專利名稱：青蒿琥酯鹽及其制備方法和應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種青蒿琥酯的衍生物，具體涉及一種青蒿琥酯鹽。
背景技術：
青蒿琥酯是一種有效的應用十分廣泛的抗瘧藥。青蒿琥酯的制備方法和理化性能在中國藥學通報，1980，15(4)，183；發(fā)明專利公報，1986，2(14)，5等文獻中已經(jīng)有公開的報道，為一種略溶于水的藥物。市售的注射劑，如桂林南藥股份有限公司生產(chǎn)的青蒿琥酯在使用時需要將5％的碳酸氫鈉溶液0.6ml注入青蒿琥酯中，充分混搖使澄清，形成青蒿琥酯與鈉的水溶液，進行注射。使用不便，而且容易出現(xiàn)差錯，亟待改進。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明需要解決的技術問題是公開一種易溶于水的固體青蒿琥酯鹽及其制備方法，以克服現(xiàn)有的青蒿琥酯所存在的缺陷，滿足有關方面的需要。
本發(fā)明另一個需要解決的技術問題是公開一種青蒿琥酯鹽的制劑。
本發(fā)明再一個需要解決的技術問題是公開所述的青蒿琥酯鹽在制備治療抗瘧、抗血吸蟲、無名高燒、節(jié)育、免疫調(diào)節(jié)劑或抗癌藥物中的應用。
本發(fā)明最后需要解決的技術問題是公開所述的青蒿琥酯鹽在運輸、儲藏過程的條件。
本發(fā)明的青蒿琥酯鹽，其結構通式為
其中M代表Na或K；優(yōu)選的為Na；優(yōu)選的化合物為青蒿琥酯鈉鹽，分子式C19H27O8Na，分子量406.43。
所說的青蒿琥酯鹽是一種白色結晶粉末，溶于二氯甲烷、三氯甲烷、乙醇和丙酮中，極易溶于水。
本發(fā)明還涉及一種藥物制劑，其特征在于，含有治療有效量的所說的青蒿琥酯鹽和醫(yī)藥學上可接受的載體，優(yōu)選含有青蒿琥酯鹽的重量百分比為0.01～99.9％；所說的制劑為注射劑、凍干粉針劑、固體制劑如片劑、膠囊劑、顆粒劑或口服液等。所說的制劑可采用本領域公知的方法進行制備。
所說的醫(yī)藥學上可接受的載體是指藥學領域常規(guī)的藥物載體，如稀釋劑、賦形劑如水、乙醇等；填充劑，如乳糖、微晶纖維素、淀粉、蔗糖等；粘合劑，如纖維素衍生物明膠、聚乙烯吡咯烷酮等；崩解劑，如羥甲基淀粉鈉、羥丙基纖維素、微粉硅膠等；潤滑劑，如硬脂酸鎂、滑石粉等。
本發(fā)明的青蒿琥酯鹽的制備方法包括如下步驟在水或/和有機醇溶劑中，pH為6～8.5的條件下，將青蒿琥酯與碳酸氫鈉、碳酸鈉、氫氧化鈉、碳酸氫鉀、碳酸鉀或氫氧化鉀中的一種反應，優(yōu)選碳酸氫鈉，反應溫度為0～30℃，反應時間為5～60分鐘，收集反應產(chǎn)物，得白色結晶粉末，青蒿琥酯鈉鹽，收率可達到97％。
所說的有機醇溶劑選自C2～C4的一元醇，優(yōu)選乙醇或異丙醇；選用碳酸氫鈉、氫氧化鈉、碳酸氫鉀或氫氧化鉀時，青蒿琥酯與碳酸氫鈉、氫氧化鈉、碳酸氫鉀或氫氧化鉀的摩爾比為1～4.6，優(yōu)選理論配比的1.05倍；選用碳酸鈉或碳酸鉀時，青蒿琥酯與碳酸鈉或碳酸鉀的摩爾比為0.5～9.2，優(yōu)選理論配比的0.525倍；
按照本發(fā)明，最好將碳酸氫鈉、碳酸鈉或氫氧化鈉配制成摩爾濃度為0.1～2mol/L的水溶液，以方便使用；由于青蒿琥酯鈉鹽易溶于水，其凍干粉針劑既可作靜脈注射，也可作肌肉注射。本發(fā)明的青蒿琥酯鈉鹽在20℃以下穩(wěn)定，可用于治療惡性瘧、腦型瘧及各種危重瘧疾的搶救和治療；每天注射一次65mg，連用5-7天；第一天劑量加倍，總劑量390-520mg；兒童按1.3mg/kg計算藥量，具體可根據(jù)患者的年齡、病情由醫(yī)師決定。
本發(fā)明的青蒿琥酯鈉鹽除了用于抗瘧，還可用于抗血吸蟲，無名高燒、節(jié)育、免疫調(diào)節(jié)劑或抗癌。
本發(fā)明的青蒿琥酯鈉鹽毒性較小，通過動物試驗，證明與青蒿琥酯具有相同的治療作用和突出的治療效果，其在水中的溶解度大大高于青蒿琥酯，醫(yī)護人員可按常規(guī)注射操作，使用方便。
具體實施例方式
實施例1青蒿琥酯分子量384.43青蒿琥酯6g(0.0156mol/L)，加18ml水，再加入摩爾濃度為0.5mol/L的碳酸氫鈉水溶液33ml，于25℃下攪拌反應20分鐘，反應畢，以活性炭脫色、過濾，濾液冷凍干燥，得白色結晶粉末青蒿琥酯鈉6.1g，收率96.2％。
元素分析C19H27O8Na(理論值％C56.14，H6.71，Na5.66；實驗值％C55.94，H6.80，Na5.72)IR(KCL)ν3416，2928，1747，1582，1132，878cm-1。
1HNMR(DMSO-d6)δ5.67-5.69(10-H)，5.56(12a-H)，2.44-2.48(15-H)，2.11-2.14(14-H)，1.29(3-CH3)，0.89-0.90(6-CH3)，0.77-0.78(9-CH3)。MSm/z406(M+)青蒿琥酯鈉的結構鑒定根據(jù)青蒿琥酯鈉的質譜，高質量端的最強峰為m/z407，由于是正電離模式，故青蒿琥酯鈉的分子質量為406。
在IR譜中，青蒿琥酯3228cm-1處締合O-H鍵的伸縮強振動峰在青蒿琥酯鈉中無吸收，同時青蒿琥酯鈉1581.5cm-1處明顯可見鈉與羧酸反應生成鹽的特征峰；1H-NMR檢測結果也表明，青蒿琥酯鈉在12.5ppm處的-COOH峰消失，這些可以確定青蒿琥酯鈉樣品已形成-COONa結構。
UV譜表明青蒿琥酯鈉在50℃0.1mol/L氫氧化鈉溶液反應1小時得到的UV譜與青蒿琥酯在相同條件下得到的UV譜是完全一致的，證明青蒿琥酯鈉、青蒿琥酯在堿性條件反應得到同一最終產(chǎn)物；13C-NMR表明青蒿琥酯鈉有19個吸收峰，化學位移值與青蒿琥酯基本一致。
綜上所述，可推斷目標物已形成-COONa結構。
實施例2青蒿琥酯分子量384.43青蒿琥酯38.4g(0.1mol)，加115ml乙醇，再加入105ml摩爾濃度為1mol/L的氫氧化鈉水溶液，于30℃下攪拌反應30分鐘，反應畢，加入活性炭脫色、過濾，濃縮、冷卻，結晶、過濾、干燥，得白色結晶粉末青蒿琥酯鈉37.6g。收率92.6％。
實施例3青蒿琥酯38.4g(0.1mol)，加體積濃度為75％的乙醇水溶液115ml，再加入摩爾濃度為2mol/L的氫氧化鉀溶液52.5ml，于室溫下攪拌反應20分鐘，反應畢，以少量活性炭脫色、過濾，濃縮、冷卻，結晶、過濾、干燥，得結晶粉末青蒿琥酯鉀鹽35.9g。收率85％。
元素分析C19H27O8K 422.53(理論值％C54.01，H6.45，K9.25；實驗值％C54.05，H6.35，K9.37)IR(KCL)v3416，2928，1747，1582，1132，878cm-1。
1HNMR(DMSO-d6)δ5.67-5.69(10-H)，5.56(12a-H)，2.44-2.48(15-H)，2.11-2.14(14-H)，1.29(3-CH3)，0.89-0.90(6-CH3)，0.77-0.78(9-CH3)。MSm/z423(M+)實施例4凍干粉針劑的制備將實施例1的青蒿琥酯鈉鹽濾液計量灌裝于西林瓶中，半蓋膠塞，冷凍干燥，壓塞，出箱，軋鋁蓋，即得凍干粉針劑。
實施例5片劑將530克實施例1的青蒿琥酯鈉鹽，316克的微晶纖維素、106克羥丙基纖維素、13克羥甲基淀粉鈉、5克微粉硅膠、5克硬脂酸鎂混合粉碎，采用本領域公知的方法制備成為片劑10,000片。
每片重量為0.0975克，每片含青蒿琥酯鈉鹽0.053克，經(jīng)檢測，含量為標示量的99.4％。
薄膜包衣片將530克實施例1的青蒿琥酯鈉鹽，316克的微晶纖維素、106克羥丙基纖維素、13克羥甲基淀粉鈉、5克微粉硅膠、5克硬脂酸鎂混合粉碎，采用本領域公知的方法制備成為素片10,000片，再以5克IV丙烯酸樹脂、乙醇適量，在包衣機內(nèi)包衣即得青蒿琥酯鈉鹽薄膜包衣片。
每片重量為0.098克，每片含青蒿琥酯鈉鹽0.053克，經(jīng)檢測，含量為標示量的99.2％。
膠囊劑
將530克實施例1的青蒿琥酯鈉鹽，1470克的乳糖、3％的羥丙基纖維素，采用本領域公知的方法制備成為膠囊10,000粒，每粒重量為0.21克，其中青蒿琥酯鈉鹽0.053克，經(jīng)檢測，含量為標示量的99.8％。
實施例6實施例1的化合物的抗瘧藥效學試驗將實施例4的青蒿琥酯鈉凍干粉針劑注射劑對實驗動物進行試驗，結果表明，青蒿琥酯鈉注射劑對鼠瘧、猴瘧、及體外培養(yǎng)的惡性瘧原蟲紅內(nèi)期無性體均顯示出很強的殺滅血液裂殖體的作用，而且具有高效、速效以及與氯喹無交叉耐藥性等特點。其殺蟲速度比目前臨床常用的抗瘧藥都快。
試驗方法青蒿琥酯鈉、二鹽酸奎寧各設33.5、10.6、3.35mg/kg三個劑量組.每組三只猴；每只猴靜脈接種5×108被寄生紅細胞.當瘧原蟲紅細胞寄生率達到2.5％時開始給藥.經(jīng)小腿后隱靜脈緩慢勻速推注；按此法每日給藥一次，連續(xù)7天，首次給藥后每4小時涂厚薄血片一次，24小時后每8小時涂一次；轉陰后每天涂一次至15天，15天后隔日一次.檢查瘧原蟲紅細胞寄生率.
實驗用體重為2000-3000克的恒河猴進行，把恒河猴分成3組，每組3只，與二鹽酸喹寧靜脈注射劑、青蒿琥酯注射劑平行對比，治療諾氏瘧原蟲感染的恒河猴。
采用靜脈注射的方法，將實施例4的制劑與二鹽酸喹寧注射于恒河猴，實施例4的制劑的劑量為，二鹽酸喹寧的劑量33.6mg/kg，青蒿琥酯注射劑的劑量3.36mg/kg，實施例4的制劑的劑量僅為二鹽酸喹寧的1/10，經(jīng)檢測，其殺蟲速度仍優(yōu)于喹寧，使原蟲減少90％的時間，青蒿琥酯鈉(3.36mg/Kg)13.2小時，而喹寧(33.6mg/Kg)為50.5小時，陰轉時間分別為40小時和104小時。試驗結果見表1。
表1青蒿琥酯鈉和二鹽酸奎寧靜脈注射對諾氏猴瘧原蟲紅內(nèi)期無性體的殺蟲速度結果的統(tǒng)計表

青蒿琥酯鈉和氯喹各設9個劑量組，仿Trager和Jensen氏微量血培養(yǎng)法(1976)。置37℃恒溫下連續(xù)培養(yǎng)48小時，涂薄血片鏡檢計數(shù)5000個紅細胞內(nèi)感染的乘原蟲數(shù)，求出各濃度藥井，以對照井原蟲平均寄生率為100％，計算各劑量組的減蟲率，

用回歸方法求出Ec50及Ec90.)結果表明青蒿琥酯鈉對體外培養(yǎng)的人體惡性瘧原蟲Fcc-1株的半數(shù)有效濃度Ec50為2.71×10-9M/ml，也優(yōu)于氯喹((3.70×10-9M/ml)。
一般藥理青蒿琥酯鈉在40倍抗鼠瘧SD90劑量(200mg/Kg)下，對小鼠神經(jīng)系統(tǒng)無明顯影響；只有在劑量增至300mg/Kg時才出現(xiàn)反應遲鈍等神經(jīng)系統(tǒng)抑制現(xiàn)象。16倍SD90劑量時對豚鼠、兔、狗、猴也無明顯影響；而在劑量增至32倍SD90(160mg/Kg)時，家兔才出現(xiàn)先興奮后抑制的腦電波。
青蒿琥酯鈉在32倍以下鼠瘧SD90劑量下對兔、狗的呼吸、血壓、心率、心電圖均無明顯影響；當劑量增至64倍SD90時，可見呼吸頻率和心率變慢，血壓下降，但心電圖仍正常。
青蒿琥酯鈉劑量在ED90的8倍時，對鼠、豚鼠、兔、狗、猴等實驗動物的神經(jīng)、呼吸、循環(huán)等系統(tǒng)未顯示出藥理活性。
實施例7毒理試驗本品的安全范圍較大，其半數(shù)致死量(LD50)在小鼠為769.0±69.7mg/Kg，大鼠為553.1±26.5mg/Kg，化療指數(shù)為792.8，安全指數(shù)為79.9，狗單次靜脈注射青蒿琥酯鈉，劑量在33mg/Kg，未見任何毒性作用，50mg以上/Kg時，僅有網(wǎng)織紅細胞一過性輕度下降，給狗靜脈注射，劑量為11.25mg/Kg/天，連續(xù)14天，無明顯毒性作用，劑量加倍，出現(xiàn)輕度中毒反應，劑量增至45mg/Kg天時，可致重度中毒，其表現(xiàn)為外周血網(wǎng)織紅細胞減少，停藥后一周恢復正常。
Ames實驗，小鼠骨髓微核試驗以及V79細胞染色體畸變試驗，結果均為陰性，表明該藥無致突變作用。
給雄性大鼠皮下注射青蒿琥酯鈉(6.5，13，26mg/Kg)，連續(xù)90天，對其生殖功能沒有影響，但給妊娠大鼠皮下注射青蒿琥酯鈉呈現(xiàn)一定的胚胎毒作用，表現(xiàn)為胚胎吸收。
實施例8藥代動力學對動物和人的藥代動力學進行了研究。靜脈注射后用RIA法測定血藥濃度。兔血藥濃度半衰期為12～23分鐘，狗20～30分鐘。本藥在動物體內(nèi)分布較廣，以腸、肝、腎較高。尿、便排泄物中僅有少量，主要為代謝產(chǎn)物。藥代動力學研究表明，血藥濃度時程為雙指數(shù)函數(shù)(二室開放模型)衰減，末相消除半衰期平均為38分鐘。尿藥排泄速度在給藥后30～80分鐘達高峰，其下降的時程變化與血藥時程變化基本一致，亦呈雙指數(shù)函數(shù)衰減，但末相消除較緩慢，平均消除半衰。
權利要求
1.一種青蒿琥酯鹽，其特征在于，結構通式為 其中M代表Na或K。
2.根據(jù)權利要求1所述的青蒿琥酯鹽，其特征在于，M代表Na或K。
3.根據(jù)權利要求2所述的青蒿琥酯鹽，其特征在于，所說的青蒿琥酯鹽為青蒿琥酯鈉鹽或青蒿琥酯鉀鹽。
4.一種藥物制劑，其特征在于，含有治療有效量的權利要求1、2或3所說的青蒿琥酯鹽和醫(yī)藥學上可接受的載體。
5.根據(jù)權利要求4所述的藥物制劑，其特征在于，所說的制劑為注射劑、凍干粉針劑、固體制劑如片劑、膠囊劑、顆粒劑或口服液。
6.根據(jù)權利要求1、2或3所述的青蒿琥酯鹽的制備方法，其特征在于，包括如下步驟在水或/和有機醇溶劑中，pH為6～8.5的條件下，將青蒿琥酯與碳酸氫鈉、碳酸鈉、氫氧化鈉、碳酸氫鉀、碳酸鉀或氫氧化鉀中的一種反應，優(yōu)選碳酸氫鈉，反應溫度為0～30℃，反應時間為5～60分鐘，收集反應產(chǎn)物。
7.根據(jù)權利要求6所述的方法，其特征在于，所說的有機醇溶劑選自C2～C4的一元醇。
8.根據(jù)權利要求6所述的方法，其特征在于，將碳酸氫鈉、碳酸鈉、氫氧化鈉、碳酸氫鉀、碳酸鉀或氫氧化鉀配制成為摩爾濃度為0.1～2mol/L的水溶液。
9.權利要求1、2或3所述的青蒿琥酯鹽在制備治療抗瘧、抗血吸蟲、無名高燒、節(jié)育、免疫調(diào)節(jié)劑或抗癌藥物中的應用。
10.權利要求1、2或3所述的青蒿琥酯鹽的儲藏條件為0～20℃。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種青蒿琥酯鹽及其制備方法和應用。在水或/和有機醇溶劑中，pH為6～8.5的條件下，將青蒿琥酯與碳酸氫鈉、碳酸鈉、氫氧化鈉、碳酸氫鉀、碳酸鉀或氫氧化鉀中的一種反應，即獲得目標產(chǎn)物。本發(fā)明的青蒿琥酯鈉鹽毒性較小，通過動物試驗證明與青蒿琥酯具有相同的治療作用和治療效果，但其在水中的溶解度卻大大提高，醫(yī)護人員可按常規(guī)注射操作，使用方便。結構通式為上式，其中M代表Na或K。
文檔編號C07D493/00GK1699370SQ20051002641
公開日2005年11月23日 申請日期2005年6月2日 優(yōu)先權日2005年6月2日
發(fā)明者嚴嘯華, 宋富文, 吳振賢, 陸福流, 黃勤, 邢利蘋 申請人:桂林制藥有限責任公司, 上海復星醫(yī)藥(集團)股份有限公司