專利名稱：制備順式－1,3－環(huán)己烷二醇衍生物的對映異構型的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種制備手性的、非外消旋的式(I)的順式構型的1，3-二取代的環(huán)己醇的方法 各種取代的順式-構型的1，3-二取代的環(huán)己烷衍生物(式(I)化合物，其中R1≠R2)是WO 03/020269中所述的活性藥物成分的核心構件或前體，它們通常尤其適合于治療脂質代謝障礙、II型糖尿病和X綜合征。
專利申請03/020269中所述的非外消旋的順式-構型的1，3-環(huán)己烷衍生物的合成不能視作工業(yè)方法例如，使用NaH/DMF的烷基化在數kg規(guī)模上不能安全地進行(C & EN，1982年9月13日，5)。而且，通過Bu2SnO方法的烷基化在工業(yè)規(guī)模上既成本高又不方便；從所需產物中除去錫化合物是非常困難的，并且通常是不完全的，即使使用色譜分離方法也是如此。錫化合物的處理是進一步的問題，也是一個成本因素。在手性相上色譜分離對映體(光學拆分)通常也是不方便的，并且過于昂貴。另外，就色譜法拆分對映體而言有必要的是，外消旋化合物以良好的化學純度存在，而這在很多情況下需要額外的前期色譜處理才能實現(xiàn)。
其它在文獻中已被描述用于合成順式-1，3-環(huán)己烷二醇構件或衍生物的方法，例如打開環(huán)氧基環(huán)己烷(P.Crotti，V.Di Bussolo，L.Favero，M.Pineschi，F(xiàn).Marianucci，G.Renzi，G.Amici，G.Roselli，Tetrahedron(四面體)，2000，56，7513-7524及其引用文獻)或金屬催化的環(huán)己烯衍生物的硼氫化作用(J.A.Brinkmann，T.T.Nguyen，J.R.Sowa，Jr.，Org.Lett.(有機快報)，2000，2，981-983；C.E.Garrett，G.C.Fu，J.Org.Chem.(有機化學雜志)，1998，63，1370-1371)主要在區(qū)域選擇性和立體選擇性方面不令人滿意。步驟總數另外也明顯太多。它們不能視作工業(yè)方法。
從順式，順式-1，3，5-環(huán)己烷三醇或順式，順式-1，3，5-環(huán)己烷三醇衍生物開始合成順式-1，3-環(huán)己烷二醇衍生物(L.Dumortier，M.Carda，J.Vander Eycken，G.Snatzke，M.Vandewalle，TetrahydronAsymmetry(四面體不對稱)，1991，2，789-792；H.Suemune，K.Matsuno，M.Uchida，K.Sakai，TetrahydronAsymmetry 1992，3，297-306)同樣是非常復雜的和不經濟的，因為步驟數量多，因此不適合于工業(yè)應用。1，3-環(huán)己烷二醇的順式/反式混合物與硫代辛酸S-乙基酯的酶催反應不能視作工業(yè)方法。除了在處理硫化合物時幾乎不能避免的臭氣和為實現(xiàn)所需轉化而不得不連續(xù)除去所釋放的乙硫醇這一事實以外，所述反應生成環(huán)己烷二醇的9種異構型或衍生物的混合物，所述異構型即為未轉化的異構體(S，S)-二醇、(R，R)-二醇和(R，S)-二醇，還有單?；a物(S，S)-單辛酸酯、(R，R)-單辛酸酯和(R，S)-單辛酸酯，以及二?；a物(S，S)-二辛酸酯、(R，R)-二辛酸酯和(R，S)-二辛酸酯。旋光活性的、單酰化的順式-構型的(R，S)-單辛酸酯僅占單?；h(huán)己烷二醇部分的約12％。這種產物在制備規(guī)模上的制備和分離尚未被描述過，但是鑒于所概括的數量比例和分離問題，該方法不能說是經濟的。另外，已知部分?；亩?或多-羥基化合物趨于發(fā)生?；w移。當發(fā)生這種情況時，例如在(R，S)-單辛酸酯的純化過程中(例如在硅膠上的色譜法分離中或在水性萃取中)或者在隨后的反應過程中(例如在游離羥基的烷基化期間)，這引起光學純度明顯降低或者外消旋化。
順式-構型的(R，S)-二醇和二?；?R，S)-化合物沒有旋光活性，因此不是我們所關注的。
因此，本發(fā)明的目的是開發(fā)一種沒有所述缺點的方法。
本發(fā)明提供一種制備手性的、非外消旋的式I化合物的方法 其中
R1是 其中環(huán)A是苯基；5-12元雜芳族環(huán)，它可以含有1-4個選自N、O和S的雜原子；8-14元芳族環(huán)；(C3-C8)-環(huán)烷基；R3是H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、(C1-C6)-烷基、(C3-C8)-環(huán)烷基、苯基；R4，R5是H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、OCF2H、OCF2-CF3、OCF2-CHF2、SCF3、O-苯基、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基-O-(C1-C3)-烷基；n是1-3；以及R2是(C1-C8)-烷基，其中該烷基中的一個或多個CH2基團可以被O、CO、S、SO或SO2代替，并且烷基可以被F、Cl、Br、CF3、CN、NO2、NHAc、NHBoc、NH-CO-C(CH3)3、羥基、OCF3、O-(C1-C6)-烷基、COOH、CO-芐氧基、CO-O(C1-C6)-烷基、四唑、噻唑烷-2，4-二酮、吲哚和(C6-C10)-芳基一至三取代，其中噻唑烷-2，4-二酮和芳基繼而可以被F、Cl、Br、CF3、CN、NO2、NHAc、NHTs、NHBoc、NHCbz、NH-CO-C(CH3)3、羥基、OCF3、O-(C1-C6)-烷基、COOH、CO-芐氧基、CO-O(C1-C6)-烷基、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基或四唑取代；或者R2是OH保護基團(PG)，例如芐氧基甲基、芐基、對甲氧基芐基或叔丁基二甲基甲硅烷基；該方法包括A)a)烷基化(alk-R2/alk-PG)在堿的存在下在適合的溶劑中使式(II)的順式-1，3-環(huán)己烷二醇 與式(III)化合物反應，X1-R2(III)其中R2如上所定義，X1是Cl、Br、I、OMs(O-甲磺?；?、OTs(O-甲苯磺?；?、OTf(O-三氟甲磺酰基)；得到式(IV)的外消旋化合物 其中R2如上所定義；b1)酶催的酯生成(EF)+分離(S)使所得的式(IV)化合物進行立體選擇性酶催的酯生成(EF)，其中將醇與?；w，例如乙烯基酯R6-O-CH＝CH2或酸酐R6-O-R6(其中R6如上所定義)和酶混合在有機溶劑中，例如二氯甲烷中，將所得混合物在-20至80℃下攪拌，在反應結束后，一種立構體以式(V)的酯存在 其中R6是C(＝O)-(C1-C16)-烷基、C(＝O)-(C2-C16)-烯基、C(＝O)-(C3-C16)-炔基、C(＝O)-(C3-C16)-環(huán)烷基，其中一個或多個碳原子可以被氧原子代替，并且可以被1-3個取代基取代，所述取代基選自F、Cl、Br、CF3、CN、NO2、羥基、甲氧基、乙氧基、苯基、CO-O(C1-C4)-烷基和CO-O(C2-C4)-烯基，它們繼而可以被1-3個選自F、Cl、Br、CF3的取代基取代，R2如上所定義，其它立構體不變，為式(IV)的醇，因此利用它們不同的化學或物理化學性質彼此分離(例如Rf值或者在水或其它溶劑中的溶解度差異)(分離S)，例如通過簡單的硅膠色譜法、萃取法(例如庚烷/甲醇或有機溶劑/水)或者隨后進一步的化學反應來分離，例如通過酯不參與其中的醇的反應，或者b2)酶催的酯水解[＝化學酯化(CE)+酶催水解(EH)]+分離(S)使所得的式(IV)化合物進行立體選擇性酶催的酯水解，其中首先在堿，例如三乙胺的存在下將外消旋醇通過化學酯化(CE)，例如借助酰氯R6-Cl或酸酐R6-O-R6轉化為式(V)的外消旋酯 其中R6和R2各自如上所定義，然后為了進行立體選擇性酶催的酯水解(EH)，將式(V)化合物溶于均勻或不均勻的、水性、水性-有機或有機介質中，并在酶的存在下在水解的情況下與水反應，而在醇解的情況下與醇，例如正丁醇反應，反應溫度為10-80℃，在反應結束后，一種立構體以式(IV)的醇存在，其它不變，為式(V)的酯，因而可以如b1)下所述彼此分離，進一步如d)下所述加工以醇形式存在的式(IV)的對映體，或者c)化學水解(CH)借助已知方法將以酯形式存在的式(V)的對映體水解為化學上對映異構的醇，d)烷基化(alk-R1)在堿的存在下在適合的溶劑中使式(IV)化合物進一步與式(VI)化合物反應 其中環(huán)A、R3、R4、R5和n各自如上所定義，X2是Cl、Br、I、OTs、OMs、OTf；得到式(I)化合物，e)保護基團PG的除去(detPG)如果R2是如上所定義的OH保護基團(PG)和R2，則轉化式(Ia)化合物 其中R1和PG各自如上所定義，這借助已知方法除去保護基團來進行，例如經Pd/C氫化除去PG＝芐氧基甲基或PG＝芐基，或者例如用DDQ(2，3-二氯-5，6-二氰基苯醌)除去PG＝對甲氧基芐基，或者例如用Bu4NF除去PG＝叔丁基二甲基甲硅烷基，得到式(VII)化合物 其中R1如上所定義，f)烷基化(alk-R2)然后在堿的存在下在適合的溶劑中使式(VII)化合物與式(III)化合物反應，X1-R2(III)其中X1和R2各自如上所定義，得到式(I)化合物，即產物或對映異構型，也可以改變如上在A)下所述的各反應步驟的順序A)alk-R2→EF+S/CE+EH+S[→CH]→alk-R1[→DetPG→alk-R2]→產物/對映異構型改變成B)alk-R1→EF+S/CE+EH+S[→CH]→alk-R2[→DetPG→alk-R2]→產物/對映異構型或者C)alk-PG→EF+S/CE+EH+S→CH→alk-R2→DetPG→alk-R1→產物/對映異構型或者D)alk-PG→EF+S/CE+EH+S→alk-R1→DetPG→alk-R2→產物/對映異構型。
可能的方法變型如下方案I至IV所述
方案I
方案II
方案III
方案III
方案IV
方案IV
本發(fā)明方法是經濟的、簡單的和迅速的。該方法完全消除了?；w移的危險，不需要等摩爾量的光學純原料或助劑、任何昂貴的試劑、任何在手性相上的色譜法旋光拆分、任何不成比例的大量溶劑或者任何高成本的操作步驟。
使用兩種對映體和改變烷基化順序，可以避免在旋光拆分時典型存在的50％損失。優(yōu)選已知的對映會聚法(參見方案IV或方法C和D)，其中工藝例如如下將式(II)的順式-1，3-環(huán)己烷二醇用式(III)化合物烷基化，并且選擇PG作為R2，以便能夠在進一步的合成過程中再次簡單和選擇性除去PG，PG因而例如是芐基、對甲氧基芐基或叔丁基二甲基甲硅烷基，使所得的式(IV)化合物進行立體選擇性酶催的酯生成或酯水解(見上)，在完成未轉化醇和酯的分離之后，分別借助不同的途徑將它們轉化為相同的光學純產物使醇(如第一部分所述)例如與式(VI)化合物反應，得到式(Ia)化合物，然后除去PG基團，得到式(VII)化合物，然后使其與式(III)化合物反應，其中R2是產物中所需的，得到式(I)化合物，借助簡單的酯水解將異構酯轉化為式(IV)化合物，然后與式(III)化合物反應，其中R2是產物中所需的，得到式(VIII)化合物。
然后除去PG基團，得到式(IV)化合物 然后使其與式(VI)化合物反應，得到式(I)化合物 優(yōu)選使用這樣的式(III)化合物X1-R2(III)
其中X1是Cl、Br、I、OMs或OTs，特別優(yōu)選使用這些，其中X1是Cl、Br或I。
優(yōu)選一種制備這樣的式(I)化合物的方法， 其中R1是 其中環(huán)A是苯基；5-12元雜芳族環(huán)，它可以含有一個或多個選自N、O和S的雜原子；稠合/二環(huán)的8-14元芳族環(huán)；(C3-C8)-環(huán)烷基；R3是H、CF3、(C1-C6)-烷基、(C3-C8)-環(huán)烷基、苯基；R4，R5是H、F、Br、CF3、OCF3、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基；n是1-2；以及R2是(C1-C8)-烷基，其中該烷基中的一個或多個CH2基團可以被O、CO、S、SO或SO2代替，并且烷基可以被F、Cl、Br、CF3、CN、NO2、NHAc、NHBoc、NH-CO-C(CH3)3、羥基、OCF3、O-(C1-C6)-烷基、COOH、CO-芐氧基、CO-O(C1-C6)-烷基、四唑、噻唑烷-2，4-二酮、吲哚和(C6-C10)-芳基一至三取代，其中噻唑烷-2，4-二酮和芳基繼而可以被F、Cl、Br、CF3、CN、NO2、NHAc、NHTs、NHBoc、NHCbz、NH-CO-C(CH3)3、羥基、OCF3、O-(C1-C6)-烷基、COOH、CO-芐氧基、CO-O(C1-C6)-烷基、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基或四唑取代。
特別優(yōu)選一種制備這樣的式(I)化合物的方法，
其中R1是 其中環(huán)A是苯基；R3是(C1-C4)-烷基；R4，R5是H、(C1-C4)-烷基、O-(C1-C4)-烷基；n是1；以及R2是(C1-C8)-烷基，其中該烷基中的一個或多個CH2基團可以被O、CO、S、SO或SO2代替，并且烷基可以被F、CI、Br、CF3、CN、NO2、NHAc、NHBoc、NH-CO-C(CH3)3、羥基、OCF3、O-(C1-C6)-烷基、COOH、CO-芐氧基、CO-O(C1-C6)-烷基、四唑、噻唑烷-2，4-二酮、吲哚和(C6-C10)-芳基一至三取代，其中噻唑烷-2，4-二酮和芳基繼而可以被F、Cl、Br、CF3、CN、NO2、NHAc、NHTs、NHBoc、NHCbz、NH-CO-C(CH3)3、羥基、OCF3、O-(C1-C6)-烷基、COOH、CO-芐氧基、CO-O(C1-C6)-烷基、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基或四唑取代。
取代基R2、R3、R4和R5中的烷基可以是直鏈或支鏈的。
在本文中，“雜芳族環(huán)”表示具有最多4個雜原子的單環(huán)和二環(huán)，特別是含有至多4個氮原子和/或1個氧或1個硫原子的那些，例如呋喃、噻吩、噻唑、噁唑、噻二唑、三唑、吡啶、三嗪、喹啉、異喹啉、吲哚、苯并噻吩、苯并呋喃、苯并三唑。芳族環(huán)可以是單環(huán)或二環(huán)的，還可以是稠合的，例如萘基、苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯、二氫苯并[1，4]二噁烯。
式(IV)和式(VII)的外消旋的順式構型的1，3-環(huán)己烷衍生物是通過單烷基化順式-環(huán)己烷二醇(式II化合物)來制備的，不過也可以通過還原性打開適當的縮醛來制備(R.Hunter等人，J.Org.Chem.1993，85，6756)，以及從甲硅烷基醚和醛或酮開始的還原性醚生成來制備(J.S.Bajwa，X.Jiang，J.Slade，K.Prasad，O.Repic，T.J.Blacklock，Tetrahedron Lett.2002，43，6709-6713)。
式(III)的烷基化試劑是市購的或者可以借助文獻方法制備，例如通過自由基側鏈鹵化來制備(參見文獻評論R.C.Larock，ComprehensiveOrganic Transformations(綜合有機轉化)，313，1989 VCH Publishers，Inc.)，或者從醇或可從醇制備的衍生物來制備(參見文獻評論R.C.Larock，Comprehensive Organic Transformations，353-363，1989 VCHPublishers，Inc.)。
借助游離基溴化作用制備各種2-溴甲基苯甲酰溴也是已知的(J.Chem.Soc.(化學會志)，1925，127，2275-2297；J.Chem.Soc.1922，121，2202-2215)，然后可以借助進一步與醇的反應轉化為屬于式(III)的烷基化試劑的溴甲基苯甲酸酯。
式(VI)的烷基化試劑或者可以充當前體的醇X2＝OH是市購的或者可以借助文獻方法制備[a].The Chemistry of HeterocyclicCompounds(雜環(huán)化合物化學)(編輯A.Weissberger，E.C.Taylor)Oxazoles(噁唑類)(編輯I.J.Turchi)；b)Methoden der OrganischenChemie(有機化學方法)，Houbeh-Weyl，第4版，Hetarene III(雜芳烯)，子卷1；c)I.Simit，E.Chindris，Arch.Pharm.(藥物文獻)，1971，304，425；d)Y.Goto，M.Yamazaki，M.Hamana，Chem.Pharm.Bull.(化學與藥學通報)，1971，19(10)，2050-2057]。
式III和VI的烷基化試劑與1，3-環(huán)己烷二醇或1，3-環(huán)己烷二醇衍生物是在堿的存在下反應的。適合的堿例如是氫氧化物，例如KOH；碳酸鹽，例如Cs2CO3；醇鹽，例如KOtBu；和其它化合物，例如LDA、BuLi、LiHMDS、KH、NaH和NaHMDS。適合的溶劑例如是THF、MTBE、DME、NMP、DMF和氯苯。
就醇的旋光拆分而言，將它們溶于有機溶劑，例如二甲氧基乙烷(DME)、甲基叔丁基醚(MTBE)、二異丙醚(DIPE)、THF、正己烷、環(huán)己烷、甲苯、氯苯、丙酮、二甲基甲酰胺(DMF)、二氯甲烷、1，2-二氯乙烷和叔丁醇中，加入?；w，例如乙酸乙烯酯、丙酸乙烯酯、丁酸乙烯酯、2H，2H-全氟癸酸2，2，2-三氟乙基酯、乙酸乙氧基乙烯酯、乙酸對-硝基-或對-氯-苯基酯、肟酯、乙酸酐、丙酸酐、琥珀酸酐、戊二酸酐、異戊酸酐、丁酸2，2，2-三氯乙基酯、2H，2H-全氟癸酸2，2，2-三氟乙基酯，隨后將反應混合物與適合的酶混合，并在-20至80℃下攪拌。助溶劑在溶液中的比例優(yōu)選為10-90％，但是在有些情況下在純酰基供體中進行酶催反應也是有利的，例如在沒有助溶劑的乙酸乙烯酯中。
就酯衍生物的旋光拆分而言，例如乙?；?、丙酰基-、丁酰基-或戊二?；苌铮瑢⑺鼈冊诰鶆蚧虿痪鶆虻?，水性、水性-有機或有機介質中，在適合的酶的存在下，任選地在助溶劑(見上)和緩沖劑的存在下進行立體選擇性水解或醇解(例如正丁醇)，反應溫度為10-80℃，反應混合物優(yōu)選地含有2-50重量％的酯。
上述酯衍生物可以借助文獻方法制備，例如通過在胺，例如三乙胺或吡啶的存在下使醇與酰氯，例如乙酰氯反應或者與酸酐，例如乙酸酐反應來制備(參見文獻評論R.C.Larock，Comprehensive OrganicTransformations，978，1989 VCH Publishers，Inc.)。
當反應結束后，可以按簡單的方式分離產物或對映體，例如通過借助文獻方法的萃取[a].T.Yamano，F(xiàn).Kikumoto，S.Yamamoto，K.Miwa，M.Kawada，T.Ito，T.Ikemoto，K.Tomimatsu，Y.Mizuno，Chem.Lett.2000，448；b].B.Hungerhoff，H.Sonnenschein，F(xiàn).Theil，J.Org.Chem.2002，67，1781]，或者采用色譜方法。
另一種方法是在酶催反應完成后，借助衍生作用明顯增加剩余醇的水溶解度，例如通過用環(huán)狀酸酐，例如戊二酸酐?；蛘咿D化為膽堿酯來進行[a].H.Kunz，M.Buchholz，Chem.Ber.(化學學報)，1979，112，2145；b).M.Schelhaas，S.Glomsda，M.H_nsler，H.-D.Jakubke，H.Waldmann，Angew.Chem.(應用化學)，1996，108，82]，從而借助萃取實現(xiàn)與水不溶性或水微溶性酯分離。分離后，借助化學或酶催水解可以逆轉醇的衍生作用。
在酶催?；那闆r下，特別感興趣的分離對映體的手段是選擇?；w，以使得?；膶τ丑w的水溶性明顯比未轉化醇更高。適合的?；w例如是環(huán)狀酸酐，例如琥珀酸酐。在酶催?；瓿珊?，酰化產物攜帶游離羧基，這能夠在堿性條件下借助水性萃取迅速分離出產物，例如用飽和NaHCO3水溶液。
在借助酯水解的酶催旋光拆分中，工藝優(yōu)選地是在水性或醇性溶液中將式(I)的酯，例如其中R1＝COCH3、COCH2CH3或COCH2CH2CH2COOH的那些與酯酶或脂酶混合并攪拌。
可能有利的是將所述溶液緩沖，例如用磷酸鹽或TRIS(三(羥甲基)甲胺)緩沖液緩沖。添加劑例如可以是0.01-1.0摩爾?？扇〉木彌_范圍為pH5-10。
所用酶優(yōu)選地是來自哺乳動物肝臟的水解酶，例如來自豬胰腺的脂酶(Fluka)，或者是來自微生物的水解酶，例如來自南極假絲酵母(Candida antarctica)的脂酶B(Roche Diagnostics)、來自皺落假絲酵母(candida rugosa)的脂酶OF(Meito Sangyo)、來自洋蔥假單孢菌(Pseudomonas cepecia)的脂酶SL(Meito Sangyo)、來自產堿桿菌屬(Alcaligenes spec.)的脂酶L-10(Roche Diagnostics)和來自產堿桿菌屬的脂酶QL(Meito Sangyo)。當所用酯是戊二酸衍生物時，例如戊二酸單-(3-芐氧基環(huán)己基)酯，使用戊二酰-7-ACA?；D移酶(Roche Diagnostics)代替上述脂酶可能是有利的。
特別優(yōu)選使用來自南極假絲酵母的脂酶B(Roche Diagnostics)，使用游離酶或酶的固定化形式可能是有利的，例如目前可市購的三種產物之一。
可以使用每種所述酶的游離或固定化形式(ImmobilizedBiocatalysts(固定化微生物催化劑)，W.Hartmeier，Springer VerlagBerlin，1988)。自由地選擇酶的量，這依賴于反應速率或所需反應時間和酶的類型(例如游離或固定化形式)，并且可借助簡單的初步實驗容易地確定。酶可以通過冷凍干燥回收。固定化可以使酶的除去(和任選的后面重新使用)變得容易。
適合的反應控制總是成功地得到至少一種呈光學純形式的對映體。當需要光學純的酯時，轉化率在酶催的酯生成的情況下應當小于(或等于)50％，或者在酶催水解或醇解的情況下應當大于(或等于)50％。當需要光學純的醇時，轉化率在酶催化的酯生成的情況下應當大于(或等于)50％，或者在水解或醇解的情況下應當小于(或等于)50％。
酶催反應的轉化率是借助HPLC直接從反應混合物測定的，或者從反應產物(酯和酸)的光學純度計算，后者同樣是借助手性相HPLC直接從反應混合物測定的。
下列實施例意欲詳細闡述本發(fā)明。
實施例所有所分離的產物和粗產物混合物都是用1H NMR和質譜或者HPLC鑒定的。酯和醇的光學純度是用HPLC測定的，例如使用Chiralpak AD 250×4.6(Daicel)或Chiracel OD 250×4.6。
方案Ia實施例1外消旋的順式-2-(3-羥基環(huán)己氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯的合成 將500g(4.3mol)順式-1，3-環(huán)己烷二醇溶于5L NMP中，并與336g(3.0mol)叔丁醇鉀(KOtBu)混合。內部溫度升至28℃。將混合物攪拌30分鐘，然后冷卻至-5℃，并逐滴與370g(約94％，約1.4mol)2-溴甲基-6-甲基苯甲酸甲酯混合，后者可以例如通過甲醇化2-溴甲基-6-甲基苯甲酰溴或者溴化2，6-二甲基苯甲酸甲酯來制備。將混合物攪拌30分鐘，然后用5L水稀釋。用正庚烷洗滌三次，每次3L，并棄去正庚烷溶液，之后，剩余水相用MTBE萃取四次，每次2.5L。合并MTBE相，用5L水洗滌一次，經Na2SO4干燥，隨后在減壓下蒸發(fā)濃縮。得到234g所需化合物，為微黃色油，并且無需進一步純化即可用于下面的反應(例如旋光拆分)；1H NMR(CDCl3)，δ＝1.27(m，1H)，1.45(m，1H)，1.55(m，1H)，1.74(m，1H)，1.83(m，1H)，2.05(m，1H)，2.34(s，3H)，3.47(m，1H)，3.72(m，1H)，3.91(s，3H)，4.58(dd，2H)，7.15(d，1H)，7.20(d，2H)，7.27(m，1H)。
實施例2外消旋的順式-2-(3-羥基環(huán)己氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯的旋光拆分 將490g粗的外消旋的順式-2-(3-羥基環(huán)己氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯(見實施例1)溶于3.1L二氯甲烷和850ml乙酸乙烯酯中，與18gNovozym 435混合，并在21-24℃下攪拌。28小時后，加入另外2gNovozym 435?？傆?4小時后，濾出酶終止反應，在減壓下蒸發(fā)濃縮濾液，得到540g。殘余物經過約6kg硅膠色譜處理(1∶1乙酸乙酯/正庚烷)，得到184g(1R，3S)-2-(3-羥基環(huán)己氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯；＞98％ee(HPLC，Chiralpak AD-H 250×4.6；1ml/min，庚烷/EtOH/CH3CN25∶1∶0.5+0.1％TFA)；1H NMR(CDCl3)，δ＝1.27(m，1H)，1.45(m，1H)，1.55(m，1H)，1.74(m，1H)，1.83(m，1H)，2.05(m，1H)，2.34(s，3H)，3.47(m，1H)，3.72(m，1H)，3.91(s，3H)，4.58(dd，2H)，7.15(d，1H)，7.20(d，2H)，7.27(m，1H)，和239g(1S，3R)-乙酸酯(93％ee，HPLC，Chiralcel OD/20 250×4.6，1ml/min，100∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN)。
實施例34-碘甲基-2-(3-甲氧基苯基)-5-甲基噁唑的合成 將150.0g(0.63mol)4-氯甲基-2-(3-甲氧基苯基)-5-甲基噁唑溶于2.7LTHF中，并與106g(0.71mol)NaI混合。將混合物攪拌4小時，放置過夜，抽吸濾出鹽，在減壓下濃縮濾液。約1-2小時后，所需碘化物固化，收率216g，mp58-59℃。1H NMR(CDCl3)δ＝2.30(s，3H)，3.88(s，3H)，4.34(s，2H)，6.97(dd，1H)，7.34(t，1H)，7.52(d，1H)，7.58(d，1H)。
實施例4(1R，3S)-2-{3-[2-(3-甲氧基苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己基-1-氧基甲基}-6-甲基苯甲酸甲酯的合成 將184g(0.66mol)(1R，3S)-2-(3-羥基環(huán)己氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯(見實施例2)溶于2.2L t-BuOMe中。加入88.0g(約55％，1.8mol)NaH，將混合物在20-22℃下攪拌45分鐘。加入282g(83.8mmol)4-碘甲基-2-(3-甲氧基苯基)-5-甲基噁唑(見實施例3)，將混合物在22℃下攪拌8小時，放置過夜。將混合物攪拌另外4小時，然后在冷卻下，小心地加入200ml水，然后加入另外1.5L。取出有機相，干燥(Na2SO4)，在減壓下濃縮。得到383g粗產物，經過約6kg硅膠色譜處理(19∶1二氯甲烷/丙酮)，收率199g微黃色油；1H NMR(CDCl3)，δ＝1.15-1.32(m，4H)，1.81(m，1H)，2.00(m，1H)，2.07(m，1H)，2.34(s，3H)，2.40(s，3H)，2.51(m，1H)，3.27(m，1H)，3.37(m，1H)，3.87(s，3H)，3.90(m，3H)，4.48(s，2H)，4.60(s，2H)，6.96(m，1H)，7.12-7.35(m，4H)，7.53(s，1H)，7.58(d，1H)。
實施例5(1R，3S)-2-{3-[2-(3-甲氧基苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己基-1-氧基甲基}-6-甲基苯甲酸的合成
將199g(0.41mol)(1R，3S)-2-{3-[2-(3-甲氧基苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己基-1-氧基甲基}-6-甲基苯甲酸甲酯(見實施例4)溶于2L乙醇中。加入250ml 33％NaOH，將混合物加熱至回流達15小時。在減壓下蒸餾除去乙醇，將殘余物溶于約2L水中，用MTB醚洗滌四次，每次500ml。用濃鹽酸酸化水相至pH1，同時冷卻，用1.5L乙酸乙酯萃取油性產物。將乙酸乙酯溶液干燥，在減壓下濃縮。將殘余物溶于約40℃的1.2L DIPE中。結晶，在60℃減壓下干燥，得到132.5g所需羧酸；mp103-105℃；＞98％ee(HPLC，Chiralpak AD-H 250×4.6；1ml/min，90∶7∶1庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％ TFA)；1H NMR(CDCl3)，δ＝1.14-1.38(m，4H)，1.80(m，1H)，1.93(m，2H)，2.41(s，3H)，2.44(s，3H)，2.61(m，1H)，3.40(m，2H)，3.86(s，3H)，4.53(s，2H)，4.68(dd，2H)，6.98(dd，1H)，7.17-7.36(m，4H)，7.55(s，1H)，7.61(d，1H)。
實施例64-碘甲基-2-(4-甲基苯基)-5-甲基噁唑的合成 將6.0g 4-氯甲基-2-(4-甲基苯基)-5-甲基噁唑溶于120ml THF中，并與4.18g(27.9mmol)NaI混合。將混合物攪拌3.5小時，加入另外1.5g NaI，將混合物加熱至35℃。30分鐘后，抽吸濾出鹽，在減壓下濃縮濾液。收率10.1g，mp104-105℃；1H NMR(CDCl3)δ＝2.29(s，3H)，2.39(s，3H)，4.34(s，2H)，7.24(d，2H)，7.88(d，2H)。
實施例7(1R，3S)-2-{3-[2-(4-甲基苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己基-1-氧基甲基}-6-甲基苯甲酸甲酯的合成
將36.0g(0.129mol)(1R，3S)-2-(3-羥基環(huán)己氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯(見實施例2)溶于430ml t-BuOMe中。加入17.2g(約55％，0.35mol)NaH，將混合物在23℃下攪拌30分鐘。加入55.1g(0.166mol)4-碘甲基-2-(4-甲基苯基)-5-甲基噁唑(見實施例6)。攪拌6小時，放置2天，之后加入400ml水，取出有機相。干燥(Na2SO4)和濃縮后，粗產物經過硅膠(約1kg)色譜處理(19∶1二氯甲烷/丙酮)，收率42g二烷基化1，3-環(huán)己烷二醇衍生物，為微黃色油；1H NMR(CDCl3)，δ＝1.16-1.31(m，4H)，1.80(m，1H)，1.97-2.1(m，2H)，2.34(s，3H)，2.39(s，3H)，2.40(s，3H)，2.52(m，1H)，3.27(m，1H)，3.37(m，1H)，3.89(s，3H)，4.47(s，2H)，4.59(s，2H)，7.13(d，1H)，7.20-7.28(m，4H)，7.88(d，1H)。
實施例8(1R，3S)-2-{3-[2-(4-甲基苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己基-1-氧基甲基}-6-甲基苯甲酸的合成 將42.0g(0.09mol)(1R，3S)-2-{3-[2-(4-甲基苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己基-1-氧基甲基}-6-甲基苯甲酸甲酯(見實施例7)溶于420ml乙醇中。加入45ml 33％NaOH，將混合物加熱至回流達約20小時。在減壓下蒸餾除去乙醇，將殘余物溶于約500ml水，溶液用MTB醚洗滌四次，每次100ml。用濃鹽酸酸化水相(pH1)，同時冷卻，用乙酸乙酯萃取油性產物。將乙酸乙酯溶液干燥，在減壓下濃縮。將殘余物溶于約250mlDIPE，同時加熱。冷卻后，開始結晶。當結晶結束后，在60℃下減壓干燥，得到28.4g所需羧酸；mp117-119℃；＞98％ee(HPLC，ChiralpakAD-H 250×4.6；1ml/min，90∶7∶1庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)；1HNMR(CDCl3)，δ＝1.14-1.36(m，4H)，1.80(m，1H)，1.91(m，2H)，2.39(s，3H)，2.40(s，3H)，2.46(s，3H)，2.64(m，1H)，3.40(m，2H)，4.54(s，2H)，4.68(dd，2H)，7.17-7.30(m，5H)，7.91(d，2H)。
實施例94-碘甲基-2-(3-甲基苯基)-5-甲基噁唑的合成 將6.0g 4-氯甲基-2-(4-甲基苯基)-5-甲基噁唑溶于120ml THF中，并與4.5g(30mmol)NaI混合。將混合物攪拌5小時，然后放置過夜。除去固體，在減壓下濃縮濾液，得到10.2g所需碘化物，mp～32℃；1HNMR(CDCl3)δ＝2.30(s，3H)，2.40(s，3H)，4.34(s，2H)，7.24(d，1H)，7.32(t，1H)，7.77(d，1H)，7.83(d，1H)。
實施例10(1R，3S)-2-{3-[2-(3-甲基苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己基-1-氧基甲基}-6-甲基苯甲酸甲酯的合成 將36.0g(0.129mol)(1R，3S)-2-(3-羥基環(huán)己氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯(見實施例2)溶于430ml t-BuOMe。加入17.19g(約55％，0.35mol)NaH，將混合物在20-22℃下攪拌30分鐘。加入55.1g(0.166mol)4-碘甲基-2-(3-甲基苯基)-5-甲基噁唑(見實施例9)。攪拌6小時，放置2天，之后加入400ml水，同時冷卻，取出有機相。干燥(Na2SO4)和濃縮后，粗產物(75g)經過硅膠(1.2kg)色譜處理(19∶1二氯甲烷/丙酮)，收率49g(1R，3S)-2-{3-[2-(3-甲基苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己基-1-氧基甲基}-6-甲基苯甲酸甲酯；1H NMR(CDCl3，δ＝1.13-1.31(m，4H)，1.80(m，1H)，1.97-2.1(m，2H)，2.34(s，3H)，2.40(s，3H)，2.41(s，3H)，2.52(m，1H)，3.27(m，1H)，3.37(m，1H)，3.90(s，3H)，4.48(s，2H)，4.59(s，2H)，7.12-7.33(m，4H)，7.78(d，1H)，7.84(s，1H)。
實施例11(1R，3S)-2-{3-[2-(3-甲基苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己基-1-氧基甲基}-6-甲基苯甲酸的合成 將49.0g(0.09mol)(1R，3S)-2-{3-[2-(3-甲基苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己基-1-氧基甲基}-6-甲基苯甲酸甲酯(見實施例10)溶于500ml乙醇。加入50ml 33％NaOH，將混合物加熱至回流達約14小時。在減壓下蒸餾除去乙醇，將殘余物溶于500ml水，溶液用MTB醚洗滌三次，每次150ml。用濃鹽酸酸化水相(pH1)，同時冷卻，用乙酸乙酯萃取油性產物。將乙酸乙酯溶液干燥，在減壓下濃縮。將殘余物溶于250mlDIPE，同時加熱。冷卻后，開始結晶。當結晶結束后，在60℃下減壓干燥，得到29.9g所需羧酸；mp109-111℃；＞98％ee(HPLC，ChiralpakAD-H 250×4.6；1ml/min，90∶7∶1庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)；1HNMR(CDCl3)，δ＝1.14-1.36(m，4H)，1.80(m，1H)，1.93(m，2H)，2.40(s，2×3H)，2.45(s，3H)，2.64(m，1H)，3.40(m，2H)，4.53(s，2H)，4.68(dd，2H)，7.17-7.34(m，5H)，7.81(d，1H)，7.85(s，1H)。
方案IIa實施例12順式-3-[2-(3-甲氧基苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己烷-1-醇的旋光拆分 將24.9g外消旋的順式-3-[2-(3-甲氧基苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己烷-1-醇(將順式-1，3-環(huán)己烷二醇用4-碘甲基-2-(3-甲氧基苯基)-5-甲基噁唑烷基化加以制備)溶于100ml乙酸乙烯酯中，與1.0g ChirazymeL-2，lyo.混合，并在20-23℃下攪拌。約30分鐘后，濾出酶，在減壓下濃縮溶液，粗產物25.8g。經過硅膠色譜處理(10∶1-0∶1正庚烷/乙酸乙酯)后，得到13.7g(1S，3R)-3-[2-(3-甲氧基苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己烷-1-醇和11.3g(1R，3S)-乙?；衔?。
實施例13(1R，3S)-3-[2-(3-甲氧基苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己烷-1-醇的制備 將11.2g來自實施例12的(1R，3S)-乙酸酯溶于約100ml MeOH中，與0.5ml NaOMe(30％)混合，并在20-23℃下攪拌。3.5小時后，將混合物用濃乙酸中和，溶于乙酸乙酯中，用NaHCO3洗滌，經Na2SO4干燥，在減壓下濃縮。通過硅膠過濾(10∶1-0∶1正庚烷/乙酸乙酯)后，得到8.8g(1R，3S)-3-[2-(3-甲氧基苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己烷-1-醇，具有92％ee(HPLC，Chiralpak AD-H 250×4.6；1ml/min，90∶7∶1庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)。
實施例14(1R，3S)-2-{3-[2-(3-甲氧基苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己基-1-氧基甲基}-6-甲基苯甲酸甲酯的合成 將1.4g(4.4mmol)(1R，3S)-3-[2-(3-甲氧基苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己醇(見實施例13)溶于15ml t-BuOMe中，在24-27℃下與1.20g(10.7mmol)KOtBu混合，并攪拌約30分鐘。將混合物冷卻至0-5℃，滴加1.89g(約94％，約7.4mmol)2-溴甲基-6-甲基苯甲酸甲酯，將混合物在0-5℃下攪拌30分鐘。無需進一步冷卻，反應混合物在1.5小時后具有約20℃的溫度。攪拌過夜，加入約200mg KOtBu，之后在22℃下攪拌另外1小時后反應完全。在減壓下蒸餾除去溶劑，使殘余物在水與t-BuOMe之間分配，將含有產物的有機相在減壓下濃縮，干燥，得到1.6g(1R，3S)-2-{3-[2-(3-甲氧基苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己基-1-氧基甲基}-6-甲基苯甲酸甲酯，為微黃色油；1H NMR(CDCl3)，δ＝1.15-1.32(m，4H)，1.81(m，1H)，2.00(m，1H)，2.07(m，1H)，2.34(s，3H)，2.40(s，3H)，2.51(m，1H)，3.27(m，1H)，3.37(m，1H)，3.87(s，3H)，3.90(s，3H)，4.48(s，2H)，4.60(s，2H)，6.96(m，1H)，7.12-7.35(m，4H)，7.53-7.60(m，2H)。
實施例15(1S，3R)-2-{3-[2-(3-甲氧基苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己基-1-氧基甲基}-6-甲基苯甲酸甲酯的合成 從來自實施例12的(1S，3R)-3-[2-(3-甲氧基苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己烷-1-醇開始，按與實施例14相似的方式烷基化，得到(1S，3R)-2-{3-[2-(3-甲氧基苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己基-1-氧基甲基}-6-甲基苯甲酸甲酯；1H NMR數據與實施例14一致。
實施例16順式-3-[2-(4-氟苯基)噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己烷-1-醇的旋光拆分，(1S，3R)-3-[2-(4-氟苯基)噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己烷-1-醇的制備
將30mg外消旋的順式-3-[2-(4-氟苯基)噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己烷-1-醇溶于約3ml二氯甲烷中，與60mg乙酸對硝基苯基酯混合，并在20-23℃下與10mg Novozyme 435一起攪拌。70小時后，濾出固定的酶。直接從已蒸發(fā)濃縮的反應混合物測定光學純度，(1S，3R)-3-[2-(4-氟苯基)噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己烷-1-醇＞95％ee(HPLC，Chiralpak AD 250×4.6；1ml/min，乙腈)，(1R，3S)-乙酸酯為95％ee(HPLC，Chiralpak AD250×4.6；1ml/min，乙腈)。為了分離(1S，3R)-3-[2-(4-氟苯基)噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己烷-1-醇，將粗混合物經過硅膠色譜處理(乙酸乙酯/正庚烷)；收率12mg，96％ee。
實施例17(1S，3R)-2-{3-[2-(4-氟苯基)噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己基-1-氧基甲基}-6-甲基苯甲酸甲酯的合成 從來自實施例16的(1S，3R)-3-[2-(4-氟苯基)噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己烷-1-醇開始，用2-溴甲基-6-甲基苯甲酸甲酯烷基化，得到(1S，3R)-2-{3-[2-(4-氟苯基)噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己基-1-氧基甲基}-6-甲基苯甲酸甲酯(見實施例35)。
實施例183-[2-(4-甲基苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己烷-1-醇的旋光拆分 (其中R4＝p-Me-，R5＝H，R3＝Me)將16.3g外消旋3-[2-(4-甲基苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己烷-1-醇溶于100ml乙酸乙烯酯中，與1.9g Chirazyme L-2，lyo.混合，并在20-23℃下攪拌。約30分鐘后，濾出酶，在減壓下濃縮溶液，粗產物16.6g。經過硅膠色譜處理(10∶1-0∶1正庚烷/乙酸乙酯)后，得到8.6g(1S，3R)-3-[2-(4-甲基苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己烷-1-醇和6.8g(1R，3S)-乙酸酯。
實施例19(1R，3S)-3-[2-(4-甲基苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己烷-1-醇的制備 將6.8g來自實施例18的(1R，3S)-乙?；衔锶苡诩s65ml MeOH中，與0.32ml NaOMe(30％)混合，并在20-23℃下攪拌。4小時后，將混合物用乙酸中和，在減壓下濃縮，溶于乙酸乙酯中，用NaHCO3洗滌，干燥(Na2SO4)，在減壓下濃縮。通過硅膠過濾(10∶1-0∶1正庚烷/乙酸乙酯)后，得到8.8g所需的(1R，3S)-3-[2-(4-甲基苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己烷-1-醇，具有95％ee(HPLC，Chiralpak AD 250×4.6；1ml/min，90∶7∶1庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)。
實施例20順式-3-[2-苯基-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己烷-1-醇的旋光拆分 將2.0g外消旋的順式-3-[2-苯基-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己烷-1-醇溶于50ml乙酸乙烯酯中，與0.1g Chirazyme L-2，lyo.混合，并在20-23℃下攪拌。約5小時后，濾出酶，在減壓下濃縮溶液。經過硅膠色譜處理(2∶1-1∶2正庚烷/乙酸乙酯)后，得到1.0g(1S，3R)-3-[2-苯基-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己烷-1-醇，為淺黃色固體，和0.96g乙酰化(1R，3S)化合物，為無色的油。
實施例21(1R，3S)-3-[2-苯基-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己烷-1-醇的制備 將0.96g來自實施例20的(1R，3S)-乙?；衔锶苡诩s5-10mlMeOH中，與0.1ml NaOMe(30％)混合，并在20-23℃下攪拌。3小時后，將混合物用乙酸中和，在減壓下濃縮，溶于乙酸乙酯中，用飽和NaHCO3洗滌，干燥(MgSO4)，在減壓下濃縮。通過硅膠過濾(10∶1-0∶1正庚烷/乙酸乙酯)后，得到0.84g所需的(1R，3S)-3-[2-苯基-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己烷-1-醇，具有95％ee(HPLC，Chiralpak AD 250×4.6；1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)。
實施例22順式-3-[2-(4-甲氧基苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己烷-1-醇的旋光拆分 將2.0g外消旋的順式-3-[2-(4-甲氧基苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己烷-1-醇溶于50ml乙酸乙烯酯中，與0.1g Chirazyme L-2，lyo.混合，并在20-23℃下攪拌。約5小時后，濾出酶，在減壓下濃縮溶液。經過硅膠色譜處理(2∶1-1∶2正庚烷/乙酸乙酯)后，得到1.16g(1S，3R)-3-[2-(4-甲氧基苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己烷-1-醇和0.79g(1R，3S)-乙酸酯。
實施例23
(1R，3S)-3-[2-(4-甲氧基苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己烷-1-醇的制備 將0.79g來自實施例22的乙酸酯溶于約5-10ml MeOH中，與0.1mlNaOMe(30％)混合，并在20-23℃下攪拌。3小時后，將混合物用稀乙酸中和，在減壓下濃縮，溶于乙酸乙酯中，用飽和NaHCO3洗滌，干燥(MgSO4)，在減壓下濃縮。通過硅膠過濾(10∶1-0∶1正庚烷/乙酸乙酯)后，得到0.84g(1R，3S)-3-[2-(4-甲氧基苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己烷-1-醇，為黃色的油，具有92％ee(HPLC，Chiralpak AD 250×4.6；1ml/min，90∶7∶1庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)。
實施例24順式-3-[2-(4-氟苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己烷-1-醇的旋光拆分 將1.70g外消旋的順式-3-[2-(4-氟苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己烷-1-醇溶于50ml乙酸乙烯酯中，與0.1g Chirazyme L-2，lyo.混合，并在20-23℃下攪拌。約1.5小時后，濾出酶，在減壓下濃縮溶液。經過硅膠色譜處理(5∶1-1∶1正庚烷/乙酸乙酯)后，得到1.0g(1S，3R)-3-[2-(4-氟苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己烷-1-醇和0.75g(1R，3S)-乙酸酯。
實施例25(1R，3S)-3-[2-(4-氟苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己烷-1-醇的制備
將0.75g來自實施例24的乙酸酯溶于約30ml MeOH中，與0.2mlNaOMe(30％)混合，并在20-23℃下攪拌。1小時后，將混合物用稀乙酸中和，在減壓下濃縮，溶于乙酸乙酯中，用飽和NaHCO3洗滌，干燥(MgSO4)，在減壓下濃縮，收率0.59g(1R，3S)-3-[2-(4-氟苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己烷-1-醇，為白色固體，具有94％ee(HPLC，ChiralpakOD/19250×4.6；1ml/min，110∶2∶1庚烷/EtOH/CH3CN+0.05％TFA)。
方案IIb實施例26乙酸3-[2-(4-氟苯基)噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己基酯的立體選擇性水解，(1R，3S)-3-[2-(4-氟苯基)噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己烷-1-醇的制備 將約10mg乙酸3-[2-(4-氟苯基)噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己基酯(按與戊二酸單-(3-芐氧基環(huán)己基)酯的合成相似的方式，使3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇與乙酸酐反應來制備，見實施例39)溶于2ml磷酸鹽緩沖液(0.1M，pH＝7.0)和2ml DME中，與約5mg Chirazyme L-2，lyo.在20-23℃下攪拌約20-24小時。反應混合物用二氯甲烷萃取。將有機相與甲苯混合，并在減壓下蒸發(fā)濃縮。測定光學純度，(1R，3S)-3-[2-(4-氟苯基)噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己烷-1-醇為99.4％ee(HPLC，Chiralpak AD 250×4.6；1ml/min，乙腈)，(1S，3R)-乙酸酯為98.9％ee(HPLC，Chiralcel OD250×4.6；1ml/min，110∶5∶1庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)。
方案IIIa實施例27
外消旋的順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的合成 將150.0g(1.29mol)順式-1，3-環(huán)己烷二醇溶于1.5L NMP中，與111.6g(0.99mol)叔丁醇鉀(KOtBu)混合，并在25-27℃下攪拌。約30分鐘后，將混合物冷卻至0℃，逐滴與78.1g(0.46mol)芐基溴混合。將混合物在約0℃下攪拌15min，然后加入1.5L水。用700ml正庚烷洗滌三次，棄去正庚烷溶液，之后將水溶液用500ml MTBE萃取四次。合并MTBE相，用水洗滌兩次，每次1L，干燥(Na2SO4)，隨后在減壓下蒸發(fā)濃縮。得到48.0g所需化合物，為澄清黃色的油；1H NMR(CDCl3)，δ＝1.29(m，1H)，1.43-1.93(m，6H)，2.06(m，1H)，2.55(s(br.)，1H)，3.56(m，1H)，3.74(br，1H)，4.55(dd，2H)，7.25-7.36(m，5H)。
實施例283-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的旋光拆分 將20.3g順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇溶于35ml乙酸乙烯酯和125ml二氯甲烷中，與2.0g Novozym 435混合，并在20-23℃下攪拌6小時。放置過夜后，濾出酶。抽取樣品，在減壓下蒸發(fā)濃縮。(1S，3R)-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的對映體過量＞99％(HPLC，Chiralpak AD-H 250×4.6；1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)，(1R，3S)-乙酸酯的對映體過量為78％(HPLC，Chiralcel OD 250×4.6；1ml/min，100∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN)。
實施例293-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的旋光拆分
將100.0g順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇溶于170ml乙酸乙烯酯和630ml二氯甲烷中，與5.0g Novozym 435混合，并在20-23℃下攪拌26小時。濾出酶，抽取樣品，在減壓下蒸發(fā)濃縮。(1S，3R)-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的對映體過量＞99％(HPLC，Chiralpak AD-H 250×4.6；1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)，(1R，3S)-乙酸酯的對映體過量為90％(HPLC，Chiralcel OD 250×4.6；1ml/min，100∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN)。
實施例30(1S，3R)-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的分離，用吡啶-SO3分離乙酸酯與醇的混合物將1.9g通過立體選擇性酶催?；?-芐氧基環(huán)己烷-1-醇得到的粗乙酸酯/醇混合物(來自實施例29)與2g吡啶-SO3于20-22℃下在10ml吡啶與2ml DMF中攪拌。4小時后，芐氧基環(huán)己醇向硫酸酯的吡啶鹽的轉化事實上是定量的。將反應混合物用40ml水稀釋，用約20ml MTBE萃取兩次。MTBE相定量地含有未改變的(1R，3S)-乙酸酯。在減壓下蒸發(fā)濃縮其余無乙酸酯的水相。將殘余物與MTBE混合，硫酸化產物固化，收率2.7g。
將2.7g(1S，3R)-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的硫酸酯的吡啶鹽于55℃下在45ml THF、4ml水和1ml濃硫酸中攪拌2小時。將混合物與40ml水混合，加入約10ml MTBE，分離各相，水相用MTBE萃取一次。合并有機相，干燥(Na2SO4)，蒸發(fā)濃縮，收率640mg淺黃色油。NMR數據與實施例16中的數據一致；測試光學純度，得到＞99％ee。
實施例31(1S，3R)-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的分離，萃取分離乙酸酯與醇的混合物將10g來自實施例29的粗乙酸酯/醇混合物溶于約90ml甲醇和約70ml水中，并用正庚烷洗滌三次，每次約50ml。合并庚烷相(主要含有乙酸酯)，用50ml 1∶1甲醇/水萃取。合并水相，再次用正庚烷洗滌。濃縮水相后，得到3.6g所需的(1S，3R)-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇，合并庚烷相，濃縮，得到5.5g(1R，3S)-乙酸酯。
實施例324-碘甲基-2-(4-氟苯基)噁唑的合成 將4.0g(18.9mmol)4-氯甲基-2-(4-氟苯基)噁唑溶于80ml THF中，并與3.18g(21.2mmol)NaI混合。將混合物在20-23℃下攪拌3小時，并在50℃下攪拌約12小時，抽吸濾出鹽，在減壓下濃縮濾液，收率6.1g。產物結晶，mp 100-102℃；1H NMR(CDCl3)δ＝4.34(s，2H)，6.97(dd，1H)，7.14(m，2H)，7.68(s，1H)，8.03(m，2H)。
實施例33(1S，3R)-4-(3-芐氧基環(huán)己基-1-氧基甲基)-2-(4-氟苯基)噁唑的合成 將2.0g(9.7mmol)(1S，3R)-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇溶于35ml t-BuOMe。加入1.3g(約55％，43.7mmol)NaH，將混合物在22℃下攪拌60分鐘。加入3.9g(12.9mmol)4-碘甲基-2-(4-氟苯基)噁唑(實施例32)，將混合物在22-23℃下攪拌約3小時。放置過夜后，將混合物在22-23℃下攪拌另外11小時。加入水(約30ml)，同時冷卻，取出有機相。干燥(Na2SO4)，濃縮(粗收率4.5g)，經過硅膠色譜處理(19∶1二氯甲烷/丙酮)，得到2.4g所需順式構型的光學純的二烷基化1，3-環(huán)己烷二醇衍生物，為白色固體；1H NMR(CDCl3)，δ＝1.11-1.39(m，4H)，1.82(m，1H)，2.07(m，2H)，2.55(m，1H)，3.38(m，2H)，4.55(s，2H)，4.57(s，2H)，7.13(m，2H)，7.25-7.35(m，5H)，7.63(s，1H)，8.02(m，2H)。
實施例34借助氫化作用合成(1R，3S)-3-[2-(4-氟苯基)噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己醇 將2.4g(1S，3R)-4-(3-芐氧基環(huán)己基-1-氧基甲基)-2-(4-氟苯基)噁唑溶于約40ml甲醇中，與一匙尖Pd/C(10％，包含50％水)混合，并在20-23℃下在大氣壓下氫化約8小時。濾出催化劑，濃縮剩余溶液，得到1.8g所需順式構型的單烷基化1，3-環(huán)己烷二醇衍生物，為油，當加入DIPE時結晶，收率1.6g；mp 81-82℃；1H NMR(CDCl3)，δ＝1.25-2.14(m，9H)，3.63(m，1H)，3.75(m，1H)，4.55(dd，2H)，7.13(m，2H)，7.64(s，1H)，8.02(m，2H)；MS(DCI)292.3(100％)。
實施例35(1R，3S)-2-{3-[2-(4-氟苯基)噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己基-1-氧基甲基}-6-甲基苯甲酸甲酯的合成 將0.8g(2.75mmol)(1R，3S)-3-[2-(4-氟苯基)噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己醇(來自實施例34)溶于10ml t-BuOMe中，與0.78g(6.95mmol)KOtBu混合，并在22-27℃下攪拌約30分鐘。將混合物冷卻至0-5℃，滴加1.24g(約94％，約4.8mmol)2-溴甲基-6-甲基苯甲酸甲酯，將混合物先在3℃下攪拌2小時，再在20℃下攪拌另外1小時。將混合物在18-21℃下攪拌過夜，然后蒸餾除去溶劑。使殘余物在水與t-BuOMe之間分配。將有機相干燥(Na2SO4)，在減壓下濃縮，收率1.04g(1R，3S)-2-{3-[2-(4-氟苯基)噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己基-1-氧基甲基}-6-甲基苯甲酸甲酯，為微黃色油；1H NMR(CDCl3)，δ＝1.15-1.32(m，4H)，1.82(m，1H)，1.98-2.1(m，2H)，2.34(s，3H)，2.50(m，1H)，3.27(m，1H)，3.39(m，1H)，3.90(s，3H)，4.54(s，2H)，4.60(s，2H)，7.11-7.30(m，5H)，7.63(s，1H)，8.02(m，2H)。
實施例36(1S，3R)-4-(3-芐氧基環(huán)己基-1-氧基甲基)-2-(3-甲氧基苯基)-5-甲基噁唑的合成 將4.6g(22.3mmol)(1S，3R)-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇溶于70ml氯苯。加入6.6g(58.8mm0l)KOtBu，將混合物在22℃下攪拌30分鐘，然后加入10.3g(31.3mmol)4-碘甲基-2-(3-甲氧基苯基)-5-甲基噁唑。溫度升至35℃。將反應物輕微冷卻，在22-23℃下攪拌另外2小時。已經在減壓下蒸餾除去氯苯后，使殘余物在t-BuOMe與水之間分配。將有機相干燥(Na2SO4)，在減壓下濃縮，粗收率10.6g。該物質無需進一步純化即可用于下面的反應(氫化，見實施例37)。
實施例37借助氫化作用合成(1R，3S)-3-[2-(3-甲氧基苯基)噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己醇 將10.5g(1S，3R)-4-(3-芐氧基環(huán)己基-1-氧基甲基)-2-(3-甲氧基苯基)噁唑溶于約120ml甲醇中，與2g Pd/C(10％，含有50％水)混合，并于20-23℃下在大氣壓下氫化過夜。濾出催化劑，濃縮剩余溶液，在MTB醚與水之間分配，干燥有機相，得到6.4g所需順式構型的單烷基化1，3-環(huán)己烷二醇衍生物，為黃色的油。取1g該物質經過硅膠色譜處理(乙酸乙酯)，得到0.8g無色的油；1H-NMR(CDCl3)，δ＝1.25-1.90(m，7H)，2.12(m，1H)，2.41(s，3H)，3.61(m，1H)，3.75(m，1H)，3.87(s，3H)，4.48(dd，2H)，6.96(d，1H)，7.33(t，1H)，7.53(s，1H)，7.58(d，1H)；MS(ES+)318.27(83％)，243.18(100％)。
實施例38(1R，3S)-2-{3-[2-(3-甲氧基苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己基-1-氧基甲基}-6-甲基苯甲酸甲酯的合成 將136mg(0.4mmol)(1R，3S)-3-[2-(3-甲氧基苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己醇(來自實施例37，氫化作用)溶于1ml氯苯中，在24-27℃下與120mg(1.07mmol)KOtBu混合，攪拌約30分鐘。將混合物冷卻至0-5℃，滴加189mg(約94％，約0.78mmol)2-溴甲基-6-甲基苯甲酸甲酯，將混合物在0-5℃下攪拌最初的30分鐘。無需進一步冷卻，反應混合物在1.5小時后具有約20℃的溫度。放置過夜，加入約20mg KOtBu，在22℃下攪拌另外1小時后，反應完全。在減壓下蒸餾除去氯苯，使殘余物在水與t-BuOMe之間分配，干燥含有產物的有機相，在減壓下濃縮后得到160mg(1R，3S)-2-{3-[2-(3-甲氧基苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己基-1-氧基甲基}-6-甲基苯甲酸甲酯，為微黃色油；1H-NMR(CDCl3)，δ＝1.15-1.32(m，4H)，1.81(m，1H)，2.00(m，1H)，2.06(m，1H)，2.34(s，3H)，2.40(s，3H)，2.51(m，1H)，3.27(m，1H)，3.36(m，1H)，3.87(s，3H)，3.90(m，3H)，4.48(s，2H)，4.60(s，2H)，6.96(m，1H)，7.12-7.35(m，4H)，7.53-7.60(m，2H)。
方案IIIb實施例39戊二酸單-(3-芐氧基環(huán)己基)酯的合成
外消旋將3.0g 3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇、2.15g戊二酸酐和3.03g三乙胺于21-23℃下在25ml二氯甲烷中攪拌。完全轉化后，將混合物加入到水中，萃取，經MgSO4干燥。在減壓下濃縮后，得到4.3g所需化合物；1HNMR(CDCl3)，δ＝1.20-1.28(m，4H)，1.82(m，1H)，1.90-1.97(m，3H)，2.05(m，1H)，2.32-2.42(m，5H)，3.39(m，1H)，4.55(dd，2H)，4.69(m，1H)，7.25-7.33(m，5H)，8.7(br.，1H)。
實施例40戊二酸單-(3-芐氧基環(huán)己基)酯的立體選擇性水解，(1R，3S)-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的制備 將20mg外消旋的戊二酸單-(3-芐氧基環(huán)己基)酯(來自實施例39)分配到2ml磷酸鹽緩沖液(pH8)和3-5滴DME中，與3-5mg Novozyme 435混合，并在21-23℃下攪拌。約50％轉化后，使反應溶液在飽和NaHCO3水溶液與乙酸乙酯之間分配。將乙酸乙酯相干燥，濃縮，收率5mg(1R，3S)-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇，對映體過量＞95％(HPLC，ChiralpakAD-H 250×4.6；1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)。
實施例41(1R，3S)-4-(3-芐氧基環(huán)己基-1-氧基甲基)-2-(4-氟苯基)噁唑的合成
從(1R，3S)-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇(見實施例40)開始，用4-碘甲基-2-(4-氟苯基)噁唑(見實施例32)烷基化，得到(1R，3S)-4-(3-芐氧基環(huán)己基-1-氧基甲基)-2-(4-氟苯基)噁唑，參見實施例33。
順式-1，3-環(huán)己烷二醇烷基化的其它實例實施例42外消旋的順式-2-(3-羥基環(huán)己氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯的合成 將5g(42.8mmol)順式-1，3-環(huán)己烷二醇溶于50ml二甲氧基乙烷(DME)中，在20-23℃下與3.36g(30mmol)叔丁醇鉀(KOtBu)混合，并攪拌。約30分鐘后，將混合物冷卻至5℃，滴加3.7g(約50％)2-溴甲基-6-甲基苯甲酸甲酯，后者可以例如通過甲醇化酰溴(2-溴甲基-6-甲基苯甲酰溴)或者通過溴化2，6-二甲基苯甲酸甲酯來制備。將混合物在5-10℃下攪拌1小時，然后在20-23℃下攪拌過夜。加入水和甲基叔丁基醚(MTBE)，將混合物劇烈攪拌，分離各相，水相再次用MTBE洗滌，合并有機相，在減壓下濃縮。殘余物經過硅膠色譜處理(1∶1乙酸乙酯/正庚烷)。得到600mg所需化合物，為淺黃色油；1H NMR(CDCl3)，δ＝1.27(m，1H)，1.45(m，1H)，1.55(m，1H)，1.74(m，1H)，1.83(m，1H)，2.05(m，1H)，2.34(s，3H)，3.47(m，1H)，3.72(m，1H)，3.91(s，3H)，4.58(dd，2H)，7.15(d，1H)，7.20(d，2H)，7.27(m，1H)。
實施例43外消旋的順式-2-(3-羥基環(huán)己氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯的合成 將10.0g(86mmol)順式-1，3-環(huán)己烷二醇溶于150ml甲基叔丁基醚(MTBE)中，在約20℃下與6.72g(59.9mmol)叔丁醇鉀(KOtBu)混合，并攪拌。約30分鐘后，將懸浮體冷卻至5℃，逐滴與7.4g(約50％)2-溴甲基-6-甲基苯甲酸甲酯混合，后者可以例如通過甲醇化酰溴(2-溴甲基-6-甲基苯甲酰溴)或者通過溴化2，6-二甲基苯甲酸甲酯來制備。將混合物在0-5℃下攪拌1小時，加熱至20-23℃，攪拌過夜。加入水，將混合物劇烈攪拌，分離各相，有機相再次用水洗滌，然后在減壓下濃縮有機相。殘余物(4.6g)經過硅膠色譜處理(1∶1乙酸乙酯/正庚烷)。得到1.2g所需化合物，為淺黃色油；1H NMR(CDCl3)，δ＝1.27(m，1H)，1.45(m，1H)，1.55(m，1H)，1.74(m，1H)，1.82(m，1H)，2.05(m，1H)，2.34(s，3H)，3.46(m，1H)，3.72(m，1H)，3.91(s，3H)，4.58(dd，2H)，7.15(d，1H)，7.20(d，2H)，7:27(m，1H)。
實施例44外消旋的順式-2-(3-羥基環(huán)己氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯的合成 將5g(42.8mmol)順式-1，3-環(huán)己烷二醇溶于40ml氯苯和10ml 1，3-二甲基-3，4，5，6-四氫-2(1H)-嘧啶酮(DMPU，二甲基亞丙基脲)，在20-23℃下與3.36g(30mm0l)叔丁醇鉀(KOtBu)混合，并攪拌。10-15分鐘后，將混合物冷卻至15-20℃，滴加3.7g(約50％)2-溴甲基-6-甲基苯甲酸甲酯。將混合物在20℃下攪拌1.5小時，然后加入到水中。取出有機相，在減壓下濃縮。將殘余物溶于NMP/水中，用正庚烷洗滌兩次以除去雜質。隨后，用MTBE萃取兩次分離產物。合并MTBE相，用水洗滌，干燥(Na2SO4)，在減壓下濃縮。殘余物(1.2g)經過硅膠色譜處理(1∶1乙酸乙酯/正庚烷)。得到580mg所需化合物，為淺黃色油；1H-NMR(CDCl3)，δ＝1.27(m，1H)，1.45(m，1H)，1.55(m，1H)，1.74(m，1H)，1.83(m，1H)，2.05(m，1H)，2.34(s，3H)，3.47(m，1H)，3.72(m，1H)，3.91(s，3H)，4.58(dd，2H)，7.15(d，1H)，7.20(d，2H)，7.27(m，1H)。
借助立體選擇性酯生成(EF)的旋光拆分的其它實例實施例45順式-2-(3-羥基環(huán)己氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯的旋光拆分 將730mg外消旋的順式-2-(3-羥基環(huán)己基-1-氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯溶于5ml二氯甲烷和2ml乙酸乙烯酯中，加熱至38℃，并與100mg Novozym 435混合。約5小時后，濾出酶終止反應，用HPLC測定所生成的乙酸酯和未轉化的醇的光學純度(HPLC乙酸酯Chiralcel OD250×4.6，1ml/min，100∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN；HPLC醇Chiralpak AD250×4.6，1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)。(3S，1R)-2-(3-羥基環(huán)己基-1-氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯的光學純度為98％ee，(3R，1S)-乙酸酯為86％ee。
實施例46順式-2-(3-羥基環(huán)己基-1-氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯的旋光拆分 將20mg外消旋的順式-2-(3-羥基環(huán)己基-1-氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯溶于2ml氯苯和1ml乙酸乙烯酯中，在22-25℃下與8mg ChirazymeL-2lyo.(Roche)混合，并攪拌。約6小時后，濾出酶終止反應，用HPLC測定所生成的乙酸酯和未轉化的醇的光學純度(HPLC乙酸酯ChiralcelOD 250×4.6，1ml/min，100∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN；HPLC醇ChiralpakAD 250×4.6，1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)，(3S，1R)-2-(3-羥基環(huán)己基-1-氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯為84％ee，(3R，1S)-乙酸酯為95％ee。
實施例47順式-2-(3-羥基環(huán)己基-1-氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯的旋光拆分
將1.0g外消旋的順式-2-(3-羥基環(huán)己基-1-氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯溶于10ml 1，2-二氯乙烷和2ml丙酸乙烯酯中，與25mg ChirazymeL-2lyo.(Roche)混合，并在21-24℃下攪拌40小時。濾出酶，在減壓下濃縮濾液，殘余物經過硅膠色譜處理(1∶1乙酸乙酯/正庚烷)，得到0.49g(3R，1S)-丙酸酯，具有92％ee(HPLC，Chiralcel OD 250×4.6，1ml/min，100∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN)；1H NMR(CDCl3)，δ＝1.13(t，3H)，1.15-1.36(m，4H)，1.79(m，1H)，1.91(m，1H)，2.01(m，1H)，2.30(q，2H)，2.34(s，3H)，2.35(m，1H)，3.34(m，1H)，3.90(s，3H)，4.58(dd，2H)，4.67(m，1H)，7.14(d，1H)，7.19(d，1H)，7.26(m，1H)，和0.3g未轉化的(3S，1R)-2-(3-羥基環(huán)己基-1-氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯，具有98％ee(HPLC，ChiralpakAD-H 250×4.6，1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)；1HNMR(CDCl3)，δ＝1.27(m，1H)，1.45(m，1H)，1.55(m，1H)，1.74(m，1H)，1.83(m，1H)，2.05(m，1H)，2.34(s，3H)，3.47(m，1H)，3.72(m，1H)，3.91(s，3H)，4.58(dd，2H)，7.15(d，1H)，7.20(d，2H)，7.27(m，1H)。
實施例48順式-2-(3-羥基環(huán)己基-1-氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯的旋光拆分 將10mg外消旋的順式-2-(3-羥基環(huán)己基-1-氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯溶于1ml乙酸乙烯酯中，與約4-6mg脂酶TL(施氏假單孢菌(Pseud.stutzeri)，Meito Sangyo)混合，并在22-25℃下攪拌。轉化率＞50％后，濾出酶終止反應，測定未轉化的(3S，1R)-2-(3-羥基環(huán)己基-1-氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯的光學純度＞98％ee(HPLC，Chiralpak AD 250×4.6，1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)。
實施例49順式-2-(3-羥基環(huán)己氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯的旋光拆分 將3.9g外消旋的順式-2-(3-羥基環(huán)己基-1-氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯溶于25ml二氯甲烷和10ml乙酸乙烯酯中，加熱至45℃中，并與250mg Novozym 435混合。轉化率約45％后，濾出酶終止反應，濃縮反應混合物。殘余物經過硅膠色譜處理(1∶1乙酸乙酯/正庚烷)，得到1.9g(3R，1S)-乙酸酯(＞95％ee，HPLC，Chiralcel OD 250×4.6，1ml/min，100∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN)和1.9g未轉化的(3S，1R)-2-(3-羥基環(huán)己基-1-氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯(82％ee，HPLC，Chiralpak AD 250×4.6，1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)。
實施例50順式-2-(3-羥基環(huán)己氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯的旋光拆分 將20mg外消旋的順式-2-(3-羥基環(huán)己基-1-氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯溶于2ml甲苯和1ml乙酸乙烯酯中，在20-23℃下與6-8mgChiralzyme L-2lyo.(Roche)混合，并攪拌。轉化率約45％后，濾出酶終止反應，測定所生成的(3R，1S)-乙酸酯的光學純度94％ee(HPLC，Chiralcel OD 250×4.6，1ml/min，100∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN)。
實施例51順式-2-(3-羥基環(huán)己氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯的旋光拆分
將10mg外消旋的順式-2-(3-羥基環(huán)己基-1-氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯溶于1ml乙酸乙烯酯中，與約4-6mg脂酶QL(產堿桿菌屬，MeitoSangyo)混合，并在20-23℃下攪拌。轉化率約52％后，濾出酶終止反應，測定所生成的乙酸酯和未轉化的醇的光學純度，乙酸酯的ee91％(HPLC，Chiralcel OD 250×4.6，1ml/min，100∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN)，(3S，1R)-2-(3-羥基環(huán)己基-1-氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯的ee98％(HPLC，Chiralpak AD 250×4.6，1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)。
實施例52順式-2-(3-羥基環(huán)己氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯的旋光拆分 將10mg外消旋的順式-2-(3-羥基環(huán)己基-1-氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯溶于1ml乙酸乙烯酯中，與約4-6mg脂酶SL(洋蔥假單孢菌，MeitoSangyo)混合，并在20-23℃下攪拌。轉化率約52％后，濾出酶終止反應，測定所生成的乙酸酯和未轉化的醇的光學純度，乙酸酯的ee90％(HPLC，Chiralcel OD 250×4.6，1ml/min，100∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN)，(3S，1R)-2-(3-羥基環(huán)己基-1-氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯的ee＞95％(HPLC，Chiralpak AD 250×4.6，1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)。
實施例53順式-2-(3-羥基環(huán)己氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯的旋光拆分
將39g外消旋的順式-2-(3-羥基環(huán)己基-1-氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯溶于250ml二氯甲烷和50ml乙酸乙烯酯中，加熱至45℃中，并與1.0g Novozym 435混合。25小時后，加入另外0.5g Novozym 435。另外6.5小時后，濾出酶，濃縮反應混合物。殘余物經過630g硅膠色譜處理(1∶1乙酸乙酯/正庚烷)，得到18.2g(3S，1R)-2-(3-羥基環(huán)己基-1-氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯(＞98％ee，HPLC，Chiralpak AD-H 250×4.6，1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)；1H NMR(CDCl3)，δ＝1.27(m，1H)，1.45(m，1H)，1.55(m，1H)，1.74(m，1H)，1.83(m，1H)，2.05(m，1H)，2.34(s，3H)，3.47(m，1H)，3.72(m，1H)，3.91(s，3H)，4.58(dd，2H)，7.15(d，1H)，7.20(d，2H)，7.27(m，1H)。
實施例54順式-2-(3-羥基環(huán)己氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯的旋光拆分 將20mg外消旋的順式-2-(3-羥基環(huán)己基-1-氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯溶于2ml THF和1ml乙酸乙烯酯中，在20-23℃下與6-8mgChirazyme L-2lyo.(Roche)混合，并攪拌。約6小時后，濾出酶終止反應，用HPLC測定所生成的乙酸酯和未轉化的醇的光學純度(HPLC乙酸酯Chiralcel OD 250×4.6，1ml/min，100∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN；HPLC醇Chiralpak AD 250×4.6，1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)，(3S，1R)-2-(3-羥基環(huán)己基-1-氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯的ee為89％ee，(3R，1S)-乙酸酯的ee為95％。
實施例55順式-2-(3-羥基環(huán)己氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯的旋光拆分
將約15mg外消旋的順式-2-(3-羥基環(huán)己基-1-氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯溶于2ml叔丁醇和1ml乙酸乙烯酯中，在20-23℃下與約6mgNovozym 435混合，并攪拌。約24小時后，濾出酶終止反應，用HPLC測定所生成的乙酸酯和未轉化的醇的光學純度，(3R，1S)-乙酸酯為91％ee(HPLCChiralcel OD 250×4.6，1ml/min，100∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN)，(3S，1R)-2-(3-羥基環(huán)己基-1-氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯為96％ee(HPLCChiralpak AD 250×4.6，1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)。
實施例56順式-2-(3-羥基環(huán)己氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯的旋光拆分 將10mg外消旋的順式-2-(3-羥基環(huán)己基-1-氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯溶于1ml乙酸乙烯酯中，與約4-6mg脂酶TL(施氏假單孢菌，MeitoSangyo)混合，并在20-23℃下攪拌。轉化率＞50％后，濾出酶終止反應，測定未轉化的醇的光學純度，(3S，1R)-2-(3-羥基環(huán)己基-1-氧基甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯＞98％ee(HPLC，Chiralpak AD 250×4.6，1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)。
實施例57順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的旋光拆分 將35-40mg外消旋的順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇溶于0.5-1ml乙酸乙烯酯和2-3ml二氯甲烷中，與約8-10mg Novozym 435混合，并在22-25℃下攪拌。4天后，濾出酶終止反應。醇(1S，3R)-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的光學純度＞98％ee(HPLC，Chiralpak AD-H 250×4.6，1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)，(1R，3S)-乙酸酯的ee為82％(HPLC，Chiralcel OD 250×4.6，1ml/min，100∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN)。
實施例58順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的旋光拆分 將10mg外消旋的順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇溶于1ml乙酸乙烯酯和3ml THF中，與約5mg脂酶L-10混合，并在22-25℃下攪拌。轉化率≥50％后，濾出酶終止反應。(1S，3R)-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的光學純度為≥90％ee(HPLC，Chiralpak AD-H 250×4.6，1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)。
實施例59順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的旋光拆分 將10mg外消旋的順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇溶于1ml乙酸乙烯酯和3ml氯苯中，與10mg Novozym 435混合，并在22-25℃下攪拌。4小時后，濾出酶終止反應。(1S，3R)-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的光學純度為68％ee(HPLC，Chiralpak AD-H 250×4.6，1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)，對映體乙酸酯的ee為95％(HPLC，Chiralcel OD 250×4.6，1ml/min，100∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN)。
實施例60順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的旋光拆分
將10mg外消旋的順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇溶于1ml乙酸乙烯酯和3ml環(huán)己烷中，與約5mg脂酶QL混合，并在22-25℃下攪拌。24小時后，濾出酶終止反應。(1S，3R)-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的光學純度為94％ee(HPLC，Chiralpak AD-H 250×4.6，1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)。
實施例61順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的旋光拆分 將10mg外消旋的順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇溶于1ml乙酸乙烯酯和3ml甲苯中，與10mg Novozym 435混合，并在22-25℃下攪拌。4小時后，濾出酶終止反應。(1S，3R)-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的光學純度為70％ee(HPLC，Chiralpak AD-H 250×4.6，1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)，(1R，3S)-乙酸酯的ee為95％(HPLC，Chiralcel OD 250×4.6，1ml/min，100∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN)。
實施例62順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的旋光拆分 將10mg外消旋的順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇溶于1ml乙酸乙烯酯和3ml環(huán)己烷中，與約10mg Novozym 435混合，并在22-25℃下攪拌。約4小時后，濾出酶終止反應。(1S，3R)-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的光學純度為95％ee(HPLC，Chiralpak AD-H 250×4.6，1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)，(1R，3S)-乙酸酯的ee為90％(HPLC，Chiralcel OD 250×4.6，1ml/min，100∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN)。
實施例63順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的旋光拆分 將10mg外消旋的順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇溶于1ml乙酸乙烯酯和3ml環(huán)己烷中，與約5mg脂酶L-10混合，并在22-25℃下攪拌。24小時后，濾出酶終止反應。(1S，3R)-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的光學純度＞95％ee(HPLC，Chiralpak AD-H 250×4.6，1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)。
實施例64順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的旋光拆分 將約10mg外消旋的順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇溶于1ml乙酸乙烯酯和3ml THF中，與10mg Novozym 435混合，并在22-25℃下攪拌。4小時后，濾出酶終止反應。(1S，3R)-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的光學純度為73％ee(HPLC，Chiralpak AD-H 250×4.6，1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)，(1R，3S)-乙酸酯的ee為94％(HPLC，Chiralcel OD 250×4.6，1ml/min，100∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN)。
實施例65順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的旋光拆分
將10mg外消旋的順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇溶于1ml乙酸乙烯酯和3ml氯苯中，與約5mg脂酶L-10混合，并在22-25℃下攪拌。轉化率≥50％后，濾出酶終止反應。(1S，3R)-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的光學純度為≥92％ee(HPLC，Chiralpak AD-H 250×4.6，1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)。
實施例66順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的旋光拆分 將約10mg外消旋的順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇溶于1ml乙酸乙烯酯和3ml乙酸乙酯中，與約10mg Novozym 435混合，并在22-25℃下攪拌。4小時后，濾出酶終止反應。(1S，3R)-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的光學純度為77％ee(HPLC，Chiralpak AD-H 250×4.6，1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)，(1R，3S)-乙酸酯的ee為93％(HPLC，Chiralcel OD 250×4.6，1ml/min，100∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN)。
實施例67順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的旋光拆分 將10mg外消旋的順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇溶于1ml乙酸乙烯酯和3ml氯苯中，與約5mg脂酶SL混合，并在22-25℃下攪拌。轉化率≥50％后，濾出酶終止反應。(1S，3R)-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的光學純度≥87％ee(HPLC，Chiralpak AD-H 250×4.6，1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)。
實施例68順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的旋光拆分
將10mg外消旋的順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇溶于1ml乙酸乙烯酯和3ml二異丙醚中，與10mg Novozym 435混合，并在22-25℃下攪拌。4小時后，濾出酶終止反應。(1S，3R)-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的光學純度為90％ee(HPLC，Chiralpak AD-H 250×4.6，1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)，(1R，3S)-乙酸酯的ee為90％(HPLC，Chiralcel OD 250×4.6，1ml/min，100∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN)。
實施例69順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的旋光拆分 將10mg外消旋的順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇溶于1ml乙酸乙烯酯和3ml MTBE中，與10mg Novozym 435混合，并在22-25℃下攪拌。4小時后，濾出酶終止反應。(1S，3R)-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的光學純度為93％ee(HPLC，Chiralpak AD-H 250×4.6，1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)，(1R，3S)-乙酸酯的ee為89％(HPLC，Chiralcel OD 250×4.6，1ml/min，100∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN)。
實施例70順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的旋光拆分 將10mg外消旋的順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇溶于1ml乙酸乙烯酯和3ml環(huán)己烷中，與約5mg脂酶SL混合，并在22-25℃下攪拌。24小時后，濾出酶終止反應。(1S，3R)-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的光學純度＞90％ee(HPLC，Chiralpak AD-H 250×4.6，1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)。
實施例71順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的旋光拆分 將27mg外消旋的順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇溶于3ml二氯甲烷中，與65mg異戊酸酐和11mg Novozym 435混合，并在22-25℃下攪拌。轉化率為45-50％后，濾出酶終止反應。(1S，3R)-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的光學純度為87％ee(HPLC，Chiralpak AD-H 250×4.6，1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)，(1R，3S)-異戊酸衍生物的對映體過量＞95％(HPLC，Chiralcel OD 250×4.6，1ml/min，100∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN)。
實施例72順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的旋光拆分 將200mg外消旋的順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇溶于3ml氯苯中，與100mg琥珀酸酐和10mg Chirazyme L-2lyo.混合，并在25-27℃下攪拌。29小時后，濾出酶終止反應。蒸發(fā)濃縮樣品，用于測定未轉化的底物和所生成的?；a物的光學純度。(1S，3R)-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的光學純度＞98％ee(HPLC，Chiralpak AD-H 250×4.6，1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)，琥珀酸衍生物的光學純度為94％ee(HPLC，Chiralcel OD 250×4.6，1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)。
實施例73
順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的旋光拆分 將200mg外消旋的順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇溶于3ml DME中，與100mg琥珀酸酐和10mg Chirazyme L-2lyo.混合，并在25-27℃下攪拌。29小時后，濾出酶終止反應。蒸發(fā)濃縮樣品，用于測定未轉化的底物和所生成的?；a物的光學純度。(1S，3R)-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的光學純度＞95％ee(HPLC，Chiralpak AD-H 250×4.6，1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)，琥珀酸衍生物的光學純度＞97％(HPLC，Chiralcel OD 250×4.6，1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)。
實施例74順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的旋光拆分 將200mg外消旋的順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇溶于3ml THF中，與100mg琥珀酸酐和10mg Chirazyme L-2lyo.混合，并在25-27℃下攪拌。29小時后，濾出酶終止反應。蒸發(fā)濃縮樣品，用于測定未轉化的底物和所生成的?；a物的光學純度。(1S，3R)-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的光學純度為84％ee(HPLC，Chiralpak AD-H 250×4.6，1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)，琥珀酸衍生物的光學純度＞95％(HPLC，Chiralcel OD 250×4.6，1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)。
實施例75順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的旋光拆分
將200mg外消旋的順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇溶于3ml二氯甲烷中，與100mg琥珀酸酐和10mg Chirazyme L-2lyo.混合，并在25-27℃下攪拌。29小時后，濾出酶終止反應。蒸發(fā)濃縮樣品，用于測定未轉化的底物和所生成的酰化產物的光學純度。(1S，3R)-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的光學純度＞98％ee(HPLC，Chiralpak AD-H 250×4.6，1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)，琥珀酸衍生物的光學純度為88％(HPLC，Chiralcel OD 250×4.6，1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)。
實施例76順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的旋光拆分 將200mg外消旋的順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇溶于3ml丙酮中，與100mg琥珀酸酐和10mg Chirazyme L-2lyo.混合，并在25-27℃下攪拌。29小時后，濾出酶終止反應。蒸發(fā)濃縮樣品，用于測定未轉化的底物和所生成的酰化產物的光學純度。(1S，3R)-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的光學純度＞99％ee(HPLC，Chiralpak AD-H 250×4.6，1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)，琥珀酸衍生物的光學純度為78％(HPLC，Chiralcel OD 250×4.6，1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)。
實施例77順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的旋光拆分，醇和琥珀酸衍生物的分離
將8.15g(39.5mmol)外消旋的順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇溶于120mlTHF中，與3.9g(39.0mmol)琥珀酸酐和390mg Chirazyme L-2lyo.混合，并在22-25℃下攪拌。轉化率約40％后，濾出酶終止反應。在減壓下濃縮濾液。將殘余物溶于t-BuOMe中，并用飽和NaHCO3水溶液充分萃取三次，每次100ml。將有機相干燥(MgSO4)，在減壓下濃縮，收率4.4g；(1S，3R)-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的光學純度為70％ee(HPLC，ChiralpakAD-H 250×4.6，1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)。溶解在合并水相中的琥珀酸衍生物的光學純度＞99％(HPLC，Chiralcel OD250×4.6，1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)。
通過用濃氫氧化鈉溶液處理來化學水解琥珀酸衍生物的水溶液。用t-BuOMe萃取所生成的(1R，3S)-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇，收率2.9g。
實施例78順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的旋光拆分，醇和琥珀酸衍生物的分離 將5.06g(24.5mmol)外消旋的順式-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇溶于75mlTHF中，與2.52g(25.2mmol)琥珀酸酐和3.1g Novozym 435混合，并在22-25℃下攪拌。28.5小時，濾出酶終止反應。在減壓下濃縮濾液至約15ml。將殘余物與30ml水混合，并在減壓下蒸餾除去剩余THF。加入15ml飽和NaHCO3水溶液、15ml水和30ml二氯甲烷，將混合物充分攪拌15-30分鐘。相分離后，將有機相先用90ml飽和NaHCO3水溶液和150ml水萃取，再用15ml飽和NaHCO3水溶液和30ml水萃取，并用30ml水洗滌兩次。將有機相干燥(MgSO4)，在減壓下濃縮，收率2.52g(50％)，[α]20D+12.1℃(c＝1.0，MeOH)；(1S，3R)-3-芐氧基環(huán)己烷-1-醇的光學純度＞99％ee(HPLC，Chiralpak AD-H 250×4.6，1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)。
合并水相中，與20ml(冰)乙酸混合，用20ml二氯甲烷萃取兩次。將有機相干燥(MgSO4)，濃縮，收率3.55g(47％)琥珀酸衍生物；光學純度＞99％ee(HPLC，Chiralcel OD 250×4.6，1ml/min，25∶1∶0.5庚烷/EtOH/CH3CN+0.1％TFA)；1H NMR(CDCl3)δ1.2-1.43(m，4H)，1.82(m，1H)，1.93(m，1H)，2.04(m，1H)，2.40(m，1H)，2.58-2.70(m，4H)，3.39(m，1H)，4.54(m，2H)，4.71(m，1H)；7.23-7.36(m，5H)。
實施例79外消旋的順式-3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)環(huán)己醇的制備 外消旋將TBDMSCl(28.62g，1.1當量)緩慢加入到1，3-環(huán)己烷二醇(20.05g，0.173mol)、Et3N(28.79ml，1.2當量)與DMAP(0.844g，0.04當量)在CH2Cl2(600ml)中的冷卻至10℃的溶液中。在20-23℃下攪拌18小時后，反應混合物用H2O洗滌(2×100ml)。將有機相用飽和NH4Cl洗滌(2×100ml)，經MgSO4干燥，在減壓下濃縮。經過硅膠色譜處理(20∶1正庚烷/乙酸乙酯)，得到18.77g(47％)所需單甲硅烷基醚；1HNMR(CDCl3)δ0.0-0.1(m，6H)，0.8-0.9(m，9H)，1.2-2.0(m，8H)，3.2(s，br.，1H)，3.8(m，1H)，3.95(m，1H)。
實施例80順式-(1S，3R)-3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)環(huán)己醇的制備 將770mg外消旋的順式-3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)環(huán)己醇溶于10ml丙酮中，與0.36ml乙酸乙烯酯和400mg Novozym 435混合，并在21-24℃下攪拌。47小時后(轉化率約50％)，濾出酶終止反應，在減壓下蒸發(fā)濃縮溶液。一部分經過硅膠色譜處理(3∶1正庚烷/乙酸乙酯)，得到(1S，3R)-3-(叔丁基二甲基甲硅烷氧基)環(huán)己醇，[α]20D+12.8°(c＝1.0，MeOH)。
權利要求
1.一種制備手性的、非外消旋的式I化合物的方法 其中R1是 其中環(huán)A是苯基；5-12元雜芳族環(huán)，它可以含有1-4個選自N、O和S的雜原子；8-14元芳族環(huán)；(C3-C8)-環(huán)烷基；R3是H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、(C1-C6)-烷基、(C3-C8)-環(huán)烷基、苯基；R4，R5是H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、OCF2H、OCF2-CF3、OCF2-CHF2、SCF3、O-苯基、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基-O-(C1-C3)-烷基；n是1-3；以及R2是(C1-C8)-烷基，其中該烷基中的一個或多個CH2基團可以被O、CO、S、SO或SO2代替，并且烷基可以被F、Cl、Br、CF3、CN、NO2、NHAc、NHBoc、NH-CO-C(CH3)3、羥基、OCF3、O-(C1-C6)-烷基、COOH、CO-芐氧基、CO-O(C1-C6)-烷基、四唑、噻唑烷-2，4-二酮、吲哚和(C6-C10)-芳基一至三取代，其中噻唑烷-2，4-二酮和芳基繼而可以被F、Cl、Br、CF3、CN、NO2、NHAc、NHTs、NHBoc、NHCbz、NH-CO-C(CH3)3、羥基、OCF3、O-(C1-C6)-烷基、COOH、CO-芐氧基、CO-O(C1-C6)-烷基、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基或四唑取代；或者R2是OH保護基團(PG)，例如芐氧基甲基、芐基、對甲氧基芐基或叔丁基二甲基甲硅烷基；該方法包含A)a)烷基化(alk-R2/alk-PG)在堿的存在下在適合的溶劑中使式(II)的順式-1，3-環(huán)己烷二醇 與式(III)化合物反應，X1-R2(III)其中R2如上所定義，X1是Cl、Br、I、OMs、OTs、OTf；得到式(IV)的外消旋化合物 其中R2如上所定義；b1)酶催的酯生成(EF)+分離(S)使所得的式(IV)化合物進行立體選擇性酶催的酯生成(EF)，其中將醇與?；w和酶混合在有機溶劑中，將所得混合物在-20至80℃下攪拌，在反應結束后，一種立構體以式(V)的酯存在 其中R6是C(＝O)-(C1-C16)-烷基、C(＝O)-(C2-C16)-烯基、C(＝O)-(C3-C16)-炔基、C(＝O)-(C3-C16)-環(huán)烷基，其中一個或多個碳原子可以被氧原子代替，并且可以被1-3個取代基取代，所述取代基選自F、Cl、Br、CF3、CN、NO2、羥基、甲氧基、乙氧基、苯基、CO-O(C1-C4)-烷基和CO-O(C2-C4)-烯基，它們繼而可以被1-3個選自F、Cl、Br、CF3的取代基取代，R2如上所定義，其它立構體不變，為式(IV)的醇，因此利用它們不同的化學或物理化學性質彼此分離(分離S)，或者b2)酶催的酯水解[＝化學酯化(CE)+酶催水解(EH)]+分離(S)使所得的式(IV)化合物進行立體選擇性酶催的酯水解，其中首先在堿的存在下將外消旋醇通過化學酯化(CE)，例如借助酰氯R6-Cl或酸酐R6-O-R6轉化為式(V)的外消旋酯 其中R6和R2各自如上所定義，然后為了進行立體選擇性酶催的酯水解(EH)，將式(V)化合物溶于均勻或不均勻的水性、水性-有機或有機介質中，并在酶的存在下在水解的情況下與水反應，而在醇解的情況下與醇反應，反應溫度為10-80℃，在反應結束后，一種立構體以式(IV)的醇存在，其它不變，為式(V)的酯，因而可以如b1)下所述彼此分離，以及進一步如d)下所述加工以醇形式存在的式(IV)的對映體，或者c)化學水解(CH)借助已知方法將以酯形式存在的式(V)的對映體水解為化學上對映異構的醇，d)烷基化(alk-R1)在堿的存在下在適合的溶劑中使式(IV)化合物進一步與式(VI)化合物反應 其中環(huán)A、R3、R4、R5和n各自如上所定義，X2是Cl、Br、I、OTs、OMs、OTf；得到式(I)化合物，e)保護基團PG的除去(detPG)如果R2是如上在R2下所定義的OH保護基團(PG)，則轉化式(Ia)化合物 其中R1和PG各自如上所定義，這借助已知方法除去保護基團來進行，得到式(VII)化合物 其中R1如上所定義，f)烷基化(alk-R2)然后在堿的存在下在適合的溶劑中使式(VII)化合物與式(III)化合物反應，X1-R2(III)其中X1和R2如上所定義，得到式(I)化合物，即產物或對映異構型，也可以改變如上在A)下所述的各反應步驟的順序A)alk-R2→EF+S/CE+EH+S[→CH]→alk-R1[→DetPG→alk-R2]→產物/對映異構型改變成B)alk-R1→EF+S/CE+EH+S[→CH]→alk-R2[→DetPG→alk-R2]→產物/對映異構型或者C)alk-PG→EF+S/CE+EH+S→CH→alk-R2→DetPG→alk-R1→產物/對映異構型或者D)alk-PG→EF+S/CE+EH+S→alk-R1→DetPG→alk-R2→產物/對映異構型。
2.如權利要求1所要求保護的方法，其中采用方法C)和D)。
3.如權利要求1或2所要求保護的方法，其中使用這樣的式(III)化合物X1-R2(III)其中X1是Cl、Br、I、OMs或OTs。
4.如權利要求1-3中任一項所要求保護的方法，其中使用這樣的式(III)化合物X1-R2(III)其中X1是Cl、Br或I。
5.如權利要求1-4中任一項所要求保護的的方法，其中制備這樣的式(I)化合物 其中R1是 其中環(huán)A是苯基；5-12元雜芳族環(huán)，它可以含有一個或多個選自N、O和S的雜原子；稠合/二環(huán)的8-14元芳族環(huán)；(C3-C8)-環(huán)烷基；R3是H、CF3、(C1-C6)-烷基、(C3-C8)-環(huán)烷基、苯基；R4，R5是H、F、Br、CF3、OCF3、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基；n是1-2；以及R2是(C1-C8)-烷基，其中該烷基中的一個或多個CH2基團可以被O、CO、S、SO或SO2代替，并且烷基可以被F、Cl、Br、CF3、CN、NO2、NHAc、NHBoc、NH-CO-C(CH3)3、羥基、OCF3、O-(C1-C6)-烷基、COOH、CO-芐氧基、CO-O(C1-C6)-烷基、四唑、噻唑烷-2，4-二酮、吲哚和(C6-C10)-芳基一至三取代，其中噻唑烷-2，4-二酮和芳基繼而可以被F、Cl、Br、CF3、CN、NO2、NHAc、NHTs、NHBoc、NHCbz、NH-CO-C(CH3)3、羥基、OCF3、O-(C1-C6)-烷基、COOH、CO-芐氧基、CO-O(C1-C6)-烷基、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基或四唑取代。
6.如權利要求1-5中任一項所要求保護的方法，其中制備這樣的式(I)化合物 其中R1是 其中環(huán)A是苯基；R3是(C1-C4)-烷基；R4，R5是H、(C1-C4)-烷基、O-(C1-C4)-烷基；n是1；以及R2是(C1-C8)-烷基，其中該烷基中的一個或多個CH2基團可以被O、CO、S、SO或SO2代替，并且烷基可以被F、Cl、Br、CF3、CN、NO2、NHAc、NHBoc、NH-CO-C(CH3)3、羥基、OCF3、O-(C1-C6)-烷基、COOH、CO-芐氧基、CO-O(C1-C6)-烷基、四唑、噻唑烷-2，4-二酮、吲哚和(C6-C10)-芳基一至三取代，其中噻唑烷-2，4-二酮和芳基繼而可以被F、Cl、Br、CF3、CN、NO2、NHAc、NHTs、NHBoc、NHCbz、NH-CO-C(CH3)3、羥基、OCF3、O-(C1-C6)-烷基、COOH、CO-芐氧基、CO-O(C1-C6)-烷基、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基或四唑取代。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種利用外消旋物的酶催拆分制備手性的、非外消旋的式(I)的順式－1，3－二取代的環(huán)己醇的方法，其中各基團如說明書中所定義。
文檔編號C07D263/32GK1753855SQ200480005441
公開日2006年3月29日 申請日期2004年2月19日 優(yōu)先權日2003年2月27日
發(fā)明者W·霍拉, S·凱爾 申請人:塞諾非－安萬特德國有限公司