專利名稱：新型腺嘌呤多肽化合物的合成和的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及具有優(yōu)良腫瘤顯像和乏氧顯像效果的99Tcm、186Re的標(biāo)記的腺嘌呤肽化合物；因標(biāo)記物(2)不穩(wěn)定等特性難以通過波譜學(xué)測定其結(jié)構(gòu)，因此本發(fā)明還涉及腺嘌呤肽分子(1)的合成。186Re標(biāo)記的腺嘌呤肽分子為腫瘤治療劑，199Tcm標(biāo)記的腺嘌呤肽分子為腫瘤顯像劑和乏氧顯像劑。
背景技術(shù)：
腺嘌呤是人體內(nèi)主要的生物堿之一，是腺苷和核苷酸(而核苷酸又是DNA和RNA的重要成份)的重要組成成份，許多含有生物堿的地物質(zhì)(如葉酸衍生物等)具有較強(qiáng)的親腫瘤活性，尤其是腺嘌呤在腫瘤藥物的研究中已經(jīng)成為熱點(diǎn)修飾官能團(tuán)之一，在放射藥物研究中也有不少效果較好的研究，雖然放射性藥物中與肽的結(jié)合研究很少，但在心腫瘤藥中與肽的結(jié)合也是很關(guān)注的研究；分子肽不僅是四配位配體的雙功能連接劑，也是目前腫瘤顯像劑研究的熱點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明還提供含有本發(fā)明化合物作為配體，該配體可以通過波譜學(xué)確定結(jié)構(gòu)，且與結(jié)構(gòu)式(2)[結(jié)構(gòu)式(2)因含放射性核素而不穩(wěn)定，難以通過譜圖測定]緊密相連的重要部分。
其中R1、R2、R3為H、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、苯基、芐基，R4為H、Tr，n為0，1，2，……20。
其中R1、R2、R3為H、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、苯基、芐基，M＝99Tcm、186Re，n為0，1，2，……20。
本發(fā)明的化合物(1)是如下化合物，其中R2為H時(shí)，R1，R3為H、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、苯基、芐基，R4為H，Tr，n為0，1，2，……20。
本發(fā)明的化合物(1)是如下化合物，其中R2為甲基時(shí)，R1，R3為H、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、苯基、芐基，R4為H，n為0，1，2，……20。
本發(fā)明的化合物(1)是如下化合物，其中R2為乙基時(shí)，R2，R3為H，甲基，乙基，丙基，異丙基，丁基，苯基，芐基，R4為Tr，n為0，1，2，……20。
本發(fā)明的化合物(1)是如下化合物，其中R2為丙基時(shí)，R1，R3為H、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、苯基、芐基，R4為H，n為0，1，2，……20。
本發(fā)明的化合物(1)是如下化合物，其中R2為異丙基時(shí)，R1，R3為H、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、苯基、芐基，R4為Tr，n為0，1，2，……20。
本發(fā)明的化合物(1)是如下化合物，其中R2為丁基時(shí)，R1，R3為H、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、苯基、芐基，R4為H，n為0，1，2，……20。
本發(fā)明的化合物(1)是如下化合物，其中R2為苯基時(shí)，R1，R3為H，甲基，乙基，丙基，異丙基，丁基，苯基，芐基，R4為Tr，n為0，1，2，……20。
本發(fā)明的化合物(1)是如下化合物，其中R2為芐基時(shí)，R1，R3為H，甲基，乙基，丙基，異丙基，丁基，苯基，R4為H，n為0，1，2，……20。
本發(fā)明的化合物(2)是如下化合物，其中R2為H時(shí)，M＝99Tcm、186Re，R1、R3為H、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、苯基、芐基，R4為H、Tr，n為0、1，2、……20。
本發(fā)明的化合物(2)是如下化合物，其中M＝99Tcm，186Re，R2為甲基時(shí)，R1，R3為H，甲基，乙基，丙基，異丙基，丁基，苯基，芐基，R4為H，n為0，1，2，……20。
本發(fā)明的化合物(2)是如下化合物，其中M＝99Tcm，186Re，R2為乙基時(shí)，R1，R3為H，甲基，乙基，丙基，異丙基，丁基，苯基，芐基，R4為Tr，n為0，1，2，……20。
本發(fā)明的化合物(2)是如下化合物，其中M＝99Tcm，186Re，R2為炳基時(shí)，R1，R3為H、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、苯基、芐基，R4為H，n為0，1，2，……20。
本發(fā)明的化合物(2)是如下化合物，其中M＝99Tcm，186Re，R2為異丙基時(shí)，R1，R3為H、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、苯基、芐基，R4為Tr，n為0，1，2，……20。
本發(fā)明的化合物(2)是如下化合物，其中M＝99Tcm，186Re，R2為丁基時(shí)，R1，R3為H，甲基，乙基，丙基，異丙基，丁基，苯基，R4為H，n為0，1，2，……20。
本發(fā)明的化合物(2)是如下化合物，其中M＝99Tcm，186Re，R2為苯基時(shí)，R1，R3為H、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、苯基、芐基，芐基，R4為Tr，n為0，1，2，……20。
本發(fā)明的化合物(2)是如下化合物，其中M＝99Tcm，186Re，R2為芐基時(shí)，R1，R3為H、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、苯基、芐基，R4為H，n為0，1，2，……20。
本發(fā)明還提供制備式(1)、(2)化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽，絡(luò)合物，和相應(yīng)藥理作用的應(yīng)用。包括以下步驟(I)按下列路線合成小肽配體 (反應(yīng)式1)上述反應(yīng)(a)，通過先將化合物(a1)的-SH實(shí)施保護(hù)，再將羥基活化成活潑酯(a2)，再在堿性條件下與氨基酸反應(yīng)形成肽鏈(a3)，最后在與甘氨酸二肽反應(yīng)形成小肽配體(a4)制備化合物(a2)的反應(yīng)通常在有機(jī)溶劑(如二氯甲烷，氯仿)中，先將化合物(a1)與等摩爾的三苯基氯化物反應(yīng)生成TrSCH2COOH，此反應(yīng)優(yōu)選在室溫進(jìn)行一個(gè)小時(shí)。
生成TrSCH2COOH在常規(guī)的有機(jī)溶劑(如二氯甲烷，氯仿，四氫呋喃)及縮合劑(如DCC)中，與等摩爾的NHS反應(yīng)得化合物(a2)。
此反應(yīng)優(yōu)選在無水四氫呋喃，于零度到室溫反應(yīng)18個(gè)小時(shí)。
所得化合物(a2)在堿性條件下(如氫氧化鈉，碳酸鉀，碳酸鈉)，與氨基酸反應(yīng)得化合物(a3)。
此反應(yīng)優(yōu)選在氫氧化鈉水溶液中，控制反應(yīng)溫度50-60度之間，回流兩個(gè)小時(shí)。
重復(fù)操作將化合物(a3)經(jīng)羧基活化，最后與甘氨酸二肽反應(yīng)形成小肽配體(a4)。
(II)按下列路線合成疊氮化物
(反應(yīng)式2)(III)按反應(yīng)式1的路線合成小肽分子 (反應(yīng)式3)上述反應(yīng)(b1)為在弱堿條件下，引進(jìn)疊氮基得化合物b2，再還原為化合物b3。
制備化合物b2得反應(yīng)利用嘌呤環(huán)氮上H的酸性，用弱堿(如無水碳酸鉀，碳酸鈉)脫氫，1摩爾化合物b1與2摩爾疊氮化物反應(yīng)。
反應(yīng)優(yōu)選在弱堿無水碳酸鈉條件下，溫度在50-60度之間進(jìn)行。
所得化合物b2還原為化合物b3。
還原包括Pd/C，Ph3P/H2反應(yīng)優(yōu)選在有機(jī)溶劑(如THF)，在氫氣存在下，用Ph3P作還原劑，室溫下反應(yīng)。
上述反應(yīng)(c)為在肽縮合劑存在下，形成小肽分子。肽縮合劑包括BOP和DIPEA、DCC和DMA，P反應(yīng)優(yōu)選用縮合劑BOP和DIPEA，反應(yīng)5個(gè)小時(shí)。
具體實(shí)施例方式以下通過實(shí)施具體實(shí)例進(jìn)一步說明本發(fā)明，但并不限制本發(fā)明。
實(shí)施例7-N-(三苯基硫代乙酰三甘氨酰乙基)硫唑嘌呤7-N-(三苯基硫代乙酰丙氨酸二甘氨酰乙基)硫唑嘌呤7-N-(三苯基硫代乙酰頡氨酸二甘氨酰乙基)硫唑嘌呤7-N-(三苯基硫代乙酰二甘氨酰乙基)硫唑嘌呤下列小肽配體簡稱為
(反應(yīng)式4) (反應(yīng)式5)1)小肽配體的制備(1)羧基的活化在20mL三口燒瓶，裝上配有干燥管的冷凝管和溫度計(jì)，攪拌下加入TrCH2COOH(3mmol)和NHS(3mmol)的無水THF溶液(4mL)，冰鹽浴冷卻至-5～0℃，10min以后，逐漸加入DCC(3mL)的無水THF溶液，然后維持-5-0℃反應(yīng)2小時(shí)，有大量白色沉淀生成。繼續(xù)在室溫下攪拌16小時(shí)，停止反應(yīng)。濾掉沉淀，用冷CH2Cl2充分洗滌，旋蒸掉溶劑，得粗產(chǎn)品。在乙酸乙酯中重結(jié)晶，得無色棱狀晶體1.10g，產(chǎn)率91％。m.p.177.5-178.3℃IR(KBr，cm-1)3070(w)，1790，1745(活潑酯特征峰)；1630，1580，1495，1445。
(2)化合物Tr-MAG的合成(參考文獻(xiàn)Synthesis of novel N3S pseudo-peptide andbiodistribution of Tc-99(m)-pseudo-peptide complexes in mice，齊傳民、楊凌春、張華北等，MEDICINAL CHEMISTRY RESEARCH 11(6)345-359，2002)在裝有冷凝管和攪拌裝置的500mL燒瓶中，加入活潑酯(0.012mol)和250mL乙腈，攪拌溶解后緩慢升高溫度。控制在50-60℃間，緩慢加入氨基酸1)和60mL(0.012mol)的0.2MNaOH水溶液，然后回流2h。TLC跟蹤反應(yīng)，原料消失。停止反應(yīng)，溶液成中性。冰浴后用稀H2SO4調(diào)節(jié)PH值約為1，得到白色沉淀。
(3)羧基的再次活化在配備有溫度計(jì)，冷凝管(加干燥管)和攪拌器的25mL三口燒瓶中，加入上一步產(chǎn)物0.002mol，NHS(0.002mol)和無水THF(7.0mL)，室溫下攪拌10min。冰浴降溫至0-5℃，加入DCC(0.002mol)的無水THF(4mL)溶液，出現(xiàn)白色沉淀，然后維持溫度0～5℃繼續(xù)反應(yīng)2h，攪拌過夜，終止反應(yīng)。過濾旋干，用乙醚研制后，用大量水洗滌。然后烘干。IR顯示1820cm-1，1780cm-1和1740cm-1有活潑酯的特征酯吸收峰。
(4)四齒配體的合成在配備冷凝管和攪拌器的100mL燒瓶中，加入Tr-MAV的活潑酯(0.028mo乙腈，然后升溫至50℃左右，緩慢加入等摩爾的甘氨酸二肽的0.2MNaOH水溶液，加熱回流2h，TLC跟蹤反應(yīng)。原料消失，溶液呈堿性，加入水稀釋，再用稀硫酸調(diào)節(jié)PH值至1左右，有大量白色沉淀產(chǎn)生，收集固體，產(chǎn)率70～92％。(如Tr-MAVG2三苯基硫代乙酰-纈氨酰-雙甘氨酸，產(chǎn)率70％，Tr-MAVG2C30H33N3O5S FW547 m.p.129.0-131℃，IR(KBr，cm-1)3250(br)，1720(COO)，1640(CONH)，1540，1500)。(化合物Tr-MAG3產(chǎn)率91.0％，IR(KBr，cm-13350(s)，3100-2500(w)，1740，1640，1HNMR(500MHz，DMSO)δ(ppm)12.15(1H，br，COOH)，8.27(1H，NH)，7.37-7.26(15H，m，Ar)，3.67(2H，d，J＝4.7Hz，CH2)，2.82(2H，s，CH2))。(化合物Tr-MAAG2三苯基硫代乙酰-丙氨酰-雙甘氨酸，產(chǎn)率70％。分子式C28H29N3O5S，F(xiàn)W519；m.p.133.0-135.5℃，IR(KBr，cm-1)3302.9(br)，1737.3(COO)，1651.2(CONH)，1527.4；1H NMR(500MHz，DMSO-d6)d8.21-8.15(2H，NH)，8.10-8.08(1H，NH)，7.37-7.25(m，15H，Ar)，4.21-4.17(1H，m，CH)，3.81-3.70(4H，CH2)，2.86(1H，s，SCH2)，1.15-1.14(d，J＝7.0Hz，3H，CH3)；13C NMR(125MHz，DMSO-d6)173.5-168.4(4C＝O)，144.6(3C，Ar)，129.5(6C，Ar)，128.5(6C，Ar)，127.3(3C，Ar)，66.4(CPh3)，48.9(CH(NH))，42.3(2NCH2)，36.3(SCH2)，18.3(CH3)。
2)嘌呤環(huán)乙胺基的引入(1)7-N-疊氮乙基腺嘌呤AdeN37-N-ethylazidoAdenine腺嘌呤(0.5g，3.7mmol)溶于5mL DMF中，向其中加入2g無水Na2CO3，室溫下攪拌反應(yīng)過夜，加入MsOCH2CH2N3(1.22g，7.4mmol)，升溫至50～60℃，攪拌反應(yīng)，TLC跟蹤反應(yīng)三四天后原料亦無明顯減少，終止反應(yīng)。濾除Na2CO3，減壓蒸餾除掉DMF濃縮，柱層析(乙酸乙酯∶甲醇＝20∶1)，產(chǎn)率30％。
C7H8N8F.W.204 m.p.174～175℃ IR(KBr，cm-1)3269.7，3103.5，2928.7，2875.0(CH2)，2100.4(-N3)，1677.5，1603.7AdeNH27-N-ethylaminoAdenine取AdeN3(0.15g，0.88mmol)溶解在5mL甲醇中，向其中加入Pd/c(10％Pd)(0.1g，0.096mmol)。抽出反應(yīng)體系的空氣，向其中充入氫氣在25℃下反應(yīng)。TLC示蹤，大約2h后反應(yīng)原料消失。結(jié)束反應(yīng)，將催化劑濾掉，用甲醇清洗催化劑，旋掉甲醇，盡量除去甲醇得到白色固體約0.12g。產(chǎn)濾為92％。C7H10N6F.W.178；m.p.202-203℃ IR(KBr，cm-1)3355.0(NH2)，1674.8(C＝N)3)目標(biāo)化合物的制備如2-N-三苯甲基硫代乙酰三甘氨?；汆堰?Tr-MAG3-ADE)(7-N-(triphenylthioacetyl triglycylethyl)Adenine)取AdeNH2(0.22g，1.15mmol)溶于5mL DMF中，向其中加入Tr-MAG3(0.58g，1.15mmol)，室溫下向其中加入DCC(0.50g，2.4mmol)，DMAP(0.3g，2.4mmol)，攪拌反應(yīng)，白色沉淀生成。攪拌反應(yīng)三至四天后補(bǔ)加DCC(0.25g)，DMAP(0.15g)，繼續(xù)攪拌反應(yīng)三天。終止反應(yīng)，濾除沉淀，減壓蒸餾除去大部分DMF，冰浴冷卻后，加入稀鹽酸有大量白色固體析出，冰浴條件下攪拌，濾集固體，用飽和NaHCO3溶液清洗，最后用蒸餾水洗兩次。抽干固體。通過柱層析(丙酮∶甲醇＝20∶1(含1％三乙胺))得到約0.43g白色固體。產(chǎn)率約為62％。2-N-三苯甲基硫代乙酰三甘氨酰基腺嘌呤(Tr-MAG3-ADE)C34H35N9O4S F.W.665MS(m/z，％)666(M+H+，18)m.p.165℃開始熔化，變黃。IR(KBr，cm-1)3325(NH)，2928.3，2851.6(CH2)，1652.7，1532.9(C＝ONH)1H NMR(500MHz，DMSO)，δ(ppm)8.14(1H，s)；8.02(1H，s)，(上面2H位雜環(huán)上的兩個(gè)氫原子)；8.22(1H，NH)，8.17(1H，NH)，8.13(1H，NH)，7.97(1H，t，J＝5.56Hz，NH)，7.35-7.19(15H，Ar)，4.18(2H，t，J＝5.4Hz，CH2)，3.71(2H，s，CH2)，3.66(2H，s，CH2)，3.61(2H，s，CH2)，3.46(2H，t，J＝5.27Hz，CH2)，3.38(2H，NH2)，2.86(2H，s，SCH2)13C NMR(125MHz，DMSO)，δ(ppm)169.05(2C＝O)，167.70(C＝O)，155.749C＝O)，152.29，149.29，140.99(2C)，118.61(以上5個(gè)C為，腺嘌呤環(huán)上的五個(gè)碳原子)；143.96(3C，Ar)，129.49(6C，Ar)，129.03(6C，Ar)，126.79(3C，Ar)，65.89(CPh3)，42.48(CH2)，42.13(CH2)，41.93(CH2)，38.42(CH2)，38.31(CH2)，35.83(CH2)2-N-三苯甲基硫代乙酰頡氨酸二甘氨?；汆堰?Tr-MAVG2Ade)*(7-N-(triphenylthioacetyl valyldiglycylethyl)Adenine)取AdeNH2(0.10g，0.5mmol)溶于2mL DMF中，向其中加入Tr-MAVG2(0.3g，0.56mmol)，室溫下向其中加入DCC(0.232g，1.12mmol)，DMAP(0.0343g，0.28mmol)，攪拌反應(yīng)，白色沉淀生成。攪拌反應(yīng)三至四天后補(bǔ)加DCC(0.12g)，DMAP(0.015g)，繼續(xù)攪拌反應(yīng)三天。終止反應(yīng)。濾除沉淀，減壓蒸餾除去大部分DMF，冰浴冷卻后，加入稀鹽酸有大量白色固體析出，冰浴條件下攪拌，濾集固體，用飽和NaHCO3溶液清洗，最后用蒸餾水洗兩次。抽干固體。通過梯度柱層析(先用丙酮(含1％三乙胺)后用丙酮∶甲醇＝10∶1(含1％三乙胺))得到約0.25g白色固體。產(chǎn)率約為62％。
2-N-三苯甲基硫代乙酰頡氨酸二甘氨?；汆堰?Tr-MAVG2ADE)C37H41N4SO4F.W707.7，MS(m/z，％)707(M+，4)m.p.180℃開始熔化，后變焦黃狀。IR(cm-1)3324.6(NH)，2928.28，2850.79-CH3，CH2)，1646.4(酰胺I帶)；1539.1(酰胺II帶)1H NMR(500MHz，DMSO)δ(ppm)8.14(1H，s)，8.02(1H，s)(上面2H為雜環(huán)上的兩個(gè)氫原子)；8.29(1H，NH)，8.12(1H，NH)，8.10(1H，NH)，8.00(1H，NH)，7.35～7.24(15H，Ar)，4.18(2H，t，J＝5.65Hz，CH2)，4.11(1H，t，J＝7.0Hz，CH)，3.73(2H，d，J＝5.24Hz，CH2)，3.62(2H，d，J＝5.42Hz，CH2)，3.45(2H，t，J＝5.40Hz，CH2)，3.39(2H，br，NH2)(重水交換氫譜中消失)，2.92(1H，d，J＝13.86Hz，SCH2)，2.84(1H，d，J＝13.5Hz，SCH2)，1.72(1H，m，CH)，0.84(3H，d，J＝6.7Hz，CH3)，0.81(3H，d，J＝6.7Hz，CH3)13C NMR(125MHz，DMSO)δ(ppm)172.15(C＝O)，169.92(C＝O)，168.59(C＝O)，156.66(C＝O)，153.18，150.43，141.85(2C)，119.55，(上面五個(gè)碳為腺嘌呤環(huán)上碳原子)；145.01(3C，Ar)，129.96(6C，Ar)，128.93(6C，Ar)，127.67(3C，Ar)，66.85(CPh3)，48.25(CH2)，43.39(CH2)，42.92(CH2)，39.33(CH2)，36.79，34.17，31.11(CH)，20.02(CH3)，18.93(CH3)同樣方法得到2-N-三苯甲基硫代乙酰二甘氨?；汆堰?Tr-MAG2ADE)m.p.158.2～158.9℃；收率53.2％MSm/z 631[M+H]+632 found 632.0IR(cm-1)3413.8(NH)，3058.1(Ar-H)，2937.6(CH2)，1642.3(酰胺I帶)，1529.7(酰胺II帶)，1H NMR(500MHz，DMSO)，δ(ppm)8.14(1H，s)；8.03(1H，s)，(上面2H為雜環(huán)上的兩個(gè)氫原子)；8.23(1H，NH)，8.16(1H，NH)，7.97(1H，t，NH)，7.36-7.19(15H，m，Ar)，4.21-4.19(2H，t，J＝5.68Hz，CH2)，3.64-3.63(2H，s，CH2)，3.60-3.59(2H，s，CH2)，，3.46-3.44(2H，t，J＝5.66Hz，CH2)，3.38(2H，s，NH2)，2.87(2H，s，SCH2)。
13C NMR(125MHz，DMSO-d6)d169.6-169.5(2C＝O)，168.4(1C＝O)，156.3，152.7，150.0，141.5(2C)，119.1(以上5個(gè)C為腺嘌呤環(huán)上的5個(gè)碳原子)，144.5(3C，Ar)，129.5(6C，Ar)，128.6(6C，Ar)，127.3(3C，Ar)，66.45(CPh3)，42.97(CH2)，42.92(CH2)，42.5(CH2)，38.9(CH2)，36.3(CH2)。
同樣方法得到2-N-三苯甲基硫代乙酰頡氨酸甘氨?；汆堰?Tr-MAVGAde)m.p.137.5～138.5℃；收率42.3％MSm/z 664[M+H]+665 found 665IR(cm-1)3392.5(NH)，3058.8(Ar-H)2930.1(CH2)，1647.1(酰胺I帶)，1528.4(酰胺II帶)1H NMR(500MHz，DMSO)，δ(ppm)8.15(1H，s)，8.04(1H，s)，(上面2H為雜環(huán)兩個(gè)氫原子)；8.23(1H，NH)，8.16(1H，NH)，7.98-7.96(1H，t，J＝5.67Hz，NH)，7.36-7.19(15H，m，Ar)，4.21-4.19(2H，t，J＝5.74Hz，CH2)，3.64-3.62(2H，s，CH2)，3.62-3.60(2H，s，CH2)，3.46-3.45(2H，s，NH2)，3.35(1H，d，J＝5.74Hz，CH)，2.87(2H，s，SCH2)
13C NMR(125MHz，DMSO-d6)d169.6-169.5(2C＝O)，168.4(1C＝O)，156.2，152.6，150.0，141.5(2C)，119.1(以上5個(gè)C為腺嘌呤環(huán)上的5個(gè)碳原子)，144.5(3C，Ar)，129.5(6C，Ar)，128.6(6C，Ar)，127.3(3C，Ar)，66.43(CPh3)，42.9(CH2)，40.5(CH2)，39.5-39.4(2CH2)，36.3(SCH2)，同樣方法得到2-N-三苯甲基硫代乙酰二丙氨酰基腺嘌呤(Tr-MAA2Ade)，m.p.144.2～145.1℃；收率57.6％。
MSm/z 636[M+H]+637 found 637.1IR(cm-1)3259.8(NH)，3058.8(Ar-H)，2928.7(CH)，1629.5(酰胺I帶)，1525.6(酰胺II帶)，1H NMR(500MHz，，DMSO)，δ(ppm)8.12(1H，s)；8.01(1H，s)，(上面2H為雜環(huán)兩個(gè)氫原子)；8.23(1H，NH)，8.16(1H，NH)，7.98-7.96(1H，t，J＝5.67Hz，NH)，7.35-7.23(15H，m，Ar)，4.20-4.18(2H，t，J＝5.5Hz，CH2)，4.10-4.07(2H，t，J＝7.1Hz，CH2)，3.49-3.48(2H，s，NH2)，1.27-1.23(2H，dd，J＝7.0，7.3Hz，2CH)，2.83(2H，s，SCH2)，1.11-1.06(6H，d，J＝6.9Hz，2CH3)13C NMR(125MHz，DMSO-d6)d172.8(C＝O)，167.7(2C＝O)，167.7，156.2，152.7，141.6(2C)，119.0(以上5個(gè)C為腺嘌呤環(huán)上的5個(gè)碳原子)，144.5(3C，Ar)，129.5(6C，Ar)，128.5(6C，Ar)，127.2(3C，Ar)，66.43(CPh3)，48.9-48.6(2CH)，42.9-40.5(2CH2)，38.9(SCH2)，18.4(2CH3)利用上述合成方法可以合成其余的目標(biāo)化合物如結(jié)構(gòu)(1)中的所有目標(biāo)物 其中R1、R2、R3為H、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、苯基、芐基，R4為H、Tr，n為0，1，2，……20。
脫保護(hù)、標(biāo)記及放化純度的檢驗(yàn)脫保護(hù)在10mL燒瓶中加入樣品5.11×10-5mol和TFA(3mL)，攪拌5min后。再加入HSiEt3(1mL)，溶液立即澄清。繼續(xù)攪拌5min，旋蒸溶劑，加入4mL0.1MNaOH水溶液，用CH2Cl2萃取除去三苯甲烷，拋去有機(jī)相，水相充氮?dú)獗Ｗo(hù)。
配體的標(biāo)記采用直接標(biāo)記法制備。10mg葡萄糖酸鈣加入小青霉素瓶中，用100μL配體溶液(濃度10g.L-1)，然后加入50μL醋酸-醋酸鈉緩沖溶液，調(diào)節(jié)溶液的PH值為4～5，加入25μL酒石酸-SnCl2溶液(酒石酸∶SnCl2＝0.8mg/mL∶0.4mg/mL)，加入適量新鮮的99TcmO4-淋洗液，室溫下反應(yīng)30min。反應(yīng)即可完成。
標(biāo)記物的層析鑒定及放化純度的檢驗(yàn)用新華1號濾紙作為支持體，用生理鹽水作展開劑，鑒定測得標(biāo)記物的放化純度均大于95％。
生物活性1)荷肉瘤S180小鼠體內(nèi)γ顯像和體內(nèi)分布實(shí)驗(yàn)荷肉瘤S180小鼠體內(nèi)γ顯像按上述方法制備的不同配合物溶液作為尾靜脈注射液。每只荷肉瘤S180小鼠尾靜脈注射100μL標(biāo)記液(0.56-0.74MBq)，昆明鼠體重為20-24g，分別在注射后不同時(shí)間利用GE MPRγcamera進(jìn)行全身顯像。
體內(nèi)分布荷肉瘤S180小鼠尾靜脈注射不同配合物溶液的標(biāo)記液后不同時(shí)間斷頸處死，取血液和臟器進(jìn)行放射性測量，血液的重量以體重的7％計(jì)，分別計(jì)算各組織的攝取率(ID/％·g-1)以及T與NT的比。
2)生物活性2-N-三苯甲基硫代乙酰三甘氨?；汆堰?Tr-MAG3-ADE)和2-N-三苯甲基硫代乙酰頡氨酸二甘氨?；汆堰?Tr-MAVG2Ade)兩種99mTc標(biāo)記目標(biāo)物在小鼠器官、血液及其腫瘤S180的分布實(shí)驗(yàn)顯示，在腫瘤中有較好的吸收；在小鼠的腫瘤和肌肉劑和血液中的分布比顯示與99mTc-ECDG相近。
權(quán)利要求
1.具有式(1)結(jié)構(gòu)的化合物是標(biāo)記99Tcm和186Re的關(guān)鍵配體部分[是能夠全面確定結(jié)構(gòu)，且是與結(jié)構(gòu)式(2)[標(biāo)記物結(jié)構(gòu)式(2)因放射性不穩(wěn)定難以通過譜圖測定]緊密相連的重要部分。 其中R1、R2、R3為H、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、苯基、芐基，R4為H、Tr，n為0、1、2、……20。
2.權(quán)利要求(1)的化合物R2為H時(shí)，R1、R3為H、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、苯基、芐基，R4為H、Tr，n為0、1、2、……20。R2為CH3時(shí)，R1、R3為H、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、苯基、芐基，R4為H、Tr，n為0、1、2、……20。R2為CH2CH3時(shí)，R1、R3為H、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、苯基、芐基，R4為H、Tr，n為0、1、2、……20。R2為CH2CH2CH3時(shí)，R1、R3為H、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、苯基、芐基，R4為H、Tr，n為0、1、2、……20。R2為丁基時(shí)，R1、R3為H、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、苯基、芐基，R4為H、Tr，n為0、1、2、……20。R2為苯基時(shí)，R1、R3為H、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、苯基、芐基，R4為H、Tr，n為0、1、2、……20。R2為芐基時(shí)，R1、R3為H、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、苯基、芐基，R4為H、Tr，n為0、1、2、……20。
3.權(quán)利要求具有結(jié)構(gòu)(2)的化合物，是由結(jié)構(gòu)(1)的化合物經(jīng)與99Tcm或186Re標(biāo)記而得到的不穩(wěn)定、難以通過波譜等確定其結(jié)構(gòu)的標(biāo)記物，它們具有優(yōu)良腫瘤顯像和乏氧顯像能力。 其中R1、R2、R3為H、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、苯基、芐基，n為0、1、2、……20，M＝99Tcm、186Re。
4.權(quán)利要求(2)的化合物R2為H時(shí)，R1、R3為H、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、苯基、芐基，n為0、1、2、……20，M＝99Tcm、186Re。R2為CH3時(shí)，R1、R3為H、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、苯基、芐基，n為0、1、2、……20，M＝99Tcm、186Re。R2為CH2CH3時(shí)，R1、R3為H、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、苯基、芐基，n為0、1、2、……20，M＝99Tcm、186Re。R2為CH2CH2CH3時(shí)，R1、R3為H、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、苯基、芐基，n為0、1、2、……20，M＝99Tcm、186Re。R2為異丙基時(shí)，R1、R3為H、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、苯基、芐基，n為0、1、2、……20，M＝99Tcm、186Re。R2為丁基時(shí)，R1、R3為H、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、苯基、芐基，n為0、1、2、……20，M＝99Tcm、186Re。R2為苯基時(shí)，R1、R3為H、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、苯基、芐基，n為0、1、2、……20，M＝99Tcm、186Re。R2為芐基時(shí)，R1、R3為H、甲基、乙基、丙基、異丙基、丁基、苯基、芐基，n為0、1、2、……20，M＝99Tcm、186Re。
5.權(quán)利要求(2)的化合物M＝99Tcm標(biāo)記物作為腫瘤顯像劑和乏氧顯像劑；M＝186Re標(biāo)記物作為腫瘤治療劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及具有優(yōu)良腫瘤顯像和乏氧顯像效果的
文檔編號C07K7/00GK1830989SQ200510053430
公開日2006年9月13日 申請日期2005年3月10日 優(yōu)先權(quán)日2005年3月10日
發(fā)明者齊傳民, 趙云嶺, 馮淑娟, 孫緒霞, 吳愛琴, 黃海波 申請人:北京師范大學(xué)