專利名稱：[6 , 7－二氫－5 H－咪唑并[1 , 2－α]咪唑－3－磺酰氨基]－丙酰胺的衍生物及其作 ...的制作方法
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本發(fā)明一般是關于一類[6，7-二氫-5H-咪唑并[1，2-α]咪唑-3-磺酰氨基]-丙酰胺的衍生物，這些化合物的合成，其在炎癥疾病治療中的用途及含這類化合物的藥物組合物。
現(xiàn)有技術跨越過去十年的研究有助于闡明體內(nèi)細胞-細胞間相互作用的分子現(xiàn)象，特別是涉及免疫系統(tǒng)中細胞的移動及活化中的現(xiàn)象。見Springer，T.Nature，1990，346，425-434。細胞表面蛋白質，特別是細胞黏著分子(“CAMs”)及“白整聯(lián)蛋白”，包括LFA-1，MAC-1及gp150.95(WHO命名分別為CD18/CD11a，CD18/CD11b及CD18/CD11c)分別是以干擾白細胞外滲至受傷部位及白細胞移至不同目標為目的的醫(yī)藥研究及發(fā)展的主題。例如，現(xiàn)已認為，作為炎癥應答中必不可少的成分的白細胞外滲前，在白細胞發(fā)生基本表達的整聯(lián)蛋白的活化，及其后在整聯(lián)蛋白(如LFA-1)和一個或數(shù)種稱為ICAM-1，ICAM-2，ICAM-3或ICAM-4的不同細胞間黏著分子(ICAMs)之間的緊密配位體/受體相互作用，這些CAM都表達在血管內(nèi)皮細胞表面及其他白細胞上。CAMs及白整聯(lián)蛋白的相互作用是免疫系統(tǒng)正常功能的重要步驟。免疫過程，如抗原呈遞(antigen presentation)，T-細胞引起的細胞毒性及白細胞外滲都需要由ICAMs與白整聯(lián)蛋白相互作用所引起的細胞黏著。見Kishimoto，T.K.；Rothlein；R.R.Adv.Pharmacol.1994，25，117-138及Diamond，M.；Springer，T.Current Biology，1994，506-532。
缺乏白整聯(lián)蛋白的適當表達的個體群已認定為一種名為“白細胞粘著缺陷”的癥狀(Anderson D.C.等人所著的Fed.Proc.，1985，44，2671-2677及Anderson D.C.等人所著的J.Infect.Dis.，1986，152，668-689)。這些個體由于其細胞不能粘著于細胞基質，故不能發(fā)動一般的炎癥及/及免疫反應。這些數(shù)據(jù)顯示當因缺乏CD18族的官能黏合分子而使淋巴細胞不能以正常方式粘著時，則免疫作用將會緩和。根據(jù)缺乏CD18的LAD患者無法發(fā)動炎癥反應的事實的特性，認為CD18、CD11/ICAM相互作用的拮抗作用也將抑制炎癥反應。
現(xiàn)已表明，CAMs及白整聯(lián)蛋白間的相互作用的拮抗作用可通過直接抵抗任一成分的制劑而實施。特別是，通過直接對抗這些分子中之一或二者的抗體而阻斷CAMs，如ICAM-1，或白整聯(lián)蛋白，如LFA-1，即有效地抑制炎癥反應。通過對CAMs或白整聯(lián)蛋白的抗體而抑制的炎癥的體外模型及免疫應答包括抗原或有絲分裂原誘發(fā)的淋巴細胞增生，淋巴細胞的同型群聚(homotypic aggregation)，T-細胞引起的細胞溶解及特異抗原誘發(fā)的耐性。有關這些活體外研究是受到以直接對抗ICAM-1或LFA-1所進行的體內(nèi)研究的支持。例如，在鼠中直接對抗LFA-1的抗體可預防甲狀腺移植物的排斥及延長心臟同種異體移植的存活期(Gorski，A.；Immunology Today，1994，15，251-255)。更有意義的是，直接對抗ICAM-1的抗體在人類疾病如腎同種異體移植排斥及類風濕關節(jié)炎顯示體內(nèi)效果(Rothlein，R.R.；Scharschmide，L.，jn粘合分子(Adhesion Molecules)；Wegner，C.D.，Ed.；1994，1-38，Cosimi，C.B.；等人.，J.Immunol.1990，144，4604-4612及Kavanaugh，A.；等人.，ArthritisRheum.1994，37，992-1004)，以及直接對抗LFA-1的抗體在骨髓移植及腎同種異體移植排斥的早期預防顯示免疫抑制效果(Fischer，A.；等人.，Lancet.，1989，2，1058-1060及Le Mauff，B.；等人.，Transplantation，1991，52，291-295)。
現(xiàn)也表明，ICAM-1的重組體溶解形式有抑制ICAM-1與LFA-1相互作用的性質?？扇苄訧CAM-1對細胞CD18，CD11/ICAM-1相互作用有直接拮抗劑的作用，并于人免疫應答模型，如人混合的淋巴細胞應答，細胞毒性T細胞應答及糖尿病病人對胰島細胞的應答的T細胞增生表示抑制活性(Becker，J.C；等人.，J.Immunol.1993，151，7224and Roep，B.O.；等人，Lancet，1994，343，1590)。
因此，現(xiàn)有技術顯示，對抗CAMs結合到白整聯(lián)蛋白的大蛋白質分子在緩和炎癥及免疫應答中常常涉及多種自體免疫或炎癥疾病的發(fā)病有治療效果。但蛋白質明顯缺乏治療劑，包括不能經(jīng)口投藥及有效的免疫活性，這就限制了這些分子對慢性給予使用。而且，蛋白質基的治療劑一般生產(chǎn)成本都很高。
因之，具有像大蛋白質分子直接及選擇性地對抗CAMs結合到白整聯(lián)蛋白上的類似能力的小分子將制成優(yōu)選的治療劑。
文獻中已述及影響CAMs及白整聯(lián)蛋白相互作用的多種小分子。例如，美國專利6,355,664及相應的WO 98/39303號公開了一類有乙內(nèi)酰脲核的小分子，其為LFA-1及ICAM-1相互作用的抑制劑。對本發(fā)明有較重要性的WO 01/07440A1，其揭示有6，7-二氫-5H-咪唑并[1，2-α]咪唑核的化合物。雖則WO 01/07440A1所述化合物較美國專利6,355,664及對應的WO 9839303所述的乙內(nèi)酰脲對CAMs及白整聯(lián)蛋白相互作用更有抑制作用，但因其代謝速度太快而并非理想的治療劑。
本發(fā)明所要解決的問題是選出較小的分子，其不僅對CAMs及白整聯(lián)蛋白相互作用有良好的抑制效果，且其代謝速度并不太快。
發(fā)明簡述本發(fā)明是次一類或選擇的6，7-二氫-5H-咪唑并[1，2-α]咪唑，其在WO01/07440A1中只作過一般敘述而未作特別敘述。令人十分驚奇的是，本發(fā)明所包括的化合物不僅展現(xiàn)對CAMs及白整聯(lián)蛋白相互作用有良好抑制效果，而且較WO 01/07440A1所述化合物的代謝更慢。本發(fā)明化合物解決了過快的代謝的問題。
發(fā)明詳述本發(fā)明包括式I化合物 其中R1是1至3個碳原子的直鏈或支鏈的烷基，其視需要是以獨立地選自下述基團的部分進行單-或二取代的(i)氧及(ii)嗎啉基；R2及R3各是獨立地選自下述基團
(A)氫，及(B)1至4個碳原子的直鏈或支鏈的烷基，其視需要可以獨立地被選自下述基團的部分進行單-或二取代的(i)CONH2及(ii)OH，或R2及R3與其間的氮原子一起形成哌嗪環(huán)；及R4是(A)氰基，(B)嘧啶，其可以NH2進行單-或二取代的，或(C)三氟甲氧基。
本發(fā)明優(yōu)選化合物是這樣的式I化合物，其中R1是甲基；R2及R3各是獨立地選自下述基團(A)氫，及(B)1至4個碳原子的直鏈或支鏈的烷基，其視需要可以獨立地被選自下述基團進行單-二取代的(i)CONH2及(ii)OH；及R4是(A)氰基，或(B)三氟甲氧基。
更佳的式I化合物是，其中R1是甲基；R2及R3各是獨立地選自下述基團(A)氫，及(B)1至4個碳原子的直鏈或支鏈的烷基，其視需要以獨立地被選自下述基團進行單-或二取代(i)CONH2及(ii)OH；及R4是三氟甲氧基。
應了解到，式I化合物具有至少二個手性中心。在最基本的優(yōu)選的通稱方面，本發(fā)明包括下述具有絕對立體化學的式I化合物。
具體優(yōu)選的式I化合物是選自由下述化合物(S)-2-[(R)-5-(4-氰基-芐基)-7-(3，5-二氯-苯基)-5-甲基-6-氧代-6，7-二氫-5H-咪唑并[1，2-α]咪唑-3-磺酰基氨基]-丙酰胺；(S)-2-[(R)-7-(3，5-二氯-苯基)-5-甲基-6-氧代-5-(4-三氟甲氧基-芐基)-6，7-二氫-5H-咪唑并[1，2-α]咪唑-3-磺酰基氨基]-N-(2-羥基-2-甲基-丙基)-丙酰胺；(S)-2-[(R)-7-(3，5-二氯-苯基)-5-甲基-6-氧代-5-(4-三氟甲氧基-芐基)-6，7-二氫-5H-咪唑并[1，2-α]咪唑-3-磺?；被鵠-丙酰胺；及(S)-N-氨甲?；谆?2-[(R)-5-(4-氰基-芐基)-7-(3，5-二氯-苯基)-5-甲基-6-氧代-6，7-二氫-5H-咪唑并[1，2-α]咪唑-3-磺?；被鵠-丙酰胺。
本發(fā)明也包括式I化合物的醫(yī)藥上可接受的鹽。
本發(fā)明也包括含有式I化合物及至少一種藥物上可接受的載體，稀釋劑或賦形劑的藥物組合物。
本發(fā)明也包括用作藥物的式I化合物，及式I化合物在制備用于治療患者的炎癥或炎性狀態(tài)的藥物組合物中的用途?？芍委煹难仔誀顟B(tài)的具體實例如本文中所描述的。
一般合成方法本發(fā)明化合物可用下述通法制備。一般，如有需要，反應進程可用薄層色層分析(TLC)監(jiān)測。如有需要，中間體及產(chǎn)物可通過在硅膠上進行色層分析及/或重結晶純化，并以一或多種下述技術定性NMR，質譜及熔點。起始物質及試劑可由商業(yè)上購得或由本領域技術人員使用化學文獻中所述方法制備。
式I化合物可用中間體II制備。中間體II的合成見Wu等人的美國非臨時申請系列09/604,312及Frutos等人美國6,441,183專利，二者都列于本文供參考。
中間體II可以方案I所述工序制備。
方案I 如上所示，將中間體III以適宜的堿如鋰雙(三甲基甲硅烷基)酰胺在約-20℃至-30℃進行去質子化，然后再用經(jīng)取代的芐基鹵化物，優(yōu)選是芐基溴(IV)進行烷基化以生成V。水解V的三氟乙酰胺基，例如可用40％芐基三甲基氫氧化銨在二噁烷/50％NaOH中的水溶液處理，再用酸如HCl處理，而制得VI。VI再用硫代羰基二咪唑在有堿如4-(N，N-二甲基氨基)吡啶存在下進行處理，得到VII。VII以氨基乙醛二甲縮醛及叔-丁基過氧化氫溶液處理，接著再將中間體縮醛以酸如對-甲苯磺酸處理，得到VIII。VIII再以碘化劑如N-碘丁二酰胺進行碘化，制得II。
中間體III的制備方法，由N-Boc-D-丙氨酸及3，5-二氯苯胺所生成的酰胺以三氟乙酸處理，以除去Boc-基，再用新戊醛處理，并將所得咪唑酮以三氟乙酸酐?；?，這描述于上述美國專利6,414,161及化學文獻中(N.Yee，OrgLett.，2000，2，2781)。
用中間體II的合成式I化合物描述于方案II。
方案II 如上所述，以Grignard試劑，如環(huán)戊基鎂的溴化物或氯化物，處理II，再將所得鎂鹽用SO2處理，再用N-氯琥珀酰亞胺處理，制得磺酰氯IX，將IX以所需胺(X)在有適宜的堿如三乙胺的存在下進行處理，即得所需式(I)產(chǎn)物。中間體X可由市場購得或用由市場購得的起始物料以現(xiàn)有技術中已知方法制備。初制式I產(chǎn)物可進一步用現(xiàn)有技術中已知方法修飾，以生成本發(fā)明的其他化合物。合成實例段內(nèi)將述及數(shù)個實施例。
式I化合物上所需的R4可通過選用適宜的經(jīng)取代的中間體IV而制得，如方案I內(nèi)所述?；蛘?，具有R4為Br的中間體VIII(VIIIa)也可如方案III所述轉化成R4為CN或經(jīng)取代的5-嘧啶基的中間體。
方案III 如上所述，芳基溴VIIIa以氰化物鹽，優(yōu)選是CuCN處理并于適宜的溶劑如DMF中加熱，制得氰基中間體VIIIb。將VIIIa以嘧啶硼酸酯如5-(4，4，5，5-四甲基-[1，3，2]二氧雜硼戊烷-2-基)嘧啶在有鈀催化劑如[1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]二氯鈀(II)·CH2Cl2(PdCl2(dppf)·(CH2Cl2)及堿如碳酸鉀存在下，于適宜的溶劑(Suzuki反應)，例如二甲氧基乙烷內(nèi)處理，得到嘧啶中間體VIIIc。然后將中間體VIIIb及VIIIc以方案I及II中所述程序轉化成所需的式I化合物。將R4＝Br轉化成R4＝視需要經(jīng)取代的嘧啶的Suzuki反應也可以式I化合物進行。Suzuki反應也可以反向進行。溴化物VIIIa(或R4＝Br的式I化合物)也可轉化成硼酸酯，例如以雙(頻那酸根(pinacolafo))二硼在有鈀催化劑如PdCl2(dppf)存在下進行處理，然后再與所需嘧啶溴反應。
用下述合成例進一步說明本發(fā)明。
合成例實施例1(R)-5-(4-溴-芐基)-7-(3，5-二氯-苯基)-5-甲基-6-氧代-6，7-二氫-5H-咪唑并[1，2-α]咪唑-3-磺酰氯
將(R)-3-(4-溴-芐基)-1-(3，5-二氯-苯基)-3-甲基-1H-咪唑并[1，2-α]咪唑-2-酮在THF內(nèi)的溶液(0.12M)以N-碘代琥珀酰亞胺(1.05當量)及對-甲苯磺酸吡啶(0.1當量)處理。此混合物在室溫攪拌17小時，再以EtOAc稀釋，用10％Na2S2O3溶液及水洗滌。合并的水層用EtOAc萃取。合并的有機相用鹽水洗，于Na2SO4上干燥，過濾且濃縮。此粗制油體以硅膠色層純化，得到所需碘化物。
將上述碘化物于THF內(nèi)的溶液(0.12M)于-40℃冷卻，在10分鐘的過程中滴加氯化c-戊基鎂(1.05當量)。于-40℃攪拌1小時后，將輸入針筒置于反應混合物表面加入SO2(氣)1.5分鐘。將淺黃色混合物加熱至-20℃1小時，然后于室溫攪拌1小時。經(jīng)混合物鼓泡N2(氣)20分鐘，然后濃縮，并在高真空下抽吸12小時。將所得黃色泡沫體溶于THF內(nèi)(0.1M)，并于-20℃冷卻，同時用5分鐘時間滴加N-氯代琥珀酰亞胺(1.2當量)在THF內(nèi)的溶液(0.3M)。于-20℃攪拌1小時后，將混合物倒于冰上，用二份EtOAc萃取。合并的有機層用冰冷的鹽水洗，于Na2SO4上干燥，過濾且濃縮。以硅膠色層純化，制得(R)-5-(4-溴-芐基)-7-(3，5-二氯-苯基)-5-甲基-6-氧代-6，7-二氫-5H-咪唑并[1，2-α]咪唑-3-磺酰氯。
實施例2(S)-2-[(R)-5-[4-(4-氨基-嘧啶-5-基)-芐基]-7-(3，5-二氯-苯基)-5-甲基-6-氧代-6，7-二氫-5H-咪唑并[1，2-α]咪唑-3-磺?；被鵠-N-(2-羥基-乙基)-丙酰胺(660.4，M+1)
在(S)-2-氨基-N-(2-羥基-乙基)-丙酰胺(0.53克，3.2毫摩爾，3當量)于10毫升DMF內(nèi)的懸浮液中加入DMAP(4當量)，所得混合物在室溫攪拌1小時。于此溶液中于室溫下加入(R)-5-(4-溴-芐基)-7-(3，5-二氯-苯基)-5-甲基-6-氧代-6，7-二氫-5H-咪唑并[1，2-α]咪唑-3-磺酰氯(0.580毫克，106毫摩爾)在2毫升DMF內(nèi)的溶液。于室溫攪拌15分鐘后，將混合物溶于EtOAc內(nèi)，用水，稀HCl，飽和NaHCO3及鹽水洗，于Na2SO4上干燥，過濾并濃縮。粗制產(chǎn)物以硅膠色層純化，得到0.305毫克所需產(chǎn)物。
將(S)-2-[(R)-5-(4-溴-芐基)-7-(3，5-二氯-苯基)-5-甲基-6-氧代-6，7-二氫-5H-咪唑并[1，2-α]咪唑-3-磺酰基氨基]-N-(2-羥基-乙基)-丙酰胺(0.310克，0.473毫摩爾)，雙(頻那醇)二硼(0.240克，0.946毫摩爾)及KOAc(0.140克，1.419毫摩爾)于29毫升二噁烷內(nèi)的混合物以N2沖洗15分鐘。加PdCl2(dppf)(0.039克，0.047毫摩爾)，此反應混合物于80℃加熱36小時。冷卻至室溫后，將混合物濃縮，殘余物用150毫升EtOAc稀釋，用水及鹽水洗，于Na2SO4上干燥且濃縮。殘余物以硅膠色層純化，得0.204克(62％)硼酸鹽。
將上述硼酸鹽(0.204克，0.295毫摩爾)，5-溴-2-氨基-嘧啶(0.078克，0.443毫摩爾)及K2CO3(0.122克，0.885毫摩爾)于8毫升二甲氧基乙烷及1.2毫升水內(nèi)的混合物用N2沖洗20分鐘。加PdCl2(dppf)(0.025克，0.030毫摩爾)，此反應混合物于80℃加熱2小時。冷卻至室溫后，將混合物用EtOAc稀釋，用水及鹽水洗且濃縮。殘余物以硅膠色層及制備用TLC純化，得到0.062克(32％)標題化合物(660.4，M+1)下述化合物以類似于實施例2所述方法制備(S)-2-[(R)-5-[4-(4-氨基-嘧啶-5-基)-芐基]-7-(3，5-二氯-苯基)-5-甲基-6-氧代-6，7-二氫-5H-咪唑并[1，2-α]咪唑-3-磺?；被鵠-N-(2-羥基-2-甲基-丙基)-丙酰胺(687.1，M+1) 實施例3(S)-2-[(R)-5-(4-氰基-芐基)-7-(3，5-二氯-苯基)-5-甲基-6-氧代-6，7-二氫-5H-咪唑并[1，2-α]咪唑-3-磺?；被鵠-丙酰胺的合成 于(R)-3-(4-溴-芐基)-1-(3，5-二氯-苯基)-3-甲基-1H-咪唑并[1，2-α]咪唑-2-酮(3.0克，6.6毫摩爾)在DMF(60毫升)內(nèi)的溶液中加Zn(CN2)(0.47克，4.0毫摩爾)。所得混合物以強氮氣流去氣2小時。加Pd2dba3及dppf，并將反應混合物在120℃加熱2小時。蒸發(fā)溶劑，將殘余物溶于EtOAc內(nèi)，然后用水及鹽水洗，干燥且過濾，殘余物于Florisil上純化，得2.42克所需產(chǎn)物。再將此產(chǎn)物以類似于實施例1所述方式處理，得(R)-5-(4-氰基-芐基)-7-(3，5-二氯-苯基)-5-甲基-6-氧代-6，7-二氫-5H-咪唑并[1，2-α]咪唑-3-磺酰氯。
將L-丙酰胺鹽酸鹽(0.151克，1.209毫摩爾)溶于無水DMF內(nèi)，在該溶液內(nèi)加入DMAP(0.197克，1.612毫摩爾)。此反應混合物于室溫攪拌1小時。然后加入在無水DMF中的(R)-5-(4-氰基-芐基)-7-(3，5-二氯-苯基)-5-甲基-6-氧代-6，7-二氫-5H-咪唑并[1，2-α]咪唑-3-磺酰氯(0.24克，0.484毫摩爾)至反應混合物內(nèi)，再將反應混合物攪拌10分鐘。此反應溶液用EtOAc稀釋，用水洗，用1N HCl洗，再用水洗。有機相于Na2SO4上干燥且減壓濃縮。粗制產(chǎn)物以硅膠柱色層純化，得0.211克標題化合物，為白色鱗狀固體(M+1，547.2)。
實施例4(S)-N-氨甲?；谆?2-[(R)-5-(4-氰基-芐基)-7-(3，5-二氯-苯基)-5-甲基-6-氧代-6，7-二氫-5H-咪唑并[1，2-α]咪唑-3-磺?；被鵠-丙酰胺的合成 將L-丙氨酸叔-丁基酯鹽酸鹽(0.88克，4.84毫摩爾)溶于無水DMF(10毫升)內(nèi)，并在此溶液內(nèi)加入DMAP(0.79克，6.46毫摩爾)。此反應混合物于室溫攪拌1小時，然后加入在無水DMF內(nèi)的(R)-5-(4-氰基-芐基)-7-(3，5-二氯-苯基)-5-甲基-6-氧代-6，7-二氫-5H-咪唑并[1，2-α]咪唑-3-磺酰氯(0.80克，1.61毫摩爾)至反應混合物內(nèi)，再將反應混合物在室溫下攪拌10分鐘。此反應混合物用水(×3)，1N HCl及飽和NaHCO3洗滌。有機相于Na2SO4上干燥且濃縮。粗制產(chǎn)物以硅膠柱色層純化，用CH2Cl2-MeOH(98∶2)作洗脫劑，得0.94克磺酰胺叔-丁基酯。所得產(chǎn)物再以三氟乙酸(5毫升)在CH2Cl2(10毫升)內(nèi)在室溫處理3小時。反應溶液用CH2Cl2稀釋且用水洗。有機相于Na2SO4上干燥，接著濃縮，得0.67克(S)-2-[(R)-5-(4-氰基-芐基)-7-(3，5-二氯-苯基)-5-甲基-6-氧代-6，7-二氫-5H-咪唑并[1，2-α]咪唑-3-磺?；被鵠-丙酸，為白色泡沫體。
將以上羧酸(0.05克，0.091毫摩爾)溶于無水DMF(2毫升)內(nèi)，于此反應溶液內(nèi)加入苯并三唑-1-基氧叁(吡咯烷基)鏻六氟磷酸鹽(PyBOP)(0.071克，0.137毫摩爾)。此反應混合物于室溫下攪拌10分鐘并加鹽酸甘氨酰胺(0.015克，0.137毫摩爾)，再加N，N-二異丙基乙基胺(0.039毫升，0.227毫摩爾)。這反應混合物于室溫下再攪拌15分鐘。然后用EtOAc(10毫升)將混合物稀釋，用水(×2)，1N HCl，飽和NaHCO3及水(×1)洗滌。有機相于Na2SO4上干燥且濃縮。粗制產(chǎn)物以硅膠制備用薄層色層純化，用CH2Cl2-MeOH(95∶5)作洗脫劑，得0.043克標題化合物，為白色泡沫體(M+1，604.2)。
以類似上例所述方法制得如下化合物(S)-2-[(R)-5-(4-氰基-芐基)-7-(3，5-二氯-苯基)-5-甲基-6-氧代-6，7-二氫-5H-咪唑并[1，2-α]咪唑-3-磺酰基氨基]-N-(2-羥基-2-甲基-丙基)-丙酰胺(M+1，619) 實施例5(S)-N-((R)-1-氨甲?；?乙基)-2-[(R)-5-(4-氰基-芐基)-7-(3，5-二氯-苯基)-5-甲基-6-氧代-6，7-二氫-5H-咪唑并[1，2-α]咪唑-3-磺?；被鵠-丙酰胺的合成
將(S)-2-[(R)-5-(4-氰基-芐基)-7-(3，5-二氯-苯基)-5-甲基-6-氧代-6，7-二氫-5H-咪唑并[1，2-α]咪唑-3-磺?；被鵠-丙酸(見實施例14)(0.05克，0.091毫摩爾)溶于無水DMF(2毫升)內(nèi)，并于此混合物內(nèi)加入TBTU(0.044克，0.137毫摩爾)。這反應混合物于室溫攪拌10分鐘并加鹽酸D-丙氨酰胺(0.017克，0.137毫摩爾)，繼之加入N，N-二異丙基乙基胺(0.039毫升，0.227毫摩爾)。將反應混合物于室溫下再攪拌15分鐘?；旌衔镉肊tOAc(10毫升)稀釋，用水，1NHCl，飽和NaHCO3及水洗滌。有機相于Na2SO4干燥并濃縮。粗制產(chǎn)物以硅膠制備用薄層色層純化，得0.035克標題化合物，為白色泡沫體(M+1，618.2)。
實施例6(S)-24(R)-5-(4-氰基-芐基)-7-(3，5-二氯-苯基)-5-甲基-6-氧代-6，7-二氫-5H-咪唑并[1，2-α]咪唑-3-磺?；被鵠-N-(2-羥基-乙基)-丙酰胺 將L-Boc-丙氨酸(0.40克，2.11毫摩爾)，乙醇胺(0.15毫升，2.54毫摩爾)及HOBt(0.29克，2.11毫摩爾)于無水CH3CN(9毫升)內(nèi)的混合物冷卻至0℃，并于此反應混合物內(nèi)加入1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(EDC)(0.49克，2.54毫摩爾)。將反應混合物加溫至室溫，并攪拌19小時。此反應混合物用EtOAc稀釋并用5％檸檬酸洗。水層用EtOAc萃取。合并的有機相用飽和NaHCO3及鹽水洗。有機相于Na2SO4上干燥且濃縮，制得0.38克偶合產(chǎn)物，為無色油體。
將上面制得的醇(0.34克，1.45毫摩爾)溶于CH2Cl2(3毫升)內(nèi)，于此溶液內(nèi)加入二噁烷內(nèi)的4N HCl(3毫升)。此反應溶液于室溫下攪拌2小時，然后濃縮，制得(S)-2-氨基-N-(2-羥基-乙基)-丙酰胺鹽酸鹽。
于上面制得的胺鹽(0.043克，0.254毫摩爾)于無水DMF內(nèi)的溶液中加DMAP(0.037克，0.303毫摩爾)。此反應混合物于室溫下攪拌1小時。然后于反應混合物內(nèi)加入(R)-5-(4-氰基-芐基)-7-(3，5-二氯-苯基)-5-甲基-6-氧代-6，7-二氫-5H-咪唑并[1，2-α]咪唑-3-磺酰氯(0.036克，0.073毫摩爾)再攪拌2小時。反應混合物用EtOAc稀釋，用1N HCl及飽和NaHCO3洗。有機相于Na2SO4上干燥且濃縮。殘余物以硅膠制備用薄層色層純化，得0.035克標題化合物，為自色泡沫體(M+1，591.1)。
實施例7(S)-2-[(R)-5-(4-氰基-芐基)-7-(3，5-二氯-苯基)-5-甲基-6-氧代-6，7-二氫-5H-咪唑并[1，2-α]咪唑-3-磺酰基氨基]-5-嗎啉-4-基-5-氧代-戊酸酰胺 于(S)-2-叔-丁氧基羰基氨基-戊二酸1-芐基酯(4.5克，13.4毫摩爾)，嗎啉(1.29毫升，14.8毫摩爾)，HOBt(1.89克，14.0毫摩爾)在CH2Cl2(18毫升)內(nèi)的混合物中在0℃緩慢加入DCC(2.89克，14.0毫摩爾)在CH2Cl2(18毫升)中的溶液。將所得混合物加溫至室溫，并攪拌過夜。過濾生成的沉淀，濾液用CH2Cl2稀釋。此溶液用飽和NaHCO3，1N HCl及最后用鹽水洗滌。有機層于Na2SO4上干燥接著過濾。蒸發(fā)溶劑，得所需酰胺(5.42克)，為白色固體。
將上面制得的酰胺(6.17克，152毫摩爾)及10％Pd/C(0.52克)于EtOAc(50毫升)內(nèi)的混合物在大氣壓下氫化24小時。過濾混合物且濃縮，得(S)-2-叔-丁氧基羰基氨基-5-嗎啉-4-基-5-氧代-戊酸(3.12克)，為泡沫體，直接使用不必進一步純化。
將氨氣通入上面制得的羧酸(3.12克，9.86毫摩爾)及O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基六氟磷酸鹽(HATU)(5.25克，13.8毫摩爾)在DMF(30毫升)內(nèi)的溶液中，并攪拌20分鐘。于此所得黃色懸浮液中以注射器加入N，N-二異丙基乙基胺(5.15毫升，29.5毫摩爾)。將混合物在氮氣下攪拌過夜。將反應物過濾且真空濃縮。所得殘余物溶于CH2Cl2內(nèi)，用飽和NaCHO3，1N HCl及最后用鹽水洗。有機層于Na2SO4上干燥，過濾且濃縮。所得殘余物用EtOAc重結晶，得酰胺(1.16克)，為白色固體。
用在EtOAc中的HCl除去Boc基團，通過真空過濾收取生成的(S)-2-氨基-5-嗎啉-4-基-5-氧代-戊酸酰胺鹽酸鹽，直接使用而不必進一步純化。在攪拌的(R)-5-(4-氰基-芐基)-7-(3，5-二氯-苯基)-5-甲基-6-氧代-6，7-二氫-5H-咪唑并[1，2-α]咪唑-3-磺酰氯(76毫克，0.13毫摩爾)在DMF(4毫升)內(nèi)的溶液中加入N，N-二異丙基乙基胺(60微升，0.39毫摩爾)及胺鹽酸鹽(100毫克，0.4毫摩爾)。攪拌過夜后真空下除去DMF，所得殘余物于硅膠上進行色層分離。這產(chǎn)物再以半制備用HPLC純化，得32毫克標題化合物，為白色固體(M+1，67.04)。
實施例8(S)-2-[(R)-7-(3，5-二氯-苯基)-5-甲基-6-氧代-5-(4-三氟甲氧基-芐基)-6，7-二氫-5H-咪唑并[1，2-α]咪唑-3-磺?；被鵠-丙酰胺
將鋰雙(三甲基甲硅烷基)酰胺(LiHMDS)(38.0毫升，1M THF內(nèi))用25分鐘在-20℃緩慢滴加到(2S，5R)-2-叔-丁基-3-(3，5-二氯-苯基)-5-甲基-1-(2，2，2-三氟-乙酰基)-咪唑烷-4-酮(10.0克，25.17毫摩爾)于60毫升THF內(nèi)的溶液中。于-20℃下攪拌20分鐘后，以20分鐘滴加4-三氟甲氧基芐基溴(6.04毫升，37.76毫摩爾)于30毫升THF內(nèi)的溶液。此混合物于-20℃下攪拌45分鐘，用1小時加溫至-5℃，再倒在50毫升冰冷的飽和NH4Cl溶液上。所得混合物用EtOAc萃取。合并的有機相用鹽水洗，于Na2SO4上干燥，過濾且濃縮。粗制產(chǎn)物以己烷研磨，得12.5克(87％)(2R，5R)-2-叔-丁基-3-(3，5-二氯-苯基)-5-甲基-1-(2，2，2-三氟-乙?；?-5-(4-三氟甲氧基-芐基)-咪唑烷-4-酮，為灰白色固體。
于上面制得的咪唑烷酮(6.0克，10.5毫摩爾)在40毫升二噁烷內(nèi)的溶液中于室溫下加入40％芐基三甲基氫氧化銨(6.59克，15.75毫摩爾)水溶液。在混合物加熱至40℃時，以5分鐘緩慢滴加入50％的氫氧化鈉(1.68克，21.0毫摩爾)水溶液。將混合物于40℃下攪拌18小時，再用10分鐘緩慢滴加6.4克濃HCl在3.3毫升水內(nèi)的溶液。將混合物加溫至50℃再攪拌5小時，再冷至室溫并濃縮。于殘余物中加入50毫升甲苯，將此二相混合物強烈攪拌，同時緩慢滴加50％氫氧化鈉(3.0克)水溶液(水相pH≥10)。水層用甲苯萃取，合并的有機相用水及鹽水洗，于Na2SO4上干燥，過濾且濃縮，得4.24克(R)-2-氨基-N-(3，5-二氯-苯基)-2-甲基-3-(4-三氟甲氧基-苯基)-丙酰胺，為淺棕色油體。
在上面制得的丙酰胺(4.24克，10.41毫摩爾)在30毫升THF內(nèi)的溶液中加入硫代羰基二咪唑(2.81克，15.77毫摩爾)及4-二甲基氨基吡啶(DMAP)(0.127克，1.04毫摩爾)。將此混合物回流加熱17小時，冷卻至室溫并濃縮。將橙色油體殘余物溶于50毫升甲苯內(nèi)，以緩慢滴加的20毫升5％HCl水溶液進行處理。攪拌10分鐘后，分離水層并用甲苯萃取。合并的有機相用水及鹽水洗，于Na2SO4上干燥，過濾且濃縮，得4.48克(R)-3-(3，5-二氯-苯基)-5-甲基-2-硫代-5-(4-三氟甲氧基-芐基)-咪唑烷-4-酮，為橙色泡沫體。
于上面制得的硫代乙內(nèi)酰脲(4.47克，9.95毫摩爾)及氨基乙醛二甲基縮醛(6.50毫升，59.7毫摩爾)在20毫升MeOH內(nèi)的溶液中用25分鐘滴加7.69毫升(59.7毫摩爾，70％的水溶液)叔-丁基過氧化氫溶液。在加入過程中以及加入后1小時，用冰水浴維持混合物內(nèi)部溫度低于20℃。再將混合物于室溫下攪拌86小時，緩慢滴加25毫升飽和NaHSO3溶液，用冰水浴維持混合物內(nèi)部溫度低于20℃。將生成的混濁白色混合物濃縮。于殘余物內(nèi)加入EtOAc，再將混合物濃縮。將油狀殘余物分配在EtOAc及水之間，分離水相并用EtOAc萃取。合并的有機相用水及鹽水洗，于Na2SO4上干燥過濾且濃縮，得5.21克(R)-3-(3，5-二氯-苯基)-2-[(E)-2，2-二甲氧基-乙基亞氨基]-5-甲基-5-(4-三氟甲氧基-芐基)-咪唑烷-4-酮，為稠黃色油體。
將上面粗制的縮醛(5.20克，9.95毫摩爾)在30毫升丙酮內(nèi)的溶液以對-甲苯磺酸(1.89克，9.96毫摩爾)處理。將此混合物回流加熱2小時，然后冷卻至室溫并濃縮。將生成的暗橙色油體溶于40毫升EtOAc內(nèi)，并小心地用2.3克NaHCO3于23毫升水內(nèi)的溶液處理。待排氣停止后，分離水相并用二份EtOAc萃取。合并的有機層用飽和NaHCO3溶液，二份水及鹽水洗滌，于Na2SO4上干燥，過濾且濃縮。油體殘余物以硅膠色層純化，得1.58克(R)-1-(3，5-二氯-苯基)-3-甲基-3-(4-三氟甲氧基-芐基)-1H-咪唑并[1，2-α]咪唑-2-酮(456.2，M+1)。
將(R)-1-(3，5-二氯-苯基)-3-甲基-3-(4-三氟甲氧基-芐基)-1H-咪唑并[1，2-α]咪唑-2-酮(實施例1)(1.54克，3.38毫摩爾)在30毫升THF內(nèi)的溶液用N-碘代琥珀酰亞胺(0.846克，3.76毫摩爾)及吡啶對-甲苯磺酸鹽(0.086克，3.76毫摩爾)處理。這混合物于室溫下攪拌17小時，再用EtOAc稀釋并用10％的Na2S2O3溶液及水洗。合并的水層用10毫升EtOAc萃取。合并的有機相用25毫升鹽水洗，于Na2SO4上干燥，過濾且濃縮。將粗制橙色油體以硅膠色層純化，得1.27克(65％)(R)-1-(3，5-二氯-苯基)-5-碘-3-甲基-3-(4-三氟甲氧基-芐基)-1H-咪唑并[1，2-α]咪唑-2-酮，為灰白色油體(582.0，M+1)。
將上面制得的碘化物(1.24克，2.13毫摩爾)于16毫升THF內(nèi)的溶液于-40℃冷卻，同時用10分鐘滴加氯化環(huán)戊基鎂(1.17毫升，2M于二乙醚)。于-40℃攪拌1小時后，通過將輸入針剛好放在反應混合物表面上加入SO2(氣)1.5分鐘。將淺黃色混合物加溫至-20℃1小時，再于室溫攪拌1小時，將N2(氣)鼓泡通入混合物20分鐘，然后濃縮并于高真空抽吸12小時。將生成的黃色泡沫體溶于16毫升THF內(nèi)，冷卻至-20℃，同時用5分鐘滴加N-氯琥珀酰亞胺(0.341克，2.56毫摩爾)在8毫升THF內(nèi)的溶液。于-20℃下攪拌1小時后，將混合物倒在冰上，并用二份EtOAc萃取。合并的有機層用冰冷卻的鹽水洗滌，于Na2SO4上干燥，過濾且濃縮。用硅膠色層純化，得0.975克(83％)(R)-7-(3，5-二氯-苯基)-5-甲基-6-氧代-5-(4-三氟甲氧基-芐基)-6，7-二氫-5H-咪唑并[1，2-α]咪唑-3-磺酰氯的黏稠油體(554.2，M+1)。
將L-丙氨酰胺HCl鹽(0.097克，0.782毫摩爾)于6.5毫升DMF內(nèi)的溶液以三乙胺(0.163毫升，1.17毫摩爾)在室溫下處理。攪拌10分鐘后，快速滴加上面制備的磺酰氯(0.217克，0.391毫摩爾)在1毫升CH2Cl2內(nèi)的溶液，將此混濁混合物于室溫攪拌5小時。加EtOAc后，有機層用水洗，再用鹽水洗，于Na2SO4上干燥，過濾且濃縮。粗制產(chǎn)物用硅膠色層純化，得0.193克(81％)標題化合物，為白色固體(606.3，M+1)。
以類似于實施例8所述方法制得如下化合物(R)-2-[(R)-7-(3，5-二氯-苯基)-5-甲基-6-氧代-5-(4-三氟甲氧基-芐基)-6，7-二氫-5H-咪唑并[1，2-α]咪唑-3-磺?；被鵠-丙酰胺(6064，M+1)
實施例9(S)-2-[(R)-7-(3，5-二氯-苯基)-5-甲基-6-氧代-5-(4-三氟甲氧基-芐基)-6，7-二氫-5H-咪唑并[1，2-α]咪唑-3-磺酰基氨基]-N-(2-羥基-乙基)-丙酰胺的合成 于N-Boc-L-(N′-羥基乙基)丙胺酰胺(0.188克，0.809毫摩爾)在1毫升二噁烷內(nèi)的懸浮液中加入HCl(2.0毫升，4M于二噁烷)，將生成的混濁混合物于室溫攪拌2.5小時。將混合物濃縮，再加入CH2Cl2，此過程重復二次。最后在高真空抽吸12小時，得無色油體。將粗制胺HCl鹽溶于1.5毫升DMF內(nèi)，用三乙胺(0.157毫升，1.13毫摩爾)處理。在室溫下攪拌10分鐘后，經(jīng)插管快速滴加(R)-7-(3，5-二氯-苯基)-5-甲基-6-氧代-5-(4-三氟甲氧基-芐基)-6，7-二氫-5H-咪唑并[1，2-α]咪唑-3-磺酰氯(0.125克，0.225毫摩爾)于3毫升CH2Cl2內(nèi)的溶液。將這反應混合物于室溫下攪拌4小時。加入EtOAc后，有機層用三份5％NaCl溶液洗，再用鹽水洗，于Na2SO4上干燥，過濾且濃縮。粗制產(chǎn)物以制備用TLC純化，得0.118克(81％)標題化合物，為白色泡沫體(649.9，M+1)。
以類似于實施例9所述方法制得如下化合物(S)-2-[(R)-7-(3，5-二氯-苯基)-5-甲基-6-氧代-5-(4-三氟甲氧基-芐基)-6，7-二氫-5H-咪唑并[1，2-α]咪唑-3-磺酰基氨基]-N-(2-羥基-2-甲基-丙基)-丙酰胺(678.3，M+1)
生物學性質說明代表性式I化合物的生物學性質是通過下述實驗方案研究。測定抑制LFA-1結合于ICAM-1的測試方法測試目的這測試方案以試驗化合物研究CAM，ICAM-1與白整聯(lián)蛋白CD18/CD11a(LFA-1)間相互作用的直接拮抗作用。
測試方案說明將LFA-1使用由20克人JY沉淀或SKW3細胞得到的TS2/4抗體以過去說明的方案(Dustin，M.J.；et al.，J.Immunol.1992，148，2654-2660)進行免疫純化。通過在TS2/4LFA-1mAb瓊脂糖(Sepharose)的免疫親合色層分析而由SKW3溶胞產(chǎn)物純化LFA-1，并在pH11.5在有2mM MgCl2及1％辛基葡糖苷的存在下洗脫。在收集并中和由TS2/4柱所得各部分后，匯集樣品并以蛋白質G瓊脂糖(Protein G agarose)預清除。
如過去所述(Marlin，S.；et al.，Nature，1990，344，70-72及見Arruda，A.；et al.，Antimicrob.Agents Chemother.1992，36，1186-1192)構建，表達，純化并表征ICAM-1的溶解形式。簡言之，即使用標準寡核苷酸定向突變將位于胞外域的域5及跨膜結構域間的推定邊界的異亮氨酸454換成終止密碼子(stop codon)。這種構建產(chǎn)生一種與膜結合的ICAM-1的起始453氨基酸相同的分子。以倉鼠(hamster)二氫葉酸還原酶基因，新霉素抗性標記，以及上述sICAM-1構造的編碼區(qū)(coding region)，和啟動子，剪接信號(splice signals)及SV40早區(qū)(early region)的聚腺苷酸化信號(polyadenylation signal)一起創(chuàng)造表達載體。使用標準磷酸鈣方法將重組體質粒轉染至CHO DUX細胞。將細胞送入選擇的介質(G418)并使用氨甲蝶呤放大分泌sICAM-1的菌落。以習用的非親和色譜技術，包括離子交換及尺寸排阻色譜，由無血清的介質純化sICAM-1。
先在96孔的碟內(nèi)在加有2mM MgCl2及0.1mM PMSF(Diluting Buffer)的Dulbecco′s磷酸鹽緩沖的含鈣及鎂的生理鹽水中室溫下以40微克/毫升培養(yǎng)sICAM-130分鐘以監(jiān)測LFA-1結合于ICAM-1上。然后通過在37℃加入在稀釋緩沖液(Diluting Buffer)中的2％(重量/容積)牛血清白蛋白阻斷碟1小時。由各孔中移除阻斷溶液且稀釋試驗化合物，并加入，約25毫微克免疫親和純化的LFA-1。在有試驗化合物及ICAM-1的存在下將LFA-1于37℃培養(yǎng)1小時。用稀釋緩沖液洗各孔3次。通過加入直接抵抗對應于CD18胞質尾區(qū)(cytoplasmic tail)的肽(以稀釋緩沖液稀釋的1∶100)的多克隆抗體及1％BSA，并于37℃培養(yǎng)45分鐘以測定結合的LFA-1。用稀釋緩沖液洗各孔3次，并通過加入1∶4000稀釋的結合到對兔免疫球蛋白有抗性的山羊免疫球蛋白的辣根過氧化酶(horse radish peroxidase)而測定結合的多克隆抗體。這試劑可于37℃培養(yǎng)20分鐘，如上洗滌各孔，將用于辣根過氧化酶的基質加到各孔內(nèi)發(fā)展成一種與結合到sICAM-1的LFA-1的量成正比的定量比色信號。使用可溶性ICAM-1(60微克/毫升)作為用于抑制LFA-1/ICAM-1相互作用的正控制。對結合鑒定沒有加入LFA-1的用作所有樣品的本底對比。對所有試驗化合物都作劑量反應曲線。
于這測試中試驗所有上述實例所制成的化合物，發(fā)現(xiàn)每一化合物的Kd＜10μM。
以人肝微粒體酶測定代謝的檢測檢測目的這檢測方案是用于以人肝微粒體酶測定試驗化合物的體外代謝。分析所收集的數(shù)據(jù)以計算化合物的半衰期(t1/2，分鐘)。
測定方案說明此測定是在50mM磷酸鉀緩沖液，pH7.4及2.5mM NADPH內(nèi)進行。將試驗樣品溶于乙腈內(nèi)，使終濃度為1-10μM。將人肝微粒體在測定緩沖液內(nèi)稀釋至終測定濃度為1毫克蛋白質/毫升。將25微升的化合物溶液及50微升微粒體懸浮液加入825微升測定緩沖液內(nèi)。將這制劑于37℃水浴內(nèi)培養(yǎng)5分鐘。加入100微升NADPH使反應開始。于反應開始后第0，3，6，10，15，20，40及60分鐘從培養(yǎng)混合物內(nèi)取出80微升并加到160微升乙腈內(nèi)。將樣品搖動20秒鐘，再以3000轉/分鐘離心3分鐘。將200微升上清液移至0.25毫米玻璃纖維過濾器盤中，以3000轉/分鐘離心5分鐘。一般是將10微升注射容積以1.5毫升/分鐘速度加入到Zorbax SB C8HPLC柱，柱內(nèi)有甲酸水溶液或乙腈。由每一時間點下的面積計算母體化合物損失的百分比以測定半衰期。
在這測定中測試所有上述實例所制的化合物，發(fā)現(xiàn)其具有t1/2≥50分鐘。
治療使用說明本發(fā)明所提供的新穎式I的小分子抑制人淋巴細胞的ICAM-1/LFA-1依賴性同型聚集(homotypic aggregation)及人淋巴細胞黏聯(lián)到ICAM-1。這些化合物在調(diào)節(jié)免疫細胞活化/增生中具有治療用途，例如，用作涉及CAMs及白整聯(lián)蛋白的細胞間配位體/受體結合反應的競爭抑制劑。更具體地說，本發(fā)明化合物可用于治療某些炎癥情況，包括哺乳動物的非特異性免疫系統(tǒng)應答所導致的情況(例如成年呼吸抑制病癥，休克，氧中毒，敗血病引起的多器官損傷病癥，外傷引起的多器官損傷病癥，心肺分流術、心肌梗塞或使用溶血栓劑引起的組織再灌注損傷，急性腎小球性腎炎，脈管炎，反應性關節(jié)炎，具有急性炎癥原因的皮膚病，中風，熱損傷，血液透析，白細胞除去法，潰瘍性結腸炎，壞死性小腸結腸炎及粒細胞輸液引起的病癥)及哺乳動物的特異免疫系統(tǒng)反應所導致的情況(例如牛皮癬，器官/組織移植排斥，移植物對病主的反應及自體免疫疾病，包括雷諾病癥，自體免疫甲狀腺炎，皮炎，多發(fā)性硬化，類風濕關節(jié)炎，胰島素依賴性糖尿病，眼色素層炎，炎性腸病包括Crohn氏病及潰瘍性結腸炎，及全身性紅斑狼瘡)。本發(fā)明化合物也可用于治療氣喘或用作助劑以減少因細胞因子治療癌癥時的毒性。一般而言，這些化合物可用于治療現(xiàn)在用類固醇治療的疾病。
因此，本發(fā)明另一方面提供一種通過給予治療量或預防量的一種或多種式I化合物治療或預防上述癥狀的方法。
根據(jù)本發(fā)明提供的方法，式I的新穎化合物可單獨或與其他免疫抑制或抗炎劑組合使用作為預防或治療目的。在預防使用時，免疫抑制化合物是在任何炎癥反應或癥狀出現(xiàn)之前使用(例如在器官或組織移植前、當時、或之后即時但在器官排斥癥狀出現(xiàn)前使用)。式I化合物的預防使用是用以防止或減輕隨后出現(xiàn)的炎癥反應(如，例如，移植器官或組織的排斥)?；騃化合物的治療使用是用以減輕任何實際炎癥(如，例如，移植器官或組織的排斥)。因此，根據(jù)本發(fā)明，式I化合物可在炎癥之前、或發(fā)生時(以抑制預期中的炎癥)或發(fā)生后給予。
根據(jù)本發(fā)明，式I新穎化合物可以以單獨劑量或分開劑量通過口服、非經(jīng)腸或局部而給予。式I化合物的適宜口服劑量是在約0.1毫克/天至10克/天。在非經(jīng)腸制劑中，適宜劑量單位可含0.1至250毫克該化合物，而作局部給藥時，制劑優(yōu)選含0.01至1％的活性成分。但應理解到，劑量的給予隨病人而不同，對任一特定病人的劑量取決于臨床醫(yī)生就病人的體型，疾病情況及病人對藥物的反應作出判斷所使用的適宜劑量。
在本發(fā)明化合物以口服途徑給予時，其可以藥物制劑形式的藥物給予，這類制劑含這類化合物及與其相容的藥物載劑。這種載劑可以是適于口服的惰性有機或無機載體。這類載劑物料的實例是水，明膠，滑石粉，淀粉，硬脂酸鎂，阿拉伯膠，植物油，聚亞烷基二醇，礦脂等。
藥物制劑可以以習用方式制備，終劑型可以是固體劑型，例如，片，糖衣片，膠囊等，或為液體劑型，例如溶液，懸浮液，乳液等。藥物制劑可進行習用的醫(yī)藥處理，如滅菌。此外，藥物制劑可含有習用的佐劑，如防腐劑，穩(wěn)定劑，乳化劑，矯味劑，濕潤劑，緩沖劑，用于改變滲透壓的鹽等?？捎玫墓腆w載劑包括，例如，淀粉，乳糖，甘露糖醇，甲基纖維素，微晶纖維素，滑石粉，二氧化硅，二堿性磷酸鈣及高分子量聚合物(如聚乙二醇)。
作非經(jīng)腸使用時，式I化合物可以是水性或非水性溶液，藥物上可接受的油或液體混合物的懸浮液或乳液進行給予，其可含抑菌劑，抗氧化劑，防腐劑，緩沖劑或其他溶質以使溶液與血液等張，增稠劑，懸浮劑，或其他藥物上可接受的添加物。這類添加物包括，例如，酒石酸鹽，檸檬酸鹽及乙酸鹽緩沖劑，乙醇，丙二醇，聚乙二醇，復合物形成劑(如EDTA)，抗氧化劑(如硫酸氫鈉，偏硫酸氫鈉及抗壞血酸)，用于調(diào)整黏性的高分子量聚合物(如液體聚氧乙烷)，及山梨糖醇酐的聚乙烯衍生物。如有需要也可加入防腐劑，如苯甲酸，甲基或丙基對羥基苯甲酸酯，氯芐烷胺及其他季銨化合物。
本發(fā)明化合物也可以以溶液經(jīng)鼻給予，除本發(fā)明化合物外還可含適宜的緩沖劑，張力調(diào)節(jié)劑，微生物防腐劑，抗氧化劑及水性載體內(nèi)的黏度增加劑。用以增加黏度的制劑實例是聚乙烯醇，纖維素衍生物，聚乙烯吡咯烷酮，多乙氧基醚或甘油?？杉舆M的微生物防腐劑包括氯芐烷銨(benzal-koniumchloride)，領乙汞硫基苯酸鈉，氯-丁醇或苯基乙基醇。
此外，本發(fā)明提供的化合物可以局部或栓劑給予。
制物式I化合物可調(diào)配成以多種途徑用于治療給予。下面說明多種制劑的實例。
實施例A膠囊或片

將式1化合物與上述預先混合的賦形劑物料，但除了潤滑劑，混合成粉末混合物。再與潤滑劑混合，將制成的混合物壓制成片或裝入硬明膠膠囊內(nèi)。
實施例B非經(jīng)腸的溶液

將賦形劑物料混合，然后加到一種式1化合物內(nèi)，使賦形劑容積能溶解化合物。繼續(xù)混合至成為澄清溶液。然后將溶液過濾至適宜小瓶或安瓿內(nèi)，以高壓滅菌。
實施例C


將賦形劑物料與水混合，然后加入一種式I化合物，繼續(xù)混合直至形成均勻懸浮液。然后將懸浮液移入適宜的小瓶或安瓿內(nèi)。
實施例D局部使用的制劑

將適量的Tefose 63，Labrafil M 1944 CS，石蠟及水混合，于75℃加熱至所有成分都熔化。然后將混合物冷至50℃，同時繼續(xù)攪拌。在攪拌下加入甲基對羥基苯甲酸酯及丙基對羥基苯甲酸酯，將混合物冷至周邊溫度。將式I化合物加至混合物內(nèi)，混合至均勻。
權利要求
1.一種式I化合物 其中R1是1至3個碳原子的直鏈或支鏈的烷基，其視需要可獨立地以選自下述基團進行單-或二取代的(i)氧代(ii)嗎啉基；R2及R3各是獨立地為選自下述基團(A)氫，及(B)1至4個碳原子的直鏈或支鏈的烷基，其視需要可獨立地以選自下述基團進行單-或二經(jīng)取代(i)CONH2及(ii)OH，或R2及R3共同與其間的氮原子形成哌嗪環(huán)；及R4是(A)氰基，(B)嘧啶，其可以NH2作單-或二取代的，或(C)三氟甲氧基；或其藥物上可接受的鹽。
2.根據(jù)權利要求1的式I化合物，其中R1是甲基；R2及R3各是獨立地選自下述基團(A)氫，及(B)1至4個碳原子的直鏈或支鏈的烷基，其視需要可獨立地以選自下述基團進行單-或二取代(i)CONH2及(ii)OH；及R4是(A)氰基或(B)三氟甲氧基；或其藥物上可接受的鹽。
3.根據(jù)權利要求1或2的式I化合物，其中R1是甲基；R2及R3各是獨立地選自下述基團(A)氫，及(B)1至4個碳原子的直鏈或支鏈的烷基，其視需要是獨立地以選自下述基團進行單-或二取代的(i)CONH2及(ii)OH；及R4是三氟甲氧基；或其藥物上可接受的鹽。
4.根據(jù)權利要求1，2或3的式I化合物，其具有如下式I*的絕對立體化學
5.根據(jù)權利要求1，2，3或4的式I化合物是選自(a)(S)-2-[(R)-5-(4-氰基-芐基)-7-(3，5-二氯-苯基)-5-甲基-6-氧代-6，7-二氫-5H-咪唑并[1，2-α]咪唑-3-磺?；被鵠-丙酰胺；(b)(S)-2-[(R)-7-(3，5-二氯-苯基)-5-甲基-6-氧代-5-(4-三氟甲氧基-芐基)-6，7-二氫-5H-咪唑并[1，2-α]咪唑-3-磺?；被鵠-N-(2-羥基-2-甲基-丙基)-丙酰胺；(c)(S)-2-[(R)-7-(3，5-二氯-苯基)-5-甲基-6-氧代-5-(4-三氟甲氧基-芐基)-6，7-二氫-5H-咪唑并[1，2-α]咪唑-3-磺?；被鵠-丙酰胺；及(d)(S)-N-氨甲?；谆?2-[(R)-5-(4-氰基-芐基)-7-(3，5-二氯-苯基)-5-甲基-6-氧代-6，7-二氫-5H-咪唑并[1，2-α]咪唑-3-磺?；被鵠-丙酰胺；或其藥物上可接受的鹽。
6.一種藥物組合物，其包含根據(jù)權利要求1，2，3，4或5的化合物及至少一種藥物上可接受的載體，稀釋劑或賦形劑。
7.一種根據(jù)權利要求1，2，3，4或5的化合物，其用作藥物。
8.一種根據(jù)權利要求1，2，3，4或5的化合物的用途，它用于制備一種用于治療病人的炎癥或炎癥癥狀的藥物組合物。
9.根據(jù)權利要求8的用途，其中要治療的癥狀是成人呼吸抑制病癥，休克，氧中毒，敗血病引起的多器官損傷病癥，外傷引起的多器官損傷病癥，因心肺分流術、心肌梗塞或使用溶血栓劑引起的組織再灌注損傷，急性腎小球性腎炎，脈管炎，反應性關節(jié)炎，具有急性炎癥部分的皮膚病，休克，熱損傷，血液透析，白細胞除去法，潰瘍性結腸炎，壞死性小腸結腸炎或粒細胞輸液引起的病癥。
10.根據(jù)權利要求8的用途，其中要治療的癥狀是牛皮癬，器官/組織移植排斥，移植物-病主反應及自體免疫疾病，包括雷諾病癥，自體免疫甲狀腺炎，皮炎，多發(fā)性硬化，類風濕關節(jié)炎，胰島素依賴性糖尿病，眼色素層炎，炎性腸病包括Crohn氏病及潰瘍性結腸炎或全身性紅斑狼瘡。
11根據(jù)權利要求8的用途，其中要治療的癥狀是氣喘。
12.根據(jù)權利要求8的用途，其中要治療的癥狀是胞質治療的毒性反應。
13.一種制造權利要求1的式I化合物的方法，該方法包括將式IX化合物與式X化合物反應，以制得式I化合物。 式(IX)中R4的定義如權利要求1所限定， 式X中R1，R2及R3的定義如權利要求1所限定。
14.根據(jù)權利要求13的方法，其中式IX化合物是通過將式II的化合物與Grignard試劑反應，接著用SO2和N-氧代琥珀酰亞胺處理以制得式IX化合物。
全文摘要
一種[6，7－二氫－5H－咪唑并[1，2－α]咪唑－3－磺酰氨基]－丙酰胺衍生物，一種式(1)的化合物對CAMs及白整聯(lián)蛋白(Leukointegrins)的相互反應具有良好的抑制效果，并因此可用于治療炎癥疾病。
文檔編號C07D487/04GK1708500SQ200380102491
公開日2005年12月14日 申請日期2003年10月27日 優(yōu)先權日2002年10月30日
發(fā)明者特倫斯·A·凱利, 金進祕, 勒內(nèi)·M·勒米厄 申請人:貝林格爾·英格海姆藥物公司