專利名稱：被甘油衍生物修飾的化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種兩性物質(zhì)或疏水性物質(zhì)被甘油衍生物修飾的化合物或其鹽，其可用于制備藥物載體等的表面修飾劑，以及含有該化合物或其鹽的微粒等。
背景技術(shù)：
以往，作為將給藥到體內(nèi)的藥劑在需要時(shí)向必要的組織以必要量傳遞至所需組織的藥物傳遞系統(tǒng)，使用微粒諸如脂質(zhì)體、乳液、膠束、微晶體(fine particle crystal)、微膠囊、微球等作為藥物載體的方法是已知的。
例如，脂質(zhì)體被用作抗腫瘤劑、抗炎劑等的藥物載體。但已知當(dāng)靜脈給藥時(shí)，脂質(zhì)體被肺、肝、脾等所捕獲并迅速?gòu)难褐邢АＲ虼?，?dāng)目標(biāo)區(qū)域是肺、肝和脾以外的部位如腫瘤或炎癥部位時(shí)，脂質(zhì)體難以有效地傳遞藥劑至目標(biāo)區(qū)域。為此，已經(jīng)多次嘗試?yán)缬镁垡叶?PEG)化學(xué)修飾脂質(zhì)體等以增加脂質(zhì)體在血液中的滯留性。例如，已知用含有PEG衍生物(PEG修飾的脂質(zhì)體)的表面修飾劑修飾的脂質(zhì)體顯示了非常高的血液滯留性(例如日本專利第2667051號(hào)，日本公開審查專利申請(qǐng)20857/95和日本專利第2948246號(hào)等)。此外，也已知使用含有聚甘油衍生物(聚甘油修飾的脂質(zhì)體)的表面修飾劑修飾的脂質(zhì)體在血液中的滯留性也增加了(例如日本公開未審專利申請(qǐng)228012/94)。
但是，用作藥物載體PEG修飾的脂質(zhì)體具有一些缺點(diǎn)。例如，盡管PEG修飾的脂質(zhì)體能夠有效地將藥物傳遞至腫瘤細(xì)胞，但是脂質(zhì)體表面的PEG具有非常大的空間位阻，抑制了藥物和腫瘤細(xì)胞之間的相互作用，從而阻礙了藥物有效地進(jìn)入腫瘤細(xì)胞中(Biochimica etBiophysica Acta，1558，1-13(2002))。還已知當(dāng)反復(fù)給以PEG修飾的脂質(zhì)體時(shí)，其在血液中的滯留性降低了(Journal of ControlledRelease，88，35-42(2003)和Journal of Pharmacology andExperimental Therapeutics，292，1071-1079(2000))。此外，在含有單克隆抗體的PEG修飾的脂質(zhì)體中，PEG抑制了抗體的細(xì)胞識(shí)別能力，從而PEG修飾的脂質(zhì)體難以進(jìn)行主動(dòng)尋靶(Biochimica etBiophysica Acta，1062，142-148(1991))。再者，由于將PEG引入到脂質(zhì)體的類脂中，脂質(zhì)體膜的穩(wěn)定性可能被降低了，從而脂質(zhì)體中被膠囊化的藥物容易泄漏。
盡管已開發(fā)將聚甘油修飾的脂質(zhì)體作為一種代替PEG修飾的脂質(zhì)體的高血液滯留性脂質(zhì)體，但是它們的血液滯留性僅兩倍于未修飾的脂質(zhì)體，仍是不充足的。
在這種情況下，需要一種新的藥物載體來取代PEG修飾的脂質(zhì)體。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種兩性物質(zhì)或疏水性物質(zhì)被甘油衍生物修飾的化合物或其鹽，其可用作制備藥物載體等的表面修飾劑，以及含有該化合物或其鹽的微粒等。在本發(fā)明中，表面修飾劑是藥物載體(例如微粒)的組分之一，且是在該載體表面部分，結(jié)構(gòu)的部分或全部從微載體向外伸展的化合物，或含有該化合物的組合物。
本發(fā)明涉及下列(1)～(28)(1)選自兩性物質(zhì)和疏水性物質(zhì)的被修飾物質(zhì)直接或經(jīng)過間隔基團(tuán)被下式(1)表示的甘油衍生物修飾的化合物或其鹽 其中，R表示含有與選自兩性物質(zhì)和疏水性物質(zhì)的被修飾物質(zhì)或間隔基團(tuán)具有反應(yīng)性的基團(tuán)的殘基，或是表示含有能夠轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂蟹磻?yīng)性基的基團(tuán)的殘基，所述間隔基團(tuán)用于將選自兩性物質(zhì)和疏水性物質(zhì)的被修飾物質(zhì)結(jié)合至R-X上；n表示大于等于3的整數(shù)；且X表示可具有n個(gè)下列結(jié)構(gòu)的殘基。
(2)根據(jù)上述(1)的化合物或其鹽，其中n是2m，其中m是大于等于2的整數(shù)。
(3)根據(jù)上述(1)或(2)的化合物或其鹽，其中X具有1個(gè)或多個(gè)串連的分支結(jié)構(gòu)。
(4)根據(jù)上述(1)-(3)任一項(xiàng)的化合物或其鹽，其中X含有1～(n-1)個(gè)下列結(jié)構(gòu)。
其中Y1、Y2和Y3各自獨(dú)立地表示單鍵或選自取代或未取代的亞烷基、羰基、取代或未取代的亞胺基、O、S、磺?；騺喕酋；娜我饨M合之一或相同或不同的兩個(gè)或更多個(gè)的任意組合，且當(dāng)Y1、Y2和Y3以兩個(gè)或更多個(gè)存在時(shí)，其可以相同或不同。
(5)根據(jù)上述(1)-(4)任一項(xiàng)的化合物或其鹽，其中X具有1～(n-1)個(gè)下列結(jié)構(gòu)。
(6)根據(jù)上述(1)-(5)任一項(xiàng)的化合物或其鹽，其中X具有1～(n-1)個(gè)下列結(jié)構(gòu)。
(7)根據(jù)上述(1)-(6)任一項(xiàng)的化合物或其鹽，其中X具有1～(n-1)個(gè)下列結(jié)構(gòu)。
(8)根據(jù)上述(1)-(7)任一項(xiàng)的化合物或其鹽，其中X具有1～(n-1)個(gè)下列結(jié)構(gòu)。
(9)根據(jù)上述(1)-(8)任一項(xiàng)的化合物或其鹽，其中R是具有與選自兩性物質(zhì)和疏水性物質(zhì)的被修飾物質(zhì)的下列基團(tuán)具有反應(yīng)性的基團(tuán)的殘基或含有與用于將選自兩性物質(zhì)和疏水性物質(zhì)的被修飾物質(zhì)結(jié)合至R-X上的間隔基團(tuán)的下列基團(tuán)具有反應(yīng)性的基團(tuán)的殘基，或是含有能夠轉(zhuǎn)變?yōu)榉磻?yīng)性基的基團(tuán)的殘基選自羧基、氨基、羥基、巰基、甲?；?、硫酸殘基、磷酸殘基、膦酸殘基和其部分結(jié)構(gòu)的基團(tuán)。
(10)根據(jù)上述(1)-(8)任一項(xiàng)的化合物或其鹽，其中R選自羧酸活性酯殘基、碳酸酯、馬來酰亞胺基、巰基、甲?；⑷一酋；?tresyl)、異氰酸酯基、酸酐殘基、酰鹵殘基、乙烯基磺酰基、肼基、氨基、羥基、鹵素、羧基、乙烯基和膦?；?br> (11)含有至少兩種根據(jù)上述(1)-(10)任一項(xiàng)的化合物及其鹽的混合物。
(12)根據(jù)上述(1)-(11)任一項(xiàng)的化合物或其鹽，其中選自兩性物質(zhì)或疏水性物質(zhì)的被修飾物質(zhì)是脂類或其衍生物。
(13)下式(2)表示的化合物或其鹽
其中X表示氫原子或堿金屬原子；R1和R2可以相同或不同，各自表示氫原子、飽和脂肪酸殘基或不飽和脂肪酸殘基，且R1和R2的至少一個(gè)是飽和脂肪酸殘基或不飽和脂肪酸殘基；R3和R4可以相同或不同，各自表示具有1-10個(gè)碳原子的亞烷基。
(14)下式(3)表示的化合物或其鹽 其中X表示氫原子或堿金屬原子；R1和R2可以相同或不同，各自表示氫原子、飽和脂肪酸殘基或不飽和脂肪酸殘基，且R1和R2的至少一個(gè)是飽和脂肪酸殘基或不飽和脂肪酸殘基；R3和R4可以相同或不同，各自表示具有1-10個(gè)碳原子的亞烷基。
(15)下式(4)表示的化合物或其鹽 其中X表示氫原子或堿金屬原子；R1和R2可以相同或不同，各自表示氫原子、飽和脂肪酸殘基或不飽和脂肪酸殘基，且R1和R2的至少一個(gè)是飽和脂肪酸殘基或不飽和脂肪酸殘基；R3和R4可以相同或不同，各自表示具有1-10個(gè)碳原子的亞烷基。
(16)下式(5)表示的化合物或其鹽 其中X表示氫原子或堿金屬原子；R1和R2可以相同或不同，各自表示氫原子、飽和脂肪酸殘基或不飽和脂肪酸殘基，且R1和R2的至少一個(gè)是飽和脂肪酸殘基或不飽和脂肪酸殘基；R3和R4可以相同或不同，各自表示具有1-10個(gè)碳原子的亞烷基。
(17)下式(6)表示的化合物或其鹽
其中X表示氫原子或堿金屬原子；R1和R2可以相同或不同，各自表示氫原子、飽和脂肪酸殘基或不飽和脂肪酸殘基，且R1和R2的至少一個(gè)是飽和脂肪酸殘基或不飽和脂肪酸殘基；R3和R4可以相同或不同，各自表示具有1-10個(gè)碳原子的亞烷基。
(18)下式(7)表示的化合物或其鹽
其中X表示氫原子或堿金屬原子；R1和R2可以相同或不同，各自表示氫原子、飽和脂肪酸殘基或不飽和脂肪酸殘基，且R1和R2的至少一個(gè)是飽和脂肪酸殘基或不飽和脂肪酸殘基；R3和R4可以相同或不同，各自表示具有1-10個(gè)碳原子的亞烷基。
(19)下式(8)表示的化合物或其鹽
其中X表示氫原子或堿金屬原子；R1和R2可以相同或不同，各自表示氫原子、飽和脂肪酸殘基或不飽和脂肪酸殘基，且R1和R2的至少一個(gè)是飽和脂肪酸殘基或不飽和脂肪酸殘基；R3和R4可以相同或不同，各自表示具有1-10個(gè)碳原子的亞烷基。
(20)下式(9)表示的化合物或其鹽
其中X表示氫原子或堿金屬原子；R1和R2可以相同或不同，各自表示氫原子、飽和脂肪酸殘基或不飽和脂肪酸殘基，且R1和R2的至少一個(gè)是飽和脂肪酸殘基或不飽和脂肪酸殘基；R3和R4可以相同或不同，各自表示具有1-10個(gè)碳原子的亞烷基。
(21)下式(10)表示的化合物或其鹽
其中X表示氫原子或堿金屬原子；R1和R2可以相同或不同，各自表示氫原子、飽和脂肪酸殘基或不飽和脂肪酸殘基，且R1和R2的至少一個(gè)是飽和脂肪酸殘基或不飽和脂肪酸殘基；R3和R4可以相同或不同，各自表示具有1-10個(gè)碳原子的亞烷基。
(22)根據(jù)上述(13)-(21)任一項(xiàng)的化合物，其中R3和R4是亞乙基。
(23)微粒，含有選自兩性物質(zhì)和疏水性物質(zhì)的被修飾物質(zhì)直接或通過間隔基團(tuán)被甘油衍生物修飾的化合物或其鹽；所述甘油衍生物含有與選自兩性物質(zhì)和疏水性物質(zhì)的被修飾物質(zhì)或間隔基團(tuán)具有反應(yīng)性的基團(tuán)的殘基，或是含有能夠轉(zhuǎn)變?yōu)樗鼍哂蟹磻?yīng)性基的基團(tuán)的殘基，所述甘油衍生物還包含一個(gè)或多個(gè)下式表示的結(jié)構(gòu)；所述間隔基團(tuán)用于將選自兩性物質(zhì)和疏水性物質(zhì)的被修飾物質(zhì)結(jié)合至R-X上。
(24)含有根據(jù)上述(1)-(22)任一項(xiàng)的化合物或其鹽的微粒。
(25)根據(jù)上述(23)或(24)的微粒，其中微粒選自脂質(zhì)體、脂肪乳、乳液、膠束和微晶體。
(26)微粒的表面修飾劑，含有選自兩性物質(zhì)和疏水性物質(zhì)的被修飾物質(zhì)直接或通過間隔基團(tuán)被甘油衍生物修飾的化合物或其鹽；所述甘油衍生物含有與選自兩性物質(zhì)和疏水性物質(zhì)的被修飾物質(zhì)或間隔基團(tuán)具有反應(yīng)性的基團(tuán)的殘基，或是含有能夠轉(zhuǎn)變?yōu)榉磻?yīng)性基團(tuán)的基團(tuán)的殘基，所述甘油衍生物還包含一個(gè)或多個(gè)下式表示的結(jié)構(gòu)；所述間隔基團(tuán)用于將選自兩性物質(zhì)和疏水性物質(zhì)的被修飾物質(zhì)結(jié)合至R-X上。
(27)微粒的表面修飾劑，含有根據(jù)上述(1)-(22)任一項(xiàng)的化合物或其鹽。
(28)根據(jù)上述(26)或(27)的表面修飾劑，其中微粒選自脂質(zhì)體、脂肪乳、膠束、乳液和微晶體。
具體實(shí)施例方式
在本發(fā)明中，(i)作為含有與選自兩性物質(zhì)和疏水性物質(zhì)的被修飾物質(zhì)具有反應(yīng)性的基團(tuán)的殘基，或含有能夠轉(zhuǎn)變?yōu)榉磻?yīng)性基團(tuán)的基團(tuán)的殘基，以及一個(gè)或多個(gè)下式表示的結(jié)構(gòu)的甘油衍生物(下文稱為甘油衍生物(I))，
可以是任何結(jié)構(gòu)中含有與選自兩性物質(zhì)和疏水性物質(zhì)的被修飾物質(zhì)具有反應(yīng)性的基團(tuán)或能夠被轉(zhuǎn)換至反應(yīng)性基團(tuán)的基團(tuán)的殘基，和一個(gè)或多個(gè)下式表示的結(jié)構(gòu)的化合物。
例如，包括式(1)表示的甘油衍生物(下文稱為甘油衍生物(1)) 其中，R表示含有與選自兩性物質(zhì)和疏水性物質(zhì)的被修飾物質(zhì)具有反應(yīng)性的基團(tuán)的殘基，或含有能夠被轉(zhuǎn)變?yōu)榉磻?yīng)性基團(tuán)的基團(tuán)的殘基；n表示大于等于3的整數(shù)；且X表示可具有n個(gè)下列結(jié)構(gòu)的殘基。
在式(1)中，X沒有特別限制，只要該基團(tuán)能夠與R和n個(gè)下列結(jié)構(gòu)結(jié)合。
但優(yōu)選其含有至少一個(gè)串連的分支結(jié)構(gòu)。串連的分支結(jié)構(gòu)是指該結(jié)構(gòu)中被分支為兩個(gè)或更多個(gè)的支鏈結(jié)構(gòu)的至少一個(gè)支鏈?zhǔn)潜贿M(jìn)一步分支為兩個(gè)或更多個(gè)支鏈的重復(fù)結(jié)構(gòu)。特別而言，優(yōu)選的結(jié)構(gòu)是其中被分支為兩個(gè)或更多個(gè)的支鏈結(jié)構(gòu)分別被進(jìn)一步分支為兩個(gè)或更多個(gè)支鏈的重復(fù)結(jié)構(gòu)。另外，優(yōu)選各個(gè)支鏈的數(shù)量是2。
作為支鏈結(jié)構(gòu)， (其中Y1、Y2和Y3分別具有上述含義)是優(yōu)選的，且特別地，下式 表示的甘油單元、 是更優(yōu)選的。式(1)中包含的這些支鏈結(jié)構(gòu)的數(shù)量沒有特別限制，優(yōu)選為1～(n-1)，且當(dāng)n是2m時(shí)，更優(yōu)選為1～(2m-2)。
此外，也優(yōu)選式(1)中的X含有1～(n-1)個(gè)，或當(dāng)n是2m時(shí)，1～(2m-2)個(gè)下式表示的結(jié)構(gòu)的甘油衍生物。
在Y1、Y2和Y3的定義中，亞烷基例如具有1-8個(gè)碳原子的直鏈、支鏈或環(huán)狀亞烷基，更具體的，例如亞甲基、亞乙基、丙-1，3-二基、丁-1，4-二基、戊-1，5-二基、己-1，6-二基、庚-1，7-二基、辛-1，8-二基、壬-1，8-二基、癸-1，9-二基、環(huán)丙-1，2-二基、環(huán)丁-1，2-二基、環(huán)戊-1，2二基、環(huán)己-1，2-二基、環(huán)辛-1，2-二基等。
取代的亞烷基的取代基例如1～3個(gè)相同或不同的取代基，例如鹵素原子、低級(jí)烷基、不飽和烴基、芳基、低級(jí)烷氧基、羥基、氧代、羧基、?；⒎减；被?、硝基、氰基和雜環(huán)基等。
在此，鹵素原子包括氟、氯、溴和碘原子。低級(jí)烷基和低級(jí)烷氧基的低級(jí)烷基部分包括例如具有1-8個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，更具體例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、新戊基、己基、庚基和辛基等。不飽和烴基包括例如具有1-8個(gè)碳原子的直鏈、支鏈或環(huán)狀不飽和烴基，更具體例如鏈烯基和炔基，如乙烯基、烯丙基、1-丙烯基、甲基丙烯基、2-丁烯基、1-戊烯基、2-己烯基、1，3-戊二烯基、1，3-己二烯基、環(huán)戊烯基、環(huán)戊二烯基、炔丙基、戊炔基等。芳基包括例如具有6-14個(gè)碳原子的芳基，更具體例如苯基、萘基、蒽基等。?；ɡ缇哂?-8個(gè)碳原子的直鏈、支鏈或環(huán)狀酰基，更具體例如乙?；捅；?。芳酰基包括例如苯甲?；?。雜環(huán)基包括例如含有至少一個(gè)氮原子、氧原子、硫原子等雜原子的3～8元雜環(huán)基，例如呋喃基、噻吩基、吡咯基、吡啶基、唑基、噻唑基、咪唑基、嘧啶基、三嗪基、吲哚基、喹啉基、嘌呤基、苯并唑基、苯并噻唑基和苯并咪唑基等。
取代的亞氨基中的取代基包括例如低級(jí)烷基、芳基、芳烷基等。
芳烷基包括例如具有7-13個(gè)碳原子的芳烷基，更具體例如芐基、苯乙基、二苯甲基和萘甲基等。低級(jí)烷基和芳基分別具有上述相同定義。
在式(1)中，R是含有與選自兩性物質(zhì)和疏水性物質(zhì)的被修飾物質(zhì)具有反應(yīng)性的基團(tuán)的殘基，或是含有能夠轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂蟹磻?yīng)性基的基團(tuán)的殘基。作為R的部分結(jié)構(gòu)的反應(yīng)性基團(tuán)，只要是能夠與選自兩性物質(zhì)和疏水性物質(zhì)的被修飾物質(zhì)中的羧基、氨基、羥基、巰基、甲酰基、硫酸殘基(磺?；?、氧硫基(sulfenyl)、亞磺?；?、磷酸殘基(膦酰基、膦氧基(phosphonoyl)、膦酸根(phosphonato)、膦酸氫根(hydroxyoxydophosphoryl)，次膦酸基(hydrohydroxy-phosphoryl)、次膦?；?phosphinoyl)、羥基磷?；⒘柞；?，膦酸殘基(次磷酸基(dihydroxyphosphanyl)、次磷酸根(hydroxy-oxydophosphanyl)、羥基膦基(hydroxyphosphanyl)、羥基膦二基、次膦酸根(phosphinato)等)等或其部分結(jié)構(gòu)反應(yīng)，可以是任何基團(tuán)。
作為與選自兩性物質(zhì)和疏水性物質(zhì)的被修飾物質(zhì)的具有反應(yīng)性的基團(tuán)，優(yōu)選包括羧酸活性酯殘基，碳酸酯、馬來酰亞胺基、巰基、甲?；?、三氟乙磺酰基、異氰酸酯基、酸酐殘基、酰鹵殘基、乙烯基磺?；?、肼基、氨基、鹵素等。
作為能夠被轉(zhuǎn)變?yōu)榕c選自兩性物質(zhì)和疏水性物質(zhì)的被修飾物質(zhì)具有反應(yīng)性的基團(tuán)的基團(tuán)，優(yōu)選包括羥基、羧基、氨基、巰基、甲?；⒁蚁┗?、膦酰基、鹵素等。
作為羧酸活性酯殘基的羧酸活性酯，優(yōu)選具有取代或未取代的芳基、取代或未取代的雜環(huán)基等的酯。具體例子包括N-羥基琥珀酰亞胺酯、對(duì)硝基苯基酯、苯硫基酯、2，3，5，-三氯苯基酯、2，4，6-三氯苯基酯、2，4，5-三氯苯基酯、五氯苯基酯、2，4-二硝基苯基酯、N-羥基鄰苯二甲酰亞胺酯等。
作為酸酐殘基的酸酐，包括羧酸酐等。
作為酰鹵殘基，包括羰基氯、羰基溴、羰基碘、羰基氟等。
R中除了反應(yīng)性基團(tuán)或能夠被轉(zhuǎn)變?yōu)榉磻?yīng)性基團(tuán)的基團(tuán)之外的部分只要是不會(huì)抑制反應(yīng)性的基團(tuán)就沒有特別限制，可以是任選的基團(tuán)。具體例子包括含有以任意方式組合的一個(gè)或多個(gè)相同或不同的基團(tuán)，選自鹵素原子、取代或未取代的烷基、取代或未取代的不飽和烴基、取代或未取代的亞烷基、取代或未取代的芳基、取代或未取代的烷氧基、羥基、羰基、羧基、取代或未取代的?；?、取代或未取代的芳酰基、取代或未取代的氨基、取代或未取代的亞氨基、硝基、氰基、O、S、亞磺酰基、磺?；?、取代或未取代的雜環(huán)基等。其中，含有一個(gè)或多個(gè)以任意方式組合的相同或不同的基團(tuán)優(yōu)選選自取代或未取代的亞烷基、羰基、取代或未取代的亞氨基、O和S。
R的烷基和烷氧基的烷基部分包括例如具有1-8個(gè)碳原子的直鏈、支鏈或環(huán)狀烷基，例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、新戊基、己基、庚基、辛基、環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基、環(huán)辛基等。
鹵素原子、不飽和烴基、亞烷基、芳基、?；⒎减；碗s環(huán)基分別具有上述在Y1、Y2和Y3定義中的鹵素原子、不飽和烴基、亞烷基、芳基、?；?、芳酰基和雜環(huán)基的相同定義。
取代的烷基、取代的不飽和烴基、取代的亞烷基、取代的芳基、取代的烷氧基、取代的酰基、取代的芳?；腿〈碾s環(huán)基中的取代基包括例如相同或不同的1-3個(gè)取代基，更具體例如鹵素原子、烷基、不飽和烴基、芳基、烷氧基、羥基、氧代、羧基、?；?、芳?；?、氨基、硝基、氰基、雜環(huán)基等，且鹵素原子、烷基、不飽和烴基、芳基、烷氧基、?；?、芳酰基和雜環(huán)基分別具有上述相同定義。
取代的亞氨基的取代基包括例如烷基、不飽和烴基、芳基、烷氧基、?；?、芳酰基、氨基、雜環(huán)基等，取代的氨基的取代基包括例如相同或不同的1或2個(gè)取代基，具體例如烷基、不飽和烴基、芳基、烷氧基、?；⒎减；被?、雜環(huán)基等，烷基、不飽和烴基、芳基、烷氧基、?；?、芳酰基和雜環(huán)基分別具有上述相同定義。
在式(1)中，n只要是大于等于3的整數(shù)則沒有特別限制，優(yōu)選是2m，其中m具有上述相同定義，且更優(yōu)選為4～1024(22～216)。
甘油衍生物(1)的分子量沒有特別限制，優(yōu)選的分子量為100～1,000,000，更優(yōu)選1,000～100,000。
甘油衍生物(1)的代表性例子包括由下式(1A)、(1B)、(1C)、(1D)、(1E)、(1F)、(1G)等表示的甘油衍生物。


甘油衍生物(I)可以通過常規(guī)有機(jī)合成中的已知反應(yīng)[日本化學(xué)會(huì)編，《有機(jī)合成I～I(xiàn)V)》，實(shí)驗(yàn)化學(xué)講座，19～22卷，丸善，(1992)]等的組合制備。例如，甘油衍生物(1)可以通過下列常規(guī)制備方法來制備。

其中R、X和n分別具有上述相同定義；Hal表示鹵素原子；RA表示能夠轉(zhuǎn)變?yōu)闅湓拥幕鶊F(tuán)；R5表示能夠轉(zhuǎn)變?yōu)镽的基團(tuán)；R6表示可被下列基團(tuán)取代的基團(tuán) 其中RA具有上述相同定義。
鹵素原子具有上述相同定義。
能夠轉(zhuǎn)變?yōu)闅湓拥幕鶊F(tuán)包括例如取代或未取代的低級(jí)烷基、取代或未取代的脂環(huán)雜環(huán)基、取代或未取代的甲硅烷基、取代或未取代的?；?、取代或未取代的芳?；龋移渲袃?yōu)選芐基等。能夠轉(zhuǎn)變?yōu)闅湓拥幕鶊F(tuán)也可以是通過一個(gè)甘油單元中的兩個(gè)RA結(jié)合而形成的基團(tuán)，例如取代或未取代的亞烷基，且其中優(yōu)選丙-2，2-二基、苯亞甲基等。
低級(jí)烷基包括例如具有1-8個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基，例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、戊基、新戊基、己基、庚基和辛基等。
脂環(huán)雜環(huán)基包括例如含有選自氮、氧和硫原子中至少一個(gè)原子的3～8元單環(huán)脂環(huán)雜環(huán)基，3～8元環(huán)稠合的含有選自氮、氧和硫原子中至少一個(gè)原子的雙環(huán)或三環(huán)稠合的脂環(huán)雜環(huán)基等，例如四氫吡啶基、四氫喹啉基、四氫異喹啉基、四氫吡喃基、四氫呋喃基、二氫苯并呋喃基、吡咯烷基、哌啶子基、哌啶基、全氫化氮雜?；f、全氫化吖辛因基、嗎啉代、嗎啉基、硫代嗎啉代、硫代嗎啉基、哌嗪基、高哌啶基、高哌嗪基、二氧雜環(huán)戊基、咪唑烷基、咪唑啉基、吡唑烷基、吲哚啉基、異吲哚啉基、2-吡咯啉基、2-吡咯烷酮基、3-吡咯烷酮基、2-哌啶酮基、3-哌啶酮基、4-哌啶酮基、全氫-2-氮雜酮基(azepinonyl)、全氫-3-氮雜酮基、全氫-4-氮雜酮基、2-噻唑烷酮基、4-噻唑烷酮基、2-唑烷酮基、4-唑烷酮基、鄰苯二甲酰亞胺基、戊二酰亞胺基、乙內(nèi)酰脲基、噻唑烷二酮基和唑烷二酮基。
?；头减；謩e具有上述相同定義。
亞烷基包括例如亞甲基、亞乙基、丙-1，3-二基、丁-1，4-二基、戊-1，5-二基和己-1，6-二基等。
取代的低級(jí)烷基、取代的脂環(huán)雜環(huán)基、取代的甲硅烷基、取代的?；腿〈姆减；娜〈ɡ?～3個(gè)相同或不同的取代基，更具體例如低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、低級(jí)烷氧基低級(jí)烷氧基和芳烷氧基等。另外取代的低級(jí)烷基的取代基也包括例如1或2個(gè)芳基取代基，該芳基包括例如苯基、萘基等。取代的芳基的取代基包括例如1～3個(gè)取代基，具體例如低級(jí)烷基、低級(jí)烷氧基、低級(jí)烷氧基低級(jí)烷氧基和芳烷氧基等。低級(jí)烷基和低級(jí)烷氧基、低級(jí)烷氧基低級(jí)烷氧基的低級(jí)烷基部分具有上述低級(jí)烷基的相同定義，芳烷氧基的芳基部分具有上述芳基的相同定義，芳烷氧基的亞烷基部分包括例如亞甲基、亞乙基、丙-1，3-二基、丁-1，4-二基、戊-1，5-二基和己-1，6-二基等。
取代的亞烷基的取代基包括例如1～3個(gè)相同或不同的取代基，例如低級(jí)烷基、芳基和低級(jí)烷氧基等。低級(jí)烷基和低級(jí)烷氧基的低級(jí)烷基部分具有上述低級(jí)烷基的相同定義，芳基具有上述芳基的相同定義能夠被轉(zhuǎn)變?yōu)镽的基團(tuán)，只要是能夠轉(zhuǎn)變?yōu)镽的基團(tuán)，則沒有特別限定，例子包括那些在能夠轉(zhuǎn)變?yōu)闅湓拥幕鶊F(tuán)定義所述的基團(tuán)。
作為可被下列基團(tuán)取代的基團(tuán) (其中RA具有上述相同的定義)沒有特別限制，只要其是能被下列基團(tuán)取代的基團(tuán) (其中RA具有上述相同的定義)，具體例子包括氫原子、鹵素原子、羥基、烷氧基、烷酰氧基等，其中鹵素原子具有上述相同定義，烷氧基和烷酰氧基的烷基部分具有上述烷基的相同定義。
化合物(c)可以通過使用表鹵代醇類(化合物(a))例如表氯醇、表溴醇、表氟醇等和RA-OH(其中RA具有上述相同定義)，根據(jù)J.Org.Chem.，57，435(1992)，J.Med.Chem，38，(10)，1673(1995)等中描述的方法來得到?；衔?c)也可以通過在合適的堿的存在下，使1mol甘油(化合物(b))與1～10mol RA-Hal(其中RA和Hal分別具有上述相同定義)反應(yīng)來得到，然后純化產(chǎn)物，或者在催化量的BF3·O(C2H5)2存在下，使其與2-甲基-1-丁烯反應(yīng)[Tetrahedron Lett，29，2951(1988)]，選擇性保護(hù)伯醇羥基而得到，或根據(jù)TetrahedronLett，41，6441(2000)，J.Org.Chem，54，1346(1989)，Can.J.Chem，62，241(1984)等描述的方法來得到。另外，化合物(c)可以通過保護(hù)化合物(b)的伯醇羥基來得到，例如參照Protective Groups inOrganic Synthesis，第3版，T.W.Greene，John Wiley & Sons Inc.，(1999)等描述的方法引入保護(hù)基團(tuán)。
作為與化合物(a)反應(yīng)的RA-OH，例如可以使用各種醇如甲醇、乙醇、丙醇、叔丁醇、苯甲醇等。作為與化合物(b)反應(yīng)的RA-Hal的RA，可以使用可以去除的殘基，例如芐基、甲基、乙基、丙基、叔丁基、甲氧基甲基、甲氧基乙氧基甲基、四氫吡喃基、四氫呋喃基、三苯基甲基、芐氧基甲基、三乙基甲硅烷基等。作為化合物(a)和(b)，可以使用市售的產(chǎn)品，化合物(c)可根據(jù)上述方法合成或以市購(gòu)產(chǎn)品得到。
然后，化合物(d)可通過上述步驟得到的化合物(c)進(jìn)一步與化合物(a)反應(yīng)而得到，或者通過化合物(b)與下式化合物反應(yīng)而得到 (其中Hal和RA分別具有上述相同定義)。
通過重復(fù)該反應(yīng)步驟，可以得到其中X具有串連的分支結(jié)構(gòu)、且n個(gè)化合物(c)殘基與X相連接的化合物(e)。
也可以通過上述反應(yīng)步驟與下列反應(yīng)步驟組合和/或重復(fù)來得到化合物(e)，其中X具有串連的分支結(jié)構(gòu)，且X上連接有n個(gè)化合物(c)殘基。
其中X、RA和n分別具有上述相同定義，且R7表示下式結(jié)構(gòu) (其中RA具有上述相同定義)，或表示 (其中X、RA和n分別具有上述相同定義)。
化合物(j)可通過J.Med.Chem，38，1673(1995)所述的方法等來得到，或通過常規(guī)有機(jī)合成方法中的已知反應(yīng)的組合來得到[日本化學(xué)會(huì)編，《有機(jī)合成I～I(xiàn)V)》，實(shí)驗(yàn)化學(xué)講座，第4版，19～22卷，丸善，(1992)等]。
也可以通過上述反應(yīng)步驟與下列反應(yīng)步驟組合和/或重復(fù)來得到化合物(e)，其中X具有串連的分支結(jié)構(gòu)，且X上連接有n個(gè)化合物(c)殘基。
其中X、RA和n分別具有上述相同定義，R7表示下式結(jié)構(gòu) (其中RA具有上述相同定義)，或表示 (其中X、RA和n分別具有上述相同定義)，R8表示可被氫原子取代的基團(tuán)。
化合物(k)可通過常規(guī)有機(jī)合成方法中的已知反應(yīng)的組合來得到[日本化學(xué)會(huì)編，《有機(jī)合成I～I(xiàn)V)》，實(shí)驗(yàn)化學(xué)講座，第4版，19～22卷，丸善，(1992)等]。
化合物(1)可用具有HO2C-CH2-NR8-CH2-CO2H骨架(R8表示可被氫原子取代的基團(tuán))的連接劑(交聯(lián)劑)二聚兩種胺來得到(Toth，G.K.，Botond，P.，Synthesis，361，(1992))，然后化合物(m)可通過例如將化合物(1)進(jìn)行氨基脫保護(hù)反應(yīng)來得到，如T.W.Greene，Protective Groups in Organic Synthesis，第3版，John Wiley &Sons，Inc.(1999)描述的方法等。
化合物(h)可通過應(yīng)用常規(guī)的有機(jī)合成方法，將含有反應(yīng)性基團(tuán)或含有能夠轉(zhuǎn)變?yōu)榉磻?yīng)性基的基團(tuán)的殘基R結(jié)合到化合物(e)中存在的X端羥基上，或通過直接將羥基轉(zhuǎn)變?yōu)榉磻?yīng)性殘基而得到。
另一方面，化合物(g)可通過將按上述同樣方法合成的化合物(c)與化合物(f)反應(yīng)來得到。通過化合物(f)與化合物(c)反應(yīng)得到化合物(g)的方法包括化合物(f)的R6部分與化合物(c)的取代反應(yīng)，按常規(guī)的有機(jī)合成方法中的已知反應(yīng)的組合[日本化學(xué)會(huì)編，《有機(jī)合成I～I(xiàn)V》，實(shí)驗(yàn)化學(xué)講座，第4版，19～22卷，丸善，(1992)等]等。化合物(h)可通過應(yīng)用常規(guī)的有機(jī)合成反應(yīng)，將化合物(g)中的R2轉(zhuǎn)變?yōu)楹蟹磻?yīng)性基團(tuán)或含有能夠轉(zhuǎn)變?yōu)榉磻?yīng)性基的基團(tuán)的殘基R來得到?；衔?f)可以使用市售的具有已知結(jié)構(gòu)的化合物，或者化合物(f)可通過采用常規(guī)的有機(jī)合成方法中的已知反應(yīng)的組合[日本化學(xué)會(huì)編，《有機(jī)合成I～I(xiàn)V)》，實(shí)驗(yàn)化學(xué)講座，第4版，19～22卷，丸善，(1992)等]等來制備。
通過將化合物(h)進(jìn)行有機(jī)合成反應(yīng)中常規(guī)的保護(hù)基脫除反應(yīng)[例如Protective Groups in Organic Synthesis，第3版，T.W.Greene，John Wiley & Sons，Inc.(1999)等]以除去RA并用氫原子來代替它來得到甘油衍生物(1)。
此外，與此相反，在式(1)中，也可以在X的相反方向，從-OH末端延伸甘油單元來制備甘油衍生物(1)。
各個(gè)反應(yīng)步驟可在合適的溶劑中進(jìn)行，優(yōu)選溶劑任選自二氯甲烷、氯仿、N，N-二甲基甲酰胺、二甲亞砜、甲苯、四氫呋喃、乙腈、甲醇、乙醇、吡啶、水和這些的混合溶劑，溫度為-20～150℃，反應(yīng)1～數(shù)天。
各步得到的各個(gè)化合物可以其本身的純度或純化至任意純度后在隨后的步驟中使用，純化是通過常用的純化方法如重結(jié)晶、溶劑萃取、硅膠層析、反相色譜、正相色譜等。
(ii)兩性物質(zhì)包括例如脂質(zhì)體如磷脂、甘油糖脂、(神經(jīng))鞘糖脂、(神經(jīng))鞘脂類(鞘氨醇類)(sphingoids)、甾醇類、陽(yáng)離子性類脂和陰離子性類脂；表面活性劑如多元醇酯型非離子表面活性劑、陰離子表面活性劑、陽(yáng)離子表面活性劑和兩性表面活性劑等。
磷脂的例子包括天然或合成的磷脂，例如甘油磷酯如磷脂酰膽堿(例如大豆磷脂酰膽堿、蛋黃磷脂酰膽堿、二硬脂酰磷脂酰膽堿(DSPC)、二棕櫚酰磷脂酰膽堿(DPPC)、二肉豆蔻酰磷脂酰膽堿(DMPC)、二油酰磷脂酰膽堿(DOPC)等)、磷脂酰乙醇胺(例如二硬脂酰磷脂酰乙醇胺(DSPE)、二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺(DPPE)、二油酰磷脂酰乙醇胺(DOPE)等)、磷脂酰絲氨酸、磷脂酸、磷脂酰甘油、磷脂酰肌醇和溶血磷脂酰膽堿等；(神經(jīng))鞘磷脂類例如(神經(jīng))鞘磷脂、神經(jīng)酰胺磷酸乙醇胺、神經(jīng)酰胺磷酸甘油和神經(jīng)酰胺磷酸甘油磷酸等；甘油磷酰脂、(神經(jīng))鞘磷酰脂、天然卵磷脂(例如蛋黃卵磷脂、大豆卵磷脂等)、氫化磷脂(例如氫化磷脂酰膽堿(HSPC)等)等。
甘油糖脂包括例如次硫酸核糖甘油酯、二糖基二甘油酯、二半乳糖基二甘油酯、半乳糖基二甘油酯、糖基二甘油酯等。
鞘糖酯包括例如半乳糖基腦苷脂類、乳糖基腦苷脂類、神經(jīng)節(jié)苷脂等。
(神經(jīng))鞘脂類包括例如鞘氨糖(sphingan)、二十鞘氨糖(icosasphingan)、鞘氨醇、及其衍生物等。衍生物包括例如那些通過將鞘氨糖、二十鞘氨糖、鞘氨醇等的-NH2轉(zhuǎn)變?yōu)?NHCO(CH2)xCH3得到的化合物(其中x為0～18的整數(shù)，優(yōu)選6、12或18)。
甾醇包括膽甾醇、二氫膽甾醇、羊毛甾醇、β-谷甾醇、菜油甾醇、豆甾醇、菜子甾醇、麥角骨化甾醇(ergocasterol)、巖藻甾醇等。
陽(yáng)離子性類脂包括例如1，2-二油基-3-甲基銨丙烷(DOTAP)、N-[1-(2，3-二油氧基)丙基]-N，N，N-三甲基氯化銨(DOTMA)、2，3-二油氧基-N-[2-(精胺羧酰胺基)乙基]-N，N-二甲基-1-丙銨三氟乙酸鹽(DOSPA)、N-(2，3-(雙十四烷氧基)丙基)-N，N-二甲基-N-羥乙基溴化銨(DMRIE)、N-[1-(2，3-二油氧基)丙基]-N，N-二甲基-N-羥乙基溴化銨(DORIE)、3β-[N-(N’，N’-二甲基氨基乙基)氨基甲酰基]膽甾醇(DC-Chol)等。
陰離子性類脂包括例如磷脂酰絲氨酸、磷脂酰甘油、磷脂酰肌醇等。
多元醇酯型非離子表面活性劑包括例如脂肪酸甘油單酯、脂肪酸甘油二酯、脂肪酸甘油三酯、脫水山梨醇脂肪酸酯、聚氧化脫水山梨醇脂肪酸酯、脂肪酸蔗糖酯等。具體例子包括辛基葡糖苷、毛地黃皂苷、癸?；?N-甲基葡糖酰胺等。
陰離子表面活性劑包括例如酰基肌氨酸、烷基硫酸鈉、烷基苯磺酸鹽、具有7-22個(gè)碳原子的脂肪酸鈉鹽等。具體例子包括十二烷基硫酸鈉、月桂基硫酸鈉、膽酸鈉、脫氧膽酸鈉、?；敲撗跄懰徕c等。
陽(yáng)離子表面活性劑包括例如烷基銨鹽、酰基銨鹽、季銨鹽、胺衍生物等。具體例子包括伯銨鹽、?；被一忆@鹽、N-烷基多烷基多銨鹽、脂肪酸聚乙烯聚酰胺、十六烷基三甲基溴化銨、十二烷基三甲基溴化銨、烷基聚氧乙烯胺、N-烷基氨基丙胺、脂肪酸三乙醇胺酯等。
兩性表面活性劑包括例如3-[(3-膽酰胺基丙基)二甲基銨基]-1-丙磺酸、N-十四烷基-N，N-二甲基-3-銨基-1-丙磺酸等。
疏水物質(zhì)包括例如油性物質(zhì)、疏水性聚合物等。
油性物質(zhì)包括例如液體石蠟、植物油(豆油等)、具有12～30個(gè)碳原子的脂肪酸酯、蓖麻油、蓖麻油衍生物(聚氧乙烯硬化蓖麻油等)、羊毛脂、羊毛脂衍生物、硅(氧烷)等。
疏水性聚合物包括例如聚天冬氨酸、聚(β-芐基天冬氨酸酯)、聚(γ-芐基谷氨酸酯)、聚(β-烷基天冬氨酸酯)、聚丙交酯、聚(ε-己內(nèi)酯)、聚(δ-戊內(nèi)酯)、聚(γ-丁內(nèi)酯)、聚(β-芐基天冬氨酸酯-共-天冬氨酸)、聚(γ-芐基谷氨酸酯-共-谷氨酸)、聚(α-氨基酸)等。
(iii)本發(fā)明的化合物(下文稱為化合物(1))只要是兩性物質(zhì)或疏水性物質(zhì)(ii)直接或通過間隔基團(tuán)被甘油衍生物(1)修飾的化合物，可以是任何一種?；衔?1)的具體例子包括上述式(2)～(10)表示的化合物等(下文分別稱為化合物(2)～(19))。
在式(2)～(10)的各個(gè)基團(tuán)的定義中，飽和或不飽和脂肪酸殘基包括例如具有12～30個(gè)碳原子的直鏈或支鏈或不飽和脂肪酸的?；糠?，且具體例子包括十二烷酰基、十三烷酰基、十四烷?；?、十五烷酰基、十六烷?；?、十七烷酰基、十八烷?；?、十九烷?；⒍轷；⒍煌轷；⒍轷；?、二十三烷酰基、二十四烷?；⒍轷；⑷轷；?、4-十二碳烯?；?、9-十六碳烯?；?、9-十八碳烯?；?1-二十碳烯?；?3-二十二碳烯?；?、15-二十四碳烯酰基、9，12-十八碳二烯?；?、11，14-二十碳二烯酰基、9，12，15-十八碳三烯?；?、11，14，17-二十碳三烯酰基、4，8，12，16-二十碳四烯酰基、4，8，12，15，19-二十二碳五烯?；?-癸基十六烷?；?-十四烷基十六烷?；?、2-十四烷基十六碳烯酰基、2-十四碳烯基十六烷酰基等。
堿金屬原子包括例如鈉、鉀等。
具有1-10個(gè)碳原子的亞烷基包括例如亞甲基、亞乙基、丙-1，2-二基、丙-2，2-二基、丙-1，3-二基、丁-1，4-二基、戊-1，5-二基、己-1，6-二基、庚-1，7-二基、辛-1，8-二基、壬-1，8-二基、癸-1，9-二基等。
除了上述實(shí)例之外，本發(fā)明的化合物進(jìn)一步包括例如Triton表面活性劑的PEG部分被甘油衍生物(1)修飾置換，或Tween表面活性劑的PEG部分被甘油衍生物(1)修飾置換的那些化合物。此外，本發(fā)明的化合物包括那些其中聚氧乙烯烷基醚和十八烷醇、聚氧乙烯烷基醚、聚氧乙烯辛基苯基醚、聚氧乙烯油胺、聚氧乙烯油基醚、聚氧乙烯油基醚磷酸二乙醇胺、聚氧乙烯油基醚磷酸鈉、聚氧乙烯氫化蓖麻油、聚氧乙烯二茋基苯基醚、聚氧乙烯十八烷基醚、聚氧乙烯十八烷基醚磷酸酯、聚氧乙烯十六烷基醚，聚氧乙烯十六烷基醚和聚乙二醇二硬脂酸酯的混合物、聚氧乙烯十六烷基醚磷酸鈉、聚氧乙烯十六烷基十八烷基醚、聚氧乙烯脫水山梨醇單月桂酸酯、聚氧乙烯山梨醇蜂蠟、聚氧乙烯多環(huán)苯基醚硫酸銨、聚氧乙烯壬基苯基醚，聚氧乙烯壬基苯基醚和烷基苯磺酸鈣的混合物、聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯二十二碳烷基醚、聚氧乙烯聚氧丙烯二醇、聚氧乙烯聚氧丙烯十六烷基醚、聚氧乙烯椰子油脂肪酸甘油酯、聚氧乙烯羊毛脂、聚氧乙烯羊毛脂醇醚的混合物等的PEG部分被甘油衍生物(1)修飾置換的化合物。
化合物的鹽包括例如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硝酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、鈉鹽、鉀鹽、鎂鹽、鈣鹽、銨鹽、四甲基銨鹽、嗎啉加成鹽、哌啶加成鹽等。
(iv)被甘油衍生物(1)修飾的兩性物質(zhì)或疏水性物質(zhì)的修飾通過如下方式進(jìn)行，例如通過將甘油衍生物(1)的反應(yīng)性基團(tuán)直接或經(jīng)過間隔基團(tuán)連接到兩性物質(zhì)或疏水性物質(zhì)的結(jié)構(gòu)中的羧基、氨基、羥基、巰基、甲?；?、硫酸殘基(磺酰基、氧硫基、亞硫?；?、磷酸殘基(膦酰基、膦氧基、膦酸根、膦酸氫根、次膦酸基、次膦?；?、羥基磷酰基、磷?；?，膦酸殘基(次磷酸基、次磷酸根、羥基膦基、羥基膦二基、次膦酸根等)上，或連接到其部分結(jié)構(gòu)上。
作為間隔基團(tuán)，只要其能夠?qū)⒏视脱苌?1)連接到兩性物質(zhì)或疏水性物質(zhì)的各自結(jié)構(gòu)的連接位上，可以是任意基團(tuán)，如包括一個(gè)或相同或不同的多個(gè)以任意方式結(jié)合的直鏈連接基團(tuán)，例如選自取代或未取代的亞烷基(其中該亞烷基和取代的亞烷基的取代基分別具有上述Y1、Y2和Y3中的所述亞烷基和取代的亞烷基的相同定義)、羰基、取代或未取代的亞胺基(其中取代的亞胺基的取代基具有上述相同定義)、O和S等。
上述間隔基團(tuán)例如通過醚鍵、酰胺鍵、硫代醚鍵、酯鍵等與兩性物質(zhì)或疏水性物質(zhì)的結(jié)構(gòu)中的羧基、氨基、羥基、巰基、甲?；?、硫酸殘基(磺?；⒀趿蚧?、亞硫酰基等)、磷酸殘基(膦?；?、膦氧基、膦酸根、膦酸氫根、次膦酸基、次膦?；?、羥基磷?；?、磷?；?，膦酸殘基(次磷酸基、次磷酸根、羥基膦基、羥基膦二基、次膦酸根等)結(jié)合，或與其部分結(jié)構(gòu)結(jié)合。該鍵可以采用常規(guī)的肽合成方法[泉屋信夫，加藤哲夫，青柳東彥和脅道典，《肽合成的基礎(chǔ)與實(shí)驗(yàn)》(ペプチド合成の基礎(chǔ)と実験)，丸善(1985)等]等來形成。
在這種情況下，優(yōu)選將間隔基團(tuán)預(yù)先被引入到兩性物質(zhì)或疏水性物質(zhì)中，但是也可以將間隔基團(tuán)連接到作為修飾劑的甘油衍生物(1)上，然后連接到該甘油衍生物(1)的間隔基團(tuán)可以以上述方式連接到兩性物質(zhì)或疏水性物質(zhì)上。
每個(gè)步驟中得到的每個(gè)化合物可以在下一步中使用而無需純化或通過常規(guī)的純化方法純化之后使用，例如重結(jié)晶、溶劑萃取、硅膠層析、反相色譜和正相色譜等。
或者，上述甘油衍生物(1)可以用作修飾兩性物質(zhì)或疏水性物質(zhì)的化學(xué)修飾劑，甘油衍生物的前體——將甘油衍生物(1)末端的部分或所有羥基被保護(hù)成了-ORA(其中RA具有上述相同定義)——也可用作與兩性物質(zhì)或疏水性物質(zhì)反應(yīng)的化學(xué)修飾劑。此時(shí)，兩性物質(zhì)或疏水性物質(zhì)被該前體修飾之后，目標(biāo)化合物(1)可以通過以上述化合物(h)的相同方式進(jìn)行脫保護(hù)基團(tuán)反應(yīng)而得到。
本發(fā)明的化合物中，選自兩性物質(zhì)或疏水性物質(zhì)的被修飾物質(zhì)被一個(gè)或多個(gè)相同或不同的以任何方式組合的甘油衍生物(1)修飾，優(yōu)選被一個(gè)或多個(gè)相同的甘油衍生物(1)結(jié)合來修飾。
本發(fā)明的化合物可用于制備藥物載體的表面修飾劑(例如能夠保持或膠囊化藥物的微粒等)。本發(fā)明的化合物也可用作藥物載體的組分，并具有增加藥物載體的生產(chǎn)率的效果。
(v)本發(fā)明的微粒包含上述(ii)中所述的兩性物質(zhì)或疏水性物質(zhì)被甘油衍生物(I)直接或經(jīng)過間隔基團(tuán)修飾的化合物(下文稱為化合物(I))或其鹽，且所包含的化合物(I)可以是不同種類的組合?；衔?I)可以按照制備上述化合物(1)的相同方式來制備。
微粒還可含有類脂和/或表面活性劑，且微粒的形態(tài)沒有限制。微粒優(yōu)選平均粒徑為1nm～1000μm，例如包括脂質(zhì)體(多層脂質(zhì)體例如MLV(多層載體))、單膜脂質(zhì)體如LUV(大單層載體)和SUV(小單層載體)等、脂肪乳(微膠囊、微球等)、乳液(類脂乳液、微乳液等)、膠束(聚合物膠束、類脂膠束等)、微晶體(片狀、柱狀、針狀、纖維狀、球狀、立方體和棱形晶體等)等。微粒優(yōu)選為脂質(zhì)體。
微粒中包含的類脂包括例如磷脂、甘油糖脂、鞘糖脂、鞘脂類、甾醇類、陽(yáng)離子性類脂、陰離子性類脂、那些通過醚鍵連接到聚乙二醇上的化合物(聚乙二醇化的)等。其中優(yōu)選相轉(zhuǎn)變溫度高于機(jī)體溫度(35～37℃)的類脂，更優(yōu)選磷脂和/或聚乙二醇化的磷脂。
微粒中包含的表面活性劑包括例如多元醇酯非離子表面活性劑、陰離子表面活性劑、陽(yáng)離子表面活性劑、兩性表面活性劑、那些通過醚鍵連接到聚乙二醇上的化合物(聚乙二醇化的)等。
作為磷脂、甘油糖脂、鞘糖脂、鞘脂類、甾醇、陽(yáng)離子類脂、陰離子類脂、多元醇酯非離子表面活性劑、陰離子表面活性劑、陽(yáng)離子表面活性劑和兩性表面活性劑，分別包括上述(ii)描述的那些，其可單獨(dú)使用或組合使用。當(dāng)它們組合使用時(shí)，例如用于脂質(zhì)體和脂肪乳時(shí)，其組合包括例如含有至少兩種選自氫化大豆磷脂酰膽堿、聚乙二醇化磷脂和膽甾醇的類脂、含有至少兩種選自DSPC、聚乙二醇化磷脂和膽甾醇的類脂、含有至少兩種選自蛋黃磷脂酰膽堿和DOTAP的類脂、含有蛋黃磷脂酰膽堿、DOTAP和膽甾醇的類脂等。在用于乳液和膠束時(shí)，優(yōu)選單獨(dú)或組合使用聚氧化脫水山梨糖醇脂肪酸酯、脫水山梨糖醇脂肪酸酯、脂肪酸鈉鹽、聚乙烯氫化蓖麻油等。
本發(fā)明的微粒必要時(shí)也可含有添加劑，例如等滲劑、膜穩(wěn)定劑、抗氧化劑和帶電物質(zhì)。等滲劑包括例如甘油、蔗糖、氯化鈉等。膜穩(wěn)定劑包括例如甾醇如膽甾醇等?？寡趸瘎┌ɡ缟印幟仕?、抗壞血酸、半胱氨酸、乙二胺四乙酸(EDTA)等。帶電物質(zhì)包括例如硬脂基胺、磷酸二鯨蠟基酯、神經(jīng)節(jié)苷脂、陽(yáng)離子類脂例如DOTMA[Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.，84，7413-7417(1987)]、雙十八烷基酰胺基甘氨酰基精胺[Proc.Natl.Acad.Sci.USA，86，6982-6986(1989)]、DMRIE、DORIE[Methods，5，67-75(1993)]和DC-Chol[Biochem.Biophys.Res.Comun.，179，280-285(1991)]等。
本發(fā)明的微?？梢云胀ǖ囊阎椒▉碇苽?，可通過例如下列方法制備其中上述類脂和/或表面活性劑和本發(fā)明的化合物，如果需要的話，與上述添加劑一起，例如(1)溶解在乙醇、醚等溶劑中，蒸去溶劑，將要懸浮的溶液加入，進(jìn)行分散、乳化或懸浮，或(2)它們直接在要懸浮的溶液中分散、乳化或懸浮?；蛘?，本發(fā)明的微?？梢酝ㄟ^以下方法得到根據(jù)普通的已知方法制備被修飾微粒，向該被修飾微粒的制備液(分散液、乳液或懸浮液)中加入本發(fā)明的化合物的例如粉末、水溶液或乙醇溶液，將得到的混合物靜置一定時(shí)間，優(yōu)選在膜相轉(zhuǎn)變溫度或更高溫度下加熱混合物，靜置冷卻混合物而制備。
用于懸浮液的溶液包括例如蒸餾水、酸性水溶液(鹽酸、硫酸、乙酸等水溶液)、堿性水溶液(氫氧化鈉、氫氧化鈣、碳酸氫鈉等水溶液)、緩沖液(磷酸緩沖液)、生理鹽水、氨基酸輸液等。
本發(fā)明的微粒優(yōu)選為化合物(1)中的一個(gè)或多個(gè)下式結(jié)構(gòu) 從微粒表面向外延伸形成的微粒(下文稱為甘油衍生物修飾的微粒，在微粒為例如脂質(zhì)體等的情況下，同樣的稱為甘油衍生物修飾的脂質(zhì)體等)。甘油衍生物修飾的微?？梢栽诒景l(fā)明微粒的制備過程中將本發(fā)明的化合物作為表面修飾劑來制備。本發(fā)明的化合物作為表面修飾劑的應(yīng)用意味著本發(fā)明的化合物用于制備本發(fā)明的微粒，使得本發(fā)明化合物包含在本發(fā)明微粒的最外部分。
具體而言，本發(fā)明的微粒例如脂質(zhì)體可以通過已知方法來制備。制備方法包括例如Bangham等的脂質(zhì)體制備方法[J.Mol.Biol.，13，238，(1965)]，乙醇注入法[J.Mol.Biol.，66，621(1975)]，F(xiàn)renchpress法[FEBS Lett，99，210(1979)]，凍融法[Arch.Biochem.Biophys.，212，186(1981)]，反相蒸發(fā)法[Proc.Natl.Acad.Sci.USA，75，4194(1978)]，pH梯度法[日本專利第2572554號(hào)和第2659136號(hào)]等。
脂質(zhì)體的表面可以用多元醇酯型非離子表面活性劑、陰離子表面活性劑、陽(yáng)離子表面活性劑、兩性表面活性劑、多糖或其衍生物、聚氧乙烯衍生物等來進(jìn)行修飾。這樣的表面修飾的脂質(zhì)體也包括在本發(fā)明的微粒中[D.D.Lasic和F.Martin，Stealth Liposomes，美國(guó)，CRC Press Inc，93-102頁(yè)(1995)]。
脂質(zhì)體的平均粒徑優(yōu)選為30～3,000nm，更優(yōu)選50～500nm，且最優(yōu)選60～200nm。控制脂質(zhì)體平均粒徑的方法包括例如通過擠出法或使用Manton Gaulin均化器、微流化器等機(jī)械研磨大的多層脂質(zhì)體(MLV)[R.H.Muller，S.Benita和B.Bohm，Emulsion andNanosuspensions for the Foumulation of Poorly Soluble Drugs，德國(guó)，Scientific Publishers斯圖加特，267-294頁(yè)(1998)]等。
為了增加微粒在血液中的滯留性，通常，化合物(I)或其鹽優(yōu)選以約0.01～50mol％，更優(yōu)選0.1～20mol％包含在微粒中。
此外，上述微?？梢杂冒ǖ鞍踪|(zhì)如抗體、糖類、糖脂、氨基酸、核酸、多種低分子量化合物、高分子化合物等物質(zhì)來修飾?；蛘?，這些物質(zhì)可以引入到上述微粒中。這些方法得到的微粒也包括在本發(fā)明的微粒中。另外，上述微粒的類脂膜表面還可以用抗體、蛋白質(zhì)、肽、脂肪酸等來修飾以用于靶向中[D.D.Lasic和F.Martin，StealthLiposomes，美國(guó)，CRC Press Inc，93-102頁(yè)(1995)]，且這些類脂膜表面修飾的微粒也包括在本發(fā)明的微粒中。
本發(fā)明的微?？梢岳绫３只蚰z囊化藥物等，并可作為制劑用來穩(wěn)定機(jī)體組分例如血液組分(例如血液、消化道等)中的藥物，降低副作用，增加藥物在靶器官如腫瘤中的聚集，或改善藥物以口服或透粘膜給藥時(shí)的吸收。
本發(fā)明的微粒用作制劑時(shí)，例如被保持或膠囊化的藥物并沒有特別限定，例如有抗腫瘤劑、造影劑、抗生素、抗真菌劑、具有藥理學(xué)活性的物質(zhì)、生物體成分等。
抗腫瘤劑包括例如放線菌素D、絲裂霉素C、色霉素、阿霉素、表柔比星(表阿霉素)、長(zhǎng)春瑞濱、柔紅霉素、阿柔比星、博來霉素、培洛霉素、長(zhǎng)春新堿、長(zhǎng)春堿、長(zhǎng)春地辛、依托泊苷、甲氨蝶呤、5-氟尿嘧啶、替加氟(喃氟啶)、阿糖胞苷、依諾他濱、安西他濱、紫杉醇、多西他賽、順鉑、胞嘧啶、阿糖胞苷、伊立替康、喜樹堿及其衍生物等。
造影劑包括例如碘海醇、碘克沙醇、吲哚菁綠、碘拉酸鈉等。
抗生素包括例如米諾環(huán)素、四環(huán)素、哌拉西林鈉、舒他西林甲苯磺酸鹽、阿莫西林、氨芐西林、巴氨西林、阿撲西林、頭孢地尼、氟氧頭孢鈉、頭孢替安、頭孢卡品酯、頭孢克洛、頭孢妥侖匹酯、頭孢唑啉鈉、cefazoran、克拉霉素、克林霉素、紅霉素、左氧氟沙星、托氟沙星甲苯磺酸鹽、氧氟沙星、環(huán)丙沙星、阿貝卡星、異帕米星、地貝卡星、阿米卡星、慶大霉素、萬古霉素、磷霉素、及其衍生物等。
抗真菌劑包括例如氟康唑、伊曲康唑、特比萘芬、兩性霉素B、咪康唑、及其衍生物等。
具有藥理學(xué)活性的物質(zhì)包括例如激素、酶、蛋白質(zhì)、肽、氨基酸、核酸、基因、反義RNA、反義DNA、siRNA(小干擾RNA)、維生素、糖類、脂類、合成藥物等。
生物體成分包括例如血液成分等。
當(dāng)本發(fā)明的微粒用作藥物時(shí)，一般按上述方法制備的微粒懸浮液本身直接用作注射劑，且該懸浮液可以將其加工以形成口服劑、滴鼻劑、滴眼劑、經(jīng)皮給藥、栓劑、吸入劑等而使用。其可以采用藥劑學(xué)上可接受的稀釋劑、賦形劑、崩解劑、潤(rùn)滑劑、粘合劑、表面活性劑、水、生理鹽水、植物油加溶劑、等滲劑、防腐劑、抗氧化劑等，通過常用的方法來制備。
例如，微粒有懸浮液可以通過加入諸如乳糖的載體之后進(jìn)行冷凍干燥、或加入諸如甘油等的冷凍保存劑之后進(jìn)行冷凍保存，這些也可以與適當(dāng)?shù)馁x形劑一起進(jìn)行造粒、干燥加工為口服劑如膠囊劑、片劑或顆粒劑等。
以下基于測(cè)試?yán)齺砻枋霰景l(fā)明的效果，但本發(fā)明并不局限于其中。測(cè)試?yán)?脂質(zhì)體的平均粒徑在實(shí)施例5-8和比較例1-3中制備的各個(gè)脂質(zhì)體的平均粒徑通過電泳光散射光度計(jì)(ELS)(ELS-800型，由Otsuka Electronics制造)測(cè)定。
結(jié)果如表1所示，在有2批的情況下，第1批和第2批的平均粒徑依次給出。
表1

如表1所示，實(shí)施例5-8制備的含有化合物(2)或(4)的甘油衍生物修飾的脂質(zhì)體的平均粒徑為約120nm，其適用作脂質(zhì)體。測(cè)試?yán)?藥物膠囊化率實(shí)施例5-8和比較例1-3制備的各個(gè)脂質(zhì)體懸浮液(下文稱為脂質(zhì)體懸浮液A)進(jìn)行超速離心處理(1小時(shí)，110,000×g，25℃)。每種脂質(zhì)體懸浮液A和超速離心處理得到的上清液(下文稱為上清液A)溶解在2-丙醇和水(8/2體積/體積)的混合溶劑中。用分光光度計(jì)(U-3210，Hitachi制造)測(cè)定每種溶液在497nm處的吸光度以測(cè)定在脂質(zhì)體懸浮液A和上清液A中的阿霉素的量。另外，制備具有與脂質(zhì)體懸浮液A相同的磷脂濃度、但不含有阿霉素的脂質(zhì)體懸浮液(下文稱為脂質(zhì)體懸浮液B)，用上述相同方法測(cè)定脂質(zhì)體中的磷脂酰膽堿(PC)的吸光度。每種脂質(zhì)體懸浮液中A的脂質(zhì)體的阿霉素膠囊化率用下式計(jì)算 A脂質(zhì)體懸浮液A的吸光度B脂質(zhì)體懸浮液B的吸光度C上清液A的吸光度應(yīng)予說明，在比較例3中，脂質(zhì)體殘留在超速離心處理后的上清液中，因此按下列等式計(jì)算膠囊化率。用Phospholipid C-Test Wako(Wako Pure Chemical Industries)測(cè)定磷脂的濃度。
A脂質(zhì)體懸浮液A的吸光度B脂質(zhì)體懸浮液B的吸光度C上清液A的吸光度D脂質(zhì)體懸浮液A的磷脂濃度E上清液A的磷脂濃度結(jié)果如表2所示，在2批的情況下，第1批和第2批的膠囊化率依次給出。
表2

如表2所示，比較例3所制備的PEG修飾的脂質(zhì)體的阿霉素膠囊化率較差，因此很清楚PEG-DSPE含量的增加顯然降低了脂質(zhì)體的穩(wěn)定性，從而導(dǎo)致了阿霉素的泄漏。另一方面按實(shí)施例5-8制備的甘油衍生物修飾的脂質(zhì)體的阿霉素膠囊化率優(yōu)異，因此很顯然脂質(zhì)體在穩(wěn)定性方面優(yōu)異。即，含有本發(fā)明化合物的脂質(zhì)體，不取決于化合物(1)的含量，具有優(yōu)異的穩(wěn)定性。
測(cè)試?yán)?在二乙醚吸入麻醉的條件下，將實(shí)施例7和8以及比較例1-3制備的脂質(zhì)體懸浮液(給藥藥液)經(jīng)左尾靜脈注射到CrjCD(SD)IGS大鼠(體重200～300g，3只/組，在2批的情況下，第1批注入2只、第2批注入1只中)(劑量阿霉素0.35mg/kg)。用肝素處理的毛細(xì)管經(jīng)規(guī)定時(shí)間從右尾靜脈采血，并離心(5分鐘，8,000×g，4℃)得到血漿，通過下列方法測(cè)定血漿中的阿霉素濃度。
得到的血漿用含有0.075mol/l鹽酸的2-丙醇/水(9/1)混合溶劑溶液稀釋10倍，攪拌。得到的稀釋液用冰冷卻，離心(10分鐘，12,000×g，4℃)，用熒光分光光度計(jì)，在激發(fā)波長(zhǎng)500nm和熒光波長(zhǎng)550nm下測(cè)定得到的上清液的熒光強(qiáng)度。以測(cè)定血漿中阿霉素的相同方式，用自沒有注入脂質(zhì)體懸浮液的大鼠采集的血漿將給藥藥液稀向燒杯中加入33mg含有約10wt％雜質(zhì)的SWNT(商購(gòu)自CarbonNanotechnologies Incorporated)。使用處于80％振幅的超聲波處理器(600瓦，13mm探針直徑，Sonics & Materials Incorporated，美國(guó))在相同溫度將混合物超聲波處理半小時(shí)。然后將熔融單體混合物中的SWNT分散體轉(zhuǎn)入反應(yīng)管并保持過夜，以使SWNT繩膠凝(形成網(wǎng)絡(luò))。然后使用與實(shí)施例2相同的方法使單體聚合為PCCD。
將以上制備的一部分復(fù)合材料加熱一小時(shí)分別使實(shí)施例3的尼龍6復(fù)合材料達(dá)到240℃(高于尼龍6的熔點(diǎn))和實(shí)施例4的PCCD復(fù)合材料達(dá)到230℃。然后將復(fù)合材料緩慢冷卻到室溫，并如表2所示測(cè)量導(dǎo)電率。類似地，使實(shí)施例3和4的復(fù)合材料與另外的聚合物熔融混合，并壓制通過小型實(shí)驗(yàn)室混合和模塑成型機(jī)，形成隨后用于進(jìn)行如實(shí)施例2中所詳述的導(dǎo)電率測(cè)量的線料。這些結(jié)果也示于表4。
表4

*S.D.表示括號(hào)中的數(shù)值為標(biāo)準(zhǔn)偏差。
從以上數(shù)據(jù)可見，與那些退火的樣品相比，退火的樣品顯示優(yōu)異的脂質(zhì)體的阿霉素AUC0-24小時(shí)值進(jìn)行比較，改變PEG-DSPE含量幾乎不改變阿霉素AUC0-24小時(shí)值。另一方面，在實(shí)施例7和8分別制備的含不同含量的化合物(4)的甘油衍生物修飾的脂質(zhì)體的阿霉素AUC0-24小時(shí)值時(shí)，改變化合物(4)在甘油衍生物中的含量可以增加阿霉素AUC0- 24小時(shí)值。因此可以認(rèn)為與PEG修飾的脂質(zhì)體不同，甘油衍生物修飾的脂質(zhì)體可以進(jìn)一步改善作為藥物載體所需要的血漿中的保留作用。
以下基于實(shí)施例和比較例來描述本發(fā)明，但本發(fā)明并不限于此。
實(shí)施例1制備化合物(2)反應(yīng)路線如下所示。在反應(yīng)路線中，Bn表示芐基；NHS表示N-羥基琥珀酰亞胺，DSPE表示二硬脂?；字Ｒ掖及贰uccinicanhydride為琥珀酸酐。

根據(jù)根本(Nemoto)等人的方法[J.Med.Chem.，38，1673(1995)]制備化合物2[2-氨基-1，3-雙(1，3-二-O-芐基-2-甘油氧基)丙烷]。在室溫下，依次將二異丙基乙胺(10.5ml，60.0mmol)、化合物2(19.8g，33.0mmol)的DMF溶液(20ml)和六氟磷酸苯并三唑-1-氧基三(吡咯烷基)(PyBOP，15.6g，30.0mmol)加入到化合物1(3.5g，15.0mmol)的二甲基甲酰胺(DMF)溶液中(50ml)，在相同溫度下攪拌15小時(shí)。反應(yīng)溶液倒入5％硫酸氫鉀水溶液中，再用乙酸乙酯萃取。有機(jī)層用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和食鹽水依次洗滌，用無水硫酸鎂干燥然后過濾。減壓蒸去溶劑，殘余物通過硅膠柱層析純化(己烷∶乙酸乙酯＝3∶2)得到淺黃色油狀化合物3(18.7g，收率89％)。1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ(ppm)1.36(9H，s)，3.40-3.81(32H，m)，4.16(2H，m)，4.48(16H，s)，7.19-7.31(40H，m)室溫下，將三氟乙酸(5ml)倒入化合物3(2.0g，1.43mmol)的二氯甲烷溶液中(45ml)，在相同溫度下攪拌20小時(shí)。將飽和碳酸氫鈉水溶液加入到反應(yīng)溶液中，然后用二氯甲烷萃取。有機(jī)層用無水硫酸鎂干燥，過濾，然后減壓蒸去溶劑得到淺黃色油狀化合物4(1.19g，收率64％)。
1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ(ppm)1.75(1H，s)，2.87(4H，s)，3.47-3.81(28H，m)，4.16(2H，m)，4.48(16H，s)，7.00(2H，d)，7.19-7.31(40H，m)在室溫下將琥珀酸酐(232mg，2.31mmol)逐漸加入到化合物4(1.5g，1.16mmol)的吡啶溶液中(2.0ml)，在100℃攪拌1.5小時(shí)。反應(yīng)溶液冷卻到室溫，向其中加入2mol/l鹽酸，用二氯甲烷萃取。有機(jī)層用飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鎂干燥，然后過濾。減壓蒸去溶劑，殘余物通過硅膠柱層析純化(己烷∶乙酸乙酯＝1∶3)得到淺黃色油狀化合物5(1.62g，收率100％)。
1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ(ppm)2.39(2H，m)，2.56(2H，m)，3.45-3.76(32H，m)，4.09-4.21(2H，m)，4.46(16H，s)，6.87(1H，d)，7.19-7.31(40H，m)，8.02(18，d)室溫下，依次將N-羥基琥珀酰亞胺(NHS，495mg，4.30mmol)、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亞胺鹽酸鹽(EDC，886mg，4.30mmol)和三乙胺(0.24ml，1.72mmol)加入到化合物5(3.0g，2.15mmol)的四氫呋喃溶液中(45ml)，回流2小時(shí)。然后加入5％硫酸氫鉀水溶液，用二氯甲烷萃取。有機(jī)層用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽食鹽水依次洗滌，無水硫酸鎂干燥，過濾。減壓蒸去溶劑，然后殘余物通過硅膠柱層析純化(己烷∶乙酸乙酯＝1∶10)得到淺黃色油狀化合物6(2.35g，收率79％)。
1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ(ppm)2.49(2H，t)，2.67(4H，s)，2.78(2H，t)，3.40-3.78(32H，m)，4.11-4.22(2H，m)，4.48(16H，d)，6.96(1H，d)，7.19-7.31(40H，m)，8.37(1H，d)將二硬脂?；字Ｒ掖及?DSPE，497mg，0.664mmol)溶解在二氯甲烷(50ml)和甲醇(50ml)的混合溶液中，然后加入化合物6(993mg，0.665mmol)的氯仿溶液(50ml)。向反應(yīng)混合物中加入含有TEA(184μl)的二氯甲烷(50ml)，在室溫、遮光和氬氣氣氛下攪拌18小時(shí)。減壓蒸去溶劑，然后殘余物通過硅膠柱層析純化(依次使用甲烷∶氯仿＝0∶100，1∶50，1∶40，1∶30，1∶20，1∶10，1∶7.5或1∶5)得到化合物7(1.032g，0.4857mmol，收率73.1％)。
1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ(ppm)0.85-0.90(6H，t)，1.00-1.35(64H，m)，2.20-2.24(2H，t)，2.45-2.52(2H，m)，3.30-3.92(32H，m)，4.11-4.22(2H，m)，4.44(16H，d)，7.19-7.31(40H，m)
在室溫，氫氣氣氛下，將Pd(OH)2/C(Pd含量20重量％，516mg)加入到化合物7(1.032g，0.4857mmol)的甲醇溶液中(50ml)，在相同溫度下攪拌6小時(shí)。經(jīng)過濾器過濾反應(yīng)溶液，減壓蒸去溶劑，得到化合物8(603mg，收率88.3％)1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ(ppm)0.84-0.88(6H，t)，1.10-1.40(64H，m)，2.26-2.33(2H，m)，2.55-2.63(2H，m)，3.30-3.95(32H，m)，4.14-4.23(2H，m).
FAB-MSm/z 1404.8([M-H]-，F(xiàn)AR-)實(shí)施例2制備化合物(4)反應(yīng)路線如下所示。在反應(yīng)路線中，Bn表示芐基；NHS表示N-羥基琥珀酰亞胺，以及DSPE表示二硬脂?；字Ｒ掖及?。

在室溫下，將化合物1(51mg，0.219mmol)、二異丙基乙胺(0.15ml，0.876mmol)和PyBOP(228mg，0.428mmol)加入到化合物4(624mg，0.48mmol)的DMF溶液中(13ml)，在相同溫度下攪拌48小時(shí)。反應(yīng)混合物倒入到5％硫酸氫鉀水溶液中，用乙酸乙酯萃取，有機(jī)層用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和食鹽水依次洗滌。然后，有機(jī)層用無水硫酸鎂干燥，過濾，然后減壓蒸去溶劑。殘余物通過硅膠柱層析純化(乙酸乙酯∶乙酸＝100∶0.7)得到黃色油狀化合物9(322mg，0.115mmol，收率53％)。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ(ppm)7.32-7.17(80H，m)，4.49-4.38(32H，m)，4.15-4.06(414，m)，3.77-3.27(68H，m)，1.32(9H，s)，(CONH未清楚鑒別)。
13C-NMR(CDCl3，75MHz)δ(ppm)170.2(C×4，CONH)，167.7(C×2，CON)，155.4(C，O2CN)，138.2(C×16)，128.3(CH×16)，128.3(CH×16)，127.7(CH×16)，127.6(CH×16)，127.6(CH×16)，80.5(C)，78.7(CH×8)，73.2(CH2×16)，70.2(CH2×16)，68.9(CH2×8)，52.1(CH2×2)，51.9(CH2×4)，49.6(CH×4)，28.2(CH3×3).
在室溫下，將三氟乙酸(0.48ml)滴加到化合物9(322mg，0.115mmol)的二氯甲烷溶液中(48.32ml)。在相同溫度下攪拌24小時(shí)之后，反應(yīng)溶液倒入到飽和碳酸氫鈉溶液中，用二氯甲烷萃取，有機(jī)層用無水硫酸鎂干燥，過濾，減壓蒸去溶劑得到白色油狀化合物10(310mg，0.115mmol，收率100％)。該產(chǎn)物無需純化即進(jìn)行下一步反應(yīng)。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ(ppm)7.33-7.18(80H，m)，4.50-4.39(32H，m)，4.20-4.02(4H，m)，3.94-3.28(68H，m)(NH未清楚鑒別)，(CONH未清楚鑒別).
在室溫下，將琥珀酸酐(28mg，0.28mmol)和N，N-二甲氨基吡啶(4mg，0.036mmol)加入到化合物10(190mg，0.071mmol)的吡啶溶液中(3ml)，在50℃下攪拌5小時(shí)。將反應(yīng)溶液加入到2mol/l鹽酸水溶液中，用二氯甲烷萃取。有機(jī)層用飽和食鹽水洗滌，用無水硫酸鎂干燥，過濾，減壓蒸去溶劑。殘余物通過硅膠柱層析純化(乙酸乙酯∶乙酸＝100∶0.7)得到白色油狀化合物11(150mg，0.054mmol，收率76％)。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ(ppm)7.35-7.17(80H，m)，4.50-4.39(32H，m)，4.22-4.05(4H，m)，4.02-3.27(68H，m)，2.62-2.53(4H，m)，(OH和CONH均未清楚鑒別).
在室溫下，將NHS(12mg，0.11mmol)加入到化合物11(150mg，0.054mmol)的四氫呋喃溶液中(2ml)，在相同溫度下攪拌15分鐘，然后在室溫下加入EDC(21mg，0.11mmol)和三乙胺(7ml，0.043mmol)，回流30分鐘。反應(yīng)溶液加入到5％KHSO4水溶液中，用二氯甲烷萃取，有機(jī)層用飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和食鹽水依次洗滌，無水硫酸鎂干燥，過濾，然后減壓蒸去溶劑。殘余物通過硅膠柱層析純化(乙酸乙酯∶己烷＝20∶1)得到油狀化合物12(62mg，0.21mmol，收率40％)。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ(ppm)7.39-7.18(80H，m)，4.54-4.38(32H，m)，4.23-4.07(4H，m)，4.89-3.33(68H，m)，2.77-2.69(4H，m)，2.57-2.49(4H，m)(CONH未清楚鑒別).
13C-NMR(CDCl3，75MHz)δ(ppm)172.1(C，CO2-)，170.4(C，CON)，169.5(C×4，CONH)，168.7(C×2，CON)，168.1(C×2，CON)，138.8(C×16)，129.0(CH×16)，129.0(CH×16)，128.2(CH×16)，128.0(CH×16)，127.6(CH×16)，79.3(CH×8)，73.8(CH2×16)，70.5(CH2×16)，68.9(CH2×8)，52.1(CH2×2)，51.9(CH2×4)，50.4(CH×4)，30.3(CH2)，30.2(CH2)，25.9(CH2×2).
TOF-MS精確質(zhì)譜值(M)＝2886，測(cè)定值(M+1)＝2887.44將DSPE(39mg，0.052mmol)用二氯甲烷(10ml)和甲醇(5ml)的混合溶劑溶解，向其中加入化合物12(150mg，0.052mmol)的氯仿溶液(5ml)和TEA(4μl)。在室溫，遮光和氬氣氣氛下反應(yīng)混合物攪拌18小時(shí)。向反應(yīng)溶液中再加入DSPE(20mg)，在33℃下攪拌23小時(shí)，減壓蒸去溶劑，然后殘余物通過硅膠柱層析純化(依次使用甲醇∶氯仿＝0∶100，1∶50，1∶40，1∶30，1∶20，1∶10，1∶7.5或1∶5)得到化合物13(42.4mg，0.0121mmol，收率23.3％)。
1H-NMR(CDCl3，300MHz)δ(ppm)0.82-0.93(6H，t)，1.10-1.35(64H，m)，2.10-2.25(2H，m)，3.50-3.65(68H，m)，4.08-4.23(2H，m)，4.43(32H，d)，7.23-7.25(80H，m).
在室溫，氫氣氣氛下，將Pd(OH)2/C(Pd含量20重量％，22mg)加入到化合物13(42.4mg，0.0121mmol)的甲醇溶液中(2.2ml)，在相同溫度下攪拌7小時(shí)，并在30℃下攪拌17小時(shí)。向反應(yīng)溶液中加入THF(1ml)，然后在30℃下攪拌6小時(shí)，在40℃下攪拌21小時(shí)，然后向其中加入20mg10％的Pd炭粉末，在40℃下攪拌95.5小時(shí)，經(jīng)過濾器過濾反應(yīng)溶液，減壓蒸去溶劑，得到化合物14(17.2mg，收率68.7％)1H-NMR(CD3OD，300MHz)δ(ppm)0.75-0.85(6H，t)，1.10-1.30(64H，m)，3.20-3.52(68H，m).
TOF-MSm/z 2076.2([M-H]-，ES-)實(shí)施例3
制備化合物(5)(第1種方法)反應(yīng)路線如下所示。在反應(yīng)路線中，Ph表示苯基，Ts表示對(duì)甲苯磺?；?，NHS表示N-羥基琥珀酰亞胺，DSPE表示二硬脂?；字Ｒ掖及?。

按已知方法[Synthesis，879-882，(1998)]制備化合物15。在室溫，劇烈攪拌條件下，將化合物16(43.8mg，0.47mmol)緩慢滴加到化合物15(250.0mg，1.89mmol)、溴化四丁基銨(30.5mg，0.09mmol)、氫氧化鉀(93.7mg，1.42mmol)和水(0.04ml)的懸浮液中。反應(yīng)混和物在60℃下攪拌40小時(shí)，用乙酸乙酯稀釋(150ml)并過濾。濾液用無水硫酸鎂干燥，然后減壓濃縮。殘余物通過硅膠柱層析純化得到化合物15(130mg，回收52％)和化合物17(64.8mg，收率43％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)4.05-3.70(m，9H)，3.65-3.45(m，4h)，3.45-3.41(m，2H)，2.63(br，1H)，1.43(s，6H)，1.41(s，6H)13C-NMR(100MHz，CDCl3)98.1(C×2)，70.8(CH×2)，69.8(CH2×2)，69.4(CH)，62.3(CH2×2)，62.2(CH2×2)，23.9(CH3×2)，22.9(CH3×2)在室溫，劇烈攪拌條件下，將化合物16(72.2mg，0.78mmol)緩慢滴加到化合物17(1,000mg，3.12mmol)、溴化四丁基銨(50.3mg，0.16mmol)、氫氧化鉀(154.5mg，2.34mmol)和水(0.4ml)的懸浮液中。反應(yīng)混和物在80℃下攪拌48小時(shí)，加入水，得到的懸浮液用二氯甲烷萃取(80ml，5次)。收集的有機(jī)層用無水碳酸鉀干燥，然后減壓濃縮。殘余物通過硅膠柱層析純化得到化合物17(273.2mg，回收27％)和化合物18(414.6mg，收率76％)。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)4.05-3.35(m，35H)，1.43(s，12H)，1.40(s，12H)13C-NMR(100MHz，CDCl3)98.1(C×4)，78.7(CH×2)，71.9(CH2×2)，70.9(CH×4)，69.6(CH)，68.7(CH2×2)，68.6(CH2×2)，62.4(CH2×2)，62.4(CH2×2)，62.3(CH2×2)，62.3(CH2×2)，30.9(CH3)，29.6(CH3)，24.0(CH3×2)，24.0(CH3)，23.1(CH3×2)，23.0(CH3)在室溫下，將對(duì)甲苯磺酰氯(1.01g，5.32mmol)和4-二甲氨基吡啶(65.0mg，0.53mmol)加入到化合物18(1.85g，2.66mmol)的吡啶溶液中(1ml)，然后攪拌16小時(shí)。將乙酸乙酯加入到得到的反應(yīng)溶液中，混合物用飽和硫酸銅水溶液、飽和碳酸氫鈉水溶液和飽和食鹽水洗滌，硫酸鈉干燥，減壓濃縮得到化合物19。得到的化合物19、疊氮化鈉(1.04g，16.0mmol)和溴化四丁基銨(85.8mg，0.27mmol)溶解在DMF中(5ml)，得到的溶液在120℃下攪拌20小時(shí)。將飽和碳酸氫鈉水溶液加入到得到的反應(yīng)溶液中，用乙酸乙酯萃取(3次)。萃取液用飽和食鹽水洗滌，碳酸鉀干燥，減壓濃縮。殘余物通過硅膠柱層析純化得到化合物20(1.2048g，收率63％)。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)4.01-3.51(m，31H)，3.48-3.40(m，4H)，1.43(s，12H)，1.41(s，12H)
在0℃，將氫化鋰鋁(2.2mg，0.057mmol)加入到化合物20(20.5mg，0.028mmol)的無水THF溶液中(0.5ml)，得到的懸浮液在室溫下攪拌15小時(shí)。在0℃將乙酸乙酯滴加到得到的反應(yīng)溶液中。在停止產(chǎn)生氫氣時(shí)，向其中加入水(0.1ml)，過濾。濾液用碳酸鉀干燥，減壓濃縮。殘余物通過硅膠柱層析純化得到化合物21(7.8mg，收率40％)。1H-NMR(CDCl3，400MHz)4.02-3.50(m，31H)，1.42(s，12H)，1.40(s，12H)攪拌下，依次將二異丙基乙胺、化合物21的DMF溶液和PyBOP加入到化合物22的DMF溶液中。反應(yīng)液體倒入到5％硫酸氫鉀水溶液中，并用乙酸乙酯萃取。得到的有機(jī)層依次用飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鎂干燥，過濾。減壓蒸去溶劑，得到的殘余物通過硅膠柱層析純化得到化合物23。
在室溫下，將氧化鋰緩慢加入到化合物23的水溶液中，攪拌。反應(yīng)液體用二氯甲烷萃取。有機(jī)層用飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鎂干燥并過濾。減壓蒸去溶劑，殘余物通過硅膠柱層析純化得到化合物24。
將NHS、EDC和三乙胺依次加入到化合物24的DMF溶液中，回流。然后將5％的硫酸氫鉀水溶液加入到反應(yīng)溶液中，用二氯甲烷萃取。有機(jī)層依次用飽和碳酸氫鈉水溶液、飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鎂干燥，過濾。減壓蒸去溶劑，殘余物通過硅膠柱層析純化得到化合物25。
如實(shí)施例1中化合物6和DSPE反應(yīng)的相同方式，用得到的化合物25和DSPE得到化合物26。
在酸性條件下，優(yōu)選在弱酸性條件下，處理化合物26得到化合物27。
實(shí)施例4制備化合物(5)(第2種方法)反應(yīng)路線如下所示。在反應(yīng)路線中，Ph表示苯基，Ts表示對(duì)甲苯磺?；?，NHS表示N-羥基琥珀酰亞胺，DSPE表示二硬脂酰基磷脂酰乙醇胺。

按已知方法[J.Am.Chem.Soc，117，8757-8768(1995)]制備化合物28。在室溫，劇烈攪拌下，將化合物16(0.91ml，d＝1.183g/l，11.6mmol)緩慢滴加到化合物28(8.739g，48.5mmol)、溴化四丁基銨(0.773g，2.33mmol)、氫氧化鉀(2.304g，41.lmmo1)和水(10ml)的懸浮液中，在80℃攪拌40小時(shí)。然后向其中加入水(200ml)，得到的懸浮液用二氯甲烷萃取(80ml×5次)。合并有機(jī)層用食鹽水洗滌，無水碳酸鉀干燥，然后減壓濃縮。殘余物通過硅膠柱層析純化得到化合物28(4.803g，回收55％)和化合物29(2.939g，收率61％)。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ7.54-7.29(m，10H，芳環(huán))，5.54(s，2H，[-CH2O]2-CHPh)，4.40-3.96(m，9H，[CH2]×4+HOCH-)，3.77-3.67(m，4H，[CH2]×2)，3.39-337(m，2H，[CH2-O-CH]×2)，2.88-2.80(m，1H，-OH)在室溫，劇烈攪拌下，將化合物16(0.087ml，1.11mmol)緩慢滴加到化合物29(1.844g，4.43mmol)、氫化鈉(55％分散在礦物油中，0.145g，3.32mmol)的二氧六環(huán)(15ml)的懸浮液中。反應(yīng)混合物在回流下攪拌43小時(shí)，向其中加入水(50ml)，得到的懸浮液用二氯甲烷萃取(50ml×3次)。合并的有機(jī)層用食鹽水洗滌，無水碳酸鉀干燥，然后減壓濃縮。殘余物通過硅膠柱層析純化得到化合物29(1.106g，回收60％)和化合物30(181mg，收率18％)。
1H-NMR(CDCl3，400MHz)δ7.70-7.28(m，20H，芳環(huán))，5.48(s，4H，[-CH2O]2-CHPh)，4.51-3.47(m，33H，[CH2]×14，[CH]×4，-OH)，3.32-3.30(m，3H，[CH]×3).
以得到的化合物30，按如實(shí)施例3中化合物18的同樣反應(yīng)，以下按實(shí)施例3中化合物19-24的反應(yīng)的相同方式，得到化合物36。
如實(shí)施例1中化合物6和DSPE反應(yīng)的相同方式，用得到的化合物36和DSPE得到化合物37。
如實(shí)施例1中化合物7的相同方式，在室溫，氫氣氣氛下，通過在甲醇溶液中用Pd(OH)2/C處理化合物38得到化合物27。
參考實(shí)施例制備化合物22反應(yīng)路線如下所示。在反應(yīng)路線中，Bn表示芐基，Succinicanhydride為琥珀酸酐。

在室溫下，將對(duì)甲苯磺酸一水合物(1.80g，9.0mmol)和苯甲醇(31ml，301mmol)依次加入到化合物38(1.00g，7.5mmol)的甲苯溶液中(20ml)，共沸脫水20小時(shí)。將二乙醚加入到反應(yīng)溶液中，冷卻。得到的沉淀過濾分離，用二乙醚洗滌。并向其中加入二氯甲烷和飽和碳酸氫鈉水溶液，然后用二氯甲烷萃取。有機(jī)層用無水硫酸鈉干燥，過濾，減壓蒸去溶劑得到化合物39。
在室溫下，將琥珀酸酐(1,125mg，11.25mmol)加入到得到的化合物39的吡啶溶液中(6ml)，在相同溫度下攪拌6小時(shí)。向反應(yīng)溶液中加入1mol/l的鹽酸，然后混合物用乙酸乙酯萃取。有機(jī)層用飽和食鹽水洗滌，無水硫酸鎂干燥，過濾，減壓蒸去溶劑得到化合物40。
在室溫下，將無水碳酸鉀(2,073mg，15mmol)和硫酸二甲酯(1,895mg，15mmol)依次加入到得到的化合物40的丙酮溶液中(50ml)，混合物回流1小時(shí)。然后將5％硫酸氫鉀水溶液加入到反應(yīng)溶液中，用乙酸乙酯萃取。有機(jī)層用飽和食鹽水萃取，無水硫酸鎂干燥，過濾，減壓蒸去溶劑，殘余物通過硅膠柱層析純化(己烷∶乙酸乙酯＝1∶1)得到化合物41(545.0mg，收率17％)。
1H-NMR(400MHz，CDCl3)7.44-7.29(m，10H)，5.22-5.12(m，4H)，4.27-4.20(m，4H)，3.68(s，3H)，2.70-2.60(m，4H)在室溫，氫氣氣氛中，將Pd(OH)2/C(Pd20重量％，25mg)加入到化合物41(535.8mg，1.25mmol)的甲醇溶液中(5ml)，在相同溫度下攪拌2小時(shí)。過硅藻土535過濾反應(yīng)溶液，減壓蒸去溶劑得到化合物22(309.0mg，收率100％)。
1H-NMR(400MHz，CD3OD)4.34-4.05(m，4H)，3.66(s，3H)，232-2.52(m，4H)
實(shí)施例5制備含有化合物(2)的甘油衍生物修飾的脂質(zhì)體(修飾率6.7mol％)將100mmol/L檸檬酸緩沖溶液(pH 4.0)加入到氫化大豆磷脂酰膽堿(HSPC)中，用Vortex攪拌器振搖下進(jìn)行攪拌。得到的懸浮液在70℃，用0.4μm聚碳酸酯膜過濾器過濾4次，并用0.1μm聚碳酸酯膜過濾器過濾10次。將100mmol/L檸檬酸緩沖溶液加入到得到的溶液中，制備HSPC濃度為62.5mg/mL的未修飾的脂質(zhì)體懸浮液。將未修飾的脂質(zhì)體懸浮液加入到阿霉素中以控制阿霉素濃度為1.25mg/mL。得到的懸浮液用1mol/L氫氧化鈉水溶液調(diào)節(jié)pH至約7.4，并將蒸餾水加入到懸浮液中以使阿霉素濃度為1mg/mL。得到的懸浮液在70℃加熱5分鐘以制備膠囊化的阿霉素的未修飾的脂質(zhì)體懸浮液。向膠囊化的阿霉素的未修飾的脂質(zhì)體的懸浮液中加入實(shí)施例1制備的化合物(2)的乙醇溶液(乙醇含量膠囊化阿霉素的未修飾的脂質(zhì)體懸浮液的1體積％)，使得化合物(2)相對(duì)于所希望的甘油衍生物修飾的脂質(zhì)體中的總脂類的摩爾比為6.7mol％。得到的懸浮液在70℃加熱2分鐘以得到含有化合物(2)的甘油衍生物修飾的脂質(zhì)體。按該方式制備2批這種脂質(zhì)體。
實(shí)施例6制備含有化合物(2)的甘油衍生物修飾的脂質(zhì)體(修飾率15mol％)將100mmol/L檸檬酸緩沖溶液(pH 4.0)加入到HSPC中，用Vortex攪拌器振搖下進(jìn)行攪拌。得到的懸浮液在70℃，用0.4μm聚碳酸酯膜過濾器過濾4次，并用0.1μm聚碳酸酯膜過濾器過濾10次。將100mmol/L檸檬酸緩沖溶液加入到得到的溶液中，制備HSPC濃度為62.5mg/mL的未修飾的脂質(zhì)體懸浮液。將未修飾的脂質(zhì)體懸浮液加入到阿霉素中以控制阿霉素濃度為1.25mg/mL。得到的懸浮液用1mol/L氫氧化鈉水溶液調(diào)節(jié)pH至約7.4，并將蒸餾水加入到懸浮液中以使阿霉素濃度為1mg/mL。得到的懸浮液在70℃加熱5分鐘以制備膠囊化的阿霉素的未修飾的脂質(zhì)體懸浮液。向該膠囊化阿霉素的未修飾的脂質(zhì)體的懸浮液中加入實(shí)施例1制備的化合物(2)的乙醇溶液(乙醇含量膠囊化阿霉素的未修飾的脂質(zhì)體懸浮液的1體積％)，使得化合物(2)相對(duì)于所希望的甘油衍生物修飾的脂質(zhì)體中的總脂類的摩爾比為12mol％。得到的懸浮液在70℃加熱2分鐘以得到含有化合物(2)的甘油衍生物修飾的脂質(zhì)體。
實(shí)施例7制備含有甘油衍生物脂質(zhì)體的化合物(4)(修飾率6.7mol％)將100mmol/L檸檬酸緩沖溶液(pH 4.0)加入到HSPC中，振搖混合物并用Vortex攪拌器攪拌。得到的懸浮液在70℃，用0.4μm聚碳酸酯膜過濾器過濾4次，并用0.1μm聚碳酸酯膜過濾器過濾10次。將100mmol/L檸檬酸緩沖溶液加入到得到的溶液中，制備HSPC濃度為62.5mg/ml的未修飾的脂質(zhì)體懸浮液。將未修飾的脂質(zhì)體懸浮液加入到阿霉素中以控制阿霉素濃度為1.25mg/mL。得到的懸浮液用1mol/L氫氧化鈉水溶液調(diào)節(jié)pH至約7.4，并將蒸餾水加入到懸浮液中以使阿霉素濃度為1mg/ml。得到的懸浮液在70℃加熱5分鐘以制備膠囊化阿霉素的未修飾的脂質(zhì)體懸浮液。向膠囊化阿霉素的未修飾的脂質(zhì)體的懸浮液中加入實(shí)施例2制備的化合物(4)的乙醇溶液(乙醇含量膠囊化阿霉素的未修飾的脂質(zhì)體懸浮液的1體積％)，使得化合物(4)相對(duì)于所希望的甘油衍生物修飾的脂質(zhì)體中的總脂類的摩爾比為6.7mol％。得到的懸浮液在70℃加熱2分鐘以得到含有化合物(4)的甘油衍生物修飾的脂質(zhì)體。
實(shí)施例8制備含有甘油衍生物脂質(zhì)體的化合物(4)(修飾率15mol％)將100mmol/L檸檬酸緩沖溶液(pH 4.0)加入到HSPC中，振搖混合物并用Vortex攪拌器攪拌。得到的懸浮液在70℃，用0.4μm聚碳酸酯膜過濾器過濾4次，并用0.1μm聚碳酸酯膜過濾器過濾10次。將100mmol/L檸檬酸緩沖溶液加入到得到溶液中，制備HSPC濃度為62.5mg/ml的未修飾的脂質(zhì)體懸浮液。將未修飾的脂質(zhì)體懸浮液加入到阿霉素中以控制阿霉素濃度為1.25mg/ml。得到的懸浮液用1mol/l氫氧化鈉水溶液調(diào)節(jié)pH至約7.4，并將蒸餾水加入到懸浮液中以使阿霉素濃度為1mg/ml。得到的懸浮液在70℃加熱5分鐘以制備膠囊化阿霉素的未修飾的脂質(zhì)體懸浮液。向膠囊化阿霉素的未修飾的脂質(zhì)體的懸浮液中加入實(shí)施例2制備的化合物(4)的乙醇溶液(乙醇含量膠囊化阿霉素的未修飾的脂質(zhì)體懸浮液的1體積％)，使得化合物(4)相對(duì)于所希望的甘油衍生物修飾的脂質(zhì)體中的總脂類的摩爾比為15mol％。得到的懸浮液在70℃加熱2分鐘以得到含有化合物(4)的甘油衍生物修飾的脂質(zhì)體。
比較例1制備未修飾的脂質(zhì)體將100mmol/L檸檬酸緩沖溶液(pH 4.0)加入到HSPC中，用Vortex攪拌器攪拌振搖混合物。得到的懸浮液在70℃，用0.4μm聚碳酸酯膜過濾器過濾4次，并用0.1μm聚碳酸酯膜過濾器過濾10次。將100mmol/L檸檬酸緩沖溶液加入到得到的溶液中，制備HSPC濃度為62.5mg/mL的未修飾的脂質(zhì)體懸浮液。將未修飾的脂質(zhì)體懸浮液加入到阿霉素中以控制阿霉素濃度為1.25mg/ml。得到的懸浮液用1mol/l氫氧化鈉水溶液調(diào)節(jié)pH至約7.4，并將蒸餾水加入到懸浮液中以使阿霉素濃度為1mg/ml。得到的懸浮液在70℃加熱5分鐘以制備膠囊化阿霉素的未修飾的脂質(zhì)體的懸浮液。以該方式制備2批這種脂質(zhì)體。比較例2制備含有PEG修飾的脂質(zhì)體(修飾率6.7mol％)將100mmol/L檸檬酸緩沖溶液(pH 4.0)加入到HSPC中，振搖混合物并用Vortex攪拌器攪拌。得到的懸浮液在70℃，用0.4μm聚碳酸酯膜過濾器過濾4次，并用0.1μm聚碳酸酯膜過濾器過濾10次。將100mmol/L檸檬酸緩沖溶液加入到得到溶液中，制備HSPC濃度為62.5mg/ml的未修飾的脂質(zhì)體懸浮液以得到。將未修飾的脂質(zhì)體懸浮液加入到阿霉素中以控制阿霉素濃度為1.25mg/ml。得到的懸浮液用1mol/L氫氧化鈉水溶液調(diào)節(jié)pH至約7.4，并將蒸餾水加入到懸浮液中以使阿霉素濃度為1mg/mL。得到的懸浮液在70℃加熱5分鐘以制備膠囊化阿霉素的未修飾的脂質(zhì)體懸浮液。向膠囊化阿霉素的未修飾的脂質(zhì)體的懸浮液中加入PEG-DSPE(1，2-二硬脂?；?sn-甘油-3-磷乙醇胺-N-[聚乙二醇-2000]，從Avanti購(gòu)得)的乙醇溶液(乙醇含量膠囊化阿霉素的未修飾的脂質(zhì)體懸浮液的1體積％)，使得PEG-DSPE相對(duì)于所希望的PEG修飾的脂質(zhì)體中的總脂類的摩爾比為6.7mol％。得到的懸浮液在70℃加熱2分鐘以得到含有PEG-修飾的脂質(zhì)體。以該方式制備2批這種脂質(zhì)體。
比較例3制備含有PEG修飾的脂質(zhì)體(修飾率15mol％)將100mmol/L檸檬酸緩沖溶液(pH 4.0)加入到HSPC中，用Vortex攪拌器攪拌下振搖混合物。得到的懸浮液在70℃，用0.4μm聚碳酸酯膜過濾器過濾4次，并用0.1μm聚碳酸酯膜過濾器過濾10次。將100mmol/L檸檬酸緩沖溶液加入到得到的溶液中，制備HSPC濃度為62.5mg/mL的未修飾的脂質(zhì)體懸浮液。將未修飾的脂質(zhì)體懸浮液加入到阿霉素中以控制阿霉素濃度為1.25mg/ml。得到的懸浮液用1mol/L氫氧化鈉水溶液調(diào)節(jié)pH至約7.4，并將蒸餾水加入到懸浮液中以使阿霉素濃度為1mg/mL。得到的懸浮液在70℃加熱5分鐘以制備膠囊化阿霉素的未修飾的脂質(zhì)體的懸浮液。向膠囊化阿霉素的未修飾的脂質(zhì)體的懸浮液中加入PEG-DSPE的乙醇溶液(乙醇含量膠囊化阿霉素的未修飾的脂質(zhì)體懸浮液的1體積％)，使得PEG-DSPE相對(duì)于所希望的PEG修飾的脂質(zhì)體中的總脂類的摩爾比為15mol％。得到的懸浮液在70℃加熱2分鐘以得到含有PEG-修飾的脂質(zhì)體。
工業(yè)實(shí)用性本發(fā)明提供了一種兩性物質(zhì)或疏水性物質(zhì)被甘油衍生物修飾的化合物或其鹽，其可作為制備藥物載體等的表面修飾劑等，以及含有該化合物或其鹽的微粒等。
權(quán)利要求
1.選自兩性物質(zhì)和疏水性物質(zhì)的被修飾物質(zhì)直接或經(jīng)過間隔基團(tuán)被下式(1)表示的甘油衍生物修飾的化合物或其鹽 其中，R表示含有與選自兩性物質(zhì)和疏水性物質(zhì)的被修飾物質(zhì)或間隔基團(tuán)具有反應(yīng)性的基團(tuán)的殘基，或是表示含有能夠轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂蟹磻?yīng)性基的基團(tuán)的殘基，所述間隔基團(tuán)用于將選自兩性物質(zhì)和疏水性物質(zhì)的被修飾物質(zhì)結(jié)合至R-X上；n表示大于等于3的整數(shù)；且X表示可具有n個(gè)下列結(jié)構(gòu)的殘基。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物或其鹽，其中n是2m，其中m是2或更大的整數(shù)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的化合物或其鹽，其中X具有1個(gè)或多個(gè)串連的分支結(jié)構(gòu)。
4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一項(xiàng)的化合物或其鹽，其中X含有1～(n-1)個(gè)下列結(jié)構(gòu)， 或 其中Y1、Y2和Y3各自獨(dú)立地表示單鍵或選自取代或未取代的亞烷基、羰基、取代或未取代的亞胺基、O、S、磺酰基和亞磺?；娜我饨M合之一或相同或不同的兩個(gè)或更多個(gè)的任意組合，且當(dāng)Y1、Y2和Y3以兩個(gè)或更多個(gè)存在時(shí)，其可以相同或不同。
5.根據(jù)權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)的化合物或其鹽，其中X含有1～(n-1)個(gè)下列結(jié)構(gòu)。
6.根據(jù)權(quán)利要求1-5任一項(xiàng)的化合物或其鹽，其中X含有1～(n-1)個(gè)下列結(jié)構(gòu)。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-6任一項(xiàng)的化合物或其鹽，其中X含有1～(n-1)個(gè)下列結(jié)構(gòu)。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-7任一項(xiàng)的化合物或其鹽，其中X含有1～(n-1)個(gè)下列結(jié)構(gòu)。
9.根據(jù)權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)的化合物或其鹽，其中R是具有與選自兩性物質(zhì)和疏水性物質(zhì)的被修飾物質(zhì)的下列基團(tuán)具有反應(yīng)性的基團(tuán)的殘基或含有與用于將選自兩性物質(zhì)和疏水性物質(zhì)的被修飾物質(zhì)結(jié)合至R-X上的間隔基團(tuán)的下列基團(tuán)具有反應(yīng)性的基團(tuán)的殘基，或是含有能夠轉(zhuǎn)變?yōu)榉磻?yīng)性基的基團(tuán)的殘基選自羧基、氨基、羥基、巰基、甲?；?、硫酸殘基、磷酸殘基、膦酸殘基和其部分結(jié)構(gòu)的基團(tuán)。
10.權(quán)利要求1-8任一項(xiàng)的化合物或其鹽，其中R選自羧酸活性酯殘基、碳酸酯、馬來酰亞胺基、巰基、甲?；⑷一酋；?、異氰酸酯基、酸酐殘基、酰鹵殘基、乙烯基磺酰基、肼基、氨基、羥基、鹵素、羧基、乙烯基和膦酰基。
11.含有至少兩種根據(jù)權(quán)利要求1-10任一項(xiàng)的化合物及其鹽的混合物。
12.根據(jù)權(quán)利要求1-11任一項(xiàng)的化合物或其鹽，其中選自兩性物質(zhì)或疏水性物質(zhì)的被修飾物質(zhì)是脂類或其衍生物。
13.下式(2)表示的化合物或其鹽 其中X表示氫原子或堿金屬原子；R1和R2可以相同或不同，各自表示氫原子、飽和脂肪酸殘基或不飽和脂肪酸殘基，且R1和R2的至少一個(gè)是飽和脂肪酸殘基或不飽和脂肪酸殘基；R3和R4可以相同或不同，各自表示具有1-10個(gè)碳原子的亞烷基。
14.下式(3)表示的化合物或其鹽 其中X表示氫原子或堿金屬原子；R1和R2可以相同或不同，各自表示氫原子、飽和脂肪酸殘基或不飽和脂肪酸殘基，且R1和R2的至少一個(gè)是飽和脂肪酸殘基或不飽和脂肪酸殘基；R3和R4可以相同或不同，各自表示具有1-10個(gè)碳原子的亞烷基。
15.下式(4)表示的化合物或其鹽 其中X表示氫原子或堿金屬原子；R1和R2可以相同或不同，各自表示氫原子、飽和脂肪酸殘基或不飽和脂肪酸殘基，且R1和R2的至少一個(gè)是飽和脂肪酸殘基或不飽和脂肪酸殘基；R3和R4可以相同或不同，各自表示具有1-10個(gè)碳原子的亞烷基。
16.下式(5)表示的化合物或其鹽 其中X表示氫原子或堿金屬原子；R1和R2可以相同或不同，各自表示氫原子、飽和脂肪酸殘基或不飽和脂肪酸殘基，且R1和R2的至少一個(gè)是飽和脂肪酸殘基或不飽和脂肪酸殘基；R3和R4可以相同或不同，各自表示具有1-10個(gè)碳原子的亞烷基。
17.下式(6)表示的化合物或其鹽 其中X表示氫原子或堿金屬原子；R1和R2可以相同或不同，各自表示氫原子、飽和脂肪酸殘基或不飽和脂肪酸殘基，且R1和R2的至少一個(gè)是飽和脂肪酸殘基或不飽和脂肪酸殘基；R3和R4可以相同或不同，各自表示具有1-10個(gè)碳原子的亞烷基。
18.下式(7)表示的化合物或其鹽 其中X表示氫原子或堿金屬原子；R1和R2可以相同或不同，各自表示氫原子、飽和脂肪酸殘基或不飽和脂肪酸殘基，且R1和R2的至少一個(gè)是飽和脂肪酸殘基或不飽和脂肪酸殘基；R3和R4可以相同或不同，各自表示具有1-10個(gè)碳原子的亞烷基。
19.下式(8)表示的化合物或其鹽 其中X表示氫原子或堿金屬原子；R1和R2可以相同或不同，各自表示氫原子、飽和脂肪酸殘基或不飽和脂肪酸殘基，且R1和R2的至少一個(gè)是飽和脂肪酸殘基或不飽和脂肪酸殘基；R3和R4可以相同或不同，各自表示具有1-10個(gè)碳原子的亞烷基。
20.下式(9)表示的化合物或其鹽 其中X表示氫原子或堿金屬原子；R1和R2可以相同或不同，各自表示氫原子、飽和脂肪酸殘基或不飽和脂肪酸殘基，且R1和R2的至少一個(gè)是飽和脂肪酸殘基或不飽和脂肪酸殘基；R3和R4可以相同或不同，各自表示具有1-10個(gè)碳原子的亞烷基。
21.下式(10)表示的化合物或其鹽 其中X表示氫原子或堿金屬原子；R1和R2可以相同或不同，各自表示氫原子、飽和脂肪酸殘基或不飽和脂肪酸殘基，且R1和R2的至少一個(gè)是飽和脂肪酸殘基或不飽和脂肪酸殘基；R3和R4可以相同或不同，各自表示具有1-10個(gè)碳原子的亞烷基。
22.根據(jù)權(quán)利要求13-21任一項(xiàng)的化合物，其中R3和R4是亞乙基。
23.微粒，含有選自兩性物質(zhì)和疏水性物質(zhì)的被修飾物質(zhì)直接或經(jīng)過間隔基團(tuán)被甘油衍生物修飾的化合物或其鹽；所述甘油衍生物包含具有與選自兩性物質(zhì)和疏水性物質(zhì)的被修飾物質(zhì)或間隔基團(tuán)有反應(yīng)性的基團(tuán)的殘基，或包含具有能夠轉(zhuǎn)變成所述的有反應(yīng)性的基團(tuán)的基團(tuán)的殘基，所述甘油衍生物還包含一個(gè)或多個(gè)下式表示的結(jié)構(gòu)；所述間隔基團(tuán)用于將選自兩性物質(zhì)和疏水性物質(zhì)的被修飾物質(zhì)結(jié)合至R-X上，
24.含有根據(jù)權(quán)利要求1-22任一項(xiàng)的化合物或其鹽的微粒。
25.根據(jù)權(quán)利要求23或24的微粒，其中微粒選自脂質(zhì)體、脂肪乳、乳液、膠束和微晶體。
26.微粒的表面修飾劑，含有選自兩性物質(zhì)和疏水性物質(zhì)的被修飾物質(zhì)直接或通過間隔基團(tuán)被甘油衍生物修飾的化合物或其鹽；所述甘油衍生物包含具有與選自兩性物質(zhì)和疏水性物質(zhì)的被修飾物質(zhì)或間隔基團(tuán)有反應(yīng)性的基團(tuán)的殘基，或是包含具有能夠轉(zhuǎn)變?yōu)樗龇磻?yīng)性基團(tuán)的基團(tuán)的殘基，所述甘油衍生物還包含一個(gè)或多個(gè)下式表示的結(jié)構(gòu)；所述間隔基團(tuán)用于將選自兩性物質(zhì)和疏水性物質(zhì)的被修飾物質(zhì)結(jié)合至R-X上，
27.微粒的表面修飾劑，含有根據(jù)權(quán)利要求1-22任一項(xiàng)的化合物或其鹽。
28.根據(jù)權(quán)利要求26或27的表面修飾劑，其中微粒選自脂質(zhì)體、脂肪乳、乳液、膠束和微晶體。
全文摘要
本發(fā)明的目的在于提供用于制備藥物載體等的表面修飾劑的化合物或其鹽，含有該化合物或其鹽的微粒等。本發(fā)明提供了選自兩性物質(zhì)和疏水性物質(zhì)的被修飾物質(zhì)直接或經(jīng)過間隔基團(tuán)被下式(1)表示的甘油衍生物修飾的化合物或其鹽，其中，R表示含有與選自兩性物質(zhì)和疏水性物質(zhì)的被修飾物質(zhì)或間隔基團(tuán)具有反應(yīng)性的基團(tuán)的殘基，或是表示含有能夠轉(zhuǎn)變?yōu)榫哂蟹磻?yīng)性基的基團(tuán)的殘基，所述間隔基團(tuán)用于將選自兩性物質(zhì)和疏水性物質(zhì)的被修飾物質(zhì)結(jié)合至R－X上；n表示大于等于3的整數(shù)；且X表示可具有n個(gè)下列結(jié)構(gòu)的殘基。
文檔編號(hào)C07C323/52GK1867580SQ20048003058
公開日2006年11月22日 申請(qǐng)日期2004年9月3日 優(yōu)先權(quán)日2003年9月3日
發(fā)明者根本尚夫, 山內(nèi)雅博, 莫野宏子, 加藤泰己, 山崎基生, 須澤敏行 申請(qǐng)人:協(xié)和發(fā)酵工業(yè)株式會(huì)社, 四國(guó)技術(shù)網(wǎng)絡(luò)株式會(huì)社