專利名稱：具有降血脂功能的昆蟲蛋白的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及的是一種生物工程技術(shù)領(lǐng)域的制備方法，特別是一種具有降血脂功能的昆蟲蛋白的制備方法。
背景技術(shù)：
蠅蛆是一種重要的蛋白質(zhì)資源，蛋白質(zhì)含量為56％，氨基酸達(dá)16種以上，脂肪為14％～16％，幾丁聚糖為20％，并含有豐富的生物活性物質(zhì)和營養(yǎng)物質(zhì)，具有很好的食用及藥用價值。上世紀(jì)70年代中期，日本報道從蠅蛆中提取分離出多種抗菌物質(zhì)，引起了各國科學(xué)家對蠅蛆中生物活性成分的研究興趣。由于蠅蛆具有很高的營養(yǎng)價值，又有特殊的活性成分，近20年來，國內(nèi)外對蠅蛆的開發(fā)利用進(jìn)行了大量和較深入的研究，對蠅蛆的利用已從動物飼料用途轉(zhuǎn)向食品、醫(yī)藥等高附加值用途的深層次開發(fā)。
經(jīng)對現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)的檢索發(fā)現(xiàn)，專利CN1141130A、CN1231131A、CN1260145A、CN1456589A都報道了利用蠅蛆開發(fā)生產(chǎn)了供人類食用的營養(yǎng)活性干粉，為蠅蛆資源的開發(fā)利用提供了一個高層次的應(yīng)用途徑。國內(nèi)也已開發(fā)了一些相關(guān)的產(chǎn)品，但這些產(chǎn)品多是對蠅蛆蛋白進(jìn)行了簡單的處理，在處理過程中并沒有將各種活性蛋白分離，對蠅蛆蛋白中的具體那幾種蛋白具有何種保健功能，并未有深入的研究，因此獲得的營養(yǎng)干粉和蠅蛆無本質(zhì)上區(qū)別，使這類產(chǎn)品的保健功能不突出，效果不明顯。導(dǎo)致產(chǎn)品有效成分含量低，針對性不強。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)中的不足，提供一種具有降血脂功能的昆蟲蛋白的制備方法。使其克服已有技術(shù)中對蠅蛆蛋白不分離而直接利用的缺陷和對蠅蛆不誘導(dǎo)或者物理誘導(dǎo)不適合大規(guī)模生產(chǎn)的缺點，所能夠提供的昆蟲蛋白能降低血清膽固醇、甘油三脂。
本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的，本發(fā)明由人工所養(yǎng)殖的家蠅幼蟲經(jīng)勻漿后分離得到具有降低血清膽固醇、甘油三脂作用的昆蟲蛋白。
所述的家蠅幼蟲，是指待蠅蛆長至3日齡時，用10～100W的19～22kHz的超聲波處理1～15分鐘；將處理后的蟲體繼續(xù)培養(yǎng)48～72小時，期間只供應(yīng)適當(dāng)生理鹽水而停止供食。
所述的勻漿，是指將停止培育后的蠅蛆用膠體磨研磨勻漿后，蛆漿用5～10倍的pH 6～8的0.02mol/L磷酸鹽緩沖液稀釋，2000～5000rpm離心15～30min，取上清液。
所述的分離，是指超濾分離，將離心所得的上清液采用分子量為10萬道爾頓的超濾膜過濾，收集濾液，將收集得濾液采用分子量為3萬道爾頓的超濾膜繼續(xù)過濾，收集截留液，將收集的截留液冷凍干燥得到昆蟲蛋白產(chǎn)品。
所述的昆蟲蛋白，其分子量范圍為30000～100000道爾頓之間。
本發(fā)明與已有的技術(shù)相比，具有以下的優(yōu)勢(1)本發(fā)明采用適合大規(guī)模生產(chǎn)的前期處理，使蠅蛆中活性蛋白的含量明顯提高。
(2)由本發(fā)明所制備的蠅蛆蛋白具有很強的降低血清膽固醇、甘油三脂作用，動物試驗表明，效果是未經(jīng)分離的蛋白粉的3～5倍。
具體實施例方式
實施例1待蠅蛆長至3日齡時，取2kg洗凈的鮮蛆用30W的19～22kHz的超聲波處理9分鐘；將處理后的蟲體繼續(xù)培養(yǎng)48小時，期間只供應(yīng)適當(dāng)生理鹽水而停止供食。然后將停止培育后的蠅蛆用膠體磨研磨勻漿后，蛆漿用5倍體積的pH7.0的0.02mol/L磷酸鹽緩沖液稀釋，5000rpm離心30min，取上清液。將上清液用pH7.0的0.02mol/L磷酸鹽緩沖液稀釋至蛋白質(zhì)含量為3.5％，采用分子量為10萬道爾頓的超濾膜超濾，收集濾液。將收集到的濾液用pH7.0的0.02mol/L磷酸鹽緩沖液稀釋至蛋白質(zhì)含量為2.5％，采用分子量為3萬道爾頓的超濾膜超濾，收集截留液。將收集的截留液進(jìn)行真空冷凍干燥得產(chǎn)品312g。
實施例2待蠅蛆長至3日齡時，取3kg洗凈的鮮蛆用50W的19～22kHz的超聲波處理7分鐘；將處理后的蟲體繼續(xù)培養(yǎng)72小時，期間只供應(yīng)適當(dāng)生理鹽水而停止供食。然后將停止培育后的蠅蛆用膠體磨研磨勻漿后，蛆漿用7倍體積的pH7.2的0.02mol/L磷酸鹽緩沖液稀釋，5000rpm離心30min，取上清液。將上清液用pH7.2的0.02mol/L磷酸鹽緩沖液稀釋至蛋白質(zhì)含量為3％，采用分子量為10萬道爾頓的超濾膜超濾，收集濾液。將收集到的濾液用pH7.2的0.02mol/L磷酸鹽緩沖液稀釋至蛋白質(zhì)含量為2％，采用分子量為3萬道爾頓的超濾膜超濾，收集截留液。將收集的截留液進(jìn)行真空冷凍干燥得產(chǎn)品458g。
實施例3待蠅蛆長至3日齡時，取2kg洗凈的鮮蛆用60W的19～22kHz的超聲波處理6分鐘；將處理后的蟲體繼續(xù)培養(yǎng)54小時，期間只供應(yīng)適當(dāng)生理鹽水而停止供食。然后將停止培育后的蠅蛆或初蛹用膠體磨研磨勻漿后，蛆漿用10倍體積的pH6.8的0.02mol/L磷酸鹽緩沖液稀釋，5000rpm離心30min，取上清液。將上清液用pH6.8的0.02mol/L磷酸鹽緩沖液稀釋至蛋白質(zhì)含量為2.0％，采用分子量為10萬道爾頓的超濾膜超濾，收集濾液。將收集到的濾液用pH6.8的0.02mol/L磷酸鹽緩沖液稀釋至蛋白質(zhì)含量為1.5％，采用分子量為3萬道爾頓的超濾膜超濾，收集截留液。將收集的截留液進(jìn)行真空冷凍干燥得產(chǎn)品319g。
權(quán)利要求
1.一種具有降血脂功能的昆蟲蛋白的制備方法，其特征在于，由人工所養(yǎng)殖的家蠅幼蟲經(jīng)勻漿后分離得到的具有降低血清膽固醇、甘油三脂作用的昆蟲蛋白。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有降血脂功能的昆蟲蛋白的制備方法，其特征是，所述的家蠅幼蟲，是指待蠅蛆長至3日齡時，用10～100W的19～22kHz的超聲波處理1～15分鐘；將處理后的蟲體繼續(xù)培養(yǎng)48～72小時，期間只供應(yīng)適當(dāng)生理鹽水而停止供食。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有降血脂功能的昆蟲蛋白的制備方法，其特征是，所述的勻漿，是指將停止培育后的蠅蛆或初蛹用膠體磨研磨勻漿后，蛆漿用5～10倍的pH6～8的0.02mol/L磷酸鹽緩沖液稀釋，2000～5000rpm離心15～30min，取上清液。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有降血脂功能的昆蟲蛋白的制備方法，其特征是，所述的分離，是指超濾分離，將離心所得的上清液采用分子量為10萬道爾頓的超濾膜超濾，收集濾液；將收集得濾液采用分子量為3萬道爾頓的超濾膜超濾，收集截留液，將收集的截留液冷凍干燥得產(chǎn)品。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的具有降血脂功能的昆蟲蛋白的制備方法，其特征是，所述的昆蟲蛋白，其分子量范圍為30000～100000道爾頓之間。
全文摘要
一種具有降血脂功能的昆蟲蛋白的制備方法，屬生物工程領(lǐng)域。由人工所養(yǎng)殖的家蠅幼蟲經(jīng)勻漿后分離得到的具有降低血清膽固醇、甘油三脂作用的昆蟲蛋白。本發(fā)明采用適合大規(guī)模生產(chǎn)的前期處理和超濾技術(shù)，使蠅蛆中活性蛋白的含量明顯提高。由本發(fā)明所制備的蠅蛆蛋白具有很強的降低血清膽固醇、甘油三脂作用，動物試驗表明，效果是未經(jīng)分離的蛋白粉的3～5倍。
文檔編號C07K14/435GK1699415SQ20051002638
公開日2005年11月23日 申請日期2005年6月2日 優(yōu)先權(quán)日2005年6月2日
發(fā)明者胡洪波, 張雪洪, 彭華松 申請人:上海交通大學(xué)