專利名稱：有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白抑制劑的前體藥物的制作方法
背景技術(shù)：
本發(fā)明涉及二氫吡咯衍生物的磷酸酯，所述二氫吡咯衍生物的磷酸酯是驅(qū)動(dòng)蛋白抑制劑，特別是有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白KSP抑制劑，并且可用于治療細(xì)胞增殖性疾病例如癌癥、增生、再狹窄、心臟肥大、免疫病癥和炎癥。
用于治療癌癥的治療劑有紫杉烷類和長(zhǎng)春花生物堿。紫杉烷類和長(zhǎng)春花生物堿類作用于在多種細(xì)胞結(jié)構(gòu)中存在的微管。微管是有絲分裂紡錘體的主要結(jié)構(gòu)單元。有絲分裂紡錘體負(fù)責(zé)讓基因組復(fù)制拷貝分配到細(xì)胞分裂所產(chǎn)生的兩個(gè)子細(xì)胞中的每一個(gè)中。據(jù)推測(cè)，藥物破壞有絲分裂紡錘體會(huì)導(dǎo)致癌細(xì)胞被抑制，并且誘導(dǎo)癌細(xì)胞死亡。然而，微管形成其他類型細(xì)胞結(jié)構(gòu)，包括神經(jīng)處理過(guò)程中的細(xì)胞內(nèi)傳遞路徑。由于這些這些活性劑并沒有特異地針對(duì)目標(biāo)有絲分裂紡錘體，它們限制期應(yīng)用的副作用。
用于治療癌癥的活性劑特異性的改善得到了很大關(guān)注，這是因?yàn)槿绻梢越档陀檬┯眠@些活性劑有關(guān)的副作用，則可以實(shí)現(xiàn)治療效益。傳統(tǒng)上，癌癥治療方面的顯著改善與與鑒定出通過(guò)新的作用機(jī)制起作用的治療劑有關(guān)。這類治療劑的實(shí)例包括紫杉烷類，以及拓?fù)洚悩?gòu)酶I抑制劑。從這兩方面來(lái)看，有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白是新抗癌劑的有吸引力的靶目標(biāo)。
有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白是有絲分裂紡錘體裝配和功能所必需的酶，但通常不是其他微管結(jié)構(gòu)的部分，例如在神經(jīng)處理中。有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白在有絲分裂的所有時(shí)期都起必不可少的作用。這些酶是“分子發(fā)動(dòng)機(jī)”，其通過(guò)將ATP水解成機(jī)械力來(lái)轉(zhuǎn)化能量，所生成的機(jī)械力驅(qū)動(dòng)細(xì)胞沿著微管運(yùn)動(dòng)。足以進(jìn)行這項(xiàng)任務(wù)的催化域是約340個(gè)氨基酸的緊湊結(jié)構(gòu)。在有絲分裂期間，驅(qū)動(dòng)蛋白將微管組織成有絲分裂紡錘體的雙極結(jié)構(gòu)。驅(qū)動(dòng)蛋白介導(dǎo)染色體沿著紡錘體微管移動(dòng)，以及與有絲分裂具體時(shí)期有關(guān)的有絲分裂紡錘體中的結(jié)構(gòu)改變。在實(shí)驗(yàn)中打亂有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白功能會(huì)引起有絲分裂紡錘體變形或功能障礙，通常導(dǎo)致細(xì)胞周期停滯和細(xì)胞死亡。
已經(jīng)鑒定出的有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白是KSP。KSP屬于正末端定向微管發(fā)動(dòng)機(jī)的進(jìn)化保守的驅(qū)動(dòng)蛋白亞族。其裝配成由反平行同質(zhì)二聚體組成的雙極同質(zhì)四聚體。在有絲分裂期間，KSP與有絲分裂紡錘體的微管結(jié)合。將抗KSP的抗體微注射的到人細(xì)胞內(nèi)阻止了前中期期間紡錘體極分離，生成單極紡錘體，并引起有絲分裂停滯和誘導(dǎo)程序化細(xì)胞死亡。在其他非人生物體中，KSP和相關(guān)驅(qū)動(dòng)蛋白捆住反平行的微管，并讓它們彼此相對(duì)滑動(dòng)，由此迫使兩個(gè)紡錘體極分開。KSP也可以介導(dǎo)后期B紡錘體延伸，并將微管在紡錘體極集中。
人KSP(還稱HsEg5)已經(jīng)描述過(guò)[Blangy，等.，Cell，831159-69(1995)；Whitehead，等.，Arthritis Rheum.，391635-42(1996)；Galgio等.，J.Cell Biol.，135339-414(1996)；Blangy，等.，J Biol.Chem.，27219418-24(1997)；Blangy，等.，Cell Motil Cytoskeleton，40174-82(1998)；Whitehead和Rattner，J.Cell Sci.，1112551-61(1998)；Kaiser，等.，JBC 27418925-31(1999)；GenBank登記號(hào)X85137，NM004523和U37426]，并且KSP基因片段(TRIP5)已經(jīng)描述過(guò)[Lee，等.，Mol Endocrinol.，9243-54(1995)；GenBank登記號(hào)L40372]。非洲爪蟾KSP同系物以及果蠅K-LP61F/KRP 130已報(bào)道過(guò)。
最近有人描述了作為KSP抑制劑的一些喹唑啉酮化合物(PCTPubl.WO01/30768，May 3，2001)有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白是發(fā)現(xiàn)和開發(fā)新的有絲分裂化療劑的有吸引力的目標(biāo)。因此，本發(fā)明的目的是提供可用于抑制KSP一有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白的化合物、方法和組合物。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及可用于治療細(xì)胞增殖性疾病，治療與KSP驅(qū)動(dòng)蛋白活性有關(guān)的病癥，以及用于抑制KSP驅(qū)動(dòng)蛋白的二氫吡咯衍生物的磷酸酯。本發(fā)明化合物可用式I表示
發(fā)明詳述本發(fā)明化合物可用于抑制有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白，并且由式I化合物或者其藥學(xué)上可接受的鹽或立體異構(gòu)體表示 其中a是0或1；b是0或1；m是0、1、或2；n是0或1；r是0或1；s是0或1；u是2、3、4或5；虛線表示任選存在的雙鍵，條件是在環(huán)中存在一個(gè)并且只有一個(gè)雙鍵。
R1選自1)(C1-C6-亞烷基)n(C＝X)C1-C10烷基，2)(C1-C6-亞烷基)n(C＝X)芳基，3)(C1-C6-亞烷基)n(C＝X)C2-C10烯基，4)(C1-C6-亞烷基)n(C＝X)C2-C10炔基，5)(C1-C6-亞烷基)n(C＝X)C3-C8環(huán)烷基，6)(C1-C6-亞烷基)n(C＝X)雜環(huán)基，7)(C1-C6-亞烷基)n(C＝X)NRcRc，8)(C1-C6-亞烷基)nSO2NRcRc，9)(C1-C6-亞烷基)nSO2C1-C10烷基，10)(C1-C6-亞烷基)nSO2C2-C10烯基，
11)(C1-C6-亞烷基)nSO2C2-C10炔基，12)(C1-C6-亞烷基)nSO2-芳基，13)(C1-C6-亞烷基)nSO2-雜環(huán)基，14)(C1-C6-亞烷基)nSO2C3-C8環(huán)烷基，15)(C1-C6-亞烷基)nP(＝O)RdRd′，16)芳基；17)雜環(huán)基；和18)C1-C10烷基；所述烷基、芳基、烯基、炔基、環(huán)烷基、亞烷基、雜芳基和雜環(huán)基可任選被一個(gè)或多個(gè)選自R10的取代基取代；R2和R6獨(dú)立地選自1)芳基，2)C1-C6芳烷基，3)C3-C8環(huán)烷基，和4)雜環(huán)基，所述芳基、環(huán)烷基、芳烷基和雜環(huán)基可任選被一個(gè)或多個(gè)選自R10的取代基取代；R3、R4、R5，、R7，、R8、和R9獨(dú)立地選自1)H，2)C1-C10烷基，3)芳基，4)C2-C10烯基，5)C2-C10炔基，6)C1-C6全氟烷基，7)C1-C6芳烷基，8)C3-C8環(huán)烷基，和9)雜環(huán)基，所述烷基、芳基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳烷基和雜環(huán)基可任選被一個(gè)或多個(gè)選自R10的取代基取代；或者連接在同一碳原子上的R4和R5，或R8和R9一起形成-(CH2)u-，其中一個(gè)碳原子可任選被選自O(shè)、S(O)m、-N(Ra)C(O)-、-N(Rb)-和-N(CORa)-的部分代替；
R10獨(dú)立地選自1)(C＝O)aObC1-C10烷基，2)(C＝O)aOb芳基，3)C2-C10烯基，4)C2-C10炔基，5)(C＝O)aOb雜環(huán)基，6)CO2H，7)鹵素，8)CN，9)OH，10)ObC1-C6全氟烷基，11)Oa(C＝O)bNR12R13，12)S(O)mRa，13)S(O)2NR12R13，14)氧代基，15)CHO，16)(N＝O)R12R13，17)(C＝O)aObC3-C8環(huán)烷基，和18)-OPO(OH)2；所述烷基、芳基、烯基、炔基、雜環(huán)基和環(huán)烷基可任選被一個(gè)或多個(gè)選自R11的取代基取代；R11選自1)(C＝O)rOs(C1-C10)烷基，2)Or(C1-C3)全氟烷基，3)(C0-C6)亞烷基-S(O)mRa，4)氧代基，5)OH，6)鹵素，7)CN，8)(C＝O)rOs(C2-C10)烯基，9)(C＝O)rOs(C2-C10)炔基，10)(C＝O)rOs(C3-C6)環(huán)烷基，
11)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-芳基，12)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-雜環(huán)基，13)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-N(Rb)2，14)C(O)Ra，15)(C0-C6)亞烷基-CO2Ra，16)C(O)H，17)(C0-C6)亞烷基-CO2H，18)C(O)N(Rb)2，19)S(O)mRa，20)S(O)2N(Rb)2，和21)-OPO(OH)2；所述烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、亞烷基和雜環(huán)基可任選被最高達(dá)3個(gè)的選自下列的取代基取代Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、鹵素、CO2H、CN、O(C＝O)C1-C6烷基、氧代基、和N(Rb)2；R12和R13獨(dú)立地選自1)H，2)(C＝O)ObC1-C10烷基，3)(C＝O)ObC3-C8環(huán)烷基，4)(C＝O)Ob芳基，5)(C＝O)Ob雜環(huán)基，6)C1-C10烷基，7)芳基，8)C2-C10烯基，9)C2-C10炔基，10)雜環(huán)基，11)C3-C8環(huán)烷基，12)SO2Ra，和13)(C＝O)NRb2，所述烷基、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)基、烯基、以及炔基可任選被一個(gè)或多個(gè)選自R11的取代基取代，或者R12和R13可以與它們所連接的氮一起形成單環(huán)或者二環(huán)雜環(huán)，所述雜環(huán)在每個(gè)環(huán)中具有3-7個(gè)環(huán)單元，并且除了所述氮以外，還可以任選含有一個(gè)或兩個(gè)選自N、O和S的另外雜原子，所述單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)可任選被一個(gè)或多個(gè)選自R11的取代基取代；R14獨(dú)立地選自1)(C＝O)aObC1-C10烷基，2)(C＝O)aOb芳基，3)C2-C10烯基，4)C2-C10炔基，5)(C＝O)aOb雜環(huán)基，6)CO2H，7)鹵素，8)CN，9)OH，10)ObC1-C6全氟烷基，11)Oa(C＝O)bNR12R13，12)S(O)mRa，13)S(O)2NR12R13，14)氧代基，15)CHO，16)(N＝O)R12R13，17)(C＝O)aObC3-C8環(huán)烷基，和18)-OPO(OH)2；所述烷基、芳基、烯基、炔基、雜環(huán)基、和環(huán)烷基可任選被一個(gè)或多個(gè)選自R11的取代基取代；Ra是(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、芳基、或雜環(huán)基，所述基團(tuán)可任選被1-3個(gè)選自R14的取代基取代；Rb是H，(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C＝O)OC1-C6烷基、(C＝O)C1-C6烷基或者S(O)2Ra，所述基團(tuán)可任選被1-3個(gè)選自R14的取代基取代；Rc和Rc’獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基和(C3-C6)環(huán)烷基，所屬基團(tuán)可任選被1，2或3個(gè)選自R10的取代基取代，或者Rc和Rc’可以與它們所連接的氮一起形成單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)，所述雜環(huán)在每個(gè)環(huán)中具有3-7個(gè)環(huán)單元，并且除了所述氮以外，還可以任選含有一個(gè)或兩個(gè)選自N、O、和S的另外的雜原子，所述單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)可任選被1、2和3個(gè)選自R11的取代基取代；Rd和Rd′獨(dú)立地選自(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基和NRb2，或者Rd和Ra′可與它們所連接的磷一起形成單環(huán)雜環(huán)，所述雜環(huán)具有5-7個(gè)環(huán)單元，并且除了所述磷以外，還可以任選含有一個(gè)或兩個(gè)選自NRe、O和S的另外的雜原子，所屬單環(huán)雜環(huán)可任選被1、2或3個(gè)選自R11的取代基取代。
Re選自H和(C1-C6)烷基；并且X選O，NRe和S；條件是在式I化合物中至少存在一個(gè)取代基-OPO(OH)2。
本發(fā)明另一個(gè)實(shí)施方案中由式II化合物或者其藥學(xué)上可接受的鹽或立體異構(gòu)體表示 其中a是0或1；b是0或1；m是0、1、或2；n是0或1；r是0或1；s是0或1；虛線表示任選存在的雙鍵，條件是在環(huán)中存在一個(gè)并且只有一個(gè)雙鍵。
R1選自1)(C1-C6-亞烷基)n(C＝O)C1-C10烷基，2)(C1-C6-亞烷基)n(C＝O)芳基，3)(C1-C6-亞烷基)n(C＝O)C2-C10烯基，
4)(C1-C6-亞烷基)n(C＝O)C2-C10炔基，5)(C1-C6-亞烷基)n(C＝O)C3-C8環(huán)烷基，6)(C1-C6-亞烷基)n(C＝O)雜環(huán)基，7)(C1-C6-亞烷基)n(C＝O)NRcRc’，8)(C1-C6-亞烷基)nSO2NRcRc’，9)(C1-C6-亞烷基)nSO2C1-C10烷基，10)(C1-C6-亞烷基)nSO2-芳基，11)(C1-C6-亞烷基)nSO2-雜環(huán)基，12)(C1-C6-亞烷基)nSO2-C3-C8環(huán)烷基，13)(C1-C6-亞烷基)nP(＝O)RdRd′，14)芳基；15)雜環(huán)基；和16)C1-C10烷基；所述烷基、芳基、烯基、炔基、環(huán)烷基、亞烷基、雜芳基和雜環(huán)基任選被一個(gè)或多個(gè)選自R10的取代基取代；R2和R6獨(dú)立地選自1)芳基，2)C1-C6芳烷基，3)C3-C8環(huán)烷基，和4)雜環(huán)基，所述烷基、環(huán)烷基、芳烷基和雜環(huán)基可任選被一個(gè)或多個(gè)選自R10的取代基取代；R3，R4和R8獨(dú)立地選自1)H，2)C1-C10烷基，3)芳基，4)C2-C10烯基，5)C2-C10炔基，6)C1-C6全氟烷基，7)C1-C6芳烷基，8)C3-C8環(huán)烷基，和9)雜環(huán)基，
所述烷基、芳基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳烷基、和雜環(huán)基可任選被一個(gè)或多個(gè)選自R10的取代基取代；R10獨(dú)立地選自1)(C＝O)aObC1-C10烷基，2)(C＝O)aOb芳基，3)C2-C10烯基，4)C2-C10炔基，5)(C＝O)aOb雜環(huán)基，6)CO2H，7)鹵素，8)CN，9)OH，10)ObC1-C6全氟烷基，11)Oa(C＝O)bNR12R13，12)S(O)mRa，1)S(O)2NR12R13，14)氧代基，15)CHO，16)(N＝O)R12R13，17)(C＝O)aObC3-C8環(huán)烷基，和18)-OPO(OH)2；所述烷基、芳基、烯基、炔基、雜環(huán)基、和環(huán)烷基可任選被1、2或3個(gè)選自R11的取代基取代；R11選自1)(C＝O)rOs(C1-C10)烷基，2)Or(C1-C3)全氟烷基，3)氧代基，4)OH，5)鹵素，6)CN，7)(C2-C10)烯基，8)(C2-C10)炔基，
9)(C＝O)rOs(C3-C6)環(huán)烷基，10)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-芳基，11)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-雜環(huán)基，12)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-N(Rb)2，13)C(O)Ra，14)(C0-C6)亞烷基-CO2Ra15)C(O)H，16)(C0-C6)亞烷基-CO2H，和17)C(O)N(Rb)2，18)S(O)mRa，19)S(O)2N(Rb)2，和20)-OPO(OH)2；所述烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、亞烷基、和雜環(huán)基可任選被最高達(dá)3個(gè)選自下列的取代基取代Rb，OH，(C1-C6)烷氧基，鹵素，CO2H，CN，O(C＝O)C1-C6烷基，氧代基，和N(Rb)2；R12和R13獨(dú)立地選自1)H，2)(C＝O)ObC1-C10烷基，3)(C＝O)ObC3-C8環(huán)烷基，4)(C＝O)Ob芳基，5)(C＝O)Ob雜環(huán)基，6)C1-C10烷基，7)芳基，8)C2-C10烯基，9)C2-C10炔基，10)雜環(huán)基，11)C3-C8環(huán)烷基，12)SO2Ra，和13)(C＝O)NRb2，所述烷基、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)基、烯基、和炔基可任選被1、2或3個(gè)選自R11的取代基取代，或者R12和R13可以與它們所連接的氮一起形成單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)，所述雜環(huán)在每個(gè)環(huán)中具有5-7個(gè)單元，并且除了所述氮以外，還可以任選含有一個(gè)或兩個(gè)選自N、O、和S的另外雜原子，所述單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)可任選被1、2、和3個(gè)選自R11的取代基取代；Ra是(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、芳基或雜環(huán)基；Rb是H、(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C＝O)OC1-C6烷基，(C＝O)C1-C6烷基或S(O)2Ra；Rc和Rc’獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基、和(C3-C6)環(huán)烷基；或者Rc和Rc’可以與它們所連接的氮一起形成單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)，所述雜環(huán)在每個(gè)環(huán)中具有5-7個(gè)單元，并且除了所述氮以外，還可以任選含有一個(gè)或兩個(gè)選自N、O、和S的另外雜原子，所述單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)可任選被1、2、和3個(gè)選自R11的取代基取代；Rd和Rd′獨(dú)立地選自(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基和NRb2，或者Rd和Rd′可以與它們所連接的磷一起形成單環(huán)雜環(huán)，所述雜環(huán)在每個(gè)環(huán)中具有5-7個(gè)單元，并且除了所述磷以外，還可以任選含有一個(gè)或兩個(gè)選自NRe、O、和S的另外雜原子，所述單環(huán)雜環(huán)可任選被1、2、和3個(gè)選自R11的取代基取代；和Re選自H和(C1-C6)烷基；并且條件是在式II化合物中至少存在一個(gè)取代基-OPO(OH)2。
本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案由式III化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽或立體異構(gòu)體表示 其中a是0或1；b是0或1；m是0、1、或2；
r是0或1；s是0或1；R1選自1)(C＝O)C1-C10烷基，2)(C＝O)芳基，3)(C＝O)C3-C8環(huán)烷基，4)(C＝O)雜環(huán)基，5)(C＝O)NRcRc′，6)(C＝S)NRcRc′，7)SO2NRcRc′，8)SO2C1-C10烷基，9)SO2-芳基，和10)SO2-雜環(huán)基，所述烷基、芳基、環(huán)烷基、和雜環(huán)基任選被一個(gè)或多個(gè)選自R10的取代基取代；R3，R4和R8獨(dú)立地選自1)H，2)C1-C10烷基，和3)C1-C6全氟烷基，所述烷基可任選被一個(gè)或多個(gè)選自R10的取代基取代；R10和R10b獨(dú)立地選自1)(C＝O)aObC1-C10烷基，2)(C＝O)aOb芳基，3)C2-C10烯基，4)C2-C10炔基，5)(C＝O)aOb雜環(huán)基，6)CO2H，7)鹵素，8)CN，9)OH，10)ObC1-C6全氟烷基，11)Oa(C＝O)bNR12R13，
12)S(O)mRa，13)S(O)2NR12R13，14)氧代基，15)CHO，16)(N＝O)R12R13，17)(C＝O)aObC3-C8環(huán)烷基，和18)-OPO(OH)2；所述烷基、芳基、烯基、炔基、雜環(huán)基、和環(huán)烷基任選被1、2或3個(gè)選自R11的取代基取代；R10a是鹵素；R11選自1)(C＝O)rOs(C1-C10)烷基，2)Or(C1-C3)全氟烷基，3)氧代基，4)OH，5)鹵素，6)CN，7)(C2-C10)烯基，8)(C2-C10)炔基，9)(C＝O)rOs(C3-C6)環(huán)烷基，10)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-芳基，11)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-雜環(huán)基，12)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-N(Rb)2，13)C(O)Ra，14)(C0-C6)亞烷基-CO2Ra15)C(O)H，16)(C0-C6)亞烷基-CO2H，17)C(O)N(Rb)2，18)S(O)mRa，19)S(O)2N(Rb)2，和20)-OPO(OH)2，所述烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、和雜環(huán)基可任選被最高達(dá)3個(gè)選自下列的取代基取代Rb，OH，(C1-C6)烷氧基，鹵素，CO2H，CN，O(C＝O)C1-C6烷基，氧代基，和N(Rb)2；R12和R13獨(dú)立地選自1)H，2)(C＝O)ObC1-C10烷基，3)(C＝O)ObC3-C8環(huán)烷基，4)(C＝O)Ob芳基，5)(C＝O)Ob雜環(huán)基，6)C1-C10烷基，7)芳基，8)C2-C10烯基，9)C2-C10炔基，10)雜環(huán)基，11)C3-C8環(huán)烷基，12)SO2Ra，和13)(C＝O)NRb2，所述烷基、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)基、烯基、和炔基可任選被1、2或3個(gè)選自R11的取代基取代，或者R12和R13可以與它們所連接的氮一起形成單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)，所述雜環(huán)在每個(gè)環(huán)中具有5-7個(gè)單元，并且除了所述氮以外，還可以任選含有一個(gè)或兩個(gè)選自N、O、和S的另外雜原子，所述單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)可任選被1、2、和3個(gè)選自R11的取代基取代；Ra獨(dú)立地選自(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、芳基或雜環(huán)基；Rb獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C＝O)OC1-C6烷基，(C＝O)C1-C6烷基或S(O)2Ra；和Rc和Rc’獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基、和(C3-C6)環(huán)烷基；或者Rc和Rc’可以與它們所連接的氮一起形成單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)，所述雜環(huán)在每個(gè)環(huán)中具有5-7個(gè)單元，并且除了所述氮以外，還可以任選含有一個(gè)或兩個(gè)選自N、O、和S的另外雜原子，所述單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)可任選被1、2、和3個(gè)選自R11的取代基取代；并且條件是在式III化合物中至少存在一個(gè)取代基-OPO(OH)2。
本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案是由式IV化合物或其可藥用鹽或立體異構(gòu)體表示 其中a是0或1；b是0或1；m是0、1、或2；r是0或1；s是0或1；R1選自1)(C＝O)C1-C10烷基，2)(C＝O)芳基，3)(C＝O)C3-C8環(huán)烷基，4)(C＝O)雜環(huán)基，5)(C＝O)NRcRc′，6)(C＝S)NRcRc′，7)SO2NRcRc′，8)SO2C1-C10烷基，9)SO2-芳基，和10)SO2-雜環(huán)基，所述烷基、芳基、環(huán)烷基、和雜環(huán)基任選被一個(gè)或多個(gè)選自R10的取代基取代；R3，R4和R8獨(dú)立地選自1)H，2)C1-C10烷基，和3)C1-C6全氟烷基，
所述烷基可任選被一個(gè)或多個(gè)選自R10的取代基取代；R10獨(dú)立地選自1)(C＝O)aObC1-C10烷基，2)(C＝O)aOb芳基，3)C2-C10烯基，4)C2-C10炔基，5)(C＝O)aOb雜環(huán)基，6)CO2H，7)鹵素，8)CN，9)OH，10)ObC1-C6全氟烷基，11)Oa(C＝O)bNR12R13，12)S(O)mRa，13)S(O)2NR12R13，14)氧代基，15)CHO，16)(N＝O)R12R13，17)(C＝O)aObC3-C8環(huán)烷基，和18)-OPO(OH)2；所述烷基、芳基、烯基、炔基、雜環(huán)基、和環(huán)烷基任選被1、2或3個(gè)選自R11的取代基取代；R10a是鹵素；R11選自1)(C＝O)rOs(C1-C10)烷基，2)Or(C1-C3)全氟烷基，3)氧代基，4)OH，5)鹵素，6)CN，7)(C2-C10)烯基，8)(C2-C10)炔基，
9)(C＝O)rOs(C3-C6)環(huán)烷基，10)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-芳基，11)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-雜環(huán)基，12)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-N(Rb)2，13)C(O)Ra，14)(C0-C6)亞烷基-CO2Ra15)C(O)H，16)(C0-C6)亞烷基-CO2H，17)C(O)N(Rb)2，18)S(O)mRa，19)S(O)2N(Rb)2，和20)-OPO(OH)2，所述烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、和雜環(huán)基可任選被最高達(dá)3個(gè)選自下列的取代基取代Rb，OH，(C1-C6)烷氧基，鹵素，CO2H，CN，O(C＝O)C1-C6烷基，氧代基，和N(Rb)2；R12和R13獨(dú)立地選自1)H，2)(C＝O)ObC1-C10烷基，3)(C＝O)ObC3-C8環(huán)烷基，3)(C＝O)Ob芳基，5)(C＝O)Ob雜環(huán)基，6)C1-C10烷基，7)芳基，8)C2-C10烯基，9)C2-C10炔基，10)雜環(huán)基，11)C3-C8環(huán)烷基，12)SO2Ra，和13)(C＝O)NRb2，所述烷基、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)基、烯基、和炔基可任選被1、2或3個(gè)選自R11的取代基取代，或者R12和R13可以與它們所連接的氮一起形成單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)，所述雜環(huán)在每個(gè)環(huán)中具有5-7個(gè)單元，并且除了所述氮以外，還可以任選含有一個(gè)或兩個(gè)選自N、O、和S的另外雜原子，所述單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)可任選被1、2、和3個(gè)選自R11的取代基取代；Ra獨(dú)立地選自(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、芳基或雜環(huán)基；Rb獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C＝O)OC1-C6烷基，(C＝O)C1-C6烷基或S(O)2Ra；和Rc和Rc’獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基、和(C3-C6)環(huán)烷基；或者Rc和Rc’可以與它們所連接的氮一起形成單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)，所述雜環(huán)在每個(gè)環(huán)中具有5-7個(gè)單元，并且除了所述氮以外，還可以任選含有一個(gè)或兩個(gè)選自N、O、和S的另外雜原子，所述單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)可任選被1、2、和3個(gè)選自R11的取代基取代；另一個(gè)實(shí)施方案是緊接的上述式IV化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或立體異構(gòu)體，其中R1選自1)(C＝O)NRcRc′2)SO2NRcRc′，和3)SO2C1-C10烷基，所述烷基可任選被1、2或3個(gè)選自R10的取代基取代；R3，R4和R8獨(dú)立地選自1)H，和2)C1-C10烷基，所述烷基可任選被一個(gè)或多個(gè)選自R10的取代基取代；并且R10，R10a，R11，R12，R13，Ra，Rb，Rc和Re′如緊接的上文所述。
本發(fā)明的具體實(shí)例包括3-{(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-1-[(二甲氨基)羰基]-2，5-二氫-1H-吡咯-2-基}苯基二氫磷酸酯；3-[(2S)-1-[(2S)-2-環(huán)丙基-2-羥基乙酰基]-4-(2，5-二氟苯基)-2，5-二氫-1H-吡咯-2-基]苯基二氫磷酸酯；3-((2S)-4-(2，5-二氟苯基)-1-{[甲基(四氫呋喃-3-基)氨基]羰基}-2，5-二氫-1H-吡咯-2-基)苯基二氫磷酸酯；3-{(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-1-[(2S)-2-羥基-3，3-二甲基丁?；鵠-2，5-二氫-1H-吡咯-2-基}苯基二氫磷酸酯；(1S)-1-{[(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基]羰基}-2，2-二甲基丙基氨基甲酸2-(磷?；?乙酯；和(1S)-1-環(huán)丙基-2-[(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基]-2-氧代乙基二氫磷酸酯；或其藥學(xué)上可接受的鹽或立體異構(gòu)體。
本發(fā)明的化合物可以具有不對(duì)稱中性、手性軸、和手性平面(如在E.L.Eliel和S.H.Wilen，Stereochemistry of Carbon Compounds，JohnWiley & Sons，New York，1994，第1119-1190頁(yè)所述的那樣)，并且可以以外消旋體、外消旋混合物的形式存在，并且可以以各非對(duì)映體的形式存在，以及包括旋光異構(gòu)體在內(nèi)所有可能的異構(gòu)體及其混合物，所有此類的立體異構(gòu)體均在本發(fā)明的范圍之內(nèi)。此外，本文所公開的化合物可以以互變異構(gòu)體的形式存在，即使僅描述了一種互變異構(gòu)結(jié)構(gòu)，這兩種互變異構(gòu)體也都被包含在本發(fā)明的范圍內(nèi)。
在任何組分中當(dāng)任何變量(例如R10、R11、R12等等)出現(xiàn)一次以上時(shí)，在每次出現(xiàn)時(shí)的定義都彼此獨(dú)立。取代基和變量的組合也僅在該類組合能產(chǎn)生穩(wěn)定的化合物時(shí)才被允許。從取代基畫到環(huán)系上的線表明所指的取代基可以連接到任何一個(gè)可取代的環(huán)碳原子上。如果該環(huán)系是多環(huán)的，則其指的是該鍵僅可以被連接到最接近環(huán)的任何適宜碳原子上。
應(yīng)當(dāng)清楚的是，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對(duì)本發(fā)明化合物上的取代基和取代模式進(jìn)行選擇從而提供化學(xué)穩(wěn)定并易于通過(guò)現(xiàn)有技術(shù)中公知的技術(shù)以及下面所述的這些方法從易于獲得的原料來(lái)進(jìn)行合成的化合物。如果一個(gè)取代基本身被一個(gè)以上的基團(tuán)所取代，應(yīng)當(dāng)清楚的是只要可以獲得穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)，這些多個(gè)基團(tuán)可以位于相同的碳或不同的碳上。短語(yǔ)“任選地被一個(gè)或多個(gè)取代基取代”應(yīng)被看成與短語(yǔ)“任選地被至少一個(gè)取代基取代”相同，并且在該類情況中優(yōu)選的實(shí)施方案將具有0至3個(gè)取代基。
本文所用的“烷基”指的是包括具有指定數(shù)目碳原子的支鏈和直鏈飽和脂肪烴基。例如，在“C1-C10烷基”中，C1-C10被定義為包括在直鏈和支鏈排列中具有1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個(gè)碳的基團(tuán)。例如“C1-C10烷基”具體包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、叔丁基、異丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基、等。術(shù)語(yǔ)“環(huán)烷基”包括環(huán)丙基、甲基環(huán)丙基、2，2-二甲基環(huán)丁基、2-乙基環(huán)戊基、環(huán)己基等。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，術(shù)語(yǔ)“環(huán)烷基”包括緊接的上文所述的基團(tuán)，并且還包括單環(huán)不飽和脂族烴基。例如，在該實(shí)施方案中定義的“環(huán)烷基”包括環(huán)丙基、甲基環(huán)丙基、2，2-二甲基環(huán)丙基、2-乙基環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)戊烯基、環(huán)丁烯基等。
術(shù)語(yǔ)“亞烷基”是指具有指定數(shù)目碳原子的烴二基。例如，“亞烷基”包括-CH2-，-CH2-CH2-等。
當(dāng)使用短語(yǔ)“C1-C6芳烷基”和“C1-C6雜芳烷基”時(shí)，術(shù)語(yǔ)“C1-C6”是指該基團(tuán)的烷基部分，并且沒有描述在該基團(tuán)的芳基和雜芳基部分中的原子數(shù)目。
“烷氧基”代表通過(guò)一個(gè)氧橋連接的具有指定數(shù)目碳原子的環(huán)狀或非環(huán)狀烷基。因此“烷氧基”包括上述烷基和環(huán)烷基的定義。
如果沒有指定碳原子數(shù)目，術(shù)語(yǔ)“烯基”指的是包含2-10個(gè)碳原子和至少1個(gè)碳碳雙鍵的直鏈、支鏈或環(huán)狀非芳族烴基。優(yōu)選存在1個(gè)碳碳雙鍵，并且可以存在最高達(dá)4個(gè)非芳族的碳碳雙鍵。因此，“C2-C6烯基”指的是具有2-6個(gè)碳原子的烯基。烯基包括乙烯基、丙烯基、丁烯基、2-甲基丁烯基和環(huán)己烯基。烯基的直鏈、支鏈或環(huán)狀部分可以包含雙鍵并且如果指出是被取代的烯基時(shí)可以被取代。
術(shù)語(yǔ)“炔基”指的是包含2-10個(gè)碳原子和至少1個(gè)碳碳三鍵的直鏈、支鏈或環(huán)狀烴基?？梢源嬖谧罡哌_(dá)3個(gè)碳碳三鍵。因此，“C2-C6炔基”指的是具有2-6個(gè)碳原子的炔基。烯基包括乙炔基、丙炔基、丁炔基、3-甲基丁炔基等。炔基的直鏈、支鏈或環(huán)狀部分可以包含三鍵并且如果指出是被取代的炔基時(shí)可以被取代。
在某些情況中，可以用包括0在內(nèi)的碳范圍對(duì)取代基進(jìn)行定義，如(C0-C6)亞烷基-芳基。如果芳基是苯基，則該定義包括苯基本身以及-CH2Ph、-CH2CH2Ph、CH(CH3)CH2CH(CH3)Ph，等等。
本文所用“芳基”指的是在每個(gè)環(huán)中具有最高達(dá)7個(gè)碳原子的任何穩(wěn)定的單環(huán)或二環(huán)碳環(huán)，其中至少一個(gè)環(huán)是芳環(huán)。這樣的芳基的實(shí)例包括苯基、萘基、四氫萘基、2，3-二氫化茚基和聯(lián)苯基。在該芳基的取代基是二環(huán)并且一個(gè)環(huán)不是芳環(huán)的情況中，應(yīng)當(dāng)清楚的是連接是通過(guò)芳環(huán)進(jìn)行的。
本文所用術(shù)語(yǔ)雜芳基代表在每一個(gè)環(huán)中具有最高達(dá)7個(gè)原子的穩(wěn)定的單環(huán)或二環(huán)，其中至少一個(gè)環(huán)是芳族的并且包含1-4個(gè)選自O(shè)、N、和S的雜原子。該定義范圍內(nèi)的雜芳基非限制性地包括吖啶基、咔唑基、噌啉基、吡唑基、吲哚基、苯并三唑基、呋喃基、噻吩基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、喹啉基、異喹啉基、噁唑基、異噁唑基、吲哚基、吡嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、四氫喹啉。如下面關(guān)于雜環(huán)的定義所述，應(yīng)當(dāng)理解“雜芳基”還包括任何含氮雜芳基的N-氧化物衍生物。在雜芳基取代基是二環(huán)、且一個(gè)環(huán)是非芳族環(huán)或不包含雜原子的情況下，應(yīng)當(dāng)清楚其是分別通過(guò)芳環(huán)或通過(guò)包含雜原子的環(huán)進(jìn)行連接的。
本文所用的“雜環(huán)”或“雜環(huán)基”是指包含1-4個(gè)選自O(shè)、N和S的雜原子的3-10元芳族或非芳族雜環(huán)。并包括二環(huán)基團(tuán)。因此，“雜環(huán)基”包括上述雜芳基及其二氫和四氫類似物?！半s芳基”的其他實(shí)例包括但不限于下列基團(tuán)氮雜環(huán)丁烷、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并呋咱基、苯并吡唑基、苯并三唑基、苯基噻吩基、苯并噁唑基、咔唑基、咔啉基、噌啉基、呋喃基、咪唑基、二氫吲哚基、吲哚基、吲嗪基、吲唑基、異苯并呋喃基、異吲唑基、異喹啉基、異噻唑基、異噁唑基、苯并吡啶基、噁二唑基、噁唑基、噁唑啉、異噁唑啉、氧雜環(huán)丁烷基、吡喃基、吡嗪基、吡唑基、噠嗪基、吡啶并吡啶基、噠嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、喹喔啉基、四氫吡喃基、四氫噻喃基、四氫異喹啉基、四唑基、四唑并吡啶基、噻二唑基、噻唑基、噻吩基、三唑基、1，4-二氧雜環(huán)己烷基、六氫氮雜卓基、哌嗪基、哌啶基、吡啶-2-酮基、吡咯烷基、嗎啉基、硫代嗎啉基、二氫苯并咪唑基、二氫苯并呋喃基、二氫苯并噻吩基、二氫苯并噁唑基、二氫呋喃基、二氫咪唑基、二氫吲哚基、二氫異惡唑基、二氫異噻唑基、二氫噁二唑基、二氫噁唑基、二氫吡嗪基、二氫吡唑基、二氫吡啶基、二氫嘧啶基、二氫吡咯基、二氫喹啉基、二氫四唑基、二氫噻二唑基、二氫噻唑基、二氫噻吩基、二氫三唑基、二氫氮雜環(huán)丁烷基、亞甲二羥苯苯甲酰、四氫呋喃基和四氫噻吩基及其N-氧化物。雜環(huán)取代基的可通過(guò)碳原子或雜原子進(jìn)行連接。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本文所用術(shù)語(yǔ)“雜環(huán)”或“雜環(huán)基”是指包括含1-4個(gè)選自O(shè)、N和S的雜原子的5-10元芳族或非芳族雜環(huán)，并包括二環(huán)基團(tuán)。因此，在該實(shí)施方案中，“雜環(huán)基”包括上述雜芳基及其二氫和四氫類似物?！半s環(huán)基”的其他實(shí)例包括但不限于下列基團(tuán)苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并呋咱基、苯并吡唑基、苯并三唑基、苯基噻吩基、苯并噁唑基、咔唑基、咔啉基、噌啉基、呋喃基、咪唑基、二氫吲哚基、吲哚基、吲嗪基、吲唑基、異苯并呋喃基、異吲唑基、異喹啉基、異噻唑基、異噁唑基、苯并吡啶基、噁二唑基、惡唑基、噁唑啉、異噁唑啉、氧雜環(huán)丁烷基、吡喃基、吡嗪基、吡唑基、噠嗪基、吡啶并吡啶基、噠嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、喹喔啉基、四氫吡喃基、四氫噻喃基、四氫異喹啉基、四唑基、四唑并吡啶基、噻二唑基、噻唑基、噻吩基、三唑基、氮雜環(huán)丁烷基、1，4-二氧雜環(huán)己烷基、六氫氮雜卓基、哌嗪基、哌啶基、吡啶-2-酮基、吡咯烷基、嗎啉基、硫代嗎啉基、二氫苯并咪唑基、二氫苯并呋喃基、二氫苯并噻吩基、二氫苯并噁唑基、二氫呋喃基、二氫咪唑基、二氫吲哚基、二氫異惡唑基、二氫異噻唑基、二氫噁二唑基、二氫噁唑基、二氫吡嗪基、二氫吡唑基、二氫吡啶基、二氫嘧啶基、二氫吡咯基、二氫喹啉基、二氫四唑基、二氫噻二唑基、二氫噻唑基、二氫噻吩基、二氫三唑基、二氫氮雜環(huán)丁烷基、亞甲二羥苯甲?；⑺臍溥秽退臍溧绶曰捌銷-氧化物。雜環(huán)取代基的可通過(guò)碳原子或雜原子進(jìn)行連接。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，雜環(huán)選自2-氮雜蒎酮、苯并咪唑基、2-二氮雜蒎酮、咪唑基、2-咪唑烷二酮、吲哚基、異喹啉基、嗎啉基、哌啶基、哌嗪基、吡啶基、吡咯烷基、2-哌啶酮、2-嘧啶酮、2-吡咯烷酮、喹啉基、四氫呋喃基、四氫異喹啉基和噻吩基。
正如本領(lǐng)域技術(shù)人員所領(lǐng)會(huì)的那樣，本文所用的“鹵代”或“鹵素”指的是包括氯、氟、溴和碘。
除非另有說(shuō)明，否則烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基取代基可以是去取代或未取代的，例如，(C1-C6)烷基可以被1、2或3個(gè)選自下列的取代基取代OH、氧代基、鹵素、烷氧基、二烷基氨基或雜環(huán)基例如嗎啉基、哌啶基等。在這種情況下，如果一個(gè)取代基是氧代基，另一個(gè)取代基是OH，則下列這些基團(tuán)包括在該定義內(nèi)-(C＝O)CH2CH(OH)CH3、-(C＝O)OH、-CH2(OH)CH2CH(O)，等等。
在定義中，當(dāng)在同一碳原子上的R4與R5以及R8與R9一起形成-(CH2)u-時(shí)，所形成的基團(tuán)由以下基團(tuán)表示 此外，這樣的環(huán)狀基團(tuán)可任選包含雜原子。這樣的包含雜原子的環(huán)狀基團(tuán)的實(shí)例包括但不限于 在某些情況下，R12和R13以及Rc和Rc’是如此定義的它們可以與所連接的氮一起形成單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)，所述雜環(huán)在每個(gè)環(huán)中具有5-7個(gè)單元，并且除了所述氮以外，還可以任選含有一個(gè)或兩個(gè)選自N、O和S的另外的雜原子，所屬單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)可任選被一個(gè)或多個(gè)選自R11的取代基取代?？捎纱诵纬傻碾s環(huán)的實(shí)例包括但不限于下列基團(tuán)，要注意的是雜環(huán)可任選被一個(gè)或多個(gè)(優(yōu)選1、2或3個(gè))選自R11的取代基取代
在某些情況下，Rd和Rd′是如此定義的它們可以與所連接的磷一起形成單環(huán)雜環(huán)，所述雜環(huán)在環(huán)中具有5-7個(gè)單元，并且除了所述磷以外，還可以任選含有一個(gè)或兩個(gè)選自NRe、O、和S的另外雜原子，所述雜環(huán)可任選被一個(gè)或多個(gè)選自R11的取代基取代。可由此形成的雜環(huán)的實(shí)例包括但不限于下列基團(tuán)，要注意的是雜環(huán)可任選被一個(gè)或多個(gè)(優(yōu)選1、2或3個(gè))選自R11的取代基取代 在一個(gè)實(shí)施方案中，R1選自(C＝O)NRcRc′和-SO2C1-C6烷基，所述基團(tuán)可任選被1-3個(gè)選自R10的取代基取代。在該實(shí)施方案的另一方面，R1是氨基羰基、N，N-二甲基氨基羰基、甲基磺?；蛞一酋；?。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，R1選自(C＝O)NRcRc′和(C＝O)C1-C6烷基，所述基團(tuán)可任選被1-3個(gè)選自R10的取代基取代。在該實(shí)施方案的另一方面，R1選自a)1-環(huán)丙基-2-氧代乙胺基或1-叔丁基-2-氧代乙胺，其中所述胺中的氮可任選被R12和R13取代，b)N，N-二甲基甲酰胺，和
c)N-甲基-N-(1-甲基哌啶-4-基)甲酰胺。
在一個(gè)實(shí)施方案中，R2選自芳基，所述芳基可任選被1-3個(gè)選自R10的取代基取代。在該實(shí)施方案的另一個(gè)方面，R2是苯基，所述苯基可任選被1-3個(gè)選自鹵素或-OPO(OH)2的取代基取代。在該實(shí)施方案的另一方面，R2是被-OPO(OH)2取代的苯基，并且任選被1-3個(gè)選自鹵素的取代基取代。
在一個(gè)實(shí)施方案中，R4、R5、R7、R8和R9是H。
在一個(gè)實(shí)施方案中，R3選自H和C1-C6烷基，所述基團(tuán)可任選被1-2個(gè)選自選自R10的取代基取代。在該實(shí)施方案的另一個(gè)方面，R3選自H和甲基。
在一個(gè)實(shí)施方案中，R6選自芳基，所述芳基可任選被1-3個(gè)選自R10的取代基取代。在該實(shí)施方案的另一個(gè)方面，R6是苯基，所述苯基可任選被1-3個(gè)選自鹵素和-OPO(OH)2的取代基取代。在該實(shí)施方案的另一個(gè)方面，R6是苯基，所述苯基可任選被1-3個(gè)選自鹵素的取代基取代。
包括在本發(fā)明范圍內(nèi)的是游離形式的式I化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽和立體異構(gòu)體。在本文中舉例說(shuō)明某些具體化合物是胺化合物的質(zhì)子化鹽。術(shù)語(yǔ)“游離形式”是胺化合物的非鹽形式。在本發(fā)明范圍內(nèi)的藥學(xué)上可接受的鹽不僅包括列舉的本文所述具體化合物的鹽，還包括游離形式的式I化合物的所有常見的藥學(xué)上可接受的鹽。所述化合物的具體鹽的游離形式可使用本領(lǐng)域已知的技術(shù)分離。例如，游離形式可通過(guò)用合適的稀的堿水溶液例如稀的氫氧化鈉水溶液、碳酸鉀水溶液、氨水和碳酸氫鈉水溶液處理再生。游離形式可在某些物理性質(zhì)方面與其各自的鹽形式稍微不同，例如在極性溶劑中的溶解度不同，但是對(duì)于本發(fā)明的目的，酸和堿鹽在藥學(xué)上與其各自的游離形式相同。
本發(fā)明化合物的藥學(xué)上可接受的鹽可以用常規(guī)化學(xué)方法由包含堿性或酸性部分的本發(fā)明的化合物來(lái)合成。一般而言，堿性化合物的鹽是通過(guò)離子交換色譜或通過(guò)將游離堿與化學(xué)計(jì)量的或過(guò)量的所需的成鹽的無(wú)機(jī)酸或有機(jī)酸在適宜的溶劑或溶劑的各種組合中進(jìn)行反應(yīng)來(lái)進(jìn)行制備的。類似地，酸性化合物的鹽是通過(guò)與適宜的無(wú)機(jī)或有機(jī)堿進(jìn)行方應(yīng)來(lái)形成的。
因此，本發(fā)明的藥學(xué)上可接受的鹽包括通過(guò)將堿性的本發(fā)明的化合物與無(wú)機(jī)或有機(jī)酸反應(yīng)而形成的本發(fā)明化合物的常規(guī)無(wú)毒鹽。例如，常規(guī)無(wú)毒鹽包括得自無(wú)機(jī)酸和有機(jī)酸的那些，所述無(wú)機(jī)酸是例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸等，所述有機(jī)酸是例如乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、抗壞血酸、撲酸、馬來(lái)酸、羥基馬來(lái)酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水楊酸、對(duì)氨基苯磺酸、2-乙酰氧基-苯甲酸、富馬酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙烷二磺酸、草酸、羥乙基磺酸、三氟乙酸等。
當(dāng)本發(fā)明化合物是酸性時(shí)，合適的“藥學(xué)上可接受的鹽”是指由藥學(xué)上可接受的無(wú)毒堿，包括無(wú)機(jī)堿和有機(jī)堿制得的鹽。得自無(wú)機(jī)堿的鹽包括鋁鹽、胺鹽、鈣鹽、銅鹽、三價(jià)鐵鹽、二價(jià)鐵鹽、鋰鹽、鎂鹽、錳鹽、二價(jià)錳鹽、鉀鹽、鈉鹽、鋅鹽等。胺鹽、鈣鹽、鎂鹽、鉀鹽和鈉鹽是特別優(yōu)選的。得自藥學(xué)上可接受的無(wú)毒有機(jī)堿的鹽包括下列堿的鹽伯胺、仲胺和叔胺、取代的胺，包括天然取代的胺、環(huán)胺和堿性離子交換樹脂，例如精氨酸、甜菜堿、咖啡因、膽堿、N，N1-二芐基乙二胺、二乙胺、2-二乙基氨基乙醇、2-二甲基氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基嗎啉、N-乙基哌啶、葡糖胺、氨基葡糖、組氨酸、海巴明(hydrabamine)、異丙基胺、賴氨酸、甲基葡糖胺、嗎啉、哌嗪、哌啶、聚胺樹脂、普魯卡因、嘌呤、可可堿、三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨丁三醇等。當(dāng)本發(fā)明化合物是酸性的時(shí)，術(shù)語(yǔ)“游離形式”是指其非鹽形式的化合物，這樣的酸性官能團(tuán)仍然是質(zhì)子化的。
上述藥學(xué)上可接受的鹽和其他常用的藥學(xué)上可接受的鹽的制備由Berg等更詳細(xì)地描述在“Pharmacertical Salts，”J.Pharm.Sci.，1977661-19中。
還應(yīng)當(dāng)注意，本發(fā)明化合物有可能是內(nèi)鹽或兩性離子，因?yàn)樵谏項(xiàng)l件下，化合物中的去質(zhì)子化酸性部分例如羧基可以是陰離子，并且該電荷可由質(zhì)子化或烷基化的堿性部分例如季氮原子的陽(yáng)離子電荷在內(nèi)部平衡。具有內(nèi)部平衡電荷，并因此不予分子間抗衡離子締合的分離的化合物也可以視為“游離形式”的化合物。
本發(fā)明化合物可通過(guò)采用如下列反應(yīng)方案所示的反應(yīng)以及文獻(xiàn)中已知的或?qū)嶒?yàn)部分中例舉的其他標(biāo)準(zhǔn)操作來(lái)制得。因此，下面所示的方應(yīng)方案不受所列的化合物或處于舉例說(shuō)明目的而采用的任何具體取代基的限制。在反應(yīng)方案中顯示的取代基編號(hào)方式不是必須與權(quán)利要求中使用的取代基標(biāo)號(hào)方式相關(guān)，并且，當(dāng)在上文式I的定義下允許多個(gè)取代基時(shí)，為了清楚起見經(jīng)常顯示一個(gè)連接在化合物上的取代基。
反應(yīng)方案如反應(yīng)方案A所示，關(guān)鍵的二氫吡咯中間體A-4可由易于獲得的適當(dāng)取代的苯胺和N-保護(hù)的二氫吡咯獲得。然后環(huán)氮脫保護(hù)，用適當(dāng)取代的親電子試劑例如所示的二烷基氨基甲酰氯進(jìn)行官能化，生成本發(fā)明化合物A-6。反應(yīng)方案A-1顯示了合成A-4中間體的另一途徑。
如反應(yīng)方案B所示，使用具有在適當(dāng)位點(diǎn)的羥基的一個(gè)苯基吡咯對(duì)映體使得能夠制備對(duì)映體純的中間體B-5，然后可按照類似于反應(yīng)方案A所示的方法將該中間體脫保護(hù)和官能化。
反應(yīng)方案B-1顯示了合成烯醇Triflate中間體B-4的另一途徑。
反應(yīng)方案C顯示了將適當(dāng)取代的氨基酸連接在中間體A-5上。基團(tuán)RSC代表取代基側(cè)鏈，優(yōu)選氨基酸側(cè)鏈。
如反應(yīng)方案D和F所示，將氨基羰基部分連接在二氫吡咯環(huán)的氮上可通過(guò)兩步合成來(lái)完成，由此將多種不同取代的胺引入本發(fā)明化合物內(nèi)。
反應(yīng)方案E顯示了在二氫吡咯環(huán)的2-位包含苯基和烷基的本發(fā)明化合物的合成。
如反應(yīng)方案G所示，也可以制備適當(dāng)取代的羥基烷基酰胺。
反應(yīng)方案H顯示了在酚氧上引入磷酸酯得到本發(fā)明化合物。磷酸酯還可以作為本發(fā)明化合物的一個(gè)更大的亞基的一部分被引入，例如在反應(yīng)方案I中所示的。
如反應(yīng)方案J所示，可將其他R6取代基引入到本發(fā)明化合物內(nèi)。因此，可使用合適的格氏試劑來(lái)代替在反應(yīng)方案B中使用的苯基硼酸。
如反應(yīng)方案K所示，還可以采用Suzuki偶聯(lián)來(lái)引入R6雜芳基取代基。
反應(yīng)方案A
反應(yīng)方案A-1 反應(yīng)方案B
反應(yīng)方案B-1 反應(yīng)方案C 反應(yīng)方案D
反應(yīng)方案E
反應(yīng)方案E(續(xù))
反應(yīng)方案F 反應(yīng)方案G
反應(yīng)方案H
反應(yīng)方案I
反應(yīng)方案J 反應(yīng)方案K
用途本發(fā)明化合物可具有很多應(yīng)用。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解，有絲分裂可通過(guò)多種途徑改變；也就是說(shuō)，可通過(guò)提高或降低有絲分裂途徑中組分的活性來(lái)影響有絲分裂。或者說(shuō)，有絲分裂可通過(guò)抑制或激活一些組分將平衡打破來(lái)影響(例如中斷)。類似方法可用于改變減數(shù)分裂。
在優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物可用于調(diào)節(jié)有絲分裂紡錘體形成，由此引起有絲分裂中延長(zhǎng)的細(xì)胞周期停滯。此處的“調(diào)節(jié)”是指改變有絲分裂紡錘體形成，包括增強(qiáng)或減弱有絲分裂形成。此處的“有絲分裂紡錘體形成”是指微管組織通過(guò)有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白形成雙極結(jié)構(gòu)。本文中的“有絲分裂紡錘體功能障礙”是指有絲分裂停滯和單級(jí)紡錘體形成。
本發(fā)明化合物可用于結(jié)合和/或調(diào)節(jié)有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白活性。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白是有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白bimC亞族的成員(如U.S.專利6,284,480，第5欄所述)。在進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案中，有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白是人KSP，然而本發(fā)明化合物也可用于調(diào)節(jié)其他生物體的有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白的活性。在此上下文中，調(diào)節(jié)是指提高或降低紡錘體極分離，引起畸形，即有絲分裂紡錘體極張開，或引起有絲分裂紡錘體的形態(tài)混亂。用于這些目的還包括在KSP定義內(nèi)的KSP的變體和/或片段。參見PCT Publ.WO01/31335“篩選細(xì)胞增殖劑的方法和診斷細(xì)胞增至病癥的方法”，1999年10月27日提交，將其引入本文以供參考。此外，本發(fā)明化合物也可以抑制其他有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白。
本發(fā)明化合物可用于治療細(xì)胞增殖疾病?？赏ㄟ^(guò)本發(fā)明提供的方法和組合物治療的病癥包括但不限于癌癥(下文進(jìn)一步討論)、自身免疫性疾病、關(guān)節(jié)炎、移植物排斥、炎性腸病，包括但不限于手術(shù)、血管成形術(shù)在內(nèi)的醫(yī)療干預(yù)之后的增殖等。應(yīng)當(dāng)理解，在某些情況下，細(xì)胞可能處于高或低增殖狀態(tài)(異常狀態(tài))，并且仍然需要治療。例如，在傷口愈合期間，細(xì)胞可以是“正?！痹鲋车?，但可能希望提高增殖。類似地，如上所述，細(xì)胞可能處于“正?！睜顟B(tài)，但是可能希望增殖調(diào)節(jié)來(lái)提高農(nóng)作物產(chǎn)量，這是通過(guò)直接促進(jìn)農(nóng)作物生長(zhǎng)或通過(guò)抑制不利地影響農(nóng)作物的植物或生物體的生長(zhǎng)來(lái)實(shí)現(xiàn)的。因此，在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明包括應(yīng)用于患有或接近患有這些病癥或疾病的細(xì)胞或個(gè)體。
本發(fā)明提供的化合物、組合物和方法可特別用于治療癌癥，包括實(shí)體瘤如皮膚癌、乳腺癌、腦癌、子宮肌癌、睪丸癌等，更特別地，可用本發(fā)明化合物、組合物和方法治療的癌癥包括但不限于心臟肉瘤(血管肉瘤、纖維肉瘤、橫紋肌肉瘤、脂肉瘤)、粘液瘤、橫紋肌瘤、纖維瘤、脂瘤和畸胎瘤；肺支氣管源性癌(鱗狀細(xì)胞、未分化小細(xì)胞、未分化大細(xì)胞、腺癌)、肺泡(細(xì)支氣管肺泡)癌、支氣管腺瘤、肉瘤、淋巴瘤、軟骨錯(cuò)構(gòu)瘤、間皮瘤；腸胃食管(鱗狀細(xì)胞癌、腺癌、平滑肌肉瘤、淋巴瘤)、胃(癌、淋巴瘤、平滑肌肉瘤)、胰腺(管狀腺癌、胰島素瘤、升糖素瘤、胃泌素瘤、類癌瘤、瘤)、小腸(腺癌、淋巴瘤、類癌瘤、Karposi′s肉瘤、平滑肌瘤、血管瘤、脂瘤、神經(jīng)纖維瘤、纖維瘤)、大腸(腺癌、管狀腺癌、絨毛狀腺癌、錯(cuò)構(gòu)瘤、平滑肌瘤)；生殖泌尿道腎(腺癌、維爾姆斯瘤[成腎細(xì)胞瘤]、淋巴瘤、白血病)、膀胱和尿道(鱗狀細(xì)胞癌、移行細(xì)胞癌、腺癌)、前列腺(腺癌、肉瘤)、睪丸(精原細(xì)胞瘤、畸胎瘤、胚胎癌、畸胎癌、絨膜癌、肉瘤、間質(zhì)細(xì)胞癌、纖維瘤、纖維腺癌、腺瘤樣瘤、脂瘤)；肝肝掌腫瘤(肝細(xì)胞癌)、膽管癌、成肝細(xì)胞瘤、血管肉瘤、肝細(xì)胞腺癌、血管瘤；骨骨原性肉瘤(骨肉瘤)、纖維肉瘤、惡性纖維組織細(xì)胞瘤、軟骨肉瘤、Ewing′s肉瘤、惡性淋巴瘤(網(wǎng)狀細(xì)胞肉瘤)、多發(fā)性骨髓瘤、惡性巨細(xì)胞瘤脊索瘤、骨軟骨瘤(骨軟骨外生骨疣)、良性軟骨瘤、成軟骨細(xì)胞瘤、軟骨粘液樣纖維瘤、骨樣骨瘤和巨細(xì)胞瘤；神經(jīng)系統(tǒng)頭顱(骨瘤、血管瘤、肉芽腫、黃瘤、畸形性骨炎)、腦膜(腦膜瘤、腦膜肉瘤、大腦膠質(zhì)瘤)、腦(星型細(xì)胞瘤、成髓細(xì)胞瘤、膠原瘤、室管膜瘤、生殖細(xì)胞瘤[松果體瘤]、多形性成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、少突膠原瘤、施萬(wàn)鞘瘤、成視網(wǎng)膜細(xì)胞瘤、先天性癌)、脊髓神經(jīng)纖維瘤、腦膜瘤、膠原瘤、肉瘤)；婦科子宮(子宮內(nèi)膜癌)、子宮頸(子宮頸癌、腫瘤前子宮頸發(fā)育不良)、卵巢(卵巢癌[漿液性囊腺癌、粘液性囊腺癌、未分類型癌]、粒層-膜細(xì)胞癌、塞-菜細(xì)胞癌、物性細(xì)胞癌、惡性畸胎癌)、女陰(鱗狀細(xì)胞癌、上皮內(nèi)癌、腺癌、纖維肉瘤、黑素瘤)、陰道(明細(xì)胞癌、鱗狀細(xì)胞癌、葡萄狀肉瘤(胚胎性橫紋肌肉瘤)、法洛皮歐管(癌))；血液血(骨髓白血病[急性和慢性]、急性成淋巴白血病、慢性淋巴細(xì)胞白血病、骨髓增生性疾病、多發(fā)性骨髓瘤、骨髓發(fā)育不良綜合癥)、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤[惡性淋巴瘤]；皮膚惡性黑素瘤、基底細(xì)胞瘤、鱗狀細(xì)胞癌、Karposi′s肉瘤、痣異常發(fā)育的痣、脂瘤、血管瘤、皮膚纖維瘤、瘢痕疙瘩、牛皮癬；以及腎上腺成神經(jīng)細(xì)胞瘤。因此，本文提供的術(shù)語(yǔ)“癌細(xì)胞”包括被任一種上述病癥影響的細(xì)胞。
本發(fā)明化合物還可以用作抗真菌劑，這是通過(guò)如U.S.專利6,284,480所述通過(guò)調(diào)節(jié)binC驅(qū)動(dòng)蛋白亞組的真菌成員的活性來(lái)實(shí)現(xiàn)的。
本發(fā)明化合物還可用于制備藥物，該藥物用于治療上文描述的細(xì)胞增生性疾病，特別是癌癥。
本發(fā)明化合物在藥物組合物可單獨(dú)或或優(yōu)選與可藥用載體、賦形劑或稀釋劑聯(lián)合，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)的藥學(xué)規(guī)范對(duì)哺乳動(dòng)物，優(yōu)選人給藥。本發(fā)明化合物可口服給藥或腸胃外給藥，包括靜脈、肌內(nèi)、腹膜、皮下、直腸和局部給藥途徑。
本文所用術(shù)語(yǔ)“組合物”包括含有特定量具體組分的產(chǎn)品，以及直接或間接由特定量具體組分的組合得到的任何產(chǎn)品。
含有活性組分的藥物組合物可以呈適于口服使用的形式，例如片劑、藥片、錠劑、水溶液或油混懸液、分散粉劑或粒劑、乳液、硬或軟膠囊、或糖漿劑或酏劑。用于口服使用的組合物可依據(jù)本領(lǐng)域用于制備藥物組合物的任何已知方法制得，并且這樣的組合物可包含一種或多種選自下列的物質(zhì)甜味劑、矯味劑、著色劑和防腐劑，以提供藥學(xué)美觀和適口的制劑。片劑含有活性組分以及與其混合的適于制備片劑的無(wú)毒的藥學(xué)上可接受的賦形劑。這些賦形劑可以是例如惰性稀釋劑如碳酸鈣、碳酸鈉、乳糖、磷酸鈣或磷酸鈉；制粒劑和崩解劑例如微晶纖維素、羧甲基纖維素鈉、玉米淀粉或藻酸；粘合劑例如淀粉、明膠、聚乙烯吡咯烷酮或阿拉伯樹膠，和潤(rùn)滑劑例如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石粉。片劑可以是未包衣的或者可通過(guò)抑制技術(shù)將其包衣以掩蔽藥物的令人不愉快的味道或者延遲其在胃腸道的崩解和吸收，以及由此在更長(zhǎng)的時(shí)間內(nèi)維持持續(xù)的作用。例如，可使用水溶性味道掩蔽材料例如羥丙基甲基纖維素或羥丙基纖維素或者時(shí)間延遲材料例如乙基纖維素、乙酸丁酸纖維素。
口服制劑還可以以硬明膠膠囊提供，其中活性組分與惰性固體稀釋劑例如碳酸鈣、磷酸鈣和高嶺土混合，或以軟明膠膠囊提供，其中活性成分與水溶性載體例如聚乙二醇或油性介質(zhì)例如花生油、液體石蠟或橄欖油混合。
水混懸液含有活性物質(zhì)以及與其混合的適于制備水混懸液的賦形劑。這樣的賦形劑是混懸劑例如羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、藻酸鈉、聚乙烯吡咯烷酮、黃蓍樹膠和阿拉伯樹膠；分散劑或潤(rùn)濕劑可以是天然磷脂例如卵磷脂、或烯化氧與脂肪酸的縮合產(chǎn)物，例如聚氧乙烯硬脂酸酯，或烯化氧與長(zhǎng)鏈脂族醇的縮合產(chǎn)物例如十七乙稀氧基鯨蠟醇，或者烯化氧與衍生自脂肪和和己糖醇的偏酯的縮合產(chǎn)物，例如聚氧乙烷山梨糖醇單油酸酯。水混懸液還可以含有一種或多種防腐劑例如對(duì)羥基苯甲酸乙酯或?qū)αu基苯甲酸正丙酯，一種或多種能夠著色劑，一種或多種矯味劑，和一種或多種甜味劑例如蔗糖、糖精或天冬甜素。
油混懸液可通過(guò)將活性組分懸浮在植物油例如花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油中，或者礦物油例如液體石蠟中來(lái)配制。油混懸液可含有增稠劑例如蜂蠟、硬石蠟或鯨蠟醇。還可加入甜味劑例如上述甜味劑和矯味劑來(lái)提供適口的口服制劑。這些組合物可通過(guò)加入抗氧化劑例如丁基化羥基苯甲醚或α-生育酚來(lái)保存。
適于通過(guò)加入水來(lái)制備水混懸液的分散粉劑和粒劑提供了與分散劑或潤(rùn)濕劑、懸浮劑和一種或多種防腐劑混合的活性組分。合適的分散劑或潤(rùn)濕劑和混懸劑的實(shí)例是上文所提到的那些。還可以存在另外的賦形劑例如甜味劑、矯味劑和著色劑。這些組合物可以通過(guò)加入抗氧劑例如抗壞血酸來(lái)保存。
本發(fā)明藥物組合物還可以呈水包油乳液的形式。油相可以是植物油例如橄欖油或花生油，或礦物油例如液體石蠟或這些油的混合物。合適的乳化劑是天然磷脂，如大豆卵磷脂、和衍生自脂肪酸與己糖醇酸酐的酯或偏酯，例如脫水山梨糖醇單油酸酯，和所述偏酯與烯化氧的縮合產(chǎn)物，例如聚氧乙烯山梨糖醇酐單油酸酯。乳液還可以包含甜味劑、矯味劑、防腐劑和抗氧劑。
糖漿劑和酏劑可以用甜味劑例如甘油、丙二醇、山梨糖醇或蔗糖配制。這樣的制劑還可包含緩和劑、防腐劑、矯味劑和著色劑以及抗氧劑。
藥物組合物可以呈無(wú)菌注射水溶液的形式?？墒褂玫目山邮艿妮d體和溶劑有水、林格溶液和等滲氯化鈉溶液。
無(wú)菌注射制劑還可以是無(wú)菌注射的水包油微乳，其中活性成分溶解在油相中。例如，可首先將活性成分溶解在大豆油與卵磷脂的混合物中。然后可將油溶液引入到水與甘油的混合物中，并加工形成微乳。
注射溶液或微乳可通過(guò)局部快速濃注引入到患者血流中?；蛘?，可能有利的是以能保持恒定的本發(fā)明化合物的循環(huán)濃度的方式施用溶液或微乳。為了保持這樣的恒定濃度，可使用連續(xù)靜脈遞送裝置。這類裝置的一個(gè)實(shí)例是Deltec CADD-PLUSTM型5400靜脈內(nèi)泵。
藥物組合物可以呈用于肌內(nèi)和皮下給藥的無(wú)菌可注射水或油混懸液的形式?？筛鶕?jù)已知方法，使用合適的上文提到的分散劑或潤(rùn)濕劑和混懸劑來(lái)配制該混懸液。無(wú)菌注射劑還可以是在無(wú)毒的胃腸外可接受的稀釋劑或或溶劑中的無(wú)菌注射溶液或混懸液。例如在1，3-丁二醇中的溶液。此外，無(wú)菌不揮發(fā)油常用作溶劑或混懸介質(zhì)。用于此目的的任何溫和的不會(huì)發(fā)油都可以使用，包括合成的甘油單酯或甘油二酯。此外，脂肪酸例如油酸可用于制備注射劑。
式I化合物還可以以用于將藥物直腸給藥的栓劑形式給藥。這些組合物可通過(guò)將藥物與合適的非刺激性賦形劑混合來(lái)制得。這樣的賦形劑在常溫下是固體。但是在直腸溫度下是液體，因此其在直腸熔化而釋放藥物。這樣的材料包括椰子油、甘油明膠，氫化植物油、不同分子量的聚乙二醇的混合物以及聚乙二醇的脂肪酸酯。
對(duì)于局部使用，可采用含有式I化合物的霜?jiǎng)⒏鄤?、凝膠劑、溶液或混懸液等(對(duì)于這種應(yīng)用，局部應(yīng)用應(yīng)當(dāng)包括漱口水和漱口劑)。
本發(fā)明化合物可以通過(guò)使用合適的鼻內(nèi)載體和遞送裝置以鼻內(nèi)形式給藥，或者可使用本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的經(jīng)鼻貼劑形式經(jīng)皮給藥。為了以經(jīng)皮遞送系統(tǒng)給藥，在整個(gè)給藥方案期間，劑量當(dāng)然應(yīng)當(dāng)是連續(xù)的而不是間歇的。本發(fā)明化合物還可以作為栓劑給藥，該栓劑所采用的基質(zhì)是例如椰子油、甘油明膠、氫化植物油、不同分子量的聚乙二醇的混合物以及聚乙二醇的脂肪酸酯。
當(dāng)把本發(fā)明化合物對(duì)人個(gè)體給藥時(shí)，日劑量通常由處方醫(yī)師決定，并且劑量一般隨個(gè)體患者的年齡、體重、性別和反應(yīng)以及患者癥狀的嚴(yán)重程度而變。
在一個(gè)示例性應(yīng)用中，將適量的化合物對(duì)進(jìn)行癌癥治療的哺乳動(dòng)物給藥。給藥劑量未約0.1mg/kg體重每天，優(yōu)選為0.5mg/kg體重-約40mg/kg體重每天。
本發(fā)明化合物還可以與已知的治療劑和抗癌劑聯(lián)合使用。例如，本發(fā)明化合物可以與已知的抗癌劑聯(lián)合使用。本發(fā)明化合物與其他抗癌劑或化療劑的組合在本發(fā)明范圍內(nèi)。這樣的活性劑的實(shí)例可參見Cancer Principles and Practice of Oncology，V.T.Devita和S.Hellman(編輯)，第6版(February 15，2001)，Lippincott Williams &Wilkins Publishers.本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠認(rèn)識(shí)到，根據(jù)藥物的特定特性以及所涉及的癌癥，活性劑的組合將是有用的。這樣的抗癌劑包括但不限于下列雌激素受體調(diào)節(jié)劑、雄激素受體調(diào)節(jié)劑、類視黃醇受體調(diào)節(jié)劑、細(xì)胞毒素劑/細(xì)胞生長(zhǎng)抑制劑、抗增殖劑、異戊烯基-蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑、HMG-CoA還原酶抑制劑、和其他血管生成抑制劑、細(xì)胞增殖和存活信號(hào)傳導(dǎo)抑制劑以及干擾細(xì)胞周期節(jié)點(diǎn)的活性劑。當(dāng)與放療聯(lián)合應(yīng)用時(shí)，本發(fā)明化合物特別有用。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物還可以與已知的抗癌劑，包括下列的抗癌劑聯(lián)合使用雌激素受體調(diào)節(jié)劑、雄激素受體調(diào)節(jié)劑、類視黃醇受體調(diào)節(jié)劑、細(xì)胞毒素劑、抗增殖劑、異戊烯基-蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑、HMG-CoA還原酶抑制劑、HIV蛋白酶抑制劑、逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑、和其他血管生成抑制劑。
“血管受體調(diào)節(jié)劑”是指無(wú)論采用什么機(jī)理，能干擾或抑制雌激素與受體結(jié)合的化合物。雌激素受體調(diào)節(jié)劑的實(shí)例包括但不限于他莫西芬、雷洛昔芬、艾多昔芬、LY353381、LY117081、托瑞米芬、福維司群、4-[7-(2，2-二甲基-1-氧代丙氧基-4-甲基-2-[4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯基]-2H-1-苯并吡喃-3-基]-苯基-2，2-二甲基丙酸酯，4，4′-二羥基二苯甲酮-2，4-二硝基苯基-腙和SH646。
“雄激素受體調(diào)節(jié)劑”是指無(wú)論采用什么機(jī)理，能干擾或抑制雄激素與受體結(jié)合的化合物。雌激素受體調(diào)節(jié)劑的實(shí)例包括非那雄胺(finasteride)和其他5α-還原酶抑制劑、尼魯米特、氟他胺、比卡魯胺、利阿唑和乙酰阿比特龍。
“類視黃醇受體調(diào)節(jié)劑”是指無(wú)論采用什么機(jī)理，能干擾或抑制類視黃醇與受體結(jié)合的化合物。這樣的類視黃醇的實(shí)例包括貝沙羅汀、維甲酸、13-順式-視黃酸、9-順式-視黃酸、α-二氟甲基鳥氨酸、ILX23-7553、反式-N-(4′-羥苯基)視黃酰胺和N-4-羧基苯基視黃酰胺。
“細(xì)胞毒素劑/細(xì)胞生長(zhǎng)抑制劑”是指主要通過(guò)直接干擾細(xì)胞功能而引起細(xì)胞死亡或者抑制細(xì)胞增殖、或者抑制或干擾細(xì)胞有絲分裂的化合物，包括烷化劑、腫瘤壞死因子、插入劑、缺氧可激活化合物、微管抑制劑/微管穩(wěn)定劑、有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白抑制劑、與有絲分裂進(jìn)程有關(guān)的激酶的抑制劑、抗代謝藥劑；生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑；激素/抗激素治療劑、造血生長(zhǎng)因子、單克隆抗體靶向治療劑、拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑、蛋白體抑制劑和遍在蛋白連接酶抑制劑。
細(xì)胞毒素劑的實(shí)例包括但不限于sertenef、惡液質(zhì)素、異環(huán)磷酰胺、他索納明、氯尼達(dá)明、卡鉑、六甲蜜胺、潑尼莫司汀、二溴衛(wèi)矛醇、雷莫司汀、福莫司汀、耐達(dá)鉑、奧沙利鉑、替莫唑胺、七鉑、雌莫司汀、甲苯磺酸英丙舒凡、曲磷胺、尼莫司汀、二溴螺氯胺、嘌嘧替派、洛鉑、沙鉑、profiromycin、順鉑、伊羅夫文、dexifosfamide、順式-胺二氯(2-甲基-吡啶)鉑、芐基鳥嘌呤、普磷酰胺、GPX100、(反式，反式，反式)-二-mu-(己烷-1，6-二胺)-mu-[二胺-鉑(II)]二[二胺(氯)鉑(II)]四氯化物、二吖丙啶基精氨、三氧化砷、1-(11-十二烷基氨基-10-羥基十一烷基)-3，7-二甲基黃嘌呤、佐柔比星、伊達(dá)比星、柔紅霉素、比生群、米托蒽醌、吡柔比星、吡奈非特、戊柔比星、氨柔比星、抗瘤酮、3′-去氨基-3′-嗎啉代-13-去氧代-10-羥基去甲柔紅霉素、，annamycin、加柔比星、伊利奈法德、MEN10755和4-去甲氧基-3-去氨基-3-吖丙啶基-4-甲基磺酰基-柔紅霉素(參見WO 00/50032)。
缺氧可激活化合物的一個(gè)實(shí)例是提拉扎明蛋白體抑制劑的一個(gè)實(shí)例包括但不限于乳胞素和MLN-341(Velcade)。
微管抑制劑/微管穩(wěn)定劑的實(shí)例包括紫杉醇、硫酸長(zhǎng)春地辛、3′，4′-二去氫-4′-去氧-8′-去甲長(zhǎng)春堿，多西他塞、根霉素、多拉司他汀、羥乙磺酸米伏布林、auristatin、西馬多丁、RPR109881、BMS184476、長(zhǎng)春氨寧、cryptophycin、2，3，4，5，6-五氟-N-(3-氟-4-甲氧基苯基)苯磺酰胺、脫水長(zhǎng)春堿、N，N-二甲基-L-纈氨?；?L-纈氨酰基-N-纈氨酰基-L-纈氨?；?L-脯氨?；?L-脯氨酸-叔-丁基酰、TDX258、大環(huán)內(nèi)酯類抗腫瘤劑(參見U.S.專利6,284,781和6，288，237)以及BMS188797。在一個(gè)實(shí)施方案中，大環(huán)內(nèi)酯類抗腫瘤劑包括在微管抑制劑/微管穩(wěn)定劑中。
拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑的某些實(shí)例是脫泊替康、hycaptamine、伊立替康、魯比替康、6-乙氧基丙酰基-3′，4′-O-外-亞芐基-教酒菌素、9-甲氧-N，N-二甲基-5-硝基吡啶并[3，4，5-kl]吖啶-2-(6H)丙胺，1-氨基-9-乙基-5-氟-2，3-二氫-9-羥基-4-甲基-1H，12H-苯并[de]吡喃并[3′，4′b，7]-中氮茚并[1，2b]喹啉-10，13(9H，15H)二酮，勒托替康、7-[2-(N-異丙基氨)乙基]-(20S)喜樹堿、BNP1350、BNPI1100、BN80915、BN80942、磷酸依托泊苷、替尼泊苷、索不佐生、2′-二甲基氨基-2′-去氧-依托泊苷，GL331、N-[2-(二甲基氨基)乙基]-9-羥基-5，6-二甲基-6H-吡啶并[4，3-b]咔唑-1-甲酰胺、asulacrine、(5a，5aB，8aa，9b)-9-[2-[N-[2-(二甲基氨基)乙基]-N-甲基氨基]乙基]-5-[4-羥基-3，5-二甲氧基苯基]-5，5a，6，8，8a，9-六氫呋喃并(3′，4′6，7)苯并(2，3-d)-1，3-二噁唑-6-酮、2，3-(亞甲基二氧基)-5-甲基-7-羥基-8-甲氧基苯并[c]-菲啶、6，9-二[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]異喹啉-5，10-二酮、5-(3-氨基丙基氨基)-7，10-二羥基-2-(2-羥基乙基氨基甲基)-6H-吡唑并[4，5，1-de]吖啶-6-酮、N-[1-[2(二乙基氨基)乙基氨基]-7-甲氧-9-氧代-9H-噻噸-4-基甲基]甲酰胺、N-(2-(二甲基氨基)乙基)吖啶-4-甲酰胺、6-[[2-(二甲基氨基)乙基]氨基]-3-羥基-7H-茚并[2，1-c]喹啉-7-酮、和地美司鈉。
有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白，特別是人有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白KSP的抑制劑的實(shí)例描述在PCT出版物WO01/30768和WO01/98278以及未決U.S.60/338,779(2001年12月6日提交)、60/338,344(2001年12月6日提交)、60/338,383(2001年12月6日提交)、60/338,380(2001年12月6日提交)、60/338,379(2001年12月6日提交)和60/344,453(2001年11月7日提交)中。在一個(gè)實(shí)施方案中，有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白抑制劑包括但不限于KSP抑制劑、MKLP1抑制劑、CENP-E抑制劑、MCAK抑制劑和Rab6-KIFL抑制劑。
“與有絲分裂進(jìn)程有關(guān)的激酶的抑制劑”包括但不限于aurora激酶抑制劑、Polo-樣激酶(PLK)抑制劑(特別是PLK-1抑制劑)、bub-1抑制劑和bub-R1抑制劑。
“抗增殖劑”包括反義RNA和DNA寡核苷酸例如G3139、ODN698、RVASKRAS、GEM231和INX3001，和抗代謝藥物例如伊諾他濱、卡莫氟、替加氟、噴絲他丁、去氧氟尿苷、三甲曲沙、氟達(dá)拉濱、卡培他濱、加洛他濱、阿糖胞苷ocfoafate、fosteabine鈉水合物、雷替曲塞、paltitrexid、乙嘧替氟、噻唑呋林、地西他濱、諾拉曲塞、培美曲賽、奈拉濱、2′-去氧-2′-亞甲基胞苷、2′-氟亞甲基-2′-去氧胞苷、N-[5-(2，3-二氫-苯并呋喃基)磺?；鵠-N′-(3，4-二氯苯基)脲、N6-[4-去氧-4-[N2-[2(E)，4(E)-十四碳二烯?；鵠甘氨?；被鵠-L-甘油基-B-L-甘露-吡喃庚糖基]腺嘌呤、aplidine、ecteinascidin、曲沙他賓、4-[2-氨基-4-氧代-4，6，7，8-四氫-3H-嘧啶并[5，4-b][1，4]噻嗪-6-基-(S)-乙基]-2，5-噻吩?；?L-谷氨酸、氨喋呤、5-氟尿嘧啶、阿拉諾新、11-乙酰--8-(氨基甲酰氧基甲基)-4-甲?；?6-甲氧基-14-氧雜-1，11-二氮雜四環(huán)(7.4.1.0.0)-十四碳-2，4，6-三烯-9-基乙酸酯、八氫吲嗪三醇、洛美曲索、右雷佐生、甲硫氨酸酶(methioninase)、2′-氰基-2′-去氧-N4-棕櫚?；?1-B-D-阿拉伯呋喃糖基胞嘧啶、3-氨基吡啶-2-甲醛縮氨基硫脲和曲妥單抗。
單克隆抗體靶向治療劑的實(shí)例包括具有連接在癌細(xì)胞特異性或靶向細(xì)胞特異性單克隆抗體上的細(xì)胞毒性劑或放射性同位素的治療劑。其實(shí)例包括Bexxar。
“HNG-CoA還原酶抑制劑”指的是3-羥基-3-甲基戊二酰-CoA還原酶的抑制劑?？梢杂矛F(xiàn)有技術(shù)眾所周知的測(cè)定來(lái)容易地確定對(duì)HMG-CoA還原酶具有抑制活性的化合物。例如，可以參見在U.S.專利4,231,938第6欄和WO 84/02131第30-33頁(yè)中所描述或列舉的測(cè)定。但在本文中使用時(shí)，術(shù)語(yǔ)“HMG-CoA還原酶抑制劑”和“HMG-CoA還原酶的抑制劑”的意思相同。
可以使用的HMG-CoA還原酶抑制劑的實(shí)例非限制性地包括洛伐他汀(MEVACOR；參見U.S.專利4,231,938、4,294,926和4,319,039)、辛伐他汀(ZOCOR；參見U.S.專利4,444,784、4,820,850和4,916,239)、普伐他汀(PRAVACHOL；參見U.S.專利4,346,227、4,537,859、4,410,629、5,030,447和5,180,589)、氟伐他汀(LESCOL；參見U.S.專利5,354,772、4,911,165、4,929,437、5,189,164、5,118,853、5,290,946和5,356,896)、阿托伐他汀(LIPITOR參見U.S.專利5,273,995、4,681,893、5,489,691和5,342,952)和西立伐他汀(也被稱作rivastatin和BAYCHOL；參見US專利5,177,080)。在M.Yalpani，“CholesterolLowering Drugs”Chernistry & Industry，pp.85-89(1996年2月5日)和US專利4,782,084和4,885,314中對(duì)可用本發(fā)明方法的這些和另外的HMG-CoA還原酶抑制劑的結(jié)構(gòu)式進(jìn)行了描述。本文所用的術(shù)語(yǔ)HMG-CoA還原酶抑制劑包括具有HMG-CoA還原酶抑制活性的化合物的所有藥學(xué)上可接受的內(nèi)酯和打開的-酸形式(即其內(nèi)酯環(huán)被打開從而形成游離酸)以及鹽和酯形式，因此，在本發(fā)明的范圍內(nèi)也包括使用該類鹽、酯、打開的酸和內(nèi)酯形式。內(nèi)酯部分及其相應(yīng)的打開的酸形式的例如如下面的結(jié)構(gòu)I和II所示。
內(nèi)酯 打開的酸I II在可以存在打開的酸形式的HMG-CoA還原酶抑制劑的情況中，并且所有該類形式都被包括在本文所用術(shù)語(yǔ)“HMG-CoA還原酶抑制劑”的含義中。在一個(gè)實(shí)施方案中，該HMG-CoA還原酶抑制劑洛伐他汀和辛伐他汀，并且在另一個(gè)實(shí)施方案中，是辛伐他汀。在本文中，涉及HMG-CoA還原酶抑制劑時(shí)的術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)上可接受的鹽”指的是本發(fā)明所用化合物無(wú)毒的鹽，其通?？梢酝ㄟ^(guò)將游離酸與適宜的有機(jī)堿或無(wú)機(jī)堿進(jìn)行反應(yīng)來(lái)進(jìn)行制備，特別是這些由陽(yáng)離子如鈉、鉀、鋁、鈣、鋰、鎂、鋅、和四甲基銨所形成的鹽以及由胺如氨、乙二胺、N-甲葡糖胺、賴氨酸、鳥氨酸、膽堿、N，N′-二芐基乙二胺、氯普魯卡因、二乙醇胺、普魯卡因、N-芐基苯乙胺、1-對(duì)氯芐基-2-吡咯烷-1′-基-甲基苯并咪唑、二乙胺、哌嗪和三(羥基甲基)氨基甲烷所形成的這些鹽。HMG-CoA還原酶抑制劑的鹽形式的另外的實(shí)例非限制性地包括乙酸鹽、苯磺酸鹽、苯甲酸鹽、碳酸氫鹽、硫酸氫鹽、酒石酸氫鹽、硼酸鹽、溴化物、乙二胺素乙酸鈣鹽、樟腦磺酸鹽、碳酸鹽、氯化物、棒酸鹽、檸檬酸鹽、二鹽酸鹽、乙二胺四乙酸鹽、乙二磺酸鹽、依托酸鹽、乙磺酸鹽、富馬酸鹽、葡庚糖酸鹽、葡萄糖酸鹽、谷氨酸鹽、乙醇酰對(duì)氨基苯胂酸鹽、己基間苯二酚鹽、哈胺(hydrabamine)、氫溴酸鹽、鹽酸鹽、羥萘甲酸鹽、碘化物、異硫代硫酸鹽、乳酸鹽、乳糖酸鹽、月桂酸鹽、蘋果酸鹽、硝酸鹽、油酸鹽、草酸鹽、撲酸鹽(pamaote)、棕櫚酸鹽、泛酸鹽(panthothenate)、磷酸鹽/二膦酸鹽、聚半乳糖醛酸鹽、水楊酸鹽、硬脂酸鹽、堿式乙酸鹽、琥珀酸鹽、鞣酸鹽、酒石酸鹽、茶氯酸鹽、甲苯磺酸鹽、三乙基碘化物和戊酸鹽。
所述HMG-CoA還原酶抑制劑的酯衍生物可以作為前藥，所述前藥當(dāng)被吸收到溫血?jiǎng)游锏难髦袝r(shí)可以以釋放出藥物形式的方式被裂解病是藥物療效得到了改善。
“異戊烯基-蛋白專業(yè)酶抑制劑”是指抑制任一種異戊烯基-蛋白轉(zhuǎn)移酶或其任何組合的化合物。所述異戊烯基-蛋白轉(zhuǎn)移酶包括法尼基-蛋白轉(zhuǎn)移酶(FPTase)、I型牛兒基牛兒基-蛋白專業(yè)酶(GGPTase-I)和II型牛兒基牛兒基-蛋白專業(yè)酶(GGPTase-II，也稱為RabGGPTase)。異戊烯基-蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑化合物的實(shí)例包括(±)-6-[氨基(4-氯苯基)(1-甲基1-1H-咪唑-5-基)甲基]-4-(3-氯苯基)-1-甲基-2(1H)-喹啉酮、(-)-6-[氨基(4-氯苯基)(1-甲基1-1H-咪唑-5-基)甲基]-4-(3-氯苯基)-1-甲基-2(1H)-喹啉酮、(+)-6-[氨基(4-氯苯基)(1-甲基-1H-咪唑-5-基)甲基]-4-(3-氯苯基)-1-甲基-2(1H)-喹啉酮、5(S)-正丁基-1-(2，3-二甲基苯基)-4-[1-(4-氰基苯基)-5-咪唑基甲基]-2-哌嗪酮、(S-1-(3-氯苯基)-4-[1-(4-氰基芐基)-5-咪唑基甲基]-5-[2-(乙磺?；?甲基)-2-哌嗪酮、5(S)-正丁基-1-(2-甲基苯基)-4-[1-(4-氰基芐基)-5-咪唑基甲基]-2-哌嗪酮、1-(3-氯苯基)-4-[1-(4-氰基苯基)-2-甲基-5-咪唑基甲基]-2-哌嗪酮、1-(2，2-二苯基乙基)-3-[N-(1-(4-氰基芐基)-1H-咪唑-5-基乙基)氨基甲酰基]哌啶、4-{5-[4-羥基甲基-4-(4-氯吡啶-2-基甲基)-哌啶-1-基甲基]-2-甲基咪唑-1-基甲基}芐腈、4-{5-[4-羥基甲基-4-(4-氯芐基)-哌啶-1-基甲基]-2-甲基咪唑-1-基甲基}芐腈、4-{3-[4-(2-氧代-2H-吡啶-1-基)芐基]-3H-咪唑-4-基甲基}芐腈、4-{3-[4-(5-氯-2-氧代-2H-[1，2′]聯(lián)吡啶-5′-基甲基]-3H-咪唑-4-基甲基}芐腈、4-{3-[4-(2-氧代-2H-[1，2′]聯(lián)吡啶-5′-基甲基]-3H-咪唑-4-基甲基}芐腈、4-[3-(2-氧代-1-苯基-1，2-二氫吡啶-4-基甲基)-3H-咪唑-4-基甲基}芐腈、18，19-二氫-19-氧代-5H，17H-6，1012，16-二亞甲基并-1H-咪唑并[4，3-c][1，11，4]二氧雜氮雜環(huán)十九碳炔-9-甲腈、(±)-19，20-二氫-19-氧代-5H-18，21-橋亞乙基-12，14-橋亞乙基-6，10-亞甲基并-22H-苯并[d]咪唑并[4，3-k][1，6，9，12]氧雜三氮雜環(huán)十八碳炔-9-甲腈、19，20-二氫-19-氧代-5H，17H-18，21-橋亞乙基-6，1012，16-二亞甲基并-22H-咪唑[3，4-h[1，8，11，14]氧雜三氮雜環(huán)二十碳炔-9-甲腈、和(±)-19，20-二氫-3-甲基-19-氧代-5H-18，21-橋亞乙基-12，14-橋亞乙基-6，10-亞甲基并-22H-苯并[d]咪唑[4，3-k][1，6，9，12]氧雜-氧雜三氮雜環(huán)十八碳炔-9-甲腈。
異戊烯基-蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑的其他實(shí)例可參見以下的出版物和專利WO 96/30343、WO 97/18813、WO 97/21701，WO 97/23478、WO97/38665、WO 98/28980、WO 98/29119、WO 95/32987、U.S.專利5,420,245、U.S.專利5,523,430、U.S.專利5,532,359、U.S.專利5,510,510、U.S.專利5,589,485、U.S.專利5,602,098、歐洲專利出版0618221、歐洲專利出版0675112、歐洲專利出版0604181、歐洲專利出版0696593、WO 94/19357、WO95/08542、WO 95/11917、WO95/12612、WO 95/12572、WO 95/10514、U.S.專利5,661,152、WO95/10515、WO95/10516、WO 95/24612、WO 95/34535、WO95/25086、WO 96/05529、WO96/06138、WO 96/06193、WO96/16443、WO 96/21701、WO 96/21456、WO96/22278、WO96/24611、WO 96/24612、WO96/05168、WO 96/05169、WO96/00736、U.S.專利5,571,792、WO 96/17861、WO 96/33159、WO96/34850、WO 96/34851、WO 96/30017、WO 96/30018、WO96/30362、WO 96/30363、WO 96/31111、WO 96/31477、WO96/31478、WO 96/31501、WO 97/00252、WO 97/03047、WO97/03050、WO 97/04785、WO 97/02920、WO 97/17070、WO97/23478、WO 97/26246、WO 97/30053、WO 97/44350、WO98/02436、和U.S.專利5,532,359。異戊烯基-蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑對(duì)血管生成的作用的實(shí)例參見European J.of Cancer，Vol.35，No.9，pp.1394-1401(1999)。
“血管生成抑制劑”是指無(wú)論采用什么機(jī)理，能抑制新血管形成的化合物。血管生成抑制劑的實(shí)例包括但不限于酪氨酸激酶抑制劑，例如酪氨酸激酶受體Flt-1(VEGFR1)和Flk-1/KDR(VEGFR2)的抑制劑，上皮衍生、成纖維細(xì)胞衍生或血小板衍生生長(zhǎng)因子的抑制劑、MMP(基質(zhì)金屬蛋白酶)抑制劑、整聯(lián)蛋白阻斷劑、干擾素-α、白介素-12、多硫酸戊聚糖、環(huán)加氧酶抑制劑，包括非甾體類抗炎劑(NASID)例如阿司匹林和布洛芬，以及選擇性環(huán)加氧酶-2抑制劑例如噻來(lái)考昔和羅非考昔(PNAS，Vol.89，p.7384(1992)；JNCI，Vol.69，p.475(1982)；Arch.Opthalmol.，Vol.108，p.573(1990)；Anat.Rec.，Vol.238，p.68(1994)；FEBS Letters，Vol.372，p.83(1995)；Clin，Orthop.Vol.313，p.76(1995)；J.Mol.Endocrinol.，Vol.16，p.107(1996)；Jpn.J.Pharmacol.，Vol.75，p.105(1997)；Cancer Res.，Vol.57，p.1625(1997)；Cell，Vol.93，p.705(1998)；Intl.J.Mol.Med.，Vol.2，p.715(1998)；J.Biol.Chem.，Vol.274，p.9116(1999))，甾類抗炎劑(例如皮質(zhì)甾類、鹽皮質(zhì)類固醇、地塞米松、潑尼松、潑尼松龍、甲潑尼松龍、倍他米松)、羧基酰氨基三唑、考布他汀A-4、角鯊胺、6-O-氯乙?；?羰基)-煙曲霉醇、沙力度胺、血管生長(zhǎng)抑素、肌原蛋白-1、血管緊張素II拮抗劑(參見Fernandez等人.，J.Lab.Clin.Med.105141-145(1985))，和VEGF的抗體(參見Nature Biotechnology，Vol.17，pp.963-968(October 1999)；Kim等人，Nature，362，841-844(1993)；WO 00/44777；和WO 00/61186)。
調(diào)節(jié)或抑制血管生成并且可以與本發(fā)明化合物聯(lián)合使用的其他治療劑包括調(diào)節(jié)或抑制凝血或血纖維蛋白溶解系統(tǒng)的活性劑(參見review in Clin.Chem.La.Med.38679-692(2000))。調(diào)節(jié)或抑制凝血或血纖維蛋白溶解系統(tǒng)的活性劑的實(shí)例包括但不限于肝素(參見Thromb.Haemost.8010-23(1998))、低分子量肝素、GPIIb/Ea拮抗劑(例如替羅非班)、化法林、凝血酶抑制劑和羧肽酶U抑制劑(還稱為活性凝血酶活化血纖維蛋白溶解抑制劑[TAFIa])(參見Thrombosis Res.101329-354(2001))。TAFIa抑制劑已經(jīng)描述在U.S.系列號(hào)60/310,927(于2001年8月8日提交)和60/349,925(于2002年1月18日提交)中。
“干擾細(xì)胞周期節(jié)點(diǎn)的活性劑”是指抑制轉(zhuǎn)換細(xì)胞周期節(jié)點(diǎn)信號(hào)的蛋白激酶，由此增強(qiáng)癌細(xì)胞對(duì)DNA破壞劑的敏感性的化合物。這樣的活性劑包括ATR、ATM、Chkl和Chk2激酶的抑制劑，以及cdk和cdc激酶抑制劑，其具體實(shí)例為7-羥基星孢素、flavopiridol、CYC202(Cyclacel)和BMS-387032。
“細(xì)胞增殖和存活信號(hào)傳導(dǎo)抑制劑“是指抑制細(xì)胞表面受體信號(hào)傳導(dǎo)級(jí)聯(lián)下游的化合物。這樣的活性劑包括絲氨酸/蘇氨酸激酶抑制劑(包括但不限于Akt的抑制劑例如在WO02/083064、WO02/083139、WO02/083140和WO02/083138中描述的那些)、Raf激酶抑制劑(例如BAY-43-9006)、MEK抑制劑(例如CI-1040和PD-098059)、mTOR抑制劑(例如Wyeth CCI-779)和PI3K抑制劑(例如LY294002)。
與NSAID的組合涉及使用作為有效COX-2抑制劑的NSAID。對(duì)于本說(shuō)明書的目的，如果其抑制COX-2的IC50為1μm或更低(通過(guò)細(xì)胞或微粒體測(cè)定的)，則NSAID是有效的。
本發(fā)明還包括與作為選擇性COX-2抑制劑的NSAID的組合。對(duì)于本說(shuō)明書的目的，作為選擇性COX-2抑制劑的NSAID定義為具有如下特異性的NSAID其對(duì)COX-2的抑制作用比對(duì)COX-1的抑制作用強(qiáng)至少100倍，這是通過(guò)關(guān)于COX-2的IC50與COX-1的IC50的比例來(lái)衡量的(通過(guò)細(xì)胞或微粒體測(cè)定評(píng)估的)。這樣的化合物包括但不限于在以下專利中公開的那些1995年12月12日公布的U.S.專利5,474,995，1999年1月19日公布的U.S.專利5,861,419，1999年12月14日公布的U.S.專利6,001,843，2000年2月1日公布的U.S.專利6,020,343，1995年4月25日公布的U.S.專利5,409,944，1995年7月25日公布的U.S.專利5,436,265，1996年7月16日公布的U.S.專利5,536,752，1996年8月27日公布的U.S.專利5,550,142，1997年2月18日公布的U.S.專利5,604,260，1997年12月16日公布的U.S.5,698,584,1998年1月20日公布的U.S.專利5,710,140，1994年7月21日公布的WO94/15932，1994年6月6日公布的U.S.專利5,344,991，1992年7月28日公布的U.S.專利5,134,142，1995年1月10日公布的U.S.專利5,380,738，1995年2月20日公布的U.S.專利5,393,790，1995年11月14日公布的U.S.專利5,466,823，1997年5月27日公布的U.S.專利5,633,272，和在1999年8月3日公布的U.S.專利5,932,598，所有這些專利均引入本文以供參考。
可特別用于本發(fā)明治療方法的COX-2抑制劑是3-苯基-4-(4-(甲基磺?；?苯基)-2-(5H)-呋喃酮；和
5-氯-3-(4-甲基磺?；?苯基-2-(2-甲基-5-吡啶基)吡啶； 或其藥學(xué)上可接受的鹽。
用于制備上述COX-2抑制劑的一般和具體合成方法可參見以下專利1995年12月2日公布的U.S.專利5,474,995，1999年1月19日公布的U.S.專利5,861,419，和1999年12月14日公布的U.S.專利6,001,843，所有這些專利均引入本文以供參考。
已描述為具體的COX-2抑制劑并因此可用于本發(fā)明的化合物包括但不限于以下化合物
或其藥學(xué)上可接受的鹽。
描述為具體的COX-2抑制劑并因此可用于本發(fā)明的化合物及其合成方法可參見以下專利、未決申請(qǐng)和出版物，其均引入本文以供參考1994年7月21日公布的WO94/15932，1994年6月6日公布的U..S專利5,344,991，1992年7月28日公布U.S.專利5,134,142，1995年1月10日公布的US專利5,380,738，1995年2月20日公布的U.S.專利5,393,790，1995年11月14日公布的U.S.專利5,466,823，1997年5月27日公布的U.S.專利5,633,272，和1999年8月3日公布的U.S.專利5,932,598。
是具體的COX-2抑制劑并因此可用于本發(fā)明的化合物及其合成方法可參見以下專利、未決申請(qǐng)和出版物，其均引入本文以供參考1995年12月12日公布的U.S.專利5,474,995，1999年1月19日公布的U.S.專利5,861,419，1999年12月14日公布U.S.專利6,001,843，2000年2月1日公布的U.S.專利6,020,343，1995年4月25日公布的U.S.專利5,409,944，1995年7月25日公布的U.S.專利5,436,265，1996年7月16日公布的U.S.專利5,536,752，1996年8月27日公布的U.S.專利5,550,142，1997年2月18日公布的U.S.專利5,604,260，1997年12月16日公布的U.S.專利5,698,584，1998年1月20日公布的U.S.專利5,710,140。
血管生成抑制劑的其它實(shí)施例包括但不限于內(nèi)皮生長(zhǎng)抑素、ukrain、豹蛙酶、IM862、5-甲氧基-4-[2-甲基-3-(3-甲基-2-丁烯基)環(huán)氧乙烷基]-1-氧雜螺[2，5]辛-6-基(氯乙?；?氨基甲酸酯、acetyldinanaline、5-氨基-1-[[3，5-二氯-4-(4-氯苯甲?；?苯基]甲基]-1H-1，2，3-三唑-4-甲酰胺、CM101、角鯊胺、考布他汀、RPI4610、NX31838、硫酸化甘露戊糖磷酸酯、7，7-(羧基-二[亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯基羰基亞氨基[N-甲基-4，2-吡咯]-羰基亞氨基]-二-(1，3-萘二磺酸酯)和3-[(2，4-二甲基吡咯-5-基)亞甲基]-2-二氫吲哚啉(SU5416)。
如上所用的“整聯(lián)蛋白阻斷劑”是指可以選擇性拮抗、抑制或抵消生理學(xué)配體與αvβ3整聯(lián)蛋白的結(jié)合的化合物，可以選擇性拮抗、抑制或抵消生理學(xué)配體與αvβ5整聯(lián)蛋白的結(jié)合化合物，可以拮抗、抑制或抵消生理學(xué)陪體αvβ3整聯(lián)蛋白和αvβ5整聯(lián)蛋白的結(jié)合化合物，以及可以拮抗、抑制或抵消在毛細(xì)管內(nèi)皮細(xì)胞上表達(dá)的特定的整聯(lián)蛋白的活性的化合物。該術(shù)語(yǔ)還涉及αvβ6、αvβ8、α1β1、α2β1、α5β1、α6β1和α6β4整聯(lián)蛋白的拮抗劑。該術(shù)語(yǔ)還涉及αvβ3、αvβ5、αvβ6、αvβ8、α1β1、α2β1、α5β1、α6β1和α6β4整聯(lián)蛋白的任何組合的拮抗劑。
酪氨酸激酶抑制劑的某些具體實(shí)例包括N-(三氟甲基苯基)-5-甲基異噁唑-4-甲酰胺、3-[(2，4-甲基吡咯-5-基)亞甲基]二氫吲哚-2-酮、17-(烯丙基氨基)-17-去甲氧基格爾德霉素、4-(3-氯-4-氟苯基氨基)-7-甲氧基-6-[3-(4-嗎啉基)丙氧基]喹唑啉、N-(3-乙炔基苯基)-6，7-二(2-甲氧基乙氧基)-4-喹唑啉胺、BIBX1382、2，3，9，10，11，12-六氫-10-(羥基甲基)-10-羥基-9-甲基-9，12-環(huán)氧-1H-二吲哚并[1，2，3-fg3′，2′，1′-kl]吡咯并[3，4-i][1，6]苯并二氮芳辛-1-酮、SH268、金雀異黃素、STI571、CEP2563、4-(3-氯苯基氨基)-5，6-二甲基-7H-咯并[2，3-d]嘧啶甲磺酸鹽、4-(3-溴-4-羥基苯基)氨基-6，7-二甲氧基喹唑啉、4-(4′-羥基苯基)氨基-6，7-二甲氧基喹唑啉、SU6668、STI571A、N-4-氯苯基-4-(4-吡啶基甲基)-1-酞嗪胺和EMD121974。
本發(fā)明方法還包括與其它抗癌化合物的組合。例如，本發(fā)明化合物與PPAR-γ(即PPAR-γ)激動(dòng)劑和PPAR-δ(即PPAR-δ)激動(dòng)劑的組合也可用于治療一些癌癥。PPAR-γ和PPAR-δ是核過(guò)氧化物酶體增殖劑激活的受體γ和δ。PPAR-γ在內(nèi)皮細(xì)胞上的表達(dá)及其參與血管生成已經(jīng)在文獻(xiàn)中報(bào)道過(guò)(參見J.Cardiovasc.Pharmacol.1998；31909-913；J.Biol.Chem.1999；2749116-9121；Invest.OphthaltnolVis.Sci.2000；412309-2317)。最近，已表明PPAR-γ激動(dòng)劑在體外抑制對(duì)于VEGF的血管生成反應(yīng)；曲格列酮和馬來(lái)酸羅格列酮抑制小鼠中視網(wǎng)膜新血管生成(Arch.Ophthamol.2001；119709-717)。PPAR-γ激動(dòng)劑和PPAR-γ/α激動(dòng)劑包括但不限于噻唑烷二酮(例如DRF2725、CS-011、曲格列酮、羅格列酮和吡格列酮)、非諾貝特、吉非貝齊、氯貝丁酯、GW2570、SB219994、AR-H039242、JTT-501、MCC-555、GW2331、GW409544、NN2344、KRP297、NP0110、DRF4158、NN622、GI262570、PNU182716、DRF552926、2-[(5，7-二丙基-3-三氟甲基-1，2-苯并異噁唑-6-基)氧基]-2-甲基丙酸(在USSN09/782,856中公開的)和2(R)-7-(3-(2-氯-4-(4-氟苯氧基)苯氧基)丙氧基)-2-乙基苯并二氫呋喃-2-甲酸(公開在USSN 60/235,708和60/244,697)。
本發(fā)明的另一實(shí)施方案是聯(lián)合使用本發(fā)明化合物與基因療法來(lái)治療癌癥。關(guān)于基因治療癌癥的策略的綜述參見Hall等人(Am J HurnGenet 61785-789，1997)和Kufe等人(Cancer Medicine，5th Ed，pp876-889，BC Decker，Hamilton 2000)?；蛑委熆捎糜谶f送任何腫瘤抑制基因。這樣的基因的實(shí)例包括但不限于p53，其可經(jīng)由重組病毒介導(dǎo)的基因傳遞來(lái)遞送(參見例如U.S.專利6,069,134)，uPA/uPAR拮抗劑(″Adenovirus-Mediated Delivery of a uPA/uPAR AntagonistSuppresses Angiogenesis-Dependent Tumor Growth and Disseminationin Mice，″Gene Therapy，August 1998；5(8)1105-13)，and interferongamma(JImmunol 2000；164217-222)。
本發(fā)明化合物還可以與固有多藥耐藥性(MDR)的抑制劑，尤其是高水平的轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白表達(dá)有關(guān)的MDR的抑制劑聯(lián)合用藥。這樣MDR抑制劑包括p-糖蛋白(P-gp)抑制劑例如LY335979、XR9576、OC144-093、R101922、VX853和PSC833(valspodar)。
本發(fā)明化合物可以與抗嘔吐劑聯(lián)合使用來(lái)治療可由于單獨(dú)使用或與放療聯(lián)合使用本發(fā)明化合物而導(dǎo)致的惡心或嘔吐，包括急性、延遲的、晚期和預(yù)計(jì)的嘔吐。為了預(yù)防和治療嘔吐，本發(fā)明化合物可以與其它以下藥物聯(lián)合使用其他抗嘔吐劑，尤其是神經(jīng)激肽-1受體拮抗劑，5HT3受體拮抗劑例如昂丹司瓊、格拉司瓊、托烷司瓊和zatisetron，GABAB受體激動(dòng)劑例如巴氯芬、皮質(zhì)甾類例如Decadron(地塞米松)、Kenalog、Aristocort、Nasalide、Preferid、Benecorten，或其他例如在U.S.專利2,789,118、2,990,401、3,048,581、3,126,375、3,929,768、3,996,359、3,928,326和3,749,712中的那些，抗多巴胺能劑例如吩噻嗪類(例如丙氯拉嗪、氟奮乃靜、硫利噠嗪和美索噠嗪)、甲氧氯普胺或屈大麻酚。為了治療或預(yù)防由于施用本發(fā)明化合物而導(dǎo)致的嘔吐，與選自神經(jīng)激肽-1受體拮抗劑、5HT3受體拮抗劑和皮質(zhì)甾類的抗嘔吐劑的聯(lián)合治療是優(yōu)選的。
用于與本發(fā)明化合物聯(lián)合使用的神經(jīng)激肽-1受體拮抗劑充分描述在例如以下文獻(xiàn)中U.S.專利5,162,339、5,232,929、5,242,930、5,373,003、5,387,595、5,459,270、5,494,926、5,496,833、5,637,699、5,719,147；歐洲專利出版EP 0360390、0394989、0428434、0429366、0430771、0436334、0443132、0482539、0498069、0499313、0512901、0512902、0514273、0514274、0514275、0514276、0515681、0517589、0520555、0522808、0528495、0532456、0533280、0536817、0545478、0558156、0577394、0585913、0590152、0599538、0610793、0634402、0686629、0693489、0694535、0699655、0699674、0707006、0708101、0709375、0709376、0714891、0723959、0733632和0776893；PCT國(guó)際專利出版WO 90/05525、90/05729、91/09844、91/18899、92/01688、92/06079、92/12151、92/15585、92/17449、92/20661、92/20676、92/21677、92/22569、93/00330、93/00331、93/01159、93/01165、93/01169、93/01170、93/06099、93/09116、93/10073、93/14084、93/14113、93/18023、93/19064、93/21155、93/21181、93/23380、93/24465、94/00440、94/01402、94/02461、94/02595、94/03429、94/03445、94/04494、94/04496、94/05625、94/07843、94/08997、94/10165、94/10167、94/10168、94/10170，94/11368、94/13639、94/13663、94/14767、94/15903、94/19320、94/19323、94/20500、94/26735、94/26740、94/29309、95/02595、95/04040、95/04042、95/06645、95/07886、95/07908、95/08549、95/11880、95/14017、95/15311、95/16679、95/17382、95/18124、95/18129、95/19344、95/20575、95/21819、95/22525、95/23798、95/26338、95/28418、95/30674、95/30687、95/33744、96/05181、96/05193、96/05203、96/06094、96/07649、96/10562、96/16939、96/18643、96/20197、96/21661、96/29304、96/29317、96/29326、96/29328、96/31214、96/32385、96/37489、97/01553、97/01554、97/03066、97/08144、97/14671、97/17362、97/18206、97/19084、97/19942和97/21702；和英國(guó)專利出版2266529、2268931、2269170、2269590、2271774、2292144、2293168、2293169和2302689。這些化合物的制備充分描述在上述專利和出版物中，它們均引入本文以供參考。
在一個(gè)實(shí)施方案中，用于與本發(fā)明化合物聯(lián)合使用的神經(jīng)激肽-1受體拮抗劑選自2-(R)-(1-(R)-(3，5-二(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟苯基)-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑基)甲基)嗎啉或其可藥用鹽，其描述在U.S.專利5,719,147中。
本發(fā)明化合物還可以與用于治療貧血的治療劑一起施用。這樣的貧血治療劑是例如連續(xù)eythropoiesis受體激活劑(例如epoetin alfa)。
本發(fā)明化合物還可以與用于治療中性白細(xì)胞減少癥的治療劑一起施用。這樣的中性白細(xì)胞減少癥治療劑是例如調(diào)節(jié)嗜中性白細(xì)胞產(chǎn)生和功能的造血生長(zhǎng)因子例如人粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)。G-CSF的實(shí)例包括非格司亭。
本發(fā)明化合物還可以與免疫增強(qiáng)藥物例如左旋咪唑、異丙肌苷和日達(dá)仙聯(lián)合給藥。
本發(fā)明的范圍包括本發(fā)明化合物與選自下列的第二種化合物的聯(lián)合應(yīng)用1)雌激素受體調(diào)節(jié)劑，2)雄激素受體調(diào)節(jié)劑，3)類視黃醇受體調(diào)節(jié)劑，4)細(xì)胞毒素劑/細(xì)胞生長(zhǎng)抑制劑，5)抗增殖劑，6)異戊烯基-蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑，7)HMG-CoA還原酶抑制劑，8)HIV蛋白酶抑制劑，9)逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑，10)血管生成抑制劑，11)PPAR-γ激動(dòng)劑，12)PPAR-δ激動(dòng)劑，13)固有多耐藥性的抑制劑，14)干擾細(xì)胞周期節(jié)點(diǎn)的活性劑。
15)用于治療貧血的治療劑16)用于治療中性白細(xì)胞減少癥的治療劑，17)免疫增強(qiáng)藥物，18)細(xì)胞增殖和存活信號(hào)傳導(dǎo)抑制劑，和
19)干擾細(xì)胞周期節(jié)點(diǎn)的活性劑。
在涉及本發(fā)明化合物時(shí)使用的術(shù)語(yǔ)“給藥”以及其變型(例如“施用”化合物)指的是將該化合物或化合物的前藥引入到需要進(jìn)行治療的動(dòng)物的系統(tǒng)中。當(dāng)本發(fā)明的化合物或其前藥以與一種或多種其它活性物質(zhì)(例如細(xì)胞毒害劑)的組合的形式被提供時(shí)，“給藥”及其變型各自應(yīng)被理解為包括該化合物或其前藥以及其它物質(zhì)的同時(shí)和相繼引入。
本文所用術(shù)語(yǔ)“組合物”包括以指定量包含指定成分的產(chǎn)品以及可以直接或間接由特定量特定成分的組合所產(chǎn)生的任何產(chǎn)品。
本文所用術(shù)語(yǔ)“治療有效量”指的是可以在組織、系統(tǒng)、動(dòng)物或中引起研究者、獸醫(yī)、醫(yī)生或其它臨床醫(yī)師所尋求的生物學(xué)或醫(yī)學(xué)反應(yīng)的活性化合物或藥學(xué)物質(zhì)的量。
術(shù)語(yǔ)“治療癌癥”或“癌癥治療”是指對(duì)患有癌癥的哺乳動(dòng)物給藥，并且是通過(guò)殺死癌細(xì)胞來(lái)減輕癌癥的作用，以及導(dǎo)致癌癥生長(zhǎng)和/或轉(zhuǎn)移被抑制的作用。
在一個(gè)實(shí)施方案中，用作第二種化合物的血管生成抑制劑選自酪氨酸激酶抑制劑，上皮衍生生長(zhǎng)因子抑制劑、成纖維細(xì)胞衍生生長(zhǎng)因子抑制劑、血小板衍生生長(zhǎng)因子抑制劑、MMP(基質(zhì)金屬蛋白酶)抑制劑、整聯(lián)蛋白阻斷劑、干擾素-α、白介素-12、多硫酸戊聚糖、環(huán)加氧酶抑制劑、羧基酰胺基三唑、考布他汀A-4、角鯊胺、6-O-氯乙?；?羰基)-煙曲霉醇(fumagillol)、沙利度胺、血管生長(zhǎng)抑素、肌原蛋白-1或VEGF的抗體。在一個(gè)實(shí)施方案中，雌激素受體調(diào)節(jié)劑是他莫昔芬或雷洛昔芬。
本發(fā)明范圍包括治療癌癥的方法，所述方法包括聯(lián)合施用治療有效量的式I化合物與放療和或選自下列的化合物1)雌激素受體調(diào)節(jié)劑，2)雄激素受體調(diào)節(jié)劑，3)類視黃醇受體調(diào)節(jié)劑，4)細(xì)胞毒素劑/細(xì)胞生長(zhǎng)抑制劑，5)抗增殖劑，6)異戊烯基-蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑，7)HMG-CoA還原酶抑制劑，
8)HIV蛋白酶抑制劑，9)逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑，10)血管生成抑制劑，11)PPAR-γ激動(dòng)劑，12)PPAR-δ激動(dòng)劑，13)固有多藥耐藥性的抑制劑，14)抗嘔吐劑，15)用于治療貧血的治療劑，16)用于治療中性白細(xì)胞減少癥的治療劑，17)免疫增強(qiáng)藥物，18)細(xì)胞增殖和存活信號(hào)傳導(dǎo)抑制劑，和19)干擾細(xì)胞周期節(jié)點(diǎn)的活性劑。
本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案是治療癌癥的方法，所述方法包括聯(lián)合施用治療有效量的式I化合物與紫杉醇或曲妥單抗。
本發(fā)明還包括治療或預(yù)防癌癥的方法，所述方法包括聯(lián)合施用治療有效量的式I化合物與COX-2抑制劑。
本發(fā)明還包括可用于治療或預(yù)防癌癥的藥物組合物，所述組合物包含治療有效量的式I化合物和選自下列化合物1)雌激素受體調(diào)節(jié)劑，2)雄激素受體調(diào)節(jié)劑，3)類視黃醇受體調(diào)節(jié)劑，4)細(xì)胞毒素劑/細(xì)胞生長(zhǎng)抑制劑，5)抗增殖劑，6)異戊烯基-蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑，7)HMG-CoA還原酶抑制劑，8)HIV蛋白酶抑制劑，9)逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑，10)血管生成抑制劑，11)PPAR-γ激動(dòng)劑，12)PPAR-δ激動(dòng)劑，13)固有多藥耐藥性的抑制劑，14)抗嘔吐劑，
15)用于治療貧血的治療劑，16)用于治療中性白細(xì)胞減少癥的治療劑，17)免疫增強(qiáng)藥物，18)細(xì)胞增殖和存活信號(hào)傳導(dǎo)抑制劑，和19)干擾細(xì)胞周期節(jié)點(diǎn)的活性劑。
本發(fā)明還涉及在用于篩選與KSP結(jié)合的其它化合物的方法中使用本發(fā)明化合物。為了在用于篩選與KSP驅(qū)動(dòng)蛋白結(jié)合的方法中采用本發(fā)明化合物，將KSP與載體結(jié)合，將本發(fā)明化合物(其是有絲分裂劑)加到測(cè)定中?；蛘撸瑢⒈景l(fā)明化合物與載體結(jié)合，并加入KSP。在可尋找的新結(jié)合劑當(dāng)中，化合物的類別包括特異性抗體、在化學(xué)庫(kù)篩選中鑒定的非天然結(jié)合劑、肽類似物等。用于篩選對(duì)人細(xì)胞有低毒性的候選物質(zhì)的測(cè)定方法是特別有用的。對(duì)于此目的可采用多種測(cè)定，包括標(biāo)記的體外蛋白-蛋白結(jié)合測(cè)定、電泳遷移率變動(dòng)分析、關(guān)于蛋白結(jié)合的免疫測(cè)定、功能測(cè)定(磷酸化測(cè)定等)等。
有絲分裂劑與KSP的結(jié)合的測(cè)定可以通過(guò)多種方式進(jìn)行。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，將有絲分裂劑(本發(fā)明化合物)標(biāo)記，例如用熒光或放射性部分標(biāo)記，并直接測(cè)定結(jié)合。例如可這樣進(jìn)行將全部或一部分KSP連接在固體載體上，加入標(biāo)記的有絲分裂劑(例如其中至少一個(gè)原子已經(jīng)被可檢測(cè)的同位素替代的本發(fā)明化合物)，洗去過(guò)量試劑，測(cè)定標(biāo)記物的量是否是存在于固體載體上的標(biāo)記物的量?？墒褂帽绢I(lǐng)域已知的各種阻斷劑和洗滌步驟。
在本文中，“標(biāo)記的”是指將化合物用能提供可檢測(cè)信號(hào)的標(biāo)記物直接或間接標(biāo)記，所述標(biāo)記物是例如放射性同位素、熒光標(biāo)記物、酶、抗體、顆粒例如磁性顆粒、化學(xué)發(fā)光標(biāo)記或特異性結(jié)合分子等。特異性結(jié)合分子包括成對(duì)物質(zhì)例如生物素與鏈抗生物素蛋白、地高辛與抗地高辛等。對(duì)于特異性結(jié)合成員，通常依據(jù)如上所述的已知方法用提供檢測(cè)的分子將互補(bǔ)成員標(biāo)記。標(biāo)記物可直接或間接提供可檢測(cè)信號(hào)。
在某些實(shí)施方案中，只有一個(gè)組分被標(biāo)記。例如，可使用125I或熒光團(tuán)將驅(qū)動(dòng)蛋白在酪氨酸位置上標(biāo)記?；蛘?，可使用不同標(biāo)記物將一種以上的組分標(biāo)記；例如使用125I來(lái)標(biāo)記蛋白，使用熒光團(tuán)來(lái)標(biāo)記有絲分裂劑。
本發(fā)明化合物還可以用作競(jìng)爭(zhēng)劑來(lái)篩選另外的候選藥物。本文所用的“候選生物活性劑”或“候選藥物”或等同物是指欲測(cè)定其生物活性的任何分子例如蛋白、寡肽、小有機(jī)分子、多糖、多核苷酸等。它們可能夠直接或間接改變細(xì)胞增殖表型或表達(dá)細(xì)胞增殖序列，包括核酸序列和蛋白序列。在其他情況下，篩選細(xì)胞增殖蛋白結(jié)合和/或活性的改變。該挑選的篩選可在存在或不存在微管的情況下進(jìn)行。當(dāng)篩選蛋白結(jié)合或活性時(shí)，優(yōu)選的實(shí)施方案將已知與特定蛋白例如聚合物結(jié)構(gòu)如微管和能源例如ATP結(jié)合的分子排除在外。在本文中，優(yōu)選的測(cè)定方案包括以其內(nèi)源天然狀態(tài)不與細(xì)胞增殖蛋白結(jié)合的候選物質(zhì)—在本文中稱為“外源性”物質(zhì)。在另一優(yōu)選的實(shí)施方案中，外源性物質(zhì)還不包括KSP的抗體。
候選物質(zhì)可包括多種化學(xué)類別，它們通常為有機(jī)分子，優(yōu)選是分子量大于100且小于約2,500道爾頓的小有機(jī)分子。候選物質(zhì)包含與蛋白發(fā)生結(jié)構(gòu)相互作用，特別是氫鍵和親脂性結(jié)合所必需的官能團(tuán)，通常包括至少一個(gè)胺、羰基、羥基、醚或羧基，優(yōu)選至少兩個(gè)化學(xué)官能團(tuán)。候選物質(zhì)通常包含被一個(gè)或多個(gè)上述官能團(tuán)取代的環(huán)碳或雜環(huán)結(jié)構(gòu)和/或芳環(huán)或多芳環(huán)結(jié)構(gòu)。也可以在生物分子當(dāng)中找到候選物質(zhì)，包括肽類、糖類、脂肪酸類、甾類化合物、嘌呤類化合物、嘧啶類化合物、其衍生物、結(jié)構(gòu)類似物或組合。肽是特別優(yōu)選的。
候選物質(zhì)可得自多種來(lái)源，包括合成或天然化合物的庫(kù)。例如，可采用多種方法來(lái)隨機(jī)和定向合成多種有機(jī)化合物和生物分子，包括表達(dá)隨機(jī)的寡核苷酸?；蛘?，細(xì)菌、真菌、植物和動(dòng)物提取物形式的天然化合物的庫(kù)是可以采用或易于產(chǎn)生的。此外，可通過(guò)常規(guī)化學(xué)、物理和生物化學(xué)手段來(lái)容易地修飾天然或合成產(chǎn)生的庫(kù)和化合物?？蓪?duì)已知的藥物活性劑進(jìn)行定向或隨機(jī)化學(xué)修飾，例如?；⑼榛?、酯化、酰胺化來(lái)產(chǎn)生結(jié)構(gòu)類似物。
競(jìng)爭(zhēng)篩選測(cè)定可通過(guò)將KSP和候選藥物在第一個(gè)樣本中合并來(lái)進(jìn)行。第二個(gè)樣本包括有絲分裂劑、KSP和候選藥物。這可通過(guò)在存在或不存在微管的情況下來(lái)進(jìn)行。測(cè)定候選藥物與兩個(gè)樣本的結(jié)合，兩個(gè)樣本之間的結(jié)合的改變或差異表明了存在能夠與KSP結(jié)合并潛在調(diào)節(jié)其活性的物質(zhì)。也就是說(shuō)，如果在第二個(gè)樣本中候選藥物的結(jié)合相對(duì)于第一個(gè)樣本有不同，則候選藥物能夠與KSP結(jié)合。
在優(yōu)選的實(shí)施方案中，通過(guò)使用競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合分析來(lái)測(cè)定候選物質(zhì)的結(jié)合。在該實(shí)施方案中，競(jìng)爭(zhēng)劑是已知能結(jié)合KSP的結(jié)合部分例如抗體、肽、結(jié)合伴侶、配體等。在一些情況下，在候選物質(zhì)與結(jié)合部分之間存在競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合，結(jié)果是結(jié)合部分置換候選物質(zhì)。
在一個(gè)實(shí)施方案中，將候選物質(zhì)標(biāo)記。首先將候選物質(zhì)或競(jìng)爭(zhēng)劑或二者加到KSP中，保持足以進(jìn)行結(jié)合(如果存在的話)的時(shí)間。在能促進(jìn)實(shí)現(xiàn)最佳活性的溫度下，一般在約4℃-約40℃進(jìn)行培養(yǎng)。
選擇培養(yǎng)時(shí)間來(lái)實(shí)現(xiàn)最佳活性，但是也可以進(jìn)行最優(yōu)化來(lái)實(shí)現(xiàn)快速高產(chǎn)量篩選。0.1-1小時(shí)通常是足夠的。通常除去或洗去過(guò)量試劑。然后加入第二個(gè)組分，之后測(cè)定存在還是不存在標(biāo)記的組分來(lái)確定是否發(fā)生結(jié)合。
在優(yōu)選的實(shí)施方案中，首先加入競(jìng)爭(zhēng)劑，然后加入候選物質(zhì)。競(jìng)爭(zhēng)劑被置換意味著候選物質(zhì)與KSP結(jié)合，并因此能夠結(jié)合以及潛在調(diào)節(jié)KSP的活性。在該實(shí)施方案中，可將任一組分標(biāo)記。因此，例如，如果將競(jìng)爭(zhēng)劑標(biāo)記，則在洗滌溶液中存在標(biāo)記物意味著被候選物質(zhì)置換?；蛘撸绻麑⒑蜻x物質(zhì)標(biāo)記，則在載體上存在標(biāo)記物意味著發(fā)生了置換。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，首先加入候選物質(zhì)，培養(yǎng)和洗滌，然后加入競(jìng)爭(zhēng)劑。不存在與競(jìng)爭(zhēng)劑的結(jié)合可意味著候選物質(zhì)以較高親和力與KSP結(jié)合。因此，如果將候選物質(zhì)標(biāo)記，則在載體上存在標(biāo)記物再加上沒有競(jìng)爭(zhēng)劑結(jié)合可意味著候選物質(zhì)能夠與KSP結(jié)合。
鑒定KSP的結(jié)合位點(diǎn)可能是有價(jià)值的。這可通過(guò)多種方式來(lái)進(jìn)行。在一個(gè)實(shí)施方案中，一旦已經(jīng)鑒定了KSP與有絲分裂劑結(jié)合，則將KSP破碎或改性，并重復(fù)測(cè)定來(lái)確定結(jié)合所必需的成分。
通過(guò)篩選能夠調(diào)節(jié)KSP活性的候選物質(zhì)來(lái)測(cè)試調(diào)節(jié)，包括以下步驟如上述將候選物質(zhì)與KSP合并，測(cè)定KSP生物活性的改變。因此，在該實(shí)施方案中，候選物質(zhì)應(yīng)當(dāng)既結(jié)合KSP(雖然這可以不是必需的)又改變?nèi)绫疚乃x的其生物或生化活性。方法包括如上所述用于測(cè)定細(xì)胞周期分配、細(xì)胞存活力、或如果存在的話有絲分裂紡錘體形態(tài)、活性、分布或量的改變的體外篩選方法和體內(nèi)篩選。
或者，可使用不同篩選來(lái)鑒定能夠與天然KSP結(jié)合，但是不能與變性KSP結(jié)合的候選藥物。
在這些測(cè)定中可使用陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照。優(yōu)選地，所有對(duì)照和測(cè)試樣本都以一式三份進(jìn)行，以獲得統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著的結(jié)果。將所有樣本培養(yǎng)足夠時(shí)間以讓物質(zhì)與蛋白結(jié)合。培養(yǎng)后，洗滌所有樣本以使其包含非特異性結(jié)合的物質(zhì)，并測(cè)定結(jié)合的、通常標(biāo)記的物質(zhì)的量。例如，當(dāng)采用放射性標(biāo)記物時(shí)，可在閃爍計(jì)數(shù)器中計(jì)數(shù)樣本以測(cè)定結(jié)合的化合物的量。
在這些篩選測(cè)定中可使用多種其它試劑。包括可用于促進(jìn)實(shí)現(xiàn)最佳蛋白-蛋白結(jié)合和/或降低非特異性或背景相互作用的試劑例如鹽、中性蛋白如白蛋白、洗滌劑等。還可以使用可提高測(cè)定效率的試劑例如蛋白酶抑制劑、核酸酶抑制劑、抗微生物劑等?？蓪⒔M分的混合物以提供必需結(jié)合的任何順序加入。
通過(guò)本文所包含的教導(dǎo)，本發(fā)明的這些和其它方面都將是顯而易見的。
測(cè)定通過(guò)下述分析測(cè)試在實(shí)施中描述的本發(fā)明化合物，結(jié)果發(fā)現(xiàn)它們具有驅(qū)動(dòng)蛋白抑制活性。其他測(cè)定是本領(lǐng)域已知的并且可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員容易地進(jìn)行(參見例如PCT出版WO 01/30768，2001年5月3日，第18-22頁(yè))。
I.驅(qū)動(dòng)蛋白ATPase體外測(cè)定人多組氨酸標(biāo)記的KSP馬達(dá)區(qū)的克隆和表達(dá)(KSP(367H))通過(guò)PCR，使用pBluescript全長(zhǎng)人KSP構(gòu)建物(Blangy等.，Cell，vol.83，ppll59-1169，1995)作為模板來(lái)克隆用于表達(dá)人KSP馬達(dá)區(qū)構(gòu)建物的質(zhì)粒。使用N-末端引物5′-GCAACGATTAATATGGCGTCGCAGCCAAATTCGTCTGCGAAG(SEQ.ID.NO.1)和C-末端5′-GCAACGCTCGAGTCAGTGATGATGGTGGTGATGCTGATTCACTTCAGGCTTATTCAATAT(SEQ.ID.NO.2)開擴(kuò)增馬達(dá)區(qū)和預(yù)連接區(qū)。將PCR產(chǎn)物用AseI和AhoI消化，連接到pRSETa(Invitrogen)的NdeI/XhoI消化產(chǎn)物內(nèi)，并轉(zhuǎn)化到大腸桿菌E.coli BL21(DE3)內(nèi)。
將細(xì)胞在37℃生長(zhǎng)至OD600為0.5。將培養(yǎng)物冷卻至室溫后，用100μm的IPTG誘導(dǎo)KSP的表達(dá)，并繼續(xù)培養(yǎng)過(guò)夜。通過(guò)離心將細(xì)胞沉淀，用冰冷的PBS洗滌一次。將細(xì)胞沉淀快速冷凍，-80℃貯藏。
蛋白純化將細(xì)胞沉淀在冰上融化并重新混懸于具有細(xì)胞溶解作用的緩沖液(50mM K-HEPES，pH 8.0，250mM KCl，0.1％ Tween，10mM咪唑，0.5mM Mg-ATP，1mM PMSF，2mM benzimidine，1×完全蛋白酶抑制劑混合物(Roche))中。將細(xì)胞混懸液與1mg/ml溶菌酶和5mM β-巰基乙醇在冰上培養(yǎng)10分鐘，然后超聲處理(3×30秒)。所有隨后的操作都在4℃進(jìn)行。將溶胞產(chǎn)物以40,000×g離心40分鐘。將上清液在緩沖液A(50mM K-HEPES，pH 6.8，1mM MgCl2，1mM EGTA，10μMMg-ATP，1mM DTT)中稀釋并裝填到SP瓊脂糖柱上(Pharmacia，5ml筒)。用KCl在緩沖液A中的濃度為0-750mM的緩沖液A進(jìn)行梯度洗脫。收集含有KSP的級(jí)分，與Ni-NTA樹脂(Qiagen)一起培養(yǎng)1小時(shí)。將樹脂用緩沖液B(具有細(xì)胞溶解作用的緩沖液減去PMSF和蛋白酶抑制劑混合物)洗滌3次，然后進(jìn)行3次15分鐘的培養(yǎng)，用緩沖液B洗滌。最后，將樹脂進(jìn)行培養(yǎng)并用緩沖液C(除了pH6.0以外與緩沖液B相同)洗滌，該操作進(jìn)行3次，每次15分鐘，然后將其倒入柱內(nèi)。再用緩沖洗脫液(除了150mMKCl和250mM咪唑以外與緩沖液B相同)將KSP洗下來(lái)。合并含有KSP的級(jí)分，在蔗糖中稀釋至10％，在-80℃貯藏。
從由牛腦分離的微管蛋白制備微管。將純化的微管蛋白(＞97％不含MAP)以1mg/ml在37℃并且在10μm紫杉醇、1mM DTT、1mMGTP存在下在BRB80緩沖液(80mM K-PIPES，1mM EGTA，1mMMgCl2，pH 6.8)中聚合。通過(guò)離心、除去上清液將所的微管與未聚合的微管蛋白分離。然后將含有微管的沉淀輕輕地重新混懸含有10μm紫杉醇、1mM DTT、50μg/ml氨芐青霉素和5μg/ml氯霉素的BRB80中。
將驅(qū)動(dòng)蛋白馬達(dá)區(qū)與微管、1mM ATP(1∶1MgCl2∶Na-ATP)和化合物在含有80mM K-HEPES(pH 7.0)、1mM EGTA、1mM DTT、1mMMgCl2和50mM KCl的緩沖液中于23℃培養(yǎng)。通過(guò)用80mM HEPES和80mM EDTA的終緩沖液組合物進(jìn)行2-10倍稀釋來(lái)終止反應(yīng)(或者，可選擇地，以1∶1的體積比例將反應(yīng)混合物加到終止緩沖液(1.8M KCl和50mM EDTA)中)。通過(guò)加入1.5倍體積的淬滅C(例如將120μl淬滅C加到40μl反應(yīng)混合物+40μl終止緩沖液的混合物中)。經(jīng)由喹哪啶紅/鉬酸銨分析來(lái)測(cè)定由ATP水解反應(yīng)所生成的游離磷酸鹽。淬滅A含有0.1mg/ml喹哪啶紅和0.14％聚乙烯醇；淬滅B含有在1.15M硫酸中的12.3mM鉬酸銨四水合物。淬滅C是2∶1比例的淬滅A淬滅B。將該反應(yīng)在23℃培養(yǎng)5-10分鐘，然后在540nM測(cè)定磷-鉬酸鹽絡(luò)合物的吸收度。
II.細(xì)胞增殖測(cè)定將細(xì)胞鋪在96-孔組織培養(yǎng)平板上，細(xì)胞的密度使得能夠在24、48和72小時(shí)的時(shí)間對(duì)數(shù)生長(zhǎng)，讓其粘著過(guò)夜。在接下來(lái)的一天，向所有平板中以10.5log滴定加入化合物。每一滴定系列以一式三份進(jìn)行，在整個(gè)測(cè)定期間保持0.1％的恒定DMSO濃度。還包括單獨(dú)的0.1％DMSO對(duì)照。每一化合物稀釋系列在不含血清的培養(yǎng)基中進(jìn)行。測(cè)定中血清的終濃度在200μL體積的培養(yǎng)基中是5％。加入藥物后，在第24、48或72小時(shí)將20微升Alamar藍(lán)染色試劑加到滴定板上的每個(gè)樣本和對(duì)照孔中，37℃下培養(yǎng)。6-12小時(shí)后，在CytoFluorII平板讀數(shù)計(jì)上使用530-560納米的激發(fā)波長(zhǎng)和590納米的發(fā)射波長(zhǎng)分析Alamar藍(lán)熒光。
通過(guò)以化合物濃度作為x-軸，每一滴定點(diǎn)的細(xì)胞生長(zhǎng)的平均抑制百分比作為y-軸繪制曲線來(lái)推導(dǎo)出細(xì)胞毒性EC50。對(duì)于測(cè)定，將已經(jīng)用單獨(dú)的載體處理的對(duì)照孔中的細(xì)胞生長(zhǎng)定義為100％，將用化合物處理的細(xì)胞的生長(zhǎng)與該值進(jìn)行比較。采用對(duì)數(shù)4-參數(shù)曲線擬合，使用內(nèi)部專用軟件來(lái)計(jì)算以百分比表示的細(xì)胞毒性值和拐點(diǎn)。
細(xì)胞毒性百分比定義為％細(xì)胞毒性(熒光對(duì)照)-(熒光樣本)×100×(熒光對(duì)照)-1拐點(diǎn)是以細(xì)胞毒性EC50報(bào)告出來(lái)的。
III.通過(guò)FACS評(píng)估有絲分裂停滯和細(xì)胞程序死亡通過(guò)測(cè)定處理的細(xì)胞群體中的DNA含量，使用FACS分析來(lái)評(píng)估化合物阻止細(xì)胞有絲分裂和誘導(dǎo)細(xì)胞程序死亡的能力。將細(xì)胞以每6cm2組織培養(yǎng)皿1.4×106個(gè)細(xì)胞的密度接種以粘著過(guò)夜。然后將細(xì)胞用載體(0.1％ DMSO)或滴定系列的化合物處理8-16小時(shí)。處理后，在指定時(shí)間通過(guò)胰蛋白酶處理來(lái)收獲細(xì)胞，并通過(guò)離心將細(xì)胞沉淀。將細(xì)胞沉淀在PBS中洗滌，在70％乙醇中固定，然后4℃貯藏過(guò)夜或更長(zhǎng)時(shí)間。
對(duì)于FACS分析，將至少5000,000個(gè)固定的細(xì)胞沉淀，通過(guò)吸引除去70％乙醇。然后將細(xì)胞在4℃與Rnase A(50Kunitz單位/ml)和碘化丙啶(50μg/ml)培養(yǎng)30分鐘，然后使用Becton DickinsonFACSCaliber分析。使用Modfit細(xì)胞周期分析模型軟件(Verity Inc.)來(lái)分析數(shù)據(jù)(得自10,000個(gè)細(xì)胞)。
通過(guò)以化合物濃度作為x-軸，每一滴定點(diǎn)處于細(xì)胞周期G2/M期的細(xì)胞百分比(通過(guò)碘化丙啶熒光測(cè)定的)作為y-軸繪制曲線來(lái)推導(dǎo)出有絲分裂停滯的EC50。采用對(duì)數(shù)4-參數(shù)曲線擬合，使用SigmaPlot程序來(lái)進(jìn)行數(shù)據(jù)分析以計(jì)算拐點(diǎn)。拐點(diǎn)是以有絲分裂停滯的EC50報(bào)告出來(lái)的。使用類似方法來(lái)確定化合物對(duì)于有絲分裂的EC50。將在每一滴定點(diǎn)的細(xì)胞程序死亡的細(xì)胞的百分比(通過(guò)碘化丙啶熒光測(cè)定的)作為y-軸繪制曲線，如上所述進(jìn)行類似分析。
VI.測(cè)定單極紡錘體免疫熒光顯微鏡法用于DNA、微管蛋白和pericentrin的免疫熒光染色的方法基本如Kappoor等.(2000)J.Cell Biol.150975-988所述。對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)研究，將細(xì)胞鋪在組織培養(yǎng)處理的玻璃室載玻片上，讓其粘著過(guò)夜。然后將細(xì)胞與化合物一起培養(yǎng)4-16小時(shí)。培養(yǎng)完成后，吸出培養(yǎng)物和藥物，從載玻片上去除室和墊圈。然后根據(jù)參照方案將細(xì)胞滲透、固定、洗滌、并阻斷非特異性抗體結(jié)合。在阻斷之前，用二甲苯將石臘植入的腫瘤切片脫石臘，通過(guò)乙醇系列進(jìn)行再水合處理。將載玻片在第一抗體(小鼠單克隆抗-α-微管蛋白抗體，得自Sigma的克隆DM1A，1∶500稀釋；得自Covance的兔多克隆抗-pericentrin抗體，1∶2000稀釋)中于4℃培養(yǎng)過(guò)夜。洗滌后，將載玻片與稀釋至15μg/ml的綴合的第二抗體(對(duì)于微管蛋白，F(xiàn)ITC-綴合的驢抗-小鼠IgG；對(duì)于pericentrin，得克薩斯紅-綴合的驢抗-兔IgG)于室溫培養(yǎng)1小時(shí)。然后洗滌載玻片，用Hoechst 33342復(fù)染色以顯現(xiàn)DNA。使用Metamorph去卷曲和成像軟件，利用在Nikon落射熒光顯微鏡上的100×油浸物鏡來(lái)觀察免疫染色樣本的圖像。
實(shí)施例通過(guò)實(shí)施例來(lái)幫助進(jìn)一步理解本發(fā)明。所采用的具體材料、物種和條件都是為了舉例說(shuō)明本發(fā)明，而不是限制本發(fā)明的合理范圍。
反應(yīng)方案1
步驟1四氟硼酸2-氯-5-氟苯重氮鹽(1-1)在0℃，將四氟硼酸亞硝鹽(802mg，6.87mmol)加到2-氯-5-氟苯胺(1.00g，6.87mmol)在乙腈(50mL)內(nèi)的溶液中。將所得混合物攪拌1小時(shí)，然后用乙醚(150mL)稀釋。將沉淀過(guò)濾，風(fēng)干得到四氟硼酸2-氯-5-氟苯重氮鹽(1-1)，為灰白色固體。1H NMR(300MHz，CD3OD)δ8.66(ddd，1H，J＝6.7，2.1，1.0Hz)，8.16(m，2H)。
步驟23-(2-氯-5-五氟苯基)-2，3-二氫-1H-吡咯-1-甲酸叔丁酯(1-2)在23℃，將乙酸鈀(II)(24mg，0.11mmol，0.020當(dāng)量)加到2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酸叔丁酯(900mg，5.32mmol)和四氟硼酸2-氯-5-氟苯重氮鹽(1-1，1.30g，5.32mmol)在水與四氯化碳(1∶1，50mL)內(nèi)的劇烈攪拌著的脫氧氣的混合物中，將所得混合物攪拌20小時(shí)。將該反應(yīng)混合物在飽和碳酸氫鈉水溶液(150mL)與乙酸乙酯(2×150mL)之間分配。將合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥并濃縮。將殘余物溶解在甲苯中(100mL)中，將所得溶液真空濃縮以促進(jìn)共沸除去殘余水分。然后在0℃將2，6-二甲苯吡啶(1.24mL，10.6mmol，2.00當(dāng)量)和三氟乙酸酐(0.558mL，2.66mmol，0.500當(dāng)量)一次加到殘余物在甲苯(100mL)中的溶液中。將所得混合物在0℃攪拌8小時(shí)，然后溫?zé)嶂?3℃，再攪拌8小時(shí)。將該反應(yīng)混合物加熱回流1小時(shí)，然后冷卻至23℃并濃縮。將殘余物在乙酸乙酯(100mL)與飽和碳酸氫鈉水溶液(100mL)之間分配。將有機(jī)層用硫酸鈉干燥并濃縮。通過(guò)快速柱色譜純化殘余物(首先是己烷，梯度變至60％EtOAc在己烷中的混合物)，得到3-(2-氯-5-五氟苯基)-2，3-二氫-1H-吡咯-1-甲酸叔丁酯(1-2)，為橙色油狀物。LRMS m/z(M+H-CH3)283.0實(shí)測(cè)值，283.1計(jì)算值。
步驟34-(2-氯-5-五氟苯基)-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酸叔丁酯(1-4)在23℃，將三(二亞芐基丙酮)二鈀(0)(20mg，022mmol，0.020當(dāng)量)加到3-(2-氯-5-氟苯基)-2，3-二氫-1H-吡咯-1-甲酸叔丁酯(1-2，330mg，1.11mmol，1當(dāng)量)、四氟硼酸苯重氮鹽(1-3，通過(guò)所述制備1-1的方法由苯胺制備，213mg，1.11mmol，1.00當(dāng)量)，和乙酸鈉三水合物(459mg，3.32mmol，3.00當(dāng)量)在乙腈內(nèi)的脫氧氣的混合物中。將該反應(yīng)混合物攪拌16小時(shí)，然后在飽和碳酸氫鈉水溶液(50mL)乙酸乙酯(2×70mL)之間分配。將合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥并濃縮。通過(guò)快速柱色譜純化殘余物(首先是己烷，然后梯度變至40％己烷在EtOAc中的混合物)，得到4-(2-氯-5-五氟苯基)-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酸叔丁酯(1-4)，為深橙色油狀物。LRMS m/z(M+H-CH3)359.0實(shí)測(cè)值，359.1計(jì)算值。
步驟44-(2-氯-5-氟苯基)-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯(1-5)在23℃，將三氟乙酸(10mL)加到4-(2-氯-5-氟苯基)-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酸叔丁酯(1-4，320mg，0.856mmol，1當(dāng)量)在二氯甲烷(40mL)內(nèi)的溶液中，將所得混合物攪拌30分鐘，然后濃縮，得到4-(2-氯-5-氟苯基)-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯(1-5)，為TFA鹽(棕色油狀物)LRMS m/z(M+H)274.1實(shí)測(cè)值，274.1計(jì)算值。
步驟54-(2-氯-5-氟苯基)-N，N-二甲基-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酰胺(1-6)在23℃，將三乙胺(0.600mL，4.28mmol，5.00當(dāng)量)和二甲基氨基甲酰氯(0.080mL，0.86mmol，1.00當(dāng)量)加到4-(2-氯-5-氟苯基)-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯(1-5，TFA鹽，0.856mmol，1當(dāng)量)在二氯甲烷(50mL)內(nèi)的溶液中，將所得混合物攪拌2小時(shí)，然后濃縮。將殘余物在飽和碳酸氫鈉水溶液(75mL)與乙酸乙酯(100mL)之間分配。將有機(jī)層用硫酸鈉干燥并濃縮。將殘余物混懸在乙醚(2mL)中，然后將沉淀過(guò)濾，得到4-(2-氯-5-氟苯基)-N，N-二甲基-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酰胺(1-6)，為灰白色固體。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.40-7.30(m，5H)，7.26(m，1H)，7.03(dd，1H，J＝9.0，2.9Hz)，6.97(m，1H)，6.24(m，1H)，6.15(m，1H)，4.86(ddd，1H，J＝13.9，5.6，2.2Hz)，4.49(dt，1H，J＝13.9，2.0Hz)，2.86(s，6H).LRMS m/z(M+H)345.0實(shí)測(cè)值，345.1計(jì)算值。
方案2 步驟1四氟硼酸2，5-二氟苯重氮鹽(2-1)在0℃，將四氟硼酸亞硝鹽(902mg，7.75mmol，1.00當(dāng)量)加到2，5-二氟苯胺(0.780mL，7.75mmol，1當(dāng)量)在乙腈(50mL)內(nèi)的溶液中。將所得混合物攪拌1小時(shí)，然后用乙醚(150mL)稀釋。將沉淀過(guò)濾，風(fēng)干得到四氟硼酸2，5-二氟苯重氮鹽(2-1)，為棕褐色固體。1H NMR(300MHz，CD3OD)δ8.54(m，1H)，8.24(m，1H)，7.95(m，1H)。
步驟23-(2，5-二氟苯基)-2.3-二氫-1H-吡咯-1-甲酸叔丁酯(2-2)在23℃，將乙酸鈀(II)(67mg，0.30mmol，0.020當(dāng)量)加到2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酸叔丁酯(2.59mL，15.0mmol，1當(dāng)量)和四氟硼酸2，5-二氟苯重氮鹽(2-1，3.42g，15.0mmol，1.00當(dāng)量)在水與四氯化碳(1∶1，150mL)內(nèi)的劇烈攪拌著的脫氧氣的混合物中，將所得混合物攪拌20小時(shí)。然后將該反應(yīng)混合物濃縮并將殘余物在乙酸乙酯(300mL)與飽和碳酸氫鈉水溶液(75mL)之間分配。將有機(jī)層用鹽水洗滌，然后用硫酸鈉干燥并濃縮。將殘余物溶解在甲苯中(200mL)中，將所得溶液真空濃縮以促進(jìn)共沸除去殘余水分。在-10℃，將2，6-二甲苯吡啶(3.50mL，30.0mmol，2.00當(dāng)量)和三氯乙酸酐(1.48mL，10.5mmol，0.700當(dāng)量)依次加到殘余物在甲苯(100mL)中的溶液中。用16小時(shí)讓所得混合物溫?zé)嶂?0℃，然后加熱回流1小時(shí)。在使反應(yīng)混合物冷卻至23℃，濃縮。將殘余物在乙酸乙酯(300mL)與飽和碳酸氫鈉水溶液(150mL)之間分配。將有機(jī)層用硫酸鈉干燥并濃縮。通過(guò)快速柱色譜純化殘余物(首先是己烷，梯度變至20％ EtOAc在己烷中的混合物)，得到3-(2，5-二氟苯基)-2.3-二氫-1H-吡咯-1-甲酸叔丁酯(2-2)，為紅色油狀物。1H NMR(500MHz，CDCl3)主要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體δ7.03-6.84(m，3H)，6.70(br s，1H)，5.01(br s，1H)，4.42(m，1H)，4.13(m，1H)，3.60(m，1H)，1.50(s，9H).
步驟34-(2，5-二氟苯基)-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酸叔丁酯(2-3)在23℃，將三(二亞芐基丙酮)二鈀(0)(59mg，064mmol，0.020當(dāng)量)加到3-(2，5-二氟苯基)-2，3-二氫-1H-吡咯-1-甲酸叔丁酯(2-2，900mg，3.20mmol，1當(dāng)量)、四氟硼酸苯重氮鹽(1-3，通過(guò)所述制備1-1的方法制備，614mg，1.11mmol，1.00當(dāng)量)，和乙酸鈉三水合物(459mg，3.32mmol，3.00當(dāng)量)在乙腈內(nèi)的脫氧氣的混合物中。將該反應(yīng)混合物攪拌16小時(shí)，然后在飽和碳酸氫鈉水溶液與乙酸乙酯(2×70mL)之間分配。將合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥并濃縮。通過(guò)快速柱色譜純化殘余物(首先是己烷，然后梯度變至40％己烷在EtOAc中的混合物)，得到4-(2，5-二氟苯基)-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酸叔丁酯(2-3)，為橙色油狀物。LRMS m/z(M+H-CH3)343.0實(shí)測(cè)值，343.1計(jì)算值。
步驟44-(2，5-二氟苯基)-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯(2-4)
在23℃，將三氟乙酸(20mL)加到4-(2，5-二氟苯基)-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酸叔丁酯(2-3，700mg，1.96mmol，1當(dāng)量)在二氯甲烷(50mL)內(nèi)的溶液中，將所得混合物攪拌30分鐘，然后濃縮，得到4-(2，5-二氟苯基)-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯(2-4)，為TFA鹽(棕色油狀物)。LRMS m/z(M+H)258.1實(shí)測(cè)值，258.1計(jì)算值。
步驟54-(2，5-二氟苯基)-N，N-二甲基-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酰胺(2-5)在23℃，將三乙胺(1.37mL，9.79mmol，5.00當(dāng)量)和二甲基氨基甲酰氯(0.180mL，1.96mmol，1.00當(dāng)量)加到4-(2，5-二氟苯基)-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯(2-4，1.96mmol)在二氯甲烷(50mL)內(nèi)的溶液中，將所得混合物攪拌2小時(shí)，然后濃縮。將殘余物在飽和碳酸氫鈉水溶液(75mL)與乙酸乙酯(100mL)之間分配。將有機(jī)層用硫酸鈉干燥并濃縮。將殘余物通過(guò)反相LC純化(H2O/CH3CN梯度含有w/0.1％ TFA)，得到4-(2，5-二氟苯基)-N，N-二甲基-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酰胺(2-5)，為灰白色固體1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.35-7.29(m，4H)，7.25(m，1H)，7.05(m，1H)，7.00(m，1H)，6.96(m，1H)，6.40(br s，1H)，6.13(m，1H)，4.88(ddd，1H，J＝13.7，5.6，2.0Hz)，4.52(d，1H，J＝13.7Hz)，2.88(s，6H).LRMS m/z(M+H)329.1實(shí)測(cè)值，329.1計(jì)算值。
步驟64-(2，5-二氟苯基)-N，N-二甲基-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酰胺的對(duì)映體(2-6和2-7)通過(guò)手性正向HPLC(Chiralcel OD柱含有0.1％二乙胺的40％乙醇在己烷中的混合物)拆分外消旋4-(2，5-二氟苯基)-N，N-二甲基-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酰胺(2-5)對(duì)映體，以洗脫順序得到2-6(-)和2-7(+)。
反應(yīng)方案3 步驟13-(5-氯-2-氟苯基)-2，3-二氫-1H-吡咯-1-甲酸叔丁酯(3-1)在23℃，將乙酸鈀(II)(106mg，0.473mmol，0.020當(dāng)量)加到2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酸叔丁酯(4.00g，23.6mmol，1當(dāng)量)和四氟硼酸5-氯-2-氟苯重氮鹽(10.4g，42.5mmol，1.80當(dāng)量)在水與四氯化碳(1∶1，150mL)內(nèi)的劇烈攪拌著的脫氧氣的混合物中，將所得混合物攪拌20小時(shí)。將該反應(yīng)混合物在飽和碳酸氫鈉水溶液(200mL)與二氯甲烷(2×200mL)之間分配。將合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥并濃縮。將殘余物溶解在甲苯中(200mL)中，將所得溶液真空濃縮以促進(jìn)共沸除去殘余水分。然后在-20℃，將2，6-二甲苯吡啶(5.51mL，47.3mmol，2.00當(dāng)量)和三氟乙酸酐(1.67mL，11.8mmol，0.500當(dāng)量)依次加到殘余物在甲苯(150mL)中的溶液中。將所得混合物在-20℃保持5小時(shí)，然后緩慢溫?zé)嶂?3℃。在23℃保持16小時(shí)后，將該反應(yīng)混合物加熱回流30分鐘。反應(yīng)混合物冷卻至23℃，然后在乙酸乙酯(100mL)與飽和碳酸氫鈉水溶液(100mL)之間分配。將有機(jī)層用硫酸鈉干燥并濃縮。通過(guò)快速柱色譜純化殘余物(首先是己烷，梯度變至30％EtOAc在己烷中的混合物)，得到3-(5-氯-2-氟苯基)-2，3-二氫-1H-吡咯-1-甲酸叔丁酯(3-1)，為橙色油狀物。LRMSm/z(M+H-CH3)283.0實(shí)測(cè)值，283.1計(jì)算值。
步驟22-(3-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}苯基)-4-(5-氯-2-氟苯基)-2，5-二氫-1H吡咯-1-甲酸叔丁基酯(3-2)在65℃，將3-(5-氯-2-氟苯基)-2，3-二氫-1H-吡咯-1-甲酸叔丁酯(3-1,1.1000g，3.69mmol，1當(dāng)量)、叔丁基(3-碘代苯氧基)二甲基硅烷(1.85g，5.54mmol，1.50當(dāng)量)、三丁胺(1.76mL，7.39mmol，2.00當(dāng)量)、三苯砷(0.453，1.48mmol，0.400當(dāng)量)、和乙酸鈀(0.166g，0.739mmol，0.200當(dāng)量)在DMG(10mL)內(nèi)的脫氧氣的混合物加熱20小時(shí)。反應(yīng)混合物在水(100mL)與乙酸乙酯(2×85mL)之間分配。將合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥并濃縮。通過(guò)快速柱色譜純化殘余物(首先是100％己烷，然后梯度變至50％乙酸乙酯在己烷中的混合物)，得到2-(3-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}苯基)-4-(5-氯-2-氟苯基)-2，5-二氫-1H吡咯-1-甲酸叔丁基酯(3-2)，為橙色油狀物。1H NMR(300MHz，CDCl3)主要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體δ7.11-6.53(m，7H)，6.11(s，1H)，5.32(m，1H)，4.53(m，2H)，1.09(s，9H)，0.79(s，9H)，0.00(s，6H).LRMS m/z(M+H)504.1實(shí)測(cè)值，504.2計(jì)算值。
步驟32-[2-(3{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}苯基)-4-(5-氯-2-氟苯基)-2，5-二氫-1H吡咯-1-基]-1，1-二甲基-2-氧代乙基甲酸叔丁基酯(3-3)
在60℃，將2-(3-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}苯基)-4-(5-氯-2-氟苯基)-2，5-二氫-1H吡咯-1-甲酸叔丁基酯(3-2，276mg，0.683mmol，1當(dāng)量)、三乙胺(277mg，2.73mmol，4當(dāng)量)、PYBOP(711mg，1.37mmol，2當(dāng)量)和2-[(叔丁氧羰基)]-2-甲基丙酸(278mg，1.37mmol，2當(dāng)量)在DMF(10mL)內(nèi)的溶液溫?zé)?8小時(shí)。然后將溶液濃縮，殘余物在乙酸乙酯與飽和碳酸氫鈉水溶液之間分配。有機(jī)層用鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥，濃縮。通過(guò)快速柱色譜純化殘余物。用10％乙酸乙酯/己烷至20％的乙酸乙酯/己烷洗脫，得到2-[2-(3{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}苯基)-4-(5-氯-2-氟苯基)-2，5-二氫-1H吡咯-1-基]-1，1-二甲基-2-氧代乙基甲酸叔丁基酯(3-3)，為灰黃色樹膠狀物。LRMS m/z(M+H)588.9實(shí)測(cè)值，589.0計(jì)算值。
步驟44-(5-氯-2-氟苯基)-2-(3-羥基苯基)-1-(2-甲基丙氨?；?-2，5-二氫-1H-吡咯(3-4)在室溫條件下，將2-[2-(3{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧基}苯基)-4-(5-氯-2-氟苯基)-2，5-二氫-1H吡咯-1-基]-1，1-二甲基-2-氧代乙基甲酸叔丁基酯(3-3，247mg，0.419mmol，1當(dāng)量)和三氟乙酸(4mL)在二氯甲烷(10mL)內(nèi)的溶液攪拌1小時(shí)。該反應(yīng)在23℃濃縮，殘余物在乙酸乙酯與飽和碳酸氫鈉水溶液之間分配。將有機(jī)層用鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥，濃縮得到一黃色樹膠狀物。將該樹膠狀物在甲醇(5mL)內(nèi)的溶液用碳酸鉀(290mg，2.10mmol，5.00當(dāng)量)處理。反應(yīng)混合物在室溫條件下攪拌2小時(shí)，然后濃縮。該水溶液用1N HCl水溶液酸化至pH 8，混合物用乙酸乙酯提取，有機(jī)層用鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥，濃縮，得到4-(5-氯-2-氟苯基)-2-(3-羥基苯基)-1-(2-甲基丙氨?；?-2，5-二氫-1H-吡咯(3-4)，為乳膏狀有色固體。1H NMR(500MHz，CDCl3)δ7.30(dd，1H，J＝6.6，2.7Hz)，7.30(m，1H)，7.18(t，1H，J＝7.8Hz)，7.05(t，1H，J＝9.2Hz)，6.83(br d，1H，J＝7.6Hz)，6.78(br s，1H)，6.70(dd，1H，J＝8.1，1.8Hz)，6.38(s，1H)，5.92(br s，1H)，5.30(m，1H)，5.08(m，1H)，1.46(s，6H).LRMS m/z(M+H)375.0實(shí)測(cè)值，375.0計(jì)算值。
(2S)-4-(5-氯-2-氟苯基)-2-(3-羥基苯基)-1-(2-甲基丙氨?；?-2，5-二氫-1H-吡咯(3-5)
通過(guò)手性正向HPLC(Chiralcel OD柱首先是含有0.1％二乙胺的10％乙醇在己烷中的混合物，梯度變至30％乙醇在己烷中的混合物)拆分外消旋的4-(5-氯-2-氟苯基)-2-(3-羥基苯基)-1-(2-甲基丙氨?；?-2，5-二氫-1H-吡咯(3-4)得到(2S)-4-(5-氯-2-氟苯基)-2-(3-羥基苯基)-1-(2-甲基丙氨?；?-2，5-二氫-1H-吡咯(3-5)，為第一洗脫物，負(fù)(-)對(duì)映體。
通過(guò)對(duì)上述方法做稍微改動(dòng)，制得了下列化合物。除非另有說(shuō)明，表中的化合物是作為游離堿分離出來(lái)的。



反應(yīng)方案4 將2-(3-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧}苯基)-4-苯基-2，5-二氫-1H吡咯-1-甲酸叔丁基酯(3-2，1.18g，3.82mmol)在無(wú)水CH2Cl2(25mL)中溶解，然后用TFA(5mL)處理1小時(shí)。將該反應(yīng)混合物在飽和的NaHCO3水溶液(100mL)與乙酸乙酯(3×20mL)之間分配。然后將合并的有機(jī)層用飽和的NaCl水溶液洗滌，用硫酸鈉干燥、過(guò)濾并濃縮。然后將該粗胺溶解在CH2Cl2中，連續(xù)用Et3N(1.6M1，11.5mmol)和二甲基氨基甲酰氯(0.37Ml，4.01mmol)進(jìn)行處理，在25℃將所得到的溶液攪拌3.5小時(shí)。反應(yīng)完成后通過(guò)質(zhì)譜法判斷反應(yīng)終點(diǎn)。將反應(yīng)濃縮，在CH2Cl2中重新溶解并加入三乙胺三氫氟酸鹽復(fù)合物(0.6mL，3.82mmol)，在25℃再攪拌12小時(shí)。反應(yīng)完成后，將反應(yīng)在NH4Cl(10mL)和CH2Cl2(3×10mL)之間進(jìn)行分配，將合并的有機(jī)層濃縮。從CH2Cl2結(jié)晶得到所想要的化合物，過(guò)濾，得到4-(2，5-二氟苯基)-2-(3-羥基苯基)-N，N-二甲基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酰胺，為白色固體。1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.18(t，J＝7.8Hz，2H)，7.00(m，3H)，6.90(s，1H)，6.84(d，J＝7.7Hz，1H)，6.74(dd，J＝7.9，2.4Hz，1H)，4.90(dd，J＝13.4，3.7Hz，1H)，4.50(d，J＝13.4Hz，1H)，2.91(s，6H).LRMSm/z(M-CH3)345.3實(shí)測(cè)值，345.4計(jì)算值。
將外消旋的4-1進(jìn)行手性柱色譜分離(ChiralPak AD柱，4.6mm×265mm，10微米，85％己烷/10％ MeOH/5％ EtOH，60mL/min)以拆分對(duì)映體，得到(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-2-(3-羥基苯基)-N，N-二甲基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酰胺4-2通過(guò)對(duì)上述方法或者所列的已有的方法做稍微改動(dòng)，制得了下列化合物。除非另有說(shuō)明，表中的化合物是作為游離堿分離出來(lái)的。



反應(yīng)方案5 步驟1(2S，4S)-4-羥基-2-苯基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(5-2)向裝配有攪拌棒的火焰干燥的燒瓶中加入(2S，4S)-4-{[叔丁基(二甲基)甲硅烷基]氧}-2-苯基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(5-1，按照Maeda，等Svnlett 2001，1808-1810所披露的方法由(S)-(-)-4-氯-3-羥基叔丁腈制得，7.8g，20.7mmol)和無(wú)水乙腈(20.0mL)。在攪拌以及N2氛圍下將所得溶液用三乙胺三氫氟酸鹽(10.1M1，62.0mmol)進(jìn)行處理。將該反應(yīng)在40℃攪拌12小時(shí)。然后將該反應(yīng)用EtOAc(100mL)稀釋，倒入5％的碳酸氫鈉水溶液中。氣體釋放停止后，將有機(jī)成用5％碳酸氫鈉水溶液洗滌3次。將有機(jī)層用硫酸鎂干燥，過(guò)濾并濃縮，得到粗產(chǎn)物。從EtOAc/己烷中重結(jié)晶，得到(2S，4S)-4-羥基-2-苯基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(5-2)，為白色固體結(jié)晶。1H NMR(300MHz，CDC13)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體δ7.38-7.18(m，5H)，4.90(m，1H)，4.42(m，1H)，3.88(m，1H)，3.56(dd，J＝11.5，4.0Hz，1H)，2.60(m，1H)，2.03(m，1H)，1.50和1.20(br s，9H)；MS 208.0實(shí)測(cè)值，208.1(M-C(CH3)3)計(jì)算值。
步驟2(2S)-4-氧代-2-苯基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(5-3)向裝配有攪拌棒的火焰干燥的燒瓶中加入冷卻至-78℃的150mL無(wú)水二氯甲烷。然后依次加入草酰氯(3.8mL，44mmol)和DMSO(4.8mL，61mmol)，將該反應(yīng)攪拌10分鐘。滴加入在10mL無(wú)水二氯甲烷中的(2S，4S)-4-羥基-2-苯基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(5-2，2.28g，8.73mmol)，在-78℃攪拌1小時(shí)。加入三乙胺(12mL，87mmol)，將該反應(yīng)用1小時(shí)溫?zé)嶂?℃。完成后，將該反應(yīng)用5％碳酸氫鈉，鹽水洗滌，用MgSO4干燥。將有機(jī)層濃縮，得到(2S)-4-氧代-2-苯基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(5-3)的粗產(chǎn)物。從從EtOAc/己烷中重結(jié)晶。1H NMR(300MHz，CDC13)δ7.35(m，3H)，7.17(m，2H)，5.38(m，1H)，4.08(d，J＝19.5Hz，1H)，3.90(d，J＝19.3Hz，1H)，3.13(dd，J＝18.8，9.8Hz，1H)，2.58(dd，J＝18.6，2.4Hz，1H)，1.40(br s，9H)；MS 206.0實(shí)測(cè)值，206.1(M-C(CH3)3)計(jì)算值。
步驟3(2S)-2-苯基-4-{[(三氟甲基)磺酰基]氧基}-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酸叔丁酯(5-4)向裝配有攪拌棒的火焰干燥的燒瓶中加入酮(2S)-4-氧代-2-苯基吡咯烷-1-甲酸叔丁酯(5-3，2.00g，7.65mmol)和無(wú)水THE(2mL)，將所得溶液冷卻至-78℃，向其中滴加六甲基二硅烷基氨基鈉(NaHMDS，8.42mL，1M在THF中的溶液，8.42mmoL)。將該反應(yīng)在-78℃攪拌1小時(shí)，經(jīng)由套管加入1，1，1-三氟-N-苯基-N-[(三氟甲基)磺?；鵠甲磺酰胺在(3.01g，8.42mmol)THF(30mL)中的溶液。將該反應(yīng)混合物溫?zé)嶂?℃，攪拌30分鐘。然后將該反應(yīng)混合物在鹽水(200mL)與乙酸乙酯和己烷(1∶1)的混合物(200mL)之間分配。將有機(jī)層用硫酸鈉干燥，濃縮，得到(2S)-2-苯基-4-{[(三氟甲基)磺?；鵠氧基}-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酸叔丁酯(5-4)，為橙色油狀物。1H NMR(300MHz，CDCl3)主要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體δ7.30(m，5H)，5.72(m，1H)，5.48(m，1H)，4.42(m，2H)，1.18(s，9H)；MS379.0實(shí)測(cè)值379.1(M-CH3)計(jì)算值。
步驟4(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酸叔丁酯(5-5)在90℃，將(2S)-2-苯基-4-{[(三氟甲基)磺?；鵠氧基}-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酸叔丁酯(5-4，7.65mmol))粗產(chǎn)物，2，5-二氟苯基硼酸(1.81g，11.5mmol)，Na2CO3水溶液(2M，11.5mL，23.0mmol)，和Pd(PPh3)4(0.442g，0.383mmol)在二噁烷(100mL)中的脫氧混合物加熱45分鐘。將該反應(yīng)混合物冷卻，然后在在鹽水(200mL)與乙酸乙酯和己烷(1∶1)的混合物(200mL)之間分配。有機(jī)層用硫酸鈉干燥，濃縮。殘余物通過(guò)快速色譜柱純化(SiO2，0-50％EtOAc/己烷梯度)，得到(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酸叔丁酯(5-5)，為白色固體，LRMS m/z(M+H-CH3)358.0實(shí)測(cè)值，358.2計(jì)算值。
反應(yīng)方案6 (1S)-1-{[(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基]羰基}-2，2-二甲基丙基胺(6-1)將(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酸叔丁酯(5-5，400mg，1.12mmol，1當(dāng)量)在二氯甲烷和三氟乙酸酯(4∶1)的混合物攪拌30分鐘，然后濃縮。殘余物用甲苯共沸物(2×10mL)干燥，然后溶解在DMF(5mL)中。加入三乙胺(0.780mL，5.60mmol，5.00當(dāng)量)，N-(叔丁氧羰基)-3-甲基-L-纈氨酸(388mg，1.68mmol，1.50當(dāng)量)，和PYBOP(874mg，1.68mmol，1.50當(dāng)量)，將所得混合物在23℃攪拌24小時(shí)。將該反應(yīng)混合物在飽和碳酸氫鈉水溶液與乙酸乙酯(2×50mL)之間分配。將合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥，濃縮。將殘余物通過(guò)快速柱色譜純化(首先是己烷，梯度至40％乙酸乙酯在己烷中的溶液)得到所想要的偶聯(lián)的，N-Boc-保護(hù)的中間體，將其溶解在二氯甲烷和三氟乙酸酯(2∶1)的混合物中。將所得到的溶液保持30分鐘，然后濃縮。將殘余物通過(guò)反相LC(H2O/CH3CN梯度w/包含0.1％ TFA)純化.將所想要的級(jí)分在飽和碳酸氫鈉水溶液與乙酸乙酯(2×50mL)之間分配，然后將合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥，濃縮，得到(1S)-1-{((2S)-4-(2，5-二氟苯基)-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基]羰基}-2，2-二甲基丙基胺(6-1)，為白色固體。1H NMR(500MHz，CDCl3)主要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體δ7.40(t，2H，J＝7.6Hz)，7.31(m，1H)，7.26(d，2H，J＝7.8Hz)，7.11-6.93(m，3H)，6.38(s，1H)，5.81(m，1H)，4.88(m，2H)，3.03(s，1H)，1.00(s，9H)。LRMS m/z(M+H)371.0實(shí)測(cè)值，371.2計(jì)算值。
通過(guò)對(duì)上述方做稍微改動(dòng)，制得了下列化合物。

反應(yīng)方案7 步驟1({(1S)-1-叔丁基-2-[(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基]-2-氧代乙基}氨基)乙酸乙酯(7-1)在150℃，將(1S)-1-{[(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基]羰基}-2，2-二甲基丙基胺(6-1，325mg，0.877mmol，1當(dāng)量)，溴代乙酸乙酯(0.195mL，1.76mmol，2.00當(dāng)量)，N，N-二異丙基乙胺(0.613mL，3.51mmol，4.00當(dāng)量)在正丁醇(4.0mL)中的溶液在微波輻射下加熱15分鐘。將反應(yīng)混合物濃縮，將殘余物在乙酸乙酯(100mL)與飽和硫酸氫鉀水溶液和鹽水(1∶1)的混合物之間分配。然后將有機(jī)層先用飽和碳酸氫鈉水溶液(100mL)洗滌，接著用鹽水(100mL)洗滌，然后用硫酸鎂干燥，濃縮，得到({(1S)-1-叔丁基-2-[(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基]-2-氧代乙基}氨基)乙酸乙酯(7-1)，為灰白色固體。LRMS m/z(M+H)457.5實(shí)測(cè)值，457.2計(jì)算值。
步驟22-({(1S)-1-叔丁基-2-[(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基]-2-氧代乙基}氨基)-N-乙基乙酰胺(7-2)
在100℃，將({(1S)-1-叔丁基-2-[(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基]-2-氧代乙基}氨基)乙酸乙酯(7-1，50mg，0.11mmol)在乙胺在THF(2M，2mL)內(nèi)的溶液中的溶液在封閉的試管中加熱16小時(shí)。將該反應(yīng)混合物濃縮，將殘余物用快速柱色譜(EtOAc)純化，得到2-({(1S)-1-叔丁基-2-[(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基]-2-氧代乙基}氨基)-N-乙基乙酰胺(7-2)，為白色固體。1H NMR(500MHz，CDCl3)表明為1∶1旋光異構(gòu)體的混合物；一個(gè)旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體δ7.43-7.22(m，5H)，7.11-6.96(m，3H)，6.89(br m，1H)，6.38(br s，1H)，5.94(m，1H)，4.92(ddd，1H，J＝14.9，4.4，1.7Hz)，4.87(br d，1H，J＝15.3Hz)，3.42(d，1H，J＝16.8Hz)，3.35(m，2H)，3.03(s，1H)，2.88(d，1H，J＝16.8Hz)，2.34(br s，1H)，1.18(t，3H，J＝7.3Hz)，1.06(s，9H).LRMS m/z(M+H)456.5實(shí)測(cè)值，456.2計(jì)算值.
通過(guò)對(duì)上述方法做稍微改動(dòng)，制得六下列化合物。

反應(yīng)方案8 在0℃，將(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-2-(3-羥基苯基)-N，N-二甲基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-甲酰胺(4-2，97mg，0.28mmol)在無(wú)水CH3CN(1.0mL)中的溶液依次用iPr2NEt(0.10mL，0.6mmol)，CCl4(0.14mL，1.5mmol)，DMAP(催化劑)處理后，最后用二苯基亞磷酸酯(0.09mL，0.40mmol)處理。所得到的灰黃色溶液在25℃攪拌2小時(shí)。反應(yīng)完成后，將反應(yīng)濃縮并直接快速柱色譜(SiO2，0-100％ EtOAc/己烷梯度)分離，得到3-{(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-1-[(二甲基氨基)羰基]-2，5-二氫-1H-吡咯-2-基}苯基磷酸二芐基酯(8-1)，為透明油狀物1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.30(m，11H)7.15(m，2H)，7.05(m，2H)，6.96(m，2H)，6.32(br s，1H)，6.10(m，1H)，5.12(d，J＝1.8Hz，2H)，5.09(d，J＝1.8Hz，2H)，4.78(ddd，J＝13.7，5.8，1.8Hz，1H)，4.47(d，J＝13.7Hz，1H)，2.85(s，6H).LRMSm/z(M+H)605.6實(shí)測(cè)值，605.6計(jì)算值。
將3-{(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-1-[(二甲基氨基)羰基]-2，5-二氫-1H-吡咯-2-基}苯基磷酸二芐基酯溶解在4∶1MeOH環(huán)己二烯(2mL)的混合物中，用10％鈀碳(100mg)進(jìn)行處理。將反應(yīng)激烈攪拌15分鐘，然后在硅藻土上進(jìn)行過(guò)濾，用MeOH洗滌使化合物全部通過(guò)硅藻土。將洗滌物濃縮并用反相柱色譜純化(C-8，含有0.1％ TFA的10-90％CH3CN/H2O梯度)，得到3-{(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-1-[(二甲基氨基)羰基]-2，5-二氫-1H-吡咯-2-基}苯基二氫磷酸酯(8-2)，為白色固體1HNMR(300MHz，CD30D)δ7.20(m.7H)，6.42(br s，1H)，6.08(m，1H)，5.00(dd，J＝14.0，3.6Hz，1H)，4.55(d，J＝14.0Hz，1H)，2.92(s，6H).LRMS m/z(M+H)425.4實(shí)測(cè)值，425.3計(jì)算值。
通過(guò)對(duì)上述方法稍做改動(dòng)，得到下列化合物
反應(yīng)方案9
反應(yīng)方案9(續(xù)) 步驟1(1S)-1-{[(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基]羰基}-2，2-二甲基丙基氨基甲酸4-硝基苯基酯(9-1)在23℃，將氯甲酸4-硝基苯基酯(300mg，1.49mmol，1.2當(dāng)量)在THF(10mL)內(nèi)的溶液滴加入攪拌過(guò)的(1S)-1-{[(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基]羰基}-2，2-二甲基丙基胺(6-1，460mg，1.24mmol，1.0當(dāng)量)和三乙胺(151mg，1.49mmol，1.2當(dāng)量)在THF(10mL)內(nèi)的溶液中。1小時(shí)后將反應(yīng)過(guò)濾并將濾液濃縮成淡黃色樹膠狀物，將其置于硅膠上通過(guò)快速色譜純化。使用二氯甲烷至3％乙酸乙酯/二氯甲烷的梯度進(jìn)行洗脫，得到(1S)-1-{[(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基]羰基}-2，2-二甲基丙基氨基甲酸2-羥基乙酯(9-1)，為無(wú)色泡沫狀物。LRMS m/z(M+H)536.5實(shí)測(cè)值，535.2計(jì)算值。
步驟2(1S)-1-{[(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基]羰基-2，2-二甲基丙基氨基甲酸2-{[雙(芐氧基)磷?；鵠氧基}乙基酯(9-2)
在100℃，在高壓容器內(nèi)將(1S)-1-{[(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基]羰基}-2，2-二甲基丙基氨基甲酸4-硝基苯基酯(9-1，27mg，0.05mmol，1.0當(dāng)量)，2-羥乙基磷酸二芐基酯(260mg，0.81mmol，16當(dāng)量)和三乙胺(0.014M1，0.10mmol，2當(dāng)量)的混合物加熱1小時(shí)。然后將反應(yīng)混合物冷卻并在乙酸乙酯與水之間分配。將有機(jī)層用鹽水洗滌，用硫酸鎂干燥，濃縮。將殘余物用基于硅膠的快速色譜純化。用二氯甲烷至30％乙酸乙酯/二氯甲烷的梯度進(jìn)行洗脫，得到(1S)-1-{[(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基]羰基-2，2-二二甲基丙基氨基甲酸2-{[雙(芐氧基)磷酰基]氧基}乙基酯(9-2)，為無(wú)色樹膠狀物。LRMS m/z(M+H)719.7實(shí)測(cè)值，718.3計(jì)算值。
步驟3(1S)-1-{[(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基]羰基}-2，2-二甲基丙基氨基甲酸2-(膦?；?乙基酯(9-3)將(1S)-1-{[(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基]羰基-2，2-二甲基丙基氨基甲酸2-{[雙(芐氧基)磷?；鵠氧基}乙基酯(9-2，11mg，0.015mmol，1當(dāng)量)，1，4-環(huán)己二烯(1mL，過(guò)量的)和10％Pd/C(5mg)加到甲醇(4mL)中，將該混合物在氮?dú)夥諊聰嚢琛?0分鐘后，在加入10％ Pd/C 5mg，再持續(xù)攪拌1小時(shí)。將反應(yīng)過(guò)濾，濾液濃縮。將殘余物通過(guò)反相LC(H2O/CH3CN梯度，包含w/0.1％ TFA)純化，得到(1S)-1-{[(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基]羰基}-2，2-二甲基丙基氨基甲酸2-(膦?；?乙基酯(9-3)，為無(wú)色泡沫。1H NMR(500MHz，CDCl3)主要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體δ7.34-7.20(m，5H)，7.12-6.92(m，3H)，6.38(s，1H)，5.93(bs，1H)，5.21(d，1H，J＝14Hz)，4.91(d，1H，J＝14Hz)，4.41(d，1H，J＝10Hz)，4.38-3.97(m，7H)，0.91(s，9H).LRMS m/z(M+H)539.5實(shí)測(cè)值，538.2計(jì)算值。
反應(yīng)方案10 (1S)-1-環(huán)丙基-2-[(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基]-2-氧代乙基二氫磷酸酯(10-1)在23℃，將叔丁氧化鈦(IV)(0.022rnL，0.065mmol，0.100當(dāng)量)加入到(1S)-1-環(huán)丙基-2-[(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基]-2-氧代乙醇(6-2，230mg，0.647mmol，1當(dāng)量)在二氯甲烷內(nèi)的溶液中，接著加入三乙胺(0.271mL，1.94mmol，3.00當(dāng)量)和氯磷酸二甲酯(0.140mL，1.29mmol，2.00當(dāng)量)。將反應(yīng)混合物攪拌2小時(shí)，然后在飽和碳酸氫鈉溶液(50mL)與乙酸乙酯(2×50mL)之間分配。合并的有機(jī)層用硫酸鈉干燥，濃縮。將殘余物溶解在二甲硫(0.5mL)中，向所得到的溶液中加入甲磺酸(1mL)。將所得到的混合物攪拌10分鐘，然后用乙腈(3mL)稀釋。通過(guò)反相LC(H2O/CH3CN梯度，含w/0.1％TFA)純化。得到(1S)-1-環(huán)丙基-2-[(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基]-2-氧代乙基二氫磷酸酯(10-1)，為白色固體1H NMR(500MHz，CDCl3)主要旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體δ7.42-7.04(m，8H)，6.46(s，1H)，5.95(m，1H)，5.14(br d，1H，J＝14Hz)，5.04(br d，1H，J＝14Hz)，4.46(t，1H，J＝8.2Hz)，1.32(m，1H)，0.62(m，4H).LRMS m/z(M+H)436.4實(shí)測(cè)值，436.1計(jì)算值。
序列表<110>Merck & Co.，Inc.
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<120>有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白抑制劑的前藥<130>21405Y<150>60/477,995<151>2003-06-12<160>2<170>FastSEQ for Windows Version 4.0<210>1<211>42<212>DNA<213>人工序列<220>
<223>完全合成的核苷酸序列<400>1gcaacgatta atatggcgtc gcagccaaat tcgtctgcga ag 42<210>2<211>60<212>DNA<213>人工序列<220>
<223>完全合成的核苷酸序列<400>2gcaacgctcg agtcagtgat gatggtggtg atgctgattc acttcaggct tattcaatat 60
權(quán)利要求
1.式I化合物或者其藥學(xué)上可接受的鹽或立體異構(gòu)體 其中a是0或1；b是0或1；m是0、1、或2；n是0或1；r是0或1；s是0或1；u是2、3、4或5；虛線表示任選存在的雙鍵，條件是在環(huán)中存在一個(gè)并且只有一個(gè)雙鍵。R1選自1)(C1-C6-亞烷基)n(C＝X)C1-C10烷基，2)(C1-C6-亞烷基)n(C＝X)芳基，3)(C1-C6-亞烷基)n(C＝X)C2-C10烯基，4)(C1-C6-亞烷基)n(C＝X)C2-C10炔基，5)(C1-C6-亞烷基)n(C＝X)C3-C8環(huán)烷基，6)(C1-C6-亞烷基)n(C＝X)雜環(huán)基，7)(C1-C6-亞烷基)n(C＝X)NRcRc′，8)(C1-C6-亞烷基)nSO2NRcRc′，9)(C1-C6-亞烷基)nSO2C1-C10烷基，10)(C1-C6-亞烷基)nSO2C2-C10烯基，11)(C1-C6-亞烷基)nSO2C2-C10炔基，12)(C1-C6-亞烷基)nSO2芳基，13)(C1-C6-亞烷基)nSO2-雜環(huán)基，14)(C1-C6-亞烷基)nSO2C3-C8環(huán)烷基，15)(C1-C6-亞烷基)nP(＝O)RdRd′，16)芳基；17)雜環(huán)基；和18)C1-C10烷基；所述烷基、芳基、烯基、炔基、環(huán)烷基、亞烷基、雜芳基和雜環(huán)基可任選被一個(gè)或多個(gè)選自R10的取代基取代；R2和R6獨(dú)立地選自1)芳基，2)C1-C6芳烷基，3)C3-C8環(huán)烷基，和4)雜環(huán)基，所述芳基、環(huán)烷基、芳烷基和雜環(huán)基可任選被一個(gè)或多個(gè)選自R10的取代基取代；R3、R4、R5，、R7，、R8、和R9獨(dú)立地選自1)H，2)C1-C10烷基，3)芳基，4)C2-C10烯基，5)C2-C10炔基，6)C1-C6全氟烷基，7)C1-C6芳烷基，8)C3-C8環(huán)烷基，和9)雜環(huán)基，所述烷基、芳基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳烷基和雜環(huán)基可任選被一個(gè)或多個(gè)選自R10的取代基取代；或者連接在同一碳原子上的R4和R5，或R8和R9一起形成-(CH2)u-，其中一個(gè)碳原子可任選被選自O(shè)、S(O)m、-N(Ra)C(O)-、-N(Rb)-和-N(CORa)-的部分代替；R10獨(dú)立地選自1)(C＝O)aObC1-C10烷基，2)(C＝O)aOb芳基，3)C2-C10烯基，4)C2-C10炔基，5)(C＝O)aOb雜環(huán)基，6)CO2H，7)鹵素，8)CN，9)OH，10)ObC1-C6全氟烷基，11)Oa(C＝O)bNR12R13，12)S(O)mRa，13)S(O)2NR12R13，14)氧代基，15)CHO，16)(N＝O)R12R13，17)(C＝O)aObC3-C8環(huán)烷基，和18)-OPO(OH)2；所述烷基、芳基、烯基、炔基、雜環(huán)基和環(huán)烷基可任選被一個(gè)或多個(gè)選自R11的取代基取代；R11選自1)(C＝O)rOs(C1-C10)烷基，2)Or(C1-C3)全氟烷基，3)(C0-C6)亞烷基-S(O)mRa，4)氧代基，5)OH，6)鹵素，7)CN，8)(C＝O)rOs(C2-C10)烯基，9)(C＝O)rOs(C2-C10)炔基，10)(C＝O)rOs(C3-C6)環(huán)烷基，11)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-芳基，12)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-雜環(huán)基，13)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-N(Rb)2，14)C(O)Ra，15)(C0-C6)亞烷基-CO2Ra，16)C(O)H，17)(C0-C6)亞烷基-CO2H，18)C(O)N(Rb)2，19)S(O)mRa，20)S(O)2N(Rb)2，和21)-OPO(OH)2；所述烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、亞烷基和雜環(huán)基可任選被最高達(dá)3個(gè)的選自下列取代基所取代Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、鹵素、CO2H、CN、O(C＝O)C1-C6烷基、氧代基、和N(Rb)2；R12和R13獨(dú)立地選自1)H，2)(C＝O)ObC1-C10烷基，3)(C＝O)ObC3-C8環(huán)烷基，4)(C＝O)Ob芳基，5)(C＝O)Ob雜環(huán)基，6)C1-C10烷基，7)芳基，8)C2-C10烯基，9)C2-C10炔基，10)雜環(huán)基，11)C3-C8環(huán)烷基，12)SO2Ra，和13)(C＝O)NRb2，所述烷基、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)基、烯基、以及炔基可任選被一個(gè)或多個(gè)選自R11的取代基取代，或者R12和R13可以與它們所連接的氮一起形成單環(huán)或者二環(huán)雜環(huán)，所述雜環(huán)在每個(gè)環(huán)中具有3-7個(gè)環(huán)單元，并且除了所述氮以外，還可以任選含有一個(gè)或兩個(gè)選自N、O和S的另外雜原子，所述單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)可任選被一個(gè)或多個(gè)選自R11的取代基取代；R14獨(dú)立地選自1)(C＝O)aObC1-C10烷基，2)(C＝O)aOb芳基，3)C2-C10烯基，4)C2-C10炔基，5)(C＝O)aOb雜環(huán)基，6)CO2H，7)鹵素，8)CN，9)OH，10)ObC1-C6全氟烷基，11)Oa(C＝O)bNR12R13，12)S(O)mRa，13)S(O)2NR12R13，14)氧代基，15)CHO，16)(N＝O)R12R13，17)(C＝O)aObC3-C8環(huán)烷基，和18)-OPO(OH)2；所述烷基、芳基、烯基、炔基、雜環(huán)基、和環(huán)烷基可任選被一個(gè)或多個(gè)選自R11的取代基取代；Ra是(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、芳基、或雜環(huán)基，所述基團(tuán)可任選被1-3個(gè)選自R14的取代基取代；Rb是H，(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C＝O)OC1-C6烷基、(C＝O)C1-C6烷基或者S(O)2Ra，所述基團(tuán)可任選被1-3個(gè)選自R14的取代基取代；Rc和Rc’獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基和(C3-C6)環(huán)烷基，所屬基團(tuán)可任選被1，2或3個(gè)選自R10的取代基取代，或者Rc和Rc’可以與它們所連接的氮一起形成單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)，所述雜環(huán)在每個(gè)環(huán)中具有3-7個(gè)環(huán)單元，并且除了所述氮以外，還可以任選含有一個(gè)或兩個(gè)選自N、O、和S的另外的雜原子，所述單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)可任選被1、2和3個(gè)選自R11的取代基取代；Rd和Rd′獨(dú)立地選自(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基和NRb2，或者Rd和Rd′可與它們所連接的磷一起形成單環(huán)雜環(huán)，所述雜環(huán)具有5-7個(gè)環(huán)單元，并且除了所述磷以外，還可以任選含有一個(gè)或兩個(gè)選自NRe、O和S的另外的雜原子，所屬單環(huán)雜環(huán)可任選被1、2或3個(gè)選自R11的取代基取代。Re選自H和(C1-C6)烷基；并且X選O，NRe和S；條件是式I化合物中至少存在一個(gè)取代基-OPO(OH)2。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中所述化合物是式II化合物或者其藥學(xué)上可接受的鹽或立體異構(gòu)體 其中a是0或1；b是O或1；m是0、1、或2；n是0或1；r是0或1；s是0或1；虛線表示任選存在的雙鍵，條件是在環(huán)中存在一個(gè)并且只有一個(gè)雙鍵。R1選自1)(C1-C6-亞烷基)n(C＝O)C1-C10烷基，2)(C1-C6-亞烷基)n(C＝O)芳基，3)(C1-C6-亞烷基)n(C＝O)C2-C10烯基，4)(C1-C6-亞烷基)n(C＝O)C2-C10炔基，5)(C1-C6-亞烷基)n(C＝O)C3-C8環(huán)烷基，6)(C1-C6-亞烷基)n(C＝O)雜環(huán)基，7)(C1-C6-亞烷基)n(C＝O)NRcRc’，8)(C1-C6-亞烷基)nSO2NRcRc’，9)(C1-C6-亞烷基)nSO2C1-C10烷基，10)(C1-C6-亞烷基)nSO2-芳基，11)(C1-C6-亞烷基)nSO2-雜環(huán)基，12)(C1-C6-亞烷基)nSO2-C3-C8環(huán)烷基，13)(C1-C6-亞烷基)nP(＝O)RdRd′，14)芳基；15)雜環(huán)基；和16)C1-C10烷基；所述烷基、芳基、烯基、炔基、環(huán)烷基、亞烷基、雜芳基和雜環(huán)基任選被一個(gè)或多個(gè)選自R10的取代基取代；R2和R6獨(dú)立地選自1)芳基，2)C1-C6芳烷基，3)C3-C8環(huán)烷基，和4)雜環(huán)基，所述烷基、環(huán)烷基、芳烷基和雜環(huán)基可任選被一個(gè)或多個(gè)選自R10的取代基取代；R3，R4和R8獨(dú)立地選自1)H，2)C1-C10烷基，3)芳基，4)C2-C10烯基，5)C2-C10炔基，6)C1-C6全氟烷基，7)C1-C6芳烷基，8)C3-C8環(huán)烷基，和9)雜環(huán)基，所述烷基、芳基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳烷基、和雜環(huán)基可任選被一個(gè)或多個(gè)選自R10的取代基取代；R10獨(dú)立地選自1)(C＝O)aObC1-C10烷基，2)(C＝O)aOb芳基，3)C2-C10烯基，4)C2-C10炔基，5)(C＝O)aOb雜環(huán)基，6)CO2H，7)鹵素，8)CN，9)OH，10)ObC1-C6全氟烷基，11)Oa(C＝O)bNR12R13，12)S(O)mRa，13)S(O)2NR12R13，14)氧代基，15)CHO，16)(N＝O)R12R13，17)(C＝O)aObC3-C8環(huán)烷基，和18)-OPO(OH)2；所述烷基、芳基、烯基、炔基、雜環(huán)基、和環(huán)烷基可任選被1、2或3個(gè)選自R11的取代基取代；R11選自1)(C＝O)rOs(C1-C10)烷基，2)Or(C1-C3)全氟烷基，3)氧代基，4)OH，5)鹵素，6)CN，7)(C2-C10)烯基，8)(C2-C10)炔基，9)(C＝O)rOs(C3-C6)環(huán)烷基，10)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-芳基，11)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-雜環(huán)基，12)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-N(Rb)2，13)C(O)Ra，14)(C0-C6)亞烷基-CO2Ra15)C(O)H，16)(C0-C6)亞烷基-CO2H，和17)C(O)N(Rb)2，18)S(O)mRa，19)S(O)2N(Rb)2，和20)-OPO(OH)2；所述烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、亞烷基、和雜環(huán)基可任選被最高達(dá)3個(gè)選自下列的取代基取代Rb，OH，(C1-C6)烷氧基，鹵素，CO2H，CN，O(C＝O)C1-C6烷基，氧代基，和N(Rb)2；R12和R13獨(dú)立地選自1)H，2)(C＝O)ObC1-C10烷基，3)(C＝O)ObC3-C8環(huán)烷基，4)(C＝O)Ob芳基，5)(C＝O)Ob雜環(huán)基，6)C1-C10烷基，7)芳基，8)C2-C10烯基，9)C2-C10炔基，10)雜環(huán)基，11)C3-C8環(huán)烷基，12)SO2Ra，和13)(C＝O)NRb2，所述烷基、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)基、烯基、和炔基可任選被1、2或3個(gè)選自R11的取代基取代，或者R12和R13可以與它們所連接的氮一起形成單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)，所述雜環(huán)在每個(gè)環(huán)中具有5-7個(gè)單元，并且除了所述氮以外，還可以任選含有一個(gè)或兩個(gè)選自N、O、和S的另外雜原子，所述單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)可任選被1、2、和3個(gè)選自R11的取代基取代；Ra是(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、芳基或雜環(huán)基；Rb是H、(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C＝O)OC1-C6烷基，(C＝O)C1-C6烷基或S(O)2Ra；Rc和Rc’獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基、和(C3-C6)環(huán)烷基；或者Rc和Rc’可以與它們所連接的氮一起形成單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)，所述雜環(huán)在每個(gè)環(huán)中具有5-7個(gè)單元，并且除了所述氮以外，還可以任選含有一個(gè)或兩個(gè)選自N、O、和S的另外雜原子，所述單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)可任選被1、2、和3個(gè)選自R11的取代基取代；Rd和Rd′獨(dú)立地選自(C1-C6)烷基、(C1-C6)烷氧基和NRb2，或者Rd和Rd′可以與它們所連接的磷一起形成單環(huán)雜環(huán)，所述雜環(huán)在每個(gè)環(huán)中具有5-7個(gè)單元，并且除了所述磷以外，還可以任選含有一個(gè)或兩個(gè)選自NRe、O、和S的另外雜原子，所述單環(huán)雜環(huán)可任選被1、2、和3個(gè)選自R11的取代基取代；和Re選自H和(C1-C6)烷基；并且條件是在式II化合物中至少存在一個(gè)取代基-OPO(OH)2。
3.權(quán)利要求2的化合物，其中所述化合物是式III化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽或立體異構(gòu)體 其中a是0或1；b是0或1；m是0、1、或2；r是0或1；s是0或1；R1選自1)(C＝O)C1-C10烷基，2)(C＝O)芳基，3)(C＝O)C3-C8環(huán)烷基，4)(C＝O)雜環(huán)基，5)(C＝O)NRcRc′，6)(C＝S)NRcRc′，7)SO2NRcRc′，8)SO2C1-C10烷基，9)SO2-芳基，和10)SO2-雜環(huán)基，所述烷基、芳基、環(huán)烷基、和雜環(huán)基任選被一個(gè)或多個(gè)選自R10的取代基取代；R3，R4和R8獨(dú)立地選自1)H，2)C1-C10烷基，和3)C1-C6全氟烷基，所述烷基可任選被一個(gè)或多個(gè)選自R10的取代基取代；R10和R10b獨(dú)立地選自1)(C＝O)aObC1-C10烷基，2)(C＝O)aOb芳基，3)C2-C10烯基，4)C2-C10炔基，5)(C＝O)aOb雜環(huán)基，6)CO2H，7)鹵素，8)CN，9)OH，10)ObC1-C6全氟烷基，11)Oa(C＝O)bNR12R13，12)S(O)mRa，13)S(O)2NR12R13，14)氧代基，15)CHO，16)(N＝O)R12R13，17)(C＝O)aObC3-C8環(huán)烷基，和18)-OPO(OH)2；所述烷基、芳基、烯基、炔基、雜環(huán)基、和環(huán)烷基任選被1、2或3個(gè)選自R11的取代基取代；R10a是鹵素；R11選自1)(C＝O)rOs(C1-C10)烷基，2)Or(C1-C3)全氟烷基，3)氧代基，4)OH，5)鹵素，6)CN，7)(C2-C10)烯基，8)(C2-C10)炔基，9)(C＝O)rOs(C3-C6)環(huán)烷基，10)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-芳基，11)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-雜環(huán)基，12)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-N(Rb)2，13)C(O)Ra，14)(C0-C6)亞烷基-CO2Ra15)C(O)H，16)(C0-C6)亞烷基-CO2H，17)C(O)N(Rb)2，18)S(O)mRa，19)S(O)2N(Rb)2，和20)-OPO(OH)2，所述烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、和雜環(huán)基可任選被最高達(dá)3個(gè)選自下列的取代基取代Rb，OH，(C1-C6)烷氧基，鹵素，CO2H，CN，O(C＝O)C1-C6烷基，氧代基，和N(Rb)2；R12和R13獨(dú)立地選自1)H，2)(C＝O)ObC1-C10烷基，3)(C＝O)ObC3-C8環(huán)烷基，4)(C＝O)Ob芳基，5)(C＝O)Ob雜環(huán)基，6)C1-C10烷基，7)芳基，8)C2-C10烯基，9)C2-C10炔基，10)雜環(huán)基，11)C3-C8環(huán)烷基，12)SO2Ra，和13)(C＝O)NRb2，所述烷基、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)基、烯基、和炔基可任選被1、2或3個(gè)選自R11的取代基取代，或者R12和R13可以與它們所連接的氮一起形成單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)，所述雜環(huán)在每個(gè)環(huán)中具有5-7個(gè)單元，并且除了所述氮以外，還可以任選含有一個(gè)或兩個(gè)選自N、O、和S的另外雜原子，所述單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)可任選被1、2、和3個(gè)選自R11的取代基取代；Ra獨(dú)立地選自(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、芳基或雜環(huán)基；Rb獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C＝O)OC1-C6烷基，(C＝O)C1-C6烷基或S(O)2Ra；和Rc和Rc’獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基、和(C3-C6)環(huán)烷基；或者Rc和Rc’可以與它們所連接的氮一起形成單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)，所述雜環(huán)在每個(gè)環(huán)中具有5-7個(gè)單元，并且除了所述氮以外，還可以任選含有一個(gè)或兩個(gè)選自N、O、和S的另外雜原子，所述單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)可任選被1、2、和3個(gè)選自R11的取代基取代；并且條件是在式III化合物中至少存在一個(gè)取代基-OPO(OH)2。
4.式IV化合物或其可藥用鹽或立體異構(gòu)體 其中a是0或1；b是0或1；m是0、1、或2；r是0或1；s是0或1；R1選自1)(C＝O)C1-C10烷基，2)(C＝O)芳基，3)(C＝O)C3-C8環(huán)烷基，4)(C＝O)雜環(huán)基，5)(C＝O)NRcRc′，6)(C＝S)NRcRc′，7)SO2NRcRc′，8)SO2C1-C10烷基，9)SO2-芳基，和10)SO2-雜環(huán)基，所述烷基、芳基、環(huán)烷基、和雜環(huán)基任選被一個(gè)或多個(gè)選自R10的取代基取代；R3，R4和R8獨(dú)立地選自1)H，2)C1-C10烷基，和3)C1-C6全氟烷基，所述烷基可任選被一個(gè)或多個(gè)選自R10的取代基取代；R10獨(dú)立地選自1)(C＝O)aObC1-C10烷基，2)(C＝O)aOb芳基，3)C2-C10烯基，4)C2-C10炔基，5)(C＝O)aOb雜環(huán)基，6)CO2H，7)鹵素，8)CN，9)OH，10)ObC1-C6全氟烷基，11)Oa(C＝O)bNR12R13，12)S(O)mRa，13)S(O)2NR12R13，14)氧代基，15)CHO，16)(N＝O)R12R13，17)(C＝O)aObC3-C8環(huán)烷基，和18)-OPO(OH)2；所述烷基、芳基、烯基、炔基、雜環(huán)基、和環(huán)烷基任選被1、2或3個(gè)選自R11的取代基取代；R10a是鹵素；R11選自1)(C＝O)rOs(C1-C10)烷基，2)Or(C1-C3)全氟烷基，3)氧代基，4)OH，5)鹵素，6)CN，7)(C2-C10)烯基，8)(C2-C10)炔基，9)(C＝O)rOs(C3-C6)環(huán)烷基，10)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-芳基，11)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-雜環(huán)基，12)(C＝O)rOs(C0-C6)亞烷基-N(Rb)2，13)C(O)Ra，14)(C0-C6)亞烷基-CO2Ra15)C(O)H，16)(C0-C6)亞烷基-CO2H，17)C(O)N(Rb)2，18)S(O)mRa，19)S(O)2N(Rb)2，和20)-OPO(OH)2，所述烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、和雜環(huán)基可任選被最高達(dá)3個(gè)選自下列的取代基取代Rb，OH，(C1-C6)烷氧基，鹵素，CO2H，CN，O(C＝O)C1-C6烷基，氧代基，和N(Rb)2；R12和R13獨(dú)立地選自1)H，2)(C＝O)ObC1-C10烷基，3)(C＝O)ObC3-C8環(huán)烷基，4)(C＝O)Ob芳基，5)(C＝O)Ob雜環(huán)基，6)C1-C10烷基，7)芳基，8)C2-C10烯基，9)C2-C10炔基，10)雜環(huán)基，11)C3-C8環(huán)烷基，12)SO2Ra，和13)(C＝O)NRb2，所述烷基、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)基、烯基、和炔基可任選被1、2或3個(gè)選自R11的取代基取代，或者R12和R13可以與它們所連接的氮一起形成單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)，所述雜環(huán)在每個(gè)環(huán)中具有5-7個(gè)單元，并且除了所述氮以外，還可以任選含有一個(gè)或兩個(gè)選自N、O、和S的另外雜原子，所述單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)可任選被1、2、和3個(gè)選自R11的取代基取代；Ra獨(dú)立地選自(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、芳基或雜環(huán)基；Rb獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C＝O)OC1-C6烷基，(C＝O)C1-C6烷基或S(O)2Ra；和Rc和Rc’獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基、和(C3-C6)環(huán)烷基；或者Rc和Rc’可以與它們所連接的氮一起形成單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)，所述雜環(huán)在每個(gè)環(huán)中具有5-7個(gè)單元，并且除了所述氮以外，還可以任選含有一個(gè)或兩個(gè)選自N、O、和S的另外雜原子，所述單環(huán)或二環(huán)雜環(huán)可任選被1、2、和3個(gè)選自R11的取代基取代；
5.選自下列的化合物3-{(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-1-[(二甲氨基)羰基]-2，5-二氫-1H-吡咯-2-基}苯基二氫磷酸酯；3-[(2S)-1-[(2S)-2-環(huán)丙基-2-羥基乙?；鵠-4-(2，5-二氟苯基)-2，5-二氫-1H-吡咯-2-基]苯基二氫磷酸酯；3-((2S)-4-(2，5-二氟苯基)-1-{[甲基(四氫呋喃-3-基)氨基]羰基}-2，5-二氫-1H-吡咯-2-基)苯基二氫磷酸酯；3-{(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-1-[(2S)-2-羥基-3，3-二甲基丁?；鵠-2，5-二氫-1H-吡咯-2-基}苯基二氫磷酸酯；(1S)-1-{[(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-l-基]羰基}-2，2-二甲基丙基氨基甲酸2-(磷?；?乙酯；和(1S)-1-環(huán)丙基-2-[(2S)-4-(2，5-二氟苯基)-2-苯基-2，5-二氫-1H-吡咯-1-基]-2-氧代乙基二氫磷酸酯；或其藥學(xué)上可接受的鹽或立體異構(gòu)體。
6.藥物組合物，所述組合物包含權(quán)利要求1的化合物和藥學(xué)上可接受的載體。
7.權(quán)利要求6的組合物，其中所述組合物還包含選自下列的第二化合物1)雌激素受體調(diào)節(jié)劑，2)雄激素受體調(diào)節(jié)劑，3)類視黃醇受體調(diào)節(jié)劑，4)細(xì)胞毒性劑/細(xì)胞生長(zhǎng)抑制劑，5)抗增殖劑，6)異戊烯基-蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑，7)HMG-CoA還原酶抑制劑，8)HIV蛋白酶抑制劑，9)逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑，10)血管生成抑制劑，11)PPAR-γ激動(dòng)劑，12)PPAR-δ激動(dòng)劑，13)細(xì)胞增殖和存活信號(hào)傳導(dǎo)抑制劑，和14)干擾細(xì)胞周期節(jié)點(diǎn)的活性劑。
8.權(quán)利要求1的化合物用于制備在需要這種治療的哺乳動(dòng)物中治療或預(yù)防癌癥的藥物的應(yīng)用。
9.權(quán)利要求1的化合物用于制備在需要這種治療的哺乳動(dòng)物中治療或預(yù)防癌癥的藥物的應(yīng)用，其中所述癌癥選自組織細(xì)胞性淋巴瘤、肺腺癌、小細(xì)胞肺癌、胰腺癌、成膠質(zhì)細(xì)胞瘤和乳腺癌。
10.權(quán)利要求1的化合物用于制備在需要這種調(diào)節(jié)的哺乳動(dòng)物中調(diào)節(jié)有絲分裂紡錘體形成的應(yīng)用。
11.權(quán)利要求1的化合物用于制備在需要這種抑制的哺乳動(dòng)物中抑制有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明涉及二氫吡咯化合物的磷酸酯前體藥物，所述化合物可用于治療細(xì)胞增殖疾病，治療與KSP驅(qū)動(dòng)蛋白活性有關(guān)的病癥，以及用于抑制KSP驅(qū)動(dòng)蛋白。本發(fā)明還涉及包含這些化合物的組合物，以及施用這些化合物治療哺乳動(dòng)物中癌癥的方法。
文檔編號(hào)C07F9/572GK1805928SQ200480016354
公開日2006年7月19日 申請(qǐng)日期2004年6月8日 優(yōu)先權(quán)日2003年6月12日
發(fā)明者M·E·弗拉利, R·M·加巴西奧, G·D·哈特曼, W·F·霍夫曼 申請(qǐng)人:麥克公司