專利名稱：C環(huán)連接有吡嗪環(huán)的青藤堿衍生物、合成方法及其用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及C環(huán)連接有吡嗪環(huán)的青藤堿衍生物、合成方法及其用途，即C環(huán)連接有吡嗪環(huán)的青藤堿衍生物、以1，2-二氨基化合物和青藤堿的水解產(chǎn)物合成C環(huán)連接有吡嗪環(huán)的青藤堿衍生物的方法，該衍生物具有對(duì)T、B淋巴細(xì)胞的增殖反應(yīng)有較強(qiáng)的抑制作用，可用于制備免疫調(diào)節(jié)方面的藥物。
背景技術(shù)：
傳統(tǒng)中藥是治病救人、保障人民身體健康的物質(zhì)基礎(chǔ)，是中國(guó)勞動(dòng)人民長(zhǎng)期同疾病作斗爭(zhēng)的極為豐富的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)，對(duì)中華民族的繁榮昌盛有著極大的貢獻(xiàn)。
隨著社會(huì)的發(fā)展及人類疾病譜的改變，醫(yī)療模式已由單純的疾病治療轉(zhuǎn)變?yōu)轭A(yù)防、保健、治療、康復(fù)相結(jié)合的模式，各種替代醫(yī)學(xué)與傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)在發(fā)揮重要作用的同時(shí)，人類“回歸自然，回歸綠色”的呼聲也越來越高。而中醫(yī)藥則強(qiáng)調(diào)人與自然結(jié)合，正好符合了人們面向未來、追求綠色消費(fèi)的潮流，重視傳統(tǒng)中藥已經(jīng)成為重要趨勢(shì)，傳統(tǒng)中藥在全球日益受到更多的關(guān)注。不僅亞洲國(guó)家人民對(duì)傳統(tǒng)中藥的接受程度高(如日本達(dá)49％，新加坡達(dá)45％)，歐美等發(fā)達(dá)國(guó)家對(duì)傳統(tǒng)中藥的接受程度也在不斷提高。
在需求的帶動(dòng)下，全世界市場(chǎng)逐年擴(kuò)大，并每年以10-20％的速度遞增。近年來，除東南亞各國(guó)和地區(qū)傳統(tǒng)中藥仍保持旺盛的需求外，北美、西歐市場(chǎng)也日趨活躍，非洲、阿拉伯傳統(tǒng)中藥市場(chǎng)也在逐漸擴(kuò)大。當(dāng)前，中藥科技的發(fā)展呈現(xiàn)出新的趨勢(shì)，傳統(tǒng)中藥正在向現(xiàn)代中藥轉(zhuǎn)變，1996年7月由國(guó)家科委正式提出并倡導(dǎo)“中藥現(xiàn)代化科技產(chǎn)業(yè)行動(dòng)計(jì)劃”，目前正在深入展開和實(shí)施，從而促進(jìn)了我國(guó)中醫(yī)藥事業(yè)向更高、更新、更深入的層次發(fā)展，其宗旨是通過運(yùn)用現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)手段，促進(jìn)中醫(yī)藥這個(gè)最具有我國(guó)民族文化特色的代表性學(xué)科和最具有特色的傳統(tǒng)產(chǎn)業(yè)向現(xiàn)代化、產(chǎn)業(yè)化、國(guó)際化方向發(fā)展。伴隨著中藥現(xiàn)代化的迅速發(fā)展，各種先進(jìn)的現(xiàn)代科學(xué)技術(shù)已廣泛應(yīng)用于中藥研究、開發(fā)、生產(chǎn)的各個(gè)環(huán)節(jié)?，F(xiàn)代制劑技術(shù)已廣泛用于傳統(tǒng)中藥劑型的改造。中藥制劑已由過去的丸、散、膏、丹向控釋、緩釋、靶向等現(xiàn)代制劑發(fā)展；各種先進(jìn)的提取、分離技術(shù)在中藥生產(chǎn)中越來越普遍，中藥生產(chǎn)的現(xiàn)代化越來越高。中藥與現(xiàn)代科技的結(jié)合正越來越緊密，傳統(tǒng)中藥正在向現(xiàn)代中藥轉(zhuǎn)變(中華綜合臨床醫(yī)學(xué)雜志第八期)。中草藥是天然組合化學(xué)庫(kù)，在數(shù)千種中草藥中存在著大約數(shù)百萬種化合物，這些化合物的結(jié)構(gòu)類型幾乎囊括了所有的化合物的結(jié)構(gòu)類型，是最完好的天然組合化學(xué)庫(kù)。目前經(jīng)提取、分離、純化、確定結(jié)構(gòu)的中草藥成分有10000種左右。對(duì)便宜易得的中藥成份進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾和改造，從而得到更高效的藥物是一條非常可行的中藥深化發(fā)展的道路。本發(fā)明就是對(duì)青藤堿進(jìn)行了結(jié)構(gòu)改造，以期得到更高效、低毒的青藤堿衍生物。
清風(fēng)藤是一常見中藥，″清風(fēng)藤″名稱始見于宋·《圖經(jīng)本草》和《本草綱目》都有較詳細(xì)記載。有祛風(fēng)濕通經(jīng)絡(luò)，止痛功能。用于風(fēng)濕性及類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、四肢疼痛麻木及損傷瘡腫等癥。主要分布于陜西、河南、湖北、江蘇、安徽、浙江、江西、福建等省。青風(fēng)藤莖膠及根含青藤堿(sinomenine)、青風(fēng)藤堿(sinoacutine)、雙青藤堿(disinomenine)、乙基青藤堿(ethylsinomenine，即異青藤堿isosinomenine)、四氫表小檗堿sinactine)尖防己堿(acutumine)、N-去甲尖防己堿(acutumidine)、土藤堿(tuduranine)、木蘭堿(magnoflorine)，另含微量的光千金藤堿(stepherine)、白蘭花堿(michelalbine)、dl-紫丁香樹脂酚(dl-syringaresinol)以及β-谷甾醇、豆甾醇等。
青藤堿 青風(fēng)藤堿尖防己堿 R＝CH3N-去甲尖防己堿 R＝H青藤堿(sinomenine)是從青風(fēng)藤(Sinomenium acutum)中分離得到的異喹啉類生物堿。由于生物堿類化合物大多具有生物活性，又具有復(fù)雜的結(jié)構(gòu)，所以生物堿一直吸引著有機(jī)化學(xué)家們的興趣而經(jīng)久不衰(網(wǎng)上搜的)。青藤堿具有抗炎、免疫、鎮(zhèn)痛、降壓、抗心律失常等生理活性。已有正清風(fēng)痛寧片、鹽酸青藤堿注射液、毛青藤總堿片等制劑應(yīng)用于臨床，治療類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎等各種風(fēng)濕病以及心率失常取得較好療效(劉強(qiáng)，等，中草藥，1997，28(4)247-249)。但其用藥量偏大，由過敏副作用。因此，本專利對(duì)青藤堿進(jìn)行了結(jié)構(gòu)修飾與優(yōu)化研究，以尋找高效、低毒的新一類青藤堿衍生物。
青藤堿鹽酸鹽可在10％鹽酸中水解得到化和物1(藥學(xué)學(xué)報(bào)ActaPharmaceutica Sinica 2004，39(3)；180-183)，化學(xué)反應(yīng)式如下 青藤堿的水解產(chǎn)物(化合物1)的C環(huán)有α-二酮結(jié)構(gòu)，而α-二酮化合物和1，2-二氨基化合物縮合是最古老也是最常用的合成吡嗪的方法(Porter，A.E.A.In Comprehensive Heterocyclic Chemistry；Katritzky，A.R.，Rees，C.W.，Scriven，E.F.V.，Eds.；PergamonNew York，1984；Vo 1.3pp 157-197)，具有α-二酮結(jié)構(gòu)的化合物，可以和不同的芳香鄰二胺或脂肪鄰二胺反應(yīng)生成具有吡嗪環(huán)結(jié)構(gòu)的化合物，化學(xué)反應(yīng)式如下 這樣，以青藤堿的水解產(chǎn)物(化合物1)為先導(dǎo)物，利用合成吡嗪環(huán)的方法，可以期望得到一系列的在C環(huán)上連接有帶有不同取代基的吡嗪環(huán)的青藤堿衍生物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的就是提供一種C環(huán)連接有吡嗪環(huán)的青藤堿衍生物。
本發(fā)明的另一目的是提供制備上述青藤堿衍生物的方法。
本發(fā)明還提供上述青藤堿衍生物的用途，其對(duì)T、B淋巴細(xì)胞的增殖反應(yīng)有較強(qiáng)的抑制作用，可用于制造免疫調(diào)節(jié)方面的藥物。
本發(fā)明的青藤堿衍生物具有如下結(jié)構(gòu) 其中R1＝OH，R2＝H，或R1和 R3和R4＝或 R5、R6、R7或R8＝H、C1-14的烷基或不飽和烴基、F、Cl、Br、I、OH、NH2、OMe、OC2H5、NO2、CN、CF3、COOMe、COPh、COOH；Ph是苯基。
本發(fā)明的化合物還可以進(jìn)一步描述為以下結(jié)構(gòu)的化合物 或
其中R3和或 R5、R6、R7、R8如上所述。
本發(fā)明的化合物可以以下列結(jié)構(gòu)的化合物為例
本發(fā)明的青藤堿衍生物的制備方法 在有機(jī)溶劑中和室溫～回流溫度下，1，2-二氨基化合物和青藤堿的水解產(chǎn)物反應(yīng)時(shí)間為1～100小時(shí)即可，建議反應(yīng)時(shí)間為5～80小時(shí)。所述的1，2-二氨基化合物和青藤堿的水解產(chǎn)物摩爾比為1∶1～2。
所述的青藤堿的水解產(chǎn)物結(jié)構(gòu)式為
R1、R2、R3和R4如前所述。
所述的1，2-二氨基化合物結(jié)構(gòu)式如下或 以上所指的有機(jī)溶劑為甲醇、乙醇、異丙純、叔丁醇、二氯甲烷、氯仿、1，2-二氯乙烷、四氯化碳、乙醚、四氫呋喃、苯、甲苯、二甲苯、丙酮、丁酮、乙氰、N，N-二甲基甲酰胺(DMF)或二甲亞砜(DMSO)。
本發(fā)明的C環(huán)連接有吡嗪環(huán)的青藤堿衍生物與青藤堿相比較，對(duì)T、B淋巴細(xì)胞的增殖反應(yīng)的抑制作用有較大提高，對(duì)T淋巴細(xì)胞的增殖反應(yīng)的抑制百分比可由-40％提高到-87％，對(duì)B淋巴細(xì)胞的增殖反應(yīng)的抑制百分比可由-18％提高到-89％。
本發(fā)明的方法成功地將青藤堿的C環(huán)連接上一帶有不同取代基的吡嗪環(huán)的同時(shí)，還可將青藤堿轉(zhuǎn)化為具有(+)嗎啡結(jié)構(gòu)的化合物，且兩步轉(zhuǎn)化可一鍋完成；所得化合物結(jié)構(gòu)新穎，是很好的進(jìn)行生物活性測(cè)試的目標(biāo)產(chǎn)物；該反應(yīng)還具有反應(yīng)條件溫和、簡(jiǎn)便而專一的特點(diǎn)，并可用于工業(yè)化生產(chǎn)；該衍生物對(duì)T、B淋巴細(xì)胞的增殖反應(yīng)有較強(qiáng)的抑制作用，可用于制備免疫調(diào)節(jié)方面的藥物。
具體實(shí)施例方式
通過下述實(shí)施例將有助于理接解本發(fā)明，但并不能限制本發(fā)明的內(nèi)容。
實(shí)施例1 等當(dāng)量的鄰苯二胺的氯仿溶液滴加到0.73g化合物1(2.3mmol)的氯仿溶液中，室溫?cái)嚢?小時(shí)，反應(yīng)液濃縮至干，氯仿-石油醚重結(jié)晶，得0.65g白色固體(化合物2)，產(chǎn)率78％。
1H NMR(CDCl3，300MHz)8.00(1H，m)，7.87(1H，m)，7.61(2H，m)，6.71，6.61(2H 2d，，J＝4.8)6.07(1H，Brs.，)，5.02(1H，d，J＝17.1)，3.71(3H，s)，2.87～3.27(6H，m)2.58(2H，m)，2.48(3H，s)，2.21(1H，dt，J＝2.7，12.0)，2.10(1H，J＝12.9)1.92(1H；dt，J＝4.2，12.6)ppm。
13C NMR(CDCl3∶CD3OD＝10∶1，75MHz)153.588，153.264，144.728，144.317，140.826，140.539，130.219，128.910，127.572，127.472，122.279，118.322，109.079，56.270，55.580，46.563，43.712，42.320，41.961，41.914，37.338，35.794，32.903，22.957ppm。
IR(KBr)2932，1602，1483，1400，1356，1276，1228，1066，1053，836，761cm-1MS(EI，m/z)387(M+)。
HRMS(EI)計(jì)算值388.2020[C24H26N3O2+]實(shí)測(cè)值388.2012。
實(shí)施例2
將等當(dāng)量的3，4-二氨基甲苯的氯仿溶液滴加到1.0g化合物1(3.17mmol)的氯仿溶液中，室溫?cái)嚢?小時(shí)。反應(yīng)液濃縮柱層析分離，得0.9g白色固體，TLC為一個(gè)點(diǎn)，產(chǎn)率70％。但經(jīng)核磁共振氫譜鑒定得到的是化合物3、4的混合物，比例為化合物3∶化合物4(或化合物4∶化合物3)＝6∶1。不能確定量多者為化合物3還是化合物4。
1H NMR(CDCl3，300MHz)(混合物中量多者為準(zhǔn))1H NMR(CDCl3，300MHz)7.71(2H，m)，7.40(1H，d，J＝8.4)，，6.60，6.56(2H，2d，，J＝8.1)6.30(1H，Brs.，)，5.02(1H，d，J＝17.5)，3.67(3H，s)，2.87～3.27(6H，m)2.55-2.69(2H，m)，2.53(3H，s)2.48(3H，s)，2.21(1H，dt，J＝2.7，12.6)，2.1(1H，d，J＝12.9)1.91(；1H，dt，J＝3.9，12.0)。
MS(EI，m/z)401(M+)。
實(shí)施例3 1.15g化合物1(3.67mmol)和等當(dāng)量的4，5-二甲基鄰苯二胺溶于二氯甲烷中，室溫?cái)嚢?小時(shí)，濃縮柱層析分離得白色固體1.21g(化合物5)，產(chǎn)率79％。
1H NMR(CDCl3，300MHz)7.55(1H，s)，7.50(1H，s)，，6.57(2H 2d，J＝8.3)6.06(1H，Brs.，)，5.02(1H，d，J＝17.0)，3.62(3H，s)，2.92～3.16(6H，m)2.55(2H，m)，2.46(3H，s)，2.36(3H，s)2.31(3H，s)2.22(1H，dt，J＝3.0，12.9)，2.1(1H，d，J＝12.9)1.91(1H，dt，J＝4.8，13.2)13C NMR(CDCl3，75.0MHz)152.777，152.411，145.022，144.637，140.396，140.113，138.829，138.768，131.268，127.657，127.234，123.736，118.701，108.954，77.637，77.215，76.795，56.706，55.904，47.037，44.576，43.109，43.009，38.327，36.324，33.550，23.407，20.279，20.245ppm。
IR(KBr)3005，2916，2802，1604 1483，1439，1335，1274，1228，1153，1104，1066，1054，1023，989，867，857，792cm-1。
MS(EI)415(M+)。
HRMS(EI)計(jì)算值416.2345[C26H30N3O2+]實(shí)測(cè)值416.2345。
實(shí)施例4 1.55g化合物1(4.9mmol)和等當(dāng)量的2，3-二氨基甲苯溶于氯仿中，反應(yīng)體系加熱回流8小時(shí)，TLC顯示得到兩個(gè)很近的點(diǎn)，濃縮柱層析分離，可分離得到兩個(gè)白色固體化合物，一個(gè)為200mg，另一個(gè)為304mg，混合物為770mg。但不能確定哪一個(gè)是化合物6哪一個(gè)是化合物7，總產(chǎn)率65％。
1H NMR(CDCl3，300MHz)(量少，極性小者)7.86(1H，d，J＝8.4)，7.43-7.53(2H，m)，6.60(2H，m)6.09(1H，Brs.，)，5.04(1H，d，J＝17.1)，3.74(3H，s)，2.92-3.30(6H，m)2.69(3H，s)2.52-2.62(2H，m)2.49(3H，s)2.23(1H，dt，J＝2.7，12.0)，2.10(1H，m)1.93(1H dt，J＝4.8，12.6)ppm。
IR(KBr)2931，1603，1577，1481，1441，1419，1336，1274，1228，1144，1104，1065，1050，1022，811，767cm-1。
MS(EI)401(M+)。
1H NMR(CDCl3，300MHz)(量多，極性大者)7.70(1H，d，J＝7.5)，7.49(2H，m)，6.58-6.61(2H，2d，J＝8.7)6.02(1H，Brs.，)，5.06(1H，d，J＝20.1)，3.73(3H，s)，2.88-3.23(6H，m)2.2.78(3H，s)2.51-2.61(2H，m)2.48(3H，s)2.21(1H，dt，J＝3.0，12.6)，2.11(1H，d，J＝13.2)1.92(1H dt，J＝5.1，12.9)。
IR(KBr)3513，2908，2836，1606，1579，1481，1437，1341，1278，1231，1211，1054，1024，986，859，759，728cm-1。
MS(EI)401(M+)。
實(shí)施例5
將等當(dāng)量的4-氯鄰苯二胺的氯仿溶液滴加到1.55g化合物1(4.9mmol)的氯仿氯仿溶液中，室溫?cái)嚢?0小時(shí)，反應(yīng)液濃縮柱層析分離，得1.49淺粉紅色固體，TLC為一個(gè)點(diǎn)，產(chǎn)率72％，但經(jīng)核磁共振氫譜鑒定得到的是化合物8、9的混合物，比例為化合物8∶化合物9(或化合物9∶化合物8)＝3.7∶1。不能確定量多者為化合物8還是化合物9。
1H NMR(CDCl3，300MHz)(混合物中量多者為準(zhǔn))8.00(1H，d，J＝2.4)，7.78(1H，d，J＝8.7)，7.54(1H，dd，J＝2.1，9.0)，6.61，6.58(2H，2d，，J＝8.1)6.00(1H，Brs.，)，5.01(1H，d，J＝17.4)，3.72(3H，s)，2.85～3.24(6H，m)2.49-2.60(2H，m)，2.47(3H，s)2.20(1H，dt，J＝3.0，12.0)，2.09(1H，d，J＝12.6)1.90(1H，dt，J＝4.8，13.2)ppm。
MS(ESI)422.2(M+H+)。
實(shí)施例6 890mg化合物1(2.8mmol)和等當(dāng)量的4，5-二甲氯鄰苯二胺溶于氯仿中，室溫?cái)嚢?小時(shí)，濃縮柱層析分離得白色固體0.87g(化合物10)，產(chǎn)率75％。
1H NMR(CDCl3，300MHz)8.10(1H，d)，7.96(1H，s)，7.22(6H，m)，6.59(2d，2H，J＝8.4)6.01(1H，Brs.，)，4.96(1H，d，J＝17.4)，3.71(3H，s)，2.87～3.22(6H，m)2.55(2H，m)，2.46(3H，s)，2.19(1H，dt，J＝3.6，12.6)，2.07(1H，d，J＝12.9)1.91(1H，dt，J＝4.2，13.2)ppm。
13C NMR(CDCl3，75MHz)155.286，154.961，144.669，144.370，140.129，139.979，132.820，132.790，131.029，129.217，128.816，122.938，118.672，108.966，56.400，55.850，46.797，44.553，42.950，42.689，38.124，36.182，33.526，23.126ppmIR(KBr)2989，2910，1603，1482，1453，1441，1416，1328，1279，1230，1175，1153，1105，1053，879，854，731，429cm-1。
MS(EI)455(M+)。
HRMS(EI)計(jì)算值456.1240[C24H24N3O2Cl2+]實(shí)測(cè)值456.1228。
實(shí)施例7 290mg化合物1(0.91mmol)和等當(dāng)量的4-溴鄰苯二胺溶于氯仿中，室溫?cái)嚢柽^夜，反應(yīng)液濃縮柱層析分離，得470mg固體，TLC為一個(gè)點(diǎn)，產(chǎn)率84％，但經(jīng)核磁共振氫譜鑒定得到的是化合物11、12的混合物，比例為化合物11∶化合物12(或12∶11)＝2∶1。不能確定量多者為化合物11還是化合物12。
1H NMR(CDCl3，300MHz)(混合物中量多者為準(zhǔn))8.17(1H，d，J＝1.8)，7.68(2H，m)，6.60(2H，m)6.06(1H，Brs.，)，5.01(1H，d，J＝17.1)，3.72(3H，s)，2.91～3.19(6H，m)2.56(2H，m)，2.47(3H，s)2.20(1H，dt，J＝2.7，12.1)，2.09(1H，m)1.91(1H，dt，J＝4.5，12.6)ppm。
MS(EI)465(M+)。
實(shí)施例8 1.25g化合物1(3.96mmol)和等當(dāng)量的4-氟鄰苯二胺溶于氯仿中，室溫?cái)嚢?8小時(shí)，濃縮柱層析分離，得1.45g白色固體，TLC為一個(gè)點(diǎn)，產(chǎn)率71％，但經(jīng)核磁共振氫譜鑒定得到的是化合物13、14的混合物，比例為化合物13∶化合物14(或14∶13)＝4.2∶1。不能確定量多者為化合物13還是化合物14。
1H NMR(CDCl3，300MHz)(混合物中量多者為準(zhǔn))7.85(1H，dd，J＝6.0，9.0)，7.63(1H，dd，J＝2.7，9.9)，7.38(1H，dt，J＝2.7，9.0)，6.60(2H，m)6.08(1H，Brs.，)，5.02(1H，d，J＝16.8)，3.73(3H，s)，2.86～3.25(6H，m)2.57(2H，m)，2.47(3H，s)2.21(1H，dt，J＝2.7，12.0)，2.12(1H，m)1.915(1H，dt，J＝4.8，12.9)ppm。
MS(EI)405(M+)。
實(shí)施例9 2.0g3，4-二氨基苯甲酸(13.1mmol)溶于46ml無水甲醇和1.7ml濃硫酸中，氮?dú)獗Ｗo(hù)下回流14小時(shí)，冷卻至室溫，用40ml10％碳酸氫鈉中和至Ph＝7～8，80ml乙酸乙酯萃取，無水硫酸鈉干燥，過濾濃縮得2g淺棕色固體，產(chǎn)率92％。
將500mg上述所得產(chǎn)物(3.0mmol)和960mg化合物1(3.0mmol)溶于氯仿中，反應(yīng)體系加熱回流12小時(shí)，濃縮柱層析分離得0.95g淺黃色固體，TLC為一個(gè)點(diǎn)，產(chǎn)率71％，但經(jīng)核磁共振氫譜鑒定得到的是化合物15、16的混合物，比例為化合物15∶化合物16(或16∶15)＝2∶1。不能確定量多者為化合物15還是化合物16。
1H NMR(CDCl3，300MHz)(混合物中量多者為準(zhǔn))8.59(1H，d，J＝1.5)，8.20(1H，m)，8.21(1H，m)，6.60(2H，m)6.10(1H，Brs.，)，5.05(1H，d，J＝17.4)，3.97(3H，s)，3.71(3H，s)，2.89～3.29(6H，m)2.59(2H，m)，2.48(3H，s)2.21(1H，dt，J＝3.0，12.3)，2.12(1H，m)1.92(1H，dt，J＝4.5，12.6)ppm。
MS(EI)445(M+)。
實(shí)施例10
將等當(dāng)量的4-苯基羰基鄰苯二氨的氯仿溶液滴加到1.48g化合物1(4.7mmol)的氯仿溶液中，加熱回流7小時(shí)，反應(yīng)液濃縮柱層析分離，得1.15g黃色固體，TLC為一個(gè)點(diǎn)，產(chǎn)率51％，但經(jīng)核磁共振氫譜鑒定得到的是化合物17、18的混合物，比例為化合物17∶化合物18(或18∶17)＝1.4∶1。不能確定量多者為化合物17還是化合物18。
1H NMR(CDCl3，300MHz)混合物中17、18量接近，核磁不易歸屬。
MS(EI)491(M+)。
實(shí)施例10 1.03g化合物1(3.26mmol)和等當(dāng)量的4-硝基鄰苯二胺溶于DMF中，反應(yīng)體系加熱到100℃反應(yīng)5小時(shí)，，濃縮柱層析分離得淺黃色固體0.73g，TLC為一個(gè)點(diǎn)，產(chǎn)率56％。但經(jīng)核磁共振氫譜鑒定得到的是化合物19、20的混合物，比例為化合物19∶化合物20(或20∶19)＝10∶1。不能確定量多者為化合物19還是化合物20。
1H NMR(CDCl3，300MHz)(混合物中量多者為準(zhǔn))8.77(1H，d，J＝1.8)，8.38(1H，dd，J＝2.4，9.0)，8.12(1H，d，J＝9.3)6.64，6.60(2H，2d，，J＝8.4)6.05(1H，Brs.，)，5.06(1H，d，J＝17.1)，3.71(3H，s)，2.88～3.32(6H，m)2.40-2.62(2H，m)，2.49(3H，s)，2.22(1H，dt，J＝2.4，12.6)，2.12(1H，J＝12.9)1.94(1H dt，J＝4.2，12.6)ppmIR(KBr)3501，2916，2905，2837，1617，1527，1482，1441，1347，1279，1231，1052，829，738cm-1。
MS(EI)432(M+)。
實(shí)施例12
2.6g化合物1(8.25mmol)和等當(dāng)量的2，3-二氨基-5-氯吡啶溶于氯仿中，反應(yīng)體系加熱回流8小時(shí)，TLC顯示得到兩個(gè)很近的點(diǎn)，濃縮柱層析分離，得到0.5g由核磁鑒定為化合物21∶化合物22(或21∶22)＝12∶1和2.0g由核磁鑒定為化合物21∶化合物22(或22∶21)＝2.2∶1的得淺黃色固體，總產(chǎn)率72％(注量多者為同一化合物)。
1H NMR(CDCl3，300MHz)(混合物中量多者為準(zhǔn))8.92(1H，d，J＝2.7)，8.18(1H，d，J＝2.7)，6.61，6.57(2H，2d，，J＝8.1)6.02(1H，Brs.，)，5.13(1H，d，J＝17.4)，3.69(3H，s)，2.86～3.29(6H，m)2.53-2.61(2H，m)，2.52(3H，s)，2.21(1H，dt，J＝3.0，12.6)，2.10(1H，m)1.92(1H dt，J＝4.8，12.6)ppm。
IR(KBr)3369，2908，2837，1670，1483，1440，1390，1320，1280，1231，1154，1053，958，787cm-1。
MS(EI)422(M+)。
實(shí)施例13 2.0g化合物1(6.38mmol)和等當(dāng)量的2，3-二氨基-5-氯吡啶溶于氯仿中，反應(yīng)體系加熱回流12小時(shí)，TLC顯示得到兩個(gè)很近的點(diǎn)，濃縮柱層析分離，得到三個(gè)比例分別為15∶1、2.8∶1、1.17∶1(由核磁鑒定)重量分別為1.4g、0.7g、3.2g的黃色固體，但不能確定哪一個(gè)是化合物23哪一個(gè)是化合物24，總產(chǎn)率79％(注量多者為同一化合物)。
1H NMR(CDCl3，300MHz)(混合物中量多者為準(zhǔn))9.00(1H，d，J＝1.8)，8.36(1H，d，J＝2.1)，6.61，6.57(2H，2d，，J＝8.4)6.01(1H，Brs.，)，5.12(1H，d，J＝17.7)，3.72(3H，s)，2.86～3.29(6H，m)2.57-2.62(2H，m)，2.54(3H，s)，2.21(1H，dt，J＝2.7，12.3)，2.10(1H，m)1.92(1H dt，J＝5.1，12.9)。
IR(KBr)3330，2930，2906，2837，1734，1585，1483，1438，1389，1319，1279，1229，1156，1067，1053，1024，920，851，785，742，727，567cm-1。
MS(EI)466(M+)。
實(shí)施例14 670mg化合物1(2.1mmol)和等當(dāng)量的3，4-二氨基噻吩的鹽酸鹽溶于氯仿中，滴加1.2ml三乙胺，室溫?cái)嚢柽^夜，反應(yīng)液依次用碳酸氫鈉飽和水溶液、水、飽和食鹽水洗，無水硫酸鈉干燥，濃縮后用氯仿/石油醚重結(jié)晶得410mg產(chǎn)物，產(chǎn)率49％。
1H NMR(CDCl3，300MHz)7.78(1H，d，J＝3.6)，7.27(1H，d，J＝3.3)，，6.59(2H，)6.11(1H，Brs.，)，4.85(1H，d，J＝17.4)，3.73(3H，s)，2.84～3.16(6H，m)2.50(2H，m)，2.47(3H，s)，2.19(1H，dt，J＝3.0，12.3)，2.07(1H，d，J＝12.9)1.91(1H，dt，J＝4.8，12.6)ppm。
13C NMR(CDCl3∶CD3OD＝10∶1，75MHz)153.347，153.183，144.773，144.365，141.549，141.193，130.358，122.410，118.433，115.608，115.264，109.159，56.382，55.778，46.663，44.675，42.503，42.250，37.463，36.058，35.959，33.427，23.010ppm。
IR(KBr)3009，2931，1602，1482，1441，1278，1228，1187，1065，1052，1024，869，796，750cm-1。
MS(ESI，m/z)394.2(M+H+)。
HRMS(ESI)計(jì)算值394.1584[C22H24N3O2S+]實(shí)測(cè)值354.1588。
實(shí)施例15
等當(dāng)量的1，2-二苯基-1，2-乙二胺的甲苯溶液滴加到1.78g化合物1(5.6mmol)甲苯溶液中，在80℃攪拌20小時(shí)，反應(yīng)液濃縮，柱層析分離，得2.1g淺黃色固體(化合物26)，產(chǎn)率75％。
1H NMR(CDCl3，300MHz)7.36(2H，m)，7.31(2H，m)，7.22(6H，m)，6.63(2H)6.08(1H，Brs.，)，5.04(1H，d，J＝17.7)，3.77(3H，s)，2.93～3.16(6H，m)2.55(2H，m)，2.50(3H，s)，2.20(1H，dt，J＝3.3，12.6)，2.1(1H，d，J＝12.9)1.90(ppm；1H，dt，J＝4.5，12.6)。
13C NMR(CDCl3，75MHz)150.188，149.444，149.379，144.729，144.669，139.103，139.054，131.272，129.699，129.577，127.986，127.939，127.880，127.831，123.759，118.456，108.630，56.440，55.727，46.884，42.876，42.637，42.545，38.415，36.113，32.578，23.355。
IR(KBr)3505，2906，2837，1604，1581，1481，1437，1394，1279，1154，1067，1054，1023，767，698cm-1。
MS(ESI，m/z)490.2(M+H+)。
HRMS(ESI)計(jì)算值490.2489 [C32H32N3O2+]Fuond490.2491。
實(shí)施例16 將等當(dāng)量的4-硝基鄰苯二胺的DMF溶液滴加到2.8g化合物1(4.9mmol)的DMF溶液中，反應(yīng)體系加熱到100℃反應(yīng)40小時(shí)，反應(yīng)液濃縮柱層析分離，只能分離得到反應(yīng)所產(chǎn)生的兩個(gè)點(diǎn)中的一個(gè)主要點(diǎn)，是2.25g棕黃色固體，產(chǎn)率57％，不能確定所得化合物是化合物27還是化合物28。
1H NMR(CDCl3，300MHz)8.50(1H，d，J＝2.3)，8.44(2H，dd，J＝2.3，9.1)，8.28(1H，d，J＝9.2)6.73，6.70(2H，2d，J＝8.4)5.69(1H，s，)，3.79(3H，s)，3.38(1H，dd，J＝2.5，5.9)3.20(1H，d，J＝18.8)3.06(1H，dd，J＝4.1，16.2)2.82(1H m)2.65(2H，m)2.50(3H，s)2.40～2.57(2H，m)，2.16(1H，dt，J＝5.1，12.9)，2.06(1H，m)。
13C NMR(CDCl3，75.0MHz)155.564，153.372，148.215，145.262，144.514，142.815，140.683，131.289，128.010，127.002，124.923，122.662，119.943，114.220，90.505，58.951，56.510，46.348，43.145，43.083，39.479，36.123，33.358，20.011ppmIR(KBr)2900，2838，2798，1619，1604，1529，1502，1349，1279，1200，1152，1105，1054，1030，916，823，741cm-1。
MS(ESI，m/z)431.1(M+H+)。
HRMS(ESI)計(jì)算值431.1714[C24H23N4O4+]實(shí)測(cè)值431.1715。
實(shí)施例17 將等當(dāng)量的3-硝基鄰苯二胺的DMF溶液滴加到1.03g化合物1(3.2mmol)的DMF溶液中，反應(yīng)體系加熱到120℃反應(yīng)40小時(shí)，反應(yīng)液濃縮柱層析分離，能分別分離得到得到反應(yīng)所產(chǎn)生的兩個(gè)點(diǎn)，共得422mg棕黃色固體，產(chǎn)率30％，不能確定所得化合物哪一個(gè)是化合物29哪一個(gè)是化合物30。
1H NMR(CDCl3，300MHz)(量多，極性大者)8.17(1H，dd，J＝1.2，8.4)，8.10(1H，dd，J＝1.2，7.5)，7.79(1H，dd，J＝7.8，8.4)6.70(2H，)5.77(1H，s，)，3.79(3H，s)，3.36(1H，dd，J＝2.4，6.0)3.19(1H，d，J＝18.9)3.00(1H，dd，J＝3.0，15.0)2.62-2.74(3H，m)2.39-2.54(2H，m)2.49(3H，s)2.13(1H，dt，J＝4.5，12.0)，2.08(1H，m)。
IR(KBr)2920，2909，2839，2798，1604，1533，1502，1450，1441，1340，1280，1151，1105，1054，1030，916，794，768，651cm-1。
MS(ESI，m/z)431.2(M+H+)。
1H NMR(CDCl3，300MHz)(量少，極性小者)8.37(1H，dd，J＝1.2，8.4)，8.09(1H，dd，J＝1.2，8.1)，7.77(1H，dd，J＝7.8，8.1)6.69(2H，)5.69(1H，s，)，3.78(3H，s)，3.34(1H，dd，J＝2.1，5.7)3.18(1H，d，J＝18.9)3.08(1H，dd，J＝3.0，15.3)2.61-2.80(3H，m)2.42-2.53(2H，m)2.48(3H，s)2.16(1H，dt，J＝4.8，12.0)，2.10(1H，m)。MS(ESI，m/z)431.2(M+H+)。
實(shí)施例18 1.15g化合物1(3.67mmol)和等當(dāng)量的3，4-二氨基吡啶溶于DMF中，反應(yīng)體系加熱到100℃35小時(shí)，濃縮柱層析分離，得780mg黃色固體，TLC為一個(gè)點(diǎn)，產(chǎn)率55％，但經(jīng)核磁共振氫譜鑒定得到的是化合物31、32的混合物，比例為化合物31∶化合物32(或31∶32)＝3.4∶1。不能確定量多者為化合物31還是化合物32。
1H NMR(CDCl3，300MHz)(混合物中量多者為準(zhǔn))9.42(1H，s)，8.78(1H，d，J＝5.7)，7.98(1H，d，J＝5.7)，6.71(2H s)，5.69(1H，s)，3.79(3H，s)，3.38(1H，dd，J＝2.7，6.0)，3.20(1H，d，J＝19.2)，3.06(1H，dd，J＝4.2，15.0)，2.48(3H，s)2.41～2.82(5H，m)，2.16(1H，dt，J＝4.8，11.7)，2.10(1H，m)，2.09(1H m)。
MS(EI)386(M+)。
實(shí)施例19 1.44g化合物1(4.58mmol)和等當(dāng)量的2，3-二氨基吡啶溶于DMF中，反應(yīng)體系加熱到100℃80小時(shí)，濃縮柱層析分離，得1.2g黃色固體，TLC為一個(gè)點(diǎn)，產(chǎn)率64％，但經(jīng)核磁共振氫譜鑒定得到的是化合物33、34的混合物，比例為化合物33∶化合物34(或34∶33)＝1.8∶1。不能確定量多者為化合物33還是化合物34。
1H NMR(CDCl3，300MHz)(混合物中量多者為準(zhǔn))9.13(1H，m)，8.51(1H，dd，J＝2.1，8.4)，7.68(1H，m)，6.70(2H，m)，5.65(1H，s)，3.78(3H，s)，2.17～3.39(8H，m)，2.49(3H，s)，2.11(2H，m)ppm。
MS(EI)386(M+)。
實(shí)施例20 660mg化合物1(2.09mmol)和等當(dāng)量的4-氯-2，3-二氨基吡啶溶于DMF中，反應(yīng)體系加熱到100℃15小時(shí)，濃縮柱層析分離，得560g黃色固體，TLC為一個(gè)點(diǎn)，產(chǎn)率64％，但經(jīng)核磁共振氫譜鑒定得到的是化合物35、36的混合物，比例為化合物35∶化合物36(或36∶35)＝1∶1。
1H NMR(CDCl3，300MHz)混合物中17、18量相同，核磁不易歸屬。
MS(EI)420(M+)。
實(shí)施例21 503mg化合物1(1.59mmol)和等當(dāng)量的4-溴-2，3-二氨基吡啶溶于DMF中，反應(yīng)體系加熱到100℃12小時(shí)，濃縮柱層析分離，得320g黃色固體，TLC為一個(gè)點(diǎn)，產(chǎn)率43％，但經(jīng)核磁共振氫譜鑒定得到的是化合物37、38的混合物，比例為化合物37∶化合物38(或38∶37)＝7∶5。不能確定量多者為化合物37還是化合物38。
1H NMR(CDCl3，300MHz)混合物中37、38量相近，核磁不易歸屬。
MS(EI)464(M+)。
實(shí)施例22
950g化合物1(3mmol)和等當(dāng)量的4-甲氧羰基鄰苯二氨溶于DMF中，反應(yīng)體系加熱到120℃30小時(shí)，濃縮柱層析分離，得460g黃色固體，TLC為一個(gè)點(diǎn)，產(chǎn)率34％，但經(jīng)核磁共振氫譜鑒定得到的是化合物39、40的混合物，比例為化合物439∶化合物40(或403∶39)＝3∶2。不能確定量多者為化合物39還是化合物40。
1H NMR(CDCl3，300MHz)混合物中39、40量相近，核磁不易歸屬。
MS(EI)443(M+)。
實(shí)施例23 890g化合物1(2.8mmol)和等當(dāng)量的4-苯基羰基鄰苯二氨溶于DMF中，反應(yīng)體系加熱到120℃70小時(shí)，濃縮柱層析分離，得350g黃色固體，TLC為一個(gè)點(diǎn)，產(chǎn)率25％，但經(jīng)核磁共振氫譜鑒定得到的是化合物41、42的混合物，比例為化合物41∶化合物42(或42∶41)＝2∶1。不能確定量多者為化合物41還是化合物42。
1H NMR(CDCl3，300MHz)混合物中41、42量相近，核磁不易歸屬。
MS(EI)489(M+)。
實(shí)施例24
740mg化合物1(2.36mmol)和等當(dāng)量的4，5-二氯鄰苯二氨溶于DMF中，反應(yīng)體系加熱到120℃50小時(shí)，濃縮柱層析分離，得300g黃色固體，產(chǎn)率27％。
1H NMR(CDCl3，300MHz)8.26(1H，s)，8.06(1H，s)，，6.67(2H，s)5.65(1H，s，)，，3.79(3H，s)，3.35(1H，q，J＝3.0)3.18(1H，d，J＝18.9)2.96(1H，m)2.75(1H m)2.63(1H，m)2.38～2.55(2H，m)，2.47(3H，s)，2.14(1H，dt，J＝4.8，12.6)，2.07(1H，m)。
13C NMR(CDCl3，75MHz)154.127，151.176，145.312，142.803，140.947，140.557，135.113，133.952，130.078，129.075，128.157，126.970，119.688，114.340，90.593，58.989，56.564，46.358，43.101，42.969，39.529，36.102，33.254，20.014ppmIR(KBr)2908，2838，2798，1603，1502，1450，1280，1253，1153，1105，1056，1030，917，836，785cm-1。
MS(EI)453(M+)。
HRMS(EI)計(jì)算值454.1084[C24H22N3O2Cl2+]實(shí)測(cè)值454.1073。
實(shí)施例25 1.1g化合物1(3.5mmol)和等當(dāng)量的4-氯鄰苯二氨溶于DMF中，反應(yīng)體系加熱到120℃3天，濃縮柱層析分離，得420g黃色固體，TLC為一個(gè)點(diǎn)，產(chǎn)率28％，但經(jīng)核磁共振氫譜鑒定得到的是化合物44、45的混合物，比例為化合物44∶化合物45(或45∶44)＝4∶1。不能確定量多者為化合物44還是化合物45。
1H NMR(CDCl3，300MHz)(混合物中量多者為準(zhǔn))8.14(1H，d，J＝2.1)，7.88(1H，d，J＝9.0)，7.66(1H，dd，J＝2.1，9.0)，6.69(2H s)，5.68(1H，s)，3.78(3H，s)，3.35(1H，dd，J＝2.4，5.7)，3.18(1H，d，J＝18.9)2.49(3H，s)，2.38～2.80(5H，m)，2.14(1H，dt，J＝4.8，12.3)，2.07(1H，m)。
MS(EI)419(M+)。
實(shí)施例26 1.55g化合物1(4.9mmol)和等當(dāng)量的4-甲基鄰苯二氨溶于DMF中，反應(yīng)體系加熱到110℃5天，濃縮柱層析分離，得260g黃色固體，TLC為一個(gè)點(diǎn)，產(chǎn)率13％，但經(jīng)核磁共振氫譜鑒定得到的是化合物46、47的混合物，比例為化合物46∶化合物47(或47∶46)＝2.5∶1。不能確定量多者為化合物46還是化合物47。
1H NMR(CDCl3，300MHz)(混合物中量多者為準(zhǔn))7.91(1H，s)，7.82(1H，d，J＝8.7)，7.55(1H，dd，J＝2.1，9.0)，6.68(2H，s)，5.70(1H，s，)，，3.78(3H，s)，3.35(1H，dd，J＝2.7，6.0)，3.17(1H，d，J＝18.6)，2.96(1H，dd，J＝3.9，15.9)，2.43-2.74(5H，m)，2.60(3H，s)，2.55(3H，s)，2.15(1H，dt，J＝4.8，12.0)，2.08(1H，m)ppm。
MS(ESI)400.2(M+H+)。
實(shí)施例27 2.0g化合物1(2.36mmol)和等當(dāng)量的鄰苯二氨溶于DMF中，反應(yīng)體系加熱到120℃60小時(shí)，濃縮柱層析分離，得440g白色固體，產(chǎn)率17％。
1H NMR(CDCl3，300MHz)8.15(1H，m)，7.95(1H，m)，7.72(2H，m)，6.69(2H，s)5.72(1H，s，)，，3.78(3H，s)，3.36(1H，dd，J＝2.4，6.7)，3.18(1H，m)，3.00(1H，m)，2.64(3H，m)，2.47(3H，s)，2.44(2H，m)，2.09(2H，m)ppm。
13C NMR(CDCl3，75MHz)152.700，149.816，145.422，142.280，141.800，130.461，129.543，129.275，128.385，128.327，127.038，119.461，114.331，91.022，59.031，56.579，46.381，43.077，42.919，39.753，36.153，33.264，20.029ppm。
IR(KBr)2939，2904，2804，1606，1556，1501，1452，1354，1277，1249，1150，1102，1055，1030，911，891，802，777cm-1。
MS(ESI，m/z)386.2(M+H+)。
HRMS(ESI)計(jì)算值408.1268[C24H23N3O2Na+]實(shí)測(cè)值408.1681。
實(shí)施例27免疫生物活性篩選試驗(yàn)測(cè)試體系體外結(jié)果評(píng)定百分比前有負(fù)號(hào)表示此樣品對(duì)T、B細(xì)胞有抑制作用。
百分比前沒有負(fù)號(hào)表示此樣品對(duì)T、B細(xì)胞有增強(qiáng)作用。
T、B淋巴細(xì)胞的增強(qiáng)/抑制百分比(絕對(duì)值)在15％以上，就表示有作用。


注樣品編號(hào)按上述實(shí)施例中所示，帶有括號(hào)的為有位置異構(gòu)體者，異構(gòu)體的比例在上述實(shí)施例中都有描述。
權(quán)利要求
1，一種C環(huán)連接有吡嗪環(huán)的青藤堿衍生物，其結(jié)構(gòu)式如下 其中R1＝OH，R2＝H，或R1和R2＝ R3和R4＝ 或 R5、R6、R7或R8＝H、C1-14的烷基或不飽和烴基、F、Cl、Br、I、OH、NH2、OMe、OC2H5、NO2、CN、CF3、COOMe、COPh、COOH；Ph是苯基。
2，如權(quán)利要求1所述的一種C環(huán)連接有吡嗪環(huán)的青藤堿衍生物，其特征是具有如下結(jié)構(gòu)式 或 其中R1、R2、R3和R4如權(quán)利要求1所述。
3，如權(quán)利要求1所述的一種C環(huán)連接有吡嗪環(huán)的青藤堿衍生物，其特征是具有如下結(jié)構(gòu)式
4，一種如權(quán)利要求1所述的C環(huán)連接有吡嗪環(huán)的青藤堿衍生物合成方法，其特征是在有機(jī)溶劑中和室溫～回流溫度下，1，2-二氨基化合物和青藤堿的水解產(chǎn)物反應(yīng)時(shí)間為1～100小時(shí)；所述的1，2-二氨基化合物和青藤堿的水解產(chǎn)物摩爾比為1∶1～2；所述的青藤堿的水解產(chǎn)物結(jié)構(gòu)式為 所述的1，2-二氨基化合物結(jié)構(gòu)式如下 或
5，如權(quán)利要求4所述的一種C環(huán)連接有吡嗪環(huán)的青藤堿衍生物合成方法，其特征是所述的有機(jī)溶劑為甲醇、乙醇、異丙純、叔丁醇、二氯甲烷、氯仿、1，2-二氯乙烷、四氯化碳、乙醚、四氫呋喃、苯、甲苯、二甲苯、丙酮、丁酮、乙氰、N，N-二甲基甲酰胺或二甲亞砜。
6，一種如權(quán)利要求1所述的C環(huán)連接有吡嗪環(huán)的青藤堿衍生物的用途，其特征是，用于制備對(duì)T、B淋巴細(xì)胞的增殖反應(yīng)有較強(qiáng)抑制作用的免疫調(diào)節(jié)藥物。
全文摘要
本發(fā)明是一種C環(huán)連接有吡嗪環(huán)的青藤堿衍生物、合成方法及其用途。該衍生物具有如下結(jié)構(gòu)式(見式1)的青藤堿衍生物，其中R
文檔編號(hào)C07D471/00GK1687065SQ200510024479
公開日2005年10月26日 申請(qǐng)日期2005年3月18日 優(yōu)先權(quán)日2005年3月18日
發(fā)明者姚祝軍, 周海濱 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院上海有機(jī)化學(xué)研究所