專利名稱：：環(huán)糖的二硫化物、硫化物、亞砜和砜衍生物及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及環(huán)糖的二硫化物、硫化物、亞砜和砜衍生物及其在預(yù)防和/或治療血管疾病中的用途。
背景技術(shù)：
：一氧化氮(NO)是自然界中最小的和最簡(jiǎn)單的生物活性分子之一。此外，NO似乎是在哺乳動(dòng)物類中最常見的分子之一。作為最廣泛的信號(hào)傳輸分子之一，NO是控制體內(nèi)幾乎所有細(xì)胞和器官機(jī)能的主要角色。NO是僅有的能起到神經(jīng)遞質(zhì)、自體有效物質(zhì)、組成型介導(dǎo)子、誘導(dǎo)型介導(dǎo)子、細(xì)胞保護(hù)分子和細(xì)胞毒素分子作用的內(nèi)源分子。由于NO在調(diào)節(jié)大量不同的器官機(jī)能中起到諸多生理學(xué)的作用，因此NO通路的缺陷導(dǎo)致了多種不同病理學(xué)狀況的形成。這些疾病包括高血壓、動(dòng)脈粥樣硬化、冠狀動(dòng)脈疾病、心力衰竭、肺動(dòng)脈高血壓癥、中風(fēng)、陽痿、糖尿病中的血管并發(fā)癥、胃腸潰瘍、哮喘以及其它中樞、全身的神經(jīng)系統(tǒng)紊亂。所有的一氧化氮供體(NODs)在應(yīng)用于生物體系時(shí)均具有產(chǎn)生NO相關(guān)活性的共有性質(zhì)，并因此模擬出內(nèi)源NO響應(yīng)。然而，導(dǎo)致NO形成/釋放的通路在各種化合物中，由于它們的化學(xué)反應(yīng)性而存在顯著不同。盡管有一些化合物需要酶催化，而其他的化合物則非酶催化地產(chǎn)生NO。在一些化合物中，NO釋放之前有還原或氧化作用。該過程由于化合物對(duì)于pH、氧氣、光和溫度的特定易感性以及在分解或代謝中不同副產(chǎn)物的生成而變得更加復(fù)雜。另外，NO從給定化合物釋放的動(dòng)力學(xué)通常比NO釋放的絕對(duì)量更加重要。此外，NODs的組織分布以及NO產(chǎn)生的部位也是非常重要的。所有的這些考慮均是重要的，這是由于它們解釋了由文獻(xiàn)中描述的不同NODs獲得的及其不同的藥理學(xué)模式(profile)，并可以完全地確定在研發(fā)中新開發(fā)NODs的藥理學(xué)模式。在WO00/20420中公開了具有異山梨醇-一硝酸酯骨架的藥理學(xué)有效的NODs。其中公開的化合物并不構(gòu)成本發(fā)明的一部分。該申請(qǐng)描述了能夠提供強(qiáng)血管舒張效果并同時(shí)顯示出小的耐受效果或沒有耐受效果的有機(jī)硝酸酯。然而并沒有指示所述化合物在治療血小板活化；血栓形成；中風(fēng)；由于局部缺血和/或局部缺血/重灌注引起的組織損傷；在發(fā)病機(jī)理中氧化性應(yīng)激起重要作用的病理學(xué)狀況；和/或動(dòng)脈粥樣硬化中的可能用途。因此所述化合物的新用途構(gòu)成本發(fā)明的一部分。在文獻(xiàn)中描述的以及臨床中使用的硝化有機(jī)化合物的一個(gè)主要問題在于如下事實(shí)它們的作用機(jī)理是松弛血管平滑肌而不是緩和心血管疾病中涉及的其他病理過程。組織缺血導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)儲(chǔ)存的腺苷三磷酸被耗盡，使得隨后危害到內(nèi)皮細(xì)胞內(nèi)與膜相關(guān)的、依賴于ATP的離子泵功能。膜的機(jī)能障礙使得鈣、鈉和水進(jìn)入細(xì)胞。鈣以及其它離子在細(xì)胞內(nèi)累積的結(jié)果可導(dǎo)致細(xì)胞膨脹和胞酶的不適當(dāng)活化。在局部缺血中由于胞內(nèi)鈣升高而活化的一種酶是黃嘌呤脫氫酶(XDH)。在常規(guī)條件下，次黃嘌呤(ATP代謝的分解產(chǎn)物)以依賴于NADPH的方式被黃嘌呤脫氫酶氧化，從而產(chǎn)生黃嘌呤和尿酸。然而，在局部缺血的低氧狀況過程中，由于ATP水解使細(xì)胞內(nèi)的次黃嘌呤水平升高，且存在依賴于鈣的蛋白酶活化，該活化將還原NAPDH的XDH轉(zhuǎn)化為該酶的氧還原形式，即黃嘌呤氧化酶(XO)。由于流向組織的血流的恢復(fù)(重灌注)以及分子氧的重引入，XO將次黃嘌呤轉(zhuǎn)化為黃嘌呤和尿酸，并且其催化分子氧的還原以形成過氧化物陰離子基團(tuán)(O2-)和過氧化氫(H2O2)。該依賴于XO的氧基生成機(jī)制已經(jīng)用于解釋在各種器官，包括腸、腦、心和骨骼肌的重灌注損傷中涉及的O2-和H2O2。在局部缺血后的組織中產(chǎn)生的氧基團(tuán)能壓制用于保護(hù)內(nèi)皮細(xì)胞和薄壁細(xì)胞的內(nèi)源性抗氧劑的能力，所述內(nèi)源性抗氧劑例如過氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶、谷光甘肽。外源性抗氧劑例如SOD和過氧化氫酶已經(jīng)顯示出能減弱由于局部缺血和重灌注引起的白細(xì)胞浸潤和組織傷害。一氧化氮的生物利用率在重灌注中顯示降低，這可能是由于在內(nèi)皮中NO的產(chǎn)生減少以及由源自內(nèi)皮細(xì)胞的O2-所導(dǎo)致的NO失活增加。NO被限制的生物利用率導(dǎo)致了在重灌注中不正常的胞間相互作用以及血管機(jī)能障礙。一氧化氮供體化合物在局部缺血-重灌注的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭幸呀?jīng)顯示出作為保護(hù)劑的希望。然而，考慮到由于局部缺血-重灌注所導(dǎo)致的損傷中所包含的過程，人們對(duì)同時(shí)具有如下兩種性質(zhì)的分子產(chǎn)生了巨大的興趣作為NO供體，同時(shí)具有抗氧劑性能。動(dòng)脈粥樣硬化是由于血管內(nèi)皮的持續(xù)損傷引發(fā)的活性過程。對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化與危險(xiǎn)因素(高LDL血漿水平、低HDL血漿水平、高血壓、氧化性應(yīng)激、吸煙、糖尿病、高Lp(a)血漿水平或LDL變型，例如通過特定受體防止LDL移除的氧化或糖化)之間的關(guān)系進(jìn)行研究，逐漸形成將動(dòng)脈粥樣硬化視作對(duì)內(nèi)皮損傷應(yīng)答的觀點(diǎn)。作為血管的內(nèi)皮細(xì)胞活性運(yùn)輸?shù)慕Y(jié)果，LDL累積在血管壁中。在該過程中，一部分LDL分子被氧化。氧化LDL(ox-LDL)的存在在動(dòng)脈粥樣硬化性病變的形成中非常重要。氧化LDL在同樣程度上是引起動(dòng)脈粥樣硬化性病變的一些病理學(xué)特征的原因，這一理論來自于在培養(yǎng)的細(xì)胞體系中，在培養(yǎng)的細(xì)胞體系中氧化LDL引起了與已知?jiǎng)用}損傷方面有關(guān)的細(xì)胞改變，而不是由于天然的LDL引誘引起。內(nèi)皮損傷、LDL在內(nèi)膜小間隙中的保留、單核細(xì)胞募集到內(nèi)膜中、具有脂蛋白衍生脂類的巨噬細(xì)胞的充盈、平滑肌細(xì)胞的遷移和增殖、壞死細(xì)胞碎片的累積、以及血管收縮的趨勢(shì)和促凝血的活性是動(dòng)脈粥樣硬化的特征。心臟病患者異體移植血管病變是冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的異常加速和擴(kuò)散形式，其限制了心臟病患者移植的長期成功。冠狀內(nèi)皮血管舒張機(jī)能障礙是心臟病患者異體移植血管病變發(fā)生的常見和早期標(biāo)志。因此，除血管舒張活性以外，還結(jié)合有使其能緩和心血管疾病的其它病理過程的活性的新型硝化有機(jī)化合物，與目前使用的化合物相比具有顯著的優(yōu)勢(shì)，所述心血管疾病例如動(dòng)脈粥樣硬化和由局部缺血和/或由于局部缺血和重灌注引起的組織損傷。發(fā)明概述本發(fā)明的目的在于新型化合物即二失水己糖醇一硝酸酯衍生物，其能夠提供強(qiáng)血管舒張效果并能同時(shí)緩和心血管疾病中所涉及的其他病理過程，所述心血管疾病例如動(dòng)脈粥樣硬化、心臟病患者異體移植血管病變和由于局部缺血和/或由于局部缺血和重灌注引起的組織損傷。本發(fā)明的另一個(gè)目的在于一類新的化合物，雙失水己糖醇一硝酸酯的衍生物，即使在不改變血壓的劑量下，其也能夠提供有效的抗血栓形成效果。本發(fā)明的又一目的在于新型化合物即雙失水己糖醇一硝酸酯衍生物，其能夠提供提供與血栓溶解藥物、抗凝劑、抗血栓形成劑、抗氧化劑和低脂血藥物的協(xié)同效應(yīng)。本發(fā)明進(jìn)一步的目的涉及雙失水己糖醇一硝酸酯在制備用于治療與動(dòng)脈粥樣硬化相關(guān)的心血管疾病的藥物組合物中的新用途。發(fā)明詳述本發(fā)明的目的在于提供根據(jù)式(I)的化合物，或其互變異構(gòu)體、藥學(xué)可接受的鹽、前藥或溶劑化物其中n是0、1或2的整數(shù)，X表示-S(O)m-、-(C＝O)-或單鍵，其中m是0、1、或2的整數(shù)，其條件是當(dāng)X表示-(C＝O)-時(shí)n是0，R表示氫或殘基Ra，其中殘基Ra選自C1-6烷基；C2-6烯基；C3-8環(huán)烷基；C3-8環(huán)烷基，其中一個(gè)CH2基團(tuán)被O、S、NH或NCH3置換；C4-8環(huán)烯基；C4-8環(huán)烯基，其中一個(gè)CH2基團(tuán)被O、S、NH或NCH3置換；苯基；吡啶基；苯硫基；亞硝?；?；S-半胱氨?；?；S-谷胱甘肽基；和其中，R*選自氫、C1-6烷基、C2-6烯基、C3-8環(huán)烷基、C4-8環(huán)烯基、乙酰氧基、羥基、ONO2和鹵素，其中Ra任選地被一至三個(gè)獨(dú)立選自如下的基團(tuán)所取代C1-6烷基、C2-6烯基、C3-8環(huán)烷基、C4-8環(huán)烯基、乙酰氧基、羥基、ONO2和鹵素。優(yōu)選在根據(jù)式(I)的化合物中，當(dāng)相對(duì)于環(huán)平面，RXS(O)n-和-ONO2彼此成反式時(shí)，如式(Ia)和式(Ib)所示則RXS(O)n-不表示其中Z是C1-4烷基、芳基或芳烷基。令人驚訝的是，除了具有小的耐受性或沒有耐受性的強(qiáng)效血管舒張效果以外，式(I)的化合物具有抗血小板活化、抗血栓形成、抗中風(fēng)、抗氧化劑、抗由于局部缺血和/或由于局部缺血/重灌注引起的組織傷害/損害以及抗動(dòng)脈粥樣硬化的特性。本發(fā)明的另一實(shí)施方式涉及藥物組合物，所述藥物組合物含有至少一種式(I)的化合物或其互變異構(gòu)體、藥學(xué)可接受的鹽、前藥或溶劑化物作為活性成分。本發(fā)明的又一實(shí)施方式涉及至少一種式(I)的雙失水己糖醇一硝酸酯衍生物或其互變異構(gòu)體、藥學(xué)可接受的鹽、前藥或溶劑化物作為活性成分在制備用于預(yù)防和/或治療動(dòng)脈粥樣硬化、內(nèi)皮機(jī)能障礙、血管痙攣、心臟病患者異體移植血管病變、循環(huán)系統(tǒng)機(jī)能障礙、血小板活化、血栓形成、中風(fēng)、氧化性應(yīng)激在其發(fā)病機(jī)理中起重要作用的病理學(xué)狀況例如但不限于阿爾茨海默氏病、一氧化氮的缺乏在其發(fā)病機(jī)理中起重要作用的病理學(xué)狀況、和/或由于局部缺血和/或由于局部缺血/重灌注引起的組織損傷的藥物組合物中的用途。上面使用的措辭將在下面詳細(xì)地?cái)⑹龃朕o“其藥學(xué)可接受的鹽、前藥或溶劑化物”描述了向患者供藥(直接或間接)的任意藥學(xué)可接受的鹽、酯、溶劑化物或任意其它的化合物，其提供了本申請(qǐng)描述的化合物。然而，可以認(rèn)為藥學(xué)不可接受的鹽也包括在本發(fā)明的范圍內(nèi)，這是由于這些化合物可以用于制備藥學(xué)可接受的鹽。鹽、前藥和衍生物可以采用現(xiàn)有技術(shù)范圍內(nèi)的已知方法進(jìn)行制備。例如，本申請(qǐng)中描述的化合物的藥學(xué)可接受的鹽由含有酸性或堿性基團(tuán)的相應(yīng)化合物，通過常規(guī)化學(xué)方法合成。通常，這些鹽例如通過如下方式制備在水中或有機(jī)溶劑中或者二者的混合物中，使這些化合物的游離酸或堿形式以化學(xué)計(jì)量與相應(yīng)的堿或酸進(jìn)行反應(yīng)而制備。通常優(yōu)選非水介質(zhì)，例如醚、乙酸乙酯、異丙醇或乙腈。酸鹽的例子包括無機(jī)酸鹽，例如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽、磷酸鹽，以及有機(jī)酸鹽，例如醋酸鹽、馬來酸鹽、富馬酸鹽、檸檬酸鹽、乙二酸鹽、琥珀酸鹽、酒石酸鹽、扁桃酸鹽、甲磺酸鹽和對(duì)甲苯磺酸鹽。堿鹽的例子包括無機(jī)鹽，例如鈉、鉀、鈣、銨、鎂、鋁和鋰的鹽，以及有機(jī)鹽，例如乙二胺、乙醇胺、N，N-二亞烷基乙醇胺、三乙醇胺、葡糖胺和氨基酸的堿鹽。特別優(yōu)選的衍生物或前藥是當(dāng)將本發(fā)明化合物給藥至患者時(shí)，能提高化合物的生物利用率的物質(zhì)(例如，使得口腹形式的給藥化合物能更快地在血液中吸收)或增加相應(yīng)化合物向生物隔室(compartment)(例如腦或淋巴系統(tǒng))釋放的物質(zhì)。作為式(I)化合物前藥的任意物質(zhì)均包含在本發(fā)明的范圍內(nèi)。術(shù)語“前藥”具有最廣泛的意義，包括“體內(nèi)”代謝為本發(fā)明化合物的衍生物。取決于分子內(nèi)存在的官能團(tuán)，這樣的衍生物包括但不限于下述衍生物酯、氨基酸的酯、磷酸酯、磺化化合物的金屬鹽、氨基甲酸酯和酰胺酯。本發(fā)明的化合物可優(yōu)選為其結(jié)晶形式，或游離(free)化合物或溶劑化物?？梢允褂玫娜軇┗椒ㄊ乾F(xiàn)有技術(shù)中眾所周知的方法。適宜的溶劑化物是藥學(xué)可接受的溶劑化物。優(yōu)選溶劑化物為水合物。式(I)的化合物或其鹽或溶劑化物優(yōu)選為其可接受的藥學(xué)上基本純的形式。藥學(xué)可接受的形式應(yīng)理解為“尤其是”具有藥學(xué)可接受的純度水平，不包括諸如稀釋劑和載體的常見藥物添加劑，并以通常的劑量水平包含認(rèn)為是非毒性的材料。用于藥物的純度水平高于50％，優(yōu)選高于70％，更優(yōu)選高于90％。在式(I)的化合物或其鹽、溶劑化物或前藥的更優(yōu)選實(shí)施方式中，優(yōu)選純度高于95％。依賴于手性或異構(gòu)中心的存在，和/或依賴于多鍵(例如Z、E)的存在，式(I)表示的本發(fā)明化合物可包括對(duì)映異構(gòu)體。純異構(gòu)體、對(duì)映異構(gòu)體或非對(duì)映異構(gòu)體以及它們的混合物均包含在本發(fā)明的范圍內(nèi)。術(shù)語“鹵素”是指氟、氯、溴或碘，其中優(yōu)選溴。本申請(qǐng)中使用的術(shù)語“C1-6烷基”是指具有1-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，包括例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基和己基。本申請(qǐng)中使用的術(shù)語“C2-6烯基”是指直鏈或支鏈烯基，其具有2-6個(gè)碳原子和至少一個(gè)E或Z立體化學(xué)(如適用)雙鍵。該術(shù)語包括，例如乙烯基、烯丙基、1-和2-丁烯基和2-甲基-2-丙烯基。本申請(qǐng)中使用的術(shù)語“C3-8環(huán)烷基”是指具有3-8個(gè)碳原子的脂環(huán)基。這樣的環(huán)烷基的一些闡述性例子是環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基和環(huán)己基。因此，術(shù)語“C3-8環(huán)烷基，其中一個(gè)CH2基團(tuán)被O、S、NH或NCH3置換”是指具有3-8個(gè)碳原子的脂環(huán)基，其中一個(gè)CH2基團(tuán)被O、S、NH或NCH3置換。這樣的基團(tuán)的一些闡述性例子是四氫吡喃、四氫呋喃、吡咯烷、哌啶和四氫噻吩。術(shù)語“C4-8環(huán)烯基”是指具有4-8個(gè)碳原子的脂環(huán)基。這樣的環(huán)烯基的一些闡述性例子是環(huán)戊烯基、環(huán)己烯基、環(huán)庚烯基和環(huán)辛烯基。優(yōu)選R表示氫、C1-6烷基、C2-6烯基、C3-8環(huán)烷基、C4-8環(huán)烯基、(C1-6烷基)C3-8環(huán)烷基、(C1-6烷基)C4-8環(huán)烯基、苯基或(C1-6烷基)苯基、其中C1-6烷基是特別優(yōu)選的。進(jìn)一步優(yōu)選在式(I)中，m和n的一個(gè)為0，或兩個(gè)同時(shí)為0。還優(yōu)選X表示單鍵或-S-。特別優(yōu)選式(I)的化合物對(duì)應(yīng)于式(Ia)和/或式(Ib)表示的化合物式(I)的化合物還包括根據(jù)式(Ic)和式(Id)表示的(R)和(S)非對(duì)映異構(gòu)體特別優(yōu)選的式(I)的化合物是2-氫硫基異山梨醇-5-一硝酸酯，5，5’-二硝酸-2，2’-聯(lián)硫基二異山梨醇酯，2-甲硫基異山梨醇-5-一硝酸酯，2-[(R)-甲基亞磺酰基]異山梨醇-5-一硝酸酯，2-[(S)-甲基亞磺酰基]異山梨醇-5-一硝酸酯，2-甲基-亞磺酰基異山梨醇-5-一硝酸酯，2-甲基磺?；惿嚼娲?5-一硝酸酯，S-亞硝基-2-硫基異山梨醇-5-一硝酸酯，2-(四氫吡喃-2-基-硫基)異山梨醇-5-一硝酸酯，2-(異山梨醇基-2’-聯(lián)硫基)異山梨醇-5-一硝酸酯，和2-(5’-乙酰氧基異山梨醇基-2’-聯(lián)硫基)異山梨醇-5-一硝酸酯。此外，特別優(yōu)選使用2-乙酰基硫基-異山梨醇-5-一硝酸酯(化合物(12))，其互變異構(gòu)體、藥學(xué)可接受的鹽、前藥和/或溶劑化物作為制備用于預(yù)防和/或治療血栓形成、局部缺血、由于局部缺血和/或由于局部缺血和重灌注引起的細(xì)胞/組織損傷、高血壓、血管痙攣、動(dòng)脈粥樣硬化和/或心臟病患者移植血管病變的藥物組合物的活性成分。另外，式(I)的化合物，特別是2-乙?；蚧?異山梨醇-5-一硝酸酯(12)，其互變異構(gòu)體、藥學(xué)可接受的鹽、前藥和/或溶劑化物，還可以用于預(yù)防和/或治療動(dòng)脈粥樣硬化、心臟病患者異體移植血管病變、血小板活化、血栓形成、中風(fēng)、氧化性應(yīng)激在其發(fā)病機(jī)理中起重要作用的病理學(xué)狀況，和/或由于局部缺血和/或由于局部缺血-重灌注引起的組織損傷的治療中。這些化合物尤其可用于治療和/或預(yù)防氧化性應(yīng)激在其發(fā)病機(jī)理中起重要作用的病理學(xué)狀況，例如變態(tài)反應(yīng)、中風(fēng)、阿爾茨海默氏病和/或缺血性心血管疾病。該藥物組合物可以通過不同的途徑給藥。例如，它們可以以藥物制備物的形式例如片劑、膠囊、糖漿和懸浮劑的形式口服給藥。以溶液或乳劑等形式非腸道給藥。它們還可以以乳膏劑、發(fā)膏劑、香脂等的形式局部給藥，以及例如通過使用帖片或繃帶經(jīng)皮膚給藥。該制備物也可以制成藥栓直接作用于直腸。該制備物可以包括生理學(xué)可接受的載體、賦形劑、活化劑、螯合劑、穩(wěn)定劑等。在用于注射的情況下，其可以包含生理學(xué)可接受的緩沖劑、增溶劑或等滲劑。根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物可以進(jìn)一步包含溶血栓劑，優(yōu)選血纖維蛋白溶酶原活化劑、尿激酶、鏈激酶、阿替普酶(alteplase)或阿尼普酶(anistreplase)。它們還可以含有抗凝劑，優(yōu)選肝素、雙香豆素(dicoumarol)、醋酸香豆素(acenocoumarol)、依諾肝素(enoxaparine)或戊聚糖多硫酸酯。此外，它們還可以另含有抗血栓形成劑，優(yōu)選乙酰水楊酸、潘生丁(dipyridamole)、氯芐噻啶(ticlopidine)、氯吡格雷(clopidrogel)、三氟醋柳酸(triflusal)、戊聚糖多硫酸酯或阿昔單抗(abciximab)。它們可以進(jìn)一步含有對(duì)糖蛋白IIb/IIIa具有特異性的免疫球蛋白或其片段。或者，根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物可以進(jìn)一步含有降血脂劑，優(yōu)選辛伐他汀(simvastatin)、洛伐他汀(lovastatin)、阿托伐他汀(atorvastatin)、普伐他汀(pravastatin)、氟伐他汀(fluvastatin)、普伐他汀(eptastatin)、利非貝羅(lifibrol)、阿昔呋喃(acifran)、阿昔替酯(acitemate)、葡煙酯(glunicate)或羅伐他汀(rosuvastatine)。它們還可以含有抗氧化劑/自由基清除劑、優(yōu)選選自煙拉文(nicaraven)、雷諾嗪(ranolazine)、emoxipin、谷胱甘肽、依達(dá)拉奉(edaravone)、雷索司特(raxofelast)、番茄紅素(lycopene)、N-乙酰基-L-半胱氨酸、N-乙?；?D-半胱氨酸、N-乙酰基-L-半胱氨酸和N-乙?；?D-半胱氨酸的外消旋混合物或卡維地洛(carvedilol)。根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物可以用于治療和/或預(yù)防動(dòng)脈粥樣硬化、心臟病患者異體移植血管病變、血小板活化、血栓形成、中風(fēng)、由于局部缺血和/或由于局部缺血-重灌注引起的組織損傷、和/或氧化性應(yīng)激在其發(fā)病機(jī)理中起重要作用的病理學(xué)狀況(例如但并不限于變態(tài)反應(yīng)、中風(fēng)、阿爾茨海默氏病、缺血性心血管疾病)；和/或一氧化氮的缺乏在其發(fā)病機(jī)理中起重要作用的病理學(xué)狀況。它們還可以用于預(yù)防和/或治療循環(huán)系統(tǒng)機(jī)能障礙，優(yōu)選心血管機(jī)能障礙和冠狀動(dòng)脈機(jī)能障礙。每日的劑量可以根據(jù)特定的癥狀、年齡、患者的體重、給藥的特定方式等而不同，且用于成人的一天正常劑量可以為0.1-500mg，可以一天一次給藥，或一天分幾次給藥。根據(jù)本發(fā)明的化合物可以通過本領(lǐng)域中已知的制備方法、由本領(lǐng)域普通技術(shù)人員對(duì)已知方法的修改、或下述的新方法而制得。根據(jù)本發(fā)明，優(yōu)選通過下述的方法制備式(I)的化合物、其互變異構(gòu)體、藥學(xué)可接受的鹽、前藥或溶劑化物其中n是0、1或2的整數(shù)，X表示-S(O)m-或單鍵，其中m是0、1或2的整數(shù)，R表示氫或殘基Ra，其中殘基Ra選自C1-6烷基；C2-6烯基；C3-8環(huán)烷基；C3-8環(huán)烷基，其中一個(gè)CH2基團(tuán)被O、S、NH或NCH3置換；C4-8環(huán)烯基；C4-8環(huán)烯基，其中一個(gè)CH2基團(tuán)被O、S、NH或NCH3置換；苯基；吡啶基；苯硫基；亞硝?；?；S-半胱氨?；?；S-谷胱甘肽基；和其中，R*選自氫、C1-6烷基、C2-6烯基、C3-8環(huán)烷基、C4-8環(huán)烯基、乙酰氧基、羥基、ONO2和鹵素，其中，Ra任選被1-3個(gè)獨(dú)立地選自C1-6烷基、C2-6烯基、C3-8環(huán)烷基、C4-8環(huán)烯基、乙酰氧基、羥基、ONO2和鹵素的基團(tuán)取代，其方法包括實(shí)施如下步驟a)使式(IIa)的化合物其中R’是C1-6烷基，優(yōu)選甲基，水解，從而獲得如下化合物b)任選地，使根據(jù)步驟(a)制備的化合物I.進(jìn)行氧化反應(yīng)以獲得任選接著進(jìn)行二次氧化以獲得下述化合物其中n是1或2，X是-S(O)m-，其中m是0、1或2，R*表示羥基或ONO2；II.進(jìn)行取代反應(yīng)以獲得根據(jù)式(I)的化合物，其中n是0的整數(shù)，X表示鍵，且R不表示亞硝?；?，任選接著進(jìn)行氧化以獲得根據(jù)式(I)的化合物，其中n是0的整數(shù)，X表示-S(O)m-，其中m是0或1的整數(shù)，且R不表示亞硝?；籌II.進(jìn)行取代反應(yīng)以獲得根據(jù)式(I)的化合物，其中n是0的整數(shù)，X表示-S-；任選接著進(jìn)行氧化以獲得根據(jù)式(I)的化合物，其中n是1或2的整數(shù)，X表示-S(O)m-，其中m是0、1或2的整數(shù)；或IV.進(jìn)行亞硝化反應(yīng)以獲得根據(jù)本發(fā)明的上述方法，特別優(yōu)選制備式(Ia)的化合物、其互變異構(gòu)體、藥學(xué)可接受的鹽、前藥或溶劑化物其中n、X、m和R具有上述的定義，且其中所述方法包括實(shí)施下述步驟a)使式(II)的化合物其中R’是C1-6烷基，優(yōu)選甲基，水解，從而獲得2-氫硫基異山梨醇-5-一硝酸酯(1)b)任選地，使根據(jù)步驟(a)制備的化合物(1)I.進(jìn)行氧化反應(yīng)以獲得5，5’-二硝酸-2，2’-聯(lián)硫基二異山梨醇酯(2)或2-(異山梨醇基-2’-聯(lián)硫基)異山梨醇-5-一硝酸酯(8)，任選接著進(jìn)行二次氧化以獲得根據(jù)式(Ie)的化合物其中n是1或2，X是-S(O)m-，其中m是0、1或2，R*表示羥基或ONO2；II.進(jìn)行取代反應(yīng)以獲得根據(jù)式(Ia)的化合物，其中n是0的整數(shù)，X表示鍵，且R不表示亞硝?；?，任選接著進(jìn)行氧化以獲得根據(jù)式(Ia)的化合物，其中n是0的整數(shù)，X表示-S(O)m-，其中m是0或1的整數(shù)，且R不表示亞硝酰基；III.進(jìn)行取代反應(yīng)以獲得根據(jù)式(Ia)的化合物，其中n是0的整數(shù)，X表示-S-；任選接著進(jìn)行氧化以獲得根據(jù)式(Ia)的化合物，其中n是1或2的整數(shù)，X表示-S(O)m-，其中m是0、1或2的整數(shù)；或IV.進(jìn)行亞硝化反應(yīng)以獲得S-亞硝基-2-硫基異山梨醇-5-一硝酸酯(6)。本發(fā)明該新方法的任選步驟(b)在用于本發(fā)明特定化合物的方案1-4中圖示性地作了描述。這些方案1-4分別涉及氧化反應(yīng)I、取代反應(yīng)II、取代反應(yīng)III和亞硝化反應(yīng)IV。本發(fā)明特別優(yōu)選的方法包括用于制備如下化合物的步驟(a)和步驟(b)II2-[(R)-烷基亞磺酰基]異山梨醇-5-一硝酸酯和/或2-[(S)-烷基亞磺?；鵠異山梨醇-5-一硝酸酯。進(jìn)一步優(yōu)選對(duì)兩種非對(duì)映異構(gòu)體隨后進(jìn)行分離，可以通過現(xiàn)有技術(shù)中已知的常規(guī)方法進(jìn)行分離。本發(fā)明進(jìn)一步優(yōu)選的制備方法涉及式(11)的化合物、其互變異構(gòu)體、藥學(xué)可接受的鹽、前藥或溶劑化物的制備其中該方法包括如下步驟a)使式(III)的化合物其中，R’是C1-6烷基，優(yōu)選甲基，進(jìn)行氧化反應(yīng)，從而獲得2，2’-聯(lián)硫基二異山梨醇(10)，(b)在羧酸酐，優(yōu)選乙酸酐的存在下，使步驟(a)中制備的化合物與硝化劑進(jìn)行硝化反應(yīng)。最后，本發(fā)明的另一實(shí)施方式涉及化合物(10)即2，2’-聯(lián)硫基二異山梨醇，其是制備本發(fā)明化合物(11)的中間體化合物。在本申請(qǐng)的工作實(shí)施例(參見下文)中，詳細(xì)地描述了用于獲得根據(jù)通式(I)的各種化合物的適宜方法。在這些實(shí)施例的基礎(chǔ)上，通過適當(dāng)改進(jìn)本發(fā)明的工作實(shí)施例以獲得本發(fā)明沒有直接例舉的化合物屬于本領(lǐng)域技術(shù)人員的常識(shí)。對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員顯而易見的是，這些實(shí)施例僅僅用于闡述性的目的而并不是對(duì)本發(fā)明的限制。實(shí)施例如下示出的實(shí)施例中獲得的化合物通過其質(zhì)子(1H-NMR)和碳-13(13C-NMR)核磁共振光譜數(shù)據(jù)鑒定。核磁共振譜通過VarianGemini-2000或VarianGemini-300分光計(jì)記錄。在1H-NMR光譜中，標(biāo)明了用于記錄光譜的工作頻率和所用溶劑。信號(hào)的位置用δ(ppm)表示，其以溶劑質(zhì)子的信號(hào)作為參比。氘代氯仿的參比值為7.24ppm，氘代二甲基亞砜的參比值為2.49ppm。有時(shí)以四甲基硅烷(TMS)質(zhì)子獲得的信號(hào)作為內(nèi)參比，其以0ppm作為參比值。在括號(hào)內(nèi)標(biāo)出了通過電子積分測(cè)量的各信號(hào)的質(zhì)子數(shù)量，以及信號(hào)的類型，該類型用下述縮寫符號(hào)表示s(單峰)、d(雙峰)、t(三峰)、dd(雙二重峰)、ddd(雙二倍二重峰)、bs(寬信號(hào))、cs(復(fù)合信號(hào))、s.a.D2O(氘化作用后簡(jiǎn)化)、d.a.D2O(氘化作用后消失)。在13C-NMR光譜中，標(biāo)明了每一光譜的工作頻率和所用溶劑。信號(hào)的位置用δ(ppm)表示，其以溶劑碳的信號(hào)作為參比。氘代氯仿的參比值為77.00ppm，六氘代二甲基亞砜的參比值為39.50ppm。在一些情況下，也使用脈沖序列APT(附著質(zhì)子測(cè)試)、HETCOR(異核化學(xué)位移相關(guān)譜)或CSY(關(guān)聯(lián)性光譜)作為輔助作業(yè)來進(jìn)行核磁共振實(shí)驗(yàn)。在實(shí)驗(yàn)部分使用下述縮寫AcOEt乙酸乙酯AcOH乙酸DMSO-d6六氘代二甲基亞砜EtOH乙醇EtOEt乙醚HPLC高效液相色譜Hx己烷MeI碘代甲烷MeOH甲醇LC-(ApcI)MS液相色譜-大氣壓化學(xué)電離質(zhì)譜法s.d.標(biāo)準(zhǔn)偏差s.e.m.均值標(biāo)準(zhǔn)誤差THP四氫吡喃實(shí)施例1獲得2-氫硫基異山梨醇-5-一硝酸酯(1)的方法在50mL的燒瓶中，將1.00g(4.02mmol)根據(jù)WO00/20420獲得的2-乙?；蚧惿嚼娲?5-一硝酸酯(12)溶解在20.0mL甲醇中。瞬間加入10％氫氧化鈉的10.0mL甲醇溶液。在迅速密封并在室溫(約25℃)下攪拌1分鐘后，瞬間加入2.23mL濃鹽酸。攪拌濃縮至干燥，在低于30℃的溫度下減壓除去溶劑。將殘?jiān)鼞腋≡诼确轮?。過濾該氯仿溶液，然后通過無水硫酸鎂干燥。過濾后，減壓除去溶劑。對(duì)其減壓干燥從而獲得0.83g對(duì)應(yīng)于目標(biāo)產(chǎn)物的桔黃色油狀物。產(chǎn)率100％。1H-NMR(200MHz，CDCl3)5.36-5.26(1H，m，CHONO2)，4.95(1H，t，J＝5.0Hz，CHCHONO2)，4.42(1H，d，4.8Hz，CHCHS)，4.07(1H，dd，J＝4.6Hz，J＝4.4Hz，H-CHCHS)，3.97(1H，dd，J＝5.64Hz，J＝2.5Hz，H-CHCHONO2)，3.87-3.76(2H，cs，H-CHCHS，H-CHCHONO2)，3.45-3.35(1H，m，CHS)，1.77(1H，d，J＝8.6Hz，SH)。13C-NMR(50MHz，CDCl3)91.21(CHCHS)，81.22(CHONO2)，81.07(CHCHONO2)，76.15(CH2CHS)，69.26(CH2CHONO2)，42.82(CHS)。實(shí)施例2獲得5，5’-二硝酸-2，2’-聯(lián)硫基二異山梨醇酯的方法步驟1將0.50g根據(jù)WO00/20420獲得的2-乙酰基硫基異山梨醇-5-一硝酸酯(12)溶解在10.0mL的甲醇中。在劇烈的磁力攪拌下，將該溶液逐滴緩慢地加入盛于250mL燒瓶中的200mL人血漿中。在室溫下攪拌反應(yīng)混合物15小時(shí)。在劇烈攪拌下，將反應(yīng)粗產(chǎn)物倒入500.0mL乙腈中，觀察對(duì)應(yīng)于血漿蛋白的絮凝劑白色固體的瞬間沉淀。在20℃下，以3000rpm離心30分鐘，分離液體，并將固體(蛋白質(zhì))懸浮在250.0mL乙腈中。在與上述相同的條件(3000rpm/20℃/30分鐘)下攪拌并離心。將上清液輕輕倒出，并與上述的液體合并，在低于30℃的溫度下減壓蒸發(fā)溶劑，使用4×500mL氯仿將所得無水殘?jiān)?約200mL)進(jìn)行萃取。合并有機(jī)相并使用無水硫酸鎂干燥。過濾后，減壓濃縮溶劑。從而得到350mg白色固體，其通過如下色譜法提純(CHCl3/AcOEt6∶1)，分離出250mg對(duì)應(yīng)于2-硫基異山梨醇-5-一硝酸酯二硫化物(2)的白色固體產(chǎn)物。產(chǎn)率60％。步驟2在50mL的燒瓶中，將1.00g(4.02mmol)根據(jù)WO00/20420獲得的2-乙?；蚧惿嚼娲?5-一硝酸酯(12)溶解在20mL甲醇中，并加入10％氫氧化鈉的10.0mL甲醇溶液。密封反應(yīng)混合物并在室溫下攪拌5小時(shí)。在反應(yīng)中觀察到對(duì)應(yīng)于二硫化物(2)的白色固體沉淀。濾出固體并使用甲醇進(jìn)行多次洗滌。減壓干燥，得到0.58g對(duì)應(yīng)于目標(biāo)產(chǎn)物2-硫基異山梨醇-5-一硝酸酯二硫化物(2)的白色固體產(chǎn)物。產(chǎn)率70％。1H-NMR(200MHz，DMSO-d6)5.51-5.43(2H，m，2CHONO2)，4.96(2H，t，J＝5.4Hz，2CHCHONO2)，4.51(2H，d，J＝4,8Hz，2CHCHS)，4.04-3.73(10H，cs，2CH2CHONO2，2CH2CHS，2CHS)。13C-NMR(50MHz，DMSO-d6)88.46(2CHCHS)，83.31(2CHONO2)，81.50(2CHCHONO2)，73.24(2CH2CHS)，69.95(2CH2CHONO2)，54.01(2CHS)。實(shí)施例3獲得2-甲硫基異山梨醇-5-一硝酸酯(3)的方法在50mL的燒瓶中，將1.00g(4.02mmol)根據(jù)WO00/20420獲得的2-乙酰基硫基異山梨醇-5-一硝酸酯(12)溶解在20.0mL甲醇中，并瞬間加入10％氫氧化鉀的5.0mL甲醇溶液。密封反應(yīng)物并在室溫下攪拌5分鐘。瞬間加入2.0mL碘代甲烷(32.00mmol)，將混合物密封并在室溫?cái)嚢?小時(shí)。濃縮至干燥，減壓除去溶劑。將殘?jiān)芙庠?50mL氯仿中，并用50mL的水進(jìn)行洗滌。分離有機(jī)相并使用3×50.0mL的水進(jìn)行洗滌。在使用無水硫酸鎂干燥后，進(jìn)行過濾并減壓除去溶劑。在減壓干燥后，得到0.68g對(duì)應(yīng)于目標(biāo)產(chǎn)物的白色固體。產(chǎn)率76％。1H-NMR(200MHz，CDCl3)5.34-5.26(1H，m，CHONO2)，4.93(1H，t，J＝5.2Hz，CHCHONO2)，4.48(1H，d，J＝4.8Hz，CHCHS)，4.14(1H，dd，J＝9.7Hz，J＝4.8Hz，H-CHCHS)，4.01(1H，dd，J＝11.2Hz，J＝3.0Hz，H-CHCHONO2)，4.01-3.81(2H，cs，H-CHCHS，H-CHCHONO2)，3.30-3.24(1H，m，CHS)，2.15(3H，s，CH3)。13C-NMR(50MHz，CDCl3)88.65(CHCHS)，81.55(CHCHONO2)，81.26(CHONO2)，73.87(CH2CHS)，69.10(CH2CHONO2)50.74(CHS)，14.74(CH3)。實(shí)施例4獲得2-[(R)-甲基亞磺?；鵠異山梨醇-5-一硝酸酯(4)和2-[(S)-甲基亞磺?；鵠異山梨醇-5-一硝酸酯(4bis)的方法在50ml的燒瓶中，將7.3g(32.9mmol)根據(jù)實(shí)施例3獲得的2-甲硫基異山梨醇-5-一硝酸酯(3)溶解在75mL二烷中。非常緩慢地逐滴加入7.04g(32.9mmol)NaIO4的110mL水溶液，然后在室溫下攪拌1小時(shí)。過濾混合物，然后減壓從濾液中除去二烷。加入150mL水。使用2×300mL份氯仿萃取混合物。使用無水硫酸鎂進(jìn)行干燥，過濾并減壓除去溶劑。得到6.6g含有65％的(4)和35％的(4bis)的非對(duì)映異構(gòu)體混合物的反應(yīng)粗產(chǎn)物。使用二烷重結(jié)晶所得反應(yīng)粗產(chǎn)物兩次，從而得到HPLC測(cè)定純度為95％的目標(biāo)產(chǎn)物(4)。使用第一次重結(jié)晶的母液，減壓除去溶劑，將所得殘?jiān)远韧橹亟Y(jié)晶，從而獲得HPLC測(cè)定純度為95％的1g目標(biāo)產(chǎn)物(4bis)。2-[(R)-甲基亞磺?；鵠異山梨醇-5-一硝酸酯(4)1H-NMR(200MHz，CDCl3)5.39-5.28(1H，m，CHONO2)，5.02(1H，dd，J＝5.6Hz，J＝1.6Hz，CHCHS)，4.89(1H，t，J＝5.5Hz，CHCHONO2)，4.29(1H，dd，J＝10.4Hz，J＝6.4Hz，H-CHCHS)，4.20-3.91(3H，cs，H-CHCHS，CH2CHONO2)，3.38-3.31(1H，m，CHSO)，2.61(3H，s，CH3)。13C-NMR(50MHz，CDCl3)82.11(CHCHONO2)，81.51(CHCHS)，80.55(CHONO2)，69.65(CH2CHS)69.28(CH2CHONO2)，66.24(CHSO)，37.28(CH3)。微量分析計(jì)算值(％)35.44C；4.67H；5.90N；13.51S；40.47O實(shí)驗(yàn)值(％)35.31C；4.67H；5.98N；13.5S；40.60O質(zhì)譜(至20V的LC-(ApcI)MS)238(M+1)+熔點(diǎn)由DSC測(cè)得153℃單晶X-射線衍射非對(duì)映異構(gòu)體(4)的結(jié)構(gòu)(configuration)確定為(R)-S，(S)-C2，(S)-C3，(S)-C4，(R)-C52-[(S)-甲基亞磺酰基]異山梨醇-5-一硝酸酯(4bis)1H-NMR(200MHz，CDCl3)5.39-5.28(1H，m，CHONO2)，4.89(1H，t，J＝5，6Hz，CHCHONO2)，4.68(1H，d，5，4Hz，CHCHS)，4.40-3.88(4H，cs，CH2CHS，CH2CHONO2)，3.48-3.40(1H，m，CHSO)，2.58(3H，s，CH3)。13C-NMR(50MHz，CDCl3)82.89(CHCHS)，82.26(CHCHONO2)，80.55(CHONO2)，69.19(CH2CHONO2)，67.88(CH2CHS)，66.94(CHSO)，36.64(CH3)。微量分析(％)計(jì)算值(％)35.44C；4.67H；5.90N；13.51S；40.47O實(shí)驗(yàn)值(％)35.65C；4.66H；5.87N；13.56S；40.57O質(zhì)譜(至20V的LC-(ApcI)MS)238(M+H)+熔點(diǎn)由DSC測(cè)得115℃單晶X-射線衍射非對(duì)映異構(gòu)體(4bis)的結(jié)構(gòu)確定為(S)-S，(S)-C2，(S)-C3，(S)-C4，(R)-C5實(shí)施例5獲得2-甲基磺?；惿嚼娲?5-一硝酸酯的方法在燒瓶中，將1.0g(4.5mmol)根據(jù)實(shí)施例3獲得的2-甲硫基異山梨醇-5-一硝酸酯(3)溶解在20mL乙腈中。瞬間加入4.11g(18.1mmol)高碘酸(H5IO6)溶液，然后在室溫下攪拌48小時(shí)。加入50mLNa2SO3飽和溶液。使用2×30mL的二氯甲烷對(duì)其進(jìn)行萃取。合并有機(jī)相，并使用2×30mLNa2SO3飽和溶液洗滌。使用無水硫酸鎂進(jìn)行干燥，過濾并減壓除去溶劑。得到662mg目標(biāo)產(chǎn)物(5)。將640mg粗產(chǎn)物懸浮在25mL己烷中，過濾并使用7.5mL氯仿進(jìn)行洗滌，得到450mg通過HPLC測(cè)定純度為99.7％的產(chǎn)物(5)。1H-NMR(200MHz，DMSO-d6)5.53-5.47(1H，m，CHONO2)，5.00-4.88(2H，cs，CHCHONO2，CHCHS)，4.38(1H，dd，J＝9.8Hz，J＝1.8Hz，H-CHCHS)，4.12-3.86(4H，cs，H-CHCHS，CH2CHONO2，CHSO2)，3.07(3H，s，CH3)。13C-NMR(50MHz，DMSO-d6)82.77(CHCHS)，82.36(CHCHONO2)，81.81(CHONO2)，68.95(CH2CHONO2)，68.46(CH2CHS)，67.48(CHSO2)，39.31(CH3)。微量分析(％)計(jì)算值(％)33.20C；4.38H；5.53N；12.66S；44.23O實(shí)驗(yàn)值(％)33.45C；4.34H；5.52N；12.69S；44.43O質(zhì)譜(至20V的LC-(ApcI)MS)254(M+H)+熔點(diǎn)由DSC測(cè)得173℃實(shí)施例6獲得S-亞硝基-2-硫基異山梨醇-5-一硝酸酯(6)的方法在棕色瓶中，將0.5g(2.41mmol)根據(jù)實(shí)施例1獲得的2-氫硫基異山梨醇-5-一硝酸酯(1)溶解在4.0mLMeOH中，密封并在冰浴中攪拌。加入320μL(0.249g，2.41mmol)叔丁氧基亞硝酸酯，并在密封和冷凍環(huán)境下攪拌7小時(shí)。濾出白色固體并在避免光照的減壓和室溫下將濾液濃縮至干燥。從而得到0.48g(產(chǎn)率84％)確認(rèn)為S-亞硝基-2-硫基異山梨醇-5-一硝酸酯(6)的深紅色固體。1H-NMR(CDCl3，200MHz)5.40-5.25(sc，1H，CHONO2)，4.84-4.64(sc，2H，CHSNO，CHCHONO2)，4.40-4.30(m，2H，H-CHCHSNO，CHCHSNO)，4.12(dd，1H，J＝11.4Hz，J＝2.6Hz，H-CHCHONO2)，4.00-3.80(sc，2H，H-CHCHSNO，H-CHCHONO2)。13C-NMR(CDCl3，50MHz)88.2(CHCHSNO)，81.9+81.1(CHCHONO2，CHONO2)，73.4(CH2CHSNO)，69.5(CH2CHONO2)，51.6(CHSNO)。實(shí)施例7獲得2-(四氫吡喃-2-基-硫基)異山梨醇-5-一硝酸酯(7)的方法將0.5g(2.41mmol)根據(jù)實(shí)施例1獲得的2-氫硫基異山梨醇-5-一硝酸酯(1)懸浮在6mL的3，4-二氫-2H-吡喃中，將混合物在冰浴中冷卻。加入0.10g(0.40mmol)吡啶鎓對(duì)甲苯磺酸鹽，在氮?dú)夥諊褪覝叵聰嚢柽^夜。加入50mLEtOET，使用2×40mL的飽和NaCl溶液洗滌混合物。由此得到1.15g反應(yīng)粗產(chǎn)物，該粗產(chǎn)物通過色譜法(Hx∶AcOEt＝3∶2)提純，得到0.65g純度為83％的目標(biāo)產(chǎn)物。使用己烷重結(jié)晶，得到0.45g純度為95％的產(chǎn)物，通過其光譜學(xué)數(shù)據(jù)確認(rèn)為2-(四氫吡喃-2-基)-2-硫基異山梨醇-5-一硝酸酯(7)。1H-NMR(CDCl3，200MHz)5.28(ddd，1H，J＝11.0Hz，5.4Hz，2.8Hz，CHONO2)，5.0-4.85(sc，2H，CHSTHP，CHCHONO2)，4.59(dd，1H，J＝11.2Hz，4.6Hz，CHCHSTHP)，4.20-3.80(sc，5H，CH2CHSTHP，H-CHCHONO2，CH2THP)，3.60-3.40(sc，2H，H-CHCHONO2，CHTHP)，2.00-1.45(sc，6H，3CH2THP)。13C-NMR(CDCl3，50MHz)89.5和89.1(CHCHS)，83.0和81.6(CHCHONO2)，81.4和81.3(CHSTHP，CHONO2)，74.9和74.1(CH2THP)，69.0和68.9(CH2CHSTHP)，64.8和64.7(CH2CHONO2)，49.1和47.6(CH2THP)，31.3和31.2(CH2THP)，25.4(CH2THP)，21.7和21.6(CH2THP)。實(shí)施例8獲得2-(異山梨醇基-2’-聯(lián)硫基)異山梨醇-5-一硝酸酯(8)的方法將0.170g(1.72mmol)琥珀酰亞胺的EtOH溶液加入至0.323g(1.56mmol)2-氫硫基異山梨醇-5-一硝酸酯(1)中。在出現(xiàn)白色沉淀后，加入0.168mg(2mmol)NaHCO3。在室溫下攪拌3小時(shí)45分鐘后，再加入100mg(1.19mmol)NaHCO3和10滴水。再繼續(xù)攪拌1小時(shí)30分鐘后，對(duì)混合物進(jìn)行回流。回流2小時(shí)后，減壓除去EtOH；加入150mL水和150mLAcOEt。形成乳液并加入NaCl(s)直至分成兩相。分離出有機(jī)相，使用2×150mL份的AcOEt洗滌水相。將有機(jī)相分成三份，分別用100mL水進(jìn)行洗滌，并將有機(jī)相合并，使用無水Na2SO4干燥。進(jìn)行過濾，使用AcOEt洗滌，并從濾液中減壓除去溶劑，從而獲得336mg反應(yīng)粗產(chǎn)物，對(duì)該粗產(chǎn)物進(jìn)行快速色譜(flashchromatography)處理。使用CHCl3/AcOEt為1∶1的混合物作為洗脫劑用于色譜分離，從而得到98mg目標(biāo)產(chǎn)物(8)的級(jí)分。1H-NMR(300MHz，CDCl3)5.40-5.32(1H，cs，CHONO2)，5.04-4.98(1H，cs，CHCHONO2)，4.70-4.60(3H，cs，3CH)，4.36-4.26(1H，cs，CHOH)，4.22-4.12(2H，cs，2H-CH)，4.10-4.00(3H，cs，3H-CH)，3.94-3.86(2H，cs，2H-CH)，3.68-3.56(3H，cs，2CH-S，1H-CH)，2.55(1H，d，J＝6.9Hz，OH).紅外光譜(在KBr顆粒中)3461cm-1，2987cm-1，1642cm-1，1465cm-1，1279cm-1，1077cm-1，846cm-1。微量分析實(shí)驗(yàn)值(％)39.53C，34.70H，4.77O，3.96N，17.04S。計(jì)算值(％)39.23C，34.84H，4.66O，3.81N，17.45S。質(zhì)譜電噴射368(M+1)。電子碰撞(m/z，(％相對(duì)豐度))367(7.4)(M+)，261(3.8)，160(8.6)，129(15.5)，127(14.2)，85(35.7)，69(100)。實(shí)施例9步驟1獲得2-氫硫基異山梨醇(9)和2，2’-聯(lián)硫基二異山梨醇(10)的方法在500mL的燒瓶中，將15g(74mmol)根據(jù)WO00/20420獲得的2-乙?；蚧惿嚼娲?13)溶解在225mLEtOH中。加入11.3gKOH的150mL85％水溶液。在室溫下攪拌所得混合物2小時(shí)，用AcOH(C)中和，并減壓除去EtOH。通過加入NaOH(S)將所得溶液調(diào)成堿性pH，并于室溫下在向溶液鼓入氣流的同時(shí)攪拌10小時(shí)。用HCl(C)酸化溶液，使其為pH＝4。減壓除去水，將得到的殘?jiān)偃芙庥贑H2Cl2中，過濾并使用無水Na2SO4干燥。過濾溶液，洗滌，并減壓從濾液中除去溶劑，從而得到9.22g反應(yīng)粗產(chǎn)物，使用不同的環(huán)己烷/乙酸乙酯作為洗脫劑對(duì)該粗產(chǎn)物進(jìn)行快速色譜提純。洗脫開始時(shí)使用3L的1∶1混合物，然后，極性溶劑的比例提高，首先使用2L的3∶5混合物，接著使用2L的1∶2混合物，最后只用AcOEt洗脫。2.64g硫醇(9)的級(jí)分和另外的3.06g二硫化物(10)從洗脫液中分離出。2-氫硫基異山梨醇(9)1H-NMR(200MHz，CDCl3)4.68-4.58(1H，cs，CHCHOH)，4.48-4.40(1H，cs，CHCHSH)，4.34-4.18(1H，bs，s.a.D2O，CHOH)，4.16-4.06(1H，mH-CHCHSH)，3.96-3.78(2H，cs，H-CHCHOH，H-CHCHSH)，3.62-3.50(1H，cs，1H-CHCHOH)，3.48-3.36(1H，cs，s.a.D2O，CHS)，2.80-2.60(1H，bs，d.a.D2O，OH)，1.75(1H，d，J＝8Hz，d.a.D2O，SH)。13C-NMR(50MHz，CDCl3)90.42(CHCHSH)，81.47(CHCHOH)，76.27(CH2CHSH)，74.00(CH2CHOH)，72.04(CHOH)，43.81(CHSH)。2，2′-聯(lián)硫基二異山梨醇(10)1H-NMR(200MHz，CDCl3)4.68-4.56(4H，cs，2CHCHS，2CHCHOH)，4.34-4.19(2H，cs，s.a.D2O，2CHOH)，4.19-3.97(4H，cs，2CH2CHS)，3.92-3.80(2H，cs，2H-CHCHOH)，3.66-3.52(4H，cs，2H-CHCHOH，2CHS)，2.63(2H，d，J＝6.6Hz，d.a.D2O，20H)。13C-NMR(50MHz，CDCl3)87.42(2CHCHS)，81.98(2CHCHOH)，73.93(2CH2CHOH)72.89(2CH2CHS)，72.07(2CHOH)，54.74(2CHS)。步驟2獲得5，5’-二乙酰氧基-2，2′-聯(lián)硫基二異山梨醇(14)和2-(5’-乙酰氧基異山梨醇基-2’-聯(lián)硫基)異山梨醇-5-一硝酸酯(11)的方法通過在0℃下，向7.5mL乙酸酐和12.5mL乙酸的混合物中緩慢、謹(jǐn)慎地添加1.8mL60％的HNO3，從而制得硝化混合物。在裝有回流冷凝器、溫度計(jì)和磁力攪拌器的100mL燒瓶中，將2.77g(8.6mmol)根據(jù)實(shí)施例8獲得的2，2’-聯(lián)硫基-二異山梨醇(10)溶解在17mL乙酸中，并加入3.5mL乙酸酐。在冰/鹽浴中于0℃下冷卻混合物。持續(xù)15分鐘滴加4mL上述制備的硝化混合物。在0℃下攪拌2小時(shí)，觀察反應(yīng)粗產(chǎn)物的固化。然后在室溫下攪拌2小時(shí)30分鐘。將反應(yīng)粗產(chǎn)物倒入100mL水中，過濾并用大量的水洗滌。將得到的固體在P2O5的存在下減壓干燥。由此得到2.69g反應(yīng)粗產(chǎn)物，將該粗產(chǎn)物通過制備級(jí)反相色譜進(jìn)行提純。使用乙腈∶水為1∶1的混合物作為用于色譜的洗脫劑。分離出1.01g二乙酸酯(14)(R＝COCH3)級(jí)分和另外的0.5g乙酸酯-硝酸酯(11)(R＝NO2)級(jí)分。5，5’-二乙酰氧基-2，2′-聯(lián)硫基二異山梨醇(R＝COCH3)(14)1H-NMR(200MHz，(CDCl3)5.16-5.02(2H，cs，2CHOCO)，4.85-4.76(2H，cs，2CH-O-C)，4.63-4.56(2H，cs，2CHOC)，4.17-4.05(2H，cs，2H-CH)，4.00-3.74(6H，cs，6H-CH)，3.56-3.48(2H，cs，2CHS)，2.09(6H，s，CH3)。13C-NMR(50MHz，CDCl3)170.27(2CO)，87.73(2CHCHS)，80.76(2CHCHO)，73.79(2CHO)，72.66(2CH2CHS)，70.46(2CH2CHO)，54.42(2CHS)，20.63(2CH3)。2-(5’-乙酰氧基異山梨醇基-2’-聯(lián)硫基-異山梨醇)5-一硝酸酯(R＝NO2)(11)1H-NMR(200MHz，CDCl3)5.37-5.28(1H，cs，CHONO2)，5.18-5.06(1H，cs，CHOCO)，5.02-4.94(1H，cs，CHOC)，4.87-4.78(1H，cs，CHOC)，4.64-4.56(2H，cs，2CHOC)，4.18-3.75(8H，cs，4CH2)，3.59-3.50(2H，cs，2CHS)，2.10(3H，s，CH3)。13C-NMR(50MHz，CDCl3)170.29(CO)，88.25(CH)，87.43(CH)，81.58(CH)，81.16(CH)，80.79(CH)，73.80(CH)，72.78(CH2)，72.66(CH2)，70.51(CH2)，69.32(CH2)，54.42(CHS)，53.72(CHS)，20.65(CH3)。質(zhì)譜化學(xué)電離(NH3)410(M+1)+，427(M+18)+。血管舒張測(cè)試試驗(yàn)中使用的方法與以下參考文獻(xiàn)中描述的基本相同*Furchgot，R.F.，″Methodsinnitricoxideresearch″；Feelisch&amp;Stamler，eds.，JohnWiley&amp;Sons，Chichester，England，pp567-581。*TrongvanbichnamK.，etal.，Jpn.J.Pharmacol.71(1996)；167-173。*Salas，E.，etal.，Eur.J.Pharmacol.258(1994)；47-55。以0.0001-10nM的濃度范圍，將不同的化合物按5種不同濃度進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，其中對(duì)每種化合物使用6-9個(gè)動(dòng)脈環(huán)。將獲得的結(jié)果與由用作對(duì)照產(chǎn)物的異山梨醇-5-一硝酸酯獲得的結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果在下表1中示出，并以EC50(有效濃度50)給出，其是各個(gè)測(cè)試化合物使動(dòng)脈環(huán)產(chǎn)生最大血管舒張的50％時(shí)的濃度，其中所述的動(dòng)脈環(huán)預(yù)先用1μM苯福林收縮。從該表可以看出，所有的測(cè)試化合物作為血管舒張劑，均比對(duì)照產(chǎn)物更有效。抑制血小板凝集的體外測(cè)試試驗(yàn)中使用的方法與以下參考文獻(xiàn)中描述的基本相同*Salas，E.，etal.，Br.J.Pharmacol.112(1994)；1071-1076。使用來自不少于6個(gè)不同健康人供體的富含血小板的血漿，以4種不同濃度測(cè)試化合物。將獲得的結(jié)果與由用作對(duì)照產(chǎn)物的5-異山梨醇一硝酸酯獲得的結(jié)果進(jìn)行比較。結(jié)果在表2中示出，并以IC50(抑制濃度50)表示，其是各個(gè)測(cè)試化合物對(duì)用ADP的次最大濃度(1-4μM)(ADP的次最大濃度是產(chǎn)生最大凝集的ADP最小量)獲得的凝集產(chǎn)生50％抑制時(shí)的濃度。從表2中可看出，所有測(cè)試化合物對(duì)血小板凝集均具有有效的抑制活性，其優(yōu)于對(duì)照化合物的活性。對(duì)人單核細(xì)胞和血小板粘附人內(nèi)皮細(xì)胞的抑制在用于確定化合物對(duì)血小板和單核細(xì)胞粘附人內(nèi)皮細(xì)胞的效果的試驗(yàn)中，所用方法與以下參考文獻(xiàn)中描述的基本相同DelMaschioA.etal.，JCellBiol1996；135497-510BombeliT.etal.，Blood1999；933831-3838ColoméC.etal；Atherosclerosis2000；149295-302；和Martin-SatueM.etal；BritishJournalofCancer1999；80；1169-1174U937-單核細(xì)胞對(duì)以TNF-α(50ng/ml)活化的融合人微血管內(nèi)皮細(xì)胞(HMEC-1)以及血小板對(duì)人臍帶內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)的粘附是用于確定化合物對(duì)細(xì)胞粘附的抑制效果的方法。預(yù)先以鈣黃綠素-AM(分子探針)標(biāo)記的單核細(xì)胞對(duì)以TNF-α活化的HMEC-1的粘附，是通過相關(guān)的細(xì)胞熒光測(cè)定而進(jìn)行評(píng)定。預(yù)先以抗CD36-FITC的MoAb標(biāo)記的洗滌后人血小板對(duì)活化的HUVEC(至少以50μg/mlLDL修飾，LDLmm)的粘附，是通過激光掃描血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀(LSC，Olympus)測(cè)定相關(guān)的細(xì)胞熒光而進(jìn)行評(píng)定。結(jié)果以相對(duì)于對(duì)照(在沒有化合物存在下的細(xì)胞粘附)的抑制百分比表示。表3示出了化合物對(duì)U937粘附活化的HMEC-1的效果。表4示出了化合物對(duì)血小板粘附活化的HUVEC的效果。表3表4表1預(yù)制穩(wěn)定劑在上表中，重量％濃度是以總進(jìn)料為基準(zhǔn)的。實(shí)施例3-5該系列實(shí)施例涉及由上述的預(yù)制穩(wěn)定劑2a和2b制備聚合物多元醇的方法。聚合物多元醇在兩級(jí)反應(yīng)體系中制備，該體系包括配置有一個(gè)葉輪和4個(gè)隔板的連續(xù)攪拌罐式反應(yīng)器(CSTR)(第一級(jí))和塞流式反應(yīng)器(第二級(jí))。在各個(gè)反應(yīng)器中的停留時(shí)間為約60分鐘。將反應(yīng)物從進(jìn)料槽通過一個(gè)串聯(lián)的靜止混合器、然后再通過一個(gè)進(jìn)料管連續(xù)泵送到反應(yīng)器中，反應(yīng)物得到很好的混合。反應(yīng)混合物的溫度控制在115±1℃。通過一個(gè)設(shè)計(jì)用來將各級(jí)的壓力控制在45psig的壓力調(diào)節(jié)器，使來自第二級(jí)反應(yīng)器的產(chǎn)物不斷溢出。然后使聚合物多元醇通過一個(gè)冷卻器，進(jìn)入收集容器。對(duì)粗產(chǎn)物進(jìn)行真空汽提，以除去揮發(fā)物。產(chǎn)物中聚合物的總重量％通過汽提前粗聚合物多元醇中測(cè)得的單體濃度來計(jì)算。該實(shí)施例中使用的參數(shù)列于表2中。實(shí)施例4和5表明，由PFS2a制備的聚合物多元醇的粘度低于由PFS<p>在確定化合物對(duì)LDL氧化的效果的試驗(yàn)中，所用方法與以下參考文獻(xiàn)中描述的基本相同SprangerT.，etal.，Chem.Phys.Lipids19989139-52LynchS.M.，etal.，Biochim.Biophys.Acta2000148511-22PedreoJ.，etal.，Thromb.Res.20009951-60。在試驗(yàn)中從新鮮人血漿中分離LDL顆粒以及使用Dil標(biāo)記的方法與在PedreoJ.etal.，Atherosclerosis2001；15599-112中描述的基本相同。低密度脂蛋白(LDL)的氧化修飾目前被認(rèn)為是動(dòng)脈粥樣硬化性心血管疾病形成的中心環(huán)節(jié)。LDL暴露于無珠蛋白的氯高鐵血紅素(高鐵離子Fe3+與原卟啉IX的絡(luò)合物)起到了能促進(jìn)LDL氧化的促氧化劑Fe3+的生理學(xué)來源的作用，其中氯高鐵血紅素來源于循環(huán)的紅血球中的血紅蛋白。體外加入化合物以確定其對(duì)由氯高鐵血紅素和H2O2誘導(dǎo)的LDL氧化的抑制活性。在2.5μM氯高鐵血紅素和5μMH2O2存在下，以0.2mg/ml的最終蛋白質(zhì)濃度培養(yǎng)LDL。通過測(cè)定共軛二烯來評(píng)定LDL顆粒的氧化修飾。在37℃下培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)樣品，每5分鐘自動(dòng)記錄在234nm處吸光度的增長，持續(xù)至少5小時(shí)。采用來自7個(gè)不同健康供體的LDL制備物，以7種不同的濃度測(cè)試化合物對(duì)由氯高鐵血紅素和H2O2誘導(dǎo)的LDL氧化的效果。表6示出了在10μM處的化合物抑制活性，其以相對(duì)于對(duì)照的遲滯期(形成共軛二烯的反應(yīng)開始所需的時(shí)間)增長百分比表示。表6<tablesid="table6"num="006"><tablewidth="745">對(duì)LDL氧化的抑制化合物相對(duì)于對(duì)照的遲滯期增長％(平均±均值標(biāo)準(zhǔn)誤差)異山梨醇-5-一硝酸酯0(1)290±8(12)117±56</table></tables>對(duì)血漿氧化的抑制在確定化合物對(duì)血漿氧化能力的效果的試驗(yàn)中，所用方法與在SprangerT.etal.，ChemPhysLipids1998；9139-52中描述的基本相同。血漿中脂蛋白的體外誘導(dǎo)氧化被認(rèn)為代表了動(dòng)脈壁內(nèi)脂蛋白氧化的相應(yīng)模型。對(duì)血漿脂蛋白氧化的評(píng)定方式為肝素化血漿的氧化能力，并以234nm處的吸光度增長方式通過分光光度法測(cè)量。體外加入化合物以確定其對(duì)Cu2+(CuSO4)誘導(dǎo)的血漿氧化能力的抑制活性。使用含有0.16MNaCl的磷酸緩沖鹽溶液(PBS)稀釋肝素化血漿，并通過50μMCuSO4開始氧化。在37℃下培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)樣品，每15分鐘自動(dòng)記錄234nm處吸光度的增長，持續(xù)至少12小時(shí)。使用來自7個(gè)不同健康供體的肝素化血漿，以7種不同的濃度測(cè)試化合物對(duì)由Cu2+誘導(dǎo)的血漿氧化能力的效果。表7示出了在10μM處的化合物抑制活性，其以相對(duì)于對(duì)照的遲滯期增長百分比表示。表7在以高膽固醇食物進(jìn)食的兔子中預(yù)防和治療動(dòng)脈粥樣硬化形成的效果使用的方法與在ShoreB，ShoreV.，InDayCE(ed)AtherosclerosisDrugDiscovery，PlenumPress，NewYorkandLondon，pp123-141，1976中描述的基本相同。在標(biāo)準(zhǔn)條件(22℃，40％-60％濕度)下喂養(yǎng)21只雄性新西蘭白兔(在開始記錄(protocol)時(shí)為10周大)，其具有規(guī)則的晝/夜循環(huán)且自由進(jìn)水。將動(dòng)物隨機(jī)分配至3組中的1組，組1(n＝5)接受標(biāo)準(zhǔn)喂食75天；組2(n＝16)接受同樣的飲食，但補(bǔ)充了1％(wt/wt)膽固醇45天。在該階段結(jié)束后，組2被分成隨機(jī)的兩組，治療組(n＝9)在另外的30天內(nèi)接受1.9mg/kg/天的化合物12(在其飲食中維持1％的膽固醇)，非治療組(n＝7)在另外的30天內(nèi)接受帶有1％膽固醇的飲食。研究變量包括甘油三酯和總膽固醇。在開始記錄(protocol)后的第75天，靜脈注射戊巴比妥使動(dòng)物安樂死。將深入骼動(dòng)脈1或2cm的整個(gè)主動(dòng)脈移除，并將該主動(dòng)脈固定在含有戊二醛(4％)的0.1M(pH7.4)磷酸鹽緩沖液中。以盲試的方式對(duì)樣品進(jìn)行肉眼和顯微鏡分析。解剖主動(dòng)脈，并用RedOil染色。除去外膜脂肪，縱向打開主動(dòng)脈，將其浸于RedOil溶液中過夜，使用丙二醇洗滌，并固定在平面上。使用標(biāo)準(zhǔn)照相機(jī)拍攝動(dòng)脈圖像。然后，拍攝主動(dòng)脈弓區(qū)域、胸主動(dòng)脈、腹主動(dòng)脈(腎臟管口)的3個(gè)切片。以石蠟包埋切片，使用切片機(jī)Ultracut(西班牙)切開，并通常使用hematosiline伊紅染色。使用標(biāo)準(zhǔn)照相機(jī)拍攝以RedOil和hematosiline伊紅染色的動(dòng)脈圖像。使用AGFA幻燈片掃描儀將圖像輸入Photoshop(Adobe)中。通過之前由LillieRD(Lillie，R.D.，1994，StainTechnology，vol.19，pp55)描述的方法，測(cè)定所有主動(dòng)脈中的損傷表面和組織樣品中內(nèi)膜的厚度。動(dòng)脈粥樣硬化性損傷(由以RedOil染色的動(dòng)脈評(píng)價(jià))表面或區(qū)域通過轉(zhuǎn)化為mm2的圖像像素?cái)?shù)目確定。動(dòng)脈的內(nèi)膜厚度(由以hematosiline伊紅染色的組織樣品評(píng)價(jià))以與在動(dòng)脈粥樣硬化性損傷的表面或區(qū)域中描述的相似方式以mm進(jìn)行定量。為了進(jìn)行如上測(cè)試，選擇含有肥胖紋損傷的切片，并確定內(nèi)膜厚度(從該動(dòng)脈的中膜到內(nèi)皮)。在每一主動(dòng)脈的四分體(quadrant)的代表性切片中確定損傷區(qū)域的平均厚度，并計(jì)算出統(tǒng)計(jì)學(xué)平均值。禁食血漿的總膽固醇、HDL膽固醇和甘油三酯水平在表8中示出。統(tǒng)計(jì)學(xué)檢取出樣品，則在等離子體處理之后約5分鐘進(jìn)行測(cè)量。將靜置在空氣內(nèi)的樣品放入不具有蓋子的陪替氏培養(yǎng)皿內(nèi)，使之暴露于空氣下。根據(jù)表5c可看出，隨著時(shí)間流逝，基片表面從親水表面變化為疏水性增加的表面。在等離子體處理之后，看到SYLGARD184SiliconeElastomer的印模表面可潤濕，但它們?cè)?-4天內(nèi)恢復(fù)到等離子體處理之前看到的起始接觸角。這一發(fā)現(xiàn)明顯地與以上表5a中等離子體處理的樣品相反，在表5a中，在3個(gè)月的時(shí)間段后，樣品沒有恢復(fù)到其起始疏水性質(zhì)。表5c實(shí)施例6有機(jī)硅樹脂基片在玻璃載片上涂布交聯(lián)乙烯基化苯基倍半硅氧烷樹脂形式的有機(jī)硅樹脂樣品，根據(jù)實(shí)施例1等離子體處理，隨后在選擇區(qū)域內(nèi)微接觸印刷(根據(jù)實(shí)施例1)，以研究等離子體處理的耐久性和在有機(jī)硅樹脂上的硅氧烷印刷。表6給出的結(jié)果顯示出等離子體處理、然后用PDMS350mm2S-1和三甲基甲硅烷基封端的甲基氫硅氧烷在特定區(qū)域微接膜的厚度顯著減少。在apoE-缺陷小鼠中對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的預(yù)防和治療效果本發(fā)明化合物對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的預(yù)防和治療效果還通過下述實(shí)施例進(jìn)行闡述。在喂食標(biāo)準(zhǔn)飲食的apoE-缺陷小鼠模型中研究化合物對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化的預(yù)防和治療效果。對(duì)3個(gè)月大小的雄性或雌性apoE-缺陷小鼠(OLA129XC57/BL6J)喂食標(biāo)準(zhǔn)飲食。對(duì)照組包括8只雄性和7只雌性小鼠，而治療組由8只雄性和7只雌性小鼠組成。所有的動(dòng)物在實(shí)驗(yàn)開始時(shí)均具有類似的膽固醇水平和體重。研究對(duì)照組和治療組12星期。治療組接受5mg/Kg/天的化合物(12)。以預(yù)定的間隔測(cè)量血漿脂質(zhì)參數(shù)(總膽固醇、HDL膽固醇和甘油三酯)和氧化性應(yīng)激(測(cè)量8-異-前列腺素F2α水平)。在給藥期結(jié)束后，分離胸主動(dòng)脈并染色，根據(jù)RedOil法(Lillie，R.D.，1994，StainTechnology，vol.19，pp55)確定血管內(nèi)壁中存積的動(dòng)脈粥樣硬化性損傷。禁食血漿的總膽固醇、HDL膽固醇、甘油三酯和8-異-前列腺素F2α水平在表11中示出。表11血管內(nèi)壁上被動(dòng)脈粥樣硬化性損傷覆蓋的面積比以及被巨噬細(xì)胞覆蓋的面積在表12中示出。表12在表11中示出化合物(12)能降低血漿中甘油三酯的水平以及這些動(dòng)物的氧化性應(yīng)激。在表12中示出化合物(12)同時(shí)減少了動(dòng)脈粥樣硬化性損傷的面積和被巨噬細(xì)胞覆蓋的面積。體內(nèi)抗血栓形成的效果使用的方法與Kurz(KurzK.D.，etal.，Thromb.Res.1990，60269-280)描述的方法和Feuerstein(FeuersteinG.Z.，etal.，Artherioscler.Thromb.Vasc.Biol.1999，192554-25562)修改的方法基本相同。大鼠接受100mg/Kg化合物的單一口服劑量。在給藥45分鐘后，采用戊巴比妥鈉(40mg/kg，腹腔注射)使大鼠麻醉，并將其以后背側(cè)放置在加熱的(37℃)手術(shù)臺(tái)上。分離出左側(cè)頸動(dòng)脈并在其下放置ParafilmM膜(7×20mmAmericanNationalCan)。在該動(dòng)脈上放置測(cè)流動(dòng)的電磁探測(cè)計(jì)(electromagneticsounding)(TransonicSystemsInc.)以測(cè)定血流。在以產(chǎn)物給藥60分鐘后，將浸滿FeCl3溶液(70％)的紙貼片(patch)放置(在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中均不除去)在左側(cè)頸動(dòng)脈上，位于測(cè)流動(dòng)的探測(cè)計(jì)的下游，用以開始形成血栓。動(dòng)脈中應(yīng)用貼片后60分鐘內(nèi)監(jiān)測(cè)血流。當(dāng)不再發(fā)現(xiàn)有血流時(shí)(0.0ml/min)，認(rèn)為該血管完全被形成的血栓阻塞。在該模型中，非治療動(dòng)物中血栓通常在15-20分鐘內(nèi)形成。如果血栓在研究過程(使用貼片持續(xù)供應(yīng)FeCl3后60分鐘)中沒有阻塞脈管，則認(rèn)為該動(dòng)物完全被治療保護(hù)。結(jié)果在表13中示出，并表示為完全被治療保護(hù)的動(dòng)物的百分比。表13如表13可看出，所有的測(cè)試化合物均具有有效的體內(nèi)抗血栓形成活性。體內(nèi)協(xié)同抗血栓形成效果使用的方法與Kurz(KurzK.D.，etal.，Thromb.Res.1990，60269-280)描述的方法和Feuerstein(FeuersteinG.Z.，etal.，Artherioscler.Thromb.Vasc.Biol.1999，192554-25562)修改的方法基本相同。大鼠僅接受表14中所述的一種或兩種化合物組合的單一口服劑量。所用化合物的劑量并不改變動(dòng)物的血壓或心率。在給藥45分鐘后，采用戊巴比妥鈉(40mg/kg，腹腔注射)使大鼠麻醉，并將其以后背側(cè)放置在加熱的(37℃)手術(shù)臺(tái)上。分離左側(cè)頸動(dòng)脈并在其下放置ParafilmM膜(7×20mmAmericanNationalCan)。在該動(dòng)脈上放置測(cè)流動(dòng)的電磁探測(cè)計(jì)(TransonicSystemsInc.)以測(cè)定血流。在以產(chǎn)物給藥60分鐘后，將浸滿FeCl3溶液(70％)的紙貼片放置(在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中均不除去)在左側(cè)頸動(dòng)脈上，位于測(cè)流動(dòng)的探測(cè)計(jì)的下游，用以開始形成血栓。動(dòng)脈中應(yīng)用貼片后60分鐘內(nèi)監(jiān)測(cè)血流。當(dāng)不再發(fā)現(xiàn)有血流時(shí)(0.0ml/min)，認(rèn)為該血管完全被形成的血栓阻塞。在該模型中，非治療動(dòng)物中的阻塞性血栓通常在15-20分鐘內(nèi)形成。如果血栓在研究過程(使用貼片持續(xù)供應(yīng)FeCl3后60分鐘)中沒有阻塞血管，則認(rèn)為該動(dòng)物完全被治療保護(hù)。采用部分產(chǎn)物(fractionalproduct)的概念以用于鑒定化合物之間的協(xié)同作用。根據(jù)該概念，如果認(rèn)為動(dòng)物的完全保護(hù)為其中，A是治療組中血栓形成性阻塞的動(dòng)物比例，B是對(duì)照組中血栓形成性阻塞的動(dòng)物比例。表1N-{(1S)-3-[3-內(nèi)向-(5-異丁酰基-2-甲基-4，5，6，7-四氫-1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-1-基)-8-氮雜二環(huán)[3.2.1]辛-8-基]-1-(3-氟苯基)丙基}乙酰胺的PXRD峰數(shù)據(jù)表2N-{(1S)-3-[3-內(nèi)向-(5-異丁酰基-2-甲基-4，5，6，7-四氫-1H-咪唑并[4，5-c]吡啶-1-基)-8-氮雜二環(huán)[3.2.1]辛-8-基]-1-(3-氟苯基)丙基}乙酰胺.富馬酸鹽的PXRD峰數(shù)據(jù)由于兩種藥物(氯吡格雷+化合物12)結(jié)合給藥的動(dòng)物保護(hù)比例高于75％(為100％)，因而在兩種產(chǎn)物之間存在協(xié)同作用。使用XTT-基方法體外對(duì)HUVEC細(xì)胞中氧基誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性的保護(hù)使用的方法與CavedaL.，etal.(J.Clin.Invest.1996；98886-893)描述的基本相同。使用人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVEC)用于確定對(duì)氧基誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性的抑制能力。分離HUVEC并在M199和20％FCS(胎牛血清)中進(jìn)行培養(yǎng)。測(cè)試XTT試驗(yàn)是基于代謝活性細(xì)胞對(duì)四氮唑(tetrazolio)XTT鹽的水解以形成橙色產(chǎn)物，所形成的甲瓚(formazan)染料是可溶的，采用分光光度計(jì)對(duì)其直接進(jìn)行定量。培養(yǎng)HUVEC細(xì)胞直至在96孔組織培養(yǎng)板上出現(xiàn)亞融合狀態(tài)，并使用50μM化合物預(yù)處理1小時(shí)。之后，使用800μM過氧化亞硝酸鹽(peroxynitrite)對(duì)細(xì)胞處理過夜。過夜培養(yǎng)后，使用黃色XTT溶液(最終濃度為0.3mg/ml)培養(yǎng)該細(xì)胞4小時(shí)。在該培養(yǎng)階段之后，形成橙色甲瓚溶液，使用ELISA板讀取器在450nm處對(duì)其進(jìn)行分光光度定量。結(jié)果在表15中示出，并表示為死亡細(xì)胞的百分比。表15如表15中所看出，所有的測(cè)試化合物均對(duì)由氧基誘導(dǎo)的細(xì)胞損傷具有細(xì)胞保護(hù)活性(P＜0.05)。體內(nèi)在心臟中對(duì)局部缺血-重灌注損傷的保護(hù)根據(jù)先前由HirataYetal(JournalofCardiovascularPharmacology.1998，31322-326)描述的模型進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。在6小時(shí)的禁食期后，將動(dòng)物分成每組至少8只動(dòng)物的組。在誘導(dǎo)局部缺血前1小時(shí)通過口服(oralsounding)將產(chǎn)物給藥。使用戊巴比妥(40mg/kg，腹腔注射)使動(dòng)物麻醉，并記錄標(biāo)準(zhǔn)肢體導(dǎo)聯(lián)II心電圖以監(jiān)測(cè)S-波下陷(depression)。將0.3U/kg精氨酸加壓素(AVP)(SigmaChemicals，StLouis，Mo，USA)注入到頸動(dòng)脈中以誘導(dǎo)小冠狀動(dòng)脈的血管收縮并提高冠狀動(dòng)脈的耐受性。在所有組中，測(cè)試藥物給藥60分鐘后給予AVP。在所有的組中，注射AVP10分鐘后開始ECG記錄。結(jié)果在表16中示出，并表示為S-波衰減(μV)。方案1方案2方案3方案4權(quán)利要求1.根據(jù)式(I)的化合物或其互變異構(gòu)體、藥學(xué)可接受的鹽、前藥或溶劑化物其中n是0、1或2的整數(shù)，X表示-S(O)m-、-(C＝O)-或單鍵，其中m是0、1或2的整數(shù)，其條件是當(dāng)X表示-(C＝O)-時(shí)n是0，R表示氫或殘基Ra，其中殘基Ra選自C1-6烷基；C2-6烯基；C3-8環(huán)烷基；C3-8環(huán)烷基，其中一個(gè)CH2基團(tuán)被O、S、NH或NCH3置換；C4-8環(huán)烯基；C4-8環(huán)烯基，其中一個(gè)CH2基團(tuán)被O、S、NH或NCH3置換；苯基；吡啶基；苯硫基；亞硝?；籗-半胱氨?；?；S-谷胱甘肽基；和其中，R*選自氫、C1-6烷基、C2-6烯基、C3-8環(huán)烷基、C4-8環(huán)烯基、乙酰氧基、羥基、ONO2和鹵素；其中Ra任選地被1-3個(gè)獨(dú)立選自C1-6烷基、C2-6烯基、C3-8環(huán)烷基、C4-8環(huán)烯基、乙酰氧基、羥基、ONO2和鹵素的基團(tuán)取代，其條件是當(dāng)RXS(O)n-和-ONO2相對(duì)于環(huán)平面彼此成反式時(shí)，如式(Ia)和式(Ib)所示則RXS(O)n-不表示其中Z是C1-4烷基、芳基或芳烷基。2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中m和n的一個(gè)為0，或兩個(gè)同時(shí)為0。3.根據(jù)權(quán)利要求1-2任一項(xiàng)的化合物，其中X表示單鍵或-S-。4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)的化合物，其中R表示氫、C1-6烷基、C2-6烯基、C3-8環(huán)烷基、C4-8環(huán)烯基、(C1-6烷基)C3-8環(huán)烷基、(C1-6烷基)C4-8環(huán)烯基、苯基、(C1-6烷基)苯基、5-乙酰氧基異山梨醇-2-基、5-羥基異山梨醇-2-基或5-硝酸基異山梨醇-2-基。5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)的化合物，其中R是C1-6烷基。6.根據(jù)權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)的化合物，其為根據(jù)式(Ic)或(Id)的化合物7.根據(jù)權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)的化合物，其選自2-氫硫基異山梨醇-5-一硝酸酯，5，5’-二硝酸-2，2’-聯(lián)硫基二異山梨醇酯，2-甲硫基異山梨醇-5-一硝酸酯，2-[(R)-甲基亞磺?；鵠異山梨醇-5-一硝酸酯，2-[(S)-甲基亞磺?；鵠異山梨醇-5-一硝酸酯，2-甲基亞磺?；惿嚼娲?5-一硝酸酯，2-甲基磺?；惿嚼娲?5-一硝酸酯，S-亞硝基-2-硫基異山梨醇-5-一硝酸酯，2-(四氫吡喃-2-基-硫基)異山梨醇-5-一硝酸酯，2-(異山梨醇基-2’-聯(lián)硫基)異山梨醇-5-一硝酸酯，和2-(5’-乙酰氧基異山梨醇基-2’-聯(lián)硫基)異山梨醇-5-一硝酸酯。8.含有至少一種根據(jù)權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)的化合物作為活性成分的藥物組合物，所述藥物組合物任選地帶有一種或多種生理學(xué)可接受的賦形劑、活化劑、螯合劑和/或穩(wěn)定劑。9.根據(jù)權(quán)利要求8的藥物組合物，其進(jìn)一步含有溶血栓劑，優(yōu)選血纖維蛋白溶酶原活化劑、尿激酶、鏈激酶、阿替普酶或阿尼普酶。10.根據(jù)權(quán)利要求8或9的藥物組合物，其進(jìn)一步含有抗凝劑，優(yōu)選肝素、雙香豆素、醋酸香豆素、依諾肝素或戊聚糖多硫酸酯。11.根據(jù)權(quán)利要求8-10任一項(xiàng)的藥物組合物，其進(jìn)一步含有抗血栓形成劑，優(yōu)選乙酰水楊酸、潘生丁、氯芐噻啶、氯吡格雷、三氟醋柳酸、戊聚糖多硫酸酯或阿昔單抗。12.根據(jù)權(quán)利要求8-11任一項(xiàng)的藥物組合物，其進(jìn)一步含有對(duì)糖蛋白IIb/IIIa具有特異性的免疫球蛋白或其片段。13.根據(jù)權(quán)利要求8-12任一項(xiàng)的藥物組合物，其進(jìn)一步含有降血脂劑，優(yōu)選辛伐他汀、洛伐他汀、阿托伐他汀、普伐他汀(pravastatin)、氟伐他汀、普伐他汀(eptastatin)、利非貝羅、阿昔呋喃、阿昔替酯、葡煙酯和羅伐他汀。14.根據(jù)權(quán)利要求8-13任一項(xiàng)的藥物組合物，其進(jìn)一步含有抗氧化劑/自由基清除劑，優(yōu)選煙拉文、雷諾嗪、emoxipin、谷胱甘肽、依達(dá)拉奉、雷索司特、番茄紅素、N-乙?；?L-半胱氨酸、N-乙?；?D-半胱氨酸、N-乙酰基-L-半胱氨酸與N-乙?；?D-半胱氨酸的外消旋混合物或卡維地洛。15.根據(jù)權(quán)利要求8-14任一項(xiàng)的藥物組合物，其用于預(yù)防和/或治療動(dòng)脈粥樣硬化、內(nèi)皮機(jī)能障礙、血管痙攣、心臟病患者異體移植血管病變、循環(huán)系統(tǒng)機(jī)能障礙、血小板活化、血栓形成、中風(fēng)、氧化性應(yīng)激在其發(fā)病機(jī)理中起重要作用的病理學(xué)狀況、一氧化氮的缺乏在其發(fā)病機(jī)理中起重要作用的病理學(xué)狀況、和/或由于局部缺血和/或由于局部缺血-重灌注引起的組織損傷。16.根據(jù)權(quán)利要求15的藥物組合物，其中氧化性應(yīng)激在其發(fā)病機(jī)理中起重要作用的病理學(xué)狀況選自變態(tài)反應(yīng)、中風(fēng)、阿爾茨海默氏病和缺血性心血管疾病。17.根據(jù)權(quán)利要求8-14任一項(xiàng)的藥物組合物，其用于治療和/或預(yù)防循環(huán)系統(tǒng)機(jī)能障礙，優(yōu)選心血管和/或冠狀動(dòng)脈機(jī)能障礙。18.至少一種式(I)的化合物或其互變異構(gòu)體、藥學(xué)可接受的鹽、前藥或溶劑化物作為活性成分在制造用于預(yù)防和/或治療動(dòng)脈粥樣硬化、內(nèi)皮機(jī)能障礙、血管痙攣、心臟病患者異體移植血管病變、循環(huán)系統(tǒng)機(jī)能障礙、血小板活化、血栓形成、中風(fēng)、氧化性應(yīng)激在其發(fā)病機(jī)理中起重要作用的病理學(xué)狀況、一氧化氮的缺乏在其發(fā)病機(jī)理中起重要作用的病理學(xué)狀況、和/或由于局部缺血和/或由于局部缺血-重灌注引起的組織損傷的藥物組合物中的應(yīng)用其中n是0、1或2的整數(shù)，X表示-S(O)m-、-(C＝O)-或單鍵，其中m是0、1或2的整數(shù)，其條件是當(dāng)X表示-(C＝O)-時(shí)n是0，R表示氫或殘基Ra，其中殘基Ra選自C1-6烷基；C2-6烯基；C3-8環(huán)烷基；C3-8環(huán)烷基，其中一個(gè)CH2基團(tuán)被O、S、NH或NCH3置換；C4-8環(huán)烯基；C4-8環(huán)烯基，其中一個(gè)CH2基團(tuán)被O、S、NH或NCH3置換；苯基；吡啶基；苯硫基；亞硝?；籗-半胱氨?；?；S-谷胱甘肽基；和其中，R*選自氫、C1-6烷基、C2-6烯基、C3-8環(huán)烷基、C4-8環(huán)烯基、乙酰氧基、羥基、ONO2和鹵素；其中Ra任選地被1-3個(gè)獨(dú)立選自C1-6烷基、C2-6烯基、C3-8環(huán)烷基、C4-8環(huán)烯基、乙酰氧基、羥基、ONO2和鹵素的基團(tuán)取代。19.至少一種式(I)的化合物或其互變異構(gòu)體、藥學(xué)可接受的鹽、前藥或溶劑化物作為活性成分在預(yù)防和/或治療動(dòng)脈粥樣硬化、內(nèi)皮機(jī)能障礙、血管痙攣、心臟病患者異體移植血管病變、循環(huán)系統(tǒng)機(jī)能障礙、血小板活化、血栓形成、中風(fēng)、氧化性應(yīng)激在其發(fā)病機(jī)理中起重要作用的病理學(xué)狀況、一氧化氮的缺乏在其發(fā)病機(jī)理中起重要作用的病理學(xué)狀況、和/或由于局部缺血和/或由于局部缺血/重灌注引起的組織損傷中的應(yīng)用，包括將所述化合物或其互變異構(gòu)體、藥學(xué)可接受的鹽、前藥或溶劑化物給藥至需要的患者，其中n是0、1或2的整數(shù)，X表示-S(O)m-、-(C＝O)-或單鍵，其中m是0、1或2的整數(shù)，其條件是當(dāng)X表示-(C＝O)-時(shí)n是0，R表示氫或殘基Ra，其中殘基Ra選自C1-6烷基；C2-6烯基；C3-8環(huán)烷基；C3-8環(huán)烷基，其中一個(gè)CH2基團(tuán)被O、S、NH或NCH3置換；C4-8環(huán)烯基；C4-8環(huán)烯基，其中一個(gè)CH2基團(tuán)被O、S、NH或NCH3置換；苯基；吡啶基；苯硫基；亞硝酰基；S-半胱氨酰基；S-谷胱甘肽基；和其中，R*選自氫、C1-6烷基、C2-6烯基、C3-8環(huán)烷基、C4-8環(huán)烯基、乙酰氧基、羥基、ONO2和鹵素；其中Ra任選地被1-3個(gè)獨(dú)立選自C1-6烷基、C2-6烯基、C3-8環(huán)烷基、C4-8環(huán)烯基、乙酰氧基、羥基、ONO2和鹵素的基團(tuán)取代。20.根據(jù)權(quán)利要求18或19的應(yīng)用，其中m和n的一個(gè)為0，或兩個(gè)同時(shí)為0。21.根據(jù)權(quán)利要求18-20任一項(xiàng)的應(yīng)用，其中X表示單鍵或-S-。22.根據(jù)權(quán)利要求18-21任一項(xiàng)的應(yīng)用，其中R表示氫、C1-6烷基、C2-6烯基、C3-8環(huán)烷基、C4-8環(huán)烯基、(C1-6烷基)C3-8環(huán)烷基、(C1-6烷基)C4-8環(huán)烯基、苯基或(C1-6烷基)苯基。23.根據(jù)權(quán)利要求18-22任一項(xiàng)的應(yīng)用，其中R是C1-6烷基。24.根據(jù)權(quán)利要求18-23任一項(xiàng)的應(yīng)用，其中所述式(I)化合物為根據(jù)式(Ic)或(Id)的化合物25.根據(jù)權(quán)利要求18-24任一項(xiàng)的應(yīng)用，其中所述式(I)化合物選自2-氫硫基異山梨醇-5-一硝酸酯，5，5’-二硝酸-2，2’-聯(lián)硫基二異山梨醇酯，2-甲硫基異山梨醇-5-一硝酸酯，2-[(R)-甲基亞磺酰基]異山梨醇-5-一硝酸酯，2-[(S)-甲基亞磺酰基]異山梨醇-5-一硝酸酯，2-甲基亞磺?；惿嚼娲?5-一硝酸酯，2-甲基磺?；惿嚼娲?5-一硝酸酯，S-亞硝基-2-硫基異山梨醇-5-一硝酸酯，2-(四氫吡喃-2-基-硫基)異山梨醇-5-一硝酸酯，2-(異山梨醇基-2’-聯(lián)硫基)異山梨醇-5-一硝酸酯，和2-(5’-乙酰氧基異山梨醇基-2’-聯(lián)硫基)異山梨醇-5-一硝酸酯。26.根據(jù)權(quán)利要求18或19的應(yīng)用，其中所述化合物為下式表示的2-乙酰基硫基異山梨醇-5-一硝酸酯27.根據(jù)權(quán)利要求18-26任一項(xiàng)的應(yīng)用，其中所述藥物組合物進(jìn)一步含有溶血栓劑，優(yōu)選血纖維蛋白溶酶原活化劑、尿激酶、鏈激酶、阿替普酶或阿尼普酶。28.根據(jù)權(quán)利要求18-27任一項(xiàng)的應(yīng)用，其中所述藥物組合物進(jìn)一步含有抗凝劑，優(yōu)選肝素、雙香豆素、醋酸香豆素、依諾肝素或戊聚糖多硫酸酯。29.根據(jù)權(quán)利要求18-28任一項(xiàng)的應(yīng)用，其中所述藥物組合物進(jìn)一步含有抗血栓形成劑，優(yōu)選乙酰水楊酸、潘生丁、氯芐噻啶、氯吡格雷、三氟醋柳酸、戊聚糖多硫酸酯或阿昔單抗。30.根據(jù)權(quán)利要求18-29任一項(xiàng)的應(yīng)用，其中所述藥物組合物進(jìn)一步含有對(duì)糖蛋白IIb/IIIa具有特異性的免疫球蛋白或其片段。31.根據(jù)權(quán)利要求18-30任一項(xiàng)的應(yīng)用，其中所述藥物組合物進(jìn)一步含有降血脂劑，優(yōu)選辛伐他汀、洛伐他汀、阿托伐他汀、普伐他汀(pravastatin)、氟伐他汀、普伐他汀(eptastatin)、利非貝羅、阿昔呋喃、阿昔替酯、葡煙酯或羅伐他汀。32.根據(jù)權(quán)利要求18-31任一項(xiàng)的應(yīng)用，其中所述藥物組合物進(jìn)一步含有抗氧化劑/自由基清除劑，優(yōu)選煙拉文、雷諾嗪、emoxipin、谷胱甘肽、依達(dá)拉奉、雷索司特、番茄紅素、N-乙?；?L-半胱氨酸、N-乙?；?D-半胱氨酸、N-乙酰基-L-半胱氨酸與N-乙?；?D-半胱氨酸的外消旋混合物或卡維地洛。33.根據(jù)權(quán)利要求18-32任一項(xiàng)的應(yīng)用，其中氧化性應(yīng)激在其發(fā)病機(jī)理中起重要作用的病理學(xué)狀況選自變態(tài)反應(yīng)、中風(fēng)、阿爾茨海默氏病和缺血性心血管疾病。34.制備式(I)化合物、其互變異構(gòu)體、藥學(xué)可接受的鹽、前藥或溶劑化物的方法其中n是0、1或2的整數(shù)，X表示-S(O)m-或單鍵，其中m是0、1或2的整數(shù)，R表示氫或殘基Ra，其中殘基Ra選自C1-6烷基；C2-6烯基；C3-8環(huán)烷基；C3-8環(huán)烷基，其中一個(gè)CH2基團(tuán)被O、S、NH或NCH3置換；C4-8環(huán)烯基；C4-8環(huán)烯基，其中一個(gè)CH2基團(tuán)被O、S、NH或NCH3置換；苯基；吡啶基；苯硫基；亞硝酰基；S-半胱氨?；?；S-谷胱甘肽基；和其中，R*選自氫、C1-6烷基、C2-6烯基、C3-8環(huán)烷基、C4-8環(huán)烯基、乙酰氧基、羥基、ONO2和鹵素，其中Ra任選地被1-3個(gè)獨(dú)立選自C1-6烷基、C2-6烯基、C3-8環(huán)烷基、C4-8環(huán)烯基、乙酰氧基、羥基、ONO2和鹵素的基團(tuán)取代，該方法包括實(shí)施如下步驟a)使式(IIa)的化合物其中R’是C1-6烷基，優(yōu)選甲基，水解，從而獲得如下化合物b)任選地，使根據(jù)步驟(a)制備的化合物I.進(jìn)行氧化反應(yīng)以獲得和/或任選接著進(jìn)行二次氧化以獲得下述化合物其中n是1或2，X是-S(O)m-，其中m是0、1或2，R*表示羥基或ONO2；II.進(jìn)行取代反應(yīng)以獲得根據(jù)式(I)的化合物，其中n是0的整數(shù)，X表示鍵，且R不表示亞硝?；?，任選接著進(jìn)行氧化以獲得根據(jù)式(I)的化合物，其中n是0的整數(shù)，X表示-S(O)m-，其中m是0或1的整數(shù)，且R不表示亞硝?；籌II.進(jìn)行取代反應(yīng)以獲得根據(jù)式(I)的化合物，其中n是0的整數(shù)，X表示-S-；任選接著進(jìn)行氧化以獲得根據(jù)式(I)的化合物，其中n是1或2的整數(shù)，X表示-S(O)m-，其中m是0、1或2的整數(shù)；或IV.進(jìn)行亞硝化反應(yīng)以獲得35.根據(jù)權(quán)利要求34的方法，其用于制備式(Ia)的化合物、其互變異構(gòu)體、藥學(xué)可接受的鹽、前藥或溶劑化物其中n是0、1或2的整數(shù)，X表示-S(O)m-或單鍵，其中m是0、1或2的整數(shù)，R表示氫或殘基Ra，其中殘基Ra選自C1-6烷基；C2-6烯基；C3-8環(huán)烷基；C3-8環(huán)烷基，其中一個(gè)CH2基團(tuán)被O、S、NH或NCH3置換；C4-8環(huán)烯基；C4-8環(huán)烯基，其中一個(gè)CH2基團(tuán)被O、S、NH或NCH3置換；苯基；吡啶基；苯硫基；亞硝?；籗-半胱氨?；?；S-谷胱甘肽基；和其中，R*選自氫、C1-6烷基、C2-6烯基、C3-8環(huán)烷基、C4-8環(huán)烯基、乙酰氧基、羥基、ONO2和鹵素；其中Ra任選地被1-3個(gè)獨(dú)立選自C1-6烷基、C2-6烯基、C3-8環(huán)烷基、C4-8環(huán)烯基、乙酰氧基、羥基、ONO2和鹵素的基團(tuán)取代，其中所述方法包括下述步驟a)使式(II)的化合物其中R’是C1-6烷基，優(yōu)選甲基，水解，從而獲得2-氫硫基異山梨醇-5-一硝酸酯(1)b)任選地，使根據(jù)步驟(a)制備的化合物(1)I.進(jìn)行氧化反應(yīng)以獲得5，5’-二硝酸-2，2’-聯(lián)硫基二異山梨醇酯(2)或2-(異山梨醇基-2’-聯(lián)硫基)異山梨醇-5-一硝酸酯(8)，任選接著進(jìn)行二次氧化以獲得根據(jù)式(Ie)的化合物其中n是1或2，X是-S(O)m-，其中m是0、1或2，R*表示羥基或ONO2；II.進(jìn)行取代反應(yīng)以獲得根據(jù)式(Ia)的化合物，其中n是0的整數(shù)，X表示鍵，且R不表示亞硝?；?，任選接著進(jìn)行氧化以獲得根據(jù)式(Ia)的化合物，其中n是0的整數(shù)，X表示-S(O)m-，其中m是0或1的整數(shù)，且R不表示亞硝酰基；III.進(jìn)行取代反應(yīng)以獲得根據(jù)式(Ia)的化合物，其中n是0的整數(shù)，X表示-S-；任選接著進(jìn)行氧化以獲得根據(jù)式(Ia)的化合物，其中n是1或2的整數(shù)，X表示-S(O)m-，其中m是0、1或2；或IV.進(jìn)行亞硝化反應(yīng)以獲得S-亞硝基-2-硫基異山梨醇-5-一硝酸酯(6)。36.根據(jù)權(quán)利要求34或35的方法，其包括用于制備如下化合物的步驟(a)和步驟(b)II2-[(R)-甲基亞磺?；鵠異山梨醇-5-一硝酸酯，和/或2-[(S)-甲基亞磺?；鵠異山梨醇-5-一硝酸酯。37.根據(jù)權(quán)利要求35的方法，其包括對(duì)兩種非對(duì)映異構(gòu)體的分離。38.制備式(11)的化合物、其互變異構(gòu)體、藥學(xué)可接受的鹽、前藥或溶劑化物的方法該方法包括如下步驟a)使式(III)的化合物其中R’是C1-6烷基，優(yōu)選甲基，進(jìn)行氧化反應(yīng)，從而獲得2，2’-聯(lián)硫基二異山梨醇(10)，(b)在羧酸酐，優(yōu)選乙酸酐的存在下，使步驟(a)中制備的化合物與硝化劑進(jìn)行硝化反應(yīng)。39.2，2’-聯(lián)硫基二異山梨醇。全文摘要本發(fā)明公開了對(duì)應(yīng)于式(I)的新型雙失水己糖醇—硝酸酯衍生物、其互變異構(gòu)體、藥學(xué)可接受的鹽、前藥和溶劑化物，以及含有這些化合物的藥物組合物及其用途。文檔編號(hào)C07D519/00GK1863805SQ200480028935公開日2006年11月15日申請(qǐng)日期2004年9月29日優(yōu)先權(quán)日2003年10月3日發(fā)明者何塞·雷波列斯莫利內(nèi)爾,愛德華多·薩拉斯佩雷斯-拉西利亞,弗朗西斯科·普比奧科伊申請(qǐng)人:雷瑟爾股份有限公司