專利名稱：提高動物體重一致性和增加畜體產(chǎn)量的方法
相關(guān)申請的交叉參考本申請要求2003年12月5日提交的美國臨時申請序列號60/527,392的優(yōu)先權(quán)。
關(guān)于聯(lián)邦政府資助的研究或開發(fā)的聲明本發(fā)明在以下部門給予的美國政府的贊助下進(jìn)行中西部家禽協(xié)會144-LP69。美國享有本發(fā)明的某些權(quán)利。
背景技術(shù)：
本發(fā)明涉及調(diào)節(jié)胃腸炎癥相關(guān)的脂質(zhì)代謝物水平，以提高一組動物的動物體重一致性和增加動物畜體產(chǎn)量(carcass yield)的方法。
體重一致性對進(jìn)行屠宰的產(chǎn)肉型動物是重要的。體重一致性水平高有助于屠宰過程的自動化并降低屠宰前分揀階段和屠宰階段的肉加工成本。一起飼養(yǎng)的動物也常常互相競爭空間、食物和水。動物之間較一致的體重能減少競爭并有助于標(biāo)準(zhǔn)化組內(nèi)生長。
體重一致性對于為產(chǎn)蛋而飼養(yǎng)的動物群也是重要的(如產(chǎn)蛋雞和鴨、火雞和種雞)。常常在估計的產(chǎn)蛋期(如當(dāng)整組動物達(dá)到45％產(chǎn)蛋時)將峰值飼料允許量提供給一整組動物。由于產(chǎn)蛋齡與體重良好相關(guān)，一組動物體重一致性較差意味著當(dāng)提供峰值允許量時，重的早熟動物接近峰值蛋產(chǎn)量，而較小的未成熟動物仍未產(chǎn)蛋。結(jié)果是，重的早熟動物飼喂不足，較小的未成熟動物飼喂過多。提高體重一致性將最大程度減少此問題。
增加動物畜體產(chǎn)量對于動物肉類工業(yè)也是重要的。用美國的禽類工業(yè)作為例子，每年飼養(yǎng)約八十億肉雞。因此，即使畜體產(chǎn)量稍有增加可產(chǎn)生顯著的經(jīng)濟(jì)效益。
降低前列腺素或白三烯前體的生物利用度以及因此降低動物胃腸炎癥能增加動物生長并提高飼養(yǎng)效率。參見美國專利號6,213,930和6,383,485，將其全文納入本文作為參考。然而，仍不了解或容易地預(yù)測前列腺素或白三烯前體的生物利用度降低是否可提高動物體重一致性或增加動物畜體產(chǎn)量。
前列腺素和白三烯是參與胃腸炎癥的脂質(zhì)代謝物。脂質(zhì)代謝物異前列腺烷也可參與胃腸炎癥。在動物中，前列腺素、白三烯和異前列腺烷可由花生四烯酸產(chǎn)生。由磷脂酶A2(PLA2)從膜磷脂的sn-2位上釋放花生四烯酸(以花生四烯酸鹽的形式)，然后由脂加氧酶或環(huán)加氧酶轉(zhuǎn)變?yōu)樯锘钚缘那傲邢偎睾桶兹┑那绑w。由于動物飼料一般含有高水平的可容易地轉(zhuǎn)變?yōu)榛ㄉ南┧岬膩営退?，用這種飼料飼喂的動物具有高水平的易于轉(zhuǎn)變?yōu)榍傲邢偎睾桶兹┑那傲邢偎睾桶兹┣绑w?；ㄉ南┧?以花生四烯酸鹽釋放)也可無酶自養(yǎng)化或酶氧化為異前列腺烷，尤其當(dāng)脂加氧酶和環(huán)加氧酶的活性被阻斷時。
前列腺素在胃腸道損傷期間引起炎癥效應(yīng)，如結(jié)腸炎和潰瘍，并參與血管舒張、血管收縮和腸或支氣管平滑肌的刺激。前列腺素發(fā)現(xiàn)于炎性滲出物中，可誘導(dǎo)發(fā)熱和紅斑。白三烯引起平滑肌如腸平滑肌的收縮、吸引白細(xì)胞和提高血管通透性。異前列腺烷對選擇組織具有血管收縮作用。
發(fā)明概述本文公開了通過降低前列腺素、白三烯或異前列腺烷脂質(zhì)前體在動物中的生物利用度可提高動物體重一致性、畜體產(chǎn)量或二者。雖然本領(lǐng)域技術(shù)人員已知降低前列腺素或白三烯脂質(zhì)前體的生物利用度可增加動物生長，令人驚訝的是，降低這些前體的生物利用度可使一組動物的體重分布變窄。而且，令人驚訝的是，降低前列腺素或白三烯脂質(zhì)前體的生物利用度引起的畜體重量增加百分?jǐn)?shù)比整體重量增加百分?jǐn)?shù)高。
在一個方面，本發(fā)明涉及提高一組動物中動物體重一致性的方法。該方法包括將足以提高體重一致性的量的可降低前列腺素或白三烯脂質(zhì)前體在動物中的生物利用度的物質(zhì)給予動物。
在另一方面，本發(fā)明涉及增加動物畜體產(chǎn)量的方法。該方法包括將足以增加畜體產(chǎn)量的量的可降低前列腺素或白三烯脂質(zhì)前體在動物中的生物利用度的物質(zhì)給予動物。
在優(yōu)選實施方式中，上述方法中所用物質(zhì)是抗PLA2抗體。
本發(fā)明的一個目的是提供提高一組動物的動物體重一致性的方法。
本發(fā)明的另一目的是提供增加動物畜體產(chǎn)量的方法。
從以下說明書中可明顯看出本發(fā)明的其它目的、優(yōu)點和特征。
附圖
簡要說明無。
發(fā)明詳述一組動物的體重一致性涉及該組動物體重相對于平均體重的分布。體重一致性可由x-軸為體重和y-軸為該組內(nèi)動物數(shù)目或百分?jǐn)?shù)的體重分布曲線描述。體重一致性可由平均體重的變動、平均體重的標(biāo)準(zhǔn)差、平均體重的標(biāo)準(zhǔn)誤差、平均體重的變動系數(shù)和本領(lǐng)域技術(shù)人員熟悉的其它統(tǒng)計參數(shù)衡量。即使兩組的體重分布相同，由于平均體重較大的一組動物的變動、標(biāo)準(zhǔn)差和標(biāo)準(zhǔn)誤差大于平均體重較小的一組動物，所以工業(yè)上采用變動系數(shù)作為工業(yè)標(biāo)準(zhǔn)來衡量體重一致性。為了確定變動系數(shù)，用平均體重標(biāo)準(zhǔn)化標(biāo)準(zhǔn)差[(標(biāo)準(zhǔn)差÷平均體重)×100]。雖然為了本發(fā)明目的，平均體重的變動、標(biāo)準(zhǔn)差、標(biāo)準(zhǔn)誤差和變動系數(shù)中任何參數(shù)的降低均被認(rèn)為是體重一致性提高，但變動系數(shù)是評價體重一致性的優(yōu)選參數(shù)?？赏ㄟ^計算用體重一致性改進(jìn)劑處理的一組動物的平均體重變動系數(shù)，并將其與處理前同一組動物的平均體重變動系數(shù)相比，與以下實施例1所述對照組動物的平均體重變動系數(shù)相比，或與本領(lǐng)域技術(shù)人員認(rèn)為是合適參比的本領(lǐng)域可用的任何建立的變動系數(shù)相比，評價體重一致性提高。優(yōu)選地，變動系數(shù)降低至少0.5，更優(yōu)選至少0.8。
本文將術(shù)語“畜體產(chǎn)量”定義為畜體重量除以屠宰前活動物體重或在任何身體部分被分離之前的死動物體重。本文所用術(shù)語畜體指去除皮、毛(如果有)、頭、尾(如果有)、足或四肢，和去除至少部分或全部內(nèi)臟后，并任選地放血和/或清除某些脂肪組織(如乳房)后的死亡動物體。本文注意到根據(jù)動物種類和當(dāng)?shù)貙嵺`，確切去除的身體部分可能不同，也可去除其它組織如生殖器。本文公開的方法可用所有動物實踐。該方法優(yōu)選實踐于禽類動物、哺乳動物或魚。優(yōu)選的禽類動物包括雞、鴨、火雞、雉雞、鵪鶉和鵝。優(yōu)選的哺乳動物包括豬、牛、綿羊和山羊。
認(rèn)為前列腺素和白三烯能引起胃腸炎癥，增加組織損傷并對動物，尤其是禽類和哺乳動物將飼料轉(zhuǎn)化為體重的能力造成負(fù)面影響。雖然炎癥對胃腸道中的正常消化和吸收造成負(fù)面影響，炎癥也激活需要營養(yǎng)供應(yīng)的宿主免疫防御系統(tǒng)，營養(yǎng)由身體通過異化降解從骨骼肌獲得。通過降低前列腺素和白三烯水平，并從而降低胃腸炎癥，減弱了可將變動引入體重的一個體重影響因素，這導(dǎo)致體重一致性提高。不受理論的束縛，本發(fā)明者認(rèn)為由前列腺素和白三烯水平降低引起的畜體產(chǎn)量增加至少部分由骨骼肌降解減少造成。
本發(fā)明者確定，通過降低可用的花生四烯酸鹽，能降低前列腺素和白三烯水平。因此，在一個實施方式中，通過降低花生四烯酸鹽的生物利用度，優(yōu)選通過防止花生四烯酸鹽從膜磷脂釋放來實踐本發(fā)明。優(yōu)選地，這可通過降低或消除PLA2的活性實現(xiàn)，PLA2是清除來自膜磷脂的花生四烯酸鹽的酶?？捎每筆LA2抗體降低PLA2活性，認(rèn)為該抗體(不旨在限制該申請)與PLA2酶復(fù)合，從而干擾其磷脂酶活性。
可用本領(lǐng)域已知的各種方法制備或給予多克隆或單克隆抗PLA2抗體，以產(chǎn)生抗體或抗體樣因子，包括但不限于，產(chǎn)生轉(zhuǎn)基因植物或產(chǎn)奶動物。合適的抗體可以(但不必)分離自非抗體物質(zhì)。如果在并列體內(nèi)試驗中相對于未處理對照抗體能夠降低PLA2活性，則認(rèn)為該抗體適用于本方法。
本領(lǐng)域技術(shù)人員可用其它方法來降低PLA2酶活，如與合適運載體聯(lián)合給予影響PLA2活性的非抗體藥物的方法。本領(lǐng)域技術(shù)人員也將理解，可通過將改變活性的變化引入動物中編碼PLA2酶的遺傳物質(zhì)，或通過干擾PLA2的轉(zhuǎn)錄或翻譯來實踐本方法。此物質(zhì)也可限制前列腺素或白三烯的不同前體的有效性。
可通過注射或口服遞送給予此物質(zhì)，優(yōu)選與藥物或營養(yǎng)添加物遞送中常用類型的合適運載體聯(lián)合給予。注射方法包括但不限于皮下、腹膜內(nèi)、肌肉內(nèi)或靜脈內(nèi)。優(yōu)選的口服給藥可包括但不限于以片劑或粉劑形式給藥。最優(yōu)選地，可通過與飼料混合或涂覆在飼料顆粒上直接飼喂該物質(zhì)，如美國專利號5,725,873中所述，全文納入本文作為參考。
在優(yōu)選方法中，如下所述制備抗體。需要用產(chǎn)生其抗體的肽或蛋白如PLA2免疫生產(chǎn)動物，以使生產(chǎn)動物產(chǎn)生所述肽或蛋白的抗體。含有該抗體的物質(zhì)獲自所述生產(chǎn)動物。如果需要，可進(jìn)一步純化該抗體，或可不經(jīng)進(jìn)一步制備用于動物飼料。
Polson，A.，M.B.von Wechmar和M.H.van Regenmortel，“從免疫的母雞的蛋黃中分離病毒IgY抗體”(Isolation of Viral IgY Antibodies from Yolks of ImmunizedHens)Immunological Communications 9475-493(1980)(全文納入本文作為參考)的方法可用于產(chǎn)生蛋黃抗體的制劑?？捎肞LA2接種產(chǎn)蛋雞。優(yōu)選與雞PLA2接種聯(lián)合給予合適的佐劑，以加強(qiáng)免疫。用于此目的的佐劑是油包水乳化佐劑如完全弗氏佐劑。PLA2使雞產(chǎn)生抗-PLA2抗體，該抗體被動轉(zhuǎn)移到該雞所產(chǎn)蛋的蛋黃中。
可收集含有抗PLA2抗體的蛋黃或全蛋，勻漿形成乳液。得到的乳液可干燥形成含有抗PLA2抗體的粉末。然后，可以適合給藥途徑的方式配制該粉末，然后用本領(lǐng)域已知方法給予所需動物。該制劑優(yōu)選通過口服給予，最優(yōu)選作為動物食物添加物給予。
給出以下實施例是為了進(jìn)一步說明本發(fā)明。本發(fā)明不受實施例所列具體細(xì)節(jié)的限制。
實施例1喂給抗PLA2抗體對體重一致性的影響材料和方法隨機(jī)分配一日齡的RossXRoss雄雞，接受抗PLA2抗體食物或?qū)φ帐澄?。每欄圈養(yǎng)5只雞，在層架式雞籠中每個處理組5-10欄。如下述實施例2所述產(chǎn)生蛋黃抗PLA2抗體。將含有抗-PLA2抗體的蛋黃粉混入雞混合飼料，劑量為體重的0.03％-0.24％。無限制地提供飼料和水。在第1天和第22天記錄體重?？偣策M(jìn)行16次獨立試驗，各試驗有1-6個比較組(抗PLA2抗體食物組和對照食物組)。計算各對照組和抗PLA2抗體組的變動系數(shù)。用成對T檢驗(一尾)比較對照組和抗PLA2抗體組的變動系數(shù)。
結(jié)果正如在試驗開始時從隨機(jī)分配的雞中所料，第一天對照組和抗PLA2抗體組平均體重的變動系數(shù)相同(數(shù)據(jù)未顯示)。如表1所示第22天的數(shù)據(jù)證明用抗PLA2抗體喂給小雞可降低平均體重的變動系數(shù)，從而提高體重一致性。
表1
成對T檢驗P值0.088*變動系數(shù)。
實施例2喂給抗PLA2抗體對畜體產(chǎn)量的影響材料和方法蛋黃抗體的產(chǎn)生給300只產(chǎn)蛋雞注射PLA2以產(chǎn)生蛋黃抗體。通過將等體積的抗原溶液(3mg/ml)與弗氏佐劑(Sigma，St.Louis，MO)乳化制備抗原。給各只雞肌內(nèi)注射總共1ml的乳化PLA2(兩條大腿和兩側(cè)胸脯各注射0.25ml接種物)。弗氏完全佐劑儀用在第一次接種中，之后的注射中使用弗氏不完全佐劑。第二次接種在第一次接種一周后進(jìn)行，后續(xù)接種相隔兩個月。
每天檢查家禽的發(fā)病率和死亡率。也每天記錄蛋產(chǎn)量。在第一次接種后第21天開始收集接種PLA2的雞的蛋。然后打碎蛋，將液蛋與封裝化合物混合，然后用食品級干燥器噴霧干燥。
肉雞產(chǎn)出試驗用于該試驗的家禽是購自Pine Manor(Goshen，IN)的Cockerel肉雞。前13天以4欄/處理和225只/欄(共16欄)孵化小雞，然后在總共28欄(10’×15’)中飼養(yǎng)雞，各欄約125只。雞用0.1％、0.2％或0.4％抗PLA2蛋抗體粉(含有封裝材料)的混合飼料或?qū)φ栈旌巷暳巷曃?5天，以達(dá)到上市重量。每天檢查雞以去除死雞。無限制地提供飼料和水。在改變食物以及試驗的開始和結(jié)束時稱得飼料重量。雞每周稱重，在試驗結(jié)束時加工得到畜體產(chǎn)量(畜體重量(無內(nèi)臟、頸、脂肪墊)除以屠宰前動物重量)。用單向ANOVA分析數(shù)據(jù)。
結(jié)果如下表2所示，用含有0.1％、0.2％或0.4％抗PLA2蛋抗體粉的食物喂養(yǎng)的雞的畜體產(chǎn)量比用對照食物喂養(yǎng)的雞高?？筆LA2抗體的作用具有高度顯著性(p＜0.0002)。線性回歸分析顯示出抗PLA2抗體劑量和畜體產(chǎn)量增加之間高度顯著的線性關(guān)系(p＜0.0001)。所有對照和處理組中計算的總SEM是0.4％。該試驗的總死亡率是3.3％。也從試驗中剔除了4.7％健康受損和/或可能影響畜群中其它雞的性能的雞。
表2
本發(fā)明不受上述實施例的限制，而將所有這些改變和變動包括在所附權(quán)利要求書的范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種提高靶動物組體重一致性的方法，所述方法包括給予所述靶動物組足以提高體重一致性的量的物質(zhì)的步驟，所述物質(zhì)可降低前列腺素或白三烯脂質(zhì)前體在動物中的生物利用度。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述前列腺素或白三烯脂質(zhì)前體是花生四烯酸。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述物質(zhì)能防止脂質(zhì)前體從磷脂釋放。
4.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述物質(zhì)包含抗磷脂酶A2(抗PLA2)抗體。
5.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，通過選自注射和口服遞送的方法給予所述物質(zhì)。
6.如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，通過注射方法給予所述物質(zhì)，所述注射方法選自皮下注射、腹膜內(nèi)注射、肌肉內(nèi)注射和靜脈內(nèi)注射。
7.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，將所述物質(zhì)與飼料或食物混合。
8.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述動物選自禽類和哺乳動物。
9.如權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，所述禽類選自雞、火雞、鴨、雉雞、鵝和鵪鶉。
10.如權(quán)利要求8所述的方法，其特征在于，所述哺乳動物選自豬、牛、綿羊和山羊。
11.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述動物是魚。
12.如權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，給予所述抗體的步驟包括用包含抗PLA2抗體的蛋制品飼喂動物的步驟。
13.一種增加靶動物畜體產(chǎn)量的方法，所述方法包括給予所述靶動物組足以增加畜體產(chǎn)量的量的物質(zhì)的步驟，所述物質(zhì)可降低前列腺素或白三烯脂質(zhì)前體在靶動物中的生物利用度。
14.如權(quán)利要求13所述的方法，其特征在于，所述前列腺素或白三烯脂質(zhì)前體是花生四烯酸。
15.如權(quán)利要求13所述的方法，其特征在于，所述物質(zhì)能防止脂質(zhì)前體從磷脂釋放。
16.如權(quán)利要求13所述的方法，其特征在于，所述物質(zhì)包含抗磷脂酶A2(抗PLA2)抗體。
17.如權(quán)利要求13所述的方法，其特征在于，通過選自注射和口服遞送的方法給予所述物質(zhì)。
18.如權(quán)利要求17所述的方法，其特征在于，通過注射方法給予所述物質(zhì)，所述注射方法選自皮下注射、腹膜內(nèi)注射、肌肉內(nèi)注射和靜脈內(nèi)注射。
19.如權(quán)利要求13所述的方法，其特征在于，將所述物質(zhì)與飼料或食物混合。
20.如權(quán)利要求13所述的方法，其特征在于，所述動物選自禽類和哺乳動物。
21.如權(quán)利要求20所述的方法，其特征在于，所述禽類選自雞、火雞、鴨、雉雞、鵝和鵪鶉。
22.如權(quán)利要求20所述的方法，其特征在于，所述哺乳動物選自豬、牛、綿羊和山羊。
23.如權(quán)利要求13所述的方法，其特征在于，所述動物是魚。
24.如權(quán)利要求16所述的方法，其特征在于，給予所述抗體的步驟包括用包含抗PLA2抗體的蛋制品飼喂動物的步驟。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種提高動物體重一致性或增加動物畜體產(chǎn)量的方法。該方法包括將一種物質(zhì)給予一只或一組動物，其中所述物質(zhì)可降低前列腺素或白三烯脂質(zhì)前體的生物利用度。在優(yōu)選實施方式中，所用物質(zhì)是抗PLA
文檔編號C07K16/40GK1905809SQ200480040163
公開日2007年1月31日 申請日期2004年11月23日 優(yōu)先權(quán)日2003年12月5日
發(fā)明者M·E·庫克, M·揚, K·羅伯遜 申請人:威斯康星校友研究基金會