專利名稱：阻礙二肽基肽酶Ⅳ的化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及具有優(yōu)異的二肽基肽酶IV(以下簡(jiǎn)稱為“DPP-IV”)地阻礙作用、對(duì)二型糖尿病的治療或預(yù)防、二型糖尿病附帶的合并癥的治療或預(yù)防、或其它的與DPP-IV有關(guān)的病情的治療有用的化合物或其醫(yī)藥上所允許的鹽的化合物。
背景技術(shù)：
DPP-IV是從多肽鏈的N末端特異性水解Xaa-Pro或Xaa-Ala(Xaa可以是任意的氨基酸)的二肽的絲氨酸蛋白水解酶的一種。DPP-IV(也稱為CD26)在生物體內(nèi)的作用、與疾病的關(guān)系還并不完全清楚，但有各種報(bào)告。尤其是，作為與胰高血糖素樣肽1(以下簡(jiǎn)記為GLP-1)的惰性化有關(guān)的酶的作用最近倍受注目。
GLP-1是單獨(dú)時(shí)不誘導(dǎo)胰島素分泌而具有增強(qiáng)由糖引起的胰島素分泌的作用的肽激素。因此，能夠期望降低低血糖的危險(xiǎn)性、促進(jìn)對(duì)應(yīng)于血糖濃度的胰島素分泌。再者，也有暗示GLP-1具有抑制攝食作用的報(bào)告。但是，因?yàn)镚LP-1被DPP-IV迅速分解，所以GLP-1本身難以作為藥劑。因此，對(duì)GLP-1的肽類似物進(jìn)行了研究，但都是注射劑而不是經(jīng)口制劑。
因此所考慮的是，通過(guò)阻礙作為分解酶的DPP-IV，可抑制GLP-1的分解，提高GLP-1的作用。這是因?yàn)橥ㄟ^(guò)經(jīng)口投給DPP-IV阻礙劑，可維持GLP-1的體液中濃度，利用該GLP-1的作用，預(yù)防或治療糖尿病等特別是二型糖尿病。人們也期望這樣的治療法對(duì)因被破壞的耐糖能力而引起或加重的其它疾病例如過(guò)血糖(飯后過(guò)血糖)、高胰島素血癥、糖尿病合并癥(腎障礙、神經(jīng)障礙等)、脂質(zhì)代射異常、肥胖等的預(yù)防或治療效果。而且人們也期望GLP-1通過(guò)增強(qiáng)攝食抑制作用而對(duì)期待改善的疾病例如吃得過(guò)多、肥胖等的預(yù)防或治療效果。
另一方面，就DPP-IV的作用而言，除此之外，還報(bào)告有神經(jīng)肽的分解、T細(xì)胞的活性化、對(duì)轉(zhuǎn)移性腫瘤細(xì)胞的內(nèi)皮的粘接、HIV病毒對(duì)淋巴球的侵入等。再者，就與DPP-IV有關(guān)的實(shí)際知識(shí)而言，已知的是提高了風(fēng)濕病患者的末梢血T細(xì)胞的DPP-IV陽(yáng)性率和在腎炎患者的尿中DPP-IV活性高。因此，也期望著阻礙DPP-IV的物質(zhì)對(duì)自身免疫疾病(例如關(guān)節(jié)炎、慢性間接風(fēng)濕病)、骨質(zhì)疏松、后天性免疫不全綜合征(AIDS)、移植器官組織的排異反應(yīng)等具有預(yù)防或治療效果。
已有關(guān)于DPP-IV阻礙藥的專利申請(qǐng)。WO02/51836、WO01/96295、US20020193390、US6011155以及特表平9-509921號(hào)中公開了2-氰基吡咯烷衍生物，WO97/40832中公開了氨基?；邕蛲轷?thiazolidide)衍生物。另外，在“Annual Report in Medicinal Chemistry第36卷、第191-200頁(yè)、2001年”中，除上述化合物組以外，還報(bào)告了作為肽衍生物的氨基?；量┩轷?pyrrolidide)衍生物、二肽膦酸酯衍生物、二肽硼酸衍生物、四氫異喹啉衍生物、環(huán)狀肽衍生物、或者作為非肽衍生物的N-苯基酞酰亞胺衍生物、N-苯基均酞酰亞胺衍生物、異喹啉衍生物。
發(fā)明內(nèi)容
迄今為止，已報(bào)告了許多DPP-IV阻礙藥，但任一種化合物在阻礙活性、穩(wěn)定性、安全性方面都不能說(shuō)充分，還沒(méi)有可滿足作為醫(yī)藥品的阻礙藥。因此，人們期望開發(fā)出一種因DPP-IV阻礙作用而具有治療或預(yù)防效果且可充分滿足作為醫(yī)藥品的化合物。
本發(fā)明人等鑒于上述問(wèn)題點(diǎn)，以開發(fā)出新的DPP-IV阻礙藥為目的而進(jìn)行了專心研究。其結(jié)果是，本發(fā)明人等發(fā)現(xiàn)側(cè)鏈具有適當(dāng)?shù)氖杷缘亩h(huán)式環(huán)特別是二環(huán)式雜環(huán)基的用下述通式表示的化合物具有強(qiáng)力的DPP-IV阻礙活性，而且在提高其穩(wěn)定性方向上進(jìn)行化合物展開，從而完成了本發(fā)明。
即，本發(fā)明提供一種用以下的式(I)表示的化合物或作為其醫(yī)藥上所允許的鹽的化合物，
(式中，R1、R2同時(shí)或分別表示氫原子、可被取代的C1-6烷基或-COOR5，或，用R1和R2和根部的碳原子表示三～六元的環(huán)烷基，而且，R5表示氫原子或可被取代的C1-6烷基，R3表示氫原子或可被取代的C6-10芳基，R4表示氫原子或氰基，D表示-CONR6-、-CO-或-NR6CO-，R6表示氫原子或可被取代的C1-6烷基，E表示-(CH2)m-(m為1～3的整數(shù))、-CH2OCH2-或-SCH2-，n表示0～3的整數(shù)，A表示可被取代的二環(huán)式雜環(huán)基或二環(huán)式烴基。)，這些化合物在本說(shuō)明書中以后稱為“本發(fā)明化合物”。
本發(fā)明還提供一種以上述本發(fā)明化合物為有效成份的DPP-IV阻礙劑。該DPP-IV阻礙劑成為通過(guò)阻礙DPP-IV活性而期待改善病情的疾病例如糖尿病(特別是二型糖尿病)、糖尿病合并癥等的預(yù)防或治療劑。
具體實(shí)施例方式
以下更詳細(xì)地說(shuō)明本發(fā)明的DPP-IV阻礙劑。本發(fā)明化合物是用下述式(I)表示的化合物或其醫(yī)藥上所允許的鹽。
(式中，R1、R2同時(shí)或分別表示氫原子、可被取代的C1-6烷基或-COOR5，或，用R1和R2和根部的碳原子表示三～六元的環(huán)烷基，而且，R5表示氫原子或可被取代的C1-6烷基，R3表示氫原子或可被取代的C6-10芳基，R4表示氫原子或氰基，D表示-CONR6-、-CO-或-NR6CO-，R6表示氫原子或可被取代的C1-6烷基，E表示-(CH2)m-(m為1～3的整數(shù))、-CH2OCH2-或-SCH2-，n表示0～3的整數(shù)，A表示可被取代的二環(huán)式雜環(huán)基或二環(huán)式烴基。)。以下更詳細(xì)地說(shuō)明本說(shuō)明書中所使用的各記號(hào)。
所謂可被取代的C1-6烷基是指C1-6烷基的任意的(所謂“任意的”也包括多個(gè)的情形，以后相同。)氫原子可以被鹵原子(例如氟、氯、溴、碘原子)、羰基、硝基、氰基、苯基、-OR14、-NR15R16、-OCOR17、NHCOR18、-NHS(O2)R19、-S(O2)NR20R21(這里，R14、R17、R18、R19表示氫原子、C1-6烷基、苯基或芐基，R15、R16、R20、R21同時(shí)或分別表示氫原子、C1-6烷基或苯基，R15和R16、或R20和R21可形成3～6元的脂環(huán)式環(huán))等取代。就C1-6烷基而言，具體地可舉出甲基、乙基、丙基、異丙基、環(huán)丙基、丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、環(huán)丁基、戊基、異戊基、新戊基、叔戊基、環(huán)戊基、己基、環(huán)己基等直鏈或支鏈狀或環(huán)狀烷基。其中，優(yōu)選為C1-3烷基。
所謂可被取代的C1-6烷氧基是指C1-6烷氧基的任意的氫原子可以被鹵原子(例如氟、氯、溴、碘原子)、羰基、硝基、氰基、苯基、-OR14、-NR15R16、-OCOR17、NHCOR18、-NHS(O2)R19、-S(O2)NR20R21(這里，R14、R15、R16、R17、R18、R19、R20、R21與上述相同)等取代。就C1-6烷氧基而言，具體地可舉出甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、環(huán)丙氧基、丁氧基、異丁氧基、仲丁氧基、叔丁氧基、環(huán)丁氧基、戊氧基、異戊氧基、新戊氧基、叔戊氧基、環(huán)戊氧基、己氧基、環(huán)己氧基等直鏈或支鏈狀或環(huán)狀烷氧基。其中，優(yōu)選為C1-3烷氧基。
所謂可被取代的C6-10芳基是指芳基環(huán)上的任意的氫原子可以被C1-6烷基、鹵原子(例如氟、氯、溴、碘原子)、羰基、硝基、氰基、苯基、-OR14、-NR15R16、-OCOR17、NHCOR18、-NHS(O2)R19、-S(O2)NR20R21(這里，R14、R15、R16、R17、R18、R19、R20、R21與上述相同)等取代。就芳基而言，可優(yōu)選舉出苯基、萘基、或在六元環(huán)與五、六或七元環(huán)縮合的二環(huán)式基中至少一個(gè)環(huán)是芳香環(huán)的基(例如茚滿基等)。
所謂可被取代的二環(huán)式雜環(huán)基是指二環(huán)式雜環(huán)基的環(huán)上的任意的氫原子可以由可被取代的C1-6烷基、可被取代的C1-6烷氧基、鹵原子(例如氟、氯、溴、碘原子)、羰基、硝基、氰基、苯基、-OR14、-NR15R16、-OCOR17、NHCOR18、-NHS(O2)R19、-S(O2)NR20R21(這里，R14、R15、R16、R17、R18、R19、R20、R21與上述相同)等取代。就二環(huán)式雜環(huán)基而言，可優(yōu)選舉出具有碳及1～4個(gè)雜原子(氧、氮、硫原子)的六元環(huán)與五、六或七元環(huán)縮合的二環(huán)式雜環(huán)基、特別是苯并基衍生物、吡啶基衍生物、嘧啶基衍生物。例如可舉出吲哚基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、吡唑并吡啶基、咪唑并吡啶基、吡唑并嘧啶基、三唑并嘧啶基、苯并三唑基、苯并呋喃基、異苯并呋喃基、苯并苯硫基、苯并異噁唑基、苯并異噻唑基、三唑并嘧啶基、喹啉基、異喹啉基、噌啉基、色烯基、吡啶并嘧啶基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基、硫茚基、異硫茚基、二氫吲哚基、二氫異吲哚基、二氫嘌呤基、二氫噻唑并嘧啶基、二氫苯并二噁烷基、異吲哚滿基、吲唑基、吡咯并吡啶基、四氫喹啉基、十氫喹啉基、四氫異喹啉基、十氫異喹啉基、四氫萘啶基、四氫吡啶并氮雜基等。
所謂可被取代的二環(huán)式烴基是指二環(huán)式烴基上的任意的氫原子可以用與上述二環(huán)式雜環(huán)的情況同樣的取代基取代。例如可舉出并環(huán)戊二烯基、茚滿基、茚基、萘基、四氫苯并環(huán)庚烯基、四氫萘基等。
以下，更詳細(xì)地說(shuō)明在本發(fā)明化合物中特別優(yōu)選的化合物。
首先，R1、R2優(yōu)選為C1-6烷基，更優(yōu)選為C1-3烷基，尤其是從化合物的穩(wěn)定性方面來(lái)考慮，特別優(yōu)選為都是甲基的化合物。再者，R3優(yōu)選為氫原子，從DPP-IV阻礙活性方面來(lái)考慮，R4優(yōu)選為氰基。而且，A優(yōu)選為含有氮、氧、硫原子之中的至少一個(gè)雜原子的可被取代的6-5、6-6、6-7系的二環(huán)式雜環(huán)基，尤其是，含有1～3個(gè)氮原子的可被取代的6-5系的二環(huán)式雜環(huán)基是最佳的。再者，D優(yōu)選為-CONH-或-CO-，E優(yōu)選為-CH2CH2-，n優(yōu)選為1或2。
接著，在通式(I)中的上述優(yōu)選的化合物中，更詳細(xì)地說(shuō)明A的特別優(yōu)選的二環(huán)式雜環(huán)基。
其中一組是，在通式(I)中的D是-CO-的情況下，A是用下式(II)表示的6-5系的二環(huán)式的脂環(huán)式雜環(huán)基，
(式中，x表示0～2的整數(shù)，R7、R8、R9、R10同時(shí)或分別表示氫原子、鹵原子、羥基、三氟甲基、可被取代的C1-6烷基、或、可被取代的C1-6烷氧基。)。尤其是，當(dāng)x為1時(shí)，即二氫異吲哚，在活性、吸收性、安全性、化合物的穩(wěn)定性方面來(lái)看，是最佳的。
再者，另一組是，在通式(I)中的D是-CONH-的情況下，A是用下式(III)表示的6-5系的二環(huán)式的脂環(huán)式雜環(huán)基，
(式中，
表示單鍵或雙鍵，y、z、v、w的至少一個(gè)是氧、氮、硫原子的任一個(gè)，R11、R12、R13可取代于環(huán)上的任一氫原子，同時(shí)或分別表示氫原子、羥基、三氟甲基、三氟乙?；?、羰基、可被取代的C1-6烷基、可被取代的C1-6烷氧基、或可被取代的C6-10芳基。)。尤其是，在y、z、v、w中1～3個(gè)為氮原子、其余為碳原子的化合物是優(yōu)選的。而且認(rèn)為從活性、對(duì)酶的選擇性、ADME profile(吸收性、代謝穩(wěn)定性、作用持續(xù)性等)、安全性(變異原性、代謝酶誘導(dǎo)、代謝酶阻礙、對(duì)各器官的安全性等)、化合物的穩(wěn)定性等方面來(lái)考慮，y為氮原子、其余為碳原子的化合物、或v、w、y為氮原子、z為碳原子的化合物，即吲哚、吡唑并嘧啶是更優(yōu)選的。
以下列舉反應(yīng)工程式(1～3)來(lái)說(shuō)明本發(fā)明化合物的制造方法。
(式中，用通式(IV-1)表示的化合物表示A環(huán)上的一個(gè)氫原子取代為COOH的化合物。其它各記號(hào)與上述同義。)
反應(yīng)工程式1是將用通式(IV-1)表示的化合物與用通式(V)表示的化合物或其鹽進(jìn)行反應(yīng)而得到用通式(I-1)表示的化合物的工序。作為用通式(V)表示的化合物的鹽而言，例如可舉出鹽酸鹽、三氟乙酸鹽等。
用通式(IV-1)表示的化合物與用通式(V)表示的化合物或其鹽的反應(yīng)，優(yōu)選在適當(dāng)?shù)娜軇?例如四氫呋喃、二氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺等)中、在脫酸劑(例如三乙胺、4-二甲基氨基吡啶等)的存在或非存在下、單獨(dú)使用將用通式(IV-1)表示的化合物中的羧酸活性化的縮合劑(例如二環(huán)己基碳化二亞胺、N-(3-二甲基氨基丙基)-N’-乙基碳化二亞胺或其鹽酸鹽、N，N’-羰基二咪唑等)或組合使用添加劑(N-羥基琥珀酰亞胺、羥基苯并三唑等)、在-10～80℃尤其在0℃～室溫的溫度條件下進(jìn)行0.5小時(shí)～3天。
(式中，X表示鹵原子。其它各記號(hào)與上述同義。)
反應(yīng)工程式2是將用通式(VI)表示的化合物或其鹽與用通式(VII)表示的化合物進(jìn)行反應(yīng)而得到用通式(I)表示的化合物的工序。作為用通式(VI)表示的化合物的鹽而言，例如可舉出鹽酸鹽、三氟乙酸鹽等。
用通式(VI)表示的化合物或其鹽與用通式(VII)表示的化合物的反應(yīng)，優(yōu)選在適當(dāng)?shù)娜軇?例如四氫呋喃、二氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺、丙酮等)中、在脫酸劑(例如三乙胺、4-二甲基氨基吡啶、碳酸鉀等)、添加劑(例如溴化鈉、碘化鈉、碘化鉀)的存在或非存在下、在-10～80℃尤其在0℃～室溫的溫度條件下進(jìn)行0.5小時(shí)～3天。
(式中，G表示氨基酸的保護(hù)基(例如叔丁氧基羰基(Boc))。其它各記號(hào)與上述同義。)。
反應(yīng)工程式3是將用通式(VIII)表示的化合物與用通式(IX)表示的化合物或其鹽反應(yīng)而得到的化合物進(jìn)行脫保護(hù)從而得到用通式(I)表示的化合物的工序。作為用通式(IX)表示的化合物的鹽而言，例如可舉出鹽酸鹽、三氟乙酸鹽等。
酰胺化反應(yīng)，優(yōu)選在適當(dāng)?shù)娜軇?例如四氫呋喃、二氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺等)中、在脫酸劑(例如三乙胺、4-二甲基氨基吡啶等)的存在或非存在下、單獨(dú)使用將用通式(VIII)表示的化合物的羧酸活性化的縮合劑(例如二環(huán)己基碳化二亞胺、N-(3-二甲基氨基丙基)-N’-乙基碳化二亞胺或其鹽酸鹽、N，N’-羰基二咪唑等)、或組合使用添加劑(N-羥基琥珀酰亞胺、羥基苯并三唑等)、在-10～80℃尤其在0℃～室溫的溫度條件下進(jìn)行0.5小時(shí)～3天。
脫保護(hù)反應(yīng)，例如當(dāng)保護(hù)基是Boc基時(shí)，優(yōu)選在適當(dāng)?shù)娜軇?例如1，4-二噁烷、四氫呋喃等)中、使用氯化氫、三氟乙酸等酸、在-10～50℃尤其在0℃～室溫的溫度條件下進(jìn)行10分鐘～24小時(shí)。
接著，下面列舉反應(yīng)工程式(4～7)說(shuō)明原料的制造方法。
(式中的各記號(hào)與上述同義)。
反應(yīng)工程式4是將用通式(X)表示的化合物與用通式(VII)表示的化合物反應(yīng)后、進(jìn)行脫保護(hù)反應(yīng)從而得到化合物(V)的工序。
用通式(X)表示的化合物與用通式(VII)表示的化合物反應(yīng)，優(yōu)選在適當(dāng)?shù)娜軇?例如四氫呋喃、二氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺、丙酮等)中、在脫酸劑(例如三乙胺、4-二甲基氨基吡啶、碳酸鉀等)、添加劑(例如溴化鈉、碘化鈉、碘化鉀)的存在或非存在下、在-10～80℃尤其在0℃～室溫的溫度條件下進(jìn)行0.5小時(shí)～3天。
脫保護(hù)反應(yīng)，例如當(dāng)保護(hù)基是Boc基時(shí)，優(yōu)選為在適當(dāng)?shù)娜軇?例如1，4-二噁烷、四氫呋喃等)中、使用氯化氫、三氟乙酸等酸、在-10～50℃尤其在0℃～室溫的溫度條件下進(jìn)行10分鐘～24小時(shí)。
(式中，G1表示氨基酸的保護(hù)基(例如叔丁氧基羰基(Boc))或氫原子。R22表示-COOH、-NH2或當(dāng)A表示通式(II)時(shí)而表示環(huán)中的-NH-，R23表示-COOH或-NH2，R22、R23一個(gè)表示羧酸而另一個(gè)表示胺。其它各記號(hào)與上述同義。)。
反應(yīng)工程式5是將用通式(IV-2)表示的化合物或其鹽(胺的情況)與用通式(XI)表示的化合物或其鹽(胺的情況)反應(yīng)(當(dāng)G1為氨基酸的保護(hù)基時(shí)，還進(jìn)行脫保護(hù)反應(yīng))從而得到用通式(VI)表示的化合物的工序。作為用通式(IV-2)、(XI)表示的化合物的鹽而言，例如可舉出鹽酸鹽、三氟乙酸鹽等。
酰胺化反應(yīng)，優(yōu)選在適當(dāng)?shù)娜軇?例如四氫呋喃、二氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺等)中、在脫酸劑(例如三乙胺、4-二甲基氨基吡啶等)的存在或非存在下、單獨(dú)使用將羧酸活性化的縮合劑(例如二環(huán)己基碳化二亞胺、N-(3-二甲基氨基丙基)-N’-乙基碳化二亞胺或其鹽酸鹽、N，N’-羰基二咪唑等)或組合使用添加劑(N-羥基琥珀酰亞胺、羥基苯并三唑等)、在-10～80℃尤其在0℃～室溫的溫度條件下進(jìn)行0.5小時(shí)～3天。
或者，當(dāng)用通式(IV-2)表示的化合物是羧酸(R22為-COOH)時(shí)，也可如以下這樣使之反應(yīng)。即，在適當(dāng)?shù)娜軇?例如四氫呋喃、二氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺等)中，使用乙二酰氯、亞硫酰氯等作為酰氯(R22為-COCl)，在脫酸劑(例如三乙胺、4-二甲基氨基吡啶等)的存在或非存在下，與用通式(XI)表示的化合物(R23為-NH2)或其鹽在-10～80℃尤其在0℃～室溫的溫度條件下進(jìn)行0.5小時(shí)～3天。
脫保護(hù)反應(yīng)，例如當(dāng)G1是Boc基時(shí)，優(yōu)選在適當(dāng)?shù)娜軇?例如1，4-二噁烷、四氫呋喃等)中、使用氯化氫、三氟乙酸等酸、在-10～50℃尤其在0℃～室溫的溫度條件下進(jìn)行10分鐘～24小時(shí)。
(式中，J表示-OH或鹵原子。其它各記號(hào)與上述同義。)。
反應(yīng)工程式6是將用通式(XII)表示的化合物與用通式(IX)表示的化合物或其鹽反應(yīng)從而得到用通式(VII)表示的化合物的工序。
就反應(yīng)而言，優(yōu)選在適當(dāng)?shù)娜軇?例如四氫呋喃、二氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺等)中、在脫酸劑(例如三乙胺、4-二甲基氨基吡啶等)的存在或非存在下、將用通式(XII)表示的化合物(當(dāng)J為-OH時(shí)，例如利用乙二酰氯或亞硫酰氯等成為酰氯化物后)與用通式(IX)表示的化合物或其鹽在-10～80℃尤其在0℃～室溫的溫度條件下反應(yīng)0.5小時(shí)～3天，得到用通式(VII)表示的化合物。
(式中，R24表示-NH2、當(dāng)A表示通式(II)時(shí)而表示環(huán)中的-NH-。其它各記號(hào)與上述同義。)
反應(yīng)工程式7是將用通式(XIII)表示的化合物與用通式(IV-3)表示的化合物或其鹽進(jìn)行反應(yīng)從而得到用通式(VIII)表示的化合物的工序。
就反應(yīng)而言，優(yōu)選在適當(dāng)?shù)娜軇?例如四氫呋喃、二氯甲烷、N，N-二甲基甲酰胺等)中、在脫酸劑(例如三乙胺、4-二甲基氨基吡啶等)的存在或非存在下、單獨(dú)使用將羧酸活性化的縮合劑(例如二環(huán)己基碳化二亞胺、N-(3-二甲基氨基丙基)-N’-乙基碳化二亞胺或其鹽酸鹽、N，N’-羰基二咪唑等)、或組合使用添加劑(N-羥基琥珀酰亞胺、羥基苯并三唑等)、在-10～80℃尤其在0℃～室溫的溫度條件下進(jìn)行0.5小時(shí)～3天。
由上述各工序得到的目的化合物，利用通常的分離、精制手段可容易地分離。就該分離手段而言，可采用通常慣用的各種手段中的任一種，就其例而言，可例示再結(jié)晶、再沉淀、溶劑提取、柱色譜法等。
本發(fā)明化合物可表現(xiàn)為多形(polymorphism)，再者，可作為多個(gè)的互變異構(gòu)體存在。因此，本發(fā)明包括上述那樣的任何的立體異構(gòu)體、光學(xué)異構(gòu)體、多形體、互變異構(gòu)體以及它們?nèi)我獾幕旌衔锏取?br>
本發(fā)明化合物，含有其醫(yī)藥上所允許的鹽。就醫(yī)藥上所允許的鹽而言，可舉出無(wú)機(jī)酸加成鹽(例如與鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、硝酸、磷酸等所形成的鹽)、有機(jī)酸加成鹽(例如與甲磺酸、苯磺酸、對(duì)甲苯磺酸、甲酸、乙酸、三氟乙酸、草酸、檸檬酸、丙二酸、富馬酸、戊二酸、己二酸、馬來(lái)酸、酒石酸、琥珀酸、扁桃酸、蘋果酸、泛酸、甲基硫酸等所形成的鹽)、與氨基酸所形成的鹽(例如與谷氨酸、天冬氨酸等所形成的鹽)等。這些酸加成鹽的形成反應(yīng)可根據(jù)常法進(jìn)行。
本發(fā)明化合物可作為DPP-IV阻礙劑來(lái)提供。即，本發(fā)明化合物顯示出強(qiáng)力的DPP-IV阻礙活性，利用DPP-IV阻礙作用對(duì)可治療的疾病例如糖尿病(特別是二型糖尿病)、糖尿病所帶來(lái)的合并癥、肥胖、自身免疫疾病(例如關(guān)節(jié)炎、慢性間接風(fēng)濕病)、骨質(zhì)疏松、后天性免疫缺損綜合征(AIDS)、移植器官、組織的排異反應(yīng)等的預(yù)防、治療是有用的。
就本發(fā)明化合物的給藥方式而言，可根據(jù)目的選擇“日本藥局方”制劑總則記載的各種給藥方式。其中，優(yōu)選制成經(jīng)口給藥制劑。因此，當(dāng)成形為藥片形態(tài)時(shí)，按照慣例可選擇該領(lǐng)域所使用的可經(jīng)口攝取的成份。例如，乳糖、結(jié)晶纖維素、白糖、磷酸鉀等賦形劑適用于它。而且，根據(jù)期望，也可添加結(jié)合劑、崩潰劑、光滑劑、抗凝聚劑等按慣例在制劑領(lǐng)域內(nèi)常用的各種添加劑。
本發(fā)明制劑、即本發(fā)明的醫(yī)藥組合物中所應(yīng)含有的本發(fā)明化合物的量，沒(méi)有特別限定，可在大范圍內(nèi)進(jìn)行適當(dāng)選擇。有效成份化合物的給藥量，根據(jù)其用法、患者的年齡、性別等其它條件以及疾病的程度來(lái)適當(dāng)?shù)剡x擇，但通常認(rèn)為本發(fā)明化合物的量是每天、每公斤體重約為0.01～500mg左右。另外，本發(fā)明制劑也可一天分1～4次給藥。
以下，列舉實(shí)施例及中間體實(shí)施例更詳細(xì)地說(shuō)明本發(fā)明，但本發(fā)明不受它們的任何限定。
(S)-1-(2’-氯乙?；?吡咯烷-2-腈
根據(jù)日本專利(WO98/19998)記載的方法，使L-脯氨酸酰胺(10.0g)和氯乙酰氯(7.0ml)反應(yīng)后，通過(guò)使之進(jìn)行脫水反應(yīng)而得到題述化合物(7.7g，Y.51％)。
1H NMR(DMSO-d6)δ(ppm)2.0-2.2(4H，m)，3.4-3.5(1H，m)，3.6-3.7(1H，m)，4.4-4.5(2H，m)，4.78(1H，q).
ESI/MS(m/z)173(M+H)+，171(M-H)-.
(R)-1-(2’-氯乙?；?吡咯烷-2-腈
參考中間體實(shí)施例1的方法，使D-脯氨酸酰胺(3.2g)和氯乙酰氯(2.5ml)反應(yīng)后，通過(guò)使之進(jìn)行脫水反應(yīng)而得到題述化合物(3.2g，Y.66％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)2.1-2.4(4H，m)，3.5-3.8(2H，m)，4.0-4.2(2H，m)，4.7-4.9(1H，m).
ESI/MS(m/z)173(M+H)+.
(S)-3-(2’-氯乙?；?噻唑烷-4-腈
將噻唑烷-3，4-二羧酸-3-叔丁酯(2.0g)溶解于四氫呋喃(10ml)中，在用冰冷卻的條件下，添加N，N’-羰基二咪唑(1.4g)。回到室溫?cái)嚢?小時(shí)。添加1，4-二噁烷(10ml)，滴下到用冰冷卻的28％氨水(40ml)中?；氐绞覝?cái)嚢?0小時(shí)。添加乙酸乙酯(60ml)進(jìn)行提取。用飽和食鹽水洗凈有機(jī)相，用無(wú)水硫酸鈉干燥。在減壓下濃縮，得到4-氨基甲酰噻唑烷-3-羧酸-叔丁酯(1.6g，Y.81％)。
將4N鹽酸/1，4-二噁烷(3.5ml)添加到上述得到的4-氨基甲酰噻唑烷-3-羧酸-叔丁酯(1.62g)中，攪拌一宿。添加水和10％碳酸氫鈉水溶液進(jìn)行中和(pH7.5～8)，在減壓下濃縮。添加N，N-二甲基甲酰胺，照射超聲波，濾去不溶物。在減壓下濃縮，得到噻唑烷-4-羧酸酰胺(735mg，Y.80％)。
參考中間體實(shí)施例1的方法，使上述得到的噻唑烷-4-羧酸酰胺(102mg)和氯乙酰氯(105mg)反應(yīng)后，通過(guò)使之進(jìn)行脫水反應(yīng)而得到題述化合物(87mg，Y.59％)。
ESI/MS(m/z)191(M+H)+.
(S)-1-(2’-氯乙?；?氮雜環(huán)丁烷-2-腈
在冰浴的條件下，將4N鹽酸/1，4-二噁烷(2.5ml)添加到2-氨基甲酰氮雜環(huán)丁烷-1-羧酸-叔丁酯(500mg)的1，4-二噁烷(2.0ml)溶液中。在室溫下攪拌2小時(shí)。滴下5N氫氧化鈉，中和了反應(yīng)溶液。在減壓下濃縮，添加N，N-二甲基甲酰胺，濾去不溶物。在減壓下濃縮濾液，得到氮雜環(huán)丁烷-2-羧酸酰胺(161mg，Y.65％)。
參考中間體實(shí)施例1的方法，使上述得到的氮雜環(huán)丁烷-2-羧酸酰胺(161mg)和氯乙酰氯(200mg)反應(yīng)后，通過(guò)使之進(jìn)行脫水反應(yīng)而得到題述化合物(112mg，Y.44％)。
ESI/MS(m/z)159(M+H)+.
(S)-1-(2’-溴-2’-苯基乙?；?吡咯烷-2-腈
將2-溴-2-苯基乙酸(500mg)溶解于二氯甲烷(30ml)中，添加乙二酰氯(950μl)、N，N-二甲基甲酰胺(2滴)，在室溫下攪拌1小時(shí)。在減壓下濃縮后，將用二氯甲烷(20ml)稀釋的溶液滴下到(S)-吡咯烷-2-腈(310mg)和三乙胺(650μl)的二氯甲烷(30ml)溶液中，在室溫下攪拌3小時(shí)。添加10％檸檬酸水溶液，分取有機(jī)相，用4％碳酸氫鈉水溶液、飽和食鹽水洗凈后，用無(wú)水硫酸鈉干燥。在減壓下濃縮，得到題述化合物(770mg，Y.quant.)。
ESI/MS(m/z)294(M+H)+，292(M-H)-.
參考中間體實(shí)施例1～5的方法，根據(jù)下述反應(yīng)式合成化合物。合成的化合物和數(shù)據(jù)如表1所示。(各記號(hào)與上述同義)。
表1
(S)-吡咯烷-2-腈
將L-脯氨酸酰胺(23g)溶解于四氫呋喃(1200ml)中，添加三乙胺(22g)并用冰冷卻。添加2-硝基苯基磺酰氯(42g)，在室溫下攪拌1小時(shí)。添加乙酸乙酯、水，分取有機(jī)相，用無(wú)水硫酸鈉干燥。在減壓下濃縮，將醚添加到殘?jiān)?，濾取析出的結(jié)晶，在減壓下干燥。將所得到的結(jié)晶(45g)溶解于吡啶(890ml)中，添加咪唑(23g)，用冰冷卻。滴下氯化磷酰(31ml)，在室溫下攪拌2小時(shí)。添加冰(1000g)、醚(2000ml)，分取有機(jī)相，用水洗凈后，用無(wú)水硫酸鈉干燥。在減壓下濃縮，將醚(4.11)添加到殘?jiān)胁⑷芙?，濾取不溶物。在用冰冷卻的條件下，將4N鹽酸/1，4-二噁烷(130ml)滴下到濾液中，在室溫下攪拌3小時(shí)。濾取析出的結(jié)晶，用醚洗凈。在減壓下干燥，得到淡黃色結(jié)晶的題述化合物的鹽酸鹽(20g，Y.88％)。
1H NMR；(CDCl3)δ(ppm)2.2-2.3(2H，m)，2.3-2.4(1H，m)，2.5-2.6(1H，m)，3.5-3.7(2H，m)，5.0(1H，t).
哌啶-2-腈
參考中間體實(shí)施例3、10的方法，由吡咯烷-2-羧酸(15g)得到題述化合物的鹽酸鹽(4.4g，Y.69％)。
ESI/MS(m/z)111(M+H)+.
(S)-1-[(2-氨基-1，1-二甲基乙基)氨基乙酰基]吡咯烷-2-腈二鹽酸鹽
將2-甲基丙烷-1，2-二胺(5.0g)溶解于二氯甲烷(200ml)中，在0℃下攪拌15分鐘。滴下BOC-ON(15g)的二氯甲烷(60ml)溶液后，在室溫下攪拌2小時(shí)。用氯仿稀釋，在用冰冷卻的條件下，用10％檸檬酸水溶液調(diào)節(jié)到酸性，分取有機(jī)相。水相是用5N氫氧化鈉水溶液調(diào)節(jié)到堿性，用乙酸乙酯提取，用無(wú)水硫酸鈉干燥。在減壓下濃縮，得到(2-氨基-2-甲基-1-丙基)氨基甲酸叔丁酯(7.9g，Y.74％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)0.9(6H，s)，1.4(9H，s)，2.8(2H，d)，6.7(1H，brt).
將上述得到的(2-氨基-2-甲基-1-丙基)氨基甲酸叔丁酯(7.9g)、碘化鈉(8.7g)、碳酸鉀(8.0g)懸濁于丙酮(230ml)中。在用冰冷卻的條件下，添加(S)-1-(2’-氯乙酰基)吡咯烷-2-腈(10g)的丙酮(80ml)溶液，就那樣攪拌30分鐘。在室溫下攪拌15小時(shí)后，在減壓的條件下濃縮。將殘?jiān)芙庥诼确轮?，濾去不溶物后，在減壓的條件下濃縮。將殘?jiān)┙o到柱色譜(流出溶劑二氯甲烷∶甲醇80∶1→60∶1→40∶1)，得到(S)-{2-[(2-氰基吡咯烷-1-基)-2-氧代乙氨基]-2-甲基-1-丙基}氨基甲酸叔丁酯(12g，Y.91％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)0.9(6H，s)，1.4(9H，s)，1.9-2.2(4H，m)，2.9(2H，d)，3.2-3.5(4H，m)，3.5-3.7(1H，m)，4.7-4.8(1H，m)，6.6-6.7(1H，brt).
ESI/MS(m/z)325(M+H)+，323(M-H)-.
將上述得到的(S)-{2-[(2-氰基吡咯烷-1-基)-2-氧代乙氨基]-2-甲基-1-丙基}氨基甲酸叔丁酯(4.8g)溶解于二氯甲烷(50ml)中。在冰冷卻的條件下，添加4N鹽酸/1，4-二噁烷(50ml)，在室溫下攪拌1小時(shí)。在減壓條件下濃縮，得到題述化合物(4.2g，Y.96％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)1.4(6H，s)，2.0-2.3(4H，m)，3.2(2H，brs)，3.5-3.6(2H，m)，3.7-3.8(1H，m)，4.0-4.2(2H，m)，4.9(1H，q)，8.5(2H，brs)，9.4(1H，brs)，9.5(1H，brs).
ESI/MS(m/z)225(M+H)+.
(S)-1-[2-(1，1-二甲基-2-甲胺基乙胺基)乙酰基]吡咯烷-2-腈
將(S)-1-[(2-氨基-1，1-二甲基乙基)氨基乙酰基]吡咯烷-2-腈二鹽酸鹽(1.48g)溶解于乙腈(50ml)中，添加甲酸-4-硝基苯酯(1.00g)、碳酸鉀(1.37g)，在室溫下攪拌16小時(shí)。在減壓下濃縮，將殘?jiān)┙o到柱色譜(流出溶劑二氯甲烷∶甲醇5∶1)，得到(S)-N-{2-[2-(2-氰基吡咯烷-1-基)-2-氧代乙胺基]-2-甲基-1-丙基}甲酰胺(693mg，Y.55％)。
ESI/MS(m/z)253(M+H)+.
將上述得到的(S)-N-{2-[2-(2-氰基吡咯烷-1-基)-2-氧代乙胺基]-2-甲基-1-丙基}甲酰胺(690mg)溶解于MeOH(30ml)中。添加氰基三氫硼酸鈉(172mg)，在室溫下攪拌6小時(shí)。在減壓條件下濃縮，將殘?jiān)┙o到柱色譜(流出溶劑二氯甲烷∶甲醇5∶1→3∶1)，得到題述化合物(455mg，Y.70％)。
1HNMR；(DMSO-d6)δ(ppm)1.4(6H，s)，2.0(2H，brs)，2.0-2.3(4H，m)，2.50(3H，s)，3.2(2H，brs)，3.5-3.6(2H，m)，4.0-4.2(2H，m)，4.9(1H，q).
ESI/MS(m/z)225(M+H)+.
3-氨基-3-甲基丁酸
將3-甲基丁烯酸(12.0g)溶解于吡啶(40ml)中，添加芐胺(12.8g)在120℃下攪拌3小時(shí)?；氐绞覝?，將丙酮添加到所得到的懸濁溶液中，濾取結(jié)晶并洗凈。在減壓下干燥，得到無(wú)色結(jié)晶的3-芐氨基-3-甲基丁酸(10.3g，Y.42％)。
ESI/MS(m/z)208(M+H)+，206(M-H)-.
將6N鹽酸(5.8ml)添加到上述得到的3-芐氨基-3-甲基丁酸(6.0g)的乙醇(90ml)溶液中。向其中添加5％鈀-碳(2.4g)、乙酸(46ml)，在氫環(huán)境下、在50℃下攪拌5小時(shí)。濾去不溶物，在減壓下濃縮濾液，用醚洗凈析出的結(jié)晶后，在減壓下干燥，得到無(wú)色結(jié)晶的題述化合物(4.4g，Y.quant.)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)1.4(6H，s)，2.7(2H，s)，8.3(3H，brs).
ESI/MS(m/z)118(M+H)+，116(M-H)-.
4-甲基-1，4-戊二胺
將4-甲基-4-硝基戊酸甲酯(5.00g)溶解于乙醇(25ml)中，添加1N氫氧化鈉水溶液，攪拌1天。在減壓下濃縮，添加氯仿、水，用氯仿洗凈水相。將2N鹽酸(20ml)添加到水相中，用氯仿提取，用無(wú)水硫酸鈉干燥。在減壓下濃縮，得到白色結(jié)晶的4-甲基-4-硝基戊酸(4.32g，Y.94％)。
1H NMR；(CDCl3)δ(ppm)1.6(6H，s)，2.2-2.3(2H，m)，2.4-2.5(2H，m)，10.8(1H，brs).
將上述得到的4-甲基-4-硝基戊酸(4.3g)溶解于二氯甲烷中，添加N-(3-二甲基氨基丙基)-N’-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(6.1g)、三乙胺(4.5ml)，攪拌1小時(shí)。向其中添加芐胺(3.4g)，攪拌1天。添加水并添加2N鹽酸調(diào)節(jié)為酸性，用氯仿提取。用飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和食鹽水洗凈有機(jī)相，用無(wú)水硫酸鈉干燥。在減壓下濃縮，將殘?jiān)┙o到柱色譜(流出溶劑乙酸乙酯∶正己烷1∶1.5)，得到無(wú)色油狀的N-芐基-4-甲基-4-硝基戊酸酰胺(2.5g，Y.38％)。
1H NMR；(CDCl3)δ(ppm)1.6(6H，s)，2.1-2.2(2H，m)，2.2-3.3(2H，m)，4.4(2H，d)，6.0(1H，brs)，7.3-7.4(5H，m).
將上述得到的N-芐基-4-甲基-4-硝基戊酸酰胺(2.5g)溶解于四氫呋喃(20ml)中，冷卻到0℃。將1N硼烷-四氫呋喃絡(luò)合物(13ml)滴下后，在室溫下攪拌一宿。再次冷卻到0℃，添加2N鹽酸(30ml)，升溫到50℃。添加乙酸乙酯。將50％氫氧化鈉水溶液添加到水相中，調(diào)節(jié)為堿性，用氯仿提取，用飽和食鹽水洗凈后，用無(wú)水硫酸鈉干燥。在減壓下濃縮，得到無(wú)色油狀的芐基-4-甲基-4-硝基戊胺(1.7g，Y.73％)。
1H NMR；(CDCl3)δ(ppm)1.4-1.5(2H，m)，1.6(6H，s)，2.0(2H，dt)，2.6(2H，t)，7.2-7.4(5H，m).
將上述得到的芐基-4-甲基-4-硝基戊胺(1.7g)和10％鈀-碳(500mg)懸濁于乙醇中，在氫環(huán)境下，在60℃下攪拌一天?；氐绞覝兀珻鹽過(guò)濾后，在減壓下濃縮。添加2N鹽酸調(diào)節(jié)為酸性，用醚提取。將50％氫氧化鈉水溶液添加到水相中，調(diào)節(jié)為堿性，用醚提取，用無(wú)水硫酸鈉干燥。在減壓下濃縮，得到題述化合物(420mg，Y.50％)。
1H NMR；(CDCl3)δ(ppm)1.2(6H，s)，1.5-1.6(4H，m)，2.7-2.8(2H，m).
2-甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶-6-羧酸
將2-甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶-6-羧酸酰胺(475mg)溶解于乙醇(5ml)中，添加5N氫氧化鈉水溶液(2ml)，在70℃下攪拌1小時(shí)。冷卻到室溫，添加水，用乙酸乙酯洗凈。將2N鹽酸添加到水相中直到為酸性，濾取析出的結(jié)晶，用水、正己烷洗凈。在減壓下干燥，得到白色結(jié)晶的題述化合物(300mg，Y.63％)。
ESI/MS；178(M+H)+，176(M-H)-.
2，5，7-三甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶-6-羧酸
將3-氨基-5-甲基吡唑(970mg)和二乙酰乙酸乙酯(1.7g)溶解于乙酸(5ml)中，在120℃下攪拌3小時(shí)。冷卻到室溫，在減壓下濃縮。將乙醇(5ml)和5N氫氧化鈉水溶液(2ml)添加到殘?jiān)?，?0℃下攪拌1小時(shí)。冷卻到室溫，添加水，用乙酸乙酯洗凈。將2N鹽酸添加到水相中直到為酸性，濾取析出的結(jié)晶，用水、正己烷洗凈。在減壓下干燥，得到白色結(jié)晶的題述化合物(1.6g，Y.80％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)2.4(3H，s)，2.5(3H，s)，2.8(3H，s)，6.5(1H，s)，13.8(1H，brs).
ESI/MS(m/z)206(M-H)-.
7-甲氧基-2，5-二甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶-6-羧酸
將3-氨基-5-甲基吡唑(970mg)和乙酰丙二酸二乙酯(2.0g)溶解于乙酸(5ml)中，在120℃下攪拌3小時(shí)。冷卻到室溫，在減壓下濃縮，將乙醇添加到殘?jiān)校鋮s到0℃。濾取析出的結(jié)晶，用冷乙醇洗凈。在減壓下干燥，得到白色結(jié)晶的7-羥基-2，5-二甲基-1，3a-二氫吡唑并[1，5-a]嘧啶-6-羧酸乙酯(2.2g，Y.95％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)1.3(3H，t)，2.3(3H，s)，2.4(3H，s)，4.2(2H，q)，6.0(1H，s)，12.6(1H，brs).
ESI/MS(m/z)236(M+H)+，234(M-H)-.
將上述得到的7-羥基-2，5-二甲基-1，3a-二氫吡唑并[1，5-a]嘧啶-6-羧酸乙酯(235mg)懸濁于丙酮(5ml)中，添加碳酸鉀(138mg)，在室溫下攪拌30分鐘。添加碘化甲烷(1.0ml)并回流2小時(shí)。冷卻到室溫，加水，用氯仿提取，用飽和食鹽水洗凈有機(jī)相后，用無(wú)水硫酸鈉干燥。在減壓下濃縮，將得到的結(jié)晶溶解于乙醇(5ml)中。添加5N氫氧化鈉水溶液(1ml)，在50℃下攪拌1小時(shí)。冷卻到室溫，加水，用乙酸乙酯洗凈。將2N鹽酸添加到水相中直到為酸性，濾取析出的結(jié)晶，用水、正己烷洗凈。在減壓下干燥，得到白色結(jié)晶的題述化合物(162mg，Y.73％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)2.3(3H，s)，2.7(3H，s)，3.7(3H，s)，6.4(1H，s).
ESI/MS(m/z)222(M+H)+.
5，7-二甲基-2-苯基吡唑并[1，5-a]嘧啶-6-羧酸
將3-氨基-5-苯基吡唑(1.6g)和二乙酰乙酸乙酯(1.7g)溶解于乙酸(5.0ml)中，在120℃下攪拌3小時(shí)。冷卻到室溫，在減壓下濃縮。將乙醇(10ml)和5N氫氧化鈉水溶液(3ml)添加到殘?jiān)?，?0℃下攪拌1小時(shí)。冷卻到室溫，添加水，用乙酸乙酯洗凈。將2N鹽酸添加到水相中直到為酸性，濾取析出的結(jié)晶，用水、正己烷洗凈。在減壓下干燥，得到白色結(jié)晶的題述化合物(2.1g，Y.78％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)2.6(3H，s)，2.9(3H，s)，7.2(1H，s)，7.4(1H，t)，7.5(2H，t)，8.1(1H，d)，13.9(1H，brs).
ESI/MS(m/z)266(M-H)-.
2-甲基-7-三氟甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶-6-羧酸
將3-氨基-5-甲基吡唑(389mg)和(乙氧基亞甲基)三氟乙酰乙酸乙酯(960mg)溶解于乙醇(10ml)中，在70℃下攪拌1.5小時(shí)。添加濃鹽酸(1ml)，再攪拌1小時(shí)。冷卻到室溫，在減壓下濃縮。將乙醇(10ml)和5N氫氧化鈉水溶液(3ml)添加到殘?jiān)?，?0℃下攪拌1小時(shí)。冷卻到室溫，添加水，用乙酸乙酯洗凈。將2N鹽酸添加到水相中直到為酸性，濾取析出的結(jié)晶，用水、正己烷洗凈。在減壓下干燥，得到白色結(jié)晶的題述化合物(102mg，Y.42％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)2.6(3H，s)，2.9(3H，s)，7.2(1H，s)，7.4(1H，t)，7.5(2H，t)，8.1(1H，d)，13.9(1H，brs).
ESI/MS(m/z)244(M-H)-.
2-叔丁基-5，7-二甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶-6-羧酸
將3-氨基-5-叔丁基吡唑(1.6g)和二乙酰乙酸乙酯(1.7g)溶解于乙酸(5ml)中，在120℃下攪拌3小時(shí)。冷卻到室溫，在減壓下濃縮。將乙醇(10ml)和5N氫氧化鈉水溶液(3ml)添加到殘?jiān)?，?0℃下攪拌1小時(shí)。冷卻到室溫，添加水，用乙酸乙酯洗凈。將2N鹽酸添加到水相中直到為酸性，濾取析出的結(jié)晶，用水、正己烷洗凈。在減壓下干燥，得到白色結(jié)晶的題述化合物(2.1g，Y.78％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)2.6(3H，s)，2.9(3H，s)，7.2(1H，s)，7.4(1H，t)，7.5(2H，t)，8.1(1H，d)，13.9(1H，brs).
ESI/MS(m/z)246(M-H)-.
2-叔丁基-7-甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶-6-羧酸
將乙酰乙酸乙酯(35.4g)溶解于乙腈(200ml)中，添加二甲基甲酰胺縮二甲醇(30.9g)，在室溫下攪拌一宿。在減壓下濃縮，得到紅色油狀的2-二甲胺基亞甲基乙酰乙酸乙酯(50.4g，Y.99％)。
1H NMR；(CDCl3-d6)δ(ppm)1.3(3H，t)，2.3(3H，s)，3.1(6H，brs)，4.2(2H，q)，7.7(1H，s).
將上述得到的2-二甲胺基亞甲基乙酰乙酸乙酯(556mg)和3-氨基-5-叔丁基吡唑(418mg)溶解于乙醇(10ml)中，在70℃下攪拌1.5小時(shí)。添加濃鹽酸(1ml)，再攪拌1小時(shí)。冷卻到室溫，在減壓下濃縮。將乙醇(10ml)和5N氫氧化鈉水溶液(3ml)添加到殘?jiān)校?0℃下攪拌1小時(shí)。冷卻到室溫，添加水，用乙酸乙酯洗凈。將2N鹽酸添加到水相中直到為酸性，濾取析出的結(jié)晶，用水、正己烷洗凈。在減壓下干燥，得到黃色結(jié)晶的題述化合物(396mg，Y.57％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)1.4(9H，s)，3.1(3H，s)，6.8(1H，s)，8.8(1H，s)，13.5(1H，brs).
ESI/MS(m/z)232(M-H)-.
7-甲基-2-苯基吡唑并[1，5-a]嘧啶-6-羧酸
將3-氨基-5-苯基吡唑(477mg)和2-N，N-二甲胺基亞甲基乙酰乙酸乙酯(556mg)溶解于乙醇(10ml)中，在70℃下攪拌1.5小時(shí)。添加濃鹽酸(1ml)，再攪拌1小時(shí)。冷卻到室溫，在減壓下濃縮。將乙醇(10ml)和5N氫氧化鈉水溶液(3ml)添加到殘?jiān)?，?0℃下攪拌1小時(shí)。冷卻到室溫，添加水，用乙酸乙酯洗凈。將2N鹽酸添加到水相中直到為酸性，濾取析出的結(jié)晶，用水、正己烷洗凈。在減壓下干燥，得到黃色結(jié)晶的題述化合物(463mg，Y.61％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)3.2(3H，s)，7.4(1H，s)，7.5(3H，m)，8.1(2H，d)，8.9(1H，s)，13.6(1H，brs).
ESI/MS(m/z)252(M-H)-.
7-甲氧基-5-甲基-2-苯基吡唑并[1，5-a]嘧啶-6-羧酸
將3-氨基-5-苯基吡唑(1.56mg)和乙酰丙二酸二乙酯(2.00g)溶解于乙酸(5.0ml)中，在120℃下攪拌3小時(shí)。冷卻到室溫，在減壓下濃縮，將乙醇添加到殘?jiān)?，冷卻到0℃。濾取析出的結(jié)晶，用冷乙醇洗凈。在減壓下干燥，得到白色結(jié)晶的7-羥基-5-二甲基-2-苯基-1，3a-二氫吡唑并[1，5-a]嘧啶-6-羧酸乙酯(2.73g，Y.92％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)1.3(3H，t)，2.3(3H，s)，4.3(2H，q)，6.7(1H，s)，7.4(2H，t)，7.5(2H，t)，8.0(1H，d).
將上述得到的7-羥基-5-二甲基-2-苯基-1，3a-二氫吡唑并[1，5-a]嘧啶-6-羧酸乙酯(297mg)懸濁于丙酮(5ml)中，添加碳酸鉀(138mg)，在室溫下攪拌30分鐘。添加碘化甲烷(1.0ml)并回流2小時(shí)。冷卻到室溫，加水，用氯仿提取，用飽和食鹽水洗凈有機(jī)相后，用無(wú)水硫酸鈉干燥。在減壓下濃縮，將得到的結(jié)晶溶解于乙醇(5ml)中。添加5N氫氧化鈉水溶液(1ml)，在50℃下攪拌1小時(shí)。冷卻到室溫，加水，用乙酸乙酯洗凈。將2N鹽酸添加到水相中直到為酸性，濾取析出的結(jié)晶，用水、正己烷洗凈。在減壓下干燥，得到白色結(jié)晶的題述化合物(121mg，Y.45％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)2.7(3H，s)，3.8(3H，s)，7.2(1H，s)，7.5(1H，t)，7.5(2H，dd)，8.0(2H，d)，13.5(1H，brs).
5-羥基-2-甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶-6-羧酸
在0℃下，將三乙胺(2.02g)、芐氧基碳酰氯(1.71g)滴下到3-氨基-5-甲基吡唑(971mg)的氯仿(20ml)溶液中，攪拌18小時(shí)。在減壓下濃縮，將殘?jiān)┙o到柱色譜(流出溶劑正己烷∶乙酸乙酯2∶1)，得到(5-甲基-2H-吡唑-3-基)-氨基甲酸芐酯(1.65g，Y.67％)。
在100℃下將上述得到的(5-甲基-2H-吡唑-3-基)-氨基甲酸芐酯(600mg)、乙氧基亞甲基丙二酸二乙酯(1.80g)的混合液攪拌18小時(shí)。在減壓條件下濃縮，將殘?jiān)┙o到柱色譜(流出溶劑正己烷∶乙酸乙酯3∶1)，得到2-(5-芐氧羰基氨基-3-甲基吡唑并-1-基亞甲基)丙二酸二乙酯(700mg，Y.67％)。
將4N鹽酸/1，4-二噁烷(2ml)添加到上述得到的2-(5-芐氧羰基氨基-3-甲基吡唑-1-基亞甲基)丙二酸二乙酯(100mg)中，攪拌22小時(shí)。濾取析出的結(jié)晶，在減壓下干燥，得到5-羥基-2-甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶-6-羧酸乙酯(40mg，Y.73％)。
參考中間體實(shí)施例24的方法，水解上述得到的5-羥基-2-甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶-6-羧酸乙酯(154mg)，得到題述化合物(136mg，Y.quant.)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)2.3(3H，s)，6.3(1H，s)，8.6(1H，s).
7-羥基-2-甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶-6-羧酸
參考中間體實(shí)施例24的方法，水解7-甲氧基乙基吡唑并[1，5-a]嘧啶-6-羧酸乙酯，得到題述化合物。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)2.3(3H，s)，6.3(1H，s)，8.8(1H，s).
2-羥甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶-6-羧酸
將乙腈(2.04ml)添加到甲醇鈉(1.40g)的四氫呋喃(50ml)溶液中，回流1.5小時(shí)?；氐绞覝?，添加甲氧基乙酸甲酯(2.57ml)，回流一宿。回到室溫，加水，用1N鹽酸使pH值為7，用醚提取。用飽和食鹽水洗凈有機(jī)相，用無(wú)水硫酸鈉干燥。在減壓下濃縮，將殘?jiān)┙o到柱色譜(流出溶劑正己烷∶乙酸乙酯2∶1)，得到4-甲氧基-3-氧代丁腈(1.14g，Y.39％)。
將水合肼(0.49ml)添加到上述得到的4-甲氧基-3-氧代丁腈(1.14g)的乙醇(50ml)溶液中，回流17小時(shí)?；氐绞覝?，在減壓條件下濃縮，將殘?jiān)┙o到柱色譜(流出溶劑二氯甲烷∶甲醇50∶1)，得到5-甲氧基甲基-2H-吡唑-3-基胺(684mg，Y.53％)。
將2-甲?；?3-氧代丙酸乙酯(775mg)添加到上述得到的5-甲氧基甲基-2H-吡唑-3-基胺(684mg)的乙醇溶液(50ml)中，攪拌一宿。在減壓下濃縮，將飽和碳酸氫鈉水溶液添加到殘?jiān)校靡宜嵋阴ヌ崛?。用飽和食鹽水洗凈有機(jī)相，用無(wú)水硫酸鈉干燥。在減壓下濃縮，將殘?jiān)┙o到柱色譜(流出溶劑正己烷∶乙酸乙酯4∶1)，得到2-甲氧基甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶-6-羧酸乙酯(878mg，Y.69％)。
在-70℃下，將1M三溴化硼/二氯甲烷溶液(0.51ml)滴下到上述得到的2-甲氧基甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶-6-羧酸乙酯(20mg)的二氯甲烷(2ml)中。邊攪拌邊利用4.5小時(shí)從-70℃升溫到-50℃后，利用2小時(shí)，從-50℃升溫到室溫。冷卻到0℃，加水，用乙酸乙酯提取，用無(wú)水硫酸鈉干燥。在減壓下濃縮，得到2-羥甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶-6-羧酸乙酯(19mg，Y.quant.)
將5N氫氧化鈉水溶液(0.1ml)添加到上述得到的2-羥甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶-6-羧酸乙酯(19mg)的四氫呋喃(1ml)溶液中，在室溫下攪拌17小時(shí)。加水，用乙酸乙酯洗凈。用2N鹽酸調(diào)節(jié)水相至酸性，用乙酸乙酯提取，用無(wú)水硫酸鈉干燥。在減壓下濃縮，將殘?jiān)芙庥跓嵋宜嵋阴ブ?，過(guò)濾。在減壓下濃縮濾液，得到題述化合物(11mg，Y.65％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)4.7(2H，s)，6.8(1H，s)，8.8(1H，d)，9.3-9.4(1H，m).
2-甲氧基甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶-6-羧酸
參考中間體實(shí)施例27的方法，水解中間體實(shí)施例27的中間體、2-甲氧基甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶-6-羧酸乙酯，得到題述化合物。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)3.4(3H，s)，4.6(2H，s)，6.8(1H，s)，8.9(1H，d)，9.4-9.5(1H，m).
ESI/MS(m/z)206(M-H)-.
1-甲基-1H-吲哚-3-羧酸
將1H-吲哚-3-羧酸(960mg)溶解于N，N-二甲基甲酰胺(15ml)中并冷卻到0℃。將氫化鈉(720mg)分兩次加入，回到室溫?cái)嚢?小時(shí)。再次冷卻到0℃，慢慢滴下碘化甲烷(0.67ml)的N，N-二甲基甲酰胺(5ml)溶液，回到室溫?cái)嚢?小時(shí)。冷卻到0℃，將冰添加到反應(yīng)液中，再添加水(50ml)，濾取析出的結(jié)晶，用水、正己烷洗凈。在減壓下干燥，得到黃色結(jié)晶的題述化合物(910mg，Y.87％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)3.9(3H，s)，7.2(1H，dd)，7.3(1H，dd)，7.5(1H，d)，8.0(1H，d)，8.1(1H，s)，11.9(1H，brs).
ESI/MS(m/z)174(M-H)-.
參考中間實(shí)施例29的方法，按照下述反應(yīng)式合成化合物。合成的化合物和數(shù)據(jù)如表2所示。
表2
1-甲基-1H-吲哚-7-羚酸
將1H-吲哚-7-羧酸甲酯(546mg)溶解于N，N-二甲基甲酰胺(8ml)中并冷卻到0℃。添加氫化鈉(370mg)，就那樣攪拌30分鐘。慢慢滴下碘化甲烷(0.38ml)，回到室溫?cái)嚢?小時(shí)。用乙酸乙酯稀釋，用2N鹽酸、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和食鹽水洗凈有機(jī)相。用無(wú)水硫酸鈉干燥后，在減壓下濃縮。
將1，4-二嗯烷(14ml)和1N氫氧化鈉水溶液(14ml)添加到上述化合物中，在40℃下攪拌17小時(shí)。用2N鹽酸調(diào)節(jié)至酸性，用氯仿提取。用無(wú)水硫酸鈉干燥后，在減壓下濃縮。濾取析出物，用正己烷洗凈后，在減壓下干燥，得到題述化合物(296mg，Y.55％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)3.8(1H，s)，6.5(1H，d)，7.1(1H，t)，7.4(1H，d)，7.5(1H，dd)，7.7(1H，dd).
ESI/MS(m/z)176(M+H)+，174(M-H)-.
參考中間實(shí)施例33的方法，按照下述反應(yīng)式合成化合物。合成的化合物和數(shù)據(jù)如表3所示。
表3
5-甲氧基-1-甲基-1H-吲哚-3-羧酸
將4-甲氧基苯基肼鹽酸鹽(200mg)、3，3-二甲氧基丙酸甲酯(194mg)添加到乙酸(8.0ml)中，在70℃下攪拌4.5小時(shí)。在減壓下濃縮，將殘?jiān)┙o到柱色譜(流出溶劑乙酸乙酯∶正己烷1∶5→1∶3)，得到5-甲氧基-1H-吲哚-3-羧酸甲酯(259mg，Y.97％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)3.8(3H，s)，3.9(3H，s)，6.8(1H，dd)，7.4(1H，d)，7.5(1H，d)，8.0(1H，s)，11.8(1H，brs).
ESI/MS(m/z)204(M-H)-.
將上述得到的5-甲氧基-1H-吲哚-3-羧酸甲酯(121mg)溶解于N，N-二甲基甲酰胺(1.5ml)中并冷卻到0℃。添加氫化鈉(47mg)，就那樣攪拌30分鐘。滴下碘化甲烷(55μl)，回到室溫?cái)嚢?小時(shí)。用乙酸乙酯稀釋，用2N鹽酸、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和食鹽水洗凈有機(jī)相。用無(wú)水硫酸鈉干燥后，在減壓下濃縮。
將1，4-二噁烷(4ml)和1N氫氧化鈉水溶液(4ml)添加到上述化合物中，在40℃下攪拌18小時(shí)。用2N鹽酸調(diào)節(jié)至酸性，濾取析出物，用水洗凈后，在減壓下干燥，得到題述化合物(57mg，Y.52％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)3.7(3H，s)，3.8(3H，s)，6.8(1H，dd)，7.4(1H，d)，7.5(1H，d)，7.9(1H，s)，11.9(1H，brs).
ESI/MS(m/z)206(M+H)+，204(M-H)-.
7-甲氧基-1-甲基-1H-吲哚-5-羧酸
按照文獻(xiàn)(J.Org.Chem.，1996，61，5804-5812)記載的方法，通過(guò)3-甲氧基4-氨茴酸甲酯得到題述化合物。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)3.9(3H，s)，4.0(3H，s)，6.5(1H，d)，7.2(1H，s)，7.3(1H，d)，7.9(1H，s).
ESI/MS(m/z)206(M+H)+，204(M-H)-.
1-(2，2-二甲基丙基)-1H-吲哚-3-羧酸
將1H-吲哚-3-羧酸(208mg)溶解于N，N-二甲基甲酰胺(10ml)溶液中，添加氫化鈉(154mg)，在室溫下攪拌10分鐘。將碘化新戊烷(0.25ml)添加到反應(yīng)液中，在80℃下攪拌15小時(shí)。加水，用乙酸乙酯洗凈。用1N鹽酸調(diào)節(jié)水相使pH值為6，用乙酸乙酯提取，用飽和食鹽水洗凈后，用無(wú)水硫酸鈉干燥。在減壓下濃縮，將殘?jiān)┙o到柱色譜(流出溶劑正己烷∶乙酸乙酯4∶1)，得到題述化合物(264mg，Y.89％)。
1H NMR；(CDCl3)δ(ppm)1.0(9H，s)，3.9(2H，s)，7.2-7.3(2H，m)，7.3-7.4(1H，m)，7.9(1H，s)，8.2-8.3(1H，m).
ESI/MS(m/z)232(M+H)+，230(M-H)-.
1-異丁基-1H-吲哚-3-羧酸
參考中間體實(shí)施例40的方法，使用1H-吲哚-3-羧酸(251mg)、碘化異丁烷，得到題述化合物(121mg，Y.36％)。
1H NMR；(CDCl3)δ(ppm)0.9(6H，d)，2.2-2.3(1H，m)，3.9(2H，d)，7.2-7.3(2H，m)，7.3-7.4(1H，m)，7.9(1H，s)，8.2-8.3(1H，m).
ESI/MS(m/z)218(M+H)+，216(M-H)-.
1-(2，2-二甲基丙基)-1H-吲哚-5-羧酸
參考中間體實(shí)施例40的方法，使用1H-吲哚-5-羧酸甲酯(825mg)、碘化新戊烷，得到題述化合物(473mg，Y.43％)。
1H NMR；(CDCl3)δ(ppm)1.0(9H，s)，3.9(2H，s)，6.6(1H，d)，7.1(1H，d)，7.3(1H，d)，7.9(1H，dd)，8.4(1H，s).
ESI/MS(m/z)232(M+H)+，230(M-H)-.
1-異丁基-1H-吲哚-5-羧酸
參考中間體實(shí)施例40的方法，使用1H-吲哚-5-羧酸甲酯(1.02g)、碘化異丁烷，得到題述化合物(375mg，Y.30％)。
1H NMR；(CDCl3)δ(ppm)0.9(6H，d)，2.1-2.2(1H，m)，3.9(2H，d)，6.6(1H，d)，7.1(1H，d)，7.3(1H，d)，7.9(1H，dd)，8.4(1H，s).
ESI/MS(m/z)218(M+H)+，216(M-H)-.
1-芐氧基甲基-1H-吲哚-3-羧酸
將1H-吲哚-3-羧酸甲酯(1.00g)溶解于N，N-二甲基甲酰胺(12ml)中，冷卻到0℃。分兩次添加氫化鈉(0.46g)，就那樣攪拌30分鐘。慢慢滴下芐氧基甲基氯(2.4ml)，回到室溫并攪拌2小時(shí)。用乙酸乙酯稀釋并用2N鹽酸、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和食鹽水洗凈有機(jī)相。用無(wú)水硫酸鈉干燥后，在減壓下濃縮。
將1，4-二噁烷(20ml)和1N氫氧化鈉水溶液(20ml)添加到上述化合物中，在40℃下攪拌18小時(shí)。用2N鹽酸調(diào)節(jié)至酸性，用氯仿提取。用無(wú)水硫酸鈉干燥后，在減壓下濃縮。殘?jiān)烧和檫M(jìn)行結(jié)晶化，在減壓下干燥，得到題述化合物(1.3g，Y.83％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)5.7(2H，s)，7.2-7.4(7H，m)，7.6(1H，d)，8.0(1H，d)，8.2(1H，s).
ESI/MS(m/z)282(M+H)+，280(M-H)-.
1-甲氧基甲基-1H-吲哚-3-羧酸
將1H-吲哚-3-羧酸甲酯(500mg)溶解于N，N-二甲基甲酰胺(7.5ml)中，冷卻到0℃。添加氫化鈉(340mg)，就那樣攪拌30分鐘。慢慢滴下甲氧基甲基氯(0.43ml)，回到室溫并攪拌1小時(shí)。用乙酸乙酯稀釋并用2N鹽酸、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和食鹽水洗凈有機(jī)相。用無(wú)水硫酸鈉干燥后，在減壓下濃縮。
將1，4-二噁烷(15ml)和1N氫氧化鈉水溶液(15ml)添加到上述化合物中，在40℃下攪拌16小時(shí)。用2N鹽酸調(diào)節(jié)至酸性，用氯仿提取。用無(wú)水硫酸鈉干燥后，在減壓下濃縮。濾取析出物，用醚洗凈后，在減壓下干燥，得到題述化合物(342mg，Y.58％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)3.1(3H，s)，5.4(2H，s)，7.2-7.3(2H，m)，7.6(1H，d)，8.0(1H，d)，8.2(1H，d).
ESI/MS(m/z)206(M+H)+，204(M-H)-.
1-乙酸基甲基-1H-吲哚-3-羧酸
將1H-吲哚-3-羧酸甲酯(400mg)溶解于N，N-二甲基甲酰胺(6ml)中，冷卻到0℃。分兩次添加氫化鈉(500mg)，就那樣攪拌30分鐘。在0℃下利用15分鐘慢慢滴下乙酸溴甲酯(0.32ml)，回到室溫并攪拌45分鐘。冷卻到0℃，加水后，用2N鹽酸調(diào)節(jié)至酸性，用乙酸乙酯提取。用無(wú)水硫酸鈉干燥后，在減壓下濃縮。將殘?jiān)┙o到柱色譜(流出溶劑二氯甲烷∶甲醇為50∶1)，得到題述化合物(354mg，Y.61％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)2.0(3H，s)，6.2(2H，s)，7.2-7.4(2H，m)，7.6(1H，d)，7.9(1H，s)，8.0(1H，d).
ESI/MS(m/z)233(M+H)+.
1-芐氧基甲基-1H-吲哚-5-羧酸
將1H-吲哚-5-羧酸甲酯(500mg)溶解于N，N-二甲基甲酰胺(6.0ml)中。冷卻到0℃，添加氫化鈉(230mg)，攪拌30分鐘。添加芐基氯甲基醚(1.2ml)，在室溫下攪拌2小時(shí)。用乙酸乙酯提取，用2N鹽酸、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和食鹽水洗凈有機(jī)相。用無(wú)水硫酸鈉干燥后，在減壓下濃縮。將1，4-二噁烷(10ml)和1N氫氧化鈉水溶液(5ml)添加到殘?jiān)校?0℃下攪拌22小時(shí)。用2N鹽酸調(diào)節(jié)至酸性后，用氯仿提取。用無(wú)水硫酸鈉干燥后，在減壓下濃縮。濾取析出物，用正己烷洗凈后，在減壓下干燥，得到題述化合物(740mg，Y.92％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)4.4(2H，s)，5.7(2H，s)，6.6(1H，d)，7.2-7.4(5H，m)，7.6-7.7(3H，m)，7.8(1H，d)，8.2(1H，s).
ESI/MS(m/z)280(M-H)-.
1-羥甲基-1H-吲哚-5-羧酸
將在中間體實(shí)施例47中得到的1-芐氧基甲基-1H-吲哚-5-羧酸(380mg)懸濁于乙醇(6.5ml)中。添加10％鈀-碳(190mg)，在氫環(huán)境下、在60℃下攪拌47小時(shí)。濾去不溶物，在減壓下濃縮。將殘?jiān)┙o到柱色譜(流出溶劑二氯甲烷∶甲醇為50∶1)，得到題述化合物(120mg，Y.48％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)5.5(2H，s)，6.5(1H，d)，7.5(1H，d)，7.6(1H，d)，7.7(1H，d)，8.2(1H，s).
1-甲氫基甲基-1H-吲哚-5-羧酸
參考中間體實(shí)施例45的方法，由1H-吲哚-5-羧酸甲酯(500mg)和氯甲基甲醚(0.43ml)得到題述化合物(190mg，Y.70％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)5.5(2H，s)，6.5(1H，d)，7.5(1H，d)，7.6(1H，d)，7.7(1H，d)，8.2(1H，s).
1-(2，2-二甲基)丙基-5-甲氧基-1H-吲哚-3-羧酸
將5-甲氧基-1H-吲哚-5-羧酸甲酯(357mg)溶解于N，N-二甲基甲酰胺(17ml)溶液中。分三次添加氫化鈉(209mg)，就那樣攪拌15分鐘。滴下碘化新戊烷(0.35ml)，在80℃下攪拌15小時(shí)。用乙酸乙酯稀釋，用2N鹽酸、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和食鹽水洗凈有機(jī)相。用無(wú)水硫酸鈉干燥后，在減壓下濃縮。將殘?jiān)┙o到分取用薄層色譜(展開溶劑乙酸乙酯∶正己烷1∶3)，得到1-(2，2-二甲基)丙基-5-甲氧基-1H-吲哚-3-羧酸新戊酯(114mg，Y.20％)、1-(2，2-二甲基)丙基-5-甲氧基-1H-吲哚-3-羧酸甲酯(130mg，Y.27％)。
將1，4-二噁烷(2.5ml)和1N氫氧化鈉水溶液(2.5ml)添加到上述得到的1-(2，2-二甲基)丙基-5-甲氧基-1H-吲哚-3-羧酸新戊酯(114mg)中，在40℃下攪拌15小時(shí)。添加乙醇(3ml)，在70℃下攪拌24小時(shí)。用2N鹽酸調(diào)節(jié)至酸性，用氯仿提取。用無(wú)水硫酸鈉干燥后，在減壓下濃縮，得到題述化合物(73mg，Y.81％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)0.9(9H，s)，3.7(3H，s)，4.0(2H，s)，6.8(1H，dd)，7.4(1H，d)，7.5(1H，d)，7.8(1H，s).
ESI/MS(m/z)262(M+H)+，260(M-H)-.
1-(2，2-二甲基)丙基-5-甲基-1H-吲哚-3-羧酸
與中間體實(shí)施例50的方法一樣，由5-甲基-1H-吲哚-3-羧酸甲酯得到題述化合物。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)0.9(9H，s)，2.4(3H，s)，4.0(2H，s)，7.0(1H，d)，7.4(1H，d)，7.8(1H，s)，7.8(1H，s).
ESI/MS(m/z)246(M+H)+，244(M-H)-.
1-(2，2-二甲基)丙基-5-羥基-1H-吲哚-3-羧酸
將1-(2，2-二甲基)丙基-5甲氧基-1H-吲哚-3-羧酸(102mg)溶解于二氯甲烷(3ml)中，冷卻到-78℃。慢慢滴下1M三溴化硼/二氯甲烷溶液(1.2ml)，一邊從-78℃回到0℃一邊攪拌1小時(shí)。用氯仿稀釋，用1N氫氧化鈉水溶液調(diào)節(jié)至堿性，分取有機(jī)相。水相用2N鹽酸調(diào)節(jié)至酸性，用氯仿提取，用無(wú)水硫酸鈉干燥。在減壓下濃縮，得到題述化合物(78mg，Y.80％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)0.9(9H，s)，3.9(2H，s)，6.6(1H，dd)，7.3-7.4(2H，m)，7.8(1H，s)，8.9(1H，brs).
ESI/MS(m/z)248(M+H)+，246(M-H)-.
1-(2，2-二甲基丙酸基甲基)-1H-吲哚-3-羧酸
用冰冷卻1H-吲哚-3-羧酸(400mg)的N，N-二甲基甲酰胺(4ml)溶液，添加氫化鈉(218mg)，攪拌30分鐘。添加2，2-二甲基丙酸氯甲酯(373mg)，回到室溫，攪拌2小時(shí)。加水并用醚洗凈水相。用2N鹽酸調(diào)節(jié)水相至酸性，用醚提取。用飽和食鹽水洗凈有機(jī)相，用無(wú)水硫酸鈉干燥。在減壓下濃縮，得到橙色結(jié)晶的題述化合物(540mg，Y.79％)
ESI/MS(m/z)276(M+H)+，274(M-H)-.
1-叔丁氧基羰甲基-1H-吲哚-5-羧酸
用冰冷卻1H-吲哚-5-羧酸芐酯(600mg)的N，N-二甲基甲酰胺(2ml)溶液，添加氫化鈉(115mg)，攪拌30分鐘。添加溴乙酸叔丁酯(562mg)，攪拌2小時(shí)。加水，使水相為中性，用二氯甲烷提取。用無(wú)水硫酸鈉干燥有機(jī)相。在減壓下濃縮，得到1-叔丁氧基羰甲基-1H-吲哚-5-羧酸芐酯(944mg，Y.quant.)。
將上述得到的1-叔丁氧基羰甲基-1H-吲哚-5-羧酸芐酯(800mg)溶解于乙醇中，添加5％鈀-碳(160mg)，在氫環(huán)境下、在室溫下攪拌一宿。濾去不溶物，在減壓下濃縮濾液，得到題述化合物(670mg，Y.quant.)。
ESI/MS(m/z)276(M+H)+，274(M-H)-.
1-甲基-2，3-二氫-1H-吲哚-5-羧酸
將二氯甲烷(2ml)和三乙基硅烷(1ml)添加到1-甲基-1H-吲哚-5-羧酸(100mg)中。冷卻到0℃，滴下三氟乙酸(1ml)，回到室溫，攪拌2小時(shí)。在減壓下濃縮，濾取析出物。用醚洗凈后，在減壓下干燥，得到題述化合物(66mg，Y.65％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)2.7(3H，s)，2.9(2H，t)，3.4(2H，t)，6.4(1H，d)，7.5(1H，s)，7.6(1H，d).
ESI/MS(m/z)178(M+H)+，176(M-H)-.
1-乙?；?1H-吲哚-3-羧酸
將1H-吲哚-3-羧酸(400mg)、乙酸鈉(0.96g)懸濁于乙酸酐(4.8ml)中。在110℃下攪拌16小時(shí)后，用氯仿提取。用2N鹽酸洗凈有機(jī)相，用無(wú)水硫酸鈉干燥后，在減壓下濃縮。將殘?jiān)┙o到柱色譜(流出溶劑二氯甲烷∶甲醇為50∶1)，得到題述化合物(170mg，Y.34％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)2.7(3H，s)，7.3-7.4(2H，m)，8.0-8.1(1H，m)，8.3-8.4(1H，m)，8.4-8.5(1H，m).
ESI/MS(m/z)202(M-H)-.
1-乙?；?2，3-二氫-1H-吲哚-5-羧酸
將1H-吲哚-5-羧酸(2.0g)溶解于N，N-二甲基甲酰胺(15ml)中。添加芐基氯(1.53ml)、碳酸鈣(3.4g)，在室溫下攪拌39小時(shí)。用乙酸乙酯稀釋并用2N鹽酸、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和食鹽水洗凈有機(jī)相。用無(wú)水硫酸鈉干燥后，在減壓下濃縮。濾取析出的固體，用正己烷洗凈后，在減壓下干燥，得到吲哚-5-羧酸芐酯(2.6g，Y.85％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)5.3(2H，s)，6.6(1H，s)，7.3-7.5(7H，m)，7.7(1H，d)，8.3(1H，s)，11.5(1H，brs).
ESI/MS(m/z)252(M+H)+，250(M-H)-.
將上述得到的吲哚-5-羧酸芐酯(1.0g)溶解于N，N-二甲基甲酰胺(10ml)中。冷卻到0℃，添加氫化鈉(0.32g)，攪拌30分鐘。添加乙酰氯(1.3ml)，在室溫下攪拌8小時(shí)。用乙酸乙酯稀釋，用2N鹽酸、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和食鹽水洗凈有機(jī)相。有機(jī)相用無(wú)水硫酸鈉干燥后，在減壓下濃縮。將殘?jiān)┙o到柱色譜(流出溶劑乙酸乙酯∶正己烷為1∶7→1∶4)，得到1-乙酰基-1H-吲哚-5-羧酸芐酯(1.1g，Y.97％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)2.6(3H，s)，5.3(2H，s)，6.9(1H，d)，7.3-7.5(5H，m)，7.9(1H，dd)，7.9(1H，d)，8.3(1H，d)，8.4(1H，d).
ESI/MS(m/z)294(M+H)+，292(M-H)-.
將上述得到的1-乙?；?1H-吲哚-5-羧酸芐酯(550mg)懸濁于乙醇(9ml)中。添加10％鈀-碳，在氫環(huán)境下、在室溫下攪拌16小時(shí)。濾去不溶物后，在減壓下濃縮。濾取析出的結(jié)晶，用醚洗凈后，在減壓下干燥，得到題述化合物(180mg，Y.48％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)2.1(3H，s)，3.1(2H，t)，4.1(2H，t)，7.7-7.8(2H，m)，8.0(1H，d).
ESI/MS(m/z)206(M+H)+，204(M-H)-.
1-乙?；?1H-吲哚-5-羧酸
將1-乙?；?2，3-二氫-1H-吲哚-5-羧酸(100mg)懸濁于1，4-二噁烷(3ml)中，添加2，3-二氯-5，6-二氰基-對(duì)苯醌(445mg)，在110℃下攪拌16小時(shí)后，濾去固態(tài)物后，在減壓下濃縮。將殘?jiān)┙o到分取用薄層色譜(展開溶劑二氯甲烷∶甲醇為20∶1)，得到題述化合物(98mg，Y.99％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)2.6(3H，s)，6.8(1H，d)，7.9(1H，d)，7.9(1H，d)，8.2(1H，s)，8.3(1H，d).
ESI/MS(m/z)203(M+H)+，202(M-H)-.
1-苯酰基-1H-吲哚-5-羧酸
用冰冷卻1H-吲哚-5-羧酸芐酯(300mg)的N，N-二甲基甲酰胺(2ml)溶液，添加氫化鈉(58mg)，攪拌30分鐘。添加苯酰氯(202mg)，攪拌2小時(shí)。用二氯甲烷烯釋，用2N鹽酸、飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和食鹽水洗凈有機(jī)相。用無(wú)水硫酸鈉干燥有機(jī)相。在減壓下濃縮，得到橙色結(jié)晶的1-苯?；?1H-吲哚-5-羧酸芐酯(500mg，Y.quant.)。
將上述得到的1-苯?；?1H-吲哚-5-羧酸芐酯(100mg)溶解于乙醇中，添加5％鈀-碳(20mg)，在氫環(huán)境下、在室溫下攪拌一宿。濾去不溶物，在減壓下濃縮濾液，得到白色結(jié)晶的題述化合物(50mg，Y.66％)。
ESI/MS(m/z)266(M+H)+，264(M-H)-.
1-(2，2-二甲基丙?；?-1H-吲哚-5-羧酸
用冰冷卻1H-吲哚-5-羧酸芐酯(276mg)的N，N-二甲基甲酰胺(2ml)溶液，添加氫化鈉(53mg)，攪拌30分鐘。添加2，2-二甲基丙酰氯(162mg)，攪拌2小時(shí)。加水，使水相為中性，用二氯甲烷提取，用無(wú)水硫酸鈉干燥。在減壓下濃縮，得到淡橙色結(jié)晶的1-(2，2二甲基丙?；?-1H-吲哚-5-羧酸芐酯(320mg，Y.87％)。
將上述得到的1-(2，2二甲基丙?；?-1H-吲哚-5-羧酸芐酯(220mg)溶解于乙醇中，添加5％鈀-碳(44mg)，在氫環(huán)境下、在室溫下攪拌一宿。濾去不溶物，在減壓下濃縮濾液，得到白色結(jié)晶的題述化合物(140mg，Y.86％)。
ESI/MS(m/z)246(M+H)+，244(M-H)-.
4-甲氧基苯并噻唑-6-羧酸
4-氨基-3-甲氧基苯甲酸(1.0g)和硫氰酸銨(910mg)溶解于甲醇(15ml)中。在0℃下，向其中慢慢滴下溴(0.30ml)的甲醇(3.0ml)溶液。然后，在室溫下攪拌2小時(shí)，加冰(50g)。濾取析出的結(jié)晶，在減壓下干燥，將所得到的白色結(jié)晶(760mg)溶解于水(3.0ml)和乙醇(3.0ml)的混合溶劑中，在90℃下，與硫化鈉(1.6g)一起攪拌2小時(shí)。冷卻后，用90％甲酸使溶液為酸性，濾取析出的結(jié)晶，在減壓下干燥，得到黃色結(jié)晶的4-氨基-5-巰基-3-甲氧基苯甲酸(670mg，Y.57％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)3.8(3H，s)，7.1(1H，brs)，7.4(1H，brs).
ESI/MS(m/z)200(M+H)+，198(M-H)-.
將上述得到的4-氨基-5-巰基-3-甲氧基苯甲酸(670mg)溶解于90％甲酸(6.0ml)中，加熱到50℃，向其中添加鋅粉末(15mg)。在100℃下攪拌2小時(shí)，冷卻后室溫后，濾取析出的結(jié)晶，用水洗凈后，在減壓下干燥，得到白色結(jié)晶的題述化合物(470mg，Y.67％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)4.0(3H，s)，7.5(1H，d)，8.3(1H，d)，9.4(1H，s).
ESI/MS(m/z)210(M+H)+，208(M-H)-.
5-甲氧基苯并噻唑-6-羧酸
用與中間體實(shí)施例61相同的方法，由4-氨基-2-甲氧基苯甲酸(2.8g)得到題述化合物(1.3g，Y.38％)。
ESI/MS(m/z)210(M+H)+，208(M-H)-.
4-甲氧基-2-甲基苯并噻唑-6-羧酸
將4-氨基-3-巰基-5甲氧基苯甲酸(500mg)溶解于四氫呋喃(15ml)中，冷卻到-78℃。添加乙酸酐(0.26ml)，利用30分鐘回到室溫，攪拌3小時(shí)。在減壓下濃縮，得到白色結(jié)晶的題述化合物(550mg，Y.99％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)2.8(3H，s)，3.9(3H，s)，7.4(1H，s)，8.2(1H，s).
ESI/MS(m/z)222(M-H)-.
4-甲氧基-2-三氟甲基苯并噻唑-6-羧酸
將4-氨基-3-巰基-5-甲氧基苯甲酸(400mg)溶解于四氫呋喃(15ml)中，冷卻到-78℃。添加三氟乙酸酐(0.31ml)，利用30分鐘回到室溫，攪拌30分鐘。在減壓下濃縮，得到白色結(jié)晶的題述化合物(550mg，Y.99％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)4.0(3H，s)，7.6(1H，s)，8.5(1H，s).
2-甲基苯并噻唑-6-羧酸
將4-氨基苯甲酸(13g)和硫氰酸銨(6.9g)懸濁于甲醇(200ml)中，在冰浴中冷卻到-15℃。慢慢滴下含有溴(4.7ml)的甲醇溶液(40ml)?；氐绞覝?，攪拌2小時(shí)，添加冰水(500ml)，濾取析出的結(jié)晶，用水、正己烷洗凈。在減壓下干燥，得到白色結(jié)晶的4-氨基-3-硫氰基苯甲酸(9.4g，Y.53％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)6.6(2H，brs)，6.8(1H，d)，7.7(1H，dd)，7.9(1H，d).
ESI/MS(m/z)193(M-H)-.
將硫化鈉(25g)懸濁于水(60ml)和乙醇(60ml)中，在40℃下，確認(rèn)硫化鈉溶解后，添加上述得到的4-氨基-3-硫氰基苯甲酸(10g)。升溫到90℃，就那樣攪拌2小時(shí)?；氐绞覝?，添加90％甲酸溶液調(diào)節(jié)到酸性，濾取析出的結(jié)晶，用水、正己烷洗凈。在減壓下干燥，得到淡黃色結(jié)晶的4-氨基-3-巰基苯甲酸(8.8g，Y.96％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)6.6(2H，brs)，6.8(1H，d)，7.7(1H，dd)，7.9(1H，d).
ESI/MS(m/z)168(M-H)-.
將上述得到的4-氨基-3-巰基苯甲酸(170mg)和硫代乙酰胺(83mg)懸濁于乙二醇(1.5ml)中。添加濃鹽酸(0.1ml)，在100℃下攪拌7小時(shí)。回到室溫，添加冷水，濾取析出的結(jié)晶，用水、正己烷洗凈。在減壓下干燥，得到白色結(jié)晶的題述化合物(150mg，Y.78％)。
ESI/MS(m/z)192(M-H)-.
4-甲氧基-2-苯基苯并噻唑-6-羧酸
將4-氨基-3-巰基-5-甲氧基苯甲酸(600mg)和硫代苯甲酰胺(450mg)懸濁于乙二醇(10ml)中。添加濃鹽酸(1.0ml)，在60℃下攪拌7小時(shí)。回到室溫，添加冷水，濾取析出的結(jié)晶，用水、正己烷洗凈。在減壓下干燥，得到白色結(jié)晶的題述化合物(280mg，Y.32％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)4.0(3H，s)，7.5(1H，d)，7.5-7.6(3H，m)，8.1-8.2(2H，m)，8.3(1H，d).
ESI/MS(m/z)284(M-H)-.
2-苯基苯并噻唑-6-羧酸
用與中間體實(shí)施例66相同的方法，由4-氨基-3-巰基苯甲酸(1.7g)得到題述化合物(1.9g，Y.74％)。
ESI/MS(m/z)254(M-H)-.
2-氧代-2，3-二氫苯并噻唑-6-羧酸
將4-氨基-3-巰基苯甲酸(680mg)溶解于四氫呋喃(20ml)中，添加碳酸鉀(550mg)，在室溫下攪拌30分鐘。冷卻到-78℃，添加三光氣(400mg)，攪拌1小時(shí)。回到室溫，在減壓下將溶劑濃縮至三分之一。添加水(20ml)和甲酸，直到溶液為酸性，濾取析出的結(jié)晶，用水、正己烷洗凈。在減壓下干燥，得到白色結(jié)晶的題述化合物(740mg，Y.95％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)6.3(1H，brs)，7.1(1H，d)，7.8(1H，d)，8.1(1H，s).
ESI/MS(m/z)194(M-H)-.
1-甲基-1H-苯并咪唑-5-羧酸
將4-氨基-3-硝基苯甲酸甲酯(7.0g)、氫氧化鈉(5.7g)、碳酸鉀(4.9g)、四丁基溴化銨(0.22)懸濁于甲苯(100ml)中。在40℃下攪拌1小時(shí)后，添加硫酸二甲酯(7.7ml)，攪拌2小時(shí)。用乙酸乙酯提取，用水洗凈后，用無(wú)水硫酸鈉干燥。在減壓下濃縮，得到4-甲基氨基-3-硝基苯甲酸甲酯(7.3g，Y.97％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)3.0(d，3H)，3.8(s，3H)，7.0(d，1H)，8.00(dd，1H)，8.5-8.7(brs，1H)，8.6(d，1H).
ESI/MS(m/z)325(M+H)+，323(M-H)-.
將上述得到的4-甲基氨基-3-硝基苯甲酸甲酯(6.3g)懸濁于1，4-二噁烷(125ml)中。添加20％氫氧化鈀(6.3g)，在氫環(huán)境下、在室溫下，攪拌91小時(shí)。濾去不溶物后，在減壓下濃縮。將殘?jiān)┙o到柱色譜(流出溶劑乙酸乙酯∶正己烷為1∶4→2∶3)，得到3-氨基-4-甲基氨基苯甲酸甲酯(3.3g，Y.62％)。
ESI/MS(m/z)181(M+H)+，179(M-H)-.
將上述得到的3-氨基-4-甲基氨基苯甲酸甲酯(3.3g)溶解于甲酸(96ml)中。加水(4ml)，在90℃下攪拌3小時(shí)。在減壓下濃縮，將乙酸乙酯添加到殘?jiān)?。用飽和碳酸氫鈉水溶液洗凈有機(jī)相，用無(wú)水硫酸鈉干燥。在減壓下濃縮，得到1-甲基-1H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯(3.4g，Y.97％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)3.8(s，3H)，3.8(s，3H)，7.6(d，1H)，7.9(dd，1H)，8.2(d，1H)，8.3(s，1H).
ESI/MS(m/z)191(M+H)+.
將上述得到的1-甲基-1H-苯并咪唑-5-羧酸甲酯(500mg)溶解于甲醇(10ml)中。添加1N氫氧化鈉水溶液(8ml)，在室溫下攪拌4小時(shí)。加水后，用甲酸調(diào)節(jié)至酸性。濾取析出物，在減壓下干燥，得到題述化合物(367mg，Y.79％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)3.8(s，3H)，7.6(d，1H)，7.8(dd，1H)，8.2(d，1H)，8.3(s，1H).
2-甲基苯并噁唑-6-羧酸
將4-氨基-3-羥基苯甲酸(4.9g)添加到乙酸(250ml)中，在130℃下攪拌3天。在減壓下濃縮，濾取析出物。溶解于甲醇和氯仿中。在減壓下濃縮，濾取析出物，用甲醇洗凈，在減壓下干燥，得到題述化合物(3.5g，Y.62％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)2.6(s，3H)，7.7(d，1H)，7.9(dd，1H)，8.1(d，1H).
ESI/MS(m/z)178(M+H)+，176(M-H)-.
5-甲基-2，3-二氫-1H-異吲哚
將二甲苯(15ml)添加到4-甲基酞酸酐(3.0g)、尿素(1.2g)中，在150℃下攪拌一宿。冷卻到室溫后，濾取析出的結(jié)晶，用乙醇、水洗凈。在減壓下干燥，得到白色結(jié)晶的4-甲基酞酰亞胺(2.4g，Y.82％)。
1H NMR；(CDCl3)δ(ppm)2.5(3H，s)，7.5(1H，d)，7.6(1H，s)，7.7(1H，s).
將上述得到的4-甲基酞酰亞胺(1.8g)懸濁于四氫呋喃(3ml)中，在室溫下添加1N甲硼烷-四氫呋喃絡(luò)合物(30ml)，在60℃下攪拌一宿。冷卻到0℃，添加甲醇(2.8ml)、6N鹽酸(3.2ml)，回流1小時(shí)。冷卻到0℃，添加6N氫氧化鈉水溶液，用乙酸乙酯提取后，用無(wú)水硫酸鈉干燥。在減壓下濃縮，將殘?jiān)┙o到柱色譜(流出溶劑二氯甲烷→二氯甲烷∶甲醇10∶1→5∶1)，得到題述化合物(400mg，Y.27％)。
1H NMR；(CDCl3)δ(ppm)2.3(3H，s)，2.7(1H，brs)，7.0(1H，s)，7.1(1H，s)，7.2(1H，d).
ESI/MS(m/z)134(M+H)+.
參考中間體實(shí)施例71的方法，按照下述的反應(yīng)式合成化合物。合成的化合物和數(shù)據(jù)如表4所示。(各記號(hào)與上述同義。)
表4
5-甲氧基-2，3-二氫-1H-異吲哚
將3，4-二甲基苯甲醚(3.0g)添加到四氯化碳中，添加N-溴琥珀酸酰亞胺(7.9g)、2，2’-偶氮二異丁腈(50mg)，回流一宿。冷卻到室溫后，濾過(guò)不溶物，在減壓下濃縮濾液。將殘?jiān)┙o到柱色譜(流出溶劑正己烷∶乙酸乙酯25∶1→20∶1)，得到1，2-二溴甲基-4-甲氧基苯(1.2g，Y.19％)。
1H NMR；(CDCl3)δ(ppm)3.8(3H，s)，4.6(2H，s)，4.6(2H，s)，6.8(1H，dd)，6.9(1H，d)，7.2(1H，d).
將氫化鈉(0.35g)懸濁于N，N-二甲基甲酰胺(1.2ml)中，添加對(duì)甲苯磺酰胺(0.71g)的N，N-二甲基甲酰胺(2ml)溶液，在室溫下攪拌30分鐘。在60℃下攪拌1小時(shí)后，在60℃下添加上述得到的1，2-二溴甲基-4-甲氧基苯(1.2g)的N，N-二甲基甲酰胺(2ml)溶液。在室溫下攪拌3小時(shí)后，添加乙酸乙酯，用水洗凈。用無(wú)水硫酸鈉干燥有機(jī)相，在減壓下濃縮，得到磺酰衍生物。將該磺酰衍生物與苯酚(0.54g)、正丙醇(0.72ml)、48％氫溴酸(4.0ml)混合，在100℃下攪拌2小時(shí)。冷卻后，用乙酸乙酯洗凈。使水相為堿性，用氯仿提取，用無(wú)水硫酸鈉干燥。在減壓下濃縮，得到題述化合物(89mg，Y.14％)。
1H NMR；(CDCl3)δ(ppm)3.8(3H，s)，4.1-4.2(4H，m)，6.7-6.8(2H，m)，7.1-7.2(1H，m).
4-甲氧基-2，3-二氫-1H-異吲哚
由3，4-二甲基苯甲醚、利用與中間體實(shí)施例86同樣的方法合成4-甲氧基-2，3-二氫-1H-異吲哚。
1H NMR；(CDCl3)δ(ppm)3.8(3H，s)，4.2-4.3(4H，m)，6.7-7.2(3H，m).
2，3，4，5-四氫-1H-苯并[c]氮雜
按照文獻(xiàn)(Tetrahedoron，1993，49，1807-1820)記載的方法，由1-四氫萘酮(3.3ml)得到題述化合物(2.0g，Y.55％)。
ESI/MS(m/z)148(M+H)+.
3-氨基-1-(1，3-二氫異吲哚-2-基)-3-甲基丁烷-1-酮
將2，3-二氫-1H-異吲哚(543mg)和3-氨基-3-甲基丁酸(700mg)溶解于N，N-二甲基甲酰胺(30ml)中。在0℃下，向其中添加N-(3-二甲基氨基丙基)-N’-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(876mg)和羥基苯并三唑(689mg)后，在室溫下攪拌一宿。在減壓下濃縮，將水和乙酸乙酯添加到殘?jiān)?。分離有機(jī)相，將飽和碳酸氫鈉水溶液添加到水相中，使pH值為9，用乙酸乙酯提取。用無(wú)水硫酸鈉干燥后，在減壓下濃縮，得到褐色油狀物的題述化合物(0.60g，Y.60％)。
1H NMR；(CDCl3)δ(ppm)1.2(6H，s)，2.4(2H，s)，4.7-4.8(4H，m)，7.2-7.3(4H，m).
ESI/MS(m/z)219(M+H)+.
參考中間體實(shí)施例89的方法，按照下述的反應(yīng)式合成化合物。合成的化合物和數(shù)據(jù)如表5及表6所示。(各記號(hào)與上述同義)。
表5
表6
2-甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶-6-羧酸(2-氨基-2-甲基丙基)酰胺
將2-甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶-6-羧酸(0.18g)懸濁于二氯甲烷(5ml)中，添加N，N-二甲基甲酰胺(1滴)。冷卻到0℃，用10分鐘滴下乙二酰氯(10μl)的二氯甲烷溶液(3ml)，就那樣在0℃下攪拌1小時(shí)。然后，在室溫下攪拌5小時(shí)，調(diào)整酰氯。將2-氨基-2-甲基丙基胺(0.11g)溶解于二氯甲烷中，添加三乙胺(0.33ml)，冷卻到-78℃。用30分鐘向其中滴下調(diào)整后的酰氯溶液，就那樣攪拌30分鐘。升溫到室溫，在室溫下攪拌1小時(shí)。添加水，用2N鹽酸使水相為酸性。用氯仿洗凈后，用5N氫氧化鈉水溶液使水相為堿性，用氯仿提取。用飽和食鹽水洗凈有機(jī)相，用無(wú)水硫酸鈉干燥。在減壓下濃縮，得到黃色結(jié)晶的題述化合物(0.14g，Y.56％)。
ESI/MS(m/z)248(M+H)+.
2-甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶-6-羧酸(1-氨基環(huán)戊基甲基)酰胺
將2-甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶-6-羧酸(0.31g)懸濁于四氫呋喃(7ml)中，添加N，N-二甲基甲酰胺(0.04ml)。在冰冷卻的條件下，向其中滴下乙二酰氯(200μl)的四氫呋喃(0.8ml)溶液，在相同溫度下攪拌1小時(shí)后，在室溫下攪拌2小時(shí)。在-60℃以下添加碳酸鉀(0.54g)后，滴下1-(氨甲基)環(huán)戊基胺(0.22g)的四氫呋喃(0.8ml)溶液。在-60℃以下攪拌30分鐘后，在室溫下攪拌22小時(shí)。在冰浴中添加水(6ml)，用6N鹽酸調(diào)整pH值為2。用氯仿洗凈，用5N氫氧化鈉水溶液使水相pH值為12，用氯仿提取。用飽和食鹽水洗凈后，用無(wú)水硫酸鈉干燥。在減壓下濃縮，得到題述化合物(57mg，Y.12％)。
1H NMR；(CDCl3)δ(ppm)1.4-1.8(8H，m)，2.5(3H，s)，3.2-3.3(2H，m)，6.5，8.8，9.2(3H，s).
ESI/MS(m/z)274(M+H)+，272(M-H)-.
2-甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶-6-羧酸(4-氨基-4-甲基戊基)酰胺
將2-甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶-6-羧酸(177mg)懸濁于四氫呋喃(5ml)中，添加N，N-二甲基甲酰胺(1滴)。在冰冷卻的條件下，添加乙二酰氯(100μl)，在室溫下攪拌30分鐘。再用冰冷卻，添加4-甲基-1，4-戊二胺(116μl)和三乙胺(0.21ml)，在室溫下攪拌一宿。添加水、2N鹽酸調(diào)節(jié)為酸性，用氯仿洗凈。用5N氫氧化鈉水溶液使水相為堿性，用氯仿提取，用無(wú)水硫酸鈉干燥。在減壓下濃縮，得到淡黃化結(jié)晶的題述化合物(151mg，Y.55％)。
1H NMR；(CDCl3)δ(ppm)1.1(6H，s)，1.7(4H，m)，2.5(3H，s)，3.4(2H，dd)，6.5(1H，s)，8.4(1H，brs)，8.7(1H，d)，9.1(1H，d).
ESI/MS(m/z)276(M+H)+，274(M-H)-.
2-氨基-3-[(苯并噻唑-6-羰基)氨基]丙酸甲酯
將苯并噻唑-6-羧酸(358mg)、N-(3-二甲基氨基丙基)-N’-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(382mg)、羥基苯并三唑(306mg)溶解于N，N-二甲基甲酰胺(10ml)中，在冰冷卻的條件下，攪拌30分鐘。添加3-氨基-2-叔丁氧基羰基氨基丙酸甲酯(560mg)的N，N-二甲基甲酰胺(8ml)溶液，在冰冷卻～室溫的條件下，攪拌17小時(shí)。在減壓下濃縮后，添加水、乙酸乙酯，提取有機(jī)相。用10％檸檬酸水溶液、4％碳酸氫鈉水溶液、水洗凈后，用無(wú)水硫酸鈉干燥。在減壓下濃縮，得到3-[(苯并噻唑-6-羰基)氨基]-2-叔丁氧基羰基氨基丙酸甲酯(750mg，Y.98.8％)。
將上述得到的3-[(苯并噻唑-6-羰基)氨基]-2-叔丁氧基羰基氨基丙酸甲酯(730mg)添加到用冰冷卻的三氟乙酸(6ml)中，攪拌1小時(shí)。在減壓下濃縮后，在冰冷卻的條件下，添加醚，濾取析出的結(jié)晶，在減壓下干燥，得到題述化合物(817mg，Y.quant.)。
ESI/MS(m/z)394(M+H)+.
3-氨基-1-(1，3-二氫異吲哚-2-基)丙烷-1-酮
在0℃下，將N-(3-二甲基氨基丙基)-N’-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(1.94g)添加到3-叔丁氧基羰基氨基丙酸(1.90g)的N，N-二甲基甲酰胺溶液中。添加2，3-二氫-1H-異吲哚(1.00g)的N，N-二甲基甲酰胺溶液?；氐绞覝兀瑪嚢枰凰?。在減壓下濃縮，將水、二氯甲烷添加到殘?jiān)小７秩∮袡C(jī)相，用10％檸檬水溶液、4％碳酸氫鈉水溶液、飽和食鹽水洗凈。用無(wú)水硫酸鈉干燥，在減壓下濃縮。添加醚，濾取析出的結(jié)晶，在減壓下干燥，得到淡橙色結(jié)晶的[3-(1，3-二氫異吲哚)-3-氧代丙基]氨基甲酸叔丁酯(1.33g，Y.55％)。
將上述得到的[3-(1，3-二氫異吲哚)-3-氧代丙基]氨基甲酸叔丁酯(1.33g)添加到用冰冷卻的三氟乙酸(6ml)中，就那樣攪拌30分鐘。在減壓下濃縮，將醚添加到殘?jiān)?，濾取析出的結(jié)晶，在減壓下干燥，得到題述化合物(1.38g，Y.99％)。
ESI/MS(m/z)191(M+H)+.
參考中間體實(shí)施例115的方法，按照下述的反應(yīng)式合成化合物。合成的化合物和數(shù)據(jù)如表7所示。(各記號(hào)與上述同義)。
表7
3-氨基-1-吲哚-1-基丙烷-1-酮
將作為中間實(shí)施例117的中間體而得到的[3-(2，3-二氫吲哚-1-基)-3-氧代丙基]氨基甲酸叔丁酯(290mg)、2，3-二氯-5，6-二氰基-對(duì)苯醌(510mg)懸濁于氯仿(40ml)中，回流30小時(shí)。冷卻到室溫后，濾去不溶物，用水洗凈濾液后，用無(wú)水硫酸鈉干燥有機(jī)相。在減壓下濃縮，將殘?jiān)┙o柱色譜(流出溶劑二氯甲烷→二氯甲烷∶甲醇10∶1)，得到(3-吲哚-1-基-3-氧代丙基)氨基甲酸叔丁酯(270mg，Y.95％)。
ESI/MS(m/z)289(M+H)+，287(M-H)-.
將上述得到的(3-吲哚-1-基-3-氧代丙基)氨基甲酸叔丁酯(260mg)添加到冰冷的三氟乙酸(2.0ml)中，就那樣攪拌1小時(shí)。在減壓下濃縮，將醚添加到殘?jiān)?，濾取析出的白色結(jié)晶。在減壓下干燥，得到題述化合物的三氟乙酸鹽(260g，Y.94％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)3.2-3.3(2H，m)，3.4(2H，t)，6.8(1H，d)，7.2(1H，t)，7.3(1H，t)，7.6(1H，d)，7.8(3H，brs)，7.9(1H，d)，8.3(1H，d).
ESI/MS(m/z)189(M+H)+，187(M-H)-.
1，3-二甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-5-羧酸(2-氨乙基)酰胺
在用冰冷卻的條件下，將羥基苯并三唑(3.55g)、N-(3-二甲基氨丙基)-N’-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(4.45g)添加到1，3-二甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-5-羧酸(4.00g)的N，N-二甲基甲酰胺(40ml)溶液中。在室溫下攪拌30分鐘后，添加(2-氨乙基)氨基甲酸叔丁酯(3.65ml)，在室溫下攪拌一宿。在減壓下濃縮，將乙酸乙酯及水添加到殘?jiān)小Ｓ?0％檸檬酸水溶液、4％碳酸氫鈉水溶液、飽和食鹽水洗凈水機(jī)相。用無(wú)水硫酸鈉干燥后，在減壓下濃縮，得到作為無(wú)色結(jié)晶的{2-[(1，3-二甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-5-羰基)氨基]乙基}氨基甲酸叔丁酯(4.02g，Y.57％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)1.4(9H，s)，2.5(3H，s)，3.4-3.6(4H，m)，4.1(3H，s)，5.0，7.5(2H，brs)，8.4(1H，s)，9.0(1H，s).
將上述得到的{2-[(1，3-二甲基-1H-吡唑并[3，4-b]吡啶-5-羰基)氨基]乙基}氨基甲酸叔丁酯(4.02g)添加到冰冷的三氟乙酸(20ml)中，就那樣攪拌2小時(shí)。在減壓下濃縮，添加醚，濾取析出的結(jié)晶。在減壓下干燥，得到淡黃色結(jié)晶的題述化合物(3.52g，Y.84％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)2.5(3H，s)，3.0-3.1(2H，m)，3.5-3.6(2H，m)，4.0(3H，s)，7.8(3H，brs)，8.7(1H，s)，8.8(1H，brt)，9.0(1H，s).
參考中間體實(shí)施例121的方法，按照下述的反應(yīng)式合成化合物。合成的化合物和數(shù)據(jù)如表8所示。(各記號(hào)與上述同義)。
表8
{叔丁氧基羰基-[2-(1，3-二氫異吲哚-2-基)-2-氧代乙基]氨基}乙酸
將Boc亞胺啶乙酸(580mg)溶解于N，N-二甲基甲酰胺(3.5ml)中，添加N-(3-二甲基氨丙基)-N’-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(480mg)，在室溫下攪拌1小時(shí)。添加2，3-二氫-1H-異吲哚(280μl)，然后在室溫下攪拌一宿。在減壓下濃縮，將10％檸檬酸水溶液、乙酸乙酯添加到殘?jiān)小７秩∮袡C(jī)相，用4％碳酸氫鈉水溶液、飽和食鹽水洗凈，然后，用無(wú)水硫酸鈉干燥。在減壓下濃縮，將殘?jiān)┙o到柱色譜(流出溶劑二氯甲烷∶甲醇20∶1→10∶1)，得到題述化合物(270mg，Y.33％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)1.4(9H，s)，3.9(2H，s)，4.2(2H，s)，4.8(4H，d)，7.2-7.3(4H，m).
ESI/MS(m/z)335(M+H)+，333(M-H)-.
參考中間體實(shí)施例138的方法，按照下述的反應(yīng)式合成化合物。合成的化合物和數(shù)據(jù)如表9所示。(各記號(hào)與上述同義)。
表9
(S)-2，7-二甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶-6-羧酸{2-[(2-氰基吡咯烷-1-基)-2-氧代乙氨基]-2-甲基丙基}酰胺
將N，N-羰基二咪唑(930mg)添加到2，7-二甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶-6-羧酸(1.00g)的四氫呋喃(30ml)溶液中，在室溫下攪拌4小時(shí)。在用冰冷卻的條件下，將該攪拌后的溶液慢慢滴下到(S)-1-[(2-氨基-1，1-二甲基乙基)氨基乙酰基]吡咯烷-2-腈二鹽酸鹽(1.56g)、三乙胺(3.6ml)的四氫呋喃(30ml)溶液中?；氐绞覝?，攪拌一宿。在減壓下濃縮，將二氯甲烷添加到殘?jiān)?。濾去不溶物，在減壓下濃縮濾液。將殘?jiān)┙o到柱色譜(流出溶劑二氯甲烷∶甲醇50∶1)，得到題述化合物(690mg，Y.33％)。在10℃下，將4N鹽酸/1，4-二噁烷(0.50ml)添加到所得到的化合物(690mg)的1，4-二噁烷(5.0ml)溶液中，攪拌10分鐘。添加醚，濾取析出的結(jié)晶。在減壓下干燥，得到黃色結(jié)晶的題述化合物的鹽酸鹽(670mg，Y.90％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)1.37(6H，s)，2.05-2.31(4H，m)，2.47(3H，s)，2.87(3H，s)，3.30-3.80(4H，m)，4.10-4.30(2H，m)，4.84-4.86(1H，m)，6.60(1H，s)，8.68(1H，s)，8.93-8.97(3H，m).
參考實(shí)施例1的方法，按照下述的反應(yīng)式合成化合物。合成的化合物和數(shù)據(jù)如表10～表17所示。
表10
表11
表12
表13
表14
表15
表16
表17
(S)-2-甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶-6-羧酸{2-[2-(2-氰基吡咯烷-1-基)-2-氧代乙氨基]-2-甲基丙基}甲基酰胺
參考實(shí)施例1的方法，由2-甲基吡唑并[1，5-a]嘧啶-6-羧酸(354mg)和(S)-1-[2-(1，1-二甲基-2-甲氨基乙氨基)乙?；鵠吡咯烷-2-腈(450mg)得到題述化合物(210mg，Y.28％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)1.36(6H，s)，1.98(1H，brs)，2.00-2.30(4H，m)，2.50(3H，s)，2.90(3H，s)，3.30-3.80(4H，m)，4.10-4.30(2H，m)，4.80(1H，m)，6.63(1H，s)，8.80(1H，s)，9.50(1H，s).
ESI/MS(m/z)398(M+H)+，396(M-H)-.
(S)-1-{2-[3-(1，3-二氫異吲哚-2-基)-1，1-二甲基-3-氧代丙氨基]乙?；鶀吡咯烷-2-腈
將碳酸鉀(370mg)和碘化鈉(200mg)添加到3-氨基-1-(1，3-二氫異吲哚-2-基)-3-甲基丁烷-1-酮(0.55g)的丙酮溶液中。在用冰冷卻的條件下，向其中添加(S)-1-(2’-氯乙?；?吡咯烷-2-腈(467mg)，在室溫下攪拌8小時(shí)。添加二氯甲烷，濾取不溶物，在減壓下濃縮濾液。將殘?jiān)┙o到柱色譜(流出溶劑二氯甲烷∶甲醇20∶1)，得到題述化合物(0.54g，61％)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)1.39，1.40(6H，2s)，2.00-2.25(4H，m)，2.85-2.95(2H，m)，3.30-4.10(4H，m)，4.71，4.90(4H，2s)，4.85-4.90(1H，m)，7.30-7.40(4H，m).
ESI/MS(m/z)355(M+H)+.
參考實(shí)施例61的方法，按照下述的反應(yīng)式合成化合物。合成的化合物和數(shù)據(jù)如表18～表22所示。(各記號(hào)與上述同義。)
表18
表19
表20
表21
表22
(S)-1-{2-[2-(1，3-二氫異吲哚-2-基)-2-氧代乙氨基]乙?；鶀吡咯烷-2-腈
將{叔丁氧基羰基-[2-(1，3-二氫異吲哚-2-基)-2-氧代乙基]氨基}乙酸(260mg)、N-(3-二甲基氨丙基)-N’-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(150mg)、羥基苯并三唑(120mg)溶解于N，N-二甲基甲酰胺(5.0ml)中。向其中添加三乙胺(110μl)、(S)-吡咯烷-2-腈鹽酸鹽(100mg)，然后，在室溫下攪拌21小時(shí)。在減壓下濃縮后，將乙酸乙酯、10％檸檬酸水溶液添加到殘?jiān)?，分取有機(jī)相。用4％碳酸氫鈉水溶液、飽和食鹽水洗凈有機(jī)相后，用無(wú)水硫酸鈉干燥。在減壓下濃縮，將殘?jiān)┙o到柱色譜(流出溶劑二氯甲烷∶甲醇20∶1)，得到(S)-[2-(氰基吡咯烷-1-基)-2-氧代乙基]-[2-(1，3-二氫異吲哚-2-基)-2-氧代乙基]氨基甲酸叔丁酯(290mg，Y.90％)。
ESI/MS(m/z)413(M+H)+，411(M-H)-.
將上述得到的(S)-[2-(氰基吡咯烷-1-基)-2-氧代乙基]-[2-(1，3-二氫異吲哚-2-基)-2-氧代乙基]氨基甲酸叔丁酯(280mg)溶解于1，4-二噁烷(1.0ml)中，在用冰冷卻的條件下，添加4N鹽酸/1，4-二噁烷(1.0ml)，攪拌30分鐘。添加醚，濾取析出的結(jié)晶，在減壓下干燥，得到題述化合物的鹽酸鹽(240mg，Y.quant)。
1H NMR；(DMSO-d6)δ(ppm)2.03-2.19(4H，m)，3.36-3.44(2H，m)，3.57，4.10(4H，2s)，4.74，4.84(4H，2s)，4.86-4.88(1H，m)，7.32-7.39(4H，m).
ESI/MS(m/z)313(M+H)+，311(M-H)-.
參考實(shí)施例142的方法，按照下述的反應(yīng)式合成化合物。合成的化合物和數(shù)據(jù)如表23～表27所示。
表23
表24
表25
表26
表27
為了進(jìn)行DPP-IV阻礙劑的篩選，使用了以甘氨酰-脯氨酸-4-甲基香豆基-7-酰胺(Gly-Pro-MCA)為基質(zhì)的以下的方法。
將溶解于測(cè)定緩沖液(含有氯化鈉(140mM)、氯化鉀(10mM)、1％牛血清白蛋白的三羥甲基氨基甲烷鹽酸緩沖液(25mM)pH7.4)的各種濃度的被檢物質(zhì)(40μl)以及150μM Gly-Pro-MCA基質(zhì)(40μl)添加在96孔微量滴定板中，混合后，在室溫下靜置5分鐘。然后，添加用測(cè)定緩沖液稀釋30倍的血漿(20μl)并攪拌，在暗室內(nèi)，在室溫下使之反應(yīng)30分鐘。添加1M乙酸緩沖液pH4.2(100μl)，停止反應(yīng)，測(cè)定了因DPP-IV活性而游離的MCA在360nm激發(fā)所得到的465nm的熒光。以按照以下的公式算出的DPP-IV活性為基礎(chǔ)，求出被檢物質(zhì)阻礙50％DPP-IV活性的濃度(IC50)。結(jié)果如表28所示。另外，就比較藥劑而言，使用專利(WO97/40832)記載的異亮氨?；邕蛲轷?化合物A)。
DPP-IV阻礙活性＝100×(1-(Fs-Fb)/F100-Fb)
F100在用血漿的反應(yīng)中得到的螢光強(qiáng)度
Fb添加反應(yīng)停止液而進(jìn)行反應(yīng)時(shí)的空白螢光強(qiáng)度
Fs添加被檢物質(zhì)而得到的螢光強(qiáng)度
表28
由本試驗(yàn)結(jié)果可知本發(fā)明化合物顯示出數(shù)十nM的IC50值，與化合物A(IC50225nM)相比，具有強(qiáng)力的DPP-IV阻礙活性。
使用Wistar/ST系雄性大白鼠((株)日本エスエルシ一)，馴化五天以上之后(使用時(shí)為8周齡)，絕食一夜。以(5ml/kg)的比例經(jīng)口投給實(shí)施例1的化合物(3mg/kg)、實(shí)施例61的化合物(1mg/kg)以及化合物A(10mg/kg)，30分鐘后，經(jīng)口投給20％葡萄糖溶液(5ml/kg)(相當(dāng)于葡萄糖(1g/kg))。經(jīng)過(guò)一段時(shí)間后由尾前端部采血，進(jìn)行血漿分離，測(cè)定血中葡萄糖以及胰島素濃度。血中葡萄糖濃度使用グルテスト((株)三和化學(xué)研究所)來(lái)測(cè)定，血漿中胰島素濃度使用市售的EAIキツト((株)シバヤギ)來(lái)測(cè)定。
結(jié)果如表29所示。其中，血中葡萄糖濃度表示根據(jù)從投給糖到60分鐘后的各采血時(shí)間的血糖值算出曲線下面積(min·mg/dl)的值(其中，作為0分鐘的血糖值，以試驗(yàn)開始前的采血而得到的試樣的血糖值代用)，血漿中胰島素濃度用投給化合物10分鐘后的血漿中胰島素濃度(pg/ml)來(lái)表示。
表29
由本實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知本發(fā)明化合物顯示出基于胰島素分泌作用的血糖降低作用。
如以上所示那樣，本發(fā)明化合物是顯示出強(qiáng)力的DPP-IV阻礙活性、化學(xué)性穩(wěn)定、酶選擇性優(yōu)異的沒(méi)有副作用等的安全的化合物，因此，對(duì)治療糖尿病(特別是二型糖尿病)、附隨糖尿病而產(chǎn)生的合并癥以及肥胖等是有用的。
權(quán)利要求
1.一種用通式(I)表示的化合物或作為其醫(yī)藥上所允許的鹽的化合物，
式中，R1、R2同時(shí)或分別表示氫原子、可被取代的C1-6烷基或-COOR5，或，用R1和R2和根部的碳原子表示三～六元的環(huán)烷基，而且，R5表示氫原子或可被取代的C1-6烷基，R3表示氫原子或可被取代的C6-10芳基，R4表示氫原子或氰基，D表示-CONR6-、-CO-或-NR6CO-，R6表示氫原子或可被取代的C1-6烷基，E表示-(CH2)m-(m為1～3的整數(shù))、-CH2OCH2-或-SCH2-，n表示0～3的整數(shù)，A表示可被取代的二環(huán)式雜環(huán)基或二環(huán)式烴基。
2.如權(quán)利要求1所述的化合物，其特征在于
通式(I)中的A是可被取代的二環(huán)式雜環(huán)基，該二環(huán)式雜環(huán)基是含有氮、氧、硫原子之中的至少一個(gè)雜原子的6-5系的二環(huán)式雜環(huán)基。
3.如權(quán)利要求2所述的化合物，其特征在于
在通式(I)中，R1、R2是甲基，R3是氫原子，R4是氰基，D是-CONH-或-CO-，E是-CH2CH2-，n是1或2。
4.如權(quán)利要求3所述的化合物，其特征在于
在通式(I)中，D是-CO-，A是用下式(II)表示的6-5系的二環(huán)式的脂環(huán)式雜環(huán)基，
式中，x表示0～2的整數(shù)，R7、R8、R9、R10同時(shí)或分別表示氫原子、鹵原子、羥基、三氟甲基、可被取代的C1-6烷基、或可被取代的C1-6烷氧基。
5.如權(quán)利要求3所述的化合物，其特征在于
在通式(I)中，D是-CONH-，A是用下式(III)表示的6-5系的二環(huán)式雜環(huán)基，
式中，
表示單鍵或雙鍵，y、z、v、w的至少一個(gè)是氧、氮、硫原子中的任一個(gè)，R11、R12、R13可取代于環(huán)上的任一氫原子，同時(shí)或分別表示氫原子、羥基、三氟甲基、三氟乙?；?、羰基、可被取代的C1-6烷基、可被取代的C1-6烷氧基、或可被取代的C6-10芳基。
6.如權(quán)利要求5所述的化合物，其特征在于在式(III)中，y、z、v、w中的1～3個(gè)是氮原子，其余是碳原子。
7.一種二肽基肽酶IV活性的阻礙劑，其特征在于將權(quán)利要求2～6中任一項(xiàng)所述的化合物作為有效成份。
8.如權(quán)利要求7所述的二肽基肽酶IV活性的阻礙劑，其特征在于用于糖尿病的治療。
9.如權(quán)利要求7所述的二肽基肽酶IV活性的阻礙劑，其特征在于用于糖尿病合并癥的治療。
10.一種醫(yī)藥組合物，其特征在于將權(quán)利要求2～6中任一項(xiàng)所述的化合物作為有效成份。
全文摘要
本發(fā)明提供一種在活性、穩(wěn)定性、安全性方面是充分的、作為醫(yī)藥具有優(yōu)異作用的二肽基肽酶IV阻礙劑。本發(fā)明是一種用下述通式表示的化合物或作為其醫(yī)藥上所允許的鹽的化合物。(R1、R2同時(shí)或分別表示氫、可被取代的C1－6烷基或－COOR5、或、用R1和R2和根部的碳原子表示三～六元的環(huán)烷基，R5表示氫或可被取代的C1－6烷基，R3表示氫或可被取代的C6－10芳基，R4表示氫或氰基，D表示－CONR6－、－CO－或－NR6CO－，R6表示氫或可被取代的C1－6烷基，E表示－(CH2) m－(m為1～3的整數(shù))、－CH2OCH2－、或－SCH2－，n表示0～3的整數(shù)，A表示可被取代的二環(huán)式雜環(huán)基或二環(huán)式烴基)。
文檔編號(hào)C07D495/04GK1745063SQ20048000334
公開日2006年3月8日 申請(qǐng)日期2004年1月30日 優(yōu)先權(quán)日2003年1月31日
發(fā)明者垣上卓司, 岡充, 加藤憲泰, 吉田雅宏, 白井真宏, 村瀨徹, 坂入將夫, 山本貴代, 竹內(nèi)光明, 林祐二, 武田基宏, 牧野充弘 申請(qǐng)人:株式會(huì)社三和化學(xué)研究所