專利名稱：一種用海星殼制備膠原蛋白肽的工藝方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用海星殼制備膠原蛋白肽的工藝方法背景技術(shù)膠原蛋白(Collagen)是一種高分子蛋白質(zhì)，是動物體內(nèi)含量最多的蛋白質(zhì)，約占人體蛋白質(zhì)的25～33％，相當于人體重的6％。它遍及全身各個組織器官，如骨骼、軟骨、韌帶、皮膚、角膜、各種內(nèi)膜筋膜等等。其主要功能是維持皮膚和組織器官的形態(tài)和結(jié)構(gòu)、也是修復各損傷組織的重要材料。骨骼中有機物成分中有70％～80％是膠原蛋白，骨骼生成時，必須首先合成充足的膠原蛋白纖維來組成骨骼的框架。因此，有人稱膠原蛋白為骨骼中的骨骼。膠原蛋白也是皮膚中的主要成分，占皮膚中蛋白質(zhì)含量的71％以上。皮膚的生長、修復和營養(yǎng)供給都離不開膠原蛋白。膠原蛋白可使肌膚充盈，保持皮膚彈性與潤澤，維持皮膚細膩光滑，皺紋舒展，呈現(xiàn)質(zhì)感和透明感，有效防止老化。膠原蛋白與皮膚保健的兩大關(guān)鍵因素—抗皺與保濕都有關(guān)，且還在修復皮膚中有明顯功效。
廣泛用于食品、化妝品和飲料作為添加劑的膠原蛋白肽的主要來源是動物的皮、骨骼、肌腱和胎盤等，由于病原菌的侵入，瘋牛病、瘋羊病等疾病的不斷出現(xiàn)，哺育類動物的膠原蛋白來源受到極大的沖擊，而海星在沿海地區(qū)資源豐富且廉價易得，可以將其廢棄的海星殼(去除內(nèi)臟的殼體)作為新資源進行深度開發(fā)成高附加值產(chǎn)品，并且以新的工藝來制取膠原蛋白肽的純度更高。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的是充分利用海星殼作為膠原蛋白肽資源，提供一種用海星殼制備膠原蛋白肽的工藝方法。
本發(fā)明的方法是利用海星殼作為提取材料，首先將海星殼用水洗凈后放在稀堿水中浸泡除去其中的雜蛋白，然后加入稀鹽酸對海星殼進行脫鈣處理，再以醋酸溶液和酸性蛋白酶抽提并離心得到粗品膠原蛋白肽溶液，將上述粗品膠原蛋白肽溶液通過大孔樹脂去除海星皂甙類有毒物質(zhì)和色素等雜質(zhì)成分得到純品膠原蛋白肽清液，最后真空冷凍干燥得到膠原蛋白肽干品。所述真空冷凍干燥條件是將所得清液-20℃預冷凍，裝到凍干機進行真空冷凍，溫度降到-54℃以下，真空度達到5mtorr干燥24小時以上；所述稀堿溶液可取NaOH或NaHCO3其質(zhì)量與水體積比為0.5-1‰；醋酸(HAc)在水溶液中濃度為0.5～1％；所述酸性蛋白酶是胃蛋白酶，且胃蛋白酶與海星殼的質(zhì)量比為1∶100為宜。
該工藝的主要特點操作簡單；利用大孔吸附樹脂除去海星殼內(nèi)色素及皂甙類有毒物質(zhì)等雜質(zhì)成分，制得膠原蛋白肽純度更高；可溶性好，常溫水相即可溶解；無異味、苦味；充分利用海星殼為原材料，成本低廉，具有很高的經(jīng)濟價值。
具體實施例方式1、海星殼用水洗凈撈出，放入0.5～1‰NaOH水溶液中，浸泡24～36小時，中間換液2～3次，以去除海星殼上的雜蛋白；2、將海星殼放入1～2％鹽酸溶液中浸泡，進行脫鈣處理，每隔一定時間換酸液一次，直至加入酸液無氣泡冒出后撈出海星殼。
3、將上述處理好的海星殼放入0.5～1％HAc溶液中，同時加入胃蛋白酶進行抽提，條件為pH＝2-3，24～36小時，加酶量1∶100(酶∶海星殼)；4、6000g離心30分鐘收集上清液得到粗品膠原蛋白肽溶液；5、取上清液通過AB-8大孔樹脂柱去除皂甙類有毒物質(zhì)和其他雜質(zhì)成分；6、將清液-20℃預冷凍、裝到凍干機進行真空冷凍，溫度降到-54℃以下，真空度達到5mtorr干燥24小時以上，即得到膠原蛋白肽干品。
實施例11.將20克去除海星內(nèi)臟的海星殼用水洗凈撈出放入200mL 0.1％NaOH水溶液中，浸泡24小時，中間換液3次，以徹底去除海星殼上的雜蛋白；2.將海星殼放入2％鹽酸溶液中浸泡進行脫鈣處理，無氣泡冒出后換酸液，直至新加入酸液無氣泡冒出后撈出海星殼。
3.將海星殼放入100mL 0.5％HAc溶液中，同時加入0.2克胃蛋白酶進行抽提，條件為pH＝3，36小時，并用磁力攪拌器攪拌；4.6000g離心30分鐘去除沉淀收集上清液；如果所收集液體中仍有少許混濁，可用濾紙抽濾除去不溶成分，得到粗品膠原蛋白肽溶液；5.取上清液以一定流速通過AB-8大孔樹脂柱處理，去除皂甙類有毒物質(zhì)和色素等雜質(zhì)成分；6.為進一步去除上述溶液中的鹽分，使所提膠原蛋白純度更高，最好再用蒸餾水作外液對抽提液進行透析24h，每隔6h更換一次透析外液；如果溶液中有沉淀產(chǎn)生可用3000g離心30分鐘后收集上清液；7.將所得上清液-20℃預冷凍、裝到凍干機進行真空冷凍，溫度降到-54℃以下，真空度達到5mtorr干燥24小時以上，即得到膠原蛋白肽干品。
實施例21.將50克去除海星內(nèi)臟的海星殼用水洗凈撈出放入500mL 0.5‰NaHCO3水溶液中，浸泡36小時，中間換液2次，以徹底去除海星殼上的雜蛋白；2.將海星殼放入1％鹽酸溶液中浸泡，進行脫鈣處理，無氣泡冒出后即換酸液，直至新加入酸液無氣泡冒出后撈出海星殼。
3.將海星殼放入250mL 1％HAc溶液中，同時加入0.5克胃蛋白酶進行抽提，條件為pH＝2，30小時，并用磁力攪拌器攪拌使抽提充分；4.6000g離心30分鐘去除沉淀收集上清液；如果所收集液體中仍有少許混濁，可用濾紙抽濾除去不溶成分得到粗品膠原蛋白肽溶液；5.取上清液以一定流速通過AB-8大孔樹脂柱處理，去除皂甙類有毒物質(zhì)和色素等雜質(zhì)成分；6.考慮到進一步去除溶液中的鹽分，使所提膠原蛋白純度更高，最好再用蒸餾水作為外液對抽提液進行透析，條件同上；7.將所得清液-20℃預冷凍，裝到凍干機進行真空冷凍，溫度降到-54℃以下，真空度達到5mtorr干燥24小時以上，即得膠原蛋白肽干品。
權(quán)利要求
1.一種用海星殼制備膠原蛋白肽的工藝方法，首先將海星殼用水洗凈后放在稀堿水中浸泡，然后加入稀鹽酸對海星殼進行脫鈣處理，再以醋酸溶液和酸性蛋白酶抽提并離心得到粗品膠原蛋白肽溶液。
2.如權(quán)利1所述的工藝方法，其特征是將上述粗品膠原蛋白肽溶液通過大孔樹脂得到純品膠原蛋白肽清液，最后真空冷凍干燥得到膠原蛋白肽干品。
3.如權(quán)利1所述的工藝方法，其特征是所述的稀堿溶液為NaOH或NaHCO3質(zhì)量其與水體積比為0.5-1‰。
4.如權(quán)利1所述的工藝方法，其特征是所述的醋酸在水溶液中濃度為0.5～1％。
5.如權(quán)利1所述的工藝方法，其特征是所述的所述酸性蛋白酶是胃蛋白酶，且胃蛋白酶與海星殼的質(zhì)量比為1∶100。
6.如權(quán)利2所述的工藝方法，其特征是真空冷凍干燥條件是將所得清液-20℃預冷凍，裝到凍干機進行真空冷凍，溫度降到-54℃以下，真空度達到5mtorr干燥24小時以上。
全文摘要
一種用海星殼制備膠原蛋白肽的工藝方法。利用海星殼作為提取材料，首先將海星殼用水洗凈后放在稀堿水中浸泡除去其中的雜蛋白，然后加入稀鹽酸對海星殼進行脫鈣處理，再以醋酸溶液和酸性蛋白酶抽提并離心得到粗品膠原蛋白肽溶液，將上述粗品膠原蛋白肽溶液通過大孔樹脂去除海星皂甙類有毒物質(zhì)和色素等雜質(zhì)成分得到純品膠原蛋白肽清液，最后真空冷凍干燥得到膠原蛋白肽干品。所述酸性蛋白酶是胃蛋白酶。本發(fā)明充分利用海星殼為原材料，操作簡單成本低廉，利用大孔吸附樹脂除去海星殼內(nèi)色素及皂甙類有毒物質(zhì)等雜質(zhì)成分，制得膠原蛋白肽純度更高；可溶性好，常溫水相即可溶解；無異味、具有很高的經(jīng)濟價值。
文檔編號C07K14/435GK1740199SQ20051004412
公開日2006年3月1日 申請日期2005年7月17日 優(yōu)先權(quán)日2005年7月17日
發(fā)明者郭瑞超, 叢日山, 韓力揮, 樊廷俊, 袁文鵬, 湯志宏, 楊秀霞 申請人:中國海洋大學