專利名稱：取代二苯并[a,kl]呫噸化合物及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體的說涉及一類取代二苯并[a，kl]呫噸化合物及其應(yīng)用。
背景技術(shù)：
惡性腫瘤的危害已成為全球性的衛(wèi)生問題，它是一種死亡率僅次于心腦血管疾病的高危疾病。但對許多實(shí)體瘤如肝癌等惡性腫瘤仍缺乏療效明顯的藥物，因此，尋找選擇性強(qiáng)、毒副作用小而價(jià)格低廉的特效抗癌藥物仍是化學(xué)界、生物學(xué)界、醫(yī)學(xué)界、藥物學(xué)界的一個(gè)重要課題。
Tan D-M等(Tan D-M，Li H-H，Wang B，Liu H-B，Xu Z-L，Chin.J.Chem.，2001，1991)在進(jìn)行模擬氧化酶的研究中，發(fā)現(xiàn)1，1’-聯(lián)-2-萘酚在銅胺絡(luò)合物的催化下，被氧氣氧化為取代二苯并[a，kl]呫噸化合物。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有惡性腫瘤治療藥物存在的問題，提供一類取代二苯并[a，kl]呫噸化合物。
本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供上述取代二苯并[a，kl]呫噸化合物在制備抗癌藥物中的應(yīng)用。
本發(fā)明的取代二苯并[a，kl]呫噸化合物，其結(jié)構(gòu)如(I)式
R1為甲基或乙基；R2和R4為H、CH2OH、CONH2、CONHCH2CH2OH或COOCH3中的任一種；R3和R5為H或NO2中的任一種；R2、R3、R4、R5不同時(shí)為H。
本發(fā)明分別用3位和6位帶不同取代基的1，1’-聯(lián)-2-萘酚在Cu(II)-胺絡(luò)合物催化下進(jìn)行仿生氧化反應(yīng)，當(dāng)它們在各種低級醇溶劑中反應(yīng)時(shí)，生成相應(yīng)的取代二苯并[a，kl]呫噸化合物，如下所示 R1R2R3R4R5Ia CH3CH2OH HCH2OH HIb CH2CH3CH2OH H HHIc CH3H NO2HNO2Id CH3H HHNO2Ie CH3H HCONH2HIf CH3H HCOOCH3HIg CH3H HCONH(CH2)2OH HIh CH3CONH(CH2)2OH H H
上述取代二苯并[a，kl]呫噸化合物的優(yōu)選化合物為Ia、Ib、Ic、Id、Ie、If、Ig或Ih。
本發(fā)明的有益效果本發(fā)明合成的取代二苯并[a，kl]呫噸化合物具有顯著的抗癌活性，其選擇性強(qiáng)、毒副作用小且價(jià)格低廉，應(yīng)用前景廣闊。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1 取代二苯并[a，kl]呫噸化合物的合成1.取代二苯并[a，kl]呫噸化合物的通用合成方法一定量的取代聯(lián)萘酚加入到反應(yīng)的醇溶劑中，加入二氧六環(huán)作為助溶劑，再加入由等摩爾量的乙醇胺與CuCl2·2H2O組成的催化劑，在氧氣的存在下100℃以下反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后減壓蒸去大部分溶劑，加入稀氨水洗去銅胺絡(luò)合物，并用乙酸乙酯萃取有機(jī)物，所得有機(jī)物用柱層析的方法提純，得到相應(yīng)的化合物I。
2.化合物Ia的合成取0.346克(1.0mmol)3，3’-二羥甲基-1，1’-聯(lián)-2-萘酚加入到15毫升甲醇中，加入5毫升二氧六環(huán)作為助溶劑，再加入由等摩爾量的乙醇胺與CuCl2·2H2O組成的催化劑，在氧氣的存在下室溫反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后減壓蒸去大部分溶劑，加入15毫升稀氨水洗去銅胺絡(luò)合物，并用乙酸乙酯萃取有機(jī)物，所得萃取液濃縮后用柱層析的方法提純，得到0.300克相應(yīng)的化合物Ia，產(chǎn)率為84％，熔點(diǎn)112～114℃，1HNMR(500MHz，CD3OD)d8.030(s，1H)，8.008(d，J＝8.5Hz，1H)，7.834(d，J＝7.5Hz，1H)，7.445(t，J＝7.5Hz 8.5Hz，1H)，7.392(dt，J＝8.0Hz 9.0Hz，J＝1.5Hz，1H)，7.330(dt，J＝8.0Hz 9.0Hz，J＝1.0Hz，1H)，7.180～7.128(m，3H)，4.974(s，2H)，4.547(dd，J＝15Hz，J＝1.5Hz，1H)，4.398(dd，J＝15Hz，J＝1.5Hz，1H)，2.772(s，3H)；IR(KBr，cm-1)ν3529，3383，3058，2926，1703，1582，1429，1286，1053，753；FAB-MS，m/z(％)357([M-OH]+，4)，343([M-OCH3]+，30)，312([M-OCH3-CH2OH]+，14).Anal.calcd for C23H18O5C73.79，H4.85；found C 74.15，H4.94.
3.Ib的合成取0.316克(1.0mmol)3-羥甲基-1，1’-聯(lián)-2-萘酚加入到15毫升乙醇中，加入5毫升二氧六環(huán)作為助溶劑，再加入由等摩爾量的乙醇胺與CuCl2·2H2O組成的催化劑，在氧氣的存在下室溫反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后減壓蒸去大部分溶劑，加入15毫升稀氨水洗去銅胺絡(luò)合物，并用乙酸乙酯萃取有機(jī)物，所得萃取液濃縮后用柱層析的方法提純，得到0.339克相應(yīng)的化合物，產(chǎn)率94.8％，熔點(diǎn)140～142℃，1H NMR(300MHz，DMSO-d6)d8.05(d，J＝9.0Hz，1H)，8.01～7.98(m，1H)，7.96～7.89(m，1H)，7.51(d，J＝7.4Hz，1H)，7.46～7.38(m，3H)，7.28(d，J＝7.0Hz，1H)，7.18(1H，s)，7.15(d，J＝9.0Hz，1H)，4.43～4.30(m，2H)，2.85～2.80(m，1H)，2.78～2.64(m，1H)，0.80(t，J＝7.0Hz，3H)；IR(KBr，cm-1)ν3408，3059，2968，1701，1571，1428，1236，1051，754；FAB-MS，m/z(％)358([M]+，9)，329([M-C2H5]+，10)，313([M-OC2H5]+，57).Anal.calcd for C23H18O4C 77.08，H 5.06；found C 77.11，H 4.94.
4.Ic的合成4mmol的CuCl2·2H2O加入到30mL甲醇溶劑中，溶解后加入等摩爾量的乙醇胺，形成銅胺絡(luò)合物溶液。然后加入1mmol的6，6’-二硝基-1，1’-聯(lián)-2-萘酚，再加入二氧六環(huán)直至剛好能把6，6’-二硝基-1，1’-聯(lián)-2-萘酚溶解完全為止。攪拌下加熱到50～70℃，在氧氣的存在下反應(yīng)。薄層色譜跟蹤至原料消失。反應(yīng)結(jié)束后減壓蒸餾回收大部分溶劑，加入5％氨水，再加入乙酸乙酯抽提，有機(jī)層用水洗至中性，加入無水硫酸鈉干燥，減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)回收乙酸乙酯，用140～200目硅膠柱層析(石油醚-乙酸乙酯洗脫)得到0.263克產(chǎn)品。產(chǎn)率65％，熔點(diǎn)289～291℃。1H NMR(500MHz，DMSO-d6/TMS)δ2.80(s，3H，)，6.50(d，J＝10Hz，1H)，7.64(d，J＝10Hz，1H)，7.69(d，J＝9.0Hz，1H)，8.12(d，J＝2.0Hz，1H)，8.13(d，J＝9.5Hz，1H)，8.14(s，1H，6-H)，8.18(d，3J＝9.5Hz，J＝2.5Hz，1H)，8.48(d，J＝9.0Hz，1H)，9.02(s，1H)；IR(KBr，cm-1)ν2926，1730，1613，1538，1340，817；FAB-MS，m/z405([M+H]+，2.5)，404(M+，2)，389(M+-CH3，1.5)，373(M+-OCH3，1)；Anal.ForC21H12N2O7CalcdC，62.38，H，2.97，N，6.93.FoundC，62.48，H，2.96，N，6.95.
5.Id的合成取0.347克(1.0mmo1)6-硝基-1，1’-聯(lián)-2-萘酚加入到15毫升甲醇中，加入5毫升二氧六環(huán)作為助溶劑，再加入由等摩爾量的乙醇胺與CuCl2·2H2O組成的催化劑，在氧氣的存在下50～70℃反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后減壓蒸去大部分溶劑，加入15毫升稀氨水洗去銅胺絡(luò)合物，并用乙酸乙酯萃取有機(jī)物，所得萃取液濃縮后用柱層析的方法提純，得到0.339克相應(yīng)的化合物Id，產(chǎn)率94.5％，熔點(diǎn)168～169℃。1H NMR(500MHz，DMSO-d6/TMS)δ2.73(s，3H)6.33(d，J＝10Hz，1H)，7.30(d，J＝8.5Hz，1H)，7.35(d，J＝7.5Hz，1H)，7.47(d，J＝10Hz，1H)，7.57(dd，J＝8.0Hz，J＝7.5Hz，1H)，7.66(d，J＝9.5Hz，1H)，8.13～8.17(m，2H)，8.32(d，J＝9.0Hz，1H)，9.00(s，1H)；IR(KBr，cm-1)ν2924，1800，1575，1339，812；FAB-MS，m/z360([M+H]+，1)，359(M+，0.8)，344(M+-CH3，2)，328(M+-OCH3，4)，313(M+-NO2，3)；Anal.For C21H13NO5CalcdC，70.19，H，3.62，N，3.90.FoundC，70.25，H，3.64，N，3.92.
6.Ie的合成取0.329克(1.0mmol)3-酰胺基-1，1’-聯(lián)-2-萘酚加入到15毫升甲醇中，加入5毫升二氧六環(huán)作為助溶劑，再加入由等摩爾量的乙醇胺與CuCl2·2H2O組成的催化劑，在氧氣的存在下室溫反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后減壓蒸去大部分溶劑，加入15毫升稀氨水洗去銅胺絡(luò)合物，并用乙酸乙酯萃取有機(jī)物，所得萃取液濃縮后用柱層析的方法提純，得到0.250克相應(yīng)的化合物Ie，產(chǎn)率，70％，熔點(diǎn)＞320℃，1H NMR(300MHz，DMSO-d6)d8.53(s，1H)，8.13(d，J＝9.0Hz，1H)，7.95(d，J＝9.0Hz，1H)，7.70(2H)，7.56(t，J＝9.0Hz 9.0Hz，1H)，7.52～7.43(m，2H)，7.40(d，J＝10Hz，1H)，7.32(d，J＝7.0Hz，1H)，7.21(d，J＝8.0Hz，1H)，6.16(d，J＝10Hz，1H)，2.82(s，3H)；IR(KBr，cm-1)ν3478，3054，2928，1705，1674，1575，1384，1263，1055，810，750；FAB-MS，m/z(％)358([M+H]+，7).Anal.calcd for C22H15NO4.H2OC 70.40，H 4.53，N 3.73；found C 71.18，H 4.42，N 3.62..
7.If的合成
取0.344克(1.0mmol)3-甲氧?；?1，1’-聯(lián)-2-萘酚加入到15毫升甲醇中，加入5毫升二氧六環(huán)作為助溶劑，再加入由等摩爾量的乙醇胺與CuCl2·2H2O組成的催化劑，在氧氣的存在下室溫反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后減壓蒸去大部分溶劑，加入15毫升稀氨水洗去銅胺絡(luò)合物，并用乙酸乙酯萃取有機(jī)物，所得萃取液濃縮后用柱層析的方法提純，得到0.342克相應(yīng)的化合物If，產(chǎn)率92％，熔點(diǎn)124～126℃，1H NMR(300MHz，Acetone-d6)d8.49(s，1H)，8.31～8.04(m，1H)，8.03～8.01(m，1H)，7.57～7.48(m，3H)，7.39(d，J＝10Hz，1H)，7.29(d，J＝7.5Hz，1H)，7.23(dd，J＝8.6Hz，J＝1.0Hz，1H)，6.27(d，J＝10Hz，1H)，3.99(s，3H)，2.81(s，3H)；IR(KBr，cm-1)ν3381，3334，3062，2931，2886，2816，1708，1635，1456，1347，1052，750；FAB-MS，m/z(％)373([M+H]+，30)，341([M-OCH3]+，95)，313([M-CO2CH3]+，25)，282([M-CO2CH3-OCH3]+，43).Anal.calcd for C23H16O5C 74.19，H 4.33；found C 74.56，H 4.49.
8.Ig的合成取0.373克(1.0mmol)3-(N-羥乙基酰胺基)-1，1’-聯(lián)-2-萘酚加入到15毫升甲醇中，加入5毫升二氧六環(huán)作為助溶劑，再加入由等摩爾量的乙醇胺與CuCl2·2H2O組成的催化劑，在氧氣的存在下室溫反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后減壓蒸去大部分溶劑，加入15毫升稀氨水洗去銅胺絡(luò)合物，并用乙酸乙酯萃取有機(jī)物，所得萃取液濃縮后用柱層析的方法提純，得到0.120克相應(yīng)的化合物Ig，產(chǎn)率30％，熔點(diǎn)156～158℃，1H NMR(500MHz，CD3OD)d8.069(d，J＝9.0Hz，1H)，7.910(d，J＝7.5Hz，1H)，7.486～7.413(m，3H)，7.290(d，J＝10.0Hz，1H)，7.245(d，J＝9.0Hz，1H)，7.204(d，J＝7.0Hz，1H)，6.212(d，J＝10.0Hz，1H)，3.821(t，J＝5.5Hz 5.5Hz，2H)，3.672(dt，J＝7.5Hz，7.5Hz，J＝2.0Hz，2H)，2.820(s，3H)；IR(KBr，cm-1)v3421，3380，3053，2925，1708，1620，1532，1425，1226，1048，756；FAB-MS，m/z(％)401([M]+，3)，371([M-OCH3]+，23)；Anal.calcd for C24H19NO5C 71.81，H 4.77，N 3.49；found C 71.43，H 4.87，N 3.34.
9.Ih的合成取0.373克(1.0mmol)3-(N-羥乙基酰胺基)-1，1’-聯(lián)-2-萘酚加入到15毫升甲醇中，加入5毫升二氧六環(huán)作為助溶劑，再加入由等摩爾量的乙醇胺與CuCl2·2H2O組成的催化劑，在氧氣的存在下室溫反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后減壓蒸去大部分溶劑，加入15毫升稀氨水洗去銅胺絡(luò)合物，并用乙酸乙酯萃取有機(jī)物，所得萃取液濃縮后用柱層析的方法提純，得到0.146克相應(yīng)的化合物Ig，產(chǎn)率36.3％，熔點(diǎn)158～160℃，1H NMR(500MHz，CD3OD)d8.056(s，1H)，8.041～8.031(m，1H)，7.983(d，J＝8.0Hz，1H)，7.864～7.845(m，1H)，7.531(t，J＝7.0Hz 8.5Hz，1H)，7.427～7.406(m，2H)，7.390～7.372(m，2H)，7.268(dd，J＝8.5HzJ＝1.0Hz，1H)，3.699(dt，J＝7.5Hz 6.5Hz，J＝2.0Hz，2H)，3.542～3.478(m，2H)，2.775(s，3H)；IR(KBr，cm-1)ν3381，3334，3062，2931，2886，2816，1708，1635，1456，1052，750；FAB-MS，m/z(％)401([M]+，3)，370([M-OCH3]+，23).Anal.calcd for C24H19NO5C 71.81，H 4.77，N3.49；found C 71.50，H 4.80，N 3.31.
實(shí)施例2 取代二苯并[a，kl]呫噸化合物的體外抗癌試驗(yàn)和細(xì)胞毒性試驗(yàn)(MTT比色法)。
以Ia～I(xiàn)h這八個(gè)化合物為例，其中，MCG803為胃癌細(xì)胞、HEPG2為肝癌細(xì)胞、GLC82為肺癌細(xì)胞、CNE-2為鼻咽癌細(xì)胞、KB-3-1為口腔上皮癌細(xì)胞。
把3×104/mL的細(xì)胞株7402接種于96孔培養(yǎng)板中，每孔加入200μL，用10％MEM培養(yǎng)基培養(yǎng)。溫箱中培養(yǎng)24h后去掉培養(yǎng)液，加入新配制培養(yǎng)液，并分別加入一系列濃度的待測藥物的DMSO溶液，每孔加入200μL，每劑量組設(shè)三個(gè)平行樣本，培養(yǎng)48h后每孔加入2mg/mL的MTT溶液20μL，培養(yǎng)40h。完全吸出孔內(nèi)培養(yǎng)液，各加入150μL的DMSO，震蕩10分鐘使結(jié)晶物溶解。用酶聯(lián)檢測儀檢測各孔OD值(＝490nm)；以O(shè)D值對藥物濃度的對數(shù)作圖，從圖上求出令半數(shù)細(xì)胞死亡的藥物濃度即IC50。
結(jié)果見表1。
表1 抗腫瘤活性測試結(jié)果化合物IC50(μg/mL) IC50(μg/mL) IC50(μg/mL) IC50(μg/mL) IC50(μg/mL)(MCG8030) (CNE-2) (HEPG2) (GLC82) (KB-3-1)Ia25.8 ＞100 15.5 24.3__Ib17.4 22.4 11.2 14.2__Ic4.0 5.5 __ __ 5.0Id7.5 9.6 __ __ 8.8Ie4.4 6.4 11.4 6.1 __If17.2 16.7 8.97.1 __Ig6.1 21.5 9.16.2 __Ih28.4 36.1 16.3 23.0__以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，Ia～I(xiàn)h這八個(gè)化合物分別對胃癌細(xì)胞(MCG803)、肝癌細(xì)胞(HEPG2)、肺癌細(xì)胞(GLC82)、鼻咽癌細(xì)胞(CNE-2)和口腔上皮癌細(xì)胞(KB-3-1)具有明顯的抗癌活性。
權(quán)利要求
1.取代二苯并[a，kl]呫噸化合物，其結(jié)構(gòu)如(I)式 R1為甲基或乙基；R2和R4為H、CH2OH、CONH2、CONHCH2CH2OH或COOCH3中的任一種；R3和R5為H或NO2中的任一種；R2、R3、R4、R5不同時(shí)為H。
2.如權(quán)利要求1所述的取代二苯并[a，kl]呫噸化合物，其特征在于所述的化合物為Ia、Ib、Ic、Id、Ie、If、Ig或Ih。
3.權(quán)利要求1或2所述的取代二苯并[a，kl]呫噸化合物在制備抗癌藥物中的應(yīng)用。
4.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于所述的抗癌為抗胃癌、抗肝癌、抗肺癌、抗鼻咽癌或抗口腔上皮癌。
全文摘要
本發(fā)明公開了一類取代二苯并[a，k1]呫噸化合物及其應(yīng)用。本發(fā)明的取代二苯并[a，k1]呫噸化合物具有顯著的抗癌活性，其選擇性強(qiáng)、毒副作用小且價(jià)格低廉，應(yīng)用前景廣闊。
文檔編號C07D311/00GK1687055SQ200510034130
公開日2005年10月26日 申請日期2005年4月15日 優(yōu)先權(quán)日2005年4月15日
發(fā)明者許遵樂, 冼勵(lì)堅(jiān), 王秀珍, 蒲興祥, 陳泳, 龐冀燕, 汪波 申請人:中山大學(xué)