專利名稱：用生物細胞制得含核酸的營養(yǎng)液和核酸原料的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種制得核酸營養(yǎng)液、核酸原料的方法，特別是利用對撞式高壓水刀切割法、化學方法從生物細胞中制得含核酸的營養(yǎng)液和核酸原料的方法。
中國發(fā)明專利公開了一種申請?zhí)枮?6115417.9，名稱叫從天然食品中制取核酸原料的方法，它以天然食品包括小豆、綠豆、蠶豆、豌豆、高糧米、玉米、小米、大麥、小麥以及水果為原料。將其研磨成80目以上粉狀物或糊狀物，通過勻質(zhì)、細胞裂解在物料中加入含有0.1-0.25M的氯化鈉(Nacl)溶液稀釋，再在稀釋液中加入堿，調(diào)整PH值，然后在90℃-100℃的條件下勻質(zhì)、裂解、再將裂解液加入酸，調(diào)PH值，然后離心獲得含核酸的上清液。再經(jīng)過純化，干燥獲得核酸原料，其不足是在細胞裂解過程中，需大量的氯化鈉溶液、堿、酸，且細胞裂解時間長，通常需要40-60分鐘，其生產(chǎn)成本高，有害液體的排放還會污染環(huán)境。
本發(fā)明的目的在于提供一種對撞式高壓水刀切割法，從生物細胞中制得含核酸的營養(yǎng)液和核酸原料的方法，其工藝簡單，生產(chǎn)周期短，原料來源廣泛，生產(chǎn)成本低。
本發(fā)明的目的可以通過以下措施來實現(xiàn)一種以對撞式高壓水刀切割的工藝，用生物細胞制得含核酸的營養(yǎng)液和核酸原料的方法，主要包括如下工藝步驟一.原料及初處理
取生物原料如植物的桔桿、葉、果實，含水果、黃豆、綠豆、黑豆、赤小豆、豇豆、小豆、蠶豆、豌豆、大米、豆粕、玉米、小米、大麥、小麥、高梁米、洋玉、洋蔥；再如動物豬、牛、羊、魚的肌肉組織；又如微生物類酵母菌；將其研磨成80-120目漿狀液。
二.所得漿狀液，輸入高壓水刀，經(jīng)高壓水刀的噴口噴出，與相對應的另一支高壓水刀噴出的漿狀液作直線對撞切割。漿液中的原料微粒以高壓水刀內(nèi)高壓水流為載體，用兩支高壓水刀噴出的高壓態(tài)的漿狀液流的對撞切割而產(chǎn)生高能效應，通過高壓水刀噴口噴出的漿狀液流量和壓力的調(diào)整得到最佳的對撞切割效應。直接對生物細胞作機械切割，使生物細胞膜、核裂解。
三.將含生物細胞膜、核裂解的漿狀液，再輸入對撞式高壓水刀進行第二次、第三次機械切割，使生物細胞膜、核裂解后釋放出的D.N.A(脫氧核糖核酸)，R.N.A(核糖核酸)的長鏈得到充分的切割，而獲得含有核酸、核苷酸、核苷的漿狀液。
四.含有核酸、核苷酸、核苷的漿狀液通過靜置、沉淀、離心后獲得的上清液即是含核酸、核苷酸、核苷的營養(yǎng)液，再通過高溫消毒，即可進入灌裝線，灌裝。實現(xiàn)純天然無化學物質(zhì)殘留的核酸營養(yǎng)液，不需氯化鈉(Nacl)、堿、酸等物質(zhì)的消耗，實現(xiàn)污染零排放。
五.核酸提取液的純化取含核酸的營養(yǎng)液以1∶7-15的比例用飽和硫酸胺混合稀釋，離心10-20分鐘，去除蛋白質(zhì)，將氯化鈉加入進已經(jīng)去除蛋白質(zhì)的含核酸的上清液中，使含核酸的上清液中氯化鈉含量達到3M-6M，再離心10-20分鐘，得到沉淀核酸，在已沉淀的核酸中加蒸餾水稀釋、其兩者的比例1∶1-2，然后用生物膜真空抽濾除去氯化鈉，將去除氯化鈉的核酸液進行干燥，制得核酸原料。
六.將含核酸的營養(yǎng)液用壓濾法，收集核酸。把含核酸的營養(yǎng)液溫度控制在55℃-90℃，用壓迫過濾的方法，并在壓濾過程中加入清水助濾，將液體核酸擠壓出來，溶入等電點罐中沉淀，此時把溫度控制在3℃-16℃之間，并加以攪拌，再加入3M-6M的硫酸，獲得分離液，此時分離液的PH值應控制在2-3之間，當攪拌至出現(xiàn)絮狀核酸時，停止攪拌，靜止保溫，再調(diào)等電點靜置5小時以上，絮狀固體與液體自然分離，去除上清液，而獲得濕核酸，再把1-4倍于濕核酸體積的高濃度酒精，加入濕核酸中攪拌10-30分鐘后靜置，酒精與核酸分離后，放出酒精，將酒精清洗后的濕核酸干燥后獲得純核酸原料。
本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比具有如下特點1.用研磨的物理方法將生物材料研磨成含微粒的漿液狀，該漿液中的微粒以水作為載體，再輸入對撞式高壓水刀切割，經(jīng)對撞式高壓切割水刀噴口，高壓噴出，并直線對撞于另一支高壓切割水刀噴口噴出的含生物材料微粒的漿狀液，從而對生物細胞進行高能的機械對撞切割，再通過第二次、第三次的高壓對撞切割使生物細胞裂解后釋放出的D.N.A、R.N.A長鏈得到進一步的高能機械切割，從而獲得含核酸、核苷酸、核苷的營養(yǎng)液，其生產(chǎn)工藝簡單、純天然、無污染物殘留，不需要氯化鈉、堿、酸材料的消耗，生產(chǎn)成本顯著下降，實現(xiàn)零排放污染。
2.在核酸原料純化過程中，不添加有害的化學試劑，進行抽提、透析，因此不會污染環(huán)境。
3.原料來源廣泛，其副產(chǎn)物分離渣可作為飼料利用，無丟棄物，利用率100％。
實施例含核酸、核苷酸、核苷營養(yǎng)液的制取取綠豆50Kg，將其洗凈去雜，加清水550Kg浸泡，研磨成80-120目漿狀液，把漿狀液輸入高壓切割水刀噴出，與另一支高壓切割水刀噴出的漿狀液進行直線對撞切割，通過對高壓切割水刀噴口噴出的漿液流量和壓力的調(diào)整得到最佳切割效應，獲得細胞膜、核已裂解的漿狀液。再將漿狀液做第二次、第三次高壓對撞切割，使細胞釋放出的D.N.A(脫氧核糖核酸)，R.N.A(核糖核酸)的長鏈得到進一步的高能機械切割，而獲得含核酸、核苷酸、核苷的漿狀液，再經(jīng)靜置、沉淀、分離后所得的上清液即為含核酸、核苷酸、核苷的營養(yǎng)液，經(jīng)高溫滅菌、分裝。對其檢測所得結(jié)果如下無化學成份核酸(含核苷酸、核苷) 2.86g/100mlD.N.A∶R.N.A 1∶10蛋白質(zhì) 3.0％鋅(Zn) 4.1mg/Kg錳(Mn) 1.31mg/Kg磷(P)3.34mg/Kg鐵(Fe) 8.48mg/Kg鎂(Mg) 24.65mg/Kg。
權(quán)利要求
1.以對撞式高壓水刀切割法，用生物細胞制得含核酸的營養(yǎng)液和核酸原料的方法，其特征在于A.原料及初處理取天然植物如植物桔桿、植物葉片、植物果實，如水果、豆類、谷物類，蔬菜類如洋玉、洋蔥，動物如豬、牛、羊、魚的肌肉，微生物類如酵母菌。清洗去雜，研磨成80-120目的漿狀液。B.將漿狀液輸入高壓切割水刀，經(jīng)高壓水刀的噴口噴出與相對應的另一支高壓切割水刀噴出的漿狀液作直線對撞切割。通過對高壓切割水刀噴口噴出的液體流量和壓力的調(diào)整，得到最佳的對撞切割效應，漿液中的原料微粒以高壓水刀內(nèi)高壓水流為載體，通過兩支高壓水刀噴出的高壓態(tài)的漿狀液流的直線對撞而產(chǎn)生高能效應，直接對生物細胞作機械切割，使生物細胞膜、核裂解。C.將含生物細胞膜、核裂解的漿狀液再輸入對撞式高壓切割水刀進行第二次、第三次機械切割，使細胞膜、核裂解后釋放出的D.N.A；R.N.A的長鏈得到充分的切割而獲得含有核酸、核苷酸、核苷的漿狀液。D.把所得的漿狀液通過靜置、沉淀、離心后所得的上清液即是含核酸、核苷酸、核苷的營養(yǎng)液，通過高溫消毒，即可灌裝，實現(xiàn)純天然，無化學物質(zhì)殘留，不使用氯化鈉、堿、酸。生產(chǎn)成本顯著下降，實現(xiàn)零污染排放。
2.核酸提取液的純化根據(jù)權(quán)利要求1所述制取核酸原料的方法取含核酸的營養(yǎng)液以1∶7-15的比例用飽和硫酸胺混合稀釋，離心10-20分鐘，去除蛋白質(zhì)，將氯化鈉加入進已經(jīng)去除蛋白質(zhì)的含核酸的上清液中，使含核酸的上清液中氯化鈉含量達到3M-6M，再離心10-20分鐘，得到沉淀核酸，在已沉淀的核酸中加蒸餾水稀釋、其兩者的比例1∶1-2，然后用生物膜真空抽濾除去氯化鈉，將去除氯化鈉的核酸液進行干燥，制得核酸原料。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述制取核酸原料的方法將含核酸的營養(yǎng)液用壓濾法，收集核酸。把含核酸的營養(yǎng)液溫度控制在55℃-90℃，用壓迫過濾的方法，并在壓濾過程中加入清水助濾，將液體核酸擠壓出來，溶入等電點罐中沉淀，此時把溫度控制在3℃-16℃之間，并加以攪拌，再加入3M-6M的硫酸，獲得分離液，此時分離液的PH值應控制在2-3之間，當攪拌至出現(xiàn)絮狀核酸時，停止攪拌，靜止保溫，再調(diào)等電點靜置5小時以上，絮狀固體與液體自然分離，去除上清液，而獲得濕核酸，再把1-4倍于濕核酸體積的高濃度酒精，加入濕核酸中攪拌10-30分鐘后靜置，酒精與核酸分離后，放出酒精，將酒精清洗后的濕核酸干燥后獲得純核酸原料。
全文摘要
以對撞式高壓水刀切割工藝，用生物細胞制取含核酸、核苷酸、核苷的營養(yǎng)液和核酸原料。用植物的秸稈、葉、果實，它包括水果、豆類、玉米、大米、洋玉、洋蔥、大麥、小麥、豆粕，動物類如豬、牛、羊、魚的肌肉組織，以及微生物如酵母菌研磨成漿狀液，再輸入高壓水刀，經(jīng)噴口噴出與另一支高壓水刀噴出的漿狀液作直線對撞切割。使生物細胞膜、核裂解，通過靜置、分離而獲得純天然核酸營養(yǎng)液，經(jīng)高溫消毒后即可灌裝。以上生產(chǎn)流程不需加入氯化鈉、堿、酸，從而得到工藝簡單，成本低，高效益，零排放污染，零殘留污染的營養(yǎng)液。在核酸原料提純中也不添加有害的化學試劑，因此不會污染環(huán)境。
文檔編號C07H21/00GK1891238SQ20051002122
公開日2007年1月10日 申請日期2005年7月6日 優(yōu)先權(quán)日2005年7月6日
發(fā)明者唐毓強 申請人:唐毓強