專利名稱：新三萜衍生物、其制備方法及其應(yīng)用的制作方法
背景技術(shù)：
發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及三萜類的新合成衍生物和這類衍生物作為藥物的應(yīng)用。相關(guān)領(lǐng)域逆轉(zhuǎn)錄病毒是小的單鏈正義RNA病毒。逆轉(zhuǎn)錄病毒顆粒包括兩個相同的單鏈正義RNA分子。其基因組含有RNA-依賴性DNA聚合酶的序列，也稱作逆轉(zhuǎn)錄酶等。發(fā)現(xiàn)逆轉(zhuǎn)錄酶的許多分子與成熟病毒顆粒中的基因組RNA極為相關(guān)。在進入細胞時，這種逆轉(zhuǎn)錄酶產(chǎn)生病毒基因組的雙鏈DNA拷貝，然后該拷貝被插入宿主細胞的染色質(zhì)。一旦插入，病毒序列稱作原病毒。逆轉(zhuǎn)錄病毒整合直接依賴于病毒蛋白質(zhì)。線性病毒DNA末端(LTRs)為整合原病毒DNA的早期前體。在整合位點上存在宿主DNA的一段短序列的特征重復(fù)。
通過宿主細胞RNA聚合酶從插入的原病毒序列轉(zhuǎn)錄子代病毒基因組和mRNAs作為對原病毒序列末端區(qū)、長末端重復(fù)序列或LTRs中轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)信號的反應(yīng)。宿主細胞的蛋白質(zhì)產(chǎn)生機器用于產(chǎn)生病毒蛋白質(zhì)，它們中的許多為失活的，直到被病毒編碼的蛋白酶加工為止。一般來說，子代病毒顆粒以非裂解的方式從細胞表面萌發(fā)。逆轉(zhuǎn)錄病毒感染不一定干擾感染細胞或生物體的正常生命周期。然而，就宿主生物體而言，它并非始終是良性的。盡管大部分類型的DNA病毒均可能涉及腫瘤發(fā)生，但是逆轉(zhuǎn)錄病毒為致癌的RNA病毒的逆轉(zhuǎn)錄病毒族。各種逆轉(zhuǎn)錄病毒，諸如作為導(dǎo)致人獲得性免疫缺陷綜合征(AIDS)的病原體的人免疫缺陷病毒(HIV)也可以產(chǎn)生高級動物中的幾種極為罕見的免疫系統(tǒng)疾病。
人免疫缺陷病毒(HIV)屬于慢病毒屬，即逆轉(zhuǎn)錄病毒亞科中的成員。HIV感染并侵入免疫系統(tǒng)細胞；它破壞身體的免疫系統(tǒng)并且使得患者易感機會性感染和腫瘤。免疫缺陷的出現(xiàn)是逐步和不可逆地，其中在幾年內(nèi)存在接近100％的高死亡率。
HIV-1對免疫系統(tǒng)細胞T4淋巴細胞是營養(yǎng)的和致細胞病變的，所述的免疫系統(tǒng)細胞表達細胞表面也稱作OKT4的分化抗原CD4、T4和leu3。病毒嗜親性因病毒包膜糖蛋白gp120和細胞表面CD4分子之間的相互作用所致(Dalgleish等，《自然》(Nature)312763-767(1984))。這些相互作用不僅介導(dǎo)HIV感染易感細胞，而且產(chǎn)生感染和未感染T細胞的病毒誘導(dǎo)的融合體。這種細胞融合體導(dǎo)致HIV-感染患者體內(nèi)巨大的多核合胞體形成、細胞死亡和CD4細胞逐步耗盡。這些結(jié)果產(chǎn)生HIV-誘導(dǎo)的免疫抑制及其隨后的后遺癥、機會性感染和腫瘤。
除CD4+T細胞外，HIV的宿主范圍包括單核吞噬細胞系細胞(Dalgleish等，文獻同上)，包括血單核細胞、組織巨噬細胞、皮膚朗格漢斯細胞和淋巴結(jié)內(nèi)的樹突網(wǎng)狀細胞。HIV也是親神經(jīng)的，它能夠感染中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的單核細胞和巨噬細胞，導(dǎo)致嚴重的神經(jīng)損害。巨噬細胞/單核細胞是HIV的主要儲蓄器。它們可以相互作用并且與含有CD4的T細胞融合，導(dǎo)致T細胞耗盡且由此產(chǎn)生AIDS的發(fā)病機制。
在過去幾年過程中，在研發(fā)用于HIV-1療法的藥物中已經(jīng)取得了顯著的進展。用于HIV的治療劑包括，但不限于AZT、3TC、ddC、d4T、ddI、替諾福韋、阿巴卡韋、奈韋拉平、地拉韋啶、恩曲他濱、依法韋侖、沙奎那韋、利托那韋、茚地那韋、那非那韋、洛匹那韋、安潑那韋、膦沙那韋和atazanavir中的至少一種或任意其它抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥或抗體彼此的組合或與基于生物的治療劑相關(guān)，諸如gp41-衍生的肽類enfuvirtide(Fuzeon；Timeris-Roche)和T-1249(Trimeris)或可溶性CD4、對CD4的抗體和CD4或抗-CD4的綴合物或作為本文額外提供的。這些藥物的組合特別有效并且可以將病毒RNA的水平降低至在血漿中不可檢測到的水平并且減緩病毒抗性的發(fā)生，使得患者的健康和壽命得到改善。
盡管存在這些進步，但是目前可獲得的藥物方案中仍然存在問題。這些藥物中許多表現(xiàn)出嚴重的毒性，具有其它副作用(例如脂肪重新分配)或需要降低依從性和由此限制功效的復(fù)雜的給藥方案。HIV抗性菌株通常在延長時間期限內(nèi)出現(xiàn)，甚至是在聯(lián)合療法時。這些藥物的高成本也是對它們的廣泛應(yīng)用的限制，尤其是在發(fā)達國家以外使用。
仍然存在對防止這些情況發(fā)生的其它藥物的研發(fā)的顯著需求。理想的情況是，這些藥物可以靶向病毒生命周期中的不同階段，從而為聯(lián)合療法添加醫(yī)用藥品，并且表現(xiàn)出最低的毒性，而具有較低的生產(chǎn)成本。
此前，從Syzigium claviflorum分離了樺木酸和platanic acid作為抗-HIV成分。樺木酸和platanic acid表現(xiàn)出對H9淋巴細胞中HIV-1復(fù)制的抑制活性，具有的EC50值分別為1.4μM和6.5μM并且T.I.值分別為9.3和14。氫化樺木酸產(chǎn)生二氫樺木酸，它表現(xiàn)出適度更為有效的抗-HIV活性，具有的EC50值為0.9且T.I.值為14(Fujioka，T.等，《天然產(chǎn)物雜志》(J.Nat.Prod.)57243-247(1994))。
用一些取代的?；?，諸如3′，3′-二甲基戊二?；?′，3′-二甲基琥珀?；セ瘶迥舅岙a(chǎn)生具有增強活性的衍生物(Kashiwada，Y.等，《藥物化學(xué)雜志》(J.Med.Chem.)391016-1017(1996))。美國專利5,679,828中還描述了屬于有效抗-HIV劑的酰化的樺木酸和二氫樺木酸衍生物。
R＝H(樺木酸)美國專利5,468,888中披露了羽扇烷類的28-酰氨基衍生物，將其描述為具有對HIV-感染細胞的細胞保護作用。
日本專利申請JP 01 143,832中披露了用于抗癌領(lǐng)域的樺木腦及其3，28-二酯類。
(樺木腦)美國專利6,172,110中披露了發(fā)現(xiàn)樺木腦和二氫樺木腦衍生物具有有效的抗-HIV活性。
(樺木腦和二氫樺木腦衍生物)用琥珀酸酯化樺木腦的3位碳產(chǎn)生能夠抑制HIV-1活性的化合物(Pokrovskii，A.G.等，Gos.Nauchnyi Tsentr Virusol.Biotekhnol.″Vector″9485-491(2001))。
公布的國際申請WO 02/26761中披露了樺木腦及其類似物在治療真菌感染中的應(yīng)用。美國專利6,369,101中披露了別樺木腦(allobetulin)衍生物在治療皰疹病毒感染中的應(yīng)用。美國專利3,903,089中披露了熊果酸衍生物作為抗炎化合物的應(yīng)用。
對具有有效抗逆轉(zhuǎn)錄病毒活性，尤其是抗-HIV活性的化合物存在持續(xù)的需求，它們具有改善的生物分布特性和不同的作用方式。迫切需要這類化合物以便補充現(xiàn)存的抗-HIV療法中。還存在對局部涂布在陰道或其它內(nèi)膜以預(yù)防個體之間的HIV感染的安全和有效化合物的需求。
發(fā)明概述本發(fā)明的第一個方面涉及式I的新化合物 或其藥物上可接受的鹽或酯；其中A為如下式的稠合環(huán) 其中在式A中命名為x和y的環(huán)碳與式I中命名為x和y的環(huán)碳相同；R1為羧基烷?；?，其中烷酰基鏈可以可選地被一個或多個羥基或鹵素取代或可以被氮、硫或氧原子或其組合間斷；R2和R3獨立為氫、甲基、鹵素、羥基、羧基或-COOR17；R4為氫、甲基、鹵素或羥基；R5為羧基烷氧羰基、烷氧羰基、烷酰氧基甲基、羧基烷酰氧基甲基、烷氧基甲基、羧基烷氧基甲基、氨基羰基、烷氨基羰基、二烷氨基羰基、烷氧基烷氨基羰基、烷氧基烷氧基烷氨基羰基、烷氧羰基氨基烷氧基烷氨基羰基、烷氧羰基氨基烷氨基羰基、烷基羰基氨基烷氨基羰基、氨基烷氨基羰基、氨基烷氧基烷氨基羰基、一烷氨基烷氨基羰基、二烷氨基烷氨基羰基、雜環(huán)基羰基、雜環(huán)基烷氨基羰基、環(huán)烷氨基羰基、芳基氨基羰基、芳基烷氨基羰基、芳基羰基氨基烷氨基羰基或雜芳基氨基羰基，它們中的任意一個均可選地被一個或多個羥基或鹵素取代；或R5為羧基或羥甲基；或當R2或R3為羧基時，R5可以為甲基；R6為氫、甲基、羥基或鹵素；R7和R8獨立為氫或C1-6烷基；R9為CH2或CH3；R10為氫、羥基或甲基；R11為甲基、甲氧羰基、羧基烷氧羰基、烷酰氧基甲基、烷氧基甲基或羧基烷氧基甲基，它們中的任意一個均可選地被一個或多個羥基或鹵素取代；R12為氫或甲基；R13為氫或甲基；R14為氫或羥基；如果C12和C13形成單鍵，那么R15為氫；或如果C12和C13形成雙鍵，那么R15不存在；R16為氫或羥基；R17為烷基或羧基烷基，其中烷基鏈可以可選地被一個或多個羥基或鹵素取代或可以被氮、硫或氧原子或其組合間斷；且其中直虛線表示C12與C13或C20與C29之間的可選雙鍵；條件是當A為如下部分時 R1不能為戊二?；蜱牾；?，此時C12與C13之間存在雙鍵；
當A為(ii)且R11為甲基時，R1不能為琥珀?；?；當A為(iii)且R2、R3和R13各自為氫時，R1不能為琥珀酰基；以及條件是A(i)不能為 此時R2和R3均為甲基且C12與C13之間存在雙鍵。
在某些實施方案中，R1選自下列基團組成的組 本發(fā)明的第二個方面涉及藥物組合物，它包括一種或多種式I的化合物和藥物上可接受的載體或稀釋劑。一種或多種額外的藥物活性化合物也可以包括在這些組合物中。
式I的化合物用作抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥。因此，本發(fā)明提供了抑制動物細胞或組織中逆轉(zhuǎn)錄病毒感染的方法，包括給予有效抑制逆轉(zhuǎn)錄病毒用量的式I的化合物。某些實施方案涉及治療患有與逆轉(zhuǎn)錄病毒相關(guān)的疾病的患者的方法，包括對所述患者給予抑制逆轉(zhuǎn)錄病毒有效量的包括式I化合物的藥物組合物。
式I的三萜衍生物可以用于與一種或多種抗病毒藥的聯(lián)合療法中。因此，本發(fā)明提供了治療患有與逆轉(zhuǎn)錄病毒相關(guān)的疾病的患者的方法，包括對所述患者給予抑制逆轉(zhuǎn)錄病毒有效量的至少一種式I化合物與一種或多種抗病毒藥的組合。在某些實施方案中，所述的抗病毒藥在美國經(jīng)批準用于HIV-療法。本發(fā)明還涉及通過給予至少一種上述三萜衍生物治療感染了HIV-1的受試者的方法，可選地與已知抗-AIDS治療劑或免疫刺激劑中的任意一種或多種的組合來進行。
本發(fā)明還提供了預(yù)防個體之間HIV感染傳播的方法。特別地，本發(fā)明提供了預(yù)防HIV感染從HIV感染孕婦傳播給胎兒的方法，包括在妊娠期間或在分娩前、分娩時或分娩后即刻對所述的孕婦和/或所述的胎兒給予抑制逆轉(zhuǎn)錄病毒有效量的一種或多種式I的化合物。
此外，本發(fā)明提供了預(yù)防HIV感染在性交過程中傳播的方法，包括在性交前對陰道或其它粘膜施用抑制逆轉(zhuǎn)錄病毒有效量的局部用組合物，該組合物包括一種或多種式I的化合物。
此外，本發(fā)明涉及制備式I化合物的方法。
本發(fā)明的其它實施方案和優(yōu)點列在如下的描述中并且部分內(nèi)容從本說明書中顯而易見或可以通過實施本發(fā)明得知。通過特別在所附的權(quán)利要求書中指出的特征和組合可以實現(xiàn)和獲得本發(fā)明的實施方案和優(yōu)點。
應(yīng)理解上述一般描述和下列詳細描述均是典型的并且僅是解釋性的，并非用來限定本發(fā)明。
詳細描述本發(fā)明的化合物具有一般式I
或其藥物上可接受的鹽或酯；其中A為如下式的稠合環(huán) 其中在式A中命名為x和y的環(huán)碳與式I中命名為x和y的環(huán)碳相同；R1為羧基烷?；渲型轷；溈梢钥蛇x地被一個或多個羥基或鹵素取代或可以被氮、硫或氧原子或其組合間斷；R2和R3獨立為氫、甲基、鹵素、羥基、羧基或COOR17；R4為氫、甲基、鹵素或羥基；R5為羧基烷氧羰基、烷氧羰基、烷酰氧基甲基、羧基烷酰氧基甲基、烷氧基甲基或羧基烷氧基甲基，它們中的任意一個均可選地被一個或多個羥基或鹵素取代；或R5為羧基或羥甲基；或當R2或R3為羧基時，R5可以為甲基；R6為氫、甲基、羥基或鹵素；R7和R8獨立為氫或C1-6烷基；R9為CH2或CH3；R10為氫、羥基或甲基；R11為甲基、甲氧羰基、羧基烷氧羰基、烷酰氧基甲基、烷氧基甲基或羧基烷氧基甲基，它們中的任意一個均可選地被一個或多個羥基或鹵素取代；R12為氫或甲基；R13為氫或甲基；R14為氫或羥基；
如果C12和C13形成單鍵，那么R15為氫；或如果C12和C13形成雙鍵，那么R15不存在；R16為氫或羥基；R17為烷基或羧基烷基，其中烷基鏈可以可選地被一個或多個羥基或鹵素取代或可以被氮、硫或氧原子或其組合間斷；且其中直虛線表示C12與C13或C20與C29之間的可選雙鍵；條件是當A為如下部分時 如果C12與C13之間存在雙鍵，R1不能為戊二酰基或琥珀?；?；當A為(ii)且R11為甲基時，R1不能為琥珀?；划擜為(iii)且R2、R3和R13各自為氫時，R1不能為琥珀?；?；以及條件是當R2和R3均為甲基且C12與C13之間存在雙鍵，A(i)不能為 在某些實施方案中，R1為羧基(C2-10)烷基羰基或羧基(C2-10)烷氧基(C1-10)烷基羰基。在某些實施方案中，R1為羧基(C2-6)烷基羰基或羧基(C2-6)烷氧基(C1-6)烷基羰基。合適的R1基團選自下列基團組成的組
在某些實施方案中，R2和R3獨立為氫、甲基、鹵素或羥基。在某些實施方案中，R2和R3獨立為羧基。在某些實施方案中，R2和R3獨立為COOR17。
在某些實施方案中，R17為羧基(C2-10)烷基或羧基(C2-10)烷氧基(C1-10)烷基。在某些實施方案中，R17為羧基(C2-6)烷基或羧基(C2-6)烷氧基(C1-6)烷基。在某些實施方案中，R17選自下列基團組成的組
本發(fā)明在某些實施方案中，所述的化合物具有式II 其中R1、R4、R5、R6、R7、R8和R14如上述對式I所定義。在一個實施方案中，R6為β-甲基，R8為氫，R5為羥甲基且R1為3′，3′-二甲基戊二?；?、3′，3′-二甲基琥珀?；⑽於；蜱牾；?。在另一個實施方案中，R6為氫，R7和R8均為甲基，R5為羧基且R1為3′，3′-二甲基戊二?；?、3′，3′-二甲基琥珀?；?、戊二?；蜱牾；?。
在某些實施方案中，R5為羧基烷氧羰基、烷氧羰基、烷酰氧基甲基、羧基烷酰氧基甲基、烷氧基甲基、羧基烷氧基甲基、氨基羰基、烷氨基羰基、二烷氨基羰基、烷氧基烷氨基羰基、烷氧基烷氧基烷氨基羰基、烷氧羰基氨基烷氧基烷氨基羰基、烷氧羰基氨基烷氨基羰基、烷基羰基氨基烷氨基羰基、氨基烷氨基羰基、氨基烷氧基烷氨基羰基、一烷氨基烷氨基羰基、二烷氨基烷氨基羰基、雜環(huán)基羰基、雜環(huán)基烷氨基羰基、環(huán)烷氨基羰基、芳基氨基羰基、芳基烷氨基羰基、芳基羰基氨基烷氨基羰基或雜芳基氨基羰基，它們中的任意一個均可選地被一個或多個羥基或鹵素取代；或R5為羧基或羥甲基。在某些實施方案中，R5為羧基烷氧羰基、烷氧羰基、烷酰氧基甲基、羧基烷酰氧基甲基、烷氧基甲基、羧基烷氧基甲基。在某些實施方案中，R5選自羧基、羥甲基、-CO2(CH2)nCOOH、-CO2(CH2)nCH3、-CH2OC(O)(CH2)nCH3、-CH2OC(O)(CH2)nCOOH、-CH2O(CH2)nCH3和-CH2O(CH2)nCOOH組成的組。在某些實施方案中，R5選自下列基團組成的組
在某些實施方案中，R5選自下列基團組成的組 在某些實施方案中，R5為羥甲基。在某些實施方案中，R5為羧基。在某些實施方案中，n為0-20。在某些實施方案中，n為1-10。在某些實施方案中，n為2-8。在某些實施方案中，n為1-6。在某些實施方案中，n為2-6。
在某些實施方案中，所述的化合物具有式III
其中R1、R9、R10和R11如上述對式I所定義。在一個實施方案中，R1為3′，3′-二甲基戊二?；?′，3′-二甲基琥珀酰基、戊二酰基或琥珀?；?。
在某些實施方案中，R11為甲基、甲氧羰基、羧基烷氧羰基、烷酰氧基甲基、烷氧基甲基或羧基烷氧基甲基，它們中的任意一個均可選地被一個或多個羥基或鹵素取代。在某些實施方案中，R11選自甲基、-CO2(CH2)nCOOH、-CH2OC(O)(CH2)nCH3、-CH2O(CH2)nCH3和-CH2O(CH2)nCOOH組成的組。在某些實施方案中，n為0-20。在某些實施方案中，n為1-10。在某些實施方案中，n為2-8。在某些實施方案中，n為1-6。在某些實施方案中，n為2-6。在某些實施方案中，R11為甲基。在某些實施方案中，R11為甲氧羰基。在某些實施方案中，R11選自甲氧基甲基和乙氧基甲基組成的組。在某些實施方案中，在R11定義中的甲基可以被鹵素或羥基取代。
在某些實施方案中，所述的化合物具有式IV 其中R1、R2、R3、R4和R13如上述對式I所定義。在一個實施方案中，R1為3′，3′-二甲基戊二?；?′，3′-二甲基琥珀?；?、戊二?；蜱牾；Ｔ谝粋€實施方案中，R2和R3均為甲基。
在某些實施方案中，本發(fā)明所述的化合物具有式V
其中R1、R3、R5、R6、R7和R8如上述對式I所定義。在一個實施方案中，R6為氫，R7為甲基，且R8為甲基。在某些實施方案中，R6為甲基，R7為氫，且R8為甲基。在某些實施方案中，R3為羧基。在某些實施方案中，R3為COOR17，其中R17如上述對式I所定義。
在某些實施方案中，本發(fā)明所述的化合物具有式VI 其中R1和R5如上述對式I所定義。
可以使用式I范圍內(nèi)的任意三萜。按照本發(fā)明，在某些實施方案中，式I的化合物選自山楂醇、熊果酸、高根二醇、刺囊酸、齊墩果酸、蘇門樹脂酸、羽扇醇、二氫羽扇醇、樺木酸甲酯、二氫樺木酸甲酯、17-α-甲基-雄烷二醇、雄烷二醇、森林匙羹藤酸、α-乳香酸、β-乳香酸和4，4-二甲基-雄烷二醇的衍生物組成的組。
在某些實施方案中，本發(fā)明的化合物定義為式I，其中R2和R3均為甲基。在某些實施方案中，本發(fā)明的化合物定義為式I，其中R1為3′，3′-二甲基琥珀?；?。在某些實施方案中，本發(fā)明的化合物定義為式I，其中R1為琥珀?；?，即 按照本發(fā)明，在某些實施方案中，側(cè)鏈取代基的立體化學(xué)是重要的。在某些實施方案中，本發(fā)明的化合物定義為式I，其中A為(i)且R5位于β位上。在某些實施方案中，本發(fā)明的化合物定義為式I，其中A為(i)且R6位于β位上。在某些實施方案中，本發(fā)明的化合物定義為式I，其中A為(i)且R14位于α位上。在某些實施方案中，本發(fā)明的化合物定義為式I，其中A為(i)，R7為α-甲基，且R8為氫。在某些實施方案中，本發(fā)明的化合物定義為式I，其中A為(i)，R8為α-甲基，且R7為氫。在某些實施方案中，本發(fā)明的化合物定義為式I，其中A為(i)且R7和R8都為甲基。在某些實施方案中，本發(fā)明的化合物定義為式I，其中A為(ii)且R11位于β位上。
在某些實施方案中，3′，3′-二甲基琥珀?；挥贑3位上。在某些實施方案中，式II的化合物為3-O-(3′，3′-二甲基琥珀?；?山楂醇；3-O-(3′，3′-二甲基琥珀?；?高根二醇；3-O-(3′，3′-二甲基琥珀?；?刺囊酸；或3-O-(3′，3′-二甲基琥珀?；?蘇門樹脂酸。在某些實施方案中，式III的化合物為3-O-(3′，3′-二甲基琥珀?；?羽扇醇；3-O-(3′，3′-二甲基琥珀酰基)二氫羽扇醇；3-O-(3′，3′-二甲基琥珀?；?-17β-甲酯-樺木酸；或3-O-(3′，3′-二甲基琥珀?；?-17β-甲酯-二氫樺木酸。在某些實施方案中，式IV的化合物為3-O-(3′，3′-二甲基琥珀?；?-4，4-二甲基雄烷二醇；3-O-(3′，3-二甲基琥珀?；?-17α-甲基雄烷二醇；或3-O-(3′，3′-二甲基琥珀?；?雄烷二醇。在某些實施方案中，式V的化合物為3-O-(3′，3′-二甲基琥珀?；?-α-乳香酸；或3-O-(3′，3′-二甲基琥珀酰基)-β-乳香酸。在某些實施方案中，式VI的化合物為3-O-(3′，3′-二甲基琥珀?；?森林匙羹藤酸。
本發(fā)明化合物的烷基和含有烷基的基團可以為直鏈或支鏈烷基，優(yōu)選具有1-10個碳原子。在某些實施方案中，本發(fā)明化合物的烷基或含有烷基的基團可以被C3-7環(huán)烷基取代。在某些實施方案中，所述的環(huán)烷基可以包括，但不限于環(huán)丁基、環(huán)戊基或環(huán)己基。
此外，本發(fā)明范圍內(nèi)包括本發(fā)明化合物的無毒性的藥物上可接受的鹽?？梢栽谧罱K分離和純化化合物的過程中原位制備這些鹽，或可以通過單獨使純化的游離酸形式的化合物與合適的有機或無機堿反應(yīng)并且分離由此形成的鹽來制備這些鹽。它們可以包括基于堿金屬和堿土金屬的陽離子，諸如鈉、鋰、鉀、鈣、鎂等，以及無毒性的銨、季銨和胺陽離子，包括，但不限于銨、四甲基銨、四乙基銨、甲胺、二甲胺、三甲胺、乙胺、N-甲基葡糖胺等。
此外，本發(fā)明范圍內(nèi)包括本發(fā)明化合物的無毒性的藥物上可接受的酯類。酯基優(yōu)選具有在生理條件下相對易于水解的類型。本發(fā)明化合物的藥物上可接受的酯類的實例包括C1-6烷基酯類，其中所述的烷基為直鏈或支鏈?？山邮艿孽ヮ愡€包括C5-7環(huán)烷基酯類以及芳基烷基酯類，諸如，但不限于芐基酯。優(yōu)選C1-4烷基酯類。在某些實施方案中，所述的酯類選自下列酯類組成的組烷基羧酸酯類，諸如乙酸酯類；和一-或二烷基磷酸酯類，諸如甲基磷酸酯或二甲基磷酸酯?？梢园凑粘Ｒ?guī)方法制備本發(fā)明化合物的酯類。
式I、II、III、IV、V和VI范圍內(nèi)的某些化合物為稱作″前體藥物″的衍生物。術(shù)語″前體藥物″指的是在體內(nèi)通過酶或化學(xué)過程，例如通過在血液中水解，快速轉(zhuǎn)化成上述式的母體化合物的化合物。下列文獻中提供了詳細討論Higuchi，T.和V.Stella《作為新遞藥系統(tǒng)的前體藥物》(Pro-drugs as Novel Delivery Systems)，Vol.14，A.C.S.Symposium Series；和《藥物設(shè)計中的生物可逆性載體》(BioreversibleCarriers in Drug Design)，Ed.Edward B.Roche，AmericanPharmaceutical Association，Pergamon Press，1987。有用的前體藥物可以為式I、II、III、IV、V和VI的酯類。在某些前體藥物的實施方案中，低級烷基通過合適的酸被一個或多個羥基或鹵素基團取代。合適的酸包括例如羧酸類、磺酸類、磷酸類或其低級烷基酯類和膦酸或其低級烷基酯類。例如，合適的羧酸類包括烷基羧酸類，諸如乙酸；芳基羧酸類和芳烷基羧酸類。合適的磺酸類包括烷基磺酸類、芳基磺酸類和芳基烷基磺酸類、合適的磷酸酯類和膦酸酯類為甲酯類或乙酯類。
在某些實施方案中，在C3′位上帶有二甲基或氧的C3?；梢詾樽罹呋钚缘幕衔?。這種觀察結(jié)果提示這些類型的酰基對抗-HIV活性的增強可能是重要的。
本發(fā)明還涉及通過給予上述三萜衍生物中的至少一種治療感染了HIV-1的受試者的方法，可選地與已知的抗-AIDS治療劑或免疫刺激劑中的任意一種或多種的組合來進行。
基于本文提供的描述、教導(dǎo)和啟示，本發(fā)明的其它特征、優(yōu)點、實施方案、方面和目的對相關(guān)領(lǐng)域技術(shù)人員而言顯而易見。
本發(fā)明的類似物可以具有抗逆轉(zhuǎn)錄病毒活性，由此提供了用于可選地與額外的藥物活性組分一起治療逆轉(zhuǎn)錄病毒感染的合適的化合物和組合物，所述的額外藥物活性組分諸如為抗逆轉(zhuǎn)錄病毒、抗-HIV和/或免疫刺激化合物或抗病毒抗體或其片段。
所謂″抗逆轉(zhuǎn)錄病毒活性″或″抗-HIV活性″是指抑制下列情況中的至少一種的能力(1)病毒原-DNA整合入宿主細胞基因組；(2)逆轉(zhuǎn)錄病毒與細胞附著；(3)病毒進入細胞；(4)允許病毒復(fù)制的細胞代謝；(5)抑制病毒的胞間傳播；(6)病毒抗原的合成和/或細胞表達；(7)病毒發(fā)芽或成熟；(8)病毒編碼的酶活性(諸如逆轉(zhuǎn)錄酶、整合酶和蛋白酶)；和/或(9)任何已知的逆轉(zhuǎn)錄或HIV致病作用，諸如，例如免疫抑制。因此，傾向于抑制任何這些機制的任何活性均為″抗逆轉(zhuǎn)錄病毒活性″或″抗-HIV活性″。
本發(fā)明的三萜衍生物可以單獨或與本領(lǐng)域中公知的其它治療方式組合用于治療逆轉(zhuǎn)錄病毒(例如HIV)感染。這類治療方式可以包括使用藥物化療，所述的藥物諸如，但不限于下列藥物中的至少一種AZT、3TC、ddC、d4T、ddI、替諾福韋、阿巴卡韋、奈韋拉平、地拉韋啶、恩曲他濱、依法韋侖、沙奎那韋、利托那韋、茚地那韋、那非那韋、洛匹那韋、安潑那韋、膦沙那韋和atazanavir或任何其它抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥或抗體彼此的組合，或與基于生物的治療劑聯(lián)合，諸如gp41-衍生的肽類enfuvirtide(Fuzeon；Timeris-Roche)和T-1249(Trimeris)或可溶性CD4、對CD4的抗體和CD4或抗-CD4的綴合物，或作為本文另外提供的。
本發(fā)明的三萜衍生物可以用于處理血液制品，諸如那些維持在血庫中的血液制品。目前將天然血源用于測試對HIV的抗體。然而，該試驗仍然不完善并且產(chǎn)生陰性試驗結(jié)果的樣品可能仍然含有HIV病毒。使用本發(fā)明的三萜衍生物處理血液和血液制品可以通過降低或消除可能未被檢測到的任何逆轉(zhuǎn)錄病毒活性而添加額外的安全范圍。
此外，本發(fā)明的三萜衍生物可以用作預(yù)防個體之間HIV感染傳播的預(yù)防劑。例如，可以通過口服或通過注射對在妊娠期間或在分娩前、分娩時或分娩后即刻對HIV感染的孕婦和/或胎兒給予所述的衍生物，以便降低新生兒感染的可能性。此外，可以在分娩前即刻經(jīng)陰道給予所述衍生物而防止嬰兒通過產(chǎn)道過程中的感染。此外，可以在性交過程中使用本發(fā)明的衍生物以防止HIV傳播，通過在性交前對陰道或其它粘膜施用抑制逆轉(zhuǎn)錄病毒有效量的局部組合物來進行，該組合物包括式I、II、III、IV、V或VI中的一種或多種化合物。例如，本發(fā)明的衍生物可以用于防止感染的男性將HIV傳播給未被感染的女性或反之亦然。
藥物組合物本發(fā)明的藥物組合物可以包括至少一種三萜衍生物。本發(fā)明的藥物組合物還可以進一步包括其它抗病毒藥，諸如但不限于AZT(齊多夫定，RETROVIR，GlaxoSmithKline)、3TC(拉米夫定，EPIVIR，GlaxoSmithKline)、AZT+3TC、(COMBIVIR，GlaxoSmithKline)、AZT+3TC+阿巴卡韋(abacvir)(TRIZIVIR，GlaxoSmithKline)、ddI(去羥肌苷，VIDEX，Bristol-Myers Squibb)、ddC(扎西他濱，HIVID，Hoffmann-LaRoche)、D4T(司他夫定，ZERIT，Bristol-Myers Squibb)、阿巴卡韋(ZIAGEN，GlaxoSmithKline)、奈韋拉平(VIRAMUNE，Boehringher Ingelheim)、地拉韋啶(Pfizer)、依法韋侖(SUSTIVA，DuPont Pharmaceuticals)、替諾福韋(VIREAD，GileadSciences)、沙奎那韋(INVIRASE，F(xiàn)ORTOVASE，Hoffmann-La Roche)、利托那韋(NORVIR，Abbott Laboratories)、茚地那韋(CRIXIVAN，Merck和Company)、那非那韋(VIRACEPT，Pfizer)、安潑那韋(AGENERASE，GlaxoSmithKline)、阿德福韋(PREVEON，HEPSERA，Gilead Sciences)、atazanavir(REYATAZ，Bristol-Myers Squibb)、膦沙那韋(LEXIVA，GlaxoSmithKline)和羥基脲(HYDREA，Bristol-Meyers Squibb)或任意其它抗逆轉(zhuǎn)錄病毒藥或抗體彼此的組合或與基于生物的治療劑相關(guān)，諸如gp41-衍生的肽類enfuvirtide(FUZEON；Roche和Timeris)和T-1249或可溶性CD4、對CD4的抗體和CD4或抗-CD4的綴合物，或作為本文額外提供的。
最適合于與本發(fā)明三萜衍生物一起使用的其它合適的抗病毒藥包括，但不限于兩性霉素B(FUNGIZONE)；聚肌胞(錯配的RNA；Hemis pherx Biopharma)；BETASERON(β-干擾素，Chiron)；丁羥甲苯；Carrosyn(polymannoacetate)；澳粟精胺；Contracan(硬脂酸衍生物)；Creme Pharmatex(含有苯扎氯銨)；5-未被取代的齊多夫定衍生物；噴昔洛韋(DENAVIR，Novartis)；泛昔洛韋(FAMVIR，Novartis)；阿昔洛韋(ZOVIRAX，GlaxoSmithKline)；cytofovir(VISTIDE，Gilead)；更昔洛韋(CYTOVENE，Hoffman LaRoche)；硫酸葡聚糖；D-青霉胺(3-巰基-D-纈氨酸)；FOSCARNET(磷酸三鈉甲酸鹽；AstraZeneca)；夫西地酸；甘草酸(甘草的成分)；HPA-23(銨-21-鎢氧基-9-銻酸鹽)；ORNIDYL(依氟鳥氨酸，Aventis)；壬苯醇醚；羥乙基磺酸噴他脒(PENTAM-300)；肽T(辛肽序列，Peninsula Laboratories)；苯妥英(Pfizer)；INH或異煙肼；利巴韋林(VIRAZOLE；ValeantPharmaceuticals)；利福布汀(rifabutin)、利福布汀(ansamycin)(MYCOBUTIN，Pfizer)；CD4-IgG2(Progenics Pharmaceuticals)或其它含CD4或基于CD4的分子；三甲曲沙(Medimmune)；蘇拉明及其類似物(Bayer)；和WELLFERON(α-干擾素，GlaxoSmithKline)。
本發(fā)明的藥物組合物還可以進一步包括免疫調(diào)節(jié)劑。按照本發(fā)明，可以與本發(fā)明三萜衍生物可選地聯(lián)用的合適的免疫調(diào)節(jié)劑可以包括，但不限于ABPP(Bropririmine)；抗-人干擾素-α-抗體；抗壞血酸及其衍生物；干擾素-β；腈美克松；環(huán)孢霉素；西咪替??；CL-246，738；集落刺激因子，包括GM-CSF；二硝基氯苯；HE2000(Hollis-EdenPharmaceuticals)；干擾素-γ；葡聚糖；超免疫γ-球蛋白(Bayer)；immuthiol(二乙基硫代氨基甲酸鈉)；白細胞介素-1(Hoffmann-LaRoche，Amgen)、白細胞介素-2(IL-2)(Chiron)；異丙肌苷(inosine pranobex)；云芝多糖；LC-9018(Yakult)；香菇多糖(Yamanouchi)；LF-1695；甲硫腦啡肽；Minophagen C；胞壁酰三肽、MTP-PE；納曲酮(Barr Laboratories)；RNA免疫調(diào)節(jié)劑；REMUNE(ImmuneResponse Corporation)；RETICULOSE(Advanced Viral ResearchCorporation)；shosaikoto；人參；胸腺體液因子；胸腺噴?。恍叵匐囊蜃?；胸腺肽1(ZADAXIN，SciClone)；胸腺刺激素；TNF(腫瘤壞死因子，Genentech)；和維生素制劑。
在某些實施方案中，本發(fā)明的動物受試者為哺乳動物。所謂″哺乳動物″是指屬于哺乳類的個體。本發(fā)明特別用于治療人類患者。
術(shù)語″治療″指的是對受試者給予三萜衍生物，目的可以包括預(yù)防、改善或治愈與逆轉(zhuǎn)錄病毒相關(guān)的病理情況。
將提供的藥物看作彼此的″組合″，條件是將它們同時提供給患者或條件是諸如每種藥物給藥之間的時間使得生物活性重疊。
在某些實施方案中，至少一種三萜衍生物包括單一藥物組合物。
本發(fā)明用于給藥的藥物組合物可以包括藥物上可接受形式的本發(fā)明的至少一種三萜衍生物可選地與藥物上可接受的載體的組合?？梢酝ㄟ^實現(xiàn)所述目的的任意方式給予這些組合物。治療逆轉(zhuǎn)錄病毒病理情況的臨床領(lǐng)域的技術(shù)人員易于確定本發(fā)明三萜衍生物的給藥量和方案。
例如，可以通過非腸道，諸如皮下、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、腹膜內(nèi)、透皮或口含途經(jīng)給藥。另一方面或同時，可以通過口服途經(jīng)給藥。給藥劑量取決于接受者年齡、健康情況和體重、前期治療或同時治療的類型和所需作用的性質(zhì)。
本發(fā)明范圍內(nèi)的組合物包括含有有效獲得所述目的用量的至少一種本發(fā)明的三萜衍生物的所有組合物。盡管個體需要可變，但是每種成分的有效量的最佳范圍的確定屬于本領(lǐng)域技術(shù)人員的范圍。典型劑量包括約0.1mg/kg-約100mg/kg體重。在某些實施方案中，所述的劑量包括約1mg/kg-約100mg/kg體重的活性組分。在某些實施方案中，所述的劑量包括約2.5mg/kg-約50mg/kg體重。在某些實施方案中，所述的劑量包括約5mg/kg-約25mg/kg體重。
治療性給藥還可以包括在前、同時、隨后或輔助給予至少一種本發(fā)明額外的三萜衍生物或其它治療劑，諸如抗病毒藥或免疫刺激劑。在這類手段中，第二種藥物的劑量可以與第一種治療劑相同或不同。在某些實施方案中，可以按照推薦的每種藥物用量隔日給予所述藥物。
本發(fā)明化合物的給藥還可以可選地包括使用免疫系統(tǒng)強化劑或免疫調(diào)節(jié)劑的預(yù)先、同時、隨后或輔助療法。除藥物活性化合物外，本發(fā)明的藥物組合物還可以含有合適的藥物上可接受的載體，包括有利于將所述活性化合物加工成可以在藥物上使用的制劑的賦形劑和助劑。在某些實施方案中，所述的制劑，特別是可以通過口服給藥并且可以用于上述類型的給藥的那些制劑，諸如片劑、錠劑和膠囊以及還有可以通過直腸給藥的制劑，諸如栓劑，以及通過注射或口服給藥用的合適的溶液，含有約1％-約99％，優(yōu)選約20％-約75％的活性化合物與賦形劑。
按照自身公知的方式，例如通過常規(guī)的混合、制粒、制錠、溶解或凍干法制備本發(fā)明的藥物制劑。因此，可以通過下列步驟獲得口服應(yīng)用的藥物制劑將所述的活性化合物與固體賦形劑混合，可選地研磨所得混合物，并且如果需要或必要，在加入合適的助劑后加工顆?；旌衔?，從而得到片劑或錠芯。
合適的賦形劑為例如，填充劑，諸如糖，例如乳糖或蔗糖、甘露糖醇或山梨醇；纖維素制品和/或磷酸鈣，諸如磷酸三鈣或磷酸氫鈣；以及粘合劑，諸如，例如使用玉米淀粉、小麥淀粉、稻米淀粉、馬鈴薯淀粉、明膠、西黃蓍膠、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉和/或聚乙烯吡咯烷酮的淀粉糊。如果需要，可以加入崩解劑，諸如上述淀粉且還有羧甲基淀粉、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、瓊脂或藻酸或其鹽，諸如藻酸鈣。助劑，尤其是調(diào)節(jié)流動性的試劑和潤滑劑例如二氧化硅、滑石粉、硬脂酸或其鹽，諸如硬脂酸鎂或硬脂酸鈣；和/或聚乙二醇。如果需要，給錠芯涂布耐胃液的合適的包衣層。為了這一目的，可以使用濃糖溶液，它可以可選地含有阿拉伯樹膠、滑石粉、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇和/或二氧化鈦、涂層溶液和合適的有機溶劑或溶劑混合物。為了生產(chǎn)耐胃液的包衣層，使用合適的纖維素制品溶液，諸如鄰苯二甲酸乙酰纖維素或鄰苯二甲酸羥丙基甲基纖維素。例如，可以將染料或色素加入到片劑或錠劑包衣層中，以便鑒定或用于表征活性化合物劑量的組合。
可以通過口服使用的其它藥物制劑包括由明膠制成的推入配合膠囊以及由明膠和增塑劑，諸如甘油或山梨醇制成的軟密封膠囊。所述的推入配合膠囊可以含有顆粒形式的活性化合物，該顆粒中可以混合有填充劑，諸如乳糖；粘合劑，諸如淀粉；和/或潤滑劑，諸如滑石粉或硬脂酸鎂；和可選的穩(wěn)定劑。在使用軟膠囊的某些實施方案中，將活性混合物溶于或懸浮于合適的液體中，諸如脂肪油或液體石蠟。此外，可以加入穩(wěn)定劑。
可以通過直腸使用的可能的藥物制劑包括例如由活性化合物與栓劑基質(zhì)組合組成的栓劑。合適的栓劑基質(zhì)例如為天然或合成的甘油三酯類或鏈烷烴類。此外，還能夠使用由活性化合物與基質(zhì)組合組成的直腸用膠囊。可能的基質(zhì)材料包括例如液體甘油三酯類、聚乙二醇類或鏈烷烴類。
用于非腸道給藥的合適的制劑包括水溶性形式的活性化合物，例如水溶性鹽的水溶液。此外，可以給予作為合適的油注射混懸液形式的活性化合物的混懸液。合適的脂溶性溶劑或載體包括脂肪油，諸如芝麻油；或合成脂肪酸酯類，諸如油酸乙酯或甘油三酯類。含水注射混懸液可以含有增加混懸液粘度的物質(zhì)，包括例如羧甲基纖維素、山梨醇和/或葡聚糖。該混懸液還可以可選地含有穩(wěn)定劑。
可以配制用于腸道、非腸道或局部給藥的本發(fā)明全身給藥用制劑。實際上，可以同時使用所有三種類型的制劑以便實現(xiàn)活性組分的全身給藥。
用于口服給藥的合適的制劑包括硬膠囊或軟膠囊；錠劑；丸劑；片劑，包括包衣片；酏劑；混懸液；糖漿劑或吸入劑及其控釋劑型。
除為口服給藥配制的那些劑型外，固體劑型還包括直腸栓劑。
用于預(yù)防分娩或性交過程中個體之間HIV感染的預(yù)防用局部組合物包括式I、II、III、IV、V和VI中的一種或多種化合物和至少一種藥物上可接受的局部用載體或稀釋劑。例如，局部用組合物可以為軟膏劑、凝膠、洗劑、糊劑、膠凍劑、噴霧劑、泡沫或海綿形式。式I、II、III、IV、V和VI在預(yù)防用局部制劑中的劑量一般低于約1,000毫克且在某些實施方案中約0.01毫克-約100毫克。局部用制劑可以包括其它預(yù)防性組分。所述的載體和稀釋劑應(yīng)是可接受的，其含義是與制劑的其它組分相容并且對接受者無害。
局部預(yù)防用制劑包括那些適合于陰道、直腸或局部給藥的制劑。如果合適，這些制劑可以便利地以分散的劑量單位存在并且可以通過制藥領(lǐng)域任意公知的方法制備。所有這類方法均包括將活性劑與液體載體、凝膠或細粉固體載體混合，且然后如果必要，使產(chǎn)物形成所需制劑。
適合于陰道給藥的預(yù)防用制劑可以作為陰道栓劑、棉塞、霜劑、凝膠、糊劑、膠凍劑、泡沫或噴霧劑或水或油混懸液、溶液或乳劑(液體制劑)存在，它們除含有所述活性劑外，還含有本領(lǐng)域公知的合適載體。液體制劑可以含有常用添加劑，諸如懸浮劑；乳化劑；非水載體，包括食用油；或防腐劑。這些制劑用于預(yù)防HIV的性傳播和嬰兒通過產(chǎn)道過程中的感染。在一個實例中，可以在性交前或分娩前即刻進行陰道給藥。
在某些實施方案中，含有固體載體的用于直腸或陰道給藥的預(yù)防用制劑作為單位劑量栓劑提供。合適的載體包括可可脂和其它本領(lǐng)域中常用的材料。例如，可以通過混合式I、II、III、IV、V和VI的一種或多種化合物與一種或多種軟化或熔化的載體，隨后冷卻并且在塑膜中成形而形成栓劑。
本發(fā)明的預(yù)防用制劑還可以為使用含水或非水基質(zhì)配制的滴劑形式，所述的基質(zhì)包括一種或多種分散劑、增溶劑或懸浮劑。液體噴霧劑可以從加壓藥物包裝中遞送。
本發(fā)明的預(yù)防用制劑可以適合于實現(xiàn)持續(xù)遞送。此外，所述的預(yù)防用制劑可以包括其它活性劑，諸如殺精子劑、抗微生物劑和抗病毒藥。
當與生物可降解的緩釋載體混合時，還可以以植入物形式給予本發(fā)明的三萜衍生物?；蛘?，可以將本發(fā)明的三萜衍生物配制成用于持續(xù)釋放活性組分的透皮貼劑。
用于局部給藥的合適的制劑包括霜劑、凝膠、膠凍劑、膠漿劑、糊劑和軟膏劑。合適的可注射溶液包括靜脈內(nèi)、皮下和肌內(nèi)可注射溶液。或者，可以以輸注液和作為鼻部吸入劑或噴霧劑的形式給藥所述的三萜衍生物。
可以使用本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的方法制備本發(fā)明的化合物。各種三萜骨架可以獲自商品來源?？梢园凑张c如方案1中所示修飾樺木腦為典型的方法類似的方式制備本發(fā)明附圖
I的化合物?？梢栽?5℃下將樺木腦或二氫樺木腦與6倍的合適的酸酐在有4-(二甲氨基)吡啶(DMAP)存在下的無水吡啶中加熱過夜。CH2ORz相當于如上述對A(ii)所定義的R11。當薄層色譜法(TLC)顯示原料消耗完全時，用EtOAc稀釋該反應(yīng)體系并且用10％HCl溶液洗滌。然后用MgSO4干燥EtOAc層并且進行柱色譜。
方案1 可以按照與如方案2中所示修飾樺木腦為典型的方法類似的方式制備本發(fā)明附圖I的化合物。方案2描述了化合物的合成途經(jīng)，其中R1和R11為取代或未被取代的羧基?；?。CH2ORz相當于如上述對A(ii)所定義的R11。
方案2
方案3描述了通過使用固相有機合成來合成本發(fā)明化合物的另外可供選擇的方法(Pathak，A.，等《組合化學(xué)與高流通量篩選》(Combinatorial Chem.and High Throughput Screening)5，241-248(2002))。簡單的說，三萜骨架可以通過在R5、R11或R13(由Ra表示)上形成酯或酰胺鍵與樹脂連接?？梢允褂迷跍睾蜅l件下使得化合物可以裂解的任何樹脂，例如2-氯三苯甲基氯樹脂或Sieber酰胺樹脂。如果需要，可以引入氨基酸作為三萜與樹脂之間的間隔基。一旦三萜固定在樹脂支架上，就可以通過添加酸形式的所需R1取代基(由Rb表示)而在C3上引入所需的衍生化。
方案3 可以如方案4中所示制備本發(fā)明的三萜衍生物。用三苯甲基醚部分保護樺木腦(1)的28-羥基產(chǎn)生樺木腦28-O-三苯甲基醚(2)，在回流狀態(tài)下和有二甲氨基吡啶存在下進一步用合適的二羧酸處理其在吡啶中的溶液。最終通過在CH2Cl2-EtOH中與對甲苯磺酸吡啶鎓一起回流除去28-保護基而得到所需的3-O-?；鶚迥灸X衍生物。
方案4 樺木腦(1) 樺木腦28-O-三苯甲基醚(2) 3-O-?；鶚迥灸X28-O-三苯甲基醚類 3-O-?；鶚迥灸X衍生物可以按照如下建立的方案進行HIV-1抑制的生物學(xué)評價(Montefiori，D.C.，等，《臨床微生物學(xué)》(Clin.Microbiol.)26，231-235(1988))。將人T-細胞系MT-2維持在含有完全培養(yǎng)基(含有補充了L-谷氨酰胺的1O％胎牛血清的RPMI 1640，在5％CO2和37℃下)的連續(xù)培養(yǎng)物中。首先將測試樣品以10mg/ml的濃度溶于二甲亞砜以產(chǎn)生標準儲備溶液，將其稀釋入組織培養(yǎng)基而得到操作儲備溶液。通常將下列藥物濃度用于篩選100、20、4和0.8＜g/ml。就發(fā)現(xiàn)為活性的活性劑而言，再制備稀釋液用于隨后的測試，以便可以測定精確的EC50值(如下定義)。制備測試樣品并且向每個樣品孔中加入90＜1的含有3×105個細胞/ml的MT-2細胞和45＜1的病毒接種物(HIV-1 IIIIB分離物)的培養(yǎng)基，其中所述的病毒接種物的濃度是在感染后(PI)5天時導(dǎo)致殺傷80％細胞靶所必需的濃度。還準備了僅含有病毒和細胞(無藥物)和僅含有細胞(無病毒或藥物)的對照孔。制備與第一組相同的第二組樣品并且在不含病毒的相同條件下加入到細胞中(模擬感染)以用于毒性測定(如下定義的IC50)。此外，還在每次實驗過程中將AZT作為陽性藥物對照檢測。在PI第5天，通過使用XTT法測定細胞存活率來確定病毒誘導(dǎo)的細胞殺傷率。通過XTT，使用模擬感染的樣品測定化合物毒性。如果測試樣品具有抑制能力并且無毒性，那么按照下列術(shù)語報導(dǎo)其作用IC50，對50％的模擬感染的MT-2細胞具有毒性的測試樣品濃度；EC50，能夠抑制HIV復(fù)制達50％的測試樣品的濃度；和治療指數(shù)(TI)，IC50與EC50之比。
下列實施例為對本發(fā)明的方法和組合物的舉例說明性解釋，并不用來起限定作用。通常可以遇到并且對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言顯而易見的對條件和參數(shù)種類的其它合適的修改和適應(yīng)性改變屬于本發(fā)明的實質(zhì)和范圍。
本領(lǐng)域技術(shù)人員將會意識到盡管已經(jīng)解釋和描述了具體的實施方案，但是可以在不脫離本發(fā)明實質(zhì)和范圍的情況下進行各種修改和改變。
對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，根據(jù)對本說明書的考慮和從本文披露的本發(fā)明的實施過程中可以顯而易見地得出其它實施方案。僅將本說明書和實施例視為典型的實例，本發(fā)明確切的范圍和實質(zhì)由所附的權(quán)利要求表示。將本文引述的所有公開文獻、專利申請和專利完整地引入作為參考。
權(quán)利要求
1.式I的化合物 或其藥物上可接受的鹽或酯；其中A為如下式的稠合環(huán) 或 其中在式A中命名為x和y的環(huán)碳與式I中命名為x和y的環(huán)碳相同；R1選自下列基團組成的組 和 R2和R3獨立為氫、甲基、鹵素、羥基、羧基或-COOR17；R4為氫、甲基、鹵素或羥基；R5為羧基烷氧羰基、烷氧羰基、烷酰氧基甲基、羧基烷酰氧基甲基、烷氧基甲基、羧基烷氧基甲基、氨基羰基、烷氨基羰基、二烷氨基羰基、烷氧基烷氨基羰基、烷氧基烷氧基烷氨基羰基、烷氧羰基氨基烷氧基烷氨基羰基、烷氧羰基氨基烷氨基羰基、烷基羰基氨基烷氨基羰基、氨基烷氨基羰基、氨基烷氧基烷氨基羰基、一烷氨基烷氨基羰基、二烷氨基烷氨基羰基、雜環(huán)基羰基、雜環(huán)基烷氨基羰基、環(huán)烷氨基羰基、芳基氨基羰基、芳基烷氨基羰基、芳基羰基氨基烷氨基羰基或雜芳基氨基羰基，它們中的任意一個均可選地被一個或多個羥基或鹵素取代；或R5為羧基或羥甲基；或當R2或R3為羧基時，R5可以為甲基；R6為氫、甲基、羥基或鹵素；R7和R8獨立為氫或C1-6烷基；R9為CH2或CH3；R10為氫、羥基或甲基；R11為甲基、甲氧羰基、羧基烷氧羰基、烷酰氧基甲基、烷氧基甲基或羧基烷氧基甲基，它們中的任意一個均可選地被一個或多個羥基或鹵素取代；R12為氫或甲基；R13為氫或甲基；R14為氫或羥基；如果C12和C13形成單鍵，那么R15為氫；或如果C12和C13形成雙鍵，那么R15不存在；R16為氫或羥基；R17為烷基或羧基烷基，其中烷基鏈可以可選地被一個或多個羥基或鹵素取代或可以被氮、硫或氧原子或其組合間斷；且其中直虛線表示C12與C13或C20與C29之間的可選雙鍵；條件是當A為如下部分時 如果C12與C13之間存在雙鍵，R1不能為戊二?；蜱牾；划擜為(ii)且R11為甲基時，R1不能為琥珀?；?；當A為(iii)且R2、R3和R13各自為氫時，R1不能為琥珀?；灰约皸l件是當R2和R3均為甲基且C12與C13之間存在雙鍵時，A(i)不能為 或
2.權(quán)利要求1所述的化合物，其中R2和R3均為甲基。
3.權(quán)利要求1所述的化合物，其中R1為3′，3′-二甲基琥珀?；?。
4.權(quán)利要求1所述的化合物，其中A為(i)且R5位于β位上。
5.權(quán)利要求1所述的化合物，其中A為(i)且R6位于β位上。
6.權(quán)利要求1所述的化合物，其中A為(i)且R14位于α位上。
7.權(quán)利要求1所述的化合物，其中A為(i)，R7為α-甲基且R8為氫。
8.權(quán)利要求1所述的化合物，其中A為(i)，R8為α-甲基且R7為氫。
9.權(quán)利要求1所述的化合物，其中A為(i)且R7和R8均為甲基。
10.權(quán)利要求1所述的化合物，其中A為(ii)且R11位于β位上。
11.權(quán)利要求1的化合物，具有式II 其中R1、R4、R5、R6、R7、R8和R14如權(quán)利要求1中所定義。
12.權(quán)利要求11的化合物，其中R6為β-甲基，R8為氫，R5為羥甲基且R1為3′，3′-二甲基戊二?；?′，3′-二甲基琥珀酰基、戊二?；蜱牾；?br> 13.權(quán)利要求11的化合物，其中R5為羥甲基、-CO2(CH2)nCOOH或-CO2(CH2)nCH3且n為0-6。
14.權(quán)利要求11的化合物，其中R5為-COC(O)(CH2)nCH3或-COC(O)(CH2)nCOOH且n為0-6。
15.權(quán)利要求11的化合物，其中R5為-CO(CH2)nCH3或-CO(CH2)nCOOH且n為0-6。
16.權(quán)利要求11所述的化合物，為下列化合物之一3-O-(3′，3′-二甲基琥珀?；?山楂醇；3-O-(3′，3′-二甲基琥珀?；?高根二醇；3-O-(3′，3′-二甲基琥珀?；?刺囊酸；和3-O-(3′，3′-二甲基琥珀酰基)蘇門樹脂酸。
17.權(quán)利要求1的化合物，具有式III 其中R1、R9、R10和R11如權(quán)利要求1中所定義。
18.權(quán)利要求17的化合物，其中R1為3′，3′-二甲基戊二?；?′，3′-二甲基琥珀酰基、戊二?；蜱牾；?。
19.權(quán)利要求17的化合物，其中R11為甲基、羧基烷氧羰基、烷酰氧基甲基、烷氧基甲基或羧基烷氧基甲基。
20.權(quán)利要求17的化合物，其中R11為甲基或-CO2(CH2)nCOOH且n為0-6。
21.權(quán)利要求17的化合物，其中R11為-COC(O)(CH2)nCH3且n為0-6。
22.權(quán)利要求17的化合物，其中R11為-CO(CH2)nCH3或-CO(CH2)nCOOH且n為0-6。
23.權(quán)利要求17所述的化合物，為下列化合物之一3-O-(3′，3′-二甲基琥珀?；?羽扇醇；3-O-(3′，3′-二甲基琥珀?；?二氫羽扇醇；3-O-(3′，3′-二甲基琥珀酰基)-17β-甲酯-樺木酸；和3-O-(3′，3′-二甲基琥珀?；?-17β-甲酯-二氫樺木酸.
24.權(quán)利要求1的化合物，具有式IV 其中R1、R2、R3、R4和R13如權(quán)利要求1中所定義。
25.權(quán)利要求24的化合物，其中R1為3′，3′-二甲基戊二酰基、3′，3′-二甲基琥珀?；⑽於；蜱牾；?br> 26.權(quán)利要求24的化合物，其中R1為3′，3′-二甲基戊二?；?、3′，3′-二甲基琥珀?；⑽於；蜱牾；襌2和R3均為甲基。
27.權(quán)利要求24所述的化合物，為下列化合物之一3-O-(3′，3′-二甲基琥珀?；?-4，4-二甲基雄烷二醇；3-O-(3′，3′-二甲基琥珀?；?-17α-甲基雄烷二醇；和3-O-(3′，3′-二甲基琥珀?；?雄烷二醇。
28.權(quán)利要求1的化合物，具有式V 其中R1、R3、R5、R6、R7和R8如權(quán)利要求1中所定義。
29.權(quán)利要求28的化合物，其中R6為氫，R7為甲基且R8為甲基。
30.權(quán)利要求28的化合物，其中R6為甲基，R7為氫且R8為甲基。
31.權(quán)利要求28所述的化合物，為下列化合物之一3-O-(3′，3′-二甲基琥珀?；?-α-乳香酸；和3-O-(3′，3′-二甲基琥珀?；?-β-乳香酸。
32.權(quán)利要求1的化合物，具有式VI 其中R1和R5如權(quán)利要求1中所定義。
33.權(quán)利要求32的化合物，為3-O-(3′，3′-二甲基琥珀?；?森林匙羹藤酸。
34.藥物組合物，包括權(quán)利要求1的化合物或其藥物上可接受的酯或鹽和藥物上可接受的載體。
35.權(quán)利要求34的藥物組合物，進一步包括抗病毒藥或免疫刺激劑。
36.權(quán)利要求35的藥物組合物，其中所述的抗病毒藥選自由下列抗病毒藥中的一種或多種組成的組齊多夫定、拉米夫定、扎西他濱、司他夫定、去羥肌苷、替諾福韋、阿巴卡韋、奈韋拉平、地拉韋啶、恩曲他濱、依法韋侖、沙奎那韋、利托那韋、茚地那韋、那非那韋、洛匹那韋、安潑那韋、膦沙那韋、atazanavir、enfuvirtide、羥基脲、白細胞介素-2、γ球蛋白、金剛烷胺、胍羥基苯并咪唑、干擾素-α、干擾素-β、干擾素-γ、縮氨基硫脲、甲吲噻蹤、利福平、利巴韋林、嘧啶類似物、嘌呤類似物、膦甲酸、膦酰乙酸、阿昔洛韋、二脫氧核苷和更昔洛韋。
37.用于抑制動物細胞或組織中逆轉(zhuǎn)錄病毒感染的方法，包括給予有效抑制逆轉(zhuǎn)錄病毒用量的權(quán)利要求34的藥物組合物。
38.權(quán)利要求37所述的方法，其中給予提供約0.1-約100mg/kg體重的用量范圍的所述化合物的所述組合物。
39.權(quán)利要求38所述的方法，其中給予提供約5-約25mg/kg體重的用量范圍的所述化合物的所述組合物。
40.權(quán)利要求39所述的方法，其中所述的動物為人。
41.藥物組合物，包括權(quán)利要求11、17、24、28或32的化合物或其藥物上可接受的酯或鹽和藥物上可接受的載體。
42.權(quán)利要求41的藥物組合物，進一步包括選自抗病毒藥或免疫刺激劑的藥物。
43.權(quán)利要求42的藥物組合物，其中所述的抗病毒藥選自由下列抗病毒藥中的一種或多種組成的組齊多夫定、拉米夫定、扎西他濱、司他夫定、去羥肌苷、替諾福韋、阿巴卡韋、奈韋拉平、地拉韋啶、恩曲他濱、依法韋侖、沙奎那韋、利托那韋、茚地那韋、那非那韋、洛匹那韋、安潑那韋、膦沙那韋、atazanavir、enfuvirtide、羥基脲、白細胞介素-2、γ球蛋白，金剛烷胺，胍羥基苯并咪唑，干擾素-α、干擾素-β、干擾素-γ、縮氨基硫脲、甲吲噻蹤、利福平、利巴韋林、嘧啶類似物、嘌呤類似物、膦甲酸、膦酰乙酸、阿昔洛韋、二脫氧核苷和更昔洛韋。
44.用于抑制動物細胞或組織中逆轉(zhuǎn)錄病毒感染的方法，包括給予有效抑制逆轉(zhuǎn)錄病毒用量的權(quán)利要求43的藥物組合物。
45.權(quán)利要求44所述的方法，其中給予提供約0.1-約100mg/kg體重的用量范圍的所述化合物的所述組合物。
46.權(quán)利要求45所述的方法，其中給予提供約5-約25mg/kg體重的用量范圍的所述化合物的所述組合物。
47.權(quán)利要求46所述的方法，其中所述的動物為人。
48.通過使細胞接觸權(quán)利要求1、11、17、24、28或32的化合物來抑制逆轉(zhuǎn)錄病毒感染的方法。
49.預(yù)防HIV感染從HIV感染孕婦傳播給胎兒的方法，包括在妊娠期間或在分娩前、分娩時或分娩后即刻對所述的孕婦和/或所述的胎兒給予抑制逆轉(zhuǎn)錄病毒有效量的權(quán)利要求1、11、17、24、28或32的化合物。
50.預(yù)防HIV感染在性交過程中傳播的方法，包括在性交前對陰道或其它粘膜施用抑制逆轉(zhuǎn)錄病毒有效量的權(quán)利要求1、11、17、24、28或32中一種或多種化合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及新的三萜類合成衍生物和這類衍生物作為藥物的應(yīng)用。在某些實施方案中，本發(fā)明涉及本發(fā)明的三萜類衍生物在抑制逆轉(zhuǎn)錄病毒感染中的應(yīng)用。
文檔編號C07C69/00GK1871251SQ200480030801
公開日2006年11月29日 申請日期2004年9月27日 優(yōu)先權(quán)日2003年9月26日
發(fā)明者C·T·維爾德, G·N·洛賓森, M·艾士頓, R·湯姆斯 申請人:帕納克斯醫(yī)藥公司