專利名稱：嘧啶－2,4,6－三酮類金屬蛋白酶抑制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及嘧啶-2，4，6-三酮類金屬蛋白酶抑制劑，藥物組合物以及治療炎癥、腫瘤及其他疾病的方法。
背景技術(shù)：
本發(fā)明的化合物是含鋅金屬內(nèi)肽酶，尤其是那些屬于基質(zhì)金屬蛋白酶(也稱MMP或matrixin)的抑制劑。
MMP酶亞家族，目前包含17個(gè)成員(MMP-1、MMP-2、MMP-3、MMP-7、MMP-8、MMP-9、MMP-10、MMP-11、MMP-12、MMP-13、MMP-14、MMP-15、MMP-16、MMP-17、MMP-18、MMP-19、MMP-20)。MMP類酶以在胞外基質(zhì)蛋白的轉(zhuǎn)化中發(fā)揮調(diào)節(jié)作用而出名，在如生殖、發(fā)育及分化等正常的生理過(guò)程中發(fā)揮重要作用。同時(shí)，MMP類酶也在很多病理狀況下表達(dá)，通常發(fā)生異常的結(jié)締組織轉(zhuǎn)化。例如，研究已經(jīng)證實(shí)對(duì)II型膠原質(zhì)(軟骨中主要膠原質(zhì)形式)具有強(qiáng)降解活性的MMP-13，在骨關(guān)節(jié)炎軟骨中高表達(dá)(Mitchell等，J.Clin.Invest.，1996，97，761)。其他的MMP(MMP-2、MMP-3、MMP-8、MMP-9、MMP-12)也在骨關(guān)節(jié)炎軟骨中高表達(dá)，抑制其中的一些或所有MMP有望減緩或阻止如骨關(guān)節(jié)炎或風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等關(guān)節(jié)病中軟骨的加速丟失。
已經(jīng)認(rèn)識(shí)到不同的病理狀況有不同組合MMP的表達(dá)。因此，對(duì)特定MMP具有特異選擇性的抑制劑也許有利于特定病理狀態(tài)的治療。
基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑在文獻(xiàn)中已有報(bào)道。歐洲專利公報(bào)606,046(1994年7月13日公開)例舉了異羥肟酸類MMP抑制劑；PCT公報(bào)WO 98/58925(1998年12月30日公開)報(bào)道幾種吡啶-2，4，6三酮類MMP抑制劑；WO00/47565(2000年8月17日)報(bào)道了芳基取代嘧啶-2，4，6-三酮MMP抑制劑。美國(guó)非臨時(shí)申請(qǐng)09/635156，2000年8月9日提交(要求享有1999年8月12日提交的美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)60/148547的優(yōu)先權(quán))報(bào)道雜芳香取代嘧啶-2，4，6三酮類MMP抑制劑。美國(guó)臨時(shí)申請(qǐng)，標(biāo)題″螺-嘧啶-2，4，6-三酮金屬蛋白酶抑制劑″，2000年10月26日提交，包括幾種5-螺-嘧啶-2，4，6-三酮。巴比妥酸及其制備方法已為專業(yè)人員所熟悉，參見Goodman和Gilman，″Phamacological Basis of Thrapeutics，″345-382(Eighth Edition，McGrawHill，1990)。上述參考的文獻(xiàn)及應(yīng)用在此作為參考文獻(xiàn)引入。
發(fā)明概要本發(fā)明涉及下列結(jié)構(gòu)式的化合物 其中A為任選取代的(C6-C10)芳基或(C2-C10)雜芳基；B為任選取代的(C6-C10)芳基，(C3-C8)環(huán)烷基，(C1-C10)雜芳香基，(C1-C10)雜環(huán)基，(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基，(C3-C8)環(huán)烷基-(C1-C4)烷基，(C1-C10)雜芳基-(C1-C4)烷基或(C1-C10)雜環(huán)基-(C1-C4)烷基；其中上述每個(gè)(C3-C8)環(huán)烷基或(C1-C10)雜環(huán)取代基可任選包含1-2個(gè)雙鍵；其中，A和B可以獨(dú)立地由一種或兩種取代基任選取代環(huán)上可另成鍵的碳原子，所述的取代基獨(dú)立地為F，Cl，Br，CN，OH，(C1-C4)烷基，(C1-C4)全氟代烷基，(C1-C4)全氟代烷氧基，(C1-C4)烷氧基以及(C3-C8)環(huán)烷氧基；X為O，＞C＝O，S，＞SO2，S＝O，＞NR10，-CH2O-，-OCH2-，-CH2S-，-CH2(S＝O)-，-CH2SO2-，-SCH2-，-SOCH2-，-SO2CH2-，-[N(R10)]CH2-，-CH2[N(R10)]-，-[N(R10)]SO2-，和-SO2[N(R10)]-；Y為鍵，O，S，＞C＝O，＞SO2，＞S＝O，＞NR12，-CH2-，-CH2O-，-OCH2-，-CH2S-，-CH2(S＝O)-，-CH2SO2-，-SCH2-，-(S＝O)CH2-，-SO2CH2-，-[N(R12)]CH2-，-CH2[N(R12)]-，-CH2CH2-，-CH＝CH-，-[N(R12)]-SO2-以及-SO2[N(R12)]-；R1為氫，(R2)2n+1-(C)n-或(C3-C8)環(huán)烷基，其中(C3-C8)環(huán)烷基可以被一個(gè)或兩個(gè)取代基任選取代，取代基獨(dú)立地為鹵原子，(C1-C4)烷基，(C1-C4)烯基，(C1-C4)炔基，R3，R3O-，全氟取代(C1-C4)烷氧基，R3-(C1-C4)烷基-O-，R3-(C＝O)-O-，(R3)2N-(C＝O)-O-，-NO2，(R3)2N-，R3-(C＝O)-(NR4)-，R3-(SO2)-(NR4)-，R3O-(C＝O)-(NR4)-，(R3)2-N-(C＝O)-(NR4)-，R3-S-，R3-(S＝O)-，R3-(SO2)-，(R3)2N-(SO2)-，-CN，R3-(C＝O)-，R3-O-(C＝O)-以及(R3)2N-(C＝O)-；
N為1-10的整數(shù)；每個(gè)R2獨(dú)立地為鹵素，R3-，(C1-C4)烯基，(C1-C4)炔基，R3-O-，全氟取代(C1-C4)烷氧基，R3-(C＝O)-O-，(R3)2N-(C＝O)-O-，-NO2，(R3)2N-，R3-(SO2)-(NR4)-，R3-(C＝O)-(NR4)-，R3O-(C＝O)-(NR4)-，(R3)2-N-(C＝O)-(NR4)-，R3-S-，R3-(S＝O)-，R3-(SO2)-，(R3)2N-(SO2)-，-CN，R3-(C＝O)-，R3-O-(C＝O)-以及(R3)2N-(C＝O)-；其中至多三個(gè)已經(jīng)提及的R2取代基不是氫，并且-(C)n-基團(tuán)上的每一個(gè)碳原子可以與一個(gè)雜原子形成單鍵；其中任兩個(gè)R2基團(tuán)上的一個(gè)碳原子可以與碳原子成鍵，形成4-10元環(huán)；每一個(gè)R3可以獨(dú)立地為氫，(C1-C4)烷基，(C6-C10)芳基，(C3-C8)環(huán)氧基，(C1-C10)雜芳基以及(C1-C10)雜環(huán)基；其中R3中有成鍵能力的碳原子可以任選被取代，每個(gè)烷基部分有1~3個(gè)取代基，或每個(gè)環(huán)有1~3個(gè)取代基，取代基可以獨(dú)立地為鹵素，羥基，氨基，-CN，(C1-C4)烷基，(C1-C4)烷氧基，(C1-C4)烷NH-，[(C1-C4)烷基]2-N-，(C6-C10)芳基，(C3-C8)環(huán)烷基，(C1-C10)雜芳基和以及(C1-C10)雜環(huán)基；其中(C3-C8)環(huán)烷基和(C1-C10)雜環(huán)基可以任選地被氧代；(C1-C10)雜芳基及(C1-C10)雜環(huán)基中每環(huán)上可成鍵環(huán)氮原子可被1~2個(gè)取代基任選取代，取代基可以是(C1-C4)烷基，(C1-C4)烷基-(C＝O)-，(C6-C10)芳基，(C3-C8)環(huán)烷基，(C1-C10)雜芳基及(C1-C10)雜環(huán)基；其中R3基團(tuán)可任選地與R4基團(tuán)成鍵形成3-8元環(huán)；其中兩個(gè)R4形成-個(gè)3-8元環(huán)；R4獨(dú)立地為氫和(C1-4)烷基；G為R5-或R6-(CHR13)p-；其中G為B上可成鍵環(huán)碳原子的取代基，成鍵位置不在B與Y相連的鄰位；p為1-6的整數(shù)；其中R5為R7-，R11-O-，R7-(C1-C4)烷基-O-，R8-(C＝O)-O-，H2N(C＝O)-O-，R8NH(C＝O)-O-，(R8)2N(C＝O)-O-，R8-S-，R8-(S＝O)-，R8-(SO2)-，H2N-(SO2)-，R8-NH-(SO2)-，(R8)2N-(SO2)-，甲羧基，R8-(C＝O)-，HO-(C＝O)-，R8-O-(C＝O)-，H2N-(C＝O)-，R8NH-(C＝O)-，(R8)2N-(C＝O)-，-NO2，NH2，R8-NH-，(R8)2N-，H(C＝O)-(NR9)-，R8-(C＝O)-(NR9)-，H2N-(C＝O)-(NR9)-，R8NH-(C＝O)-(NR9)，(R8)2N-(C＝O)-(NR9)-，R8O-(C＝O)-(NR9)-，R8-(SO2)-NH-及R8-(SO2)-(NR9)-；R6為全氟代(C1-C4)烷基，(C1-C4)烯基，(C1-C4)炔基，R7，OH，R8-O-，R8-(C1-C4)烷基-O-，全氟代(C1-C4)烷氧基，R8-(C＝O)-O-，H2N(C＝O)-O-，R8-NH(C＝O)-O-，(R8)2N(C＝O)-O-，R8-S-，R8-(S＝O)-，R8-(SO2)-，H2N-(SO2)-，R8NH-(SO2)-，(R8)2N-(SO2)-，甲羧基，-CN，R8-(C＝O)-，HO-(C＝O)-，R8-O-(C＝O)-，H2N-(C＝O)-，R8NH-(C＝O)-，(R8)2N-(C＝O)-，-NO2，NH2，R8-NH-，(R8)2N-，H(C＝O)-(NR9)-，R8-(C＝O)-(NR9)-，H2N-(C＝O)-(NR9)-，R8NH-(C＝O)-(NR9)-，(R8)2N-(C＝O)-(NR9)-，R8O-(C＝O)-(NR9)-，R8-(SO2)-NH-及R8-(SO2)-(NR9)-；R7為(C6-C10)芳基，(C3-C8)環(huán)烷基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環(huán)基；其中(C6-C10)芳香基，(C3-C8)環(huán)烷基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環(huán)基部分每環(huán)中環(huán)上可成鍵碳原子可以任選被1-3個(gè)取代基取代，取代基獨(dú)立地為F，Cl，Br，CN，OH，(C1-C4)烷基，(C1-C4)全氟代烷基，(C1-C4)全氟代烷氧基，(C1-C4)烷氧基，氨基，(C1-C4)烷基-NH-，[(C1-C4)烷基]2-N-及(C3-C8)環(huán)烷氧基；其中(C3-C8)環(huán)烷基及(C1-C10)雜環(huán)基部分可以任選地被氧代；其中(C1-C10)雜芳基及(C1-C10)雜環(huán)基部分環(huán)上成鍵氮原子可以被任選取代，每環(huán)上可以有1-2取代基，取代基獨(dú)立地為(C1-C4)烷基，(C1-C4)烷基-(C＝O)-；R8為(C1-C4)烷基，(C6-C10)芳香基，(C3-C8)環(huán)烷基，(CI-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環(huán)基；其中每個(gè)R8上可成鍵碳原子可任選被取代，每個(gè)烷基部分或環(huán)上可以有1-3個(gè)取代基，取代基獨(dú)立地為F，Cl，Br，CN，OH，(C1-C4)烷基，(C1-C4)全氟代烷基，(C1-C4)全氟代烷氧基，(C1-C4)烷氧基，(C3-C8)環(huán)烷氧基；其中(C3-C8)環(huán)烷基及(C1-C10)雜環(huán)基可被任選氧代；其中(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環(huán)基部分環(huán)上成鍵氮原子也可以任選取代，每環(huán)上可以有1-2取代基，取代基為(C1-C4)烷基，(C1-C4)烷基-(C＝O)-；其中這里提及的2個(gè)R8可以任選地與其連接的雜原子形成一個(gè)3-8元環(huán)；R9獨(dú)立地為氫和(C1-C4)烷基；R8與R9可以任選地與其連接的雜原子一起形成一個(gè)3-8元環(huán)；R10獨(dú)立地為氫和(C1-C4)烷基；R11是(C6-C10)芳基，(C1-C10)雜芳基及(C1-C10)雜環(huán)基；其中(C6-C10)芳基，(C1-C10)雜芳基及(C1-C10)雜環(huán)基部分上環(huán)上可成鍵碳原子可任選被取代，每環(huán)可以有1~3個(gè)取代基，取代基獨(dú)立地為F，Cl，Br，CN，OH，(C1-C4)烷基，(C1-C4)全氟代烷基，(C1-C4)全氟代烷氧基，(C1-C4)烷氧基以及(C3-C8)環(huán)烷氧基；其中(C1-C10)雜環(huán)基也可以任選被氧代；(C1-C10)雜芳基及(C1-C10)雜環(huán)基部分環(huán)上成鍵氮原子可以被任選取代，每環(huán)上可以有1-2取代基，取代基獨(dú)立地為(C1-C4)烷基，(C1-C4)烷基-(C＝O)-；R12獨(dú)立地為氫及(C1-C4)烷基；R13獨(dú)立地為氫及(C1-C4)烷基；R13也可以任選地與R6形成4-10元環(huán)；或者上述化合物藥用的鹽。
本發(fā)明也涉及到式1所示化合物的藥用加酸鹽(酸加成鹽)。用來(lái)制備本發(fā)明上述堿性化合物藥用加酸鹽的酸，是那些形成非毒性的鹽，即包括藥用可以接受的陰離子，如鹽酸鹽，氫溴酸鹽，氫碘酸鹽，硝酸鹽，硫酸鹽，硫酸氫鹽，磷酸鹽，酸式磷酸鹽，乙酸鹽，乳酸鹽，檸檬酸鹽，酸檸檬酸鹽，酒石酸鹽，酒石酸氫鹽，琥珀酸鹽，馬來(lái)酸鹽，延胡索酸鹽，葡萄糖酸鹽，糖二酸鹽，苯甲酸鹽，甲基磺酸鹽，乙基磺酸鹽，苯磺酸鹽，對(duì)甲苯磺酸鹽和pamoate[即，1，1’-亞甲基-雙-(2-羥基-3萘甲酸鹽)]。
本發(fā)明也包括式1化合物的加堿鹽(堿加成鹽)。用來(lái)制備本質(zhì)上是酸性、式I化合物的藥用堿鹽的化學(xué)堿是那些與化合物形成無(wú)毒性加堿鹽的試劑。這些無(wú)毒性加堿鹽包括，但不僅限于那些來(lái)自那些藥用的陽(yáng)離子，如堿金屬陽(yáng)離子(如，鉀和鈉離子)，堿土金屬陽(yáng)離子(如，鈣、鎂離子)，銨離子或水溶性氨加成鹽，如N-甲基葡糖胺-(meglumine)，以及低級(jí)烷醇銨鹽和其他有機(jī)胺的藥用加堿鹽。
官能團(tuán)Y中的″鍵″，指Ar1與Z直接通過(guò)碳碳鍵連接形成pendent芳香基環(huán)，如聯(lián)苯“烷基”，除另有說(shuō)明外，包括飽和的單價(jià)烴的基團(tuán)，有直鏈，支鏈或環(huán)部分或及其組合。烷基可以地被合適的取代基任選取代；″烯基″，除另有說(shuō)明外，指含有至少一個(gè)烯鍵的有直鏈，支鏈或環(huán)部分或及其組合的碳?xì)浠鶊F(tuán)；″炔基″，除另有說(shuō)明外，指含有至少一個(gè)碳碳叁鍵的直鏈，支鏈或環(huán)部分或及其組合的碳?xì)浠鶊F(tuán)；″烷氧基″，包含O-烷基，其中的″烷基″與上面定義一致。
″鹵素″，除另有說(shuō)明外，包括氟，氯，溴或碘，優(yōu)選氟或氯。
″(C＝O)″這里指羰基。與氮原子一起形成的官能團(tuán)為酰氨。與氧原子一起形成的官能團(tuán)為羧酸衍生物。
″芳基″，，除另有說(shuō)明外，指從芳香烴移去1個(gè)或多個(gè)氫原子后的有機(jī)基團(tuán)，如苯基，萘基-2，3-二氫化茚基或四氫萘基；其可被1-3個(gè)合適的取代基任選取代，取代基如氟，氯，氰基(CN)，硝基，三氟甲基，(C1-C6)烷氧基，(C6-C10)芳香基氧，(C3-C8)環(huán)烷基氧，三氟甲氧基，二氟甲氧基或(C1-C6)烷基。
″環(huán)烷基″，除另有說(shuō)明外，包括一個(gè)或兩個(gè)碳環(huán)(如，環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)戊基，環(huán)己基，環(huán)庚基，環(huán)辛基，環(huán)壬基，環(huán)戊烯基，環(huán)己烯基，二環(huán)[2.2.1]庚基，二環(huán)[3.2.1]辛基以及二環(huán)[5.2.O]壬基等)；其任選包括1-2雙鍵，被1-3合適的取代基任選取代，取代基包括氟，氯，三氟甲基，(C1-C4)烷氧基，(C6-C10)芳基氧，三氟甲氧基，二氟甲氧基或(C1-C4)烷基，更優(yōu)選的為氟，氯，甲基，乙基及甲氧基。
″雜芳基″，除另有說(shuō)明外，包括從芳香雜環(huán)化合物移去1個(gè)或多個(gè)氫的有機(jī)基團(tuán)，如苯并咪唑基，苯并呋喃基，苯并呋咱基，2H-1-苯并吡喃基，苯并噻二嗪，苯并噻嗪基，苯并噻唑基，苯并硫代苯基(benzothiophenyl)，苯并噁唑基，苯并二氫吡喃基，肉啉基，呋咱基，呋喃并吡啶基，呋喃基，咪唑基，吲唑基，二氫吲哚基，中氮茚基，吲哚基，3H-吲哚基，異吲哚基，異喹啉基，異噻唑基，異噁唑基，1，5-二氮雜萘基，噁二唑基，噁唑基，2，3-二氮雜萘基，蝶啶基，嘌啉基，吡嗪基，噠嗪基，吡啶基，嘧啶基，吡唑基，吡咯基，喹唑啉基，喹啉基，喹喔啉基，四唑基，噻唑基，噻二唑基，噻吩基，三嗪基，和三唑基，其中(C1-C10)雜芳基任一個(gè)環(huán)上可成鍵碳原子可地被1~2個(gè)取代基任選取代，合適的取代基如F，Cl，Br，CN，OH，(C1-C4)烷基，(C1-C4)全氟代烷基，(C1-C4)全氟代烷氧基，(C1-C4)烷氧基，和(C3-C8)環(huán)烷氧基。從上述所列化合物得到的前述官能團(tuán)，可能是C-連接或N-連接。如，從吡咯得到的官能團(tuán)可以為吡咯-1-基(N-連接)或吡咯-3-基(C-連接)。
″雜環(huán)基″，除另有說(shuō)明外，包括非芳香雜環(huán)化合物移去1甚至更多個(gè)氫原子或得到的有機(jī)官能團(tuán)，如3-氮雜二環(huán)[3.1.0]己基，3-氮雜二環(huán)[4.1.0]-庚基，氮雜環(huán)丁烷基，二氫呋喃基，二氫吡喃基，二氫噻吩基，二氧雜環(huán)己基，1，3-二氧雜環(huán)戊基，1，4-二噻嗪基，六氫azepinyl，六氫嘧啶，咪唑烷基，咪唑啉基，異噁唑烷基，嗎啉基，噁唑烷基，哌嗪基，哌啶基，2H-吡喃基，4H-吡喃基，吡唑烷基，吡唑啉基，吡咯烷基，2-吡咯啉基，3-吡咯啉基，喹嗪基，四氫呋喃基，四氫吡喃基，1，2，3，6-四氫吡啶基，四氫噻吩基，四氫硫代吡喃基，硫代嗎啉基，噻噁烷基(thioxanyl)，和三噻烷基(trithianyl)。從上述所列的化合物衍生得到的前述官能團(tuán)，可能為C-連接或N-連接。如，官能團(tuán)從哌啶得到的官能團(tuán)可以是哌啶-1-基(N-連接)或哌啶-4-基(C-連接)。從上述所列的化合物衍生得到的前述官能團(tuán)，可能的時(shí)候能被合適取代基任選取代，如氧代，F(xiàn)，Cl，Br，CN，OH，(C1-C4)烷基，(C1-C4)全氟取代烷基，(C1-C4)全氟取代烷氧基，(C1-C4)烷氧基，和(C3-C8)環(huán)烷基氧。
″合適的取代基″意指化學(xué)或藥學(xué)上可接受的官能團(tuán)，即，引入取代基不會(huì)使本發(fā)明化合物的抑制活性喪失。專業(yè)人員很容易選擇出這些合適的取代基。合適取代基的例子包括但不限于，鹵素，全氟取代烷基，全氟取代烷氧基，烷基，羥基，橋氧基(oxo)，巰基，烷硫基，烷氧基，芳香基或雜芳香基，芳香基氧或雜芳香基氧，芳代脂烷基或雜芳代脂烷基，芳代脂烷氧基或雜芳代脂烷氧基，羰基，氨基，烷基及二烷基氨基，甲氨?；榛驶?，烷氧基羰基，烷基氨基羰基，二烷基氨基羰基，芳香基羰基，芳香氧基羰基，烷基磺?；枷慊酋；邦愃苹鶊F(tuán)。
″可成鍵″指可以用另一種高級(jí)官能團(tuán)取代氫。
″連接位置不在B環(huán)與Y連接位置的α-位″指與Y相連的橋頭碳原子鄰位的取代。如果B是苯基，那么確定的基團(tuán)不能在鄰位取代(即相對(duì)于苯基與Y的連接而言)。
式I中的一些化合物包含手性中心，因此存在不同的對(duì)映異構(gòu)體式。本發(fā)明涉及式I所示的所有光學(xué)異構(gòu)體，對(duì)映異構(gòu)體，非對(duì)映異構(gòu)體，立體異構(gòu)體及其混合物。本發(fā)明的化合物也有不同互變異構(gòu)體。本發(fā)明涉及式1所有的互變異構(gòu)體。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員能意識(shí)到嘧啶-2，4，6-三酮母核在溶液中以互變異構(gòu)體的混合物形式存在。固態(tài)及液態(tài)下，各互變異構(gòu)體的比例取決于分子上不同的取代基以及用來(lái)純化化合物所用的特定結(jié)晶技術(shù)。
本發(fā)明包括式I所示的化合物，其中更優(yōu)選X為＞C＝O，更優(yōu)選其中Y為鍵，氧，S，-CH2-，＞SO2，-OCH2或-CH2O-，更優(yōu)選Y為氧，-OCH2-或-CH2O-，最優(yōu)選Y為氧。
本發(fā)明優(yōu)選化合物包括那些化合物，其中X為氧，-OCH2-，-CH2O-，更優(yōu)選X為氧；更優(yōu)選Y為鍵，氧，S，-CH2-，＞SO2，-OCH2-或-CH2O-，更優(yōu)選Y為氧，-OCH2-或-CH2O-，最優(yōu)選Y為氧。
本發(fā)明也包括式I代表的那些化合物，X為S，＞SO2，＞S＝O，-SCH2-，-CH2S-，-(O＝S)CH2-，-CH2(S＝O)-，-CH2SO2-或-SO2CH2-，更優(yōu)選Y為鍵，氧，S，-CH2-，＞SO2，-OCH2-或-CH2O-，更優(yōu)選Y為氧，-OCH2-或-CH2O-，最優(yōu)選Y為氧。
本發(fā)明也包括式I代表的下列化合物，其中X為＞NR10，-CH2N(R10)-或-N(R10)CH2-，更優(yōu)選Y為鍵，氧，S，-CH2-，＞SO2，-OCH2-或-CH2O-，更優(yōu)選Y為氧，-OCH2-或-CH2O-，最優(yōu)選Y為氧。
本發(fā)明也包括式I代表的下列化合物，其中X為-N(R10)SO2-或-SO2N(R10)-，更優(yōu)選其中Y為鍵，氧，S，-CH2-，＞SO2，-OCH2-或-CH2O-，更優(yōu)選其中Y為氧，-OCH2-，最優(yōu)選Y為氧。
其他優(yōu)選化合物包括A為任選取代的苯基的化合物。
本發(fā)明也包括下列化合物，其中A為(C1-C10)雜芳香基；優(yōu)選吡啶基，呋喃基，吡咯基，噻吩基，異噻唑基，咪唑基，苯并咪唑基，四唑基，吡嗪基，嘧啶基，喹啉基，異喹啉基，苯并呋喃基，異苯并呋喃基，苯并噻吩基，吡唑基，吲哚基，異吲哚基，嘌啉基，咔唑基，異噁唑基，噻唑基，噁唑基，苯并噻唑基或苯并噁唑基，更優(yōu)選吡啶基，噠嗪基，吡嗪基，嘧啶基，最優(yōu)選1-3合適的取代基任選取代的吡啶基，取代基如氟，氯，三氟甲基，(C1-C6)烷氧基，(C6-C10)芳香基氧，三氟甲氧基，二氟甲氧基或(C1-C6)烷基。
其他優(yōu)選化合物包括B為任選取代苯基的化合物。
本發(fā)明也包括式I的代表化合物，其中B為(C1-C10)雜芳香基(C1-C4)烷基或(C1-C10)雜芳基，優(yōu)選(C1-C10)雜芳基；其中(C1-C10)雜芳香基被1或多個(gè)取代基任選取代，優(yōu)選0，1或2個(gè)取代基，取代基獨(dú)立地為F，Cl，Br，-CN，OH，(C1-C4)烷基，(C1-C4)全氟代烷基，(C1-C4)全氟取代烷氧基，(C1-C4)烷氧基和(C3-C8)環(huán)烷氧基。
本發(fā)明也包括式I的代表化合物，其中B為-個(gè)(C1-C10)雜環(huán)基，如四氫呋喃基，四氫吡喃基，N-甲基-3-氮雜環(huán)丁基，哌嗪基，哌啶基，1，3-噁唑烷-4-酮-5-基，1，3-噁唑烷-2，4-二酮-5-基，4，5二氫-1，2-噁唑烷-3-酮-4-基，1，3-噻唑烷-4-酮-5-基，1，3-噻唑烷-2，4-二酮-5-基，1，3-咪唑烷-4-酮-5-基，1，3-咪唑烷-2，4-二酮-5-基，1，2-吡唑烷-3-酮-4-基，四氫-1，3-噁嗪-4-酮-5-基，四氫-1，3-噁嗪-2，4-二酮-5-基，嗎啉基，嗎啉-3-酮-2-基，嗎啉-3，5-二酮-2-基，2，3-二氫-1，4-噁嗪-3-酮-2-基，四氫-1，3-噻嗪-4-酮-5-基，四氫-1，3-噻嗪-2，4-二酮-5-基，硫代嗎啉基，硫代嗎啉-3-酮-2-基，硫代嗎啉-3，5-二酮-2-基，2，3-二氫-1，4-噻嗪-3-酮-2-基，六氫-1，2-二嗪-3-酮-4-基，4，5-二氫-2H-噠嗪-3-酮-4-基，六氫-1，3-二嗪-2，4-二酮-5-基，哌嗪-2-酮-3-基，哌嗪-2，6-二酮-3-基，四氫-1，3，4-噻二嗪-5-酮-6-基，5，6-二氫-1，3，4-噻二嗪-5-酮-6-基，1，3，4-噁二嗪-5-酮-6-基，5，6-二氫-1，2，4-噁二嗪-5-酮-6-基，四氫-1，2，4-噁二嗪-5-酮-6-基，1，2，4-三嗪-5-酮-6-基，四氫-1，2，4-噁二嗪-5-酮-6-基，5，6-二氫-1-2，4-噁二嗪-5-酮-6-基，1，2，4-噁二嗪-3，5-二酮-6-基，和1，2，4-三嗪-6-酮-5-基；優(yōu)選四氫呋喃基，四氫吡喃基，N-甲基-3-氮雜丁烷基，哌嗪基，哌啶基，N-甲基哌啶基和嗎啉基；更優(yōu)選四氫呋喃基和四氫吡喃基；最優(yōu)選四氫呋喃-2-基和四氫吡喃-2-基。普通技術(shù)人員會(huì)認(rèn)識(shí)到詳述中的編號(hào)方法為與標(biāo)準(zhǔn)命名法中以最重原子為起點(diǎn)一致。
本發(fā)明也包括式I的下列化合物，其中B為(C3-C10)環(huán)烷基，如環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)戊基，環(huán)己基或環(huán)庚基；優(yōu)選環(huán)己基或環(huán)庚基。
本發(fā)明也包括式I的下列化合物，其中G為R5-，其中R5為H2N-(C＝O)-，R8NH-(C＝O)-，(R8)2N-(C＝O)-，NH2，R8-NH-，(R8)2N-，R8-(C＝O)-(NR9)-，H2N-(C＝O)-(NR9)-，R8NH-(C＝O)-(NR9)-，(R8)2N-(C＝O)-(NR9)-，R8O-(C＝O)-(NR9)-，R8-(SO2)-NH-，R8-(SO2)-(NR9)-R8-(SO2)-，和H2N-(SO2)-；優(yōu)選H2N-(C＝O)-，R8NH-(C＝O)-，(R8)2N-(C＝O)-，NH2，R8-NH-，(R8)2N-，和R8-(C＝O)-(NR9)-，更優(yōu)選R8為(C1-C4)烷基(優(yōu)選甲基)。
本發(fā)明的其他優(yōu)選化合物，其中G為R5，其中R5包括R8官能團(tuán)，其中R8為(C1-C4)烷基或被任選取代的(C3-C8)環(huán)烷基，每個(gè)環(huán)上可成鍵環(huán)碳原子任選被1~3個(gè)取代基取代，取代基獨(dú)立地為F，Cl，Br，CN，OH，(C1-C4)烷基，(C1-C4)全氟取代烷基，(C1-C4)全氟取代烷氧基，(C1-C4)烷氧基，(C3-C8)環(huán)烷基氧；優(yōu)選(C1-C4)烷基和(C1-C4)烷氧基。
本發(fā)明優(yōu)選的化合物包括那些化合物，其中G為R5-，其中R5-為H2N-(C＝O)-，R8NH-(C＝O)-，(R8)2N-(C＝O)-或R8-(C＝O)-(NR9)-。本發(fā)明更優(yōu)選的化合物包括那些化合物，其中G為R5-，其中R5-為R8NH-(C＝O)-或(R8)2N-(C＝O)-。其中G為R5-、R5包括R8的最優(yōu)選化合物為那些R8為甲基的化合物。
本發(fā)明最優(yōu)選的化合物包括式I的那些化合物，其中G為R5-，其中R5為R7-或R7-(C1-C4)烷基-O-；其中R7優(yōu)選為(C6-C10)芳香基，(C3-C10)環(huán)烷基或(C1-C10)雜芳香基；每個(gè)環(huán)上的可成鍵環(huán)碳原子可被1~3個(gè)取代基任選取代，取代基獨(dú)立地為F，Cl，Br，CN，OH，(C1-C4)烷基，(C1-C4)全氟代烷基，(C1-C4)全氟烷氧基，(C1-C4)烷氧基，氨基，(C1-C4)烷基-NH-，[(C1-C4)烷基]2-N-和(C3-C8)環(huán)烷氧基。本發(fā)明更優(yōu)選的化合物包括式I的那些化合物，其中G為R5-，其中R5為R7-，其中R7為(C1-C10)雜芳香基。
發(fā)明者感興趣的其他化合物為那些化合物，其中G為R5-，其中R5為R7-，其中R7為(C6-C10)芳香基，更優(yōu)選苯基。
本發(fā)明化合物，其中G為R5-，其中R5為R7-或R7-(C1-C4)烷基-O-；包括那些化合物，其中R7為(C1-C10)雜芳基，其選自吡啶基，呋喃基，吡咯基，噻吩基，異噻唑基，咪唑基，苯并咪唑基，四唑基，吡嗪基，嘧啶基，喹啉基，異喹啉基，苯并呋喃基，異苯并呋喃基，苯并噻吩基，吡唑基，吲哚基，異吲哚基，嘌啉基，咔唑基，異噁唑基，噻唑基，噁唑基，苯并噻唑基或苯并噁唑基，更優(yōu)選吡啶基，嘧啶基，三唑，二唑，噁唑，噁二唑，吡咯或噻唑；其中每個(gè)(C1-C10)雜芳香基被1~3合適的取代基任選取代，如氟，氯，三氟甲基，(C1-C6)烷氧基，(C6-C10)芳香基氧，三氟甲氧基，二氟甲氧基和(C1-C6)烷基。
優(yōu)選的(C1-C10)雜芳香基包括五元環(huán)雜芳香基，如三唑類，二唑類，噁唑類，噁二唑類，吡咯類和噻唑類；優(yōu)選1，2，4-三唑-1-基，1，2，4-三唑-3-基，1，3，4-三唑-1-基，1，3-二唑-1-基，1，2-二唑-3-基，1，2-二唑-1-基，1，2-二唑-4-基，1，3-噁唑-4-基，1，3-噁唑-5-基，1，2-噁唑-5-基，1，2，4-噁二唑-3-基，1，3，4-噁二唑-2-基，吡咯-1-基，1，3-噻唑-4-基和1，3-噻唑-2-基；其被下列取代基任選取代(C1-C4)烷基，氨基，(C1-4)烷基-NH-，[(C1-C4)烷基]2-N-，鹵素或羥基，優(yōu)選(C1-C4)烷基，更優(yōu)選甲基。最優(yōu)選(C1-C10)雜芳香基包括被(C1-C4)烷基任選取代的1，3，4-噁二唑基。
本發(fā)明包括式I的那些化合物，其中G為-R5，其中R5為R11-O-或R8-(C＝O)-O-。發(fā)明者有興趣包括的化合物，R5包括R11，其中R11為(C6-C10)芳香基或(C1-C10)雜芳香基，環(huán)上可成鍵碳原子可任選被1~3個(gè)取代基取代，取代基獨(dú)立地為F，Cl，Br，CN，OH，(C1-C4)烷基，(C1-C4)全氟代烷基，(C1-C4)全氟代烷氧基，(C1-C4)烷氧基和(C3-C8)環(huán)烷氧基；優(yōu)選CN，(C1-C4)烷基，氨基，(C1-C4)烷基-NH-和[(C1-C4)烷基]2-N-。
本發(fā)明也包括式I所示的其他化合物，其中G為R5-，其中R5為R8-O-(C＝O)-或R8-(C＝O)-。
本發(fā)明也包括式I所示的其他化合物，其中G為R5-，其中R5為R8-S-，R8-(S＝O)-，R8-(SO2)-，R8-NH-(SO2)-或(R8)2N-(SO2)-。
本發(fā)明其它優(yōu)選方案為式I所示的化合物，其中G為R6-(CHR13)p-，優(yōu)選p為1~6的整數(shù)；下列化合物，其中R6為(C1-C4)烯基，(C1-C4)炔基，-CN，-NO2，OH，NH2，全氟取代(C1-C4)烷氧基，H2N-(SO2)-，H2N-(C＝O)-，R8-NH-(C＝O)-，(R8)2-(C＝O)-和NH2-(C＝O)-(NR9)-；優(yōu)選其中R6為-CN，OH，NH2，H2N-(C＝O)-或NH2-(C＝O)-(NR9)-；最優(yōu)選其中R6為H2N-(C＝O)-或-CN。
本發(fā)明其他優(yōu)選化合物包括式I所示的那些化合物，其中G為R6-(CHR13)p-，優(yōu)選其中p為1-6的整數(shù)；下列化合物，其中R6為(C6-C10)芳香基，(C3-C8)環(huán)烷基，(C1-C10)雜芳香基和(C1-C10)雜環(huán)基。本發(fā)明更優(yōu)選化合物是那些R6為(C1-C10)雜芳香基，任選地被0-3個(gè)取代基取代，取代基獨(dú)立地為鹵素或(C1-C4)烷基的化合物。
本發(fā)明其他優(yōu)選化合物包括式I的那些化合物，其中G為R6-(CHR13)p-，優(yōu)選p為1-6的整數(shù)；下列化合物，其中R6包括R8官能團(tuán)，如R8-O-，R8-(C1-C4)烷基-O-，R8-NH-，(R8)2N-R8-S-，R8-(S＝O)-，R8(SO2)-，R8-(SO2)-NH-，R8-(SO2)-(NR9)-，R8-NH-(SO2)-，(R8)2N-(SO2)-，H2N-(C＝O)-(NR9)-，R8NH-(C＝O)-(NR9)-，(R8)2N-(C＝O)-(NR9)-，R8O-(C＝O)-(NR9)-，R8-(C＝O)-(NR9)-，R8-(C＝O)-O-，R8-O-(C＝O)-和R8-(C＝O)-。本發(fā)明更優(yōu)選的是那些化合物，其中R8為-(C1-C4)烷基或(C3-C6)環(huán)烷基，其被1-3個(gè)取代基任選地取代，取代基為鹵素或(C1-C4)烷氧基。
本發(fā)明范圍的其他化合物包括G為R6-(CHR13)p-，和R6包括R8官能團(tuán)，其中R8為(C1-C10)雜芳香基，(C6-C10)芳香基或(C1-C10)雜環(huán)基的化合物，任一個(gè)環(huán)上可成鍵碳原子任選地被1-3個(gè)取代基取代，取代基可以為F，Cl，Br，CN，OH，(C1-C4)烷基，(C1-C4)全氟取代烷基，(C1-C4)全氟取代烷氧基，(C1-C4)烷氧基，和(C3-C8)環(huán)烷基氧；優(yōu)選(C1-C4)烷基和(C1-C4)烷氧基。
最優(yōu)選包括R8的-R6取代基為R8NH-(C＝O)-(NR9)-，(R8)2NH-(C＝O)-(NR9)-，R8O-(C＝O)-(NR9)-和R8-(C＝O)-(NR9)-，更優(yōu)選其中R8為(C1-C4)烷基，更優(yōu)選甲基。
本發(fā)明的其他化合物包括那些化合物，其中A與B上可以成鍵碳原子獨(dú)立地被1-3取代基任選取代，取代基可以是F，Cl，Br，-CN，OH，(C1-C4)烷基，(C1-C4)全氟取代烷基，(C1-C4)全氟取代烷氧基，(C1-C4)烷氧基及(C3-C8)環(huán)烷氧基。
本發(fā)明包括式I代表其他的化合物，其中R1為(C3-C8)環(huán)烷基，其中，(C3-C8)環(huán)烷基可被1~2個(gè)取代基任選取代，取代基獨(dú)立地為鹵素，(C1-C4)烷基，(C1-C4)烯基，(C1-C4)炔基，R3-，R3-O-，全氟取代(C1-C4)烷氧基，R3-(C1-C4)烷基-O-，R3-(C＝O)-O-，-NO2，(R3)2N-，R3-(C＝O)-(NR4)-，R3-S-，R3-(S＝O)-，R3-(SO2)-，R3-(SO2)-(NR4)-，R3-NH-(SO2)-，(R3)2N-(SO2)-，-CN，R3-(C＝O)-，R3-O-(C＝O)-和(R3)2N-(C＝O)-。
本發(fā)明包括式I代表其他的化合物，其中R1為(R2)2n+1(C)n-，n為1-10的整數(shù)；每個(gè)R2獨(dú)立地為鹵素，R3-，(C1-C4)烯基，(C1-C4)炔基，R3-O-，全氟取代(C1-C4)烷氧基，R3-(C＝O)-O-，(R3)2N-(C＝O)-O-，-NO2，(R3)2N-，R3-(SO2)-NR4)-，R3-(C＝O)-(NR4)-，R3O-(C＝O)(NR4)-，(R3)2-N-(C＝O)-(NR4)-，R3-S-，R3-(S＝O)-，R3-(SO2)-，(R3)2N-(SO2)-，-CN，R3-(C＝O)-，R3-O(C＝O)-及(R3)2N-(C＝O)-；其中不多于3個(gè)R2的取代基不是氫，-(C)n-上的任一個(gè)碳原子可僅包括一個(gè)與雜原子形成的鍵；每個(gè)R3獨(dú)立地為氫，(C1-C4)烷基，(C6-C10)芳香基，(C3-C8)環(huán)烷基，(C1-C10)雜芳香基及(C1-C10)雜環(huán)基；其中每個(gè)R3可以被1-3個(gè)取代基任選地取代，取代基獨(dú)立地為鹵素，羥基，氨基，-CN，(C1-C4)烷基，(C1-C4)烷氧基，(C1-C4)烷基-NH-，[(C1-C4)烷基]2-N-(C6-C10)芳香基，(C3-C8)環(huán)烷基，(C1-C10)雜芳香基和(C1-C10)雜環(huán)基；其中R3可以任選地與R4形成3-8元環(huán)。
本發(fā)明還包括式I代表其他的化合物，其中R1為(R2)2n+1-(C)n-，n為1~10的整數(shù)；至少一個(gè)R2可以獨(dú)立地為R3-，R3-O-，R3-(C＝O)-O-，R3-S-，R3-(S＝O)-，R3-(SO2)-，(R3)2N-，R3-(SO2)-(NR4)-，R3-NH-(SO2)-，(R3)2N-(SO2)-，R3-(C＝O)-(NR4)-，R3-O-(C＝O)-和R3-(C＝O)-；每個(gè)R3獨(dú)立地為氫和(C1-C4)烷基；其中每個(gè)R3(C1-C4)烷基部分可以被1~3個(gè)取代基任選取代，取代基獨(dú)立地為鹵素，羥基，氨基，-CN，(C1-C4)烷基，(C1-C4)烷氧基，(C1-C4)烷基-NH-，[(C1-C4)烷基]2-N-(C6-C10)芳香基，(C3-C8)環(huán)烷基，(C1-C10)雜芳香基和(C1-C10)雜環(huán)基；其中R3可以任選地與R4形成3-8元環(huán)。
本發(fā)明包括式I代表的其他化合物，其中R1為(R2)2n+1-(C)n-，n為1~10的整數(shù)；每個(gè)R2獨(dú)立地為氫，鹵素，(C1-C4)烷基，R3-和R3-O-。
本發(fā)明包括式I代表其他的化合物，其中n為1-3；每個(gè)R3獨(dú)立地為氫和(C1-C4)烷基；其中每個(gè)R3(C1-C4)烷基部分可以被1-3個(gè)取代基任選取代，取代基獨(dú)立地為鹵素，羥基，氨基，-CN，(C1-C4)烷基，(C1-C4)烷氧基，(C1-C4)烷基-NH-，[(C1-C4)烷基]2-N-(C6-C10)芳香基，(C3-C8)環(huán)烷基，(C1-C10)雜芳香基和(C1-C10)雜環(huán)基。
本發(fā)明包括式I代表其他的化合物，其中n為1-3；每個(gè)R3獨(dú)立地為氫和(C1-C4)烷基；其中至少一個(gè)R3(C1-C4)烷基被下列取代基取代鹵素，羥基，氨基，-CN，(C1-C4)烷基，(C1-C4)烷氧基，(C1-C4)烷基-NH-，[(C1-C4)烷基]2-N-(C6-C10)芳香基，(C3-C8)環(huán)烷基，(C1-C10)雜芳香基和(C1-C10)雜環(huán)基。
本發(fā)明包括式I代表其他的化合物，其中n為1；每個(gè)R3獨(dú)立地為氫和(C1-C4)烷基；其中至少一個(gè)R3(C1-C4)烷基被(C1-C4)烷氧基，(C1-C4)烷基-NH-，或[(C1-C4)烷基]2-N-取代。
本發(fā)明包括式I代表其他的化合物，其中至少一個(gè)R3為(C6-C10)芳香基，(C3-C8)環(huán)烷基，(C1-C10)雜芳香基或(C1-C10)雜環(huán)基；其中每個(gè)R3可以被1~3個(gè)取代基任選取代，取代基為鹵素，羥基，氨基，-CN，(C1-C4)烷基，(C1-C4)烷氧基，(C1-C4)烷基-NH-，[(C1-C4)烷基]2-N-(C6-C10)芳香基，(C3-C8)環(huán)烷基，(C1-C10)雜芳香基和(C1-C10)雜環(huán)基。
更優(yōu)選R1為(C1-C4)烷氧基(C1-C4)烷基，最優(yōu)選乙氧基乙基。
本發(fā)明更優(yōu)選包括式I的化合物，其中X為氧，Y為鍵，氧，硫，-CH2-，＞SO2，-OCH2-或-CH2O-；R1為(R2)2n+1-(C)n-，n為1；每個(gè)R2獨(dú)立地為氫，(C1-C4)烷基；其中至少1個(gè)R3(C1-C4)烷基官能團(tuán)為(C1-C4)烷氧基，(C1-C4)烷基-NH-或[(C1-C4)烷基]2-N-取代。
本發(fā)明最優(yōu)選包括I化合物，其中X為氧；Y為氧；A和B為獨(dú)立的任選取代苯基；G為任選取代的苯基，R1為(R2)2n+1-(C)n-，n為1；每個(gè)R2獨(dú)立地為氫，(C1-C4)烷基，R3-及R3-O-，每個(gè)R3獨(dú)立地為氫，(C1-C4)烷基；其中1個(gè)R3(C1-4)烷基官能團(tuán)被(C1-C4)烷氧基取代。
本發(fā)明其他最優(yōu)選包括式I化合物，其中X為氧；Y為氧；A和B為任選取代的苯基；G為任選取代的(C1-C10)雜芳香基，R1為(R2)2n+1-(C)n-，n為1；每個(gè)R2為獨(dú)立地為氫，(C1-C4)烷基，R3-及R3-O-，每個(gè)R3獨(dú)立地為氫和(C1-C4)烷基；其中1個(gè)R3(C1-C4)烷基被(C1-C4)烷氧基取代。
本發(fā)明更優(yōu)選包括式I化合物，其中X為氧；Y為氧；A和B為任選取代的苯基；G為任選取代的(C3-C8)環(huán)烷基，R1為(R2)2n+1-(C)n-，n為1；每個(gè)R2獨(dú)立地為氫，(C1-C4)烷基，R3-和R3-O-，每個(gè)R3獨(dú)立地為氫和(C1-C4)烷基；其中一個(gè)R3(C1-C4)烷基被(C1-C4)烷氧基取代。
本發(fā)明最優(yōu)選化合物，其中X為氧；Y為氧；A及B為任選取代的苯基；G為R6-(CHR9)p-，R1為(R2)2n+1-(C)n-，n為1；每個(gè)R2獨(dú)立地為氫，(C1-C4)烷基，R3-和R3-O-，每個(gè)R3為獨(dú)立地為氫和(C1-C4)烷基；其中1個(gè)R3(C1-C4)烷基被(C1-C4)烷氧基取代。
式I特別優(yōu)選的化合物包括5-(2-乙氧乙基)-5-[4-(4-噻唑-2-基-苯氧)-苯氧]-嘧啶-2，4，6-三酮；5-(2-乙氧乙基)-5-{4-[4-(2-甲基-2H-吡唑-3-基)-苯氧]-苯氧}-嘧啶-2，4，6-三酮；5-(2-乙氧乙基)-5-{4-[4-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)-苯氧]-苯氧}-嘧啶-2，4，6-三酮；5-(4-{4-[5-(2-乙氧乙基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧]-苯氧}苯基)-戊腈；5-(2-乙氧乙基)-5-{4-[4-(2-甲基-噻唑-4-基)-苯基]-苯氧}-嘧啶-2，4，6-三酮；5-(2-乙氧乙基)-5-{4-[4-(1H-吡唑-3-基)-苯氧]-苯氧}-嘧啶-2，4，6-三酮；5-(2-乙氧乙基)-5-[4-(4-噁唑-5-基-苯氧)-苯氧]-嘧啶-2，4，6-三酮；及，5-(2-乙氧乙基)-5-[4-(4-嘧啶-4-基-苯氧)-苯氧]-嘧啶-2，4，6-三酮；或藥用鹽類。
本發(fā)明其他的化合物包括5-[4-(聯(lián)苯基-4-基氧)-苯氧]-5-(2-乙氧乙基)-嘧啶-2，4，6-三酮；5-[4-(聯(lián)苯基-3-基氧)-苯氧]-5-(2-乙氧乙基)-嘧啶-2，4，6-三酮；
N-(3-{4-[5-(2-乙氧乙基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧]-苯氧基}-苯基)-乙酰胺；5-(2-乙氧乙基)-5-[4-(4-[1，3，4]噁二唑-2-基-苯氧基)-苯氧基]-嘧啶-2，4，6-三酮；5-(2-乙氧乙基)-5-[4-(4-[1，2，4]三唑-1-基-苯氧基)-苯氧基]-嘧啶-2，4，6-三酮；5-[4-(4-氨甲基-苯氧基)-苯氧基]-5-(2-乙氧乙基)-嘧啶-2，4，6-三酮；5-(2-乙氧乙基)-5-[4-(4-咪唑-1-基-苯氧基)-苯氧基]-嘧啶-2，4，6-三酮；N-(4-{4-[5-(2-乙氧乙基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧]-苯氧基}芐基)-乙酰胺；4-{4-[5-(2-乙氧乙基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧]-苯氧基}苯甲酰胺；4’-{4-[5-(2-乙氧乙基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧]-苯氧基}-聯(lián)苯基-4-腈；5-(2-乙氧乙基)-5-[4-(4-甲磺酰基-苯氧基)-苯氧基]-嘧啶-2，4，6-三酮；4-{4-[5-(2-乙氧乙基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧]-苯氧基}-N-甲基苯甲酰胺；4-{4-[5-(2-乙氧乙基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧]-苯氧基}-N，N二甲基-苯甲酰胺；5-(2-乙氧乙基)-5-[4-(4-噁唑-4-基-苯氧基)-苯氧基]嘧啶-2，4，6-三酮；5-{4-[4-(5-二甲基氨基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基]-苯氧基}-5-(2-乙氧乙基)-嘧啶-2，4，6-三酮；5-(2-乙氧乙基)-5-[4-(4-吡咯-1-基-苯氧基)-苯氧基]-嘧啶-2，4，6-三酮；5-(2-乙氧乙基)-5-{4-[4-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基]-苯氧基}-嘧啶-2，4，6-三酮；5-(2-乙氧乙基)-5-{4-[4-(5-甲基-異噁唑-3-基)-苯氧基]-苯氧基}-嘧啶-2，4，6-三酮；5-(2-乙氧乙基)-5-[4-(6-氟-聯(lián)苯基-3-基氧)-苯基]-嘧啶-2，4，6-三酮；2-(4-{4-[5-(2-乙氧乙基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧]-苯氧基}苯基)-乙酰胺；5-(2-乙氧乙基)-5-[4-(4-[1，2，4]三唑-4-基-苯氧基)-苯氧基]嘧啶-2，4，6-三酮；5-[4-(4-環(huán)戊基-苯氧基)-苯氧基]-5-(2-乙氧乙基)-嘧啶-2，4，6-三酮；5-[4-(4-環(huán)己基-苯氧基)-苯氧基]-5-(2-乙氧乙基)-嘧啶-2，4，6-三酮；N-[2-(4-{4-[5-(2-乙氧乙基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧]-苯氧基}苯基)-乙基]-乙酰胺；5-(2-乙氧乙基)-5-{4-[4-(4H-[1，2，4]三唑-3-基)-苯氧基]-苯氧基}-嘧啶-2，4，6-三酮；5-(2-乙氧乙基)-5-[4-(4-羥基甲基-苯氧基)-苯氧基]-嘧啶-2，4，6-三酮；5-(2-乙氧乙基)-5-{4-[4-(5-乙基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基]-苯氧基}嘧啶-2，4，6-三酮；N-(4-{4-[5-(2-乙氧乙基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧]-苯氧基}芐基)-3-甲基-丁酰胺；戊酸4-{4-[5-(2-乙氧乙基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧]苯氧基}-芐基酰胺；5-(2-乙氧乙基)-5-[4-(4-噻唑-4-基-苯氧基)-苯氧基]-嘧啶-2，4，6-三酮；N-(4-{4-[5-(2-乙氧乙基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧-苯氧基}芐基)-異丁酰胺；N-(4-{4-[5-(2-乙氧乙基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧]-苯氧基}芐基)-2-甲氧基-乙酰胺；環(huán)丁烷羧酸4-{4-[5-(2-乙氧乙基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧]-苯氧基}-芐基酰胺；
N-(4-{4-[5-(2-乙氧乙基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧]-苯氧基}芐基)-2-甲基-丁酰胺；N-(4-{4-[5-(2-乙氧乙基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧]-苯氧基}芐基)-丙酰胺；5-(2-乙氧乙基)-5-[4-(3-甲基-4-[1，3，4]噁二唑-2-基-苯氧基)-苯氧基]嘧啶-2，4，6-三酮；5-(2-乙氧乙基)-5-{4-[3-甲基-4-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基]苯氧基}-嘧啶-2，4，6-三酮；5-(2-乙氧乙基)-5-[4-(4-吡唑-1-基-苯氧基)-苯氧基]-嘧啶-2，4，6-三酮；5-(2-乙氧乙基)-5-{4-[3-甲基-4-(1H-吡唑-4-基)-苯氧基]-苯氧基}-嘧啶-2，4，6-三酮；5-(2-乙氧乙基)-5-{4-[3-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-苯氧基]-苯氧基}-嘧啶-2，4，6-三酮；5-(2-乙氧乙基)-5-{4-[4-(1H-吡唑-4-基)-苯氧基]-苯氧基}-嘧啶-2，4，6-三酮；1-(4-{4-[5-(2-乙氧乙基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧]-苯氧基}芐基)-3-甲基-脲；5-(2-乙氧乙基)-5-[4-(3-氟-4-[1，3，4]噁二唑-2-基-苯氧基)-苯氧基]嘧啶-2，4，6-三酮；5-(2-乙氧乙基)-5-{4-[3-氟-4-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基]苯氧基}-嘧啶-2，4，6-三酮；5-{4-[3-氟-4-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基]-苯氧基}-5-(四氫呋喃-3-基)-嘧啶-2，4，6-三酮；5-(4-[3-氟-4-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基]-苯氧基}-5-(四氫吡喃-3-基)-嘧啶-2，4，6-三酮；5-{4-[4-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基]-苯氧基}-5-(四氫-呋喃-3-基)嘧啶-2，4，6-三酮；5-{4-[4-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基]苯氧基}-5-(四氫-吡喃-3-基)嘧啶-2，4，6-三酮；5-{4-[4-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基]-苯氧基}-5-(四氫-吡喃-2基甲基)-嘧啶-2，4，6-三酮；5-{4-[4-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基]-苯氧基}-5-(四氫-呋喃-2-基甲基)-嘧啶-2，4，6-三酮；5-{4-[3-氟-4-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基]-苯氧基}-5-(四氫呋喃-2-基甲基)-嘧啶-2，4，6-三酮；5-{4-[3-甲基-4-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基]-苯氧基}-5-(四氫-呋喃-2-基甲基)-嘧啶-2，4，6-三酮；5-(4-甲基-5-氧代-嗎啉-2-基甲基)-5-[4-(4-[1，3，4]噁二唑-2-基-苯氧基)苯氧基]-嘧啶-2，4，6-三酮；5-(4-甲基-3-氧代-嗎啉-2-基甲基)-5-[4-(4-[1，3，4]噁二唑-2-基-苯氧基)苯氧基]-嘧啶-2，4，6-三酮；N-異丙基-2-{5-[4-(4-[1，3，4]噁二唑-2-基-苯氧基)-苯氧基]-2，4，6-三氧六氫-嘧啶-5-基}-乙酰胺；N-(2-{5-[4-(4-[1，3，4]噁二唑-2-基-苯氧基)-苯氧基]-2，4，6-三氧-六氫嘧啶-5-基}-乙基)-異丁酰胺；5-{4-[4-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基]-苯氧基}-5-吡啶-2-基甲基嘧啶-2，4，6-三酮；5-{4-[4-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基]-苯氧基}-5-吡啶-3-基甲基-嘧啶-2，4，6-三酮；5-{4-[4-(5-甲基-[1，3，4)噁二唑-2-基)-苯氧基]-苯氧基}-5-吡啶-4-基甲基-嘧啶-2，4，6-三酮；5-{4-[6-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-吡啶-3-基氧]-苯氧基}-5-(四氫-呋喃-2-基甲基)-嘧啶-2，4，6-三酮；5-[4-(4-噁唑-2-基-苯氧基)-苯氧基-5-(四氫-呋喃-2-基甲基)-嘧啶-2，4，6-三酮；5-{4-[4-(2-氧代-吡咯烷-1-基甲基)-苯氧基-苯氧基}-5-(四氫-呋喃-2-基甲基)-嘧啶-2，4，6-三酮；環(huán)丁羧酸4-{4-[2，4，6-三氧-5-(四氫-呋喃-2-基甲基)六氫-嘧啶-5-基氧]-苯氧基}-芐基酰胺；5-4-(4-吡唑-1-基甲基-苯氧基)-苯氧基-5-(四氫-呋喃-2-基甲基)-嘧啶-2，4，6-三酮；
(5-{4-[4-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基]-苯氧基}-2，4，6-三氧-六氫嘧啶-5-基)-乙酸；(5-{4-[3-甲基-4-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基]-苯氧基}-2，4，6-三氧六氫-嘧啶-5-基)-乙酸；(5-{4-[3-氟-4-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基]-苯氧基}-2，4，6-三氧六氫-嘧啶-5-基)-乙酸；3-{5-[4-(5-([1，3，4]-噁二唑-2-基)-苯氧基)-苯氧基]-2，4，6-三氧-六氫嘧啶-5-基}-N，N-二甲基-丙酰胺；5-[4-(聯(lián)苯基-4-基氧)-苯氧基]-5-(環(huán)己基)-嘧啶-2，4，6-三酮；5-[4-(聯(lián)苯基-3-基氧)-苯氧基]-5-(環(huán)己基)-嘧啶-2，4，6-三酮；N-(3-{4-[5-(環(huán)己基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧]-苯氧基}-苯基)乙酰胺；5-(環(huán)己基)-5-[4-(4-[1，3，4]噁二唑-2-基-苯氧基)-苯氧基]-嘧啶-2，4，6三酮；5-(環(huán)己基)-5-[4-(4-[1，2，4]三唑-1-基-苯氧基)-苯氧基]-嘧啶-2，4，6-三酮；5-[4-(4-氨基甲基-苯氧基)-苯氧基]-5-(環(huán)己基)-嘧啶-2，4，6-三酮；5-(環(huán)己基)-5-[4-(4-咪唑-1-基-苯氧基)-苯氧基]-嘧啶-2，4，6-三酮；N-(4-{4-[5-(環(huán)己基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧]-苯氧基}-芐基)乙酰胺；4-{4-[5-(環(huán)己基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧]-苯氧基}-苯甲酰胺；4’-14-[5-(環(huán)己基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧]-苯氧基}-聯(lián)苯基-4腈；5-(環(huán)己基)-5-[4-(4-甲磺?；?苯氧基)-苯氧基]-嘧啶-2，4，6-三酮；4-{4-[5-(環(huán)己基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧]-苯氧基}-N-甲基苯甲酰胺；4-{4-[5-(環(huán)己基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧]-苯氧基}-N，N-二甲基苯甲酰胺；5-(環(huán)己基)-5-[4-(4-噁唑-5-基-苯氧基)-苯氧基]-嘧啶-2，4，6-三酮；5-(環(huán)己基)-5-[4-(4-噁唑-4-基-苯氧基)-苯氧基]-嘧啶-2，4，6-三酮；5-{4-[4-(5-二甲基氨基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基]-苯氧基}-5-(環(huán)己基)-嘧啶-2，4，6-三酮；5-(環(huán)己基)-5-[4-(4-吡咯-1-基-苯氧基)-苯氧基]-嘧啶-2，4，6-三酮；5-(環(huán)己基)-5-{4-[4-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基]-苯氧基}-嘧啶-2，4，6-三酮；5-(環(huán)己基)-5-{4-[4-(5-甲基-異噁唑-3-基)-苯氧基]-苯氧基}-嘧啶-2，4，6三酮；5-(環(huán)己基)-5-[4-(6-氟-聯(lián)苯基-3-基氧)-苯氧基]-嘧啶-2，4，6-三酮；2-(4-{4-[5-(環(huán)己基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧]-苯氧基}-苯基)乙酰胺；5-(環(huán)己基)-5-[4-(4-[1，2，4]三唑-4-基-苯氧基)-苯氧基]-嘧啶-2，4，6-三酮；5-(環(huán)己基)-5-{4-[4-(1H-吡唑-3-基)-苯氧基]-苯氧基}-嘧啶-2，4，6-三酮；5-(環(huán)己基)-5-{4-[4-(2-甲基-噻唑-4-基)-苯氧基]-苯氧基}-嘧啶-2，4，6三酮；5-(4-{4-[5-(環(huán)己基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧]-苯氧基}-苯基)-戊氰；5-[4-(4-環(huán)戊基-苯氧基)-苯氧基]-5-(環(huán)己基)-嘧啶-2，4，6-三酮；5-[4-(4-環(huán)己基-苯氧基)-苯氧基]-5-(環(huán)己基)-嘧啶-2，4，6-三酮；N-[2-(4-{4-[5-(環(huán)己基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧]-苯氧基}苯基)-乙基-乙酰胺；5-(環(huán)己基)-5-{4-[4-(4H-[1，2，4]三唑-3-基)-苯氧基]-苯氧基}-嘧啶-2，4，6三酮；5-(環(huán)己基)-5-{4-[4-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)-苯氧基]-苯氧基}-嘧啶2，4，6-三酮；
5-(環(huán)己基)-5-{4-[4-(2-甲基-2H-吡唑-3-基)-苯氧基]-苯氧基}-嘧啶2，4，6-三酮；5-(環(huán)己基)-5-[4-(4-羥基甲基-苯氧基)-苯氧基]-嘧啶-2，4，6-三酮；5-(環(huán)己基)-5-{4-[4-(5-乙基-{1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧基]-苯氧基}-嘧啶-2，4，6-三酮；N-(4-{4-[5-(環(huán)己基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧]-苯氧基}-芐基)-3-甲基-丁酰胺；戊酸4-{4-[5-(環(huán)己基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧]苯氧基}-芐基酰胺；5-(環(huán)己基)-5-{4-[4-(4-噻唑-4-基-苯氧基)-苯氧基]-嘧啶-2，4，6-三酮；N-(4-{4-[5-(環(huán)己基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧]-苯氧基}-芐基)-異丁酰胺；N-(4-{4-[5-(環(huán)己基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧]-苯氧基}-芐基)-2甲氧基-乙酰胺；環(huán)丁烷羧酸4-{4-[5-(環(huán)己基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5基氧]-苯氧基}-芐基酰胺；N-(4-4-[5-(環(huán)己基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧-苯氧基}-芐基)-2-甲基-丁酰胺；N-(4-{4-[5-(環(huán)己基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧]-苯氧}-芐基)丙酰胺；5-(環(huán)己基)-5-[4-(4-噻唑-2-基-苯氧)-苯氧]-嘧啶-2，4，6-三酮；5-(環(huán)己基1)-5-[4-(4-嘧啶-4-基-苯氧)-苯氧]-嘧啶-2，4，6-三酮；5-(環(huán)己基)-5-[4-(3-甲基-4-[1，3，4]噁二唑-2-基-苯氧)-苯氧]-嘧啶-2，4，6-三酮；5-(環(huán)己基)-5-{4-[3-甲基-4-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧]-苯氧}-嘧啶-2，4，6-三酮；5-(環(huán)己基)-5-[4-(4-吡唑-1-基-苯氧)-苯氧]-嘧啶-2，4，6-三酮；5-(環(huán)己基)-5-{4-[3-甲基-4-(1H-吡唑-4-基)-苯氧]-苯氧}-嘧啶-2，4，6-三酮；5-(環(huán)己基)-5-{4-[3-甲基-4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-苯氧]-苯氧}嘧啶-2，4，6-三酮；5-(環(huán)己基)-5-{4-[4-(1H-吡唑-4-基)-苯氧]-苯氧}-嘧啶-2，4，6-三酮；1-(4-{4-[5-(環(huán)己基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧]-苯氧}-芐基)-3-甲基-脲；1-(4-{4-[5-(環(huán)己基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧]-苯氧}-芐基)-3-丙基-脲；氮雜環(huán)丁烷-1-羧酸4-{4-[5-(環(huán)己基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧]-苯氧}-芐基酰胺；5-(環(huán)己基)-5-{4-(3-氟-4-[1，3，4]噁二唑-2-基-苯氧)-苯氧}-嘧啶-2，4，6-三酮；5-(環(huán)己基)-5-{4-[3-氟-4-(5-甲基-[1，3，4]噁二唑-2-基)-苯氧]-苯氧}-嘧啶-2，4，6-三酮；1-(4-{4-[5-(2-乙氧乙基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧]-苯氧}芐基)-3-丙基-脲；和氮雜環(huán)丁烷-1-羧酸4-{4-[5-(2-乙氧乙基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶5-基氧]-苯氧}-芐基酰胺；以及藥理可以接受的鹽類。
本發(fā)明也涉及一種藥用組合物，包括一定有效劑量的式I化合物或藥用鹽和藥用載體，用于治療包括人在內(nèi)的哺乳動(dòng)物的結(jié)締組織疾病，炎性疾病，免疫/過(guò)敏性疾病，傳染性疾病，呼吸系統(tǒng)疾病，心血管疾病，眼類疾病，代謝疾病，中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)疾病，肝/腎疾病，生殖健康疾病，胃病，皮膚疾病和腫瘤和其他以金屬蛋白酶活性為特征的疾病。
本發(fā)明也涉及一種藥用組合物，包括有效劑量的式I的化合物或藥用鹽，用來(lái)抑制包括人在內(nèi)哺乳動(dòng)物中，參與基質(zhì)降解的，基質(zhì)金屬蛋白酶或其他的金屬蛋白酶。
本發(fā)明也涉及一種治療包括人在內(nèi)的哺乳動(dòng)物中以下疾病方法結(jié)締組織疾病，炎性疾病，免疫/過(guò)敏性疾病，傳染性疾病，呼吸系統(tǒng)疾病，心血管疾病，眼類疾病，代謝疾病，中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)疾病，肝/腎疾病，生殖健康疾病，胃疾病，皮膚疾病和腫瘤和其他以基質(zhì)金屬蛋白酶活性為特征的疾病，該方法包括給予哺乳動(dòng)物劑一定量對(duì)上述疾病有效治療的化合物式I或藥用鹽。
本發(fā)明也涉及一種用來(lái)抑制包括人在內(nèi)的哺乳動(dòng)物中參與基質(zhì)降解的基質(zhì)金屬蛋白酶或其他金屬蛋白酶的方法，包括給予哺乳動(dòng)物有效劑量的式I化合物或其藥用鹽。
本發(fā)明者也發(fā)現(xiàn)可以由差異金屬蛋白酶活性(優(yōu)選MMP-13活性抑制)來(lái)確定式I抑制劑。發(fā)明者發(fā)現(xiàn)的優(yōu)選式I抑制劑中的一組包括那些對(duì)MMP-13選擇性抑制優(yōu)于MMP-1的化合物。本發(fā)明的化合物也對(duì)一組相關(guān)的reprolysins酶具有選擇性，如TACE和aggrecanase。發(fā)明者發(fā)現(xiàn)的優(yōu)選式I抑制劑中的另一組，包括那些對(duì)MMP-13選擇性抑制優(yōu)于MMP-1和MMP-14的化合物。發(fā)明者已能確定的另一組優(yōu)選的式I抑制劑包括那些選擇性抑制MMP-13優(yōu)于MMP-1和12的化合物。發(fā)明者已能確定的另一組優(yōu)選的式I抑制劑包括那些選擇性抑制MMP-13優(yōu)于MMP-1，12和14的化合物。發(fā)明者已能確定的另一組優(yōu)選的式I抑制劑包括那些選擇性抑制MMP-13優(yōu)于對(duì)MMP-1，2，3，7，9和14的抑制的化合物。本發(fā)明最優(yōu)選的化合物選擇性抑制MMP-13，優(yōu)于對(duì)MMP-1，2，3，7，9，12和14以及哺乳動(dòng)物reprolysins的抑制。
本發(fā)明也涉及一種治療方法，針對(duì)的醫(yī)療狀況以哺乳動(dòng)物的關(guān)節(jié)軟骨破壞為特征，方法包括給有提及狀況的主體以治療有效劑量的合適取代的嘧啶-2，4，6-三酮，其中提及的合適取代的嘧啶-2，4，6-三酮顯示i)MMP-13的IC50小于約100nM(更優(yōu)選50nM，最優(yōu)選小于20nM)，MMP-13的IC50用重組MMP-13分析方法測(cè)量，ii)MMP-1的IC50大于約200nM(更優(yōu)選大于500nM，最優(yōu)選大于1μM)，MMP-1的IC50用重組MMP-1分析方法測(cè)量；iii)MMP-14的IC50大于約200nM(更優(yōu)選大于500nM，最優(yōu)選大于1μM)，MMP-14的IC50用重組MMP-14分析方法測(cè)量。
本發(fā)明也涉及一種治療關(guān)節(jié)軟骨破壞的方法，其中提及的嘧啶-2，4，6-三酮同時(shí)顯示MMP-12的IC50大于約100nM(更優(yōu)選大于200nM，最優(yōu)選大于500nM)，MMP-12的IC50用重組MMP-12分析方法測(cè)量。
本發(fā)明也涉及一種關(guān)節(jié)軟骨破壞的治療方法，其中提及的嘧啶-2，4，6-三酮同時(shí)顯示i)MMP-2的IC50大于約200nM(更優(yōu)選大于500nM，最優(yōu)選大于1μM)，MMP-2的IC50用重組MMP-12分析方法測(cè)量，ii).MMP-3的IC50大于約200nM(更優(yōu)選大于500nM，最優(yōu)選大于1μM)，MMP-3的IC50用重組MMP-3分析方法測(cè)量，iii)MMP-7的IC50大于約200nM(更優(yōu)選大于500nM，最優(yōu)選大于1μM)，MMP-7的IC50用重組MMP-7分析方法測(cè)量，以及iv)MMP-9的IC50大于約200nM(更優(yōu)選大于500nM，最優(yōu)選大于1μM)，MMP-9的IC50用重組MMP-9分析方法測(cè)量。
″治療″，這里指逆轉(zhuǎn)，減輕，抑制發(fā)展，或預(yù)防疾病或狀況，或一種或多種癥狀這些紊亂或狀況。在這些情況下，使用這一術(shù)語(yǔ)。術(shù)語(yǔ)“進(jìn)行治療”包括如上定義的“治療”這種行為。
″結(jié)締組織疾病″這里指疾病如外傷引起的關(guān)節(jié)損傷后的退行性軟骨丟失，骨關(guān)節(jié)炎，骨質(zhì)疏松，Paget氏疾病，人造關(guān)節(jié)植入導(dǎo)致的松開，牙齒周圍疾病和齒齦炎。
″關(guān)節(jié)軟骨破壞″這里指結(jié)締組織疾病導(dǎo)致關(guān)節(jié)軟骨破壞，尤其是關(guān)節(jié)損傷，反應(yīng)性關(guān)節(jié)炎，急性焦磷酸關(guān)節(jié)炎(假性痛風(fēng))，牛皮癬患者關(guān)節(jié)炎，或青少年風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，更優(yōu)選骨關(guān)節(jié)炎。
″炎性疾病″這里指風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎，強(qiáng)直性脊椎炎，牛皮癬患者關(guān)節(jié)炎，牛皮癬，軟骨鈣質(zhì)沉著，痛風(fēng)，炎性腸病，潰瘍性大腸炎，Crohn氏病及惡病體質(zhì)。
″免疫/過(guò)敏疾病″這里指疾病如器官移植毒性，過(guò)敏反應(yīng)，過(guò)敏接觸超敏性，自身免疫疾病如肉芽腫炎癥/組織再造(如哮喘)，免疫抑制和芽腫性病變相關(guān)的疾病。
″傳染性疾病″包括那些由病毒，細(xì)菌，真菌或分支桿菌感染，這里指如敗血性關(guān)節(jié)炎，AIDS，發(fā)熱；Prion疾病，重癥肌無(wú)力，瘧疾，敗血癥，血液動(dòng)力學(xué)性休克，敗血性休克類的疾病。
″呼吸系統(tǒng)疾病″這里指如慢性梗阻肺部疾病(包括肺氣腫)，急性呼吸窘迫綜合癥，哮喘，過(guò)氧小泡損傷和自發(fā)性肺部纖維化和其他的纖維性肺部疾病類的疾病。
″心血管疾病″這里指如動(dòng)脈硬化癥，包括動(dòng)脈硬化斑破裂；大動(dòng)脈動(dòng)脈瘤，包括腹部大動(dòng)脈動(dòng)脈瘤和腦部大動(dòng)脈動(dòng)脈瘤；充血性心衰；心肌和腦梗塞；中風(fēng)；腦貧血；凝結(jié)物及急性時(shí)期反應(yīng)；左心室擴(kuò)張；貧血性再灌流后損傷；血管纖維瘤；血管瘤以及再狹窄類的疾病。
″眼病″這里指如異常血管生成，眼睛血管生成，眼睛發(fā)炎，圓錐性角膜，Sjogren氏綜合癥，近視，眼睛腫瘤，角膜移植排斥，角膜損傷，新血管性青光眼，角膜潰瘍，角膜瘢痕，視斑退化(包括年齡相關(guān)視斑退化(ARMD)，包括濕形和千形)，擴(kuò)散性玻璃體視網(wǎng)膜病和早熟性視網(wǎng)膜病類的疾病。
″代謝病″指如糖尿病(包括非胰島素依賴性糖尿病，糖尿病性視網(wǎng)膜病，胰島素抗性，糖尿病性潰瘍)類的疾病。
″中樞神經(jīng)系統(tǒng)″(CNS)疾病這里指如頭部外傷，脊髓損傷，中樞神經(jīng)系統(tǒng)的炎性疾病，神經(jīng)退行性疾病(急性和慢性)，Alzheimer氏疾病，神經(jīng)系統(tǒng)的脫髓鞘疾病，Huntington氏疾病，Parkinson氏疾病，外周神經(jīng)病，疼痛，腦淀粉樣血管病，情感或認(rèn)知增加，肌萎縮性脊髓側(cè)索硬化，多發(fā)性硬化，偏頭疼，消沉，厭食類的疾病。
″肝/腎疾病″這里指如腎病綜合癥，如腎小球性腎炎和腎小球疾病，蛋白尿，肝硬變以及間質(zhì)性腎炎類的疾病。
″生殖健康疾病″這里指如子宮內(nèi)膜異位，避孕(男性/女性)，月經(jīng)困難，功能不全性子宮失血，胎膜早熟性脫落和墮胎類的疾病。
″胃疾病″這里指如結(jié)腸吻合術(shù)和胃潰瘍類的疾病。
″皮膚疾病″這里指如皮膚老化，壓疼，牛皮蘚，濕疹，皮炎，輻射損害，組織潰瘍，褥瘡潰瘍，大皰性表皮松懈，異常創(chuàng)傷康復(fù)(局部給藥和口服劑型)，燒傷和鞏膜炎類的疾病。
″腫瘤″這里指如實(shí)體瘤，包括結(jié)腸瘤，乳腺瘤，肺癌以及prostrate腫瘤；腫瘤侵入，腫瘤生長(zhǎng)，腫瘤轉(zhuǎn)移，以及包括口腔和咽(嘴唇，舌，口，咽)，食道，胃，小腸，大腸，直腸，肝和膽汁通道，胰腺，喉，肺，骨骼，結(jié)締組織，皮膚，子宮頸，子宮體，卵巢，睪丸，膀胱，腎，和其他泌尿組織，眼腦和中樞神經(jīng)系統(tǒng)，甲狀腺和其他內(nèi)分泌腺體腫瘤在內(nèi)的腫瘤以及Hodgkin氏疾病，非Hodgkin氏淋巴瘤，多重骨髓瘤，和造血惡性瘤包括白血病和淋巴瘤，包括淋巴細(xì)胞淋巴瘤，粒性白細(xì)胞淋巴瘤和單核細(xì)胞淋巴瘤類的疾病。
本發(fā)明主題也包括同位素標(biāo)記發(fā)化合物，結(jié)構(gòu)上與式I相同，區(qū)別就在于一個(gè)或更多原子被與天然通常存在原子量或質(zhì)量數(shù)不同的原子代替?？梢杂脕?lái)標(biāo)記本發(fā)明化合物的同位素包括氫，碳，氮，氧，磷，氟及氯，分別為2H，3H，13C，14C，15N，18O，17O，31P，32P，35S，18F和36CI。本發(fā)明化合物，對(duì)應(yīng)的前藥以及化合物及前藥的藥用鹽的同位素及其他原子的同位素標(biāo)記化合物都在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。本發(fā)明的幾種同位素標(biāo)記的化合物，如用放射性同位素如3H及14C標(biāo)記，在藥物及/或底物的組織分布分析中有用。3H及14C這類同位素特別易于制備及檢測(cè)。并且用原子量較大的同位素，如氘2H取代由于代謝穩(wěn)定性增加會(huì)獲得一些治療優(yōu)勢(shì)，如增加體內(nèi)的半衰期或減少需要的劑量，因此，在有些情況下會(huì)非常有利。本發(fā)明式I所示的同位素標(biāo)記化合物及其前藥，用易得的同位素標(biāo)記試劑代替無(wú)同位素標(biāo)記試劑，依照方案中的過(guò)程和/或后述的實(shí)施例及制備方法通?？梢灾苽涞玫?。
本為發(fā)明也包括式I化合物前藥的藥用組合物。本發(fā)明也包括利用式I化合物的前藥通過(guò)抑制基質(zhì)金屬蛋白酶或抑制哺乳動(dòng)物reprolysin來(lái)治療或預(yù)防疾病的方法。式I化合物有游離氨基，酰氨基，羥基，磺酰氨或羧基可以衍生成前藥。前藥包括，利用氨基酸殘基或2或多個(gè)(如，2，3或4個(gè))或更多氨基酸殘基的多肽鏈與式I化合物中的游離酰氨基，氨基，羥基或羧酸官能團(tuán)形成共價(jià)的肽鍵得到的化合物。氨基酸包括通常用三字母表示的，天然存在的20種氨基酸，也包括4-羥基脯氨酸，羥基賴氨酸，demosine，異demosine，3-甲基組氨酸，正纈氨酸，beta-丙氨酸，gamma-氨基丁酸，瓜氨酸，高半光氨酸，高絲氨酸，鳥氨酸和蛋氨酸砜。前藥也包括，碳酸酯，氨基甲酸酯，酰氨和烷基酯，通過(guò)碳基碳前藥側(cè)鏈與式I化合物中上述取代基共價(jià)結(jié)合形成的化合物，碳酸酯、氨基甲酸酯、酰胺和烷基酯。前藥也包括式I化合物的二聚體。
本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員將會(huì)認(rèn)識(shí)到本發(fā)明的化合物對(duì)許多疾病的治療有用。普通技術(shù)人員也會(huì)認(rèn)識(shí)到用本發(fā)明化合物治療特定的疾病時(shí)，本發(fā)明的化合物也可以與多種現(xiàn)用治療該病的藥物聯(lián)合使用。
治療風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎時(shí)，本發(fā)明的化合物可以與其他藥物一起使用。如，TNF-a抑制劑，如抗TNF單克隆抗體(如英夫單抗(infliximab)，D2E7和CDP-870)；TNF受體免疫球蛋白分子(如etanercept)，ICE抑制劑，MEKKl抑制劑，COX-2抑制劑，如塞來(lái)昔布(celecoxib)，洛芬昔布，valdecoxib和etoricoxib；低劑量甲氨蝶呤，來(lái)氟米特，甾體類，氨基葡糖類，chondrosamines/硫酸酯，gabapentin，A-激動(dòng)劑，IL-1產(chǎn)生和釋放抑制劑，IL-l受體拮抗劑，如Kineret，CCR-1拮抗劑，羥氯喹，d-青霉胺，醋硫葡金或羥嗪(parenteral)或口服金(oral gold)。
本發(fā)明化合物可以與現(xiàn)有的治療骨關(guān)節(jié)炎藥物一起使用。合適的現(xiàn)有聯(lián)合使用治療藥物包括標(biāo)準(zhǔn)的非甾體抗炎藥(以后用NSAID表示)，如吡羅昔康，雙氯酚酸鈉；丙酸類，如萘普生，氟苯布洛芬，苯氧布洛芬鈣，酮基布洛芬和異丁洛芬；安芬鈉類如甲芬那酸，吲哚美辛，舒林酸，阿扎丙宗；吡唑酮類，如苯基保泰松；水楊酸鹽類，如阿斯匹林；COX-2抑制劑，如塞來(lái)昔布，valdeoxib，paracoxib，etoricoxib和洛芬昔布；鎮(zhèn)疼藥類；甾體類；氨基葡糖類，半乳糖胺/硫酸酯，加巴噴丁；A-激動(dòng)劑；IL-1產(chǎn)生和釋放抑制劑；CCR-1拮抗劑，LTD-4，LTB-4和5-LO抑制劑；p38激酶抑制劑和關(guān)節(jié)內(nèi)治療藥如皮質(zhì)甾類和透明質(zhì)酸類如透明質(zhì)酸鈉(hyalgan)和synvisc。
本發(fā)明的化合物也可以與抗腫瘤藥聯(lián)合使用，如endostatin和angiostatin或細(xì)胞毒性藥如阿霉素，柔紅霉素，順鉑，依托泊苷，紫杉醇，多西紫衫；生物堿類，如長(zhǎng)春新堿；抗代謝藥，如甲氨蝶呤。
本發(fā)明的化合物也可以與心血管類治療藥物聯(lián)合使用，包括鈣通道拮抗劑(如阿洛地平和尼非地平)；降脂藥如斯特汀類(如洛伐他汀，托伐他汀，洛普伐他汀和辛伐他汀)，；腎上腺素類如多沙唑嗪和特拉唑嗪；fibrates，beta-阻滯劑，Ace抑制劑(如卡托普利，賴諾普利，福辛普利，依那普利和喹那普利)；血管緊張素-2受體拮抗劑，如氯沙坦和依貝沙坦；硝酸酯類；CCB類；利尿劑如洋地黃，血小板凝聚抑制劑。本發(fā)明化合物血小板破裂預(yù)防藥聯(lián)合使用，如斯特汀，阿齊紅霉素；NSAID類，包括阿司匹林，肝素，urarfarin，阿昔單抗，TPA和血小板抑制劑。本發(fā)明的化合物也可以與中風(fēng)治療藥聯(lián)合使用，如NIF，NHEI類和CCRIR拮抗劑。
本發(fā)明的化合物也可以與CNS藥物聯(lián)合使用，如抗抑郁藥，(如珊特拉林)；抗帕金森病藥(如鹽酸司來(lái)吉蘭，卡巴多巴，L-多巴，多巴胺受體激動(dòng)劑，如累匹利洛，硫丙麥角林和派拉米蘇；MAOB抑制劑，如司來(lái)吉蘭和rasagiline；兒茶酚-O-甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑，如托卡朋，A-2抑制劑，多巴胺再攝取(reuptake)抑制劑，NMDA拮抗劑，尼古丁(Nicotine)激動(dòng)劑，NK-1抑制劑，多巴胺激動(dòng)劑和神經(jīng)元氧化氮合成酶抑制劑)以及抗Alzheimer氏藥，如杜尼匹次，他克林；COX-2抑制劑，丙戊茶堿或metryfonate。
本發(fā)明的化合物也可以與骨質(zhì)疏松治療藥，如roloxifene，droloxifene，lasoxifene或fosomax，以及免疫抑制劑劑，如FK-506和瑞帕霉素聯(lián)合使用。
本發(fā)明的化合物也可以與呼吸系統(tǒng)疾病治療藥聯(lián)合使用，如PDE-IV抑制劑，甾族類如氟地松，去炎松，布地縮松，布地縮松和丙酸倍氯米松；抗膽堿藥如異丙托品；擬交感神經(jīng)藥如沙美特羅，沙丁胺醇和左沙丁胺醇；抗過(guò)敏藥如甲關(guān)芳銨，氯雷他定，和西替利嗪；白三烯拮抗藥如扎魯司特和motelukast；柱細(xì)胞穩(wěn)定劑如棄白通。
本發(fā)明的化合物也可以與皮膚病治療藥聯(lián)合使用，如維甲酸，異維甲酸，甾體類藥物，如可的松和莫美達(dá)松；抗生素，如四環(huán)素；抗真菌藥，如克霉唑，咪康唑和氟康唑以及PDE-IV抑制劑。
本發(fā)明的化合物也可以與糖尿病治療藥物聯(lián)合用藥，如胰島素，包括人或人源化的胰島素和胰島素吸入劑，醛糖還原酶抑制劑；山梨醇脫氫酶抑制劑；抗糖尿病藥，如雙胍類二甲雙胍；glitazones；糖苷酶抑制劑，如阿卡波糖，磺酰基脲如格列沒脲和格列吡嗪；噻唑烷二酮類，如吡格列酮，羅格列酮和曲格列酮。優(yōu)選聯(lián)合給藥有利于治療糖尿病的副作用，如視網(wǎng)膜病，腎病和神經(jīng)病，尤其是視網(wǎng)膜病。
發(fā)明詳述下列方案舉例說(shuō)明了制備本發(fā)明的化合物的方法。除另有說(shuō)明外，下述方案及討論中的X，Y，Ar1，Z，R1，R2及R3與上述定義相同。
方案1
方案2
方案3
方案4
方案5
方案6
方案1表示從式V所示化合物通過(guò)兩個(gè)步驟制備式I化合物。參照方案1，式I化合物從化合物IV制備得到，其中L1及L2為離去基團(tuán)，如甲氧基，乙氧基，芐氧基或氯，優(yōu)選乙氧基，與化合物III(H2NCONH2)的脲在強(qiáng)堿性條件下極性溶劑中反應(yīng)得到，適合的堿包括甲醇鈉，乙醇鈉及甲醇鎂，優(yōu)選乙醇鈉。適合的溶劑包括醇類(如乙醇)或四氫呋喃，優(yōu)選無(wú)水乙醇。反應(yīng)在20℃-90℃進(jìn)行，優(yōu)選50℃-65℃，反應(yīng)時(shí)間約為15分鐘-16小時(shí)。
化合物IV由化合物V制備得到，其中L3是離去基團(tuán)，如鹵素，對(duì)甲苯基磺?；?OTs)或甲基磺?；?OMs)，優(yōu)選鹵素，最優(yōu)選氯或溴，在堿性條件下極性溶劑中與化合物II HX-A-Y-B-G反應(yīng)。合適的溶劑包括二甲基甲酰胺(DMF)，醇類(如乙醇)或四氫呋喃，優(yōu)選乙醇。反應(yīng)在20℃-90℃進(jìn)行，優(yōu)選50℃-65℃，反應(yīng)時(shí)間約為15分鐘-16小時(shí)。
化合物V由現(xiàn)有技術(shù)中己知的方法制備，可以參照WO98/58925中描述的方法，或The Organic Chemistry of Drug Synthesis，Lednicer D和Mitscher LA，1，167-277的綜述及其引用文件。上述每個(gè)參考文獻(xiàn)及應(yīng)用這里都全面引用。
化合物III有商品供應(yīng)，也可以參照專業(yè)人員已知方法的制備得到。
化合物II，HX-A-Y-B-G，有商品供應(yīng)，也可以參照本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知方法制備得到，或參照方案5的方法制備得到。
方案2為另一種制備化合物I的方法，由化合物VI或VII經(jīng)3步反應(yīng)得到。參照方案2，化合物I由化合物IX與合適的堿和合適的烷基化試劑R1L4在溶劑中反應(yīng)得到。合適的堿包括氫化鈉，碳酸鉀，碳酸鈉，三乙胺，吡啶或三乙醇胺；最優(yōu)選氫化鈉。合適的烷基化試劑包括那些其中L4為鹵素，對(duì)甲苯基磺酰基氧(OTs)或甲基磺?；?OMs)，優(yōu)選鹵素，最優(yōu)選氯或溴的化合物；或如Eshenmoser氏鹽的烷基化試劑；環(huán)氧化物或合適取代的親電氮雜環(huán)丙烷類(aziridine)。合適的溶劑依賴使用的堿，但可以從包括N，N-二甲基甲酰胺(DMF)，四氫呋喃和水中選擇。反應(yīng)溫度約為0℃-30℃，優(yōu)選約20℃~25℃，反應(yīng)時(shí)間約15分鐘-16小時(shí)。
化合物IX可由化合物VIII在強(qiáng)堿性條件下極性溶劑中與脲反應(yīng)制得。合適的堿包括甲醇鈉，乙醇鈉，甲醇鎂；優(yōu)選乙醇鈉。合適的溶劑包括醇類(如乙醇)或四氫呋喃，優(yōu)選無(wú)水乙醇。反應(yīng)溫度約20℃-90℃，優(yōu)選約50℃-65℃，反應(yīng)時(shí)間約15分鐘-16小時(shí)。
化合物VIII可從化合物VI制備得到，L3是離去基團(tuán)，如鹵素，對(duì)甲苯磺?；?OTs)或甲基磺?；?OMs)，優(yōu)選鹵素，最優(yōu)選氯，在極性溶劑中堿性條件下與化合物HX-A-Y-B-G反應(yīng)。合適的堿包括甲醇鈉，乙醇鈉，碳酸鉀以及氫化鈉；優(yōu)選乙醇鈉。合適的溶劑包括二甲基甲酰胺(DMF)，醇類(如乙醇)或四氫呋喃，優(yōu)選乙醇。反應(yīng)溫度約20℃-90℃，優(yōu)選約50℃-70℃，反應(yīng)時(shí)間約15分鐘-16小時(shí)，優(yōu)選3小時(shí)。這種類型的反應(yīng)在NiederlJ.B.及Roth R.T.的文章中(J.Amer.Chem.Soc.，1940，62，1154)也例舉說(shuō)明過(guò)。
化合物VIII也可以由VII在合適的催化劑的存在下制備得到，優(yōu)選醋酸銠(11)，參見CampbellM.等的方法(Aust.J.Chem.，1992，45，2061)。
化合物VI和VII已有商品化供應(yīng)，也可以根據(jù)本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員已知方法從易得的起始原料制備得到。如化合物VII可由Peace D.W.等的方法(Synthesis，1971，658)制備得到。
化合物III有商品供應(yīng)，也可根據(jù)本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員已知的方法制備得到。
方案3為另一種制備化合物1的方法；特別是X為氧或-OCH2-的那些化合物。參照方案3，化合物I可以通過(guò)化合物XI的烷基化得到，與式HO-A-Y-B-G的合適酚類化合物，參照Mitsonubu O.方法(Synthesis，1981，1)的方法制備得到；或與式L3CH2A-Y-B-G類合適的烷基化試劑，其中L3為離去基如鹵素，對(duì)甲苯磺?；?OTs)或甲基磺酰基氧(OMs)，優(yōu)選鹵素，最優(yōu)選氯或溴在合適的溶劑如N，N-二甲基甲酰胺，四氫呋喃，乙氰，合適的堿如氫化鈉，碳酸鉀，三乙基胺，吡啶或三乙醇胺存在條件下反應(yīng)得到，上述反應(yīng)溫度約為0℃~50℃，優(yōu)選約20℃，反應(yīng)時(shí)間約為15分鐘-16小時(shí)。
式XI所示的化合物也可以從化合物X制備得到，參照J(rèn).A.Vida等的方法(J.Med.Chem.，1974，17，732)。
式X的化合物可從式XII化合物制備得到，反應(yīng)用合適的堿，在式R1L4的合適烷基化試劑和溶劑中進(jìn)行，參照Biehl等的描述(J.Het.Chem.，1986，23，9)。合適堿如氫化鈉，碳酸鉀，三乙胺，吡啶，三乙醇胺；最優(yōu)選三乙醇胺。合適的烷基化劑包括L4為鹵素，對(duì)甲苯磺?；?OTs)或甲磺酰基氧(OMs)，優(yōu)選鹵素，最優(yōu)選氯或溴的化合物；或如Eshenmoser鹽類；環(huán)氧化物或合適取代親電試劑氮雜環(huán)丙烷類。合適的溶劑依賴所使用的堿，可以從N，N-二甲基甲酰胺，四氫呋喃，乙氰和水中選擇。反應(yīng)溫度約為0℃-30℃，優(yōu)選約20℃-25℃，反應(yīng)時(shí)間約15分鐘-16小時(shí)。
化合物XII已有商品供應(yīng)，也可以由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員按照文獻(xiàn)(Lednicer D.及Mitscher L.A.，The Organic Chemistry Drug Synthesis，第1卷第167-277頁(yè))中的方法及其中引用的文獻(xiàn)很方便制備得到。
方案4為另一種制備化合物1的方法。參照方案4，式I化合物可由化合物XIV的化合物與式HX-A-Y-B-G的化合物在堿性條件下烷基化得到。合適的堿包括聚合物結(jié)合的堿，如1，5，7-三氮雜二環(huán)[4.4.0]癸-5-烯固定在聚苯乙烯(PTBD)，PTBD用2％二乙烯基苯(DVB)或堿金屬的碳酸鹽交聯(lián)；優(yōu)選PTBD。適合的溶劑包括醇類(如乙醇，甲醇和丁醇)，DMF，THF或乙氰，優(yōu)選乙氰。反應(yīng)溫度約20℃-90℃，優(yōu)選約50℃-65℃，反應(yīng)時(shí)間約15分鐘-16小時(shí)。
化合物XIV從化合物X通過(guò)與合適的溴化試劑如Br2或Br2-Ph3P反應(yīng)得到。溴化可在惰性溶劑如水(合適的堿存在)，乙酸，乙氰或DMF，優(yōu)選水中進(jìn)行。反應(yīng)溫度0℃-40℃，優(yōu)選20℃-35℃，反應(yīng)時(shí)間約15分鐘-16小時(shí)。
或者，化合物I，當(dāng)其中X為S或-SCH2-，或?qū)?yīng)的氧化衍生物＞SO2，＞SO，-SO2CH2-，-SOCH2-時(shí)，可通過(guò)式X化合物嘧啶-2，4，6-三酮環(huán)與適當(dāng)?shù)亩蚧?SA-Y-B-G)2或(SCH2A-Y-B-G)2在合適的溶劑如N，N-二甲基甲酰胺，四氫呋喃，乙氰中，在合適的堿存在條件，如氫化鈉，碳酸鉀，三乙胺，吡啶或三乙醇胺，制備得到。反應(yīng)在20℃-70℃，優(yōu)選20℃，反應(yīng)時(shí)間約為15分鐘-16小時(shí)。
二硫化物(SA-Y-B-G)2或(SCH2A-Y-B-G)2可由相應(yīng)的硫醇化合物HSA-Y-B-G或HSCH2A-Y-B-G用本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的氧化方法制備得到。
化合物X已有商品供應(yīng)，也可以參照方案3或其他本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的方法制備得到。
本領(lǐng)域普通技術(shù)人員也許會(huì)認(rèn)識(shí)到側(cè)鏈R1和X-A-YB-G可以作為一個(gè)單元加入，如上述討論的那樣；或作為單獨(dú)單元如X-A加入，接著加入第二個(gè)單元L’-Y-B-G。這些都是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的方法。
方案5描述了式XV中間體的制備方法。式XV中間體是用來(lái)制備方案1-4式I化合物。參照方案5，式XV化合物(其中X’為＞(C＝O)-Cl，OH，SH，＞NHR10，CH2OH，CH2SH，CH2NHR10和SO2NHR10)，可從式XVI的合適化合物用本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的脫保護(hù)方法制備得到，可以參考Greene和Wuts文章，″Protecting Groups in Organic Synthesis，″(John Wiley & SonPress，2ndEd)。式XV的化合物(其中X’為-(C＝O)-Cl)可以從式XVI的化合物(其中P為羥基)與氯代試劑，如亞硫酰(二)氯或磷酰氯反應(yīng)制備得到。
式XVI的化合物(Y為O，S，CH2O，CH2S，NR18，CH2NR18或SO2NR18)可由式XVII化合物(其中W為Br或I)與式G-Z-YH化合物在合適的堿，如堿金屬碳酸鹽或氫氧化物，優(yōu)選碳酸鉀，在合適的催化劑，如銅(O)催化劑，優(yōu)選精細(xì)粉末狀青銅，在極性非質(zhì)子溶劑，如DMF或NMP，約80℃-140℃反應(yīng)6-24小時(shí)制備得到?；蛘撸?dāng)W為Cl，Br，I或三氟化物(trifalte)(TfO)時(shí)，偶合反應(yīng)也可在Buchwald和Hartwig氏反應(yīng)條件進(jìn)行，用合適的堿，如醇鹽類的堿，優(yōu)選叔丁醇鈉，在合適的溶劑中，如醚溶劑，優(yōu)選二噁烷，在鈀(O)催化劑，如Pd2(dba)3存在條件下，及合適的配基，如三芳香基膦，優(yōu)選三(鄰-甲苯基)膦，在溫度約40℃~100℃反應(yīng)約1-48小時(shí)。這些反應(yīng)條件在Angew.Chem.Int.Ed.Engl.，1998，37，2046-2067中進(jìn)行了評(píng)論，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員都熟悉。當(dāng)W為B(OH)2時(shí)，偶合反應(yīng)也可以用銅催化劑，優(yōu)選乙酸銅(II)，在4分子篩及叔胺堿，如三乙胺或吡啶存在下，在合適的溶劑，如二氯甲烷，DMSO或THF中，在一大氣壓的氧氣氛中進(jìn)行，反應(yīng)溫度約為10℃-50℃，優(yōu)選23℃反應(yīng)約6-72小時(shí)。在幾種情況(如，Y為CH2O，CH2S，CH2NR18或SO2NR18)下，更有利于利用式XVII的化合物(其中X為CHO，W為F)，與式G-Z-YH的化合物，在合適的堿，如堿金屬氫化物，優(yōu)選氫化鈉存在下，在非質(zhì)子極性溶劑，如DMF或THF，反應(yīng)溫度0℃-140℃反應(yīng)1-24小時(shí)得到式XVI的化合物。這些化合物可以用所謂的BayerVillager氧化條件轉(zhuǎn)化為化合物XVI(X為O)，或通過(guò)Curtius重排反應(yīng)轉(zhuǎn)化為化合物XVI(X為NR18)，兩種都是經(jīng)典的有機(jī)化學(xué)轉(zhuǎn)化方法，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員都熟知。
化合物XVI(其中Y為＞SO2，＞S＝O，-CH2SO-，-CH2SO2-，SO(CH2)n-，-SO2(CH2)n-，可以由相應(yīng)的低氧化態(tài)的化合物(如Y為-S-，-CH2S-，-S-(CH2)n-)用合適的氧化劑，如過(guò)氧酸，優(yōu)選過(guò)氧乙酸，或有機(jī)過(guò)氧化物，優(yōu)選間氯過(guò)氧苯甲酸或過(guò)氧化氫叔丁基，在合適的溶劑，如二氯甲烷或叔丁醇，反應(yīng)溫度-10℃~30℃反應(yīng)時(shí)間1-8小時(shí)制備得到。
式XVI的化合物(其中Y為O(CH2)n，S(CH2)n，NR18(CH2)n)可以由式XVII的化合物(其中W為L(zhǎng)-(CH2)n-，其中L為鹵素，甲磺?；?MsO)或甲苯磺酰基氧(TsO))，與式G-Z-Y-H所示的合適化合物(其中Y為O，S或NR18)，在合適的堿，如堿金屬碳酸鹽，優(yōu)選碳酸鉀或碳酸銫，在極性非質(zhì)子溶劑，如DMF或THF中，于23℃-80℃，優(yōu)選20-50℃，反應(yīng)124小時(shí)制備得到。
式XVI所示的化合物(其中Y為＞C＝O或CH＝CH)，可由式XVII的化合物(其中W為-B(OH)2，-ZnX或-SnR3)與化合物G-Z-Y-X(其中X為鹵素，優(yōu)選Cl，Br或I)，在鈀或鎳催化劑，優(yōu)選Pd(PPh3)4存在下，在合適的溶劑如甲苯，THF，DMF或DMSO中，在23℃-110℃反應(yīng)1-24小時(shí)制備得到。這類反應(yīng)在銅鹽，如碘化亞銅或溴化亞銅存在的條件下反應(yīng)會(huì)加速。式XVI的化合物(其中Y為-C≡C-)可用式XVII化合物(W為鹵素或三氟化物，優(yōu)選Br或I)，與式G-Z-Y-H所示的化合物，在合適的堿，如三烷基胺，優(yōu)選三乙基胺和鈀催化劑，優(yōu)選Pd(PPh3)4存在下，在合適的溶劑中，如THF或DMF，在23-60℃反應(yīng)1-24小時(shí)制備得到。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員會(huì)認(rèn)識(shí)到，式XVI的化合物(其中Y是-CH2(CH2)n-)，用前述化合物(其中Y是-CH＝CH-或-C＝C-)還原得到，還原條件為50psi環(huán)境壓力的氫氣氛，在鈀催化劑存在條件下，優(yōu)選附著在焦碳上的鈀，合適的溶劑，如甲醇或乙酸乙酯，在20℃-50℃反應(yīng)1-24小時(shí)。
化合物I(其中P為合適的保護(hù)基，如Green和Wuts上述定義的那樣)，已有商品供應(yīng)或本領(lǐng)域普通技術(shù)人員用知道的方法從市售起始原料制備得到。
方案6描述了式XVlll的化合物的制備過(guò)程，式XVIII中X為-OCH2-，SCH2-或-N(R10)CH2-。當(dāng)R1為氫時(shí)，化合物XVIII就是方案1中的化合物IV。參照方案6，化合物XVIII可由化合物XIX與化合物G-B-Y-A-XH(其中X為O，S或NR10)，在合適的堿，如堿金屬氫化物，優(yōu)選氫化鈉，及合適的溶劑，如醇類溶劑，THF或DMF在-20-50℃，優(yōu)選0℃-23℃反應(yīng)1-24小時(shí)制備得到。
式I類的化合物，本質(zhì)上是堿性的，可以與多種無(wú)機(jī)和有機(jī)酸形成多種鹽。盡管這些鹽對(duì)動(dòng)物給藥而言，必須是藥用可接受的，在實(shí)際操作中，通常是將式I化合物以非藥用鹽的形式從反應(yīng)混合物中的分離出來(lái)，然后簡(jiǎn)單地用堿試劑處理，將后者轉(zhuǎn)換成游離堿，隨后變成藥用加酸鹽。本發(fā)明化合物的加酸鹽很方便制備，堿化合物與實(shí)質(zhì)上等量所選的無(wú)機(jī)或有機(jī)酸在水溶性溶劑介質(zhì)或合適的有機(jī)溶劑如甲醇或乙醇反應(yīng)，小心蒸出溶劑，就得到需要的固體鹽。
用來(lái)制備本發(fā)明堿性化合物的藥用加酸鹽的酸，必須形成無(wú)毒性加酸鹽，即，鹽必須包括藥用陰離子，如鹽酸鹽，氫溴酸鹽，氫碘酸鹽，硝酸鹽，硫酸鹽或硫酸氫鹽，磷酸鹽或酸式磷酸鹽，乙酸鹽，乳酸鹽，檸檬酸鹽或酸式檸檬酸鹽，酒石酸鹽或酒石酸氫鹽，琥珀酸鹽，馬來(lái)酸鹽，延胡索酸，葡萄糖酸，糖酸鹽，苯甲酸鹽，甲磺酸鹽和pamoate[即，1，1’-亞甲基-二-(2-羥基-3-萘甲酸鹽)]。
式I化合物本質(zhì)上也呈酸性，能與多種陽(yáng)離子形成藥用加堿鹽。這些鹽包括堿金屬或堿土金屬鹽，特別是，鈉和鉀鹽。用常規(guī)的技術(shù)可以制備得到這些鹽。用來(lái)制備本發(fā)明的藥用加堿鹽的堿化學(xué)試劑為與式I的酸性化合物形成無(wú)毒性加堿鹽的堿類。這些的無(wú)毒性加堿鹽包括用藥用陽(yáng)離子如鈉，鉀，鈣和鎂等得到的那些鹽。這些鹽很方便制備得到，將相應(yīng)酸化合物與包括合適藥用陽(yáng)離子的水溶液混合，然后蒸發(fā)所得到溶液至干，優(yōu)選在減壓下進(jìn)行。
或者，它們也可以利用酸性化合物的低級(jí)烷醇溶液和合適的堿金屬烷醇化物混合，與前述方式相同蒸干反應(yīng)液，制備得到。在任何一種情況下，優(yōu)選使用化學(xué)計(jì)量的試劑，以保證反應(yīng)完全，得到最多產(chǎn)物。
生物活性分析結(jié)構(gòu)式I所示化合物或其藥用鹽(后面稱之為本發(fā)明的化合物)對(duì)金屬蛋白酶或哺乳動(dòng)物reprolysins的抑制活性，以及由此證明它們對(duì)以金屬蛋白酶活性為特征疾病的治療效果，將用下述體外和體內(nèi)分析實(shí)驗(yàn)來(lái)顯示。
MMP分析利用下述的MMP熒光分析篩選本發(fā)明的抑制劑，選擇MMP-13/MMP-X抑制IC50比例大于或等于100以及活性小于100nM的化合物確定為MMP-13選擇性抑制劑，這里MMP-X指一種或多種的其他MMP。
這里指的非選擇性膠原酶抑制劑，除非另有為說(shuō)明，指其對(duì)MMP-13酶的抑制選擇性小于對(duì)MMP-X酶100倍或用下述MMP-13/MMP-X熒光分析IC50結(jié)果來(lái)判斷的活性大于100nM的化合物。
膠原酶抑制劑對(duì)膠原酶活性有抑制作用已為本領(lǐng)域普通技術(shù)人員所熟悉。數(shù)個(gè)化合物對(duì)特定MMP抑制作用已有記載。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員知道如何將不同分析方法的結(jié)果與這里所使用的方法進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化。下述分析方法可以用來(lái)判斷基質(zhì)金屬蛋白酶抑制劑。
人膠原酶(MMP-1)抑制重組人膠原酶用胰蛋白酶激活。每批膠原酶-1所需的胰蛋白酶量需要優(yōu)化，但通常比例是100μg膠原酶用5μg胰蛋白酶。膠原酶及胰蛋白酶在室溫下孵育10分鐘，然后加入5倍量(50mg/10mg胰蛋白酶)的大豆胰蛋白酶抑制劑。
配制抑制劑的二甲亞砜?jī)?chǔ)藏液(10mM)，按照下述方案稀釋10mM----->120μM------>12μM------>1.2μM------>0.12μM每個(gè)濃度取25μL，然后加到96孔顯微熒光板上，重復(fù)三次。加入酶和底物后，抑制劑的終濃度為1∶4稀釋。陽(yáng)性對(duì)照(有酶，無(wú)抑制劑)在板上D7-D12位置，陰性對(duì)照(無(wú)酶，無(wú)抑制劑)在板上D1-D6的位置。
膠原酶-1稀釋到240ng/ml，在顯微熒光板上合適的孔中加入25μl。分析時(shí)膠原酶的終濃度為60ng/ml。
底物(DNP-Pro-Cha-Gly-Cys(Me)-His-Ala-Lys(NMA)-NH2)配成5mM的二甲亞砜?jī)?chǔ)存液，用分析緩沖液中稀釋到20μM。顯微熒光板的每孔中加入50μl底物啟動(dòng)分析，底物的終濃度為10μM。
在時(shí)間0點(diǎn)，進(jìn)行熒光讀數(shù)(360nm激發(fā)；460nm發(fā)射)，隨后每間隔20分鐘讀數(shù)一次。分析在室溫條件下進(jìn)行，通常的分析時(shí)間為3小時(shí)。
利用空白和包含膠原酶樣品的熒光數(shù)據(jù)(數(shù)據(jù)為三次數(shù)據(jù)的平均值)對(duì)時(shí)間作圖。由有好信號(hào)(至少5倍空白信號(hào))和曲線上是線性部分的時(shí)間點(diǎn)(通常約120分鐘)選擇來(lái)確定IC50數(shù)值。每個(gè)化合物每個(gè)濃度零時(shí)間點(diǎn)作為空白，120分鐘的數(shù)據(jù)減去這些數(shù)值。抑制劑濃度對(duì)百分抑制率作圖(抑制劑熒光/只有膠原酶熒光X100)。IC50確定為產(chǎn)生50％抑制信號(hào)的抑制劑濃度。
如果IC50的值小于0.03μM，就對(duì)抑制劑濃度為0.3μM，0.03μM，0.003μM進(jìn)行分析。
白明膠酶(MMP-2)抑制重組人72kD白明膠酶(MMP-2，白明膠酶A)在4℃用1mM對(duì)氨基苯基乙酸汞(用新配的100mM的0.2N NaOH儲(chǔ)存液)，輕微震蕩活化16-18小時(shí)。
抑制劑的10mM二甲基亞砜?jī)?chǔ)存液按照下列方案用分析緩沖液(50mMTRIS，pH7.5，200mM NaCl，5mM CaCl2，20μM ZnCl2和0.02％BRIJ-35(v/v))進(jìn)行連續(xù)稀釋。
10mM----->120μM------>12μM------>1.2μM------>0.12μM需要進(jìn)一步稀釋時(shí)按照同樣方案進(jìn)行。每個(gè)化合物至少分析四個(gè)抑制劑濃度。每個(gè)濃度取25μL，然后加到黑色U-型底96孔顯微熒光板上，重復(fù)三次。分析終體積為100μL，抑制劑的濃度就進(jìn)行了1∶4的稀釋(即30μM------>3μM------>0.3μM------>0.03μM，等)?？瞻?無(wú)酶，無(wú)抑制劑)和陽(yáng)性酶對(duì)照(有酶，無(wú)抑制劑)也分別制備三個(gè)孔。
激活的酶用分析緩沖液稀釋成100ng/mL，在合適的孔中，每孔加入25μL。酶的分析終濃度為25ng/mL(0.34nM)。
底物(Mca-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa-Ala-Arg-NH2)的5mM二甲基亞砜?jī)?chǔ)存液用分析緩沖液稀釋到20μM。加入50μL稀釋的底物啟動(dòng)分析，底物的分析終濃度10μM。立即記錄零時(shí)間點(diǎn)的熒光讀數(shù)(320激發(fā)；390發(fā)射)，隨后每15分鐘讀數(shù)一次，實(shí)驗(yàn)在室溫條件下，利用PerSeptive BiosystemssCytoluor Multi-Plate Reader(放大系數(shù)為90倍)進(jìn)行。
酶和空白的熒光平均數(shù)值對(duì)時(shí)間作圖。曲線上線性部分的早期時(shí)間點(diǎn)用來(lái)確定IC50。后續(xù)時(shí)間點(diǎn)數(shù)據(jù)減去每個(gè)化合物每個(gè)稀釋液零時(shí)間點(diǎn)數(shù)據(jù)，得到的數(shù)據(jù)然后用來(lái)定義酶抑制百分率(抑制劑熒光/陽(yáng)性酶對(duì)照熒光x100)。抑制劑濃度對(duì)酶抑制百分率作圖。IC50定義為50％陽(yáng)性酶對(duì)照熒光信號(hào)時(shí)的抑制劑濃度。
溶基質(zhì)素(stromelysin)活性(MMP-3)抑制重組人溶基質(zhì)素(MMP-3，溶基質(zhì)素-1)于37℃用2mM對(duì)氨基苯基乙酸汞(用新配100mM的0.2N NaOH儲(chǔ)存液)活化20-22小時(shí)。
抑制劑的10mM二甲基亞砜?jī)?chǔ)存液按照下列方案用分析緩沖液(50mMTRIS，pH 7.5，150mM NaCl，10mM CaCl2和0.05％BRIJ-35(v/v))進(jìn)行連續(xù)稀釋。
10mM----->120μM------>12μM------>1.2μM------>0.12μM需要進(jìn)一步稀釋時(shí)按照同樣方案進(jìn)行。每個(gè)化合物至少分析四個(gè)抑制劑濃度。每個(gè)濃度取25μL，然后加到黑色U-型96孔顯微熒光板上，重復(fù)三次。分析終體積為100μL，抑制劑的濃度就進(jìn)行了1∶4的稀釋(即30μM------>3μM------>0.3μM------>0.03μM，等)。空白(無(wú)酶，無(wú)抑制劑)和陽(yáng)性酶對(duì)照(有酶，無(wú)抑制劑)也分別制備三個(gè)孔。
激活的酶用分析緩沖液稀釋成200ng/mL，在合適的孔中，每孔加入25μL。分析時(shí)，酶的分析終濃度為50ng/mL(0.875nM)。
底物(Mca-Arg-Pro-Lys-Pro-Val-Glu-Nva-Trp-Arg-Lys(Dnp)-NH2)的10mM二甲基亞砜?jī)?chǔ)存液用分析緩沖液稀釋到6μM。加入50μL底物啟動(dòng)分析，底物的分析終濃度3μM。立即記錄零時(shí)間點(diǎn)的熒光讀數(shù)(320激發(fā)；390發(fā)射)，隨后每15分鐘讀數(shù)一次，實(shí)驗(yàn)在室溫條件下，利用PerSeptiveBiosystemss Cytoluor Multi-Plate Reader(放大系數(shù)為90倍)進(jìn)行。
酶和空白的熒光平均數(shù)值對(duì)時(shí)間作圖。曲線上線性部分的早期時(shí)間點(diǎn)用來(lái)確定IC50。后續(xù)時(shí)間點(diǎn)數(shù)據(jù)減去每個(gè)化合物每個(gè)稀釋液零時(shí)間點(diǎn)數(shù)據(jù)，得到的數(shù)據(jù)然后用來(lái)定義酶抑制百分率(抑制劑熒光/陽(yáng)性酶對(duì)照熒光X100)。抑制劑濃度對(duì)酶抑制百分率作圖。IC50定義為50％陽(yáng)性酶對(duì)照熒光信號(hào)時(shí)的抑制劑濃度。
人92kD白明膠酶(MMP-9)抑制92kD白明膠酶(MMP-9)抑制活性分析利用底物Mca-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa-Ala-Arg-NH2(10μM)進(jìn)行，類似于上述人膠原酶(MMP-1)抑制活性的實(shí)驗(yàn)條件。
重組人92kD白明膠酶(MMP-9，白明膠酶B)在37℃用1mM對(duì)氨基苯基乙酸汞(用新配100mM的0.2N NaOH儲(chǔ)存液)活化2小時(shí)。
抑制劑的10mM二甲基亞砜?jī)?chǔ)存液按照下列方案，用分析緩沖液(50mMTRIS，pH 7.5，200mM NaCl，5mM CaCl2，20mM ZnCl2和0.05％BRIJ-35(v/v))進(jìn)行連續(xù)稀釋。
10mM----->120μM------>12μM------>1.2μM------>0.12μM需要進(jìn)一步稀釋時(shí)按照同樣方案進(jìn)行。每個(gè)化合物至少分析四個(gè)抑制劑濃度。每個(gè)濃度取25μL，然后加到黑色U-型96孔顯微熒光上，重復(fù)三次。分析終體積為100μL，抑制劑的濃度就進(jìn)行了1∶4的稀釋(即30μM------>3μM------>0.3μM------>0.03μM，等)。空白(無(wú)酶，無(wú)抑制劑)和陽(yáng)性酶對(duì)照(有酶，無(wú)抑制劑)也分別制備三個(gè)孔。
激活的酶用分析緩沖液稀釋成100ng/mL，在合適的孔中，每孔加入25μL。酶的分析終濃度為25ng/mL(0.27nM)。
底物((Mca-Pro-Leu-Gly-Leu-Dpa-Ala-Arg-NH2)的5mM二甲基亞砜?jī)?chǔ)存液用分析緩沖液稀釋到20μM。加入50μL稀釋的底物啟動(dòng)分析，底物的分析終濃度10μM。立即記錄零時(shí)間點(diǎn)的熒光讀數(shù)(320激發(fā)；390發(fā)射)，隨后每15分鐘讀數(shù)一次，實(shí)驗(yàn)在室溫條件下，利用PerSeptive BiosystemssCytoluorMulti-Plate Reader(放大系數(shù)為90倍)進(jìn)行。
酶和空白的熒光平均數(shù)值對(duì)時(shí)間作圖。曲線上線性部分的早期時(shí)間點(diǎn)用來(lái)確定IC50。后續(xù)時(shí)間點(diǎn)減去每個(gè)化合物每個(gè)稀釋液零時(shí)間點(diǎn)，得到的數(shù)據(jù)然后用來(lái)定義酶抑制百分率(抑制劑熒光/熒光陽(yáng)性酶x100)。抑制劑濃度對(duì)酶抑制百分率作圖。IC50定義為50％陽(yáng)性酶對(duì)照熒光信號(hào)時(shí)的抑制劑濃度。
MMP-13抑制重組人MMP-13在37℃用2mM APMA(對(duì)氨基苯基乙酸汞)(用新配100mM的0.2N NaOH儲(chǔ)存液)活化1.5小時(shí)。然后用分析緩沖液(50mM TRIS，pH 7.5，200mM NaCl，5mM CaCl2，20μM ZnCl2和0.02％BRIJ(v/v))稀釋到400mg/mL。96孔顯微熒光板中，每孔加入25μL經(jīng)稀釋酶。由于加入了抑制劑和底物，酶就進(jìn)行了1∶4的稀釋，終濃度為100mg/mL。
抑制劑的10mM二甲基亞砜?jī)?chǔ)存液按照人膠原酶(MMP-1)抑制實(shí)驗(yàn)中每個(gè)抑制劑稀釋方案進(jìn)行。每個(gè)濃度取25μL，然后加到顯微熒光板上，重復(fù)三次。抑制劑的終濃度為30μM，3μM，0.3μM，0.03μM。
底物(Dnp-Pro-Cha-Gly-Cys(Me)-His-Ala-Lys(NMA)-NH2)按照人膠原酶(MMP-1)抑制實(shí)驗(yàn)配制。每孔中加入50μL底物啟動(dòng)分析，底物的分析終濃度10μM。熒光讀數(shù)(360激發(fā)；450發(fā)射)在時(shí)間0點(diǎn)記錄，每5分鐘記錄一次，連續(xù)記錄1小時(shí)。
陽(yáng)性對(duì)照包括為酶和底物，沒有抑制劑；空白對(duì)照只有底物。
IC50按照人膠原酶(MMP-1)抑制方法來(lái)確定。如果得到的IC50小于0.03μM，然后抑制劑按終濃度0.3μM，0.03μM，0.003μM和0.0003μM進(jìn)一步進(jìn)行分析。
膠原膜MMP-13分析I型大鼠膠原用14C乙酸酐進(jìn)行放射標(biāo)記(Cawston T.E.和BarrettA.J.，Anal.Biochem.，1979，99，340-345)，用來(lái)制備96孔板，形成一層放射標(biāo)記膠原膜(Barbara Johnson-Wint，Anal.Biochem.，1980，104，175-181)?？字屑尤肽z原酶溶液，酶就裂解處于展開狀態(tài)的不溶的膠原，膠原就溶解到溶液中。由于膠原酶活性與溶解的膠原的量成比例，因此用標(biāo)準(zhǔn)的閃爍記數(shù)儀測(cè)量釋放溶液中的放射活性比例，就可以確定膠原酶活性。膠原酶抑制劑，相對(duì)于沒有抑制劑存在的對(duì)照而言，就是那些降低釋放的放射記數(shù)的化合物。下面將詳細(xì)描述該分析方法。
將按照下述操作方法，以膠原為底物，來(lái)判斷化合物對(duì)MMP-13與MMP-1選擇性。重組人原MMP-13或原MMP-1用前述方法激活?；罨腗MP-13或MMP-1用緩沖液(50mM Tris，pH 7.5，150mM NaCl，10mM CaCl2，1μM ZnCl2和0.05％BRIJ(v/v)，0.02％疊氮化鈉)稀釋至0.6μg/ml。
受試化合物的儲(chǔ)存液(10mM)用二甲亞砜配制。用上述Tris緩沖液稀釋，配制0.2，2.0，20，200，2000和20000nM受試化合物稀釋液。
100μl藥物稀釋液和100μl酶稀釋液吸到14C-膠原標(biāo)記的含膠原膜的96孔板中。酶的終濃度為0.3μg/ml，藥物終濃度為0.1，1.0，10，100，1000nM。每個(gè)藥物濃度及對(duì)照分析三次。包含無(wú)酶和有酶無(wú)藥的對(duì)照也分析三次。
板在37℃孵育，直至大約30-50％膠原溶解，參照多個(gè)時(shí)間點(diǎn)的另外的對(duì)照孔記數(shù)來(lái)確定。在大多數(shù)情況下，需要約孵育9小時(shí)。分析充分進(jìn)行時(shí)，移出每孔的上清夜，閃爍記數(shù)儀記數(shù)。每個(gè)樣品減去背景記數(shù)(無(wú)酶孔的記數(shù))，參照有酶無(wú)抑制劑孔的記數(shù)，計(jì)算出百分釋放率。每個(gè)點(diǎn)的三個(gè)數(shù)值平均，百分釋放率對(duì)藥物濃度作圖。IC50為50％抑制放射標(biāo)記膠原的釋放時(shí)的濃度點(diǎn)。
為判別軟骨條件培養(yǎng)液中膠原酶活性的一致性，用膠原為底物，包括膠原酶和不同選擇性抑制劑的軟骨條件培養(yǎng)液來(lái)進(jìn)行分析。發(fā)生膠原降解時(shí)，收集軟骨條件培養(yǎng)液，用來(lái)代表分解膠原的膠原酶。分析按照前述方法進(jìn)行，不同的是，軟骨條件培養(yǎng)液作為酶源，代替重組MMP-13或重組MMP-1。
IL-1誘導(dǎo)降解來(lái)源于牛鼻軟骨的軟骨膠原分析使用的牛鼻軟骨外植片，通常用來(lái)評(píng)價(jià)化合物抑制IL-1誘導(dǎo)粘蛋白的降解或IL-1誘導(dǎo)膠原降解效果。牛鼻軟骨是與關(guān)節(jié)軟骨非常類似的組織，即單層軟骨細(xì)胞被基質(zhì)包圍，基質(zhì)主要是為II型膠原和聚集蛋白聚糖。利用該組織，主要因?yàn)?1)與關(guān)節(jié)軟骨類似，(2)方便得到，(3)同一性較好，(4)IL-1誘導(dǎo)后，按照可預(yù)見的動(dòng)力學(xué)降解。
有兩種分析方法來(lái)評(píng)價(jià)化合物的活性。兩種分析方法得到相似的數(shù)據(jù)。
下面介紹兩種分析方法分析方法13個(gè)牛鼻軟骨栓(直徑約2mm，長(zhǎng)1.5mm)放到24孔的組織培養(yǎng)板的孔中。每孔加入1ml無(wú)血清培養(yǎng)液?；衔锱涑?0mM的DMSO儲(chǔ)存液，用無(wú)血清培養(yǎng)基稀釋成合適的終濃度，即，50，500和5000nM。每個(gè)濃度分析重復(fù)三次。
將重組人IL-1α(5ng/mL)(IL-1)加到三份對(duì)照孔和含牛鼻軟骨栓的孔中。也設(shè)置無(wú)藥無(wú)IL1三份對(duì)照孔。移出培養(yǎng)液，在第6，12，18和24天加入幾-1的新鮮培養(yǎng)液和合適濃度的藥物，必要的時(shí)候也可以每3-4天加一次。在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)移出的培養(yǎng)液于-20℃保存，分析備用。當(dāng)只有IL-1的孔中軟骨的完全再吸收(約21天)的時(shí)候，終止實(shí)驗(yàn)。移出培養(yǎng)液，貯存。每孔每個(gè)時(shí)間點(diǎn)取出部分溶液(100μl)，用木瓜蛋白酶裂解，分析羥脯氨酸含量。每個(gè)數(shù)據(jù)減去背景羥脯氨酸(無(wú)IL一1和無(wú)藥孔數(shù)據(jù)平均)，對(duì)三重?cái)?shù)據(jù)平均。數(shù)據(jù)以相對(duì)于只有IL-1平均數(shù)據(jù)的百分率表示，作圖。IC50從該圖上確定。
分析方法2至第12天，實(shí)驗(yàn)與上述分析方法1相同。第12天，從每孔中移出調(diào)理的培養(yǎng)液，凍存。然后每孔加入1ml含0.5μg/ml胰蛋白酶的磷酸鹽緩沖液(PBS)，37℃繼續(xù)孵育48小時(shí)。胰蛋白酶孵育48小時(shí)后，移出PBS溶液。PBS/胰蛋白酶溶液(50μl)和前面的兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)(第6天和12天)混合，水解，確定羥基脯氨酸含量。每個(gè)數(shù)據(jù)點(diǎn)減去背景羥基脯氨酸(無(wú)IL-1和無(wú)藥孔數(shù)據(jù)的平均)，對(duì)三重?cái)?shù)據(jù)平均。數(shù)據(jù)以相對(duì)于只有IL-1平均數(shù)據(jù)的百分率表示，作圖。IC50從該圖上確定。利用這種分析方法，分析時(shí)間大為縮短。IL-1誘導(dǎo)12天后，加入胰蛋白酶，孵育48小時(shí)，可能釋放出被膠原酶破壞但還沒從軟骨基質(zhì)中釋放的所有II型膠原。膠原降解軟骨外植片實(shí)驗(yàn)中，不用IL-1誘導(dǎo)，只用胰蛋白酶處理只能得到低水平的背景。
TNF產(chǎn)生抑制化合物或藥用鹽對(duì)TNF產(chǎn)生抑制活性用下述體外分析方法評(píng)價(jià)。
人單核細(xì)胞分析人單核細(xì)胞是用一步Ficoll-hypaque分離技術(shù)從抗凝聚的人血中分離得到。(2)單核細(xì)胞用含二價(jià)陽(yáng)離子的Hanks平衡鹽溶液(HBSS)洗滌3次，重新懸浮于含1％BSA的HBSS中，密度為2×106/ml。利用Abbott Cell Dyn3500分析儀進(jìn)行差異記數(shù)，單核細(xì)胞占總細(xì)胞的17~24％。
細(xì)胞懸浮液移到平底96孔板(Costar)中，每孔加入180μl。加入化合物和LPS(100ng/ml終濃度)，得到終體積為200μl。所有的條件重復(fù)3次。在增濕的CO2培養(yǎng)箱中，37℃孵育4小時(shí)，移出培養(yǎng)板，250g離心10分鐘，移出上清液，用R&D ELISA試劑盒分析TNFa。
聚集蛋白聚糖酶分析原代豬軟骨細(xì)胞從關(guān)節(jié)軟骨分離得到，連續(xù)用胰蛋白酶和膠原酶消化，隨后用膠原酶消化過(guò)夜，按照每孔2×105細(xì)胞進(jìn)行鋪板，將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到48孔板，板為I型膠原質(zhì)包埋且加有5μCi/ml35S(1000Ci/mmol)硫。在37℃的5％CO2氣中培養(yǎng)，細(xì)胞的蛋白聚糖基質(zhì)中就會(huì)摻入標(biāo)記(大約1星期)。
啟動(dòng)分析的前夜，軟骨細(xì)胞用DMEM/1％PSF/G洗滌2次，然后在新鮮的DMEM/1％FBS中培養(yǎng)過(guò)夜。
次日上午軟骨細(xì)胞用DMEM/1％PSF/G洗滌一次。在配制稀釋液時(shí)，將最后的洗滌液保留在培養(yǎng)箱的板中。
按照下表配制培養(yǎng)液和稀釋液。
板進(jìn)行標(biāo)記，只使用板中間的24個(gè)孔。在其中的一塊板上，幾列標(biāo)記為IL-1(無(wú)藥)和對(duì)照(無(wú)IL-1，無(wú)藥)。這些對(duì)照定時(shí)測(cè)量35S-蛋白聚糖的釋放。對(duì)照和IL-1溶液加入孔中(450μl)，隨后加入化合物(50μl)啟動(dòng)分析。板在37℃的5％CO2氣中培養(yǎng)。
用液閃記數(shù)(LSC)分析溶液樣品，在40-50％釋放(當(dāng)IL-1溶液中CPM為對(duì)照溶液的4-5倍)時(shí)，分析終止(9-12小時(shí))。移出所有孔中的溶液，放入閃爍管中。加入閃爍液，得到放射活性記數(shù)(LSC)。每孔加入500μl木瓜蛋白酶消化緩沖液(0.2M Tris，pH7.0，5mM EDTA，5mM DTT，和1mg/ml木瓜蛋白酶)溶解細(xì)胞層。板用裂解液于60℃孵育過(guò)夜。第二天移出板中細(xì)胞層，放入液閃管。加入閃爍液，樣品放射活性記數(shù)(LSC)。
確定每個(gè)孔中釋放量相對(duì)于總量的百分比。每孔數(shù)據(jù)減去對(duì)照背景，對(duì)三份數(shù)據(jù)取平均?；衔锏囊种瓢俜致?，以IL-1樣品為0％抑制(100％總記數(shù))為基準(zhǔn)計(jì)算。
本發(fā)明的所有受試化合物，利用上述分析方法，至少在一種分析方法中的IC50小于100μM，甚至小于100nM。優(yōu)選的幾組化合物對(duì)多種MMP’s或ADAMs具有差異選擇性。一組優(yōu)選化合物對(duì)MMP-13具有選擇性活性優(yōu)于MMP-1。另一組優(yōu)選化合物對(duì)MMP-13具有選擇性活性，優(yōu)于MMP-1和MMP-12。
包括口服，腸胃外給藥(如，靜脈，肌肉或皮下)，口腔，肛門和局部給藥多種給藥途徑，可以用來(lái)給包括人在內(nèi)哺乳動(dòng)物給藥，抑制基質(zhì)金屬蛋白酶或哺乳動(dòng)物reprolysin。通常，本發(fā)明的化合物(下文也稱為活性化合物)按照治療對(duì)象的體重，以每天約0.1~25mg/kg劑量給藥，優(yōu)選約0.3~5mg/kg。優(yōu)選活性化合物的給藥方式為口服或腸胃外給藥。但是，劑量應(yīng)因治療對(duì)象的狀況而變。在任何情況下，負(fù)責(zé)給藥的人確定個(gè)體給藥量。
本發(fā)明化合物可以多種劑量給藥，通常，本發(fā)明的治療有效化合物的劑量濃度水平約為5.0％~70％(重量比)。
口服給藥，采用片劑，片劑包括多種賦形劑，如微晶纖維素，檸檬酸鈉，碳酸鈣，磷酸二鈣和甘氨酸；其他多種崩解劑，如淀粉(和優(yōu)選玉米，馬鈴薯或木薯淀粉)，海藻酸和某些復(fù)合硅酸鹽；粒狀粘合劑如聚乙烯吡咯烷酮，蔗糖，凝膠和阿拉伯樹膠。潤(rùn)滑劑如硬脂酸鎂，月桂硫酸鈉和滑石對(duì)片劑的制備很有用。相似類型的固體組分也可以用來(lái)作為明膠膠囊的填料；就此而言，優(yōu)選的材料也包括乳糖或牛奶糖以及高分子量的聚乙二醇。當(dāng)水性混懸液和/或酏劑用于口服給藥，可將活性組份與多種甜味或調(diào)味劑，成色物質(zhì)或染料混合，需要時(shí)，還可與乳化和/或懸浮劑以及稀釋劑如水，乙醇，丙二醇，丙三醇和多種類似物混合。如果對(duì)動(dòng)物給藥，通過(guò)動(dòng)物飼料或飲用水給藥更有利，濃度為5-5000ppm，優(yōu)選25~500ppm。
腸胃外給藥(肌肉，腹腔內(nèi)，皮下和靜脈)通常制備成活性組分的無(wú)菌注射溶液?？梢允褂帽景l(fā)明治療化合物芝麻或花生油或水溶性的丙二醇溶液。水溶液應(yīng)經(jīng)適當(dāng)?shù)恼{(diào)節(jié)和緩沖，必要的時(shí)候，優(yōu)選pH大于8，稀釋液應(yīng)該先成為等滲溶液。這些水溶液合適靜脈注射。油溶液合適關(guān)節(jié)，肌肉和皮下注射。在無(wú)菌的條件下，利用本領(lǐng)域普通技術(shù)人員熟悉的標(biāo)準(zhǔn)的制藥技術(shù)很方便制備這些溶液。如果是動(dòng)物用藥，化合物可以通過(guò)肌肉或皮下給藥，劑量約為0.1~50mg/kg/天，優(yōu)選單劑量為0.2~10mg/kg/天或分成3個(gè)以上的劑量給藥。
本發(fā)明活性化合物也可以通過(guò)直腸給藥如栓劑或保留灌腸劑(retention enemas)，如，包括常用的栓劑基質(zhì)如可可油或其他甘油脂。
鼻內(nèi)給藥或吸入給藥時(shí)，本發(fā)明活性化合物可用溶液或混懸液的形式方便地給藥，由病人擠壓或抽吸泵噴射容器；或氣霧給藥形式，利用壓縮容器或噴霧器，用合適的拋射劑，如，二氯二氟甲烷，三氯氟甲烷，二氯四氟乙烷，二氧化碳或其他合適氣體。在壓縮氣溶膠給藥時(shí)，藥物的劑量單位由一個(gè)閥門控制，輸出經(jīng)過(guò)測(cè)定的劑量。壓縮容器或噴霧器可以容納活性化合物的溶液或混懸液。吸入器或吹藥器中的膠囊和儲(chǔ)庫(kù)(cartridges)(由，如，明膠制備)包括本發(fā)明化合物和合適的粉狀輔料如乳糖或淀粉的粉狀混合物。
眼睛局部給藥，可以直接對(duì)受侵襲的眼進(jìn)行給藥，制劑形式為滴眼劑，氣溶膠，凝膠劑或軟膏，或并入膠原(如聚-2-羥基乙基甲基丙烯酸酯以及共聚物)，或親水性的聚合物護(hù)罩(polymer shield)。材料也可制備成接觸眼鏡(contact lens)或通過(guò)局部的給藥池(reservoir)或結(jié)膜下劑型(subconzunctival formulation)。
眼眶給藥通常制備成活性組分的無(wú)菌注射液。給藥時(shí)可以使用本發(fā)明治療化合物的水溶液或混懸液(顆粒小于10微米)。水溶液應(yīng)該經(jīng)過(guò)合適的調(diào)節(jié)和緩沖，必要的時(shí)候，優(yōu)選pH介于5~8；液體稀釋液先進(jìn)行等滲處理?？梢约尤胄┝康木酆衔镌黾诱承曰蜻_(dá)到緩釋的效果(如纖維素類的聚合物，右旋糖苷，聚乙二醇，或海藻酸)。這些溶液合適眼眶注射給藥。這些溶液在無(wú)菌條件用本領(lǐng)域普通技術(shù)人員熟悉的技術(shù)可以很方便制備得到。在給動(dòng)物給藥時(shí)，化合物眼眶給藥的劑量約為0.1~50mg/kg/天，優(yōu)選單劑量0.2~10mg/kg/天或3個(gè)以上的分劑量。
與其他給藥途徑和相應(yīng)劑型形式類似，口服給藥的也合適制備成活性組份的控釋，緩釋，和/或延遲釋放的劑型。通常，包括延遲釋放口服片劑，膠囊和復(fù)合粒子(multiparticulates)，包有腸溶衣的片劑和膠囊釋放，可以避免活性組分在病人胃里的釋放和吸收，加速轉(zhuǎn)運(yùn)到胃的遠(yuǎn)端，即，腸。其他典型的口服劑型包括緩釋口服片劑，膠囊，和復(fù)合粒子(multiparticulates)，可以在相當(dāng)長(zhǎng)的一段時(shí)間以可控的方式全身給藥，如，24小時(shí)。當(dāng)活性組分需要快速給藥時(shí)，控釋口服劑型可以制成快速溶解的片劑，也優(yōu)選包括活性組分的易溶鹽。
下述實(shí)施例舉例說(shuō)明了本發(fā)明化合物的制備方法。熔點(diǎn)未經(jīng)校正。NMR數(shù)據(jù)以ppm(δ)表示并且參照樣品溶劑的(除非說(shuō)明，都為氘代氯仿)氘鎖信號(hào)。商品化的試劑使用前未經(jīng)進(jìn)一步的純化。THF指四氫呋喃。DMF指N，N-二甲基甲酰胺。色譜指柱色譜，用32-63mm硅膠，在氮?dú)鈮毫ο逻M(jìn)行(快速色譜)。室溫或環(huán)境溫度指20-25℃。所有的無(wú)水反應(yīng)在氮?dú)獗Ｗo(hù)下進(jìn)行并且優(yōu)化了產(chǎn)率。減壓或真空濃縮指使用了旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。
實(shí)施例1
5-(2-乙氧乙基)-5-[4-(4-[1，3，4]噁二唑-2-基-苯氧基)-苯氧基]-嘧啶-2.4.6-三酮 將4-(4-[1，3，4]噁二唑-2-基-苯氧基)-苯酚(0.90g，2.5mmol)，5-溴5-(2-乙氧乙基)-嘧啶-2，4，6-三酮(1.0g，3.6mmol)，連接到聚苯乙烯上的1，5，7-三氮雜二環(huán)[4.4.0]癸-5-烯(1，5，7-trazabicyclo[4.4.0]dec-5-ene)(聚苯乙烯用2％DVB(二乙烯基苯)交聯(lián))(PTBD，F(xiàn)luka，2.4g，6.1mmol)和11.7mL乙氰混合，23℃振蕩24小時(shí)?；旌衔镉?0mL 25％乙酸的甲醇溶液稀釋，過(guò)濾，固體用乙酸-甲醇溶液洗兩次。濾液真空濃縮，用徑向(radical)色譜(2∶1~1∶1己烷-乙酸乙酯)純化，得到600mg 5-(2-乙氧乙基)-5-[4-(4-[1，3，4]噁二唑-2-基-苯氧基)-苯氧基]-嘧啶-2，4，6-三酮，為無(wú)色固體。
1H NMR(CD3OD)8.98(s，1H)，8.04(d，2H，J＝9.0Hz)，7.07(d，2H，J＝9.5Hz)，7.04(d，2H，J＝9.0Hz)，6.91(d，2H，J＝9.0Hz)，3.61(t，2H，J＝5.5Hz)，3.42(q，2H，J＝7.0Hz)，2.58(t，2H，J＝6.5Hz)，1.15(t，3H，J＝7.5Hz)ppm.
MS(m/z，APCI)496.3[M-H]-.
4-(4-[1，3，4]噁二唑-2-基-苯氧基)-苯酚將2-[4-(4-甲氧基-苯氧基)-苯基]-[1，3，4]噁二唑(1.1g，4.1mmol)，蛋氨酸(0.94g，4.9mmol)，甲磺酸(20.5mL)混合，混合物在50℃加熱1.5小時(shí)。傾入冰冷的5M氫氧化鈉(60mL)溶液中，飽和碳酸氫鈉水溶液稀釋，乙酸乙酯萃取三次，合并有機(jī)相，硫酸鈉干燥，過(guò)濾，真空濃縮，得到4-(4-[1，3，4]噁二唑-2-基-苯氧基)-苯酚，為無(wú)色固體(0.91g)。
1H NMR(CD3OD)8.97(s，1H)，8.01(d，2H，J＝9.0Hz)，7.04(d，2H，J＝9.0Hz)，6.97(d，2H，J＝9.0Hz)，6.87(d，2H，J＝9.0Hz)ppm2-[4-(4-甲氧基-苯氧基)-苯基]-[1，3，4]噁二唑?qū)?-甲氧基苯基硼酸(1.9g，12mmol)，4-(1，3，4)噁二唑-2-基苯酚(1.0g，6.2mmol)，乙酸銅(II)(1.1g，6.2mmol)，粉碎的4-分子篩(0.65g)，三乙基胺(4.2mL)以及二氯甲烷(22.7mL)混合，混合物在1大氣壓的氧氣下攪拌48小時(shí)?；旌衔餅V過(guò)Celite層，真空濃縮，徑向色譜純化(2∶1，正己烷-乙酸乙酯)，得到1.2g 2-[4-(4-甲氧基-苯氧基)-苯基]-[1，3，4]噁二唑。
1H NMR(CDCl3)8.44(s，1H)，8.02(d，2H，J＝9.0Hz)，7.05(m，4H)，6.95(d，2HaJ＝7.0Hz)，3.85(s，3H)ppm.
MS(m/z，APCI)300.2[M+H]+.
5-溴-5-(2-乙氧乙基)-嘧啶-2，4，6-三酮在0℃下，向5-(2-乙氧乙基)-嘧啶-2，4，6-三酮(27.8g，139mmol)及1.5L水的混合物中，加入1M氫氧化鈉(140mL)和溴(7.2mL，22.2g，139mmol)。恢復(fù)至室溫，攪拌48小時(shí)，過(guò)濾，固體用水洗，醚洗，己烷洗，真空干燥，得到23g的5-溴-5-(2-乙氧乙基)-嘧啶-2，4，6-三酮。
1H NMR(CDCl3)8.37(bs，2H)，3.53(t，2H，J＝7.0Hz)，3.35(q，2H，J＝6.5Hz)，2.99(t，2H，J＝7.0Hz)，1.05(t，3H，J＝6.5Hz)ppm.
MS(m/z，APCI)468.2[M+H]+.
5-(2-乙氧乙基)-嘧啶-2.4，6-三酮金屬鈉(8.6g，0.38mol)加到乙醇(375mL)中，混合物在室溫下攪拌直到形成均相。加入丙二酸二乙酯(60g，0.38mol)，然后加入溴乙基乙基醚(57.4g，0.38mol)。攪拌回流3小時(shí)，反應(yīng)液冷卻至室溫，真空濃縮。殘留物加入乙醇鈉及乙醇混合物(由17.2g金屬鈉和600mL甲醇反應(yīng)得到)。加入脲(24g)，混合物回流2.5小時(shí)。冷卻至室溫，繼續(xù)攪拌12小時(shí)，1M鹽酸酸化，乙酸乙酯萃取三次，合并有機(jī)相，硫酸鈉干燥，過(guò)濾，真空濃縮，得到無(wú)色的固體化合物5-(2-乙氧乙基)-嘧啶-2，4，6-三酮。
實(shí)施例2N-(4-{4-[5-(2-乙氧乙基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧]-苯氧基}芐基)-丙酰胺
參照實(shí)施例1的制備工藝，將N-[4-(4-羥基-苯氧基)-芐基]-丙酰胺(0.13g，0.47mmol)與5-溴-5-(2-乙氧基乙基)-嘧啶-2，4，6-三酮(0.13g，0.48mmol)，1，5，7-三氮雜二環(huán)[4.4.0]癸-5-烯(連接到聚苯乙烯-2％DVB交聯(lián)體)(PTBD，F(xiàn)luka，0.31g)和1.55mL乙氰反應(yīng)后，得到無(wú)色的固體化合物N-(4-{4-[5-(2-乙氧乙基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧]-苯氧基}芐基)-丙酰胺(0.060g)。
1H NMR(CD3OD)7.25(d，2H，J＝8.5Hz)，6.90(m，4H)，6.89(d，2H，J＝8.0Hz)，4.33(s，2H)，3.59(t，2H，J＝6.0Hz)，3.42(q，2H，J＝7.0Hz)，2.56(t，2H，J＝6.5Hz)，2.25(q，2H，J＝7.5Hz)，1.14(m，6H)ppm.
MS(m/z，APCI)468.3[M-H]-.
N-[4-(4-羥基-苯氧基)-芐基]-丙酰胺將4-(4-氨基甲基-苯氧基)-苯酚(0.10g，0.47mmol)，MMP樹脂(聚苯乙烯N-甲基嗎啉交聯(lián)型堿，0.30g，1.04mmol)和1.9mL乙氰混合物，用丙酰氯(0.086mL，1.0mmol)處理，室溫振蕩24小時(shí)。濾出樹脂后，濾液用2mL甲醇稀釋，加入2mL的1M氫氧化鋰(LiOH)水溶液，混合物室溫?cái)嚢?4小時(shí)，用Amberlite IRP-64樹脂處理至中性，過(guò)濾，真空濃縮，得到N-[4-(4-羥基-苯氧基)-芐基]-丙酰胺。MS(m/z)272.2[M+H]+。
實(shí)施例34-{4-[5-(2-乙氧乙基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧]-苯氧}-N甲基-苯甲酰胺 參照實(shí)施例1的制備過(guò)程，將4-(4-羥基-苯氧基)-N-甲基-苯甲酰胺(0.14g，0.58mmol)與5-溴-5-(2-乙氧乙基)-嘧啶-2，4，6-三酮(0.16g，0，58mmol)，1，5，7-traza二環(huán)[4.4.0]癸-5-烯(連接到聚苯乙烯與2％DVB交聯(lián)物)(PTBD，F(xiàn)luka，0.40g)和2.0mL乙氰反應(yīng)，得到無(wú)色固體化合物4-{4-[5-(2-乙氧乙基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧]-苯氧基}-N-甲基-苯甲酰胺(0.040g)。
1H NMR(CD3OD)7.79(d，2H，J＝9.0Hz)，7.00(d，2H，J＝9.5Hz)，6.95(d，2H，J＝8.5Hz)，6.90(d，2H，J＝9.0Hz)，3.61(t，2H，J＝5.5Hz)，3.42(q，2H，J＝7.5Hz)，2.91(s，3H)，2.57(t，2H，J＝5.5Hz)，1.14(t，3H，J＝7.0Hz)ppm.MS(m/z，APCI)440.2[M-H]-.
14-(4-羥基-苯氧基)-N-甲基-苯甲酰胺4-(4-羥基-苯氧基)-苯甲酸(0.25g，1.09mmol)，三乙胺(0.15mL，1.07mmol)及THF(5.0mL)的混合物在0℃下，加入氯甲酸甲酯(0.084mL，0.10g，1.1mmol)。攪拌15分鐘，用噴射管加入過(guò)量的甲胺，繼續(xù)攪拌10分鐘?；旌衔镉盟♂專宜嵋阴ポ腿∪?，合并有機(jī)相，Na2SO4干燥，過(guò)濾，真空濃縮，得到無(wú)色糖漿狀的14-(4-羥基-苯氧基)-N-甲基-苯甲酰胺。
1HNMR(CDCl3)7.70(d，2H，J＝9.0Hz)，6.87(m，6H)，2.96(s，3H)ppm.MS(m/z，APCI)244.2[M-H]-.
實(shí)施例45-[4-(4-氨甲基-苯氧基)-苯氧基]-5-(2-乙氧乙基)-嘧啶-2，4，6三酮
參照實(shí)施例1的制備過(guò)程，4-(4-氨基甲基苯氧基)-苯酚(0.70g，3.32mmol)與5-溴-5-(2-乙氧乙基)-嘧啶-2，4，6-三酮(0.95g，2.4mmol)，1，5，7-traza二環(huán)[4.4.0]癸-5-烯(結(jié)合到聚苯乙烯與2％DVB的交聯(lián)物上)(PTBD，F(xiàn)luka，2.22g)以及11mL乙氰反應(yīng)，產(chǎn)物經(jīng)反相HPLC純化后得到5-[4-(4-氨甲基-苯氧基)-苯氧基-5-(2-乙氧乙基)-嘧啶-2，4，6-三酮(0.180g)，為無(wú)色的固體化合物。
1H NMR(CD3OD)7.41(d，2H，J＝9.0Hz)，7.00(d，2H，J＝9.0Hz)，6.95(d，2H，J＝8.5Hz)，6.87(d，2H，J＝9.0Hz)，4.08(s，2H)，3.60(t，2H，J＝6.5Hz)，3.42(q，2H，J＝7.5Hz)，2.57(t，2H，J＝5.5Hz)，1.14(t，3H，J＝7.0Hz)ppm.
MS(m/z，APCI)414.2[M+H]+.
實(shí)施例5N-(4-{5-[5-(2-乙氧乙基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧]-吡啶--基氧)-芐基)-乙酰胺 按照實(shí)施例1的制備過(guò)程，N-[4-(5-羥基-吡啶-2-基氧)-芐基]-乙酰胺(0.25g，0.97mmol)與5-溴-5-(2-乙氧乙基)-嘧啶-2，4，6-三酮(0.20g，0.80mmol)，1，5，7-traza二環(huán)[4.4.0]癸-5-烯(連接到聚苯乙烯與2％DVB的交聯(lián)物上)(PTBD，F(xiàn)luka，0.77g)及4mL乙氰反應(yīng)，得到N-(4-{5-[5-(2-乙氧乙基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧]-吡啶-2基氧}-苯基)-乙酰胺。
MS(m/z，APCl)455[M-H]-.
下列化合物按照實(shí)施例1的方法制備，用合適的苯酚(如G-B-Y-A-OH)替代。








權(quán)利要求
1.式I的化合物， 其中，A為任選取代的(C6-C10)芳基或(C1-C10)雜芳基；B為任選取代的(C6-C10)芳基，(C3-C8)環(huán)烷基，(C1-C10)雜芳基，(C1-C10)雜環(huán)基，(C6-C10)芳基-(C1-C4)烷基，(C3-C8)環(huán)烷基-(C1-C4)烷基，(C1-C10)雜芳基-(C1-C4)烷基或(C1-C10)雜環(huán)-(C1-C4)烷基；其中任一個(gè)前述的(C3-C8)環(huán)烷基或(C1-C10)雜環(huán)基可以任選包含1-2個(gè)雙鍵；其中A和B上每一個(gè)環(huán)上可另成鍵碳原子可以被1-2個(gè)取代基獨(dú)立地任選取代，取代基獨(dú)立地為F，Cl，Br，CN，OH，(C1-C4)烷基，(C1-C4)全氟取代烷基，(C1-C4)全氟取代烷氧基，(C1-C4)烷氧基和((C3-C8)環(huán)烷氧基；X選自氧，＞C＝O，S，＞SO2，＞S＝O，＞NR10，-CH2O-，-OCH2-，-CH2S-，-CH2(S＝O)-，-CH2SO2-，-SCH2-，-SOCH2-，-SO2CH2-，-[N(R10)]CH2-，-CH2[N(R10)]-，-[N(R10)]SO和-SO2[N(R10)]-；Y選自鍵，氧，S，＞C＝O，＞SO2，＞S＝O，＞NR12，-CH2-，-CH2O-，-OCH2-，-CH2S-，-CH2(S＝O)-，-CH2SO2-，-SCH2-，-(S＝O)CH2-，-SO2CH2-，-[N(R12)]CH2-，-CH2[N(R12)]，-CH2CH2-，-CH＝CH-，-[N(R12)]-SO2-和-SO2[N(R12)]-；R1為氫，(R2)2n+1-(C)n-或(C3-C8)環(huán)烷基，其中(C3-C8)環(huán)烷基可以被1-2個(gè)取代基任選取代，取代基獨(dú)立地為鹵素，(C1-C4)烷基，(C1-C4)烯基，(C1-C4)炔基，R3，R3-O-，全氟取代(C1-C4)烷氧基，R3-(C1-C4)烷基-O-，R3-(C＝O)-O-，(R3)2N-(C＝O)-O-，-NO2，(R3)2N-，R3-(C＝O)-(NR4)-，R3-(SO2)-(NR4)-，R3O-(C＝O)-(NR4)-，(R3)2-N-(C＝O)-(NR4)-，R3-S-，R3-(S＝O)-，R3-(SO2)-，(R3)2N-(SO2)-，-CN，R3-(C＝O)-，R3-O-(C＝O)-和(R3)2N-(C＝O)-；n為1-10的整數(shù)；每個(gè)R2可以獨(dú)立地選自鹵素，(C1-C4)烯基，(C1-C4)炔基，R3-，R3-O-，全氟取代(C1-C4)烷氧基，R3-(C＝O)-O-，(R3)2N-(C＝O)-O-，-NO2，(R3)2N-，R3-(SO2)-(NR4)-，(R3)2-N-(C＝O)-，R3-(C＝O)-(NR4)-，R3O-(C＝O)-(NR4)-，(R3)2-N-(C＝O)-(NR4)-，R3-S-，R3-(S＝O)-，R3-(SO2)-，(R3)2N-(SO2)-，-CN，R3-O-(C＝O)-和R3-(C＝O)-；其中不多于3個(gè)R2取代基不是氫，-(C)n上的任何一個(gè)碳原子可以僅與雜原子形成一個(gè)鍵；其中任兩個(gè)R2的碳原子可以與R2所轉(zhuǎn)接的碳原子一起形成4-10元環(huán)；每個(gè)R3可以獨(dú)立地選自氫，(C1-C4)烷基，(C6-C10)芳基，(C3-C8)環(huán)烷基，(C1-C10)雜芳基和(C1-C10)雜環(huán)基；其中R3可支持另外取代基的碳原子每個(gè)烷基部分上可被1-3個(gè)取代基取代，每個(gè)環(huán)可被1-3個(gè)取代基取代，取代基獨(dú)立地為鹵素，羥基，氨基，-CN，(C1-C4)烷基，(C1-C4)烷氧基，(C1-C4)烷基-NH-，[(C1-C4)烷基]2-N-，(C6-C10)芳基，(C3-C8)環(huán)烷基，(C1-C10)雜芳基和(C1-C10)雜環(huán)基；其中(C3-C8)環(huán)烷基和(C1-C10)雜環(huán)基可被任選氧代；其中(C1-C10)雜芳基及(C1-C10)雜環(huán)基上每個(gè)環(huán)上任意一個(gè)可支持另外取代基的環(huán)上氮原子可被1-2個(gè)取代基取代，取代基獨(dú)立地為(C1-C4)烷基，(C1-C4)烷基-(C＝O)-，(C6-C10)芳基，(C3-C8)環(huán)烷基，(C1-C10)雜芳基和(C1-C10)雜環(huán)基；其中R3任選地與R4形成3-8元環(huán)；其中兩個(gè)R4也可以形成3-8元環(huán)；若出現(xiàn)，R4獨(dú)立地為氫和(C1-C4)烷基；G為R5-或R6-(CHR13)p-；其中G為B上可另成鍵環(huán)碳原子的取代基，取代位置為B環(huán)與Y相連位置的鄰位以外的其他位置；p為1-6的整數(shù)；其中R5選自R7-，R11-O-，R7-(C1-C4)烷基-O-，R8-(C＝O)-O-，H2N(C＝O)-O-，R8-NH(C＝O)-O-，(R8)2N(C＝O)-O-，R8-S-，R8-(S＝O)-，R8(SO2)-，H2N-(SO2)-，R8-NH-(SO2)-，(R8)2N-(SO2)-，甲?；?，R8-(C＝O)-，HO-(C＝O)-，R8-O-(C＝O)-，H2N-(C＝O)-，R8NH-(C＝O)-，(R8)2N-(C＝O)-，-NO2，NH2，R8-NH-，(R8)2N-，H(C＝O)-(NR9)-，R8-(C＝O)-(NR9)-，H2N-(C＝O)-(NR9)-，R8NH-(C＝O)-(NR9)-，(R8)2N-(C＝O)-(NR9)-，R8O-(C＝O)-(NR9)-，R8-(C＝O)-(NR9)-，R8-(SO2)-NH-和R8-(SO2)-(NR9)-；R6選自(C1-C4)烯基，(C1-C4)炔基，R7，OH，R8-O-，R8-(C1-C4)烷基-O-，全氟取代(C1-C4)烷氧基，R8-(C＝O)-O-，H2N(C＝O)-O-，R8-NH(C＝O)-O-，(R8)2N(C＝O)-O-，R8-S-，R8-(S＝O)-，R8-(SO2)-，H2N-(SO2)-，R8-NH-(SO2)-，(R8)2N-(SO2)-，甲酰基，-CN，R8-(C＝O)-，HO-(C＝O)-，R8-O-(C＝O)-，H2N-(C＝O)-，R8NH-(C＝O)-，(R8)2N-(C＝O)-，-NO2，NH2，R8-NH-，(R8)2N-，H(C＝O)-(NR9)-，R8-(C＝O)-(NR9)-，H2N-(C＝O)-(NR9)-，R8NH-(C＝O)-(NR9)-，(R8)2N-(C＝O)-(NR9)-，R8O-(C＝O)-(NR9)-，R8-(SO2)-NH-和R8-(SO2)-(NR9)-；R7選自(C6-C10)芳基，(C3-C8)環(huán)烷基，(C1-C10)雜芳基和(C1-C10)雜環(huán)基；其中(C6-C10)芳基，(C3-C8)環(huán)烷基，(C1-C10)雜芳基和(C1-C10)雜環(huán)基部分每個(gè)環(huán)上可另成鍵碳原子可以被1-3取代基任選取代，取代基獨(dú)立地為F，Cl，Br，CN，OH，(C1-C4)烷基，(C1-C4)全氟取代烷基，(C1-C4)全氟取代烷氧基，(C1-C4)烷氧基，氨基，(C1-C4)烷基-NH-，[(C1-C4)烷基]2-N-和(C3-C8)環(huán)烷氧基；其中(C3-C8)環(huán)烷基和(C1-C10)雜環(huán)基部分可以任選地被氧代；其中(C1-C10)雜芳基和(C1-C10)雜環(huán)基上每個(gè)環(huán)上可支持另外取代基的環(huán)氮原子可被1-2個(gè)取代基任選取代，取代基獨(dú)立地為(C1-C4)烷基及(C1-C4)烷基-(C＝O)-；R8選自(C1-C4)烷基，(C6-C10)芳基，(C3-C8)環(huán)烷基，(C1-C10)雜芳基和(C1-C10)雜環(huán)基；其中每個(gè)R8中，可支持另外取代基的碳原子每烷基部分可被1-3個(gè)取代基任選取代，每環(huán)上可被1~3個(gè)取代基任選取代，取代基獨(dú)立地為F，Cl，Br，CN，OH，(C1-C4)烷基，(C1-C4)全氟取代烷基，(C1-C4)全氟取代烷氧基，(C1-C4)烷氧基和(C3-C8)環(huán)烷基氧；其中(C3-C8)環(huán)烷基和(C1-C10)雜環(huán)基可任選被氧代；其中(C1-C10)雜芳基和(C1-C10)雜環(huán)基任何一個(gè)環(huán)上可支持另外取代基的環(huán)氮原子可被1-2個(gè)取代基任選取代，取代基獨(dú)立地為(C1-C4)烷基和(C1-C4)烷基-(C＝O)-；其中兩個(gè)R8可以與其所連接的雜原子任選形成3~8元環(huán)；若出現(xiàn)，R9獨(dú)立地為氫和(C1-C4)烷基；其中R8和R9可以與其所連接的雜原子任選形成3-8元環(huán)；R10出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地為氫和(C1-C4)烷基；R11選自(C6-C10)芳基，(C1-C10)雜芳基和(C1-C10)雜環(huán)基；其中(C6-C10)芳基，(C1-C10)雜芳基和(C1-C10)雜環(huán)基部分每一個(gè)環(huán)上可另成鍵環(huán)碳原子可被1-3個(gè)取代基任選取代，取代基選自F，Cl，Br，CN，OH，(C1-C4)烷基，(C1-C4)全氟取代烷基，(C1-C4)全氟取代烷氧基，(C1-C4)烷氧基和(C3-C8)環(huán)烷基氧；其中(C1-C10)雜環(huán)基可任選地被氧代；其中(C1-C10)雜芳基和(C1-C10)雜環(huán)基每環(huán)上任一個(gè)可支持另外取代基的環(huán)氮原子可被1-2個(gè)取代基任選取代，取代基獨(dú)立地為(C1-C4)烷基和(C1-C4)烷基-(C＝O)-；R12出現(xiàn)時(shí)獨(dú)立地選自氫和(C1-C4)烷基；R13可以獨(dú)立地選自氫和(C1-C4)烷基；其中，R13可以任選與R6形成4-1O元環(huán)；以及上述化合物的藥用鹽。
2.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中X為氧，-OCH2-或-CH2O-。
3.如權(quán)利要求1-2中任一項(xiàng)所述的化合物，其中Y為氧，-OCH2-或-CH2O-。
4.如權(quán)利要求1-3中任一項(xiàng)所述的化合物，其中A為任選取代的苯基。
5.如權(quán)利要求1-4中任一項(xiàng)所述的化合物，其中，B為任選取代的苯基(C1-C10)雜芳基。
6.如權(quán)利要求1-5中任一項(xiàng)所述的化合物，其中G為R5-。
7.如權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)所述的化合物，其中R5-為R7，R7為(C1-C10)雜芳基。
8.如權(quán)利要求1-7中任一項(xiàng)所述的化合物，其中R1為(R2)2n+1(C)n-，n為1-10的整數(shù)。至少一個(gè)R2獨(dú)立地選自R3-，R3O-，(R3)2N-，R3S-，R3-(S＝O)-，R3(SO2)-，R3-(SO2)-(NR4)-，R3-NH-(SO2)-，(R3)2N-(SO2)-，R3-(C＝O)-(NR4)-，R3-(C＝O)-O-，R3-O-(C＝O)-和R3-(C＝O)-；和每個(gè)R3獨(dú)立地選自氫和(C1-C4)烷基；每個(gè)R3的(C1-C4)烷基部分可以任選被1~3個(gè)取代基任選取代，取代基可以獨(dú)立地為鹵素，羥基，氨基，-CN，(C1-C4)烷基，(C1-C4)烷氧基，(C1-C4)烷基-NH-，[(C1-C4)烷基]2-N-，(C6-C10)芳基，(C3-C8)環(huán)烷基，(C1-C10)雜芳基和(C1-C10)雜環(huán)基；其中R3可任選地與R4形成3-8元環(huán)。
9.如權(quán)利要求1所述的化合物，其中化合物為5-(2-乙氧乙基)-5-[4-(4-噻唑-2-基-苯氧基)-苯氧基]-嘧啶-2，4，6-三酮；5-(2-乙氧乙基)-5-{4-[4-(2-甲基-2H-吡唑-3-基)-苯氧基]-苯氧基}-嘧啶-2，4，6-三酮；5-(2-乙氧乙基)-5-{4-[4-(1-甲基-1H-吡唑-3-基)-苯氧基]-苯氧基}-嘧啶-2，4，6-三酮；5-(4-{4-[5-(2-乙氧乙基)-2，4，6-三氧-六氫-嘧啶-5-基氧]-苯氧基}苯基)-戊腈；5-(2-乙氧乙基)-5-{4-[4-(2-甲基-噻唑-4-基)-苯氧基]-苯氧基}-嘧啶-2，4，6-三酮；5-(2-乙氧乙基)-5-{4-[4-(1H-吡唑-3-基)-苯氧基]-苯氧基}-嘧啶-2，4，6三酮；5-(2-乙氧乙基)-5-[4-(4-噁唑-5-基-苯氧基)-苯氧基]-嘧啶-2，4，6-三酮；及5-(2-乙氧乙基)-5-[4-(4-嘧啶-4-基-苯氧基)-苯氧基]-嘧啶-2，4，6-三酮；以及上述化合物的藥用鹽。
10.一種用于治療包括人在內(nèi)的哺乳動(dòng)物的疾病的藥物組合物，所述疾病選自結(jié)締組織疾病，炎性疾病，免疫/過(guò)敏疾病，傳染性疾病，呼吸系統(tǒng)疾病，心血管疾病，眼類疾病，代謝疾病，中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)疾病，肝/腎疾病，生殖健康疾病，胃疾病，皮膚疾病和腫瘤；該組合物包含一定量對(duì)上述疾病有效的如權(quán)利要求1-9任何一項(xiàng)所述的化合物及其藥用載體。
11.一種治療包括人在內(nèi)的哺乳動(dòng)物的疾病的方法，所述疾病選自結(jié)締組織疾病，炎性疾病，免疫/過(guò)敏疾病，傳染性疾病，呼吸系統(tǒng)疾病，心血管疾病，眼類疾病，代謝疾病，中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)疾病，肝/腎疾病，生殖健康疾病，胃疾病，皮膚疾病和腫瘤，該方法包含用對(duì)上述疾病有效的如權(quán)利要求1-10任何一項(xiàng)所述的化合物對(duì)所述哺乳動(dòng)物給藥。
全文摘要
本發(fā)明涉及式(I)的嘧啶－2，4，6－三酮類金屬蛋白酶抑制劑，其中X，Y，A、B和R
文檔編號(hào)C07D403/12GK1714084SQ01818084
公開日2005年12月28日 申請(qǐng)日期2001年10月17日 優(yōu)先權(quán)日2000年10月26日
發(fā)明者馬克·C·諾埃, 勞倫斯·A·賴特, 馬丁·J·威西斯 申請(qǐng)人:輝瑞產(chǎn)品公司