專利名稱：芳基茚并吡啶和芳基茚并嘧啶及其作為腺苷A2a受體拮抗劑的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的芳基茚并吡啶和芳基茚并嘧啶及其治療和預(yù)防應(yīng)用。用這些化合物治療和/或預(yù)防的疾病包括通過拮抗腺苷A2a受體而緩解的神經(jīng)變性性疾病和運動障礙。
背景技術(shù)：
腺苷A2a受體腺苷是一種由機體所有代謝活性細胞產(chǎn)生的嘌呤核苷酸。腺苷通過四種細胞表面受體亞型(A1、A2a、A2b和A3)發(fā)揮其作用，這些亞型屬于G蛋白偶聯(lián)受體超家族(Stiles，G.L Journal of BiologicalChemistry，1992，267，6451)。A1和A3的偶聯(lián)抑制G蛋白，而A2a和A2b的偶聯(lián)則刺激G蛋白。A2a受體主要存在于腦中，在神經(jīng)元和神經(jīng)膠質(zhì)細胞中均有發(fā)現(xiàn)(在紋狀體和伏隔核中水平最高，于嗅結(jié)節(jié)、下丘腦和海馬等區(qū)域水平中等至高水平)(Rosin，D.L.；Robeva，A；Woodard，R.L.；Guyenet，P.G.；Linden，J.Journal of ComparativeNeurology，1998，401，163).
在周圍組織中，A2a受體見于血小板、嗜中性粒細胞、血管平滑肌和內(nèi)皮中(Gessi，S.；Varani，K.；Merighi，S.；Ongini，E.；Borea，P.A.British Journal of Pharmacology，2000，129，2)。紋狀體是調(diào)節(jié)運動活性(特別是通過由起源于黑質(zhì)的多巴胺能神經(jīng)元發(fā)出的其神經(jīng)支配)的主要腦部區(qū)域。黑質(zhì)是帕金森病(PD)患者中多巴胺能神經(jīng)元變性的主要靶。在黑質(zhì)中，A2a受體與多巴胺D2受體共同定位，提示這是腦中腺苷整合和多巴胺信號的主要部位(Fink，J.S.；Weaver，D.R.；Rivkees，S.A.；Peterfreund，R.A.；Pollack，A.E.；Adler，E.M.；Reppert，S.M.Brain Research Molecular Brain Research，1992，14，186)。
神經(jīng)化學(xué)研究業(yè)已表明，A2a受體的活化降低D2激動劑對其受體的結(jié)合親和性。在大鼠紋狀體膜制備物(Ferre，S.；von Euler，G.；Johansson，B.；Fredholm，B.B.；Fuxe，K.Proceedings of the NationalAcademy of Sciences of the United States of America，1991，88，7238)以及在的成纖維細胞系(Salim，H.；Ferre，S.；Dalal，A.；Peterfreund，R.A.；Fuxe，K.；Vincent，J.D.；Lledo，P.M.Journal of Neurochemistry，2000，74，432)用A2aR和D2R cDNA轉(zhuǎn)染后，業(yè)已證明了這種D2R和A2aR的受體-受體相互作用。在體內(nèi)，用A2a拮抗劑藥理上阻斷A2a受體，在包括小鼠、大鼠和猴的不同物種的多巴胺能神經(jīng)毒素MPTP(1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氫吡啶)-誘發(fā)性PD中產(chǎn)生有益作用(Ikeda，K.；Kurokawa，M.；Aoyama，S.；Kuwana，Y.Journal of Neurochemistry，2002，80，262)。此外，業(yè)已發(fā)現(xiàn)，通過基因阻斷A2a功能得到的A2a敲除小鼠，在其接觸神經(jīng)毒素MPTP時對運動損傷和神經(jīng)化學(xué)變化不大敏感(Chen，J.F.；Xu，K.；Petzer，J.P.；Staal，R.；Xu，Y.H.；Beilstein，M.；Sonsalla，P.K.；Castagnoli，K.；Castagnoli，N.，Jr.；Schwarzschild，M.A.Journal of Neuroscience，2001，21，RC143)。
在人類中，業(yè)已發(fā)現(xiàn)腺苷受體拮抗劑茶堿在PD患者中產(chǎn)生有益作用(Mally，J.；Stone，T.W.Journal of the Neurological Sciences，1995，132，129)。與此相一致，最近的流行病學(xué)研究表明，高咖啡因消耗使人不太容易患PD(Ascherio，A.；Zhang，S.M.；Hernan，M.A.；Kawachi，I.；Colditz，G.A.；Speizer，F(xiàn).E.；Willett，W.C.Annals of Neurology，2001，50，56)。總之，腺苷A2a受體阻滯劑可提供一類新的抗震顫麻痹藥(Impagnatiello，F(xiàn).；Bastia，E.；Ongini，E.；Monopoli，A.EmergingTherapeutic Targets，2000，4，635)。
發(fā)明概述本發(fā)明提供式I或I式II結(jié)構(gòu)的化合物或其可藥用鹽 式中(a)R1選自(i)-COR5，其中R5選自H、任選取代的C1-8直鏈或支鏈烷基、任選取代的芳基和任選取代的芳基烷基；其中所述烷基、芳基和芳基烷基上的取代選自C1-8烷氧基、苯基乙酰氧基、羥基、鹵素、對甲苯磺酰氧基、甲磺酰氧基、氨基、氰基、烷氧羰基或NR7R8，其中R7和R8獨立選自氫、C1-8直鏈或支鏈烷基、C3-7環(huán)烷基、芐基、芳基或雜芳基，或者NR7R8結(jié)合在一起形成雜環(huán)或雜芳基；(ii)COOR5，其中R5的定義同上；(ii)氰基；(iii)-CONR9R10，其中R9和R10獨立選自H、C1-8直鏈或支鏈烷基、C3-7環(huán)烷基、三氟甲基、羥基、烷氧基、酰基、烷基羰基、羧基、芳基烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基；其中所述烷基、環(huán)烷基、烷氧基、?；⑼榛驶?、羧基、芳基烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基可被下述基團取代羧基、烷基、芳基、取代的芳基、雜環(huán)基、取代的雜環(huán)基、雜芳基、取代的雜芳基、異羥肟酸、氨磺酰、磺?；⒘u基、硫氫基(thiol)、氨基、烷氧基或芳基烷基，或者R9和R10與它們所連接的氮結(jié)合形成雜環(huán)或雜芳基；(v)任選取代的C1-8直鏈或支鏈烷基；其中所述烷基上的取代選自C1-8烷氧基、苯基乙酰氧基、羥基、鹵素、對甲苯磺酰氧基、甲磺酰氧基、氨基、氰基、烷氧羰基、羧基、芳基、雜環(huán)基、雜芳基、磺酰基、硫氫基、烷硫基或NR7R8，其中R7和R8的定義同上；(b)R2選自任選取代的烷基、任選取代的芳基、任選取代的雜芳基、任選取代的雜環(huán)基和任選取代的C3-7環(huán)烷基、C1-8烷氧基、芳氧基、C1-8烷基磺酰基、芳基磺?；⒎剂蚧?、C1-8烷硫基或-NR24R25其中R24和R25獨立選自H、C1-8直鏈或支鏈烷基、芳基烷基、C3-7環(huán)烷基、羧基烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基，或者R24和R25與所述氮結(jié)合形成雜芳基或雜環(huán)基、(c)R3為1-4個獨立選自以下的基團氫、鹵基、C1-8直鏈或支鏈烷基、芳基烷基、C3-7環(huán)烷基、C1-8烷氧基、氰基、C1-4烷氧羰基、三氟甲基、C1-8烷基磺酰基、鹵素、硝基、羥基、三氟甲氧基、C1-8羧酸酯基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基，-NR11R12，其中R11和R12獨立選自H、C1-8直鏈或支鏈烷基、芳基烷基、C3-7環(huán)烷基、羧基烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基，或者R10和R11與所述氮結(jié)合形成雜芳基或雜環(huán)基、-NR13COR14，其中R13選自氫或烷基，R14選自氫、烷基、取代的烷基、C1-3烷氧基、羧基烷基、芳基、芳基烷基、雜芳基、雜環(huán)基、R15R16N(CH2)p-或R15R16NCO(CH2)p-，其中R15和R16獨立選自H、OH、烷基和烷氧基，而p為1-6的整數(shù)，其中所述烷基可被下述基團取代羧基、烷基、芳基、取代的芳基、雜環(huán)基、取代的雜環(huán)基、雜芳基、取代的雜芳基、異羥肟酸、氨磺酰、磺酰基、羥基、硫氫基、烷氧基或芳基烷基，或者R13和R14與所述羰基結(jié)合形成帶有羰基的雜環(huán)基；(d)R4選自氫、C1-6直鏈或支鏈烷基、芐基其中所述烷基和芐基任選被一個或多個選自以下的基團取代C3-7環(huán)烷基、C1-8烷氧基、氰基、C1-4烷氧羰基、三氟甲基、C1-8烷基磺?；?、鹵素、硝基、羥基、三氟甲氧基、C1-8羧酸酯基、氨基、NR17R18、芳基和雜芳基，-OR17和-NR17R18，其中R17和R18獨立選自氫和任選取代的C1-6烷基或芳基；和(e)X選自C＝S、C＝O；CH2、CHOH、CHOR19；或CHNR20R21，其中R19、R20和R21選自任選取代的C1-8直鏈或支鏈烷基，其中所述烷基上的取代選自C1-8烷氧基、羥基、鹵素、氨基、氰基或NR22R23，其中R22和R23獨立選自氫、C1-8直鏈或支鏈烷基、C3-7環(huán)烷基、芐基、芳基、雜芳基，NR22R23結(jié)合形成雜環(huán)或雜芳基；
條件是在式II化合物中，當R1為氰基時，則R2不是苯基。
本發(fā)明還提供包含本發(fā)明化合物和可藥用載體的藥物組合物。
本發(fā)明進一步提供治療患有可通過拮抗體內(nèi)腺苷A2a受體得以緩解的疾病的受治療者的方法，包括給予該受治療者治療有效量的本發(fā)明的藥物組合物。
本發(fā)明還提供預(yù)防受治療者中可通過拮抗體內(nèi)腺苷A2a受體得以緩解的疾病的方法，包括在預(yù)期引起受治療者中可通過拮抗體內(nèi)腺苷A2a受體得以緩解的疾病之前或之后，給予該受治療者預(yù)防有效量的權(quán)利要求1的化合物。
發(fā)明詳述式I化合物是有效的腺苷A2a受體的小分子拮抗劑，業(yè)已表現(xiàn)出拮抗腺苷A2a、A1和A3受體的功效R1的優(yōu)選實施方案是COOR5，其中R5為任選取代的C1-8直鏈或支鏈烷基。優(yōu)選所述烷基鏈被二烷基氨基取代。
R2的優(yōu)選實施方案是任選取代的雜芳基和任選取代的芳基。優(yōu)選R2為任選取代的呋喃。
R3的優(yōu)選取代基包括氫、鹵基、羥基、氨基、三氟甲基、烷氧基、羥基烷基鏈和氨基烷基鏈。
R4的優(yōu)選實施方案包括NH2和烷基氨基。
在一個優(yōu)選實施方案中，所述化合物選自下文表1和表2所示的化合物。
更優(yōu)選所述化合物選自以下化合物權(quán)利要求1的式I化合物，其中R4為氨基
2-氨基-4-呋喃-2-基-茚并[1，2-d]嘧啶-5-酮 2-氨基-4-苯基-茚并[1，2-d]嘧啶-5-酮 2-氨基-4-噻吩-2-基-茚并[1，2-d]嘧啶-5-酮
2-氨基-4-(5-甲基-呋喃-2-基)-茚并[1，2-d]嘧啶-5-酮 2，6-二氨基-4-呋喃-2-基-茚并[1，2-d]嘧啶-5-酮 3-氨基-1-呋喃-2-基-9-氧代-9H-茚并[2，1-c]吡啶-4-甲腈 3-氨基-1-呋喃-2-基-9-氧代-9H-茚并[2，1-c]吡啶-4-甲酸2-二甲氨基-乙酯
3-氨基-1-苯基-9-氧代-9H-茚并[2，1-c]吡啶-4-甲酸2-二甲氨基-乙酯 3-氨基1-呋喃-2-基-9-氧代-9H-茚并[2，1-c]吡啶-4-甲酸(2-二甲氨基-1-甲基-乙基)-酰胺 3-氨基-1-呋喃-2-基-9-氧代-9H-茚并[2，1-c]吡啶-4-甲酸(2-二甲氨基-乙基)-甲基-酰胺
3-氨基-1-呋喃-2-基-9-氧代-9H-茚并[2，1-c]吡啶-4-甲酸1-甲基-吡咯烷-2-基甲酯本發(fā)明的化合物可作為游離堿分離和使用。它們也可作為可藥用鹽分離和使用。這樣的鹽的實例包括氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、鹽酸鹽、高氯酸鹽、硫酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、蘋果酸鹽、酒石酸鹽、檸檬酸鹽、苯甲酸鹽、扁桃酸鹽、甲磺酸鹽、羥乙磺酸鹽(hydroethanesulfonic)、苯磺酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽(palmoic)，2-萘磺酸鹽，對甲苯磺酸鹽、環(huán)己烷氨磺酸鹽和葡糖二酸鹽。
本發(fā)明還提供包含本發(fā)明化合物和可藥用載體的藥物組合物。
可藥用載體是本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的，包括但不限于約0.01-0.1M、優(yōu)選0.05M磷酸緩沖液或0.8％鹽水。這樣的可藥用載體可以是水性或非水溶液、懸浮液或乳液。非水溶劑的實例為丙二醇、聚乙二醇、諸如橄欖油的植物油和注射用有機酯，如油酸乙酯。水性載體包括水、乙醇、醇/水溶液、甘油、包括鹽水和緩沖介質(zhì)的乳液或懸浮液?？诜幂d體可以是酏劑、糖漿、膠囊、片劑等。典型的固體載體是惰性物質(zhì)，如乳糖、淀粉、葡萄糖、甲基纖維素、硬脂酸鎂、磷酸二鈣、甘露醇等。胃腸外載體包括氯化鈉溶液、林格氏葡萄糖、葡萄糖和氯化鈉、加有乳酸鹽的林格氏液和不揮發(fā)油。靜脈內(nèi)載體包括流質(zhì)和營養(yǎng)補充物、電解質(zhì)補充物，如基于林格氏葡萄糖的補充物等。也可存在防腐劑和其它添加劑，例如抗菌劑、抗氧化劑、螫合劑、惰性氣體等?？梢圆捎帽绢I(lǐng)域已知的常規(guī)技術(shù)，根據(jù)需要將所有載體與崩解劑、稀釋劑、制粒劑、潤滑劑、粘合劑等混合。
本發(fā)明還提供治療患有可通過拮抗A2a受體而得以緩解的疾病的受治療者的方法，包括給予所述受治療者治療有效量的本發(fā)明藥物組合物。
在一個實施方案中，所述疾病為神經(jīng)變性性疾病或運動障礙?？捎帽景l(fā)明藥物組合物治療的疾病的實例包括但不限于帕金森病、亨廷頓舞蹈病、多發(fā)性系統(tǒng)萎縮、皮質(zhì)基底變性(CorticobasalDegeneration)、早老性癡呆和老年性癡呆。
在一個優(yōu)選實施方案中，所述疾病是帕金森病。
本文所用的術(shù)語“受治療者”包括但不限于患有可通過拮抗A2a受體而得以緩解的疾病的任何動物或人工修飾動物。在一個優(yōu)選實施方案中，所述受治療者是人類。
可采用本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的多種方法中的任一種，實施或進行本發(fā)明藥物組合物的給予。本發(fā)明的化合物可以例如經(jīng)靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、口服或皮下給予。在一個優(yōu)選實施方案中，本發(fā)明的藥物組合物口服給予。另外，給予可包括在一段合適的時間周期內(nèi)給予所述受治療者多劑。這樣的給藥方案可根據(jù)常規(guī)方法來確定。
本文所用術(shù)語藥物組合物的“治療有效量”是足以停止、逆轉(zhuǎn)或減緩疾病進程的量。藥物組合物的“預(yù)防有效量”是足以預(yù)防疾病、即消除、緩解和/或延遲疾病發(fā)作的量。用于確定本發(fā)明藥物組合物的治療和預(yù)防有效量的方法是本領(lǐng)域已知的。將藥物組合物給予人用的有效量，例如可根據(jù)動物研究的結(jié)果萊計算確定。
在一個實施方案中，所述治療和/或預(yù)防有效量是足以遞送約0.001mg/kg體重至約200mg/kg體重的本發(fā)明藥物組合物的量。在另一實施方案中，所述治療和/或預(yù)防有效量是足以遞送約0.05mg/kg體重至約50mg/kg體重的量。更具體地講，在一個實施方案中，口服劑量為每日約0.05mg/kg至約100mg/kg。在另一實施方案中，口服劑量為每日約0.05mg/kg至約50mg/kg，在一個進一步的實施方案中，為每日約0.05mg/kg至約20mg/kg。在再一實施方案中，輸注劑量范圍為在大約數(shù)分鐘至數(shù)日內(nèi)約1.0μg/kg/min至約10mg/kg/min的與可藥用載體混合的抑制劑。在又一實施方案中，對于局部給藥而言，本發(fā)明的化合物可與藥用載體以約0.001至約0.1的藥物/載體比混合。
定義和命名法除非另有說明，否則本申請全文中使用標準命名法，首先描述所指定側(cè)鏈的末端部分，然后給出朝向連接點的相鄰官能團。
本文所用的下列化學(xué)術(shù)語具有以下段落中敘述的含義當提及化學(xué)取代基時，“獨立地”應(yīng)當意指當不止一個取代基存在時，所述取代基可以相同或不同；“烷基”是指直鏈、環(huán)狀和支鏈烷基。除非另有說明，否則烷基含有1-20個碳原子。除非另有說明，否則烷基可任選被一個或多個諸如以下的基團取代鹵素、OH、CN、巰基、硝基、氨基、C1-C8-烷基、C1-C8-烷氧基、C1-C8-烷硫基、C1-C8-烷基-氨基、二(C1-C8-烷基)氨基、(一、二、三和全)鹵烷基、甲?；?、羧基、烷氧基羰基、C1-C8-烷基-CO-O-、C1-C8-烷基-CO-NH-、羧酰胺、異羥肟酸、氨磺酰、磺?；?、硫氫基、芳基、芳基(C1-C8)烷基、雜環(huán)基和雜芳基。
“烷氧基”意指-O-烷基，除非另有說明，否則它具有1-8個碳原子。
術(shù)語“生物電子等排物”的定義為“具有產(chǎn)生廣泛類似生物學(xué)特性的化學(xué)物理性質(zhì)的基團或分子”(Burger’s Medicinal Chemistry andDrug Discovery，M.E.Wolff編著，第5版，Vol.1，1995，第785頁)。
“鹵素”意指氟、氯、溴、碘；“PH”或“Ph”意指苯基；“Ac”意指?；?；“Bn”是指芐基。
本文所用術(shù)語“?；睙o論單獨使用還是作為取代基的一部分，意指通過除去羥基而由有機酸衍生的具有2-6個碳原子的有機基團(直鏈或支鏈)。本文所用術(shù)語“Ac”，無論單獨使用還是作為取代基的部分使用時，都意指乙?；?。
“芳基”或“Ar”無論單獨使用還是作為取代基的部分使用時，均為碳環(huán)芳族基團，包括但不限于苯基、1-萘基或2-萘基等。碳環(huán)芳族基團可通過用下述基團獨立地取代其上的1-5個氫原子而被取代鹵素、OH、CN、巰基、硝基、氨基、C1-C8-烷基、C1-C8-烷氧基、C1-C8-烷硫基、C1-C8-烷基-氨基、二(C1-C8-烷基)氨基、(一、二、三和全)鹵烷基、甲酰基、羧基、烷氧基羰基、C1-C8-烷基-CO-O-、C1-C8-烷基-CO-NH-或羧酰胺、說明性的芳基包括例如苯基、萘基、聯(lián)苯基、氟苯基、二氟苯基、芐基、苯甲酰氧基苯基、乙酯基苯基、乙?；交?、乙氧基苯基、苯氧基苯基、羥基苯基、羧基苯基、三氟甲基苯基、甲氧基乙基苯基、乙酰氨基苯基、甲苯基、二甲苯基、二甲基氨甲?；交取！癙h”或“PH”意指苯基。
無論單獨使用還是作為取代基的部分使用，“雜芳基”是指具有5-10個環(huán)原子的完全不飽和環(huán)狀基團，其中一個環(huán)原子選自S、O和N；0-2環(huán)原子是獨立選自S、O和N的額外的雜原子；而其余環(huán)原子為碳。所述基團可通過任何環(huán)原子與分子的其余部分連接。示例性的雜芳基包括例如吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、噠嗪基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、噻唑基、唑基、異唑基、噻二唑基、三唑基、三嗪基、二唑基、噻吩基、呋喃基、喹啉基、異喹啉基、吲哚基、異噻唑基、2-吖庚英基、吖庚英基、N-氧代-吡啶基、1-二噻吩基、苯并噻唑基、苯并唑基、苯并噻吩基、喹啉基-N-氧化物、苯并咪唑基、苯并吡喃基、苯并異噻唑基、苯并異唑基、苯并二嗪基、苯并呋咱基、苯并噻喃基、吲唑基、中氮茚基、苯并呋喃基、色酮基、香豆素基、噌啉基、喹喔啉基、吲唑基、吡咯并吡啶基、呋喃并吡啶基(如呋喃并[2，3-c]吡啶基、呋喃并[3，2-b]吡啶基或呋喃并[2，3-b]吡啶基)、咪唑并吡啶基(如咪唑并[4，5-b]吡啶基或咪唑并[4，5-c]吡啶基)、1，5-二氮雜萘基、2，3-二氮雜萘基、嘌呤基、吡啶并吡啶基、喹唑啉基、噻吩并呋喃基、噻吩并吡啶基、噻吩并噻吩基和呋喃基。雜芳基可通過被以下基團獨立取代其上的1-5個氫原子而被取代鹵素、OH、CN、巰基、硝基、氨基、C1-C8-烷基、C1-C8-烷氧基1、C1-C8-烷硫基、C1-C8-烷基-氨基、二(C1-C8-烷基)氨基、(一、二、三和全)鹵烷基、甲?；Ⅳ然⑼檠趸驶?、C1-C8-烷基-CO-O-、C1-C8-烷基-CO-NH-或羧酰胺。雜芳基可被一氧代基取代，得到例如4-氧代-1H-喹啉。
術(shù)語“雜環(huán)”和“雜環(huán)基”是指任選取代的、全飽和或部分飽和的環(huán)狀基團，例如4-7元單環(huán)、7-11元二環(huán)或10-15元三環(huán)環(huán)狀系統(tǒng)，其在含至少一個碳原子的環(huán)中具有至少一個雜原子。含雜原子的雜環(huán)基的每個環(huán)可具有選自氮原子、氧原子和硫原子的1、2或3個雜原子，其中氮和硫雜原子也可任選被氧化。氮原子可任選被季銨化。雜環(huán)基可于任何雜原子或碳原子連接。
示例性單環(huán)雜環(huán)基包括吡咯烷基；丁環(huán)基；吡唑啉基；咪唑啉基；咪唑烷基；唑基；唑烷基；異唑啉基；噻唑烷基；異噻唑烷基；四氫呋喃基；哌啶基；哌嗪基；2-氧代哌嗪基；2-氧代哌啶基；2-氧代吡咯烷基；4-哌啶酮基；四氫吡喃基；四氫噻喃基；四氫噻喃基砜；嗎啉基；硫代嗎啉基；硫代嗎啉基亞砜；硫代嗎啉基砜；1，3-二氧戊環(huán)；二烷基；噻丁環(huán)(thietanyl)；硫雜丙環(huán)等。示例性的二環(huán)雜環(huán)基包括奎寧環(huán)基；四氫異喹啉基；二氫異吲哚基；二氫喹唑啉基(如3，4-二氫-4-氧代-喹唑啉基)；二氫苯并呋喃基；二氫苯并噻吩基；二氫苯并噻喃基；二氫苯并噻喃基砜；二氫苯并吡喃基；二氫吲哚基；異色酮基；異二氫氮雜茚基；胡椒基；四氫喹啉基等。
取代的芳基、取代的雜芳基和取代的雜環(huán)也可被第二取代芳基、第二取代雜芳基或第二取代雜環(huán)取代，得到例如4-吡唑-1-基-苯基或4-吡啶-2-基-苯基。
碳原子的指定數(shù)目(如C1-8)應(yīng)當獨立地指烷基部分或環(huán)烷基部分中的碳原子數(shù)目，或指烷基以前綴出現(xiàn)的較大的取代基中的烷基部分。
除非另有說明，否則分子中某一特定位置上的任何取代基或變量的定義與在該分子其它位置中的其定義無關(guān)。應(yīng)當理解，本發(fā)明化合物上的取代基和取代模式可由本領(lǐng)域技術(shù)人員來選擇，以得到化學(xué)穩(wěn)定的、且可容易地用本領(lǐng)域已知的技術(shù)和本文所述的方法合成的化合物。
當本發(fā)明的化合物具有至少一個立體(stereogenic)中心時，它們可因此以對映體存在。當所述化合物具有兩個或更多個立體中心時，它們還可以非對映體存在。此外，所述化合物的某些晶型可以多晶型存在，因此這些將包括在本發(fā)明中。另外，某些化合物可與水(水合物)或普通有機溶劑形成溶劑合物，這樣的溶劑合物也將包括在本本發(fā)明的某些化合物可具有反式和順式異構(gòu)體。另外，當本發(fā)明化合物的制備方法產(chǎn)生立體異構(gòu)體的混合物時，這些異構(gòu)體可用常規(guī)技術(shù)如制備性色譜來分離。所述化合物可以單一立體異構(gòu)體或以某些可能的立體異構(gòu)體之混合物的外消旋體形式來制備?？刹捎脴藴始夹g(shù)，諸如通過形成鹽而形成非對映體對，將所述化合物例如拆分成其組分對映體。所述化合物也可通過下述方法拆分與手性助劑共價連接，接著進行色譜分離和/或結(jié)晶分離，然后除去手性助劑。另一方面，所述化合物可采用手性色譜加以拆分。
參考下述的實驗細節(jié)，將會更好地理解本發(fā)明，但本領(lǐng)域技術(shù)人員會容易認識到，這些實驗細節(jié)僅僅用于說明本發(fā)明，本發(fā)明在所附的權(quán)利要求書中有更全面的描述。另外，在本申請全文中引證了各種出版物。這些出版物在此引入本申請中作為參考，從而更全面地描述本發(fā)明所屬領(lǐng)域的現(xiàn)有技術(shù)狀況。
實驗細節(jié)I.通用合成流程本發(fā)明的代表性化合物可按照下述的及后面通用流程中說明的通用合成方法來合成。某些流程的產(chǎn)物可用作中間體，來制備不止一種的本發(fā)明化合物。用于制備本發(fā)明后續(xù)化合物的中間體的選擇只是判斷問題，這完全在本領(lǐng)域技術(shù)人員的能力范圍之內(nèi)。
可用流程1-7中所述方法來制備本發(fā)明的化合物，其中R3a、R3b、R3c和R3d獨立地是任何R3基團，而R1、R2、R3和R4如上所述。
取代的嘧啶1可如流程1所述方法制備。二氫茚酮或二氫茚二酮2或茚酯3可與醛縮合，得到取代的亞芐基4(Bullington，J.L；Cameron，J.C.；Davis，J.E.；Dodd，J.H.；Harris，C.A.；Henry，J.R.；Pellegrino-Gensey，J.L.；Rupert，K.C.；Siekierka，J.J.Bioorg.Med.Chem.Lett.1998，8，2489；Petrow，V.；Saper，J.；Sturgeon，B.J.Chem.Soc.1949，2134)。然后將其與碳酸胍縮合形成茚并嘧啶1.
流程1 或者，所述嘧啶化合物可如流程2所示方法制備?？赏ㄟ^氧化硫醇醚5來制備砜6，通過用芳族胺處理該砜，可得到所需的胺7。
流程2 稠合芳環(huán)上具有取代基的嘧啶也可用下述方法(流程3)合成。合成始于用烯丙基溴使呋喃烷基化，得到2-烯丙基呋喃。使2-烯丙基呋喃和乙炔二甲酸二甲酯(dimethylacetylene dicarboxylate)進行狄爾斯-阿德爾(Diels-Alder)反應(yīng)，然后脫氧合(Xing，Y.D.；Huang，N.Z.J.Org.Chem.1982，47，140)，得到鄰苯二甲酸酯8。然后鄰苯二甲酸酯8與乙酸乙酯進行克萊森(Claisen)縮合，在酸處理后得到苯乙烯基二氫茚二酮9(Buckle，D.R.；Morgan，N.J.；Ross，J.W.；Smith，H.；Spicer，B.A.J.Med.Chem.1973，16，1334)。然后用二硫化碳，在KF存在下將二氫茚二酮9轉(zhuǎn)變?yōu)槎谆蚁┩蚩s醛10。向二硫縮醛10中加入格式試劑，然后與胍反應(yīng)，得到作為異構(gòu)體混合物的嘧啶11。
流程3 經(jīng)二羥基化和氧化，得到芳族醛13，可將其還原氨化，得到胺14。其它異構(gòu)體可以相似方式進行處理。
流程4 用業(yè)已公開的方法(Bello，K.A.；Cheng，L.；Griffiths，J.J.Chem.Soc.，Perkin Trans.II 1987，815)獲得3-二氰基乙烯基二氫茚-1-酮(15)(流程5)。3-二氰基乙烯基二氫茚-1-酮與醛在氫氧化銨存在下反應(yīng)，產(chǎn)生二氫吡啶16(El-Taweel，F(xiàn).M.A.；Sofan，M.A.；E.-Maati，T.M.A.；Elagamey，A.A.Boll.Chim.Farmac.2001，140，306)。然后，用三氧化鉻，在回流乙酸中將這些化合物氧化成相應(yīng)的吡啶17。
流程5 然后還原吡啶17的酮，得到芐型醇18。或者，用氫氧化鈉水解腈，得到羧酸19(流程6)。
流程6 然后，可用各種方法將酸轉(zhuǎn)變?yōu)轸人狨?0或酰胺21。一般而言，通過用碳酸銀處理，然后用烷基氯處理或者與二乙基磷酰氰(DEPC)和合適的醇偶聯(lián)，獲得酯20(Okawa，T.；Toda，M.；Eguchi，S.；Kakehi，A.Synthesis 1998，1467)。通過將所述羧酸與合適的胺在DEPC或1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(EDCI)中偶聯(lián)，獲得酰胺21。也可通過首先使羧酸19與二溴鏈烷反應(yīng)，然后用胺取代末端溴，獲得酯20(流程7)。
流程7 II.具體化合物的合成作為本發(fā)明代表的具體化合物可按照下述實施例制備。并未嘗試優(yōu)化這些反應(yīng)所得的收率。然而，基于下述實施例本領(lǐng)域技術(shù)人員會知曉如何通過對反應(yīng)時間、溫度、溶劑和/或試劑作常規(guī)改變而提高收率。
某些合成的產(chǎn)物可作為中間體使用，以制備不止一種的本發(fā)明化合物。在這些情況下，用來制備本發(fā)明化合物的中間體的選擇是判斷問題，這完全在本領(lǐng)域技術(shù)人員的能力范圍內(nèi)。
實施例1亞芐基4的合成(R2＝2-呋喃基，R3a＝F，R3b、R3c、R3d＝H)將75mL乙醇和3mL濃鹽酸中的3(3.0g，11.69mmol)和2-糠醛(1.17g，12.17mmol)的混合物于回流下攪拌16小時。然后將反應(yīng)物冷卻至室溫，濾出所產(chǎn)生的沉淀，用乙醇、乙醚洗滌并風(fēng)干，得到1.27g(45％)產(chǎn)物。
實施例2茚并嘧啶1的合成(R2＝2-呋喃基，R3a＝F，R3b、R3c、R3d＝H)將甲醇中的4(0.5g，2.06mmol)、碳酸胍(0.93g，5.16mmol)和20.6mL 0.5M甲醇鈉的混合物于回流下攪拌16小時。將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用水稀釋。收集所產(chǎn)生的沉淀，用水、乙醇、乙醚洗滌，然后干燥。然后，粗制物質(zhì)經(jīng)硅膠純化，得到0.024g(4％)產(chǎn)物。MS m/z 282.0(M+H).
實施例32-氨基-4-甲磺酰基-茚并[1，2-d]嘧啶-5-酮的合成向5(Augustin，M.；Groth，C.；Kristen，H.；Peseke，K.；Wiechmann，C.J.Prakt.Chem.1979，321，205)(1.97g，8.10mmol)的MeOH(150mL)懸浮液中，加入過一硫酸氫鉀(14.94g，24.3mmol)的H2O(100mL)溶液。將混合物于室溫下攪拌過夜，然后用冷水(500mL)稀釋，用K2CO3調(diào)成堿性并過濾。產(chǎn)物用水和乙醚洗滌，得到0.88g(40％)砜6。MS m/z297.9(M+Na).
實施例4氨基嘧啶7的合成(R2＝NHPh，R3＝H)將N-甲基吡咯烷酮(3.5mL)中的砜6(0.20g，0.73mmol)和苯胺(0.20g，2.19mmol)的混合物加熱至100℃達90分鐘。冷卻至室溫后，混合物用EtOAc(100mL)稀釋，用鹽水(2×75mL)和水(2×75mL)洗滌，然后經(jīng)Na2SO4干燥。過濾并真空濃縮后，殘余物經(jīng)柱色譜純化，用0-50％ EtOAc/己烷洗脫，得到0.0883g(42％)產(chǎn)物7。MS m/z 289.0(M+H).
實施例5鄰苯二甲酸酯8的合成向-78℃的呋喃(5.3ml，73.4mmol)的冷THF溶液(100ml)中，添加1.37M的正-BuLi(53.6ml，73.4mmol)的己烷溶液；然后，使反應(yīng)溫熱至0℃。于0℃ 1.25小時后，一次性添加純的烯丙基溴(7.9ml，91.8mmol)。于0℃1小時后，添加NH4Cl的飽和水溶液，并分離各層。用EtOAc萃取水相，且將合并的有機物用水和鹽水洗滌，用Na2SO4干燥，以及濃縮，產(chǎn)生4.6克(58％)的不經(jīng)進一步純化而使用的2-烯丙基呋喃。
將粗制的烯丙基呋喃(4.6g，42.6mmol)和乙炔二甲酸二甲酯(5.2ml，42.6mmol)在無溶劑的密封管中加熱至90℃。在90℃ 6小時后，冷卻所述物質(zhì)，且通過柱色譜用25％ EtOAc的己烷溶液洗脫，將其純化，從而產(chǎn)生5.8g(54％)的作為黃色油狀物的氧雜二環(huán)。MS m/z 251(M+H)。
于0℃，向純的TiCl4(16.5ml，150.8mmol)中滴加四氫呋喃(60ml)。逐滴添加1.0M LiAlH4(60.3ml，60.3mmol)的THF溶液，而改變懸浮液的顏色，從黃色懸浮液變成深綠色或黑色的懸浮液。添加三乙胺(2.9ml，20.9mmol)，并于75-80℃回流所述混合物。45分鐘后，將這溶液冷卻至室溫，且將所述氧雜二環(huán)(5.8g，23.2mmol)的THF溶液(23ml)加到所述深色溶液中。在室溫2.5小時后，把所述溶液傾注到20％的K2CO3水溶液(200ml)中，且過濾所產(chǎn)生的懸浮液。用CH2Cl2洗滌沉淀幾次，并使濾液各層分離。用CH2Cl2萃取水相，并將合并的有機物用水和鹽水洗滌，用Na2SO4干燥，濃縮，且通過柱色譜用25％ EtOAc的己烷溶液洗脫進行純化，產(chǎn)生3.5克(64％)作為黃色油狀物的鄰苯二甲酸酯8。MS m/z 235(M+H)。
實施例6二氫茚二酮9的合成將礦物油中的60％的氫化鈉分散體(641mg，16.0mmol)加到所述鄰苯二甲酸酯8(2.5g，10.7mmol)的EtOAc溶液(3.5ml)中，且回流所產(chǎn)生的漿液。1小時后，該溶液變粘稠，于是添加追加的7.5mlEtOAc。于回流下4小時后，冷卻懸浮液至室溫并過濾，產(chǎn)生黃色固體。將這固體分批加到80℃的HCl溶液中(25ml水和5ml濃HCl)。于80℃加熱該懸浮液達另外的30分鐘，然后將其冷卻至室溫并過濾，產(chǎn)生1.2克(60％)作為黃色固體的二氫茚二酮9。MS m/z 187(M+H)。
實施例7二甲基乙烯酮二硫縮醛10的合成將固體氟化鉀(7.5g，129.1mmol)加到0℃的二氫茚二酮9(1.2g，6.5mmol)和CS2(0.47ml，7.8mmol)的DMF(10ml)溶液中。除去低溫浴，而在30分鐘后添加純的甲基碘(1.00ml，16.3mmol)。于室溫5小時后，用EtOAc稀釋該懸浮液，然后用水和鹽水洗滌。用Na2SO4干燥有機層，濃縮，并通過柱色譜用20％ EtOAc的己烷溶液洗脫進行純化，產(chǎn)生1.4g(75％)作為黃色固體的二甲基乙烯酮二硫縮醛10。MS m/z 291(M+H)。
實施例8嘧啶11的合成(R2＝Ph，R3a＝CHCHCH3，R3d＝H)向溶于200ml THF的二甲基乙烯酮二硫縮醛10(5.7g，19.8mmol)的-78℃溶液中，加入溶于THF(13ml，25.7mmol)的2.0M的PhMgCl溶液。在-78℃ 3小時后，添加NH4Cl的飽和水溶液，并使各層分離。用EtOAc萃取水層，且將合并的有機萃取液用水和鹽水洗滌，用Na2SO4干燥，濃縮，以及通過柱色譜用溶于己烷的20％ EtOAc洗脫進行純化，產(chǎn)生4.9g(77％)作為黃色固體的硫烯醇醚。MS m/z321(M+H)。將固體鹽酸胍(1.5g，15.3mmol)加到溶于30ml DMF的硫烯醇醚(4.9g，15.3mmol)和K2CO3(2.6g，19.1mmol)的溶液中，并把這溶液加熱到80℃。在80℃ 6小時后，用EtOAc稀釋該溶液，并用水和鹽水進行洗滌。將有機層用Na2SO4干燥，濃縮，且通過柱色譜用溶于己烷的40％ EtOAc洗脫進行純化，從而產(chǎn)生4.6g(96％)作為黃色固體的嘧啶區(qū)域異構(gòu)體11。MS m/z 314(M+H)。
實施例9醛13的合成(R2＝Ph)將固體MeSO2NH2(277mg，2.9mmol)加到AD-mix-α(4.0g)的t-BuOH∶H2O(1∶1)的溶液(30ml)中。把所產(chǎn)生的黃色溶液加到所述嘧啶(910mg，2.9mmol)的EtOAc溶液(15ml)中。3天后，添加固體亞硫酸鈉(4.4g，34.9mmol)。在攪拌1.5小時后，用EtOAc稀釋異相溶液，并使各層分離。用EtOAc萃取水相，將合并的萃取液用水和鹽水洗滌，用Na2SO4干燥，濃縮，以及通過柱色譜用100％ EtOAc洗脫進行純化，產(chǎn)生710mg(70％)的中間體二醇12。MS m/z 348(M+H)。
將固體HIO4-2H2O(933mg，4.1mmol)加到溶于THF的二醇12(710mg，2.1mmol)的0℃溶液中。于0℃1.5小時后，用EtOAc稀釋該溶液，且用NaHCO3的飽和水溶液、水和鹽水洗滌有機相。將有機層用Na2SO4干燥，且濃縮有機層，產(chǎn)生603mg(98％)作為黃色固體的、不進一步純化而使用的醛13。MS m/z 302(M+H)。
實施例10經(jīng)由還原氨化的胺14的合成(R3a＝N(-CH2CH2OCH2CH2-)將固體NaBH(OAc)3(53mg，0.25mmol)加到溶于1ml THF中的醛13(50mg，0.17mmol)、嗎啉(0.034ml，0.34mmol)和AcOH(0.014ml，0.25mmol)的溶液里。3天后，過濾所述溶液并將其濃縮。把所產(chǎn)生的物質(zhì)溶解于CH2Cl2中，并用NaHCO3的飽和水溶液和鹽水洗滌，在Na2SO4上干燥，濃縮，且通過柱色譜用溶于CH2Cl2的0-10％甲醇洗脫將其純化，從而產(chǎn)生38mg(60％)作為黃色固體的胺14。MS m/z373(M+H)。將該產(chǎn)物溶于最低量的CH2Cl2中，且用溶于乙醚的1.0M的HCl處理，而得到鹽酸鹽。
實施例11環(huán)化成二氫吡啶16(R2＝2-呋喃基，R3＝H)向溶于200ml乙醇的3-二氰基乙烯基茚滿-1-酮(4.06g，20.9mmol)的溶液中，添加2-糠醛(3.01g，31.4mmol)和25ml濃NH4OH。將所述溶液加熱至回流達2小時，并讓其冷卻至室溫過夜。真空濃縮該混合物以除去乙醇。將殘余物過濾并用水洗滌。干燥所獲得的紫色固體，得到5.92g(89％)。MS m/z 290(M++1)。
實施例12二氫吡啶16氧化為吡啶17(R2＝2-呋喃基，R3＝H，R4＝NH2，R5＝CN，X＝O)向回流的二氫吡啶16(5.92g，20.4mmol)的乙酸(100ml)溶液中，加入溶于12ml水的三氧化鉻(VI)(2.05g，20.4mmol)的溶液。在回流10分鐘后，用水沖稀該反應(yīng)直到沉淀開始形成為止。將該混合物冷卻至室溫并過濾。用水洗滌殘余物而產(chǎn)生4.64g(79％)的棕色固體。MS m/z 288(M++1)。
實施例13酮17還原為醇18(R2＝2-呋喃基，R3＝H，R4＝NH2，R5＝CN，X＝H、OH)向溶于12ml THF的酮17(0.115g，0.40mmol)的0℃溶液中，加入溶于THF(0.40ml，0.40mmol)的1.0M的LiAlH4溶液。在0℃攪拌該反應(yīng)物1小時。通過加入乙酸乙酯(1.5ml)、水(1.5ml)、10％的NaOH水溶液(1.5ml)和NH4Cl的飽和水溶液(3.0ml)，猝滅該反應(yīng)。將該混合物用乙酸乙酯(3×35ml)萃取，用鹽水洗滌，并用硫酸鈉干燥。濃縮剩余的溶液，得到0.083g(72％)的黃色固體。MS m/z 290(M++1)。
實施例14腈17水解為羧酸19(R2＝2-呋喃基，R3＝H，R4＝NH2，R5＝COOH，X＝O)向腈17(0.695g，2.42mmol)和乙醇(30ml)的混合物中，加入35％的氫氧化鈉水溶液5ml。把所產(chǎn)生的混合物加熱至回流過夜。在冷卻至室溫后，將該溶液傾注到水中并用1N HCl酸化。通過過濾，分離出所產(chǎn)生的沉淀，并用水洗滌沉淀，得到0.623g(84％)的棕色固體。MS m/z 329(M++23)。
實施例15用碳酸銀合成羧酸酯20(R2＝2-呋喃基，R3＝H，R4＝NH2，R5＝CO2CH2CH2NMe2，X＝O)將80ml DMF中的羧酸19(5.0g，16.3mmol)、碳酸銀(5.8g，21.2mmol)和碘化四丁銨(1.5g，4.1mmol)的懸浮液加熱到90℃。1小時后，冷卻該混合物至室溫并加入2-(二甲基氨基)乙基氯鹽酸鹽(2.4g，16.3mmol)，且將混合物加熱至100℃。7小時后，將反應(yīng)物趁熱過濾，濃縮，且通過柱色譜用0-10％甲醇/CH2Cl2洗脫純化，得到0.160g(3％)的黃色固體。MS m/z 378(M++1)。將該產(chǎn)物溶于最低量的二氯甲烷中，且用溶于乙醚的1.0M的HCl處理，得到鹽酸鹽。
實施例16用DEPC合成羧酸酯20
(R2＝2-呋喃基，R3＝H，R4＝NH2，R5＝CO2CH2CH(-CH2CH2CH2(Me)N-)，X＝O)向DMF(30ml)中的羧酸19(0.40g，1.3mmol)和(S)-1-甲基-2-吡咯烷甲醇(pyrrolidinemethanol)的混合物里，加入0.20ml(1.3mmol)的二乙基磷酰氰和三乙胺(0.20ml，1.3mmol)。在0℃攪拌該反應(yīng)物達一個小時，然后最多加熱到大約70℃過夜。然后，將該反應(yīng)物冷卻至室溫并用乙酸乙酯稀釋。用NaHCO3的飽和水溶液、水以及鹽水洗滌該有機混合物。在用硫酸鈉將其干燥后，濃縮這溶液。通過柱色譜用10-100％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫，然后通過制備性TLC用2％甲醇的二氯甲烷溶液洗脫，純化殘余物，從而得到1.9mg(0.4％)的黃色固體。MS m/z 404(M++1)。
實施例17用DEPC合成羧酰胺21(R2＝2-呋喃基，R3＝H，R4＝NH2，R5＝CO2CH2CH(-CH2CH2CH2(Me)N-)，X＝O)向DMF(20ml)中的羧酸19(0.25g，0.82mmol)和N，N，N’-三甲基乙二胺(0.14ml，1.08mmol)的混合物里，加入0.12ml(0.82mmol)的二乙基磷酰氰和三乙胺(0.11ml，0.82mmol)。在0℃攪拌該反應(yīng)達一小時，然后最多加熱到大約60℃過夜。然后，將該反應(yīng)冷卻至室溫并用乙酸乙酯稀釋。用NaHCO3的飽和水溶液、水以及鹽水洗滌該有機混合物。在用硫酸鎂將其干燥后，濃縮這溶液。通過柱色譜用0-10％甲醇的二氯甲烷溶液洗脫，然后通過制備性TLC用1％甲醇的二氯甲烷溶液洗脫，純化殘余物，從而得到3.3mg(10％)的黃色固體。MS m/z 391(M++1)。將產(chǎn)物溶于最少量的乙醚中，且用溶于乙醚的1.0M的HCl處理，得到鹽酸鹽。
實施例18用EDCI合成羧酰胺21(R2＝2-呋喃基，R3＝H，R4＝NH2，R5＝CON(-CH2CH2NMeCH2CH2-)，X＝O)
在室溫下，將DMF(8ml)中的羧酸19(0.300g，0.979mmol)、N-甲基哌嗪(0.295g，2.94mmol)、1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽(0.563g，2.94mmol)、1-羥基苯并三唑水合物(0.397g，2.94mmol)、三乙胺(0.298g，2.94mmol)的混合物攪拌過夜。然后，用水稀釋該混合物，且用乙酸乙酯萃取幾次。將合并的有機物用鹽水洗滌兩次，然后用硫酸鈉將其干燥。濃縮溶液，然后通過柱色譜純化，得到0.092g(2％)的固體。MS m/z 389(M++1)。用溶于乙醚的1.0M HCl處理該產(chǎn)物，而獲得鹽酸鹽。
實施例19經(jīng)由二溴鏈烷合成羧酸酯20(R2＝Ph，R3＝H，R4＝NH2，R5＝CO2CH2CH2CH2NMe2，X＝O)向羧酸19(0.100g，0.32mmol)的DMF(1.5ml)溶液里，加入礦物油中的60％的NaH分散體(0.013g，0.32mmol)。于室溫在10分鐘后，加入1，3-二溴丙烷(0.035ml，0.35mmol)，且在室溫攪拌這溶液17小時。在濃縮后，經(jīng)由柱色譜用40％乙酸乙酯的己烷溶液洗脫，純化殘余物，得到0.014g(9％)的黃色固體。MS m/z 437(M++1)。
向密封管中的所述黃色固體(0.014mg，0.03mmol)的溶液里，加入40％的二甲胺水溶液(0.5ml，3.0mmol)。將該管加熱到75℃達2小時，然后濃縮。通過柱色譜用0-10％甲醇的二氯甲烷溶液洗脫，純化殘余物，得到0.009g(70％)的黃色固體。MS m/z 402(M++1)。將產(chǎn)物溶于最少量的CH2Cl2中，且用溶于乙醚的1.0N HCl處理，得到鹽酸鹽。
按照在上面和在實施例1-19中概述的通用合成步驟，制備下面表1的化合物。表1


表2

III.生物學(xué)試驗及活性腺苷A2a受體的配體結(jié)合測定利用含有人A2a腺苷受體(PerkinElmer，RB-HA2a)的HEK293細胞的質(zhì)膜和放射性配體[3H]CGS21680(PerkinElmer，NET1021)，進行腺苷A2a受體的配體結(jié)合測定。用96-孔聚丙烯板，通過按總體積200μl地順序添加20μl 1∶20稀釋的膜、130μl含有[3H]CGS21680的測定緩沖液(50mM Tris·HCl，pH7.4，10mM MgCl2，1mM EDTA)、50μl用試驗緩沖液稀釋的化合物(4X)或溶媒對照，來建立測定。用80mM的NECA測定非特異性結(jié)合。在室溫下進行反應(yīng)2小時，然后，通過預(yù)先用含有0.3％聚乙烯亞胺的50mM Tris·HCl(pH7.4)浸泡的96-孔GF/C濾板，進行過濾。然后，用冷的50mM Tris·HCl(pH7.4)，洗滌板5次；將其干燥并在底部封口。每孔加30μl的微閃爍液(Microscintillation fluid)并密封頂部。針對[3H]，用Packard Topcount對所述板進行計數(shù)。用Microsoft Excel和GraphPad Prism程序，分析數(shù)據(jù)。(Varani，K.；Gessi，S.；Dalpiaz，A.；Borea，P.A.British Journal ofPharmacology，1996，117，1693)腺苷A2a受體功能測定將過量表達人腺苷A2a受體且包含cAMP誘導(dǎo)型β-半乳糖苷酶報道基因的CHO-K1細胞按40-50K/孔接種到96-孔組織培養(yǎng)板中，并培養(yǎng)兩天。在測定當天，用200μl測定培養(yǎng)基(F-12營養(yǎng)混合物/0.1％ BSA)洗滌細胞一次。對于激動劑測定，隨后添加腺苷A2a受體的激動劑NECA，且在37℃、5％ CO2中培養(yǎng)細胞5小時，然后終止反應(yīng)。關(guān)于拮抗劑測定，在室溫用拮抗劑溫育細胞5分鐘，繼之以添加50nM的NECA。然后在37℃、5％ CO2中培養(yǎng)細胞5小時；然后，通過用PBS洗滌細胞兩次，終止實驗。每孔加50μl的1X溶胞緩沖液(Promega，5X的儲備溶液，在使用前需要將其稀釋至1X)，并將板在-20℃冷凍。對于半乳糖苷酶的酶比色定量，則在室溫下融化板，且每孔加50μl的2X測定緩沖液(Promega)。讓其在37℃顯色達1小時或者直到適當?shù)男盘栵@現(xiàn)為止。然后用150μl的1M碳酸鈉停止反應(yīng)。在Vmax Machine(Molecular Devices)上于405nm對板進行數(shù)據(jù)測定。用Microsoft Excel和GraphPad Prism程序，分析數(shù)據(jù)。(Chen，W.B.；Shields，T.S.；Cone，R.D.Analytical Biochemistry，1995，226，349；Stiles，G.Journal ofBiological Chemistry，1992，267，6451)氟哌啶醇誘導(dǎo)的C57b1/6小鼠僵住癥研究在嚙齒動物房中，每籠兩只安置雄性成年C57b1/6小鼠(9-12周齡，來自ACE)。使室溫保持在64-79度，且濕度在30-70％，并按12小時照明/12小時黑暗周期進行室內(nèi)照明。在所述研究的那天，將小鼠轉(zhuǎn)移至研究室。按1.5mg/kg、7.5ml/kg，給所述小鼠皮下注射氟哌啶醇(Sigma H1512，用0.3％酒石酸配制成1.0mg/ml，然后用鹽水稀釋至0.2mg/ml)或溶媒。然后把小鼠放置在其所住籠中，可獲得水和食物。30分鐘后，將溶媒(鹽水中的0.3％的吐溫80)或化合物以10mg/kg、10ml/kg(化合物1mg/ml，用鹽水中的0.3％的吐溫80配制的，為獲得均勻懸浮液而超聲處理的)經(jīng)口給予所述小鼠。然后，將所述小鼠放置在其所住籠中，可獲得水和食物。在口服后1小時，進行所述僵住癥試驗。對于所述試驗，使用一種垂直的金屬絲柵(1.0cm的方格)。將所述小鼠放置在所述柵格上，且給幾秒鐘以安定下來，并記錄它們的不動時間，直到所述小鼠移動它們的后爪為止。溫和地將所述小鼠移開所述柵格，又把它們放回所述柵格；且再次數(shù)它們的不動時間。重復(fù)所述測定三次。將三次測量結(jié)果的平均值用于數(shù)據(jù)分析。當按10mg/kg經(jīng)口給藥時，化合物70對氟哌啶醇誘導(dǎo)的僵住癥顯示出87％的抑制，而化合物3對氟哌啶醇誘導(dǎo)的僵住癥顯示出90％的抑制。
表權(quán)利要求
1.式I或式II結(jié)構(gòu)的化合物或其可藥用鹽， 式中(a)R1選自(i)-COR5，其中R5選自H、任選取代的C1-8直鏈或支鏈烷基、任選取代的芳基和任選取代的芳基烷基；其中所述烷基、芳基和芳基烷基上的取代基選自C1-8烷氧基、苯基乙酰氧基、羥基、鹵素、對甲苯磺酰氧基、甲磺酰氧基、氨基、氰基、烷氧羰基或NR7PR8，其中R7和R8獨立選自氫、C1-8直鏈或支鏈烷基、C3-7環(huán)烷基、芐基、芳基或雜芳基，或者NR7R8結(jié)合在一起形成雜環(huán)或雜芳基；(ii)COOR5，其中R5的定義同上；(ii)氰基；(iii)-CONR9R10，其中R9和R10獨立選自H、C1-8直鏈或支鏈烷基、C3-7環(huán)烷基、三氟甲基、羥基、烷氧基、酰基、烷基羰基、羧基、芳基烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基；其中所述烷基、環(huán)烷基、烷氧基、?；?、烷基羰基、羧基、芳基烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基可被下述基團取代羧基、烷基、芳基、取代的芳基、雜環(huán)基、取代的雜環(huán)基、雜芳基、取代的雜芳基、異羥肟酸、氨磺酰、磺酰基、羥基、硫氫基、氨基、烷氧基或芳基烷基，或者R9和R10與所連接的氮結(jié)合在一起形成雜環(huán)或雜芳基；(v)任選取代的C1-8直鏈或支鏈烷基；其中所述烷基上的取代基選自C1-8烷氧基、苯基乙酰氧基、羥基、鹵素、對甲苯磺酰氧基、甲磺酰氧基、氨基、氰基、烷氧羰基、羧基、芳基、雜環(huán)基、雜芳基、磺?；⒘驓浠?、烷硫基或NR7R8，其中R7和R8的定義同上；(b)R2選自任選取代的烷基、任選取代的芳基、任選取代的雜芳基、任選取代的雜環(huán)基和任選取代的C3-7環(huán)烷基、C1-8烷氧基、芳氧基、C1-8烷基磺?；⒎蓟酋；⒎剂蚧?、C1-8烷硫基或-NR24R25，其中R24和R25獨立選自H、C1-8直鏈或支鏈烷基、芳基烷基、C3-7環(huán)烷基、羧基烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基，或者R24和R25與所述氮結(jié)合形成雜芳基或雜環(huán)基，(c)R3為1-4個獨立選自以下的基團氫、鹵基、C1-8直鏈或支鏈烷基、芳基烷基、C3-7環(huán)烷基、C1-8烷氧基、氰基、C1-4烷氧羰基、三氟甲基、C1-8烷基磺?；Ⅺu素、硝基、羥基、三氟甲氧基、C1-8羧酸酯基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基，-NR11R12，其中R11和R12獨立選自H、C1-8直鏈或支鏈烷基、芳基烷基、C3-7環(huán)烷基、羧基烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基，或者R10和R11與所述氮結(jié)合形成雜芳基或雜環(huán)基，-NR13COR14，其中R13選自氫或烷基，R14選自氫、烷基、取代的烷基、C1-3烷氧基、羧基烷基、芳基、芳基烷基、雜芳基、雜環(huán)基、R15R16N(CH2)p-或R15R16NCO(CH2)p-，其中R15和R16獨立選自H、OH、烷基和烷氧基，p為1-6的整數(shù)，其中所述烷基可被以下基團取代羧基、烷基、芳基、取代的芳基、雜環(huán)基、取代的雜環(huán)基、雜芳基、取代的雜芳基、異羥肟酸、氨磺酰、磺?；⒘u基、硫氫基、烷氧基或芳基烷基，或者R13和R14與所述羰基結(jié)合形成帶有羰基的雜環(huán)基；(d)R4選自氫、C1-6直鏈或支鏈烷基、芐基，其中所述烷基和芐基任選被一個或多個選自以下的基團取代C3-7環(huán)烷基、C1-8烷氧基、氰基、C1-4烷氧羰基、三氟甲基、C1-8烷基磺?；?、鹵素、硝基、羥基、三氟甲氧基、C1-8羧酸酯基、氨基、NR17R18、芳基和雜芳基，-OR17和-NR17R18，其中R17和R18獨立選自氫和任選取代的C1-6烷基或芳基；和(e)X選自C＝S、C＝O；CH2、CHOH、CHOR19；或CHNR20R21，其中R19、R20和R21選自任選取代的C1-8直鏈或支鏈烷基，其中烷基上的取代基選自C1-8烷氧基、羥基、鹵素、氨基、氰基或NR22R23，其中R22和R23獨立選自氫、C1-8直鏈或支鏈烷基、C3-7環(huán)烷基、芐基、芳基、雜芳基，或者NR22R23結(jié)合形成雜環(huán)或雜芳基；條件是，在式II化合物中，當R1為氰基時，則R2不是苯基。
2.權(quán)利要求1的式I化合物，其中R4為氨基。
3.權(quán)利要求1的式I化合物，其中R2為芳基或雜芳基。
4.權(quán)利要求1的式II化合物，其中R2為芳基或雜芳基。
5.權(quán)利要求4的化合物，其中R2為呋喃基或取代的呋喃基。
6.權(quán)利要求4的化合物，其中R1為COOR5，其中R5選自任選取代的C1-8直鏈或支鏈烷基。
7.權(quán)利要求1的化合物，其為2-氨基-4-呋喃-2-基-茚并[1，2-d]嘧啶-5-酮。
8.權(quán)利要求1的化合物，其為2-氨基-4-苯基-茚并[1，2-d]嘧啶-5-酮。
9.權(quán)利要求1的化合物，其為2-氨基-4-噻吩-2-基-茚并[1，2-d]嘧啶-5-酮。
10.權(quán)利要求1的化合物，其為2-氨基-4-(5-甲基-呋喃-2-基)-茚并[1，2-d]嘧啶-5-酮。
11.權(quán)利要求1的化合物，其為2，6-二氨基-4-呋喃-2-基-茚并[1，2-d]嘧啶-5-酮。
12.權(quán)利要求1的化合物，其為3-氨基-1-呋喃-2-基-9-氧代-9H-茚并[2，1-c]吡啶-4-甲腈。
13.權(quán)利要求1的化合物，其為3-氨基-1-呋喃-2-基-9-氧代-9H-茚并[2，1-c]吡啶-4-甲酸2-二甲氨基-乙酯。
14.權(quán)利要求1的化合物，其為3-氨基-1-苯基-9-氧代-9H-茚并[2，1-c]吡啶-4-甲酸2-二甲氨基-乙酯。
15.權(quán)利要求1的化合物，其為3-氨基1-呋喃-2-基-9-氧代-9H-茚并[2，1-c]吡啶-4-甲酸(2-二甲氨基-1-甲基-乙基)-酰胺。
16.權(quán)利要求1的化合物，其為3-氨基-1-呋喃-2-基-9-氧代-9H-茚并[2，1-c]吡啶-4-甲酸(2-二甲氨基-乙基)-甲基-酰胺。
17.權(quán)利要求1的化合物，其為3-氨基-1-呋喃-2-基-9-氧代-9H-茚并[2，1-c]吡啶-4-甲酸1-甲基-吡咯烷-2-基甲酯。
18.一種藥物組合物，其包含權(quán)利要求1的化合物和可藥用載體。
19.患有可通過在受治療者的合適細胞中拮抗腺苷A2a受體而得以緩解的疾病的受治療者的治療方法，其包括給予所述受治療者治療有效量的權(quán)利要求1的化合物。
20.可通過在受治療者的合適細胞中拮抗腺苷A2a受體而緩解的疾病的預(yù)防方法，包括在預(yù)期引起通過在受治療者的合適細胞中拮抗預(yù)防A2a受體而緩解的疾病的事件之前或之后，給予所述受治療者預(yù)防有效量的權(quán)利要求1的化合物。
21.權(quán)利要求19的方法，包括給予所述受治療者治療或預(yù)防有效量的權(quán)利要求18的藥物組合物。
22.權(quán)利要求20的方法，包括給予所述受治療者治療或預(yù)防有效量的權(quán)利要求18的藥物組合物。
23.權(quán)利要求19的方法，其中所述疾病為神經(jīng)變性性疾病或運動障礙。
24.權(quán)利要求19的方法，其中所述疾病選自帕金森病、亨廷頓舞蹈病、多發(fā)性系統(tǒng)萎縮、皮質(zhì)基底變性、早老性癡呆和老年性癡呆。
25.權(quán)利要求20的方法，其中所述疾病為神經(jīng)變性性疾病或運動障礙。
26.權(quán)利要求20的方法，其中所述疾病選自帕金森病、亨廷頓舞蹈病、多發(fā)性系統(tǒng)萎縮、皮質(zhì)基底變性、早老性癡呆和老年性癡呆。
全文摘要
本發(fā)明提供式(I)、式(II)的新的芳基茚并吡啶和芳基茚并嘧啶，式中R
文檔編號C07D405/12GK1878761SQ200380110761
公開日2006年12月13日 申請日期2003年10月3日 優(yōu)先權(quán)日2003年10月3日
發(fā)明者G·R·海因策爾曼, J·L·布林頓, K·C·魯珀特 申請人:奧索-麥克尼爾藥品公司