專利名稱：高比旋度的左旋亞葉酸鈣及拆分方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種高比旋度的左旋亞葉酸鈣以及從非對映混合的亞葉酸鈣中拆分出高比旋度的左旋亞葉酸鈣的方法。
(6S)-亞葉酸鈣在Merk Index(第13版)中，其比旋光度[α]D20＝-15.1°，由于其旋光值為負(fù)值，因此又稱為左旋亞葉酸鈣。D.B.Cosulich等人[D.B.Cosulichet al.，J.Am.Chem.Soc.，74，4215-16，1952]早在1952年即報道了對于亞葉酸鈣中存在的6R及6S兩種非對映異構(gòu)體，可以根據(jù)兩者在水中溶解性的差異分離出6S構(gòu)型的左旋亞葉酸鈣，但其結(jié)果未被重復(fù)出來。
在專利CN88102709.X中，在堿土金屬鹽存在下對(6R，S)-亞葉酸鈣進行結(jié)晶拆分，拆分過程采用調(diào)節(jié)pH值及加入無水CaCl2的方法，通過一步結(jié)晶，可以得到含88％(6S)-亞葉酸鈣及12％(6R)-亞葉酸鈣的混合物，再對其進行兩步后續(xù)重結(jié)晶并通過加入晶種的方法，獲得了比旋光度為-15的左旋亞葉酸鈣(相對于無水鈣鹽)，其中(6S)-亞葉酸鈣含量通過手性柱分析＞99％。
本發(fā)明還提供一種從非對映混合的亞葉酸鈣中拆分出上述高比旋度的左旋亞葉酸鈣的的方法。
本發(fā)明是一種高比旋度的左旋亞葉酸鈣，其比旋光值[α]D20為≤-16°(c＝1，H2O，濃度以無水鈣鹽計)。如比旋光值[α]D20為≤-17.7°的一種高比旋度的左旋亞葉酸鈣，(d.e.＞98％)。
本發(fā)明的從非對映混合的亞葉酸鈣中拆分出高比旋度左旋亞葉酸鈣的方法，系采用分步結(jié)晶的方法。采用本發(fā)明的方法，可以獲得旋光值高于MerckIndex和CN88102709.X專利報道的左旋亞葉酸鈣的旋光值，在本發(fā)明的方法中，采用高效毛細管電泳測試方法對其中(6S)-亞葉酸鈣的含量進行分析測定。
本發(fā)明的方法可以進一步描述如下首先，在8-12％的混旋亞葉酸鈣水溶液中加入無水CaCl2，用氨水調(diào)pH值至9.5-10，在18-22℃恒溫18-24小時，過濾沉淀，用2-10％的CaCl2溶液及乙醇洗滌，干燥，得到(6S)-亞葉酸鈣含量＞85％的第一步拆分產(chǎn)物，在拆分過程中(6R，S)-亞葉酸鈣與無水CaCl2的摩爾比為1∶5-8，CaCl2溶液以4-6％為好；其次，將第一步的拆分產(chǎn)物60g與水混合加熱至55-60℃，用10-25％的HCl調(diào)pH值，pH值太低該化合物不穩(wěn)定，pH值太高將不利于固體溶解，因此將pH值調(diào)至5-6，固體全溶，再用1-10％的一價金屬氫氧化物(如NaOH、KOH等)溶液調(diào)pH值至7.0-7.5，加入無水CaCl2，溶解后靜置，靜置溫度太高將降低收率，而溫度太低將降低產(chǎn)物的d.e值，因此降溫至20-25℃，在此溫度下恒溫20-24小時，過濾得到(6S)-亞葉酸鈣含量＞95％的第二步拆分產(chǎn)物。拆分過程中亞葉酸鈣與無水CaCl2的摩爾比為1∶3.5-4較為適宜；采用本方法時無須加入晶種。
再次，將第二步拆分產(chǎn)物60g與水混合加熱至55-60℃，用10-25％的HCl調(diào)pH值至5-6，固體溶解后，再用1-10％的一價金屬氫氧化物(如NaOH、KOH等)溶液調(diào)pH值至7.0-7.5，加入無水CaCl2，溶解完全后，在21-25℃恒溫35-45小時，過濾得到第三步拆分產(chǎn)物。在拆分過程中(6R，S)-亞葉酸鈣與無水CaCl2的摩爾比為1∶3.5-4；最后，將第三步拆分產(chǎn)物18g與水混合加熱至55-60℃溶解后過濾，濾液用乙醇沉淀產(chǎn)物以除去無機雜質(zhì)，過濾沉淀即得產(chǎn)物，獲得比旋光度為-17.7°的左旋亞葉酸鈣，其中(6S)-亞葉酸鈣含量＞99％，所述的乙醇可以是80-100％的乙醇。
綜上所述，在拆分亞葉酸鈣非對映體時，第一步拆分過程中，加入相當(dāng)于亞葉酸鈣摩爾量的6.5-8倍的無水CaCl2并調(diào)節(jié)pH值，獲得左旋亞葉酸鈣含量＞85％的產(chǎn)物，將其進行三步后處理，可以獲得比旋光度[α]D20為≤-16°(c＝1，H2O，濃度以無水鈣鹽計)，如比旋光度為-17.7°的左旋亞葉酸鈣(d.e.＞98％)。
對于亞葉酸鈣對映體混合物中左旋亞葉酸鈣含量的分析測定，專利CN88102709.X報道可以采用手性柱HPLC的方法，但要得到分析結(jié)果往往是困難的。高效毛細管電泳法作為分析手性化合物的一種常用分析測試手段，在本發(fā)明中，采用高效毛細管電泳法，在一定的條件下，對非對映混合的亞葉酸鈣其d.e.值進行分析，可以得到混旋亞葉酸鈣的比旋光度與其中左旋亞葉酸鈣含量的對應(yīng)關(guān)系(見表一)。
表一、產(chǎn)物旋光值與產(chǎn)物中左旋亞葉酸鈣含量的對應(yīng)關(guān)系
本方法與專利CN88102709.X的不同之處在于，在拆分過程中加入了明顯不同量的無水CaCl2，并且拆分過程中無須晶種。采用本專利的方法得到的最終產(chǎn)物的比旋光值高于專利CN88102709.X及Merk Index(第13版)中左旋亞葉酸鈣的比旋光值。本發(fā)明的方法也適用于工業(yè)化的生產(chǎn)。
具體實施例方式
通過下述實施例將有助于理解本發(fā)明，但并不限制本發(fā)明的內(nèi)容。
實施例11. 60g(6R，S)-亞葉酸鈣與540-690ml蒸餾水混合加熱溶解，加入摩爾量為亞葉酸鈣6.5倍的無水CaCl2。降溫至30℃，滴加25％的氨水調(diào)pH值至10。滴加完畢，將溫度緩慢降至18℃恒溫18小時。過濾沉淀，用5％的CaCl2溶液及無水乙醇洗滌，干燥，得淡黃色固體25g。[α]D20＝-12°(c＝1，H2O，濃度以無水鹽計)。
2.第一步拆分產(chǎn)物60g與540-690ml蒸餾水混合加熱至60℃左右，用20％的HCl調(diào)pH值至5.5左右，固體全溶，再用5％的NaOH溶液調(diào)pH值至7.0-7.5，加入摩爾量為亞葉酸鈣3.5倍的無水CaCl2，溶解完全后靜置，緩慢降溫至22℃恒溫24小時。過濾沉淀，得到產(chǎn)物約33g，[α]D20＝-16°(c＝1，H2O，濃度以無水鹽計)。高效毛細管電泳測試左旋亞葉酸鈣的含量在95％左右。
3.第二步的拆分產(chǎn)物60g與600ml水混合加熱至60℃左右，用20％的HCl調(diào)pH值至5.5左右，待固體全溶，再用5％的NaOH溶液調(diào)pH值至7.0-7.5，加入摩爾量為亞葉酸鈣3.5倍的無水CaCl2，溶解完全后靜置，降溫至22℃恒溫40小時后，過濾沉淀，得到產(chǎn)物56g，[α]D20＝-18.3°(c＝1，H2O，濃度以無水鈣鹽計)。
4.將第三步的拆分產(chǎn)物18g于55-60℃與550ml水混合溶解后過濾，濾液中加入1500ml95％乙醇沉淀產(chǎn)物，過濾沉淀并干燥得產(chǎn)物17.5g。[α]D20＝-17.7°(c＝1，H2O，濃度以無水鈣鹽計)。高效毛細管電泳測試左旋亞葉酸鈣的含量在99％以上。
權(quán)利要求
1，一種高比旋度的左旋亞葉酸鈣，其旋光值[α]D20為≤-16°(c＝1，H2O，濃度以無水鹽計)。
2，如權(quán)利要求1所述的一種高比旋度的左旋亞葉酸鈣，其旋光值[α]D20為≤-17.7°。
3，如權(quán)利要求1或2所述的一種高比旋度的左旋亞葉酸鈣，其特征是產(chǎn)物的旋光值采用毛細管電泳法測定。
4，如權(quán)利要求1所述的一種高比旋度的左旋亞葉酸鈣的制備方法，其特征是由下述的方法制備(1)在8-12％的混旋亞葉酸鈣水溶液中加入無水CaCl2，用氨水調(diào)pH值至9.5-10，在18-22℃恒溫18-24小時，過濾沉淀，用2-10％的CaCl2溶液及乙醇洗滌，干燥，得到含量＞85％的(6S)-亞葉酸鈣，其中(6R，S)-亞葉酸鈣與無水CaCl2的摩爾比為1∶5-8；(2)將(1)的拆分產(chǎn)物60g與水混合加熱至55-60℃，用10-25％的HCl調(diào)pH值至5-6，固體全溶，再用1-10％的一價金屬氫氧化物溶液調(diào)pH值至7.0-7.5，加入無水CaCl2，溶解后靜置至20-25℃，在此溫度下恒溫20-24小時，過濾得到含量＞95％的(6S)-亞葉酸鈣。拆分過程中，亞葉酸鈣與無水CaCl2的摩爾比為1∶3.5-4；(3)將(2)拆分產(chǎn)物60g與水混合加熱至55-60℃，用10-25％的HCl調(diào)pH值至5-6左右，固體溶解后，再用1-10％的一價金屬氫氧化物溶液調(diào)pH值至7.0-7.5，加入無水CaCl2，溶解后，在21-25℃恒溫35-45小時，過濾得到拆分產(chǎn)物，在拆分過程中亞葉酸鈣與無水CaCl2的摩爾比為1∶3.5-4；(4)將(3)的拆分產(chǎn)物18g與水混合加熱至55-60℃溶解后過濾，濾液用乙醇沉淀產(chǎn)物，過濾。
5，如權(quán)利要求4所述的一種高比旋度的左旋亞葉酸鈣的制備方法，其特征是所述的乙醇可以是80-100％的乙醇。
6，如權(quán)利要求4所述的一種高比旋度的左旋亞葉酸鈣的制備方法，其特征是其中(4)所述的左旋亞葉酸鈣比旋光度為≤-16°，(6S)-亞葉酸鈣含量＞99％。
7，如權(quán)利要求4或6所述的一種高比旋度的左旋亞葉酸鈣的制備方法，其特征是所述的(6S)-亞葉酸鈣的比旋光度為-17.7°。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種高比旋度的左旋亞葉酸鈣，以及從非對映混合的亞葉酸鈣中拆分出高比旋度的左旋亞葉酸鈣的方法。采用本發(fā)明的方法，可以獲得比旋光度為－17.7°的左旋亞葉酸鈣，其中(6S)－亞葉酸鈣含量＞99％。
文檔編號C07D487/00GK1401647SQ02136978
公開日2003年3月12日 申請日期2002年9月13日 優(yōu)先權(quán)日2002年9月13日
發(fā)明者林國強, 孫江勤, 夏克敏, 許旭 申請人:中國科學(xué)院上海有機化學(xué)研究所