專利名稱：從葛根中提取分離蛋白質(zhì)的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種從葛根中提取分離蛋白質(zhì)的方法。
(二)技術(shù)背景在國內(nèi)，葛根種植范圍相當(dāng)廣泛，基本上各個(gè)省份均有種植。葛根為藥食兩用植物，味甘、性平，具有清熱解毒的功效，其葛根異黃酮對高血壓、冠心病等心血管疾病有顯著療效。目前國內(nèi)外對葛根的提取只是涉及了對原料中的葛根異黃酮和葛根淀粉的研究，其中幾乎全部的蛋白質(zhì)卻隨二次原料被排放掉，造成了蛋白質(zhì)資源的極大浪費(fèi)。從全球的營養(yǎng)調(diào)查結(jié)果表明，膳食中的蛋白質(zhì)的量與質(zhì)的不足仍是當(dāng)今世界特別是發(fā)展中國家最大的營養(yǎng)問題，開發(fā)和利用新的蛋白資源仍是食品科學(xué)領(lǐng)域中重要的研究課題。葛根蛋白含有8種人體必需氨基酸賴氨酸、纈氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、蘇氨酸、甲硫氨酸、組氨酸、精氨酸。與其他植物蛋白相比，葛根蛋白又具有一定的藥用價(jià)值，藥食兩用。但葛根蛋白的提取研究至今無人報(bào)道，因此，開發(fā)葛根蛋白資源意義重大。

發(fā)明內(nèi)容為了充分發(fā)掘葛根中的蛋白資源，本發(fā)明目的在于提供一種從葛根中提取分離蛋白質(zhì)的方法。本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是一種從葛根中提取分離蛋白質(zhì)的方法，其特征在于包括以下步驟(1)將干凈的葛根進(jìn)破碎機(jī)加水破碎，制得葛根淀粉漿液；(2)步驟(1)制得淀粉漿液經(jīng)洗滌篩分得到粗淀粉，粗淀粉經(jīng)旋分分離得到葛根粗蛋白溶液；
(3)用堿性液調(diào)節(jié)葛根粗蛋白溶液pH至8～10，在25～50℃保持20～60分鐘，將溶液分離得固相(I)和上清液(I)；(4)將所得上清液用酸調(diào)pH至3.5～5.0后，沉淀，分離去上清液，保留沉積物；(5)用pH為8.0～10.0的堿溶液調(diào)節(jié)步驟(4)所得沉積物pH至6.5～7.5，制得葛根分離蛋白。
步驟(3)和(4)所述的分離均可采用離心分離或其它可以接受的化學(xué)分離方法。
步驟(3)為堿溶浸提的過程，所述的堿性液優(yōu)選為下列之一的溶液①亞硫酸鈉，②亞硫酸氫鈉，③氫氧化鈉，堿性液將粗蛋白中蛋白成份提取，提取時(shí)的優(yōu)選條件是在30～50℃保持30～40分鐘。為了提高原料利用率，優(yōu)選將步驟(3)中得到的固相(I)加入水或堿性液洗滌，經(jīng)分離得固相(II)和上清液(II)，上清液(II)用于步驟(4)。此時(shí)分離可以用超濾的方法。
步驟(5)中所述的堿溶液優(yōu)選為氫氧化鈉溶液，pH優(yōu)選為9.0。
作為對本發(fā)明得到的蛋白質(zhì)產(chǎn)物的進(jìn)一步處理，所述步驟(5)得到的葛根分離蛋白還經(jīng)均質(zhì)殺菌、噴霧干燥后，以得到葛根分離蛋白成品。其中所述的均質(zhì)殺菌優(yōu)選為瞬時(shí)殺菌，溫度為120～140℃。
應(yīng)用凱氏定氮法測定制得蛋白成品中的蛋白質(zhì)含量，采用下式計(jì)算x＝(V-V0)*C(HCl)*14*F/m注x樣品中蛋白質(zhì)的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，％(g/ml)V0滴定空白用去的鹽酸液毫升數(shù)；V滴定樣品用去的鹽酸液毫升數(shù)；
C鹽酸標(biāo)準(zhǔn)液濃度；m樣品質(zhì)量(g)；F蛋白質(zhì)換算系數(shù)(6.25)。
本發(fā)明工藝簡單易行，生產(chǎn)成本低，宜于實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)，可以從葛根中提取出有價(jià)值的植物蛋白，經(jīng)濟(jì)效益、社會(huì)效益顯著，為葛根資源的綜合利用提供了一條新途徑。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步說明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍并不限于此。
實(shí)施例1葛根分離蛋白及其成品的制備(1)將干凈的葛根進(jìn)破碎機(jī)加水破碎，制得葛根淀粉漿液；(2)步驟(1)制得淀粉漿液經(jīng)洗滌篩分得到粗淀粉，粗淀粉經(jīng)旋分分離得到葛根粗蛋白溶液；(3)用亞硫酸鈉溶液調(diào)節(jié)葛根粗蛋白溶液pH至10，在50℃保持40分鐘，將溶液離心分離得固相和上清液；(4)將所得上清液用稀鹽酸調(diào)pH至5.0后，沉淀，離心分離去上清液，保留沉積物；(5)用pH為9.0的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)步驟(4)所得沉積物pH至7.0，制得葛根分離蛋白。
葛根分離蛋白在120℃經(jīng)瞬時(shí)殺菌，噴霧干燥后，得到葛根分離蛋白成品。經(jīng)凱氏定氮法測定制得蛋白成品中的蛋白質(zhì)含量為71％。
實(shí)施例2葛根分離蛋白及其成品的制備
(1)將干凈的葛根進(jìn)破碎機(jī)加水破碎，制得葛根淀粉漿液；(2)步驟(1)制得淀粉漿液經(jīng)洗滌篩分得到粗淀粉，粗淀粉經(jīng)旋分分離得到葛根粗蛋白溶液；(3)用亞硫酸鈉溶液調(diào)節(jié)葛根粗蛋白溶液pH至9，在45℃保持40分鐘，將溶液離心分離得固相和上清液；(4)將所得上清液用稀鹽酸調(diào)pH至4.5后，沉淀，離心分離去上清液，保留沉積物；(5)用pH為9.0的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)步驟(4)所得沉積物pH至7.0，制得葛根分離蛋白。
葛根分離蛋白在120℃經(jīng)瞬時(shí)殺菌，噴霧干燥后，得到葛根分離蛋白成品。經(jīng)凱氏定氮法測定制得蛋白成品中的蛋白質(zhì)含量為72％。
實(shí)施例3葛根分離蛋白及其成品的制備(1)將干凈的葛根進(jìn)破碎機(jī)加水破碎，制得葛根淀粉漿液；(2)步驟(1)制得淀粉漿液經(jīng)洗滌篩分得到粗淀粉，粗淀粉經(jīng)旋分分離得到葛根粗蛋白溶液；(3)用亞硫酸鈉溶液調(diào)節(jié)葛根粗蛋白溶液pH至8，在40℃保持35分鐘，將溶液離心分離得固相和上清液；(4)將所得上清液用稀鹽酸調(diào)pH至5.0后，沉淀，離心分離去上清液，保留沉積物；(5)用pH為9.0的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)步驟(4)所得沉積物pH至6.8，制得葛根分離蛋白。
葛根分離蛋白在125℃經(jīng)瞬時(shí)殺菌，噴霧干燥后，得到葛根分離蛋白成品。經(jīng)凱氏定氮法測定制得蛋白成品中的蛋白質(zhì)含量為74％。
實(shí)施例4葛根分離蛋白及其成品的制備(1)將干凈的葛根進(jìn)破碎機(jī)加水破碎，制得葛根淀粉漿液；(2)步驟(1)制得淀粉漿液經(jīng)洗滌篩分得到粗淀粉，粗淀粉經(jīng)旋分分離得到葛根粗蛋白溶液；(3)用亞硫酸鈉溶液調(diào)節(jié)葛根粗蛋白溶液pH至8.5，在35℃保持45分鐘，將溶液離心分離得固相和上清液；(4)將所得上清液用稀鹽酸調(diào)pH至3.5后，沉淀，離心分離去上清液，保留沉積物；(5)用pH為8.5的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)步驟(4)所得沉積物pH至7.1，制得葛根分離蛋白。
葛根分離蛋白在125℃經(jīng)瞬時(shí)殺菌，噴霧干燥后，得到葛根分離蛋白成品。經(jīng)凱氏定氮法測定制得蛋白成品中的蛋白質(zhì)含量為75％。
實(shí)施例5葛根分離蛋白及其成品的制備(1)將干凈的葛根進(jìn)破碎機(jī)加水破碎，制得葛根淀粉漿液；(2)步驟(1)制得淀粉漿液經(jīng)洗滌篩分得到粗淀粉，粗淀粉經(jīng)旋分分離得到葛根粗蛋白溶液；(3)用亞硫酸氫鈉溶液調(diào)節(jié)葛根粗蛋白溶液pH至10，在30℃保持40分鐘，將溶液離心分離得固相和上清液；(4)將所得上清液用稀鹽酸調(diào)pH至4.0后，沉淀，離心分離去上清液，保留沉積物；(5)用pH為9.5的氫氧化鉀溶液調(diào)節(jié)步驟(4)所得沉積物pH至7.0，制得葛根分離蛋白。
葛根分離蛋白在130℃經(jīng)瞬時(shí)殺菌，噴霧干燥后，得到葛根分離蛋白成品。經(jīng)凱氏定氮法測定制得蛋白成品中的蛋白質(zhì)含量為71％。
實(shí)施例6葛根分離蛋白及其成品的制備(1)將干凈的葛根進(jìn)破碎機(jī)加水破碎，制得葛根淀粉漿液；(2)步驟(1)制得淀粉漿液經(jīng)洗滌篩分得到粗淀粉，粗淀粉經(jīng)旋分分離得到葛根粗蛋白溶液；(3)用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)葛根粗蛋白溶液pH至9.5，在40℃保持35分鐘，將溶液離心分離得固相和上清液；(4)將所得上清液用稀鹽酸調(diào)pH至4.5后，沉淀，離心分離去上清液，保留沉積物；(5)用pH為9.0的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)步驟(4)所得沉積物pH至7.0，制得葛根分離蛋白。
葛根分離蛋白在130℃經(jīng)瞬時(shí)殺菌，噴霧干燥后，得到葛根分離蛋白成品。經(jīng)凱氏定氮法測定制得蛋白成品中的蛋白質(zhì)含量為69％。
實(shí)施例7葛根分離蛋白及其成品的制備(1)將干凈的葛根進(jìn)破碎機(jī)加水破碎，制得葛根淀粉漿液；(2)步驟(1)制得淀粉漿液經(jīng)洗滌篩分得到粗淀粉，粗淀粉經(jīng)旋分分離得到葛根粗蛋白溶液；(3)用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)葛根粗蛋白溶液pH至9.5，在50℃保持20分鐘，將溶液離心分離得固相和上清液；(4)將所得上清液用稀鹽酸調(diào)pH至4.5后，沉淀，離心分離去上清液，保留沉積物；(5)用pH為9.0的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)步驟(4)所得沉積物pH至7.0，制得葛根分離蛋白。
葛根分離蛋白在130℃經(jīng)瞬時(shí)殺菌，噴霧干燥后，得到葛根分離蛋白成品。經(jīng)凱氏定氮法測定制得蛋白成品中的蛋白質(zhì)含量為70％。
實(shí)施例8葛根分離蛋白及其成品的制備(1)將干凈的葛根進(jìn)破碎機(jī)加水破碎，制得葛根淀粉漿液；(2)步驟(1)制得淀粉漿液經(jīng)洗滌篩分得到粗淀粉，粗淀粉經(jīng)旋分分離得到葛根粗蛋白溶液；(3)用氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)葛根粗蛋白溶液pH至9.5，在25℃保持60分鐘，將溶液離心分離得固相和上清液；(4)將所得上清液用稀鹽酸調(diào)pH至4.5后，沉淀，離心分離去上清液，保留沉積物；(5)用pH為9.0的氫氧化鉀溶液調(diào)節(jié)步驟(4)所得沉積物pH至7.0，制得葛根分離蛋白。
葛根分離蛋白在130℃經(jīng)瞬時(shí)殺菌，噴霧干燥后，得到葛根分離蛋白成品。經(jīng)凱氏定氮法測定制得蛋白成品中的蛋白質(zhì)含量為72％。
權(quán)利要求
1.一種從葛根中提取分離蛋白質(zhì)的方法，其特征在于包括以下步驟(1)將干凈的葛根進(jìn)破碎機(jī)加水破碎，制得葛根淀粉漿液；(2)步驟(1)制得淀粉漿液經(jīng)洗滌篩分得到粗淀粉，粗淀粉經(jīng)旋分分離得到葛根粗蛋白溶液；(3)用堿性液調(diào)節(jié)葛根粗蛋白溶液pH至8～10，在25～50℃保持20～60分鐘，將溶液分離得固相(I)和上清液(I)；(4)將所得上清液用酸調(diào)pH至3.5～5.0后，沉淀，分離去上清液，保留沉積物；(5)用pH為8.0～10.0的堿溶液調(diào)節(jié)步驟(4)所得沉積物pH至6.5～7.5，制得葛根分離蛋白。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從葛根中提取分離蛋白質(zhì)的方法，其特征在于步驟(3)中所述的分離為離心分離。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從葛根中提取分離蛋白質(zhì)的方法，其特征在于步驟(4)中所述的分離為離心分離。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的從葛根中提取分離蛋白質(zhì)的方法，其特征在于所述的步驟(3)中得到的固相(I)加入水或堿性液洗滌，經(jīng)分離得固相(II)和上清液(II)，上清液(II)用于步驟(4)。
5.根據(jù)權(quán)利要求1～4之一所述的從葛根中提取分離蛋白質(zhì)的方法，其特征在于所述的堿性液為下列之一的溶液①亞硫酸鈉，②亞硫酸氫鈉，③氫氧化鈉。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的從葛根中提取分離蛋白質(zhì)的方法，其特征在于所述步驟(5)中氫氧化鈉溶液pH為9.0。
7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的從葛根中提取分離蛋白質(zhì)的方法，其特征在于所述的步驟(3)為用堿性液調(diào)節(jié)葛根粗蛋白溶液pH至8～10，在30～50℃保持30～40分鐘，將溶液分離得固相(I)和上清液(I)。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的從葛根中提取分離蛋白質(zhì)的方法，其特征在于步驟(5)中所述的堿溶液為氫氧化鈉溶液。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種從葛根中提取分離蛋白質(zhì)的方法，包括以下步驟將干凈的葛根進(jìn)破碎機(jī)加水破碎，制得葛根淀粉漿液；淀粉漿液經(jīng)洗滌篩分得到粗淀粉，粗淀粉經(jīng)旋分分離得到葛根粗蛋白溶液；用堿性液調(diào)節(jié)葛根粗蛋白溶液pH至8～10，在25～50℃保持20～60分鐘，將溶液分離得固相和上清液；將上清液用酸調(diào)pH至3.5～5.0后，沉淀，分離去上清液，保留沉積物；用pH為8.0～10.0的堿溶液調(diào)節(jié)沉積物pH至6.5～7.5，制得葛根分離蛋白。本發(fā)明工藝簡單易行，生產(chǎn)成本低，宜于實(shí)現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)，可以從葛根中提取出有價(jià)值的植物蛋白，經(jīng)濟(jì)效益、社會(huì)效益顯著，為葛根資源的綜合利用提供了一條新途徑。
文檔編號C07K1/00GK1765923SQ20041006774
公開日2006年5月3日 申請日期2004年10月29日 優(yōu)先權(quán)日2004年10月29日
發(fā)明者蘇為科, 王燕 申請人:浙江工業(yè)大學(xué)