專利名稱：用作β的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及新的β2腎上腺素能受體激動劑。本發(fā)明還涉及含有這樣的化合物的藥物組合物，用這樣的化合物來治療與β2腎上腺素能受體活性相關(guān)的疾病的方法，以及用于制備這樣的化合物的方法和中間體。
背景技術(shù)：
β2腎上腺素能受體激動劑認(rèn)為是治療與肺有關(guān)的疾病如哮喘和慢性阻塞性肺病(包括慢性支氣管炎和肺氣腫)的有效藥物。β2腎上腺素能受體激動劑還可用于治療早產(chǎn)，而且潛在地用于治療神經(jīng)障礙和心臟病。盡管使用某些β2腎上腺素能受體激動劑取得了成功，目前的藥劑在持續(xù)時間、效能、選擇性和/或起效(onset)方面仍不太令人滿意。因此，需要另外的具有改進(jìn)的性質(zhì)(如改進(jìn)的作用持續(xù)時間、效能、選擇性和/或起效)的β2腎上腺素能受體激動劑。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供了新的化合物，其具有β2腎上腺素能受體激動劑活性。在其它性質(zhì)中，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的化合物是有效的和選擇性的β2腎上腺素能受體激動劑。此外，發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的化合物具有令人驚訝的和出乎意料的長的作用持續(xù)時間，預(yù)期其用于每日一次、或者甚至更少的頻率給藥。
因此，本發(fā)明提供了式(I)的化合物
其中R1、R2、R3和R4各自獨(dú)立選自氫、羥基、氨基、鹵素、-CH2OH和-NHCHO，或者R1和R2連在一起選自-NHC(＝O)CH＝CH-、-CH＝CHC(＝O)NH-、-NHC(＝O)S-和-SC(＝O)NH-；R5和R6中的一個是-[X-C1-6亞烷基]n-NR10R11或C1-6亞烷基-NR12R13，而R5和R6中的另一個選自氫、羥基、C1-4烷氧基和C1-4烷基，其中C1-4烷基任選被鹵素取代，其中，X各自獨(dú)立地選自-O-、-NH-、-S-、-NHSO2-、-SO2NH-、-NHC(＝O)-和-C(＝O)NH-；R10、R11、R12和R13各自獨(dú)立的是氫或C1-4烷基；或R10和R11與和其連接的氮原子一起，或R10與和其連接的氮原子以及相鄰的C1-6亞烷基的碳原子一起，或者R12和R13與和其連接的氮原子一起，或者R12與和其連接的氮原子以及相鄰的C1-6亞烷基的碳原子一起，形成具有5-7個環(huán)原子的雜環(huán)或雜芳基環(huán)，所述環(huán)任選地含有另外的選自氧、氮和硫的雜原子，其中氮任選地被-S(O)2-C1-4烷基取代；而n是1、2或3；且R7、R8和R9分別獨(dú)立的是氫或C1-6烷基；或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物或立體異構(gòu)體。
本發(fā)明還提供了含有本發(fā)明化合物和藥物可接受載體的藥物組合物。本發(fā)明進(jìn)一步提供了含有本發(fā)明的化合物和一種或多種其它治療劑的組合以及含這樣的組合的藥物組合物。
本發(fā)明還提供了一種治療患有與β2腎上腺素能受體活性(例如，與肺有關(guān)的疾病如哮喘或慢性阻塞性肺病、早產(chǎn)、神經(jīng)障礙、心臟病或炎癥)有關(guān)的疾病或癥狀的哺乳動物的方法，所述方法包括向哺乳動物給予治療有效量的本發(fā)明的化合物。本發(fā)明進(jìn)一步提供一種治療的方法，包括給予治療有效量的本發(fā)明的化合物和一種或多種其它治療劑的組合。
本發(fā)明還提供了一種治療患有與β2腎上腺素能受體活性有關(guān)的疾病或病癥的哺乳動物的方法，所述方法包括向哺乳動物給予治療有效量的本發(fā)明的藥物組合物。
本發(fā)明的化合物還可以用作研究工具，即，用于研究生物系統(tǒng)或樣品，或用于研究其它化學(xué)上的化合物的活性。因此，在其方面的另一個方面，本發(fā)明提供了一種方法，使用式(I)的化合物或其藥物可接受的鹽或溶劑化物或立體異構(gòu)體，作為研究生物系統(tǒng)或樣品或發(fā)現(xiàn)新的β2腎上腺素能受體激動劑的研究工具。
在分開的和不同的方面，本發(fā)明還提供了本文所述的合成方法和中間體，其用于制備本發(fā)明的化合物。
本發(fā)明還提供了如本文所述的本發(fā)明的化合物在醫(yī)學(xué)治療中的應(yīng)用，以及本發(fā)明的化合物在制備治療患有與β2腎上腺素能受體活性(例如，與肺有關(guān)的疾病如哮喘或慢性阻塞性肺病、早產(chǎn)、神經(jīng)障礙、心臟病或炎癥)有關(guān)的疾病或病癥的哺乳動物的制劑或藥物中的應(yīng)用。


圖1是實(shí)施例17b的產(chǎn)物的x-射線粉末衍射圖。
圖2是實(shí)施例17b的產(chǎn)物的差示掃描量熱法曲線。
圖3是實(shí)施例17c的產(chǎn)物的x-射線粉末衍射圖。
圖4是實(shí)施例17c的產(chǎn)物的差示掃描量熱法曲線。
圖5是實(shí)施例17d的產(chǎn)物的x-射線粉末衍射圖。
圖6是實(shí)施例17d的產(chǎn)物的的差示掃描量熱法曲線。
發(fā)明詳述本發(fā)明提供了新的式(I)的芳基苯胺β2腎上腺素能受體激動劑，或其藥物上可接受的鹽或溶劑化物或立體異構(gòu)體。下面的取代基和涵義將提供本發(fā)明不同方面的典型實(shí)施例。這些典型的涵義目的在于進(jìn)一步地定義這樣的方面，而不是為了排除其它涵義或限制本發(fā)明的范圍。
在本發(fā)明的一個特定方面，R1是鹵素、-CH2OH或-NHCHO。
在其它的特定方面，R1是氯、-CH2OH或-NHCHO；或R1是-CH2OH或-NHCHO。
在一個特定方面，R2是氫。
在一個特定方面，R3是羥基或氨基。
在一個特定方面，R4是氫或鹵素；或R4是氫或氯。
在一個特定方面，R1是-NHCHO；R3是羥基，且R2和R4分別是氫。
在另一個特定方面，R1和R2連在一起是-NHC(＝O)CH＝CH-或-CH＝CHC(＝O)NH-，R3是羥基，和R4是氫。
在另一個特定方面，R1是-CH2OH；R3是羥基，且R2和R4分別是氫。
在還一個特定方面，R1和R4是氯，R3是氨基，且R2是氫。
在又一個特定方面，R1和R2連在一起是-NHC(＝O)S-或-SC(＝O)NH-，R3是羥基，和R4是氫。
在一個特定方面，R5或R6是-[X-C1-6亞烷基]n-NR10R11，其中n、X、R10和R11如式(I)定義。
在另一個特定方面，R5或R6是-[O-C1-6亞烷基]n-NR10R11，其中R10和R11如式(I)中所定義，且n是1或2。
在另一個特定方面，R5或R6是-O-C1-6亞烷基-NR10R11，其中R10和R11各自獨(dú)立的是氫或C1-4烷基。典型的R5或R6涵義包括，但不限于-O(CH2)2NH2、-O(CH2)3N(CH3)2、-O(CH2)4NH2和-OCH2C(CH3)2NH2。
在另一個特定方面，R5或R6是-O-C1-6亞烷基-NR10R11，其中R10和R11與和其連接的氮原子一起形成哌嗪基環(huán)。例如，R5或R6是-O(CH2)2-1-哌嗪基。
然而在另一個特定方面，R5或R6是C1-6亞烷基-NR12R13，其中R12和R13如式(I)中的定義。
但在另一個特定方面，R5或R6是C1-6亞烷基-NR12R13，其中R12和R13各自獨(dú)立的是氫或C1-4烷基。在這個方面，典型的R5或R6的涵義包括但不限于-(CH2)2NH2、-(CH2)2N(CH3)2和-CH2C(CH3)2NH2。
而在其它特定的方面，R5或R6是C1-4烷基，任選地用鹵素取代，例如CF3；或R5或R6是C1-4烷氧基，例如-OCH3；或R5或R6是氫；或R5或R6是羥基。
在一個特定方面，R7是氫。
在一個特定方面，R8是氫。
在一個特定方面，R9是氫。
在一個方面，本發(fā)明提供了具有通式(II)的化合物 其中R1是-CH2OH或-NHCHO，且R2是氫；或R1和R2連在一起是-NHC(＝O)CH＝CH-或-CH＝CHC(＝O)NH-；R5和R6中的一個是-[O-C1-6亞烷基]n-NR10R11或C1-6亞烷基-NR12R13，而R5和R6中的另一個選自氫、羥基、C1-4烷氧基和C1-4烷基，其中C1-4烷基任選被鹵素取代，其中R10、R11、R12和R13各自獨(dú)立的是氫或C1-4烷基；或R10和R11與和其連接的氮原子一起，或R10與和其連接的氮原子以及相鄰的C1-6亞烷基的碳原子一起，或者R12和R13與和其連接的氮原子一起，或者R12與和其連接的氮原子以及相鄰的C1-6亞烷基的碳原子一起，形成具有5-7個環(huán)原子的雜環(huán)或雜芳基環(huán)，所述環(huán)任選地含有另外的選自氧、氮和硫的雜原子，其中氮任選地被-S(O)2-C1-4烷基取代；且n是1或2；或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物或立體異構(gòu)體。
在另一個方面，本發(fā)明提供了式(II)的化合物，其中R5是-[O-C1-6亞烷基]n-NR10R11或C1-6亞烷基-NR12R13，且R6是氫。
在另一個方面，本發(fā)明提供了式(II)的化合物，其中R5是C1-4烷氧基，且R6是-[O-C1-6亞烷基]n-NR10R11或C1-6亞烷基-NR12R13。
在另一個方面，本發(fā)明提供了式(II)的化合物，其中R5選自-O-C1-6亞烷基-NR10R11和C1-6亞烷基-NR12R13，且R6是氫；或R5是C1-4烷氧基，且R6是-C1-6亞烷基-NR12R13，其中R10、R11、R12和R13各自獨(dú)立的是氫或C1-4烷基；或R10和R11與和其連接的氮原子一起，形成哌嗪基環(huán)。
在這一方面的化合物的特定的基團(tuán)是這樣的基團(tuán)，其中R1和R2連在一起是-NHC(＝O)CH＝CH-或-CH＝CHC(＝O)NH-。
在這一方面的化合物的另一個特定基團(tuán)是這樣的基團(tuán)，其中R5是-O-C1-6亞烷基-NR10R11，且R6是氫。
而在其它特定方面，本發(fā)明提供式(II)的化合物，其中可變的R1、R2、R5和R6具有下表I所列的涵義。


特別值得一提的是以下的化合物5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-氨基-2-甲基-丙氧基)-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-羥基-乙基]-8-羥基-1H-喹啉-2-酮；8-羥基-5-[(R)-1-羥基-2-(2-{4-[4-(2-哌嗪-1-基-乙氧基)-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-乙基]-1H-喹啉-2-酮；5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-氨基-乙基)-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-羥基-乙基]-8-羥基-1H-喹啉-2-酮；5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-二甲氨基-乙基)-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-羥基-乙基]-8-羥基-1H-喹啉-2-酮；5-[(R)-2-(2-{4-[3-(2-氨基-乙基)-4-甲氧基-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-羥基-乙基]-8-羥基-1H-喹啉-2-酮；其中，化學(xué)命名法符合自動命名程序AutoNom，由MDL信息系統(tǒng)，GmbH(Frankfurt，Germany)提供。
如上所述的，本發(fā)明的化合物包含一個或多個手性中心。因此，除非另外指出，本發(fā)明包括外消旋混合物、純的立體異構(gòu)體(即，單個的對映異構(gòu)體或非對映異構(gòu)體)，以及這種異構(gòu)體的立體異構(gòu)體-富集的混合物。當(dāng)顯示一種特定的立體異構(gòu)體，本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解的是，除非另外指出，較少量的其它立體異構(gòu)體可以存在于本發(fā)明的組合物中，只要組合物作為整體的功用不因?yàn)檫@樣的其它異構(gòu)體的存在而消除。
更具體的說，本發(fā)明的化合物在式(I)和(II)的亞烷基碳原子位上含一個手性中心，羥基連接在該碳原子上。當(dāng)使用立體異構(gòu)體的混合物時，在有羥基的手性中心的(R)方向立體異構(gòu)體的量大于對應(yīng)的(S)立體異構(gòu)體的量是有利的。當(dāng)比較相同化合物的立體異構(gòu)體時，(R)立體異構(gòu)體優(yōu)于(S)立體異構(gòu)體。
定義當(dāng)描述本發(fā)明的化合物、組合物和方法時，除非另外指出，以下的術(shù)語具有下面的意思。
術(shù)語“烷基”意思是一價飽和的烴基，其可以是直鏈或支鏈的或其組合。除非另有定義，這樣的烷基典型地包含1-10個碳原子。作為實(shí)例，代表性的烷基包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、仲丁基、異丁基、叔丁基、正戊基、正己基、正庚基、正辛基、正壬基、正癸基等。
術(shù)語“烷氧基”意思是一價基團(tuán)-O-烷基，其中烷基如上定義。作為實(shí)例，代表性的烷氧基包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基等等。
術(shù)語“鏈烯基”意思是一價不飽和的烴基，其含有至少一個碳-碳雙鍵，通常是1或2個碳-碳雙鍵，且其可以是直鏈或支鏈或其組合。除非另有定義，這樣的鏈烯基通常包含2-10碳原子。作為實(shí)例，代表性的鏈烯基包括乙烯基、烯丙基、異丙稀基、丁-2-烯基、正-戊-2-烯基、正-己-2-烯基、正-庚-2-烯基、正-辛-2-烯基、正-壬-2-烯基、正-癸-4-烯基、正-癸-2，4-二烯基等等。
術(shù)語“炔基”意思是一價不飽和的烴基，其包含至少一個碳-碳三鍵，通常是1個碳-碳三鍵，而且其可以是直鏈或支鏈或其組合。除非另有定義，這樣的炔基通常含有2-10個碳原子。作為實(shí)例，代表性的炔基包括乙炔基、炔丙基、丁-2-炔基等。
術(shù)語“亞烷基”意思是二價飽和的烴基，其可以是直鏈或支鏈或其組合。除非另有定義，這樣的亞烷基通常包含1-10個碳原子。作為實(shí)例，代表性的亞烷基包括亞甲基、亞乙基、正亞丙基、正亞丁基、丙烷-1，2-二基(1-甲基亞乙基)、2-甲基丙烷-1，2-二基(1，1-二甲基亞乙基)等。
術(shù)語“雜芳基”意思是一價芳香基，其具有一個單環(huán)或兩個稠合環(huán)，并且在環(huán)上含至少一個選自氮、氧和硫的雜原子(通常是1-3個雜原子)。除非另有定義，這樣的雜芳基通常含有5-10個的總環(huán)原子。作為實(shí)施例，代表性的雜芳基包括吡咯基、異噁唑基、異噻唑基、吡唑基、吡啶基、噁唑基、噁二唑基、噻二唑基、噻唑基、咪唑基、三唑基、四唑基、呋喃基、三嗪基(triazinyl)、噻吩基、嘧啶基、噠嗪基、吡嗪基、苯丙噁唑基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并噻吩基、喹啉基、吲哚基、異喹啉基等，其中連接點(diǎn)在任何有效的碳或氮環(huán)原子上。
術(shù)語“雜環(huán)基”或“雜環(huán)”意思是一價飽和的或部分不飽和環(huán)狀的非芳香族基團(tuán)，其可以是單環(huán)或多環(huán)(即，稠合或橋連的)，而且其包含至少一個選自N、O和S的雜原子(通常為1至3個雜原子)。除非另外定義，所述雜環(huán)基團(tuán)通常包含5-10個總環(huán)原子。作為實(shí)例，代表性的雜環(huán)基團(tuán)包括吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、咪唑烷基、嗎啉基、二氫吲哚-3-基、2-咪唑啉基、1，2，3，4-四氫異喹啉-2-基、奎寧環(huán)基等等。
術(shù)語“鹵素”意思是氟、氯、溴或碘。
在此所用的術(shù)語“治療”意思是患者如哺乳動物(尤其是人)的疾病或醫(yī)學(xué)上的病癥的治療，其包括(a)防止疾病或醫(yī)學(xué)上的病癥的發(fā)生，即，患者的預(yù)防性治療；(b)改善疾病或醫(yī)學(xué)上的病癥，即，消除患者的疾病或醫(yī)學(xué)上的病癥或引起患者的疾病或醫(yī)學(xué)上的病癥的消退；(c)抑制疾病或醫(yī)學(xué)上的病癥，即，減緩或阻止患者的疾病或醫(yī)學(xué)上的病癥的發(fā)展；或(d)減輕患者的疾病或醫(yī)學(xué)上的病癥的癥狀。
術(shù)語“治療有效量”意思是當(dāng)向需要治療的患者給藥時，足以使治療有效的量。
術(shù)語“與β2腎上腺能受體活性有關(guān)的疾病或病癥”包括通過用β2腎上腺能受體激動劑治療減輕的所有醫(yī)學(xué)上的病癥，包括目前所知的或在將來發(fā)現(xiàn)的與β2腎上腺能受體活性有關(guān)的所有疾病癥狀和/或病癥。這樣的疾病癥狀包括，但不限于，與肺有關(guān)的疾病如哮喘和慢性阻塞性肺病(包括慢性支氣管炎和肺氣腫)，以及神經(jīng)障礙和心臟病。還已知β2腎上腺能受體活性與早產(chǎn)(參見美國專利號5,872,126)和某些類型的炎癥(參見國際專利申請?zhí)朩O99/30703和美國專利號5,290,815)有關(guān)。
術(shù)語“藥物可接受的鹽”是指由適于向患者如哺乳動物給藥的堿或酸制備的鹽。所述的鹽可以來源于藥物可接受的無機(jī)或有機(jī)堿以及來源于藥物可接受的無機(jī)或有機(jī)酸。
對于衍生自藥物可接受的酸的鹽，所述酸包括，但不限于乙酸、苯磺酸、苯甲酸、樟腦磺酸、檸檬酸、乙磺酸、延胡索酸、葡糖酸、谷氨酸、氫溴酸、鹽酸、乳酸、馬來酸、蘋果酸、扁桃酸、甲磺酸、半乳糖二酸、硝酸、泛酸、磷酸、琥珀酸、硫酸、酒石酸、對甲苯磺酸、xinafoic(1-羥基-2-萘酸)、1，5-萘二磺酸、肉桂酸等等。衍生自延胡索酸、氫溴酸、鹽酸、乙酸、硫酸、甲磺酸、1，5-萘二磺酸、昔萘酸(xinafoic)、草酸、酒石酸和4-甲基-肉桂酸的鹽是特別重要的。
對于衍生自藥物可接受的無機(jī)堿的鹽，包括鋁、銨、鈣、銅、三價鐵(ferric)、二價鐵、鋰、鎂、三價錳、二價錳、鉀、鈉、鋅等等。特別優(yōu)選的是銨、鈣、鎂、鉀和鈉鹽。衍生自藥物可接受的有機(jī)堿的鹽包括伯胺、仲胺和叔胺的鹽，所述胺類包括取代的胺、環(huán)胺、天然存在的胺等等，如精氨酸、甜菜堿、咖啡堿、膽堿、N，N′-芐乙撐二胺、二乙胺、2-二乙氨基乙醇、2-二甲氨基乙醇、乙醇胺、氨茶堿、N-乙基嗎啉、N-乙基哌啶、葡糖胺、氨基葡糖、組氨酸、哈胺(hydrabamine)、異丙胺、賴氨酸、甲基葡糖胺、嗎啉，哌嗪、哌啶、聚胺樹脂、普魯卡因、嘌呤、可可堿、三乙胺、三甲基胺、三丙基胺、氨基丁三醇等等。
術(shù)語“溶劑化物”意思是由一個或多個溶質(zhì)分子，即，本發(fā)明的化合物或其藥物可接受的鹽，和一個或多個溶劑的分子形成的絡(luò)合物或聚集體。這樣的溶劑化物通常是具有基本上固定的溶質(zhì)和溶劑摩爾比的結(jié)晶固體。作為實(shí)例，代表性的溶劑和物包括水、甲醇、乙醇、異丙醇、乙酸等等。當(dāng)溶劑是水時，形成的溶劑和物是水合物。
應(yīng)當(dāng)理解，術(shù)語“或其藥物可接受的鹽或溶劑化物或立體異構(gòu)體”是指包括鹽、溶劑化物和立體異構(gòu)體的所有排列，如式(I)的化合物的立體異構(gòu)體的藥物可接受的鹽的溶劑化物。
術(shù)語“離去基團(tuán)”意思是在取代反應(yīng)如親核取代反應(yīng)中可以被另外的官能團(tuán)或原子置換的官能團(tuán)或原子。作為實(shí)例，代表性的離去基團(tuán)包括Cl、Br、I；磺酸酯基團(tuán)如甲磺酸酯(mesylate)、甲苯磺酸酯、對溴苯磺酸酯、nosylate等等；和酰氧基如乙酰氧基、三氟乙酸基等等。
術(shù)語“氨基保護(hù)基團(tuán)”意思是適于防止在氨基氮上的不希望的反應(yīng)的保護(hù)基團(tuán)。代表性的氨基保護(hù)基團(tuán)包括，但不限于甲?；货；?，例如烷酰基如乙?；煌檠豸驶缡宥⊙豸驶?Boc)；芳基甲氧羰基如芐氧羰基(Cbz)和9-芴基甲氧羰基(Fmoc)；芳基甲基如芐基(Bn)、三苯甲基(Tr)、和1，1-二-(4′-甲氧基苯基)甲基；甲硅烷基如三甲基硅烷基(TMS)和叔丁基二甲基硅烷基(TBS)；等等。
術(shù)語“羥基保護(hù)基團(tuán)”意思是適于防止在羥基上的不希望的反應(yīng)的保護(hù)基團(tuán)。代表性的羥基保護(hù)基團(tuán)包括，但不限于烷基如甲基、乙基和叔丁基；?；缤轷；缫阴；环蓟谆缙S基(Bn)、對甲氧基芐基(PMB)、9-芴基甲基(Fm)和二苯基甲基(二苯甲基、DPM)；甲硅烷基如三甲基硅烷基(TMS)和叔丁基二甲基硅烷基(TBS)；等等。
一般的合成步驟本發(fā)明的化合物可以由容易得到的起始物質(zhì)采用以下的一般方法和步驟制得。盡管在以下的流程圖說明了本發(fā)明的特定方面，本領(lǐng)域的技術(shù)人員將認(rèn)識到本發(fā)明的所有方面可以采用在此描述的方法或本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其它方法、試劑和起始物質(zhì)來制得。應(yīng)當(dāng)理解，當(dāng)給出典型或優(yōu)選的工藝條件(即，反應(yīng)溫度、時間、反應(yīng)物的摩爾比、溶劑、壓力等)，除非另外說明，也可以使用其他工藝條件。最適的反應(yīng)條件可以隨使用的特定反應(yīng)物或溶劑而變化，但是本領(lǐng)域的技術(shù)人員通過常規(guī)優(yōu)化的操作可以確定這樣的反應(yīng)條件。
此外，為了防止某些官能團(tuán)經(jīng)受不希望的反應(yīng)，需要常規(guī)的保護(hù)基團(tuán)，這對本領(lǐng)技術(shù)人員來講是顯而易見的。用于特定官能團(tuán)的適合的保護(hù)基團(tuán)的選擇以及保護(hù)和脫保護(hù)的適宜的條件，也是為現(xiàn)有技術(shù)所熟知的。例如，多數(shù)的保護(hù)基團(tuán)以及其引入和除去，描述于T.W.Greene和G.M.Wuts，Protecting Groups in Organic Synthesis，第三版，Wiley，紐約1999，并且在此引入作為參考。
在一個合成的方法中，式(I)和(II)的化合物按照流程圖A的說明制備。(下述的流程圖所示的取代基和可變量，除非另外指出，具有如上所給出的定義)
流程圖A 其中P1表示羥基-保護(hù)基團(tuán)，P2表示羥基-保護(hù)基團(tuán)，且L表示離去基團(tuán)，如溴。
如流程圖A所示，式1的化合物首先和芳胺(2)反應(yīng)得到式3的中間體。通常，這個反應(yīng)在有堿和過渡金屬催化劑和芳基膦配體存在的有機(jī)溶劑中加熱進(jìn)行。將芳基偶合到芳胺上的有用的催化劑是三(二亞芐基丙酮)二鈀(O)和外消旋-2，2′-雙(二苯基膦基)-1，1′-二萘基。反應(yīng)通常在約50℃-約120℃之間加熱約0.25-約12小時。保護(hù)基團(tuán)P1通常是甲硅烷基保護(hù)基團(tuán)，通常使用氟化物或酸試劑將其從式3的中間體上除去，得到式4的中間體。保護(hù)基團(tuán)P2通常是芐基保護(hù)基團(tuán)，通常使用碳載鈀催化劑將其從式4的中間體除去，得到產(chǎn)物。
流程圖B中說明了制備中間體3的另一種的方法。
流程圖B 在流程圖B中，中間體5和6偶合制得中間體3的條件，與流程圖A中中間體1和2偶合所采用的條件通常是相同的。
然而，在流程圖C中說明了制備中間體3的另一個可選擇性的方法。
流程圖C 流程圖C的反應(yīng)通常是在有堿存在下的極性的非質(zhì)子溶劑中進(jìn)行。通常適合的溶劑包括二甲亞砜、二甲基甲酰胺、二甲基乙酰胺等等。反應(yīng)通常是在約60℃-約140℃之間加熱約0.25-約4小時。
在本申請所述反應(yīng)中使用的式1和7的化合物，根據(jù)本領(lǐng)域已知的步驟是容易制得的，例如美國專利6,653,323 B2和6,670,376 B1中描述的，其在此引入作為參考，并在此參考。在加熱下，在非質(zhì)子溶劑中中間體7和2-(4-氨基苯基)乙胺反應(yīng)可以制得中間體5。
中間體2和6是可商購的或由容易獲得的起始原料容易地制得。例如，當(dāng)R5是-[O-C1-6亞烷基]n-NR10R11而R6是氫，通式2的中間體2′，可以由流程圖D的方法制備。
流程圖D 其中R5a是這樣定義的，-OR5a是-[O-C1-6亞烷基]n-NR10R11。作為流程圖D的適合反應(yīng)條件的一個實(shí)例，反應(yīng)在氫化鈉存在的條件下，在二甲亞砜中進(jìn)行。
例如，當(dāng)R5是C1-6亞烷基-NR12R13而R6是氫時，通式2的中間體2″，可以由流程圖E的方法制備。
流程圖E 其中R5b是C1-6亞烷基。
式8的中間體可以由式2的中間體與用離去基團(tuán)在苯環(huán)的4-位取代的苯乙胺(例如4-溴苯乙胺)反應(yīng)來制得。
關(guān)于制備本發(fā)明的代表性的化合物或?qū)Υ说闹虚g體的特定的反應(yīng)條件和其它步驟的進(jìn)一步的細(xì)節(jié)，描述于以下的實(shí)施例中。
因此，在方法方面，本發(fā)明提供了一種制備式(I)的化合物或其鹽或立體異構(gòu)體或保護(hù)的衍生物的方法，所述方法包括(a)(i)在過渡金屬催化劑存在下，使式(III)的化合物 與式(IV)的化合物反應(yīng) 或(ii)使式(V)的化合物 與式(VI)的化合物反應(yīng) 其中P1是羥基保護(hù)基團(tuán)，R1a、R2a、R3a和R4a或者各自獨(dú)立地與式(I)中的R1、R2、R3和R4的定義相同，或者是-OP2，其中P2是羥基保護(hù)基團(tuán)，A和B中的一個是離去基團(tuán)，而A和B中的另一個是-NH2；L是離去基團(tuán)；且R5、R6、R7、R8和R9如式(I)中所定義，得到式(VII)的化合物

(b)脫去保護(hù)基團(tuán)P1得到式(VIII)的化合物 (c)當(dāng)R1a、R2a、R3a或R4a任一個是-OP2時，脫去保護(hù)基團(tuán)P2得到式(I)的化合物或其鹽或立體異構(gòu)體。
藥物組合物本發(fā)明還提供了包含本發(fā)明的化合物的藥物組合物。因此，該化合物，優(yōu)選以藥物可接受的鹽的形式，可以配制成任何適合的給藥形式，如口服或胃腸外給藥，或吸入給藥。
作為說明，化合物可以與常規(guī)藥物載體和賦形劑混合，以粉劑、片劑、膠囊劑、酏劑、混懸劑、糖漿劑和薄片(wafer)等形式使用。這樣的藥物組合物將包含約0.05-約90％重量的活性化合物，更通常的是約0.1-約30％。藥物組合物可以包含常規(guī)的載體和賦形劑，如玉米淀粉或明膠、乳糖、硫酸鎂、硬脂酸鎂、蔗糖、微晶纖維素、高嶺土、甘露醇、磷酸二鈣、氯化鈉和藻酸。常用于本發(fā)明制劑中的崩解劑包括交聯(lián)羧甲基纖維素、微晶纖維素、玉米淀粉、羥乙酸淀粉鈉和藻酸。
液體組合物一般由在適合液體載體中化合物或其藥物可接受的鹽的混懸劑或溶液組成，例如乙醇、甘油、山梨糖醇、非水溶劑如聚乙二醇、油類或水，任選含助懸劑、增溶劑(如環(huán)糊精)、防腐劑、表面活性劑、濕潤劑、芳香劑或著色劑。選擇性地，液體制劑可以由可重制的粉末制得。
例如，含活性化合物、助懸劑、蔗糖和增甜劑的粉末可以用水重制形成混懸液；糖漿劑可以由含活性成分、蔗糖和增甜劑的粉末制得。
片劑形式的組合物可以采用任何合適的常規(guī)用于制備固體組合物的藥物載體。所述載體的實(shí)例包括硬脂酸鎂、淀粉、乳糖、蔗糖、微晶纖維素和粘合劑，例如聚乙烯吡咯烷酮。片劑還可以用彩色薄膜包衣，或內(nèi)含顏色作為載體的一部分。此外，活性化合物可以配制成受控釋放的劑型如含親水或疏水基質(zhì)的片劑。
膠囊劑形式的組合物，可以采用常規(guī)的裝膠囊步驟制得，例如將活性化合物和賦形劑摻入硬明膠膠囊中?；蛘叩?，可以制備活性化合物和高分子量的聚乙二醇的半固體基質(zhì)，裝填入硬明膠膠囊中；或可以制備活性化合物的聚乙二醇的溶液或可食用油的混懸液，例如制備成液體石蠟或分餾椰子油，并將其裝入軟明膠膠囊中。
可以包括的片劑粘合劑是阿拉伯膠、甲基纖維素、羧甲基纖維鈉、聚乙烯吡咯烷酮(聚維酮)、羥丙基甲基纖維素、蔗糖、淀粉和乙基纖維素?？梢允褂玫臐櫥瑒┌ㄓ仓徭V或其它硬脂酸金屬鹽、硬脂酸、硅油、滑石、蠟、油和膠態(tài)二氧化硅。
也可以使用芳香劑如薄荷、冬青油，櫻桃調(diào)味劑。相應(yīng)地，可能需要加入著色劑使劑型在外觀上更吸引人或有助于產(chǎn)品的識別。
本發(fā)明的化合物及其藥物可接受的鹽當(dāng)胃腸外給予時是有效的，可以配制成肌肉內(nèi)、鞘內(nèi)或靜脈內(nèi)給藥。
用于肌內(nèi)或鞘內(nèi)給藥的典型的組合物將由在油中的活性成分的混懸液或溶液組成，例如花生油或芝麻油。用于靜脈內(nèi)或鞘內(nèi)給藥的典型的組合物將由無菌等滲的水溶液組成，例如含活性成分和葡萄糖或氯化鈉或葡萄糖和氯化鈉的混合物。其它實(shí)例是乳酸林格注射液，加葡萄糖的乳酸格林注射液、含葡萄糖的Normosol-M、Isolyte E、?；?acylated)格林注射液等等。任選的，共溶劑例如聚乙二醇；鰲合劑例如乙二胺四乙酸；增溶劑例如環(huán)糊精；和抗氧化劑例如焦亞硫酸鈉，可以包括在配方中?；蛘撸芤嚎梢岳鋬龈稍铮S后在給藥前用適合的溶劑重制。
局部給藥有效的本發(fā)明的化合物及其藥物可接受的鹽可以配制為經(jīng)皮組合物或經(jīng)皮傳送系統(tǒng)(“貼劑”)。這樣的組合物包括，例如背襯、活性化合物儲庫、控釋膜、襯墊和壓敏膠。所述經(jīng)皮貼劑可用于提供以受控的量連續(xù)或不連續(xù)的注入本發(fā)明的化合物。用于藥物制劑傳送的經(jīng)皮貼劑的結(jié)構(gòu)和用途是現(xiàn)有技術(shù)熟知的。例如，參見美國專利申請?zhí)?,023,252。所述貼劑可以制成連續(xù)的、脈沖式釋放藥物的形式，或者需要時即釋放的劑型。
給予本發(fā)明的化合物的一個優(yōu)選的方式是吸入劑。吸入劑是一個有效的傳送藥劑至呼吸道的方式。有三種一般類型的藥物吸入裝置噴霧器吸入器、干粉吸入器(DPI)和定量吸入器(MDI)。常規(guī)噴霧器裝置產(chǎn)生高速的氣流，引起治療劑像霧一樣噴霧，其被帶進(jìn)患者的呼吸道。治療劑配制成液體形式如可呼吸大小的微?；w粒的溶液或混懸液，其中微粒化通常定義為具有約90％或更多的直徑小于約10μm的顆粒。
常規(guī)噴霧器裝置中使用的典型的制劑是活性劑藥用鹽的等滲水溶液，活性劑的濃度介于約0.05μg/mL至1mg/mL之間。適合的噴霧器裝置能從商業(yè)上購得，例如，PARI GmbH(Starnberg，德國)。例如，其它噴霧器裝置已經(jīng)公開于美國專利號6,123,068。
DPI通常以自由流動的粉末的形式給予治療劑，在吸入的時候其可以分散于患者的吸入的氣流。使用外部的能源來分散粉末的選擇性的DPI裝置，也有了進(jìn)展。為了得到自由流動的粉末，治療劑可以用適合的賦形劑(例如，乳糖或淀粉)來配制。例如，干粉制劑可以通過將干的乳糖顆粒與本發(fā)明的化合物(即，活性劑)適合形式的微?；念w粒混合，通常是藥物可接受的鹽的形式，再干摻和來制得。選擇性地，制劑可以不加入賦形劑進(jìn)行配制。制劑裝入干粉配送器或用于干粉傳送裝置的吸入藥筒或膠囊。
可商購的DPI傳送裝置的實(shí)例包括Diskhaler(GlaxoSmithKline，Research Triangle Park，NC)(參見，例如美國專利號5,035,237)；Diskus(GlaxoSmithKline)(參見，例如美國專利號6,378,519)；Turbuhaler(AstraZeneca，Wilmington，DE)(參見，例如美國專利號4,524,769)；和Rotahaler(GlaxoSmithKline)(參見，例如美國專利號4,353,365)。適合的DPI裝置的進(jìn)一步實(shí)例描述于美國專利號5,415,162、5,239,993和5,715,810，以及其中的參考文獻(xiàn)。
MDI通常用壓縮的氣體推進(jìn)劑排放出計(jì)量量的治療劑。用于MDI給藥的制劑包括在液化的推進(jìn)劑中的活性成分的溶液或混懸液。含氯氟烴如CCl3F，已被常規(guī)用作推進(jìn)劑，由于對于這樣的藥物對臭氧層的不利影響的擔(dān)心，開發(fā)使用了采用氫氟烷烴(HFA)如1，1，1，2-四氟乙烷(HFA 134a)和1，1，1，2，3，3，3，-七氟-正丙烷(HFA 227)的制劑。用于MDI給藥的HFA制劑的另外的組分包括共溶劑如乙醇或戊烷，和表面活性劑如脫水山梨醇三油酸酯、油酸、卵磷脂和甘油(參見，例如美國專利號5,225,183、EP 0717987 A2和WO92/22286)。
因此，用于MDI給藥的適合的制劑可以包括約0.001％-約2％重量的已有的晶型，約0％-約20％重量的乙醇和約0％-約5％重量的表面活性劑，剩余物是HFA推進(jìn)劑。在一個制備制劑的方法中，冷凍和加壓的氫氟烷烴加入含已有的晶型、乙醇(假如存在)和表面活性劑(假如存在)的管瓶中。為了制備混懸液，以微?；w粒形式提供藥用鹽。將制劑裝入氣霧劑罐中，所述罐形成了MDI裝置的一部分。美國專利號6,006,745和6,143,227提供了專門開發(fā)的用于HFA推進(jìn)劑使用的MDI裝置的實(shí)施例。
在另一種制劑中，通過在活性化合物的藥用鹽的微?；w粒上噴霧干燥的表面活性劑的包衣，制得混懸劑配方(參見，例如WO 99/53901和WO 00/61108)。制備適合呼吸的顆粒的方法的另外的實(shí)施例與適于吸入給藥的制劑和裝置參見美國專利號6,268,533、5,983,956、5,874,063和6,221,398，WO 99/55319和WO 00/30614。
應(yīng)該理解的是適于特定方式的給藥的本發(fā)明化合物的任何形式(即，游離堿、藥用鹽或溶劑化物)，可以適用于上述的藥物組合物形式。
預(yù)計(jì)活性化合物在廣泛的劑量范圍內(nèi)是有效的，并以治療有效量給藥。然而，應(yīng)當(dāng)理解，實(shí)際給藥的化合物量是由醫(yī)生按照有關(guān)的事實(shí)(包括將要治療的病癥、選擇的給藥途徑、實(shí)際給藥的化合物及其相對活性、年齡、體重、個體患者的反應(yīng)、患者癥狀的嚴(yán)重性等)來決定的。
化合物可以周期性的劑量給藥每周一次、每周多次、每日一次或每日多次劑量。治療方案可能要求在很長的時間階段給藥(例如幾周或數(shù)月)，或治療方案可能要求長期給藥?？诜o藥的合適劑量是約0.05μg/天-約100mg/天的一般范圍，優(yōu)選是約0.5μg/天-約1000μg/天。
吸入給藥的治療劑的合適劑量是約0.05μg/天-約1000μg/天的一般范圍，優(yōu)選是約0.1μg/天-約500μg/天。應(yīng)當(dāng)理解的是，在確定吸入給藥的合適劑量時，要考慮作為特定的傳送裝置的特征的傳送到肺的活性劑的比例。
在其它性質(zhì)中，已發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的化合物是強(qiáng)有力的和選擇性的β2腎上腺素能受體激動劑。特別地，與β1和β3腎上腺素能受體比較，本發(fā)明的化合物顯示了對β2腎上腺素能受體有極好的選擇性。此外，已發(fā)現(xiàn)本發(fā)明的化合物具有令人驚訝和出人意料的作用持續(xù)時間。如以下生物測定中描述的，已證明本發(fā)明的化合物在支氣管保護(hù)的動物模型中的作用時間大于24小時。
因此本發(fā)明提供了一種治療哺乳動物中與β2腎上腺素能受體活性有關(guān)的疾病和病癥的方法，所述方法包括向所述哺乳動物給于治療有效量的本發(fā)明的化合物或含本發(fā)明化合物的藥物組合物。
本活性劑還可以用作另外含一種或多種其它的治療劑的組合的一部分。例如，本活性劑可以與一種或多種治療劑聯(lián)合給藥，所述治療劑選自抗炎藥(例如，皮質(zhì)類固醇和非甾體類抗炎藥(NSAIDs)、抗膽堿能藥(特別是毒蕈堿的受體拮抗劑)、其它β2腎上腺素能受體激動劑、抗感染藥(例如，抗生素或抗病毒藥)或抗組胺劑。因此，在進(jìn)一步方面，本發(fā)明提供包含本發(fā)明的化合物和一種或多種治療劑(例如，抗炎藥、抗膽堿能藥、另外的β2腎上腺素能受體激動劑、抗感染藥或抗組胺劑)的組合。
其它的治療劑可以藥物可接受的鹽或溶劑化物的形式使用。合適時，其它治療劑可以光學(xué)上純的立體異構(gòu)體形式使用。
適合的抗炎藥包括皮質(zhì)類固醇和NSAIDs?？梢杂糜谂c本發(fā)明的化合物組合的合適的皮質(zhì)類固醇為那些口服和吸入的皮質(zhì)類固醇及其具有抗炎活性的前藥。實(shí)例包括甲基潑尼松龍、潑尼松龍、地塞米松、氟替卡松丙酸酯、6α，9α-二氟-17α-[(2-呋喃基羰基)氧基]-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸(carbothioic acid)S-氟代甲酯、6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-17α-丙酰氧基-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-(2-氧代-四氫-呋喃-3S-基)酯、倍氯米松酯(例如，17-丙酸酯或17，21-二丙酸酯)、布地奈德、氟尼縮松、莫米松酯(例如，糠酸酯)、曲安奈德、羅氟奈德、環(huán)索奈德、布替可特丙酸酯、RPR-106541和ST-126。優(yōu)選的皮質(zhì)類固醇包括氟替卡松丙酸酯、6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-17α-[(4-甲基-1，3-噻唑-5-羰基)氧基]-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟代甲酯和6α，9α-二氟-17α-[(2-呋喃基羰基)氧基]-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟代甲酯，更優(yōu)選6α，9α-二氟-17α-[(2-呋喃基羰基)氧基]-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟代甲酯。
合適的NSAIDs包括色甘酸鈉、奈多羅米鈉、磷酸二酯酶(PDE)抑制劑(例如茶堿、PDE4抑制劑或者混合的PDE3/PDE4抑制劑)、白三烯拮抗劑(例如，孟魯司特)、白三烯合成抑制劑、iNOS抑制劑、蛋白酶抑制劑如類胰蛋白酶和彈性蛋白酶抑制劑、β-2整聯(lián)蛋白拮抗劑和腺苷受體激動劑或拮抗劑(例如腺苷2a激動劑)、細(xì)胞因子拮抗劑(例如趨化因子拮抗劑，如白介素抗體(αIL抗體)、特別地αIL-4療法、αIL-13療法或其組合)；或者細(xì)胞因子合成抑制劑。合適的其它的β2-腎上腺素受體激動劑包括沙美特羅(例如作為昔萘酸鹽)、沙丁胺醇(例如作為硫酸鹽或者游離堿)、福美特羅(例如作為富馬酸鹽)、非諾特羅或者特布他林及其鹽。
還有益的是本活性劑與磷酸二酯酶4(PDE4)抑制劑或混合的PDE3/PDE4抑制劑組合的用途。代表性的磷酸二酯酶-4(PDE4)抑制劑或混合的PDE3/PDE4抑制劑包括，但是不限于，順式4-氰基-4-(3-環(huán)戊氧基-4-甲氧基苯基)環(huán)己烷-1-羧酸、2-甲氧甲酰-4-氰基-4-(3-環(huán)丙基甲氧基-4-二氟甲氧基苯基)環(huán)己烷-1-酮、順式-[4-氰基-4-(3-環(huán)丙基甲氧基-4-二氟甲氧基苯基)環(huán)己烷-1-醇]、順式-4-氰基-4-[3-(環(huán)戊氧基)-4-甲氧基苯基]環(huán)己烷-1-羧酸等，或其藥學(xué)上可接受的鹽。其它代表性的PDE4或混合的PDE3/PDE4抑制劑包括AWD-12-281(elbion)、NCS-613(INSERM)、D-4418(Chiroscience和Schering-Plough)、CI-1018或PD-168787(Pfizer)、WO 99/16766中公開的苯并間二氧雜環(huán)戊二烯化合物、K-34(Kyowa Hakko)、V-11294A(Napp)、羅氟司特(Byk-Gulden)、WO99/47505中公開的pthalazinone化合物(Byk-Gulden)、Pumafentrine(Byk-Gulden，目前為Altana)、阿羅茶堿(Almirall-Prodesfarma)、VM554/UM565(Vernalis)、T-440(Tanabe Seiyaku)和T2585(TanabeSeiyaku)。
合適的抗膽堿能藥是充當(dāng)毒蕈堿受體拮抗劑的那些化合物，特別是M1、M2或M3受體的拮抗劑的那些化合物或其組合。示范性化合物有顛茄植物的生物堿，例如阿托品、東莨菪堿、后馬托品、莨菪堿；這些化合物通常是作為叔胺的鹽而給藥的。這些藥物、特別是鹽形式容易從大量商業(yè)來源獲得或者可以利用文獻(xiàn)資料制備阿托品-CAS-51-55-8或者CAS-51-48-1(無水形式)，阿托品硫酸鹽-CAS-5908-99-6；阿托品氧化物-CAS-4438-22-6或者其HCl鹽-CAS-4574-60-1和甲基阿托品硝酸鹽-CAS-52-88-0。
后馬托品-CAS-87-00-3，氫溴酸鹽-CAS-51-56-9，甲基溴化物鹽-CAS-80-49-9。
莨菪堿(d，1)-CAS-101-31-5，氫溴酸鹽-CAS-306-03-6和硫酸鹽-CAS-6835-16-1。
東莨菪堿-CAS-51-34-3，氫溴酸鹽-CAS-6533-68-2，甲基溴化物鹽-CAS-155-41-9。
優(yōu)選抗膽堿能藥包括以愛全樂(Atrovent)的名稱銷售的異丙托銨(例如作為溴化物)，氧托銨(例如作為溴化物)和噻托銨(例如作為溴化物)(CAS-139404-48-1)。重要的還有甲胺太林(CAS-53-46-3)、溴化丙胺太林(CAS-50-34-9)、甲溴辛托品或Valpin50(CAS-80-50-2)、克利溴銨(Quarzan，CAS-3485-62-9)、copyrrolate(Robinul)、異丙碘銨(CAS-71-81-8)、溴美噴酯(美國專利2,918,408)、曲地氯胺(Pathilone，CAS-4310-35-4)和甲硫己環(huán)銨(Tral，CAS-115-63-9)。還參見鹽酸環(huán)噴托酯(CAS-5870-29-1)、托品酰胺(CAS-1508-75-4)、鹽酸苯海索(CAS-144-11-6)、哌侖西平(CAS-29868-97-1)、替侖西平(CAS-80880-90-9)、AF-DX 116或者美索曲明和在WO 01/04118中公開的化合物，其公開通過引用結(jié)合到本文中。
合適的抗組胺藥(也稱作H1-受體拮抗劑)包括任何一種或者更多種的大量已知抑制H1-受體并且對于人類使用是安全的拮抗劑。它們都是組胺與H1-受體相互作用的可逆的、競爭性抑制劑。這些抑制劑的大部分，大多數(shù)為第一代拮抗劑，其特征在于，基于它們的核心結(jié)構(gòu)，如乙醇胺、乙二胺和烷基胺。另外，其它的第一代抗組胺藥包括那些可以以基于哌嗪和吩噻嗪為特征的藥物。第二代拮抗劑，其為非-鎮(zhèn)靜的，具有類似的結(jié)構(gòu)-活性關(guān)系，它們保留了核心亞乙基(烷基胺)或者模擬具有哌嗪或者哌啶的叔胺基團(tuán)。舉例說明的拮抗劑如下乙醇胺類馬來酸卡比沙明、富馬酸氯馬斯汀、鹽酸苯海拉明和茶苯海明。
乙二胺類馬來酸美吡拉明、曲吡那敏HCl和枸櫞酸曲吡那敏。
烷基胺類氯吡那敏及其鹽例如馬來酸鹽和阿伐斯汀。
哌嗪類羥嗪HCl、雙羥萘酸羥嗪、賽克利嗪HCl、乳酸賽克利嗪、美克洛嗪HCl和西替利嗪HCl。
哌啶類阿斯咪唑、左卡巴斯汀HCl、氯雷他啶或其脫乙酯基類似物，和特非那定和鹽酸非索非那定或者另一種藥學(xué)上可接受的鹽。
鹽酸氮卓斯汀也是一種H1受體拮抗劑，它可以用于與本發(fā)明的化合物的組合。
優(yōu)選抗組胺藥的實(shí)例包括美沙吡林和氯雷他定。
因此，本發(fā)明在進(jìn)一步方面提供一種含式(I)的化合物或其藥物可接受的鹽或溶劑化物或立體異構(gòu)體與皮質(zhì)類固醇的組合。特別地，本發(fā)明提供一種組合，其中皮質(zhì)類固醇是丙酸氟替卡松或皮質(zhì)類固醇是6α，9α-二氟-17α-[(2-呋喃基羰基)氧基]-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟代甲酯或6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-17α-丙酰氧基-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-(2-氧代-四氫-呋喃-3S-基)酯。
因此，本發(fā)明在進(jìn)一步方面提供了包含式(I)的化合物或其藥物可接受的鹽或溶劑化物或立體異構(gòu)體與PDE4抑制劑的組合。
因此，本發(fā)明在進(jìn)一步方面提供了包含式(I)的化合物或其藥物可接受的鹽或溶劑化物或立體異構(gòu)體與抗膽堿能藥的組合。
因此，本發(fā)明在進(jìn)一步方面提供了包含式(I)的化合物或其藥物可接受的鹽或溶劑化物或立體異構(gòu)體和抗組胺劑的組合。
因此，本發(fā)明在進(jìn)一步方面提供了包含式(I)的化合物或其藥物可接受的鹽或溶劑化物或立體異構(gòu)體連同PDE4抑制劑和皮質(zhì)類固醇的組合。
因此，本發(fā)明在進(jìn)一步方面提供了包含式(I)的化合物或其藥物可接受的鹽或溶劑化物或立體異構(gòu)體連同抗膽堿能藥和皮質(zhì)類固醇的組合。
如以上所用的組合，術(shù)語“式(I)的化合物”包括式(II)的化合物及其優(yōu)選的基團(tuán)，任何單獨(dú)公開的一種或多種化合物。
因此，本發(fā)明藥物組合物可以任選的包含式(I)的化合物或其藥物可接受的鹽或溶劑化物或立體異構(gòu)體與一種或多種其它治療劑，如以上所述的。
本發(fā)明的組合的單個化合物可以分開配制或以單一的藥物組合物配制在一起。單個化合物可以以分開或者組合的藥用制劑順序或者同時給藥。已知治療劑的合適劑量對本領(lǐng)域技術(shù)人員來講是顯而易見的。因此，本發(fā)明的治療方法包括該組合的單個化合物以分開或者組合的藥用制劑順序或者同時給藥。
因此，根據(jù)進(jìn)一步方面，本發(fā)明提供治療哺乳動物中與β2腎上腺素能受體活性有關(guān)的疾病或病癥的方法，包括向哺乳動物給予治療有效量的式(I)的化合物或其藥物可接受的鹽或溶劑化物或立體異構(gòu)體與一種或多種其它治療劑的組合。
由于本發(fā)明的化合物是β2腎上腺素能受體激動劑，所述化合物還可以用作調(diào)查或研究含有β2腎上腺素能受體的生物系統(tǒng)或樣品的研究工具，或用來發(fā)現(xiàn)新的β2腎上腺素能受體激動劑。而且，因?yàn)榕c其它β腎上腺素能亞型受體的結(jié)合和功能活性的比較，本發(fā)明的化合物表現(xiàn)出對β2腎上腺素能受體的選擇性，所以所述化合物還用于研究生物系統(tǒng)或樣品中的β2腎上腺素能受體的選擇性的激動作用。任何含β2腎上腺素能受體的合適的生物系統(tǒng)或樣品可用于所述研究中，該研究可以在體外或體內(nèi)進(jìn)行。適合于研究的代表性的生物系統(tǒng)和樣品包括，但不限于細(xì)胞、細(xì)胞提取物、質(zhì)膜、組織樣品、哺乳動物(如小鼠、大鼠、豚鼠、兔子、狗、豬等)等等。
使含β2腎上腺素能受體的生物系統(tǒng)或樣品與β2腎上腺素能受體-激動(agonizing)量的本發(fā)明的化合物接觸。采用常規(guī)的操作和裝置(如放射配基結(jié)合試驗(yàn)和功能測定)，來確定激動β2腎上腺素能受體的效應(yīng)，例如如下所述的配基-介導(dǎo)的細(xì)胞內(nèi)環(huán)腺苷酸單磷酸(cAMP)變化的測定或相似性質(zhì)的測定。本發(fā)明化合物的β2腎上腺素能受體激動量通常是約1毫微摩爾至約1000毫微摩爾的范圍。當(dāng)本發(fā)明的化合物用作發(fā)現(xiàn)新的β2腎上腺素能受體激動劑的研究工具時，作為分開的實(shí)施方式本發(fā)明還包括，對比數(shù)據(jù)(使用合適的測定)的產(chǎn)生和鑒定目標(biāo)試驗(yàn)化合物的試驗(yàn)數(shù)據(jù)的分析。
下述的非限制性實(shí)施例說明了本發(fā)明的代表性的藥物組合物。本發(fā)明活性化合物的制劑的另外的合適載體還可以在RemingtonTheScience and Practice of Pharmacy，第二十版，Lippincott Williams& Wilkins，Philadelphia，PA，2000中找到。
制劑實(shí)施例A這個實(shí)施例說明了用于本發(fā)明化合物口服給藥的代表性藥物組合物的制備。
成分 每片的量(mg)活性化合物1乳糖、干燥噴霧148硬脂酸鎂 2混合上述成分，填充入硬殼明膠膠囊內(nèi)。
制劑實(shí)施例B這個實(shí)施例說明了用于本發(fā)明化合物口服給藥的另一個代表性藥物組合物的制備。
成分 每片的量(mg)活性化合物1玉米淀粉 50乳糖 145硬脂酸鎂 5以上成分直接混合，壓成有單個壓痕的片劑。
制劑實(shí)施例C這個實(shí)施例說明了用于本發(fā)明化合物口服給藥的代表性藥物組合物的制備。
制備具有以下組分的口服混懸劑。
成分活性化合物 3mg富馬酸 0.5g氯化鈉 2.0g尼泊金甲酯 0.1g砂糖 25.5g山梨糖醇(70％溶液) 12.85g硅酸鎂鋁K(Vanderbilt Co.) 1.0g芳香劑 0.035mL著色劑 0.5mg蒸餾水 適量至100mL制劑實(shí)施例D這個實(shí)施例說明了含本發(fā)明化合物的代表性藥物組合物的制備。制備具有以下組分的已緩沖至pH4的可注射的制劑。
成分活性化合物 0.1mg醋酸鈉緩沖溶液(0.4M) 2.0mLHCl(1N) 適量至pH4水(蒸餾過的、無菌的) 適量至20mL制劑實(shí)施例E這個實(shí)施例說明了用于注射本發(fā)明化合物的代表性藥物組合物的制備。
通過向1mg的本發(fā)明化合物中加入20mL的無菌水制備重制的溶液。使用前，該溶液用200mL的可與活性化合物配伍的靜脈注射的液體稀釋。所述液體選自5％葡萄糖溶液、0.9％氯化鈉溶液或5％的葡萄糖和0.9％的氯化鈉的混合溶液。其它實(shí)施例是乳酸格林注射液、含5％的葡萄糖的乳酸格林注射液、含5％的葡萄糖的Normosol-M、Isolyte E和?；母窳肿⑸湟骸?br> 制劑實(shí)施例F這個實(shí)施例說明了用于本發(fā)明化合物的局部施用的代表性藥物組合物的制備。
成分 克活性化合物 0.2-10司盤60 2吐溫60 2礦物油 5凡士林 10尼泊金甲酯 0.15尼泊金丙酯 0.05BHA(丁基化羥基苯甲醚) 0.01水 適量至100合并以上除了水的所有成分，攪拌下加熱至60℃。在60℃時，在劇烈攪拌下加入足量的水使成分乳化，再適量加入水至100g。
制劑實(shí)施例G這個實(shí)施例說明了含本發(fā)明化合物的代表性藥物組合物的制備。
把0.1mg活性化合物的藥用鹽溶解于用檸檬酸酸化的0.9％的氯化鈉溶液中，制得用于噴霧器的含水氣霧劑制劑。攪拌混合物并超聲處理直到活性鹽溶解完。緩慢加入NaOH調(diào)節(jié)溶液的pH至3-8的范圍。
制劑實(shí)施例H這個實(shí)施例說明了用于吸入藥筒的含本發(fā)明化合物的干粉制劑的制備。
成分mg/藥筒活性化合物的藥用鹽0.2乳糖 25活性化合物的藥用鹽在與乳糖摻和前，先微?；?。使用粉劑吸入器來給予藥筒的內(nèi)含物。
制劑實(shí)施例I這個實(shí)施例說明了用于干粉吸入裝置的含本發(fā)明化合物的干粉制劑的制備。
制備微粒化的藥用鹽和乳糖的體積配方比為1∶200的藥物組合物。把組合物填充入干粉吸入裝置，所述裝置能傳送每劑量約10μg-約100μg的活性藥物成分。
制劑實(shí)施例J這個實(shí)施例說明了用于計(jì)量劑量吸入器的含本發(fā)明化合物的制劑的制備。
將5g平均尺寸小于10μm的微?；w粒的活性化合物分散于膠體溶液中制成含5％的活性化合物的藥用鹽、0.5％卵磷脂和0.5％海藻糖的混懸液，所述膠體溶液由0.5g的海藻糖和0.5g的卵磷脂溶解于100mL的軟化水中形成?；鞈乙簢婌F干燥，所得的物質(zhì)微?；玫狡骄睆叫∮?.5μm的顆粒。將顆粒裝填入含加壓的1，1，1，2-四氟乙烷的罐中。
制劑實(shí)施例K這個實(shí)施例說明了用于計(jì)量劑量吸入器的含本發(fā)明化合物的制劑的制備。
將10g平均尺寸小于10μm的微?；w粒的活性化合物分散于溶液中制成含5％的活性化合物的藥用鹽、0.1％卵磷脂的混懸液，所述溶液由0.2g的卵磷脂溶解于200mL的軟化水中形成?；鞈乙簢婌F干燥，所得的物質(zhì)微?；玫狡骄睆叫∮?.5μm的顆粒。將顆粒裝填入含加壓的1，1，1，2，3，3，3-七氟-正丙烷的罐中。
生物學(xué)測定本發(fā)明的化合物及其藥物可接受的鹽，表現(xiàn)出生物活性，用于藥物治療?；衔锝Y(jié)合β2腎上腺素能受體的能力及其選擇性、激動潛能和內(nèi)在活性，可以用以下的試驗(yàn)A-B證明，或使用本領(lǐng)域已知的其它試驗(yàn)證明。
縮寫％Eff ％效價ATCC 美國典型培養(yǎng)物保藏中心BSA牛血清白蛋白cAMP 3′5′-環(huán)磷酸腺苷DMEM Dulbecco改進(jìn)的Eagle培養(yǎng)基DMSO 二甲亞砜EDTA 乙二胺四乙酸Emax 最大效價FBS胎牛血清Gly甘氨酸HEK-293人胚腎-293PBS磷酸鹽緩沖鹽水rpm轉(zhuǎn)/分Tris 三(羥甲基)氨基甲烷來自表達(dá)人β1或β2腎上腺素能受體的細(xì)胞的膜制劑HEK-293衍生的細(xì)胞系穩(wěn)定地表達(dá)克隆的人β1或β2腎上腺素能受體，使之在含10％的透析的FBS并存在500μg/mL的遺傳霉素(Geneticin)的DMEM中分別地生長到幾乎布滿(匯合，confluency)。使用乙二胺四乙酸鈉(Versene)1∶5,000(PBS中0.2g/L EDTA)和細(xì)胞刮刀移出(lifted)單層細(xì)胞。細(xì)胞在1,000rpm的離心分離下沉淀，細(xì)胞沉淀在-80℃下冷凍保存或立刻制成膜。就制備而言，細(xì)胞沉淀再懸浮于溶胞緩沖液(10mM的Tris/HCL pH 7.4@4℃，每50mL的緩沖液(Roche cat.#1697498，Roche Molecular Biochemicals，Indianapolis，IN)有一片“含2mM的EDTA的完全性蛋白酶抑制劑混合物片”)，并在冰上使用吻合緊密的Dounce玻璃勻漿器(20strokes)勻化。勻漿在20,000xg下離心分離，經(jīng)過如上的再懸浮和離心分離，該沉淀用溶胞緩沖液洗一次。最后的沉淀(pellet)再懸浮于膜緩沖液(75mM的Tris/HCl pH 7.4，12.5mM的MgCl2，1mM的EDTA@25℃)。用Bradford的方法(Bradford MM.，Analytical Biochemistry，1976，72，248-54)測定膜懸浮液的蛋白質(zhì)濃度。薄以等分試樣在-80℃下冷凍保存。
試驗(yàn)A對人β1和β2腎上腺素能受體的放射配基結(jié)合試驗(yàn)結(jié)合測定在96-孔的微量滴定板中進(jìn)行，在測定緩沖液(75mM的Tris/HCl pH 7.4@25℃，12.5mM的MgCl2，1mM的EDTA，0.2％的BSA)中以100μL的總測定量，含有5μg的含有人β2腎上腺素能受體膜的膜蛋白或含2.5μg的含有人β1腎上腺素能受體膜的膜蛋白。采用[3H]二氫阿普洛爾(NET-720，100Ci/mmol，PerkinElmer LifeSciences Inc.，Boston，MA)在從0.01nM-200nM的10個不同的濃度范圍下，進(jìn)行放射性配基的Kd值的測定的飽和結(jié)合研究。用1nM的[3H]二氫阿普洛爾和從40pM-10μM的10個不同的濃度的化合物，進(jìn)行化合物pKi值的測定的置換測定。化合物溶解于溶解緩沖液(25mM的Gly-HCl，pH3.0，含50％的DMSO)中濃度為10mM，然后在50mM的pH3.0的Gly-HCl中稀釋至1mM，從這里連續(xù)稀釋成測定的緩沖液。在存在10μM的未標(biāo)記的阿普洛爾的條件下，測定非特異結(jié)合。測定在室溫下溫育(incubated)90分鐘，通過預(yù)先浸漬在0.3％的聚乙烯亞胺中的GF/B玻璃纖維濾板(Packard BioScience Co.，Meriden，CT)快速過濾使反應(yīng)終止。濾板用濾過的緩沖液(75mM的Tris/HCl，pH7.4@4℃，12.5mM的MgCl2，1mM的EDTA)沖洗三次除去未結(jié)合放射性配基。將板干燥，加入50μL的Microscint-20液體閃爍流體(Packard BioScience Co.，Meriden，CT)，板用液體閃爍計(jì)數(shù)器(Packard BioScience Co.，Meriden，CT)計(jì)數(shù)。采用使用一位點(diǎn)競爭的3參數(shù)模型的GraphPad Prism軟件包(GraphPad Software，Inc.，San Diego，CA)通過非線性回歸分析結(jié)合數(shù)據(jù)。當(dāng)存在10μM的阿普洛爾的條件下測定時，曲線最小值固定在非特異結(jié)合的值上。采用Cheng-Prusoff方程，從觀察到的IC50值和放射性配基的Kd值計(jì)算化合物的Ki(Cheng Y.和Prusoff WH.，Biochemical Pharmacology，1973年，22期，23期，第3099-108頁)。受體亞型選擇性計(jì)算為Ki(β1)/Ki(β2)之比。本發(fā)明的化合物證明，與β1腎上腺素能受體的結(jié)合比，與β2腎上腺素能受體的結(jié)合更好，即，Ki(β1)＞Ki(β2)，選擇性大于約30。
試驗(yàn)B分別異源地表達(dá)人β1腎上腺素受體、β2腎上腺素受體和β3腎上腺素受體的細(xì)胞系的全細(xì)胞cAMP閃式板(Flashplate)測定法穩(wěn)定地表達(dá)克隆的人β1腎上腺素能受體(克隆H34.1)的HEK-293細(xì)胞系，在由用10％的FBS和500μg/mL的遺傳霉素補(bǔ)充的DMEM組成的培養(yǎng)基中長到約70％-90％的匯合(confluency)。穩(wěn)定地表達(dá)克隆的人β2-腎上腺素受體(克隆H24.14)的HEK-293細(xì)胞系在相同的培養(yǎng)基中長到全部匯合。穩(wěn)定地表達(dá)人β3-腎上腺素受體的CHO-K1的細(xì)胞系在用10％FBS和每第五傳代加入800μg/mL的遺傳霉素補(bǔ)充的Ham’s F-12培養(yǎng)基中長到70％-90％的匯合。在測定前一天，培養(yǎng)物都轉(zhuǎn)換到相同的不含抗生素的生長培養(yǎng)基中。
根據(jù)廠商的說明書，采用含125I-cAMP的閃式板腺苷酸環(huán)化酶活化測定系統(tǒng)(NEN SMP004，PerkinElmer Life Sciences Inc.，Boston，MA)的放射免疫測定格式完成cAMP的測定。
在測定的當(dāng)天，細(xì)胞用PBS漂洗一次，用1∶5,000的乙二胺四乙酸(PBS中含0.2g/L的EDTA)懸浮起來(lifted)并計(jì)數(shù)。在1,000rpm下，細(xì)胞用離心機(jī)分離沉淀，再懸浮在預(yù)加熱至37℃的刺激緩沖液中。因?yàn)榧?xì)胞表達(dá)β1-腎上腺素受體，10nM的ICI 118,551加入刺激緩沖液，細(xì)胞在37℃下溫育10分鐘。細(xì)胞在分別表達(dá)β1-腎上腺素受體-、β2-腎上腺素受體-和β3-腎上腺素受體的細(xì)胞的30,000、40,000和70,000個細(xì)胞/孔的最后濃度下使用。化合物溶解于DMSO為10mM的濃度，然后用50mM的pH3.0的Gly-HCl稀釋至1mM，從這里連續(xù)稀釋成分析緩沖液(75mM的Tris/HCl，pH7.4@25℃，12.5mM的MgCl2，1mM的EDTA，0.2％的BSA)。化合物在測定法中以10μM-9.5pM的11個不同的濃度進(jìn)行試驗(yàn)。反應(yīng)在37℃下溫育10分鐘，通過加入100μL的冰冷的檢驗(yàn)緩沖液停止反應(yīng)。將平皿密封，在4℃下溫育整夜，在第二天早上用topcount閃爍計(jì)數(shù)器(Packard BioScience Co.，Meriden，CT)計(jì)數(shù)?；谟^察到的樣品和cAMP標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算出反應(yīng)每mL產(chǎn)生的cAMP的量，如廠商的使用說明書描述的。采用使用S形劑量響應(yīng)(希爾斜率＝1)的3參數(shù)模型的GraphPad Prism軟件包(GraphPadSoftware，Inc.，San Diego，CA)通過非線性回歸分析數(shù)據(jù)。激動劑的效力表達(dá)為pEC50值。
本發(fā)明的化合物顯示了在測定中對β2腎上腺素能受體的有效活性，如證據(jù)pEC50值大于約9所示。此外，測試的化合物顯示了在功能性活動中與β1受體和β3受體相比，對β2受體有選擇性。特別地，本發(fā)明的化合物顯示了EC50(β1)/EC50(β2)之比大于約10，EC50(β3)/EC50(β2)之比大于約50。
試驗(yàn)C內(nèi)源性地表達(dá)人β2腎上腺素能受體的肺上皮細(xì)胞系的全細(xì)胞cAMP閃式板測定法因?yàn)樵诒磉_(dá)內(nèi)源性水平的β2腎上腺素能受體的細(xì)胞系中測定激動劑潛能和效力(內(nèi)在活性)，所以使用人肺上皮細(xì)胞系(BEAS-2B)(ATCC CRL-9609，American Type Culture Collection，Manassas，VA)(January B等人，British Journal of Pharmacology，1998年，123卷第4期，第701-11頁)。細(xì)胞在完全無血清的培養(yǎng)基(含腎上腺素和維甲酸的LHC-9 MEDIUM，cat #181-500，BiosourceInternational，Camarillo，CA)長到75％-90％的匯合。在測定前一天，培養(yǎng)基轉(zhuǎn)換為LHC-8(不含腎上腺素和維甲酸，cat #141-500，Biosource International，Camarillo，CA)。
根據(jù)廠商的說明書，采用含125I-cAMP的閃式板腺苷酸環(huán)化酶活化測定系統(tǒng)(NEN SMP004，PerkinElmer Life Sciences Inc.，Boston，MA)的放射免疫測定格式完成cAMP的測定。
在測定的當(dāng)天，細(xì)胞用PBS漂洗，刮下并用5mM的含EDTA的PBS懸浮起來，并計(jì)數(shù)。在1,000rpm下，細(xì)胞用離心機(jī)分離沉淀，再以600,000細(xì)胞/mL的最后濃度懸浮于預(yù)加熱至37℃的刺激緩沖液中。在測定中，細(xì)胞使用30,000細(xì)胞/mL的最終濃度?；衔锶芙庥谌芙饩彌_液(25mM的pH3.0的Gly-HCl，含50％的DMSO)中為10mM的濃度，然后用50mM的pH3.0的Gly-HCl稀釋至1mM，從這里連續(xù)稀釋成測定的緩沖液(75mM的Tris/HCl，pH7.4@25℃，12.5mM的MgCl2，1mM的EDTA，0.2％的BSA)。
化合物在測定中在10μM-40pM的10個不同濃度下進(jìn)行試驗(yàn)。最大響應(yīng)在存在10μM的異丙醇的條件下確定。反應(yīng)在37℃下溫育10分鐘，通過加入100μL的冰冷的檢驗(yàn)緩沖液停止反應(yīng)。把平皿密封，在4℃下溫育整夜，在第二天早上用topcount閃爍計(jì)數(shù)器(PackardBioScience Co.，Meriden，CT)計(jì)數(shù)?；谟^察到的樣品和cAMP標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算出反應(yīng)每mL產(chǎn)生的cAMP的量，如廠商的使用手冊中描述的。采用具有可變斜率的S形劑量響應(yīng)的4參數(shù)模型的GraphPad Prism軟件包(GraphPad Software，Inc.，San Diego，CA)通過非線性回歸進(jìn)行數(shù)據(jù)分析。在這個測定中，試驗(yàn)的本發(fā)明的化合物證明pEC50值大于約8。
化合物的效價(％Eff)由觀察到的Emax(擬合曲線的頂點(diǎn))和從10μM的異丙醇獲得的最大響應(yīng)之比計(jì)算出，表達(dá)為相對于異丙醇的％Eff。證明測試的化合物％Eff大于約50。
試驗(yàn)D豚鼠模型中的對抗乙酰膽堿誘導(dǎo)的支氣管痙攣的支氣管保護(hù)的測定幾組體重介于250和350g之間的6只雄性豚鼠(Duncan-Hartley(HsdPocDH)Harlan，Madison，WI)，分別用籠子卡片辨別。自始至終，允許研究的動物隨意地吃食物和喝水。
在全身暴露于定量給藥室(dosing chamber)(R&S Molds，SanCarlos，CA)中，通過吸入10分鐘給予測試的化合物。安排定量給藥室，使氣霧劑從中央的多支管(central manifold)同時遞送到6個單獨(dú)的室(chamber)。60分鐘順應(yīng)周期和暴露于噴霧的注射用水(WFI)10分鐘后，豚鼠暴露于試驗(yàn)化合物的氣霧劑或載體(WFI)。這些氣霧劑由使用22psi壓力的氣體混合物(CO2＝5％、O2＝21％和N2＝74％)推動的LC星級噴霧裝置(型號22F51，PARI呼吸裝備，Inc.Midlothian，VA)的水溶液產(chǎn)生。在工作壓力下通過噴霧器的氣流大約是3L/分鐘。產(chǎn)生的氣霧劑通過正壓推進(jìn)腔內(nèi)。未稀釋的空氣用于霧化器溶液的傳送。在10分鐘的噴霧過程中，大約噴霧了1.8mL的溶液。通過比較噴霧前后的填充了液體的噴霧器的重量，用重量分析法測量出噴霧的溶液的量。
服藥后1.5、24、48和72小時，采用全身體積描記法評價吸入法給藥的化合物的支氣管保護(hù)的效果。肺部評估開始前45分鐘，每只豚鼠肌內(nèi)注射氯胺酮(43.75mg/kg)、賽拉嗪(3.50mg/kg)、乙酰丙嗪(1.05mg/kg)來麻醉。外科手術(shù)位點(diǎn)剃毛和用70％的酒精清理過后，做一個2-5cm的頸前側(cè)面的中線切口。然后，分離頸靜脈，用充滿生理鹽水的聚乙烯導(dǎo)管(PE-50，Becton Dickinson，Sparks，MD)插管，使靜脈內(nèi)輸注0.1mg/mL的乙酰膽堿(Ach)的生理鹽水溶液(Sigma-Aldrich，St.Louis，MO)。然后，自由地切開氣管，用14G聚四氟乙烯管(#NE-014，Small Parts，Miami Lakes，F(xiàn)L)插管。如果需要，通過另外肌肉內(nèi)注射前面提及的麻醉劑混合物來保持麻醉。如果動物對捏擰其腳爪有反應(yīng)或其呼吸速率大于100次/分鐘，監(jiān)視并調(diào)節(jié)麻醉的深度。
一旦完成插管，將動物固定在體積描記器(#PLY3114，BuxcoElectronics，Inc.，Sharon，CT)上，插入食管壓力插管來測量肺驅(qū)動壓(壓力)。聚四氟乙烯氣管的導(dǎo)管連在體積描記器的開口上，使豚鼠呼吸給藥室外面的房間空氣。密封給藥室。熱燈用于維持體溫，吸入4mL的空氣，豚鼠的肺膨脹3次，采用10mL的標(biāo)準(zhǔn)刻度注射器(#5520級，Hans Rudolph，Kansas City，MO)，來確保下面的氣道不會萎陷并且動物不會遭受通氣過度的痛苦。
基線值在順應(yīng)性的0.3-0.9ml/H2O的范圍內(nèi)，在耐藥性的每秒0.1-0.199cm H2O/mL的范圍內(nèi)，一旦確定就開始肺的評估。Buxco肺測量計(jì)算機(jī)程序能夠采集并導(dǎo)出與肺有關(guān)的值。啟動引起實(shí)驗(yàn)原始記錄和采集的數(shù)據(jù)的程序。隨時間在體積描記器內(nèi)出現(xiàn)的每次呼吸的體積變化，通過Buxco壓力傳感器測量。通過累計(jì)隨時間出現(xiàn)的信號，計(jì)算出每次呼吸測量的流量。信號與肺的驅(qū)動壓一起變化，使用Sensym壓力傳感器(#TRD4100)采集信號，通過Buxco(MAX 2270)前置放大器將信號和數(shù)據(jù)采集界面(#’s SFT3400和SFT3813)相連接。所有其它與肺有關(guān)的參數(shù)從這兩個輸入信號導(dǎo)出。
基線值采集5分鐘，5分鐘后豚鼠與Ach發(fā)生激發(fā)。Ach從實(shí)施例1開始按照下述的劑量和規(guī)定的時間從注射泵(sp210iw，WorldPrecision Instruments，Inc.，Sarasota，F(xiàn)L)中由靜脈內(nèi)輸入1分鐘在5分鐘時1.9μg/分，在10分鐘時3.8μg/分，在15分鐘時7.5μg/分，在20分鐘時15.0μg/分，在25分鐘時30μg/分，在30分鐘時60μg/分。如果緊跟每次Ach給藥后的3分鐘耐藥性或順應(yīng)性沒有回到基線值，豚鼠的肺隨著來自10mL的標(biāo)準(zhǔn)刻度注射器的4mL的空氣已經(jīng)膨脹了3次。記錄的與肺有關(guān)的參數(shù)包括呼吸(呼吸/分鐘)、順應(yīng)性(mL/cm H2O)和肺耐藥性(每秒的cm H2O/mL)(Giles et al.，1971)。一旦在這個實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的35分鐘完成肺功能測量，將豚鼠從體積描記器上移開，通過CO2窒息安樂死。
量PD2，其定義為使基線肺耐藥性加倍的所需Ach的量，其采用肺耐藥性值計(jì)算出，所述肺耐藥性值使用下列方程由Ach激發(fā)范圍內(nèi)的流量和壓力導(dǎo)出。從所用的方程導(dǎo)出臨床上的PC20的計(jì)算值(Am.Thoracic Soc，2000)。
PD2=antilog[logC1+(logC2-logC1)(2R0-R1)R2-R1]]]>其中C1＝第二次至最后一次Ach濃度(C2前面的濃度)C2＝Ach最后濃度(導(dǎo)致肺耐藥性(RL)增加兩倍的濃度)R0＝基線RL值R1＝C1后的RL值R2＝C2后的RL值使用方差的單相分析完成數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析，接著使用Bonferroni/Dunn試驗(yàn)完成此后的分析。P-值＜0.05認(rèn)為是顯著的。
劑量響應(yīng)曲線與四參數(shù)對數(shù)方程擬合，采用GraphPad Prism，Windows 3.00版本(GraphPad Software，San Diego，California)。
Y＝Min+(Max-Min)/(1+10^((logED50-X)*Hillslope))，其中X是劑量的對數(shù)，Y是響應(yīng)值(PD2)，且Y在最小值開始，漸近地到最大值，具有S形。
發(fā)現(xiàn)本發(fā)明代表性的化合物在服藥后超過24小時的時間點(diǎn)上具有顯著的支氣管保護(hù)活性。
提供以下的合成實(shí)施例用于說明本發(fā)明，無論如何并不理解為限制本發(fā)明的范圍。
實(shí)施例一般的除非另外指出，試劑、起始物質(zhì)和溶劑是從供應(yīng)商處購得，例如Sigma-Aldrich(St.Louis，MO)、J.T.Baker(Phillipsburg，NJ)和Honeywell Burdick和Jackson(Muskegon，MI)，并且無需進(jìn)一步純化而使用；反應(yīng)在氮保護(hù)氣氛下進(jìn)行；用薄層色譜法(二氧化硅TLC)、分析型高效液相色譜法(分析HPLC)或質(zhì)譜測定法監(jiān)測反應(yīng)混合物；反應(yīng)混合物通常用硅膠快速柱色譜法或用制備HPLC，采用以下所述的一般方案提純；NMR試樣溶解于氘代溶劑(CD3OD、CDCl3或DMSO-d6)中，光譜用Varian Gemini 2000儀器(300MHz)在標(biāo)準(zhǔn)參數(shù)下獲得；采用Perkin Elmer儀器(PE SCIEX API 150 BX)的電噴離子化方法(ESMS)進(jìn)行質(zhì)譜測定法鑒別。
實(shí)施例15-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-氨基-2-甲基-丙氧基)-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-羥基-乙基]-8-羥基-1H-喹啉-2-酮的合成a.4-(2-氨基-2-甲基-丙氧基)-苯胺鹽酸化物的制備劇烈攪拌氫化鈉(60％分散于礦物油，11.32g、0.28mol)的二甲亞砜(400mL)漿液，在45℃下加熱1小時。然后，向這個漿液中加入純的2-氨基-2-甲基-1-丙醇(25.3g，1當(dāng)量)。反應(yīng)混合物加熱至75℃，持續(xù)1小時，再在冰浴中冷卻至20℃。緩慢加入1-氟代-4-硝基苯(40g，1當(dāng)量)并保持溫度低于30℃，所得的暗紅溶液在室溫下進(jìn)一步攪拌1小時。用水(1000mL)結(jié)束反應(yīng)，用二氯甲烷(500mL)萃取，洗滌有機(jī)層(1∶1飽和氯化鈉水溶液∶水，1000mL)。向有機(jī)層中加入3M的鹽酸(400ml)來沉淀得到產(chǎn)物。再濾過所得的橙色固體，并用二氯甲烷沖洗直到濾液為無色。
固體物質(zhì)立刻轉(zhuǎn)移至氫化燒瓶內(nèi)。加入鈀(碳載10％w/w，50％w/w水)，接著加入甲醇(500mL)。在3個大氣壓的氫氣下，劇烈振搖漿液16小時。然后濾掉催化劑，減壓除去溶劑，通過用甲苯(3×150mL)共沸干燥得到的固體，獲得標(biāo)題中間產(chǎn)物，為白色固體(40g，0.18mol，65％)。
b.5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-氨基-2-甲基-丙氧基)-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-(叔-丁基-二甲基-硅烷氧基)-乙基]-8-苯甲氧基-1H-喹啉-2-酮的制備在90℃下，步驟a的產(chǎn)物(23.2g，1.1當(dāng)量)、8-芐氧基-5-{(R)-2-[2-(4-溴代-苯基)-乙氨基-1-(叔-丁基-二甲基-硅烷氧基)-乙基]-1H-喹啉-2-酮的鹽酸化物(66.0g，0.1mol)和叔丁醇鈉(54.0g，5.5當(dāng)量)的混合物在甲苯(600mL)中攪拌，直到獲得均一的溶液。加入三(二亞芐基丙酮)鈀(1.4g，0.015當(dāng)量)，接著加入外消旋-2，2′-二(二苯基膦基)-1，1′-二萘基(2.87g，0.045當(dāng)量)。反應(yīng)混合物在90℃下攪拌3小時，再使其冷卻。溶液用水(100mL)洗，用1∶1的飽和的氯化鈉水溶液∶水(100mL)洗，然后通過硫酸鈉干燥。減壓除去溶劑獲得標(biāo)題中間產(chǎn)物，為暗褐色固體(40g粗制的)，其無需進(jìn)一步純化即可使用。
c.5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-氨基-2-甲基-丙氧基)-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-羥基-乙基]-8-芐氧基-1H-喹啉-2-酮的制備上步的產(chǎn)物用含三乙胺三氫氟化物(36g)的2-丙醇(500mL)/乙醇(100mL)溶液在室溫下處理16小時。混合物減壓濃縮至其原體積的三分之一。加入1M的氫氧化鈉水溶液(500mL)，接著加入乙腈(500mL)和乙酸異丙酯(500mL)。除去水層，有機(jī)相用1∶1的飽和氯化鈉水溶液∶水(400mL)洗，再用飽和氯化鈉水溶液(400mL)洗。有機(jī)層通過硫酸鈉干燥，在真空下除去溶劑獲得標(biāo)題中間產(chǎn)物(50g粗制的)，為棕色固體，其無需進(jìn)一步純化即可使用。
d.5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-氨基-2-甲基-丙氧基)-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-羥基-乙基]-8-羥基-1H-喹啉-2-酮的合成氫氧化鈀(10g，碳載20％w/w，水50％w/w)加到上步反應(yīng)得到的產(chǎn)物中，接著加入乙醇(500mL)。在一個大氣壓的氫氣下，劇烈攪拌該漿體8小時。濾掉催化劑，減壓濃縮濾液得到標(biāo)題化合物(40g)，其用反相HPLC純化，并凍干分離，為其三氟乙酸鹽。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)10.4(s，1H)，9.3(br s，1H)，8.7(br s，1H)，8.15(m，2H)，7.8(br s，1H)，7.03(d，1H，J＝8.2)，6.76-7.01(m，10H)，6.42(d，1H，J＝9.6)，6.1(br s，1H)，5.33(d，1H，J＝9.1)，3.8(s，2H)，2.7-3.1(m，6H)，1.21(s，6H)；C29H34N4O4的m/z[M+H+]的計(jì)算值為503.3；實(shí)測值為503.5。
實(shí)施例2-8化合物2-8的合成除了在步驟a用適合的醇代替2-氨基-2-甲基-1-丙醇外，采用與實(shí)施例1中描述的那些相似的步驟，制得化合物2-8的三氟乙酸鹽。
化合物25-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-氨基-乙氧基)-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-羥基-乙基]-8-羥基-1H-喹啉-2-酮C27H31N4O4的m/z[M+H+]的計(jì)算值為475.2，實(shí)測值為475.3。
化合物35-[(R)-2-(2-{4-[4-(3-氨基-丙氧基)-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-羥基-乙基]-8-羥基-1H-喹啉-2-酮C28H33N4O4的m/z[M+H+]的計(jì)算值為489.2，實(shí)測值為489.5。
化合物45-[(R)-2-(2-{4-[4-(4-氨基-丁氧基)-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-羥基-乙基]-8-羥基-1H-喹啉-2-酮C29H35N4O4的m/z[M+H+]的計(jì)算值為503.3，實(shí)測值為503.5。
化合物55-{(R)-2-[2-(4-{4-[2-(2-氨基-乙氧基)-乙氧基]-苯基氨基}-苯基)-乙氨基]-1-羥基-乙基}-8-羥基-1H-喹啉-2-酮C29H35N4O5的m/z[M+H+]的計(jì)算值為519.3，實(shí)測值為519.5。
化合物68-羥基-5-[(R)-1-羥基-2-(2-{4-[4-(2-嗎啉-4-基-乙氧基)-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-乙基]-1H-喹啉-2-酮C31H37N4O5的m/z[M+H+]的計(jì)算值為545.3，實(shí)測值為545.6。
化合物78-羥基-5-[(R)-1-羥基-2-(2-{4-[4-(2-哌嗪-1-基-乙氧基)-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-乙基]-1H-喹啉-2-酮C31H38N5O4的m/z[M+H+]的計(jì)算值為544.7，實(shí)測值為544.7。
化合物88-羥基-5-[(R)-1-羥基-2-(2-{4-[4-嘧啶-2-基甲氧基]-苯基氨基}-苯基)-乙氨基]-乙基]-1H-喹啉-2-酮C31H31N4O4的m/z[M+H+]的計(jì)算值為523.1，實(shí)測值為523.2。
實(shí)施例95-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-氨基-2-甲基-丙氧基)-3-三氟甲基-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-羥基-乙基]-8-羥基-1H-喹啉-2-酮的合成除了在步驟a中用1-氟代-4-硝基-2-三氟甲苯替代1-氟代-4-硝基苯之外，采用與實(shí)施例1中描述的那些相似的步驟，制得標(biāo)題化合物。C30H34F3N4O4的m/z[M+H+]的計(jì)算值為571.3，實(shí)測值為571.3。
實(shí)施例108-羥基-5-{(R)-1-羥基-2-[2-(4-{4-[2-(4-甲烷磺?；?哌嗪-1-基)-乙氧基]-苯基氨基}-苯基)-乙氨基]-乙基}-1H-喹啉-2-酮的合成a.8-芐氧基-5-[(R)-1-(叔-丁基-二甲基-硅烷氧基)-2-(2-{4-[4-(2-哌嗪-1-基-乙氧基)-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-乙基]-1H-喹啉-2-酮的制備除了在步驟a中用N-(2-羥基乙基)哌嗪替換2-氨基-2-甲基-1-丙醇之外，采用與實(shí)施例1中，步驟a和b，描述的那些相似的步驟，制得標(biāo)題中間產(chǎn)物。
b.8-芐氧基-5-{(R)-1-(叔-丁基-二甲基-硅烷氧基)-2-[2-(4-{4-[2-(4-甲烷磺?；?哌嗪-1-基)-乙氧基]-苯基氨基}-苯基)-乙氨基]-乙基}-1H-喹啉-2-酮的制備步驟a的產(chǎn)物(100mg)用含甲烷磺?；然?15.3mg，1當(dāng)量)的二異丙基乙胺(0.14mL)和四氫呋喃(2mL)的混合液在室溫下處理1小時。蒸發(fā)混合物產(chǎn)出標(biāo)題中間產(chǎn)物。
c.8-羥基-5-{(R)-1-羥基-2-[2-(4-{4-[2-(4-甲烷磺?；?哌嗪-1-基)-乙氧基]-苯基氨基}-苯基)-乙氨基]-乙基}-1H-喹啉-2-酮的合成采用與實(shí)施例1中步驟c和d描述的那些相似的步驟，步驟b的中間產(chǎn)物轉(zhuǎn)化成標(biāo)題化合物。C32H40N5O6S的m/z[M+H+]的計(jì)算值為622.3，實(shí)測值為622.5。
實(shí)施例115-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-氨基-乙基)-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-羥基-乙基]-8-羥基-1H-喹啉-2-酮的合成a.5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-氨基-乙基)-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-(叔-丁基-二甲基-硅烷氧基)-乙基]-8-芐氧基-1H-喹啉-2-酮的制備在室溫下，向含2-(4-氨基苯基)乙胺(0.100g，0.740mmol)、8-芐氧基-5-{(R)-2-[2-(4-溴代-苯基)-乙氨基-1-(叔-丁基-二甲基-硅烷氧基)-乙基]-1H-喹啉-2-酮的鹽酸化物(0.393g，0.612mmol)和叔丁醇鈉(0.265g，2.75mmol)的甲苯(20mL)溶液中加入三(二亞芐基丙酮)二鈀(O)(0.028g，0.031mmol)，接著加入外消旋-2，2′-二(二苯基膦基)-1，1′-二萘基(0.057g，0.092mmol)。所得混合物在90℃下加熱2小時，再使其冷卻。溶液用水(100mL)洗，再用1∶1飽和氯化鈉水溶液∶水(100mL)洗，然后通過硫酸鈉干燥。減壓除去溶劑，獲得標(biāo)題中間產(chǎn)物，為暗褐色固體(0.473g)，其無需進(jìn)一步純化即可使用。
b.5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-氨基-乙基)-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-羥基-乙基]-8-芐氧基-1H-喹啉-2-酮的制備上步的產(chǎn)物(0.473g，0.714mmol)用含三乙胺三氫氟化物(0.173g，1.07mmol)的四氫呋喃(20mL)在室溫下處理16小時?；旌衔镉枚燃淄?100mL)和水(100mL)稀釋。劇烈攪拌所得的混合物，加入1N的氫氧化鈉水溶液成堿性(pH＞10)。有機(jī)相用水(200mL)洗，再用飽和的氯化鈉水溶液(200mL)洗。有機(jī)層通過硫酸鎂干燥，減壓除去溶劑獲得標(biāo)題中間產(chǎn)物(0.500g)，為棕色固體，其無需進(jìn)一步純化即可使用。
c.5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-氨基-乙基)-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-羥基-乙基]-8-羥基-1H-喹啉-2-酮的合成將鈀(0.100g，活性碳載10％wt.)加入到含上步產(chǎn)物的1∶1甲醇∶二氯甲烷(20mL)溶液中。漿液在一個大氣壓的氫氣下劇烈攪拌16小時。反應(yīng)混合物通過硅藻土過濾，并減壓濃縮獲得標(biāo)題化合物，其用反相HPLC純化，并凍干分離，為其三氟乙酸鹽。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ10.4(d，2H)，8.6(br s，2H)，8.0(d，2H)，7.7(brs，3H)，7.0(d，1H)，6.96(d，4H)，6.84-6.88(m，4H)，6.45(d，1H)，6.08(s，1H)，5.19(d，1H)，3.0-3.2(m，2H)，2.8(br s，2H)，2.72-2.75(m，2H)，2.62(m，2H)；C27H30N4O3的m/z[M+H+]的計(jì)算值為458.56，實(shí)測值為459.4。
實(shí)施例125-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-二甲基氨基-乙基)-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-羥基-乙基]-8-羥基-1H-喹啉-2-酮的合成a.二甲基-[2-(4-硝基-苯基)-乙基]-胺的制備將鹽酸二甲胺(0.390g，4.78mmol)加入到含4-硝基苯乙基溴化物(1.0g，4.35mmol)和N，N-二異丙基乙胺(1.69g，13.05mmol)的無水二甲基甲酰胺(20mL)溶液中。反應(yīng)混合物加熱至60℃，持續(xù)5小時，再使其冷卻。溶液用1∶1的水∶二氯甲烷(200mL)稀釋，加入到分液漏斗中。收集有機(jī)層，產(chǎn)物用1N的氯化氫溶液萃取。除去有機(jī)層，水層加入1N氫氧化鈉水溶液成堿性。產(chǎn)物用二氯甲烷(100mL)萃取并用飽和氯化鈉水溶液(200ml)洗滌。有機(jī)層通過硫酸鎂干燥，減壓除去溶劑獲得標(biāo)題中間產(chǎn)物(0.426g粗制的)，為澄清的油，無需進(jìn)一步純化即可使用。
b.4-(2-二甲基氨基-乙基)-苯胺的制備將鈀(0.043g，活性碳載10％wt.)加入到含上步產(chǎn)物(0.430g，2.2mmol)的甲醇(20mL)溶液中。漿液在一個大氣壓的氫氣下劇烈攪拌6小時。過濾反應(yīng)混合物，濾液減壓濃縮獲得標(biāo)題中間產(chǎn)物(0.307g粗制的)，其無需進(jìn)一步純化即可使用。
c.5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-二甲基氨基-乙基)-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-羥基-乙基]-8-羥基-1H-喹啉-2-酮的合成除了用上步的產(chǎn)物替換實(shí)施例11步驟a中的2-(4-氨基苯基)乙胺之外，采用與實(shí)施例11中描述的那些相似的步驟，制得標(biāo)題化合物的三氟乙酸鹽。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ10.4(s，2H)，9.8(brs，1H)，8.9(br s，1H)，8.7(br s，1H)，8.0(d，2H)，6.8-7.2(m，10H)，6.4(d，1H)，6.2(br s，1H)，5.2(d，1H)，2.8-3.1(m，6H)，2.3-2.7(m，8H)；C29H34N4O3的m/z[M+H+]的計(jì)算值為486.61，實(shí)測值為487.5。
實(shí)施例135-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-氨基-2-甲基-丙基)-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-羥基-乙基]-8-羥基-1H-喹啉-2-酮的合成a.1，1-二甲基-2-(4-硝基-苯基)-乙胺的制備α，α-二甲基苯乙胺鹽酸化物(20g，108mmol)溶解于濃縮的硫酸(40mL)中。溶液冷卻至-10℃。在30分鐘內(nèi)滴加硝酸(31mL，90％)并保持反應(yīng)溫度低于-5℃。溶液再攪拌45分鐘，然后傾倒在冰上，過夜使其加溫到室溫。過濾收集產(chǎn)物(13.7g)。氫氧化銨水溶液(1N)加入到濾液中，分離標(biāo)題化合物，為澄清的油。
b.4-(2-氨基-2-甲基-丙基)-苯胺的制備將鈀(0.136g，活性碳載10％wt.)加入到含步驟a的產(chǎn)物(1.36g，7.0mmol)的甲醇(20mL)溶液中。漿液在一個大氣壓的氫氣下劇烈攪拌6小時。過濾反應(yīng)混合物，減壓濃縮濾液獲得標(biāo)題中間產(chǎn)物(1.04g粗制的)，其無需進(jìn)一步純化即可使用。
c.5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-氨基-2-甲基-丙基)-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-羥基-乙基]-8-羥基-1H-喹啉-2-酮的合成除了用上步的產(chǎn)物替換實(shí)施例11步驟a中的2-(4-氨基苯基)乙胺之外，采用與實(shí)施例11中描述的那些相似的步驟，制得標(biāo)題化合物的三氟乙酸鹽。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δ10.4(d，2H)，8.8(brs，1H)，8.65(br s，1H)，8.0(d，2H)，7.7(s，3H)，6.8-7.0(m，8H)，6.4(d，1H)，6.1(br s，1H)，5.2(d，1H)，3(br s，4H)，2.7(m，2H)，2.6(s，2H)，1.0(s，6H)；C29H34N4O3的m/z[M+H+]的計(jì)算值為486.61，實(shí)測值為487.5。
實(shí)施例14N-{5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-氨基-2-甲基-丙氧基)-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-羥基-乙基]-2-羥基-苯基}-甲酰胺的合成a.[4-(2-氨基-2-甲基-丙氧基-苯基)-[4-(2-氨基乙基)-苯基]-胺的制備在90℃下，4-(2-氨基-2-甲基-丙氧基)-苯胺(1.0g，5.5mmol)(實(shí)施例1、a部分的中間產(chǎn)物的游離堿)、4-溴代苯乙胺(1.1g，1當(dāng)量)和數(shù)丁醇鈉(1.9g，3.5當(dāng)量)的混合物在甲苯(30mL)中攪拌，直到獲得均一的溶液。
加入三(二亞芐基丙酮)二鈀(0)(252mg，0.05當(dāng)量)，接著加入外消旋-2，2′-二(二苯基膦基)-1，1′-二萘基(516mg，0.015當(dāng)量)。反應(yīng)混合物在90℃下攪拌16小時，再使其冷卻。溶液用乙酸乙酯(100mL)稀釋，用1∶1飽和氯化鈉水溶液∶水(100mL)洗，然后，在6M的鹽酸(100mL)中萃取。水層用乙酸乙酯(2×100mL)洗，然后用乙酸異丙酯(100mL)稀釋?；旌衔锢鋮s到0℃并用氫氧化鈉(20mL水中含13g)中和。除去水層，有機(jī)層用1∶1飽和氯化鈉水溶液∶水(100mL)洗，通過硫酸鈉干燥，蒸發(fā)獲得標(biāo)題中間產(chǎn)物(1.3g粗制)。
b.N-{5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-氨基-2-甲基-丙氧基)-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-(叔-丁基-二甲基-硅烷氧基)-乙基]-2-芐氧基-苯基}-甲酰胺的制備N-[5-((R)-2-溴代-1-(叔-丁基-二甲基-硅烷氧基)-乙基)-2-芐氧基-苯基]-甲酰胺(2.0g，4.35mmol)、上步的產(chǎn)物(1.3g，1當(dāng)量)、碳酸鉀(2.4g，4當(dāng)量)和碘化鈉(718mg，1.1當(dāng)量)的混合物在二甲亞砜(8mL)中，在140℃下加熱20分鐘。使混合物冷卻，用水(20mL)稀釋，并用乙酸乙酯(2×20mL)萃取。有機(jī)層用飽和的氯化鈉水溶液(20mL)洗，通過硫酸鈉干燥，并蒸發(fā)。殘留物用反相HPLC純化，獲得標(biāo)題中間產(chǎn)物(500mg，0.73mmol，17％產(chǎn)率)。
c.N-{5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-氨基-2-甲基-丙氧基)-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-羥基-乙基]-2-羥基-苯基}-甲酰胺的合成使用和實(shí)施例1，步驟c和d中描述的那些相似的步驟，步驟b的中間產(chǎn)物轉(zhuǎn)化為標(biāo)題化合物。C27H35N4O4的m/z[M+H+]計(jì)算值為479.3，實(shí)測值為479.3。
實(shí)施例155-[(R)-2-(2-{4-[3-(2-氨基-乙基)-4-甲氧基-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-羥基-乙基]-8-羥基-1H-喹啉-2-酮的合成a.5-{(R)-2-[2-(4-氨基-苯基)-乙氨基]-1-(叔-丁基-二甲基-硅烷氧基)-乙基}-8-芐氧基-1H-喹啉-2-酮的制備5-(2-溴代-1-(叔-丁基-二甲基-硅烷氧基)-乙基)-8-芐氧基-1H-喹啉-2-酮(5.0g，1.0當(dāng)量)和2-(4-氨基苯基)乙胺(2.8g，2.0當(dāng)量)的混合物在二甲亞砜(10mL)中，在100℃下加熱12小時。反應(yīng)混合物冷卻至20℃，所得的紅色油狀物用乙酸乙酯(200mL)稀釋，并用兩部分的水(200mL)萃取。有機(jī)層用兩份的1∶1的10％乙酸水溶液和飽和的氯化鈉水溶液(200mL)洗。有機(jī)層通過小心地用兩份飽和的碳酸氫鈉(200mL)萃取，接著用飽和的氯化鈉(200mL)萃取來堿化。所得的有機(jī)溶液用無水的硫酸鈉處理，減壓除去溶劑獲得標(biāo)題中間產(chǎn)物(5.1g)，其無需進(jìn)一步純化即可使用。
b.5-[(R)-2-(2-{4-[3-(2-氨基-乙基)-4-甲氧基-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-(叔-丁基-二甲基-硅烷氧基)-乙基]-8-芐氧基-1H-喹啉-2-酮的制備在90℃下，上步產(chǎn)物(0.500g，1.0當(dāng)量)、5-溴代-2-甲氧基苯乙胺氫溴化物(0.343g，1.2當(dāng)量)和叔丁醇鈉(0.397g，4.5當(dāng)量)的混合物在甲苯(10mL)中攪拌，直到獲得均質(zhì)的溶液。加入三(二苯亞甲基丙酮)鈀(0.0042g，0.05當(dāng)量)，接著加入rac-2，2′-二(二苯基膦基)-1，1′-二萘基(0.0086g，0.15當(dāng)量)。反應(yīng)混合物在90℃下攪拌5小時，再使其冷卻至20℃。溶液用二氯甲烷(100mL)稀釋，并用水(2×100mL)洗。有機(jī)溶液通過硫酸鈉干燥。反應(yīng)混合物過濾，減壓除去溶劑得到標(biāo)題中間產(chǎn)物(1.0g)，為暗褐色固體，其無需進(jìn)一步純化即可使用。
c.5-[(R)-2-(2-{4-[3-(2-氨基-乙基)-4-甲氧基-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-羥基]-乙基]-8-芐氧基-1H-喹啉-2-酮的制備上步的粗制固體(1.0g)用含三乙胺三氫氟化物(0.70mL)的四氫呋喃(10mL)在室溫下處理5小時。混合物用二氯甲烷(100mL)稀釋并用0.1M的NaOH萃取(2×100mL)，接著飽和氯化鈉水溶液(100mL)。有機(jī)層用無水硫酸鈉處理，溶劑減壓除去。所得的固體用反相HPLC純化，凍干分離得到標(biāo)題中間產(chǎn)物(200mg)，為其三氟乙酸鹽。
d.5-[(R)-2-(2-{4-[3-(2-氨基-乙基)-4-甲氧基-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-羥基]-乙基]-8-羥基-1H-喹啉-2-酮的合成鈀(10mg，碳載10％w/w)加到上步的中間產(chǎn)物(50mg)中，接著加入甲醇(5mL)，漿液在一個大氣壓的氫氣下劇烈攪拌5小時。過濾反應(yīng)混合物，減壓濃縮濾液獲得標(biāo)題化合物(42.0mg)，其用反相HPLC純化，并凍干分離，為其三氟乙酸鹽。C28H32N4O4的m/z[M+H+]計(jì)算值為489.3，實(shí)測值為489.5。
實(shí)施例16N-{5-[(R)-2-(2-{4-[3-(2-氨基-乙基)-4-甲氧基-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-羥基-乙基]-2-羥基-苯基}-甲酰胺的合成除了用N-[5-((R)-2-溴代-1-(叔-丁基-二甲基-硅烷氧基)-乙基)-2-芐氧基-苯基]-甲酰胺替換5-(2-溴代-1-(叔-丁基-二甲基-硅烷氧基)-乙基)-8-芐氧基-1H-喹啉-2-酮之外，使用與實(shí)施例15中描述的那些相似的步驟，制得標(biāo)題化合物。C26H32N4O4的m/z[M+H+]的計(jì)算值為465.3，實(shí)測值為465.3。
實(shí)施例175-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-氨基-2-甲基-丙氧基)-苯基氨基]-苯基}-乙氨基]-1-羥基-乙基]-8-羥基-1H-喹啉-2-酮的鹽a.5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-氨基-2-甲基-丙氧基)-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-羥基-乙基]-8-羥基-1H-喹啉-2-酮游離堿的制備碳酸氫銨(10％)的水溶液(50mL)，一次加入到含實(shí)施例1的產(chǎn)物、5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-氨基-2-甲基-丙氧基)-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-羥基-乙基]-8-羥基-1H-喹啉-2-酮的三氟乙酸鹽(1.80g，2.1mmol)的乙醇(6mL)溶液中。溶液在室溫下攪拌1小時。濾過得到的固體，減壓干燥獲得標(biāo)題化合物(0.84g，1.67mmol，80％)，為黃色固體。
b.5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-氨基-2-甲基-丙氧基)-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-羥基-乙基]-8-羥基-1H-喹啉-2-酮的硫酸鹽的合成在90℃下，如上步得到的游離堿(5.85g，11.6mmol)溶于乙腈∶水(200mL∶60mL)中，過濾除去殘留的固體顆粒。濾液再加熱至90℃，加入含濃縮硫酸(2mL)的乙腈∶水(18mL∶2mL)溶液。使溶液在2小時內(nèi)冷卻至室溫，然后在冰/水浴中冷卻到10℃。濾過固體并減壓干燥獲得粗制的標(biāo)題鹽(5.70g，82％)。物質(zhì)(5.70g)在90℃下，再溶解于乙腈∶水(120mL∶410mL)中，又使其在2小時內(nèi)冷卻至室溫。漿液在冰/水浴中冷卻至10℃，濾過固體并減壓干燥獲得標(biāo)題鹽的水合物(4.40g，63％總的(overall))，為米色粉。產(chǎn)品的x-射線粉末衍射(XRPD)圖如圖1所示。差示掃描量熱法曲線如圖2所示。
c.5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-氨基-2-甲基-丙氧基)-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-羥基-乙基]-8-羥基-1H-喹啉-2-酮的萘二磺酸鹽的合成在60℃下，向含如a部分制得的游離堿(23mg，0.046mmol)的異丙醇∶水(1.8mL∶0.2mL)溶液中，加入1，5-萘-二磺酸四水合物(33mg，2當(dāng)量)，得到白色沉淀。溫度升至70℃，加入另外的1mL的水獲得澄清的溶液。冷卻到室溫后，過濾漿液，干燥得到標(biāo)題鹽(25mg，63％)，為白色的粉。產(chǎn)物的x-射線粉末衍射圖(XRPD)如圖3所示。差示掃描量熱法曲線如圖4所示。
d.5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-氨基-2-甲基-丙氧基)-苯基氨基]-苯基-1-乙氨基}-1-羥基-乙基)-8-羥基-1H-喹啉-2-酮的草酸鹽的合成在60℃下，向含如a部分制得的游離堿(100mg，0.2mmol)的異丙醇∶水(3.6mL∶0.4mL)溶液中，加入草酸(50mg，2當(dāng)量)，得到白色沉淀。溫度升至70℃，加入另外的4mL的水獲得澄清的溶液。冷卻到室溫后，過濾漿液，干燥得到標(biāo)題鹽(82mg，65％)，為米色的粉。產(chǎn)物的x-射線粉末衍射圖(XRPD)如圖5所示。差示掃描量熱法曲線如圖6所示。
e.5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-氨基-2-甲基-丙氧基)-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-羥基-乙基]-8-羥基-1H-喹啉-2-酮的4-甲基-肉硅酸鹽的合成5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-氨基-2-甲基-丙氧基)-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-羥基-乙基]-8-羥基-1H-喹啉-2-酮(0.21g)溶解于四氫呋喃(1.2mL)和水(1.2mL)的混合液中。4-甲基-肉桂酸(0.07g，主要是反式)在室溫下加入到攪拌的溶液中，其溶解。大約10分鐘后，出現(xiàn)結(jié)晶。漿液攪拌整夜并過濾。濾餅用四氫呋喃水溶液(1∶1 THF∶water，2×0.4mL，1×0.2mL)洗，得到標(biāo)題化合物，其在真空45℃下干燥整夜(產(chǎn)率0.207g)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6；DMSO-d5，如在δ(ppm)2.5處參考)。δ(ppm)1.22(6H)s；2.30(3H)s；2.64(2H)t J＝6.6Hz；2.72-2.86(4H)m；3.74(2H)s；5.09(1H)m；6.43(1H)d J＝15.9Hz；6.49(1H)d J＝10.0Hz；6.86(4H)m；6.93-7.03(5H)m；7.06(1H)d J＝7.8Hz；7.17(2H)d J＝7.8Hz；7.34(1H)d J＝15.9Hz；7.45(2H)d J＝7.8Hz；7.75(1H)s；8.19(1H)d J＝10.0Hz。結(jié)晶產(chǎn)物用XRPD和DSC表征。
f.5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-氨基-2-甲基-丙氧基)-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-羥基-乙基]-8-羥基-1H-喹啉-2-酮的4-甲基-肉硅酸鹽的合成5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-氨基-2-甲基-丙氧基)-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-羥基-乙基]-8-羥基-1H-喹啉-2-酮(17.77g)溶解于四氫呋喃(89mL)和水(89mL)的混合液中。稱重4-甲基-肉桂酸(6.02g，主要是反式)，約1/4加入到游離堿溶液中，接著加入e部分得到的晶種。攪拌混合物，剩余的酸在以下的1.5小時內(nèi)一份份加入。進(jìn)一步攪拌漿液4小時，然后過濾漿液。濾餅用四氫呋喃水溶液(1∶1 THF∶水，36mL)洗，再用四氫呋喃(2×18mL)洗，得到標(biāo)題化合物，其在真空40-50℃下整夜干燥(產(chǎn)率16.916g)。1H NMR(400MHz，CD3OD；TMS如在δ(ppm)0處參考)δ(ppm)1.39(6H)s；2.32(3H)s；2.79(2H)t J＝7.2Hz；2.92-3.03(4H)m；3.87(2H)s；5.25(1H)d of d J＝3.9和8.8Hz；6.44(1H)d J＝15.9Hz；6.63(1H)dJ＝9.8Hz；6.86-6.93(4H)m；6.96(1H)d J＝8.3Hz；6.99-7.05(4H)m；7.15(2H)d J＝7.8Hz；7.19(1H)d J＝8.3Hz；7.36(1H)d J＝15.9Hz；7.38(2H)d J＝7.6Hz；8.34(1H)d J＝9.8Hz。結(jié)晶產(chǎn)物用XRPD和DSC表征。
g.分析方法通過采用Cu Kα(30.0kV，15.0mA)輻射的Rigaku衍射計(jì)，獲得圖1、3和5的X射線粉末衍射圖。運(yùn)用測角儀進(jìn)行分析，測角儀在2-45°的范圍內(nèi)，以連續(xù)掃描的模式運(yùn)行，每分鐘3°，每步的大小是0.03°。樣品配制在石英樣品容器中，為一薄層粉末狀物質(zhì)。儀器用硅金屬標(biāo)準(zhǔn)品校準(zhǔn)。
采用型號為DSCQ10的TA儀器獲得圖2、4、6的差示掃描量熱法曲線。樣品固定在密封的鋁盤中用于分析，一個空盤作為參照。樣品在30℃下均衡，并以每分鐘加熱5℃，加熱至300℃。儀器以銦標(biāo)準(zhǔn)品校準(zhǔn)。
根據(jù)其具體的實(shí)施方式描述了本發(fā)明，本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)理解在不背離本發(fā)明真實(shí)的精神和范圍下，可以產(chǎn)生多種變化并且可以取代同等物質(zhì)。此外，可以進(jìn)行很多修飾適應(yīng)特定的情形、原料、物質(zhì)的組合物、方法、步驟，適應(yīng)本發(fā)明的目的、精神和保護(hù)范圍。所有這些修飾認(rèn)為是在此附加的權(quán)利要求的范圍之內(nèi)的。另外地，在上文中引用的所有的出版物、專利、專利文獻(xiàn)在此以全文引入作為參考，好像個別地引入作為參考。
權(quán)利要求
1.一種式(I)的化合物 其中R1、R2、R3和R4各自獨(dú)立選自氫、羥基、氨基、鹵素、-CH2OH和-NHCHO，或者R1和R2連在一起選自-NHC(＝O)CH＝CH-、-CH＝CHC(＝O)NH-、-NHC(＝O)S-和-SC(＝O)NH-；R5和R6中的一個是-[X-C1-6亞烷基]n-NR10R11或C1-6亞烷基-NR12R13，而R5和R6中的另一個選自氫、羥基、C1-4烷氧基和C1-4烷基，其中C1-4烷基任選被鹵素取代，其中X各自獨(dú)立地選自-O-、-NH-、-S-、-NHSO2-、-SO2NH-、-NHC(＝O)-和-C(＝O)NH-；R10、R11、R12和R13各自獨(dú)立的是氫或C1-4烷基；或R10和R11與和其連接的氮原子一起，或R10與和其連接的氮原子以及相鄰的C1-6亞烷基的碳原子一起，或者R12和R13與和其連接的氮原子一起，或者R12與和其連接的氮原子以及相鄰的C1-6亞烷基的碳原子一起，形成具有5-7個環(huán)原子的雜環(huán)或雜芳基環(huán)，所述環(huán)任選地含有另外的選自氧、氮和硫的雜原子，其中氮任選地被-S(O)2-C1-4烷基取代；而n是1、2或3；且R7、R8和R9各自獨(dú)立的是氫或C1-6烷基；或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物或立體異構(gòu)體。
2.權(quán)利要求1的化合物，其中R7、R8和R9各自是氫。
3.權(quán)利要求1的化合物，其中X是-O-。
4.權(quán)利要求1的化合物，其是式(II)的化合物 其中R1是-CH2OH或-NHCHO，且R2是氫；或者R1和R2連在一起是-NHC(＝O)CH＝CH-或-CH＝CHC(＝O)NH-；R5和R6中的一個是-[O-C1-6亞烷基]n-NR10R11或C1-6亞烷基-NR12R13，而R5和R6中的另一個選自氫、羥基、C1-4烷氧基和C1-4烷基，其中C1-4烷基任選被鹵素取代，其中R10、R11、R12和R13各自獨(dú)立的是氫或C1-4烷基；或R10和R11與和其連接的氮原子一起，或R10與和其連接的氮原子以及相鄰的C1-6亞烷基的碳原子一起，或者R12和R13與和其連接的氮原子一起，或者R12與和其連接的氮原子以及相鄰的C1-6亞烷基的碳原子一起，形成具有5-7個環(huán)原子的雜環(huán)或雜芳基，所述環(huán)任選地含有另外的選自氧、氮和硫的雜原子，其中氮任選地被-S(O)2-C1-4烷基取代；且n是1或2；或其藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物或立體異構(gòu)體。
5.權(quán)利要求4的化合物，其中R5是-[O-C1-6亞烷基]n-NR10R11或C1-6亞烷基-NR12R13，且R6是氫。
6.權(quán)利要求4的化合物，其中R5是C1-4烷氧基，且R6是-[O-C1-6亞烷基]n-NR10R11或C1-6亞烷基-NR12R13。
7.權(quán)利要求4的化合物，其中R5是選自-O-C1-6亞烷基-NR10R11和C1-6亞烷基-NR12R13，且R6是氫；或R5是C1-4烷氧基，且R6是-C1-6亞烷基-NR12R13，其中R10、R11、R12和R13各自獨(dú)立的是氫或C1-4烷基，或R10和R11與和其連接的氮原子一起，形成哌嗪基環(huán)。
8.權(quán)利要求7的化合物，其中R1和R2連在一起是-NHC(＝O)CH＝CH-或-CH＝CHC(＝O)NH-。
9.權(quán)利要求8的化合物，其中R5是-O-C1-6亞烷基-NR10R11，且R6是氫。
10.權(quán)利要求4的化合物，其中帶有羥基的亞烷基碳的立體化學(xué)是(R)。
11.權(quán)利要求4的化合物，其選自5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-氨基-2-甲基-丙氧基)-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-羥基-乙基]-8-羥基-1H-喹啉-2-酮；8-羥基-5-[(R)-1-羥基-2-(2-{4-[4-(2-哌嗪-1-基-乙氧基)-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-乙基]-1H-喹啉-2-酮；5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-氨基-乙基)-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-羥基-乙基]-8-羥基-1H-喹啉-2-酮；5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-二甲基氨基-乙基)-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-羥基-乙基]-8-羥基-1H-喹啉-2-酮；5-[(R)-2-(2-{4-[3-(2-氨基-乙基)-4-甲氧基-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-羥基-乙基]-8-羥基-1H-喹啉-2-酮；和其藥物可接受的鹽和溶劑化物和立體異構(gòu)體。
12.權(quán)利要求11的化合物，其是5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-氨基-2-甲基-丙氧基)-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-羥基-乙基]-8-羥基-1H-喹啉-2-酮，或其藥物可接受的鹽和溶劑化物和立體異構(gòu)體。
13.權(quán)利要求12的化合物，其是5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-氨基-2-甲基-丙氧基)-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-羥基-乙基]-8-羥基-1H-喹啉-2-酮的硫酸鹽。
14.權(quán)利要求12的化合物，其是5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-氨基-2-甲基-丙氧基)-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-羥基-乙基]-8-羥基-1H-喹啉-2-酮的萘二磺酸鹽。
15.權(quán)利要求12的化合物，其是5-[(R)-2-(2-{4-[4-(2-氨基-2-甲基-丙氧基)-苯基氨基]-苯基}-乙氨基)-1-羥基-乙基]-8-羥基-1H-喹啉-2-酮的草酸鹽。
16.一種藥物組合物，其包含治療有效量的權(quán)利要求1-15任一項(xiàng)所述的化合物和藥物可接受的載體。
17.權(quán)利要求16的藥物組合物，其中組合物進(jìn)一步包含治療有效量的一種或多種其它治療劑。
18.權(quán)利要求17的藥物組合物，其中其它治療劑是皮質(zhì)類固醇、抗膽堿能藥或PDE4抑制劑。
19.權(quán)利要求17的藥物組合物，其中其它治療劑選自丙酸氟替卡松、6α，9α-二氟-17α-[(2-呋喃基羰基)氧基]-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟代甲酯和6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-17α-丙酰氧基-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-(2-氧代-四氫呋喃-3S-基)酯。
20.權(quán)利要求16的藥物組合物，其中組合物適于吸入給藥。
21.一種組合，包含權(quán)利要求1-15任一項(xiàng)所述的化合物和一種或多種其它治療劑。
22.權(quán)利要求21組合，其中其它治療劑是皮質(zhì)類固醇、抗膽堿能藥或PDE4抑制劑。
23.一種組合，其包括權(quán)利要求1-15任一項(xiàng)所述的化合物和選自丙酸氟替卡松、6α，9α-二氟-17α-[(2-呋喃基羰基)氧基]-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-氟代甲酯和6α，9α-二氟-11β-羥基-16α-甲基-3-氧代-17α-丙酰氧基-雄甾-1，4-二烯-17β-硫代羧酸S-(2-氧代-四氫呋喃-3S-基)酯的化合物。
24.用于治療的權(quán)利要求1-15任一項(xiàng)所述的化合物。
25.權(quán)利要求1-15任一項(xiàng)所述的化合物在制備藥物中的應(yīng)用。
26.權(quán)利要求25的應(yīng)用，其中所述藥物用于治療患有與β2腎上腺素能受體活性有關(guān)的疾病或病癥的哺乳動物。
27.權(quán)利要求26的應(yīng)用，其中所述疾病或病癥是與肺有關(guān)的疾病或病癥。
28.權(quán)利要求27的應(yīng)用，其中所述與肺有關(guān)的疾病或病癥是哮喘或慢性阻塞性肺病。
29.權(quán)利要求26的應(yīng)用，其中所述藥劑適于吸入給藥。
30.權(quán)利要求1-15任一項(xiàng)所述的化合物在制備用于治療患有與β2腎上腺素能受體活性有關(guān)的疾病或病癥的哺乳動物的藥物中的應(yīng)用，所述藥物用于和一種或多種治療劑聯(lián)合給藥。
31.一種制備權(quán)利要求1-15任一項(xiàng)所述的式(I)化合物的方法，該方法包括(a)(i)在過渡金屬催化劑存在下，使式(III)的化合物 與(IV)的化合物反應(yīng) 或(ii)使式(V)的化合物 與式(VI)的化合物反應(yīng) 其中P1是羥基保護(hù)基團(tuán)，R1a、R2a、R3a和R4a或者各自獨(dú)立地與式(I)中的R1、R2、R3和R4的定義相同，或者是-OP2，其中P2是羥基保護(hù)基團(tuán)，A和B中一個是離去基團(tuán)，而A和B中的另一個是-NH2；L是離去基團(tuán)；且R5、R6、R7、R8、和R9如式(I)中所定義，得到式(VII)的化合物 (b)脫去保護(hù)基團(tuán)P1得到式(VIII)的化合物 (c)當(dāng)R1a、R2a、R3a或R4a任一個是-OP2時，脫去保護(hù)基團(tuán)P2得到式(I)的化合物或其鹽或立體異構(gòu)體。
32.根據(jù)權(quán)利要求31的方法制得的產(chǎn)品。
33.一種治療患有與β2腎上腺素能受體活性有關(guān)的疾病或病癥的哺乳動物的方法，所述方法包括向所述哺乳動物給予治療有效量的權(quán)利要求1-15任一項(xiàng)所述的化合物。
34.權(quán)利要求33的方法，進(jìn)一步包括給予治療有效量的一種或多種另外的治療劑。
35.權(quán)利要求34的方法，其中所述另外的治療劑是皮質(zhì)類固醇、抗膽堿能藥或PDE4抑制劑。
36.權(quán)利要求33的方法，其中所述方法包括吸入給予化合物。
37.一種治療哺乳動物中與肺有關(guān)的疾病或病癥的方法，所述方法包括向所述哺乳動物給予治療有效量的權(quán)利要求1-15任一項(xiàng)所述的化合物。
38.一種治療哺乳動物中的哮喘或慢性阻塞性肺病的方法，所述方法包括向所述哺乳動物給予治療有效量的權(quán)利要求1-15任一項(xiàng)所述的化合物。
39.一種研究含β2腎上腺素能受體的生物系統(tǒng)或樣品的方法，所述方法包括(a)使生物系統(tǒng)或樣品與權(quán)利要求1-15任一項(xiàng)所述的化合物接觸；和(b)測定該化合物所引起的對生物系統(tǒng)或樣品的效應(yīng)。
全文摘要
本發(fā)明提供了新的β
文檔編號C07D215/24GK1910137SQ200580002279
公開日2007年2月7日 申請日期2005年1月11日 優(yōu)先權(quán)日2004年1月12日
發(fā)明者R·M·馬克金內(nèi)爾, J·R·扎考布森, S·G·特拉普, D·R·塞托 申請人:施萬制藥