專利名稱：一種從鮮鹿茸提取胰島素樣生長因子(igf－1)的方法
技術領域：
本發(fā)明屬于一種從鹿茸中提取活性物質的方法，特別是涉及一種鮮鹿茸提取胰島素樣生長因子即IGF-1的方法。
背景技術：
鹿茸為梅花鹿或馬鹿的尚未骨化的幼角，幾千年來，鹿茸都被認為是一種名貴的滋補品?，F(xiàn)代藥物化學分析表明，鹿茸中含有多種生理活性成份，主要有磷脂、多肽、生物胺類化合物、前列腺素、維生素、氨基酸、無機元素、高不飽和脂肪酸、脂類和甾體類成份以及皮質醇等。隨著生物技術的快速發(fā)展，人們發(fā)現(xiàn)鹿茸中除了含有以上各種生理活性成份以外，還含有胰島素樣生長因子(IGF-1)、人生長激素(HGH)、促生長釋放因子(GHRF-6)、神經(jīng)生長因子(NGF)、表皮生長因子(EGF)、成纖維生長因子(FGF)等活性蛋白；這些物質都有著各自的功效，但又相互關聯(lián)；而IGF-1則有著突出的作用。
在傳統(tǒng)的鹿茸加工過程中，鹿茸要經(jīng)過煮炸、烘干等步驟，高溫會使其中的IGF-1等活性蛋白變性而失去生理功能；通常人們對鹿茸的利用往往是將其泡在高酒精含量的酒中，而酒精作為一種有機溶劑也會使蛋白變性。因此在鹿茸的傳統(tǒng)加工過程中及一般利用時，IGF-1等活性蛋白都會被破壞，從而大大降低了鹿茸的應用價值，造成很大的資源浪費。目前還沒有一種較好的辦法將IGF-1從鹿茸中提取出來以供人們有效利用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明針對上述現(xiàn)有技術存在的不足，提出了一種從鹿茸中提取IGF-1的方法，該方法工藝合理、可行，并能保持IGF-1的活性。
本發(fā)明的技術方案是一種從鮮鹿茸提取胰島素樣生長因子(IGF-1)的方法，包括切片、低溫勻漿、超聲波處理、高速離心分離、超濾、冷凍干燥步驟(1)切片用切片機將鮮鹿茸切成薄片；(2)低溫勻漿將鮮鹿茸薄片放入勻漿機中勻漿，勻漿過程可加入適量的預冷的去離子水，使整個勻漿過程保持低溫，勻漿操作應進行至勻漿中沒有大的組織塊才結束；
(3)超聲波處理將勻漿物用超聲波破碎，使細胞破裂，超聲波處理過程中，勻漿物應置于冰浴中；(4)高速離心分離勻漿物經(jīng)超聲波處理后進行高速離心分離，取上清液；在沉淀中加入一定量的去離子水，重懸后再次進行高速離心分離，取上清液；然后可再重復一次；(5)超濾混合各次離心分離所得上清液，用膜進行超濾，去除小分子物質和大分子物質，并對上清液進行濃縮，得濃縮液；(6)冷凍干燥先將超濾所得濃縮液冷凍，然后在超低溫下用冷凍干燥機進行冷凍干燥。
所述鮮鹿茸應當在新鮮割下后盡快存放于-20℃冷藏。
所述切片步驟(1)應當在從冷藏處取出后立即進行，操作的溫度應當在0℃～30℃內(nèi)；鮮鹿茸切片的厚度為1mm～5mm。
所述低溫勻漿步驟(2)可以將勻漿機置于冷庫或冷柜中進行。
在所述高速離心分離步驟(4)中離心的速度為5000rpm～20000rpm，離心的時間10min～30min；在沉淀中加入的去離子水的量為其體積的2～5倍。
所述超濾步驟(5)所采用的膜是1000Da～100000Da的膜。
在所述冷凍干燥步驟(6)中將濃縮液冷凍的溫度為-20℃，冷凍干燥機的工作溫度為-30℃～-50℃，干燥后產(chǎn)品的含水量為3％～10％。
為提高IGF-1收率和含量，在上述方法的超聲波處理步驟(3)與高速離心分離步驟(4)之間可增加低溫浸提步驟；所述低溫浸提步驟是將經(jīng)超聲波處理后的勻漿物靜置于0℃～4℃的低溫下0～24hr。
應用本發(fā)明技術從鹿茸中提取IGF-1，活性保持良好，具有很高的營養(yǎng)價值，可用作抗衰老保健品的原料。
具體實施例方式
實施例1稱取1kg鹿茸，切片后用勻漿機在4℃進行勻漿，然后在冰浴條件下，加入2L預冷的去離子水，混勻后進行超聲波破碎。接著將此產(chǎn)物以5000rpm離心20min；沉淀物中再加入2L去離子水，離心；再重復上述步驟一次?；旌?次離心上清，用截留分子量為100000Da的超濾膜進行超濾，濾出液再用1000Da的超濾膜超濾，濃縮到1L的體積。將濃縮液進行冷凍干燥，得到IGF-1成品40克。這種方法得到的產(chǎn)品中，除具有較高含量的IGF-1外，還有EGF、FGF等各種活性蛋白。
實施例2稱取1kg鹿茸，切片后用勻漿機在4℃進行勻漿，然后在冰浴條件下，加入2L預冷的去離子水，混勻后進行超聲波破碎。然后放置在4℃浸提24小時。接著將此產(chǎn)物以5000rpm離心20min；沉淀物中再加入2L去離子水，離心；再重復上述步驟一次。混合3次離心上清，用截留分子量為100000Da的超濾膜進行超濾，濾出液再用1000Da的超濾膜超濾，濃縮到1L的體積。將濃縮液進行冷凍干燥，得到IGF-1成品45克。這種方法得到的產(chǎn)品中，IGF-1的含量較高。
實施例3稱取1kg鹿茸，切片后用勻漿機在4℃進行勻漿，然后在冰浴條件下，加入2L預冷的去離子水，混勻后進行超聲波破碎。接著將此產(chǎn)物5000rpm離心20min；沉淀物中再加入2L去離子水，離心；再重復上述步驟一次。混合3次離心上清，用截留分子量為10000Da的超濾膜進行超濾，濾出液再用1000Da的超濾膜超濾，濃縮到1L的體積。將濃縮液進行冷凍干燥，得到IGF-1成品20克。這種方法由于使用截留分子量為10000Da的超濾膜進行超濾，去除了更多的大分子物質，得到的產(chǎn)品中IGF-1的含量更高。
權利要求
1.一種從鮮鹿茸提取胰島素樣生長因子(IGF-1)的方法，其特征在于包括切片、低溫勻漿、超聲波處理、高速離心分離、超濾、冷凍干燥步驟(1)切片用切片機將鮮鹿茸切成薄片；(2)低溫勻漿將鮮鹿茸薄片放入勻漿機中勻漿，勻漿過程可加入適量的預冷的去離子水，使整個勻漿過程保持低溫，勻漿操作應進行至勻漿中沒有大的組織塊才結束；(3)超聲波處理將勻漿物用超聲波破碎，使細胞破裂，超聲波處理過程中，勻漿物應置于冰浴中；(4)高速離心分離勻漿物經(jīng)超聲波處理后進行高速離心分離，取上清液；在沉淀中加入一定量的去離子水，重懸后再次進行高速離心分離，取上清液；然后可再重復一次；(5)超濾混合各次離心分離所得上清液，用膜進行超濾，去除小分子物質和大分子物質，并對上清液進行濃縮，得濃縮液；(6)冷凍干燥先將超濾所得濃縮液冷凍，然后在超低溫下用冷凍干燥機進行冷凍干燥。
2.如權利要求1所述的一種從鮮鹿茸提取胰島素樣生長因子(IGF-1)的方法，其特征在于所述鮮鹿茸應當在新鮮割下后盡快存放于-20℃冷藏。
3.如權利要求1所述的一種從鮮鹿茸提取胰島素樣生長因子(IGF-1)的方法，其特征在于所述切片步驟(1)應當在從冷藏處取出后立即進行，操作的溫度應當在0℃～30℃內(nèi)；鮮鹿茸切片的厚度為1mm～5mm。
4.如權利要求1所述的一種從鮮鹿茸提取胰島素樣生長因子(IGF-1)的方法，其特征在于所述低溫勻漿步驟(2)可以將勻漿機置于冷庫或冷柜中進行。
5.如權利要求1所述的一種從鮮鹿茸提取胰島素樣生長因子(IGF-1)的方法，其特征在于在所述高速離心分離步驟(4)中離心的速度為5000rpm～20000rpm，離心的時間10min～30min；在沉淀中加入的去離子水的量為其體積的2～5倍。
6.如權利要求1所述的一種從鮮鹿茸提取胰島素樣生長因子(IGF-1)的方法，其特征在于所述超濾步驟(5)所采用的膜是1000Da～100000Da的膜。
7.如權利要求1所述的一種從鮮鹿茸提取胰島素樣生長因子(IGF-1)的方法，其特征在于在所述冷凍干燥步驟(6)中將濃縮液冷凍的溫度為-20℃，冷凍干燥機的工作溫度為-30℃～-50℃，干燥后產(chǎn)品的含水量為3％～10％。
8.如權利要求1所述的一種從鮮鹿茸提取胰島素樣生長因子(IGF-1)的方法，其特征在于在所述超聲波處理步驟(3)與所述高速離心分離步驟(4)之間可增加低溫浸提步驟。
9.如權利要求8所述的一種從鮮鹿茸提取胰島素樣生長因子(IGF-1)的方法，其特征在于所述低溫浸提步驟是將經(jīng)超聲波處理后的勻漿物靜置于0℃～4℃的低溫下0～24hr。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種鮮鹿茸提取胰島素樣生長因子即IGF－1的方法。鹿茸中含有多種生理活性成分以及胰島素樣生長因子(IGF－1)和表皮生長因子(EGF)、成纖維生長因子(FGF)等活性蛋白。在鹿茸的傳統(tǒng)加工過程中及一般利用時，IGF－1等活性蛋白都會被破壞，從而大大降低了鹿茸的應用價值，造成很大的資源浪費。本發(fā)明提出了一種從鹿茸中提取IGF－1的方法，包括切片、低溫勻漿、超聲波處理、高速離心分離、超濾、冷凍干燥等步驟。應用本發(fā)明技術從鹿茸中提取IGF－1，活性保持良好，具有很高的營養(yǎng)價值，可用作抗衰老保健品的原料。
文檔編號C07K1/00GK1603344SQ200410053399
公開日2005年4月6日 申請日期2004年8月4日 優(yōu)先權日2004年8月4日
發(fā)明者朱成鋼, 王利忠 申請人:王利忠