專利名稱：制備考布他汀的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及制備考布他汀及其衍生物的新方法。
術(shù)語“考布他汀”或“1，2-二苯乙烯衍生物”意指下列通式的衍生物及其藥學(xué)上可接受的鹽 其中A代表羥基或氨基。
在這些鹽中，值得注意的是鹽酸鹽、乙酸鹽、磷酸鹽或甲磺酸鹽。當(dāng)化合物中的A為氨基時，它也可以與氨基酸偶合為酰胺，以及其藥學(xué)上可接受的鹽。
可以以藥學(xué)上可接受的鹽的形式存在的1，2-二苯乙烯衍生物或考布他汀的合成方法以及含有它們的藥物組合物公開于下列專利文獻(xiàn)US 4 996237、US 5 525 632、US 5 731 353以及US 5 674 906。這些專利中公開了考布他汀和它們的代謝物，同時也公開了它們在體外的抗腫瘤活性。
根據(jù)這些專利，考布他汀可以這樣制備將(3，4，5-三甲氧基芐基)三苯鏻與3-硝基-或3-羥基-4-甲氧基苯甲醛(其中羥基被保護(hù))在氫化鈉或鋰衍生物存在下縮合，如果得到的衍生物是硝化的話，則在鋅存在下將其還原。隨后將混合物進(jìn)行光處理或?qū)游龇蛛x來制備具有順式構(gòu)型的異構(gòu)體。
本發(fā)明涉及制備考布他汀或它們的衍生物的新方法以及對已有方法的改良。
首先被發(fā)現(xiàn)的第一個方法的途徑V0 1是用于制備其中A代表氨基的式(I)衍生物，該方法是對上述專利中所述方法的改良，該方法包括在(3，4，5-三甲氧基芐基)三苯鏻溴化物或氯化物和3-硝基-4-甲氧基苯甲醛存在下，進(jìn)行Wittig縮合，并且用鐵代替以前所述的鋅，進(jìn)行還原反應(yīng)，這使得就采用的醛而言，產(chǎn)率可達(dá)到60％，而在專利US 5 525 632中，以采用的醛計，產(chǎn)率僅為21％-33％。
第一個方法的途徑V0 2包括將3，4，5-三甲氧基苯甲醛與(4-甲氧基-3-硝基芐基)三苯鏻溴化物或氯化物縮合。在前述途徑V0 1和V0 2中，反應(yīng)在堿存在下進(jìn)行，所述堿特別是指叔-丁醇鉀、叔-戊醇鈉、氫化鈉、丁基鋰、LDA(二異丙基氨化鋰)、甲醇鈉、碳酸鉀或六甲基二硅氮烷的堿性衍生物。
該反應(yīng)可以在各種不同的溶劑中進(jìn)行，例如醚(THF)、極性非質(zhì)子溶劑(乙腈、NMP、DMF、DMSO等)、醇、芳族溶劑或水，反應(yīng)溫度則可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)所采用的堿和溶劑來調(diào)整。
第一個方法途徑V0 2所述的反應(yīng)，在K.G.Piney的Bioorg.Med.Chem.，8(2000)，2417-2425中有詳盡描述。
按照本發(fā)明改良的方法，采用鐵還原2-甲氧基-5-[2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙烯基]硝基苯。如果需要原料完全轉(zhuǎn)化，則優(yōu)選采用過量的鐵。所述過量最好為每摩爾的硝基衍生物加入2當(dāng)量以上的鐵。
已經(jīng)證實，在鋅存在的條件下在乙酸中進(jìn)行相同的反應(yīng)，采用常規(guī)的溶劑進(jìn)行鋅還原反應(yīng)，不能使其完全反應(yīng)(專利US 5 525 632，純Z異構(gòu)體的還原產(chǎn)率為46-66％)，此外，鋅的用量很大，因此在工業(yè)上造成極大的消耗。另外，在該方法中，還原反應(yīng)中形成的氨基和亞硝基中間體發(fā)生偶合產(chǎn)生了大量的“偶氮”化合物。
采用自甲酸銨得到的新生的氫，在常規(guī)催化劑(例如鈀或鉑)存在下進(jìn)行還原，可以使不需要的E異構(gòu)體的雙鍵產(chǎn)生高異構(gòu)化并使雙鍵發(fā)生部分飽和。
上述Piney出版物中描述了通過將純硝基Z異構(gòu)體用亞硫酸氫鈉還原，經(jīng)層析及結(jié)晶后得到氨基Z異構(gòu)體的方法，但是產(chǎn)率只有37％。
經(jīng)鉑或鈀催化采用分子氫進(jìn)行氫化作用，反應(yīng)極少可以完全，并且還使乙烯雙鍵飽和。
已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了第二個方法，該方法避免了以硝基衍生物作為原料時的中間體的還原步驟。因此，這種方法使縮合變得更加經(jīng)濟(jì)，可以使(3，4，5-三甲氧基芐基)三苯鏻溴化物或氯化物與3-氨基-4-甲氧基苯甲醛縮合，也可以使3，4，5-三甲氧基苯甲醛與(3-氨基-4-甲氧基芐基)三苯鏻鹽縮合。
第二個方法的兩種備選途徑與第一個方法的途徑V0 1及V0 2相比，其所需步驟可以產(chǎn)生更少的CMR(致癌、致突變或致畸)產(chǎn)物，因此，這個方法在工業(yè)安全性及產(chǎn)出成本上的優(yōu)點均是顯而易見的。
根據(jù)第二個方法的途徑V0 3，為實現(xiàn)本發(fā)明，使(3，4，5-三甲氧基芐基)三苯鏻鹽與3-氨基-4-甲氧基苯甲醛反應(yīng)，反應(yīng)優(yōu)選在堿存在的條件下進(jìn)行，所述堿特別是指叔-丁醇鉀、叔-戊醇鈉、氫化鈉、丁基鋰、LDA、甲醇鈉、碳酸鉀或六甲基二硅氮烷的堿性衍生物。優(yōu)選采用甲醇鈉。
該反應(yīng)可以在不同的溶劑(例如醚(THF)、極性非質(zhì)子溶劑(乙腈、NMP、DMF、DMSO)、醇、芳族溶劑或水)中進(jìn)行，至于溫度則可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)所使用的堿及溶劑進(jìn)行調(diào)節(jié)。
如上所述，反應(yīng)溫度可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)所用堿來調(diào)節(jié)。當(dāng)采用甲醇鹽時，優(yōu)選溫度為0-10℃。反應(yīng)后，用酸的水溶液中和堿，洗滌并濃縮有機(jī)相，層析粗品濃縮液后得到目標(biāo)產(chǎn)物。
按照第二個方法的途徑V0 4，為實現(xiàn)本發(fā)明，使(3-氨基-4-甲氧基芐基)三苯鏻鹽及3，4，5-三甲氧基苯甲醛反應(yīng)，反應(yīng)優(yōu)選在堿存在的條件下進(jìn)行，所述堿特別是指叔-丁醇鉀、叔-戊醇鈉、氫化鈉、丁基鋰、LDA、甲醇鈉、碳酸鉀或六甲基二硅氮烷的堿性衍生物。優(yōu)選采用甲醇鈉。
該反應(yīng)可以在不同的溶劑(例如醚(THF)、極性非質(zhì)子溶劑(乙腈、NMP、DMF、DMSO)、醇、芳族溶劑或水)中進(jìn)行，至于溫度則可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)所使用的堿及溶劑進(jìn)行調(diào)節(jié)。
如上所述，反應(yīng)溫度可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)所用堿來調(diào)節(jié)。當(dāng)采用甲醇鹽時，優(yōu)選溫度為0-10℃。反應(yīng)后，用酸的水溶液中和堿，洗滌并濃縮有機(jī)相，層析粗品濃縮液后得到目標(biāo)產(chǎn)物。
根據(jù)第二個方法的途徑V0 3或V0 4或第一個方法的途徑V0 1或V0 2獲得下式衍生物
式(IIa)當(dāng)需要使絲氨酸與式(IIa)化合物偶合時，優(yōu)選采用在通式(IIb)的絲氨酸氮上和羥基官能基團(tuán)上雙保護(hù)的L-絲氨酸作為原料 其中PG代表一個本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的胺官能團(tuán)的保護(hù)基團(tuán)，得到新的下列通式的中間體 隨后將該中間體裂解，優(yōu)選根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的脫保護(hù)反應(yīng)，同時通過酸水解進(jìn)行開環(huán)反應(yīng)。優(yōu)選地，式(IIb)或(III)的PG基團(tuán)代表選自下列的保護(hù)基團(tuán)叔-丁氧基羰基、芐氧基羰基(CBZ)或9-芴基甲氧基羰基(FMOC)。
上述式(III)化合物為新化合物并且在此要求進(jìn)行保護(hù)。
縮合優(yōu)選在EDCl(1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺氯化物)存在或DCC(二環(huán)己基碳二亞胺)和HOBT(羥基苯并三唑)存在或DCC(二環(huán)己基碳二亞胺)及HOSU(N-羥基琥珀酰亞胺)存在，或者，最終，TOTU(O-[(乙氧基羰基)氰基亞甲基氨基]-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓四氟代硼酸鹽)或HBTU(O-苯并三唑-1-基-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽)或N，N-羰基二咪唑存在的條件下進(jìn)行。反應(yīng)優(yōu)選在一個對反應(yīng)惰性的溶劑中進(jìn)行，該溶劑特別可選自極性非質(zhì)子溶劑，例如乙腈、二甲基甲酰胺、四氫呋喃或氯化脂族溶劑，例如二氯甲烷或酯。
當(dāng)然，式(IIa)衍生物的偶合也可以通過混合酐進(jìn)行，所述混合酐可以通過使氯代甲酸酯或酰氯(例如新戊酰氯)與雙保護(hù)的式(IIb)的L-絲氨酸反應(yīng)就地合成，并且該反應(yīng)在各種對反應(yīng)惰性的溶劑中在NMM(N-甲基嗎啉)型的叔堿存在的條件下進(jìn)行，所述溶劑包括酯、醚、氯化溶劑、乙腈等。混合酐優(yōu)選在溫度0-10℃下制備，然后反應(yīng)在室溫下進(jìn)行。反應(yīng)后，反應(yīng)混合物用水溶液水解，然后沉淀分離混合物，得到的有機(jī)相用羥基化的堿洗滌。
式(III)化合物的雙脫保護(hù)采用有機(jī)或無機(jī)酸進(jìn)行。優(yōu)選采用醇介質(zhì)中的濃鹽酸溶液。根據(jù)本發(fā)明的優(yōu)選實施方案，反應(yīng)溫度為50-70℃。
下列實施例將更詳盡地闡述本發(fā)明，但這些實施例不以任何方式限制本發(fā)明的范圍。
混合物的組成、反應(yīng)的監(jiān)測和進(jìn)展，以及未分離產(chǎn)物/中間體的產(chǎn)率及它們的測定通過HPLC(高效液相層析法)來進(jìn)行。
實施例1-本發(fā)明的第一個方法的途徑V0 2(Z)-N-[2-甲氧基-5-[2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙烯基]苯基]-L-絲氨酰胺鹽酸鹽通用合成方法新的“反向維悌希(Wittig inverse)”方法，采用(4-甲氧基-3-硝基芐基)三苯鏻溴化物及3，4，5-三甲氧基苯甲醛作為原料，可以得到2-甲氧基-5-[2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙烯基]硝基苯的Z和E異構(gòu)體混合物，其Z/E比率為75/25。
Z硝基異構(gòu)體的比率足夠高，因此可以直接對Z/E混合物進(jìn)行還原，并且通過使鹽酸鹽結(jié)晶獲得Z氨基異構(gòu)體，經(jīng)HPLC測定為97％(內(nèi)標(biāo))。
(4-甲氧基-3-硝基芐基)三苯鏻溴化物(4)可以根據(jù)下列實施例制備 3-硝基-4-甲氧基芐基醇(2)將90.5g的3-硝基-4-甲氧基苯甲醛(1)、450ml的THF及90ml的乙醇順次加入裝有一個機(jī)械攪拌器、一個溫度計、一個Y型管、一個固體加料漏斗和一個裝有計泡計的回流冷凝器的2-升的三頸燒瓶中。將得到的淡黃色溶液冷卻至10℃，然后于10/15℃、40分鐘內(nèi)，加入10g硼氫化鈉(反應(yīng)放熱，所以必須用冰/丙酮浴保持溫度)；加入完成后，棕色溶液變?yōu)樯钏{(lán)色。于10℃，攪拌溶液30分鐘，經(jīng)TLC(薄層層析)監(jiān)測反應(yīng)的完成，于10℃，再攪拌溶液1小時，然后溫?zé)嶂潦覝亍?br> 用一個500ml等壓滴液漏斗(ampoule de coulée isobare)代替加液漏斗，通過該滴液漏斗，在30分鐘內(nèi)滴加300ml蒸餾水，同時保持混合物溫度為20℃。加入水的同時觀察氣體的變化。
將混合物在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(50℃/20mmHg)上濃縮至2/3，白色產(chǎn)物自濃縮溶液中以塊狀形式結(jié)晶。
冷卻的水相先用250ml、然后用150ml二氯甲烷提取，然后將合并的有機(jī)相用250ml蒸餾水洗滌，經(jīng)硫酸鎂干燥。
過濾后，二氯甲烷溶液可用于下列溴化反應(yīng)。
該步驟的產(chǎn)率為100％。
注意醇(2)可自商業(yè)獲得，但很難處理。
3-硝基-4-甲氧基芐基溴(3)將3-硝基-4-甲氧基芐基醇(2)的二氯甲烷溶液加入裝有一個機(jī)械攪拌器、一個溫度計、一個Y型管、一個固體加料漏斗和一個裝有計泡計的回流冷凝器的1-升的三頸燒瓶中，加入100ml二氯甲烷。將攪拌的溶液冷卻至5℃，然后滴加入135.4g的三溴化磷，同時保持溫度5℃。
于5℃，將溶液攪拌1小時30分鐘，經(jīng)TLC(薄層層析法)監(jiān)測反應(yīng)的完成，然后保持在溫度15℃，滴加入250ml飽和的碳酸氫鈉溶液。稍后有大量氣體產(chǎn)生。
從漏斗中分離的有機(jī)相順次用250ml蒸餾水及200ml飽和的碳酸氫鈉溶液洗滌。經(jīng)硫酸鎂干燥有機(jī)相，過濾并于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(50℃/20mmHg)上濃縮。
經(jīng)兩個步驟得到119g黃綠色針狀固體，化學(xué)產(chǎn)率97％。
注意產(chǎn)物(3)也可以按照在出版物K.G.Piney等，Bioorg.Med.Chem.，8(2000)，2417-2425中描述的方法制備。
(3-硝基-4-甲氧基芐基)三苯鏻溴化物(4)在攪拌下，將119g的3-硝基-4-甲氧基芐基溴(3)加入裝有一個機(jī)械攪拌器、一個溫度計、一個Y型管、一個可以加入固體的漏斗和一個裝有計泡計的回流冷凝器的1000ml甲苯的2-升的三頸燒瓶中，溫?zé)嶂?5℃，變?yōu)槿芤?。然后加?26.5g三苯膦，隨后將獲得的溶液逐漸加熱至60℃；自30℃開始形成沉淀物。將混合物保持于60/65℃ 4小時，然后冷卻至30℃并用燒結(jié)玻璃過濾器過濾。過濾后的殘留物用300ml甲苯在過濾器上洗滌2次，在烘箱中干燥(35℃/20mmHg/20小時)。
得到217g(4-甲氧基-3-硝基芐基)三苯鏻溴化物，化學(xué)產(chǎn)率為88％。
合成方法在下列出版物中有所描述(溶劑二氯甲烷)K.G.Piney等，Bioorg.Med.Chem.，8(2000)，2417-2425。色譜No.＝4865-V1H N.M.R.色譜(300MHz，(CD3)2SO，δ為ppm)3.90(s，3H)，5.26(d，J＝15Hz，2H)，7.33(mt，2H)，7.41(mt，1H)，7.65-8.05(mt，15H)。質(zhì)譜No.212217，m＝428EI m/z＝262 [PPh3]+基峰DCI m/z＝445 MNH3+m/z＝428 M+m/z＝263 [PPh3H]+基峰IR色譜426469 KBr2869，2843，2776，1619，1527，1438，1362，1287，1270，1111，752，692及502cm-12-甲氧基-5-[2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙烯基]硝基苯(6)及(7)的Z和E混合物 于20℃、氮氣氛下，將54.7g 3，4，5-三甲氧基苯甲醛(5)、148.6g(4-甲氧基-3-硝基芐基)三苯鏻溴化物(4)及1300ml甲苯加入裝有一個機(jī)械攪拌器、一個溫度計、一個Y型管、一個加液漏斗和一個裝有計泡計的回流冷凝器的2-升的三頸燒瓶中。
采用冰浴將攪拌的懸浮液冷卻至5℃，然后于5℃、用40分鐘，加入63.2g 25％w/w的甲醇鈉的甲醇溶液。
在加入過程中，懸浮液的顏色由灰白變?yōu)辄S色、然后又變?yōu)樽厣?br> 于5℃，攪拌混合物1小時，用HPLC監(jiān)測反應(yīng)完成(醛完全消耗)。然后加入3g(0.05mol)乙酸。
加熱懸浮液至40℃，并保持于40℃30分鐘。在該溫度下，只有鹽未溶解。于40℃，經(jīng)過燒結(jié)玻璃過濾器No.3過濾混合物，鹽在過濾器上，用100ml甲苯洗滌3次。
再將濾液放入裝有250ml蒸餾水的圓底燒瓶中，于40℃，攪拌雙相混合物20分鐘，然后通過分液漏斗分離。再用250ml蒸餾水洗滌甲苯層2次，然后在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮至干。
于40℃，將殘留物溶于600ml異丙醇和12ml甲苯，目標(biāo)產(chǎn)物開始結(jié)晶，在緩慢攪拌下，溫?zé)嶂潦覝剡^夜。
攪拌的懸浮液冷卻至5℃并持續(xù)1小時，然后經(jīng)過燒結(jié)玻璃過濾器過濾，過濾墊用125ml異丙醇洗滌2次，于真空下在烘箱中蒸發(fā)至干(35℃/30mmHg/18小時)。
得到91.7g Z和E異構(gòu)體(6)和(7)的混合物，Z/E比率為75/25(ISHPLC)，產(chǎn)率為95％。
合成方法在下列出版物中有所描述(溶劑二氯甲烷堿NaH)K.G.Piney等，Bioorg.Med.Chem.，8(2000)，2417-2425。
注意反應(yīng)條件分別為例如溶劑THF、乙腈、甲醇和其它醇、二氯甲烷、NMP、DMF、DMSO等。
堿叔丁醇鉀、叔戊醇鈉、氫氧化鈉、NaH、BuLi/LDA、碳酸鉀等。
溫度自-10℃至溶劑的回流溫度。
Z-2-甲氧基-5-[2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙烯基]苯胺鹽酸鹽(8)
于20℃、在氮氣氛下、將80g 2-甲氧基-[2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙烯基]硝基苯(6)和(7)的75/25的Z及E混合物、640ml無水乙醇和160ml蒸餾水加入裝有一個機(jī)械攪拌器、一個溫度計、一個Y型管、一個可加入固體的漏斗、一個裝有計泡計的回流冷凝器和熱浴的2-升的三頸燒瓶中。
迅速攪拌混合物并在油浴上加熱，于50℃，向懸浮液中加入7.8ml 6N鹽酸，然后將混合物的溫度提高至77±2℃?；旌衔锶咳芙狻?br> 用5分鐘，逐份加入52g鐵粉。加入后，混合物變?yōu)槿芤海S后在圓底燒瓶壁上形成黑色沉淀。
將混合物保持于77±2℃ 2小時并用HPLC監(jiān)測原料硝基化合物(6)和(7)的消失。
混合物冷卻至40℃并經(jīng)覆有clarcel的燒結(jié)玻璃過濾器過濾，濾墊用160ml的80/20乙醇/水的混合物清洗2次。
在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上濃縮濾液、母液以及洗滌液。共沸水合物一經(jīng)洗滌，即在殘留的液相中形成油沉淀。
在分液漏斗中用300ml二氯甲烷提取水相2次，然后將有機(jī)相用半-飽和的氯化鈉水溶液及300ml蒸餾水洗滌2次。
在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上將有機(jī)相濃縮至干，得到76g油狀物，該油經(jīng)HPLC測定顯示Z/E比率為80/20。將油溶于591ml甲醇并在攪拌下轉(zhuǎn)入1升的圓底燒瓶中，然后加入100ml的2.32N甲醇制鹽酸溶液，開始形成沉淀，于攪拌下，將混合物沉淀過夜。
甲醇+甲醇制鹽酸溶液的量使Z異構(gòu)體終濃度(經(jīng)HPLC測定)為8.8％w/v。
清晨，混合物經(jīng)一個燒結(jié)玻璃過濾器過濾。干燥的墊重8.2g，并只含E異構(gòu)體(HPLC)。
在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上將濾液(693g)(Z/E比率＝86/14(IS HPLC))濃縮至一半，將400ml乙腈加入347g濃縮液并將混合物再濃縮至得到347g濃縮液。然后加入1000ml乙腈并將混合物濃縮至結(jié)晶形成。然后于60℃，將濃縮液轉(zhuǎn)入攪拌的含有1500ml乙腈的4升圓底燒瓶中?；旌衔锎罅砍恋?。
于60℃，繼續(xù)攪拌混合物2.5小時并用約1小時冷卻至30℃。用燒結(jié)玻璃過濾器過濾漿狀物(E異構(gòu)體(9)溶于濾液)。將墊用200ml乙腈洗滌兩次并在烘箱中干燥(35℃/30mmHg/18小時)。
得到45.7g Z-2-甲氧基-5-[2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙烯基]苯胺(8)，經(jīng)ISHPLC測定為97％，產(chǎn)率為56％，即相對于加入72％的Z異構(gòu)體的Z異構(gòu)體產(chǎn)率。
實施例2-根據(jù)本發(fā)明按照第二個方法的途徑V0 3進(jìn)行合成相對于第一個“反向維悌希”方法的途徑V0 2，第二個方法的途徑V0 3的優(yōu)點是在已還原的產(chǎn)物即氨基醛(1a)及鏻(2a)之間進(jìn)行維悌希反應(yīng)，因此可以消除產(chǎn)生CMR產(chǎn)物的化學(xué)步驟。
(Z)-N-[2-甲氧基-5-[2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙烯基]苯基]-L-絲氨酰胺鹽酸鹽通用合成方法
3-氨基-4-甲氧基苯甲醛(1a) 將20g 3-硝基-4-甲氧基苯甲醛(1)和350ml無水乙醇裝入2升充有惰性氣體氬氣的三頸燒瓶中，該燒瓶裝有一個機(jī)械攪拌器、一個溫度計、一個Y型管、一個可以加入固體的漏斗、一個裝有計泡計的回流冷凝器和加熱浴。攪拌并于60℃加熱混合物，混合物變?yōu)槿芤骸?br> 于60℃，滴加115ml蒸餾水，隨后再加入14ml 2N鹽酸。然后分份加入24.7g鐵粉。
用2小時，將混合物的溫度升至室溫。至此，反應(yīng)完成(TLC)。
混合物經(jīng)硅藻土墊過濾，并真空濃縮，殘留物溶于二氯甲烷，有機(jī)溶液用蒸餾水洗滌兩次，然后經(jīng)硫酸鎂干燥、過濾并真空濃縮至干。
獲得16g粗品(1a)并經(jīng)硅膠柱層析純化，洗脫液為二氯甲烷。
獲得2份含有純目標(biāo)產(chǎn)物的流分，經(jīng)濃縮后，得到11.5g純化合物(1a)，即產(chǎn)率69％。
1H N.M.R.色譜No.2810-V(300MHz，(CD3)2SO，δin ppm)3.88(s，3H)，5.11(mf，2H)，7.01(d，J＝8Hz，1H)，7.14(d，J＝2Hz，1H)，7.18(d，J＝8Hz，1H)，9.53(s，1H)。
質(zhì)譜No.210112，m＝151EI m/z＝151 M+.基峰m/z＝136 [M-CH3]+m/z＝108 [136-CO]+m/z＝80 [108-CO]+IR色譜425135 KBr3464，3437，3367，3349，1675，1655，1582，1513，1293，1241，1139，1023，803及640cm-1Z-及E-2-甲氧基-5-[2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙烯基]苯胺(8’)及(9’) 注意鏻鹽(2a)作為原料，并已經(jīng)被公開于專利Ajinomoto Co.Ltd，US 5525 632及WO 01/12579 A2中。
先將8.0g鏻鹽(2a)、隨后將2.20g氨基苯甲醛(1a)及100ml甲苯裝入充有惰性氣體氮氣的250ml三頸燒瓶中，該燒瓶裝有一個機(jī)械攪拌器、一個溫度計、一個Y型管、一個加液漏斗、一個裝有計泡計的回流冷凝器和冷浴。將攪拌的懸浮液冷卻至5℃，并用15分鐘通入3.51ml 25％w/w甲醇鈉的甲醇溶液。于5℃，2.5小時后，反應(yīng)仍未完成(TT45％)，但未進(jìn)一步變化(HPLC)，Z/E比率為61/39。然后通入用50ml水稀釋的0.2ml乙酸，溫度升至13℃，攪拌混合物30分鐘，然后傾入分液漏斗中分離。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上真空濃縮有機(jī)相，得到8g黃色油狀物。
經(jīng)HPLC檢測，該油狀物含有原料醛、膦氧化物，并且所需Z/E混合物的比率為61/39。
該油狀物經(jīng)硅膠柱層析(40份w/w)，洗脫液為環(huán)己烷/乙酸乙酯/三乙胺(50/50/2)的混合物。
將合并的2個系列的流分濃縮至干第一提取物干燥后為360mg，含有93％Z異構(gòu)體+不明雜質(zhì)；第二部分為2.09g，經(jīng)IS HPLC測定含有39和37.5％的原料醛及Z/E混合物。
Z異構(gòu)體(8’)的重量，經(jīng)IS HPLC測定，為1.15g，相對于采用的2.20g醛，產(chǎn)率為24％。
實施例3-根據(jù)本發(fā)明按照第二個方法的途徑V0 3進(jìn)行合成如途徑V0 2，相對于第一個“反向維悌?！狈椒ǖ耐緩絍0 2，第二個方法的途徑V0 3的優(yōu)點是在已還原的產(chǎn)物即(3-氨基-4-甲氧基芐基)三苯鏻溴化物(1b)及3，4，5-三甲氧基苯甲醛(5)之間進(jìn)行維悌希反應(yīng)，因此可以消除產(chǎn)生CMR產(chǎn)物的化學(xué)步驟。
(Z)-N-[2-甲氧基-5-[2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙烯基]苯基]-L-絲氨酰胺鹽酸鹽通用合成方法
(4-甲氧基-3-氨基芐基)三苯鏻溴化物(1b) 將30g(4)、240ml乙醇及60ml蒸餾水裝入裝有一個機(jī)械攪拌器、一個溫度計、一個Y型管、一個可加入固體的漏斗、一個裝有計泡計的回流冷凝器和加熱浴的1-升的三頸燒瓶中。
將1.76ml的6N鹽酸加入攪拌的懸浮液中，加熱至70℃。
然后用15分鐘，分份加入9.9g鐵粉，混合物仍然不溶。將混合物保持于75℃2小時；有機(jī)物緩慢變?yōu)槿芤?，同時形成褐色鐵沉淀和鐵氧化物。
經(jīng)HPLC監(jiān)測，仍殘留了5％的原料；再加入2g鐵并繼續(xù)加熱1小時；TT完全。
將混合物冷卻至40℃并經(jīng)clarcel過濾，過濾殘留物用100ml含有20％水的乙醇清洗，將濾液在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器上真空濃縮至干。
殘留物溶于300ml異丙醇并自混合物中結(jié)晶，攪拌并加熱至50℃，再次變?yōu)槿芤?。然后通?4ml的5N鹽酸的異丙醇溶液，混合物沉淀，并于50℃持續(xù)1小時后恢復(fù)至室溫。
漿狀物經(jīng)燒結(jié)玻璃過濾器過濾并用50ml異丙醇洗滌墊，在真空烤箱中充分干燥。
得到27.3g(1b)，產(chǎn)率為89.9％。
1H N.M.R.色譜No.4584-V(300MHz，(CD3)2SO，δin ppm)3.78(s，3H)，5.03(寬峰d，J＝15Hz，2H)，6.43(mf，1H)，6.62(寬峰s，1H)，6.82(寬峰d，J＝8Hz，1H)，7.60-8.00(mt，15H).
質(zhì)譜 No.211915，m＝397EIm/z＝397 M+m/z＝382 [M-CH3]+m/z＝262 [PPh3]+基峰DCI m/z＝398 MNH4+M/z＝263 [PPh3H]+基峰IR色譜426386KBr3254，2474，1920，1628，1520，1439，1433，1279，1110，736，690，527及511cm-1Z-和E-2-甲氧基-5-[2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙烯基]苯胺(8’)和(9’) 將11.02g(1b)、4g(5)和70ml甲苯裝入250ml充有惰性氣體氮氣的三頸燒瓶中，該燒瓶裝有一個機(jī)械攪拌器、一個溫度計、一個Y型管、一個固體加料漏斗、一個裝有計泡計的回流冷凝器和冷浴。
將攪拌的懸浮液冷卻至5℃，然后用15分鐘，通入4.92ml 25％w/w的甲醇鈉的甲醇溶液。于5℃，攪拌懸浮液2.5小時，然后加入用50ml水稀釋的0.2ml乙酸，升溫至14℃，混合物變濃。用10ml甲苯及10ml水稀釋。得到棕色不溶物。
混合物經(jīng)clarcel過濾，用50ml甲苯(洗滌液最終只含有原料醛，不加至雙相濾液中)洗滌墊3次，澄清的濾液(pH 12)通過轉(zhuǎn)移至分液漏斗中進(jìn)行分離，于40℃，真空濃縮有機(jī)相至干。經(jīng)HPLC測定Z/E的比率為43/57。
獲得棕色油狀物(4g)，經(jīng)硅膠柱層析(100份w/w)，洗脫液為環(huán)己烷/乙酸乙酯/三乙胺(50/50/2)混合物。
將2個系列的流分合并并濃縮至干第一份1.1g，含有14％的E異構(gòu)體和59％的Z異構(gòu)體；第二份為1.08g，含有86％的E異構(gòu)和7％的Z異構(gòu)體。
經(jīng)IS HPLC測定，Z異構(gòu)體(8’)的重量為0.725g，相對于采用的4g醛，產(chǎn)率為11.3％。
Z-4-{2-甲氧基-5-[2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙烯基]苯基氨甲?；鶀-2，2-二甲基噁唑烷-3-甲酸叔-丁酯(11) 自鹽酸鹽(8)中釋出堿(8’)先將44g(8)、16g碳酸氫鈉，然后再將200ml蒸餾水和375ml二氯甲烷裝入1升的厄倫美厄燒瓶中。于室溫下，攪拌混合物20分鐘，獲得澄清的雙相。
分離有機(jī)相，經(jīng)硫酸鈉干燥并過濾。
獲得約400ml含有(8’)的二氯甲烷溶液。
2，2-二甲基噁唑烷-3，4-二甲酸3-叔-丁酯(10)的制備盡管可以從商業(yè)獲得，但該產(chǎn)物很難處理。因此可以根據(jù)J.Org.Chem.，63(12)，第3983頁(1998)所述的方法，通過將甲酯用氫氧化鋰皂化制備1H N.M.R.色譜(300MHz，(CD3)2SO，δppm)1.38(s，3H)，1.45(s，9H)，1.55(s，3H)，3.95(mt，1H)，4.16(mt，1H)，4.31(mt，1H)，12.50-13.10(寬峰mf，1H)。
質(zhì)譜No.213135，m＝245DCI m/z＝263 MNH4+m/z＝246 MH+m/z＝207 [MNH4-t-Bu]+基峰m/z＝146 [MH-BOC]+IR色譜426759KBr1744，1704，1638，1407，1368，1164，1104，856，836和623cm-1偶合將溶液(8’)裝入2升的裝有一個機(jī)械攪拌器、一個溫度計、一個Y型管、一個可以加入固體的漏斗、一個裝有計泡計的回流冷凝器和冰浴的三頸燒瓶中，加入600ml二氯甲烷，攪拌下冷卻混合物。
于5℃，加入42.9g的2，2-二甲基噁唑烷-3，4-二甲酸3-叔-丁酯(10)，變?yōu)槿芤海缓笥?-10℃，分份加入48g的1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDCl)。
用冰浴融化過夜，使混合物緩慢恢復(fù)至室溫。
清晨，再加入330ml蒸餾水，劇烈攪拌混合物。經(jīng)30分鐘，混合物變得渾濁(EDCl水解)。再持續(xù)攪拌30分鐘。
用分液漏斗分離混合物，順次用280ml的0.55N氫氧化鈉溶液和300ml蒸餾水洗滌有機(jī)相2次。
在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(50℃/50mmHg)上將有機(jī)相濃縮至干。
獲得79.4g粘性油狀物(11)，該油于20℃變硬，產(chǎn)率為117％，以所使用的(8)計。
色譜No.＝5578-V
1H N.M.R.色譜(400MHz，(CD3)2SO，溫度373K，δppm)1.41(s，9H)，1.53(s，3H)，1.64(s，3H)，3.64(s，6H)，3.71(s，3H)，3.86(s，3H)，3.99(dd，J＝9和3Hz，1H)，4.19(dd，J＝9和7Hz，1H)，4.52(dd，J＝7和3Hz，1H)，6.48(d，J＝12.5Hz，1H)，6.55(d，J＝12.5Hz，1H)，6.58(s，2H)，7.02(mt，2H)，8.13(寬峰s，1H)，8.82(寬峰s，1H)。
質(zhì)譜No.213565，m＝542DCI m/z＝560MNH4+基峰m/z＝543MH+m/z＝504[MNH4-t-Bu]+m/z＝443[MH-BOC]+IR色譜425857 CCl43409，2982，2938，2837，1712，1698，1534，1363，1249，1133，1092及851cm-1其它所采用的偶合條件如-混合酐(新戊酰氯/(10))。
-DCC/HOBT、DCC/HOSU、TOTU、N，N-羰基二咪唑等。
-在乙腈、DMF、THF、二氯甲烷、酯等中。
效果最好的是采用二氯甲烷中的EDCl·HCl。
(Z)-N-[2-甲氧基-5-[2-(3，4，5-三甲氧基苯基)乙烯基]苯基]-L-絲氨酰胺鹽酸鹽 于20℃，將在54ml甲醇中的61.8g(11)溶液裝入1升的裝有一個機(jī)械攪拌器、一個溫度計、一個Y型管、一個裝有計泡計的回流冷凝器和加熱浴的三頸燒瓶中，加入150ml乙酸異丙酯、99ml的2.3N甲醇制鹽酸溶液和8.2ml蒸餾水。攪拌混合物并于60℃加熱3小時。冷卻溶液至40℃，經(jīng)燒結(jié)玻璃過濾器No.4過濾，用40ml甲醇洗滌。濾液再裝入三頸燒瓶中攪拌，加入194ml乙酸異丙酯，再次加熱混合物至40℃，加入0.2g(12)使溶液開始反應(yīng)，然后用1小時，滴加入194ml乙酸異丙酯。加入乙酸異丙酯的同時，混合物開始緩慢結(jié)晶。
混合物恢復(fù)至室溫，然后冷卻并保持于5℃過夜。
清晨，將漿狀物經(jīng)燒結(jié)玻璃過濾器過濾，并將墊干燥，用50ml乙酸異丙酯洗滌4次，在烤箱中充分干燥至穩(wěn)定重量(35℃/10mmHg)。
得到28g(12)，經(jīng)過2個步驟(偶合后脫保護(hù)處理)后的產(chǎn)率為56％，ISHPLC測定＞98％，根據(jù)第一個方法的途徑V0 2進(jìn)行合成，總產(chǎn)率為30％[得到的(12)相對于使用的(5)]。
權(quán)利要求
1.制備下列通式(I)的考布他汀的方法 其中A代表氨基，該方法的特征在于，在(3，4，5-三甲氧基芐基)三苯鏻溴化物或氯化物與3-硝基-4-甲氧基苯甲醛或3，4，5-三甲氧基苯甲醛與(4-甲氧基-3-硝基芐基)三苯鏻鹽存在的條件下進(jìn)行維悌希縮合反應(yīng)，然后將硝基在鐵存在的條件下還原。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其特征是使用過量的鐵。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的方法，其特征是所述過量指對于每1mol硝基衍生物原料使用大于2當(dāng)量的鐵。
4.制備下列通式(I)的考布他汀的方法 其中A代表一個氨基，該方法的特征在于，按照第二個方法，使(3，4，5-三甲氧基芐基)三苯鏻鹽與3-氨基-4-甲氧基苯甲醛縮合或者使(3-氫基-4-甲氧基芐基)三苯鏻鹽與3，4，5-三甲氧基苯甲醛縮合。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的方法，其特征在于，使(3，4，5-三甲氧基芐基)三苯鏻鹽與3-氨基-4-甲氧基苯甲醛縮合。
6.根據(jù)權(quán)利要求4或權(quán)利要求5的方法，其特征在于所述反應(yīng)優(yōu)選在堿存在的條件下進(jìn)行，所述堿選自叔-丁醇鉀、叔-戊醇鈉、氫化鈉、丁基鋰、LDA(二異丙基氨化鋰)、甲醇鈉、碳酸鉀或六甲基二硅氮烷的堿性衍生物。
7.根據(jù)權(quán)利要求4或權(quán)利要求5的方法，其特征在于采用甲醇鈉。
8.根據(jù)權(quán)利要求4或權(quán)利要求5的方法，其特征在于所述反應(yīng)溶劑對該反應(yīng)呈惰性，所述溶劑選自醚(THF)、極性非質(zhì)子溶劑(乙腈、NMP、DMF、DMSO等)、醇、芳族溶劑或水。
9.根據(jù)權(quán)利要求7的方法，其特征在于所述反應(yīng)溫度優(yōu)選為0-10℃。
10.制備絲氨酸鹽形式的式(I)化合物的方法，所述方法包括使式(IIa)衍生物 與式(IIb)的保護(hù)的絲氨酸環(huán)狀衍生物偶合 其中PG代表一個胺官能團(tuán)的保護(hù)基團(tuán)，從而得到新的下列通式的中間體 隨后脫保護(hù)。
11.氨基考布他汀和保護(hù)的絲氨酸狀環(huán)衍生物偶合的中間體，其特征在于具有下式 其中PG為保護(hù)基團(tuán)。
12.根據(jù)權(quán)利要求11的中間體，其特征在于PG代表選自下列的保護(hù)基團(tuán)叔-丁氧基羰基、芐氧基羰基(CBZ)或9-芴基甲氧基羰基(FMOC)。
全文摘要
本發(fā)明涉及通過使硝基甲氧基苯甲醛與三甲氧基芐基鏻或使硝基甲氧基芐基鏻與三甲氧基苯甲醛發(fā)生維悌?？s合反應(yīng)或者使它們的衍生物發(fā)生維悌希反應(yīng)從而將其中的硝基官能團(tuán)還原為氨基官能團(tuán)來制備考布他汀的新方法。
文檔編號C07C217/84GK1646476SQ03807566
公開日2005年7月27日 申請日期2003年4月9日 優(yōu)先權(quán)日2002年4月11日
發(fā)明者S·穆蒂, M·拉維涅, I·馬萊約諾克, J－P·卡齊米爾 申請人:安萬特醫(yī)藥股份有限公司