化鈉的環(huán)氧化物打開反應，式51化合物可以轉化為式53化合物。式51化合物的還原作用可以得到式53化合物，利用本領域技術人員熟知的方法，可以轉化為式54和55化合物。
流程13
流程14流程14描述其中Y是CH(4”-取代的克拉定糖)的式1化合物的另一種合成，如式57和58所示。式50起始化合物可從流程13獲得。通過與NH2(CH2)nNH2的環(huán)氧化物打開反應，式50化合物可以轉化為式56化合物，其中n是從0至10的整數。利用本領域技術人員熟知的方法，式56化合物的還原性烷基化作用或直接的烷基化作用可以得到式57化合物。利用本領域技術人員熟知的方法，經由與NH2(CH2)nC(O)NR8R9的環(huán)氧化物打開反應，式50化合物可以轉化為式58化合物。
流程14
流程15流程15概括其中R1和R2一起構成環(huán)狀氨基甲酸酯或肼基甲酸酯的式1化合物的合成，如式65所示，和其中Rf是H或-C(O)-咪唑基且R3是OR10的式1A化合物的合成，分別如式62和63所示。按照流程8，可以從13-甲基紅霉素A制備式37起始化合物。按照基本上如WO99/35157所述相同的操作，可以實現式37化合物向式64化合物的轉化。利用Greene和Wuts，pp.10-142所總結的方法，可以保護式37化合物的2’羥基和4”羥基，得到其中P1和P2代表相同或不同保護基團的式59化合物。優(yōu)選的保護基團是甲硅烷基醚、例如三甲基甲硅烷基醚，或酯、例如乙酸酯或苯甲酸酯。利用各種方法，包括DBU與羰基二咪唑或三氯乙酰異氰酸酯，可以完成式59化合物的11，12-環(huán)狀碳化作用，得到式60化合物。利用本領域技術人員已知的常規(guī)方法，式60化合物通過各種合成途徑可以轉化為式61化合物。在一種堿的存在下，例如DBU或三乙胺，式61化合物可以經歷β-消去作用。式62化合物與羰基二咪唑和一種堿反應，例如DBU或金屬氫化物，可以得到式63化合物。通過用一種堿和羰基二咪唑處理，式61化合物可以直接轉化為式63化合物。按照基本上與Agouridas等《醫(yī)藥化學雜志》vol.41，pp.4080-4100(1998)(以下稱“Agouridas”)、W.W.Baker等《有機化學雜志》pp.2340-2345(1988)或G.Griesgraber等《抗生素雜志》vol.49，pp.465-77(1996)所述相同的操作，式63化合物與R6B1NH2的加成作用可以得到式64化合物，其中R6和B1是如前文所定義的。利用本領域技術人員已知的常規(guī)方法可以除去式64化合物的2’羥基保護基團。進一步對式64化合物2’羥基進行常規(guī)的化學處理，可以得到式65化合物。
流程15
流程16流程16概括其中R1和R2與X一起構成另外兩個環(huán)的式1化合物的合成，如式66所示。式63起始化合物可從流程15獲得。式63化合物與NH2C(D)(E)C(F)(G)NH2反應，其中D、E、F和G是如前文所定義的，繼之以2’上P1的去保護作用，隨后對2’羥基進行常規(guī)的化學處理，可以得到式66化合物。
流程16
流程17流程17概括其中R1和R2與X一起構成另外兩個環(huán)的式1化合物的合成，如式72所示。按照流程15可以制備式67起始化合物。利用本領域技術人員熟知的常規(guī)方法可以進行式68化合物的肟化作用。利用一種還原劑、例如TiCl3，繼之以NaBH3CN，或者通過催化氫化作用，可以實現其中R8是氫的式68化合物向式69化合物的轉化。在一種酸的存在下，例如甲酸或乙酸，式69化合物與C(D)(E)(O)反應，其中D和E是如前文所定義的，可以生成式70化合物，后者可以經歷還原性烷基化作用或直接的烷基化作用，得到式71化合物。利用1999年5月6日公布的WO99/21865所述操作，將式71化合物用一種堿、繼之以一種鹵化劑或一種適當的親電子試劑處理，可以生成式72化合物。適合的堿實例包括氫化鈉、氫化鉀、DBU、二異丙氨基化鋰或鈉或鉀或者氫氧化鉀或鈉。適合的鹵化劑實例包括1-(氯甲基)-4-氟-1，4-重氮二環(huán)(2.2.2)辛烷雙(四氟硼酸酯)和(ArSO2)2N-鹵素，其中Ar是C6-C10芳基。
流程17
流程18流程18概括其中R1和R2與X一起構成另外兩個環(huán)的式1化合物的合成，如式75、77和78所示。按照流程17可以制備式73起始化合物。將式73化合物用甲苯磺酰氯或甲磺酰氯和一種堿處理，例如三乙胺、吡啶或DBU，可以得到式74化合物。將式74化合物用一種堿、繼之以一種鹵化劑或一種適當的親電子試劑處理，可以生成式75化合物。適合的堿實例包括氫化鈉、氫化鉀、DBU、二異丙氨基化鋰或鈉或鉀或者氫氧化鉀或鈉。適合的鹵化劑實例包括1-(氯甲基)-4-氟-1，4-重氮二環(huán)(2.2.2)辛烷雙(四氟硼酸酯)和(ArSO2)2N-鹵素，其中Ar是C6-C10芳基。在一種酸的存在下，例如甲酸或乙酸，式73化合物與C(D)(E)(O)反應，其中D和E是如前文所定義的，可以得到式76化合物。按照類似于式74化合物轉化為式75化合物的方式，式76化合物可以轉化為式77化合物。按照基本上與WO99/21865所述相同的操作，利用一種還原劑、例如三苯膦，或者通過催化氫化作用，可以進行式77化合物向式78化合物的還原作用。
流程18
流程19流程19概括其中R1和R2一起構成環(huán)脲的式1化合物的合成，如式86所示。按照流程15可以從13-甲基紅霉素A制備式60起始化合物。通過一種酸的處理，例如鹽酸或硫酸，可以除去式60化合物的克拉定糖部分，得到式79化合物。利用本領域技術人員熟知的各種常規(guī)方法，例如Agouridas，pp.4080-4100所述的改進的Pfitzner-Moffat操作，可以完成式79化合物的氧化作用，得到式80化合物。式80化合物與一種堿反應，例如三乙胺或DBU，可以促進β-消去，生成式81醇。通過用羰基二咪唑和一種堿處理，例如三乙胺或DBU，式81化合物可以轉化為式82化合物。通過式80化合物與羰基二咪唑和一種堿的反應，例如DBU和三乙胺，式80化合物可以直接轉化為式82化合物。在一種路易斯酸的存在下，例如Me3Al或Me2AlCl，將式82化合物用一種疊氮化物試劑處理，例如TMS-N3，可以進行縮醛打開反應，得到式83疊氮化物。用一種還原劑、例如三苯膦或者通過催化氫化作用還原，可以實現式83化合物向式84化合物的轉化。式84化合物與一種堿、例如金屬氫化物或DBU和羰基二咪唑反應，繼之與R6B1NH2反應，其中R6和B1是如前文所定義的，可以得到式85的11，12-環(huán)脲。利用Greene和Wuts，pp.10-142所總結的方法，可以除去2’保護基團。隨后對2’羥基進行常規(guī)的化學處理，可以得到式86化合物。
流程19
流程20流程20概括其中R3和Y一起構成環(huán)狀縮酮的式1化合物的合成，如式88所示。利用本領域技術人員熟知的方法，可以從13-甲基紅霉素A制備式38起始化合物。通過用一種酸處理，例如鹽酸或硫酸，可以除去式38化合物的克拉定糖部分，得到式87化合物。在一種酸的存在下，通過與R14R15C(O)反應，其中R14和R15是如前文所定義的，可以從式87化合物生成式88縮酮。優(yōu)選的酸是對-甲苯磺酸。
流程20
本發(fā)明化合物可以具有不對稱的碳原子。通過本領域技術人員已知的方法，例如色譜法或分步結晶法，根據它們的物理化學差異，這些非對映體混合物可以分離為它們各自的非對映體。通過與適當的旋光活性化合物(例如醇)的反應將對映體混合物轉化為非對映體混合物，分離非對映體，將各非對映體轉化(例如水解)為相應的純對映體，可以分離對映體。所有這些異構體，包括對映體混合物、非對映體混合物、純的非對映體和純的對映體都視為本發(fā)明的一部分。
堿性的式1和1A化合物能夠與各種無機和有機酸生成多種不同的鹽。盡管這些鹽在藥學上必須是對動物(包括動物、魚和鳥類)給藥可接受的，不過在實踐中經常需要最初從反應混合物中分離式1或1A化合物的藥學上不可接受的鹽，然后通過堿性試劑的處理，簡單地將后者轉化為游離的堿化合物，隨后將后者游離堿轉化為藥學上可接受的酸加成鹽。本發(fā)明堿化合物的酸加成鹽是易于制備的，方法是在一種含水溶劑介質或適合的有機溶劑中，例如甲醇或乙醇，將該堿化合物用基本上為當量的選定無機或有機酸處理。小心地蒸發(fā)溶劑，易于獲得所需的固體鹽。所需的酸鹽也可以從游離堿在有機溶劑中的溶液中沉淀出來，方法是向該溶液中加入適當的無機或有機酸。
酸性的式1和1A化合物能夠與各種藥學上可接受的陽離子生成堿鹽。這些鹽的例子包括堿金屬或堿土金屬的鹽，確切地是鈉鹽和鉀鹽。這些鹽可以通過常規(guī)工藝制備。作為試劑用于制備本發(fā)明的藥學上可接受的堿鹽的化學堿是與式1和1A酸性化合物生成無毒堿鹽的那些。這些無毒堿鹽包括從藥學上可接受的陽離子衍生的那些，例如鈉、鉀、鈣和鎂等。這些鹽能夠這樣制備，優(yōu)選地在減壓條件下，將相應的酸性化合物用含有所需藥學上可接受的陽離子的水溶液處理，然后蒸發(fā)所得溶液至干。作為替代選擇，它們也可以這樣制備，將酸性化合物的低級鏈烷醇溶液與所需堿金屬醇化物一起混合，然后按前述相同方式蒸發(fā)所得溶液至干。在兩者情況下，優(yōu)選地采用化學計算量的試劑，目的是確保反應完全，和所需終產物的收率最高。
式1和1A化合物及其藥學上可接受的鹽、前體藥物和溶劑化物(以下統(tǒng)稱為“本發(fā)明的活性化合物”)可以單獨或者與藥學上可接受的載體結合分單次或多次給藥。藥學上可接受的載體一般將根據預期給藥途徑和標準藥學實踐加以選擇。
本發(fā)明的藥物組合物包含任意本發(fā)明的化合物及其藥學上可接受的鹽、前體藥物和溶劑化物以及任意藥學上可接受的載體。適合的藥物載體包括但不限于惰性固體稀釋劑或填充劑、無菌水溶液和各種有機溶劑。適合的藥學上可接受的載體實例包括離子交換劑、礬土、硬脂酸鋁、卵磷脂、半乳化藥物釋放系統(tǒng)(SEDDS)、用在藥物劑型中的表面活性劑(例如吐溫類)或其他類似的聚合釋放基質、血清蛋白(例如人血清白蛋白)、聚乙二醇聚合物(例如PEG-400)、緩沖物質(例如磷酸鹽)、甘氨酸、山梨酸、山梨酸鉀、飽和植物脂肪酸的偏甘油酯、水、鹽或電解質(例如硫酸魚精蛋白、磷酸氫二鈉、磷酸氫鉀、氯化鈉、鋅鹽)、膠體二氧化硅、三硅酸鎂、聚乙烯吡咯烷酮、纖維素類物質、羧甲基纖維素鈉、聚丙烯酸酯、蠟、聚乙烯-聚丙烯嵌段聚合物和羊毛脂。
利用本發(fā)明的活性化合物所形成的藥物組合物可以通過口服、腸胃外、吸入噴霧、局部、直腸、鼻、頰、陰道或經由植入藥庫給藥。本發(fā)明的藥物組合物可以含有任意常規(guī)無毒的藥學上可接受的載體。在有些情況下，可以用藥學上可接受的酸、堿或緩沖劑調節(jié)制劑的pH，以增強所配制的化合物或其釋放劑型的穩(wěn)定性。本文所用的術語“腸胃外”包括皮下、皮內、靜脈內、肌內、關節(jié)內、腹膜內、滑膜腔內、胸骨內、鞘內、損傷部位內和顱內注射或輸注工藝。
關于腸胃外給藥，本發(fā)明的藥物組合物可以是溶液的形式，其中含有芝麻油或花生油、含水丙二醇或無菌水溶液。如果必要的話，水溶液應當被適當緩沖，并且首先用足夠的鹽水或葡萄糖賦予液體稀釋劑以等滲性。這些特定的水溶液尤其適合于靜脈內、肌內、皮下和腹膜內給藥。通過本領域技術人員已知的標準工藝，易于獲得所有所用無菌含水介質。
本發(fā)明的藥物組合物可以是無菌注射劑的形式，例如無菌可注射的水懸液或油懸液。使用適合的分散劑或濕潤劑(例如吐溫80)和懸浮劑，可以按照本領域已知的工藝配制這種懸液。無菌注射劑也可以是在無毒的腸胃外可接受的稀釋劑或溶劑中的、無菌可注射的溶液或懸液，例如在1，3-丁二醇中的溶液?？梢圆捎玫目山邮艿馁x形劑和溶劑是甘露糖醇、水、林格氏溶液和等滲的氯化鈉溶液。另外，無菌的不揮發(fā)油也常用作溶劑或懸浮介質。為此，可以采用任意溫和的不揮發(fā)油，包括合成的單或二甘油酯。脂肪酸、例如油酸及其甘油酯衍生物可用于注射劑的制備，它們是天然的藥學上可接受的油，例如橄欖油或蓖麻油，尤其是它們的聚氧乙基化變型。這些油溶液或懸液還可以含有一種長鏈醇稀釋劑或分散劑，例如羧甲基纖維素，或類似的分散劑，常用于藥學上可接受的劑型的配制，例如乳劑和/或懸液。出于制劑的目的，還可以使用其他常用的表面活性劑、例如吐溫類和司盤類，和/或其他類似的乳化劑或生物利用度提高劑，它們常用于藥學上可接受的固體、液體或其他劑型的制備。
本發(fā)明的藥物組合物在口服給藥時可以采取任意口服可接受的劑型，包括但不限于硬或軟膠囊劑、片劑、粉劑、錠劑、乳劑與水懸液、分散系和溶液。在口用片劑的情況下，常用的載體包括乳糖和玉米淀粉?？梢圆捎酶鞣N賦形劑，例如檸檬酸鈉、碳酸鈣和磷酸鈣，以及崩解劑，例如淀粉、甲基纖維素、藻酸和某些復合硅酸鹽，以及粘合劑，例如聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖、明膠和阿拉伯膠。通常還加入潤滑劑，例如硬脂酸鎂、月桂基硫酸鈉和滑石。還可以采用相似類型的固體組合物作為口服軟膠囊與硬膠囊劑的填充劑?？诜z囊劑優(yōu)選的稀釋劑包括乳糖或奶糖和大分子聚乙二醇。當水懸液和/或乳劑口服給藥時，將活性成分與乳化劑和/或懸浮劑和/或稀釋劑結合，例如水、乙醇、丙二醇、甘油及其組合。如果需要的話，可以加入某些甜味劑和/或矯味劑和/或著色劑。
本發(fā)明的藥物組合物還可以在給藥時采取用于直腸給藥的栓劑。這些組合物可以這樣制備，將本發(fā)明化合物與適合的非刺激性賦形劑混合，后者在室溫下為固體，在直腸溫度下為液體。賦形劑因此將在直腸內熔化，釋放活性組分。這樣的材料包括但不限于可可脂、蜂蠟和聚乙二醇。
當所需治療涉及局部用藥易于接近的部位或器官時，本發(fā)明的藥物組合物的局部給藥是尤其有用的。關于對皮膚局部用藥，藥物組合物應當用適合的軟膏劑配制，其中含有懸浮或溶解在載體中的活性組分。用于本發(fā)明化合物局部給藥的載體包括但不限于礦物油、煤油、白石油、丙二醇、聚氧乙烯聚氧丙烯化合物、乳化蠟和水。作為替代選擇，藥物組合物可以用適合的洗劑或霜劑配制，其中含有懸浮或溶解在載體中的活性化合物。適合的載體包括但不限于礦物油、失水山梨糖醇單硬脂酸酯、多乙氧基醚60、鯨蠟酯蠟、鯨蠟硬脂醇、2-辛基十二烷醇、苯甲醇和水。本發(fā)明的藥物組合物還可以通過直腸栓劑或適合的灌腸劑局部用于下腸道。本發(fā)明還包括局部透皮貼劑。
本發(fā)明的藥物組合物可以通過鼻氣霧劑或吸入法給藥。這樣的組合物按照藥物制劑領域熟知的工藝加以制備，可以制備成鹽水溶液，并采用苯甲醇或其他適合的防腐劑、提高生物利用度的吸收促進劑、碳氟化合物和/或其他本領域已知的增溶劑或分散劑。
為了實施本發(fā)明的方法，將有效劑量的本發(fā)明活性化合物通過腸胃外、口服、鼻、頰、陰道或直腸途徑對可疑的或被感染的動物(包括哺乳動物、魚和鳥類)給藥，或者局部外用于皮膚和/或粘膜。給藥途徑將取決于所治療的哺乳動物、魚或鳥。
每日劑量通常將從約0.25至約150mg/kg所治療的患者體重，優(yōu)選地從約0.25至約25mg/kg。通常，本發(fā)明的化合物和組合物每天將給藥約＿至約＿次，或者作為替代選擇，采取連續(xù)輸注。這樣的給藥可以用作慢性或急性療法?？梢耘c載體材料結合得到單一劑型的活性成分的量將因所治療的宿主和特定的給藥方式而異。
正如技術人員將領會到的，可能要求比上述更低或更高的劑量。關于任意特定患者的具體劑量和治療方案將取決于多種因素，包括疾病的嚴重性、所用具體化合物的活性、患者的年齡、體重、一般健康狀況、性別與飲食、給藥時間、藥物的排泄速率、是否采用藥物組合、病癥的嚴重性與病程、患者對病癥的素因和主治醫(yī)師的判斷。
本發(fā)明化合物可以作為單一藥物或者與其他藥物結合對患者給藥。本發(fā)明化合物可以與其他本發(fā)明化合物或其他抗細菌劑或抗原生動物劑共同給藥，以提高療效。根據本發(fā)明的聯合療法可以發(fā)揮附加的或協(xié)同的抗細菌或抗原生動物作用，例如因為組合中的每種組分可以作用于不同的部位或者借助不同的機理。與該藥物作為單一療法給藥相比，這些聯合療法的使用還可以有利地減少為達到所需治療效果所要求的給定常規(guī)抗生素的劑量。這樣的組合可以減少或消除常規(guī)抗生素療法的副作用，同時不會干擾藥物的抗生活性。這些組合減少耐受單一藥物療法的可能性，同時使任意有關的毒性最小化。作為替代選擇，根據本發(fā)明的藥物組合物可以包含本發(fā)明化合物與另一種具有不同治療或預防作用的藥物的組合。
當本發(fā)明化合物與其他藥物聯合給藥時，它們可以先后或同時對患者給藥。另外的藥物可以獨立于本發(fā)明化合物給藥，作為多次給藥方案的一部分。作為替代選擇，這些藥物可以是單一劑型的一部分，與本發(fā)明化合物混合在單一的組合物中。根據本發(fā)明的藥物組合物可以包含根據本發(fā)明的抗細菌劑或抗原生動物劑與一種或更多治療劑的組合。
可以按各種方式試驗每種本發(fā)明化合物的活性。例如，每種本發(fā)明化合物對抗細菌和原生動物病原體的活性通過每種化合物抑制所定義的人病原體(測定I)或動物病原體(測定II和III)菌株生長的能力加以證明。
測定I下述測定I采用常規(guī)方法和解釋條件。本測定法經過設計，可鑒別化學修飾，這些化學修飾可以生成規(guī)避明確的大環(huán)內酯耐藥性機理的化合物。測定I采用一組細菌菌株，包括各種目標病原體品種，其中包括了已被鑒定的大環(huán)內酯耐藥性機理的代表。這組菌株的使用證明了化合物的化學結構與其活性之間關于效力、活性譜和結構元素或對排除耐藥性機理可能是必要的修飾的關系。包括在篩選組內的細菌病原體列在下表中。在多數情況下，大環(huán)內酯易感性親代菌株和從其衍生的大環(huán)內酯耐受性菌株都是可以利用的，以更加準確地評價關于化合物規(guī)避耐藥性機理的能力。
含有名為ermA/ermB/ermC的基因的菌株耐受大環(huán)內酯、lincosamides和鏈陽性菌素B抗生素。這種耐藥性是由于Erm甲基化酶對23S rRNA分子的修飾(甲基化)，從而一般防止了全部三種結構類型的結合。已經描述了兩種類型的大環(huán)內酯流出物msrA編碼葡萄球菌流出物系統(tǒng)中防止大環(huán)內酯和鏈陽性菌素進入的組分，而mefA/E編碼似乎僅流出大環(huán)內酯的跨膜蛋白。可能發(fā)生大環(huán)內酯抗生素的失活，并且2’-羥基的磷酸化作用(mph)或大環(huán)內酯的裂解作用(酯酶)都能夠介導這種失活作用。利用常規(guī)的聚合酶鏈反應(PCR)技術和/或通過耐藥性決定子測序，可以對菌株進行鑒定。PCR技術在本申請中的應用參見J.Sutcliffe等“PCR對紅霉素耐藥性決定子的檢測”《抗微生物劑與化學療法》Vol.40，No.11，pp.2562-2566(1996)。
先將供試化合物溶于二甲基亞砜(DMSO)，得到40mg/ml儲備溶液?？辜毦鷾y定是在微量滴定盤中進行的，解釋參照PerformanceStandards for Antimicrobial Disk Susceptibility Tests-Sixth Edition；Approved Standard，由國家臨床實驗室標準委員會(NCCLS)指導小組出版；比較對菌株的最低抑菌濃度(MIC)。術語“acr AB”和“acr AB-樣”表示菌株內存在固有的多藥流出泵。
測定II用于試驗對抗出血敗血性巴斯德氏菌的活性。
測定II這項測定是基于微升級液體稀釋法的。將出血敗血性巴斯德氏菌(59A067菌株)的單一菌落接種在5ml腦心浸劑(BHI)肉湯中。供試化合物是這樣預備的，將1mg化合物溶于125μl二甲基亞砜(DMSO)。利用未接種的BHI肉湯制備供試化合物的稀釋液。所用供試化合物的濃度范圍從200μg/ml至0.098μg/ml，通過兩倍連續(xù)稀釋而得。經過出血敗血性巴斯德氏菌接種的BHI用未接種的BHI肉湯稀釋，得到104個細胞懸液/200μl。將BHI細胞懸液與供試化合物的各種系列稀釋液混合，在37℃下培養(yǎng)18小時。
最低抑菌濃度(MIC)等于化合物對出血敗血性巴斯德氏菌的生長表現100％抑制作用時的濃度，這是通過與未接種的對照進行比較而測定的。
測定III用于試驗對抗溶血性巴斯德氏菌的活性。
測定III這項測定基于利用Steers復制基因所進行的瓊脂稀釋法。從瓊脂板上分離二至五個菌落，接種在BHI中，在37℃下培養(yǎng)過夜，同時搖動之(200rpm)。第二天早上，將300μl充分生長的溶血性巴斯德氏菌預培養(yǎng)物接種在3ml新鮮的BHI肉湯中，在37℃下培養(yǎng)，同時搖動之(200rpm)。將適量供試化合物溶于乙醇，制備一系列的兩倍系列稀釋液。將2ml各種系列稀釋液與18ml熔化的BHI瓊脂混合，固化。當所接種的溶血性巴斯德氏菌培養(yǎng)物達到0.5McFarland標準密度時，利用Steers復制基因將約5μl溶血性巴斯德氏菌培養(yǎng)物接種在含有各種濃度供試化合物的BHI瓊脂板上，在37℃下培養(yǎng)18小時。供試化合物的最初濃度范圍為100-200μg/ml。
MIC等于供試化合物對溶血性巴斯德氏菌的生長表現100％抑制作用時的濃度，這是通過與未接種的對照進行比較而測定的。
本發(fā)明化合物的體內活性可以通過本領域技術人員熟知的常規(guī)動物保護研究加以測定，這些研究通常對小鼠進行。測定IV是對小鼠進行的動物保護研究實例，用于試驗對抗出血敗血性巴斯德氏菌的活性。
測定IV按照到達順序將小鼠分配在籠中(每籠10只)，使用前有最少48小時的適應時間。動物腹膜內接種0.5ml 3×103CFU/ml細菌懸液(出血敗血性巴斯德氏菌59A006菌株)。每次實驗具有至少3個非給藥對照組，包括一組用0.1X細菌感染(challenge)劑量感染，兩組用1X細菌感染劑量感染；也可以采用10X細菌感染數據組。一般地，在一項給定研究中的所有小鼠都在30-90分鐘內被細菌感染，尤其是在使用反復注射器(例如Cornwall注射器)進行細菌感染的情況下。細菌感染開始后30分鐘，進行第一次化合物治療。如果全部動物在30分鐘結束時都已被細菌感染的話，可能需要第二個人來開始化合物給藥。給藥途徑是皮下或口服。皮下給藥部位在頸部背側松弛的皮膚，而口服給藥是通過飼喂針頭進行的。在兩者情況下，每只小鼠的用藥體積為0.2ml。
在細菌感染后30分鐘、4小時和24小時將化合物給藥。已知功效的對照化合物通過相同途徑給藥也包括在每次試驗中。每天觀察動物，記錄每組的存活數量。細菌感染后繼續(xù)進行出血敗血性巴斯德氏菌模型監(jiān)測96小時(四天)。
PD50為計算劑量，在該劑量下，所試驗的化合物保護一組小鼠的50％不因細菌感染而死亡，在沒有藥物治療的情況下，這種細菌感染將是致命性的。
實施例1式14化合物將200mg 13-甲基紅霉素A溶于10ml無水吡啶。加入鹽酸羥胺(0.145g，7.5equiv.)，將溶液加熱至60℃，攪拌24小時。將反應物潷析到25ml二氯甲烷與水的1∶1混合物中。用1N NaOH調節(jié)pH至10，用3×25ml二氯甲烷萃取，經Na2SO4干燥。過濾，濃縮濾液，得到淺黃色固體產物。產物(0.195g)經過HPLC純化，得到標題化合物，為白色固體(0.085g)。
MSm/z 735(M+H)。
實施例2式15化合物將70mg實施例1所得式14化合物溶于1.5ml丙酮。加入Na2HCO3水溶液(1.0g/10.0ml水)(0.33ml)，將所得混合物冷卻至0℃。加入冷卻至0℃的對-甲苯磺酰氯(0.380g)的丙酮(1.0ml)溶液，將混合物攪拌過夜。將反應物潷析到30ml二氯甲烷與水的1∶1混合物中。用1NNaOH調節(jié)pH至10，用3×20ml二氯甲烷萃取，經Na2SO4干燥。過濾，濃縮濾液，得到標題化合物，為固體(0.062g)。
MSm/z 717(M+H)。
實施例3式16化合物將60mg實施例2所得式15化合物溶于0.50ml四氫呋喃和2.5ml乙二醇，然后冷卻至0-5℃。加入NaBH4(0.047g)，將反應物在0-5℃下攪拌10小時。將反應物潷析到20ml二氯甲烷與水的1∶1混合物中。含水層用1×10ml二氯甲烷反萃取。合并有機層，經Na2SO4干燥。過濾，濃縮濾液，得到標題化合物，為固體(0.037g)。
MSm/z 721(M+H)。

實施例4其中R9是Me的式17化合物將實施例3所得式17化合物溶于氯仿。加入37％甲醛(3.0equiv.)和甲酸(3.0equiv.)，將溶液在45-50℃下攪拌12-24小時。將反應混合物在真空下濃縮。然后將殘余物溶于1-2ml二氯甲烷。然后加入2-5ml飽和NaHCO3水溶液。分離各層，含水層用等體積二氯甲烷反萃取。合并有機層，經Na2SO4干燥。過濾，濃縮，分離，得到標題化合物，為固體。
實施例5式23化合物將實施例4所得式14化合物溶于乙醇。加入氫氧化鋰一水合物(2當量)，將反應混合物在室溫下攪拌過夜。在真空下濃縮反應物，在鹽水與乙酸乙酯之間分配。調節(jié)反應混合物的pH至9-10。反應混合物用乙酸乙酯萃取，經Na2SO4干燥。得到4∶1比例的Z∶E異構體。粗產物經過二氧化硅色譜或硝基甲烷結晶純化，得到標題化合物。
實施例6式24化合物將實施例5所得式23化合物溶于丙酮。加入0.1M NaHCO3水溶液(2equiv.)，將所得混合物冷卻至0-5℃。加入0.1M對-甲苯磺酰氯的丙酮溶液，將混合物攪拌過夜。將反應物潷析到25ml二氯甲烷與水的1∶1混合物中。用1N NaOH調節(jié)反應混合物的pH至9-10。反應混合物用3×20ml二氯甲烷萃取，經Na2SO4干燥。過濾，濃縮濾液，得到標題化合物，為固體產物。
實施例7式26化合物方法A將實施例6所得式24化合物溶于冰乙酸。加入氧化鉑催化劑(50摩爾％)，將反應物用氮沖洗，放置在50psi氫下，在室溫下搖動24小時。另外加入氧化鉑催化劑(50摩爾％)，將反應物用氮沖洗，放置在50psi氫下，在室溫下再搖動24-48小時。反應物通過CeliteTM過濾。加入25ml水，用1N NaOH調節(jié)反應混合物的pH至9-10。反應混合物用3×25ml二氯甲烷萃取，經Na2SO4干燥。過濾，濃縮，得到標題化合物，為固體產物。
方法B將式24化合物溶于0.5ml MeOH，冷卻至0-5℃。加入NaBH4(10equiv.)，將反應物在0-5℃下攪拌4小時，溫熱至室溫，攪拌過夜。將反應物潷析到10ml二氯甲烷與水的1∶1混合物中。用1NNaOH調節(jié)反應混合物的pH至8-9，用3×5ml二氯甲烷萃取，經Na2SO4干燥。過濾，濃縮，得到標題化合物，為固體產物。
實施例8其中R9是Me的式27化合物將實施例7所得式26化合物溶于氯仿。加入37％甲醛(1.0equiv.)和甲酸(1.0equiv.)，將溶液在45-50℃下攪拌48-72小時。然后將反應物潷析到氯仿與水的1∶1混合物中。用1N NaOH調節(jié)反應混合物的pH至9-10，反應混合物用氯仿萃取，經Na2SO4干燥。過濾，濃縮，得到標題化合物，為固體產物。
盡管我們已經描述了大量本發(fā)明的實施方式，不過顯然我們的基本構造是可以改變的，以提供其他利用本發(fā)明產物和方法的實施方式。因此，本發(fā)明的范圍將被視為由權利要求書所定義，而不是已經通過實施例所呈現的具體實施方式
。
權利要求
或其藥學上可接受的鹽、前體藥物或溶劑化物，其中A是H或鹵素；X選自-C(O)-、-CH(NR8R9)-、-CHR8NR9-、-NR9CHR8-、-C(＝NR8)-和-C(＝N-OR8)-，其中每個上述X基團的前一條短線連接式1化合物的C-10碳，每個基團的后一條短線連接式1化合物的C-8碳；Y選自CH2、C(O)、CHF、CF2、C＝C(RaRb)、CHSR7、CHR7、C＝S、-C(＝NR8)-、-C(＝N-OR8)、CH(OR8)、CH(OC(O)R8)、CH(OC(O)Ar)、CH(OC(O)NR8R9)、CH(O(CRaRb)nAr)、CH(OC(O)(CRaRb)nAr)、CH(OC(O)(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr)、CH(OC(O)NR8NR8R9)、CH(OC(O)NR8(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr)、CH(OC(O)NR8NR8(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr)、-CH(NR8R9)-、CH(NR8C(O)R8)、CH(NR8C(O)NR8R9)、CH(NR8C(O)OR8)、CH(S(CRaRb)nAr)、-CH(NH(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr)和CH(NH(CRaRb)nAr)，其中n是從0至10的整數；或者Y具有下列結構 R1和R2可以是單獨連接的或連接在一起的；當單獨連接時，R1獨立地選自OR8、OC(O)R8、OC(O)NR8R9、NR8R9、NR8C(O)R8、NR8C(O)NR8R9、O(CRaRb)nAr、S(CRaRb)nAr和N(CRaRb)nAr，其中n是從0至10的整數；當單獨連接時，R2獨立地選自OR8、O-甲磺?；?、O-甲苯磺?；?、OC(O)R8、OC(O)NR8R9、NR8R9、NR8C(O)R8、NR8C(O)NR8R9、O(CRaRb)nAr、S(CRaRb)nAr和NH(CRaRb)nAr，其中n是從0至10的整數；Ra和Rb每個獨立地選自H、鹵素和C1-C6烷基；Ra和Rb與它們所連接的碳一起可以構成3-至10-元環(huán)狀或雜環(huán)狀雙基，其中所述雙基的一個或兩個碳可選地被獨立地選自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(C1-C6)烷基-和-C(O)-的雙基置換，并且可選地被1至3個獨立地選自S組取代基的取代基取代；(CRaRb)n是亞烷基，其中n是從0至10的整數，它是不間斷的或者被獨立地選自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(C1-C6)烷基-和-C(O)-的雙基中斷，并且可選地被1至3個獨立地選自S組取代基的取代基取代；當連接在一起時，R1和R2與中間原子一起構成另外一個具有下列結構之一的環(huán) B1選自O、(CRaaRbb)m、SO2、O和NR7，其中m是0或1；Z選自(CRaaRbb)m、C(O)、C(NRaa)、P-ORaa、P(O)ORaa、P(O)NRaaRbb、Si(RcRd)、SO、SO2、(CRaaRbb)mCO和CO(CRaaRbb)m，其中m是1或2；Rc和Rd獨立地選自C1-C8烷基、C6-C10芳基和C4-C10雜環(huán)基；Raa和Rbb獨立地選自H和C1-C6烷基；Raa和Rbb與它們所連接的碳一起可以構成3-至10-元環(huán)狀或雜環(huán)狀雙基，其中所述雙基的一個或兩個碳可選地被獨立地選自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(C1-C6)烷基-和-C(O)-的雙基置換，并且可選地被1至3個獨立地選自S組取代基的取代基取代；當B1是NR7時，B1和R6與它們所連接的氮一起可以構成3-至10-元環(huán)，其中所述環(huán)的一個或兩個碳可選地被獨立地選自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(C1-C6)烷基-和-C(O)-的雙基置換，并且可選地被1至3個獨立地選自S組取代基的取代基取代；當B1是NR7時，B1和R6與它們所連接的氮一起可以構成-N＝C(R7)(RaRb)nAr，其中n是從0至10的整數；R1、R2和X可以連接在一起；當連接在一起時，R1、R2和X與中間原子一起構成另外兩個具有下列結構之一的環(huán) D、E、F和G每個獨立地選自H、鹵素、C1-C12烷基、C3-C10烯基、C3-C10炔基和CH2(RaRb)nAr，其中n是從0至10的整數，其中所述烷基的一個或兩個碳可選地被獨立地選自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(C1-C6)烷基-和-C(O)-的雙基置換，并且可選地被1至3個獨立地選自S組取代基的取代基取代；D和E或F和G與它們所連接的碳一起可以構成3-至10-元環(huán)狀或雜環(huán)狀雙基，其中所述雙基的一個或兩個碳可選地被獨立地選自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(C1-C6)烷基-和-C(O)-的雙基置換，并且可選地被1至3個獨立地選自S組取代基的取代基取代；J、J1和K每個獨立地選自C(O)R8、C(O)NR8R9、C(O)OR8、(CRaRb)nAr、S(CRaRb)nAr和NH(CRaRb)nAr，其中n是從0至10的整數；L、M、Q和V每個獨立地選自S組取代基；其中L、M、Q和V被連接的苯環(huán)的一個或兩個碳可以被氮置換；R1和X可以連接在一起；當連接在一起時，R1和X與中間原子一起構成另外一個具有下列結構之一的環(huán) R2和X可以連接在一起；當連接在一起時，R2和X與中間原子一起構成另外一個具有下列結構之一的環(huán) R3是OR10；R3和X可以連接在一起；當連接在一起時，R3和X與中間原子一起構成另外一個具有下列結構之一的環(huán) R3和Y可以連接在一起；當連接在一起時，R3和Y與中間原子一起構成另外一個具有下列結構之一的環(huán) R4選自H、C(O)(C1-C18)烷基、C(O)Ar、OC(O)(C1-C18)烷基和OC(O)Ar，其中上述R4基團的烷基部分可選地被獨立地選自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(C1-C6)烷基-和-C(O)-的雙基置換，并且可選地被1至3個獨立地選自S組取代基的取代基取代；R5選自H、鹵素、C1-C10烷基、C3-C10烯基、C3-C10炔基、-C(RaRb)-C(Ra)＝C(Rb)-Ar、(CRaRb)nAr、OR8、O(CO)R8、OC(O)NR8R9、NR8R9、NR8C(O)R8、NR8C(O)NR8R9、O(CRaRb)nAr、S(CRaRb)nAr和NR8(CRaRb)nAr，其中n是從0至10的整數，其中所述烷基、烯基和炔基的一個或兩個碳可選地被獨立地選自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(C1-C6)烷基-和-C(O)-的雙基置換，并且可選地被1至3個獨立地選自S組取代基的取代基取代；R5和Y可以連接在一起；當連接在一起時，R5和Y與中間原子一起構成下列結構 R6選自H、C1-C12烷基、C3-C10烯基、C3-C10炔基和CH2(RaRb)nAr，其中n是從0至10的整數，其中所述烷基的一個或兩個碳可選地被獨立地選自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(C1-C6)烷基-和-C(O)-的雙基置換，并且可選地被1至3個獨立地選自S組取代基的取代基取代；R7、R8和R9每個獨立地選自H和C1-C12烷基，其中所述烷基的一個或兩個碳可選地被獨立地選自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(C1-C6)烷基-和-C(O)-的雙基置換，并且可選地被1至3個獨立地選自S組取代基的取代基取代；R8和R9與它們所連接的氮一起可以構成3-至10-元環(huán)，其中一個或兩個碳可選地被獨立地選自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(C1-C6)烷基-和-C(O)-的雙基置換，并且可選地被1至3個獨立地選自S組取代基的取代基取代；R10選自C1-C10烷基、C3-C10烯基、C3-C10炔基、-C(RaRb)-C(Ra)＝C(Rb)-Ar和(CRaRb)nAr，其中n是從1至10的整數，其中所述烷基、烯基和炔基的一個或兩個碳可選地被獨立地選自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(C1-C6)烷基-和-C(O)-的雙基置換，并且可選地被1至3個獨立地選自S組取代基的取代基取代，只要R10不是未取代的甲基；R11是H或OCH3；R12和R13與它們所連接的碳一起可以構成-C(O)-、-C(＝NR8)-或-C(＝N-OR8)；R12和R13與它們所連接的碳一起可以構成3-至10-元環(huán)，其中所述環(huán)的一個或兩個碳可選地被獨立地選自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(C1-C6)烷基-和-C(O)-的雙基置換，并且可選地被1至3個獨立地選自S組取代基的取代基取代；R12選自H、C1-C10烷基、C3-C10烯基、C3-C10炔基、-C(RaRb)-C(Ra)＝C(Rb)-Ar和(CRaRb)nAr，其中n是從0至10的整數，其中所述烷基、烯基和炔基的一個或兩個碳可選地被獨立地選自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(C1-C6)烷基-和-C(O)-的雙基置換，并且可選地被1至3個獨立地選自S組取代基的取代基取代；R13選自H、C1-C10烷基、C3-C10烯基、C3-C10炔基、OR8、OC(O)R8、OC(O)(CRaRb)nAr、OC(O)(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr、OC(O)NR8R9、OC(O)NR8NR8R9、OC(O)NR8(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr、OC(O)NR8NR8(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr、NR8R9、NR8(CO)R8、NR8C(O)NR8R9、NR8C(O)OR8、O(CRaRb)nAr、O(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr、S(CRaRb)nAr、NH(CRaRb)nNR8(CRaRb)nAr和NH(CRaRb)nAr，其中n是從0至10的整數；R14和R15每個獨立地選自H、C1-C12烷基、芳基取代的C1-C12烷基和雜芳基取代的C1-C12烷基，其中所述烷基的一個或兩個碳可選地被獨立地選自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(C1-C6)烷基-和-C(O)-的雙基置換，并且可選地被1至3個獨立地選自S組取代基的取代基取代；R14和R15與它們所連接的碳一起可以構成3-至10-元環(huán)，其中一個或兩個碳可選地被獨立地選自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(C1-C6)烷基-和-C(O)-的雙基置換，并且可選地被1至3個獨立地選自S組取代基的取代基取代；R17是C1-C20烷基，其中所述烷基的一個或兩個碳可選地被獨立地選自-O-、-S-、-S(O)-、-S(O)2-、-N(C1-C6)烷基-和-C(O)-的雙基置換，并且可選地被1至3個獨立地選自S組取代基的取代基取代，只要R17不是未取代的乙基；R18選自由芳基、取代的芳基、雜芳基、取代的雜芳基和雜環(huán)烷基組成的組；R19和R20每個獨立地選自由C1-C12烯基、C1-C12炔基、芳基、C3-C8環(huán)烷基、雜環(huán)烷基和雜芳基組成的組，其中所述烯基、炔基、芳基、環(huán)烷基、雜環(huán)烷基和雜芳基是取代的或未取代的；R19和R20與它們所連接的碳一起可以構成可以被一個或更多取代基取代的3-至10-元雜環(huán)烷基環(huán)，所述取代基獨立地選自由鹵素、羥基、C1-C3烷氧基、C1-C3烷氧基-C1-C3烷氧基、氧代、C1-C3烷基、鹵代-C1-C3烷基和C1-C3烷氧基-C1-C3烷基組成的組；每個Ar獨立地是4-至10-元雜環(huán)基或C6-C10芳基，其中所述雜環(huán)基和芳基可選地被一個或更多獨立地選自S組取代基的取代基取代；以及S組取代基選自下組硝基；鹵素；羥基；N3；CN；CHO；C1-C10烷氧基；C1-C3烷氧基-C1-C3烷氧基；氧代；C1-C10烷?；?；C1-C10烷基；被芳族雜環(huán)取代的C1-C12烷基；被O-SO2取代的C1-C6烷基；C2-C10烯基；C2-C10炔基；C3-C10環(huán)烷基；取代的C3-C10環(huán)烷基；4至10元雜環(huán)基；取代的雜環(huán)基；芳基；取代的芳基；三烷基甲硅烷基；-C(O)R8；-C(O)R18；-C(O)OR8；-C(O)NR8R9；-NR8R9；-NR19R20；-NHC(O)R8；-NHC(O)NR8R9；＝N-O-R8；＝N-NR8R9；＝N-NR19R20；＝N-R8；＝N-R18；＝N-NHC(O)R8；＝N-NHC(O)NR8R9；-C≡N；-S(O)n，其中n是0、1或2；-S(O)nR8，其中n是0、1或2；-O-S(O)nR8，其中n是0、1或2；和-SO2NR8R9。
2.權利要求1的化合物，其中A是H或F。
3.權利要求1的化合物，其中X選自-C(O)-、-CH(NH2)-、-CH2NR9-、-NR9CH2-和-C(＝N-OR8)。
4.權利要求3的化合物，其中X選自-CH2NH-、-CH2N(Me)-、-N(Me)CH2-、-C(＝N-OH)-、-C(＝N-OMe)-和-C(＝N-OCH2CH2OMe)-。
5.權利要求1的化合物，其中R1是OH。
6.權利要求1的化合物，其中R2是OH。
7.權利要求1的化合物，其中R1是OH，R2是OH。
8.權利要求1的化合物，其中R1是OH，R2是OH，A是H，X選自-CH2NH-、-CH2N(Me)-、-N(Me)CH2-、-C(＝N-OH)-、-C(＝N-OMe)-和-C(＝N-OCH2CH2OMe)-。
9.權利要求1的化合物，其中R1是OH，R2是OH，A是F，X選自-CH2NH-、-CH2N(Me)-、-N(Me)CH2-、-C(＝N-OH)-、-C(＝N-OMe)-和-C(＝N-OCH2CH2OMe)-。
10.權利要求1的化合物，其中R1和R2與中間原子一起構成另外一個具有下列結構之一的環(huán) 其中Z是CH2或C(＝O)；B1選自NH、NMe和CH2；R6是(CH2)nAr，其中n是從0至10的整數。
11.權利要求1的化合物，其中R1和R2與中間原子一起構成另外一個具有下列結構之一的環(huán) 其中Z是CH2或C(＝O)；B1選自NH、NMe和CH2；R6是(CH2)3Ar，其中n是從0至10的整數。
12.權利要求1的化合物，其中Ar選自喹啉-4-基、4-苯基-咪唑-1-基、咪唑并(4，5-b)吡啶-3-基和4-吡啶-3-基-咪唑-1-基。
13.權利要求1的化合物，其中R3選自O(C2-C4)烷基、OCH2CH＝CH-Ar和O(CH2)nAr。
14.權利要求1的化合物，其中Y選自CH2、C(O)、C＝S、CH(OR8)、CH(OC(O)R8)、CH(OC(O)Ar)、CH(OC(O)NR8R9)和CH(O(CRaRb)nAr)，其中n是從0至10的整數。
15.權利要求1的化合物，其中R5是H或F。
16.權利要求1的化合物，其中所述化合物具有下列結構 其中B1選自NH、O和CH2；X選自-C(O)-、-CH2NH-、-CH2NMe-、-NHCH2-、-N(Me)CH2-、-CH(NH2)-、-C(＝N-OMe)-和-C(＝N-OCH2O(CH2)2OMe)-；R5是H或F；以及Ar選自喹啉-4-基、7-甲氧基-喹啉-4-基、4-苯基-咪唑-1-基、吡啶-4-基、吡啶-3-基、吡啶-2-基、4-吡啶-3-基-咪唑-1-基、苯基、咪唑并(4，5-b)吡啶-3-基、2-苯基-噻唑-5-基、2-吡啶-3-基-噻唑-4-基和苯并咪唑-1-基。
17.權利要求1的化合物，其中所述化合物具有下列結構 其中Ar選自喹啉-4-基、7-甲氧基-喹啉-4-基、4-苯基-咪唑-1-基、吡啶-4-基、吡啶-3-基、吡啶-2-基、4-吡啶-3-基-咪唑-1-基、苯基、咪唑并(4，5-b)吡啶-3-基、2-苯基-噻唑-5-基、2-吡啶-3-基-噻唑-4-基和苯并咪唑-1-基；和R5是H或F。
18.用于哺乳動物、魚或鳥感染的治療的藥物組合物，包含治療學上有效量的權利要求1化合物和藥學上可接受的載體。
19.治療哺乳動物、魚或鳥感染的方法，包括將治療學上有效量的權利要求1化合物對所述哺乳動物、魚或鳥給藥。
20.選自下組的化合物 和上述化合物的藥學上可接受的鹽、前體藥物和溶劑化物。
全文摘要
本發(fā)明涉及式(1)化合物及其藥學上可接受的鹽、前體藥物和溶劑化物,其中R
文檔編號C07H17/08GK1351608SQ00807992
公開日2002年5月29日 申請日期2000年4月25日 優(yōu)先權日1999年5月24日
發(fā)明者J·P·迪拉姆, T·喀尼克, H·A·I·穆卡瑟, W－G·蘇, Y－J·伍 申請人:輝瑞產品公司