專利名稱：二芳基環(huán)烷基衍生物、它們的產(chǎn)生方法以及它們作為藥物的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及二芳基環(huán)烷基衍生物，并涉及它們的生理可接受鹽及其生理機(jī)能性衍生物(physiologically functional derivative)。
類似結(jié)構(gòu)的化合物已經(jīng)在現(xiàn)有技術(shù)中描述為用于高脂血癥和糖尿病的治療(WO 2000/64876和WO 03/020269)。
本發(fā)明的目的是提供允許治療上可利用于脂類和/或碳水化合物代謝調(diào)節(jié)，因而適合用于疾病如2型糖尿病和動(dòng)脈硬化癥以及它們的多種后遺癥的預(yù)防和/或治療的化合物。
令人吃驚的是，發(fā)現(xiàn)了一系列調(diào)節(jié)PPAR受體活性的的化合物。特別是，這些化合物適合于PPARα和PPARγ的激活，并且其相對(duì)激活程度可以根據(jù)這些化合物的不同而不同。
因此，本發(fā)明涉及式I化合物及它們的生理可接受鹽 其中環(huán)A是(C3-C8)-環(huán)烷二基、或(C3-C8)-環(huán)烯二基，其中環(huán)烷二基環(huán)或環(huán)烯二基環(huán)中一個(gè)或多個(gè)碳原子可以被O原子替換；環(huán)B是a)苯基；或b)可以含有一到四個(gè)選自N、O和S的雜原子的5-12元雜芳環(huán)、8-14元芳環(huán)或(C3-C8)-環(huán)烷基；對(duì)R1a)在環(huán)B＝a)的情況下R1為SCF3、OCF2-CHF2、O-苯基、O-(C1-C6)-烷基-O-(C1-C3)-烷基；b)在環(huán)B＝b)的情況下
R1為H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、OCF2-CF3、SCF3、OCF2-CHF2、O-苯基、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基-O-(C1-C3)-烷基；c)在環(huán)B＝a)并且R4＝苯基的情況下R1為(C1-C6)-烷基或O-(C1-C6)-烷基；R2是 H或CF3；對(duì)R4 a)在環(huán)B＝a)的情況下R4為苯基；b)在環(huán)B＝b)的情況下R4為H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基；c)在環(huán)B＝a)并且R1＝a)的情況下R4為(C1-C6)-烷基；R5是H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基；R3是H或(C1-C6)-烷基；X是(C1-C6)-烷二基，其中烷二基中的一個(gè)或多個(gè)碳原子可以被氧原子替換；Y是(C1-C6)-烷二基，其中烷二基中的一個(gè)或多個(gè)碳原子可以被氧原子替換；優(yōu)選的式I化合物為其中環(huán)A是(C3-C8)-環(huán)烷二基或(C3-C8)-環(huán)烯二基，其中環(huán)烷二基環(huán)或環(huán)烯二基環(huán)中的一個(gè)或多個(gè)碳原子可以被氧原子替換。
環(huán)B是a)苯基；或b)可以含有一到四個(gè)選自N、O和S的雜原子的5-12元雜芳環(huán)、8-14元芳環(huán)或(C3-C8)-環(huán)烷基；對(duì)R1 a)在環(huán)B＝a)的情況下R1為SCF3、OCF2-CHF2、O-苯基、O-(C1-C6)-
烷基-O-(C1-C3)-烷基；b)在環(huán)B＝b)的情況下R1為H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、OCF2-CF3、SCF3、OCF2-CHF2、O-苯基、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基-O-(C1-C3)-烷基；c)在環(huán)B＝a)并且R4＝苯基的情況下R1為(C1-C6)-烷基或O-(C1-C6)-烷基；R2是 H或CF3；對(duì)R4 a)在環(huán)B＝a)的情況下R4為苯基；b)在環(huán)B＝b)的情況下R4為H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基；c)在環(huán)B＝a)并且R1＝a)的情況下R4為(C1-C6)-烷基；R5是H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基；R3是H或(C1-C6)-烷基；X是CH2-O；Y是(C1-C6)-烷二基，其中烷二基中的一個(gè)或多個(gè)碳原子可以被氧原子替換；更優(yōu)選的式I化合物為其中環(huán)A是 (C3-C8)-環(huán)烷二基，其中一個(gè)碳原子可以被氧原子替換。
環(huán)B是 a)苯基；或b)可以含有一到四個(gè)選自N、O和S的雜原子的5-12元雜芳環(huán)、8-14元芳環(huán)或(C3-C8)-環(huán)烷基；對(duì)R1 a)在環(huán)B＝a)的情況下
R1為SCF3、OCF2-CHF2、O-苯基、O-(C1-C6)-烷基-O-(C1-C3)-烷基；b)在環(huán)B＝b)的情況下R1為H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、OCF2-CF3、SCF3、OCF2-CHF2、O-苯基、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基-O-(C1-C3)-烷基；c)在環(huán)B＝a)并且R4＝苯基的情況下R1為(C1-C6)-烷基或O-(C1-C6)-烷基；R2是 H或CF3；對(duì)R4a)在環(huán)B＝a)的情況下R4為苯基；b)在環(huán)B＝b)的情況下R4為H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基；c)在環(huán)B＝a)并且R1＝a)的情況下R4為(C1-C6)-烷基；R5是 H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基；R3是 H或(C1-C6)-烷基；X是CH2-O；Y是CH2-O；特別優(yōu)選式Ia化合物， 其中環(huán)A、環(huán)B、R1、R2、R3、R4、R5、X和Y如上定義。
更特別優(yōu)選這樣的式Ia化合物，其中
R3是 H且R5是甲基或其中環(huán)A是 (C5-C7)-環(huán)烷二基。
環(huán)B是 a)苯基，或b)可以含有一到四個(gè)選自N、O和S的雜原子的5-12元雜芳環(huán)、8-14元芳環(huán)或(C3-C8)-環(huán)烷基；對(duì)R1a)在環(huán)B＝a)的情況下R1為SCF3、OCF2-CHF2、O-苯基、O-(C1-C6)-烷基-O-(C1-C3)-烷基；b)在環(huán)B＝b)的情況下R1為H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、OCF2-CF3、SCF3、OCF2-CHF2、O-苯基、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基-O-(C1-C3)-烷基；c)在環(huán)B＝a)并且R4＝苯基的情況下R1為(C1-C6)-烷基或O-(C1-C6)-烷基；R2是 H或CF3；對(duì)R4a)在環(huán)B＝a)的情況下R4為苯基；b)在環(huán)B＝b)的情況下R4為H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基；c)在環(huán)B＝a)并且R1/R2＝a)情況下R4為(C1-C6)-烷基；R5是甲基；R3是 H；X是CH2-O；Y是CH2-O；
十分特別優(yōu)選其中中心的環(huán)烷二基環(huán)為1，3順式連接的式I和Ia化合物。
本發(fā)明也包含在此描述的本發(fā)明的“優(yōu)選實(shí)施方案”的所有組合；取代基R1、R2、R3、R4和R5中的烷基可以是直鏈或支鏈。
芳基可以理解為芳香的、碳環(huán)的單-或雙環(huán)體系，其中環(huán)中含有6到10個(gè)原子。
雜芳基是單-或雙環(huán)芳環(huán)體系，其具有4到11個(gè)環(huán)成員，其中環(huán)體系中的至少一個(gè)原子是來自N、O和S的雜原子。
式I化合物含有至少兩個(gè)不對(duì)稱中心并且可以含有多個(gè)不對(duì)稱中心。式I化合物因此可以它們的外消旋物、外消旋混合物、純對(duì)映體、非對(duì)映體和非對(duì)映體混合物形式存在。本發(fā)明包括式I化合物的所有這些同分異構(gòu)體形式。這些同分異構(gòu)體形式可通過已知方法獲得，即使其中一些沒有被明文描述。
因?yàn)榕c起始或基礎(chǔ)化合物相比可藥用鹽具有較大的溶解性，可藥用鹽特別適于醫(yī)學(xué)應(yīng)用。這些鹽必須具有可藥用陰離子或陽離子。本發(fā)明化合物的合適的可藥用酸加成鹽是無機(jī)酸如鹽酸、氫溴酸、磷酸、偏磷酸、硝酸和硫酸的鹽以及有機(jī)酸如乙酸、苯磺酸、苯甲酸、檸檬酸、乙磺酸、反丁烯二酸、葡糖酸、乙醇酸、羥乙磺酸、乳酸、乳糖酸、順丁烯二酸、蘋果酸、甲磺酸、丁二酸、對(duì)甲苯磺酸和酒石酸的鹽。合適的可藥用堿性鹽為銨鹽、堿金屬鹽(例如鈉鹽和鉀鹽)和堿土金屬鹽(例如鎂鹽和鈣鹽)以及氨丁三醇(2-氨基-2-羥甲基-1.3-丙二醇)、二乙醇胺、賴氨酸或乙二胺的鹽。
具有不可藥用陰離子例如三氟醋酸根的鹽同樣也屬于本發(fā)明的范圍，作為用于可藥用鹽的制備和純化和/或用于非治療性如在體外應(yīng)用使用的有用中間體。
在此使用的術(shù)語“生理機(jī)能性衍生物”指任何生理容許的本發(fā)明式I化合物的衍生物，如酯，其在施用到哺乳動(dòng)物如人后能夠形成(直接或間接)式I化合物或它的活性代謝物。
生理機(jī)能性衍生物也包括本發(fā)明化合物的前體藥物，例如H.Okada等，Chem.Pharm.Bull.1994，42，57-61中所描述。這些前體藥物可以在體內(nèi)代謝為本發(fā)明化合物。這些前體藥物本身可以具有活性或沒有活性。
本發(fā)明化合物也可以多種多晶型形式存在，如非晶態(tài)多晶型形式和晶態(tài)多晶型形式。所有本發(fā)明化合物的多晶型形式屬于本發(fā)明的范圍并且是本發(fā)明的另一方面。
在下文中所有提及的“式I化合物”指如上描述的式I化合物，并且指如在此描述的它們的鹽、溶劑合物和生理機(jī)能性衍生物。
用途本發(fā)明還涉及作為PPAR受體配體的式I化合物和它們的藥物組合物的用途。本發(fā)明的PPAR受體配體適合作為PPAR受體活性的調(diào)節(jié)劑。
過氧化物酶體增殖物激活受體(Peroxisome proliferator-ativatedreceptor；PPAR)是轉(zhuǎn)錄因子，它們可以通過配體激活，并且屬于核激素受體類。有三種PPAR同種型，PPARα、PPARγ和PPARδ，它們由不同基因編碼(Peroxisome proliferator-ativatedreceptor(PPAR)structure，mechanisms of activation and diverse fuctionsMotojima K，Cell Struct Funct.，1993年10月，18(5)，267-77)。
存在兩種PPARγ變體，PPARγ1和PPARγ2，它們是啟動(dòng)子的選擇性使用以及不同的mRNA剪接的結(jié)果(Vidal-Puig等，J.Clin.Invest.，972553-2561，1996)。不同的PPAR受體具有不同的組織分布并且調(diào)節(jié)不同的生理功能。PPAR受體在大量基因的調(diào)節(jié)的不同方面起著關(guān)鍵的作用，這些基因的基因產(chǎn)物至關(guān)重要地直接或間接地參與脂類和碳水化合物代謝。因此，例如，PPARα受體在肝臟中的脂肪酸分解代謝或脂蛋白新陳代謝的調(diào)節(jié)中起著重要的作用，而PPARγ至關(guān)重要地參與例如脂肪細(xì)胞分化的調(diào)節(jié)。
而且，PPAR受體也參與許多其它生理過程的調(diào)節(jié)，包括那些不直接和碳水化合物或脂類代謝相關(guān)聯(lián)的生理過程。不同PPAR受體的活性可以通過多種脂肪酸、脂肪酸衍生物和合成化合物不同程度的調(diào)節(jié)。對(duì)于涉及功能、生理學(xué)效果以及病理生理學(xué)的相關(guān)綜述，見Joel Berger等，Annu.Rev.Med.，2002，53，409-435；Timothy Wilson等，J.Med.Chem.，2000，43卷，No.4，527-550；Steven Kliewer等，Recent Prog HormRes.，2001，56，239-63.
本發(fā)明涉及適合于調(diào)節(jié)PPAR受體的活性，特別是PPARα和PPARγ的活性的式I化合物?；谡{(diào)節(jié)的特性，式I化合物適用于下文描述的適應(yīng)癥的治療、控制和預(yù)防，以及適用于一系列其它相關(guān)的醫(yī)藥應(yīng)用(見，如Joel Berger等，Annu.Rev.Med.，2002，53，409-435；Timothy Wilson等，.Med.Chem.，2000，43(4)，527-550；Steven Kliewer等，Recent ProgHorm Res.，2001，56，239-63；Jean-Charles Fruchart，Bart Staels和Patric DuriezPPARS，Metabolic Disease and Arteriosclerosis，Pharmacological Research，44卷，No.5，345-52，2001；Sander Kersten，Beatrice Desvergne & Walter WahliRoles of PPARs in health and disease，NATURE，VOL.405，2000年5月25日，421-424；Ines Pineda Torra，Giulia Chinetti，Caroline Duval，Jean-Charles Fruchart和Bart StaelsPeroxisome proliferators-activated receptorsfrom transcriptional controlto clinical practice，Curr Opin Lipidol 122001，245-254)。
這類化合物特別適合于治療和/或預(yù)防1.-脂肪酸代謝疾病和葡萄糖利用疾病-胰島素抗性在其中起作用的疾病2.-糖尿病，特別是2型糖尿病，包括相關(guān)聯(lián)的后遺癥的預(yù)防。
其中的具體方面是-高血糖癥，-胰島素抗性的提高，-葡萄糖耐性的提高，-胰腺β-細(xì)胞的保護(hù)-大-和微血管疾病的預(yù)防
3.異常脂蛋白血癥和它們的后遺癥，例如，動(dòng)脈硬化癥，冠心病，腦血管病等，特別是那些(但不局限于那些)以一個(gè)或多個(gè)下列因素表征的疾病-高血漿甘油三酯濃度，高餐后血漿甘油三酯濃度-低HDL膽固醇濃度-低ApoA脂蛋白濃度-高LDL膽固醇濃度-低密度的LDL膽固醇顆粒-高ApoB脂蛋白濃度4.可能與代謝綜合征相關(guān)聯(lián)的多種其它病癥是如-肥胖癥(超重)，包括腹部肥胖-形成血栓，高凝狀態(tài)和血栓形成前(動(dòng)脈的和靜脈的)狀態(tài)-高血壓-心臟衰竭，例如(但不限于那些)在心肌梗死、高血壓心臟病或心肌病之后的狀態(tài)5.其它疾病，如炎性過程或細(xì)胞分化在其中起作用的疾病是-動(dòng)脈硬化癥，例如(但不限于)冠狀動(dòng)脈硬化癥，包括心絞痛或心肌梗死、中風(fēng)。
-血管再狹窄或再阻塞-慢性炎性腸病，例如，節(jié)段性回腸炎和潰瘍性結(jié)腸炎-胰腺炎-其它炎癥狀態(tài)-視網(wǎng)膜病-脂肪細(xì)胞瘤-脂肪瘤，例如，脂肪肉瘤-實(shí)體瘤和贅生物，例如(但不限于)胃腸道癌、肝癌、膽道癌、胰腺癌、內(nèi)分泌腫瘤、肺癌、腎癌和泌尿道癌、生殖道癌、前列腺癌等-急性和慢性骨髓增生性疾病和淋巴瘤
-血管新生-神經(jīng)退化性疾病-阿爾茨海默癥-多發(fā)性硬化癥-帕金森癥-紅斑鱗狀皮膚病，例如，銀屑病-痤瘡-其它由PPAR調(diào)節(jié)的皮膚病和皮膚病學(xué)病癥-濕疹和神經(jīng)性皮炎-皮炎，例如，脂溢性皮炎或光照性皮炎-角膜炎和角化癥，例如，脂溢性角化病、老年性角化癥、光化性角化病、光誘導(dǎo)性角化病或毛囊角化病-瘢痕瘤和瘢痕瘤預(yù)防-疣，包括濕疣或尖銳濕疣-人乳頭瘤病毒(HPV)感染，例如，性乳頭瘤、病毒性疣，例如，傳染性軟疣、黏膜白斑病-丘疹皮膚病，例如，扁平苔蘚-皮膚癌，例如，基底細(xì)胞癌、黑素瘤或皮膚T-細(xì)胞淋巴瘤-局限性良性表皮瘤，例如，角皮病、表皮痣-凍瘡-高血壓-X綜合征-多囊卵巢綜合征(PCOS)-哮喘-骨關(guān)節(jié)炎-紅斑狼瘡(LE)或炎性風(fēng)濕病，例如，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎-血管炎-消瘦(惡病質(zhì))
-痛風(fēng)癥-缺血/再灌注綜合征-急性呼吸窘迫綜合征(ARDS)(“肺休克”)劑型要獲得需要的生物學(xué)效果所必需的式I化合物的量取決于許多因素，如所選擇的特定化合物、目標(biāo)用途、施用方式和患者的臨床癥狀。每天的劑量一般是0.001mg到100mg(一般為0.01mg到50mg)每天每千克體重，例如0.1-10mg/kg/天。靜脈內(nèi)劑量可以是，如0.001mg到1.0mg/kg，此劑量可適合以10ng到100ng每千克每分鐘灌輸施用。用于此目的的合適灌注溶液可以包含如0.1ng到10mg，一般1ng到10mg每毫升。單一劑量可以包含，如1mg到10g活性化合物。因此，用于注射的安瓿劑可以包含，如1mg到100mg，并且，可口服施用的單劑量制劑，例如膠囊或片劑，可以包含，如0.05到1000mg，一般為03到600mg。對(duì)于上面提到的病癥的治療，式I化合物可以以化合物自身使用，但它們優(yōu)選以具有可接受載體的藥物組合物的形式使用。當(dāng)然，載體必須是可接受的，意思是它和組合物其它組分兼容并且對(duì)患者健康無害。載體可以是固體或液體或兩者皆可，并且優(yōu)選與化合物配制成單劑量，如作為片劑，它可以包含重量為0.05％到95％的活性化合物。其它藥物活性物質(zhì)也同樣可以存在，包括其它式I化合物。本發(fā)明的藥物組合物可以通過已知的制藥方法之一生產(chǎn)，它基本由混合成分與可藥用載體和/或賦形劑組成。
本發(fā)明的藥物組合物是那些適合于經(jīng)口的、直腸的、局部的、經(jīng)口(例如舌下的)、腸胃外的(例如皮下的、肌肉內(nèi)的、皮內(nèi)的或靜脈內(nèi)的)施用的組合物，雖然最適合的施用方式在每個(gè)單獨(dú)的病例中取決于需要治療的病癥的特性及其嚴(yán)重性以及取決于用于每個(gè)病例中的式I化合物的特性。包衣制劑和包衣緩釋制劑也屬于本發(fā)明的范圍。優(yōu)選酸-和胃液-抗性制劑。合適的抵抗胃液的包衣材料包括乙酸鄰苯二甲酸纖維素、聚乙酸鄰苯二甲酸乙烯酯、鄰苯二甲酸羥丙基甲基纖維素和甲基丙烯酸與甲基丙烯酸甲酯的陰離子聚合物。
用于經(jīng)口施用的合適的藥物組合物可以是獨(dú)立單位的形式，如膠囊劑、糯米紙囊劑(wafer)、可吸片劑或片劑，它們每種包含規(guī)定量的式I化合物；如粉劑或顆粒劑；如水或非水液體中的溶液或懸液；或如水包油或油包水乳液；如已經(jīng)提到的那樣，這些組合物可以通過合適的藥學(xué)方法制備，包括將活性化合物和載體(它可以由一種或多種額外組分組成)接觸在一起的步驟。組合物一般通過將活性化合物與液體和/或細(xì)磨的固體載體均一和勻質(zhì)混合，如果需要的話，隨后將產(chǎn)物成形，而得以生產(chǎn)。因此，如片劑可以通過將化合物的粉末或顆粒根據(jù)需要與一種或多種額外成分一起壓縮或模壓得以生產(chǎn)。壓縮的片劑可以通過在合適的機(jī)器中將易流動(dòng)形式的化合物，如粉末或顆粒，根據(jù)需要，與粘合劑、助流劑、惰性稀釋劑和/或一種或多種表面活性劑/分散劑混合壓片得以生產(chǎn)。模壓的片劑可以在合適的機(jī)器中通過模壓粉末形式的并用惰性液體稀釋劑濕潤(rùn)的化合物得以生產(chǎn)。
適合經(jīng)口(舌下的)施用的藥物組合物包括含有具有調(diào)味劑通常是蔗糖和阿拉伯樹膠或黃蓍膠的式I化合物的可吸片劑，以及含有在惰性基質(zhì)如明膠和甘油或蔗糖和阿拉伯膠中的化合物的錠劑。
適合腸胃外施用的藥物組合物優(yōu)選包含式I化合物的無菌液制劑，它優(yōu)選地是和目的受試者血液等滲。盡管施用也可以通過皮下的、肌肉內(nèi)的或皮內(nèi)的注射進(jìn)行施用，但這些制劑優(yōu)選靜脈內(nèi)施用。這些制劑可以優(yōu)選地通過混合化合物和水并且將得到的溶液滅菌并使它和血液等滲而得以制備。可注射的本發(fā)明的組合物一般包含重量0.1到5％的活性化合物。
適合直腸施用的藥物組合物優(yōu)選地是以單劑量栓劑形式。這些藥物組合物可以通過混合式I化合物和一種或多種常規(guī)的固體載體如可可油，并且使得到的混合物成形而得以制備。
適合皮膚上局部施用的藥物組合物優(yōu)選地是以軟膏劑、霜?jiǎng)?、洗劑、糊劑、噴霧劑、氣霧劑或油劑的形式。可用的載體是凡士林、羊毛脂、聚乙二醇、醇類以及兩種或多種這些物質(zhì)的組合?；钚曰衔镆话阋越M合物重量的0.1到15％濃度存在，例如從0.5到2％。
也可經(jīng)皮施用。適合經(jīng)皮使用的藥物組合物可以是單硬膏劑形式，它適合長(zhǎng)期與患者表皮緊密接觸。這種硬膏劑適當(dāng)?shù)匕后w溶液中的活性化合物，它可以在粘合劑中或在聚合物中根據(jù)需要進(jìn)行緩沖、溶解和/或擴(kuò)散。合適的活性化合物濃度約為1％到35％，優(yōu)選約3％到15％。特別可能的是，對(duì)于活性化合物，通過按照，如Pharmaceutical Research，2(6)318(1986)中所描述的電轉(zhuǎn)運(yùn)或離子電滲療法進(jìn)行釋放。
式I化合物有利地作用于代謝疾病。它們對(duì)于脂類和糖代謝具有積極的效果并且，特別地，降低甘油三酯的濃度，并且它們適用于預(yù)防和治療II型糖尿病和動(dòng)脈硬化癥及它們的多種后遺癥。
與其它藥物的組合本發(fā)明化合物能夠單獨(dú)施用或與一種或多種其它藥學(xué)活性物質(zhì)例如能有利地作用于代謝疾病或常常與之相關(guān)聯(lián)的疾病的藥學(xué)活性物質(zhì)聯(lián)合施用。這些藥物例如是，1.能降低血糖、抗糖尿病的藥物，2.用于治療血脂異常的活性成分，3.抗動(dòng)脈粥樣硬化藥，4.抗肥胖藥，5.抗炎活性化合物，6.用于治療惡性腫瘤的活性化合物，7.抗血栓形成的活性化合物，8.用于治療高血壓的活性化合物，9.用于治療心臟衰竭的活性化合物以及10.用于由糖尿病引起或和糖尿病相關(guān)的并發(fā)癥的治療和/或預(yù)防的活性化合物。
特別是為了效果的協(xié)同提高，它們可以和本發(fā)明的式I化合物聯(lián)合。通過分別施用活性化合物給患者，或以其中多種活性化合物存在于一種藥物制劑中的組合產(chǎn)物的形式，進(jìn)行活性化合物的聯(lián)合施用。
可提及的例子是抗糖尿病藥合適的抗糖尿病藥是例如那些在Rote Liste 2001的第12章中或在USAN的USP藥名詞典(USP Dictionary)和國(guó)際藥物名稱(InternationalDrug Names)、美國(guó)藥典(US Pharmacopeia)，Rockville 2003中公開的。抗糖尿病藥包括所有胰島素和胰島素衍生物，例如，Lantus(見www.Lantus.com)或Apidra，以及其它速效胰島素(見US 6,221，633)、GLP-1受體調(diào)節(jié)劑，如在WO01/04146中描述的，或如那些在NovoNordiskA/S的WO98/08871中公開的。
經(jīng)口的活性低血糖活性化合物優(yōu)選地包括磺酰脲類、縮二胍、美各里替尼類(Meglitinides)、噁二唑烷二酮(oxadiazolidinedione)、噻唑烷二酮(thiazolidinedione)、葡糖苷酶抑制劑、胰增血糖素拮抗劑、經(jīng)口的GLP-1激動(dòng)劑、DPP-IV抑制劑、鉀通道開啟劑(如那些在WO 97/26265和WO 99/03861中公開的內(nèi)容)、胰島素增敏劑、涉及糖異生和/或糖原分解的肝酶抑制劑、葡萄糖吸收調(diào)節(jié)劑、改變脂類代謝和導(dǎo)致血液脂類組成改變的化合物、降低食物攝取或食物吸收的化合物、PPAR和PXR調(diào)節(jié)劑和作用于β細(xì)胞的ATP-依賴的鉀通道的活性化合物。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與胰島素聯(lián)合施用。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與影響肝葡萄糖生成的物質(zhì)如糖原磷酸化酶抑制劑聯(lián)合施用(參見WO 01/94300，WO 02/096864，WO03/084923，WO 03/084922，WO 03/104188)。
在一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與磺酰脲類如甲磺丁脲、優(yōu)降糖(glibenclamide)、格列吡嗪(glipizide)或格列美脲(glimepiride)聯(lián)合施用。
在另一實(shí)施方案中，式I化合物與美各里替尼類如瑞格列奈(repaglinide)聯(lián)合施用。
在一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與噻唑烷二酮類，如環(huán)格列酮(ciglitazone)、吡格列酮(Pioglitazone)、羅格列酮(Rosiglitazone)或在Reddy博士研究基金(Dr.Reddy’s Reasearch Foundation)的WO97/41097中公開的化合物，特別是5-[[4-[(3，4-二氫-3-甲基-4-氧代-2-喹唑啉基甲氧基)]苯基]甲基]-2，4-噻唑烷二酮聯(lián)合施用。
在一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與DPPIV抑制劑，例如在WO98/19998、WO 99/61431、WO 99/67278、WO 99/67279、WO 01/72290、WO 02/38541、WO 03/040174中所描述的化合物聯(lián)合施用，所述DPPIV抑制劑特別是P93/01(氯化1-環(huán)戊基-3-甲基-1-氧代-2-戊氨)、P-31/98、LAF237(1-[2-(3-羥基金剛烷-1-基氨基)乙酰基]吡咯烷-2-(S)-腈])、TS021((2S，4S)-4-氟-1-[[(2-羥基-1，1-二甲基乙基)氨基]乙?；鵠吡咯烷-2-腈單基取代苯磺酸鹽)。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與PPARγ激動(dòng)劑如羅格列酮、吡格列酮聯(lián)合施用。
在一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與對(duì)SGLT-1和/或2有抑制活性的化合物，例如直接或間接在PCT/EP03/06841、PCT/EP03/13454和PCT/EP03/13455中公開的化合物聯(lián)合施用。
在一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與α-葡糖苷酶抑制劑，例如米格列醇(miglitol)或阿卡波(acarbose)聯(lián)合施用。
在一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與多于一種的上述化合物，例如，與磺酰脲和二甲雙胍、磺酰脲和阿卡波、瑞格列奈和二甲雙胍、胰島素和磺酰脲、胰島素和二甲雙胍、胰島素和曲格列酮(troglitazone)、胰島素和洛伐他汀(Lovastatin)等聯(lián)合施用。
脂類調(diào)節(jié)劑在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與HMGCoA還原酶抑制劑如洛伐他汀、氟伐他汀(Fluvastatin)、普伐他汀(Pravastatin)、辛伐他汀(simvastatin)、伊伐他汀(ivastatin)、伊他伐他汀(itavastatin)、阿托伐他汀(atoravastatin)、羅素他汀(Rosuvastatin)聯(lián)合施用。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與膽汁酸吸收抑制劑(見，例如，US 6,245,744、US 6,221,897、US 6,227,831、EP0683773、EP0683774)聯(lián)合施用。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與聚合膽汁酸吸收劑如消膽胺、colesevelam聯(lián)合施用。
本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與膽固醇吸收抑制劑，如在WO 0250027中描述的化合物或ezetimibe、替奎安(tiqueside)、帕馬苷(pamaqueside)聯(lián)合施用。
本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與LDL受體誘導(dǎo)劑(見，例如，US 6,342,512)聯(lián)合施用。
本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與填充劑(bulking agent)，優(yōu)選不可溶填充劑(見例如，carob/Caromax(zunft H J等，Carob pulppreparation for treatment of hypercholesterolemia，ADVANCES INTHERAPY(2001年9月-10月)，18(5)，230-6)。Caromax是一種產(chǎn)自Nutrinova，Nutrition Specialties & Food Ingredient GmbH，IndustrieparkHochst，65926 Frankfurt/Main的含有長(zhǎng)豆角的產(chǎn)品))聯(lián)合施用。在一種制劑中或通過式I化合物和Caromax的分別施用，與Caromax的聯(lián)用是可能的。此外，Caromax能夠以食品的形式，例如，在面點(diǎn)產(chǎn)品或牛奶什錦早餐棒中得以施用。
本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與PPARα激動(dòng)劑聯(lián)合施用。
本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與混合的PPARα/γ激動(dòng)劑，如AZ 242(Tesaglitazar，(S)-3-(4-[2-(4-甲磺酰氧基苯基)乙氧基]苯基)-2-乙氧基丙酸)、BMS 298585(N-[(4-甲氧基苯氧基)羰基]-N[[4-[2-(5-甲基-2-苯基-4-噁唑基)乙氧基]苯基]甲基]甘氨酸)，或如在WO 99/62872、WO 99/62871、WO 01/40171、WO 01/40169、WO 96/38428、WO 01/81327、WO 01/21602、WO 03/020269、WO 00/64888或WO 00/64876中描述的化合物聯(lián)合施用。
本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與貝特類(fibrate)藥物如非諾貝特(fenofibrate)、吉非貝齊(gemfibrozil)、氯苯丁酯(Clofibrate)、苯扎貝特(Benzafibrate)聯(lián)合施用。
本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與尼克酸或煙酸聯(lián)合施用。
本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與CETP抑制劑如CP-529,414(torcetrapib)聯(lián)合施用。
本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與ACAT抑制劑聯(lián)合施用。
本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與MTP抑制劑如implitapide聯(lián)合施用。
本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與抗氧化劑聯(lián)合施用。
本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與脂蛋白脂肪酶抑制劑聯(lián)合施用。
本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與ATP檸檬酸裂解酶抑制劑聯(lián)合施用。
本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與鯊烯合酶抑制劑聯(lián)合施用。
本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與脂蛋白拮抗劑聯(lián)合施用。
抗肥胖劑本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與脂肪酶抑制劑例如奧列司他(orlistat)聯(lián)合施用。
在一個(gè)實(shí)施方案中，其它活性化合物是氟苯丙胺或右旋氟苯丙胺。在另一實(shí)施方案中，其它活性化合物是西布曲明(sibutramine)。
在另外的實(shí)施方案中，式I化合物與CART調(diào)節(jié)劑(見“Cocaine-amphetamine-regulated transcript influences energymetabolism，anxiety and gastric emptying in mice”Asakawa，A等，M.Hormone and Metabolic Reasearch(2001)，33(9)，554-558)、NPY拮抗劑如N-{4-[(4-氨基喹唑啉-2-基氨基)甲基]環(huán)己基甲基}-萘-1-磺酰胺鹽酸鹽(CGP71683A))、MC4激動(dòng)劑(如N-[2-(3a-芐基-2-甲基-3-氧代-2，3，3a，4，6，7-六氫吡唑并[4，3-c]吡啶-5-基)-1-(4-氯苯基)-2-氧代乙基]-1-氨基-1，2，3，4-四氫萘-2-甲酰胺(WO01/91752))、阿立新(Orexin)拮抗劑(如1-(2-甲基苯并噁唑-6-基)-3-[1，5]萘啶-4-基脲鹽酸鹽(SB-334867-A))、H3激動(dòng)劑(如3-環(huán)己基-1-(4，4-二甲基-1，4，6，7-四氫咪唑并[4，5-c]吡啶-5-基)丙烷-1-酮草酸鹽(WO 00/63208))；TNF激動(dòng)劑、CRF拮抗劑(如[2-甲基-9-(2，4，6-三甲基苯基)-9H-1，3，9-三氮雜芴-4-基]二丙基胺(WO00/66585))、CRF BP拮抗劑(如優(yōu)洛可定(Urocortin))、優(yōu)洛可定激動(dòng)劑、β3激動(dòng)劑(如1-(4-氯-3-甲磺酰甲基苯基)-2-[2-(2，3-二甲基-1H-吲哚-6-基氧基)乙基氨基]-乙醇鹽酸鹽(WO 01/83451))、MSH(促黑素細(xì)胞激素)激動(dòng)劑、CCK-A激動(dòng)劑(如{2-[4-(4-氯-2，5-二甲氧基苯基)-5-(2-環(huán)己基乙基)噻唑-2-基氨甲?；鵠-5，7-二甲基吲哚-1-基}乙酸三氟乙酸鹽(WO99/15525))；血清素再吸收抑制劑(如右芬氟拉明(Dexfenfluramine))、混合的血清素能化合物和去甲腎上腺素能化合物(如WO 00/71549)、5HT激動(dòng)劑(如1-(3-乙基苯并呋喃-7-基)哌嗪草酸鹽(WO 01/09111))、鈴蟾肽(bombesin)激動(dòng)劑、galanin拮抗劑、生長(zhǎng)激素(如人生長(zhǎng)激素)、生長(zhǎng)激素釋放化合物(叔丁基6-芐氧基-1-(2-二異丙基氨基乙基氨甲?；?-3，4-二氫-1H-異喹啉-2-羧酸鹽(WO 01/85695))、TRH激動(dòng)劑(見，如EP0 462 884)、解偶聯(lián)蛋白2或3調(diào)節(jié)劑、瘦素(Leptin)激動(dòng)劑(見，如Lee，Daniel W.；Leinung，MatthewC.；Pozhavskaya-Arena，Marina；Grasso，Patricia.Leptinagonists as a potential approach to the treatment of obesity，Drugs of theFuture(2001)，26(9)，837-881)、DA激動(dòng)劑(溴隱停(bromocriptin)、Doprexin)、脂肪酶/淀粉酶抑制劑(如WO 00/40569)、PPAR調(diào)節(jié)劑(如WO00/78312)、RXR調(diào)節(jié)劑或TRβ激動(dòng)劑聯(lián)合施用。
在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，另外的活性化合物是瘦素。
在一個(gè)實(shí)施方案中，另外的活性化合物是右旋安菲他明(dexamphetamine)、安非他明(amphetamine)、嗎吲哚(mazindole)或苯丁胺(phentermine)。
在一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與作用于冠狀循環(huán)和血管系統(tǒng)的藥物如ACE抑制劑(如雷米普利(Ramipril))、作用于腎素-血管緊張素系統(tǒng)的藥物、鈣拮抗劑、β-阻斷劑等聯(lián)合施用。
在一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與具有抗炎效果的藥物聯(lián)合施用。
在一個(gè)實(shí)施方案中，式I化合物與用于癌癥治療和癌癥預(yù)防的藥物聯(lián)合施用。
可以理解，本發(fā)明化合物和一種或多種上述化合物以及任選地一種或多種其它藥學(xué)活性物質(zhì)的任何合適的聯(lián)合認(rèn)為是屬于本發(fā)明授予保護(hù)的范圍內(nèi)。
化合物的活性按如下進(jìn)行測(cè)試在PPARα細(xì)胞試驗(yàn)中PPAR激動(dòng)劑的EC50值的測(cè)定原理使用了穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的HEK(HEK＝人胚胎腎)細(xì)胞系，在這里將其稱“PPARα報(bào)告細(xì)胞系”，分析結(jié)合到人PPARα并以激動(dòng)劑的方式激活它的物質(zhì)的功效。所述細(xì)胞包含兩個(gè)基因元件，即螢光素酶報(bào)告元件(pdeltaM-GAL4-Luc-Zeo)和PPARα融合蛋白(GR-GAL4-人PPARα-LBD)，PPARα融合蛋白依賴PPARα配體介導(dǎo)螢光素酶報(bào)告元件的表達(dá)。穩(wěn)定和組成型表達(dá)的融合蛋白GR-GAL4-人PPARα-LBD在PPARα報(bào)告細(xì)胞系的細(xì)胞核中通過GAL4蛋白部分結(jié)合到整合進(jìn)此細(xì)胞系基因組中的螢光素酶報(bào)告元件的5’-上游GAL4DNA結(jié)合基序。如果在試驗(yàn)中使用脂肪酸耗竭的胎牛血清(cs-FCS)，沒有PPARα配體加入時(shí)，只有極少量螢光素酶報(bào)告基因表達(dá)。PPARα配體結(jié)合并激活了PPARα融合蛋白，因而導(dǎo)致螢光素酶報(bào)告基因的表達(dá)。形成的螢光素酶可以通過借助合適底物的化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)。
細(xì)胞系的構(gòu)建PPARα報(bào)告細(xì)胞系在兩個(gè)步驟中制備。首先，構(gòu)建螢光素酶報(bào)告元件并且將其穩(wěn)定地轉(zhuǎn)染進(jìn)HEK細(xì)胞。為此目的，將酵母轉(zhuǎn)錄因子GAL4的五個(gè)結(jié)合位點(diǎn)(每種情況下為5’-GGAGTACTGTCCTCCGAG-3’)克隆進(jìn)68bp長(zhǎng)的最小MMTV啟動(dòng)子(Genbank登錄號(hào)V01175)的5’-上游。最小MMTV啟動(dòng)子部分包含CCAAT盒和TATA元件以便使通過RNA聚合酶II的有效轉(zhuǎn)錄成為可能。GAL4-MMTV構(gòu)建體的克隆和測(cè)序可類似于Sambrook J.等的描述(Molecular cloning，Cold Spring HarborLaboratory Press，1989)進(jìn)行。然后將完整的螢火蟲螢光素酶基因(登錄號(hào)M15077)克隆進(jìn)GAL4-MMTV元件的3’-下游。測(cè)序后，將由五個(gè)GAL4結(jié)合位點(diǎn)、MMTV啟動(dòng)子和螢光素酶基因組成的螢光素酶報(bào)告元件再克隆進(jìn)提供zeozin抗性的質(zhì)粒中以便獲得質(zhì)粒pdeltaM-GAL4-Luc-zeo。根據(jù)Ausubel，F(xiàn).M.等的描述(Current protocols in molecular biology，1-3卷，John Wiley & Sons，Inc.，1995)將載體轉(zhuǎn)染進(jìn)HEK細(xì)胞中。然后用含有zeozin的培養(yǎng)基(0.5mg/ml)來選擇合適的穩(wěn)定的細(xì)胞克隆，它表現(xiàn)出十分低的螢光素酶基因的基本表達(dá)量。
第二步，將PPARα融合蛋白(GR-GAL4-人PPARα-LBD)導(dǎo)入所述穩(wěn)定細(xì)胞克隆中。為此目的，最初，將編碼糖皮質(zhì)激素受體N端76個(gè)氨基酸的cDNA(登錄號(hào)P04150)連接到編碼酵母轉(zhuǎn)錄因子GAL4的氨基酸1-147的cDNA部分(登錄號(hào)P04386)上。將人PPARα受體的配體結(jié)合結(jié)構(gòu)域(氨基酸S167-Y486；登錄號(hào)S74349)的cDNA克隆進(jìn)此GR-GAL4構(gòu)建體的3’端。將用此方法制備的融合構(gòu)建體(GR-GAL4-人PPARα-LBD)再克隆進(jìn)質(zhì)粒pcDNA3(購自Invitrogen)以便使通過巨細(xì)胞病毒啟動(dòng)子進(jìn)行的組成型表達(dá)成為可能。將這個(gè)質(zhì)粒用限制性核酸內(nèi)切酶線性化并穩(wěn)定地轉(zhuǎn)染進(jìn)前述含有螢光素酶報(bào)告元件的細(xì)胞克隆中。所得到的包含螢光素酶報(bào)告元件并組成型表達(dá)PPARα融合蛋白(GR-GAL4-人PPARα-LBD)的PPARα報(bào)告細(xì)胞系可以通過zeozin(0.5mg/ml)和G418(0.5mg/ml)選擇分離。
試驗(yàn)方法PPARα激動(dòng)劑活性在3天的試驗(yàn)中得以測(cè)定，描述如下
第一天將PPARα報(bào)告細(xì)胞系在具有如下添加物10％cs-FCS(胎牛血清，#SH-30068.03，Hyclone)、0.5mg/ml的zeocin(#R250-01 Invitrogen)、0.5mg/ml的G418(#10131-027，Invitrogen)、1％的青霉素鏈霉素溶液(#15140-122，Invitrogen)和2mM的L-谷氨酰胺(#25030-024，Invitrogen)的DMEM培養(yǎng)基(#41965-039，Invirogen)中培養(yǎng)至80％匯合。培養(yǎng)在存在5％CO2時(shí)于37℃細(xì)胞培養(yǎng)箱中的標(biāo)準(zhǔn)細(xì)胞培養(yǎng)瓶(#353112，BectonDickinson)里進(jìn)行。80％匯合的細(xì)胞用15mlPBS(#14190-094，Invitrogen)洗滌一次，用3ml胰蛋白酶溶液(#25300-054，Invitrogen)在37℃處理2分鐘，將其置于5ml上述DMEM培養(yǎng)基中并且在細(xì)胞計(jì)數(shù)器中計(jì)數(shù)。稀釋到500000個(gè)細(xì)胞/ml后，每種情況下，將35000個(gè)細(xì)胞置于具有透明塑料底的96孔微量滴定板(#3610，Corning Costar)的每個(gè)孔中。將板在37℃和5％CO2下的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育24小時(shí)。
第二天將待檢測(cè)的PPARα激動(dòng)劑溶解于DMSO中，濃度為10mM。將此儲(chǔ)備溶液在DMEM培養(yǎng)基(#41965-039，Invitrogen)中稀釋，在此培養(yǎng)基中加入了5％的cs-FCS(#SH-30068.03，Hyclone)、2mM的L-谷氨酰胺(#25030-024，Invitrogen)以及上述抗生素(zeozin、G418、青霉素和鏈霉素)。
測(cè)試物質(zhì)在10μM到100pM范圍的11種不同濃度進(jìn)行檢測(cè)。較有效的化合物以1μM到10pM或100nM到1pM之間的濃度進(jìn)行檢測(cè)。
通過抽吸將在第一天接種的PPARα報(bào)告細(xì)胞系的培養(yǎng)基完全除去，并且立刻將在培養(yǎng)基中稀釋了的試驗(yàn)物質(zhì)加入細(xì)胞中。使用機(jī)器手(Beckman FX)進(jìn)行此類物質(zhì)的稀釋和添加。在培養(yǎng)基中稀釋的試驗(yàn)物質(zhì)的終體積是每96-孔微量滴定板孔100μl。在檢測(cè)中DMSO濃度低于0.1％v/v以防止溶劑的細(xì)胞毒效應(yīng)。
為了證明本測(cè)試在各個(gè)單獨(dú)板中起作用，將也稀釋成11種不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)PPARα激動(dòng)劑加入到各個(gè)板中。將檢測(cè)板于37℃和5％CO2的培養(yǎng)箱中孵育24小時(shí)。
第三天將用試驗(yàn)物質(zhì)處理過的PPARα受體細(xì)胞從培養(yǎng)箱中移出，并且將培養(yǎng)基抽吸掉。通過吸移50μlBright Glo試劑(來自Promega)進(jìn)入每個(gè)96-孔微量滴定板孔，將細(xì)胞裂解。在暗處室溫下孵育10分鐘后，在光度計(jì)中(來自Wallac的Trilux)測(cè)定微量滴定板。對(duì)每個(gè)微量滴定板孔的測(cè)定時(shí)間為1秒。
計(jì)算將用于測(cè)定發(fā)光的儀器的原始數(shù)據(jù)導(dǎo)入Microsoft Excel文件中。根據(jù)生產(chǎn)商(IDBS)的用法說明用程序XL.Fit計(jì)算PPAR激動(dòng)劑的劑量-活性曲線和EC50值。
在此測(cè)定法中，實(shí)施例1到13的化合物的PPARα EC50值范圍是0.05nM到＞10μM.
本發(fā)明的一些式I化合物的活性結(jié)果在下面表I中列出表I
從表I來看，顯然，根據(jù)本發(fā)明的式I化合物活化了PPARα受體，因而例如和臨床上使用的貝特類藥物相似，實(shí)現(xiàn)了對(duì)生物體中甘油三酯濃度的降低(見，例如，J.-Ch.Fruchard等PPARS，Metabolic Disease andAtherosclerosis，Pharmacological Research，44卷，5期，345-52，2001；S.Kersten等，Roles of PPARs in health and disease，Nature，405卷，2000年5月25日，421-4；I.Pineda等Peroxisome proliferator-activatedreceptorsfrom transcriptional control to clinical practice，Curr OpinLipidol 122001，245-254)。
在細(xì)胞PPARγ試驗(yàn)中PPAR激動(dòng)劑的EC50值的測(cè)定原理采用瞬時(shí)轉(zhuǎn)染體系來測(cè)定PPAR激動(dòng)劑的細(xì)胞PPARγ活性。這基于螢光素酶報(bào)告質(zhì)粒(pGL3basic-5xGAL4-TK)和PPARγ表達(dá)質(zhì)粒(pcDNA3-GAL4-人PPARγ-LBD)的使用。將兩種質(zhì)粒瞬時(shí)轉(zhuǎn)染進(jìn)入人胚腎細(xì)胞(HEK細(xì)胞)。接著在這些細(xì)胞中融合蛋白GAL4-人PPARγLBD表達(dá)，所述融合蛋白結(jié)合到報(bào)告質(zhì)粒的GAL4結(jié)合位點(diǎn)。在存在PPARγ-活化配體時(shí)，活化的融合蛋白GAL4-人PPARγLBD誘導(dǎo)螢光素酶報(bào)告基因的表達(dá)，這可以以加入螢光素酶底物后化學(xué)發(fā)光的形式得以檢測(cè)。和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的PPARα報(bào)告細(xì)胞系不同，在細(xì)胞PPARγ檢測(cè)中兩種組分(螢光素酶報(bào)告質(zhì)粒和PPARγ表達(dá)質(zhì)粒)被瞬時(shí)轉(zhuǎn)染進(jìn)HEK細(xì)胞中，這是因?yàn)镻PARγ融合蛋白的穩(wěn)定和持久表達(dá)是有細(xì)胞毒作用的。
質(zhì)粒的構(gòu)建螢光素酶報(bào)告質(zhì)粒pGL3basic-5xGAL4-TK是基于購自Promega的載體pGL3basic。報(bào)告質(zhì)粒通過將酵母轉(zhuǎn)錄因子GAL4的五個(gè)結(jié)合位點(diǎn)(每個(gè)結(jié)合位點(diǎn)具有序列5’-CTCGGAGGACAGTACTCCG-3，)，和160bp-長(zhǎng)的胸苷激酶啟動(dòng)子部分(登錄號(hào)AF027128)5’-上游一起克隆進(jìn)pGL3basic得以制備。胸苷激酶啟動(dòng)子3’-下游是來自螢火蟲(Photinuspyralis)的全長(zhǎng)螢光素酶基因(登錄號(hào)M15077)，此螢光素酶基因已經(jīng)是所用質(zhì)粒pGL3basic的一個(gè)組分。報(bào)告質(zhì)粒GL3basic-5xGAL4-TK的克隆和測(cè)序可類似于Sambrook J.等(Molecular cloning，Cold Spring HarborLaboratory Press，1989)的描述進(jìn)行。
通過首先將編碼酵母轉(zhuǎn)錄因子GAL4的氨基酸1-147的cDNA(登錄號(hào)P04386)克隆進(jìn)質(zhì)粒pcDNA3(購自Invitrogen)巨細(xì)胞病毒啟動(dòng)子的3’-下游，PPARγ表達(dá)質(zhì)粒pcDNA3-GAL4-人PPARγ LBD得以制備。接著，將人PPARγ受體的配體-結(jié)合結(jié)構(gòu)域(LBD)(氨基酸I152-Y475；登錄號(hào)#g1480099)克隆進(jìn)GAL4DNA結(jié)合域的3’-下游中。PPARγ表達(dá)質(zhì)粒pcDNA3-GAL4-人PPARγ-LBD的克隆和測(cè)序同樣可類似于Sambrook J.等(Molecular cloning，Cold Spring Harbor Laboratory Press，1989)的描述進(jìn)行。除了螢光素酶報(bào)告質(zhì)粒pGL3basic-5xGAL4-TK和PPARγ表達(dá)質(zhì)粒pcDNA3-GAL4-人PPARγ-LBD外，也用于細(xì)胞PPARγ測(cè)試的是參考質(zhì)粒pRL-CMV(購自Promega)和購自Stratagene的質(zhì)粒pBluescriptSK(+)。所有四種質(zhì)?？梢允褂觅徸訯iagen的質(zhì)粒制備試劑盒制備，它可以確保質(zhì)粒在轉(zhuǎn)染進(jìn)入HEK細(xì)胞之前具有最小內(nèi)毒素含量的質(zhì)量。
試驗(yàn)方法PPARγ激動(dòng)劑的活性在如下描述的4天的試驗(yàn)中得以測(cè)定在轉(zhuǎn)染之前，HEK細(xì)胞在混合了以下添加物10％FCS(#16000-044，Invitrogen)、1％的青霉素鏈霉素溶液(#15140-122，Invitrogen)和2mM的L-谷氨酰胺(#25030-024，Invitrogen)的DMEM(#41965-039，Invitrogen)中培養(yǎng)。
第一天首先制備溶液A，它是一種包含所有四種上述質(zhì)粒加上DMEM的轉(zhuǎn)染混合液。下列的數(shù)量用于制備每次試驗(yàn)中每96孔微量滴定板孔的3ml溶液A2622μl的無抗生素和無血清的DMEM(#41965-039，Invitrogen)、100μl參考質(zhì)粒pRL-CMV(1ng/μl)、100μl螢光素酶報(bào)告質(zhì)粒pGL3basic-5xGAL4-TK(10ng/μl)、100μl PPARγ表達(dá)質(zhì)粒pcDNA3-GAL4-人PPARγ-LBD(100ng/μl)以及78μl的質(zhì)粒pBluescript SK(+)(500ng/μl)。然后通過混合1.9ml的DMEM(#41965-039，Invitrogen)與100μl的PolyFect轉(zhuǎn)染試劑(購自Qiagen)為每個(gè)96孔微量滴定板制備2ml的溶液B。接著，將3ml的溶液A和2ml的溶液B混合產(chǎn)生5ml的溶液C，通過多次抽吸充分混合C并在室溫下孵育10分鐘。
將175cm2容量的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中80％匯合的HEK細(xì)胞用15ml的PBS(#14190-094，Invitogen)洗滌一次并用3ml的胰蛋白酶溶液(#25300-054，Invitrogen)在37℃處理2分鐘。然后將細(xì)胞置于15ml混合了10％FCS(#16000-044，Invitrogen)、1％的青霉素鏈霉素溶液(#15140-122，Invitrogen)和2mM的L-谷氨酰胺(#25030-024，Invitrogen)的DMEM(#41965-039，Invitrogen)中。當(dāng)將細(xì)胞懸液在細(xì)胞計(jì)數(shù)器中計(jì)數(shù)后，將懸液稀釋到250000個(gè)細(xì)胞/ml。將15ml的這種細(xì)胞懸液和5ml的溶液C混合以用于一塊微量滴定板。200μl的此懸液接種到具有透明塑料底部的96孔微量滴定板(#3610，Corning Costar)的每孔中。將此板于37℃和5％CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育24小時(shí)。
第二天將待檢測(cè)的PPAR激動(dòng)劑以10mM濃度溶解于DMSO中。將該儲(chǔ)備溶液在混合有2％Ultroser(#12039-012，Biosepra)、1％青霉素鏈霉素溶液(#15140-122，Invitrogen)和2mM L-谷氨酰胺(#25030-024，Invitrogen)的DMEM(#41965-039，Invitrogen)中稀釋。試驗(yàn)物質(zhì)在總共11種從10μM到100pM范圍的不同濃度中得以檢測(cè)。較有效力的化合物在范圍為1μM到10pM范圍的濃度中得以檢測(cè)。
將在第一天轉(zhuǎn)染和接種的HEK細(xì)胞的培養(yǎng)基通過抽吸完全除去，并將稀釋于培養(yǎng)基的試驗(yàn)物質(zhì)立刻加入細(xì)胞中。這些物質(zhì)的稀釋和添加通過機(jī)器手(Beckman FX)進(jìn)行。稀釋于培養(yǎng)基的試驗(yàn)物質(zhì)的最終體積是每96孔微量滴定板孔100μl。將每板裝載同樣被稀釋成11種不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)PPARγ激動(dòng)劑，以便證明每個(gè)單獨(dú)板中檢測(cè)的功能。將測(cè)試板在37℃和5％CO2下的培養(yǎng)箱中孵育48小時(shí)。
第四天通過抽吸將培養(yǎng)基除去后，將50μl的Dual-GloTM試劑(Dual-GloTM螢光素酶測(cè)試體系；Promega)按照生產(chǎn)商的使用說明加入每個(gè)孔中以便裂解細(xì)胞并且向細(xì)胞中形成的螢火蟲(Photinus pyralis)螢光素酶提供底物。在室溫下暗處孵育10分鐘后，在測(cè)量?jī)x器中測(cè)量螢火蟲螢光素酶介導(dǎo)的化學(xué)發(fā)光(測(cè)量時(shí)間/每孔1秒；Trilux購自Wallac)。然后將50μl的Dual-GloTMStop & Glo試劑(Dual-GloTM螢光素酶測(cè)試體系；Promega)加入至每孔中以便終止螢火蟲螢光素酶的活性并向通過參考質(zhì)粒pRL-CMV表達(dá)的海腎(Renilla)螢光素酶提供底物。在室溫下暗處孵育另外10分鐘后，再次在測(cè)量?jī)x器中以1秒/孔測(cè)量通過海腎螢光素酶介導(dǎo)的化學(xué)發(fā)光。
計(jì)算將得自光度計(jì)的原始數(shù)據(jù)導(dǎo)入Microsoft Excel文件中。對(duì)于源自微量滴定板每個(gè)孔的每次檢測(cè)值確定螢火蟲/海腎螢光素酶活性率。通過XL.Fit程序按照由生產(chǎn)商(IDBS)詳細(xì)說明的方法從這個(gè)比率計(jì)算出PPAR激動(dòng)劑的劑量-效果曲線和EC50值。
對(duì)于在此申請(qǐng)中的所述PPAR激動(dòng)劑，測(cè)定的PPARγEC50值的范圍為0.5nM到＞10μM。
下面給出的實(shí)施例用來闡述本發(fā)明，而不用于限制本發(fā)明。
順式1，3Cy是指順式取代的環(huán)己烷-1，3-二基-----表示連接點(diǎn)根據(jù)下列反應(yīng)方案可以合成式I和Ia化合物
將式A化合物，其中R3、R5和Y具有上面給出的意義，在惰性溶劑(如CCl4)中與NBS反應(yīng)，生成式B化合物。
將式B化合物與式C化合物，式C中n和m各自是0-5，反應(yīng)生成式D化合物，式D中R1、R2、R4、m、n和Y具有上面描述的意義，同時(shí)最初將組分C在水分離器上于甲苯中的二丁基氧化錫加熱多個(gè)小時(shí)并隨后，隨著加入二甲基甲酰胺、氟化銫和溴化物B，通過在室溫下攪拌數(shù)小時(shí)轉(zhuǎn)化為D。
將式E化合物與式W的醛(如苯甲醛、噻吩-或呋喃甲醛)反應(yīng)生成式F化合物，式F中R1、R2、R4和X是如上面定義的；為此目的，最初將組分E和F溶解于乙酸中并導(dǎo)入HCl直到反應(yīng)進(jìn)行完全，生成式F化合物。
將式F化合物，其中R1、R2、R4和X是如上定義，在氯仿中與POCl3加熱回流數(shù)小時(shí)，生成式G化合物。
將式G化合物，其中R1、R2、R4和X是如上定義，在加熱回流下與丙酮中的NaI反應(yīng)數(shù)小時(shí)，生成式H化合物。
將式D化合物與式H化合物反應(yīng)，式H中Y是如上定義，生成式J化合物，式J中R1、R2、R4、R5、X和Y是如上定義。為了建立醚鍵，將D例如在室溫下，于二甲基甲酰胺和四氫呋喃的混合物中，使用強(qiáng)堿如氫化鈉脫質(zhì)子化，并隨后用組分H烷基化。
通過水解酯官能團(tuán)如通過與氫氧化鉀加熱并隨后與醇(乙醇、叔丁醇)加熱，并通過酸化釋放式I的羧酸基團(tuán)，將化合物J轉(zhuǎn)化成式M化合物。此羧酸基團(tuán)可以通過常規(guī)方法衍生為式-(C＝O)-OR3基團(tuán)，其中R3是如上定義。其它化合物可按照所述或通過已知方法獲得。
實(shí)施例14，5-二甲基-2-萘-2-基噁唑3-氧化物 將18.4g二乙酰一肟和31.2g 2-萘甲醛加至50ml冰醋酸中，并導(dǎo)入HCl氣體冰冷30分鐘。通過加入甲基叔丁基醚將產(chǎn)物沉淀為鹽酸鹽并用抽吸濾盡，并且用甲基叔丁基醚洗滌沉淀。將沉淀在二氯甲烷和水的混合物中懸浮，并用氨確立堿性pH。每種情況下用500ml二氯甲烷和乙酸乙酯萃取混合物三次，將合并的有機(jī)相在MgSO4上干燥并隨后在減壓下除去溶劑。這生成40.3g 4，5-二甲基-2-萘-2-基噁唑3-氧化物的黃色固體。
CF15H13NO2(239.28)，MS(ESI)＝240(M+H+)4-氯甲基-5-甲基-2-萘-2-基噁唑 將40g 4，5-二甲基-2-萘-2-基噁唑3-氧化物溶解于200ml氯仿中，加入16.7ml磷酰氯并將混合物加熱回流30分鐘。將混合物冷卻至0℃，用氨確立稍微堿性的pH并每種情況下用500ml乙酸乙酯萃取混合物三次。將合并的有機(jī)相用水洗滌并在MgSO4上干燥并隨后在減壓下除去溶劑。將殘余物在硅膠上用流動(dòng)相正庚烷∶乙酸乙酯＝80∶1＝＞5∶1純化。這生成10.6g4-氯甲基-5-甲基-2-萘-2-基噁唑的無色固體。C15H12ClNO(257.72)，MS(ESI)258(M+H+)。
4-碘甲基-5-甲基-2-萘-2-基噁唑 將150ml丙酮中的1.8g 4-氯甲基-5-甲基-2-萘-2-基噁唑和3g碘化鈉加熱回流2小時(shí)。當(dāng)將反應(yīng)混合物冷卻后，加入300ml甲基叔丁基醚，將混合物用飽和Na2S2O3溶液洗滌三次并在MgSO4上干燥并且在減壓下將溶劑除去。這生成2.7g 4-碘甲基-5-甲基-2-萘-2-基噁唑的淡黃色固體。C15H12INO(349.17)，MS(ESI)350(M+H+)2-(順式-3-羥基環(huán)己基氧甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯 將8.7g 1，3-環(huán)己烷二醇和12g二丁基氧化錫溶解于600ml甲苯中并在脫水器上加熱回流。反應(yīng)期間，反應(yīng)體積減為初始體積的一半。4小時(shí)后，將反應(yīng)混合物冷卻至室溫，并加入300ml DMF、9.0g 2-溴甲基-6-甲基苯甲酸甲酯和9.4g氟化銫。室溫下攪拌混合物12小時(shí)。通過加入乙酸乙酯將反應(yīng)混合物稀釋并用飽和NaCl溶液洗滌。將有機(jī)相在硫酸鎂上干燥，在減壓下除去溶劑并通過硅膠(正庚烷/乙酸乙酯＝50∶1＝＞1∶2)上的快速制備色譜純化殘余物。這生成6g 2-(順式-3-羥基環(huán)己基氧甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯的油狀物。C16H22O4(278.35)，MS(ESI)279(M+H+)
2-((1R，3S)-3-羥基環(huán)己基氧甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯 將8g 2-(順式-3-羥基環(huán)己基氧甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯溶解于100ml醋酸乙烯酯中，并加入1g Candida antartika脂肪酶B。將混合物室溫下攪拌七小時(shí)并隨后將酶濾盡并且在減壓下除去溶劑。通過硅膠(正庚烷/乙酸乙酯＝10∶1)上的快速制備色譜純化殘余物。這生成3.9g 2-((1R，3S)-3-羥基環(huán)己基氧甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯的無色油狀物。C16H22O4(278.35)，MS(ESI)279(M+H+)ee＝98％(Chiralpak AD/2 250∶4.6；正庚烷∶乙醇∶甲醇＝25∶1∶0.5+0.1％三氟乙酸，Rt＝8.9分鐘；對(duì)映異構(gòu)體的保留時(shí)間Rt＝9.9分鐘。)。
2-甲基-6-[(1R，3S)-3-(5-甲基-2-萘-2-基噁唑-4-基甲氧基)-環(huán)己基氧甲基]苯甲酸甲酯 室溫下，將50mg氫化鈉的60％強(qiáng)度懸液加至200mg 2-((1R，3S)-3-羥基環(huán)己基氧甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯在5ml二甲基甲酰胺中的溶液中，并隨后加入380mg 4-碘甲基-5-甲基-2-萘-2-基噁唑。一小時(shí)后，加入甲基叔丁基醚并用水萃取混合物。將有機(jī)相在硫酸鎂上干燥，在減壓下除去溶劑并通過RP-HPLC純化殘余物。這生成94mg 2-甲基-6-[(1R，3S)-3-(5-甲基-2-萘-2-基噁唑-4-基甲氧基)-環(huán)己基氧甲基]苯甲酸甲酯的淡黃色油狀物。
C31H33NO5(499.61)，MS(ESI)500(M+H+)
2-甲基-6[(1R，3S)3-(5-甲基-2-萘-2-基噁唑-4-基甲氧基)環(huán)己基氧甲基]苯甲酸 將94mg 2-甲基-6-[(1R，3S)-3-(5-甲基-2-萘-2-基噁唑-4-基甲氧基)-環(huán)己基氧甲基]苯甲酸甲酯在10ml叔丁醇和1ml 10N氫氧化鉀溶液的混合物中90℃下攪拌。兩天后，用鹽酸酸化并用乙酸乙酯萃取混合物。將合并的有機(jī)相在硫酸鎂上干燥，在減壓下除去溶劑并通過RP-HPLC純化殘余物。這生成72mg 2-甲基-6-[(1R，3S)3-(5-甲基-2-萘-2-基噁唑-4-基甲氧基)環(huán)己基氧甲基]苯甲酸的非晶形固體。C30H31NO5(485.59)，MS(ESI)486(M+H+)。
實(shí)施例2與實(shí)施例1相似，二乙酰一肟、苯并[1，3]間二氧雜環(huán)戊烯-5甲醛和2-((1R，3S)-3-羥基環(huán)己基氧甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯生成2-[(1R，3S)-3-(2-苯并[1，3]間二氧雜環(huán)戊烯-5-基-5-甲基噁唑-4-基甲氧基)環(huán)己基氧甲基]-6-甲基苯甲酸 C27H29NO7(479.53)，MS(ESI)480(M+H+)。
實(shí)施例3和實(shí)施例1相似，二乙酰一肟、2，3-二氫苯并[1，4]二噁烯-6-甲醛和2-((1R，3S)-3-羥基環(huán)己基氧甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯生成2-[(1R，3S)-3-(2，3-二氫苯并[1，4]二氧芑-6-基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基)環(huán)己基氧甲基]-6-甲基苯甲酸。
C28H31NO7(493.56)，MS(ESI)494(M+H+)。
實(shí)施例4和實(shí)施例1相似，二乙酰一肟、呋喃-2-甲醛和2-((1R，3S)-3-羥基環(huán)己基氧甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯生成2-甲基-6-{(1R，3S)-3-[5-甲基-2-(5-甲基呋喃-2-基)噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己基氧甲基}苯甲酸。
C25H29NO6(493.51)，MS(ESI)440(M+H+)。
實(shí)施例5和實(shí)施例1相似，二乙酰一肟、5-甲基噻吩-2-甲醛和2-((1R，3S)-3-羥基環(huán)己基氧甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯生成2-甲基-6-{(1R，3S)-3-[5-甲基-2-(5-甲基噻吩-2-基)噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己基氧甲基}苯甲酸。
C25H29NO5S(455.58)，MS(ESI)456(M+H+)。
實(shí)施例6和實(shí)施例1相似，二乙酰一肟、4-三氟甲基硫基苯甲醛和2-((1R，3S)-3-羥基環(huán)己基氧甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯生成2-{(1R，3S)-甲基-6-{3-[5-甲基-2-(4-三氟甲基硫基苯基)噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己基氧甲基}苯甲酸。
C27H28F3NO5S(535.58)，MS(ESI)536(M+H+)。
實(shí)施例7和實(shí)施例1相似，二乙酰一肟、3-五氟乙氧基苯甲醛和2-((1R，3S)-3-羥基環(huán)己基氧甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯生成2-{(1R，3S)-甲基-6-(3-{5-甲基-2-[3-(1，1，2，2-四氟乙氧基)苯基]噁唑-4-基甲氧基}環(huán)己基氧甲基)}苯甲酸。
C28H29F4NO6(551.54)，MS(ESI)552(M+H+)。
實(shí)施例8和實(shí)施例1相似，二乙酰一肟、4-苯氧基苯甲醛和2-((1R，3S)-3-羥基環(huán)己基氧甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯生成2-{(1R，3S)-甲基-6-{3-[5-甲基-2-(4-苯氧基苯基)噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己基氧甲基}苯甲酸。
C32H33NO6(527.62)，MS(ESI)528(M+H+)。
實(shí)施例9和實(shí)施例1相似，二乙酰一肟、噻吩-2-甲醛和2-((1R，3S)-3-羥基環(huán)己基氧甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯生成2-{(1R，3S)-甲基-6-[3-(5-甲基-2-噻吩-2-基噁唑-4-基甲氧基)環(huán)己基氧甲基]苯甲酸。

C24H27NO5S(441.55)，MS(ESI)442(M+H+)。
實(shí)施例10和實(shí)施例1相似，二乙酰一肟、3-氟-5-三氟甲基苯甲醛和2-((1R，3S)-3-羥基環(huán)己基氧甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯生成2-{(1R，3S)-{3-[2-(3-氟-5-三氟甲基苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己基氧甲基}-6-甲基苯甲酸甲酯 C28H29F4NO5(535.54)，MS(ESI)536(M+H+)。
將128mg 2-{(1R，3S)-{3-[2-(3-氟-5-三氟甲基苯基)-5-甲基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己基氧甲基}-6-甲基苯甲酸甲酯、5ml乙二醇單甲醚和0.6ml 10NKOH的混合物加熱回流24小時(shí)。冷卻后，用鹽酸酸化并用乙酸乙酯萃取混合物。將合并的有機(jī)相在硫酸鎂上干燥，在減壓下除去溶劑并通過RP-HPLC純化殘余物。這生成56mg 2-{(1R，3S)-(3-{2-[3-(2-甲氧基乙氧基)-5-三氟甲基苯基]-5-甲基噁唑-4-基甲氧基}環(huán)己基氧甲基)-6-甲基苯甲酸的無色油狀物，分子量為C29H32F3NO7(563.58)，MS(ESI)564(M+H+)。
實(shí)施例11和實(shí)施例1相似，1-苯基-1，2-丙二酮2-肟、對(duì)甲苯甲醛和2-((1R，3S)-3-羥基環(huán)己基氧甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯生成2-甲基-6-[(1R，3S)-3-(5-苯基-2-對(duì)甲苯基噁唑-4-基甲氧基)環(huán)己基氧甲基]苯甲酸。
C32H33NO5(511.62)，MS(ESI)512(M+H+)。
實(shí)施例12和實(shí)施例1相似，1-苯基-1，2-丙二酮2-肟、間甲氧基苯甲醛和2-((1R，3S)-3-羥基環(huán)己基氧甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯生成2-{(1R，3S)-3-[2-(3-甲氧基苯基)-5-苯基噁唑-4-基甲氧基]環(huán)己基氧甲基}-6-甲基苯甲酸。
C32H33NO6(527.62)，MS(ESI)528(M+H+)。
實(shí)施例13和實(shí)施例1相似，2-環(huán)己基-4-碘甲基噁唑和2-((1R，3S)-3-羥基環(huán)己基氧甲基)-6-甲基苯甲酸甲酯生成2-[(1R，3S)-3-(2-環(huán)己基噁唑-4-基甲氧基)環(huán)己基氧甲基]-6-甲基苯甲酸 C25H27NO5(412.50)，MS(ESI)422(M+H+)。
權(quán)利要求
1.式I化合物及其生理可接受鹽 其中環(huán)A是(C3-C8)-環(huán)烷二基、或(C3-C8)-環(huán)烯二基，其中環(huán)烷二基環(huán)或環(huán)烯二基環(huán)中一個(gè)或多個(gè)碳原子可以被O原子替換；環(huán)B是a)苯基；或b)可以含有一到四個(gè)選自N、O和S的雜原子的5-12元雜芳環(huán)、8-14元芳環(huán)或(C3-C8)-環(huán)烷基；對(duì)于R1a)在環(huán)B＝a)的情況下R1為SCF3、OCF2-CHF2、O-苯基、O-(C1-C6)-烷基-O-(C1-C3)-烷基；b)在環(huán)B＝b)的情況下R1為H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、OCF2-CF3、SCF3、OCF2-CHF2、O-苯基、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基-O-(C1-C3)-烷基；c)在環(huán)B＝a)并且R4＝苯基的情況下R1為(C1-C6)-烷基或O-(C1-C6)-烷基；R2是H或CF3；對(duì)于R4a)在環(huán)B＝a)的情況下R4為苯基；b)在環(huán)B＝b)的情況下R4為H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基；c)在環(huán)B＝a)并且R1＝a)的情況下R4為(C1-C6)-烷基；R5是H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基；R3是H或(C1-C6)-烷基；X是(C1-C6)-烷二基，其中烷二基中的一個(gè)或多個(gè)碳原子可以被氧原子替換；Y是(C1-C6)-烷二基，其中烷二基中的一個(gè)或多個(gè)碳原子可以被氧原子替換。
2.如權(quán)利要求1所述的式I化合物，其中環(huán)A是(C3-C8)-環(huán)烷二基或(C3-C8)-環(huán)烯二基，其中環(huán)烷二基環(huán)或環(huán)烯二基環(huán)中的一個(gè)或多個(gè)碳原子可以被氧原子替換；環(huán)B是a)苯基；或b)可以含有一到四個(gè)選自N、O和S的雜原子的5-12元雜芳環(huán)、8-14元芳環(huán)或(C3-C8)-環(huán)烷基；對(duì)于R1a)在環(huán)B＝a)的情況下R1為SCF3、OCF2-CHF2、O-苯基、O-(C1-C6)-烷基-O-(C1-C3)-烷基；b)在環(huán)B＝b)的情況下R1為H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、OCF2-CF3、SCF3、OCF2-CHF2、O-苯基、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基-O-(C1-C3)-烷基；c)在環(huán)B＝a)并且R4＝苯基的情況下R1為(C1-C6)-烷基或O-(C1-C6)-烷基；R2是 H或CF3；對(duì)于R4a)在環(huán)B＝a)的情況下R4為苯基；b)在環(huán)B＝b)的情況下R4為H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基；c)在環(huán)B＝a)并且R1＝a)的情況下R4為(C1-C6)-烷基；R5是H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基；R3是H或(C1-C6)-烷基；X是CH2-O；Y是(C1-C6)-烷二基，其中烷二基中的一個(gè)或多個(gè)碳原子可以被氧原子替換。
3.如權(quán)利要求1或2所述的式I化合物，其中環(huán)A是(C3-C8)-環(huán)烷二基，其中一個(gè)碳原子可以被氧原子替換；環(huán)B是a)苯基；或b)可以含有一到四個(gè)選自N、O和S的雜原子的5-12元雜芳環(huán)、8-14元芳環(huán)或(C3-C8)-環(huán)烷基；對(duì)于R1a)在環(huán)B＝a)的情況下R1為SCF3、OCF2-CHF2、O-苯基、O-(C1-C6)-烷基-O-(C1-C3)-烷基；b)在環(huán)B＝b)的情況下R1為H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、OCF2-CF3、SCF3、OCF2-CHF2、O-苯基、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基-O-(C1-C3)-烷基；c)在環(huán)B＝a)并且R4＝苯基的情況下R1為(C1-C6)-烷基或O-(C1-C6)-烷基；R2是H或CF3；對(duì)于R4a)在環(huán)B＝a)的情況下R4為苯基；b)在環(huán)B＝b)的情況下R4為H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基；c)在環(huán)B＝a)并且R1＝a)的情況下R4為(C1-C6)-烷基；R5是H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基；R3是H或(C1-C6)-烷基；X是CH2-O；Y是CH2-O。
4.式Ia的化合物 其中環(huán)A、環(huán)B、R1、R2、R3、R4、R5、X和Y是如權(quán)利要求1到3所述的定義。
5.如權(quán)利要求4所述的式Ia化合物，其中R3是H且R5是甲基。
6.如權(quán)利要求4或5所述的式Ia化合物，其中環(huán)A是(C5-C7)-環(huán)烷二基；環(huán)B是a)苯基，或b)可以含有一到四個(gè)選自N、O和S的雜原子的5-12元雜芳環(huán)、8-14元芳環(huán)或(C3-C8)-環(huán)烷基；對(duì)于R1a)在環(huán)B＝a)的情況下R1為SCF3、OCF2-CHF2、O-苯基、O-(C1-C6)-烷基-O-(C1-C3)-烷基；b)在環(huán)B＝b)的情況下R1為H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、OCF2-CF3、SCF3、OCF2-CHF2、O-苯基、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基-O-(C1-C3)-烷基；c)在環(huán)B＝a)并且R4＝苯基的情況下R1為(C1-C6)-烷基或O-(C1-C6)-烷基；R2是H或CF3；對(duì)于R4a)在環(huán)B＝a)的情況下R4為苯基；b)在環(huán)B＝b)的情況下R4為H、F、Cl、Br、OH、NO2、CF3、OCF3、(C1-C6)-烷基、O-(C1-C6)-烷基；c)在環(huán)B＝a)并且R1/R2＝a)的情況下R4為(C1-C6)-烷基；R5是甲基；R3是H；X是CH2-O；Y是CH2-O。
7.如權(quán)利要求1到6中任意一項(xiàng)所述的式I或Ia化合物，其中中心的環(huán)烷二基環(huán)為1，3順式連接。
8.一種藥物，其包含如權(quán)利要求1到7中一項(xiàng)或多項(xiàng)所述的一種或多種化合物。
9.一種藥物，其包含如權(quán)利要求1到7中一項(xiàng)或多項(xiàng)所述的一種或多種化合物I以及一種或多種對(duì)于代謝性疾病或相關(guān)疾病具有有利作用的活性化合物。
10.一種藥物，其包含如權(quán)利要求1到7中一項(xiàng)或多項(xiàng)所述的一種或多種化合物I以及一種或多種抗糖尿病藥。
11.一種藥物，其包含如權(quán)利要求1到7中一項(xiàng)或多項(xiàng)所述的一種或多種化合物以及一種或多種脂類調(diào)節(jié)劑。
12.如權(quán)利要求1到7中一項(xiàng)或多項(xiàng)所述的化合物的用途，用于治療和/或預(yù)防脂肪酸代謝疾病和葡萄糖利用疾病。
13.如權(quán)利要求1到7中一項(xiàng)或多項(xiàng)所述的化合物的用途，用于治療和/或預(yù)防胰島素抗性在其中起作用的疾病。
14.如權(quán)利要求1到7中一項(xiàng)或多項(xiàng)所述的化合物的用途，用于治療和/或預(yù)防糖尿病和相關(guān)后遺癥。
15.如權(quán)利要求1到7中一項(xiàng)或多項(xiàng)所述的化合物的用途，用于治療和/或預(yù)防血脂異常及其后遺癥。
16.如權(quán)利要求1到7中一項(xiàng)或多項(xiàng)所述的化合物的用途，用于治療和/或預(yù)防與代謝綜合征相關(guān)的病癥。
17.如權(quán)利要求1到7中一項(xiàng)或多項(xiàng)所述的化合物的用途，用于與至少一種其它活性化合物聯(lián)合而治療和/或預(yù)防脂肪酸代謝疾病和葡萄糖利用疾病。
18.如權(quán)利要求1到7中一項(xiàng)或多項(xiàng)所述的化合物的用途，用于與至少一種其它活性化合物聯(lián)合而治療和/或預(yù)防胰島素抗性在其中起作用的疾病。
19.用于制備包含如權(quán)利要求1到7中一項(xiàng)或多項(xiàng)所述的一種或多種化合物的藥物的方法，其包括將活性化合物與藥學(xué)上合適的載體混合以及將該混合物制成適于施用的形式。
全文摘要
本發(fā)明涉及二芳基環(huán)烷基衍生物，并涉及它們的生理可接受鹽、外消旋物及生理機(jī)能性衍生物。本發(fā)明涉及式(I)的化合物，其中的基團(tuán)如說明書中所述定義，并涉及它們的生理可接受鹽及它們的制備方法。這些化合物適用于治療和/或預(yù)防脂肪酸代謝疾病、葡萄糖利用疾病和胰島素抗性在其中起作用的疾病。
文檔編號(hào)C07D263/02GK1753880SQ200480005447
公開日2006年3月29日 申請(qǐng)日期2004年2月19日 優(yōu)先權(quán)日2003年2月27日
發(fā)明者J·格利策, H·格隆比克, E·法爾克, D·格雷茨克, S·凱爾, H-L·舍費(fèi)爾, C·斯塔普爾, W·文德勒 申請(qǐng)人:塞諾菲-安萬特德國(guó)有限公司