專利名稱:一種快速高效提取植物類胰島素的方法
苦瓜(Momordica charanctia)是葫蘆科植物,其果是我國人民常用蔬菜,具有清火明目、解毒等功能,其種子含有較豐富的植物類胰島素,是目前治療糖尿病的一種有效的天然植物成分。根據植物類胰島素分子量在27~32K道爾頓等電點在pH值9.0~9.5之間和在酸性環(huán)境下的醇溶性,設計出一種高效快速分離提取方法。
1、苦瓜種子去殼后粉碎過60~100目篩;2、將過60~100目篩的苦瓜籽粉,加入5倍體積的90%乙醇,用鹽酸或醋酸等調節(jié)溶液pH值在2.0~3.0之間,攪拌0.5~1.0小時;3、離心(依據離心機型號,一般在4000~5000rpm,10~20分鐘);4、棄沉淀,取上清液加入5%NaCl(體積重量比)用NaOH或KOH將溶液調為pH值在7.0~7.5,靜止1小時;5、離心(依據離心機型號,一般在4000~5000rpm,10~20分鐘);6、棄上清,沉淀用丙酮洗三次以上,真空干燥得到植物類胰島素精品;7、將上述精品溶于0.1M Tris.cl溶液中,采用親和膠藍方法純化收集,洗脫峰,丙酮或乙醇濃縮干燥得精品。
權利要求
本發(fā)明涉及植物類胰島素分離方法,其技術特征是苦瓜種子脫殼,種仁粉碎過60或100目篩,然后采用酸性乙醇進行萃取,離心取上清液,加入NaCl占體積3%~5%,用1~5Mol/L NaOH調節(jié)溶液至pH值7.0±7.5溶液變渾濁、離心、去上液,用丙酮洗滌沉淀部分三次,真空干燥,得到植物類胰島素粗品。用0.1M Tris.cl溶液(pH7.5)溶解進行親和膠藍層析,收集洗脫峰溶液,用丙酮或乙醇濃縮真空干燥得到植物類胰島素精品。
全文摘要
苦瓜(Momordica chararctia)是葫蘆科植物,其果是我國人民常用蔬菜,具有清火明目、解毒等功效,其種子含有較豐富的植物類胰島素,是目前治療糖尿病的一種有效成分。本發(fā)明從苦瓜種子分離提取植物類胰島素的方法,主要采用酸性乙醇萃取,醇性鹽析和親和層析的方法可以提取制備高純度的植物類胰島素成分,可用于糖尿病的治療。
文檔編號C07K14/62GK1389471SQ0210275
公開日2003年1月8日 申請日期2002年1月23日 優(yōu)先權日2002年1月23日
發(fā)明者張楠, 黃俊生 申請人:海南英得利生物技術開發(fā)有限公司