專利名稱：作為腎素抑制劑的新型3－位具有雜原子的9－氮雜雙環(huán)壬烯衍生物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及通式I的新化合物。本發(fā)明還涉及這些化合物的制備方法、包含一種或多種式I化合物的藥物組合物以及特別是它們在心血管疾病和腎機能不全中作為腎素抑制劑的用途。此外，這些化合物可以被認為是其它天冬氨酰蛋白酶的抑制劑，并由此可用作治療瘧疾的plasmepsins抑制劑以及作為白色念珠菌分泌的天冬氨?；鞍酌傅囊种苿亩委熣婢腥?。
在腎素-血管緊張素系統(tǒng)(RAS)中，生物活性的血管緊張素II(Ang II)是通過一種兩步機制產(chǎn)生的。高度特異性的腎素酶斷裂血管緊張肽原成為血管緊張素I(Ang I)，其然后通過較低特異性血管緊張素-轉化酶(ACE)形成AngI。已知AngII作用于至少兩個被稱為AT1和AT2的受體亞型。其中AT1似乎傳送Ang II大部分的已知功能，而AT2的作用仍然未知。
RAS的調節(jié)代表了心血管疾病治療中的主要進步。ACE抑制劑和AT1阻滯劑已被用于治療高血壓(Waeber B.等“The renin-angiotensin systemrole inexperimental and human hypertension”，in Berkenhager W.H.，Reid J.L.(eds)Hypertension，Amsterdam，Elsevier Science Publishing Co，1996，489-519；Weber M.A.，Am.J.Hypertens.，1992，5，247S)。此外，ACE抑制劑用于保護腎(Rosenberg M.E.等，Kidney International，1994，45，403；Breyer J.A.等，Kidney International，1994，45，S156)，用于預防充血性心力衰竭(Vaughan D.E.等，Cardiovasc.Res.，1994，28，159；Fouad-Tarazi F.等，Am.J.Med.，1988，84(Suppl.3A)，83)和心肌梗塞(Pfeffer M.A.et al.，N.Engl.J.Med.，1992，327，669)。
開發(fā)腎素抑制劑的原理在于腎素的特異性(Kleinert H.D.，Cardiovasc.Drugs，1995，9，645)。腎素唯一已知的底物是血管緊張素原，其僅受到腎素作用(在生理條件下)。相反，ACE除了可以斷裂Ang I外，還可斷裂緩激肽且與胃促胰酶(一種絲氨酸蛋白酶)功能相交叉(Husain A.，J.Hypertens.，1993，11，1155)。在患者中，ACE的抑制會導致引起咳嗽的緩激肽積累(5～20％)以及潛在性的危急生命的急性自發(fā)水腫(0.1～0.2％)(Israili Z.H.et al.，Annalsof Internal Medicine，1992，117，234)。凝乳酶并非是通過ACE抑制劑來抑制的。因此，在接受ACE抑制劑治療的患者中，仍可能形成Ang II。另一方面，AT1受體的阻斷(例如通過洛沙坦)將其他的AT-受體亞型過度暴露于Ang II，Ang II的濃度通過AT1受體的阻斷而被顯著地提高。這可以在AT1受體拮抗體的安全與效能特征方面產(chǎn)生嚴重的問題。總之，不僅希望腎素抑制劑在安全性不同于ACE抑制劑和AT1阻滯劑，但更重要的是，還希望在它們阻擋RAS的效力方面也不同于ACE抑制劑和AT1阻滯劑。
由于腎素抑制劑具有擬肽特征(Kleinert H.D.，Cardiovasc.Drugs，1995，9，645)而導致口腔活度不足，因而僅僅對腎素抑制劑進行了有限的臨床實踐(Azizi M.et al.，J.Hypertens.，1994，12，419；Neutel J.M.et al.，Am.Heart，1991，122，1094)。已經(jīng)有數(shù)種化合物的臨床研發(fā)由于它們存在成本高的問題而被終止了。僅僅有一個具有4個手性中心的化合物進入了臨床試驗(Rahuel J.et al.，Chem.Biol.，2000，7，493；Mealy N.E.，Drugs of theFuture，2001，26，1139)。因此，期待并在尋找一種可大規(guī)模制備的代謝穩(wěn)定、可經(jīng)口生物利用并充分可溶的腎素抑制劑。最近，公開了首個顯示出較高體外活性的非肽腎素抑制劑(Oefner C.et al.，Chem.Biol.，1999，6，127；專利申請WO97/09311；Mrki H.P.et al.，Il Farmaco，2001，56，21)。然而，這些化合物的研發(fā)狀態(tài)仍是未知的。
本發(fā)明涉及一種非肽性的和低分子量的血管緊張肽原酶抑制劑的發(fā)現(xiàn)。并描述了長效作用的口腔活性的血管緊張肽原酶抑制劑在血壓調節(jié)之外的指示中是有作用的，在這種血壓調節(jié)指示中，可以將組織的血管緊張肽原酶-凝乳酶系統(tǒng)活化，從而導致病理生理學改變的局部功能，例如腎、心臟和血管改型、動脈粥樣硬化、和可能的再狹窄。
本發(fā)明描述了非肽類腎素抑制劑。
特別地，本發(fā)明涉及通式I的新型化合物，
通式I其中X代表-O-、-S-、-SO-、-SO2-；W是六元的、非苯并稠合的、苯環(huán)或雜芳環(huán)、在間位或對位被V取代；V代表鍵、-(CH2)r-、-A-(CH2)s-、-CH2-A-(CH2)t-、-(CH2)s-A-、-(CH2)2-A-(CH2)u-、-A-(CH2)v-B-、-CH2-CH2-CH2-A-CH2-、-A-CH2-CH2-B-CH2-、-CH2-A-CH2-CH2-B-、-CH2-CH2-CH2-A-CH2-CH2-、-CH2-CH2-CH2-CH2-A-CH2-、-A-CH2-CH2-B-CH2-CH2-、-CH2-A-CH2-CH2-B-CH2-、-CH2-A-CH2-CH2-CH2-B-、-CH2-CH2-A-CH2-CH2-B-、-O-CH2-CH(OCH3)-CH2-O-、-O-CH2-CH(CH3)-CH2-O-、-O-CH2-CH(CF3)-CH2-O-、-O-CH2-C(CH3)2-CH2-O-、-O-CH2-C(CH3)2-O-、-O-C(CH3)2-CH2-O-、-O-CH2-CH(CH3)-O-、-O-CH(CH3)-CH2-O-、-O-CH2-C(CH2CH2)-O-或-O-C(CH2CH2)-CH2-O-；A和B獨立代表-O-、-S-、-SO-、-SO2-；U代表芳基、雜芳基；T代表-CONR1-、-(CH2)pOCO-、-(CH2)pN(R1)CO-、-(CH2)pN(R1)SO2-或-COO-；Q代表低級亞烷基、低級亞烯基；M代表氫、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)基、雜芳基；R1代表氫、低級烷基、低級鏈烯基、低級炔基、環(huán)烷基、芳基、環(huán)烷基-低級烷基；p為整數(shù)1、2、3或4；r為整數(shù)3、4、5或6；s為整數(shù)2、3、4或5；t為整數(shù)1、2、3或4；u為整數(shù)1、2或3；
v為整數(shù)2、3或4；以及光學純的對映體、對映體的混合物例如消旋物、非對映體、非對映體的混合物、非對映的消旋物、非對映消旋物的混合物、和該內(nèi)消旋型、和藥學上可接受的鹽、溶劑配合物和晶體形式。
在通式I的定義中——除非有另外的說明——術語“低級烷基”，單獨或與其它基團結合時，是指含有1～7個、優(yōu)選1～4個可被鹵素任選取代的碳原子飽和的、直鏈或支鏈基團。低級烷基的實例為甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、己基和庚基。優(yōu)選為甲基、乙基和異丙基。
術語“低級烷氧基”是R-O-基團，其中R為低級烷基。低級烷氧基的實例為甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、異丁氧基、仲丁氧基和叔丁氧基。
術語“低級鏈烯基”，單獨或與其它基團結合時，是指包含2～7個、優(yōu)選2～4個可被鹵素任選取代的碳原子以及一個烯鍵的直鏈或支鏈基團。低級烯基的實例為乙烯基、丙烯基或丁烯基。
術語“低級炔基”，單獨或與其它基團結合時，是指包含2～7個、優(yōu)選2～4個可被鹵素任選取代的碳原子以及一個三鍵的直鏈或支鏈基團。低級炔基的實例為乙炔基、丙炔基或丁炔基。
術語“低級亞烷基”，單獨或其它基團結合時，是指包含1～7個、優(yōu)選1～4個可被鹵素任選取代的碳原子直鏈或支鏈二價鏈基團。低級亞烷基的實例為亞乙基、亞丙基或亞丁基。
術語“低級亞烯基”，單獨或其它基團結合時，是指包含2～7個、優(yōu)選2～4個可被鹵素任選取代的碳原子以及一個烯鍵的直鏈或支鏈二價鏈基團。低級亞烯基的實例為亞乙烯基、亞丙烯基和亞丁烯基。
術語“低級亞烷基二氧基”是指在各個末端被一個氧原子取代的低級亞烷基。低級亞烷基二氧基的實例優(yōu)選為亞甲二氧基和亞乙二氧基。
術語“低級亞烷基氧基”是指在一個末端被氧原子取代的低級亞烷基。低級亞烷基氧基的實例優(yōu)選為亞甲氧基、亞乙氧基和亞丙氧基。
術語“鹵素”是指氟、氯、溴或碘，優(yōu)選氟、氯和溴。
術語“環(huán)烷基”單獨或結合使用時，是指含有3～7個碳原子的飽和烴環(huán)系統(tǒng)，例如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基和環(huán)庚基，并且可任選地被下述基團獨立地單取代或多取代低級烷基、低級烯基、低級亞烯基、低級烷氧基、低級亞烷基氧基、低級亞烷基二氧基、羥基、鹵素、-CF3、-NR1R1’、-NR1C(O)R1’、-NR1S(O)2R1’、-C(O)NR1R1’、低級烷基羰基、-COOR1、-SR1、-SOR1、-SO2R1、-SO2NR1R1’，其中R1’代表氫、低級烷基、低級烯基、低級炔基、環(huán)烷基、芳基、環(huán)烷基-低級烷基。優(yōu)選的基團為環(huán)丙基。
術語“芳基”，單獨或結合使用時，是指苯基、萘基或茚滿基，優(yōu)選苯基，并且優(yōu)選被下述基團獨立地單取代或多取代低級烷基、低級烯基、低級炔基、低級亞烯基或低級亞烷基從而與芳環(huán)形成五員或六元環(huán)、低級烷氧基、低級亞烷基二氧基、低級亞烷基氧基、羥基、羥基-低級烷基、鹵素、氰基、-CF3、-OCF3、-NR1R1’、-NR1R1’-低級烷基、-NR1C(O)R1’、-NR1S(O)2R1’、-C(O)NR1R1’、-NO2、低級烷基羰基、-COOR1、-SR1、-SOR1、-SO2R1、-SO2NR1R1’、苯甲氧基，其中R1’定義如上。優(yōu)選的取代基為鹵素、低級烷氧基、低級烷基、-CF3、-OCF3。
術語“芳氧基”是指Ar-O-基團，其中Ar為芳基。芳氧基的實例為苯氧基。
術語“雜環(huán)基”，單獨或結合使用時，是指包含一個或兩個可相同或不同的氮、氧或硫原子的飽和或不飽和(但非芳香性的)五-、六-或七-元環(huán)，并且該環(huán)任選可被低級烷基、羥基、低級烷氧基和鹵素任選取代。氮原子，如果存在，可以被COOR2取代。這種環(huán)的實例為哌啶基、嗎啉基、硫代嗎啉基、哌嗪基、四氫吡喃基、二氫吡喃基、1，4-二氧六環(huán)基、吡咯烷基、四氫呋喃基、二氫吡咯基、咪唑烷基、二氫吡唑基、吡唑烷基、二氫喹啉基、四氫喹啉基、四氫異喹啉基。
術語“雜芳基”，單獨或結合使用時，是指包含1～4個氮原子的六員芳環(huán)；包含1～3個氮原子的苯并六員芳環(huán)；包含1個氧原子、1個氮原子或1個硫原子的五員芳環(huán)；包含1個氧原子、1個氮原子或1個硫原子的苯并五員芳環(huán)；包含1個氧原子和1個氮原子的五員芳環(huán)及其苯并衍生物；包含1個硫原子和1個氮原子或1個氧原子的五員芳環(huán)及其苯并衍生物；包含2個氮原子的五員芳環(huán)及其苯并衍生物；包含3個氮原子的五員芳環(huán)及其苯并衍生物，或四唑環(huán)。這種環(huán)系統(tǒng)的實例為呋喃基、苯硫基、吡咯基、吡啶基、嘧啶基、茚滿基、喹啉基、異喹啉基、咪唑啉基、三嗪基、噻嗪基、噻唑基、異噻唑基、噠嗪基、吡唑基、噁唑基、異噁唑基、香豆素基、苯并苯硫基、喹唑啉基、喹喔啉基。這類環(huán)可被下述取代基所充分取代低級烷基、低級烯基、低級炔基、低級亞烷基、低級亞烯基、低級亞烷基二氧基、低級亞烷氧基、羥基-低級烷基、低級烷氧基、羥基、鹵素、氰基、-CF3、-OCF3、-NR1R1’、-NR1R1’-低級烷基、-N(R1)COR1，-N(R1)SO2R1、-CONR1R1’、-NO2、低級烷基羰基、-COOR1、-SR1、-SOR1、-SO2R1、-SO2NR1R1’、另一個芳基、另一個雜芳基或另一個雜環(huán)基等，其中R1’定義如上。優(yōu)選的雜芳基是吡啶基、嘧啶基(pirimidinyl)、吡嗪基(pirazinyl)。
術語“雜芳芳基”是指Het-O基團，其中Het為雜芳基。
術語“藥學上可接受的鹽”包括與無機酸或有機酸諸如鹽酸或氫溴酸、硫酸、磷酸、檸檬酸、甲酸、乙酸、馬來酸、酒石酸、苯甲酸、甲磺酸、對甲苯磺酸等所形成的對生物活體無毒性的鹽，并且當式I的化合物為酸性的化合物時與無機堿比如堿金屬或堿土金屬例如氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈣等所形成的鹽。
本發(fā)明的化合物還包括在一個或多個位點例如氧(羥基縮合)、硫(巰基縮合)和/或氮被亞硝基化的通式I的亞硝基化化合物?？梢允褂帽绢I域已知的常規(guī)方法制備本發(fā)明的亞硝基化化合物。例如將化合物亞硝基化的方法如美國專利的US5,380,758和US5,703,073、WO 97/27749、WO 98/19672、WO 98/21193、WO99/00361以及Oae等，Org.Prep.Proc.Int.，15(3)165-198(1983)所述，這些文獻所公開的內(nèi)容在此全文引為參考。
通式I的化合物還可以包含兩個或多個不對稱碳原子，并且可以制備成光學純的對映體、對映體的混合物例如消旋物、非對映體、非對映體的混合物、非對映的消旋物、非對映的消旋物的混合物、和內(nèi)消旋形式及其藥學上可接受的鹽。
本發(fā)明包含全部這些形式?？梢酝ㄟ^本身已知的方式，例如柱色譜法、薄層色譜法、HPLC或結晶法對混合物進行分離。
一組優(yōu)選的通式I的化合物為其中X、W、V和U定義如通式I的化合物，其中T為-CONR1-；Q為亞甲基；M為芳基或雜芳基。
另一組更優(yōu)選的通式I的化合物為其中X、W、T、Q和M如上通式I定義，且V是-CH2CH2O-、-CH2CH2CH2O-、-OCH2CH2O-。
另一組更優(yōu)選的通式I化合物為其中V、U、T、Q和M如上通式I定義的化合物，且W代表1，4-二取代的苯基。
另一組更優(yōu)選的通式I化合物為其中X、W、V、U、T、Q和M如上通式I定義的化合物，且U是單-、二-或三取代的苯基或雜芳基、其中取代基為鹵素、低級烷基、低級烷氧基、CF3。
特別優(yōu)選的通式I化合物選自(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3-氧雜-9-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸環(huán)丙基-(3-甲氧基-2-甲基-芐基)酰胺，(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3，3-二氧基-3λ6-硫代-9-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸環(huán)丙基-(2，3-二氯芐基)酰胺，(消旋)-(1R*，3R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3-氧基-3λ4-硫代-9-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸環(huán)丙基-(3-甲氧基-2-甲基芐基)酰胺，(消旋)-(1R*，3R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3-氧基-3λ4-硫代-9-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸環(huán)丙基-(2-甲氧基-3-甲基吡啶-4-基甲基)酰胺，(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3-氧雜-9-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸環(huán)丙基-[2-(3-羥基-丙氧基)-3-甲基吡啶-4-基甲基]酰胺，以及(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3，3-二氧基-3λ6-硫代-9-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸環(huán)丙基-[2-(3-羥基丙氧基)-3-甲基吡啶-4-基甲基]酰胺。
通式I的化合物及其藥學上可接受的鹽例如可以以藥物組合物的形式用作治療藥劑。這些包含至少一種通式I的化合物和常見的載體材料和輔助劑的藥物組合物可特別用于預防和治療與腎素血管緊張素系統(tǒng)(RAS)的調節(jié)障礙相關的病癥，包括心血管疾病和腎病。這種疾病的實例為高血壓、冠狀動脈疾病、心功能不全、腎機能不全、腎或心肌缺血和腎衰竭。它們還可用于預防氣囊或支架血管成形術之后的再狹窄，用于治療勃起功能障礙、血管球性腎炎、腎絞痛和青光眼。此外，它們還可被用于治療和預防糖尿病并發(fā)癥、血管或心臟術或器官移植后并發(fā)癥、環(huán)孢子菌素治療的并發(fā)癥，以及目前已知的其它與RAS相關疾病。
在另一個具體實例中，本發(fā)明涉及一種用于與RAS相關疾病預防和/或治療的方法，RAS相關疾病例如高血壓、充血性心力衰竭、肺性高血壓癥、心功能不全、腎功能不全、腎或心肌缺血、動脈粥樣硬化、腎衰竭、勃起功能障礙、血管球性腎炎、腎絞痛、青光眼、糖尿病性并發(fā)癥、血管或心臟術后并發(fā)癥、再狹窄、器官移植后使用免疫抑制劑治療引起的并發(fā)癥、以及其它目前已知的與RAS相關疾病，該方法包括給人或動物服用一種式I化合物。
在另一個具體實例中，本發(fā)明涉及通式I的化合物用于治療和/或預防與RAS相關疾病的用途，RAS相關疾病例如高血壓、充血性心力衰竭、肺性高血壓癥、心功能不全、腎功能不全、腎或心肌缺血、動脈粥樣硬化、腎衰竭、勃起功能障礙、血管球性腎炎、腎絞痛、青光眼、糖尿病性并發(fā)癥、血管或心臟術后并發(fā)癥、再狹窄、器官移植后使用免疫抑制劑治療引起的并發(fā)癥、以及其它目前已知的與RAS相關疾病。
式I化合物還可被用于與一種或多種其它的藥理學活性物質聯(lián)合使用，例如與其它腎素抑制劑、ACE-抑制劑、血管緊張素II受體拮抗體、內(nèi)皮素受體拮抗體、血管擴張劑、鈣拮抗劑、鉀活化劑、利尿劑、交感神經(jīng)阻滯劑、β-腎上腺素能拮抗劑、以及中性肽鏈內(nèi)切酶抑制劑、d-腎上腺素能拮抗劑聯(lián)合使用，以治療上述疾病。
所有形式的導致一個包含在通式I中的活性組分的前藥也包括在本發(fā)明中。
可以通過下述實施例中所給出的方法或類似方法制造通式I的化合物。
化學部分A型雙環(huán)體系(流程1；Jerchel，D；等；Justus Liebigs Ann.Chem.，1957，607，126；Zirkle，C.L.；et al.；J.Org.Chem.，1961，26，395)可用作起始原料。經(jīng)立體選擇的或消旋的烷基化(Majewski，M；等；J.Org.Chem.，1995，60，5825)可得到B型雙環(huán)化合物。Rc通常可以是甲基、乙基或芐基取代基。然后可將這些化合物轉化為相應的三氟甲磺酸乙烯酯(vinyl triflates)C，然后經(jīng)碳-碳偶合，通常經(jīng)Pd-復合物催化，可生成D型衍生物。Ra任選代表任何如通式I所定義的U-V化學前體。經(jīng)保護基團處理可生成E型雙環(huán)體系，并經(jīng)標準處理比如脫保護以及Mitsunobu偶合，可生成F型雙環(huán)化合物。水解該酯可形成G型化合物，然后例如經(jīng)酰胺偶合生成H型化合物。如果X1是硫原子，其在該過程的幾乎任何時候被氧化為亞砜或砜。然后脫保護可生成終產(chǎn)物。還可使用較早的專利申請中描述的化學方法，例如WO 03/093267或WO 04/002957中的方法。
流程1 式I化合物及其藥學上可接受的酸加成鹽可用作藥物，例如為腸內(nèi)給藥、胃腸外給藥、或局部給藥的藥物制劑形式。這些藥物可以口服(例如為片劑、包衣片、錠劑、硬膠囊或軟膠囊、溶液、乳液或懸浮液的形式)、直腸給藥(例如栓劑形式)、胃腸外給藥(例如為注射液或灌注液形式)、或局部給藥(例如為軟膏、乳劑或油類形式)。
可以以本領域熟練技術人員熟知的方式來制造藥物制劑，即，通過一種已知方法方式，將所述的式I化合物及其藥學上可接受的酸加成鹽，任選地與其它有治療價值的物質混合，與適當?shù)摹⒎嵌拘?、惰性、治療上相容的固體或液體載體材料，以及如果需要，常見的藥品輔助劑，制成一種蓋侖給藥形式。
適當?shù)妮d體材料不僅可以是無機載體材料，也可以是有機載體材料。因此，例如乳糖、玉米淀粉或其衍生物、滑石粉、硬脂酸或其鹽等可被用作例如片劑、包衣片劑、錠劑、和硬膠囊的載體材料。用于軟膠囊的適當?shù)妮d體材料為例如植物油、蠟、脂肪以及半固體和液體多元醇(取決于活性成分的性質，然而，在軟膠囊中并不需要載體)。用于該制造的溶液和糖漿適當?shù)妮d體材料為例如水、多元醇、蔗糖、轉化糖等等。用于注射液的適當?shù)妮d體材料為例如水、醇、多元醇、甘油和植物油。用于栓劑的適當?shù)妮d體材料為例如天然或硬化油類、蠟、脂肪和半-液體或液體多元醇。用于局部給藥的制劑適當?shù)妮d體材料為甘油酯、半-合成和合成物甘油酯、氫化油、液體蠟、液體石蠟、液體脂肪醇、甾醇、聚乙二醇和纖維素衍生物。
可以考慮將常見的穩(wěn)定劑、防腐劑、濕潤劑和乳化劑、稠度改善劑、氣味改善劑、用于改變滲透壓力的鹽、緩沖劑、增溶劑、著色劑和掩蔽劑以及抗氧化劑作為藥品輔助劑。
式I化合物的劑量可以在很大范圍內(nèi)變化并取決于所控制的疾病、患者的年齡和個體情況以及給藥模式，并且在各個具體情形中應適應于個體的要求。對于成年患者而言，可接受的日劑量為約1mg～約1000mg，特別優(yōu)選為約50mg～約500mg。對于兒童而言，應當根據(jù)體重和年齡調整劑量。
藥品制劑適合包含大約1～500mg，優(yōu)選5～200mg的式I化合物。
下述實施例用于更具體地說明本發(fā)明。但是，這些實施例并非是對本發(fā)明的范圍的任何限制。
實施例縮寫ACE 血管緊張素轉化酶Ang 血管緊張素aq. 水溶液Boc 叔-丁氧基羰基BSA 牛血清白蛋白BuLi 正丁基鋰DIPEA 二異丙基乙基胺DMAP4-N，N-二甲基氨基吡啶DMSO甲基亞砜EDCHCl 乙基-N，N-二甲基氨基丙基碳二亞胺鹽酸鹽EIA 酶免疫測定Et 乙基EtOAc 乙酸乙酯FC 快速層析HOBt羥基苯并三唑基LDA 二異丙基胺鋰MCPBA 間-氯過苯甲酸MeOH 甲醇org.有機的PG 保護基Ph 苯基RAS 腎素血管緊張素系統(tǒng)RP18反相柱，填充了C18烴rt 室溫sol.溶液TBDMS 叔-丁基二甲硅烷基Tf 三氟甲磺酰基
THF四氫呋喃環(huán)丙基-(2-甲氧基-3-甲基吡啶-4-基甲基)胺的制備a)2-氯-3，N-二甲基-N-苯基異煙堿于-78℃，在2h內(nèi)向2-氯-N-苯基異煙堿(Epsztajn，J.；Bieniek，A.；Plotka，M.W.；Suwald，K.，Tetrahedron，1989，45，7469，139.8g，601mmol)的THF(1L)溶液中加入BuLi(1.6M的己烷溶液，826mL，1321mmol)，同時保持反應混合物溫度低于-65℃。然后于此溫度攪拌該混合物30min。加入碘甲烷(123mL，1.98mol)并于-78℃攪拌該混合物1h。允許該混合物緩慢升至33℃并于此溫度攪拌30min。逐滴加入水(300mL)，然后加入10％NH4OH水溶液(300mL)，該混合物經(jīng)乙醚(3×300mL)萃取。合并有機相并經(jīng)MgSO4干燥，過濾，減壓除去溶劑。經(jīng)FC純化得到淡黃色無定形物質(124.92g，80％)。
b)2-氯-3-甲基吡啶-4-醛(carbaldehyde)于-78℃，在1h內(nèi)向2-氯-3，N-二甲基-N-苯基異煙堿(124.9g，479mmol)的CH2Cl2(1300mL)溶液中加入DIBAL(1M的THF溶液，719mL，719mmol)，并于此溫度攪拌該混合物2h。再次加入DIBAL(1M的THF溶液，281mL，281mmol)，并于-60℃攪拌反應混合物30min。在30min內(nèi)加入檸檬酸鈉鉀飽和水溶液(500mL)，除去冷浴，并于室溫攪拌該混合物過夜。加入水(100mL)，分離有機相，水相經(jīng)CH2Cl2(2×100mL)萃取。合并有機相并經(jīng)MgSO4干燥，過濾，減壓除去溶劑。經(jīng)FC純化得到淡黃色結晶產(chǎn)物(58.35g，78％)。
c)(2-氯-3-甲基吡啶-4-基甲基)環(huán)丙基胺于室溫下攪拌2-氯-3-甲基吡啶-4-醛(58.35g，375mmol)和環(huán)丙基胺(52.6mL，750mmol)在MeOH(800mL)中的混合物過夜。該混合物冷至0℃并逐份加入NaBH4(18.4g，488mmol)。室溫攪拌該混合物過夜。加入1M NaOH(250mL)水溶液并減壓除去部分溶劑。水相經(jīng)EtOAc(3x)萃取。合并有機相并經(jīng)飽和水溶液洗滌，MgSO4干燥，過濾，減壓除去溶劑。經(jīng)FC純化得到該化合物(54.56g，74％)，為淡黃色液體。
d)環(huán)丙基-(2-甲氧基-3-甲基吡啶-4-基甲基)胺將(2-氯-3-甲基吡啶-4-基甲基)環(huán)丙基胺(10.0g，50.8mmol)和甲醇鈉(13.73g，254mmol)在二氧六環(huán)(40mL)中的混合物加熱回流48h通過硅藻土(Celite)過濾反應混合物，殘留的固體經(jīng)乙醚(2x)洗滌。減壓除去溶劑。經(jīng)FC純化得到標題化合物(8.8g，90％)，為淡黃色液體。
{2-[3-(叔-丁基二甲基硅烷氧基)丙氧基]-3-甲基-吡啶-4-基甲基}環(huán)丙基胺的制備于0℃，向NaH(55％，4.97g，114mmol)的甲苯溶液中逐滴加入3-(叔-丁基二甲基硅烷氧基)丙-1-醇(20.1g，42.6mmol)。該混合物于室溫攪拌1h并加入(2-氯-3-甲基吡啶-4-基甲基)-環(huán)丙基胺(16.0g，81.3mmol)。該混合物加熱回流過夜并允許冷至室溫。減壓除去溶劑。殘留物經(jīng)Et2O洗滌，并經(jīng)水(2x)洗滌。合并含水萃取物并重新使用Et2O(2x)萃取。合并有機萃取物并經(jīng)MgSO4干燥，過濾，減壓除去溶劑。經(jīng)FC純化得到標題化合物(7.56g，26％)，為淡黃色液體。
前體(消旋)-(1R*，5S*)-9-甲基-7-氧基-3-氧雜-9-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬烷-6-羧酸甲酯(B1)氮氣中，將NaH(0.91g，60％于油中，21mmol)和碳酸二甲基酯(2.18g，24mmol)在環(huán)己烷(16mL)中的混合物加熱至60℃。加入9-甲基-7-氧基-3-氧雜-9-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬烷A1(1.55g，10.0mmol)，混合物攪拌回流2h。該混合物允許冷至室溫并加入冰和水。分離各相，有機相經(jīng)水(1x)洗滌。合并含水萃取物并用NH4Cl飽和，使用CHCl3重新萃取。合并有機萃取物并經(jīng)MgSO4干燥，過濾，減壓除去溶劑。經(jīng)FC純化得到標題化合物(1.02g，48％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-9-甲基-7-氧基-3-硫代-9-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬烷-6-羧酸甲酯(B2)由二異丙胺(5.8mL，41.2mmol)、BuLi(1.6M的己烷溶液，26.2mL，42.0mmol)和THF(60mL)制備LDA。該溶液冷卻至-78℃并在3分鐘內(nèi)逐滴加入9-甲基-3-硫代-9-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬烷-7-酮A2(6.42g，37.5mmol)的THF(70mL)溶液。該反應混合物于-78℃攪拌3h，然后加入氰甲酸甲酯(3.87mL，48.9mmol)。該反應混合物于-78℃攪拌1h，加入AgNO3(9.12g，53.7mmol)的H2O/THF(1∶1，70mL)溶液。10min后，加入H2O(35mL)和AcOH(35mL)并允許該反應混合物升至室溫。加入氨(25％的水溶液，120mL)。該反應混合物經(jīng)CH2Cl2(2x)萃取。合并有機萃取物并經(jīng)MgSO4干燥，減壓除去溶劑。經(jīng)FC純化得到標題化合物(7.59g，88％)。
(消旋)-(1R*，5S)-9-甲基-7-三氟甲磺酰氧基-3-氧雜-9-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸甲酯(C1)將二環(huán)壬酮B1(4.67g，21.9mmol)的THF(100mL)溶液冷卻至0℃并加入NaH(約60％在礦油中，1.13g，約26mmol)。20min后，加入Tf2NPh(10.0g，28mmol)。10min后，除去冰浴。攪拌該溶液過夜，經(jīng)EtOAc稀釋并經(jīng)鹽水洗滌(1x)。合并有機萃取物并經(jīng)MgSO4干燥，過濾，減壓除去溶劑。經(jīng)FC純化得到油狀標題化合物(6.11g，81％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-9-甲基-7-三氟甲磺酰氧基-3-硫代-9-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸甲酯(C2)將二環(huán)壬酮B2(550mg，2.40mmol)的THF(10mL)溶液冷卻至0℃并加入NaN(約60％在礦油中，144mg，約3.60mmol)。觀察到氣體冒出。20min后，加入Tf2NPh(1.11g，3.12mmol)。10min后，除去冰浴。攪拌該溶液過夜，經(jīng)EtOAc稀釋并經(jīng)鹽水洗滌(1x)。合并有機萃取物并經(jīng)MgSO4于燥，過濾，減壓除去溶劑。經(jīng)FC純化得到油狀標題化合物(667，77％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(叔-丁基二甲基硅烷氧基)丙基]苯基}-9-甲基-3-氧雜-9-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸甲酯(D1)將[3-(4-溴苯基)丙氧基]-叔-丁基二甲基硅烷(Kiesewetter D.O.，Tetrahedron Asymmetry，1993，4，2183，9.88g，30.0mmol)的THF(200mL)溶液冷卻至-78℃。加入BuLi(1.6M的己烷溶液，18.7mL，30.0mmol)。30min后，加入ZnCl2(1M的THF溶液，30mL，30mmol，根據(jù)于150℃干燥過夜的ZnCl2和THF制備)。允許該混合物升至室溫。加入三氟甲酸乙烯酯(Vinyl triflate)C1(5.87g，17.0mmol)的THF(30mL)溶液然后加入Pd(PPh3)4(390mg，0.34mmol)。該混合物加熱至40℃維持30min，加入1M HCl(1mL)水溶液。該混合物經(jīng)EtOAc稀釋并經(jīng)1M NaOH洗滌(1x)。合并有機萃取物并經(jīng)MgSO4干燥，過濾，減壓除去溶劑。殘留物經(jīng)FC純化得到標題化合物(5.87g，77％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(叔-丁基二甲基硅烷氧基)丙基]苯基}-9-甲基-3-硫代-9-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸甲酯(D2)將[3-(4-溴苯基)丙氧基]-叔-丁基二甲基硅烷(Kiesewetter D.O.，Tetrahedron Asymmetry，1993，4，2183，1.52g，4.61mmol)的THF(20mL)溶液冷卻至-78℃。加入BuLi(1.6M的己烷溶液，2.88mL，4.61mmol)。30min后，加入ZnCl2(1M的THF溶液，5.00mL，5.00mmol，根據(jù)于150℃干燥過夜的ZnCl2和THF制備)。允許該混合物升至室溫。加入三氟甲酸乙烯酯C2(667mg，1.85mmol)的THF(20mL)溶液然后加入Pd(PPh3)4(107mg，0.093mmol)。該混合物加熱至50℃維持30min，加入1M HCl(1mL)水溶液。該混合物經(jīng)EtOAc稀釋并經(jīng)1M NaOH洗滌(1x)。合并有機萃取物并經(jīng)MgSO4干燥，過濾，減壓除去溶劑。殘留物經(jīng)FC純化得到標題化合物(818mg，96％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-7-[4-(3-羥丙基)苯基]-3-氧雜-9-氮雜雙環(huán)[3.3.1]-壬-6-烯-6，9-二羧酸9-叔-丁酯6-甲酯(E1)將氯甲酸1-氯乙酯(5.90g，41mmol)加至二環(huán)壬烯D1(5.72g，12.8mmol)的1，2-二氯乙烷(75mL)溶液中。該溶液加熱至回流。4h后，允許反應混合物冷至室溫，并減壓除去溶劑。殘留物經(jīng)MeOH(50mL)稀釋，混合物于室溫攪拌20min，然后于80℃攪拌45min。減壓除去溶劑，殘留物經(jīng)CHCl3稀釋。該混合物經(jīng)1MNaOH(1x)水溶液和鹽水(1x)洗滌。合并含水萃取物并重新使用CHCl3(2x)萃取。合并有機萃取物并經(jīng)MgSO4干燥，過濾，減壓除去溶劑。殘留物溶解于CH2Cl2(60mL)中，加入DIPEA(3.18g，24.6mmol)，并將該混合物冷卻至0℃。加入Boc2O(3.14g，14.4mmol)并于0℃攪拌該混合物1h，然后于室溫攪拌2h。該混合物經(jīng)1M HCl(1x)水溶液和飽和NaHCO3(1x)水溶液洗滌。合并有機萃取物并經(jīng)MgSO4干燥，過濾，減壓除去溶劑。殘留物經(jīng)FC純化得到標題化合物(4.17g，78％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-7-[4-(3-羥丙基)苯基]-3-硫代-9-氮雜雙環(huán)[3.3.1]-壬-6-烯-6，9-二羧酸9-叔-丁酯6-甲酯(E2)
將氯甲酸1-氯乙酯(1.93mL，17.7mmol)加至二環(huán)壬烯D2(818mg，1.77mmol)和NaHCO3(1.49g，17.7mmol)的1，2-二氯乙烷(20mL)溶液中。該溶液加熱至回流。3h后，允許反應混合物冷至室溫，過濾，并減壓徹底除去溶劑。加入甲醇(20mL)并于60℃攪拌該混合物20min。允許該混合物冷至室溫并減壓除去溶劑。殘留物溶解于CH2Cl2(20mL)中，加入DIPEA(1.82mL，10.6mmo])并將該混合物冷至0℃。加入Boc2O(1.16g，5.31mmol)并于0℃攪拌該混合物30min，然后于室溫攪拌30min。該混合物經(jīng)1M HCl(1x)水溶液和飽和NaHCO3(1x)水溶液洗滌。合并有機萃取物并經(jīng)MgSO4干燥，過濾，減壓除去溶劑。殘留物經(jīng)FC純化得到標題化合物(586mg，76％)。
(消旋)-(1R，5S*)-7-[4-(2-羥乙基)苯基]-3，3-二氧基-3λ6-硫代-9-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬-6-烯-6，9-二羧酸9-叔-丁酯6-甲酯(E3)將化合物E2(586mg，1.35mmol)的CH2Cl2(15mL)溶液冷卻至0℃并再次加入3-氯過苯甲酸(70％，359mg，2.97mmol)。再次攪拌該混合物2h并使用較多的CH2Cl2稀釋。該混合物經(jīng)飽和NaHCO3(1x)水溶液洗滌。合并有機萃取物并經(jīng)MgSO4干燥，過濾，減壓除去溶劑。殘留物經(jīng)FC純化得到標題化合物(578mg，92％)。
(消旋)-(1R*，3R*，5S*)-7-[4-(2-羥乙基)苯基]-3-氧基-3λ4-硫代-9-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬-6-烯-6，9-二羧酸9-叔-丁酯6-甲酯(E4)將化合物E2(0.82g，1.89mmol)的CH2Cl2(21mL)溶液冷卻至0℃并加入MCPBA(70％，233mg，0.945mmol)。該混合物于0℃攪拌15min。再次加入MCPBA(197mg，0.880mmol)。該混合物于室溫攪拌15并使用較多的CH2Cl2稀釋。該混合物經(jīng)飽和NaHCO3(1x)水溶液洗滌。合并有機萃取物并經(jīng)MgSO4干燥，過濾，減壓除去溶劑。殘留物經(jīng)FC純化得到標題化合物(1.51g，，89％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3-氧雜-9-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬-6-烯-6，9-二羧酸9-叔-丁酯6-甲酯(F1)將三丁基膦(7.05g，30.0mmol)加至二環(huán)壬烯E2(4.04g，9.7mmol)、2-氯-3，6-二氟苯酚(2.89g，17.5mmol)和偶氮二羧基二哌啶(azodicarboxylicdipiperidide)(7.05g，30.0mmol)的甲苯(80mL)溶液中。該混合物加熱回流2h并允許冷卻至室溫。減壓除去溶劑。經(jīng)FC純化得到標題化合物(4.60g，84％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[2-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)乙基]苯基}-3，3-二氧基-3λ6-硫代-9-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬-6-烯-6，9-二羧酸9-叔-丁酯6-甲酯(F2)將三丁基膦(85％，1.08mL，3.72mmol)加至二環(huán)壬烯E3(578mg，1.24mmol)、2-氯-3，6-二氟苯酚(407mg，2.48mmol)和氮雜二羧基二哌啶(626mg，2.48mmol)的甲苯(10mL)溶液中。該混合物加熱回流2h并允許冷卻至室溫。減壓除去溶劑。經(jīng)FC純化得到標題化合物(668mg，88％)。
(消旋)-(1R*，3R*，5S*)-7-{4-[2-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)乙基]苯基}-3，3-二氧基-3λ6-硫代-9-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬-6-烯-6，9-二羧酸9-叔-丁酯6-甲酯(F3)將三丁基膦(85％，3.30mL，11.3mmol)加至二環(huán)壬烯E4(1.70mg，3.78mmol)、2-氯-3，6-二氟苯酚(930mg，5.67mmo)和氮雜二羧基二哌啶(1.90g，7.26mmol)的甲苯(45mL)溶液中。該混合物加熱回流1h并允許冷卻至室溫。減壓除去溶劑。經(jīng)FC純化得到標題化合物(1.94g，86％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6二氟苯氧基)丙基]苯基}-3-氧雜-9-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬-6-烯-6，9-二羧酸9-叔-丁酯(G1)將雙環(huán)壬烯F1(4.60g，25mmol)溶解于中EtOH(200mL)。加入1M NaOH(200mL)水溶液并將該混合物加熱至80℃。于80℃攪拌該溶液5h，然后允許冷卻至室溫。使用1M HCl水溶液酸化至pH＝1-2后，該混合物經(jīng)EtOAc(3x)萃取。合并有機萃取物并經(jīng)MgSO4干燥，過濾，減壓除去溶劑。殘留物經(jīng)FC純化得到標題化合物(4.50g，定量的)。
(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[2-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)乙基]苯基}-3，3-二氧基-3λ6-硫代-9-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬-6-烯-6，9-二羧酸9-叔-叔丁酯(G2)將雙環(huán)壬烯F2(668mg，1.09mmol)溶解于中EtOH(7mL)。加入1M NaOH(3mL)水溶液并將該混合物加熱至80℃。于80℃攪拌該溶液5h，然后允許冷卻至室溫。使用1M HCl水溶液酸化至pH＝1-2后，該混合物經(jīng)EtOAc(3x)萃取。合并有機萃取物并經(jīng)MgSO4干燥，過濾，減壓除去溶劑。殘留物無需進一步純化而使用(624mg，96％)。
(消旋)-(1R*，3R*，5S*)-7-{4-[2-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)乙基]苯基}-3-氧基-3λ4-硫代-9-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬-6-烯-9-羧酸9-叔-丁酯(G3)將雙環(huán)壬烯F3(1.94g，3.25mmol)溶解于中EtOH(24mL)。加入1M NaOH(10mL)水溶液并將該混合物加熱至80℃。于80℃攪拌該溶液1h，然后允許冷卻至室溫。使用1M HCl水溶液酸化至pH＝1-2后，該混合物經(jīng)EtOAc(3x)萃取。合并有機萃取物并經(jīng)MgSO4干燥，過濾，減壓除去溶劑。殘留物無需進一步純化而使用(1.86g，98％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-6-[環(huán)丙基-(3-甲氧基-2-甲基芐基)氨基甲酰基]-3-氧雜-9-氮雜雙環(huán)-[3.3.1]壬-6-烯-9-羧酸叔-丁酯(H1)室溫攪拌雙環(huán)壬烯G1(360mg，2.0mmol)、環(huán)丙基-(3-甲氧基-2-甲基芐基)胺(根據(jù)3-甲氧基-2-甲基苯甲醛，Comins，D.L.；Brown，J.D.，J.Org.Chem.，1989，54，3730，和環(huán)丙基胺還原胺化制備；1.05g，6.00mmol)、DIPEA(1.37mL，8.00mmol)、DMAP(61mg，0.50mmol)、HOBt(149mg，1.10mmol)和EDC·HCl(1.19g，6.00mmol)在CH2Cl2(10mL)中的混合物3天。該混合物經(jīng)較多的CH2Cl2稀釋并經(jīng)1M HCl(3x)水溶液和飽和NaHCO3(1x)水溶液洗滌。合并有機萃取物并經(jīng)MgSO4干燥，過濾，減壓除去溶劑。殘留物經(jīng)FC純化得到標題化合物(260mg，55％)。
(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[2-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)乙基]苯基}-6-[環(huán)丙基-(2，3-二氯芐基)氨基甲?；鵠-3，3-二氧基-3λ6-硫代-9-氮雜雙環(huán)-[3.3.1]壬-6-烯-9-羧酸9-叔-丁酯6-甲酯(H2)室溫攪拌雙環(huán)壬烯G2(624mg，1.04mmol)、環(huán)丙基-(2，3-二氯-芐基)胺(676mg，3.13mmol)、DIPEA(0.712mL，4.16mmol)、DMAP(32mg，0.25mmol)、HOBt(169mg，1.25mmol)和EDC·HCl(498mg，2.60mmol)在CH2Cl2(10mL)中的混合物過夜。該混合物經(jīng)較多的CH2Cl2稀釋并經(jīng)1M HCl(3x)水溶液和飽和NaHCO3(1x)水溶液洗滌。合并有機萃取物并經(jīng)MgSO4干燥，過濾，減壓除去溶劑。殘留物經(jīng)FC純化得到標題化合物。
(消旋)-(1R*，3R*，5S*)-7-{4-[2-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)乙基]苯基}-6-[環(huán)丙基-(3-甲氧基-2-甲基芐基)氨基甲酰基]-3-氧基-3λ4-硫代-9-氮雜雙環(huán)-[3.3.1]壬-6-烯-9-羧酸叔-丁酯(H3)室溫攪拌雙環(huán)壬烯G3(150mg，0.257mmol)，環(huán)丙基-(3-甲氧基-2-甲基芐基)胺(根據(jù)3-甲氧基-2-甲基苯甲醛，Comins，D.L.；Brown，J.D.，J.Org.Chem.，1989，54，3730，和環(huán)丙基胺還原胺化制備；148mg，0.771mmol)、DIPEA(0.180mL，1.02mmol)、DMAP(8mg，0.06mmol)、HOBt(52mg，0.38mmol)和EDC·HCl(123mg，0.642mmol)中CH2Cl2(10mL)的混合物2天。該混合物經(jīng)較多的CH2Cl2稀釋并經(jīng)1M HCl(3x)水溶液和飽和NaHCO3(1x)水溶液洗滌。合并有機萃取物并經(jīng)MgSO4干燥，過濾，減壓除去溶劑。殘留物經(jīng)FC純化得到標題化合物(183mg，94％)。
(消旋)-(1R*，3R*，5S*)-7-{4-[2-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)乙基]苯基}-6-[環(huán)丙基-(3-甲氧基-2-甲基吡啶-4-基甲基)氨基甲酰基]-3-氧基-3λ4-硫代-9-氮雜雙環(huán)-[3.3.1]壬-6-烯-9-羧酸叔-丁酯(H4)室溫攪拌雙環(huán)壬烯G3(150mg，0.257mmol)、環(huán)丙基-(3-甲氧基-2-甲基吡啶-4-基甲基)胺(149mg，0.773mmol)、DIPEA(0.180mL，1.02mmol)、DMAP(8mg，0.06mmol)、HOBt(52mg，0.38mmol)和EDC·HCl(123mg，0.642mmol)在CH2Cl2(10mL)中的混合物2天。該混合物經(jīng)較多的CH2Cl2稀釋并經(jīng)1M HCl(3x)水溶液和飽和NaHCO3(1x)水溶液洗滌。合并有機萃取物并經(jīng)MgSO4干燥，過濾，減壓除去溶劑。殘留物經(jīng)FC純化得到標題化合物(180mg，93％)。
(消旋)-(1R*，3R*，5S*)-6-({2-[3-(叔-丁基二甲基硅烷氧基)丙氧基]-3-甲基吡啶-4-基甲基}環(huán)丙基氨基甲?；?-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3-氧雜-9-氮雜雙環(huán)-[3.3.1]壬-6-烯-9-羧酸叔-丁酯(H5)
室溫攪拌雙環(huán)壬烯G1(2.05g，3.72mmol)、{2-[3-(叔-丁基二甲基硅烷氧基)內(nèi)氧基]-3-甲基-吡啶-4-基甲基}環(huán)丙基-胺(1.96，5.59mmol)、DIPEA(2.55mL，14.9mmo])、DMAP(114mg，0.93mmol)、HOBt(757mg，5.59mmol)和EDC·HCl(2.51g，13mmol)在CH2Cl2(50mL)中的混合物過夜。該混合物經(jīng)較多的CH2Cl2稀釋并經(jīng)1M HCl(3x)水溶液和飽和NaHCO3(1x)水溶液洗滌。合并有機萃取物并經(jīng)MgSO4干燥，過濾，減壓除去溶劑。殘留物經(jīng)FC純化得到標題化合物(3.00g，91％)。
(消旋)-(1R*，3R*，5S*)-6-({2-[3-(叔-丁基二甲基硅烷氧基)丙氧基]-3-甲基吡啶-4-基甲基}環(huán)丙基氨基甲?；?-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3，3-二氧基-3λ6-硫代-9-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬-6-烯-9-羧酸叔-丁酯(H6)室溫攪拌雙環(huán)壬烯G2(2.23g，3.72mmol)、2-[3-(叔-丁基二甲基硅烷氧基)丙氧基]-3-甲基-吡啶-4-基甲基}環(huán)丙基-胺(1.96，5.59mmol)、DIPEA(2.55mL，14.9mmol)、DMAP(114mg，0.93mmol)、HOBt(757mg，5.59mmol)和EDC·HCl(2.51g，13mmol)在CH2Cl2(50mL)中的混合物過夜。該混合物經(jīng)較多的CH2Cl2稀釋并經(jīng)1M HCl(3x)水溶液和飽和NaHCO3(1x)水溶液洗滌。合并有機萃取物并經(jīng)MgSO4干燥，過濾，減壓除去溶劑。殘留物經(jīng)FC純化得到標題化合物(2.16g，62％)。
實施例實施例1(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3-氧雜-9-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸環(huán)丙基-(3-甲氧基-2-甲基芐基)酰胺雙環(huán)壬烯H1經(jīng)CH2Cl2(10mL)稀釋并將該混合物冷卻至0℃。加入HCl(4M的二氧六環(huán)溶液，10mL)并于0℃攪拌該混合物1h，然后室溫攪拌1h。減壓除去溶劑并在高度真空下干燥殘留物。該殘留物經(jīng)CH2Cl2稀釋并經(jīng)1M NaOH水溶液洗滌直至有機相pH＞9。有機萃取物經(jīng)MgSO4干燥，過濾，減壓除去溶劑。殘留物經(jīng)FC純化得到標題化合物。
實施例2(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3，3-二氧基-3λ6-硫代-9-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸環(huán)丙基-(2，3-二氯芐基)酰胺雙環(huán)壬烯H2經(jīng)CH2Cl2(10mL)稀釋并將該混合物冷卻至0℃。加入HCl(4M的二氧六環(huán)溶液，10mL)并于0℃攪拌該混合物1h，然后室溫攪拌1h。減壓除去溶劑并在高度真空下干燥殘留物。該殘留物經(jīng)CH2Cl2稀釋并經(jīng)1M NaOH水溶液洗滌直至有機相pH＞9。有機萃取物經(jīng)MgSO4干燥，過濾，減壓除去溶劑。殘留物經(jīng)FC純化得到標題化合物。
實施例3(消旋)-(1R*，3R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3-氧基-3λ4-硫代-9-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸環(huán)丙基-(3-甲氧基-2-甲基芐基)酰胺雙環(huán)壬烯H3經(jīng)CH2Cl2(10mL)稀釋并將該混合物冷卻至0℃。加入HCl(4M的二氧六環(huán)溶液，10mL)并于0℃攪拌該混合物1h，然后室溫攪拌1h。減壓除去溶劑并在高度真空下干燥殘留物。該殘留物經(jīng)CH2Cl2稀釋并經(jīng)1M NaOH水溶液洗滌直至有機相pH＞9。有機萃取物經(jīng)MgSO4干燥，過濾，減壓除去溶劑。殘留物經(jīng)FC純化得到標題化合物。
實施例4(消旋)-(1R*，3R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3-氧基-3λ4-硫代-9-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸環(huán)丙基-(2-甲氧基-3-甲基吡啶-4-基甲基)酰胺雙環(huán)壬烯H4經(jīng)CH2Cl2(10mL)稀釋并將該混合物冷卻至0℃。加入HCl(4M的二氧六環(huán)溶液，10mL)并于0℃攪拌該混合物1h，然后室溫攪拌1h。減壓除去溶劑并在高度真空下干燥殘留物。該殘留物經(jīng)CH2Cl2稀釋并經(jīng)1M NaOH水溶液洗滌直至有機相pH＞9。有機萃取物經(jīng)MgSO4干燥，過濾，減壓除去溶劑。殘留物經(jīng)FC純化得到標題化合物。
實施例5(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3-氧雜-9-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸環(huán)丙基-[2-(3-羥丙氧基)-3-甲基吡啶-4-基甲基]酰胺雙環(huán)壬烯H5(2.16g，2.32mmol)經(jīng)CH2Cl2(10mL)稀釋并將該混合物冷卻至0℃。加入HCl(4M的二氧六環(huán)溶液，10mL)并于0℃攪拌該混合物1h，然后室溫攪拌1h。減壓除去溶劑并在高度真空下干燥殘留物。該殘留物經(jīng)CH2Cl2稀釋并經(jīng)1M NaOH水溶液洗滌直至有機相pH＞9。有機萃取物經(jīng)MgSO4干燥，過濾，減壓除去溶劑。殘留物經(jīng)FC純化得到標題化合物。
實施例6(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3，3-二氧基-36-硫代-9-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸環(huán)丙基-[2-(3-羥丙氧基)-3-甲基吡啶-4-基甲基]酰胺雙環(huán)壬烯H6(2.16g，2.22mmol)經(jīng)CH2Cl2(10mL)稀釋并將該混合物冷卻至0℃。加入HCl(4M的二氧六環(huán)溶液，10mL)并于0℃攪拌該混合物1h，然后室溫攪拌1h。減壓除去溶劑并在高度真空下干燥殘留物。該殘留物經(jīng)CH2Cl2稀釋并經(jīng)1M NaOH水溶液洗滌直至有機相pH＞9。有機萃取物經(jīng)MgSO4干燥，過濾，減壓除去溶劑。殘留物經(jīng)FC純化得到標題化合物。
本發(fā)明化合物對于人重組腎素的抑制在384-孔聚丙烯板(Nunc)中進行體外酶促測定。測定緩沖液由包含1mM EDTA和0.1％BSA的10mM PBS(Gibco BRL)組成。孵化物由50μL每孔的酶混合物和2.5μL腎素抑制劑的DMSO溶液組成。該酶混合物于4℃預混合并由下面成分組成·人重組腎素(0.16ng/mL)·合成的人血管緊張素(1-14)(0.5μM)·羥基喹啉硫酸鹽(1mM)然后于37℃孵化該混合物3h。
為了測定酶促活性及其抑制作用，在384-孔板(Nunc)中通過酶免疫測定(EIA)檢測累積的Ang I。將5μL孵化物或標準品轉移到免疫板中，該板上預先涂布有Ang I和牛血清清蛋白的共價配合物(Ang I-BSA)。加入包含0.01％ Tween 20的75μL Ang I-抗體的上述試驗緩沖液，并且在4℃下培育初步孵化一整夜。使用包含0.01％ Tween 20的PBS洗滌免疫板3次，然后使用抗兔-過氧化物酶偶聯(lián)抗體(WA 934，Amersham)在室溫下孵化2小時。水洗3次后，加入過氧化物酶底物ABTS(2.2’-連氮基-二-(3-乙基-苯并噻唑啉磺酸酯)，并在室溫下孵化該板60分鐘。使用pH為4.3的0.1M檸檬酸終止反應后，在微板讀數(shù)器中于405nm處評價該板。計算各濃度點的抑制百分比并且測定在酶活性被抑制50％(IC50)時的腎素抑制濃度。所測定的所有化合物的IC50-值都低于100nM。所選擇的混合物顯示出非常良好的生物利用度并且比現(xiàn)有技術的化合物在代謝上更穩(wěn)定。
權利要求
1.通式I化合物 通式I其中X代表-O-；-S-；-SO-；-SO2-；W是六元的、非苯并稠合的、苯環(huán)或雜芳環(huán)、在間位或對位被V取代；V代表鍵、-(CH2)r-、-A-(CH2)s-、-CH2-A-(CH2)t-、-(CH2)s-A-、-(CH2)2-A-(CH2)u-、-A-(CH2)v-B-、-CH2-CH2-CH2-A-CH2-、-A-CH2-CH2-B-CH2-、-CH2-A-CH2-CH2-B-、-CH2-CH2-CH2-A-CH2-CH2-、-CH2-CH2-CH2-CH2-A-CH2-、-A-CH2-CH2-B-CH2-CH2-、-CH2-A-CH2-CH2-B-CH2-、-CH2-A-CH2-CH2-CH2-B-、-CH2-CH2-A-CH2-CH2-B-、-O-CH2-CH(OCH3)-CH2-O-、-O-CH2-CH(CH3)-CH2-O-、-O-CH2-CH(CF3)-CH2-O-、-O-CH2-C(CH3)2-CH2-O-、-O-CH2-C(CH3)2-O-、-O-C(CH3)2-CH2-O-、-O-CH2-CH(CH3)-O-、-O-CH(CH3)-CH2-O-、-O-CH2-C(CH2CH2)-O-、或-O-C(CH2CH2)-CH2-O-；A和B獨立代表-O-、-S-、-SO-、-SO2-；U代表芳基、雜芳基；T代表-CONR1-、-(CH2)pOCO-、-(CH2)pN(R1)CO-、-(CH2)pN(R1)SO2-或-COO-；Q代表低級亞烷基、低級亞烯基；M代表氫、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)基、雜芳基；R1代表氫、低級烷基、低級鏈烯基、低級炔基、環(huán)烷基、芳基、環(huán)烷基-低級烷基；p為整數(shù)1、2、3或4；r為整數(shù)3、4、5或6；s為整數(shù)2、3、4或5；t為整數(shù)1、2、3或4；u為整數(shù)1、2或3；v為整數(shù)2、3或4；以及光學純的對映體、對映體的混合物例如消旋物、非對映體、非對映體的混合物、非對映的消旋物、非對映消旋物的混合物、和該內(nèi)消旋型、和藥學上可接受的鹽、溶劑配合物和晶體形式。
2.根據(jù)權利要求1的化合物，其中X、W、V和U如通式I定義，且T代表-CONR1-；Q代表亞甲基；M代表芳基、雜芳基；以及光學純的對映體、對映體的混合物例如消旋物、非對映體、非對映體的混合物、非對映的消旋物、非對映消旋物的混合物、和該內(nèi)消旋型、和藥學上可接受的鹽、溶劑配合物和晶體形式。
3.根據(jù)權利要求1的化合物，其中X、W、U、T、Q和M如通式I定義，且V代表-CH2CH2O-、-CH2CH2CH2O-、-OCH2CH2O-；以及光學純的對映體、對映體的混合物例如消旋物、非對映體、非對映體的混合物、非對映的消旋物、非對映消旋物的混合物、和該內(nèi)消旋型、和藥學上可接受的鹽、溶劑配合物和晶體形式。
4.根據(jù)權利要求1的化合物，其中X、V、U、T、Q和M如通式I定義，且W代表1，4-二取代的苯基；以及光學純的對映體、對映體的混合物例如消旋物、非對映體、非對映體的混合物、非對映的消旋物、非對映消旋物的混合物、和該內(nèi)消旋型、和藥學上可接受的鹽、溶劑配合物和晶體形式。
5.根據(jù)權利要求1的化合物，其中X、W、V、Q、T和M如通式I定義，且U是單-、二-和三取代的苯基或雜芳基，其中取代基為鹵素、低級烷基、低級烷氧基、CF3以及光學純的對映體、對映體的混合物例如消旋物、非對映體、非對映體的混合物、非對映的消旋物、非對映消旋物的混合物、和該內(nèi)消旋型、和藥學上可接受的鹽、溶劑配合物和晶體形式。
6.根據(jù)權利要求1至5任一項的化合物，選自下述化合物(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3-氧雜-9-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸環(huán)丙基-(3-甲氧基-2-甲基-芐基)酰胺，(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3，3-二氧基-3λ6-硫代-9-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸環(huán)丙基-(2，3-二氯芐基)酰胺，(消旋)-(1R*，3R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3-氧基-3λ4-硫代-9-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸環(huán)丙基-(3-甲氧基-2-甲基芐基)酰胺，(消旋)-(1R* ，3R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3-氧基-3λ4-硫代-9-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸環(huán)丙基-(2-甲氧基-3-甲基吡啶-4-基甲基)酰胺，(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3-氧雜-9-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸環(huán)丙基-[2-(3-羥基-丙氧基)-3-甲基吡啶-4-基甲基]酰胺，和(消旋)-(1R*，5S*)-7-{4-[3-(2-氯-3，6-二氟苯氧基)丙基]苯基}-3，3-二氧基-3λ6-硫代-9-氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬-6-烯-6-羧酸環(huán)丙基-[2-(3-羥基丙氧基)-3-甲基吡啶-4-基甲基]酰胺。
7.一種藥物組合物，其包含至少一種如權利要求1至6任一項所述化合物以及常見的載體材料和輔助劑，并用于治療或預防與腎素-血管緊張素系統(tǒng)(RAS)的調節(jié)障礙相關的紊亂，所述的紊亂包括心血管疾病和腎病、高血壓、充血性心力衰竭、肺性高血壓癥、心功能不全、腎功能不全、腎或心肌缺血、動脈粥樣硬化、腎衰竭、勃起功能障礙、血管球性腎炎、腎絞痛、青光眼、糖尿病性并發(fā)癥、血管或心臟術后并發(fā)癥、再狹窄、器官移植后使用免疫抑制劑治療引起的并發(fā)癥、以及其它目前已知的與RAS相關疾病。
8.一種用于預防或治療與RAS相關疾病的方法，其中所述疾病包括高血壓、充血性心力衰竭、肺性高血壓癥、心功能不全、腎功能不全、腎或心肌缺血、動脈粥樣硬化、腎衰竭、勃起功能障礙、血管球性腎炎、腎絞痛、青光眼、糖尿病性并發(fā)癥、血管或心臟術后并發(fā)癥、再狹窄、器官移植后使用免疫抑制劑治療引起的并發(fā)癥、以及其它目前已知的與RAS相關疾病，該方法包括給人或動物服用一種權利要求1至6任一項所述的化合物。
9.權利要求1至6任一項所述的化合物用于治療或預防與RAS相關疾病的用途，所述疾病包括高血壓、充血性心力衰竭、肺性高血壓癥、心功能不全、腎功能不全、腎或心肌缺血、動脈粥樣硬化、腎衰竭、勃起功能障礙、血管球性腎炎、腎絞痛、青光眼、糖尿病性并發(fā)癥、血管或心臟術后并發(fā)癥、再狹窄、器官移植后使用免疫抑制劑治療引起的并發(fā)癥、以及其它目前已知的與RAS相關疾病。
10.如權利要求1至6任一項所述化合物與一種或多種其它藥理學活性物質相聯(lián)合以治療如權利要求7至9所述疾病的用途，所述藥理學活性物質包括ACE-抑制劑、血管緊張素II受體拮抗體、內(nèi)皮素受體拮抗體、血管擴張劑、鈣拮抗劑、鉀活化劑、利尿劑、交感神經(jīng)阻滯劑、β-腎上腺素能拮抗劑、α-腎上腺素能拮抗劑、以及中性肽鏈內(nèi)切酶抑制劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及新型9－氮雜雙環(huán)[3.3.1]壬烯衍生物及其相關化合物以及它們作為活性成分在制備藥物組合物中的用途。本發(fā)明還涉及這些化合物制備方法、包含一種或多種所述化合物的藥物組合物，并特別涉及它們作為腎素抑制劑的用途。
文檔編號C07D513/08GK1780663SQ200480011637
公開日2006年5月31日 申請日期2004年4月26日 優(yōu)先權日2003年4月30日
發(fā)明者奧利維爾·貝曾康, 丹尼爾·比爾, 瓦爾特·菲施利, 尤博斯·雷門, 西爾維婭·理查德-比洛斯泰恩, 托馬斯·韋勒, 蒂埃里·西費朗 申請人:埃科特萊茵藥品有限公司