專利名稱：α－?；挺粒s原子取代的苯乙酰胺葡糖激酶活化劑的制作方法
葡糖激酶(GK)是在哺乳動物中發(fā)現(xiàn)的四種己糖激酶的一種[Colowick，S.P.in The Enzymes，Vol.9(P.Boyer，ed.)，Academic Press，NewYork，NY，pages 1-48，1973]。這種己糖激酶催化葡萄糖新陳代謝的第一步，即葡萄糖向6-磷酸鹽葡萄糖的轉(zhuǎn)化。GK具有有限的細胞分布，主要分布在胰腺β-細胞和肝臟軟組織細胞中。另外，GK在這兩種公知的在全身的葡萄糖動態(tài)平衡中起關(guān)鍵作用的細胞中是葡萄糖新陳代謝的速率控制酶[Chipkin，S.R.，Kelly，K.L.，and Ruderman，，N.B.in Joslin’s Diabetes(C.R.Khan and G..C.Wier，eds.)，Lea and Febifer，Philadelphia，PA，Pages 97-115，1994]。GK顯示出最大活性的一半活性時葡萄糖的濃度約為8mM。其他三種己糖激酶被濃度非常低(＜1mM)的葡萄糖飽和。因此，當血液中葡萄糖濃度從禁食濃度(5mM)增加到食含碳水化合物餐后濃度(≈10-15mM)時，葡萄糖流經(jīng)GK通道的流量增加[Printz，R.G..，Magnuson，M.A.，andGranner，D.K，in Ann.Rev.Nutrition Vol.13(R.E.Olson，D.M.Bier，and D.B.McCormick，eds.)，Annual Review，Inc.，Palo Alto，CA，Pages 463-496，1993]。這些發(fā)現(xiàn)促使在十幾年以前形成了GK在β-細胞和肝細胞中具有葡萄糖傳感器功能的假設(shè)(Meglasson，M.D.and Matschinsky，F(xiàn).M.Amer.J.Physiol.246，E1-E13，1984)。近年來，在轉(zhuǎn)基因動物方面的研究已經(jīng)證實GK的確在全身葡萄糖動態(tài)平衡中起著關(guān)鍵的作用。沒有GK的動物在出生后幾天內(nèi)因嚴重的糖尿病死亡，而含過量GK的動物改善了糖耐受性(Grupe，A.，Hultgren，B.，Ryan，A.等人，Cell 83，69-78，1995；Ferrie，T.，Riu，E.，Bosch，F(xiàn).等人，F(xiàn)ASEB J.，10，1213-1218 1996)。葡萄糖曝光的增加通過β-細胞中的GK與增加的胰島素分泌素結(jié)合以及通過肝細胞中的GK與增加的肝糖沉積結(jié)合從而可能降低葡萄糖的產(chǎn)量。
青年人的II型成熟(maturity-onset)糖尿病(MODY-2)是由于GK基因中喪失功能突變而引起的，這種發(fā)現(xiàn)暗示GK在人體中還具有葡萄糖傳感器的功能(Liang，Y.，Kesavan，P.，Wang，L.等人，Biochem.J.309，167-173，1995)。對提高的酶活性具有GK突變異種形式的病人的鑒定提供了支持GK在人體的葡萄糖新陳代謝規(guī)律中起著重要作用的附加證據(jù)。這些病人顯示出與有不適當?shù)难獫{胰島素濃度增高有關(guān)的低血糖癥(Glaser，B.，Kesvan，P.，Heyman，M.等人，NewEngland J.Med.338，226-230，1998)。雖然GK基因的突變在絕大多數(shù)II型糖尿病患者中沒有發(fā)現(xiàn)，但是激活GK從而增加GK傳感器體系敏感度的化合物將仍然在對所有II型糖尿病的低血糖癥的治療中是有用的。葡糖激酶活化劑將在β-細胞和肝細胞中增加葡萄糖新陳代謝的流量，這將會與增加的胰島素分泌素結(jié)合。這種試劑將對治療II型糖尿病有用。
本發(fā)明提供了一種選自下式化合物的酰胺及其藥學上可接受的鹽 其中，R1和R2獨立地為氫、鹵素、氰基、硝基、低級烷基硫代基、全氟代低級烷基硫代基、低級烷基磺?；?，或全氟代低級烷基磺?；?，R3為含2-4個碳原子的低級烷基，或為環(huán)烷基、環(huán)烯基，或有一個選自氧和硫的雜原子的雜環(huán)烷基的5-7元環(huán)，R4為-C(O)NHR5或R6，R6為未取代或單取代的被環(huán)碳原子連接到所示的酰胺基上的五元或六元雜芳環(huán)，其中五元或六元雜芳環(huán)含有1-3個選自硫、氧或氮的雜原子，其中一個雜原子為與連接環(huán)碳原子鄰接的氮原子；所說的單取代的雜芳環(huán)在不是與所說的連接碳原子相鄰的環(huán)碳原子位置上被單取代，所述單取代用的取代基選自低級烷基，鹵素，硝基，氰基，-(CH2)n-OR9，-(CH2)n-C(O)-OR10，-(CH2)n-C(O)-NH-R11，-C(O)-C(O)-OR12，-(CH2)n-NH-R13；n為0，1，2，3或4；R7，R8，R9，R10，R11，R12，R13獨立地為氫或低級烷基，R5為氫，低級烷基，低級烯基，羥基低級烷基，鹵代低級烷基，-(CH2)n-C(O)-OR7，-C(O)-(CH2)n-C(O)-OR8，X為氧、硫、磺酰基或羰基；*指不對稱碳原子。
優(yōu)選的是，式I化合物在不對稱碳原子處是”R”構(gòu)型，當X是羰基(C＝O)、當優(yōu)選的對映體是“S”的情況除外。
已經(jīng)發(fā)現(xiàn)式I化合物能激活葡糖激酶。葡糖激酶活化劑可用于治療II型糖尿病。
本發(fā)明還涉及一種包括式I化合物和藥學上可接受的載體和/或助劑的藥用組合物。本發(fā)明還涉及這類化合物作為藥用活性物質(zhì)的用途及其在制備用于治療或預防II型糖尿病的藥物中的用途。本發(fā)明還涉及制備式I化合物的方法。另外，本發(fā)明涉及預防或治療II型糖尿病的方法，該方法包括將式I化合物應用到人或動物上的方法。
在一個實施方案中，本發(fā)明提供包括下式II和III化合物的式I酰胺 其中，R1和R2獨立地為氫、鹵素、氰基、硝基、低級烷基硫代基、全氟代低級烷基硫代基、低級烷基磺?；蛉图壨榛酋；?優(yōu)選氫，鹵素，低級烷基磺?；?，或全氟代低級烷基磺酰基)，R3為5-7元環(huán)的環(huán)烷基、環(huán)烯基，或有一個選自氧和硫的雜原子的雜環(huán)烷基，R5為低級烷基，X為氧、硫、磺酰基或羰基，*指不對稱碳原子和 其中，R1和R2獨立地為氫、鹵素、氰基、硝基、低級烷基硫代基、全氟代低級烷基硫代基、低級烷基磺?；?，或全氟代低級烷基磺?；?優(yōu)選氫，鹵素，低級烷基磺?；?，或全氟代低級烷基磺?；?，R3為屬于5-7元環(huán)的環(huán)烷基、環(huán)烯基，或含有一個選自氧和硫的雜原子的雜環(huán)烷基，R6為未取代的其環(huán)碳原子連接到所示的酰胺基上的五元或六元雜芳環(huán)，其中五元或六元雜芳環(huán)含有1-3個選自硫、氧或氮的雜原子，其中一個雜原子為與連接環(huán)碳原子鄰接的氮原子；X為氧、硫、磺?；螋驶?，*指不對稱碳原子。
優(yōu)選的是，式II和式III化合物在所示的不對稱碳原子處是“R”構(gòu)型，當X是羰基(C＝O)、當優(yōu)選的對映體是“S”的情況除外。本發(fā)明的每一種酰胺的藥學上可接受的鹽都在本發(fā)明的保護范圍內(nèi)。
在優(yōu)選的式II酰胺中，R1和R2獨立地為鹵素或低級烷基磺?；琑3為屬于5-7元環(huán)的環(huán)戊基、環(huán)己基，環(huán)己烯基，或有一個選自氧和硫(優(yōu)選氧)的雜原子的雜環(huán)烷基(化合物A)。
在化合物A的某些酰胺中，R5為甲基，X為氧。更優(yōu)選的是，R1和R2獨立地為氯或甲基磺酰基(即R1和R2都可以是氯或甲基磺酰基，也可以是一個為氯而另一個為甲基磺酰基)(化合物A-1)。其中R1和R2為氯的這種化合物的例子是1-[環(huán)戊基氧基-(3，4-二氯-苯基)-乙?；鵠-3-甲基-脲，1-[環(huán)己基氧基-(3，4-二氯-苯基)-乙酰基]-3-甲基-脲，1-[(環(huán)己-2-烯基氧基)-(3，4-二氯-苯基)-乙?；鵠-3-甲基-脲，和1-[(3，4-二氯-苯基)-(四氫-吡喃-4-基氧基)-乙酰基]-3-甲基-脲。
其中R1為氯和R2為甲基磺?；幕衔顰-1酰胺的例子是1-[(3-氯-4-甲烷磺酰基-苯基)-環(huán)戊基氧基-乙?；鵠-3-甲基-脲，和1-[(3-氯-4-甲烷磺酰基-苯基)-(環(huán)己-2-烯基氧基)-乙?；鵠-3-甲基-脲。
在優(yōu)選的式III酰胺中，R1和R2獨立地為鹵素或低級烷基磺?；?，R3為屬于5-7元環(huán)的環(huán)戊基、環(huán)己基，環(huán)己烯基，或有一個選自氧和硫的雜原子(優(yōu)選氧)的雜環(huán)烷基(化合物B)。優(yōu)選的是，R6為噻唑基或吡啶基，R1和R2獨立地為氯或甲基磺?；?化合物B-1)。
在化合物B-1的某些酰胺中，優(yōu)選X是氧，特別是當R1和R2是氯且R6是噻唑基或吡啶基時。其中R6是噻唑基的這種化合物的例子是2-(3，4-二氯-苯基)-2-(四氫-吡喃-4-基氧基)-N-噻唑-2-基-乙酰胺，2-環(huán)戊基氧基-2-(3，4-二氯-苯基)-N-噻唑-2-基-乙酰胺，2-環(huán)己基氧基-2-(3，4-二氯-苯基)-N-噻唑-2-基-乙酰胺，和2-(環(huán)己-2-烯基氧基)-2-(3，4-二氯-苯基)-N-噻唑-2-基-乙酰胺。
其中R6為吡啶基的這種化合物的例子是2-環(huán)戊基氧基-2-(3，4-二氯-苯基)-N-吡啶-2-基-乙酰胺。
在化合物B-1的另一種酰胺中，X是氧，R1是氯，R2是甲基磺酰基。這種化合物的例子是2-(3-氯-4-甲烷磺酰基-苯基)-2-環(huán)戊基氧基-N-噻唑-2-基-乙酰胺，和2-(3-氯-4-甲烷磺酰基-苯基)-2-(環(huán)己-2-烯基氧基-N-(4，5-二氫-噻唑-2-基-乙酰胺。
在化合物B-1的另一種酰胺中，X是硫、磺?；螋驶?，R1和R2是氯，R3是環(huán)戊基。這些化合物的例子是3-環(huán)戊基-2-(3，4-二氯-苯基)-3-氧代-N-噻唑-2-基-丙酰胺，3-環(huán)戊烷磺酰基-2-(3，4-二氯-苯基)-N-噻唑-2-基-乙酰胺，和3-環(huán)戊基硫烷基-2-(3，4-二氯-苯基)-N-噻唑-2-基-乙酰胺。
對于上述每一種化合物，每一個具體表示的變量可以和任何其它式I的變量結(jié)合或可以和任何一個或多個具體表示的變量結(jié)合。
在式I化合物中，*表示不對稱碳原子。式I化合物在所示的不對稱碳原子處可以是外消旋物或“R”構(gòu)型，當X是羰基(C＝O)時、當優(yōu)選的對映體是“S”的情況除外。R3不對稱時，優(yōu)選“R”對映體，在與X相連的環(huán)碳原子上產(chǎn)生附加的手性中心。在這個中心處，式I化合物可以表現(xiàn)為外消旋物或“R”或“S”構(gòu)型。
除非特別指出，本申請使用的術(shù)語“鹵素”和術(shù)語“鹵”指所有四種鹵素即氟，氯，溴和碘。優(yōu)選的鹵素是氯和溴，最優(yōu)選氯。
本申請全文中使用的術(shù)語“低級烷基”既包括直鏈又包括支鏈的具有1-7個碳原子的烷基，例如甲基，乙基，丙基，異丙基，優(yōu)選甲基。本申請使用的“低級烷基磺?；笔侵竿ㄟ^磺酰基中的硫原子與分子的其他部分連接的如上面定義的低級烷基。類似地，“全氟代-低級烷基磺酰基”是通過磺?；械牧蛟优c分子的其他部分連接的如上定義的全氟代低級烷基。
本申請使用的“低級烷基硫代基”是指其中的硫代基連接到分子的其他部分的如上定義的低級烷基。類似地，“全氟代-低級烷基硫代基”是其中的硫代基連接到分子的其他部分的如上定義的全氟代-低級烷基。
本申請使用的“環(huán)烷基”是具有3-10個碳原子，優(yōu)選5-7個碳原子的飽和烴環(huán)。優(yōu)選的環(huán)烷基是環(huán)戊基和環(huán)己基。本申請使用的“環(huán)烯基”是具有3-10個碳原子，優(yōu)選5-7個碳原子，環(huán)碳原子之間的一個鍵不飽和的環(huán)烷基。本申請使用的“雜環(huán)烷基”是具有3-10個碳原子，優(yōu)選5-7個碳原子，并且有一個雜原子是氧或硫的飽和烴環(huán)。優(yōu)選具有一個雜原子，該雜原子優(yōu)選是氧。
本申請使用的術(shù)語“低級烯基”指具有2-6個碳原子且雙鍵位于該基團上任何兩個相鄰碳原子之間的烯基。優(yōu)選的低級烯基是烯丙基和丁烯基。
變量X可以是氧或硫(即-O-或-S-)或磺?；螋驶?即SO2或C＝O)。
雜芳環(huán)可以是未取代或單取代的具有1至3個選自氧，氮，或硫的雜原子，并且環(huán)碳原子連接到所示的酰胺基上的五元或六元雜芳環(huán)。該雜芳環(huán)具有至少一個鄰接連接環(huán)碳原子的氮原子，如果存在有其他雜原子，則可以是硫，氧或氮。某些優(yōu)選的環(huán)含有鄰接連接環(huán)碳原子的氮原子和鄰接連接環(huán)碳原子或與所說的第一個雜原子相鄰的第二個雜原子。雜芳環(huán)借助環(huán)碳原子與該酰胺基團連接。借助該酰胺鍵聯(lián)接的雜芳環(huán)的環(huán)碳原子不能包含任何取代基。雜芳環(huán)包括如吡嗪基，噠嗪基，異噁唑基，異噻唑基，吡唑基，吡啶基(pyridinyl)，嘧啶基，噻二唑基(優(yōu)選1，3，4-，1，2，3-，1，2，4-)，三嗪基(優(yōu)選1，3，5-，1，2，4-)，噻唑基，噁唑基，和咪唑基。優(yōu)選的環(huán)是噻唑基如4或5-鹵代噻唑基，4或5低級烷基噻唑基，吡啶基和嘧啶基如2-低級烷基嘧啶基。最優(yōu)選噻唑基或吡啶基。
本發(fā)明優(yōu)選的化合物是其中R5為低級烷基，優(yōu)選甲基的上述式I化合物。在一實施方案中，優(yōu)選的雜芳環(huán)R6是噻唑基；在另一實施方案中，優(yōu)選的雜芳環(huán)R6是吡啶基。在一實施方案中，優(yōu)選的R1和R2是獨立的鹵素(優(yōu)選氯)或低級烷基磺?；?優(yōu)選甲基磺酰基)；在又一實施方案中，R1和R2是氯；在又一實施方案中，R1是氯且R2是甲基磺?；?。優(yōu)選的殘基R3是環(huán)戊基，環(huán)己基，環(huán)己烯基，優(yōu)選環(huán)戊基，或有一個選自氧或硫的雜原子優(yōu)選氧的六元雜環(huán)烷基。在另一實施方案中，X是氧；在另一實施方案中，X是硫，磺?；螋驶?。
本發(fā)明最優(yōu)選的化合物是1-[環(huán)戊基氧基-(3，4-二氯-苯基)-乙?；鵠-3-甲基-脲，1-[環(huán)己基氧基-(3，4-二氯-苯基)-乙?；鵠-3-甲基-脲，1-[(環(huán)己-2-烯基氧基)-(3，4-二氯-苯基)-乙酰基]-3-甲基-脲，1-[(3，4-二氯-苯基)-(四氫-吡喃-4-基氧基)-乙酰基]-3-甲基-脲，1-[(3-氯-4-甲烷磺酰基-苯基)-環(huán)戊基氧基-乙?；鵠-3-甲基-脲，1-[(3-氯-4-甲烷磺?；?苯基)-(環(huán)己-2-烯基氧基)-乙酰基]-3-甲基-脲，2-(3，4-二氯-苯基)-2-(四氫-吡喃-4-基氧基)-N-噻唑-2-基-乙酰胺，2-環(huán)戊基氧基-2-(3，4-二氯-苯基)-N-噻唑-2-基-乙酰胺，2-環(huán)己基氧基-2-(3，4-二氯-苯基)-N-噻唑-2-基-乙酰胺，2-(環(huán)己-2-烯基氧基)-2-(3，4-二氯-苯基)-N-噻唑-2-基-乙酰胺，2-環(huán)戊基氧基-2-(3，4-二氯-苯基)-N-吡啶-2-基-乙酰胺，2-(3-氯-4-甲烷磺?；?苯基)-2-環(huán)戊基氧基-N-噻唑-2-基-乙酰胺，2-(3-氯-4-甲烷磺?；?苯基)-2-(環(huán)己-2-烯基氧基)-N-(4，5-二氫)-噻唑-2-基-乙酰胺，3-環(huán)戊基-2-(3，4-二氯-苯基)-3-氧雜-N-噻唑-2-基-丙酰胺，2-環(huán)戊烷磺?；?2-(3，4-二氯-苯基)-N-噻唑-2-基-乙酰胺，和2-環(huán)戊基硫烷基-2-(3，4-二氯-苯基)-N-噻唑-2-基-乙酰胺。
本申請使用的術(shù)語“藥學上可接受的鹽”包括任何藥學上可接受的無機或有機酸鹽，例如，鹽酸，氫溴酸，硝酸，硫酸，磷酸，檸檬酸，甲酸，馬來酸，乙酸，琥珀酸，酒石酸，甲烷磺酸，對-甲苯磺酸等的鹽。術(shù)語“藥學上可接受的鹽”還包括任何藥學上可接受的堿式鹽例如胺鹽，三烷基胺鹽等。這些鹽非常容易由本領(lǐng)域人員通過標準技術(shù)制備。本發(fā)明包括藥學上可接受的式I所表示的每一種化合物的鹽。
式I化合物可以由下面的反應方案制備。
在反應過程中，各種官能團例如游離羧酸或羥基將通過常規(guī)的可水解酯或醚保護基團來保護。本申請使用的術(shù)語“可水解酯或醚保護基團”指任何常規(guī)用來保護羧酸或醇的能分別水解成羥基或羧基的酯或醚?？捎米鞅Ｗo羥基的例示性酯基是其中?；糠盅苌缘图夋溚樗?，芳基低級鏈烷酸，或低級烷烴二羧酸的那些酯基。能用來生成這些基團的活化酸是酸酐，酸性鹵化物，優(yōu)選衍生自芳基或低級鏈烷酸的酸氯化物或酸溴化物。酸酐的例子是衍生自單羧酸的酸酐如乙酸酐，苯甲酸酐和低級烷烴二羧酸酐如琥珀酸酐。適用于醇類的醚保護基團的例子是四氫吡喃基醚如4-甲氧基-5，6-二羥基-2H-吡喃基醚。其他是芳酰基取代的甲基醚例如芐基或三苯甲游基醚或α-低級烷氧基低級烷基醚，例如，甲氧基甲基或烯丙基醚或烷基甲硅烷基醚如三甲基甲硅烷基醚。
用于保護羧酸基的酯基的例子是衍生自低級烷醇或取代或未取代的芐基醇的那些酯基。選用的酯官能團對于有機化學領(lǐng)域的一般技術(shù)人員來說是公知的。例如，在堿水解下最容易斷開的酯官能團是衍生自低級伯醇例如甲基，乙基等的伯醇的那些官能團。衍生自仲或叔醇的酯官能團更容易在酸性條件下斷開，例如叔丁基或二苯基甲基酯。芐基酯對于能穩(wěn)定存在于用來除去保護基的氫解條件下的化合物中的羧酸官能團的保護是特別有用的。
術(shù)語“氨基保護基團”指任何常規(guī)的能被斷開生成游離氨基的氨基保護基團。優(yōu)選的保護基團是常規(guī)的氨基保護基團，例如那些用在縮氨酸合成中的基團，特別是氨基甲酸酯。特別優(yōu)選的這類氨基保護基團是叔丁氧羰基(BOC)，芐酯基(carbobenzyloxy)(CBZ)，和9-芴基甲氧基-羰基(FMOC)部分。每種這些保護基團在不影響其他基團的反應條件下是容易除去的。例如，F(xiàn)MOC和CBZ保護基團在用來除去BOC基團和其他酸性不穩(wěn)定基團的酸性條件下是穩(wěn)定的。CBZ基團在FMOC和BOC保護基團存在下能通過氫解除去，而FMOC基團在仲位環(huán)胺存在下是特別不穩(wěn)定的，BOC和CBZ基團在這種條件下不受影響。反應方案I 反應方案II制備結(jié)構(gòu)6的丙酮酸苯酯的方法經(jīng)α-羥基苯基乙酸 反應方案II概括了式6所示的丙酮酸苯酯的制備方法，其中X＝O、S或SO2的式I化合物可由其制備。式6化合物可由結(jié)構(gòu)3所示的相應的苯基乙酸或結(jié)構(gòu)1所示的取代苯得到，這概括在反應方案II中(例如，可參見Anderson，J.C.and Smith，S.C.Syn.Lett.，1990，107；Davis，F(xiàn).A.，Haque，M.S.，等人，J Org.Chem，1986，51，2402；Tanaka，M.；Kobayashi，T.andSakakura，T.；Angew.Chem.Iht.Ed.Engl，1984，23，518；Murahashi，S.andNaota，T.，Synthesis，1993，433)。通過結(jié)構(gòu)7所示的α-羥基苯乙酸制備結(jié)構(gòu)6所示的丙酮酸酯的方法在假設(shè)根據(jù)需要這些取代基在整個反應過程中用合適的保護基團被保護起來的條件下可以不考慮取代基R1和R2的性質(zhì)而認為該方法是一般方法。另外一種在Friedel-Crafts條件下，通過在結(jié)構(gòu)10所示的取代苯上的親電取代反應制備結(jié)構(gòu)6的丙酮酸酯的方法對于某些選定的化學領(lǐng)域的普通技術(shù)人員可以識別的R1和R2是有用的。
在其中R1和R2中一個是硝基，氯，溴或碘而另外一個是氫的式3化合物中，羧酸3或其低級烷基酯4(Ra＝低級烷基)是可以商購的。在得到的式3所示的原料酸或可商購的前驅(qū)體1、3或5沒有攜帶所需的取代基時，即，R1和R2不在本發(fā)明對R1和R2所下的定義范圍的情況下，得到的原料物質(zhì)的取代基可以由任何普通的公知的方法轉(zhuǎn)換成芳香取代基最終在結(jié)構(gòu)6的苯基丙酮酸中生成想要的取代模式，這適用于所有定義的R1和R2。在僅有結(jié)構(gòu)3的羧酸可得到的情況下，使用任何傳統(tǒng)的酯化方法能將這些羧酸轉(zhuǎn)化成相應的低級醇的酯4。所有在此以前討論的取代基相互轉(zhuǎn)化反應是生成式4化合物的低級烷基酯。
隨后能由相應的NO2化合物得到的式4的氨基取代化合物能重氮化生成相應的重氮化合物，該重氮化合物能與需要的低級烷基硫醇，全氟代低級烷基硫醇(參見Baleja，J.D.Synth.Comm.1984，14，215；Giam，C.S.；Kikukawa，K.，J Chem.Soc，Chem.Comm.1980，756；Kau，D.；Krushniski，J.H.；Robertson，D.W，J Labelled Compd Rad.1985，22，1045；Oade，S.；Shinhama，K.；Kim，Y.H.，Bull Chem Soc.Jpn.1980，53，2023；Baker，B.R.；etal，J.Org Chem.1952，17，164)，或堿土金屬氰化物現(xiàn)場生成其取代基之一是低級烷基硫代基，全氟代-低級烷基硫代基，或氰基而其它是氫的相應的式4化合物。如果需要，這些低級烷基硫代基或全氟代-低級烷基硫代化合物能接著轉(zhuǎn)化成相應的低級磺?；蛉?低級烷基磺?；〈氖?化合物。任何傳統(tǒng)的將烷基硫代取代基氧化成砜的方法能用來完成這種轉(zhuǎn)化。
在R1和R2均為氯或氟的式3化合物中，羧酸4或相應的結(jié)構(gòu)4的低級烷基酯是可以商購的。在僅有羧酸可得到的情況下，使用任何傳統(tǒng)的酯化方法能將它們轉(zhuǎn)化成相應的低級烷基醇的酯。如反應方案II所示，為了制備R1和R2(均為硝基的式3化合物，3，4-二硝基甲苯(R1＝R2＝NO2)可以用作原料物質(zhì)。其能轉(zhuǎn)化成相應的3，4-二硝基苯甲酸2。任何傳統(tǒng)的將芳基甲基轉(zhuǎn)化成相應的苯甲酸的方法能使用來完成這種轉(zhuǎn)化(參見Clark，R.D.；Muchowski，J.M.；Fisher，L.E.；Flippin，L.A.；Repke，D.B.；Souchet，M，Synthesis，1991，871)。結(jié)構(gòu)2的苯甲酸能用公知的Amdt Eistert方法同系化成相應的結(jié)構(gòu)3所示的苯基乙酸。
其中R1和R2取代基均為氨基的式4b化合物能從上面所述的式4a相應的二硝基化合物得到。任何傳統(tǒng)的將硝基還原成胺的方法能有效地進行這種轉(zhuǎn)化。其中R1和R2均為氨基的式4b化合物能通過前面描述的重氮化反應中間體4c制備其中R1和R2均為碘、溴、氯或氟的相應的式4d化合物。任何傳統(tǒng)的將氨基轉(zhuǎn)化成碘或溴的方法(參見Lucas，H.J.；Kennedy，E.R.Org.Synth.Coll.Vol，II 1943，351)能用來完成這種轉(zhuǎn)化。 4aR1＝R2＝NO24bR1＝R2＝NH2 4cR1＝R2＝N+24dR1＝R2＝Br or Ior Cl or F
如果需要制備其中R1和R2均為低級烷基硫代基或全氟代低級烷基硫代基的式4e，f的化合物，可以使用其中R1和R2為氨基的化合物4b作為原料物質(zhì)。任何將芳基氨基轉(zhuǎn)化成芳基硫代烷基的傳統(tǒng)方法可以用來完成這種轉(zhuǎn)化。如果需要制備其中R1和R2為低級烷基磺?；蛉图壨榛酋；氖?g，h化合物，可以使用其中R1和R2為低級烷基硫代基或全氟代低級烷基硫代基的相應的式4e，f的化合物作為原料物質(zhì)。任何傳統(tǒng)的將烷基硫代基取代物氧化成砜的方法可以用來完成這種轉(zhuǎn)化。 4e R1＝R2＝低級烷基硫代基 4g R1＝R2＝低級烷基磺?；?f R1＝R2＝全氟低級烷基硫代基 4h R1＝R2＝全氟低級烷基磺?；?i R1＝R2＝氰基如果需要制備其中R1和R2均為氰基的式4i化合物，可以使用式4b化合物作為原料物質(zhì)。任何用來將氨基轉(zhuǎn)化為氰基的傳統(tǒng)方法可以用來完成這種轉(zhuǎn)化。
其中R1和R2中一個是硝基而另一個是鹵素(例如氯)的式3的羧酸從文獻中可以了解(參見4-氯-3-硝基苯基乙酸，Tadayuki，S.；Hiroki，M.；Shinji，U.；Mitsuhiro，S.日本專利JP 7199504，ChemicalAbstracts 8059716；4-硝基-3-氯基苯基乙酸，Zhu，J.；Beugelmans，R.；Bourdet，S.；Chastanet，J.；Rousssi，G.J.Org.Chem.1995，60，6389；Beugelmans，R.；Bourdet，S.；Zhu，J.Tetrahedron Lett.1995，36，1279)。使用任何傳統(tǒng)的酯化方法能夠?qū)⑦@些羧酸轉(zhuǎn)化成相應的低級烷基酯4m，n。因此，如果需要制備其中R1和R2中的一個是硝基而另一個是低級烷基硫代基(4o，p)或全氟代低級烷基硫代基(4q，r)的式4化合物，可以使用其中R1和R2中一個是硝基而另一個是氯的相應的化合物作為原料物質(zhì)。在這個反應中，任何傳統(tǒng)的用低級烷基硫醇對芳族氯基團進行親電取代的方法都可以使用(例如，可以參見Singh，P.；Batra，M.S.；Singh，H，J Chem.Res.-S 1985(6)，S204；Ono，M.；Nakamura，Y.；Sata，S.；Itoh，I，Chem.Lett，1988，1393；Wohrle，D.；Eskes，M.；Shigehara，K.；Yamada，A，Synthesis，1993，194；Sutter，M.；Kunz，W，美國專利US 5169951)。如果其中R1和R2中的一個是硝基而另一個是低級烷基硫代基或全氟代低級烷基硫代基的式4化合物可以得到，則可以使用傳統(tǒng)的氧化方法將它們轉(zhuǎn)化成其中R1和R2中的一個是硝基而另一個是低級烷基磺?；?4s，t)或全氟代低級烷基磺?；?4u，v)的式4化合物。 4mR1＝NO2，R2＝Cl4oR1＝NO2，R2＝低級烷基硫代基4nR1＝Cl，R2＝NO24pR1＝低級烷基硫代基，R2＝NO24qR1＝NO2，R2＝全氟代低級烷基硫代基4rR1＝全氟代低級烷基硫代基R2＝NO2 4sR1＝NO2，R2＝低級烷基磺?；?tR1＝低級烷基磺?；?，R2＝NO24uR1＝NO2，R2＝全氟代低級烷基磺?；?vR1＝全氟代低級烷基磺?；?，R2＝NO2如果需要制備其中R1和R2中的一個是低級烷基硫代基而另一個是全氟代低級烷基硫代基的式4aa-ad化合物，可以使用其中R1和R2中的一個是氨基而另一個是低級烷基硫代基(4w，x)或全氟代低級烷基硫代基(4y，z)的化合物作為原料物質(zhì)。任何傳統(tǒng)的重氮化芳基氨基并且能夠現(xiàn)場與需要的低級烷基硫醇或全氟代烷基硫醇反應的方法可以用來完成這種轉(zhuǎn)化。 4wR1＝NH2，R2＝低級烷基硫代基4aaR1＝全氟代低級烷基硫代基R2＝低級烷基硫代基4xR1＝低級烷基硫代基，R2＝NH24abR1＝低級烷基硫代基，R2＝全氟代低級烷基硫代基4yR1＝NH2，R2＝全氟代低級烷基4acR1＝低級烷基硫代基，R2＝全硫代基 氟代低級烷基硫代基4zR1＝全氟代低級烷基硫代基，4adR1＝全氟代低級烷基硫代基，R2＝NH2R2＝低級烷基硫代基如果需要制備其中R1和R2中的一個是低級烷基硫代基，另一個是全氟代低級烷基磺酰基(4ae-4ah)的式4化合物，可以使用其中R1和R2中的一個是低級烷基硫代基而另一個是全氟代低級烷基硫代基的相應化合物(4aa-ad)作為原料物質(zhì)。任何傳統(tǒng)的將芳基硫醚基氧化成相應的砜基的方法可以用來完成這種轉(zhuǎn)化。 4aeR1＝全氟代低級烷基磺酰基，R2＝低級烷基磺酰基4afR1＝低級烷基磺?；琑2＝全氟代低級烷基磺?；?br> 4agR1＝低級烷基磺酰基，R2＝全氟代低級烷基磺?；?ahR1＝全氟代低級烷基磺酰基，R2＝低級烷基磺?；绻枰苽淦渲蠷1和R2中的一個是鹵素而另一個是低級烷基硫代基(4ai，aj)或全氟代低級烷基硫代基(4ak，al)的式4化合物，可以使用相應的其中R1和R2中的一個是氨基而另一個是低級烷基硫代基(4w，x)或全氟代低級烷基硫代基(4y，z)的化合物作為原料物質(zhì)。任何傳統(tǒng)的重氮化芳基氨基并且能夠現(xiàn)場轉(zhuǎn)化成芳基鹵代物的方法可以用來完成這種轉(zhuǎn)化。
如果需要制備其中R1和R2中的一個是氰基而另一個是鹵素(4aq，4ar)的式4化合物，可以使用其中R1和R2中的一個是硝基而另一個是氨基的式(4as，4at)化合物作為原料物質(zhì)。這種轉(zhuǎn)換能通過式(4as，4at)的化合物的氨基轉(zhuǎn)化成相應的鹵代化合物(4au，4av)來實現(xiàn)，該鹵代化合物反過來能進一步轉(zhuǎn)化成式(4aq，4ar)化合物。 4aiR1＝鹵素，R2＝低級烷基硫代基4aiR1＝低級烷基硫代基，R2＝鹵素4akR1＝鹵素，R2＝全氟代低級烷基硫代基4alR1＝全氟代低級烷基硫代基，R2＝鹵素如果需要制備其中R1和R2中的一個是氰基而另一個是低級烷基硫代基或全氟代低級烷基硫代基(4ba-4be)的式4化合物，可以使用式(4as，4at)化合物作為原料物質(zhì)。任何傳統(tǒng)的將氨基轉(zhuǎn)化成硫代烷基的方法都可以用來完成這種轉(zhuǎn)化。
如果需要制備其中R1和R2中的一個是氰基而另一個是低級烷基磺?；蛉图壨榛酋；?4bf-4bi)的式4化合物，可以使用相應的式(4ba-4be)化合物作為原料物質(zhì)。任何傳統(tǒng)的將硫醚轉(zhuǎn)化成相應的砜的方法都可以用來完成這種轉(zhuǎn)化。
如果需要制備其中R1和R2中的一個是鹵素而另一個是低級烷基磺?；蛉图壨榛酋；?4am-4ap)的式4化合物，可以使用相應的其中R1和R2中的一個是鹵素而另一個是低級烷基硫代基(4ai，aj)或全氟代低級烷基硫代基(4ak，al)的化合物作為原料物質(zhì)。任何傳統(tǒng)的將芳基硫醚氧化成相應砜的方法都可以用來完成這種轉(zhuǎn)化。 4amR1＝鹵素，R2＝低級烷基磺?；?baR1＝CN，R2＝低級烷基硫代基4anR1＝低級烷基磺?；?，R2＝鹵素4bcR1＝低級烷基硫代基，R2＝CN4aoR1＝鹵素，R2＝全氟代低級烷基磺4bdR1＝CN，R2＝全氟代低級烷基硫?；? 代基4apR1＝全氟代低級烷基磺?；?，R2＝4beR1＝全氟代低級烷基硫代基，鹵素 R2＝CN4aqR1＝氰基，R2＝鹵素4bfR1＝CN，R2＝低級烷基砜4arR1＝鹵素，R2＝氰基4bgR1＝低級烷基砜，R2＝CN4asR1＝硝基，R2＝氨基4bhR1＝CN，R2＝全氟代低級烷基砜4atR1＝氨基，R2＝硝基4auR1＝硝基，R2＝鹵素4avR1＝鹵素，R2＝硝基在結(jié)構(gòu)6所示的化合物中，在R1和R2中的一個或兩個是氨基的情況下，氨基在進行進一步轉(zhuǎn)化反應之前用傳統(tǒng)的氨基保護基團保護。
其中X是O或S的式I化合物的制備方法概括在反應方案I中。式6丙酮酸酯通過使丙酮酸酯和合適的磺?；卵苌锓磻D(zhuǎn)化成相應的式9芳基磺?；ｋ?。這種反應能通過傳統(tǒng)的芳基磺?；ｋ驴s合反應條件方便地進行，例如通過在惰性溶劑中回流丙酮酸酯6和對甲苯磺?；ｋ逻M行，優(yōu)選芳烴如苯或甲苯，優(yōu)選甲苯。這種反應可以在設(shè)計的裝置中進行以使含有共沸反應副產(chǎn)物水的回流溶劑在回流到反應燒瓶以前通過除水劑如分子篩。在這種方式下，生成腙的反應可以加速完成。式9的對甲苯磺?；昴芙又诰埯u化有機溶劑例如三乙胺或二異丙胺中用叔胺堿處理，優(yōu)選在氯化烴溶劑例如二氯甲烷中用三乙胺處理獲得相應的式11所示的重氮酯。這種轉(zhuǎn)化通常在0℃至40℃下進行，優(yōu)選在環(huán)境溫度下進行。
其中X是O的結(jié)構(gòu)12的化合物可以通過在催化量的乙酸銠(II)存在下使式11的重氮酯與合適的環(huán)烷基、環(huán)烯基或非芳族雜環(huán)醇反應來制備。該反應可在惰性溶劑中方便地進行，優(yōu)選在0℃至40℃下的二氯甲烷中進行，優(yōu)選在室溫下進行。
以類似的方式，其中X是S的結(jié)構(gòu)12的化合物可以通過在催化量的乙酸銠(II)存在下使式11的重氮酯與合適的環(huán)烷基、環(huán)烯基或非芳族雜環(huán)硫醇反應來制備。該反應可在惰性溶劑中方便地進行，優(yōu)選在0℃至混合物的回流溫度下的二氯甲烷中進行，優(yōu)選在回流溫度下進行。
反應方案III 其中X是C(O)的式I化合物的制備概括在反應方案I中。更具體地說，如反應方案III所示，使用兩種相關(guān)的方法來制備其中X是C(O)的結(jié)構(gòu)III化合物。在第一種方法中，結(jié)構(gòu)3的苯基乙酸首先通過有機化學領(lǐng)域中普通技術(shù)人員公知的任何方法轉(zhuǎn)化成相應的酯4。舉一個例子，在惰性溶劑中例如在甲醇或二乙醚或四氫呋喃或其混合物中的結(jié)構(gòu)3的酸，可以用過量的重氮甲烷的乙醚溶液處理或在催化量的硫酸存在下用甲醇處理酸3。
這樣生成的結(jié)構(gòu)4的酯可以用惰性溶劑如二乙基醚或四氫呋喃優(yōu)選四氫呋喃中的非親核強堿例如二異丙基氨基化鋰或雙(三甲基甲硅烷基)氨基化鋰來脫質(zhì)子。該脫質(zhì)子反應可以方便地在-50℃至-100℃優(yōu)選在-78℃的無水條件下的惰性氣體中進行。用這種方式形成的鋰化物可以現(xiàn)場與結(jié)構(gòu)19的環(huán)烷基或環(huán)烯基?；确磻?，此時該反應溫度可以保持在-50℃至-100℃，優(yōu)選在-78℃下以獲得其中X＝C(O)的結(jié)構(gòu)12的化合物。
結(jié)構(gòu)12的化合物(Ra＝非支鏈低級烷基)中堿性不穩(wěn)定酯基團的斷裂可以根據(jù)已知的方法進行。例如，結(jié)構(gòu)12的酯可以用堿金屬氫氧化物例如氫氧化鉀、氫氧化鈉或氫氧化鋰，優(yōu)選氫氧化鉀，在惰性溶劑體系中例如乙醇和水的混合物中處理。該皂化反應一般在0攝氏度至混合物的回流溫度下，優(yōu)選在室溫下進行以生成結(jié)構(gòu)14的酸。
結(jié)構(gòu)14的羧酸與胺R6-NH2(13)的偶合獲得結(jié)構(gòu)III的酰胺的反應可以使用本領(lǐng)域普通技術(shù)人員公知的方法來進行。例如，該反應可以方便地用胺13處理結(jié)構(gòu)14的羧酸來進行，在叔胺堿例如三乙胺或二乙基異丙胺，和偶合劑例如O-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3，-四甲基脲鎓六氟代磷酸鹽(HBTU)或苯并三唑-1-基氧基(二甲氨基)膦鎓六氟代磷酸鹽(BOP)的存在下。該反應可以在惰性溶劑例如氯化烴(如二氯甲烷)或N，N-二甲基甲酰胺中，在0攝氏度至室溫下，優(yōu)選在室溫下，任選存在加快反應速度的物質(zhì)例如1-羥基苯并三唑下進行。
或者，為了制備結(jié)構(gòu)III的酰胺，如反應方案III所示，結(jié)構(gòu)3的羧酸能通過轉(zhuǎn)化為混合酸酐來激活，然后可以與胺13在催化劑存在下反應以提供結(jié)構(gòu)18的酰胺，或該羧酸通過使用標準的縮氨酸偶合劑如HBTU來激活。接著結(jié)構(gòu)18的酰胺可以用惰性溶劑如二乙基醚或四氫呋喃優(yōu)選四氫呋喃中的非親核強堿例如二異丙基氨基化鋰或雙(三甲基甲硅烷基)氨基化鋰來脫質(zhì)子。該脫質(zhì)子反應可以方便地在-50℃至-100℃，優(yōu)選在-78℃的無水條件下的惰性氣體中進行。這樣生成的鋰化物中間體可以現(xiàn)場與結(jié)構(gòu)19的環(huán)烷基或環(huán)烯基?；确磻藭r該反應溫度可以保持在-50℃至-100℃，優(yōu)選在-78℃下以獲得其中X＝C(O)的結(jié)構(gòu)III的化合物。
為了制備結(jié)構(gòu)15的伯酰胺，將結(jié)構(gòu)14的羧酸轉(zhuǎn)化成活性物，優(yōu)選?；龋浣又梢院桶彼谋槐Ｗo形式六甲基二硅氮烷反應，如果現(xiàn)場有三甲基甲硅烷基可以獲得水解脫除后的伯位酰胺。結(jié)構(gòu)14的羧酸在惰性溶劑中例如氯化烴(如二氯甲烷)或芳烴如苯中用草酰氯處理轉(zhuǎn)化成相應的?；?。該反應可以在存在催化量的N，N-二甲基甲酰胺，在0度至約室溫的溫度下，優(yōu)選約0度下進行。隨后的中間體?；群瓦^量的1，1，1，3，3，3-六甲基二硅氮烷的反應可以現(xiàn)場在0度至約室溫的溫度下，優(yōu)選約室溫下進行。生成的雙(三甲基甲硅烷基)酰胺在室溫下用大量過量的含5％硫酸的甲醇處理獲得結(jié)構(gòu)15的脫甲硅烷基的伯位酰胺。
結(jié)構(gòu)II的脲用三種方法制備(a)根據(jù)上面描述的衍生自結(jié)構(gòu)14的羧酸的酰氯和單取代的脲16反應；(b)由結(jié)構(gòu)15的伯位酰胺和結(jié)構(gòu)17的異氰酸酯反應；(c)由式12的酯(Ra＝低級烷基)和單取代脲(16)在堿金屬醇鹽存在下反應。
在上述第一種方法中，結(jié)構(gòu)14的羧酸用草酰氯處理的反應是按照上面所描述的反應進行，只是在氟苯中進行，其衍生的酰基氯可以現(xiàn)場與脲或單取代的脲(16)反應。該反應可以在50℃至約混合物的回流溫度下，優(yōu)選約70℃下進行生成結(jié)構(gòu)II的脲。在另一種方案中，結(jié)構(gòu)15的伯酰胺可以和結(jié)構(gòu)17的異氰酸酯在惰性溶劑例如芳烴，優(yōu)選甲苯中反應。該反應通?？梢栽?0℃至約混合物的回流溫度下，優(yōu)選在回流溫度下進行生成結(jié)構(gòu)II的脲。
對于其中X是S的式I的化合物而言，結(jié)構(gòu)II和III的硫醚(X＝S)可以使用有機化學領(lǐng)域內(nèi)普通技術(shù)人員公知的方法轉(zhuǎn)化成結(jié)構(gòu)I的砜(X＝SO2)。例如，該轉(zhuǎn)化可以使用兩步法實現(xiàn)。第一步，用氧化劑，優(yōu)選高碘酸鈉在含水甲醇中處理結(jié)構(gòu)II和III的硫醚(X＝S)生成結(jié)構(gòu)II和III的中間體亞砜(X＝SO)。該方應可以方便地在50℃至約室溫下，優(yōu)選在約室溫下進行。第二步，在含水甲醇中用氧化劑優(yōu)選高錳酸鉀處理中間體亞砜II和III(X＝SO)生成結(jié)構(gòu)I的砜(X＝SO2)。該方應可以方便地在50℃至約室溫下，優(yōu)選在約室溫下進行。
式I的化合物具有連接基團XR3和酸酰胺取代基的不對稱碳原子。根據(jù)本發(fā)明，該基團優(yōu)選的立體構(gòu)型是R，除了在其中X是羰基的情況下，優(yōu)選的對映體是“S”外。在其中R3是不對稱(例如環(huán)烷烯)的情況下，連接“X”原子的環(huán)碳位置處生成附加的手性中心。在這個中心處，外消旋化合物和與R和S構(gòu)型相應的化合物是本發(fā)明的一部分。
如果需要制備式I化合物的R和S異構(gòu)體，該化合物能用任何傳統(tǒng)的化學手段分離成這些異構(gòu)體。優(yōu)選的化學手段是使式14(完全同上面的14)的化合物與旋光堿(active base)反應。任何傳統(tǒng)的光學旋光堿都能用來進行該溶解。其中優(yōu)選的旋光堿是旋光胺堿，例如α-甲基苯甲胺，奎寧，脫氫松香胺和α-甲基萘胺。在用旋光有機堿分離有機酸中采用的任何傳統(tǒng)的技術(shù)可以用來溶解有機酸。
在溶解步驟中，式14的化合物在惰性有機溶劑介質(zhì)中和旋光堿反應制備具有結(jié)構(gòu)14的化合物的R和S異構(gòu)體的旋光胺鹽。在這些鹽的生成中，溫度和壓力不是關(guān)鍵的并且該鹽的生成能在室溫和大氣壓下發(fā)生。該R和S鹽能用任何傳統(tǒng)的方法例如分步結(jié)晶來分離。結(jié)晶后，每種鹽能以R和S構(gòu)型通過酸水解分別轉(zhuǎn)化成結(jié)構(gòu)14的化合物。其中優(yōu)選的酸是稀含水酸，即從約0.001N至2N的含水酸如含水硫酸或含水氫氯酸。用這種溶解方法產(chǎn)生的式14的構(gòu)型能通過整個反應方案來制備需要的式I的R或S異構(gòu)體。
R和S異構(gòu)體的分離也能使用式14的化合物相應的任何低級烷基酯的酶法酯水解實現(xiàn)(例如，參見Ahmar，M.； Girard，C.；Bloch，R，TetrahedronLett，1989，7053)，該水解方法生成相應的手性酸和手性酯。該酯和酸能用任何傳統(tǒng)的分離酸和酯的方法來分離。優(yōu)選的溶解式14的化合物的外消旋物的方法是通過生成相應的非對映體酯或酰胺。這些非對映體酯或酰胺能通過用手性醇或手性胺偶合式14的羧酸來制備。該反應能使用任何傳統(tǒng)的以醇或胺偶合羧酸的方法進行。然后式14的化合物相應的非對映體用任何傳統(tǒng)的分離方法來分離。接著生成的純非對映體酯或酰胺能水解生成相應的純R或S異構(gòu)體。該水解反應能用任何傳統(tǒng)的水解沒有外消旋化的酯或酰胺的方法進行。
根據(jù)其活化葡糖激酶的能力，上面的式I化合物能用作治療II型糖尿病的醫(yī)藥。因此，正如前面所提及的那樣，含有式I化合物的醫(yī)藥也是本發(fā)明的一個目的，這些醫(yī)藥的的制備方法也是本發(fā)明的目的，該方法包括將一種或多種式I化合物和一種或多種其他藥學上有價值的物質(zhì)(如果需要)形成草藥給藥形式，例如將式I的化合物與藥學上可接受的載體和/或助劑結(jié)合。
該藥品組合物可以口服，例如以片劑，糖衣片劑，糖衣丸，硬或軟膠囊，溶液，乳劑或懸浮液的形式給藥。也L可以直腸給藥，例如使用栓劑；局部或皮膚給藥，例如使用軟膏，乳劑，凝膠或溶液；或腸道外給藥，例如靜脈內(nèi)的，肌肉內(nèi)的，皮下的，鞘內(nèi)注射的或經(jīng)由皮膚的，例如使用可注射的溶液。另外，給藥可以舌下或以霧狀例如以噴霧的形式進行。對于片劑、糖衣片劑，糖衣丸或硬膠囊的制備而言，本發(fā)明的化合物可以和藥學上惰性的無機或有機賦形劑混合。對于片劑，糖衣丸或硬膠囊的合適的賦形劑的例子包括乳糖，玉米淀粉或其衍生物，滑石或硬脂酸或其鹽。合適的軟膠囊使用的賦形劑包括例如蔬菜油，石蠟，脂肪，半固體或液體多醇等；根據(jù)活性成分的性質(zhì)，對于軟膠囊而言可能在任何情況下都根本不需要賦形劑。對于溶液和糖漿的制備而言，可以使用的賦形劑包括例如水，多醇，蔗糖，轉(zhuǎn)化糖和葡萄糖。對于可注射的溶液而言，可以使用的賦形劑包括例如水，醇，多醇，甘油和蔬菜油。對于栓劑和局部或皮膚應用而言，可以使用的賦形劑包括例如天然的或硬油，石蠟，脂肪和半固體或液體多醇。該藥物組合物也可以包含防腐劑，增溶劑，穩(wěn)定劑，加濕劑，乳化劑，甜味劑，著色劑，除臭劑，改變滲透壓的鹽，緩沖劑，糖衣劑或抗氧劑。如上所述，他們也可以包含其他藥學上有價值的試劑。先決條件是所有用在制劑的制備中的助劑是非毒性的。
優(yōu)選的使用形式是靜脈內(nèi)的，肌肉內(nèi)的或口服的，最優(yōu)選口服的。式(I)化合物的有效量給藥的劑量取決于具體的活性成分的性質(zhì)，病人的年齡和要求以及施用的方式。一般可以考慮劑量約為1-100mg/kg體重每天。
在下述活性葡糖激酶的合成中描述的所有化合物都要根據(jù)生物活性實施例中描述的檢定方法進行體外實驗。
由下述實施例可以更好地理解本發(fā)明，這些實施例是為了說明本發(fā)明，而不是限定本發(fā)明，本發(fā)明的保護范圍將由隨后的權(quán)利要求書所定義。
實施例1外消旋-2-環(huán)戊基氧基-2-(3，4-二氯-苯基)-N-噻唑-2-基-乙酰胺的制備 將氯化鋁(19.96g 149.6mmol)在二氯甲烷(85ml)中的溶液冷卻到0℃，接著緩慢的添加甲基草酰氯(6.6mL 71.43mmol)并且在0-5℃下攪拌混合物1h。添加1，2-二氯苯(7.7mL，68.03mmol)，在整個添加過程中反應溫度維持在5℃以下。在0-5℃下再攪拌混合物1h，升溫到25℃并且在該溫度下攪拌16h。然后緩慢的將反應物倒進冰/水漿中用二氯甲烷(3×50mL)萃取。該混合的有機層用硫酸鈉干燥然后減壓蒸發(fā)獲得黃色固體。該產(chǎn)物用快速色譜儀提純(Merck硅膠60，230-400目，90/10己烷/乙基乙酸酯)以獲得黃色固體(3，4二氯-苯基)-氧代-乙酸甲基酯(1.59g，產(chǎn)率10％)EI-HRMS m/e計算值C9H6O3Cl2(M+)231.9694，理論值231.9698。
為了干燥圓底燒瓶，使其與填充有3分子篩的Dean-Stark捕集器和回流冷凝器套接，在通氬氣下，在甲苯(20mL)中加入(3，4-二氯-苯基)-氧代-乙酸甲基酯(1.00g，4.29mmol)和對甲苯磺酰基肼(1.03g，4.29mmol)。該反應物在110℃下加熱16h，接著冷卻到25℃并且在真空下除去溶劑獲得淺黃色固體。該產(chǎn)物由熱甲醇結(jié)晶后獲得漂白色固體(3，4-二氯-苯基)-(4-甲苯磺?；鶃嗠禄?-乙酸甲基酯(1.45g，84％產(chǎn)率)EI-HRMSm/e calcd C16H14Cl2N2O4S(M+)400.0051，理論值400.0057。
在通氬氣的干燥的燒瓶中，在25℃下加入(3，4-二氯-苯基)-(4-甲苯磺?；鶃嗠禄?-乙酸甲基酯(1.45g，3.61mmol)在含三乙胺(0.55mL，3.97mmol)的二氯甲烷(20mL)的溶液。接著在25℃下攪拌該亮黃色溶液1h，接著在在真空下除去溶劑獲得亮黃色固體。該產(chǎn)物用快速色譜儀提純(Merck硅膠60，230-400目，7/1/0.5己烷/二氯甲烷/甲醇)以獲得亮黃桔色固體重氮基-(3，4-二氯-苯基)-乙酸甲基酯(814 mg，產(chǎn)率92％)EI-HRMSm/e計算值C9H6Cl2N2O2(M+)243.9806，理論值243.9800。
在通氬氣的干燥燒瓶中，加入其中添加了二氯甲烷(10mL)和環(huán)戊醇(0.25mL，2.8mmol)的重氮基-(3，4-二氯-苯基)-乙酸甲基酯(350mg 1.4mmol)。在25℃下攪拌該溶液，當加入乙酸銠(II)二聚物(13mg，0.028mmol)時，立刻注意到有氣體逸出并且其顏色由亮黃色變?yōu)樗G色。該溶液在25℃下攪拌1h，然后將其倒入水中并分離層。該含水層用二氯甲烷(3×15mL)洗滌，然后在用硫酸鈉干燥后混合有機層并且真空濃縮。該殘留物用快速色譜儀提純(Merck硅膠60，230-400目，95/5己烷/乙基乙酸酯)以獲得純凈無色油外消旋-環(huán)戊基氧基-(3，4-二氯-苯基)-乙酸甲基酯(217mg，產(chǎn)率64％)EI-HRMS m/e計算值C14H16Cl2N2O3(M+)302.0477，理論值302.0484。
外消旋-環(huán)戊基氧基-(3，4-二氯-苯基)-乙酸甲基酯(266mg，0.877mmol)在乙醇(10mL)中的溶液用水(1mL)中的氫氧化鉀(123mg，2.19mmol)溶液處理，并且在25℃下攪拌該混合物。3h后，該反應物用水(5mL)稀釋并且在真空下除去乙醇。然后用1N鹽酸酸化該含水層至PH2并且用二氯甲烷(3×15mL)萃取。該混合有機相層用硫酸鈉干燥，過濾并且減壓蒸發(fā)。該殘留物用快速色譜儀提純(Merck硅膠60，230-400目，95/5氯仿/附加1％乙酸的甲醇)以獲得白色固體外消旋-環(huán)戊基氧基-(3，4-二氯-苯基)-乙酸(223mg，產(chǎn)率88％)，mp87.5-89.9℃EI-HRMS m/e計算值C13H14Cl2O3(M+)288.0320，理論值288.0332。
外消旋-環(huán)戊基氧基-(3，4-二氯-苯基)-乙酸(52mg，0.17mmol)在二氯甲烷(10mL)中的溶液用O-(1H-苯并三唑-1-基)-1，1，3，3，-四甲基脲六氟代磷酸鹽(HBTU)(72mg，0.19mmol)，二異丙基乙胺(0.09mL，0.52mmol)和2-氨基噻唑(26mg，0.25mmol)處理。然后在25℃下攪拌得到的該棕色-桔色溶液16h。然后該反應物用水(5mL)稀釋并且用乙基乙酸酯(3×15mL)萃取。該混合有機相層用水(1×10mL)，1N氫氧化鈉溶液(1×10mL)，1N鹽酸(1×10mL)和鹽水(1×10mL)洗滌，然后用硫酸鈉干燥，并且真空濃縮。該產(chǎn)物用快速色譜儀提純(Merck硅膠60，230-400目，90/10己烷/以及乙酸酯)以獲得白色泡沫外消旋-環(huán)戊基氧基-2-(3，4-二氯-苯基)-N-噻唑-2-基-乙酰胺(45mg，產(chǎn)率70％)EI-HRMS m/e計算值C16H16Cl2O2N2S(M+)370.0309，理論值370.0309。
實施例2外消旋-2-環(huán)己基氧基-2-(3，4-二氯-苯基)-N-噻唑-2-基-乙酰胺的制備 在通氬氣的干燥的25mL圓底燒瓶中，在二氯甲烷(10mL)中加入重氮基-(3，4-二氯-苯基)-乙酸甲基酯(來自實施例1，550mg2.24mmol)和環(huán)己醇(0.47mL，4.49mmol)。在25℃下攪拌該溶液，當加入乙酸銠(II)二聚物(20mg，0.045mmol)時，立刻觀察到有氣體逸出并且其顏色由亮黃色變?yōu)樗G色。該溶液在25℃下攪拌1h后，將其倒入水中并分離層。該含水層用二氯甲烷(3×15mL)洗滌，然后在用硫酸鈉干燥后混合有機層并且減壓蒸發(fā)。該殘留油用快速色譜儀提純(Merck硅膠60，230-400目，98/2己烷/乙基乙酸酯)以獲得純凈無色油外消旋-環(huán)己基氧基-(3，4-二氯-苯基)-乙酸甲基酯(527mg，產(chǎn)率74％)EI-HRMS m/e計算值C15H18Cl2O3(M+)316.0633，理論值316.0646。
外消旋-環(huán)己基氧基-(3，4-二氯-苯基)-乙酸甲基酯(527mg，1.66mmol)在乙醇(15mL)中的溶液用水(2mL)中的氫氧化鉀(233mg，4.15mmol)溶液處理，并且在25℃下攪拌該混合物。3h后，該反應物用水(5mL)稀釋并且在真空下除去乙醇。然后用1N鹽酸酸化該含水層至PH2并且用二氯甲烷(3×15mL)萃取。該混合有機相層用硫酸鈉干燥，過濾并且真空濃縮。該殘留油用快速色譜儀提純(Merck硅膠60，230-400目，95/5氯仿/附加1％乙酸的甲醇)以獲得無色油外消旋-環(huán)己基氧基-(3，4-二氯-苯基)-乙酸(487mg，產(chǎn)率97％)EI-HRMS m/e計算值C14H16Cl2O3(M+)302.0477，理論值302.0486。
外消旋-環(huán)己基氧基-(3，4-二氯-苯基)-乙酸(102mg，0.34mmol)在二氯甲烷(10mL)中的溶液用苯并三唑-1-基氧基(二甲氨基)膦鎓六氟代磷酸鹽(BOP)試劑(223mg，0.51mmol)，三乙胺(0.14mL，0.52mmol)和2-氨基噻唑(51mg，0.51mmol)在25℃下處理。在25℃下攪拌得到的該棕色-桔色溶液16h后，該反應物用水(10mL)稀釋并且用乙基乙酸酯(3×15mL)萃取。該混合有機相層用水(1×10mL)，1N氫氧化鈉溶液(1×10mL)，1N鹽酸(1×10mL)和鹽水(1×10mL)洗滌，然后用硫酸鈉干燥，并且真空蒸發(fā)。該產(chǎn)物用快速色譜儀提純(Merck硅膠60，230-400目，90/10己烷/乙基乙酸酯)以獲得白色泡沫外消旋-2-環(huán)己基氧基-2-(3，4-二氯-苯基)-N-噻唑-2-基-乙酰胺(115mg，產(chǎn)率88％)EI-HRMS m/e計算值C17H18Cl2O2N2S(M+)384.0466，理論值384.0469。
實施例3外消旋-2-(環(huán)己-2-烯基氧基)-2-(3，4-二氯-苯基)-N-噻唑-2-基-乙酰胺的制備 在通氬氣的干燥的25mL圓底燒瓶中，加入重氮基-(3，4-二氯-苯基)-乙酸甲基酯(來自實施例1，552mg，2.25mmol)，二氯甲烷(10mL)和外消旋-2-環(huán)己烯-1-醇(0.45mL，4.51mmol)。在25℃下攪拌該溶液然后加入乙酸銠(II)二聚物(20mg，0.045mmol)。氣體立刻開始蒸發(fā)并且其顏色由亮黃色變?yōu)樗G色。該溶液在25℃下攪拌1h后，將其倒入水中并分離層。該含水層用二氯甲烷(3×15mL)洗滌，然后在用硫酸鈉干燥混合有機層并且減壓蒸發(fā)。該殘留油用快速色譜儀提純(Merck硅膠60，230-400目，98/2己烷/乙基乙酸酯)以獲得淺黃色油外消旋-(環(huán)己-2-烯基氧基)-(3，4-二氯-苯基)-乙酸甲基酯(552mg，產(chǎn)率78％)EI-HRMS m/e計算值C15H16Cl2O3(M+)314.0468，理論值314.0476。
外消旋-(環(huán)己-2-烯基氧基)-(3，4-二氯-苯基)-乙酸甲基酯(552mg，0.877mmol)在乙醇(10mL)中的溶液用含水(2mL)和氫氧化鉀(246mg，4.37mmol)的溶液處理，并且在25℃下攪拌該混合物。3h后，該反應物用水(10mL)稀釋并且在真空下除去乙醇。然后用1N鹽酸酸化該含水層至PH2并且用二氯甲烷(3×15mL)萃取。該混合有機相層用硫酸鈉干燥，過濾并且真空濃縮。該產(chǎn)物用快速色譜儀提純(Merck硅膠60，230-400目，95/5氯仿/附加1％乙酸的甲醇)以獲得黃色油外消旋-(環(huán)己-2-基氧基)-(3，4-二氯-苯基)-乙酸(520mg，產(chǎn)率99％)EI-HRMS m/e計算值C14H14Cl2O3(M+)300.0320，理論值300.0324。
外消旋-(環(huán)己-2-基氧基)-(3，4-二氯-苯基)-乙酸(89mg，0.28mmol)在二氯甲烷(10mL)中的溶液用BOP試劑(187mg，0.42mmol)，三乙胺(0.12mL，0.85mmol)和2-氨基噻唑(42mg，0.42mmol)在25℃下處理。在25℃下攪拌得到的該棕色-桔色溶液16h，然后該反應物用水(10mL)稀釋并且用乙基乙酸酯(3×15mL)萃取。該混合有機相層用水(1×10mL)，1N氫氧化鈉溶液(1×10mL)，1N鹽酸(1×10mL)和鹽水(1×10mL)洗滌，然后用硫酸鈉干燥并且真空蒸發(fā)。該產(chǎn)物用快速色譜儀提純(Merck硅膠60，230-400目，95/5己烷/乙基乙酸酯)以獲得白色泡沫外消旋-2-(環(huán)己-2-烯基氧基)-2-(3，4-二氯-苯基)-N-噻唑-2-基-乙酰胺(99mg，產(chǎn)率92％)EI-HRMS m/e計算值C17H16Cl2O2N2S(M+)382.0309，理論值382.0308。
實施例4外消旋-2-(3，4-二氯-苯基)-2-[(四氫-吡喃-4-基)氧基]-N-噻唑-2-基-乙酰胺的制備 在通氬氣的干燥的25mL圓底燒瓶中，加入重氮基-(3，4-二氯-苯基)-乙酸甲基酯(來自實施例1，614mg，2.51mmol)，二氯甲烷(10mL)和四氫-4H-吡喃-4-醇(0.50mL，5.01mmol)。在25℃下攪拌該溶液然后加入乙酸銠(II)二聚物(22mg，0.05mmol)。氣體立刻開始蒸發(fā)并且其顏色由亮黃色變?yōu)樗G色。該溶液在25℃下攪拌1h后，將其倒入水(10mL)中并分離層。該含水層用二氯甲烷(3×15mL)洗滌，然后用硫酸鈉干燥混合有機層并且真空濃縮。該殘留物用快速色譜儀提純(Merck硅膠60，230-400目，98/2己烷/乙基乙酸酯)以獲得純凈無色油外消旋-(3，4-二氯-苯基)-[(四氫-吡喃-4-基)氧基]-乙酸甲基酯(598mg，產(chǎn)率75％)EI-HRMS m/e計算值C14H16Cl2O4(M+)318.0426，理論值318.0412。
外消旋-(3，4-二氯-苯基)-[(四氫-吡喃-4-基)氧基]-乙酸甲基酯(598mg，1.87mmol)在乙醇(15mL)中的溶液用含水(2mL)和氫氧化鉀(262mg，4.68mmol)的溶液處理，并且在25℃下攪拌該混合物。3h后，該反應物用水(10mL)稀釋并且在真空下除去乙醇。然后用1N鹽酸酸化該含水層至PH2并且用二氯甲烷(3×15mL)萃取。該混合有機相層用硫酸鈉干燥，過濾并且減壓蒸發(fā)。該產(chǎn)物用快速色譜儀提純(Merck硅膠60，230-400目，95/5氯仿/附加1％乙酸的甲醇)以獲得純凈無色油外消旋-(3，4-二氯-苯基)-[(四氫-吡喃-4-基)氧基]-乙酸]-(544mg，產(chǎn)率95％)EI-HRMS m/e計算值C13H14Cl2O4(M+)304.0269，理論值304.0259。
外消旋-(3，4-二氯-苯基)-[(四氫-吡喃-4-基)氧基]-乙酸(90mg，0.30mmol)在二氯甲烷(10mL)中的溶液用BOP試劑(195mg，0.44mmol)，三乙胺(0.12mL，0.88mmol)和2-氨基噻唑(44mg，0.44mmol)在25℃下處理。在25℃下攪拌得到的該棕色-桔色溶液16h后，該反應物用水(10mL)稀釋并且用乙基乙酸酯(3×15mL)萃取。該混合有機相層用水(1×10mL)，1N氫氧化鈉溶液(1×10mL)，1N鹽酸(1×10mL)和鹽水(1×10mL)洗滌，然后用硫酸鈉干燥并且真空蒸發(fā)。該殘留物用快速色譜儀提純(Merck硅膠60，230-400目，90/10己烷/乙基乙酸酯)以獲得白色泡沫外消旋-2-(3，4-二氯-苯基)-2-[(四氫-吡喃-4-基)氧基]-N-噻唑-2-基-乙酰胺(98mg，產(chǎn)率86％)EI-HRMS m/e計算值C16H16Cl2O3N2S(M+)386.0258，理論值386.0261。
實施例5外消旋-2-環(huán)戊基氧基-2-(3，-二氯-苯基)-N-吡啶-2-基-乙酰胺的制備 外消旋-環(huán)戊基氧基-(3，4-二氯-苯基)-乙酸(來自實施例1，50mg，0.17mmol)和三乙胺(0.07mL，0.52mmol)在甲苯中(5mL)中的溶液，首先用2，4，6-三氯苯甲?；?0.03mL，0.19mmol)冷卻到0℃并且在0℃下攪拌該混合物。1h后，添加2-氨基吡啶(20mg，0.21mmol)和4-二甲基氨基吡啶(5mg，0.035mmol)并在在0℃下繼續(xù)攪拌該混合物1h。檢查該反應是否完全，然后用水(10mL)稀釋并且用二氯甲烷(3×15mL)萃取。該混合有機相萃取物用硫酸鈉干燥并且真空濃縮。該殘留物用快速色譜儀提純(Biotage Flash 12M色譜柱，80/20己烷/乙基乙酸酯)以獲得白色泡沫外消旋-2-環(huán)戊基氧基-2-(3，4-二氯-苯基)-N-吡啶-2-基-乙酰胺(48mg，產(chǎn)率76％)EI-HRMS m/e計算值C18H18N2O2Cl2(M+)364.0745，理論值364.0746。實施例6外消旋-2-(3-氯-4-甲烷磺?；?苯基)-2-環(huán)戊基氧基-N-噻唑-2-基-乙酰胺的制備 將冷卻到0℃的氯化鋁(105.3g，789.4mmol)在氯仿(300ml)中的溶液，用甲基草?；?46.52mL，505.8mmol)在氯仿(300mL)中的溶液處理并且在0℃下攪拌該反應物。30min后，用2-氯茴香硫醚(75.00g，472.7mmol)在氯仿(300mL)的溶液處理該反應物并使該反應緩慢升到25℃。4h后，然后緩慢的將該反應物到進冰(2L)中保持15min。然后通過次乙酰塑料過濾以除去鋁鹽并用二氯甲烷(3×50mL)萃取濾液。然后用飽和重碳酸鈉(1×100mL)溶液洗滌該有機萃取物，用硫酸鎂干燥，過濾并減壓蒸發(fā)。分離出淺黃色固體，不需進一步提純的該產(chǎn)物(3-氯-4-甲基硫烷基-苯基)-氧代-乙酸甲基酯(39.22g，產(chǎn)率34％)，mp67.9-70.2℃EI-HRMS m/e計算值C10H9ClSO3(M+)243.9961，理論值243.9958。
為在25℃下得到澄清的(3-氯-4-甲基硫烷基-苯基)-氧代-乙酸甲基酯(5.00g，20.43mmol)在甲醇1(100mL)和水(10mL)中的溶液，在其一部分里加入過硫酸氫鉀制劑(37.68g，61.29mmol)和PH4的磷酸鹽(5mL)。攪拌該反應物5h后，在真空下濃縮以除去乙醇，然后用水(50mL)稀釋，并用乙基乙酸酯(3×50mL)萃取。該混合有機萃取物用硫酸鎂干燥，過濾并且減壓蒸發(fā)。該產(chǎn)物用快速色譜儀提純(Merck硅膠60，230-400目，70/30己烷/乙基乙酸酯)以獲得淺黃色固體(3-氯-4-甲烷磺?；?苯基)-氧代-乙酸中基酯(3.67g，產(chǎn)率65％)，mp101.7-121.2℃EI-HRMS m/e計算值C10H9ClSO5(M+)275.9859，理論值275.9857。
(3-氯4-甲烷磺?；?苯基)-氧代-乙酸甲基酯(3.67g，13.26mmol)和p-甲苯磺?；?3.21g，17.24mmol)在甲苯(50mL)中的溶液在套接有填充有3分子篩的Dean-Stark阱的燒瓶中回流16h。然后將該反應冷卻到25℃并且在真空下濃縮。該殘留物用快速色譜儀提純(Merck硅膠60，230-400目，70/30己烷/乙基乙酸酯)以獲得漂白色固體(3-氯-4-甲烷磺?；?苯基)-(4-甲苯磺?；鶃嗠禄?-乙酸甲基酯(3.82g，65％產(chǎn)率)。該化合物本身使用于隨后的轉(zhuǎn)化中。
(3-氯-4-甲烷磺酰基-苯基)-(4-甲苯磺?；鶃嗠禄?-乙酸甲基酯(3.82g，8.5mmol)和三乙胺(1.3mL，9.35mmol)在二氯甲烷(40mL)中的溶液在25℃下攪拌。1h后，減壓蒸發(fā)該反應液。得到的該殘留物用快速色譜儀提純(Merck硅膠60，230-400目，60/40己烷/乙基乙酸酯)以獲得亮黃桔色固體外消旋-(3-氯-4-甲烷磺酰基-苯基)-重氮基-乙酸甲基酯(978mg，產(chǎn)率40％)，mp102.7-106.5℃；EI-HRMS m/e計算值C10H9N2ClSO4(M+)287.9972，理論值287.9979。
(3-氯-4-甲烷磺酰基-苯基)-重氮基-乙酸甲基酯(489mg，1.69mmol)在二氯甲烷(10mL)中的溶液在25℃下用環(huán)戊醇(0.38mL，4.23mmol)處理，接著用乙酸銠(II)二聚物(15mg，0.034mmol)并用二氯甲烷。將得到的溶液在25℃下攪拌1h后，將其用二氯甲烷(10mL)稀釋，倒入水中(15mL)并用二氯甲烷(3×10mL)萃取。該混合有機萃取物用硫酸鈉干燥，過濾并且真空濃縮。該產(chǎn)物用色譜儀提純(Biotage Flash 40S色譜柱，75/25己烷/乙基乙酸酯)以獲得無色油外消旋-(3-氯-4-甲烷磺酰基-苯基)-環(huán)戊基氧基-乙酸甲基酯(395mg，產(chǎn)率67％)EI-HRMS m/e計算值C15H19ClSO5(M+)346.0642，理論值346.0643。
外消旋-(3-氯-4-甲烷磺?；?苯基)-環(huán)戊基氧基-乙酸甲基酯(395mg，1.14mmol)在乙醇(15mL)中25℃的溶液用在水(3mL)中的氫氧化鉀(320mg，5.69mmol)溶液處理，并且在25℃下攪拌該混合物。3h后，該反應物用水稀釋并且在真空下蒸發(fā)。然后用1N鹽酸酸化該濃縮液至PH2并且用二氯甲烷(3×15mL)萃取。該混合有機相層用硫酸鈉干燥，過濾并且真空蒸發(fā)。該殘留油用快速色譜儀提純(Merck硅膠60，230-400目，50/50己烷/附加1％乙酸的乙基乙酸酯)以獲得無色油外消旋-(3-氯-4-甲烷磺?；?苯基)-環(huán)戊基氧基-乙酸(364mg，產(chǎn)率96％)EI-HRMS m/e計算值C14H17ClSO5(M+)332.0485，理論值332.0486。
往攪拌后的外消旋-(3-氯-4-甲烷磺?；?苯基)-環(huán)戊基氧基-乙酸(50mg，0.15mmol)在二氯甲烷(10mL)中的25℃的溶液中加入2-氨基噻唑(23mg，0.23mmol)，BOP試劑(100mg，0.23mmol)和三乙胺(0.06mL，0.45mmol)。在25℃下攪拌該混合物16h，然后對其用水(10mL)稀釋并且用二氯甲烷(3×20mL)萃取。該混合有機相層用水(1×10mL)，1N氫氧化鈉溶液(1×10mL)，1N鹽酸(1×10mL)和鹽水(1×10mL)洗滌，然后用硫酸鈉干燥，過濾并且真空濃縮。該產(chǎn)物用色譜儀提純(Biotage Flash 12M色譜柱，60/40己烷/乙基乙酸酯)以獲得白色固體外消旋-2-(3-氯-4-甲烷磺?；?苯基)-2-環(huán)戊基氧基-N-噻唑-2基-乙酰胺(44mg，產(chǎn)率71％)EI-HRMS m/e計算值C17H19N2O4S2CI(M+)414.0475，理論值414.0481。
實施例7外消旋-1-[(3-氯-4-甲烷磺?；?苯基)-環(huán)戊基氧基-乙?；鵠-3-甲基-脲的制備 冷卻到0℃的外消旋-(3-氯-4-甲烷磺?；?苯基)-環(huán)戊基氧基-乙酸(實施例6；100mg，0.30mmol)在氟苯(2.5mL)和N，N-二甲基甲酰胺(1.8uL)中的溶液用2.0M的草酰基氯在二氯甲烷(0.18mL，0.36mmol)中的溶液處理。立刻觀察到大量氣體逸出并且該混合物在25℃下攪拌1h后其顏色變?yōu)闇\黃色。然后添加甲基脲(97mg，0.90mmol)，并且該反應物在70℃下加熱10min后，添加吡啶(0.048mL，0.60mmol)并使該反應保持70℃1h。冷卻后的該混合物用乙基乙酸酯(5mL)稀釋，然后通過次乙酰塑料過濾以除去可溶解的物質(zhì)并且真空濃縮該濾液。濃縮液用3N鹽酸(1×20mL)，飽和重碳酸鈉(1×15mL)和鹽水(1×15mL)洗滌，然后用硫酸鈉干燥，過濾并且減壓蒸發(fā)。產(chǎn)物用色譜儀提純(Biotage Flash 40S色譜柱，50/50己烷/乙基乙酸酯)以獲得白色泡沫外消旋-1-[(3-氯-4-甲烷磺?；?苯基)-環(huán)戊基氧基-乙?；鵠-3-甲基-脲(78mg，67％產(chǎn)率)FAB-HRMS m/e計算值C16H21N2O5SCl(M+H)+389.0938，理論值389.0943。
實施例8外消旋-2-(3-氯-4-甲烷磺?；?苯基)-2-(環(huán)己-2-烯基氧基)-N-噻唑-2-基-乙酰胺的制備 (3-氯-4-甲烷磺?；?苯基)-重氮-乙酸甲基酯(實施例6；489mg，1.69mmol)在二氯甲烷(10mL)中的25℃的溶液用2-環(huán)己烯-1-醇(0.42mL，4.23mmol)處理，接著用乙酸銠(II)二聚物(15mg，0.034mmol)處理，并將得到的溶液在25℃下攪拌1h。將該反應混合物用二氯甲烷(10mL)稀釋，然后倒入水中(15mL)并用二氯甲烷(3×10mL)萃取。該混合有機萃取物用硫酸鈉干燥，過濾并且真空濃縮。該產(chǎn)物用色譜儀提純(Biotage Flash 40S色譜柱，75/25己烷/乙基乙酸酯)以獲得無色油外消旋-(3-氯-4-甲烷磺酰基-苯基)-(環(huán)己-2-烯基氧基)-乙酸甲基酯(350mg，產(chǎn)率58％)EI-HRMS m/e計算值C16H19ClSO5(M+)358.0642，理論值358.0640。
外消旋-(3-氯-4-甲烷磺?；?苯基)-(環(huán)己-2-烯基氧基)-乙酸甲基酯(350mg，0.98mmol)在乙醇(15mL)中25℃的溶液用在水(2.5mL)中的氫氧化鉀(273mg，4.88mmol)溶液處理，并且在25℃下攪拌該混合物。3h后，該反應物用水稀釋并且減壓濃縮。然后用1N氫氯酸的含水溶液酸化該濃縮液至PH2并且用二氯甲烷(3×15mL)萃取。該混合有機相層用硫酸鈉干燥，過濾并且減壓蒸發(fā)。該殘留物用快速色譜儀提純(Merck硅膠60，230-400目，50/50己烷/附加1％乙酸的乙基乙酸酯)以獲得無色油外消旋-(3-氯-4-甲烷磺?；?苯基)-(環(huán)己-2-烯基氧基)-乙酸(265mg，產(chǎn)率79％)EI-HRMS m/e計算值C15H17ClSO5(M+)344.0485，理論值344.0494。
往外消旋-(3-氯-4-甲烷磺?；?苯基)-(環(huán)己-2-烯基氧基)-乙酸(50mg，0.15mmol)在二氯甲烷(10mL)中的25℃的溶液中加入2-氨基噻唑(22mg，0.22mmol)，BOP試劑(96.2mg，0.22mmol)和三乙胺(0.06mL，0.45mmol)。在25℃下攪拌該混合物16h，然后對其用水(10mL)稀釋并且用二氯甲烷(3×20mL)萃取。該混合有機相層用水(1×10mL)，1N氫氧化鈉溶液(1×10mL)，1N鹽酸(1×10mL)和鹽水(1×10mL)洗滌，然后用硫酸鈉干燥，過濾并且減壓蒸發(fā)。該產(chǎn)物用色譜儀提純(Biotage Flash 40SD色譜柱，60/40己烷/乙基乙酸酯)以獲得玻璃狀固體外消旋-2-(3-氯-4-甲烷磺?；?苯基)-2-(環(huán)己-2-烯基氧基)-N-噻唑-2基-乙酰胺(39mg，產(chǎn)率63％)EI-HRMS m/e計算值C18H19N2O4S2Cl(M+)426.0475，理論值426.0479。
實施例9外消旋-1-[(3-氯-4-甲烷磺酰基-苯基)-(環(huán)己-2-烯基氧基)-乙?；鵠-3-甲基-脲的制備
冷卻(0℃)的外消旋-(3-氯-4-甲烷磺?；?苯基)-(環(huán)己-2-烯基氧基)-乙酸(來自實施例8，100mg，0.29mmol)，氟苯(2.5mL)和N，N-二甲基甲酰胺(1.8uL)的混合物用2.0M的草?；仍诙燃淄?0.18mL，0.36mmol)中的溶液處理，其導致大量氣體逸出。然后將該混合物在25℃下攪拌1h其顏色變?yōu)闇\黃色。添加甲基脲(64mg，0.87mmol)后，將該反應物在70℃下加熱10min，然后添加吡啶(0.048mL，0.60mmol)并使該反應保持70℃1h。冷卻后的該反應物用乙基乙酸酯(5mL)稀釋，然后通過次乙酰塑料過濾以除去可溶解的物質(zhì)并且真空濃縮該濾液。濃縮液用3N鹽酸(1×20mL)，飽和重碳酸鈉(1×15mL)和鹽水(1×15mL)洗滌，然后用硫酸鈉干燥，過濾并且減壓蒸發(fā)。產(chǎn)物用色譜儀提純(Biotage Flash 40S色譜柱，50/50己烷/乙基乙酸酯)以獲得白色泡沫外消旋-1-[(3-氯-4-甲烷磺?；?苯基)-(環(huán)己-2-烯基氧基)-乙酰基]-3-甲基-脲(63mg，產(chǎn)率54％)FAB-HRMS m/e計算值C17H21N2O5SCl(M+H)+401.0938，理論值401.0921。
實施例10外消旋-2-環(huán)戊基硫烷基-2-(3，4-二氯-苯基)-N-噻唑-2-基-乙酰胺的制備 重氮基-(3，4-二氯-苯基)-乙酸甲基酯(來自實施例1；193mg，0.79mmol)在二氯甲烷(10mL)中的25℃的溶液用環(huán)戊基硫醇(0.21mL，1.97mmol)處理，接著加入乙酸銠(II)二聚物(9mg，0.020mmol)并且將該溶液在25℃下攪拌1h。在該段時間內(nèi)，沒有觀察到氣體逸出，用薄層色譜儀對該黑色溶液的分析表明僅存在起始物質(zhì)。將該反應液加熱到回流并且添加第二部分的乙酸銠(II)二聚物(10mg，0.024mmol)當該混合物在回流下攪拌10min時，觀察到大量氣體逸出。將該反應混合物用二氯甲烷(10mL)稀釋，然后倒入水(15mL)中并且用二氯甲烷(3×15mL)萃取。混合有機層用硫酸鈉干燥，過濾并且減壓蒸發(fā)。該殘留油用快速色譜儀提純(Merck硅膠60，230-400目，95/5己烷/乙基乙酸酯)以獲得無色油外消旋-環(huán)戊基硫烷基-(3，4-二氯-苯基)-乙酸甲基酯(148mg，產(chǎn)率59％)EI-HRMS m/e計算值C14H16Cl2SO2(M+)318.0248，理論值318.0244。
外消旋-環(huán)戊基硫烷基-(3，4-二氯-苯基)-乙酸甲基酯(50mg，0.66mmol)在乙醇(3mL)中的25℃的溶液用在水(1mL)中的氫氧化鉀(44mg，0.79mmol)溶液處理，并且在25℃下攪拌該混合物。3h后，該反應物用水稀釋并且在真空蒸發(fā)。用1N鹽酸酸化該濃縮液至PH2并且用二氯甲烷(3×15mL)萃取。該混合有機萃取物用硫酸鈉干燥，過濾并且真空濃縮。該殘留物用快速色譜儀提純(Merck硅膠60，230-400目，50/50己烷/附加1％乙酸的乙基乙酸酯)以獲得無色油外消旋-環(huán)戊基硫烷基-(3，4-二氯-苯基)-乙酸(43mg，產(chǎn)率90％)EI-HRMS m/e計算值C13H14Cl2SO2(M+)304.0091，理論值304.0101。
環(huán)戊基硫烷基-(3，4-二氯-苯基)-乙酸(43mg，0.14mmol)溶解在二氯甲烷(10mL)中往該25℃的溶液中加入2-氨基噻唑(21mg，0.21mmol)，BOP試劑(92mg，0.21mmol)和三乙胺(0.06mL，0.42mmol)。在25℃下攪拌該反應混合物16h，然后用水(10mL)稀釋并且用二氯甲烷(3×15mL)萃取。該混合有機相層用水(1×10mL)，1N氫氧化鈉溶液(1×10mL)，1N鹽酸(1×10mL)和鹽水(1×10mL)洗滌，然后用硫酸鈉干燥，并且減壓蒸發(fā)。該產(chǎn)物用色譜儀提純(Biotage Flash 12M色譜柱，80/20己烷/乙基乙酸酯)以獲得無色油外消旋-2-環(huán)戊基硫烷基-2-(3，4-二氯-苯基)-N-噻唑-2-基-乙酰胺(40mg，產(chǎn)率74％)EI-HRMS m/e計算值C16H16N2OS2Cl2(M+)386.0081，理論值386.0080。
實施例11外消旋-2-環(huán)戊烷基磺酰基-2-(3，4-二氯-苯基)-N-噻唑-2-基-乙酰胺的制備 往外消旋-2-環(huán)戊基硫烷基-2-(3，4-二氯-苯基)-N-噻唑-2-基-乙酰胺(實施例10；34mg，0.088mmol)在甲醇(2mL)中的溶液中加入高碘酸鈉(34mg，0.16mmol)在水中(1mL)的溶液并在25℃下攪拌該混合物。6h后，過濾其沉淀物并用二氯甲烷(15mL)洗滌。收集該有機層并用用二氯甲烷(3×15mL)萃取。該混合有機層用硫酸鈉干燥，過濾并且減壓蒸發(fā)。該殘留物用色譜儀(Biotage Flash 12M色譜柱，50/50己烷/乙基乙酸酯)獲得無色油外消旋-2-環(huán)戊烷亞磺?；?2-(3，4-二氯-苯基)-N-噻唑-2-基-乙酰胺(23mg，產(chǎn)率66％)EI-HRMS m/e計算值C16H16N2O2S2Cl2(M+)402.0030，理論值402.0035。
外消旋-2-環(huán)戊烷亞磺?；?2-(3，4-二氯-苯基)-N-噻唑-2-基-乙酰胺(20mg，0.05mmol)在甲醇(2mL)中的溶液當其中加入高錳酸鉀(9mg，0.06mmol)在水中(0.5mL)的溶液的同時在25℃下攪拌。該混合物在25℃下攪拌30min，然后過濾。其濾餅并用二氯甲烷洗滌。該混合濾液用重碳酸鈉溶液(10mL)和鹽水(10mL)洗滌，然后用硫酸鈉干燥，過濾并且真空濃縮。該殘留物用色譜儀提純(Biotage Flash 12M色譜柱，50/50己烷/乙基乙酸酯)獲得無色油外消旋-2-環(huán)戊烷磺?；?2-(3，二氯-苯基)-N-噻唑-2-基-乙酰胺(10mg，產(chǎn)率48％)EI-HRMS m/e計算值C16H16N2O3S2Cl2(M+)417.9979，理論值417.9977。
實施例12
外消旋-1-[環(huán)戊基氧基-(3，4-二氯-苯基)-乙?；鵠-3-甲基-脲的制備 冷卻(0℃)的外消旋-環(huán)戊基氧基-(3，4-二氯-苯基)-乙酸(實施例1，164mg，0.57mmol)在二氯甲烷(10mL)和N，N-二甲基甲酰胺(一滴)的中的溶液用草酰基氯(2.0M的在二氯甲烷，0.43mL，0.86mmol中的溶液)處理。在0℃下攪拌該反應物1h，然后添加1，1，1，3，3，3-六甲基二硅氮烷(0.42mL，2.0mmol)，并將得到的該黑色混合物在25℃下攪拌16h。用甲醇(10mL)驟冷該反應物，用5％的硫酸含水溶液(2×15mL)洗滌并用二氯甲烷(3×10mL)萃取。該混合有機萃取物用鹽水(1×10mL)洗滌，然后用硫酸鎂干燥，過濾并且真空濃縮。該殘留物用快速色譜儀提純(Merck硅膠60，230-400目，60/40己烷/乙基乙酸酯)以獲得白色固體外消旋-2-環(huán)戊基氧基-2-(3，4-二氯-苯基)-乙酰胺(116mg，產(chǎn)率71％)，mp88.3-91.4℃FAB-HRMS m/e計算值C13H15NCl2O2(M+)288.0558，理論值288.0572。
外消旋-2-環(huán)戊基氧基-2-(3，4-二氯-苯基)-乙酰胺(116mg，0.40mmol)在甲苯(5mL)中的溶液用甲基異氰酸酯(0.04mL，0.60mmol)處理。得到的該溶液在回流下加熱24h，然后冷卻并且減壓蒸發(fā)。該得到的油用快速色譜儀提純(Merck硅膠60，230-400目，60/40己烷/乙基乙酸酯)以獲得無色油外消旋-1-[環(huán)戊基氧基-(3，4-二氯-苯基)-乙酰基]-3-甲基-脲(30mg，產(chǎn)率41％)EI-HRMS m/e計算值C15H18N2Cl2O3(M+)288.0558，理論值288.0572。
實施例13外消旋-1-[(環(huán)己-2-烯基氧基)-(3，4-二氯-苯基)-乙?；鵠-3-甲基-脲的制備 冷卻到0℃的外消旋-(環(huán)己-2-烯基氧基)-(3，4-二氯-苯基)-乙酸(實施例3，409mg，1.36mmol)在二氯甲烷(10mL)和N，N-二甲基甲酰胺(一滴)的中的溶液用草?；?2.0M在二氯甲烷，0.95mL，1.90mmol中的溶液)處理。在0℃下攪拌該反應物1h，然后添加1，1，1，3，3，3-六甲基二硅氮烷(1.0mL，4.75mmol)，并將得到的該黑色混合物在25℃下攪拌16h。用甲醇(10mL)驟冷該反應物，用5％的硫酸含水溶液(2×15mL)洗滌并用二氯甲烷(3×10mL)萃取。該混合有機萃取物用鹽水(1×10mL)洗滌，然后用硫酸鎂干燥，過濾并且真空濃縮。該反應產(chǎn)物用快速色譜儀提純(Merck硅膠60，230-400目，70/30己烷/乙基乙酸酯)以獲得白色固體外消旋-2-(環(huán)己-2-烯基氧基)-2-(3，4-二氯-苯基)-乙酰胺(311mg，產(chǎn)率76％)mp103.6-108.9℃；EI-HRMS m/e計算值C14H15NCl2O2(M+)299.0479，理論值299.0492。
外消旋-2-(環(huán)己-2-烯基氧基)-2-(3，4-二氯-苯基)-乙酰胺(311mg，1.04mmol)在甲苯(10mL)中的溶液用甲基異氰酸酯(0.09mL，1.55mmol)處理。得到的該溶液在回流下加熱24h，然后真空濃縮。該殘留物用快速色譜儀提純(Merck硅膠60，230-400目，90/10己烷/乙基乙酸酯)以獲得無色油外消旋-1-[(環(huán)己-2-烯基氧基)-(3，4-二氯-苯基)-乙酰基]-3-甲基-脲(238mg，產(chǎn)率64％)EI-HRMS m/e計算值C16H18N2Cl2O3(M+)356.0694，理論值356.0694。
實施例14外消旋-1-[環(huán)己基氧基-(3，4-二氯-苯基)-乙?；鵠-3-甲基-脲的制備 冷卻到0℃的外消旋-1-環(huán)己基氧基-(3，4-二氯-苯基)-乙酸(實施例2；364mg，1.20mmol)在二氯甲烷(10mL)和N，N-二甲基甲酰胺(一滴)的中的溶液用草酰基氯(2.0M在二氯甲烷，0.84mL，1.68mmol中的溶液)處理。在0℃下攪拌該反應物1h，然后添加1，1，1，3，3，3-六甲基二硅氮烷(0.90mL，4.20mmol)，并將得到的該黑色混合物在25℃下攪拌16h。在此時，用甲醇(10mL)驟冷該反應物，用5％的硫酸含水溶液(2×15mL)洗滌并用二氯甲烷(3×10mL)萃取。該混合有機萃取物用鹽水(1×10mL)洗滌，然后用硫酸鎂干燥，過濾并且減壓蒸發(fā)。該反應產(chǎn)物用快速色譜儀提純(Merck硅膠60，230-400目，90/10己烷/乙基乙酸酯)以獲得無色油外消旋-2-環(huán)己基氧基-2-(3，4-二氯-苯基)-乙酰胺(311mg，76％產(chǎn)率)FAB-HRMS m/e計算值C14H17NCl2O2(M+H)+302.0714，理論值302.0728。
外消旋-2-環(huán)己基氧基-2-(3，4-二氯-苯基)-乙酰胺(291mg，0.96mmol)在甲苯(10mL)中的溶液用甲基異氰酸酯(0.09mL，1.44mmol)處理。得到的該溶液在回流下加熱24h，然后將該冷卻的反應物真空濃縮。該反應產(chǎn)物用快速色譜儀提純(Merck硅膠60，230-400目，90/10己烷/乙基乙酸酯)以獲得無色油外消旋-1-[環(huán)己基氧基-3，4-二氯-苯基]-乙?；鵠-3-甲基-脲(301mg，產(chǎn)率87％)EI-HRMS m/e計算值C16H20N2Cl2O3(M+H)+359.0929，理論值359.0922。
實施例15外消旋-1-[(3，4-二氯-苯基)-(四氫-吡哺-4-基氧基)-乙?；鵠-3-甲基-脲的制備 冷卻(0℃)的外消旋-(3，4-二氯-苯基)-[(四氫-吡喃-4-基氧基)]-乙酸(實施例4，441mg，1.45mmol)在二氯甲烷(10mL)和N，N-二甲基甲酰胺(一滴)的中的溶液用草酰基氯(2.0M在二氯甲烷，1.01mL，2.02mmol中的溶液)處理。在0℃下攪拌該反應物1h，然后添加1，1，1，3，3，3-六甲基二硅氮烷(1.10mL，5.06mmol)，并將得到的該黑色混合物在25℃下攪拌16h。用甲醇(10mL)驟冷該反應物，用5％的硫酸含水溶液(2×15mL)洗滌并用二氯甲烷(3×10mL)萃取。該混合有機萃取物用鹽水(1×10mL)洗滌，然后用硫酸鎂干燥，過濾并且減壓蒸發(fā)。該得到的殘留物用快速色譜儀提純(Merck硅膠60，230-400目，70/30己烷/乙基乙酸酯)以獲得白色固體外消旋-2-(3，4-二氯-苯基)-2-(四氫-吡喃-4-基氧基)-乙酰胺(278mg，產(chǎn)率63％)，mp81.9-83.6℃；FAB-HRMS m/e計算值C13H15NCl2O3(M+H)+303.0428，理論值303.0426。
外消旋-2-(3，4-二氯-苯基)-2-(四氫-吡喃-4-基氧基)-乙酰胺(278mg，0.91mmol)在甲苯(10mL)中的溶液用甲基異氰酸酯(0.08mL，1.37mmol)處理。得到的該溶液在回流下加熱24h，然后將該冷卻的反應物真空濃縮。該得到的油用快速色譜儀提純(Merck硅膠60，230-400目，20/80己烷/乙基乙酸酯)以獲得無色油外消旋-1-[(3，4-二氯-苯基)-(四氫-吡喃-4-基氧基)-乙?；鵠-3-甲基-脲(70mg，21％產(chǎn)率)EI-HRMS m/e計算值C15H18N2Cl2O4(M+)360.0643，理論值360.0865。
實施例16外消旋-3-環(huán)戊基-2-(3，4-二氯-苯基)-3-氧代-N-噻唑-2-基-丙酰胺的制備 往(3，4-二氯-苯基)-乙酸(500mg，2.4mmol)在N，N-二甲基甲酰胺(15mL)中的25℃的溶液中加入HBTU(1.02g，2.7mmol)，2-氨基噻唑(360mg，3.6mmol)和二異丙基乙胺(1.25mL，7.2mmol)。攪拌得到的該反應混合物16h，然后該反應物用水(5mL)稀釋并且用乙基乙酸酯(3×15mL)萃取。該混合有機相層接著用水(1×10mL)，1N氫氧化鈉溶液(1×10mL)，1N鹽酸(1×10mL)和鹽水(1×10mL)洗滌，然后用硫酸鈉干燥，并且減壓蒸發(fā)。該殘留物用快速色譜儀提純(Merck硅膠60，230-400目，50/50己烷/以及乙酸酯)以獲得淺黃色固體外消旋-2-(3，4-二氯-苯基)-N-噻唑-2-基-乙酰胺(480mg，70％產(chǎn)率)，mp169.8-172.3℃。EI-HRMS m/e計算值C11H8N2OSCl2(M+)285.9734，理論值285.9734。
往事先冷卻到-78℃的外消旋-2-(3，4-二氯-苯基)-N-噻唑-2-基-乙酰胺(185mg，0.64mmol)在四氫呋喃(15mL)中的溶液中緩慢加入1.0M的雙(三甲基甲硅烷基)氨基化鋰(1.3mL，1.3mmol)。該溶液在-78℃下攪拌15min，然后逐滴加入環(huán)戊烷碳酰基氯(0.08mL，0.64mmol)。將該反應混合物在-78℃下再攪拌60min，之后加入飽和氯化鋁溶液(10mL)驟冷。然后將該混合物用乙基乙酸酯(3×10mL)萃取，用硫酸鈉干燥并且真空濃縮。該產(chǎn)物用快速色譜儀提純(Merck硅膠60，230-400目，80/20己烷/以及乙酸酯)以獲得桔黃色固體外消旋-3-環(huán)戊基-2-(3，4-二氯-苯基)-3-氧代-N-噻唑-2-基-丙酰胺(98mg，40％產(chǎn)率)EI-HRMS m/e計算值C17H16N2O2SCl2(M+)382.0309，理論值382.0309。
生物活性實施例a)體外葡糖激酶活性葡糖激酶檢定用嗜檸檬酸明串球菌屬腸系膜類(mesenteroides)作為偶合酶將6-磷酸鹽葡萄糖的生產(chǎn)和用6-磷酸鹽葡萄糖脫氫酶的NADH的生成相偶合，由此對葡糖激酶(GK)進行檢定(G6PDH，0.75-1千單位/毫克；Boehringer Mannheim，Indianapolls，IN)(方案示意2)。 方案示意2重組體人肝GK1在E.Coli中表達為谷胱肝肽S-轉(zhuǎn)移酶融合蛋白質(zhì)(GST-GK)[Liang等人，1995]，并通過谷胱甘肽-瓊脂糖4B親合力柱色譜按照制造商(Amersham Pharmacia Biotech，Piscataway，NJ)提供的程序純化。前人的研究已經(jīng)說明天然GK和GST-GK的酶性能本質(zhì)上是相同的(Liang等人，1995；Neet等人，1990)。
在最終培育體積為120μL的購自Costar(Cambridge，MA)的平底96-井組織培養(yǎng)皿中于25℃下進行測定。該培育混合物含有25mM赫佩斯緩沖液(pH，7.1)，25mM KCl，5mM D-葡萄糖，1mM ATP，1.8mM NAD，2mM MgCl2，1μM山梨醇-6-磷酸酯，1mM二硫蘇糖醇，測試藥或10％DMSO，1.8單位/ml G6PDH和GK(參見下文)，所有有機試劑的純度＞98％，除D-葡萄糖和赫佩斯購自Sigma Chemical Co，St Louis，MO之外，全部購自Boehringer Mannheim。測試化合物溶于DMSO并加至已去掉12μL GST-GK的培養(yǎng)混合物中，得到的最終DMSO濃度為10％。將該混合物在SPECTRAmax 250小平板光度計(Molecular DevicesCorporation，Sunnyvale，CA)的溫控室中預培育10分鐘以使溫度平衡，然后加入20μL GST-GK開始反應。
加入酶后，在10分鐘培育期內(nèi)監(jiān)測340nm處的光密度(OD)的增加，以此作為GK活性的測定。加入足夠量的GST-GK以使含10％DMSO但是不含測試化合物的井中的OD340在10分鐘培育期內(nèi)從0.08增加到0.1單位。先前的實驗證明即使在能使GK活性增加5倍的活化劑存在下，GK在該時期內(nèi)也是線性的。將對照井中的GK活性與含測試GK活化劑的井中的活性進行對比，計算使GK活性增加50％的活化劑的濃度，即SC1.5。合成實施例中描述的所有式I化合物的SC1.5低于或等于30μM。
Liang，Y.，Kesavan，P.，Wang，L.，Niswender，K.，Tanizawa，Y.，Permut，M.A.，Magnuson，M.，和Matschinsky，F(xiàn).M.Variable effects of maturity-onset-diabetes-of-youth(MODY)-associated glucokinase mutations on the substrateinteractions and stability ofthe enzyme。Biochem.J.309167-173，1995。
Neet，K.，Keenan，R.P.，和Tippett，P.S.Observation of a kinetic slowtransition in monomeric glucokinase。Biochemistry 29；770-777，1990。b)體內(nèi)活性體內(nèi)葡糖激酶活性篩選方案禁食兩小時后向C57BL/6J小鼠以口服劑量強行飼喂葡糖激酶(GK)活化劑，劑量為50mg/kg體重。服藥后6小時觀察期中測量五次血糖。
口服處理前將小鼠(n＝6)稱重，并禁食兩小時。在Gelucire載體中以6.76mg/ml的速度配制GK活化劑(乙醇Gelucire44/14PEG400適量4∶66∶30v/w/v。向小鼠口服7.5μL制劑/克體重，相當于50mg/kg劑量。即將喂藥前，剪去少部分動物尾部(∽1mm)并將15μL血收集到肝素化的毛細管中進行分析，得到前劑量(時間零)血糖讀數(shù)。隨后在給藥1、2、4和6小時后從相同的尾部傷口讀取其他血糖讀數(shù)。將用介質(zhì)處理的小鼠的六次血糖平均值與用GK活化劑經(jīng)六小時觀察期處理的小鼠的血糖平均值進行對比以解釋結(jié)果。當它們表現(xiàn)出與兩個連續(xù)測試時間點所用的載體相比血糖中統(tǒng)計顯著水平(P≤0.05)降低時，化合物的活性相當高。
實施例A用傳統(tǒng)方法可以生產(chǎn)含下述成分的片劑成分mg每片式(I)的化合物 10.0-100.0乳糖125.0玉米淀粉75.0滑石4.0硬脂酸鎂1.0實施例B用傳統(tǒng)方法可以生產(chǎn)含下述成分的膠囊成分mg每個膠囊式(I)的化合物25.0乳糖 150.0玉米淀粉 20.0云母 5.0
權(quán)利要求
1.一種酰胺，選自下式表示的化合物 其中，R1和R2獨立地為氫、鹵素、氰基、硝基、低級烷基硫代基、全氟代低級烷基硫代基、低級烷基磺?；蛉图壨榛酋；?；R3為含2至4個碳原子的低級烷基、或為環(huán)烷基、環(huán)烯基，或有一個選自氧和硫的雜原子的雜環(huán)烷基的5-7元環(huán)；R4為-C(O)NHR5或R6；R5為氫，低級烷基，低級烯基，羥基低級烷基，鹵代低級烷基，-(CH2)n-C(O)-OR7，-C(O)-(CH2)n-C(O)-OR8；R6為未取代或單取代的五元或六元雜芳環(huán)，其被環(huán)碳原子連接到所示的酰胺基上，其中五元或六元雜芳環(huán)含有1-3個選自硫、氧或氮的雜原子，其中一個雜原子為與連接環(huán)碳原子鄰接的氮原子；所說的單取代的雜芳環(huán)在不是與所說的連接碳原子相鄰的環(huán)碳原子位置上被單取代，用于所述單取代的取代基選自低級烷基，鹵素，硝基，氰基，-(CH2)n-OR9，-(CH2)n-C(O)-OR10，-(CH2)n-C(O)-NH-R11，-C(O)-C(O)-OR12，-(CH2)n-NHR13；n為0，1，2，3或4；R7，R8，R9，R10，R11，R12，和R13獨立地為氫或低級烷基；X為氧、硫、磺酰基或羰基；*指不對稱碳原子；及其藥學上可接受的鹽。
2.權(quán)利要求1的酰胺，其中所說的化合物是 其中，R1和R2獨立地為氫、鹵素、低級烷基磺?；蛉图壨榛酋；?；R3為屬于5-7元環(huán)的環(huán)烷基、環(huán)烯基，或有一個選自氧和硫的雜原子的雜環(huán)烷基；R5為低級烷基；和X為氧、硫、磺?；螋驶?。
3.權(quán)利要求1的酰胺，其中所說的化合物是 其中，R1和R2獨立地為氫、鹵素、低級烷基磺?；蛉图壨榛酋；籖3為5-7元環(huán)的環(huán)烷基、環(huán)烯基，或有一個選自氧和硫的雜原子的雜環(huán)烷基；R6為未取代的五元或六元雜芳環(huán)，其通過環(huán)碳原子連接到所示的酰胺基上，其中五元或六元雜芳環(huán)含有1-3個選自硫、氧或氮的雜原子，其中一個雜原子為與連接環(huán)碳原子鄰接的氮原子；和X為氧、硫、磺?；螋驶?。
4.權(quán)利要求1的酰胺，其中R5為低級烷基。
5.權(quán)利要求1或2的酰胺，其中R5為甲基。
6.權(quán)利要求1或3的酰胺，其中R6是吡嗪基，噠嗪基，異噁唑基，異噻唑基，吡唑基，吡啶基，嘧啶基，噻二唑基，三嗪基，噻唑基，噁唑基，或咪唑基，優(yōu)選噻唑基或吡啶基。
7.權(quán)利要求1或3的酰胺，其中R6是噻唑基。
8.權(quán)利要求1或3的酰胺，其中R6是吡啶基。
9.權(quán)利要求1-8中任一項的酰胺，其中R1和R2獨立地為鹵素或低級烷基磺?；?br> 10.權(quán)利要求1-8中任一項的酰胺，其中R1和R2是獨立的氯或甲基磺?；?。
11.權(quán)利要求1-8中任一項的酰胺，其中R1和R2是氯。
12.權(quán)利要求1-8中任一項的酰胺，其中R1是氯，R2是甲基磺酰基。
13.權(quán)利要求1-12中任一項的酰胺，其中R3是環(huán)戊基、環(huán)己基，環(huán)己烯基，或有一個選自氧和硫的雜原子的六元雜環(huán)烷基。
14.權(quán)利要求13的酰胺，其中雜原子是氧。
15.權(quán)利要求1-14中任一項的酰胺，其中R3是環(huán)戊基。
16.權(quán)利要求1-15中任一項的酰胺，其中X是氧。
17.權(quán)利要求1-15中任一項的酰胺，其中X是硫，磺酰基或羰基。
18.權(quán)利要求1-17中任一項的酰胺，選自下面的化合物1-[環(huán)戊基氧基-(3，4-二氯-苯基)-乙?；鵠-3-甲基-脲1-[環(huán)己基氧基-(3，4-二氯-苯基)-乙酰基]-3-甲基-脲1-[(環(huán)己-2-烯基氧基)-(3，4-二氯-苯基)-乙?；鵠-3-甲基-脲1-[(3，4-二氯-苯基)-(四氫-吡喃-4-基氧基)-乙酰基]-3-甲基-脲1-[(3-氯-4-甲烷磺?；?苯基)-環(huán)戊基氧基-乙?；鵠-3-甲基-脲1-[(3-氯-4-甲烷磺?；?苯基)-(環(huán)己-2-烯基氧基)-乙?；鵠-3-甲基-脲2-(3，4-二氯-苯基)-2-(四氫-吡喃-4-基氧基)-N-噻唑-2-基-乙酰胺，2-環(huán)戊基氧基-2-(3，4-二氯-苯基)-N-噻唑-2-基-乙酰胺，2-環(huán)己基氧基-2-(3，4-二氯-苯基)-N-噻唑-2-基-乙酰胺2-(環(huán)己-2-烯基氧基)-2-(3，4-二氯-苯基)-N-噻唑-2-基-乙酰胺，2-環(huán)戊基氧基-2-(3，4-二氯-苯基)-N-吡啶-2-基-乙酰胺，2-(3-氯-4-甲烷磺酰基-苯基)-2-環(huán)戊基氧基-N-噻唑-2-基-乙酰胺和2-(3-氯-4-甲烷磺?；?苯基)-2-(環(huán)己-2-烯基氧基-N-(4，5-二氫-噻唑-2-基-乙酰胺3-環(huán)戊基-2-(3，4-二氯-苯基)-3-氧代-N-噻唑-2-基-丙酰胺，2-環(huán)戊烷磺?；?2-(3，4-二氯-苯基)-N-噻唑-2-基-乙酰胺，和2-環(huán)戊基硫烷基-2-(3，4-二氯-苯基)-N-噻唑-2-基-乙酰胺。
19.一種藥用組合物，包括權(quán)利要求1-18中任一項的化合物和藥學上可接受的載體和/或助劑。
20.一種制備權(quán)利要求19的藥用組合物的方法，包括將任一權(quán)利要求1-18的式I化合物和藥學上可接受的載體和/或助劑結(jié)合。
21.權(quán)利要求1-18中任一項的化合物作為藥學活性物質(zhì)的用途。
22.權(quán)利要求1-18中任一項的化合物的用于治療或預防II型糖尿病的用途。
23.權(quán)利要求1-18中任一項的化合物的用于制備用于治療或預防II型糖尿病的藥物的用途。
24.一種II型糖尿病的預防或治療方法，該方法包括對人或動物給服權(quán)利要求1-18中任一項的化合物。
25.一種權(quán)利要求1-18中任一項的酰胺的制備方法，該方法包括(a)將下式化合物 其中X是O，S或CO，和R1，R2和R3如權(quán)利要求1中所定義，和具有下式的胺偶合R6-NH2(13)其中R6如權(quán)利要求1中所定義；(b)下式化合物脫質(zhì)子化 其中R1，R2和R6如權(quán)利要求1中所定義，然后與下式化合物反應 其中R3如權(quán)利要求1中所定義；(c)下式化合物 其中X是O，S或CO，R1，R2和R3如權(quán)利要求1中所定義，和下式的單取代脲反應 其中R5如權(quán)利要求1中所定義；(d)下式化合物 其中X是O，S或CO，和R1，R2和R3如權(quán)利要求1中所定義，和下式的異氰酸酯反應R5-N＝C＝O (17)其中R5定義在權(quán)利要求1中；(e)在堿金屬醇鹽的存在下，下式化合物 其中X是O，S或CO，Ra是低級烷基，R1，R2和R3定義在權(quán)利要求1中，和下式的單取代脲反應 其中R5定義在權(quán)利要求1中；(f)將下式的硫醚 其中X是S，R1、R2、R3和R6如權(quán)利要求1中所定義，轉(zhuǎn)化成下式的砜 其中R1，R2，R3和R4如權(quán)利要求1中所定義；或(g)將下式的硫醚 其中X是S，和R1、R2、R3和R5如權(quán)利要求1中所定義，轉(zhuǎn)化成下式的砜 其中R1，R2，R3和R4如權(quán)利要求1中所定義。
26.一種用權(quán)利要求25的方法制備的化合物。
27.前面定義的本發(fā)明。
全文摘要
結(jié)構(gòu)式(1)所示的化合物是一種用于治療II型糖尿病的葡糖激酶活化劑，其中，R
文檔編號C07D309/12GK1443177SQ01813050
公開日2003年9月17日 申請日期2001年7月11日 優(yōu)先權(quán)日2000年7月20日
發(fā)明者羅伯特·弗朗西斯·凱斯特, 拉馬肯斯·薩拉布 申請人:霍夫曼-拉羅奇有限公司