專利名稱：用作腺苷受體配體的苯并噻唑衍生物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及通式I化合物及其可藥用酸加成鹽 其中R是苯基、吡啶-2-基、-C(O)-O-低級烷基、C(O)-低級烷基、-C(O)-嗎啉基、-C(O)-NR’2、-(CH2)n-NR’2或-(CH2)n-O-低級烷基，且R’可以是氫或低級烷基。
現(xiàn)出人意料地發(fā)現(xiàn)通式I化合物是腺苷受體的配體。具體來說，本發(fā)明化合物對A2A-受體具有良好親和性，并且對A1-和A3受體具有高選擇性，此外，它們還具有良好的水溶性。
腺苷通過與特定的細(xì)胞表面受體相互作用來調(diào)節(jié)多種生理學(xué)功能。在1982年首次提出了腺苷受體作為藥物靶點(diǎn)的可能性。腺苷同時(shí)在結(jié)構(gòu)學(xué)和代謝方面與生物活性的核苷酸三磷酸腺苷(ATP)、二磷酸腺苷(ADP)、一磷酸腺苷(AMP)和環(huán)腺苷一磷酸(cAMP)有關(guān)；并且同時(shí)在結(jié)構(gòu)學(xué)和代謝方面與生物化學(xué)甲基化試劑S-腺苷-1-甲硫氨酸(SAM)有關(guān)；其在結(jié)構(gòu)上與輔酶NAD、FAD和輔酶A有關(guān)；并且與RNA有關(guān)。腺苷和這些相關(guān)的化合物一起對于調(diào)節(jié)細(xì)胞代謝的許多方面以及調(diào)節(jié)不同的中樞神經(jīng)系統(tǒng)活性具有重要意義。
腺苷受體被分類成A1、A2A、A2B和A3受體，屬于G蛋白偶聯(lián)的受體家族。腺苷激活腺苷受體引發(fā)信號傳導(dǎo)機(jī)制。這些機(jī)制依賴于與G蛋白結(jié)合的受體。每一種腺苷受體亞型均通過腺苷酸環(huán)化酶效應(yīng)器系統(tǒng)進(jìn)行分類表征，該系統(tǒng)使用cAMP作為第二信使。與Gi蛋白偶聯(lián)的A1和A3受體抑制腺苷酸環(huán)化酶，導(dǎo)致細(xì)胞cAMP水平降低；而A2A和A2B受體與Gs蛋白偶聯(lián)并激活腺苷酸環(huán)化酶，導(dǎo)致細(xì)胞cAMP水平升高。已知A1受體系統(tǒng)包括磷脂酶C的激活以及鉀和鈣離子通道的調(diào)節(jié)。A3亞型除了與腺苷酸環(huán)化酶結(jié)合外，還可以刺激磷脂酶C，從而激活鈣離子通道。
由各種物種(犬、人、大鼠、狗、雞、牛、豚鼠)克隆了A1受體(326-328個(gè)氨基酸)，在哺乳動(dòng)物物種之間該受體具有90-95％的序列同一性。由犬、大鼠、人、豚鼠和小鼠克隆了A2A受體(409-412個(gè)氨基酸)。由人和小鼠克隆了A2B受體(332個(gè)氨基酸)，人A2B與人A1和A2A受體具有45％的同源性。由人、大鼠、狗、兔子和綿羊克隆了A3受體(317-320個(gè)氨基酸)。
有人提出A1和A2A受體亞型在腺苷對能量供給的調(diào)節(jié)中起補(bǔ)充作用。腺苷是一種ATP的代謝產(chǎn)物，它從細(xì)胞擴(kuò)散并局部地產(chǎn)生作用而激活腺苷受體，以降低氧的需求(A1)或增加氧供給(A2A)，從而恢復(fù)組織內(nèi)能量的供需平衡。兩種亞型的作用都是增加組織可以利用的氧的量，并使細(xì)胞免受因短時(shí)間的氧失衡所引起的損傷。內(nèi)源性腺苷的一個(gè)重要功能是防止創(chuàng)傷例如組織缺氧、局部缺血、低血壓和癲癇發(fā)作過程中的損傷。
此外，已知腺苷受體激動(dòng)劑與表達(dá)大鼠A3受體的肥大細(xì)胞的結(jié)合導(dǎo)致三磷酸肌醇和胞內(nèi)鈣濃度增高，這增強(qiáng)了抗原誘導(dǎo)的炎性介質(zhì)的分泌。因此，A3受體在介導(dǎo)哮喘發(fā)作和其它過敏反應(yīng)中起作用。
腺苷是一種神經(jīng)調(diào)質(zhì)，它能夠調(diào)節(jié)腦生理功能的多個(gè)方面。內(nèi)源性腺苷—能量代謝與神經(jīng)元活性之間的中樞連接物—隨著行為狀態(tài)和(病)生理狀況而改變。在能量需求增加和能量利用降低的條件下(例如組織缺氧、低血糖和/或過度神經(jīng)元活性)，腺苷提供有力的保護(hù)反饋機(jī)制。在很多神經(jīng)和精神疾病例如癲癇、睡眠、運(yùn)動(dòng)障礙(帕金森病或亨廷頓舞蹈病)、阿爾茨海默氏病、抑郁癥、精神分裂癥或成癮中，與腺苷受體的相互作用代表著治療干預(yù)的有希望的靶點(diǎn)。在創(chuàng)傷例如組織缺氧、局部缺血和癲癇發(fā)作之后，神經(jīng)遞質(zhì)釋放增加。這些神經(jīng)遞質(zhì)最終引起神經(jīng)變性和神經(jīng)死亡，這會引起腦損傷或個(gè)體死亡。因此，模擬腺苷的中樞抑制作用的腺苷A1激動(dòng)劑可用作神經(jīng)保護(hù)劑。有人提出腺苷是一種內(nèi)源性抗驚厥劑，可以抑制興奮性神經(jīng)元釋放谷氨酸并抑制神經(jīng)元放電。因此，腺苷激動(dòng)劑可用作抗癲癇劑。腺苷拮抗劑可以刺激CNS的活性，并且已證實(shí)其可用作認(rèn)知促進(jìn)劑。選擇性A2a拮抗劑在治療各種形式的癡呆，例如在阿爾茨海默氏病中的癡呆，和神經(jīng)變性病癥例如中風(fēng)中具有潛在治療作用。腺苷A2a受體拮抗劑調(diào)節(jié)紋狀體GABA能神經(jīng)元的活性，并調(diào)節(jié)平滑肌和良好協(xié)調(diào)的運(yùn)動(dòng)，從而給帕金森病癥狀提供了可能的治療。腺苷還參與鎮(zhèn)靜、催眠狀態(tài)、精神分裂癥、焦慮、疼痛、呼吸、抑郁癥和藥物成癮(安非他明、可卡因、阿片樣物質(zhì)、酒精、煙堿、大麻素)所涉及的生理學(xué)過程。因此，作用于腺苷受體的藥物具有作為鎮(zhèn)靜劑、肌肉松弛劑、抗精神病藥、抗焦慮藥、鎮(zhèn)痛藥、呼吸興奮藥、抗抑郁藥和治療藥物濫用的潛在治療價(jià)值。它們還可用于治療ADHD(注意力缺陷-多動(dòng)癥)。
腺苷在心血管系統(tǒng)中的一個(gè)重要作用是作為心臟保護(hù)劑。內(nèi)源性腺苷水平會在局部缺血和組織缺氧時(shí)增加，并在創(chuàng)傷期間和之后(預(yù)適應(yīng))保護(hù)心臟組織。通過作用于A1受體，腺苷A1激動(dòng)劑可保護(hù)心臟不受心肌缺血和再灌注引起的損傷。A2a受體對腎上腺素能功能的調(diào)節(jié)影響可涉及多種病癥例如冠狀動(dòng)脈疾病和心力衰竭。對于希望提高抗腎上腺素能反應(yīng)的情形，例如在急性心肌缺血期間，A2a拮抗劑可以有治療價(jià)值。作用于A2a受體的選擇性拮抗劑還可以提高腺苷在終止室上性心律失常方面的有效性。
腺苷調(diào)節(jié)腎功能的許多方面，包括腎素釋放、腎小球?yàn)V過率和腎臟血流。拮抗腺苷的腎臟作用的化合物是潛在的腎臟保護(hù)劑。此外，腺苷A3和/或A2B拮抗劑可以用于治療哮喘和其它過敏反應(yīng)，或者可用于治療糖尿病和肥胖。
許多文獻(xiàn)描述了關(guān)于腺苷受體的現(xiàn)有知識，例如下列出版物Bioorganic & Medicinal Chemistry，6，(1998)，619-641，Bioorganic & Medicinal Chemistry，6，(1998)，707-719，J.Med.Chem.，(1998)，41，2835-2845，J.Med.Chem.，(1998)，41，3186-3201，J.Med.Chem.，(1998)，41，2126-2133，
J.Med.Chem.，(1999)，42，706-721，J.Med.Chem.，(1996)，39，1164-1171，Arch.Pharm.Med.Chem.，332，39-41，(1999)，Am.J.PhySiol.，276，H1113-1116，(1999)或Naunyn Schmied，Arch.Pharmacol.362，375-381，(2000)。
本發(fā)明的目的是式I化合物本身，式I化合物及其可藥用鹽在制備用于治療涉及腺苷A2受體的疾病的藥物中的應(yīng)用，其制備方法，基于本發(fā)明化合物的藥物及它們的生產(chǎn)方法，以及式I化合物在控制或預(yù)防基于腺苷系統(tǒng)的調(diào)節(jié)作用的疾病中的應(yīng)用，這些疾病是例如阿爾茨海默氏病、帕金森病、亨廷頓舞蹈病、神經(jīng)保護(hù)、精神分裂癥、焦慮、疼痛、呼吸不足、抑郁、藥物成癮例如安非他明、可卡因、阿片樣物質(zhì)、酒精、煙堿、大麻素成癮，或哮喘、過敏反應(yīng)、組織缺氧、局部缺血、癲癇發(fā)作和物質(zhì)濫用。此外，本發(fā)明化合物可用作鎮(zhèn)靜劑、肌肉松弛劑、抗精神病藥、抗癲癇藥、抗驚厥藥和用于病癥例如冠狀動(dòng)脈疾病和心力衰竭的心臟保護(hù)劑。本發(fā)明最優(yōu)選的適應(yīng)癥是基于A2A受體拮抗活性的那些，包括中樞神經(jīng)系統(tǒng)病癥，例如阿爾茨海默氏病、某些抑郁癥、藥物成癮、神經(jīng)保護(hù)和帕金森病以及ADHD的治療或預(yù)防。
本文中所用的術(shù)語“低級烷基”是指含有1-6個(gè)碳原子的飽和的直鏈或支鏈的烷基，例如甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、2-丁基、叔丁基等。優(yōu)選的低級烷基是具有1-4個(gè)碳原子的基團(tuán)。
術(shù)語“可藥用酸加成鹽”包括與無機(jī)酸和有機(jī)酸形成的鹽，所述酸是例如鹽酸、硝酸、硫酸、磷酸、檸檬酸、甲酸、富馬酸、馬來酸、乙酸、琥珀酸、酒石酸、甲磺酸、對甲苯磺酸等。
其中R是苯基、吡啶-2-基、-C(O)-O-CH2CH3、-C(O)-CH2CH3、-C(O)-嗎啉基或-C(O)-N(CH3)2的本發(fā)明化合物是優(yōu)選的，它們是下列化合物1-芐基-2-氧代-1，2-二氫-吡啶-4-甲酸(4-甲氧基-7-嗎啉-4-基苯并噻唑-2-基)-酰胺，[4-(4-甲氧基-7-嗎啉-4-基-苯并噻唑-2-基-氨基甲酰基)-2-氧代-2H-吡啶-1-基]-乙酸乙酯，
2-氧代-1-(2-氧代-丁基)-1，2-二氫-吡啶-4-甲酸(4-甲氧基-7-嗎啉-4-基-苯并噻唑-2-基)-酰胺，2-氧代-1-吡啶-2-基-甲基-1，2-二氫-吡啶-4-甲酸(4-甲氧基-7-嗎啉-4-基-苯并噻唑-2-基)-酰胺，1-(2-嗎啉-4-基-2-氧代-乙基)-2-氧代-1，2-二氫-吡啶-4-甲酸(4-甲氧基-7-嗎啉-4-基苯并噻唑-2-基)-酰胺，或1-二甲基氨基甲酰基甲基-2-氧代-1，2-二氫-吡啶-4-甲酸(4-甲氧基-7-嗎啉-4-基-苯并噻唑-2-基)-酰胺。
本發(fā)明的式I化合物及其可藥用鹽可通過本領(lǐng)域已知的方法制得，例如通過下述方法制得，該方法包括a)將式(6)化合物 與式(7)化合物反應(yīng) 以生成式I化合物 其中R是苯基、吡啶基、-C(O)O-低級烷基或-C(O)-低級烷基，或者b)將式(8)化合物
與式(7)或式(9)化合物反應(yīng) 或 以生成式I化合物 其中R是-C(O)-嗎啉基、-(CH2)n-O-低級烷基、-(CH2)nNR’2或-C(O)NR’2，以及，如果需要的話，將所得化合物轉(zhuǎn)化成可藥用酸加成鹽。
其中R是苯基、吡啶基、-C(O)O-低級烷基或-C(O)-低級烷基的式I化合物的制備制備其中R是苯基、吡啶基、-C(O)O-低級烷基或C(O)-低級烷基的式I化合物的一種方法是如下面的反應(yīng)方案1和2所示，經(jīng)由式(6)所示的2-甲氧基-異煙酰胺中間體來進(jìn)行。
反應(yīng)方案1 在該反應(yīng)方案中使用下述縮寫HATU O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲六氟磷酸鹽反應(yīng)方案2 其中R是苯基、吡啶基、-C(O)O-低級烷基或C(O)-低級烷基。
制備式(2)化合物式(1)所示的原料2-氯異煙酸或2-溴異煙酸可商購獲得，例如得自Maybridge Chemicals，或者可依據(jù)本領(lǐng)域眾所周知的方法制得。
可通過下述方法將式(1)所示的2-鹵代異煙酸轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的式(2)的酰鹵衍生物使用催化劑例如N，N-二甲基甲酰胺或吡啶，將式(1)化合物與過量鹵化劑例如草酰氯或草酰溴，或亞硫酰氯或亞硫酰溴在有機(jī)溶劑，優(yōu)選二氯甲烷或二氯乙烷中于室溫反應(yīng)約2-16小時(shí)，優(yōu)選16小時(shí)。通過常規(guī)方法分離出式(2)產(chǎn)物，優(yōu)選不用進(jìn)一步純化直接在下一步驟中反應(yīng)。
制備式(4)化合物式(3)所示的原料2-氨基-苯并噻唑化合物可依據(jù)EP00113219.0中公開的方法制得。
式(4)化合物可這樣制得將式(3)所示的2-氨基-苯并噻唑化合物與稍微過量的式(2)的酰鹵化合物在含有堿，優(yōu)選N-乙基二異丙基胺或三乙胺的非質(zhì)子有機(jī)溶劑，優(yōu)選二氯甲烷與四氫呋喃的混合物中于室溫反應(yīng)2-24小時(shí)，優(yōu)選24小時(shí)。通過常規(guī)方法分離出式(4)產(chǎn)物，優(yōu)選通過色譜法或重結(jié)晶純化式(4)產(chǎn)物。
制備式(4)化合物的另一方法式(4)化合物還可以直接由式(1)化合物制得。在該方法中，在含有堿，優(yōu)選N-乙基二異丙基胺的醚類溶劑，優(yōu)選四氫呋喃中，將式(1)化合物用化學(xué)計(jì)算當(dāng)量的肽偶聯(lián)試劑，優(yōu)選O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲六氟瞵酸鹽(HATU)于室溫處理30-90分鐘。然后在溶劑混合物，優(yōu)選四氫呋喃、二氧雜環(huán)己烷和N，N-二甲基甲酰胺的混合物中，用式(3)所示的2-氨基-苯并噻唑化合物將該混合物于室溫處理16-24小時(shí)，優(yōu)選24小時(shí)。通過常規(guī)方法分離出式(4)產(chǎn)物，優(yōu)選通過色譜法或重結(jié)晶純化式(4)產(chǎn)物。
制備式(6)化合物制備式(6)化合物的一種方法是用過量的甲醇與金屬氫化物堿，優(yōu)選氫化鈉或氫化鉀一起處理式(4)化合物。這些反應(yīng)可在任選含有助溶劑例如N，N-二甲基甲酰胺的醚類溶劑例如二氧雜環(huán)己烷、四氫呋喃或1，2-二甲氧基乙烷，優(yōu)選二氧雜環(huán)己烷中，于室溫至溶劑的回流溫度下，優(yōu)選約100℃下進(jìn)行2-72小時(shí)，優(yōu)選16小時(shí)。通過常規(guī)方法分離出式(6)產(chǎn)物，優(yōu)選通過色譜法或重結(jié)晶純化式(6)產(chǎn)物。
用過量式(7)的烷基溴處理式(6)化合物，其中式(7)烷基溴可商購獲得，或者可通過本領(lǐng)域眾所周知的方法，依據(jù)Synthetic Commun.1999，29，4051-4059的方法制得。該反應(yīng)可在極性溶劑如乙腈或N，N-二甲基甲酰胺，優(yōu)選N，N-二甲基甲酰胺中于高溫下，優(yōu)選所用溶劑的回流溫度下進(jìn)行2-18小時(shí)，優(yōu)選16小時(shí)。通過常規(guī)方法分離，優(yōu)選通過色譜法或重結(jié)晶純化其中R是苯基、吡啶基、-C(O)O-低級烷基或C(O)-低級烷基的式I產(chǎn)物。
其中R是-C(O)-嗎啉基、-(CH2)n-NR’2、-(CH2)n-O-低級烷基或-C(O)NR’2的式I化合物的制備制備其中R是-C(O)-嗎啉基、-(CH2)nNR’2、-(CH2)n-O-低級烷基或-C(O)NR’2的式I化合物的一種方法是如下面的反應(yīng)方案3所示，經(jīng)由式(8)所示的2-氧代-1，2-二氫-吡啶-4-甲酸酰胺中間體來進(jìn)行。
反應(yīng)方案3
其中R是-C(O)-嗎啉基、-(CH2)n-NR’2、-(CH2)n-O-低級烷基或-C(O)NR’2，且TMSI是碘代三甲基甲硅烷。
制備式(8)化合物在鹵代有機(jī)溶劑，優(yōu)選氯仿中，于室溫或高于室溫的溫度下，優(yōu)選在溶劑的回流溫度下，將式(6)化合物用過量碘代三甲基甲硅烷處理2-16小時(shí)，優(yōu)選約8小時(shí)。然后將該反應(yīng)混合物用醇，優(yōu)選甲醇在室溫或高于室溫的溫度下，優(yōu)選在溶劑混合物的回流溫度下處理2-18小時(shí)，優(yōu)選約16小時(shí)。通過常規(guī)方法分離出式(8)產(chǎn)物，優(yōu)選通過色譜法或重結(jié)晶純化式(8)產(chǎn)物。
其中R是-C(O)-嗎啉基、-(CH2)n-NR’2、-(CH2)n-O-低級烷基或-C(O)NR’2的式I化合物的制備用過量式(7)的烷基溴或式(9)的烷基氯處理式(8)化合物，其中式(7)的烷基溴或式(9)的烷基氯可商購獲得，或者可通過本領(lǐng)域眾所周知的方法制得。當(dāng)使用式(9)的烷基氯時(shí)，該反應(yīng)在化學(xué)計(jì)算當(dāng)量的溴化鋰的存在下進(jìn)行。這些反應(yīng)可在極性有機(jī)溶劑例如二氧雜環(huán)己烷或N，N-二甲基甲酰胺，優(yōu)選N，N-二甲基甲酰胺與二氧雜環(huán)己烷的混合物中，于室溫至所用溶劑混合物的回流溫度下進(jìn)行2-18小時(shí)，優(yōu)選16小時(shí)。通過常規(guī)方法分離出式I產(chǎn)物，優(yōu)選通過色譜法或重結(jié)晶純化式I產(chǎn)物。
分離和純化化合物如果需要的話，可通過任意合適的分離或純化方法進(jìn)行本文所述化合物和中間體的分離和純化，所述方法有例如過濾、萃取、結(jié)晶、柱色譜法、薄層色譜法、厚層色譜法、制備型低壓或高壓液相色譜法或這些方法的組合。關(guān)于合適的分離和純化方法的具體舉例說明可參見下文中的制備和實(shí)施例。然而，當(dāng)然也可以使用其它等同的分離或純化方法。
式I化合物的鹽式I化合物可以是堿性的，例如當(dāng)殘基R含有堿性基團(tuán)例如脂族或芳族胺基團(tuán)時(shí)，式I化合物是堿性的。在這樣的情況下，可將式I化合物轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的酸加成鹽。
轉(zhuǎn)化可通過用至少化學(xué)計(jì)算量的合適的酸處理來進(jìn)行，所述酸有例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸等，和有機(jī)酸例如乙酸、丙酸、乙醇酸、丙酮酸、草酸、蘋果酸、丙二酸、琥珀酸、馬來酸、富馬酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、甲磺酸、乙磺酸、對甲苯磺酸、水楊酸等。通常是將游離堿形式的本發(fā)明化合物溶解在惰性有機(jī)溶劑例如乙醚、乙酸乙酯、氯仿、乙醇或甲醇等中，并將酸加到類似溶劑中。把溫度保持在0℃-50℃。所形成的鹽自發(fā)地沉淀出來，或者可用極性較弱的溶劑讓其從溶液中沉淀出來。
可通過用至少化學(xué)計(jì)算量的合適的堿例如氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鉀、碳酸鈉、氨等處理來將式I化合物的酸加成鹽轉(zhuǎn)化成相應(yīng)的游離堿。
式I化合物及其可藥用加成鹽具有有價(jià)值的藥理學(xué)特性。具體而言，發(fā)現(xiàn)本發(fā)明化合物是腺苷受體配體，并且對腺苷A2A受體具有高親和性，對A1受體具有良好選擇性。
按照下文中給出的試驗(yàn)對化合物進(jìn)行研究。
人腺苷A1受體用塞姆利基森林病毒表達(dá)系統(tǒng)在中國倉鼠卵巢(CHO)細(xì)胞中重組表達(dá)人腺苷A1受體。收獲細(xì)胞，通過離心洗滌兩次，勻化并再次通過離心進(jìn)行洗滌。將最后洗滌的膜沉積物懸浮在Tris(50mM)緩沖液中，所述緩沖液中含有120mM NaCl、5mM KCl、2mM CaCl2和10mM MgCl2(pH 7.4)(緩沖液A)。在96孔培養(yǎng)板中進(jìn)行[3H]-DPCPX(([丙基-3H]8-環(huán)戊基-1，3-二丙基黃嘌呤)；0.6nM)結(jié)合試驗(yàn)，試驗(yàn)在2.5μg膜蛋白、0.5mg Ysi-聚-l-賴氨酸SPA珠和0.1U腺苷脫氨酶的存在下、在最終體積為200μl的緩沖液A中進(jìn)行。用黃嘌呤胺同類物(XAC；2μM)測定非特異性結(jié)合。在10μM至0.3nM的10種濃度下對化合物進(jìn)行測定。所有試驗(yàn)均一式兩份地進(jìn)行并且重復(fù)至少兩次。將測定培養(yǎng)板在室溫下保溫1小時(shí)，然后離心并用PackardTopcount閃爍計(jì)數(shù)器測定結(jié)合的配體。用非線性曲線擬合程序計(jì)算IC50值并周Cheng-Prussoff方程計(jì)算Ki值。
人腺苷A2A受體用塞姆利基森林病毒表達(dá)系統(tǒng)在中國倉鼠卵巢(CHO)細(xì)胞中重組表達(dá)人腺苷A2A受體。收獲細(xì)胞，通過離心洗滌兩次，勻化并再次通過離心進(jìn)行洗滌。將最后洗滌的膜沉積物懸浮在Tris(50mM)緩沖液中，所述緩沖液中含有120mM NaCl、5mM KCl、2mM CaCl2和10mM MgCl2(pH 7.4)(緩沖液A)。在96孔培養(yǎng)板中進(jìn)行[3H]-SCH-58261(Dionisotti等，1997，Br.J.Pharmacol.121，353；1nM)結(jié)合試驗(yàn)，試驗(yàn)在2.5μg膜蛋白、0.5mg Ysi-聚-1-賴氨酸SPA珠和0.1U腺苷脫氨酶的存在下、在最終體積為200μl的緩沖液A中進(jìn)行。用黃嘌呤胺同類物(XAC；2μM)測定非特異性結(jié)合。在10μM至0.3nM的10種濃度下對化合物進(jìn)行測定。所有試驗(yàn)均一式兩份地進(jìn)行并且重復(fù)至少兩次。將測定培養(yǎng)板在室溫下保溫1小時(shí)，然后離心并用Packard Topcount閃爍計(jì)數(shù)器測定結(jié)合的配體。用非線性曲線擬合程序計(jì)算IC50值并用Cheng-Prussoff方程計(jì)算Ki值。
結(jié)果表明，式I化合物對A2A受體具有良好親和性，并且對A1受體具有高選擇性。如下表所示，優(yōu)選的化合物表現(xiàn)出pKi＞7.2
式I化合物及式I化合物的可藥用鹽可，例如以藥物制劑的形式用作藥物。藥物制劑可例如以片劑、包衣片、糖衣丸、硬和軟明膠膠囊、溶液、乳液或混懸液的形式經(jīng)口服給藥。但也可例如以栓劑的形式直腸給藥，或者以注射液的形式胃腸外給藥。
式I化合物可用藥物惰性的、無機(jī)或有機(jī)載體加工以生產(chǎn)藥物制劑。乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石、硬脂酸或其鹽等，可用作例如制備片劑、包衣片、糖衣丸和硬明膠膠囊的載體。用于軟明膠膠囊的適宜載體是，例如植物油、蠟、脂肪、半固體和液體的多元醇等。根據(jù)活性物質(zhì)的性質(zhì)，在軟明膠膠囊的情況下通常不需要載體。用于制備溶液和糖漿的適宜載體是，例如水、多元醇、甘油、植物油等。用于栓劑的適宜載體是，例如天然的或硬化的油、蠟、脂肪、半液體或者液體多元醇等。
此外，藥物制劑還可包含防腐劑、增溶劑、穩(wěn)定劑、潤濕劑、乳化劑、甜味劑、著色劑、矯味劑、用于改變滲透壓的鹽、緩沖劑、掩蔽劑或抗氧劑。它們還可包含其它治療學(xué)上有益的物質(zhì)。
含有式I化合物或其可藥用鹽以及治療惰性的載體的藥物及其生產(chǎn)方法也是本發(fā)明的目的，所述生產(chǎn)方法包括，將一種或多種式I化合物和/或可藥用酸加成鹽以及，如果需要的話，一種或多種其它治療學(xué)上有益的物質(zhì)與一種或多種治療學(xué)惰性的載體一起制成蓋侖給藥形式。
根據(jù)本發(fā)明，式I化合物及其可藥用鹽可用于控制或預(yù)防基于腺苷受體拮抗活性的疾病，例如阿爾茨海默氏病、帕金森病、神經(jīng)保護(hù)、精神分裂癥、焦慮、疼痛、呼吸不足、抑郁、哮喘、過敏反應(yīng)、組織缺氧、局部缺血、癲癇發(fā)作和物質(zhì)濫用。此外，本發(fā)明的化合物還可用作鎮(zhèn)靜劑、肌肉松弛劑、抗精神病藥、抗癲癇藥、抗驚厥藥和心臟保護(hù)劑以及用于生產(chǎn)相應(yīng)的藥物。
根據(jù)本發(fā)明，最優(yōu)選的適應(yīng)癥包括中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病，例如某些抑郁癥、神經(jīng)保護(hù)和帕金森病的治療或預(yù)防。
劑量可在較寬的限度內(nèi)變化，但在每個(gè)具體病例中，當(dāng)然應(yīng)根據(jù)個(gè)體需求進(jìn)行調(diào)整。在口服給藥的情況下，對于成人的日劑量可以為約0.01mg-約1000mg通式I化合物或相應(yīng)量的其可藥用鹽。該日劑量可以以單次劑量給藥，或者以劃分的劑量給藥，此外，當(dāng)需要時(shí)，劑量也可超過上限。
片劑(濕法制粒)項(xiàng)成分mg/片5mg 25mg 100mg 500mg1. 式I化合物5 25 1005002. 無水乳糖DTG 125 10530 1503. Sta-Rx1500 6 6 6 304. 微晶纖維素 3030 30 1505. 硬脂酸鎂 1 1 1 1總計(jì)167167167831制備方法1.混合1、2、3和4項(xiàng)并用純水制粒。
2.在50℃下干燥該顆粒。
3.用適宜的研磨設(shè)備使該顆粒過篩。
4.加入第5項(xiàng)并混合3分鐘；在適宜的壓片機(jī)上壓片。
膠囊制劑項(xiàng)成分mg/膠囊5mg 25mg 100mg 500mg1. 式I化合物 525 100 5002. 含水乳糖 159 123148 ---3. 玉米淀粉 25 35 40 704. 滑石粉10 15 10 255. 硬脂酸鎂 12 2 5總計(jì)200200300600制備方法1.將1、2和3項(xiàng)在適宜的混合器中混合30分鐘。
2.加入第4和5項(xiàng)并混合3分鐘。
3.填充到適合的膠囊中。
下列制備和實(shí)施例用來舉例說明本發(fā)明，而不是限制本發(fā)明的范圍。
實(shí)施例11-芐基-2-氧代-1，2-二氫-吡啶-4-甲酸(4-甲氧基-7-嗎啉-4-基-苯并噻唑-2-基)-酰胺向85mg(0.21mmol)2-甲氧基-N-(4-甲氧基-7-嗎啉-4-基-苯并噻唑-2-基)-異煙酰胺在2ml乙腈內(nèi)的攪拌著的溶液中加入73mg(0.43mmol)碘化鈉和0.05ml(0.43mmol)芐基溴。將該混合物加熱回流16小時(shí)。然后將該反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用乙酸乙酯稀釋，依次用水和飽和鹽水洗滌。然后用硫酸鈉將有機(jī)相干燥，并真空濃縮。通過快速色譜法純化(2/1 EtOAc/甲苯)，得到32mg(32％)1-芐基-2-氧代-1，2-二氫-吡啶-4-甲酸(4-甲氧基-7-嗎啉-4-基-苯并噻唑-2-基)-酰胺，為黃色固體結(jié)晶。ES-MS m/e(％)499(M+Na+，14)，477(M+H+，100)。
按照類似方法制得了下列化合物實(shí)施例2[4-(4-甲氧基-7-嗎啉-4-基-苯并噻唑-2-基氨基甲?；?-2-氧代-2H-吡啶-1-基]-乙酸乙酯在DMF中使用碘化鈉和溴乙酸乙酯由2-甲氧基-N-(4-甲氧基-7-嗎啉-4-基-苯并噻唑-2-基)-異煙酰胺制得了該化合物。ES-MS m/e(％)495(M+Na+，25)，473(M+H+，100)。
實(shí)施例32-氧代-1-(2-氧代-丁基)-1，2-二氫-吡啶-4-甲酸(4-甲氧基-7-嗎啉-4-基-苯并噻唑-2-基)-酰胺在DMF中使用碘化鈉和1-溴-2-丁酮由2-甲氧基-N-(4-甲氧基-7-嗎啉-4-基-苯并噻唑-2-基)-異煙酰胺制得了該化合物。ES-MS m/e(％)479(M+Na+，32)，457(M+H+，100)。
實(shí)施例42-氧代-1-吡啶-2-基甲基-1，2-二氫-吡啶-4-甲酸(4-甲氧基-7-嗎啉-4-基-苯并噻唑-2-基)-酰胺在DMF中使用碘化鈉和2-(溴乙基)吡啶氫溴酸鹽由2-甲氧基-N-(4-甲氧基-7-嗎啉-4-基-苯并噻唑-2-基)-異煙酰胺制得了該化合物。ES-MS m/e(％)500(M+Na+，30)，478(M+H+，100)。
實(shí)施例51-(2-嗎啉-4-基-2-氧代-乙基)-2-氧代-1，2-二氫-吡啶-4-甲酸(4-甲氧基-7-嗎啉-4-基-苯并噻唑-2-基)-酰胺向200mg(0.52mmol)2-氧代-1，2-二氫-吡啶-4-甲酸(4-甲氧基-7-嗎啉-4-基-苯并噻唑-2-基)-酰胺在1ml DMF和4ml 1，2-二甲氧基乙烷內(nèi)的攪拌著的溶液中加入44mg(1.04mmol)氫化鈉(60％在礦物油中的分散液)。在室溫?cái)嚢?5分鐘后，加入90mg(1.04mmol)溴化鋰，繼續(xù)攪拌15分鐘。然后加入95mg(0.58mmol)4-(2-氯乙?；?嗎啉，將該混合物在室溫?cái)嚢?6小時(shí)。然后將該反應(yīng)混合物用乙酸乙酯稀釋，依次用0.5M鹽酸、飽和碳酸氫鈉溶液和飽和鹽水洗滌。將合并的水相過濾，用乙醚洗滌濾餅，然后重懸在甲苯中，并真空濃縮。通過快速色譜法純化(MeOH/CH2Cl2)，然后在乙酸乙酯中研制，制得了83mg(31％)1-(2-嗎啉-4-基-2-氧代-乙基)-2-氧代-1，2-二氫-吡啶-4-甲酸(4-甲氧基-7-嗎啉-4-基-苯并噻唑-2-基)-酰胺，為黃色固體結(jié)晶。ES-MS m/e(％)536(M+Na+，25)，514(M+H+，100)。
按照類似方法制得了下述化合物實(shí)施例61-二甲基氨基甲?；谆?2-氧代-1，2-二氫-吡啶-4-甲酸(4-甲氧基-7-嗎啉-4-基-苯并噻唑-2-基)-酰胺在1，2-二甲氧基乙烷和DMF中，用氫化鈉、溴化鋰和2-氯-N，N-二甲基乙酰胺由2-氧代-1，2-二氫-吡啶-4-甲酸(4-甲氧基-7-嗎啉-4-基-苯并噻唑-2-基)-酰胺制得該化合物。ES-MS m/e(％)494(M+Na+，22)，472(M+H+，100)。
權(quán)利要求
1.通式I化合物及其可藥用酸加成鹽 其中R是苯基、吡啶-2-基、-C(O)-O-低級烷基、C(O)-低級烷基、-C(O)-嗎啉基、-C(O)-NR’2、-(CH2)n-NR’2或-(CH2)n-O-低級烷基，且R’可以是氫或低級烷基。
2.權(quán)利要求1的式I化合物，其中R是苯基。
3.權(quán)利要求2的式I化合物，其中所述化合物是1-芐基-2-氧代-1，2-二氫-吡啶-4-甲酸(4-甲氧基-7-嗎啉-4-基-苯并噻唑-2-基)-酰胺。
4.權(quán)利要求1的化合物，其中R是-C(O)O-低級烷基。
5.權(quán)利要求4的化合物，其中所述化合物是[4-(4-甲氧基-7-嗎啉-4-基-苯并噻唑-2-基氨基甲酰基)-2-氧代-2H-吡啶-1-基]-乙酸乙酯。
6.權(quán)利要求1的化合物，其中R是-C(O)-低級烷基。
7.權(quán)利要求6的化合物，其中所述化合物是2-氧代-1-(2-氧代-丁基)-1，2-二氫-吡啶-4-甲酸(4-甲氧基-7-嗎啉-4-基-苯并噻唑-2-基)-酰胺。
8.權(quán)利要求1的化合物，其中R是吡啶基。
9.權(quán)利要求8的化合物，其中所述化合物是2-氧代-1-吡啶-2-基-甲基-1，2-二氫-吡啶-4-甲酸(4-甲氧基-7-嗎啉-4-基-苯并噻唑-2-基)-酰胺。
10.權(quán)利要求1的化合物，其中R是-C(O)-嗎啉基。
11.權(quán)利要求10的化合物，其中所述化合物是1-(2-嗎啉-4-基-2-氧代-乙基)-2-氧代-1，2-二氫-吡啶-4-甲酸(4-甲氧基-7-嗎啉-4-基-苯并噻唑-2-基)-酰胺。
12.權(quán)利要求1的化合物，其中R是-C(O)-NR’2。
13.權(quán)利要求12的化合物，其中所述化合物是1-二甲基氨基甲?；谆?2-氧代-1，2-二氫-吡啶-4-甲酸(4-甲氧基-7-嗎啉-4-基-苯并噻唑-2-基)-酰胺。
14.制備權(quán)利要求1-13的式I化合物的方法，所述方法包括a)將式(6)化合物 與式(7)化合物反應(yīng) 以生成式I化合物 其中R是苯基、吡啶基、-C(O)O-低級烷基或-C(O)-低級烷基，或者b)將式(8)化合物 與式(7)或式(9)化合物反應(yīng) 或 以生成式I化合物 其中R是-C(O)-嗎啉基、-(CH2)n-O-低級烷基、-(CH2)nNR’2或-C(O)NR’2，以及，如果需要的話，將所得化合物轉(zhuǎn)化成可藥用酸加成鹽。
15.通過權(quán)利要求14的方法或相當(dāng)?shù)姆椒ㄖ苽涞臋?quán)利要求1-13任一項(xiàng)的化合物。
16.包含一種或多種權(quán)利要求1-13任一項(xiàng)的化合物和可藥用賦形劑的藥物。
17.用于治療涉及腺苷受體的疾病的權(quán)利要求16的藥物。
18.權(quán)利要求1-13任一項(xiàng)的化合物在治療疾病中的應(yīng)用。
19.權(quán)利要求1-13任一項(xiàng)的化合物在制備用于治療涉及腺苷A2A受體的疾病的相應(yīng)藥物中的應(yīng)用。
20.前述的本發(fā)明。
全文摘要
本發(fā)明涉及通式I化合物及其可藥用酸加成鹽，其中R是苯基、吡啶－2－基、－C(O)－O－低級烷基、C(O)－低級烷基、－C(O)－嗎啉基、－C(O)－NR’
文檔編號C07D417/12GK1589146SQ02822890
公開日2005年3月2日 申請日期2002年11月9日 優(yōu)先權(quán)日2001年11月19日
發(fā)明者A·弗洛爾, R·雅各布-勞特恩, R·D·諾可羅司, C·里莫 申請人:弗·哈夫曼-拉羅切有限公司