專利名稱：：埃坡霉素、與之相關(guān)的中間體、類似物的合成及其用途的制作方法
背景技術(shù)：
：埃坡霉素(Epothilone)A和B(2a和2b，示意圖1)為從纖維素降解分支桿菌，纖維堆囊菌(sorangiumcellulosum)中分離出來的天然細(xì)胞毒素大環(huán)內(nèi)酯物(Hfle等人Angew.Chem.，Int.Ed.Engl.1996，35，1567和J.Antibiot.1996，49，560；每篇文獻(xiàn)通過引用并入本發(fā)明)。盡管它們的結(jié)構(gòu)大不相同，埃坡霉素A和B卻都具有如紫杉醇(他克唑(Taxol))的作用機(jī)理，該機(jī)理包括通過微管蛋白聚合和微管裝配(microtubuleassemblies)的穩(wěn)定而抑制癌細(xì)胞的生長(Bollag等人CancerRes.1995，55，2325；通過引用并入本發(fā)明)。盡管其作為前線化學(xué)治療劑具有毫無疑問的臨床價(jià)值，但他克唑遠(yuǎn)不是理想藥物。其微溶于水的溶解性使其必須借助制劑媒介物例如可利摩福(Cremophor)，這造成其自身的危險(xiǎn)和管理問題(Essayan等人J.AllergyClin.Immunol.1996，97，42；通過引用并入本發(fā)明)。此外，他克唑通過多重耐藥性(MDR)而易于失活(Giannakakou等人J.Biol.Chem.1997，272，17118；通過引用并入本發(fā)明)。然而，這也說明了埃坡霉素A和B保持了抗MDR腫瘤細(xì)胞的顯著效力(Kowalski等人Mol.Biol.Cell1995，6，2137；通過引用并入本發(fā)明)。此外，對于埃坡霉素的配方能力(formulability)，增加的水溶解性與紫杉醇相比可能是有用的。雖然天然化合物，埃坡霉素B(2b，EpoB，示意圖1中)，是天然產(chǎn)物的有效的埃坡霉素家族成員，但至少在異種移植小鼠中，卻不幸具有麻煩地狹窄的治療指數(shù)(Su等人Angew.Chem.Int.Ed.Engl.1997，36，1093；Harris等人J.Org.Chem.1999，64，8434；每篇文獻(xiàn)通過引用并入本發(fā)明)。2aR1＝H，R2＝CH3，埃坡霉素A(EpoA)2bR1＝CH3，R2＝CH3，埃坡霉素1aR＝Ph，紫杉醇(他克唑)B(EpoB)1bR＝t-Bu，多西紫杉醇(Taxotere)2cR1＝H，R2＝CH2OH，埃坡霉素E(EpoE)2dR1＝CH3，R2＝CH2OH，埃坡霉素F(EpoF)示意圖1紫杉烷類(Taxoids)和埃坡霉素鑒于EpoB具有有限的治療指數(shù)，人們研究其它的埃坡霉素類似物，特別是12，13-脫氧埃坡霉素，提供改進(jìn)的治療特性(therapeuticprofile)的能力(參見美國專利6,242,469、6,284,781、6,300,355、6,369,234、6,204,388、6,316,630；每篇文獻(xiàn)通過引用并入本發(fā)明)。在各種小鼠模型上實(shí)施的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)證明12，13-脫氧埃坡霉素B(示意圖2中3b，dEpoB)在小鼠異種移植物中具有抗各種敏感和耐藥的人腫瘤的治療效力(Chou等人Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.1998，95，9642和15798；通過引用并入本發(fā)明)。最近，這些脫氧埃坡霉素相比其它抗癌劑的治療優(yōu)勢通過對比研究已經(jīng)被最終證明(Chou等人Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.2001，98，8113；通過引用并入本發(fā)明)。由于其令人印象深刻的體內(nèi)特性，dEpoB已經(jīng)提前通過狗體內(nèi)的毒理評價(jià)，并且作為抗癌藥物現(xiàn)正在進(jìn)行人體試驗(yàn)。3aR1＝H，R2＝CH3，脫氧埃4aR1＝H，R2＝CH3，脫氫5aR1＝H，R2＝CH3，異坡霉素A(dEpoA)dEpoA(ddEpoA)-dEpoA3bR1＝CH3，R2＝CH3，脫氧4bR1＝CH3，R2＝CH3，脫氫5bR1＝CH3，R2＝CH3，異埃坡霉素B(dEpoB)dEpoB(ddEpoB)-dEpoB3cR1＝H，R2＝CH2OH，脫氧4cR1＝H，R2＝CH2OH，脫氫5cR1＝H，R2＝CH2OH，異埃坡霉素E(dEpoE)dEpoE(ddEpoE)dEpoE3dR1＝CH3，R2＝CH2OH，4dR1＝CH3，R2＝CH2OH，脫5dR1＝CH3，R2＝CH2OH，脫氧埃坡霉素F(dEpoF)氫dEpoF(ddEpoF)異dEpoF(ddEpoF)3eR1＝H，R2＝NH2，脫甲基4eR1＝H，R2＝NH2，脫甲基氨5eR1＝H，R2＝NH2，脫甲基氨基-dEpoA(dadEpoA)基-ddEpoA氨基-異-dEpoA3fR1＝CH3，R2＝NH2，脫甲4fR1＝CH3，R2＝NH2，脫甲5fR1＝CH3，R2＝NH2，脫甲基氨基-dEpoB(dadEpoB)基氨基-ddEpoB基氨基-異-dEpoB3gR1＝CH2F，R2＝CH3，26-氟4gR1＝CH2F，R2＝CH3，26-氟-dEpoB-ddEpoB3hR1＝CF3，R2＝CH3，26-三4hR1＝CF3，R2＝CH3，26-三氟氟-dEpoB-ddEpoB示意圖2.各種脫氧埃坡霉素類似物考慮到所述12，13-脫氧埃坡霉素的有前景的治療效用，有必要研究另外的類似物以及另外的合成方法，用于合成現(xiàn)有埃坡霉素、脫氧埃坡霉素及其類似物以及其新型的類似物。特別的，鑒于在這類化合物的治療效用上產(chǎn)生興趣，有必要開發(fā)能提供大量前述的任何埃坡霉素或脫氧埃坡霉素或本發(fā)明中所述的化合物的的方法學(xué)，用于臨床試驗(yàn)和大規(guī)模制備。圖1表示12-三氟甲基-9，10-脫氫脫氧埃坡霉素D的合成。圖2表示由EpoA制備12-三氟甲基-9，10-脫氫脫氧埃坡霉素D的幾種方法。圖3表示由Epo490通過使C10-C11雙鍵異構(gòu)化至C9-C10位置而制備9，10-脫氫-epoD。圖4描繪了在9，10-位置上有修飾的各種埃坡霉素類似物。圖5表示采用在9，10-位置上的閉環(huán)復(fù)分解反應(yīng)而進(jìn)行的各種9，10-脫氫-埃坡霉素類似物的合成。圖6表示實(shí)驗(yàn)結(jié)果，其中超大的MX-1異種移植物植入裸鼠中。將MX-1腫瘤組織(50mg)在第0天皮下植入。在第22天(D22)當(dāng)腫瘤大小達(dá)到960±132mg(約為體重的3.4％)時(shí)，6hr靜脈內(nèi)灌注弗迪隆(Fludelone)25mg/kg，如箭頭所示于D22、D25、D28、D31和D34給藥Q3D×5。隨后間歇9天，于D43、D46、D49和D52進(jìn)行第二周期治療。腫瘤大小在賦形劑治療對照組(●)和弗迪隆治療組(□)(每組n＝5)中變化。繼續(xù)觀察Q3D直至D180，這時(shí)終止實(shí)驗(yàn)(在D52停止治療后的128天)。圖6A表示由腫瘤大小降低而表示的治療效果。圖6B表示裸鼠(各自選自對照組和治療組的一只老鼠)在D25、D31、D37、D43和D52所拍的照片。在D180實(shí)驗(yàn)終止時(shí)沒有觀察到復(fù)發(fā)。圖6C表示體重變化。圖7表示用人T-細(xì)胞淋巴母細(xì)胞性白血病(CCRF-CEM/他克唑)(對他克唑的耐藥性為44倍)植入裸鼠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。在第0天將CCRF-CEM/他克唑(生物體外44倍耐藥性)的腫瘤組織以50mg/小鼠皮下植入到裸鼠中。于D8開始用弗迪隆15mg/kg(□)(n＝3)和30mg/kg(△)(n＝4)進(jìn)行6hr-靜脈內(nèi)灌注治療，或D16開始，Q2D×3和然后將劑量提高到40mg/kg，Q2D×3(D22-26)和然后60mg/kg，Q2D×3(D28-40)。圖10A表示由腫瘤大小降低而表示的治療效果。圖10B表示體重變化。圖11表示采用26-三氟-9，10-脫氫-dEpoB和他克唑?qū)哂腥朔伟?A549/他克唑)(對他克唑耐藥性為44倍)的裸鼠的治療(6小時(shí)靜脈內(nèi)灌注，Q3D×11)。圖11A表示由腫瘤大小降低而表示的治療效果。圖11B表示體重變化。圖12表示采用9，10-脫氫-dEpoB對具有人類肺癌A549/他克唑(對他克唑耐藥性為44倍)的裸鼠的治療(6小時(shí)靜脈內(nèi)灌注，Q4D×5，×3)。圖12A表示由腫瘤大小降低而表示的治療效果。圖12B表示治療前后的體重變化。圖13表示采用26-三氟-9，10-脫氫-dEpoB、dEpoB和他克唑在采用口服制劑(PO，Q2D×7，×5)治療具有人乳腺癌MX-1異種移植物裸鼠中的比較。圖13A表示由腫瘤大小降低而表示的治療效果。圖13B表示體重變化。圖14為總結(jié)埃坡霉素衍生物的各種治療和藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)的表。圖15表示采用26-三氟-9，10-脫氫-dEpoB和dEpoB治療具有人類肺癌(A549)異種移植的裸鼠(6小時(shí)靜脈內(nèi)灌注，(Q2D×6)×2，×2)。圖15A表示由腫瘤大小降低而表示的治療效果。圖15B表示在治療中和治療后的體重變化。圖16表示在10μM藥物下的微管形成的穩(wěn)定性。將在10μM他克唑存在下形成的微管定義為100％。得自牛腦的微管蛋白是Sigma的產(chǎn)品。微管蛋白裝配試驗(yàn)根據(jù)制造商的說明書來實(shí)施。微管蛋白(200μl中1mg)用790μ的緩沖劑(0.1MMES，1mMEGTA，0.5mMMgCl2，0.1mMEDTA和2.5M甘油，pH6.5)和用10μl的藥物(最終濃度10μM)培養(yǎng)。對于裝配，在35℃下實(shí)施培養(yǎng)40分鐘，和對于相同樣品的拆卸，在4℃下實(shí)施培養(yǎng)40分鐘。對于微管穩(wěn)定，在350nm處測量吸光度值。溶劑空白(DMSO)從吸光度值中減去。圖17表示埃坡霉素體外抗癌細(xì)胞生長的效力和相對治療指數(shù)。圖18為由碘化丙啶DNA染色而確定的細(xì)胞周期分析。對于OPM-2骨髓瘤細(xì)胞在用dEpoB(上圖)和弗迪隆(下圖)治療后，細(xì)胞周期在開始后6小時(shí)的G2M階段中止并且在24小時(shí)完全阻斷。兩種藥物導(dǎo)致相同細(xì)胞周期中止的模式。圖19表示AnnexinV在RPMI8226骨髓瘤細(xì)胞系上染色。在初期凋亡細(xì)胞中，膜磷脂磷脂酰絲氨酸(PS)由細(xì)胞膜內(nèi)小葉易位到細(xì)胞膜外小頁，因此將PS暴露于外部細(xì)胞環(huán)境。AnnexinV為具有對PS高度親和的35-36kDCa+依附的磷脂結(jié)合蛋白，并利用暴露的PS結(jié)合到細(xì)胞上。結(jié)合活體染料，例如7-氨基-放線菌素(7-AAD)，染色死亡細(xì)胞，這項(xiàng)試驗(yàn)用于鑒定早期凋亡細(xì)胞。所示的數(shù)據(jù)顯示在用dEpoB或弗迪隆治療24小時(shí)后多數(shù)細(xì)胞或者凋亡或者死亡。圖20表示用弗迪隆(125nM)治療24小時(shí)的骨髓瘤和淋巴瘤細(xì)胞系的顯微照片?？梢钥匆娭兄褂贕2/M的細(xì)胞的特征環(huán)狀結(jié)構(gòu)。圖21表示用弗迪隆和dEpoB(125nM)治療的RPMI8226骨髓瘤細(xì)胞的細(xì)胞計(jì)數(shù)。在不同的時(shí)間點(diǎn)(1、2、4、8、24小時(shí))，將藥物洗除，并將該細(xì)胞繼續(xù)培養(yǎng)直至48小時(shí)。注意到暴露于弗迪隆短至1小時(shí)時(shí)，腫瘤細(xì)胞數(shù)即逐步降低，同時(shí)在24小時(shí)時(shí)多數(shù)細(xì)胞經(jīng)歷凋亡，而用dEpoB，細(xì)胞則仍繼續(xù)增殖。圖22表示RPMI8226骨髓瘤細(xì)胞的α-微管蛋白染色。弗迪隆明顯穩(wěn)定了微管并在治療早期(治療RPMI8226骨髓瘤細(xì)胞12小時(shí))即大大增加了微管聚合物質(zhì)量。藥物治療24小時(shí)后，微管質(zhì)量降低并被破壞，同時(shí)細(xì)胞經(jīng)歷凋亡。圖23為由碘化丙啶DNA染色確定的細(xì)胞周期分析。實(shí)線表示G1和G2的值，灰色陰影區(qū)表示在S階段中的細(xì)胞，虛線描繪出二重細(xì)胞數(shù)的總曲線，采用他克唑尤其明顯(左上圖)。上排說明卵巢癌細(xì)胞系IGROV用弗迪隆(10nM)、dEpoB(100nM)和他克唑(100nM)培養(yǎng)24小時(shí)后在G2M階段停止。下排說明增加弗迪隆濃度增加了HT-29細(xì)胞周期的停止。用弗迪隆的100nM培養(yǎng)導(dǎo)致在24小時(shí)后大量凋亡，在包括IGROV和HT-29的幾種細(xì)胞系中，阻礙了細(xì)胞周期分析。圖24表示用100nM弗迪隆、他克唑或dEpoB培養(yǎng)24小時(shí)后Ovcar3卵巢癌細(xì)胞系的AnnexinV染色。在左下象限給出的百分比為AnnexinV+/P1-陰性細(xì)胞的百分比，這與在早期凋亡階段的細(xì)胞類似。圖25為用HEMA3染色的治療24小時(shí)后的HT-29結(jié)腸癌細(xì)胞的cytospin(200×放大)。(a)用溶劑(DMSO)治療的對照細(xì)胞。(b)-(d)表示增加弗迪隆的濃度1、10和100nM。(e)在應(yīng)用100nM的dEpoB后的HT-29細(xì)胞和(f)在應(yīng)用100nM的他克唑后的HT-29細(xì)胞。所有三種藥物都在24小時(shí)后產(chǎn)生同樣的表型，明顯呈導(dǎo)致凋亡的核的類環(huán)結(jié)構(gòu)。圖26表示在彌漫性人腫瘤異種移植和轉(zhuǎn)移人腫瘤異種移植模型中，評價(jià)弗迪隆和dEpoB的作用的體系的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)。圖27表示細(xì)胞增殖和IC50(50％細(xì)胞抑制的濃度)試驗(yàn)。細(xì)胞增殖采用3’-[1-(苯氨基-羰基)-3，4-四唑]-雙(4-甲氧基-6-硝基)苯磺酸鈉水合物(XTT)而測定，其通過活細(xì)胞中的線粒體脫氫酶測量四唑化合物向甲的轉(zhuǎn)化。甲的量與存在于試驗(yàn)混合物中活細(xì)胞的數(shù)量成比例。每個(gè)數(shù)據(jù)均為四次獨(dú)立測量的平均值。對于骨髓瘤細(xì)胞系(RPMI8226，CAG)，弗迪隆的IC50為約7.6～36.67nM，并且dEpoB的IC50為36.67～61.34nM。對于淋巴瘤系(SKIDLBCL和RL)，弗迪隆的IC50為約60～80nM。圖28表示在正?；|(zhì)細(xì)胞上的細(xì)胞增殖和IC50試驗(yàn)。采用如在圖104中所描述的相同的方法。人骨髓間質(zhì)細(xì)胞系，HS-27A和HS-5通過E6/E7基因而不滅，具有正常的骨髓基質(zhì)的功能，其支持了干細(xì)胞的自我更新和增殖。對于這些基質(zhì)系，弗迪隆和dEpoB的IC50約為90～100nM，這與腫瘤系具有對等的群體倍增時(shí)間。圖29表示弗迪隆和dEpoB的濃度對細(xì)胞周期停滯的滴定。采用CAG骨髓瘤細(xì)胞系。在濃度為31.25nM時(shí)，兩種藥物均完全阻斷細(xì)胞周期于G2M階段(低于31.25nM的數(shù)據(jù)未示出)。圖30表示弗迪隆和dEpoB的濃度對細(xì)胞周期停滯的滴定。采用RPMI8226骨髓瘤細(xì)胞系。在濃度為31.25nM時(shí)，兩種藥物均完全阻斷細(xì)胞周期于G2M階段(低于31.25nM的數(shù)據(jù)未示出)。圖31表示AnnexinV在CAG骨髓瘤細(xì)胞系上的染色。在初期凋亡細(xì)胞中，膜磷脂磷脂酰絲氨酸(PS)從細(xì)胞膜的內(nèi)小葉易位到細(xì)胞膜外小葉，因此將PS暴露于外部細(xì)胞環(huán)境。AnnexinV為具有對PS高度親和的35-36kDCa+依附的磷脂結(jié)合蛋白，并利用暴露的PS結(jié)合到細(xì)胞上。結(jié)合于活體染料，例如7-氨基-放線菌素(7-AAD)，染色死亡的細(xì)胞，這項(xiàng)試驗(yàn)用于鑒定早期凋亡細(xì)胞。所示的數(shù)據(jù)顯示用弗迪隆或dEpoB治療24小時(shí)后大多數(shù)細(xì)胞或者進(jìn)入凋亡或者死亡。注意X-軸為Annexin染色和Y-軸為7-ADD染色。圖32為DNA片段化試驗(yàn)。凋亡的主要生物化學(xué)特點(diǎn)為從染色質(zhì)中核小體的移除。核小體移除由在染色質(zhì)中核小體之間暴露的DNA連接區(qū)域的核酸內(nèi)切酶介導(dǎo)的消化而導(dǎo)致。由于圍繞組蛋白核的DNA的180-200個(gè)堿基在構(gòu)象上免遭消化，該核酸內(nèi)切酶介導(dǎo)的核小體移除在瓊脂糖凝膠中可觀察為DNA梯。所示數(shù)據(jù)說明在用弗迪隆或dEpoB治療RPMI8226和CAG骨髓瘤細(xì)胞24hr后檢測到了典型的DNA梯。該數(shù)據(jù)說明由埃坡霉素通過胱冬肽酶(caspase)途徑引起細(xì)胞凋亡。圖33表示體重的交替變化和在埃坡霉素(20mg/kg)治療彌漫性CAG異種移植骨髓瘤小鼠后的結(jié)果。所示數(shù)據(jù)顯示對照小鼠在約30天時(shí)死亡并且在治療20天后觀察到體重顯著降低。在用dEpoB治療的小鼠和對照之間在壽命內(nèi)沒有顯著性不同；然而用弗迪隆治療的小鼠顯示出比對照組和dEpoB組均顯著延長的存活時(shí)間。每組中所用小鼠的數(shù)量均為四只，并且在注射CAG細(xì)胞之前輻射300Rad。圖34表示彌漫性CAG異種移植骨髓瘤小鼠在第4周的治療。將10×106個(gè)用Luc-eGFP-TK融合基因改造的CAG骨髓瘤細(xì)胞靜脈內(nèi)注射入小鼠尾靜脈，并且在通過生物發(fā)光圖像檢測到相宜骨髓瘤細(xì)胞植入的第7天時(shí)開始治療。本圖顯示分別用對照或dEpoB或弗迪隆治療的小鼠的生物發(fā)光圖像。圖35表示在CAG異種移植小鼠中(N＝4)平均腫瘤光子發(fā)射的定量。該圖顯示用弗迪隆治療的小鼠比用賦形劑或單獨(dú)用dEpoB治療的小鼠具有顯著降低的腫瘤光子發(fā)射。腫瘤光子發(fā)射與腫瘤負(fù)荷正相關(guān)。圖36表示體重的交替變化和在埃坡霉素(20mg/kg)治療彌漫性CAG異種移植骨髓瘤小鼠后的結(jié)果。本圖在第一個(gè)30天顯示如圖33相似的特征；但是弗迪隆治療小鼠的唯一存活組接受另外5劑量的Velcade(6.25μg/小鼠，靜脈內(nèi)灌注)加強(qiáng)。圖37表示在第18天彌漫性CAG異種移植骨髓瘤小鼠的治療。該圖顯示出各組間圖像的顯著不同，這反映出其所在組中的腫瘤負(fù)荷。圖38表示在第18天在彌漫性CAG異種移植骨髓瘤小鼠的治療中平均腫瘤光子發(fā)射的定量。該圖顯示出各組間圖像的顯著不同，這反映出其所在組中的腫瘤負(fù)荷。圖39表示在第40天彌漫性CAG異種移植骨髓瘤小鼠的治療。該圖顯示出圖像的不同，反映出三組小鼠中的腫瘤負(fù)荷。圖40表示在第40天在彌漫性CAG異種移植骨髓瘤小鼠的治療中平均腫瘤光子發(fā)射的定量。該圖顯示出圖像的不同，反映出三組小鼠中的腫瘤負(fù)荷。圖41表示用弗迪隆與Velcade結(jié)合治療CAG異種移植骨髓瘤小鼠。用弗迪隆從第0天至28天(20mg/kg，Q2d)和用Velcade從第35天至45天(6.25μg/小鼠，靜脈內(nèi)，3/w)治療小鼠。在第10天開始治療，并且在第59天弗迪隆12劑量和Velcade5劑量后拍攝圖像。與在第40天的圖像相比，三只小鼠中的兩只在股骨和在無脊椎柱中均具有顯著降低的腫瘤負(fù)荷。圖42為用CAG骨髓瘤細(xì)胞異種移植的七只NOD/SCID小鼠的Kaplan-Meier存活曲線。對照小鼠在移植CAG細(xì)胞后40天內(nèi)死亡，和用dEpoB治療的小鼠在50天內(nèi)死亡。除了一只小鼠在70天內(nèi)死亡，所有用弗迪隆治療的小鼠存活超過80天。圖43表示細(xì)胞凋亡的途徑。圖44表示在CAG骨髓瘤細(xì)胞中埃坡霉素誘導(dǎo)的時(shí)間依賴的胱冬肽酶3過程，其顯示隨著藥物治療的時(shí)間延長增加了17kD的胱冬肽酶3的切割形式。圖45表示用切割的胱冬肽酶-3抗體進(jìn)行的CAG骨髓瘤細(xì)胞的免疫組織化學(xué)的染色，其顯示出在凋亡細(xì)胞中細(xì)胞質(zhì)和核周的定位(示出了低和高的放大率)。圖46表示用切割的胱冬肽酶-3抗體進(jìn)行的CAG骨髓瘤細(xì)胞的免疫組織化學(xué)的染色，其顯示出在凋亡細(xì)胞中細(xì)胞質(zhì)和核周的定位(示出了低和高的放大率)。圖47表明胱冬肽酶8的活性在埃坡霉素治療后增加了，并且這種增加可通過胱冬肽酶8的特異抑制劑抑制。圖48表明胱冬肽酶8的活性在埃坡霉素治療后增加了，并且這種增加可通過胱冬肽酶8的特異抑制劑抑制。圖49表明胱冬肽酶9的活性在埃坡霉素治療后增加了。圖50表示在KL不存在或存在下，用dEpoB或弗迪隆培養(yǎng)24h的CBCD34+細(xì)胞的AnnexinV染色。然后將藥物洗除并實(shí)施AnnexinV染色。實(shí)心區(qū)域代表賦形劑對照組并且空心區(qū)域代表藥物治療組。短時(shí)間暴露于埃坡霉素沒有明顯增加非循環(huán)人CD34+細(xì)胞的凋亡。圖51表示在集落形成中，埃坡霉素對非循環(huán)人CD34+細(xì)胞的影響。通過2星期集落形成而評價(jià)的先祖細(xì)胞，在對照組和藥物治療組之間沒有顯著不同。圖52表示在集落形成中，埃坡霉素對非循環(huán)人CD34+細(xì)胞的影響。通過2星期集落形成而評價(jià)的先祖細(xì)胞，在對照組和藥物治療組之間沒有顯著不同。圖53表示由弗迪隆和紫杉醇抗藥物耐藥性的人T細(xì)胞淋巴母細(xì)胞性白血病(CCRT-CEM/紫杉醇)異種移植物的治療效果(體重降低)。盡管顯著地降低體重，但對于所有治療沒有毒性死亡。定義本發(fā)明的一些化合物，和特定官能團(tuán)的定義還更詳細(xì)地描述于下。為了本發(fā)明的目的，化學(xué)元素根照元素周期表(CAS版本，HandbookofChemistryandPhysics(化學(xué)物理手冊)，第75版，封二)而確定，并且特定官能團(tuán)為在其中所述的一般定義。另外，有機(jī)化學(xué)的一般性原則，以及特定官能團(tuán)部分和反應(yīng)性描述于“OrganicChemistry(有機(jī)化學(xué))”，ThomasSorrell，UniversityScienceBooks，Sausalito1999，其全部內(nèi)容通過引用而并入本發(fā)明。另外，本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將認(rèn)識到的是，如本發(fā)明中所述的合成方法利用了多種保護(hù)基團(tuán)。如本發(fā)明中所用的術(shù)語“保護(hù)基團(tuán)”，意思是指特別的官能部分，例如O、S或N，被臨時(shí)封閉以使得可以在多官能化合物中另一個(gè)反應(yīng)位置上選擇性地進(jìn)行反應(yīng)。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，保護(hù)基團(tuán)以良好產(chǎn)率選擇性地反應(yīng)以給出被保護(hù)了的底物，該底物對所計(jì)劃進(jìn)行的反應(yīng)是穩(wěn)定的；保護(hù)基團(tuán)應(yīng)當(dāng)能以良好產(chǎn)率選擇性地除去，其通過容易獲得的優(yōu)選無毒的不進(jìn)攻其它官能團(tuán)的試劑而進(jìn)行；保護(hù)基團(tuán)形成可易于分離的衍生物(更優(yōu)選不形成新的手性中心)；并且保護(hù)基團(tuán)具有最小的附加功能性以避免其它位置的反應(yīng)。如在本發(fā)明中詳述的，氧、硫、氮和碳保護(hù)基團(tuán)可被利用。雖然典型的保護(hù)基團(tuán)在本發(fā)明中詳述，但是將認(rèn)識到的是，本發(fā)明不意于受這些保護(hù)基團(tuán)限制；更確切地，各種另外的同等保護(hù)基團(tuán)可用上述標(biāo)準(zhǔn)容易地確定并應(yīng)用于本發(fā)明的方法中。另外，在“ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis(有機(jī)合成中的保護(hù)基團(tuán))”第三版，Greene，T.W.和Wuts，P.G.編，JohnWiley&Sons，NewYork1999中描述了多種保護(hù)基團(tuán)，其全部內(nèi)容通過引用并入本發(fā)明。將認(rèn)識到的是，本發(fā)明中所描述的化合物，可以用任何數(shù)量的取代基或功能部分取代。通常，術(shù)語“取代”，無論是否在前面加上術(shù)語“任選地”，以及包含于本發(fā)明分子式中的取代基，是指用指定取代基的基團(tuán)取代給定結(jié)構(gòu)中的氫基團(tuán)。當(dāng)在任何給定結(jié)構(gòu)中多于一個(gè)位置可以取代以多于一個(gè)選自指定基團(tuán)的取代基時(shí)，在每個(gè)位置上的取代基可以是相同的或不同的。如本發(fā)明中所用的，術(shù)語“取代”被設(shè)想包括所有有機(jī)化合物的可允許的取代基。在廣義的方面，可允許的取代基包括有機(jī)化合物的無環(huán)的和環(huán)狀的、支鏈的和無支鏈的、碳環(huán)的和雜環(huán)的、芳香族的和非芳香族的取代基。為了本發(fā)明的目的，雜原子如氮可以具有氫取代基和/或本發(fā)明中所述的任何可允許的有機(jī)化合物的取代基，只要其滿足該雜原子的化合價(jià)。另外，本發(fā)明不意于以任何方式被有機(jī)化合物的可允許取代基限制。由本發(fā)明設(shè)想的取代基和變體的組合優(yōu)選導(dǎo)致形成穩(wěn)定的化合物的那些，所述化合物用于治療，例如增殖性疾病，包括但不限于癌癥。術(shù)語“穩(wěn)定的”，如本發(fā)明中所用，優(yōu)選指這樣的化合物，其具有足以允許被制備的穩(wěn)定性，和其保持該化合物的完整性以被檢測的足夠長的時(shí)間并優(yōu)選用于詳述于本發(fā)明中的目的的足夠長的時(shí)間。術(shù)語“脂肪族”，如本發(fā)明中所用，包括飽和的和不飽和的、直鏈的(即無支鏈的)、支鏈的、環(huán)狀的或多環(huán)的脂肪族烴，其任選地取代以一個(gè)或多個(gè)官能團(tuán)。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將認(rèn)識到的是，本發(fā)明中“脂肪族”意于包括但不限于烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、環(huán)烯基和環(huán)炔基部分。因此，如本發(fā)明中所用的，術(shù)語“烷基”包括直鏈、支鏈和環(huán)狀烷基。類似的慣例應(yīng)用于其它一般術(shù)語，例如“烯基”、“炔基”等等。另外，如本發(fā)明中所用的，術(shù)語“烷基”、“烯基”、“炔基”等包括取代的和未取代的基團(tuán)。在一些實(shí)施方案中，如本發(fā)明中所用的，“低級烷基”指那些具有1-6個(gè)碳原子的烷基(環(huán)狀的、無環(huán)的、取代的、未取代的、支鏈的或無支鏈的)。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明中所用的烷基、烯基和炔基包含1-20個(gè)脂肪族碳原子。在另一些實(shí)施方案中，本發(fā)明中所用的烷基、烯基和炔基包含1-10個(gè)脂肪族碳原子。在再一些實(shí)施方案中，本發(fā)明中所用的烷基、烯基和炔基包含1-8個(gè)脂肪族碳原子。在又一些實(shí)施方案中，本發(fā)明中所用的烷基、烯基和炔基包含1-6個(gè)脂肪族碳原子。在再一些實(shí)施方案中，本發(fā)明中所用的烷基、烯基和炔基包含1-4個(gè)脂肪族碳原子。因此例舉的脂肪族基團(tuán)包括但不限于，例如，甲基、乙基、正丙基、異丙基、環(huán)丙基、-CH2-環(huán)丙基、烯丙基、正丁基、仲丁基、異丁基、叔丁基、環(huán)丁基、-CH2-環(huán)丁基、正戊基、仲戊基、異戊基、叔戊基、環(huán)戊基、-CH2-環(huán)戊基、正己基、仲己基、環(huán)己基、CH2-環(huán)己基部分等等，其同樣可具有一個(gè)或多個(gè)取代基。烯基包括但不限于，例如，乙烯基、丙烯基、丁烯基、1-甲基-2-丁烯-1-基等。典型的炔基包括但不限于，乙炔基、2-丙炔基(炔丙基)、1-丙炔基等。如本發(fā)明中所用的術(shù)語“烷氧基”或“硫代烷基”指如前定義的烷基，通過氧原子或通過硫原子連接到母體分子部分。在一些實(shí)施方案中，所述烷基包含1-20個(gè)脂肪族碳原子。在另一些實(shí)施方案中，所述烷基包含1-10個(gè)脂肪族碳原子。在再一些實(shí)施方案中，本發(fā)明中所用的烷基、烯基和炔基包含1-8個(gè)脂肪族碳原子。在又一些實(shí)施方案中，所述烷基包含1-6個(gè)脂肪族碳原子。在再一些實(shí)施方案中，所述烷基包含1-4個(gè)脂肪族碳原子。烷氧基的例子包括但不限于，甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、正丁氧基、叔丁氧基、新戊氧基和正己氧基。硫代烷基的例子包括但不限于，甲硫基、乙硫基、丙硫基、異丙硫基、正丁硫基等。術(shù)語“烷氨基”指具有-NHR’結(jié)構(gòu)的基團(tuán)，其中R’為如本發(fā)明中所定義的烷基。在一些實(shí)施方案中，所述烷基包含1-20個(gè)脂肪族碳原子。在另一些實(shí)施方案中，所述烷基包含1-10個(gè)脂肪族碳原子。在再一些實(shí)施方案中，本發(fā)明中所用的烷基、烯基和炔基包含1-8個(gè)脂肪族碳原子。在又一些實(shí)施方案中，所述烷基包含1-6個(gè)脂肪族碳原子。在再一些實(shí)施方案中，所述烷基包含1-4個(gè)脂肪族碳原子。烷氨基的例子包括但不限于，甲氨基、乙氨基、異丙氨基等等。本發(fā)明化合物的上述脂肪族(和其它)部分的取代基的一些例子包括但不限于，脂肪族、雜脂肪族、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、烷氧基、芳氧基、雜烷氧基、雜芳氧基、烷硫基、芳硫基、雜烷硫基、雜芳硫基、F、Cl、Br、I、-OH、-NO2、-CN、-CF3、-CH2CF3、-CHCl2、-CH2OH、-CH2CH2OH、-CH2NH2、-CH2SO2CH3、-C(O)Rx、-CO2(Rx)、-CON(Rx)2、-OC(O)Rx、-OCO2Rx、-OCON(Rx)2、-N(Rx)2、-S(O)2Rx、-NRx(CO)Rx，其中每次出現(xiàn)的Rx獨(dú)立地包括但不限于，脂肪族、雜脂肪族、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基，其中上述的和在此描述的任何脂肪族、雜脂肪族、芳烷基或雜芳烷基取代基可以是取代的或未取代的、支鏈的或無支鏈的、環(huán)狀或無環(huán)的，并且其中上述的和在此描述的任何芳基或雜芳基取代基可以是取代或未取代的。另外的通?？蓱?yīng)用的取代基的例子由在本發(fā)明實(shí)施例中所示的特定實(shí)施方案舉例說明。通常，術(shù)語“芳基”和“雜芳基”，如本發(fā)明中所用，指具有優(yōu)選3-14個(gè)碳原子的穩(wěn)定的單環(huán)或多環(huán)、雜環(huán)、多環(huán)和多雜環(huán)不飽和部分，其中每個(gè)均可被取代或未取代。取代基包括但不限于，任何前面提及的取代基，即如本發(fā)明中公開的對脂肪族部分列舉的取代基或?qū)ζ渌糠至信e的取代基，該取代基導(dǎo)致形成穩(wěn)定的化合物。在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，“芳基”指具有一個(gè)或兩個(gè)芳香環(huán)的單環(huán)或二環(huán)碳環(huán)體系，包括但不限于，苯基、萘基、四氫萘基、茚滿基、茚基等。在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，本發(fā)明中所用的術(shù)語“雜芳基”，指具有五至十個(gè)環(huán)原子的環(huán)狀芳香基，其中一個(gè)環(huán)原子選自S、O和N；零個(gè)、一個(gè)或兩個(gè)環(huán)原子為獨(dú)立地選自S、O和N的額外雜原子；并且剩余的環(huán)原子為碳，該環(huán)狀芳香基通過任何環(huán)原子連接到本發(fā)明分子的其它部分，例如吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、噻唑基、噁唑基、異噁唑基、噻二唑基、噁二唑基、苯硫基、呋喃基、喹啉基、異喹啉基等等。將認(rèn)識到芳基和雜芳基(包括二環(huán)芳基)可以是未取代的或取代的，其中取代包括其上的一個(gè)、兩個(gè)、三個(gè)或更多個(gè)氫原子獨(dú)立地替換以任何一個(gè)或多個(gè)如下部分，包括但不限于脂肪族、雜脂肪族、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、烷氧基、芳氧基、雜烷氧基、雜芳氧基、烷硫基、芳硫基、雜烷硫基、雜芳硫基、F、Cl、Br、I、-OH、-NO2、-CN、-CF3、-CH2CF3、-CHCl2、-CH2OH、-CH2CH2OH、-CH2NH2、-CH2SO2CH3、-C(O)Rx、-CO2(Rx)、-CON(Rx)2、-OC(O)Rx、-OCO2Rx、-OCON(Rx)2、-N(Rx)2、-S(O2)Rx、-NRx(CO)Rx，其中每個(gè)出現(xiàn)的Rx獨(dú)立地包括但不限于，脂肪族、雜脂肪族、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基，其中任何上述的和在此描述的脂肪族、雜脂肪族、芳烷基或雜芳烷基取代基可以是取代的或未取代的，支鏈的或無支鏈的、環(huán)狀的或無環(huán)的，并且其中任何上述的和在此描述的芳基或雜芳基取代基可以是取代的或未取代的。另外的通?？蓱?yīng)用的取代基的例子由在本發(fā)明實(shí)施例中所示的特定實(shí)施方案舉例說明。本發(fā)明中所用的術(shù)語“環(huán)烷基”特指具有三至七個(gè)，優(yōu)選三至十個(gè)碳原子的基團(tuán)。適合的環(huán)烷基包括但不限于，環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基等等，如在其它的脂肪族、雜脂肪族或雜環(huán)部分中的情況那樣，其可任選的取代以如下基團(tuán)，包括但不限于脂肪族、雜脂肪族、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、烷氧基、芳氧基、雜烷氧基、雜芳氧基、烷硫基、芳硫基、雜烷硫基、雜芳硫基、F、Cl、Br、I、-OH、-NO2、-CN、-CF3、-CH2CF3、-CHCl2、-CH2OH、-CH2CH2OH、-CH2NH2、-CH2SO2CH3、-C(O)Rx、-CO2(Rx)、-CON(Rx)2、-OC(O)Rx、-OCO2Rx、-OCON(Rx)2、-N(Rx)2、-S(O2)Rx、-NRx(CO)Rx，其中每個(gè)出現(xiàn)的Rx獨(dú)立地包括但不限于，脂肪族、雜脂肪族、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基，其中任何上述的和在此描述的脂肪族、雜脂肪族、芳烷基或雜芳烷基取代基可以是取代的或未取代的，支鏈的或無支鏈的、環(huán)狀的或無環(huán)的，并且其中任何上述的和在此描述的芳基或雜芳基取代基可以是取代的或未取代的。另外的通?？蓱?yīng)用的取代基的例子由在本發(fā)明實(shí)施例中所示的特定實(shí)施方案舉例說明。本發(fā)明中所用的術(shù)語“雜脂肪族”指脂肪族部分，包含一個(gè)或多個(gè)氧、硫、氮、磷或硅原子，例如，替代碳原子。雜脂肪族部分可以是支鏈的、無支鏈的、環(huán)狀的或無環(huán)的并包括飽和的和不飽和的雜環(huán)例如嗎啉基、吡咯烷基等。在一些實(shí)施方案中，雜脂肪族部分其上的一個(gè)或多個(gè)氫原子獨(dú)立地替代以一個(gè)或多個(gè)部分，包括但不限于，脂肪族、雜脂肪族、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、烷氧基、芳氧基、雜烷氧基、雜芳氧基、烷硫基、芳硫基、雜烷硫基、雜芳硫基、F、Cl、Br、I、-OH、-NO2、-CN、-CF3、-CH2CF3、-CHCl2、-CH2OH、-CH2CH2OH、-CH2NH2、-CH2SO2CH3、-C(O)Rx、-CO2(Rx)、-CON(Rx)2、-OC(O)Rx、-OCO2Rx、-OCON(Rx)2、-N(Rx)2、-S(O2)Rx、-NRx(CO)Rx，其中每個(gè)出現(xiàn)的Rx獨(dú)立地包括但不限于，脂肪族、雜脂肪族、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基，其中任何上述的和在此描述的脂肪族、雜脂肪族、芳烷基或雜芳烷基取代基可以是取代的或未取代的，支鏈的或無支鏈的、環(huán)狀的或無環(huán)的，并且其中任何上述的和在此描述的芳基或雜芳基取代基可以是取代的或未取代的。另外的通?？蓱?yīng)用的取代基的例子由在本發(fā)明實(shí)施例中所示的特定實(shí)施方案舉例說明。本發(fā)明中所用的術(shù)語“鹵代”和“鹵素”指選自氟、氯、溴和碘的原子。術(shù)語“鹵代烷基”指如上定義的烷基，其具有一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)鹵素原子連接其上并舉例說明為如氯甲基、溴乙基、三氟甲基等等這樣的基團(tuán)。本發(fā)明中所用的術(shù)語“雜環(huán)烷基”或“雜環(huán)”指非芳香族的5元、6元或7元環(huán)或多環(huán)基團(tuán)，包括但不限于二環(huán)或三環(huán)基團(tuán)，包含具有一至三個(gè)雜原子(獨(dú)立地選自氧、硫、和氮)的稠合的六元環(huán)，其中(i)每個(gè)5元環(huán)具有0至1個(gè)雙鍵和每個(gè)6元環(huán)具有0至2個(gè)雙鍵，(ii)氮和硫雜原子可任選地被氧化，(iii)氮雜原子可任選地被季銨化，和(iv)任何上述的雜環(huán)可以稠合到苯環(huán)上。典型的雜環(huán)包括但不限于，吡咯烷基、吡唑啉基、吡唑烷基、咪唑啉基、咪唑烷基、哌啶基、哌嗪基、噁唑烷基、異噁唑烷基、嗎啉基、噻唑烷基、異噻唑烷基和四氫呋喃基。在一些實(shí)施方案中，“取代的雜環(huán)烷基或雜環(huán)”基團(tuán)是可利用的并如本發(fā)明中使用的，其指如上所定義的雜環(huán)烷基或雜環(huán)基團(tuán)，通過用如下基團(tuán)獨(dú)立地替代其上的一個(gè)、二個(gè)或三個(gè)氫原子而被取代，所述基團(tuán)包括但不限于，脂肪族、雜脂肪族、芳基、雜芳基、芳烷基、雜芳烷基、烷氧基、芳氧基、雜烷氧基、雜芳氧基、烷硫基、芳硫基、雜烷硫基、雜芳硫基、F、Cl、Br、I、-OH、-NO2、-CN、-CF3、-CH2CF3、-CHCl2、-CH2OH、-CH2CH2OH、-CH2NH2、-CH2SO2CH3、-C(O)Rx、-CO2(Rx)、-CON(Rx)2、-OC(O)Rx、-OCO2Rx、-OCON(Rx)2、-N(Rx)2、-S(O2)Rx、-NRx(CO)Rx，其中每個(gè)出現(xiàn)的Rx獨(dú)立地包括但不限于，脂肪族、雜脂肪族、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基，其中任何上述的和在此描述的脂肪族、雜脂肪族、芳烷基或雜芳烷基取代基可以是取代的或未取代的，支鏈的或無支鏈的、環(huán)狀的或無環(huán)的，并且其中任何上述的和在此描述的芳基或雜芳基取代基可以是取代的或未取代的。另外的通?？蓱?yīng)用的取代基的例子由在本發(fā)明實(shí)施例中所示的特定實(shí)施方案舉例說明?！皹?biāo)記的”本發(fā)明中所用的術(shù)語“標(biāo)記的”意于表示化合物具有連接其上的至少一個(gè)元素、同位素或化學(xué)化合物使得該化合物可檢測。通常，標(biāo)記物典型地分成三類a)同位素標(biāo)記物，其可以是放射性的或者是重同位素，包括但不限于，2H、3H、32P、35S、67Ga、99mTc(Tc-99m)、111In、123I、125I、169yb和186Re；b)免疫標(biāo)記物，其可以是抗體或抗原，其可以結(jié)合于酶(例如辣根過氧化物酶)上以制得可檢測試劑；和c)顯色的、發(fā)光的、磷光的或熒光的染料。將認(rèn)識到的是，該標(biāo)記物可以在任何位置上并入本發(fā)明化合物中，只要該位置不干擾被檢測化合物的生物活性或特性。在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，利用光親和標(biāo)記直接說明在生物體系中的分子間相互作用(例如，探測微管蛋白二聚體中的埃坡霉素結(jié)合位置)?？捎酶鞣N已知的發(fā)光物質(zhì)，大部分依賴于重氮化合物、疊氮或重氮甲烷(diazirine)向氮賓或卡賓的光轉(zhuǎn)換(參見，Bayley，H.，PhotogeneratedReagentsinBiochemistryandMolecularBiology(1983)，Elsevier，Amsterdam。)，其全部內(nèi)容通過引用而并入本發(fā)明。在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，所用的光親和標(biāo)記物為用一個(gè)或多個(gè)鹵素部分取代的鄰-、間-和對-疊氮苯甲?；ǖ幌抻?-疊氮基-2，3，5，6-四氟苯甲酸?！熬酆衔铩北景l(fā)明中所用的術(shù)語“聚合物”指包含鏈的組合物，所述鏈可以是打開的、閉合的、直鏈的、支鏈的或交聯(lián)的重復(fù)單元(單體)，所述重復(fù)單元可以是相同的或不同的。將認(rèn)識到的是，在一些實(shí)施方案中術(shù)語聚合物指生物聚合物，在本發(fā)明中所用的生物聚合物意于指天然的聚合物材料或基于天然的那些材料，包括但不限于核酸、肽及其類似物。在另一些實(shí)施方案中，術(shù)語聚合物指合成聚合物，例如生物可降解聚合物或其它聚合物材料。將認(rèn)識到的是，聚合物固相支持體也包括于本發(fā)明的聚合物中。本發(fā)明的化合物可以連接于聚合物支持體上并因此可以在固相上進(jìn)行合成修飾。本發(fā)明中所用的術(shù)語“固相支持體”指包括但不限于，小顆粒、盤狀物、毛細(xì)管、中空纖維、針狀物、針狀物、固體纖維、纖維素珠、多孔玻璃珠、硅膠、任選與二乙烯苯交聯(lián)的聚苯乙烯珠、接枝共聚珠、聚丙烯酰胺珠、乳膠粒子、任選與N，N’-雙-丙烯酰乙二胺交聯(lián)的二甲基丙烯酰胺，和用疏水聚合物涂覆的玻璃顆粒。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將認(rèn)識到的是，特定固相支持體的選擇將受限于支持體與所利用的反應(yīng)化學(xué)的相容性。典型的固相支持體為Tentagel氨基樹脂，由1)與二乙烯基苯交聯(lián)的聚苯乙烯珠和2)PEG(聚乙二醇)組成的復(fù)合物。Tentagel是特別有用的固相支持體，因?yàn)樗怯糜陬w粒上(on-bead)或顆粒下(off-bead)試驗(yàn)的通用支持體，并且它還具有在從甲苯到水的溶劑中的良好的溶脹性。本發(fā)明一些實(shí)施方案的描述認(rèn)識到開發(fā)新型和有效的癌癥療法的需要，本發(fā)明提供可獲得具有廣泛的生物活性和藥理活性的大環(huán)的新型合成方法學(xué)，以及具有這些活性的新型化合物，新型治療組合物，和使用這些化合物和組合物的方法。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物用于治療癌癥。本發(fā)明的一些化合物顯示出對癌細(xì)胞系的細(xì)胞毒性或生長抑制作用，顯示出聚合微管蛋白和穩(wěn)定微管裝配的能力，和/或?qū)е略诎┘?xì)胞異種移植物模型中腫瘤的縮小或消失。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物可具有減少的或最小化的副作用，包括要害器官毒性、惡心、嘔吐、腹瀉、脫發(fā)、體重降低、體重增加、肝毒性、皮膚病等。本發(fā)明化合物還可能由于增加的水溶性、降低的毒性、增加的治療范圍、增強(qiáng)的功效等而易于制成制劑。本發(fā)明化合物的一般性說明本發(fā)明的化合物包括如下進(jìn)一步定義的通式(0)的化合物，和其藥學(xué)上可接受的衍生物；和其藥學(xué)可接受的衍生物其中R0為取代或未取代的芳基、雜芳基、芳烷基、芳烯基、芳炔基、雜芳烷基、雜芳烯基或雜芳炔基部分；在一些實(shí)施方案中，R0為芳烷基、芳烯基、雜芳烷基或雜芳烯基部分；在另一些實(shí)施方案中，R0為雜芳烯基部分；在一些實(shí)施方案中，R0為雜芳烷基部分；在另一些實(shí)施方案中，R0為5-7元的芳基或雜芳基部分；在再一些實(shí)施方案中，R0為8-12元二環(huán)芳基或雜芳基部分；在又一些實(shí)施方案中，R0為二環(huán)部分，其中苯環(huán)被稠合到雜芳基或芳基部分上；在另一些實(shí)施方案中，R0為雙環(huán)部分，其中苯環(huán)被稠合到噻唑、噁唑或咪唑部分上；在再一些實(shí)施方案中，R0為取代或未取代的苯基部分；R3和R4各自獨(dú)立地為氫；或取代或未取代、直鏈或支鏈、環(huán)狀或無環(huán)的脂肪族、雜脂肪族，芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基部分，任選取代以一個(gè)或多個(gè)如下基團(tuán)羥基、被保護(hù)的羥基、烷氧基、羧基、甲醛基、直鏈或支鏈的烷基或環(huán)狀縮醛、氟、氨基、被保護(hù)的氨基、用一個(gè)或兩個(gè)烷基或芳基部分取代的氨基、N-羥基亞氨基或N-烷氧基亞氨基；在一些實(shí)施方案中，R3和R4各自獨(dú)立地為氫、氟或低級烷基；在另一些實(shí)施方案中，R3和R4各自獨(dú)立地為氫或甲基；在又一些實(shí)施方案中，R3為甲基和R4為氫；R5和R6各自獨(dú)立地為氫或保護(hù)基團(tuán)；在一些實(shí)施方案中，R5和R6都是氫；X為O、S、C(R7)2或NR7，其中每種情況下的R7獨(dú)立地為氫或低級烷基；在一些實(shí)施方案中，X為O；在另一些實(shí)施方案中，X為NH；Y為O、S、NH、C(R7)2、CH2、N(R7)或NH，其中每種情況下的R7獨(dú)立地為氫或低級烷基；在一些實(shí)施方案中Y為O；在另一些實(shí)施方案中，Y為NH；在再一些實(shí)施方案中，Y為CH2；每個(gè)R8獨(dú)立地為氫；鹵素，羥基，烷氧基，氨基，二烷氨基，烷氨基，氟，氰基，或取代或未取代、直鏈或支鏈、環(huán)狀或無環(huán)的脂肪族、雜脂肪族、芳基、雜芳基、芳烷基、芳烯基、芳炔基或雜芳烷基、雜芳烯基、雜芳炔基部分，任選取代以一個(gè)或多個(gè)如下基團(tuán)羥基、被保護(hù)的羥基、烷氧基、羧基、甲醛基、直鏈或支鏈的烷基或環(huán)狀縮醛、氟、氨基、被保護(hù)的氨基、用一個(gè)或兩個(gè)烷基或芳基部分取代的氨基、N-羥基亞氨基或N-烷氧基亞氨基；在一些實(shí)施方案中，R8為氫；在另一些實(shí)施方案中，R8為羥基；在再一些實(shí)施方案中，R8為氟；在又一些實(shí)施方案中，R8為低級烷基例如甲基；在另一些實(shí)施方案中，R8為-CF3、-CF2H或CFH2；在另一些實(shí)施方案中，R8為全氟化的或氟化的烷基；在再一些實(shí)施方案中，R8為鹵化的或全鹵化的烷基；R9和R10各自獨(dú)立地為氫；或取代或未取代、直鏈或支鏈、環(huán)狀或無環(huán)的脂肪族、雜脂肪族、芳基、雜芳基、芳基、芳烷基、芳烯基、芳炔基、雜芳烷基、雜芳烯基或雜芳炔基部分，任選取代以一個(gè)或多個(gè)如下基團(tuán)羥基、被保護(hù)的羥基、烷氧基、羧基、甲醛基、直鏈或支鏈的烷基或環(huán)狀縮醛、氟、氨基、被保護(hù)的氨基、用一個(gè)或兩個(gè)烷基或芳基部分取代的氨基、N-羥基亞氨基或N-烷氧基亞氨基；在一些實(shí)施方案中，R9和R10之一為甲基；在另一些實(shí)施方案中，R9和R10均為甲基；在再一些實(shí)施方案中，R9和R10之一為甲基，并且另一個(gè)為氫；在另一些實(shí)施方案中，R9和R10都為氫；A-B代表CRA＝CRB-，C(RA)2-C(RB)2-或-C≡C-；C-D代表CRC＝CRD-，-C(RC)2-C(RD)2-或-C≡C-；其中每種情況下的RA獨(dú)立地為氫；鹵素；-ORA’；-SRA’；-N(RA’)2；-C(O)ORA’；-C(O)RA’；-CONHRA’；-O(C＝O)RA’；-O(C＝O)ORA’；-NRA’(C＝O)RA’；N3；N2RA’；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或無環(huán)、直鏈或支鏈的脂肪族、雜脂肪族、芳基或雜芳基，任選取代以一個(gè)或多個(gè)如下基團(tuán)氫；鹵素；-ORA’；-SRA’；-N(RA’)2；-C(O)ORA’；-C(O)RA’；-CONHRA’；-O(C＝O)RA’；-O(C＝O)ORA’；-NRA’(C＝O)RA’；N3；N2RA’；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或無環(huán)、直鏈或支鏈的取代或未取代的脂肪族、雜脂肪族、芳基或雜芳基部分；對于每種情況下的RB獨(dú)立地為氫；鹵素；-ORB’；-SRB’；-N(RB’)2；-C(O)ORB’；-C(O)RB’；-CONHRB’；-O(C＝O)RB’；-O(C＝O)ORB’；-NRB’(C＝O)RB’；N3；N2RB’；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或無環(huán)、直鏈或支鏈的脂肪族、雜脂肪族、芳基或雜芳基，任選取代以一個(gè)或多個(gè)如下基團(tuán)氫；鹵素；-ORB’；-SRB’；-N(RB’)2；-C(O)ORB’；-C(O)RB’；-CONHRB’；-O(C＝O)RB’；-O(C＝O)ORB’；-NRB’(C＝O)RB’；N3；N2RB’；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或無環(huán)、直鏈或支鏈的取代或未取代的脂肪族、雜脂肪族、芳基，或雜芳基部分；在一些實(shí)施方案中，RB為氫、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基或環(huán)己基，各自未取代或任選取代以一個(gè)或多個(gè)出現(xiàn)的如下基團(tuán)鹵素、-OH、-ORB’、NH2或N(RB’)2或其任意組合，其中每種情況下的RB’獨(dú)立地為氫、烷基、芳基或保護(hù)基團(tuán)，在另一些實(shí)施方案中，RB為氫、甲基或乙基，在又一些實(shí)施方案中，RB為甲基，在另一些實(shí)施方案中，-CY3、-CHY2、-CH2Y，其中Y為F、Br、Cl、I、ORB’、NHRB’、N(RB’)2或SRB’；在再一些實(shí)施方案中，RB為-CF3、-CH2F或CHF2；在另一些實(shí)施方案中，RB為全氟化或氟化的烷基；在再一些實(shí)施方案中，RB為鹵化的或全鹵化的烷基；對于每種情況下的RC獨(dú)立地為氫；鹵素；-ORC’；-SRC’；-N(RC’)2；-C(O)ORC’；-C(O)RC’；-CONHRC’；-O(C＝O)RC’；-O(C＝O)ORC’；-NRC’(C＝O)RC’；N3；N2RC’；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或無環(huán)、直鏈或支鏈的脂肪族、雜脂肪族、芳基或雜芳基，任選取代以一個(gè)或多個(gè)如下基團(tuán)氫；鹵素；-ORC’；-SRC’；-N(RC’)2；-C(O)ORC’；-C(O)RC’；-CONHRC’；-O(C＝O)RC’；-O(C＝O)ORC’；-NRC’(C＝O)RC’；N3；N2RC’；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或無環(huán)、直鏈或支鏈的取代或未取代的脂肪族、雜脂肪族、芳基或雜芳基部分；在一些實(shí)施方案中，RC為鹵素、烷基、羥基或氨基；在另一些實(shí)施方案中，RC為氟；在再一些實(shí)施方案中，RC為羥基；對于每種情況下的RD獨(dú)立地為氫；鹵素；-ORD’；-SRD’；-N(RD’)2；-C(O)ORD’；-C(O)RD’；-CONHRD’；-O(C＝O)RD’；-O(C＝O)ORD’；-NRD’(C＝O)RD’；N3；N2RD’；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或無環(huán)、直鏈或支鏈的脂肪族、雜脂肪族、芳基或雜芳基，任選取代以一個(gè)或多個(gè)如下基團(tuán)氫；鹵素；-ORD’；-SRD’；-N(RD’)2；-C(O)ORD’；-C(O)RD’；-CONHRD’；-O(C＝O)RD’；-O(C＝O)ORD’；-NRD’(C＝O)RD’；N3；N2RD’；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或無環(huán)、直鏈或支鏈的取代或未取代的脂肪族、雜脂肪族、芳基，或雜芳基部分；或者其中RA，RB，RC或RD中任意兩個(gè)合在一起可以形成環(huán)狀部分并可以通過氧、硫、碳或氮原子連接，或者任意兩個(gè)相鄰的RA，RB，RC或RD合在一起，可以形成3-6元取代或未取代的脂肪族、雜脂肪族、芳基或雜芳基環(huán)；在一些實(shí)施方案中，RA和RB合在一起形成通過氧、硫、碳或氮原子連接的3元環(huán)；在另一些實(shí)施方案中，RC和RD合在一起形成通過氧、硫、碳或氮原子連接的3元環(huán)；其中每種情況下的RA’，RB’，RC’或RD’獨(dú)立地為氫；保護(hù)基團(tuán)；直鏈或支鏈、取代或未取代、環(huán)狀或無環(huán)的、脂肪族、雜脂肪族、芳基、雜芳基、芳烷基、芳烯基、芳炔基、芳烯基、芳炔基或雜芳烷基、雜芳烯基、雜芳炔基部分。本發(fā)明化合物包括如下進(jìn)一步定義的通式(I)的化合物其中R1為氫或低級烷基；在一些實(shí)施方案中，R1為甲基；在一些實(shí)施方案中，R1為-CF3、-CF2H或CH2F；在另一些實(shí)施方案中，R1為全氟化的或氟化的烷基；在再一些實(shí)施方案中，R1為鹵化的或全鹵化的烷基；R2為取代的或未取代的芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基部分；在一些實(shí)施方案中，R2為取代或未取代的噁唑；在另一些實(shí)施方案中，R2為取代或未取代的噻唑；和A、B、C、D、R3、R4、R5、R6和X如上定義。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物包括如下定義的具有立體化學(xué)的通式(II)的化合物其中A、B、C、D、R1、R2、R3、R4、R5、R6和X如上定義。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物包括如下所示的通式(III)的化合物其中Z為氧原子、硫原子、-NRZ-或-C(RZ)2-；并且A、B、R1、R2、R3、R4、R5、R6和X如上定義。在一些優(yōu)選的實(shí)施方案中，Z為氧。在另一些實(shí)施方案中，Z為-NH-。在再一些實(shí)施方案中，Z為-CH2-。在另一些實(shí)施方案中，RZ為氫、烷基、鹵素或?；Ｔ谝恍?shí)施方案中，RZ為氟。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物包括如下定義的具有立體化學(xué)的通式(IV)的化合物其中A、B、R1、R2、R3、R4、R5、R6、X和Z如上定義。在一些實(shí)施方案中，RB為甲基。在另一些實(shí)施方案中，RB為-CF3。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物包括如下所示的通式(V)或(VI)的化合物其中Z為氧原子、硫原子、-NRZ-或-C(RZ)2-；并且A、B、R1、R2、R3、R4、R5、R6和X如上定義。在一些優(yōu)選的實(shí)施方案中，Z為氧。在另一些實(shí)施方案中，Z為-NH-。在再一些實(shí)施方案中Z為-CH2-。在另一些實(shí)施方案中，RZ為氫、烷基、鹵素或?；?。在一些實(shí)施方案中，RZ為氟。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物包括如下所示的通式(VII)的化合物其中A、B、RC、RD、R1、R2、R3、R4、R5、R6和X如上定義。在一些優(yōu)選的實(shí)施方案中，每個(gè)RC獨(dú)立地為氫、鹵素或低級烷基。在另一些的實(shí)施方案中，每個(gè)RD獨(dú)立地為氫、鹵素或低級烷基。在一些實(shí)施方案中，X為O。在另一些實(shí)施方案中，X為NH。在另一些實(shí)施方案中，X為CH2。在一些實(shí)施方案中，R2為取代的或未取代的噻唑。在一些實(shí)施方案中，R2為2-甲基-噻唑-4-基。在另一些實(shí)施方案中，R2為2-羥甲基-噻唑-4-基。在再一些實(shí)施方案中，R2為2-氨甲基-噻唑-4-基。在另一些實(shí)施方案中，R2為2-硫羥甲基-噻唑-4-基。在一些實(shí)施方案中，R2為取代的或未取代的噁唑。在一些實(shí)施方案中，R2為2-甲基-噁唑-4-基。在另一些實(shí)施方案中，R2為2-羥甲基-噁唑-4-基。在再一些實(shí)施方案中，R2為2-氨甲基-噁唑-4-基。在另一些實(shí)施方案中，R2為2-硫羥甲基-噁唑-4-基。在一些實(shí)施方案中，RB為氫、甲基、乙基、-CF3、-CH2F、-CF2H。在一些實(shí)施方案中，RB為甲基。在再一些實(shí)施方案中，RB為-CF3。在一些實(shí)施方案中，RB為氫。在另一些實(shí)施方案中，RB為乙基。一些優(yōu)選的化合物包括，例如本發(fā)明化合物包括如上具體闡明的和在此所描述的那些化合物，并且通過在本發(fā)明中其它地方公開的各種類、屬和種而部分地舉例說明。不希望束縛于任何具體理論，本發(fā)明的一些化合物已經(jīng)在C9和C10上修飾以與在C9-C10位置上碳碳雙鍵相同的方式強(qiáng)制分子構(gòu)象。電子效應(yīng)、位阻效應(yīng)、氫鍵、偶極效應(yīng)或它們的結(jié)合可被用于建立這種構(gòu)象強(qiáng)制。例如，環(huán)狀環(huán)體系例如環(huán)氧乙烷、環(huán)丙基和氮雜環(huán)丙烷可用于強(qiáng)制這種分子的構(gòu)象。在另一些實(shí)施方案中，4、5或6元環(huán)被用來達(dá)到同樣的效果。這種效果還可以通過共軛的p-軌道體系，例如發(fā)現(xiàn)于酯、硫代酸酯或酰胺中的體系而完成。這種效果還可通過離域π體系，例如發(fā)現(xiàn)于芳香環(huán)體系中的那些而完成。在另一些實(shí)施方案中，利用C9和C10位置附近的取代基的位阻效應(yīng)以與在C9-C10位置上碳碳雙鍵強(qiáng)制分子的相同方式來強(qiáng)制分子構(gòu)象。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將認(rèn)識到的是，不對稱中心可存在于本發(fā)明化合物中。因此，本發(fā)明化合物及其藥物組合物可以是單一的對映異構(gòu)體、非對映異構(gòu)體或幾何異構(gòu)體的形式，或者可以是立體異構(gòu)體的混合物形式。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物為對映體純化合物。在另一些實(shí)施方案中，提供了立體異構(gòu)體或非對映異構(gòu)體的混合物。將認(rèn)識到的是，一些前述化合物的類和亞類可以以各種異構(gòu)形式存在。本發(fā)明包含化合物作為基本上無其它異構(gòu)體的單一異構(gòu)體和替代地作為各種異構(gòu)體的混合物，例如立體異構(gòu)體的外消旋混合物。另外，本發(fā)明包含(Z)和(E)兩者的雙鍵異構(gòu)體，除非另外明確指出。因此，通常描述于本發(fā)明結(jié)構(gòu)中的本發(fā)明化合物包含那些其中雙鍵結(jié)構(gòu)為(Z)或(E)的化合物。在一些優(yōu)選的實(shí)施方案中，在C12-C13位置上的雙鍵為順式或Z構(gòu)型。在一些實(shí)施方案中，在C9-C10位置上的雙鍵為反式或E構(gòu)型。在又一些實(shí)施方案中，在C12-C13位置上的雙鍵為順式或Z構(gòu)型，并且在C9-C10位置上的雙鍵為反式或E構(gòu)型。本發(fā)明還包含如上所述的特定化合物的互變異構(gòu)體。另外，本發(fā)明提供本發(fā)明化合物藥學(xué)可接受的衍生物，和使用所述這些化合物、其藥物組合物或其中之一與一種或多種另外的治療劑組合而治療對象的方法。本發(fā)明中所用的用語“藥學(xué)上可接受的衍生物”指這種化合物的任何藥學(xué)上可接受的鹽、酯或這種酯的鹽，或任何其它的加成物或衍生物，其在給病人用藥時(shí)，能(直接地或間接地)提供如本發(fā)明中其它地方描述的化合物，或其代謝物或殘留。藥學(xué)上可接受的衍生物因此特別包括前體藥物。前體藥物為化合物的衍生物，通常具有顯著降低的藥理活性，其包含另外的部分，該部分在體內(nèi)易于移除而生成作為藥理活性物質(zhì)的母體分子。前體藥物的例子為酯，其可以在體內(nèi)切割生成目的化合物。各種化合物的前體藥物和材料以及用于衍生母體化合物形成前體藥物的方法，是已知的并可適合于本發(fā)明。一些典型的藥物組合物和藥學(xué)可接受的衍生物將在本發(fā)明的下面詳細(xì)論述。特別感興趣的本發(fā)明化合物包括●顯示出對癌細(xì)胞系的細(xì)胞毒性或生長抑制作用，所述細(xì)胞系維持在體外或采用科學(xué)上可接受的癌細(xì)胞異種移植模型的動(dòng)物研究中；●顯示出聚合微管蛋白和穩(wěn)定微管裝配的能力；●顯示出對重要器官最低的毒性水平；●導(dǎo)致在科學(xué)上可接受的癌細(xì)胞異種移植模型中的腫瘤消失；●導(dǎo)致在科學(xué)上可接受的癌細(xì)胞異種移植模型中的腫瘤收縮；●導(dǎo)致在科學(xué)上可接受的癌細(xì)胞異種移植模型中的腫瘤消失并在停止治療后延緩/或不導(dǎo)致腫瘤復(fù)發(fā)；●在科學(xué)上可接受的癌細(xì)胞異種移植模型中顯示出短時(shí)和可逆的體重降低并顯示出治療效果；●顯示出優(yōu)于埃坡霉素A、B、C或D或紫杉醇的水溶性，或另外或替代地顯示出足夠的溶解性以配制在使用降低比例的可利摩福的含水介質(zhì)中；和/或●顯示出優(yōu)于埃坡霉素B、埃坡霉素D或紫杉醇的治療特性(例如最佳的安全性和治愈的效果)前面所描述的各種埃坡霉素的類似物已經(jīng)如本發(fā)明所例證的那樣而被制備、表征和測試。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)9，10-脫氫-埃坡霉素類似物可用于對癌癥的治療，并且特別是化合物已經(jīng)被制備并發(fā)現(xiàn)其具有一個(gè)或多個(gè)上面列舉的想要的特性。合成方法學(xué)一些埃坡霉素、脫氧埃坡霉素及其類似物的合成以前已經(jīng)被描述了(參見，美國專利6,242,469、6,284,781、6,300,355、6,204,388、6,316,630和6,369,234；美國專利申請09/797,027、09/796,959和10/236,135；和PCT公開WO99/01124、WO99/43653和WO01/64650，全部內(nèi)容通過引用并入本發(fā)明)。認(rèn)識到需要對大量地有效生成埃坡霉素、脫氧埃坡霉素及其類似物的合成方法學(xué)進(jìn)行改進(jìn)或補(bǔ)充，本發(fā)明提供有效的標(biāo)準(zhǔn)路線用于合成埃坡霉素、脫氧埃坡霉素及其類似物。盡管一些典型的化合物的合成描述于本文的實(shí)施例中，將認(rèn)識到的是，該方法學(xué)可通用于生成如上本發(fā)明中所描述的每個(gè)類和亞類的類似物和共軛物。具體而言，本發(fā)明的9，10-脫氫埃坡霉素化合物可用用于合成埃坡霉素的合成方法學(xué)的多種途徑制備。在一些實(shí)施方案中，采用匯集合成途徑制備這些化合物。例如合成埃坡霉素可通過制備兩個(gè)或三個(gè)中間體并將它們結(jié)合在一起形成想要的化合物。在一個(gè)實(shí)施方案中，中間體之一為包含1-9個(gè)碳的?；糠?，而另一個(gè)中間體包含10-15個(gè)碳并可還包含噻唑側(cè)鏈。這兩個(gè)大致相等的埃坡霉素的中間體可以利用酯化反應(yīng)而結(jié)合在一起，該酯化反應(yīng)發(fā)生在C1和脫去氧的C15之間。然后可利用碳碳耦合反應(yīng)，例如Suzuki耦合或閉環(huán)復(fù)分解反應(yīng)，關(guān)閉成大環(huán)。在一個(gè)實(shí)施方案中，最終的閉環(huán)步驟通過閉環(huán)復(fù)分解反應(yīng)形成9，10-雙鍵并關(guān)閉成大環(huán)而完成。閉環(huán)復(fù)分解反應(yīng)通過使用有機(jī)金屬催化劑，例如示于下面示意圖8的Grubbs催化劑而完成。在一些實(shí)施方案中，將該9，10-雙鍵被還原或氧化，或者可以將該9，10-雙鍵進(jìn)一步官能化以制備另外的埃坡霉素衍生物。在一些實(shí)施方案中，通過以卡賓或卡賓體試劑如CH2N2處理9，10-雙鍵而將該9，10-雙鍵轉(zhuǎn)化為環(huán)丙基部分。在一些實(shí)施方案中，所述9，10-脫氫埃坡霉素化合物通過將雙鍵從10，11-位置(例如，Epo490)異構(gòu)化至9，10-位置而制備。這種異構(gòu)化可以由存在的過渡金屬如鈀催化。在另一些實(shí)施方案中，最終閉環(huán)步驟通過采用閉環(huán)復(fù)分解反應(yīng)形成12，13-雙鍵并關(guān)閉成大環(huán)而完成。在一些實(shí)施方案中，將該12，13-雙鍵還原或氧化。在另一些實(shí)施方案中，用大環(huán)縮醛反應(yīng)或大環(huán)內(nèi)酯化反應(yīng)形成大環(huán)。在附圖和實(shí)施例中提供本發(fā)明化合物一些典型的合成。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將認(rèn)識到，采用描述于本發(fā)明中的合成方法可制備多種類似物和衍生物。例如，用不同的保護(hù)基團(tuán)或不同的在16元環(huán)上的取代基可實(shí)現(xiàn)很多合成步驟。藥物組合物本發(fā)明還提供藥物制劑，其包含至少一種如上所述和在此描述的化合物，或其藥學(xué)上可接受的衍生物，所述化合物能夠抑制癌細(xì)胞的生長或殺死癌細(xì)胞，并且在一些實(shí)施方案中，特別感興趣的是所述化合物能抑制多重耐藥性癌細(xì)胞的生長或殺死它們。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明藥物制劑還包含增溶劑或乳化劑，例如可利摩福(聚氧乙烯35蓖麻油)或Solutol(聚乙二醇66012-羥基硬脂酸酯)。如上所述，本發(fā)明提供具有抗癌和抗增殖活性的新型化合物，并且因此本發(fā)明化合物可用于癌癥的治療。因此在本發(fā)明的另一個(gè)方面，提供藥物組合物，其中這些組合物包含本發(fā)明中所描述的化合物中的任意一個(gè)，并任選包含藥物可接受的載體。在一些實(shí)施方案中，這些組合物任選地進(jìn)一步包含一種或多種另外的治療劑。在另一些實(shí)施方案中，如在本發(fā)明中進(jìn)一步詳述，該另外的治療劑為抗癌劑。還將認(rèn)識到的是，本發(fā)明的一些化合物可以以游離形式存在用于治療，或適當(dāng)?shù)牡胤?，作為其藥學(xué)上可接受的衍生物的形式。根據(jù)本發(fā)明，藥學(xué)上可接受的衍生物包括但不限于，藥學(xué)上可接受的鹽、酯、這種酯的鹽或任何其它的加成物或衍生物，其在給需要的病人用藥時(shí)，能夠(直接地或間接地)提供如本發(fā)明中其它地方描述的化合物，或其代謝物或殘留，例如前體藥物。如在本發(fā)明中所用的，術(shù)語“藥學(xué)上可接受的鹽”指那些鹽，其在合理的醫(yī)療判斷范圍內(nèi)，適合用于與人和低等動(dòng)物組織接觸而沒有不適當(dāng)?shù)亩拘浴⒋碳ば?、變態(tài)反應(yīng)等，并具有合理的益處/風(fēng)險(xiǎn)比。藥學(xué)上可接受的鹽在本領(lǐng)域內(nèi)是公知的。例如，藥學(xué)可接受的鹽由S.M.Berge等人詳細(xì)描述于J.PharmaceuticalSciences，661-19(1977)中，通過引用并入本發(fā)明。所述鹽可在本發(fā)明化合物最后的分離和純化過程中原位生成，或通過將游離堿官能團(tuán)與適合的有機(jī)酸反應(yīng)而分開制備。藥學(xué)可接受的無毒的酸加成鹽的例子為氨基與無機(jī)酸或有機(jī)酸形成的鹽，其中無機(jī)酸為例如鹽酸、氫溴酸、磷酸、硫酸和高氯酸，有機(jī)酸為例如乙酸、草酸、馬來酸、酒石酸、檸檬酸、琥珀酸或丙二酸，或者通過采用本領(lǐng)域中可用的其它方法，例如離子交換。其它藥學(xué)可接受的鹽包括己二酸鹽、藻酸鹽、抗壞血酸鹽、天冬氨酸鹽、苯磺酸鹽、苯甲酸鹽、硫酸氫鹽、硼酸鹽、丁酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、檸檬酸鹽、環(huán)戊丙酸鹽、二葡萄糖酸鹽、十二烷基磺酸鹽、乙烷磺酸鹽、甲酸鹽、富馬酸鹽、葡庚糖酸鹽、甘油磷酸鹽、葡萄糖酸鹽、hernisulfate、庚酸鹽、己酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基-乙烷磺酸鹽、乳糖酸鹽、乳酸鹽、月桂酸鹽、十二烷基硫酸鹽、蘋果酸鹽、馬來酸鹽、丙二酸鹽、甲磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、煙酸鹽、硝酸鹽、油酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、雙羥萘酸鹽(pamoate)、果膠酸鹽(pectinate)、過硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、磷酸鹽、苦味酸鹽、新戊酸鹽、丙酸鹽、硬脂酸鹽、琥珀酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、對甲苯磺酸鹽、十一烷酸鹽、戊酸鹽等等。典型的堿金屬鹽或堿土金屬鹽包括鈉、鋰、鉀、鈣、鎂等等。更多的藥學(xué)可接受的鹽包括，適當(dāng)時(shí)，無毒的銨、季銨和用帶反電荷的離子形成的胺陽離子，所述帶反電荷的離子例如鹵離子、氫氧根離子、羧酸根離子、硫酸根離子、磷酸根離子、硝酸根離子、低級烷基磺酸根離子和芳基磺酸根離子。另外，如本發(fā)明中所用的，術(shù)語“藥學(xué)上可接受的酯”指在體內(nèi)水解的酯，并包括在人體內(nèi)容易分解釋放出母體化合物或其鹽的那些酯。適合的酯基團(tuán)包括，例如，那些衍生于藥學(xué)可接受的脂肪族羧酸的酯，特別是鏈烷酸、鏈烯酸、環(huán)烷酸和鏈烷二酸，其中每個(gè)烷基或烯基部分有利地具有不多于6個(gè)碳原子。具體的酯的例子包括甲酸酯、乙酸酯、丙酸酯、丁酸酯、丙烯酸酯和琥珀酸乙酯。另外，如本發(fā)明中所用的“藥學(xué)上可接受的前體藥物”指本發(fā)明化合物的那些前體藥物，其在合理的醫(yī)療判斷范圍內(nèi)，適用于與人和低等動(dòng)物組織接觸而沒有不適當(dāng)?shù)亩拘?、刺激性、變態(tài)反應(yīng)等，并具有合理的益處/風(fēng)險(xiǎn)比，和對它們預(yù)期用途的有效性，以及只要對本發(fā)明化合物可能，指兩性離子形式。術(shù)語“前體藥物”指在體內(nèi)快速轉(zhuǎn)換以形成如上通式的母體化合物，例如通過在血液中水解。在T.Higuchi和V.Stella，Pro-drugsasNovelDeliverySystems，theA.C.S.SymposiumSeries第14卷中，和在EdwardB.Roche編的BioreversibleCarriersinDrugDesign，AmericanPharmaceuticalAssociationandPergamonPress，1987中進(jìn)行了徹底的討論，兩篇文獻(xiàn)都通過引用并入本發(fā)明。如上所述，本發(fā)明的藥物組合物另外包含藥學(xué)可接受的載體，其如在本發(fā)明中所用的，包括任意和所有的溶劑、稀釋劑或其它液體媒介物、分散或懸浮助劑、表面活性劑、等滲劑、增稠劑或乳化劑、防腐劑、固體粘合劑、潤滑劑等等，如適合于想要的具體的給藥形式。Remington′sPharmaceuticalSciences，第15版，E.W.Martin(MackPublishingCo.，Easton，Pa.，1975)公開了用于形成藥物組合物的多種載體及其已知的制備技術(shù)。與本發(fā)明抗癌化合物不相容的所有常規(guī)載體介質(zhì)，例如產(chǎn)生任何不需要的生物效果或與藥物組合物中任何其它的一種或多種組分以有害的方式相互作用，除此之外，該載體介質(zhì)的用途預(yù)期并入本發(fā)明的范圍內(nèi)。一些可用作藥學(xué)可接受的載體的材料的例子，根據(jù)配方設(shè)計(jì)師的判斷，包括但不限于，糖類例如乳糖、葡萄糖和蔗糖；淀粉類例如玉米淀粉和土豆淀粉；纖維素及其衍生物例如羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素和醋酸纖維素；粉狀的西黃蓍膠；麥芽；明膠；滑石粉；可利摩福；Solutol；賦形劑例如可可脂和栓劑臘(suppositorywaxes)；油類例如花生油、棉籽油、紅花油、芝麻油、橄欖油、玉米油和大豆油；二元醇類例如丙二醇；酯類例如油酸乙酯和月桂酸乙酯；瓊脂；緩沖劑例如氫氧化鎂和氫氧化鋁；藻酸；無熱原水；等滲鹽；林格氏溶液；乙醇和磷酸鹽緩沖溶液，以及其它無毒的相容的潤滑劑例如十二烷基硫酸鈉和硬脂酸鎂，以及著色劑、釋放劑、涂層劑、甜味劑、調(diào)味劑和加香劑(perfumingagents)、防腐劑和抗氧劑也可存在于本發(fā)明組合物中?；衔锖退幬锝M合物的用途本發(fā)明進(jìn)一步提供用于抑制腫瘤生長和/或腫瘤轉(zhuǎn)移的方法。在一些特別感興趣的實(shí)施方案中，對于腫瘤的多重耐藥癌細(xì)胞，本發(fā)明提供通過抑制腫瘤生長和/或腫瘤轉(zhuǎn)移而治療癌癥的方法。該方法包括將治療有效量的本發(fā)明化合物或其藥學(xué)可接受的衍生物對需要它的對象(包括但不限于人或動(dòng)物)用藥。在一些實(shí)施方案中，特別用于治療包括多重耐藥癌細(xì)胞的癌癥，所述治療有效量為這樣的量其足以殺死或抑制多重耐藥癌細(xì)胞系。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物用于治療實(shí)體瘤。本發(fā)明化合物和藥物組合物可用于治療或預(yù)防任何疾病或癥狀，包括增殖性疾病(例如癌癥)、自身免疫性疾病(例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎)和傳染病(例如細(xì)菌、真菌等傳染病)。本發(fā)明化合物和藥物組合物可用藥于動(dòng)物，優(yōu)選哺乳動(dòng)物(例如家畜、貓、狗、小鼠、大鼠)，并且更優(yōu)選人?？墒褂萌魏斡盟幏椒ㄏ騽?dòng)物遞送藥物組合物的化合物。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物或藥物組合物以非腸道給藥。在再一方面，如本文所描述的，根據(jù)本發(fā)明的治療方法，通過使腫瘤細(xì)胞與本發(fā)明化合物或組合物接觸而殺死腫瘤細(xì)胞或抑制它們的生長。因此在本發(fā)明的又一方面，提供用于治療癌癥的方法，其包括將治療有效量的本發(fā)明化合物或包含本發(fā)明化合物的藥物組合物以達(dá)到所想要結(jié)果的量和時(shí)間用藥到需要其的對象。在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物或藥物組合物的“治療有效量”為這樣的量其有效地殺死癌細(xì)胞或抑制癌細(xì)胞生長。根據(jù)本發(fā)明的方法，本發(fā)明的化合物和組合物可以以有效殺死癌細(xì)胞或抑制癌細(xì)胞生長的任意量和任意途徑給藥。因此，如本發(fā)明中所用的表述“有效殺死癌細(xì)胞或抑制癌細(xì)胞生長的量”指殺死癌細(xì)胞或抑制癌細(xì)胞生長的足夠量的試劑。所需的確切的量將隨對象不同而變化，其依賴于對象的物種、年齡和的綜合狀態(tài)，感染的嚴(yán)重性，具體的抗癌試劑，用藥方式等等。本發(fā)明的抗癌化合物優(yōu)選以劑量單位形式配制以易于用藥和劑量均一。本發(fā)明中所用的表述“劑量單位形式”指適合用于治療病人的抗癌試劑的物理上分離的單位。然而這將理解為，本發(fā)明化合物和組合物的全天用量將由主治醫(yī)師在合理的醫(yī)學(xué)判斷范圍內(nèi)決定。用于任何具體病人或生物體的特定治療有效的劑量水平將依賴于各種因素，包括所治療的病癥和該病癥的嚴(yán)重性；所用特定化合物的活性；所用的特定組合物；病人的年齡、體重、綜合健康狀態(tài)、性別和日常飲食；所用特定化合物的用藥的時(shí)間、用藥途徑和排泄速度；治療的持續(xù)時(shí)間；與所用特定化合物相結(jié)合或同時(shí)使用的藥物；以及于醫(yī)學(xué)領(lǐng)域公知的類似因素。另外，在與適當(dāng)?shù)乃帉W(xué)可接受的載體以想要的劑量配制后，本發(fā)明的藥物組合物可以對人和其它動(dòng)物以如下方式給藥口服給藥、直腸投藥、非腸道用藥、池內(nèi)用藥、陰道內(nèi)用藥、腹膜內(nèi)用藥、局部用藥(如通過粉末、軟膏或滴劑)、經(jīng)頰用藥如口腔或鼻腔噴劑等等，其依賴于所治療的感染的嚴(yán)重性。在本發(fā)明的一些實(shí)施方案中，本發(fā)明中所述的化合物通過與水溶性螯合劑或水溶性聚合物結(jié)合而配制，其中所述水溶性聚合物例如聚乙二醇如聚(1-谷氨酸)或聚(1-天冬氨酸)，如在美國專利5,977,163中所述的那樣，其全部內(nèi)容通過引用而并入本發(fā)明。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物可以口服或非腸道以足夠的劑量水平用藥，所述劑量水平為投送的藥物足以達(dá)到每日對象體重的約0.001mg/kg至約100mg/kg，約0.01mg/kg至約50mg/kg，優(yōu)選約0.1mg/kg至約40mg/kg，優(yōu)選約0.5mg/kg至約30mg/kg，約0.01mg/kg至約10mg/kg，約0.1mg/kg至約10mg/kg，并且更優(yōu)選約1mg/kg至約25mg/kg，每日一次或多次，以獲得想要的治療效果。可以以每兩天一次、每三天一次、每星期一次、每兩星期一次、每三星期一次或每四星期一次提供想要的劑量。在一些實(shí)施方案中，可以用多次給藥提供想要的劑量(例如，兩次、三次、四次、五次、六次、七次、八次、九次或十次給藥)。用于口服和非腸道給藥的液體劑型包括但不限于，藥學(xué)可接受的乳劑、微乳劑、溶液、懸浮液、糖漿和酏劑。除了活性化合物，液體劑型還可包含本領(lǐng)域中常用的惰性稀釋劑例如，水或其它溶劑、增溶劑和乳化劑例如乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、芐醇、苯甲酸芐酯、丙二醇、1，3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油類(特別是棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄欖油、蓖麻油和芝麻油)、丙三醇、四氫糠醇、聚乙二醇和山梨聚糖的脂肪酸酯，以及它們的混合物。除了惰性稀釋劑，口服組合物還可包含佐劑例如保濕劑、乳化劑和懸浮劑、甜味劑、調(diào)味劑和加香劑。在一些用于非腸道給藥的實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物與增溶劑混合，例如可利摩福、醇類、油類、改性油類、二醇類、聚山梨醇酯類、環(huán)糊精類、聚合物類，以及它們的組合物。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明化合物與醇，例如乙醇，和可利摩福(聚乙氧基化的蓖麻油)混合。注射劑，例如無菌注射水或油狀懸浮液，可以根據(jù)本領(lǐng)域已知的使用適合的分散劑或保濕劑和懸浮劑而配制。無菌注射劑也可以是在無毒非腸道可接受的稀釋劑或溶劑中的無菌注射溶液、懸浮液或乳液，例如在1，3-丁二醇中的溶液。這些可接受的賦形劑和溶劑中可使用的有水、林格氏溶液、U.S.P.和等滲氯化鈉溶液。另外，無菌的不易揮發(fā)的油常用作溶劑或懸浮介質(zhì)。為此，可用任何無刺激的不揮發(fā)性油，包括合成的甘油單酯或甘油二酯。另外，脂肪酸例如油酸被用于注射劑。本發(fā)明注射劑可通過如下方式消毒例如，通過細(xì)菌保留過濾器過濾，或加入消毒固體組合物形式消毒劑，所述消毒劑可以在使用前溶解或分散于無菌水或其它無菌注射介質(zhì)中。為了延長藥效，希望延緩從皮下注射或肌內(nèi)注射的藥物的吸收。這可通過使用具有較差水溶性的結(jié)晶或無定型材料的液體懸浮液來完成。于是藥物的吸收速度依賴于其溶出速度，這又可能依賴于結(jié)晶大小和晶體形態(tài)。或者，通過在油類賦形劑中將藥物溶解或懸浮而達(dá)到延緩非腸道給藥的藥物形式吸收的目的。注射貯庫劑型通過藥物在生物可降解聚合物，例如聚乳酸-聚甘醇酸交酯中形成微封裝膠囊基質(zhì)而制備。依賴于藥物對聚合物的比和所用具體聚合物的性質(zhì)，可以控制藥物釋放速度。生物可降解聚合物的例子包括聚原酸酯和聚酐。貯庫注射劑還通過與身體組織相容的脂質(zhì)體或微乳捕獲藥物而制備。用于直腸和陰道用藥的組合物優(yōu)選為栓劑，其可通過將本發(fā)明化合物與適合的非刺激性賦形劑或載體，例如可可脂、聚乙二醇或栓劑臘混合而制備，所述賦形劑或載體在室溫下為固體，而在體溫下為液體，并因此在直腸或陰道腔內(nèi)熔化并釋放出活性藥物?？诜o藥的固體劑型包括膠囊劑、片劑、丸劑、粉劑和顆粒劑。在這些固體劑型中，活性化合物與至少一種惰性的、藥學(xué)可接受的賦形劑或載體混合，例如檸檬酸鈉或磷酸氫鈣和/或a)填充劑或增量劑例如淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸，b)粘合劑例如羧甲基纖維素、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯樹膠，c)潤濕劑例如甘油，d)崩解劑例如瓊脂--瓊脂、碳酸鈣、土豆淀粉或木薯淀粉、藻酸、某些硅酸鹽和碳酸鈉，e)溶解延緩劑例如石蠟，f)吸收促進(jìn)劑例如季銨鹽化合物，g)保濕劑例如單硬脂酸鯨蠟醇酯和單硬脂酸甘油酯，h)吸收劑例如高嶺土和膨潤土和i)潤滑劑例如滑石粉、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、固態(tài)聚乙二醇、十二烷基硫酸鈉及其混合物。在膠囊劑、片劑和丸劑的情況下，這些劑型還包含緩沖劑。相似類型的固體組合物也可被用作在軟填充和硬填充的明膠膠囊劑中的填充劑，所述膠囊劑所用的賦形劑為乳糖以及高分子量聚乙二醇等等。片劑、糖衣丸劑、膠囊劑、丸劑和顆粒劑的這些固體劑型可使用在制藥制劑領(lǐng)域公知的包衣和外殼而制備，例如腸衣和其它包衣。這些劑型可任選包含鎮(zhèn)靜劑并也可以是僅釋放一種或多種活性組分的組合物，或優(yōu)選地，在腸道的某些部分，任選地以延時(shí)方式釋放?？捎玫陌窠M合物的例子包括聚合物物質(zhì)和蠟。相似類型的固體組合物也可被用作在軟填充和硬填充的明膠膠囊劑中的填充劑，所述膠囊劑所用的賦形劑為如乳糖以及高分子量聚乙二醇等等?；钚曰衔镆部梢耘c具有如上所說明的一種或多種賦形劑在微封裝膠囊劑型中。片劑、糖衣丸劑、膠囊劑、丸劑和顆粒劑的這些固體劑型可使用制藥制劑領(lǐng)域公知的包衣和外殼而制備，例如腸衣、控釋包衣和其它包衣。在這種固體劑型中活性化合物可以與至少一種惰性稀釋劑例如蔗糖、乳糖或淀粉摻混。這種劑型還可包含，如正常做法，除了惰性稀釋劑的另外物質(zhì)，例如片劑潤滑劑和其它片劑助劑如硬脂酸鎂和微晶纖維素。在膠囊劑、片劑和丸劑的情況下，所述劑型還可包含緩沖劑。這些劑型可任選包含乳化劑并也可以是僅釋放一種或多種活性組分的組合物，或優(yōu)選地，在腸道的某些部分，任選地以延時(shí)的方式釋放。可用的包埋組合物的例子包括聚合物物質(zhì)和蠟。本發(fā)明化合物的用于局部或經(jīng)皮給藥的劑型包括軟膏劑、糊劑、霜?jiǎng)?、洗劑、凝膠劑、粉劑、溶液、噴霧劑、吸入劑或貼劑。所述的活性組分在無菌狀態(tài)下與可能需要的藥學(xué)可接受的載體和任何所需的防腐劑或緩沖劑摻混。眼用制劑、滴耳劑和滴眼劑也預(yù)料落入本發(fā)明范圍內(nèi)。另外，本發(fā)明涉及使用透皮貼劑，其具有向身體提供控釋化合物的附加的優(yōu)點(diǎn)。這種劑型可通過將本發(fā)明化合物溶解或分散于適當(dāng)?shù)慕橘|(zhì)中而制備。還可使用吸收促進(jìn)劑以增加本發(fā)明化合物穿過皮膚的通量。可通過提供速度控制膜或通過在聚合物基質(zhì)或凝膠中分散本發(fā)明化合物而控制透皮速度。如上所討論的，本發(fā)明化合物可用作抗癌劑，并因此通過使癌細(xì)胞死亡或抑制癌細(xì)胞生長而用于治療癌癥。通常，本發(fā)明抗癌劑可用于治療的癌癥和其它增殖性疾病包括但不限于，乳癌、腦癌、皮膚癌、子宮癌、結(jié)腸和直腸癌、白血病、肺癌、黑素瘤、多發(fā)性骨髓瘤、非霍奇金淋巴瘤、卵巢癌、胰腺癌、前列腺癌和胃癌，僅舉幾個(gè)例子。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明的抗癌劑對白血病細(xì)胞和黑素瘤細(xì)胞是有效的，并因此可用于治療白血病(例如，骨髓的、淋巴細(xì)胞的、早幼粒細(xì)胞的、髓細(xì)胞的和淋巴母細(xì)胞的白血病，無論急性或慢性形式)和惡性黑素瘤。在又一些實(shí)施方案中，本發(fā)明抗癌劑對實(shí)體瘤是有效的并還可以殺死多重耐藥細(xì)胞(MDR細(xì)胞)和/或抑制其生長。在一些實(shí)施方案中，本發(fā)明抗癌劑對其它已知的抗腫瘤藥耐藥性的癌癥或已經(jīng)發(fā)現(xiàn)對其他已知的抗腫瘤藥臨床不反應(yīng)的癌癥是有效的。在另一些實(shí)施方案中，對于其它抗腫瘤微管穩(wěn)定劑(例如紫杉醇)耐藥性的癌癥，本發(fā)明抗癌劑是有效的。還將認(rèn)識到的是，本發(fā)明化合物和藥物組合物可被用于組合治療，即本發(fā)明的化合物和藥物組合物可同時(shí)、先于或隨后用藥于一種或多種其它所需的療法或醫(yī)學(xué)過程。用于組合方案的具體的治療組合(治療學(xué)或規(guī)程)應(yīng)當(dāng)考慮所需治療學(xué)和/或規(guī)程與要達(dá)到的所需治療效果的相容性。還將認(rèn)識到的是，所用的療法對于相同的病癥可以達(dá)到想要的效果(例如，本發(fā)明化合物可同時(shí)與另一種抗癌劑用藥)，或所用的療法可獲得不同的效果(例如，控制任何相反作用)。例如，可與本發(fā)明抗癌劑組合應(yīng)用的其它的療法或抗癌劑包括外科手術(shù)、放射治療(其中一些例子，γ-輻射、中子束放射治療、電子束放射治療、質(zhì)子治療、短距離放射治療和全身放射性同位素，僅舉幾個(gè)例子)、內(nèi)分泌療法、生物反應(yīng)療法(干擾素、白細(xì)胞介素和腫瘤壞死因子(TNT)，僅舉幾個(gè)例子)、過熱和冷凍療法、降低任意副反應(yīng)的藥劑(例如止吐藥)，和其它批準(zhǔn)的化學(xué)療法藥物，包括但不限于烷基化劑(氮芥、苯丁酸氮芥、環(huán)磷酰胺、苯丙酸氮芥、異環(huán)磷酰胺)、抗代謝物(甲氨喋呤)、嘌呤拮抗物和嘧啶拮抗物(6-巰基嘌呤、5-氟尿嘧啶、Cytarabile、吉西他濱(Gemcitabine))、紡錘體毒物(長春堿、長春新堿、長春花、紫杉醇、多烯紫杉醇(Docetaxel))、足葉草毒素(表鬼臼毒吡喃葡糖苷、依立替康、托泊替康)、抗生素(阿霉素、博萊霉素、絲裂霉素)、亞硝基脲(卡氮芥、羅氮芥)、無機(jī)離子(順鉑、順羧酸鉑)、酶類(天冬酰胺酶)和激素類(三苯氧胺、亮脯利特、氟他胺和甲地孕酮)，僅舉幾個(gè)例子。對于最新的癌癥療法的更全面的討論參見http://www.nci.nih.gov/，F(xiàn)DA批準(zhǔn)的腫瘤藥物的列表在http://www.fda.gov/cder/cancer/druglistframe.htm，和TheMerckManual，第十七版1999中，其全部內(nèi)容通過應(yīng)用并入本發(fā)明。在另一方面，本發(fā)明還提供藥物包裝或試劑盒，其包含用本發(fā)明藥物組合物的一種或多種成分填充的一個(gè)或多個(gè)容器，并且在一些實(shí)施方案中，其包括另外批準(zhǔn)的用作組合療法的治療劑。任選地與這樣的一個(gè)或多個(gè)容器相伴的，可以是以政府機(jī)構(gòu)指定形式的公告，所述政府機(jī)構(gòu)規(guī)范藥物產(chǎn)品的制造、使用或銷售，其中所述公告反映了政府機(jī)構(gòu)對于人用藥的生產(chǎn)、使用或銷售的批準(zhǔn)。同等物下面的本發(fā)明實(shí)施例意于幫助理解本發(fā)明，并且它們不意于，也不應(yīng)當(dāng)將它們解釋為限制本發(fā)明。事實(shí)上，從本發(fā)明的全部內(nèi)容，包括下面的實(shí)施例和本發(fā)明中引用的科學(xué)和專利文獻(xiàn)的參考文獻(xiàn)中，對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，除了那些在本發(fā)明中說明并描述的那些，本發(fā)明的各種修改和其許多進(jìn)一步實(shí)施方案將是顯而易見的。將進(jìn)一步認(rèn)識到的是，那些被引用的文獻(xiàn)的內(nèi)容通過引用而并入本發(fā)明以幫助理解現(xiàn)有技術(shù)。下面的實(shí)施例包含重要的附加信息、例證和指導(dǎo)，其可以本發(fā)明的各種實(shí)施方案及其同等物而適合于本發(fā)明的實(shí)踐。實(shí)施例實(shí)施例126-三氟-9，10-反式-脫氫-埃坡霉素D的口服和非腸道用藥治療植入裸鼠體內(nèi)的人腫瘤在本實(shí)施例中，證明了結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)的16元大環(huán)內(nèi)酯物的微管穩(wěn)定劑，26-三氟-9，10-反式-脫氫-埃坡霉素D，在給予6hr靜脈內(nèi)灌注或口服時(shí)，使腫瘤收縮，致使腫瘤消失，并達(dá)到長時(shí)間不復(fù)發(fā)的效果。具有大尺寸腫瘤(圖6)或他克唑耐藥性腫瘤異種移植物(圖7)的小鼠被用來說明可以用26-三氟-9，10-反式-脫氫-埃坡霉素D作為單一藥劑單藥治療而治愈。治愈的治療范圍包括白血病以及乳癌、結(jié)腸癌和肺癌(圖6、9和13)。這里報(bào)告的所有化學(xué)療法體內(nèi)實(shí)驗(yàn)均采用在免疫缺陷裸鼠中的人腫瘤異種移植物而進(jìn)行。該動(dòng)物模型在對癌癥病人臨床試驗(yàn)之前常用于評價(jià)抗腫瘤化合物。MX-1和HCT-116實(shí)驗(yàn)分別進(jìn)行5.5和6.5個(gè)月(圖6和9)。在兩個(gè)實(shí)驗(yàn)中腫瘤均沒有復(fù)發(fā)，在停止治療后腫瘤分別消除了3.8和5.2個(gè)月。對于HCT-116實(shí)驗(yàn)(圖9)，紫杉醇和26-三氟-9，10-反式-脫氫-埃坡霉素D均以20mg/kg使用并且都實(shí)現(xiàn)了腫瘤消失。然而，紫杉醇治療組在停止治療后1.1個(gè)月后復(fù)發(fā)，而26-三氟-9，10-反式-脫氫-埃坡霉素D治療的動(dòng)物腫瘤消失超過5.2個(gè)月。假設(shè)腫瘤長大一倍的時(shí)間是4天(基于媒介物治療對照)，HCT-116腫瘤的紫杉醇治療導(dǎo)致99.7％的腫瘤抑制或2.56-log的細(xì)胞殺死，然而當(dāng)實(shí)驗(yàn)終止時(shí)，由26-三氟-9，10-反式-脫氫-埃坡霉素D在MX-1和HCT-16實(shí)驗(yàn)中殺死的細(xì)胞分別是＞8.5-log和＞11.6log?；诒恢委熜∈蠼】档?、活躍的狀態(tài)，同時(shí)體重恢復(fù)到治療前水平，如果實(shí)施延長的治療或增加治療周期，預(yù)計(jì)這種“治愈”可確保貫穿小鼠的2年壽命。應(yīng)當(dāng)可以得到這樣的結(jié)果，盡管事實(shí)上這種“治愈”在免疫缺陷小鼠中比在有免疫活性的小鼠中更難于獲得。就我們所知，這是在生物醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)中在裸鼠上實(shí)施的最長的異種移植物治療研究，也是對于單一抗腫瘤藥劑用非腸胃給藥或用口服給藥中所報(bào)導(dǎo)的最長的完全康復(fù)。這與下面的表述有關(guān)發(fā)現(xiàn)抑制腫瘤生長的化合物相對容易，但發(fā)現(xiàn)使腫瘤縮小的化合物是相對不尋常的。本發(fā)明化合物26-三氟-9，10-反式-脫氫-埃坡霉素D，其實(shí)現(xiàn)了在所有的小鼠中完全使腫瘤消失，并且沒有復(fù)發(fā)長達(dá)5.2個(gè)月，這個(gè)發(fā)現(xiàn)就我們所知從未報(bào)導(dǎo)過，這表明26-三氟-9，10-反式-脫氫-埃坡霉素D對于治療學(xué)進(jìn)展的巨大潛力。口服治療的另外的顯著優(yōu)點(diǎn)是可以避免使用可利摩福配方導(dǎo)致的嚴(yán)重過敏反應(yīng)。在他克唑、脫氧-EpoB和15-aza-Epo13制劑中使用可利摩福引起棘手的過敏反應(yīng)是公知的，這使得必須使用抗組胺藥和/或類固醇進(jìn)行預(yù)處理。26-三氟-9，10-反式-脫氫-埃坡霉素D的口服效果與其在體外小鼠血漿內(nèi)和人肝臟微粒體S9片段中顯著的代謝穩(wěn)定性相一致。所述代謝穩(wěn)定性歸因于該埃坡霉素分子中在C-26位置的三氟化(圖14)。在C9-C10位置上引入雙鍵也增加了代謝穩(wěn)定性(圖14)。26-三氟-9，10-反式-脫氫-埃坡霉素D用于靜脈內(nèi)灌注(20-30mg/kg，Q2D)和用于口服給藥(20mg/kg，QD或30mg/kgQ2D)，其最佳劑量的接近說明該化合物在體內(nèi)能被很好地吸收并具有良好的生物利用度。值得注意的是，本發(fā)明實(shí)施了許多與他克唑(在臨床上常用的最重要的抗癌治療劑之一)平行進(jìn)行的關(guān)于弗迪隆抗異種移植物的體內(nèi)治療研究(圖13、7、9、10、11和16)。弗迪隆的重要發(fā)現(xiàn)，與他克唑相比，表明了該化合物用于治療癌癥的有前景的潛力。材料和方法化學(xué)產(chǎn)品所有的埃坡霉素如本發(fā)明中所述的那樣合成。紫杉醇(他克唑)和長春堿硫酸鹽(VBL)購自Sigma。所有這些化合物溶解于二甲亞砜中用于體外試驗(yàn)，(除了VBL溶解于鹽水之外)。對于體內(nèi)研究，所有的埃坡霉素和紫杉醇均溶解于可利摩福/乙醇(1∶1)媒介物中并然后用鹽水稀釋用于通過尾靜脈利用自主設(shè)計(jì)的微導(dǎo)管和可程控的泵進(jìn)行6hr靜脈內(nèi)灌注(Chou等人(1998)Proc.Natl.Acad.Sci.USA95，15798-15802；Chou等人(2001)Proc.Natl.Acad.Sci.USA98，8113-8118；每篇文獻(xiàn)通過引用并入本發(fā)明)?？诜o藥的藥物通過如下方式制備將化合物溶解于乙醇中并懸浮于等體積的吐溫-80中，給裸鼠用藥前將該懸浮液用5倍體積的鹽水稀釋。使用1ml注射器和標(biāo)準(zhǔn)#22球形帶帽的動(dòng)物給食針實(shí)施管飼法(Popper&Sons，Inc.NewHydePark，NY)。腫瘤和細(xì)胞系CCRF-CEM人淋巴母細(xì)胞白血病細(xì)胞和其長春堿耐藥性亞系(CCRF-CEM/VBL100，720倍耐藥性)得自ChicagoIllinois大學(xué)的WilliamBeck博士，并且CCRF-CEM/他克唑(44倍耐藥性)通過在六個(gè)月中將CCRF-CEM細(xì)胞暴露于不斷增加的至致死的濃度(IC50-IC90)的紫杉醇中而制備。耐藥性程度示于圖14中。人乳癌(MX-1)、人肺癌細(xì)胞(A549)和人結(jié)腸癌(HCT-116)得自美國典型培養(yǎng)物保藏中心(ATCC，Rockville，MD)。動(dòng)物具有nu/nu基因的無胸腺裸鼠得自NCI，F(xiàn)rederick，MD并用于所有的人腫瘤異種移植。使用6星期以上的和體重20-22g或更重的雄性裸鼠。通過使用自制的灌輸微管和限制管通過尾靜脈靜脈內(nèi)灌注6小時(shí)給藥。具有多通道的可程控的HarvardPHD2000注射器泵被用于靜脈內(nèi)灌注。典型的6小時(shí)灌輸體積為2.0ml鹽水中含有100μl每種藥物的可利摩福/乙醇(1∶1)。對于口服給藥，弗迪隆和他克唑均溶解于乙醇中并用吐溫-80稀釋5倍。他克唑溶液應(yīng)在5min內(nèi)使用以避免沉淀。腫瘤體積通過用測徑器測量長×寬×高(或?qū)?而估算。對于帶有腫瘤的裸鼠，實(shí)驗(yàn)過程中其體重是指總重減去腫瘤的重量。所有的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)均根據(jù)NationalInstituteofHealthGuidefortheCareandUseofAnimals的指導(dǎo)原則和由MemorialSloan-KetteringCancerCenter′sInstitutionalAnimalCareandUseCommittee批準(zhǔn)的協(xié)議而實(shí)施。細(xì)胞毒性試驗(yàn)為準(zhǔn)備體外細(xì)胞毒性試驗(yàn)，細(xì)胞培養(yǎng)于初始密度為2-5×104個(gè)細(xì)胞每毫升。將它們保存于5％CO2-濕潤氣氛的37℃的RPMI培養(yǎng)基1640(GIBCO/BRL)中，所述RPMI培養(yǎng)基1640包含青霉素(100單位/mL)、鏈霉素(100μg/mLGIBCO/BRL)和5％熱滅活的FBS。對于在單層中生長的實(shí)體腫瘤細(xì)胞(例如HCT-116和A549)，藥物的細(xì)胞毒性通過使用麗絲胺羅丹明B方法(Skehan等人(1990)J.Natl.CancefInst.82，1107-1112，通過引用并入本發(fā)明)在96-孔微量滴定板上測定。對于生長于混懸液中的細(xì)胞(例如CCRF-CEM及其亞系)，通過使用2，3-雙-(2-甲氧基-4-硝基-5-磺苯基)-5-N羧酰苯胺)-2H-terazodium氫氧化物(XTT)微管法(Scudiero等人(1988)CancerRes.48，4827-4833；通過引用并入本發(fā)明)在96-孔微量滴定板上一式兩份進(jìn)行測量。對于兩種方法，每個(gè)孔的吸光度用微量板讀板機(jī)(PowerWaveXS，Bio-Tek，Winooski，VT)測量。劑量-效果的關(guān)系數(shù)據(jù)由每種藥物的6至7個(gè)濃度，一式兩份，通過使用計(jì)算機(jī)程序(Chou等人(1997)CalcuSynforWindows(Biosoft，Cambridge，U.K.)；其中每個(gè)均通過引用并入本發(fā)明)以中效圖而分析。埃坡霉素在小鼠中和在人肝臟S9片段中的穩(wěn)定性用全自動(dòng)HPLC系統(tǒng)進(jìn)行穩(wěn)定性研究，所述HPLC系統(tǒng)包括Prospekt-2(SparkHolland，Netherlands)樣品制備系統(tǒng)和Agilent1100HPLC系統(tǒng)。簡言之，Prospekt2選擇C8萃取柱并用乙腈和水洗滌。Agilent自動(dòng)進(jìn)樣器，設(shè)定為37℃，吸取20μl樣品，將其加載到萃取柱上，用水洗，然后Prospekt2轉(zhuǎn)向流動(dòng)相流通過萃取柱到分析柱上。具有保護(hù)柱(MacMod，ChaddsFord，PA)的RelianceStableBondC84×80mm和洗脫液在250nm處監(jiān)控。流動(dòng)相由53或65％乙腈/0.1％甲酸組成，流速0.4ml/min，因此目的化合物的保留時(shí)間為約6分鐘。樣品制備包含將等體積的血漿加入到PBS中，得到總體積400μl，過濾，并加入0.5-2μl的該底物(20mM)以獲得在HPLC分析中在250nm處約30-50mAU。為了合并的人肝臟微粒體S9片段(XenoTech，Lenex，KS)，將20μl(400μg)的S9片段用280μl的PBS混合然后進(jìn)行如上所述步驟。采樣周期由自動(dòng)進(jìn)樣器控制并且采集峰面積數(shù)據(jù)以比較母體化合物的消失速率。結(jié)果體外抗人白血病、他克唑耐藥性和長春堿耐藥性白血病細(xì)胞和實(shí)體瘤細(xì)胞的結(jié)構(gòu)-活性關(guān)系。依據(jù)IC50(以μM計(jì))，對于十二種典型埃坡霉素抗如下細(xì)胞生長的效力列于圖17的表中人白血病CCRF-CEM細(xì)胞以及它們的長春堿耐藥性CCRF-CEM/VBL和紫杉醇耐藥性CCRF-CEM/他克唑的亞系。同時(shí)還列有兩個(gè)人實(shí)性瘤細(xì)胞系的IC50值肺癌A549和結(jié)腸癌HCT-116。這表明deH-EpoB代替了EpoB作為已知的最有效力的埃坡霉素。還表明的是i)在dEpoB、dEpoF或F3-dEpoF上9，10-脫氫修飾總是導(dǎo)致效力的顯著增加，然而在C-26位置上的三氟化卻在一定程度上降低了所述效力，然而代謝穩(wěn)定性卻由三氟化大大增加了(圖14)；和ii)大部分埃坡霉素對長春堿，一種對P-糖蛋白有多重抗藥性的典型底物沒有交叉耐藥性，也沒有對他克唑的交叉耐藥性。他克唑是一種MDR表型良好的底物，但他克唑耐藥性也可通過在微管蛋白基因中的突變而產(chǎn)生。15-氮雜-EpoB是個(gè)例外，15-氮雜-deH-EpoB顯示出顯著的對長春堿和紫杉醇的交叉耐藥性。dEpoF及其衍生物顯示出一些與長春堿的交叉耐藥性而對紫杉醇卻沒有。iii)白血病CCRF-CEM細(xì)胞和實(shí)體瘤A549和HCT-116幾乎同樣的易受埃坡霉素的影響。iv)F3-deH-dEpoB、deH-dEpoB和deH-EpoB，它們是本發(fā)明用于進(jìn)一步藥理學(xué)評價(jià)的新型先導(dǎo)化合物，沒有一點(diǎn)對長春堿的交叉耐藥性，對紫杉醇也沒有。在早期研究中(Schiff等人(1979)Nature(London)277，665-667；Meng等人(1997)J.Am.Chem.Soc.119，2733-2734；每篇文獻(xiàn)通過引用并入本發(fā)明)，總結(jié)了埃坡霉素分子可被分成三個(gè)部分。因此，在C-1～8的?；糠种?，根據(jù)體外細(xì)胞毒性和微管穩(wěn)定化能力，不允許結(jié)構(gòu)改變。這與C-9～15的O-烷基部分和C-15的側(cè)芳基部分相反，其中后兩者結(jié)構(gòu)可允許顯著地變化(Haar等人(1996)Biochemistry35，243-250；Kowalski等人(1997)J.Biol.Chem.272，2534-2541；每篇文獻(xiàn)通過引用并入本發(fā)明中)。具有12，13-環(huán)氧基部分的埃坡霉素，例如EpoB和deH-EpoB，盡管是埃坡霉素系列中最有效力的藥劑，但它們卻在最大忍受劑量下只具有相當(dāng)差的治療指數(shù)。這種假說用示于圖14表中的治療數(shù)據(jù)可說明。埃坡霉素衍生物的物理化學(xué)性質(zhì)、代謝性質(zhì)、藥理學(xué)性質(zhì)和治療結(jié)果。相互關(guān)聯(lián)的不同性質(zhì)的系列埃坡霉素促進(jìn)了對貢獻(xiàn)于主導(dǎo)化合物的治療歸宿的因素的理解。圖14中的表總結(jié)了九種埃坡霉素衍生物的特征。結(jié)構(gòu)-細(xì)胞毒素的體外活性關(guān)系提供了基于效力的初始評估。例如，9，10-脫氫修飾的新類大大增加了體內(nèi)和體外的效力。在這些預(yù)選的化合物中，較難于將結(jié)構(gòu)-微管穩(wěn)定性效力相關(guān)聯(lián)，因?yàn)檫@個(gè)效力都非常高(即，類似于紫杉醇的效力)。水溶解性和親脂性在治療效果中起不同的作用并對于制劑的設(shè)計(jì)是重要的。DeH-dEpoF、F3-deH-dEpoF和deH-dEpoB相對于其它埃坡霉素具有顯著增加的水溶性。F3-deH-dEpoB是口服有效的，這個(gè)發(fā)現(xiàn)降低了水溶性在藥物制劑中的必要性并且可以避免使用引起過敏的可利摩福。在體外，deH-EpoB、deH-dEpoF、EpoB和deH-dEpoB，以此順序具有亞納摩爾的IC50，然而F3-deH-dEpoF、dEpoF、F3-deH-dEpoB、dEpoB和F3-dEpoB，以此順序，具有IC50的范圍為1.3至9.3nM(圖17)。DeH-EpoB和EpoB在體外和體內(nèi)是已知的最有效力的埃坡霉素，但它們并不產(chǎn)生最好的治療指數(shù)。顯然，在EpoB和deH-EpoB的C-12～13上的環(huán)氧基部分很大地貢獻(xiàn)于對于宿主的毒性，通過最大體重百分比降低(而不死亡)較低的值明顯可見(圖14)。相反，F(xiàn)3-deH-dEpoB和dEpoB允許體重降低最高值并且它們都表現(xiàn)出良好的治療結(jié)果，例如在所有動(dòng)物中完全消除腫瘤。通常，用6hr靜脈內(nèi)灌注治療，體外效力和最佳的治療劑量顯示了良好的關(guān)聯(lián)性。特別有興趣的是在所列的埃坡霉素中，F(xiàn)3-deH-dEpoB(弗迪隆)具有最寬的治愈治療劑量范圍(10-30mg/kg)(Chou等人(2003)AngewChem.Int.Ed.Engl.42，4762-4767，通過引用并入本發(fā)明)、極好的代謝穩(wěn)定性和最佳的總體治療結(jié)果(圖14)。另外，F(xiàn)3-deH-dEpoB通過口服給藥途徑提供了治愈的治療效果。總之，最有效力的埃坡霉素作為抗腫瘤藥劑并不一定具有較好療效，和F3-deH-dEpoB是用于治療學(xué)發(fā)展的主導(dǎo)候選藥物。對于超大MX-1腫瘤異種移植物的治療。如圖6A中所示，25mg/kg，6hr靜脈內(nèi)灌注Q3D×5，腫瘤植入后D22開始用F3-deH-dEpoB大至體重3.4％的治療MX-1異種移植物導(dǎo)致顯著的腫瘤收縮(＞97.4％)。在沒有治療的9天間歇期內(nèi)(D34-D43)，腫瘤大小持續(xù)收縮(＞99.3％)并且在5只被研究的小鼠中有2只小鼠腫瘤消失，然而治療組的體重在相同的間歇期間都恢復(fù)到治療前的水平(圖6B)。在D43恢復(fù)治療，Q3D×4，導(dǎo)致在剩余的3只小鼠中在D50、D50和D51腫瘤消失。D52(即最后服藥日期)后，每三天觀察動(dòng)物一次，直到D165試驗(yàn)終止時(shí)。所有5只動(dòng)物在D165(即停止治療后3.7個(gè)月)均沒有腫瘤復(fù)發(fā)。從對照組和治療組中一只小鼠在D25、D31、D37、D43和D52拍攝的本試驗(yàn)裸鼠的照片示于圖6B中。通過口服給藥由弗迪隆對MX-1異種移植物的治愈癌癥治療。如圖13A所示，每兩天口服給予F3-deH-dEpoB30mg/kg7次，導(dǎo)致MX-1腫瘤收縮并且4只小鼠中2只腫瘤消失。另外兩個(gè)劑量(劑量跳過后)在4只小鼠中4只均導(dǎo)致腫瘤消失。相反，以相同劑量和相同進(jìn)度下進(jìn)行的他克唑的口服治療抑制了MX-1腫瘤的生長但并不導(dǎo)致腫瘤收縮。在最后一劑他克唑后兩天(D36)，其導(dǎo)致腫瘤抑制66.9％。F3-deH-dEpoB治療誘導(dǎo)中等程度的但卻持久的體重降低，最大降低15％體重(圖13B)。他克唑治療誘導(dǎo)很小的體重變化，說明口服給藥他克唑明顯由于藥物代謝失活或差的生物利用度而不是合適的治療。與口服給藥途徑相反，本發(fā)明的發(fā)明人早期報(bào)導(dǎo)(Chou等人(2001)Proc.Natl.Acad.Sci.USA98，8113-8118；通過引用并入本發(fā)明)，MX-1腫瘤以20mg/kg他克唑經(jīng)6hr靜脈內(nèi)灌注治療能導(dǎo)致腫瘤收縮和腫瘤消失。弗迪隆抗他克唑耐藥性的CCRF-CEM/他克唑異種移植物的治愈治療效果。在本發(fā)明的發(fā)明人最近的報(bào)導(dǎo)中(Chou等人(2003)AngewClient.Int.Ed.Engl.42，4762-4767；通過引用并入本發(fā)明)，本發(fā)明的發(fā)明人說明了F3-deH-dEpoB在20mg/kg，Q2D×7，6hr靜脈內(nèi)灌注在抗他克唑耐藥性人肺癌A549/他克唑(體外對紫杉醇44倍耐藥性)時(shí)導(dǎo)致腫瘤生長完全抑制，但沒有達(dá)到消失腫瘤。本發(fā)明的發(fā)明人在本發(fā)明中使用另一種紫杉醇耐藥性異種移植物，CCRF-CEM/他克唑(體外對紫杉醇44倍耐藥性)。如圖7中所示，弗迪隆在30mg/kgQ2D×7，6hr靜脈內(nèi)灌注導(dǎo)致4只小鼠中有2只腫瘤消失。另外的Q2D×5(劑量翻一倍)導(dǎo)致在4只小鼠中有3只腫瘤消失，最終的腫瘤抑制為99.8％(圖7A)。在降低的劑量為15mg/kg，在4只小鼠中只有一只在兩個(gè)周期治療后第5天發(fā)生腫瘤消失。在D34最終的腫瘤抑制為98.8％。用他克唑在20mg/kg進(jìn)行的平行實(shí)驗(yàn)導(dǎo)致了腫瘤生長抑制但很少或根本沒有縮小腫瘤。在D34最終的腫瘤抑制為75.6％。F3-deH-dEpoB(在15mg/kg和30mg/kg)和他克唑(20mg/kg)兩者在每兩天通過6hr靜脈內(nèi)灌注的7次治療的第一周期治療過程中均持續(xù)降低體重。在D22跳過一次治療導(dǎo)致在所有小鼠中立即增加體重。Q2D×5的第二周期治療同樣持續(xù)降低體重，但對所有測試小鼠均沒有致死(圖7B)。由弗迪隆抗人結(jié)腸癌HCT-116異種移植物的治愈治療。如圖9A所示，F(xiàn)3-deH-dEpoB在20mg/kg和30mg/kg或他克唑在20mg/kg，Q2D×4，6hr靜脈內(nèi)灌注3個(gè)周期，在4只小鼠中4只均導(dǎo)致腫瘤消失。在腫瘤植入后D9開始治療。介于第一和第二周期之間在D17跳過一個(gè)劑量，并且介于第二和第三循環(huán)之間在D27和D29跳過兩個(gè)劑量。D9-D37為3周期治療階段并且D37-D200為隨訪階段。該實(shí)驗(yàn)持續(xù)200天，其為超過小鼠平均壽命的四分之一。對于在30mg/kg的F3-deH-dEpoB，腫瘤在D21、23、33和41消失，而在20mg/kg，腫瘤在D31、35、41和45消失。對于兩種劑量的F3-deH-dEpoB，在D200實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，4只小鼠中4只均沒有腫瘤復(fù)發(fā)。對于他克唑在20mg/kg，腫瘤在D33、33、41和45消失，這與在20mg/kg的F3-deH-dEpoB中觀察到的相似。然而在他克唑治療組，在D71、75、81和81腫瘤復(fù)發(fā)。包括間歇期間的治療進(jìn)度表由小鼠的體重降低和體格狀況來表示。對于在30mg/kg的F3-deH-dEpoB治療，最大的體重降低為30％而沒有導(dǎo)致死亡，這發(fā)生于第二治療周期末(即D29)(圖9B)。對于20mg/kg的他克唑和20mg/kg的F3-deH-dEpoB，體重的降低和恢復(fù)在模式和量度上均相似。實(shí)施例2確定弗迪隆(F3-deH-dEpoB)的作用機(jī)理以及其如何不同于EpoD的作用機(jī)理；這些不同的治療學(xué)暗示人多重骨髓瘤(MM)和非霍奇金淋巴瘤(NHL)腫瘤細(xì)胞系的藥物敏感性MM占所有癌癥的1％和惡性血液疾病的10％，在2002年有15,500新增診斷病例和＞15,000例死亡。用傳統(tǒng)化學(xué)療法治療MM是不能治愈的，生存年限中位值為約3年(Barlogie等人“Treatmentofmultiplemyeloma”Blood2004；10320-32；通過引用并入本發(fā)明)。盡管用造血干細(xì)胞載體的高劑量化學(xué)療法增加了完全癥狀減退和無事件生存時(shí)間的比率，幾乎每個(gè)病人都會復(fù)發(fā)，要求對于搶救治療選擇方案的迫切需要。紫杉醇已被用于治療多重骨髓瘤和非霍奇金淋巴瘤(Miller等人“PaclitaxelastheinitialtreatmentofmultiplemyelomaanEasternCooperativeOncologyGroupStudy(E1A93)”Am.J.Clin.Oncol.1998；21553-556；Jazirehi等人“Resveratrolmodifiestheexpressionofapoptoticregulatoryproteinsandsensitizesnon-Hodgkin′slymphomaandmultiplemyelomacelllinestopaclitaxel-inducedapoptosis”Mol.CancerTher.2004；371-84；每篇文獻(xiàn)通過引用并入本發(fā)明)。然而，這種應(yīng)用卻由于其高的毒性和多重耐藥性而受限制。本發(fā)明的發(fā)明人已經(jīng)評價(jià)了弗迪隆和dEpoB抗一組人MM和NHL系，它們已經(jīng)在許多用于評價(jià)新型療法的NOD/SCID異種移植模型的新近研究中使用，包括10-炔丙基-10-脫氮雜-氨喋呤(PDX)(Wang等人“Activityofanovelanti-folate(PDX，10-propargyl-10-deazaaminopterin)againsthumanlymphomaissuperiortomethotrexateandcorrelateswithtumorRFC-1geneexpression”Leukemia&Lymphoma2003，441027-1035)、抗端粒末端轉(zhuǎn)移酶(Wang等人“Telomeraseinhibitionwithanoligonucleotidetelomerasetemplateantagonistinvitroandinvivostudiesinmultiplemyelomaandlymphoma”Blood2004；103258-66；通過引用并入本發(fā)明)和抗VEGFRMab(Wang等人“TargetingautocrineandparacrineVEGFreceptorpathwaysregresseshumanlymphomaxenographsinvivo”Blood，印刷中；通過引用并入本發(fā)明)。弗迪隆和dEpoB均能顯著地抑制骨髓瘤和淋巴瘤細(xì)胞增殖。骨髓瘤細(xì)胞系對具有超低IC50的弗迪隆和dEpoB非常敏感，同時(shí)兩種NHL系在弗迪隆劑量高出MM中有效劑量5-10倍時(shí)被抑制(表2-1)。表2-1.弗迪隆和dEpoB抗一組正常人腫瘤和正常人細(xì)胞種群的細(xì)胞增長抑制和IC50，由XTT雙偶氮鹽(tetrazonium)試驗(yàn)測定。正常的骨髓基質(zhì)細(xì)胞(HS-27A和HS-5系)顯示對這些化合物的相對耐藥性，表明弗迪隆和dEpoB具有對MM的安全治療窗(表2-1)。弗迪隆比dEpoB對MM細(xì)胞系具有約5倍大的效力，同時(shí)這兩種藥均對正常骨髓基質(zhì)細(xì)胞具有對等的毒性。人胎兒肺成纖維細(xì)胞(MRC-5)對dEpoB和Flu是敏感的，但對于Flu，清晰的治療窗是明顯的，甚至對于這些非常敏感的正常細(xì)胞。弗迪隆和dEpoB導(dǎo)致骨髓瘤和淋巴瘤細(xì)胞在G2M階段停滯(圖18)并誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡(圖19和20)。本發(fā)明的發(fā)明人評價(jià)了導(dǎo)致骨髓瘤細(xì)胞凋亡必需的體外藥物暴露的持續(xù)時(shí)間。脈沖暴露1、2、4、8和24小時(shí)，隨后洗除藥物并繼續(xù)培養(yǎng)長達(dá)48小時(shí)。細(xì)胞暴露于弗迪隆或dEpoB24hr導(dǎo)致所有的細(xì)胞在48hr內(nèi)死亡(圖21)。用dEpoB培養(yǎng)4-8hr延緩了細(xì)胞增殖，而暴露于弗迪隆相同的持續(xù)時(shí)間則降低了最初細(xì)胞數(shù)量的約50％。暴露于dEpoB一小時(shí)在48hr內(nèi)減少了但沒有阻止腫瘤細(xì)胞增殖，而用Flu，腫瘤數(shù)量降低了50％(圖21)。弗迪隆和dEpoB與紫杉醇一樣，都具有在暴露后不久，增加微管束在癌細(xì)胞內(nèi)形成而沒有略微改變該細(xì)胞中的微管質(zhì)量的能力(圖22)。在稍后的時(shí)間(約24hr)微管被破壞并且發(fā)生細(xì)胞凋亡。在弗迪隆和dEpoB對于獲自母體髓的初生CD138MM細(xì)胞的比較中，本發(fā)明的發(fā)明人說明弗迪隆誘導(dǎo)腫瘤在24hr內(nèi)凋亡，而dEpoB卻沒有。對人實(shí)體瘤細(xì)胞系的藥物敏感性弗迪隆和dEpoB的IC50在一組人實(shí)體瘤系(結(jié)腸、乳和卵巢)上測定(表2-1)。在每個(gè)例子中，弗迪隆的IC50均低于dEpoB的IC50。卵巢癌系對弗迪隆特別敏感并且4/5的卵巢系具有平均為1.6nM的IC50，相比而言dEpoB的IC50為16.5nM。這兩種藥物均導(dǎo)致腫瘤細(xì)胞在G2M階段停滯(圖23)并快速誘導(dǎo)凋亡(圖24和25)。RPMI-8226骨髓瘤細(xì)胞系在用dEpoB或弗迪隆在以×10各自IC50劑量治療6和18hr后的全基因組表達(dá)在RPMI-8226人多重骨髓瘤細(xì)胞系中全基因組表達(dá)(Affymetric芯片AU1332.0)與差別基因表達(dá)的比較，在用dEpoB或弗迪隆治療6或18hr(在×10的IC50劑量)后進(jìn)行。在弗迪隆治療的RPMI-08226與對照未治療的細(xì)胞比較中，在6小時(shí)時(shí)5個(gè)基因被正調(diào)控(表2-2)并且在18hr時(shí)48個(gè)基因被正調(diào)控(表2-3)。JUN在兩次均被正調(diào)控(+3.25，+2.64)。在6hr時(shí)3個(gè)基因被負(fù)調(diào)控(表2-2)并且在18hr時(shí)16個(gè)基因被負(fù)調(diào)控(表2-3)。HNRPD(異源核核蛋白D類似物)在兩個(gè)時(shí)間均被負(fù)調(diào)控(-2.46，-3.25)。在dEpoB治療的RPMI-08226與對照未治療的細(xì)胞比較中，在6小時(shí)時(shí)21個(gè)基因被正調(diào)控(表2-2)并且在18hr時(shí)26個(gè)基因被正調(diào)控(表2-3)。JUN(+5.66，+3.73)和微管蛋白α3(+2.64，+2.30)在兩個(gè)時(shí)間均被正調(diào)控。在6hr時(shí)3個(gè)基因被負(fù)調(diào)控(表2-2)并且在18hr時(shí)16個(gè)基因被負(fù)調(diào)控(表2-3)。HNRPD在兩個(gè)時(shí)間均被負(fù)調(diào)控(-4.92，-2.00)。于是本發(fā)明的發(fā)明人比較了由弗迪隆對dEpoB而改變的基因表達(dá)(表2-2和2-3)。表2-2.全基因組表達(dá)(Affymetrix芯片-AU1332.0)與差別基因表達(dá)在RPMI-8226(人多重骨髓瘤細(xì)胞系)中的比較。對照細(xì)胞與用弗迪隆或dEpoB治療的細(xì)胞(在10倍IC50劑量)6小時(shí)的比較。下劃線-基因正調(diào)控或負(fù)調(diào)控，在弗迪隆或dEpoB治療的細(xì)胞中6hr時(shí)。*干擾素可誘導(dǎo)基因。表2-3.全基因組表達(dá)(Affymetrix芯片-AU1332.0)與差別基因表達(dá)在RPMI-8226(人多重骨髓瘤細(xì)胞系)中的比較。對照細(xì)胞與用弗迪隆或dEpoB治療(在×10倍IC50劑量)的細(xì)胞18小時(shí)的比較。下劃線-基因正調(diào)控或負(fù)調(diào)控，在弗迪隆或dEpoB治療的細(xì)胞中18hr時(shí)。*干擾素可誘導(dǎo)基因。在6小時(shí)，由弗迪隆正調(diào)控5個(gè)基因，由dEpoB正調(diào)控21個(gè)，并且二者都正調(diào)控3個(gè)基因，同時(shí)由弗迪隆負(fù)調(diào)控3個(gè)基因，由dEpoB負(fù)調(diào)控4個(gè)，并且沒有二者都負(fù)調(diào)控的基因。在18小時(shí)，由弗迪隆正調(diào)控48個(gè)基因，由dEpoB正調(diào)控26個(gè)，并且二者都正調(diào)控18個(gè)基因，同時(shí)由弗迪隆負(fù)調(diào)控16個(gè)基因，由dEpoB負(fù)調(diào)控7個(gè)，并且二者都負(fù)調(diào)控6個(gè)基因。指定該方案測試如下假說弗迪隆優(yōu)于dEpoB和以前的埃坡霉素的增強(qiáng)的抗腫瘤功效是由于除了微管穩(wěn)定性外，另外一些腫瘤靶向機(jī)理。因此本發(fā)明的發(fā)明人確定了何種基因由Flu差別地正調(diào)控和負(fù)調(diào)控，同時(shí)與dEpoB-治療的MM細(xì)胞比較(表2-4)。表2-4.全基因組表達(dá)(Affymetrix芯片-AU1332.0)與差別基因表達(dá)在用dEpoB或弗迪隆(在×10倍IC50劑量)治療6或18小時(shí)的RPMI-8226(人多重骨髓瘤細(xì)胞系)中的比較。所示基因?yàn)橛筛サ下∵x擇性改變的那些。下劃線-基因負(fù)調(diào)控，在弗迪隆或dEpoB治療的細(xì)胞中在6和18hr時(shí)。*干擾素可誘導(dǎo)基因。在6小時(shí)，正調(diào)控了兩個(gè)基因，并且在18小時(shí)，正調(diào)控了一個(gè)基因。在6小時(shí)，負(fù)調(diào)控了十個(gè)基因，并且在18小時(shí)，負(fù)調(diào)控了十一個(gè)基因，并且在兩個(gè)時(shí)間負(fù)調(diào)控了四個(gè)基因(IFI27，-7.46，-5.28)，GIP3(-6.06，-5.28)，IFTM1(-4.00，-3.25)，MX-1(-2.00，-2.30)。這些是所有干擾素可誘導(dǎo)的基因。卵巢1A9和1A9PTX22卵巢異種移植物的基因表達(dá)圖已經(jīng)被報(bào)導(dǎo)，用紫杉醇治療24小時(shí)后顯示為IFN響應(yīng)基因(GIP3，IFI27，IFITM1，IFII6，ISG15)的表達(dá)減少(Bani等人“Geneexpressioncorrelatingwithresponsetopaclitaxelinovariancarcinomaxenografts”Mol.CancerThera.2004；3111-121；通過引用并入本發(fā)明)。這些基因中的三個(gè)(GIP3，IFI27，IFITM1)，在用dEpoB而不是用弗迪隆治療的RPMI-8226細(xì)胞后6小時(shí)，被強(qiáng)烈地過度表達(dá)，并且這些也是其表達(dá)最強(qiáng)烈地辨別弗迪隆和dEpoB基因圖的基因。IFN-響應(yīng)基因的過度表達(dá)(例如，IFR9)最近已經(jīng)與腫瘤細(xì)胞系中對紫杉醇的耐藥性聯(lián)系在一起，并且這些發(fā)現(xiàn)支持了這樣的可能性是INF信號的介質(zhì)涉及于紫杉醇的響應(yīng)，而不是INF自身(Luker等人，“OverexpressionofIRF9confersresistancetoantimicrotubuleagentsinbreastcancercells”CancerRes.2001；616540-7；通過引用并入本發(fā)明)。在對抗微管劑耐藥性的發(fā)展中，IRF9的這種新型IFN獨(dú)立作用的報(bào)導(dǎo)占到接近乳癌和子宮癌的一半(Luker等人，“OverexpressionofIRF9confersresistancetoantimicrotubuleagentsinbreastcancercells”CancerRes.2001；616540-7；通過引用并入本發(fā)明)。eEpoA或他克唑耐藥性的腫瘤系的微陣列分析表明在EpoA耐藥性腫瘤中而不在他克唑耐藥性腫瘤中被高度表達(dá)的多數(shù)基因編碼了干擾素可誘導(dǎo)基因(Atadja等人“GeneexpressionprofilingofepothiloneA-resistantcells”NovartisFoundSymp.2002；243119-32；通過引用并入本發(fā)明)。顯然，本發(fā)明的發(fā)明人發(fā)現(xiàn)8/21(38％)的所有基因(在dEpoB治療RPMI-8226之后被正調(diào)控，為IFN可誘導(dǎo)的并且這些基因中沒有一個(gè)由Flu治療而改變(表2-2至2-4)。隨后的IFN可誘導(dǎo)基因顯示出在8226MM細(xì)胞中用dEpoB治療6小時(shí)或18小時(shí)后被正調(diào)控而用弗迪隆治療時(shí)不改變。由dEpoB正調(diào)控的程度排序，它們是1.)干擾素(IFN)α-可誘導(dǎo)的IFI27(增加+18.83)。這屬于小的干擾素-α-可誘導(dǎo)基因的家族，其未知的功能為在發(fā)炎的皮膚病、上皮癌和傷口修復(fù)中被正調(diào)控(Suomela等人“Interferonalpha-inducibleprotein27(IFI27)isupregulatedinPsoriaticskinandcertainepithelialcancers”JInvest.Dermatol.2004；122717-721；通過引用并入本發(fā)明)。2.)IFNα-可誘導(dǎo)蛋白(克隆IFI-6-16)GIP3(Bani等人“Geneexpressioncorrelatingwithresponsetopaclitaxelinovariancarcinomaxenografts”Mol.Cancer.Thera.2004；3111-121；通過引用并入本發(fā)明)(增加+5.28)。3.)IFN-誘導(dǎo)跨膜蛋白1，IFTM1(Bani等人)(增加+4.92)。4.)粘膜病毒耐藥性，IFN可誘導(dǎo)的，MX1(在6小時(shí)增加+2和在18小時(shí)增加+2.3)。該MX1基因賦予流感病毒選擇性的先天耐藥性(Staeheli，Ad.ViralRes.38147，1990；通過引用并入本發(fā)明)。它們還可能作為GTP結(jié)合蛋白擔(dān)當(dāng)基本的細(xì)胞功能(ArnheiterH和MeierE.“Mxproteinsantiviralproteinsbychanceornecessity？”NewBiol.1990；90851；通過引用并入本發(fā)明)。5.)磷脂移位酶1基因PLSCR1。該基因的轉(zhuǎn)錄控制由位于第一外顯子的單一IFN-刺激的響應(yīng)元件而完全調(diào)控(Zhou等人“Transcriptionalcontrolofthehumanplasmamembranephospholipidscramplase1geneismediatedbyinterferon-alpha”Blood2000；952593-2599；通過引用并入本發(fā)明)。PLSCR1涉及改建血漿膜磷脂和磷脂酰絲氨酸向細(xì)胞表面的運(yùn)動(dòng)。其可幫助血漿膜磷脂的快速跨膜移動(dòng)，這可在暴露至升高細(xì)胞內(nèi)Ca++的受傷和凋亡的細(xì)胞中觀察到。研究表明其還能使核易位并可以用作轉(zhuǎn)錄因子(Ben-Efraim等人“PhospholipidScramblase1isimportedintothenucleusbyareceptor-mediatedpathwayandinteractswithDNA”Biochem.2004；4335181；通過引用并入本發(fā)明)。6.)具有tetracopeptide重復(fù)的干擾素誘導(dǎo)蛋白，IFITI(增加+2.3)。其已經(jīng)與全身紅斑狼瘡相關(guān)并且蛋白-蛋白研究表明其可以通過與Rho/Rac鳥嘌呤核苷酸交換因子相互作用而活化Rho蛋白(Ye等人“Proteininteractionforaninterferon-induciblesyste-3526miclupusassociatedgene，IFIT1”Rheumatology2003；421155-63；通過引用并入本發(fā)明)。7.)2’-5’寡腺苷酸合成酶-2，OAS2(增加+2)。這一族(OAS1，OAS2，OAS3，OAS4)的干擾素誘導(dǎo)基因涉及應(yīng)激反應(yīng)并對于干擾素的抗病毒活性是重要的(Chebath，Nature330587，1987；Meurs等人J.Virol.665804，1992；每篇文獻(xiàn)通過引用并入本發(fā)明)。OAS2催化了腺苷低聚物(2-5A)的合成。于是這些低聚物活化了RNaseL，潛伏于大多數(shù)哺乳動(dòng)物細(xì)胞中的核糖核酸內(nèi)切酶，其反過來又可以使病毒(picornoviruses例如門戈病毒)和細(xì)胞的RNA失活(Anderson等人Eur.J.Biochem.2004；271628-36；通過引用并入本發(fā)明)。8.)組織相容性類IIDPα1，HLA-DPA1(增加+2)。MHC-類II是已知的IFN生物學(xué)功能的介質(zhì)(Tissot等人“MolecularcloningofanewInterferon-inducedfactorthatrepresseshumanimmunodeficiencyvirusType1longterminalrepeatexpression”Biol.Chem.1995；27014891-14898；通過引用并入本發(fā)明)?？偨Y(jié)CAG骨髓瘤細(xì)胞系顯示了臨床多重骨髓瘤的許多特征，所述多重骨髓瘤具有表型(CD38+CD138+CD45-)和體內(nèi)移植物兩者。通過靜脈內(nèi)灌注10～15百萬個(gè)用融合HSV-TK-eGFP-熒光素酶基因改造的CAG細(xì)胞而建立異種移植NOD-SCID骨髓瘤小鼠模型。因此由熒光素酶生物發(fā)光形成的整個(gè)動(dòng)物成像可用于實(shí)時(shí)的、非侵入性報(bào)告評價(jià)在活的小鼠中腫瘤負(fù)荷和藥物功效。骨髓瘤小鼠在腫瘤注射7至20天后顯示骨髓浸潤和病理溶骨損害。植入腫瘤細(xì)胞后，小鼠隨機(jī)地分成媒介物對照組、dEpoB治療組和弗迪隆治療組。dEpoB和弗迪隆的劑量均為20mg/kg，并且這些藥物均通過腹膜內(nèi)途徑給藥。給藥劑量次數(shù)的平均值在治療的第一個(gè)30天中，對于dEpoB為10次，對于弗迪隆為12次。另外，在初始用弗迪隆治療的7只小鼠中的3只，在35至45天之間給藥五個(gè)劑量的Velcade(6.25μg/鼠，靜脈內(nèi)灌注)。結(jié)果表明，通過生物發(fā)光成像評價(jià)，與用dEpoB治療的小鼠和對照小鼠相比，用弗迪隆治療的骨髓瘤小鼠的其腫瘤負(fù)荷顯著降低。所有對照組的小鼠在初始治療后30天內(nèi)死亡，然而弗迪隆治療的小鼠的存活時(shí)間至少為對照組的兩倍。對照組和用dEpoB治療的小鼠兩組間的存活時(shí)間沒有差別。與蛋白酶體抑制劑Velcade組合，可顯著減小位于脊椎動(dòng)物脊髓灰柱和股骨中的腫瘤，這表明這種組合甚至在骨髓微環(huán)境保護(hù)下也可以攻擊骨髓瘤細(xì)胞。前面的數(shù)據(jù)表明用埃坡霉素治療的骨髓瘤顯示出典型的凋亡特征。尚不清楚胱冬肽酶是否牽涉于這個(gè)過程中。首先，本發(fā)明的發(fā)明人通過Western印跡研究了在骨髓瘤細(xì)胞中胱冬肽酶3(在胱冬肽酶途徑中的一種效應(yīng)物胱冬肽酶)的活性。用dEpoB或弗迪隆治療，骨髓瘤細(xì)胞顯示出增加了17kd的裂解的胱冬肽酶3，這與其活性相關(guān)。CAG骨髓瘤細(xì)胞免疫組織化學(xué)的染色采用了特異于切斷的胱冬肽酶3的抗體，用于表示在凋亡細(xì)胞中細(xì)胞質(zhì)和核周的局部特征。這些數(shù)據(jù)證實(shí)胱冬肽酶在埃坡霉素治療的細(xì)胞中被激活。其次，本發(fā)明的發(fā)明人嘗試通過螢光法試驗(yàn)了胱冬肽酶8和胱冬肽酶9(在胱冬肽酶途徑中的引發(fā)劑胱冬肽酶)的活性。同樣，在骨髓瘤細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)胱冬肽酶8和胱冬肽酶9活性均被增加了。注意增加的胱冬肽酶9的活性比胱冬肽酶8更突出。引發(fā)胱冬肽酶8或9活化的信號正在積極研究中。對造血干細(xì)胞的藥物細(xì)胞毒性一直是人們主要關(guān)心的。從臍帶血中分離出人CD34+干細(xì)胞并或用dEpoB或用弗迪隆單獨(dú)培養(yǎng)24小時(shí)。洗除藥物后，進(jìn)行凋亡試驗(yàn)和2個(gè)星期的起源試驗(yàn)以評價(jià)埃坡霉素對干細(xì)胞的影響。本發(fā)明的數(shù)據(jù)顯示dEpoB或弗迪隆對非循環(huán)干細(xì)胞沒有顯著毒性。實(shí)施例3(E)-9，10-脫氫埃坡霉素在鼠科異種移植模型中具有很好前景特征的一類新型微管穩(wěn)定抗腫瘤劑包含普通16元環(huán)的26-F3-[16]dEpoB(2)的合成可通過高匯集策略完成，該策略為應(yīng)用于27-F3-[17]ddEpoB(19)的合成中相關(guān)的策略。這種策略預(yù)計(jì)通過如下所示的閉環(huán)復(fù)分解反應(yīng)而形成E-9，10-烯(以前的通過RCM大環(huán)化成絡(luò)合物結(jié)構(gòu)的例子為，參見Sinha，S.C.；Sun，J.Angew.Chem.Int.Ed.2002，41，1381；通過引用并入本發(fā)明)。本發(fā)明的發(fā)明人預(yù)計(jì)28和29的E-9，10-烯的化學(xué)選擇還原將給出dEpoB(1)和想要的26-F3-dEpoB(2)。該RCM的前體由通過酯化反應(yīng)結(jié)合兩個(gè)片段(21或24)和123而制備。耦合伴侶123通過消除連接于C8二級甲基的亞甲基間隔基團(tuán)(見本發(fā)明的發(fā)明人早期途徑中，參見化合物18)而構(gòu)建。如上所說明，包含間隔雙烯排列的17元環(huán)的埃坡霉素(參見18)的體外水平的發(fā)現(xiàn)，強(qiáng)調(diào)了對于在熟悉的16元環(huán)內(nèi)酯結(jié)構(gòu)中這樣的雙烯的生物學(xué)結(jié)果的相應(yīng)研究的需要。鑒于本發(fā)明中dEpoB中的順式12，13-雙烯的存在，這樣的間隔雙烯應(yīng)當(dāng)必須包含9，10-雙鍵。9，10-脫氫埃坡霉素和26-F3-dEpoB的逆合成用易于合成的三氟烯丙基碘和甲基烯丙基碘(分別為8和124)烷基化噁唑烷酮7(Lee等人，J.Am.Chem.Soc.2001，123，5249；通過引用并入本發(fā)明)，允許在適合的絕對構(gòu)型中建立具有高的非對映體過量(參見產(chǎn)物9或125)的C15立體中心(Evans，D.A.；Morrissey，M.M.；Dorow，R.L.J.Am.Chem.Soc.1985，107，4346；Paterson，I.；Bower，S.；Mcleod，M.D.Tetrahedronlett.1995，36，175；每篇文獻(xiàn)通過引用并入本發(fā)明)。將后者轉(zhuǎn)換為相應(yīng)的Weinreb酰胺(Nahm等人TetrahedronLett.1981，22，3815；Levin等人Synth.Commun.1982，12，989；每篇文獻(xiàn)通過引用并入本發(fā)明)，并且由此轉(zhuǎn)化為126和42，然后通過親核甲基化(MeMgBr)和適合的HomerWittig成烯化作用(Lythgoe等人，Tetrahedronlett.1975，40，3863；Lythgoe，Chem.Soc.Rev.1981，449；Toh等人Org.Chem.1983，48，1414；Baggiolini等人J.Org.Chem.1986，51，3098；每篇文獻(xiàn)通過引用并入本發(fā)明)轉(zhuǎn)化為24和21。盡管使用這種作為手性輔助物的噁唑烷酮已經(jīng)由Evans及其同事(Evans等人J.Am.Chem.Soc.1985，107，4346；Paterson等人TetrahedronLett.1995，36，175；每篇文獻(xiàn)通過引用并入本發(fā)明)首創(chuàng)，但其通過烷基化(而不是通過羥基化)合成光學(xué)定義的甘醇酸酯的應(yīng)用尚未被開發(fā)。片段21和24的合成多丙酸酯片段25的合成可以通過兩個(gè)關(guān)鍵的醛醇縮合反應(yīng)而實(shí)現(xiàn)，其建立了C3、C6和C7立體中心的相對構(gòu)型。第一個(gè)醇醛縮合反應(yīng)涉及將Z-烯醇化的乙基酮30與Roche醛31反應(yīng)(Cohen等人Org.Chem.1976，41，3505；Nagaoka等人Tetrahedron1981，37，3873；Roush等人J.Am.Chem.Soc.1990，112，6348；每篇文獻(xiàn)通過引用并入本發(fā)明)以提供想要的具有高度非對映體選擇性的32。該合成借助于31，其顯著優(yōu)點(diǎn)是優(yōu)于使用以前的醛，以前的醛需要解決光學(xué)純起始原料的來源問題。保護(hù)C7-醇隨后通過縮醛水解提供想要的醛34并為第二次醇醛縮合反應(yīng)創(chuàng)造條件。34與Duthaler的DAG(二酮葡萄糖)Ti-烯醇化物反應(yīng)(Duthaler等人Angew.Chem.Int.Ed.Engl.1989，28，495；通過引用并入本發(fā)明)提供想要的具有高度(＞95％)非對映體選擇性的羥基叔丁基酯35。然后將后者直接轉(zhuǎn)化為想要的酸25。酸25的合成烯丙基醇24、21和C1-C9的酸片段25通過EDCI酯化規(guī)程結(jié)合在一起，因此分別提供了RCM前體26和27。26和27的閉環(huán)復(fù)分解反應(yīng)通過使用RCM催化劑(Scholl等人TetrahedronLett.1999，40，2247；Grubbs等人Acc.Chem.Res.1995，28，446；Trnka等人Acc.Chem.Res.2001，34，18；AlkeneMetathesisinOrganicChemistryEd.Fürstner，A；Springer，Berlin，1998；Fürstner，A.Angew.Chem.Int.Ed.Engl.2000，39，3012；Schrock，Top.Organomet.Chem.1998，1，1；每篇文獻(xiàn)通過引用并入本發(fā)明)在甲苯中進(jìn)行。這些反應(yīng)確實(shí)提供了反式異構(gòu)體39a和40a。然而，主產(chǎn)物卻是39b和40b，其由明顯的另一RCM途徑獲得。這些不想要的RCM異構(gòu)體超過想要的39a和40a的比例為約3∶1。最后，用HF-吡啶對39a和40a的甲硅烷基醚脫去保護(hù)導(dǎo)致形成想要的E-9，10-脫氫-埃坡霉素28(White等人JAm.Chem.Soc.2001，123，5407；White等人J；Am.Chem.Soc.(增補(bǔ)/修正)2003，125，3190；每篇文獻(xiàn)通過引用并入本發(fā)明。已知化合物28的嚴(yán)格證明的結(jié)構(gòu)，本發(fā)明的發(fā)明人驚奇地發(fā)現(xiàn)其光譜性質(zhì)與先前地報(bào)導(dǎo)的以為具有相同實(shí)體的化合物的光譜并不一致。該化合物的實(shí)際結(jié)構(gòu)先前認(rèn)為是28，現(xiàn)在被重新鑒定。回顧過去，28從未被制備過并且，事實(shí)上本發(fā)明中報(bào)導(dǎo)的整個(gè)(E)-9，10-脫氫埃坡霉素家族都是新的種類)和29。根據(jù)計(jì)劃，后者通過二酰亞胺還原E-9，10-烯而轉(zhuǎn)化為dEpoB(1)和26-三氟-dEpoB(2)(Corey等人TetrahedronLett.1961，347；Pasto等人Org.React.1991，40，91；每篇文獻(xiàn)通過引用并入本發(fā)明)。通過相應(yīng)的方法學(xué)，本發(fā)明的發(fā)明人合成了9，10-脫氫-dEpoF(57)，參見下文。選擇性的二酰亞胺還原E-9，10-烯證實(shí)了如上所述的各種合成中間體的結(jié)構(gòu)，因此促使再次評定文獻(xiàn)中以前的分配。9，10-脫氫-埃坡霉素的合成合成的類似物(28、29和57)，在細(xì)胞培養(yǎng)裝置中的檢查(參見增補(bǔ)版)，顯示出它們對各種敏感物和MDR腫瘤細(xì)胞系產(chǎn)生強(qiáng)于本發(fā)明的發(fā)明人目前的候選藥物dEpoB(1)所具有的抑制作用。埃坡霉素28、29和57所具有的給人深刻印象的細(xì)胞生長抑制作用覆蓋各種耐藥性腫瘤的范圍，這促使了對這些新型(E)-9，10同類物的血漿穩(wěn)定性進(jìn)行測定。本發(fā)明的發(fā)明人記得(E)-10，11-脫氫-dEpoB(Epo490)具有非常差的血漿穩(wěn)定性。事實(shí)上，正是這種血漿不穩(wěn)定性阻礙了Epo490(6)的進(jìn)一步開發(fā)。相反，當(dāng)將28、29和57暴露于鼠血漿時(shí)，本發(fā)明的發(fā)明人觀察到與dEpoB(1)相比非常慢的藥物降解(因子約為7)。從藥物利用度方面，相對于dEpoB(1)，更不用說epo490(6)，這種穩(wěn)定性構(gòu)成了實(shí)質(zhì)上的進(jìn)步?；诔醪降?E)-9，10-脫氫衍生物28和29的細(xì)胞培養(yǎng)和藥物動(dòng)力學(xué)數(shù)據(jù)，將它們進(jìn)一步用于體內(nèi)研究是合適的。這樣的研究當(dāng)然比在體外研究更強(qiáng)調(diào)藥物的利用度(Rivkin等人J.Am.Chem.Soc.2003，125，2899；Chou等人Angew.Chem.Int.Ed.Engl.2003，42，4761-4767；Yoshimura等人Angew.Chem.Int.Ed.Engl.2003，42，2518-2521；每篇文獻(xiàn)通過引用并入本發(fā)明。對于最近另外有效的埃坡霉素類似物的例子參見Altmann等人Bioorg.Med.Chem.Lett.2000，10，2765；Nicolaou等人Chem.Biol.，2000，7，593；每篇文獻(xiàn)通過引用并入本發(fā)明)。這種需求，和實(shí)際上可能最后需要制備數(shù)克量的9，10-脫氫衍生物用于進(jìn)一步研究，促使對本發(fā)明全合成路線進(jìn)行有意義的再評價(jià)。當(dāng)然，唯一最嚴(yán)重的問題是在26、27和54上的RCM反應(yīng)產(chǎn)生的39b、40b和56僅為次要產(chǎn)物。涉及RCM反應(yīng)的主要途徑嚴(yán)格限制于26、27和54的O-烷基部分，導(dǎo)致主要產(chǎn)生不想要的39b和40b。因此，決定嘗試將噻唑的引入(通過烯化作用)推遲到RCM之后(見下頁)。將最終數(shù)克量級的可處理性作為本發(fā)明的目標(biāo)，因此重新構(gòu)建了進(jìn)入RCM反應(yīng)的烷基和?；巍；衔?6如所示的那樣易于合成。將其用于烷基化高度對映體過量的噁唑烷酮7。隨后進(jìn)行OTES基團(tuán)的去保護(hù)和親核甲基化作用，得到化合物90。該α-羥基酮，在制備所有關(guān)鍵性RCM的重要的酯的形成中，用作?；荏w。令人明顯關(guān)注的可能的弱點(diǎn)是，這樣的羥基酮作為?；荏w可部分外消旋化或轉(zhuǎn)化成區(qū)位異構(gòu)的α-酮醇?？商幚淼暮铣善?0本發(fā)明的發(fā)明人以前合成的酸片段25的嚴(yán)重問題是，成本很高并且技術(shù)上需要Duthaler化學(xué)(Duthaler等人Angew.Chem.Int.Ed.Engl.1989，28，495；通過引用并入本發(fā)明)在C3位置上產(chǎn)生想要的S立體化學(xué)。為了回避這個(gè)問題，不用任何手性輔助物而進(jìn)行羥醛反應(yīng)以提供相應(yīng)β-羥基酮的1∶1混合物?？刂扑苌耐倌軋F(tuán)(參見化合物69)不對稱還原的試劑，采用Noyori條件(Noyori等人J.Am.Chem.Soc.1987，109，5856；通過引用并入本發(fā)明)在C3位置上以高對映體過量的形式產(chǎn)生了想要的S立體化學(xué)?，F(xiàn)在將可得到的β-羥基酯70根據(jù)以前的方案在幾步內(nèi)轉(zhuǎn)化為酸25(Chou等人Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.2001，98，8113；通過應(yīng)用并入本發(fā)明)?？商幚淼暮铣伤?5顯著地，將得到的羥基酮43和44用C1-C9酸片段25酯化提供了相應(yīng)的RCM環(huán)化前體45和46，而沒有在C15上明顯外消旋，或者說喪失最初α酮醇成鍵的完整性。45和46的閉環(huán)復(fù)分解反應(yīng)通過采用RCM催化劑(Scholl等人TetrahedronLett.1999，40，2247；Grubbs等人Acc.Chem.Res.1995，28，446；Trnka等人Acc.Chem.Res.2001，34，18；AlkeneMetathesisinOrganicChemistryEd.Fürstner，A；Springer，Berlin，1998；Fürstner，A.Angew.Chem.Int.Ed.Engl.2000，39，3012；Schrock，Top.Organomet.Chem.1998，1，1；每篇文獻(xiàn)通過引用并入本發(fā)明)在甲苯中進(jìn)行。該反應(yīng)，現(xiàn)在由于代用的復(fù)分解途徑而并不復(fù)雜，提供高產(chǎn)率的完全反式異構(gòu)體47和48。通過Wittig反應(yīng)以高的E/Z選擇性和高產(chǎn)率引入噻唑部分，在將兩個(gè)甲硅烷醚脫保護(hù)后得到28和29(Hindupur等人TetrahedronLett.2000，2，7341；通過引用并入本發(fā)明。嘗試應(yīng)用Avery的方案引入噻唑以獲得想要的產(chǎn)物，產(chǎn)率低且E/Z選擇性差)。這條途徑符合服從大量合成的標(biāo)準(zhǔn)。本發(fā)明的發(fā)明人考慮是否在埃坡霉素B(51，EpoB)中引入C9-C10烯將改變其生物特性，以與其12，13-脫氧對應(yīng)物情況相同的方向。為此，本發(fā)明的發(fā)明人研究了采用2，2′-二甲基雙環(huán)氧乙烷(DMDO)對28進(jìn)行環(huán)氧化。該反應(yīng)在較多取代的C12-C13烯上確實(shí)以高立體選擇性而進(jìn)行。獲得產(chǎn)率為87％的比例為1∶2.6的(E)-9，10-脫氫埃坡霉素B(49)和其具有α-12，13-環(huán)氧乙烷的非對映異構(gòu)體(結(jié)構(gòu)未示出)。體外研究49(其在C12和C13構(gòu)型已被建立，將其還原提供EpoB)，顯示其比母體化合物EpoB(51)對各種細(xì)胞系的效力強(qiáng)大約為2-4倍。盡管化合物49在本發(fā)明的發(fā)明人進(jìn)行的程序中被證明是最有效力的埃坡霉素，但其對于異種移植物狹窄的治療指數(shù)，以及其難于獲得性(見上)阻礙了其在臨床前的進(jìn)一步研究。有趣的是，非天然的α-環(huán)氧乙烷幾乎沒有活性?？商幚淼暮铣?E)-9，10-脫氫埃坡霉素如上所述的重新建立的(第二代)合成的另一個(gè)優(yōu)勢為可通過酮中間體39a和40a將各種雜環(huán)引入。這點(diǎn)通過9，10-脫氫-dEpoF的合成而很好的突出。酮與合適的鏻鹽葉立德進(jìn)行的Wittig反應(yīng)以高產(chǎn)率和高E/Z選擇性提供了想要的9，10-脫氫-dEpoF化合物57和59。另外，本發(fā)明的發(fā)明人能夠有效地將21-羥基59轉(zhuǎn)化為96和97型的衍生物，包括在C21位置進(jìn)行氨基官能化，幾步反應(yīng)如下所述。(E)-9，10-脫氫埃坡霉素的C21的多樣化已經(jīng)在抗多種細(xì)胞類型方面評價(jià)本發(fā)明全合成的埃坡霉素同系物，以確定它們的抗腫瘤效力。本發(fā)明的發(fā)明人的發(fā)現(xiàn)的最突出的特征如下通過將E-12，13雙鍵替代C12-C13β環(huán)氧化物，可以預(yù)見大約降低一個(gè)數(shù)量級(對敏感的CCRF-CEM細(xì)胞系比較EpoB和dEpoB)。另一個(gè)可以預(yù)料的為包括E-9，10雙鍵，加上Z-12，13烯，其導(dǎo)致覆蓋幾種細(xì)胞系的細(xì)胞毒性顯著增加。另一個(gè)有益的趨勢可見于12-三氟-E-9，10-脫氫-dEpoB(29)(弗迪隆)與相應(yīng)的E-9，10-脫氫化合物28的比較中。相對于(1)，在C26上包含三個(gè)氟原子減弱了細(xì)胞毒性最高至因子4。這種12-三氟甲基官能團(tuán)的減弱效應(yīng)也可見于缺少9，10-不飽和鍵的化合物中(比較dEpoB(1)和12-三氟-dEpoB(2))。鑒于這些數(shù)據(jù)，和鑒于這些9，10-脫氫化合物(包括12-三氟同類物)通過化學(xué)合成的可得到性，本發(fā)明的發(fā)明人開始用本發(fā)明最有前景的化合物進(jìn)行體內(nèi)實(shí)驗(yàn)。本發(fā)明人在此描述了用化合物29(弗迪隆)的一些特別驚人的和有前景的結(jié)果，化合物29已經(jīng)顯示出用于進(jìn)一步臨床評價(jià)的最令人興奮的可能性。在免疫缺陷裸鼠中利用人腫瘤異種移植物進(jìn)行體內(nèi)實(shí)驗(yàn)。盡管有它們的缺點(diǎn)，這種在腫瘤學(xué)中的模型仍被廣泛用于評價(jià)(Fiebig，H.H.；Berger，D.P.；PreclinicalPhaseIItrials。在Boven，E.和Winograd，B.編輯的TheNudeMouseinOncologyResearch中，CRCPress，BocaRaton(1995)，318；通過應(yīng)用并入本發(fā)明)可能的抗腫瘤先導(dǎo)化合物以開展臨床研究。顯著地，用30mg/kg劑量的弗迪隆治療MX-1異種移植物，其導(dǎo)致腫瘤完全消失并且在停止治療后2個(gè)月沒有任何復(fù)發(fā)(參見圖6A)。最重要的是，這些成功的治療可或者通過6小時(shí)靜脈內(nèi)灌注或者通過口服給藥而完成(參見圖6B和10A)。另一方面，通過口服他克唑治療MX-1異種移植物沒有影響該腫瘤(參見圖6B和10A)。不言而喻，如果轉(zhuǎn)移到人的臨床環(huán)境中，獲得口服活性將是顯著有益的。他克唑耐藥性腫瘤異種移植物(圖7A)以及人結(jié)腸癌(HCT-116，圖9A)也可以用弗迪隆通過靜脈內(nèi)灌注而治愈。在裸鼠中用人乳癌(MX-1)和人結(jié)腸癌(HCT-116)異種移植物進(jìn)行的實(shí)驗(yàn)分別持續(xù)6.0和6.6個(gè)月。在停止治療后，在兩個(gè)實(shí)驗(yàn)中各自在4.3和5.3個(gè)月中沒有腫瘤復(fù)發(fā)。對于HCT-116實(shí)驗(yàn)，在20mg/kg下比較他克唑和弗迪隆，兩者都使腫瘤消失他克唑治療的組在治療中止后1.1個(gè)月復(fù)發(fā)，然而弗迪隆治療的動(dòng)物腫瘤消失超過5.3個(gè)月。這些結(jié)果涉及特別長的并貫穿整個(gè)治療的研究，所述研究采用異種移植物并引人注目地報(bào)告了用單一抗腫瘤劑腸胃外用藥或口服用藥而長期完全消退病癥。實(shí)驗(yàn)例一般性藥理學(xué)方法腫瘤和細(xì)胞系。CCRF-CEM人淋巴母細(xì)胞性白血病細(xì)胞和其長春堿耐藥性的亞系(CCRF-CEM/VBL100，720倍耐藥性)得自Chicago，Illinois大學(xué)的WilliamBeck博士，并且CCRF-CEM/他克唑(體外44倍耐藥性)通過在六個(gè)月中將CCRF-CEM細(xì)胞暴露于不斷增加的至致死的濃度(IC50-IC90)的紫杉醇中而制備。人乳癌(MX-1)、人肺癌細(xì)胞(A549)和人結(jié)腸癌(HCT-116)細(xì)胞得自美國典型培養(yǎng)物保藏中心(ATCC，Rockville，MD)。動(dòng)物。帶有nu/nu基因的無胸腺裸鼠得自NCI，F(xiàn)rederick，MD并用于所有的人腫瘤異種移植。除了另外指出雌性裸鼠，使用6星期以上的體重20-22g或更重的雄性裸鼠。使用自制的灌輸微管和限制器通過尾靜脈靜脈內(nèi)灌注6小時(shí)給藥。具有多通道的可程控的HarvardPHD2000注射泵被用于靜脈內(nèi)灌注。典型的6小時(shí)灌輸體積對在可利福/乙醇(1∶1)中的每種藥物而言為2.0ml鹽水中含有100μl。對于口服給藥，弗迪隆和他克唑均溶解于乙醇中并用吐溫-80稀釋5倍。他克唑溶液應(yīng)在5min內(nèi)使用以避免沉淀。腫瘤體積通過測徑器測量長×寬×高(或?qū)?而估算。對于帶有腫瘤的裸鼠，實(shí)驗(yàn)過程中其體重是指總重減去腫瘤的重量。所有的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)均根據(jù)NationalInstituteofHealthGuidefortheCareandUseofAnimals的指導(dǎo)原則和由MemorialSloan-KetteringCancerCenter′sInstitutionalAnimalCareandUseCommittee批準(zhǔn)的規(guī)程而實(shí)施。細(xì)胞毒性試驗(yàn)。為準(zhǔn)備體外細(xì)胞毒性試驗(yàn)，細(xì)胞培養(yǎng)于初始密度為2-5×104個(gè)細(xì)胞每毫升。將它們保存于5％CO2-濕潤氣氛的37℃的RPMI介質(zhì)1640(GIBCO/BRL)中，所述RPMI介質(zhì)1640包含青霉素(100單位/mL)、鏈霉素(100μg/mL，GIBCO/BRL)和5％熱滅活的FBS。對于在單層中生長的實(shí)體腫瘤細(xì)胞(例如HCT-116和A549)，藥物的細(xì)胞毒性通過使用磺酰羅丹明B方法(Skehan等人J.Natl.CancerInst.(1990)82，1107-1112，通過引用并入本發(fā)明)在96-孔微量滴定板上測定。對于生長于混懸液中的細(xì)胞(例如CCRF-CEM及其亞系)，通過使用二甲氧唑磺(2，3-bis-(2-methoxy-4-nitro-5-sulfophenyl)-5-carboxanilide)-2H-terazodiumhydroxide(XTT))微管法(Scudiero等人CancerRes.(1988)48，4827；通過引用并入本發(fā)明)在96孔微量滴定板上一式兩份進(jìn)行測量。對于兩種方法，每個(gè)孔的吸光度用微量滴定板讀板機(jī)(PowerWaveXS，Bio-Tek，Winooski，VT)測量。劑量-效果的關(guān)系數(shù)據(jù)由每種藥物的6至7個(gè)濃度，一式兩份，通過使用計(jì)算機(jī)程序(Chou，T.-C.&Talalay，P.T.Adv.EnzymeReg.1984，22，27；Chou，T.-C.&Hayball，M.CalcuSynforWindows(Biosoft，Cambridge，U.K.)(1997)；其中每篇文獻(xiàn)通過引用并入本發(fā)明)以中效圖而分析。一般性化學(xué)方法使用得自商業(yè)供貨商的試劑不用進(jìn)一步純化，除非另有說明。下述溶劑由干燥溶劑系統(tǒng)(通過預(yù)填充的氧化鋁柱)獲得，并無需進(jìn)一步干燥而被使用四氫呋喃、二氯甲烷、乙醚、苯和甲苯。從氫化鈣中蒸餾三乙胺、N，N-二異丙基乙胺、二異丙胺、吡啶和2，6-二甲基吡啶。所有對空氣和水敏感的反應(yīng)均在經(jīng)火焰干燥的玻璃器皿中在超純氮?dú)饣驓鍤獾恼龎簵l件下而進(jìn)行。NMR(1H和13C)光譜在BrukerAMX-400MHz或BrukerAdvanceDRX-500MHz上如分別說明的那樣記錄，參照CDCl3(對于1H7.27ppm和對于13C77.1ppm)。紅外光譜(IR)在Perkin-ElmerFT-IRmodel1600光譜儀上獲得。旋光度在JASCOmodelDIP-370數(shù)字旋光計(jì)上獲得。低分辨率(電噴射)質(zhì)譜在PESCIEXAPI100上記錄。分析薄層色譜在E.Merck硅膠60F254板上進(jìn)行。對紫外沒有活性的化合物通過將硅膠板浸漬于乙醇的對甲氧基苯甲醛溶液、乙醇的磷鉬酸或鉬酸鈰氨中或/和加熱而顯影。制備性薄層色譜在Whatman(LK6F硅膠60A)TLC板上使用指定的溶劑而進(jìn)行。硅膠色譜法在Davisil(1740級，60A型，170-400目)硅膠上使用指定的溶劑進(jìn)行?；瘜W(xué)位移以相對于氯仿(NMR對于質(zhì)子δ7.24和對于碳δ77.0)的δ值報(bào)告。在室溫下向4，4，4-三氟乙酰乙酸乙酯(24.0mL，0.164mol)的THF-水(3∶1＝V∶V，320mL)的溶液中加入烯丙基溴(20.0mL，1.4當(dāng)量)，隨后加入銦(粉，-100目，25g，1.3當(dāng)量)，并將所得到的混合物在48℃下攪拌15h。將該反應(yīng)混合物冷卻至室溫，用2N的HCl水溶液(400mL)淬滅，并用CH2Cl2(400mL，2×200mL)萃取。將合并的有機(jī)相干燥(MgSO4)，過濾，并在真空下濃縮。急驟層析(己烷→己烷-乙醚10∶1→8∶1→6∶1→4∶1)給出的醇為澄清油狀物(31.64g，85％產(chǎn)率)IR(film)3426(brm)，2986(m)，1713(s)，1377(m)，1345(m)，1301(m)，1232(m)，1173(s)，1095(m)，1023(m)，927(m)cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ5.82(m，1H)，5.15(m，3H)，4.17(m，2H)，2.59(m，1H)，2.58(d，J＝3.4Hz，2H)，2.29(dd，J＝14.2，8.6Hz，1H)，1.24(t，J＝7.2Hz，3H)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ172.08，130.89，125.65(q，J＝280Hz)，120.27，73.79(q，J＝28Hz)，61.55，38.97，35.65，13.82；高分辨率質(zhì)譜m/z227.0895[(M+H)+；C9H14O3F3計(jì)算值227.0895]。該醇為揮發(fā)性的。經(jīng)柱色譜后，不將該醇徹底濃縮。產(chǎn)率由總重和通過NMR積分而獲得的產(chǎn)物和溶劑間的比而確定。將醇(16.71g，0.07386mol)和吡啶(15.0mL，2.5當(dāng)量)的混合物冷卻至-10℃并于11min內(nèi)用亞硫酰氯(11.3mL，2.1當(dāng)量)緩慢處理(黃色沉淀)。將所得的混合物溫?zé)嶂?5℃(在75℃下加熱17h得到氯化產(chǎn)物的復(fù)雜混合物)并攪拌12h。將反應(yīng)混合物冷卻至-5℃，用水(200mL)淬滅并用CH2Cl2(2×200mL，2×150mL)萃取。合并的有機(jī)相用飽和NaHCO3(2×200mL)和鹽水(200mL)洗滌，干燥(MgSO4)并在真空下濃縮。急驟層析(戊烷∶乙醚15∶1)給出的酯(11.90g，77％產(chǎn)率)為黃色油狀物IR(film)2986(w)，1731(s)，1308(s)，1265(w)，1227(m)，1197(s)，1133(s)，1025(m)，920(w)，896(w)cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ6.36(s，1H)，5.79(ddt，J＝16.9，10.2，6.6Hz，1H)，5.15(dd，J＝17.1，1.5Hz，1H)，5.08(dd，J＝10.0，1.4Hz，1H)，4.22(q，J＝7.1Hz，2H)，3.44(d，J＝6.5Hz，2H)，1.29(t，J＝7.1Hz，3H)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ164.22，143.37(q，J＝29Hz)，132.71，123.21(q，J＝274Hz)，122.60(q，J＝6Hz)，117.32，60.85，30.54，13.85；高分辨率質(zhì)譜m/z209.0788[(M+H)+；C9H12O2F3計(jì)算值227.0789]。該酯是揮發(fā)性的。經(jīng)過柱色譜后，不將該酯徹底濃縮。向冷卻的(-75℃)所述酯(7.12g，0.0342mol)的CH2Cl2(120mL)溶液中，在35min內(nèi)加入DIBAL-H(75mL，2.2當(dāng)量)的CH2Cl2溶液(1.0M)，將所得的溶液在3h內(nèi)溫?zé)嶂潦覝?。將反?yīng)混合物冷卻至0℃，用飽和NH4Cl(12mL)淬滅并在室溫?cái)嚢?0min。將反應(yīng)混合物用乙醚(200mL)稀釋，干燥(MgSO4)并真空濃縮。急驟層析(戊烷∶乙醚3∶1→1∶1)給出的醇(5.68g，99％)為澄清油狀物IR(film)3331(brs)，2929(m)，1642(m)，1445(m)，1417(w)，1348(s)，1316(s)，1217(s)，1175(s)，1119(s)，1045(m)，985(s)，921(m)，831(w)cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ6.33(td，J＝6.1，1.6Hz，1H)，5.75(ddt，J＝17.2，10.0，6.2Hz，1H)，5.07(m，2H)，4.29(ddd，J＝6.3，4.3，2.1Hz，2H)，2.95(d，J＝6.2Hz，2H)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ134.45(q，J＝6Hz)，133.38，127.97(q，J＝29Hz)，123.76(q，J＝271Hz)，116.25，57.87，29.79。醇56是揮發(fā)性的。經(jīng)過柱色譜后，不將56徹底濃縮。將冷卻的(0℃)醇(5.97g，0.0358mol)的CH2Cl2(50mL)溶液用PPh3(11.17g，1.2當(dāng)量)、咪唑(3.55g，1.5當(dāng)量)和I2(9.10g，1.1當(dāng)量)處理(最后加入I2)，將所得的(黃色渾濁)混合物在0℃下攪拌10min。該反應(yīng)混合物用飽和Na2S2O3飽和的NaHCO3(1∶1＝V∶V，200mL)溶液淬滅并用戊烷萃取(3×200mL)。合并的有機(jī)相用飽和Na2S2O3飽和的NaHCO3(1∶1＝V∶V，200mL)溶液和鹽水(100mL)洗滌，干燥(MgSO4)并在真空下濃縮。急驟層析(戊烷)給出的碘化物(6.69g，68％)為淡紅色油狀物(貯藏于-78℃冷凍箱中)IR(film)3083(w)，2982(w)，1636(w)，1558(w)，1456(w)，1367(w)，1317(s)，1216(m)，1181(s)，1151(s)，1120(s)，989(m)，921(m)，896(m)cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ6.45(td，J＝8.9，1.5Hz，1H)，5.79(ddt，J＝16.8，10.3，6.2Hz，1H)，5.12(m，2H)，3.85(ddd，J＝8.9，2.9，1.4Hz，2H)，3.00(dt，J＝6.1，1.4Hz，2H)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ132.42，131.64(q，J＝6Hz)，129.63(q，J＝29Hz)，123.64(q，J＝272Hz)，117.00，29.32，-4.27；低分辨率質(zhì)譜m/z298.7[(M+Na)+；C7H8F3INa計(jì)算值299.0]。該烯丙基碘是揮發(fā)性的。經(jīng)過柱色譜后，不將該烯丙基碘徹底濃縮。α-羥基噁唑烷酮。向冷卻的(-78℃)TES保護(hù)的4-芐基-3-羥基乙?；?噁唑烷-2-酮(16.28g，1.92當(dāng)量)的THF(160mL)溶液中，在51min內(nèi)滴加LHMDS(42mL，1.73當(dāng)量)的THF溶液(1.0M)，將所得到的混合物在-78℃下攪拌35min。該反應(yīng)混合物于15min內(nèi)用烯丙基碘(6.69g，24.2mmol)的THF(10mL)溶液處理，將所得的混合物緩慢溫?zé)嶂潦覝剡^夜。該反應(yīng)混合物用飽和NaHCO3(200mL)淬滅并用EtOAc萃取(3×200mL)。合并的有機(jī)相用飽和NH4Cl(150mL)、鹽水(150mL)洗滌，干燥(MgSO4)并在真空下濃縮。急驟層析(己烷-EtOAc6∶1→3∶1)給出烷基化產(chǎn)物混合物(13.6g)，其用于下步反應(yīng)而不必進(jìn)一步純化(在此階段不分離非對映異構(gòu)體)。將所述烷基化產(chǎn)物的HOAc-水-THF溶液(3∶1∶1＝V∶V∶V，200mL)在室溫下攪拌4h。將反應(yīng)混合物真空濃縮以除去HOAc，用飽和NaHCO3(400mL)淬滅并用EtOAc萃取(3×200mL)。將合并的有機(jī)相干燥(MgSO4)并在真空下濃縮。急驟層析(己烷∶EtOAc3∶1→2∶1)給出α-羥基噁唑烷酮(7.55g，兩步的產(chǎn)率為81％)為澄清油狀物[α]D20(25℃)-48.2°(c1.08，CHCl3)；IR(film)3486(brs)，3030(m)，2983(s)，2925(m)，1790(s)，1682(s)，1481(m)，1393(m)，1360(m)，1217(m)，1171(m)，1113(m)，992(m)，919(m)，847(w)cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.32(m，3H)，7.17(m，2H)，6.33(td，J＝7.2，1.5Hz，1H)，5.77(ddt，J＝16.6，10.1，6.2Hz，1H)，5.08(m，3H)，4.74(ddt，J＝4.8，3.7，4.4Hz，1H)，4.33(dd，J＝8.6，8.6Hz，1H)，4.26(dd，J＝9.2，3.4Hz，1H)，3.42(brd，J＝6.4Hz，1H)，3.24(dd，J＝13.5，3.4Hz，1H)，2.99(m，2H)，2.79(dd，J＝13.5，9.4Hz，1H)，2.70(m，1H)，2.50(m，1H)；13CNMR(125MHz，CDCl3)δ173.93，153.05，134.43，133.64，129.98(q，J＝6Hz)，129.82(q，J＝28Hz)，129.29，120.01，127.58，124.00(q，J＝272Hz)，116.34，69.60，67.31，54.95，37.78，32.29，29.84；高分辨率質(zhì)譜m/z384.1421[(M+H)+；C19H21NO4F3計(jì)算值384.1423]。α-羥基酰胺。(MeO)NHMe.HCl(10.1g，5.25當(dāng)量)的THF(100mL)懸浮液在0℃下用AlMe3(50mL，5.1當(dāng)量)的甲苯溶液(2.0M)滴加處理，并將所得到的澄清溶液在室溫下攪拌34min，然后緩慢加入到冷卻的(0℃)α-羥基噁唑烷酮(7.55g，19.7mmol)的THF(70mL)溶液中(混濁→澄清，淡黃色)。將所得到的混合物溫?zé)嶂潦覝夭嚢?2h。將反應(yīng)混合物冷卻至0℃，通過緩慢加入1N的酒石酸水溶液(100mL)淬滅，室溫下攪拌25min，用EtOAc萃取(3×200mL)。將合并的有機(jī)相干燥(MgSO4)并在真空下濃縮。急驟層析(己烷∶EtOAc2∶1→1∶1)給出的α-羥基酰胺(5.12g，產(chǎn)率97％)為澄清油狀物[α]D20(24℃)-57.2°(c1.03，CHCl3)；IR(film)3432(brs)，3084(w)，2980(m)，2943(m)，1652(s)，1464(m)，1373(m)，1318(m)，1214(m)，1171(m)，1112(m)，991(m)，919(m)，818(w)cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ6.32(td，J＝7.3，1.5Hz，1H)，5.74(ddt，J＝16.9，10.3，6.1Hz，1H)，5.05(m，2H)，4.43(dd，J＝7.6，3.5Hz，1H)，3.70(s，3H)，3.35(brs，1H)，3.24(s，3H)，2.94(d，J＝6.1Hz，2H)，2.59(m，1H)，2.36(m，1H)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ173.43，133.68，130.59(q，J＝6Hz)，129.25(q，J＝28Hz)，124.05(q，J＝271Hz)，116.17，67.57，61.44，32.56，32.38，29.75；高分辨率質(zhì)譜m/z268.1161[(M+H)+；C11H17NO3F3計(jì)算值268.1161]。α-羥基酮。向冷卻的(0℃)α-羥基酰胺(4.87g，18.2mmol)的THF(150mL)溶液中加入MeMgBr(75mL，12當(dāng)量)的乙醚溶液(3.0M)。5min后，將該反應(yīng)混合物用飽和NH4Cl(250mL)淬滅并用EtOAc萃取(5×200mL)。將合并的有機(jī)相干燥(MgSO4)并在真空下濃縮。急驟層析(己烷∶EtOAc4∶1→2∶1→1∶2)給出的α-羥基酮(2.16g，產(chǎn)率53％，基于回收的原料計(jì)產(chǎn)率為73％)為澄清油狀物，并且給出原料α-羥基酰胺(1.30g，收率為27％)[α]D20(23℃)+58.5°(c1.30，CHCl3)；IR(film)3460(brs)，3085(w)，2984(m)，2926(m)，1716(s)，1679(m)，1641(m)，1417(m)，1361(m)，1319(s)，1247(m)，1216(s)，1172(s)，1113(s)，1020(m)，994(m)，968(w)，919(m)cm-1；1HNMR(500MHz，CDCl3)δ6.21(t，J＝7.0Hz，1H)，5.75(ddt，J＝16.7，10.4，6.2Hz，1H)，5.07(m，2H)，4.26(dt，J＝7.1，4.5Hz，1H)，3.51(d，J＝4.7Hz，1H)，2.96(d，J＝6.1Hz，2H)，2.66(m，1H)，2.42(m，1H)，2.19(s，3H)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ208.53，133.43，129.80(q，J＝28Hz)，129.76(q，J＝6Hz)，123.85(q，J＝271Hz)，116.32，75.36，31.22，29.81，25.11；高分辨率質(zhì)譜m/z223.0945[(M+H)+；C10H14NO2F3計(jì)算值223.0946]。這個(gè)反應(yīng)即使使用過量MeMgBr也不能進(jìn)行完全。碳酸1-(2芐氧基-1-甲基乙基)-5，5-二異丙氧基-2，4，4-三甲基-3-氧代戊酯2，2，2-三氯乙基酯。向0℃下的7-芐氧基-5-羥基-1，1-二異丙氧基-2，2，4，6-四甲基-庚-3-酮(1.0g，2.4mmol)和吡啶(0.8mL，7.3mmol)的CH2Cl2(10.0mL)溶液中加入氯甲酸2，2，2-三氯乙酯(668.0μL，4.9mmol)，然后將所得的混合物溫?zé)嶂潦覝亍?h后，將反應(yīng)混合物用鹽水淬滅并用CH2Cl2萃取。將合并的有機(jī)層經(jīng)MgSO4干燥并在減壓下濃縮。粗產(chǎn)物通過急驟層析(梯度己烷至己烷/EtOAc93∶7)純化給出想要的產(chǎn)物(1.285g，92％)為澄清油狀物1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.03-1.09(m，12H)，1.15(d，J＝1.8Hz，3H)，1.17(d，J＝1.9Hz，3H)，1.19-1.21(m，6H)，1.97-2.11(m，1H)，3.2(dd，J＝6.2和9.0Hz，1H)，3.54(dd，J＝4.8和9.1Hz，1H)，3.57-3.60(m，1H)，3.82(qd，J＝3.6和5.9Hz，2H)，4.47(s，2H)，4.57(s，1H)，4.72(d，J＝11.9Hz，1H)，4.81(d，J＝11.9Hz，1H)，5.08(t，J＝6.0Hz，1H)，7.29-7.35(m，5H)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ11.9，15.0，18.8，21.4，21.7，22.3，23.2，23.4，35.7，42.5，53.4，53.9，69.4，70.9，71.4，73.3，81.3，94.7，103.4，127.5，127.6，128.2，138.2，154.0，215.6；IR(film，NaCl，cm-1)2966，1760，1698，1247；LRMS(ESI)C27H41O7Cl3Na[M+Na+]計(jì)算值605.2，實(shí)驗(yàn)值605.2；[α]23D＝-20.4(c＝1.0，CHCl3)。碳酸1-(2芐氧基-1-甲基乙基)-2，4，4-三甲基-3，5-二氧代戊酯2，2，2-三氯乙基酯。向原料(1.28g，2.25mmol)的4∶1的THF/H2O(25mL)溶液中加入p-TsOH(111.0mg，0.6mmol)。在70℃下加熱5h后，將反應(yīng)混合物傾入冷的(0℃)飽和NaHCO3水溶液中(12mL)，然后用EtOAc萃取。將合并的有機(jī)層用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥并在減壓下濃縮。粗產(chǎn)物經(jīng)急驟層析(梯度己烷至己烷/EtOAc84∶16)純化給出的產(chǎn)物(793.2mg，76％)為澄清油狀物1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.90(d，J＝5.8Hz，3H)，1.0(d，J＝6.9Hz，3H)，1.24(s，6H)，1.97-2.04(m，1H)，3.24(dd，J＝4.8和9.2Hz，1H)，3.34(m，1H)，3.42(dd，J＝5.8和9.2Hz，1H)，4.35(d，J＝11.9Hz，1H)，4.39(d，J＝11.9Hz，1H)，4.64(d，J＝11.9Hz，1H)，4.69(d，J＝11.9Hz，1H)，4.96(t，J＝6.0Hz，1H)，7.19-7.28(m，5H)，9.49(s，1H)；13CNMR(100MHz，CDCl3)-12.0，14.8，19.5，19.6，35.4，43.3，60.9，71.1，73.3，80.37，94.5，127.7，127.8，128.3，137.9，154.1，201.0，210.1；IR(film，NaCl，cm-1)2973，2880，1758，1701，1453，1380，1248；LRMS(ESI)C21H27O6Cl3Na[M+Na+]計(jì)算值503.0，實(shí)驗(yàn)值503.0；[α]23D＝-18.5(c＝0.8，CHCl3)。9-芐氧基-4，4，6，8-四甲基-3，5-二氧代-7-(2，2，2-三氯乙氧基羰基氧基)-壬酸叔丁酯。在-78℃下向LDA(1.17mmol，在Et2O中0.3M)的溶液中加入乙酸叔丁酯(1.0mmol，135.0μl)。30min后，在15min內(nèi)緩慢加入原料(464.0mg，1mmol)的Et2O(2mL)溶液。攪拌1h后，用飽和NH4Cl水溶液淬滅反應(yīng)并然后用EtOAc萃取。合并的有機(jī)層用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥并在減壓下濃縮。粗產(chǎn)物用急驟層析(梯度己烷至己烷/EtOAc86∶14)純化給出的產(chǎn)物(1∶1差向異構(gòu)體混合物461.4mg，80％)為澄清油狀物1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.87(d，J＝5.3Hz，3H)，0.89(d，J＝5.5Hz，3H)，1.02-1.10(m，18H)，1.38(s，18H)，1.97-2.2(m，2H)，2.27-2.31(m，2H)，3.22-3.27(m，3H)，3.39-3.48(m，5H)，4.03-4.06(m，1H)，4.11-4.14(m，1H)，4.38-4.45(m，4H)，4.58-4.73(m，4H)，4.97(t，J＝5.8Hz，1H)，5.02(t，J＝5.8Hz，1H)，7.18-7.27(m，10H)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ11.9，12.7，14.9，15.2，18.7，19.3，21.4，21.6，28.0，35.6，37.4，41.7，42.0，51.8，51.9，71.3，71.3，72.5，73.0，73.3，73.3，80.6，81.2，81.3，94.6，127.5，127.7，127.8，128.3，138.0，138.1，154.0，154.1，172.3，172.4，216.0，216.3；IR(film，NaCl，cm-1)3509，2975，1759，1707，1368，1248，1152；LRMS(ESI)C27H39O8Cl3Na[M+Na+]計(jì)算值619.1，實(shí)驗(yàn)值619.2。向原料(350.0mg，0.6mmol)的CH2Cl2(10mL)的0℃溶液中加入Dess-Martin過碘烷(periodinane)(398.0mg，0.9mmol)。將該混合物在室溫下攪拌1h然后傾入到攪拌充分的1∶1的飽和Na2S2O3/飽和NaHCO3混合物中。30min后分層。水層用Et2O萃取三次。合并有機(jī)萃取物，用飽和NaHCO3、鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥并在真空下濃縮。粗產(chǎn)物用急驟層析(梯度己烷至己烷/EtOAc91∶9)純化給出的產(chǎn)物(258.4mg，74％)為澄清油狀物1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.80(d，J＝6.9Hz，3H)，0.87(d，J＝6.9Hz，3H)，1.13(s，3H)，1.19(s，3H)，1.23(s，9H)，2.04-2.12(m，1H)，3.09-3.28(m，5H)，4.23(s，2H)，4.48(d，J＝11.9Hz，1H)，4.55(d，J＝11.9Hz，1H)，4.79(dd，J＝4.6和7.3Hz，1H)，7.04-7.13(m，5H)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ11.7，14.6，20.7，21.5，27.9，35.5，42.2，43.4，63.3，71.3，73.3，79.9，81.5，90.5，94.5，127.6，127.7，128.2，138.0，154.0，166.2，202.9，210.0；IR(film，NaCl，cm-1)2977，1758，1697，1368，1248，1154；LRMS(ESI)C27H37O8Cl3Na[M+Na+]計(jì)算值617.1，實(shí)驗(yàn)值617.1；[α]23D＝-49.1(c＝0.9，CHCl3)。9-芐氧基-3-羥基-4，4，6，8-四甲基-5-氧代-7-(2，2，2-三氯乙氧基羰基氧基)-壬酸叔丁酯。用(R)-RuBINAP催化劑(16.8mg，10.0pmol)裝填容器襯里(bombliner)。加入HCl(555μL，在甲醇中0.2N)，并將該混合物超聲15sec。然后將原料(59.4mg，0.1mmol)的甲醇(555μL)溶液加入并將該混合物轉(zhuǎn)移到Parr裝置中。將該容器用H2清洗5min，然后加壓至1200psi。17h后，反應(yīng)回到大氣壓下并將其傾入飽和NaHCO3水溶液中。水層用EtOAc萃取三次。合并的有機(jī)萃取物經(jīng)MgSO4干燥并在減壓下濃縮。粗產(chǎn)物用急驟層析(梯度己烷至己烷/EtOAc88∶12)純化給出的產(chǎn)物(47.6mg，80％)為澄清油狀物1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.06(d，J＝6.9Hz，3H)，1.11(d，J＝6.8Hz，3H)，1.14(s，3H)，1.18(s，3H)，1.47(s，9H)，2.05-2.12(m，1H)，2.35-2.40(m，1H)，3.31-3.37(m，2H)，3.51-3.54(m，2H)，4.11-4.14(m，1H)，4.46(s，2H)，4.72(d，J＝11.9Hz，1H)，4.80(d，J＝11.9Hz，1H)，5.05(dd，J＝5.0和6.7Hz，1H)，7.27-7.35(m，5H)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ12.0，15.0，19.3，21.7，28.0，35.6，37.5，41.7，51.8，71.3，73.0，73.3，80.6，81.3，94.7，127.5，127.7，128.3，138.2，154.1，172.4，216；IR(film，NaCl，cm-1)3849，2974，2879，1758，1701，1454，1368，1248，1152，926，734；LRMS(ESI)C27H39O8Cl3Na[M+Na+]計(jì)算值619.1，實(shí)驗(yàn)值619.2；[α]23D＝-13.0(c＝0.4，CHCl3)。9-芐氧基-4，4，6，8-四甲基-5-氧代-7-(2，2，2-三氯乙氧基羰基氧基)-3-(三乙基硅烷氧基)-壬酸叔丁酯。在0℃下向原料(37.6mg，6.3μmol)和咪唑(9.4mg，13.8μmol)的DMF(0.4mL)溶液中加入TESCl(11.6μl，69.3μmol)。3h后，用飽和NaHCO3水溶液稀釋該混合物。水層用己烷萃取三次。合并的有機(jī)萃取物用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥并在減壓下濃縮。粗產(chǎn)物通過急驟層析(梯度己烷至己烷/EtOAc93∶7)純化，以洗脫順序得到產(chǎn)物(22.9mg，51％)和回收的原料(12.9mg，34％)為澄清油狀物1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.66(q，J＝7.9Hz，6H)，0.96(t，J＝7.9Hz，9H)，1.01(s，3H)，1.05(d，J＝5.2Hz，3H)，1.07(d，J＝5.3Hz，3H)，1.35(s，3H).1.44(s，9H)，2.05-2.11(m，2H)，2.50(dd，J＝3.5和17.2Hz，1H)，3.35(dd，J＝5.9和9.0Hz，1H)，3.49(dd，J＝4.0和9.0Hz，1H)，3.53(dd，J＝3.8和6.7Hz，1H)，4.18(dd，J＝3.5和6.5Hz，1H)，4.45(s，2H)，4.65(d，J＝11.9Hz，1H)，4.79(d，J＝11.9Hz，1H)，4.97(dd，J＝3.7和8.1Hz，1H)，7.29-7.52(m，5H)；13CNMR(125MHz，CDCl3)δ5.3，7.3，10.9，14.9，21.3，22.6，28.4，35.9，41.1，42.7，53.7，71.9，73.7，75.7，80.1，80.9，95.1，127.9，128.0，128.7，138.6，154.3，171.7，215.7；IR(film，NaCl，cm-1)2956，2876，1732，1694，1456，1366，1257，1154，1098，988，835，774，741；LRMS(ESI)C33H53O8SiCl3Na[M+Na+]計(jì)算值733.2，實(shí)驗(yàn)值733.3。[α]23D＝-16.1(c＝0.1，CHCl3)。9-芐氧基-3-(二乙基甲基硅烷氧基)-7-羥基-4，4，6，8-四甲基-5-氧代-壬酸叔丁酯。向原料(22.9mg，3.2μmol)的1∶1THF/AcOH(1.4mL)溶液中加入Zn(5.0mg，7.8μmol，納米級)。將該混合物超聲15min。加入更多的Zn(5.0mg，7.8μmol，納米級)，隨后再超聲15min。該懸浮液通過C鹽墊過濾，用EtOAc洗滌數(shù)次。濾出液用飽和NaHCO3、鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥并在真空下濃縮。將粗殘余物通過硅膠短塞，用己烷/EtOAc4∶1洗脫，給出17.1mg(99％收率)的產(chǎn)物為無色油狀物1HNMR(400MHz，CDCl3)δ(m，6H)，0.96(t，J＝7.9Hz，9H)，0.97(d，J＝6.8Hz，3H)，1.05(d，J＝6.8Hz，3H)，1.11(s，3H)，1.26(s，3H)，1.44(s，9H)，1.84-1.90(m，1H)，2.21(dd，J＝6.7和17.0Hz，1H)，2.36(dd，J＝6.7和17.0Hz，1H)，3.24-3.29(m，1H)，3.44-3.52(m，2H)，3.67(dd，J＝3.9和8.9Hz，1H)，4.36(dd，J＝3.5和6.5Hz，1H)，4.50(d，J＝12.0Hz，1H)，4.54(d，J＝12.0Hz，1H)，7.32-7.36(m，5H)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ5.0，6.9，9.7，13.9，20.2，21.8，28.0，36.3，40.8，41.5，53.7，72.5，72.9，73.2，73.6，80.7，127.4，127.5，128.2，138.6，171.0，221.4；IR(film，NaCl，cm-1)3502，2959，2875，1731，1683，1456，1366，1154，1098，996，739；LRMS(ESI)C30H52O6SiCl3Na[M+Na+]計(jì)算值559.3，實(shí)驗(yàn)值559.3；[α]23D＝-41.0(c＝0.4，CHCl3)。9-芐氧基-7-(叔丁基二甲基硅烷氧基)-3-(二乙基甲基硅烷氧基)-4，4，6，8-四甲基-5-氧代-壬酸叔丁酯。在-78℃下向原料(4.1mg，7.6μmol)和2，6-二甲基吡啶(10.0μl，43.5mmol)的CH2Cl2(0.2mL)溶液中加入TBSOTf(10.0μl，85.8mmol)。2h后，加入更多的2，6-二甲基吡啶(10.0μl，43.5mmol)和TBSOTf(10.0μl，85.8mmol)。6h后將該混合物用飽和NaHCO3水溶液稀釋。水層用EtOAc萃取三次。將合并的有機(jī)萃取物用鹽水洗滌，經(jīng)MgSO4干燥并在減壓下濃縮。粗產(chǎn)物用急驟層析(梯度己烷至己烷/EtOAc91∶9)純化給出的產(chǎn)物(5.4mg，82％)為澄清油狀物。光譜數(shù)據(jù)很好地符合于已經(jīng)報(bào)導(dǎo)的值。將酸和醇與無水苯(5mL×2)共沸并在反應(yīng)前于高真空下干燥。在0℃下向醇(639mg，2.63mmol)的CH2Cl2(13mL)溶液中加入EDCI(576mg，3.09mmol)和DMAP(366mg，3.09mmol)。在0℃下向該混合物中滴加酸(1.11g，相當(dāng)于1.88mmol)的CH2C12(5mL+2mL沖洗)溶液16min以上。在0℃下攪拌1.5h后，將該混合物在室溫下攪拌3.5h。將反應(yīng)混合物濃縮后，殘余物通過急驟柱層析(SiO2，己烷/EtOAc＝30∶1至20∶1)純化給出的酯(1.20g，1.61mmol，由叔丁酯計(jì)86％)為無色油狀物。[α]D24-25.1(c1.30，CHCl3)；IR(film)ν2955，2925，2872，1732，1696，1461，1378，1290，1243，1173，1091，985，873，773cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.06(3H，s)，0.06(3H，s)，0.58-0.66(6H，m)，0.92(9H，s)，0.95(9H，t，J＝8.0Hz)，1.02(3H，d，J＝6.5Hz)，1.03(3H，d，J＝6.5Hz)，1.07(3H，s)，1.21(3H，s)，1.67(3H，s)，2.07(3H，s)，2.05-2.12(1H，m)，2.30(1H，dd，J＝16.9，7.5Hz)，2.39(1H，dt，J＝14.8，6.7Hz)，2.49(1H，dd，J＝17.0，3.0Hz)，2.50(1H，dt，J＝14.8，6.7Hz)，2.70(3H，s)，2.74-2.30(2H，m)，3.07(1H，dd，J＝7.0Hz)，3.83(1H，dd，J＝7.1，2.0Hz)，4.35(1H，dd，J＝7.4，2.8Hz)，4.98-5.07(4H，m)，5.16(1H，brt，J＝7.0Hz)，5.23(1H，t，J＝6.9Hz)，5.74(1H，ddt，J＝16.7，10.2，6.5Hz)，5.91(1H，ddd，J＝17.8，10.5，7.8Hz)，6.50(1H，s)，6.95(1H，s)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ-3.7，-3.3，5.3(3C)，7.2(3C)，14.8，15.2，18.7，18.9，19.4，20.3，23.6，23.7，26.4(3C)，31.7，36.7，40.1，43.8，46.4，53.3，74.2，76.5，79.6，115.5，115.6，116.5，120.5，121.3，135.8，136.1，137.4，140.2，152.9，164.7，171.5，218.4；LRMS(ESI)C41H71NO5SSi2Na[M+Na+]計(jì)算值768.5，實(shí)驗(yàn)值768.5；HRMSC41H72NO5SSi2[M+H+]計(jì)算值746.4670，實(shí)驗(yàn)值746.4680。將二烯(26.9mg，36.1μmol)的甲苯(70mL)溶液加熱至回流并用Grubbs催化劑(3.1mg，3.61μmol)的甲苯(2mL)溶液處理。將該混合物攪拌25min，冷卻至0℃，通過已用己烷/EtOAc＝2/1洗滌過的硅膠墊過濾。將合并的濾液濃縮并通過急驟柱層析(SiO2，己烷/Et2O＝40∶1至5∶1)純化給出想要的產(chǎn)物(9.9mg，13.8μmol，38％)和環(huán)庚二烯(14.4mg，22.3μmol，62％)均為無色油狀物。[α]D25-41.5(c0.715，CHCl3)；IR(film)ν2955，2884，1737，1690，1467，1378，1249，1179，1102，1014，979，879，826，773cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.08(3H，s)，0.12(3H，s)，0.57(6H，q，J＝7.8Hz)，0.89(9H，t，J＝8.0Hz)，0.93(9H，s)，1.04(3H，s)，1.06(3H，d，J＝7.1Hz)，1.12(3H，s)，1.17(3H，d，J＝7.1Hz)，1.68(3H，s)，2.15(3H，d，J＝0.8Hz)，2.14-2.27(2H，m)，2.45(1H，dd，J＝14.0，4.8Hz)，2.50(1H，dd，J＝14.9，3.2Hz)，2.64-2.74(2H，m)，2.72(3H，s)，3.02(1H，五重峰，J＝7.0Hz)，3.10(1H，dd，J＝14.4，7.3Hz)，3.96(1H，d，J＝8.7Hz)，4.43(1H，dd，J＝8.3，2.9Hz)，5.22(1H，dd，J＝9.8，5.7Hz)，5.33-5.42(2H，m)，5.69(1H，dd，J＝15.8，8.2Hz)，6.57(1H，s)，6.96(1H，s)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ-3.3，-3.2，5.6(3C)，7.1(3C)，15.0，17.2，18.8，19.4，21.4，21.7，23.8，24.3，26.5(3C)，33.2，35.6，41.3，41.8，48.2，54.0，74.4，77.4，79.3，116.4，120.5，121.0，129.3，132.1，137.8，138.0，152.7，164.8，170.7，216.8；LRMS(ESI)C39H68NO5SSi2[M+H+]計(jì)算值718.4，實(shí)驗(yàn)值718.3；HRMSC39H68NO5SSi2[M+H+]718.4357，實(shí)驗(yàn)值718.4355。[α]D26-38.5(c0.400，CHCl3)；IR(film)ν2955，2878，1741，1693，1472，1458，1385，1295，1253，1169，1098，988，871，837，775cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.07(6H，s)，0.61-0.68(6H，m)，0.93(9H，s)，0.97(9H，t，J＝8.0Hz)，1.03(3H，d，J＝7.0Hz)，1.04(3H，d，J＝7.0Hz)，1.10(3H，s)，1.21(3H，s)，1.65(3H，s)，1.75(3H，s)，2.06-2.14(1H，m)，2.31(1H，dd，J＝17.2，7.2Hz)，2.34-2.51(2H，m)，2.49(1H，dd，J＝17.1，2.8Hz)，2.65-2.81(2H，m)，3.07(1H，五重峰，J＝7.0Hz)，3.84(1H，dd，J＝7.2，2.1Hz)，4.40(1H，dd，J＝7.2，2.8Hz)，4.98-5.09(2H，m)，5.38-5.42(1H，m)，5.65(1H，t，J＝5.9Hz)，5.93(1H，ddd，J＝17.9，10.1，7.8Hz)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ-3.6，-3.3，5.4(3C)，7.3(3C)，15.3，18.7，19.0，20.0，22.1，23.8，25.8，26.4(3C)，31.3，32.3，40.0，43.8，46.3，54.0，72.5，73.8，76.5，115.6，119.8，125.6，136.5，140.1，140.6，171.9，218.5；LRMS(ESI)C35H64O5Si2Na[M+Na+]計(jì)算值643.4，實(shí)驗(yàn)值643.3；HRMSC35H64O5Si2Na[M+Na+]計(jì)算值643.4190，實(shí)驗(yàn)值643.4219。經(jīng)過Wittig反應(yīng)在0℃下向Wittig試劑(19.1mg，54.7μmol)的THF(0.4mL)溶液中加入KHMDS(109μl0.5M的甲苯溶液，54.7μmol)。將該混合物在0℃下攪拌0.5h然后冷卻至-78℃。向該混合物中滴加酮(5.7mg，9.12μmol)的THF(0.3mL)溶液，將得到的混合物在1.5h溫?zé)嶂?20℃。用飽和NH4Cl水溶液(2mL)淬滅該反應(yīng)并用EtOAc萃取(7mL×3)。合并的有機(jī)層經(jīng)Na2SO4干燥并濃縮。殘余物通過急驟柱層析(SiO2，己烷/Et2O＝10∶1)純化給出5.6mg的不可分開的烯混合物(E/Z＝9∶1)。將該混合物通過制備TLC(己烷/Et2O＝4∶1)純化給出純的想要的異構(gòu)體(5.0mg，6.96μmol，76％)為無色油狀物。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.08(3H，s)，0.12(3H，s)，0.51(6H，q，J＝7.9Hz)，0.86(9H，t，J＝7.9Hz)，0.97(9H，s)，1.01(3H，s)，1.06(3H，d，J＝7.1Hz)，1.12(3H，s)，1.18(3H，d，J＝7.1Hz)，1.69(3H，s)，1.97(3H，s)，2.10-2.18(1H，m)，2.24-2.31(1H，m)，2.38-2.59(3H，m)，2.68-2.78(1H，m)，2.72(3H，s)，2.98-3.14(2H，m)，3.97(1H，d，J＝9.0Hz)，4.45-4.48(1H，m)，5.29-5.41(2H，m)，5.73(1H，dd，J＝15.6，8.3Hz)，6.30(1H，s)，6.73(1H，d，J＝8.7Hz)，6.56(1H，s)；LRMS(ESI)C39H68NO5SSi2[M+H+]計(jì)算值718.4，實(shí)驗(yàn)值718.1。在0℃下向在塑料管中的甲硅烷基醚(298.8mg，0.416mmol)的THF(6.5mL)溶液中加入HF·吡啶(3.2mL)，將該混合物在室溫下攪拌3h。在0℃下滴加TMSOMe(30mL)淬滅反應(yīng)，將該混合物在室溫下攪拌3h。濃縮后在高真空下干燥，殘余物用急驟柱層析(SiO2，己烷/Et2O＝1∶1)純化給出醇(196.6mg，0.402mmol，97％)為無色固體。[α]D25-96.6(c0.235，CHCl3)；IR(film)ν3502，2970，2927，1733，1685，1506，1456，1375，1251，1152，1040，977cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.06(3H，s)，1.11(3H，d，J＝7.0Hz)，1.22(3H，d，J＝6.8Hz)，1.28(3H，s)，1.72(3H，s)，2.10(3H，s)，2.31-2.40(2H，m)，2.43(1H，dd，J＝16.0，3.7Hz)，2.49(1H，dd，J＝16.0，9.2Hz)，2.55-2.68(2H，m)，2.71(3H，s)，2.98(1H，dd，J＝14.4，6.4Hz)，3.16(1H，五重峰，J＝6.2Hz)，3.76(1H，dd，J＝5.9，3.2Hz)，4.30(1H，dd，J＝9.2，3.7Hz)，5.18(1H，brt，J＝7.3Hz)，5.32(1H，dd，J＝8.4，2.5Hz)，5.63(1H，dd，J＝15.7，6.4Hz)，5.60(1H，ddd，J＝15.7，6.9，5.1Hz)，6.60(1H，s)，6.98(1H，s)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ15.1，16.0，17.7，19.2，19.5，22.5，23.6，32.0，35.0，39.6，40.3，44.8，53.3，71.8，75.6，78.3，116.1，119.6，120.5，129.9，131.3，137.5，138.2，152.2，165.0，170.7，218.8；LRMS(ESI)C27H40NO5S[M+H+]計(jì)算值490.3，實(shí)驗(yàn)值490.2；HRMSC27H40NO5S[M+H+]計(jì)算值490.2627，實(shí)驗(yàn)值490.2602。在50℃下向烯(1.2mg，2.5μmol)和TrisNHNH2(29.3mg，98μmol)的ClCH2CH2Cl(0.7mL)溶液中加入Et3N(13.7μL，98μmol)。反應(yīng)由HPTLC監(jiān)控(己烷/EtOAc/CH2Cl2＝1/1/2)。攪拌7h后，將該混合物冷卻至室溫，用EtOAc稀釋并通過用EtOAc沖洗過的硅膠墊過濾。濃縮后，殘余物通過制備TLC(己烷/EtOAc/CH2Cl2＝1/1/2)純化給出還原的產(chǎn)物(1.1mg，2.2μmol，91％)為白色固體。該化合物的光譜數(shù)據(jù)與已報(bào)導(dǎo)的dEpoB的光譜相同。將酸和醇與無水苯(5mL×2)共沸并于反應(yīng)前在高真空下干燥。在0℃下向醇(10∶1異構(gòu)體的混合物，240mg，0.756mmol)的CH2Cl2(5mL)溶液中加入EDCI(192.7mg，1.01mmol)和DMAP(122.8mg，1.01mmol)。在0℃下于15min內(nèi)向混合物中滴加酸(314.6mg，0.628mmol)的CH2Cl2(2mL+1mL沖洗)溶液。在0℃下攪拌2h后，將該混合物在室溫下攪拌2h。濃縮后，小心地將殘余物用急驟柱層析(SiO2，己烷/EtOAc＝20∶1至15∶1)純化給出酯(340.1mg，0.425mmol，基于酸計(jì)68％)為無色油狀物。[α]D24-27.5(c0.28，CHCl3)；IR(film)ν2956，2878，1740，1692，1472，1378，1317，1253，1174，1118，988，915，872，837，775cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.06(6H，s)，0.57-0.65(6H，m)，0.92(9H，s)，0.94(9H，t，J＝7.9Hz)，1.02(3H，d，J＝6.9Hz)，1.03(3H，d，J＝6.8Hz)，1.07(3H，s)，1.22(3H，s)，2.07-2.10(1H，m)，2.09(3H，s)，2.31(1H，dd，J＝16.9，7.3Hz)，2.51(1H，dd，J＝16.8，3.0Hz)，2.49-2.65(2H，m)，2.71(3H，s)，2.96-2.99(2H，m)，3.06(1H，五重峰，J＝7.1Hz)，3.83(1H，dd，J＝7.3，2.1Hz)，4.35(1H，dd，J＝7.2，3.0Hz)，4.98-5.12(4H，m)，5.30(1H，t，J＝6.7Hz)，5.76(1H，ddt，J＝16.7，10.2，6.2Hz)，5.92(1H，ddd，J＝17.8，9.9，7.8Hz)，6.19(1H，t，J＝7.0Hz)，6.51(1H，s)，6.97(1H，s)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ-3.7，-3.4，5.2(3C)，7.1(3C)，14.7，15.2，18.6，18.9，19.3，19.9，23.8，26.3(3C)，30.1，31.2，40.0，43.7，46.3，53.3，73.9，76.5，77.9，115.5，116.5，117.0，121.5，124.1[q，1J(C，F(xiàn))＝273.4Hz]，129.6[q，2J(C，F(xiàn))＝28.5Hz]，130.5[q，3J(C，F(xiàn))＝6.1Hz]，133.6，136.3，140.1，152.4，164.8，171.3，218.3；LRMS(ESI)C41H68F3NO5SSi2Na[M+Na+]計(jì)算值822.4，實(shí)驗(yàn)值822.4；HRMSC41H69F3NO5SSi2[M+H+]計(jì)算值800.4387，實(shí)驗(yàn)值800.4374。將雙烯(57.6mg，72.0μmol)的甲苯(142mL)溶液加熱至回流并用Grubbs催化劑(6.1mg，7.20μmol)的甲苯(2mL)溶液處理。將該混合物攪拌28min，冷卻至0℃，通過用己烷/EtOAc＝2/1(300mL)沖洗過的硅膠墊過濾。將合并的濾液濃縮并通過急驟柱層析(SiO2，己烷/Et2O＝40∶1至15∶2)純化給出想要的產(chǎn)物(12.0mg，15.5μmol，22％)和環(huán)庚二烯(29.2mg，43.3μmol，60％)均為無色油狀物。[α]D26-17.1(c0.14，CHCl3)；IR(film)ν2955，2884，1743，1690，1472，1320，1173，1114，1038，1008，873，832，773cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.09(3H，s)，0.12(3H，s)，0.55(6H，q，J＝7.7Hz)，0.88(9H，t，J＝8.0Hz)，0.96(9H，s)，1.01(3H，s)，1.06(3H，d，J＝7.1Hz)，1.12(3H，s)，1.20(3H，d，J＝7.1Hz)，2.07-2.17(1H，m)，2.19(3H，s)，2.38(1H，dd，J＝14.3，3.5Hz)，2.39-2.49(1H，m)，2.50(1H，dd，J＝14.3，7.3Hz)，2.73(3H，s)，2.77-2.91(2H，m)，2.96-3.09(2H，m)，3.98(1H，dd，J＝8.9Hz)，4.54(1H，dd，J＝7.3，3.4Hz)，5.28-5.38(1H，m)，5.63(1H，dd，J＝9.6，2.3Hz)，5.77(1H，dd，J＝15.9，8.5Hz)，6.21-6.28(1H，m)，6.60(1H，s)，6.99(1H，s)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ-3.4，-3.3，5.5(3C)，7.0(3C)，14.6，17.1，18.7，19.4，19.9，21.3，24.8，26.4(3C)，29.6，32.8，42.0，42.1，48.2，54.1，73.4，76.9，77.8，117.0，121.6，124.3[q，1J(C，F(xiàn))＝273.5Hz]，127.2，130.6[q，2J(C，F(xiàn))＝28.2Hz]，130.8[q，3J(C，F(xiàn))＝6.1Hz]，133.2，136.5，152.3，165.0，170.1，217.1；LRMS(ESI)C39H65F3NO5SSi2[M+H+]計(jì)算值772.4，實(shí)驗(yàn)值772.4；HRMSC39H65F3NO5SSi2[M+H+]計(jì)算值772.4074，實(shí)驗(yàn)值772.4102。[α]D26-35.6(c0.365，CHCl3)；IR(film)ν2956，2878，1737，1693，1472，1458，1305，1279，1252，1173，1116，988，871，775cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.08(6H，s)，0.64(6H，q，J＝7.8Hz)，0.93(9H，s)，0.96(9H，t，J＝7.8Hz)，1.04(6H，d，J＝7.0Hz)，1.10(3H，s)，1.22(3H，s)，1.70(3H，s)，2.05-2.14(1H，m)，2.32(1H，dd，J＝17.0，7.1Hz)，2.50(1H，dd，J＝17.0，3.0Hz)，2.51-2.63(2H，m)，2.87(1H，dd，J＝18.4，6.7Hz)，2.90-3.02(1H，m)，3.07(1H，五重峰，J＝7.1Hz)，3.85(1H，dd，J＝7.2，2.0Hz)，4.39(1H，dd，J＝7.1，2.9Hz)，4.98-5.08(2H，m)，5.51(1H，dd，J＝8.1，3.8Hz)，5.67(1H，t，J＝5.9Hz)，5.93(1H，ddd，J＝17.8，10.5，7.8Hz)，6.29(1H，t，J＝5.5Hz)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ-3.7，-3.4，5.3(3C)，7.1(3C)，15.3，18.7，18.9，19.6，21.3，23.9，24.1，26.3(3C)，30.3，40.0，43.7，46.3，53.4，70.9，73.7，76.5，115.5，123.4，123.8[q，1J(C，F(xiàn))＝272.2Hz]，129.1[q，3J(C，F(xiàn))＝6.1Hz]，131.5[q，2J(C，F(xiàn))＝28.8Hz]，138.1，140.0，171.7，218.5；LRMS(ESI)C35H61F3O5Si2Na[M+Na+]計(jì)算值697.4，實(shí)驗(yàn)值697.4；HRMSC35H61F3O5Si2Na[M+Na+]計(jì)算值697.3907，實(shí)驗(yàn)值697.3892。在0℃下向在塑料管中的甲硅烷基醚(1.78g，2.31mmol)的THF(25mL)溶液中緩慢加入HF·吡啶(12.5mL)，將該混合物在室溫下攪拌4h。在0℃下于10min內(nèi)用滴加TMSOMe(80mL)淬滅反應(yīng)。在室溫下劇烈攪拌該混合物2.5h。濃縮并在高真空干燥2h后，將殘余物通過急驟柱層析(SiO2～50g，己烷/EtOAc＝1∶1)純化，給出二醇(1.20g，2.21mmol，96％)為無色固體。[α]D25-54.6(c0.28，CHCl3)；IR(film)ν3478，2974，2929，1736，1689，1449，1381，1318，1247，1169，1113，1039，983，867，736cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.05(3H，s)，1.12(3H，d，J＝7.0Hz)，1.23(3H，d，J＝6.8Hz)，1.37(3H，s)，2.04(1H，brd，J＝3.8Hz，-OH)，2.12(3H，s)，2.25-2.33(1H，m)，2.38(1H，dd，J＝15.3，3.0Hz)，2.48(1H，dd，J＝15.4，9.8Hz)，2.54-2.61(1H，m)，2.66-2.76(1H，m)，2.71(3H，s)，2.96(1H，dd，J＝16.5，4.5Hz)，3.02(1H，dd，J＝16.3，6.5Hz)，3.11(1H，五重峰，J＝6.7Hz)，3.19(1H，brs，＝OH)，3.74(1H，brs)，4.35(1H，brd，J＝9.5Hz)，5.42(1H，dd，J＝6.2，4.1Hz)，5.60(1H，ddd，J＝15.8，5.6，4.5Hz)，5.66(1H，dd，J＝15.8，5.8Hz)，6.24(1H，t，J＝7.2Hz)，6.64(1H，s)，7.00(1H，s)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ15.1，16.1，17.7，18.5，19.3，22.5，28.8，31.1，39.6，39.7，45.0，53.7，71.4，75.3，76.8，116.7，120.2，124.3[q，1J(C，F(xiàn))＝273.4Hz]，127.9，130.2[q，3J(C，F(xiàn))＝6.0Hz]，130.6[q，2J(C，F(xiàn))＝28.4Hz]，132.5，136.7，152.0，165.4，170.2，218.4；LRMS(ESI)C27H37F3NO5S[M+H+]計(jì)算值544.2，實(shí)驗(yàn)值544.1；HRMSC27H37F3NO5S[M+H+]計(jì)算值544.2345，實(shí)驗(yàn)值544.2346。在50℃下向二醇(1.22mg，2.24μmol)和TrisNHNH2(26.7mg，89.6μmol)的ClCH2CH2Cl(1mL)溶液中加入Et3N(12.5μL，89.6μmol)。反應(yīng)由HPTLC監(jiān)控(己烷/EtOAc/CH2Cl2＝1/1/2)。攪拌6.5h后，向混合物中再加入TrisNHNH2(26.7mg，89.6μmol)和Et3N(12.5μL，89.6μmol)。攪拌14h后，將該混合物冷卻至室溫，用EtOAc稀釋并通過用EtOAc沖洗過的硅膠墊過濾。濃縮后，殘余物用制備TLC(己烷/EtOAc/CH2Cl2＝1/1/2)純化給出還原的產(chǎn)物(1.16mg，2.13μmol，94％)為白色固體。[α]D24-75.1(c0.35，CHCl3)；IR(film)ν3483，2968，1337，1685，1466，1381，1322，1247，1168，1113，1010，833，736cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.03(3H，d，J＝7.0Hz)，1.08(3H，s)，1.19(3H，d，J＝6.8Hz)，1.25-1.35(2H，m)，1.37(3H，s)，1.42-1.55(2H，m)，1.65-1.82(2H，m)，2.10(3H，d，J＝0.8Hz)，2.21-2.47(2H，m)，2.27(1H，dd，J＝14.2，2.6Hz)，2.48(1H，dd，J＝14.3，10.8Hz)，2.70(3H，s)，2.70-2.28(1H，m)，3.02(1H，d，J＝2.0Hz，-OH)，3.19(1H，qd，J＝6.9，2.2Hz)，3.65(1H，d，J＝6.2Hz，-OH)，3.69-3.72(1H，m)，4.34(1H，ddd，J＝10.8，6.2，2.6Hz)，5.28(1H，dd，J＝10.2，2.2Hz)，6.12(1H，dd，J＝10.2，5.2Hz)，6.61(1H，s)，6.98(1H，s)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ13.0，15.9，16.0，17.7，19.1，23.0，25.6，26.2，31.3，32.3，37.4，39.8，41.6，53.9，72.3，73.6，77.7，116.2，119.9，124.3[q，1J(C，F(xiàn))＝274.4Hz]，129.8[q，3J(C，F(xiàn))＝6.1Hz]，132.6[q，2J(C，F(xiàn))＝27.8Hz]，138.3，151.7，165.4，170.2，220.7；LRMS(ESI)C27H39F3NO5S[M+H+]計(jì)算值546.3，實(shí)驗(yàn)值546.2；HRMSC27H39F3NO5S[M+H+]計(jì)算值546.2501，實(shí)驗(yàn)值544.2496。將酸和醇與無水苯(3mL×2)共沸并于反應(yīng)前在高真空下干燥。在0℃下向醇(68.0mg，0.173mmol)的CH2Cl2(1.3mL)溶液中加入EDCI(37.8mg，0.197mmol)和DMAP(24.1mg，0.197mmol)。在0℃下于5min內(nèi)向混合物中滴加酸(72.6mg，0.123mmol)的CH2Cl2(0.7mL)溶液。在0℃下攪拌1h后，將該混合物在室溫下攪拌2.5h。濃縮后，將殘余物用急驟柱層析(SiO2，己烷/EtOAc＝30∶1)純化給出酯(99.5mg，0.114mmol，由叔丁酯計(jì)92％)為無色油狀物。[α]D25-23.4(c0.56，CHCl3)；IR(film)ν2955，2931，2880，1735，1696，1506，1472，1386，1362，1294，1254，1174，1104，988，878，776，742cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.06(3H，s)，0.06(3H，s)，0.14(6H，s)，0.63(6H，q，J＝8.0Hz)，0.92(9H，s)，0.94(9H，t，J＝8.0Hz)，0.97(9H，s)，1.02(3H，d，J＝6.6Hz)，1.05(3H，d，J＝6.5Hz)，1.07(3H，s)，1.21(3H，s)，1.67(3H，s)，2.06(3H，d，J＝0.8Hz)，2.05-2.14(1H，m)，2.30(1H，dd，J＝16.9，7.5Hz)，2.33-2.53(2H，m)，2.50(1H，dd，J＝16.9，2.7Hz)，2.76-2.80(2H，m)，3.07(1H，五重峰，J＝7.0Hz)，3.83(1H，dd，J＝7.0，2.2Hz)，4.35(1H，dd，J＝7.4，2.8Hz)，4.97(2H，s)，4.97-5.07(4H，m)，5.16(1H，t，J＝7.2Hz)，5.24(1H，t，J＝6.9Hz)，5.74(1H，ddt，J＝16.6，10.0，6.5Hz)，5.91(1H，ddd，J＝17.6，9.9，7.7Hz)，6.50(1H，s)，7.06(1H，s)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ-5.2(2C)，-3.7，-3.3，5.3(3C)，7.2(3C)，14.7，15.2，18.5，18.7，18.9，20.3，23.6，23.7，26.0(3C)，26.4(3C)，31.7，36.7，40.1，43.8，46.4，53.3，63.4，74.2，76.5，79.6，115.5，115.6，116.6，120.5，121.3，135.8，136.1，137.4，140.1，153.0，171.5，172.2，218.4；LRMS(ESI)C47H86NO6SSi3[M+H+]計(jì)算值876.6，實(shí)驗(yàn)值876.5；HRMSC47H86NO6SSi3[M+H+]計(jì)算值876.5484，實(shí)驗(yàn)值876.5482。將雙烯(69.7mg，79.5μmol)的甲苯(158mL)溶液加熱至回流并用Grubbs催化劑(6.7mg，7.95μmol)的甲苯(2mL)溶液處理。將該混合物攪拌11min，冷卻至0℃，通過用己烷/EtOAc＝3/1(280mL)沖洗過的硅膠墊過濾。將合并的濾液濃縮并通過急驟柱層析(SiO2，己烷/Et2O＝20∶1至15∶1)純化給出想要的產(chǎn)物(18.4mg，21.7μmol，27％)和環(huán)庚二烯(28.3mg，45.5μmol，57％)均為無色油狀物。[α]D24-40.4(c0.26，CHCl3)；IR(film)ν2955，2930，2879，1740，1694，1472，1387，1362，1253，1200，1107，1007，838，776，742cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.08(3H，s)，0.12(3H，s)，0.15(6H，s)，0.57(6H，q，J＝7.9Hz)，0.88(9H，t，J＝8.0Hz)，0.95(9H，s)，0.97(9H，s)，1.04(3H，s)，1.06(3H，d，J＝7.1Hz)，1.12(3H，s)，1.17(3H，d，J＝7.0Hz)，1.69(3H，s)，2.06-2.30(2H，m)，2.14(3H，s)，2.45(1H，dd，J＝15.6，3.6Hz)，2.50(1H，dd，J＝14.9，3.1Hz)，2.63-2.75(2H，m)，2.97-3.06(1H，m)，3.10(1H，dd，J＝14.6，7.7Hz)，3.97(1H，d，J＝8.5Hz)，4.44(1H，dd，J＝8.4，2.9Hz)，4.97(2H，s)，5.22(1H，dd，J＝8.7，5.2Hz)，5.33-5.44(2H，m)，5.70(1H，dd，J＝15.6，8.1Hz)，6.57(1H，s)，7.07(1H，s)；13CNMR(125MHz，CDCl3)δ-5.2，-3.3，-3.2，5.6，7.2，7.3，15.0，17.2，18.5，18.8，21.4，23.9，24.4，26.0，26.5，33.3，35.6，41.4，41.8，48.2，54.0，63.5，74.4，78.1，79.3，116.6，120.6，121.0，129.3，132.1，137.8，137.9，153.0，170.7，172.3，216.8；LRMS(ESI)C45H82NO6SSi3[M+H+]計(jì)算值848.5，實(shí)驗(yàn)值848.5；HRMS(ESI)C45H82NO6SSi3[M+H+]計(jì)算值848.5171，實(shí)驗(yàn)值848.516l。在0℃下向在塑料管中的甲硅烷基醚(61.8mg，72.8μmol)的THF(2mL)溶液中加入HF·吡啶(1mL)，將該混合物在室溫下攪拌3.2h。在0℃下滴加TMSOMe(15mL)淬滅反應(yīng)。在室溫下攪拌該混合物2h。濃縮并在高真空干燥后，將殘余物通過急驟柱層析(SiO2，己烷/EtOAc＝1∶3)純化，給出三醇(32.4mg，64.1μmol，88％)為白色固體。[α]D25-108.4(c0.285，CHCl3)；IR(film)ν3422，2968，2919，2729，1689，1449，1377，1252，1152，1064，978cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.05(3H，s)，1.12(3H，d，J＝6.9Hz)，1.22(3H，d，J＝6.8Hz)，1.32(3H，s)，1.72(3H，s)，2.08(3H，s)，2.31-2.40(3H，m)，2.43(1H，dd，J＝15.5，3.5Hz)，2.49(1H，dd，J＝15.5，9.5Hz)，2.55-2.67(2H，m)，2.95(1H，dd，J＝14.6，6.3Hz)，3.13(1H，五重峰，J＝6.6Hz)，3.34(1H，brs，-OH)，3.75(1H，dd，J＝6.6，2.4Hz)，4.06(1H，brs，-OH)，4.33(1H，dd，J＝9.4，3.0Hz)，4.92(2H，s)，5.18(1H，t，J＝6.9Hz)，5.33(1H，dd，J＝8.0，2.5Hz)，5.52(1H，dd，J＝15.8，6.4Hz)，5.59(1H，ddd，J＝15.8，6.6，5.0Hz)，6.63(1H，s)，7.13(1H，s)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ15.3，16.3，17.8，19.2，22.8，23.7，31.9，35.1，39.7，40.2，45.0，53.4，61.8，71.7，75.8，78.1，116.7，119.0，120.5，130.0，131.2，137.6，138.9，152.5，170.0，170.7，218.7；LRMS(ESI)C27H39NO6SNa[M+Na+]計(jì)算值528.2，實(shí)驗(yàn)值528.0；HRMSC27H40NO6S[M+H+]計(jì)算值506.2576，實(shí)驗(yàn)值506.2552。將粗酸(4.65g，相當(dāng)于7.27mmol)和醇(2.18g，9.84mmol)與無水苯共沸，然后在反應(yīng)前高真空下干燥20min。在0℃下向醇(2.18g，9.84mmol)的CH2Cl2(65mL)溶液中加入EDCI(2.09g，10.9mmol)和DMAP(1.33g，10.9mmol)。在0℃下于20min內(nèi)向混合物中滴加粗酸(4.65g，相當(dāng)于7.27mmol)的CH2Cl2(20mL+5mL沖洗)溶液。在0℃下攪拌40min后，將該混合物在室溫下攪拌4h。濃縮后，將殘余物用急驟柱層析(SiO2～160g，己烷/EtOAc＝20∶1)純化給出酯(4.85mg，6.87mmol，從叔丁酯計(jì)94％)為無色油狀物。[α]D25-22.7(c0.26，CHCl3)；IR(film)ν2958，2936，2800，1748，1732，1693，1473，1416，1360，1317，1296，1254，1174，1119，989，916，872，838，776cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.08(3H，s)，0.08(3H，s)，0.60(6H，q，J＝7.8Hz)，0.93(9H，s)，0.94(9H，t，J＝8.0Hz)，1.04(3H，d，J＝7.0Hz)，1.04(3H，d，J＝7.0Hz)，1.11(3H，s)，1.23(3H，s)，2.05-2.14(1H，m)，2.17(3H，s)，2.40(1H，dd，J＝16.9，7.0Hz)，2.59(1H，dd，J＝17.0，3.6Hz)，2.56-2.64(2H，m)，2.90-3.01(2H，m)，3.06(1H，五重峰，J＝7.0Hz)，3.85(1H，dd，J＝7.3，2.0Hz)，4.38(1H，d，J＝7.0，3.4Hz)，4.97-5.14(5H，m)，5.75(1H，ddt，J＝16.0，9.9，6.2Hz)，5.92(1H，ddd，J＝17.8，10.5，7.8Hz)，6.21(1H，td，J＝7.2，1.5Hz)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ-3.7，-3.4，5.2(3C)，7.1(3C)，15.4，18.7，18.9，19.5，23.9，26.3(3C)，26.6，28.5，30.0，39.8，43.7，46.3，53.3，73.6，76.5，77.1，115.6，117.8，124.0[q，1J(C，F(xiàn))＝273.5Hz]，129.2[q，3J(C，F(xiàn))＝6.1Hz]，130.6[q，2J(C，F(xiàn))＝28.7Hz]，133.4，140.0，171.8，204.6，218.4；LRMS(ESI)C36H63F3O6Si2Na[M+Na+]計(jì)算值727.4，實(shí)驗(yàn)值727.3；HRMSC36H64F3O6Si2[M+H+]計(jì)算值705.4194，實(shí)驗(yàn)值705.4193。將雙烯(510.0mg，0.723mmol)的甲苯(500mL)溶液加熱至回流并用Grubbs催化劑(92.1mg，0.109mmol)的甲苯(10mL)溶液處理。將該混合物在回流狀態(tài)下攪拌17min并立即冷卻至0℃并在通過硅膠墊過濾前保持在0℃。同時(shí)第二批雙烯(510.0mg，0.723mmol)同樣處理。合并的反應(yīng)混合物通過用己烷/EtOAc＝3/1(1.4L)沖洗過的硅膠墊(100g)過濾。將合并的濾液濃縮并通過急驟柱層析(SiO2～65g，己烷/Et2O＝10∶1至5∶1)純化給出大環(huán)內(nèi)酯物(742.4mg，1.10mmol，76％)為無色無定形油狀物。[α]D25-7.5(c0.12，CHCl3)；IR(film)ν2956，2979，1748，1732，1695，1472，1415，1384，1252，1170，1119，1018，986，876，835cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.08(3H，s)，0.10(3H，s)，0.60(6H，q，J＝7.8Hz)，0.93(9H，s)，0.94(9H，t，J＝7.8Hz)，1.03(3H，d，J＝7.1Hz)，1.08(3H，s)，1.13(3H，d，J＝7.0Hz)，1.17(3H，s)，2.26(3H，s)，2.25-2.34(1H，m)，2.64(1H，dd，J＝15.5，5.0Hz)，2.68-2.75(2H，m)，2.76(1H，dd，J＝15.6，6.4Hz)，2.85(1H，dd，J＝15.6，5.7Hz)，2.97(1H，dq，J＝8.3，6.9Hz)，3.04(1H，dd，J＝15.6，6.3Hz)，3.92(1H，dd，J＝8.3，1.2Hz)，4.36(1H，t，J＝5.3Hz)，5.30-5.39(2H，m)，5.58(1H，dd，J＝15.5，8.0Hz)，6.13(1H，brt，J＝7.2Hz)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ-3.6，-3.6，5.4(3C)，7.0(3C)，17.5，18.5，19.0，21.6，23.5，26.3(3C)，26.5，28.6，29.1，41.0，42.3，47.3，54.1，74.2，76.8，77.7，124.0[q，1J(C，F(xiàn))＝273.7Hz]，126.0，128.7[q，3J(C，F(xiàn))＝5.9Hz]，132.2[q，2J(C，F(xiàn))＝28.1Hz]，133.8，170.5，204.1，216.1；LRMS(ESI)C34H59F3O6Si2Na[M+Na+]計(jì)算值699.4，實(shí)驗(yàn)值699.4；HRMSC34H60F3O6Si2[M+H+]計(jì)算值677.3881，實(shí)驗(yàn)值677.3892。經(jīng)過Wittig反應(yīng)將酮與苯(5mL×2)共沸然后在高真空下干燥0.5h。在0℃下于5min內(nèi)向Wittig鹽(907mg，2.59mmol)的THF(19mL)溶液中滴加t-BuOK(2.4mL的1.0M的THF溶液，2.43mmol)。在0℃下將該混合物攪拌0.5h然后冷卻至-78℃。于10min內(nèi)向該混合物中滴加酮(1.10g，1.62mmol)的THF(13mL)溶液，將得到的混合物于2h內(nèi)溫?zé)嶂?20℃。用飽和NH4Cl水溶液(15mL)淬滅該反應(yīng)并用EtOAc萃取(50mL×3)。合并的有機(jī)層用鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥并濃縮。殘余物用急驟柱層析(SiO2，己烷/Et2O＝20∶1至10∶1)純化給出想要的16(E)-異構(gòu)體(940mg，1.22mmol，75％)和不想要的16(Z)-異構(gòu)體(140.9mg，0.182mmol，11％)均為無色無定形油狀物。[α]D2562.7(c0.33，CHCl3)；IR(film)ν2955，2878，1743，1692，1472，1379，1320，1253，1169，1114，1007，956，877，835，775cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.09(3H，s)，0.13(3H，s)，0.49(6H，q，J＝7.8Hz)，0.85(9H，t，J＝7.8Hz)，0.97(9H，s)，0.99(3H，s)，1.06(3H，d，J＝7.1Hz)，1.11(3H，s)，1.20(3H，d，J＝7.1Hz)，2.00(3H，s)，2.03-2.13(1H，m)，2.35(1H，dd，J＝14.3，3.0Hz)，2.46(1H，dd，J＝14.3，7.8Hz)，2.41-2.50(1H，m)，2.73(3H，s)，2.71-2.90(2H，m)，2.98-3.12(2H，m)，3.99(1H，d，J＝9.2Hz)，4.56(1H，dd，J＝7.7，2.8Hz)，5.33(1H，ddd，J＝15.6，8.9，4.1Hz)，5.82(1H，dd，J＝15.6，8.4Hz)，6.29(1H，s)，6.33-6.40(1H，m)，6.94(1H，m)，7.09(1H，brd，J＝8.4Hz)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ-3.2，-3.2，5.5(3C)，7.0(3C)，17.2，18.7，19.3，19.6，20.0，22.3，24.9，26.4(3C)，29.7，32.9，41.9，42.0，48.6，54.0，72.2，73.3，77.0，116.7，120.7，124.5[q，1J(C，F(xiàn))＝273.3Hz]，127.9，129.7[q，2J(C，F(xiàn))＝28.0Hz]，131.9[q，3J(C，F(xiàn))＝6.1Hz]，132.9，136.6，152.1，165.4，170.2，217.4；LRMS(ESI)C39H65F3NO5SSi2[M+H+]計(jì)算值772.4，實(shí)驗(yàn)值772.4；HRMSC39H65F3NO5SSi2[M+H+]計(jì)算值772.4074，實(shí)驗(yàn)值772.4044。將deH-dEpoB(12.2mg，24.9μmol)的CH2Cl2(1.25mL)溶液冷卻至-78℃并用冷卻的DMDO溶液(-78℃，丙酮中0.06M，914μl，54.8μmol)處理。將該混合物溫?zé)嶂?50℃并在-50℃下攪拌2.7h。過量的DMDO通過在-50℃下加入二甲硫(117μl)而淬滅，并且將該混合物在此溫度下攪拌0.5h。真空下除去溶劑。用制備薄層色譜(己烷/EtOAc＝1/2)純化給出β-環(huán)氧化物(3.0mg，5.93μmol，24％)和α-環(huán)氧化物(7.9mg，15.6μmol，63％)，均為無色固體。[α]D25-78.5(c0.33，CHCl3)；IR(film)ν3454，2974，2928，1734，1689，1450，1379，1250，1152，1061，978，735cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.03(3H，s)，1.11(3H，d，J＝7.0Hz)，1.14(3H，d，J＝6.9Hz)，1.34(3H，s)，1.36(3H，s)，2.00(1H，ddd，J＝15.1，7.3，4.0Hz)，2.14(1H，dt，J＝15.1，5.2Hz)，2.14(3H，s)，2.21(1H，dd，J＝14.6，8.0Hz)，2.33(1H，dd，J＝14.7，4.8Hz)，2.47(1H，dd，J＝13.8，3.3Hz)，2.59(1H，dd，J＝13.8，9.4Hz)，2.73(3H，s)，2.77(1H，brs，OH)，2.93(1H，dd，J＝7.3，4.8Hz)，3.34(1H，qd，J＝6.9，3.8Hz)，3.75-3.82(1H，m)，4.12-4.24(2H，m，包含OH)，5.54(1H，ddd，J＝15.7，7.4，5.0Hz)，5.54-5.60(1H，m)，5.64(1H，dd，J＝15.7，5.6Hz)，6.94(1H，s)，7.01(1H，s)；1HNMR(500MHz，CD2Cl2)δ0.91(3H，s)，1.01(3H，d，J＝6.9Hz)，1.03(3H，d，J＝6.9Hz)，1.22(3H，s)，1.27(3H，s)，1.96-2.02(1H，m)，2.04(3H，d，J＝0.7Hz)，2.16-2.23(2H，m)，2.33(1H，dd，J＝14.2，3.1Hz)，2.30-2.35(1H，m)，2.44(1H，dd，J＝14.4，10.3Hz)，2.69(3H，s)，2.77(1H，t，J＝5.9Hz)，3.24(1H，qd，J＝6.9，4.5Hz)，3.63(1H，t，J＝4.1Hz)，4.18-4.26(1H，m)，5.37(1H，t，J＝4.5Hz)，5.48(1H，dtd，J＝15.7，6.7，0.5Hz)，5.58(1H，dd，J＝15.7，6.2Hz)，6.58(1H，s)，7.00(1H，s)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ14.4，16.3(2C)，19.3，19.7，21.6，22.6，31.8，35.9，38.7，39.6，44.1，52.8，60.8，61.8，74.0，75.7，75.9，116.5，119.6，124.3，135.8，136.2，152.1，165.2，170.8，221.5；LRMSC27H40NO6S[M+H+]計(jì)算值506.3，實(shí)驗(yàn)值506.3；HRMS(ESI)C27H40NO6S[M+H+]計(jì)算值506.2576，實(shí)驗(yàn)值506.2566。[α]D25-53.9(c0.700，CHCl3)；IR(film)ν3460，2976，2928，1735，1688，1506，1451，1378，1252，1186，1151，1087，1042，976，879，735cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.00(3H，s)，1.04(3H，d，J＝6.9Hz)，1.12(3H，d，J＝7.0Hz)，1.35(3H，s)，1.35(3H，s)，1.87(1H，dt，J＝15.0，9.2Hz)，2.03(1H，dd，J＝13.9，9.2Hz)，2.13(3H，s)，2.13-2.19(1H，m)，2.36(1H，dd，J＝13.9，3.4Hz)，2.39(1H，dd，J＝12.2，2.1Hz)，2.42-2.51(1H，m)，2.49(1H，dd，J＝12.4，10.9Hz)，2.69(1H，d，J＝2.7Hz)，2.72(3H，s)，3.06(1H，dd，J＝9.7，3.1Hz)，3.54(1H，qd，J＝7.0，1.8Hz)，3.76-3.80(1H，m)，4.07-4.14(1H，m)，4.31(1H，d，J＝4.1Hz)，5.52(1H，dd，J＝15.5，8.7Hz)，5.60(1H，ddd，J＝15.1，9.4，3.4Hz)，5.71(1H，d，J＝8.4Hz)，6.63(1H，s)，6.99(1H，s)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ13.7，15.3，15.7，18.5，19.4，21.2，22.4，32.5，35.5，39.1，43.4，43.8，51.9，61.3，64.8，73.5，75.9，76.4，116.7，120.1，124.3，137.5，137.7，152.3，165.2，171.0，222.3；LRMS(ESI)C27H39NO6SNa[M+Na+]計(jì)算值528.2，實(shí)驗(yàn)值528.2；HRMSC27H40NO6S[M+H+]計(jì)算值506.2576，實(shí)驗(yàn)值506.2583。在50℃下向環(huán)氧化物(0.7mg，1.38μmol)和TrisNHNH2(20.6mg，69μmol)的ClCH2CH2Cl(0.4mL)溶液中加入Et3N(9.6μL，69μmol)。反應(yīng)由HPTLC監(jiān)控(己烷/EtOAc＝1/2)。攪拌6h后，將該混合物冷卻至室溫，用EtOAc稀釋并通過用EtOAc沖洗過的硅膠墊過濾。濃縮后，殘余物用制備TLC(己烷/EtOAc＝1/2)純化給出還原的產(chǎn)物(0.5mg，0.985μmol，71％)為白色固體。該化合物的光譜數(shù)據(jù)與已報(bào)導(dǎo)的dEpoB的光譜相同。在50℃下向環(huán)氧化物(14.0mg，27.7μmol)和TrisNHNH2(165mg，0.554mmol)的ClCH2CH2Cl(3.3mL)溶液中加入Et3N(77.0μL，0.554mmol)。反應(yīng)由HPTLC監(jiān)控(己烷/EtOAc＝1/2)。攪拌6h后，將該混合物冷卻至室溫，用EtOAc稀釋并通過用EtOAc沖洗過的硅膠墊過濾。濃縮后，殘余物用制備TLC(己烷/EtOAc＝1/2)純化給出還原的產(chǎn)物(12.3mg，24.2μmol，87％)為無色固體。[α]D24-13.8(c0.61，CHCl3)；IR(film)ν3475，2971，2875，1735，1689，1456，1382，1253，1181，1151，1056，980，884，735cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.95(3H，d，J＝7.1Hz)，1.04(3H，s)，1.11(3H，d，J＝7.0Hz)，1.28(3H，s)，1.37(3H，s)，1.25-1.44(2H，m)，1.45-1.59(2H，m)，1.71-1.82(3H，m)，1.86(1H，dt，J＝15.3，9.5Hz)，2.10(1H，dd，J＝15.3，3.6Hz)，2.13(3H，s)，2.40(1H，dd，J＝12.5，2.5Hz)，2.49(1H，dd，J＝12.5，11.0Hz)，2.74(3H，s)，2.80(1H，brs，OH)，3.07(1H，dd，J＝10.3，3.3Hz)，3.34(1H，qd，J＝7.0，0.5Hz)，3.89(1H，brs，OH)，4.03-4.09(1H，m)，4.12-4.17(1H，m)，5.69(1H，d，J＝9.1Hz)，6.63(1H，s)，7.00(1H，s)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ12.9，15.4，16.3，18.8，19.3，21.6，22.0，23.0，31.5，32.1，33.6，38.6，38.9，42.6，51.7，62.6，65.5，71.2，74.5，76.3，116.6，119.9，138.0，152.2，165.2，170.6，222.7；LRMS(ESI)C27H41NO6SNa[M+Na+]計(jì)算值530.3，實(shí)驗(yàn)值530.2；HRMSC27H42NO6S[M+H+]計(jì)算值508.2733，實(shí)驗(yàn)值508.2754。將酮與苯(5mL×2)共沸然后在高真空下干燥0.5h。在0℃下于5min內(nèi)向Wittig鹽(1.19g，2.27mmol)的THF(18mL)溶液中滴加t-BuOK(2.2□L的1.0M的THF溶液，2.20mmol)。在0℃下將該混合物攪拌20min并然后冷卻至-78℃。于10min內(nèi)向該混合物中滴加酮(1.06g，1.51mmol)的THF(10mL+2mL沖洗)溶液，將得到的混合物在2h內(nèi)溫?zé)嶂?20℃。用飽和NH4Cl水溶液(15mL)淬滅該反應(yīng)并用EtOAc萃取(50mL×3)。合并的有機(jī)層用鹽水(20mL)洗滌，經(jīng)Na2SO4干燥并濃縮。殘余物用急驟柱層析(SiO2～65g，己烷/Et2O＝30∶1至20∶1)純化給出想要的16(E)-異構(gòu)體(1.01g，1.11mmol，74％)和不想要的16(Z)-異構(gòu)體(154.5mg，0.182mmol，11％)均為無色無定形油狀物。[α]D24-19.0(c0.10，CHCl3)；IR(film)ν2954，2930，2880，1744，1692，1472，1381，1321，1252，1171，1114，1038，1006，837，776cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.09(3H，s)，0.12(3H，s)，0.15(6H，s)，0.55(6H，q，J＝7.8Hz)，0.87(9H，t，J＝8.0Hz)，0.96(9H，s)，0.97(9H，s)，1.01(3H，s)，1.06(3H，d，J＝7.1Hz)，1.12(3H，s)，1.20(3H，d，J＝7.1Hz)，2.07-2.16(1H，m)，2.18(3H，d，J＝1.0Hz)，2.38(1H，dd，J＝14.4，3.3Hz)，2.34-2.46(1H，m)，2.49(1H，dd，J＝14.4，7.4Hz)，2.78-2.90(2H，m)，2.97-3.09(2H，m)，3.98(1H，d，J＝8.9Hz)，4.54(1H，dd，J＝7.3，3.3Hz)，4.97(2H，s)，5.33(1H，ddd，J＝15.8，8.6，4.9Hz)，5.63(1H，dd，J＝9.6，2.4Hz)，5.78(1H，dd，J＝15.8，8.2Hz)，6.22-6.27(1H，m)，6.60(1H，s)，7.09(1H，s)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ-5.3(2C)，-3.4，-3.3，5.5(3C)，7.0(3C)，14.6，17.1，18.4，18.7，19.8，21.3，24.8，25.9(3C)，26.4(3C)，29.6，32.9，42.0，42.1，48.2，54.1，63.4，73.4，76.9，77.8，117.2，121.7，124.3[q，1J(C，F(xiàn))＝273.6Hz]，127.2，130.7[q，2J(C，F(xiàn))＝27.5Hz]，130.8[q，3J(C，F(xiàn))＝6.2Hz]，133.2，136.4，152.6，170.1，172.4，217.1；LRMS(ESI)C45H78F3NO6SSi3Na[M+Na+]計(jì)算值924.5，實(shí)驗(yàn)值924.5；HRMSC45H79F3NO6SSi3[M+H+]計(jì)算值902.4888，實(shí)驗(yàn)值902.4887。D2665.7(c1.76，CHCl3)；IR(film)ν2955，2931，2879，1743，1692，1472，1380，1321，1253，1170，1113，1007，836，776cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.07(3H，s)，0.13(3H，s)，0.16(6H，s)，0.48(6H，q，J＝7.8Hz)，0.84(9H，t，J＝7.9Hz)，0.97(18H，s)，0.98(3H，s)，1.06(3H，d，J＝7.1Hz)，1.11(3H，s)，1.20(3H，d，J＝7.2Hz)，2.00(3H，s)，2.03-2.11(1H，m)，2.33(1H，dd，J＝14.1，2.8Hz)，2.43(1H，dd，J＝14.0，7.8Hz)，2.40-2.48(1H，m)，2.76-2.89(2H，m)，2.97-3.10(2H，m)，3.99(1H，d，J＝9.3Hz)，4.57(1H，dd，J＝7.8，2.6Hz)，4.95(1H，d，J＝14.6Hz)，5.00(1H，d，J＝14.6Hz)，5.33(1H，ddd，J＝15.6，9.1，3.8Hz)，5.82(1H，dd，J＝15.6，8.3Hz)，6.30(1H，s)，6.32-6.38(1H，m)，7.04(1H，s)，7.11(1H，dd，J＝11.0，2.3Hz)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ-5.3(2C)，-3.2，-3.2，5.5(3C)，7.0(3C)，17.2，18.4，18.8，19.3，19.8，22.4，25.1，25.9(3C)，26.5(3C)，29.7，33.0，41.9，42.1，48.6，54.0，63.5，72.1，73.3，76.9，117.0，120.8，124.5[q，1J(C，F(xiàn))＝273.5Hz]，127.9，129.7[q，2J(C，F(xiàn))＝27.6Hz]，131.9[q，3J(C，F(xiàn))＝6.1Hz]，132.9，136.4，152.4，170.1，172.9，217.5；LRMS(ESI)C45H78F3NO6SNa[M+Na+]計(jì)算值924.5，實(shí)驗(yàn)值924.5。在0℃下向在塑料管中的甲硅烷基醚(1.04g，2.25mmol)的THF(22mL)溶液中緩慢加入HF·吡啶(11mL)，將該混合物在室溫下攪拌4.3h。在0℃下于10min內(nèi)滴加TMSOMe(75mL)淬滅反應(yīng)。在室溫下劇烈攪拌該混合物4.2h。濃縮并在高真空干燥1h后，將殘余物通過急驟柱層析(SiO2～25g，己烷/EtOAc＝3∶4至1∶2)純化，給出三醇(615.7mg，1.00mmol，96％)為無色粉末。[α]D25-57.7(c1.20，CHCl3)；IR(film)ν3441，2974，2932，1734，1685，1507，1456，1374，1318，1248，1169，1112，1054，982，888，737cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.04(3H，s)，1.12(3H，d，J＝6.9Hz)，1.25(3H，d，J＝6.8Hz)，1.36(3H，s)，1.90(1H，d，J＝6.6Hz，OH)，2.08(3H，s)，2.23-2.32(1H，m)，2.34(1H，dd，J＝15.7，2.4Hz)，2.49(1H，dd，J＝15.7，10.1Hz)，2.59-2.69(2H，m)，2.95-3.01(2H，m)，3.04(1H，五重峰，J＝6.8Hz)，3.72(1H，td，J＝7.0，3.0Hz)，3.78(1H，d，J＝5.7Hz，OH)，4.38(1H，ddd，J＝10.1，5.7，2.4Hz)，4.90(2H，d，J＝6.1Hz)，5.10(1H，t，J＝6.1Hz，OH)，5.44(1H，t，J＝4.7Hz)，5.60(1H，dd，J＝15.9，4.4Hz)，5.66(1H，dd，J＝15.9，5.0Hz)，6.28(1H，t，J＝6.7Hz)，6.73(1H，s)，7.16(1H，s)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ16.0，16.5，17.4，17.5，22.9，28.5，30.3，39.0，39.6，45.6，54.0，60.9，70.6，75.6，75.7，116.8，119.2，124.2[q，1J(C，F(xiàn))＝273.6Hz]，127.9，129.8[q，2J(C，F(xiàn))＝28.4Hz]，130.3[q，3J(C，F(xiàn))＝5.9Hz]，131.2，137.0，152.2，169.8，170.0，218.3；LRMS(ESI)C27H37F3NO6SNa[M+H+]計(jì)算值560.2，實(shí)驗(yàn)值560.1；HRMSC27H37F3NO6S[M+H+]計(jì)算值560.2294，實(shí)驗(yàn)值560.2299。在0℃下向在塑料管中的甲硅烷基醚(42.8mg，55.4μmol)的THF(1mL)溶液中緩慢加入HF·吡啶(0.5mL)，并將該混合物在室溫下攪拌4.3h。在0℃下于10min內(nèi)滴加TMSOMe(3.2mL)淬滅反應(yīng)。在室溫下劇烈攪拌該混合物1.5h。濃縮并在高真空干燥1h后，將殘余物通過急驟柱層析(SiO2，己烷/EtOAc＝1∶1)純化，給出二醇(23.6mg，43.4μmol，78％)為無色油狀物。[α]D2531.6(c1.00，CHCl3)；IR(film)ν2955，2878，1743，1692，1471，1379，1320，1253，1169，1114，1007，877，835，741cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.04(3H，s)，1.11(3H，d，J＝6.9Hz)，1.20(3H，d，J＝6.9Hz)，1.30(3H，s)，1.93(3H，brs)，2.22(1H，d，J＝4.3Hz，OH)，2.25-2.33(1H，m)，2.38-2.41(2H，m)，2.51-2.59(2H，m)，2.70(3H，s)，2.80-2.90(1H，m)，2.94(1H，dd，J＝15.6，4.7Hz)，3.06(1H，dd，J＝15.6，7.4Hz)，3.19(1H，五重峰，J＝6.6Hz)，3.71-3.76(1H，m)，4.26-4.32(1H，m)，5.57(1H，ddd，J＝15.8，7.2，5.0Hz)，5.67(1H，dd，J＝15.8，6.8Hz)，6.27(1H，s)，6.33(1H，dd，J＝7.6，6.3Hz)，6.76(1H，dd，J＝8.3，2.9Hz)，6.94(1H，s)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ14.5，17.9，19.2，19.5，19.8，22.2，28.7，32.4，39.8(2C)，44.7，53.3，71.9，74.1，75.1，117.0，120.4，124.4[q，1J(C，F(xiàn))＝272.7Hz]，128.4，130.1[q，2J(C，F(xiàn))＝28.9Hz]，131.5[q，3J(C，F(xiàn))＝5.9Hz]，133.0，136.9，152.2，165.5，170.7，218.5；LRMS(ESI)C27H36F3NO5SNa[M+Na+]計(jì)算值566.2，實(shí)驗(yàn)值566.3。在0℃下向醇(18.9mg，33.8μmol)和Et3N(18.8μL，0.135mmol)的CH2Cl2(1mL)溶液中加入TsCl(12.9mg，67.5μmol)，隨后加入DMAP(2.1mg，16.9μmol)。室溫下攪拌1.5h后，將該混合物通過硅膠墊(EtOAc沖洗)過濾。濃縮后，殘余物用制備TLC(己烷/EtOAc＝1/1)純化給出甲苯磺酸酯(8.5mg，11.9μmol，35％)和氯化物(4.3mg，7.44μmol，22％)均為無色粉末。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.06(3H，s)，1.12(3H，d，J＝7.0Hz)，1.23(3H，d，J＝6.7Hz)，1.33(3H，s)，1.99(1H，d，J＝5.5Hz)，2.10(3H，s)，2.25-2.34(1H，m)，2.41(1H，dd，J＝15.5，3.3Hz)，2.47(3H，s)，2.48(1H，dd，J＝15.7，9.4Hz)，2.51-2.63(1H，m)，2.63(1H，d，J＝6.1Hz，OH)，2.64-2.75(1H，m)，2.91-3.05(2H，m)，3.10(1H，五重峰，J＝6.8Hz)，3.70-3.75(1H，m)，4.30(1H，ddd，J＝9.3，6.1，3.2Hz)，5.32(2H，s)，5.41(1H，dd，J＝5.8，4.5Hz)，5.57(1H，ddd，J＝15.8，6.4，4.6Hz)，5.65(1H，dd，J＝15.8，6.0Hz)，6.21(1H，t，J＝7.1Hz)，6.59(1H，s)，7.18(1H，s)，7.37(2H，d，J＝8.1Hz)，7.84(2H，d，J＝8.3Hz)；LRMS(ESI)C34H42F3NO8S2Na[M+Na+]計(jì)算值736.2，實(shí)驗(yàn)值736.3。IR(film)ν3494，2975，2935，1734，1689，1319，1248，1170，1113，1040，979，738cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.06(3H，s)，1.12(3H，d，J＝6.9Hz)，1.23(3H，d，J＝6.7Hz)，1.34(3H，s)，2.00(1H，d，J＝5.6Hz，OH)，2.15(3H，s)，2.25-2.35(1H，m)，2.41(1H，dd，J＝15.5，3.2Hz)，2.49(1H，dd，J＝15.5，9.4Hz)，2.53-2.62(1H，m)，2.69(1H，d，J＝6.1Hz，OH)，2.66-2.76(1H，m)，2.92-3.05(2H，m)，3.11(1H，五重峰，J＝6.4Hz)，3.70-3.76(1H，m)，4.32(1H，ddd，J＝9.2，5.9，3.1Hz)，4.85(2H，s)，5.43(1H，dd，J＝6.0，4.4Hz)，5.59(1H，ddd，J＝15.9，6.4，4.5Hz)，5.66(1H，dd，J＝15.9，6.1Hz)，6.23(1H，t，J＝6.8Hz)，6.63(1H，s)，7.20(1H，s)；LRMS(ESI)C27H35ClF3NO5SNa[M+Na+]計(jì)算值600.2，實(shí)驗(yàn)值600.2。在0℃下向三醇(50.4mg，90.1μmol)的THF(1mL)溶液中加入(PhO)2PON3(27.2μl，0.126mmol)。5min后，加入DBU(16.2μl，0.108mmol)，將該混合物在0℃下攪拌2h，然后在室溫下攪拌20.5h。該混合物用EtOAc稀釋并用水(2mL)淬滅，用EtOAc萃取(三次)，合并的有機(jī)層經(jīng)Na2SO4干燥。濃縮后，將殘余物通過急驟柱層析(SiO2，己烷/EtOAc＝3∶2)純化，給出疊氮化物(45.6mg，78μmol，87％)為無色粉末。[α]D24-60.3(c0.345，CHCl3)；IR(film)ν3492，2975，2931，2105，1732，1688，1319，1248，1169，1113，982，733cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.05(3H，s)，1.12(3H，d，J＝7.0Hz)，1.23(3H，d，J＝6.8Hz)，1.33(3H，s)，2.01(1H，d，J＝5.5Hz，OH)，2.17(3H，s)，2.25-2.35(1H，m)，2.41(1H，dd，J＝15.5，3.2Hz)，2.49(1H，dd，J＝15.5，9.5Hz)，2.54-2.60(1H，m)，2.66(1H，d，J＝6.0Hz)，2.65-2.76(1H，m)，2.96(1H，dd，J＝16.0，4.2Hz)，3.03(1H，dd，J＝16.1，6.7Hz)，3.11(1H，五重峰，J＝6.8Hz)，3.71-3.76(1H，m)，4.31(1H，ddd，J＝9.2，5.9，3.2Hz)，4.65(2H，s)，5.43(1H，dd，J＝6.0，4.3Hz)，5.58(1H，ddd，J＝15.8，6.4，4.6Hz)，5.66(1H，dd，J＝15.8，6.1Hz)，6.23(1H，t，J＝7.3Hz)，6.63(1H，s)，7.18(1H，s)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ15.4，15.9，17.8，18.6，22.8，28.7，30.9，39.5，39.7，45.1，51.3，53.5，71.5，75.4，76.8，118.2，119.6，122.7[q，1J(C，F(xiàn))＝273.6Hz]，127.9，130.0[q，3J(C，F(xiàn))＝6.1Hz]，130.6[q，2J(C，F(xiàn))＝27.9Hz]，132.3，137.2，153.1，163.9，170.0，218.3；LRMS(ESI)C27H35F3N4O5SNa[M+Na+]計(jì)算值607.2，實(shí)驗(yàn)值607.2；HRMSC27H36F3N4O5S[M+H+]計(jì)算值585.2359，實(shí)驗(yàn)值585.2344。向甲苯磺酸酯(8.9mg，12.5μmol)的DMF(0.4mL)溶液中加入NaN3(12.2mg，0.188mmol)。在室溫下攪拌21h，該混合物用飽和NH4Cl(水溶液)淬滅，用EtOAc萃取(三次)。濃縮后，殘余物用制備TLC(己烷/EtOAc＝1∶1)純化給出疊氮化物(6.9mg，11.8μmol，94％)為無色粉末。向疊氮化物(21.0mg，35.9μmol)的THF(0.6mL)溶液中加入PMe3(在THF中1.0M，43.1μL，43.1μmol)。2min后，加入水(0.1mL)并將混合物在室溫下攪拌3h。加入更多的PMe3(在THF中1.0M，7.2μL，7.2μmol)，并在室溫下將混合物攪拌1.5h。加入28％的NH4OH水溶液(54.5μL)。室溫下攪拌1h后，將混合物直接用制備TLC(CH2Cl2/MeOH＝100∶7.5)純化給出胺(15.9mg，28.5μmol，79％)為無色粉末。[α]D26-64.2(c0.815，CHCl3)；IR(film)ν3504，3363，2975，2931，1733，1688，1450，1383，1318，1248，1169，1113，1054，984，736cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.05(3H，s)，1.12(3H，d，J＝7.0Hz)，1.23(3H，d，J＝6.8Hz)，1.34(3H，s)，2.12(3H，d，J＝0.7Hz)，2.24-2.35(1H，m)，2.39(1H，dd，J＝15.4，3.0Hz)，2.49(1H，dd，J＝15.4，9.8Hz)，2.54-2.63(1H，m)，2.66-2.76(1H，m)，2.97(1H，dd，J＝16.2，4.2Hz)，3.03(1H，dd，J＝16.3，6.5Hz)，3.10(1H，五重峰，J＝6.8Hz)，3.74(1H，dd，J＝6.7，3.5Hz)，4.18(2H，s)，4.34(1H，dd，J＝9.8，2.9Hz)，5.43(1H，dd，J＝6.0，4.3Hz)，5.55-5.64(1H，m)，5.67(1H，dd，J＝15.9，5.8Hz)，6.24(1H，brt，J＝7.3Hz)，6.66(1H，s)，7.10(1H，s)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ15.3，16.1，17.7，18.2，22.6，28.7，30.9，39.4，39.7，43.9，45.1，53.8，71.2，75.3，76.6，116.8，120.1，124.2[q，1J(C，F(xiàn))＝273.5Hz]，127.8，130.2[q，3J(C，F(xiàn))＝6.1Hz]，130.4[q，2J(C，F(xiàn))＝28.6Hz]，132.2，136.6，152.3，170.1，172.7，218.4；LRMS(ESI)C27H38F3N2O5S[M+H+]計(jì)算值559.2，實(shí)驗(yàn)值559.2；HRMSC27H38F3N2O5S[M+H+]計(jì)算值559.2454，實(shí)驗(yàn)值559.2440。向攪拌過的胺(15.9mg，28.5μmol)的CH3CN(0.78mL)溶液中加入HCHO(37％水溶液，31.4μL，0.143mmol)，隨后加入NaBH3CN(在THF中1.0M，85.5μL。85.5μmol)。在室溫下攪拌混合物20min。加入AcOH(1滴)，室溫下攪拌混合物40min。將混合物直接用制備TLC(CH2Cl2/MeOH＝100∶8)純化給出二甲胺(15.6mg，26.6μmol，93％)為無色粉末。[α]D24-49.9(c0.74，CHCl3)；IR(film)ν3424，2974，1729，1689，1468，1318，1247，1169，1112，754cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.05(3H，s)，1.12(3H，d，J＝6.9Hz)，1.23(3H，d，J＝6.8Hz)，1.33(3H，s)，2.17(3H，s)，2.24-2.35(1H，m)，2.43(1H，dd，J＝15.7，3.6Hz)，2.49(1H，dd，J＝15.6，9.1Hz)，2.55-2.64(2H，m，包含OH)，2.68-2.77(1H，m)，2.80(3H，s)，2.81(3H，s)，2.92-3.06(2H，m)，3.10(1H，五重峰，J＝6.8Hz)，3.69-3.76(1H，m)，4.25-4.34(1H，m)，4.33(2H，s)，5.42(1H，t，J＝5.5Hz)，5.57(1H，dt，J＝15.8，6.3Hz)，5.66(1H，dd，J＝15.7，6.4Hz)，6.22(1H，brt，J＝7.2Hz)，6.64(1H，s)，7.30(1H，s)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ15.3，15.8，17.8，18.8，22.3，28.8，30.9，39.6，39.6，45.2，49.7，49.7，53.4，61.5，71.7，75.4，77.4，119.2，120.2，124.2[q，1J(C，F(xiàn))＝273.5Hz]，127.8，129.9[q，3J(C，F(xiàn))＝6.2Hz]，130.7[q，2J(C，F(xiàn))＝28.4Hz]，132.4，137.6，154.2，157.2，170.0，218.3；LRMS(ESI)C29H42F3N2O5S[M+H+]計(jì)算值580.2，實(shí)驗(yàn)值580.2。熔點(diǎn)；兩個(gè)樣品均未重結(jié)晶，但通過SiO2純化。權(quán)利要求1.下式的化合物及其藥學(xué)可接受的衍生物其中R1為氫或低級烷基；R2為取代或未取代的芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基部分；R5和R6各自獨(dú)立地為氫或保護(hù)基團(tuán)；X為O、S、C(R7)2或NR7，其中每種情況下的R7獨(dú)立地為氫或低級烷基；A-B代表CRA＝CRB-、C(RA)2-C(RB)2-或-C≡C-；C-D代表-CRC＝CRD-、-C(RC)2-C(RD)2-或-C≡C-；其中每種情況下的RA獨(dú)立地為氫；鹵素；-ORA’；-SRA’；-N(RA’)2；-C(O)ORA’；-C(O)RA’；-CONHRA’；-O(C＝O)RA’；-O(C＝O)ORA’；-NRA’(C＝O)RA’；N3；N2RA’；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或無環(huán)、直鏈或支鏈的脂肪族、雜脂肪族、芳基或雜芳基，任選取代以一個(gè)或多個(gè)如下基團(tuán)氫；鹵素；-ORA’；-SRA’；-N(RA’)2；-C(O)ORA’；-C(O)RA’；-CONHRA’；-O(C＝O)RA’；-O(C＝O)ORA’；-NRA’(C＝O)RA’；N3；N2RA’；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或無環(huán)、直鏈或支鏈的取代或未取代的脂肪族、雜脂肪族、芳基或雜芳基部分；對于每種情況，RB獨(dú)立地為氫；鹵素；-ORB’；-SRB’；-N(RB’)2；-C(O)ORB’；-C(O)RB’；-CONHRB’；-O(C＝O)RB’；-O(C＝O)ORB’；-NRB’(C＝O)RB’；N3；N2RB’；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或無環(huán)、直鏈或支鏈的脂肪族、雜脂肪族、芳基或雜芳基、任選取代以一個(gè)或多個(gè)如下基團(tuán)氫；鹵素；-ORB’；-SRB’；-N(RB’)2；-C(O)ORB’；-C(O)RB’；-CONHRB’；-O(C＝O)RB’；-O(C＝O)ORB’；-NRB’(C＝O)RB’；N3；N2RB’；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或無環(huán)、直鏈或支鏈的取代或未取代的脂肪族、雜脂肪族、芳基或雜芳基部分；對于每種情況，RC獨(dú)立地為氫；鹵素；-ORC’；-SRC’；-N(RC’)2；-C(O)ORC’；-C(O)RC’；-CONHRC’；-O(C＝O)RC’；-O(C＝O)ORC’；-NRC’(C＝O)RC’；N3；N2RC’；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或無環(huán)、直鏈或支鏈的脂肪族、雜脂肪族、芳基或雜芳基，任選取代以一個(gè)或多個(gè)如下基團(tuán)氫；鹵素；-ORC’；-SRC’；-N(RC’)2；-C(O)ORC’；-C(O)RC’；-CONHRC’；-O(C＝O)RC’；-O(C＝O)ORC’；-NRC’(C＝O)RC’；N3；N2RC’；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或無環(huán)、直鏈或支鏈的取代或未取代的脂肪族、雜脂肪族、芳基或雜芳基部分；對于每種情況，RD獨(dú)立地為氫；鹵素；-ORD’；-SRD’；-N(RD’)2；-C(O)ORD’；-C(O)RD’；-CONHRD’；-O(C＝O)RD’；-O(C＝O)ORD’；-NRD’(C＝O)RD’；N3；N2RD’；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或無環(huán)、直鏈或支鏈的脂肪族、雜脂肪族、芳基或雜芳基，任選取代以一個(gè)或多個(gè)如下基團(tuán)氫；鹵素；-ORD’；-SRD’；-N(RD’)2；-C(O)ORD’；-C(O)RD’；-CONHRD’；-O(C＝O)RD’；-O(C＝O)ORD’；-NRD’(C＝O)RD’；N3；N2RD’；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或無環(huán)、直鏈或支鏈的取代或未取代的脂肪族、雜脂肪族、芳基或雜芳基部分；或者其中RA，RB，RC或RD中任意兩個(gè)合在一起可以形成環(huán)狀部分并可以通過氧、硫、碳或氮原子連接，或者任意兩個(gè)相鄰的RA，RB，RC或RD基團(tuán)合在一起，可以形成3-6元取代或未取代的脂肪族、雜脂肪族、芳基或雜芳基環(huán)；其中每種情況下的RA’，RB’，RC’或RD’獨(dú)立地為氫；保護(hù)基團(tuán)；直鏈或支鏈、取代或未取代、環(huán)狀或無環(huán)的、脂肪族、雜脂肪族、芳基、雜芳基、芳烷基、芳烯基、芳炔基、芳烯基、芳炔基或雜芳烷基、雜芳烯基或雜芳炔基部分。2.下式的化合物和其藥學(xué)可接受的衍生物其中X為O、S、C(R7)2或NR7，其中每種情況下的R7獨(dú)立地為氫或低級烷基；Y為O或S；R5和R6各自獨(dú)立地為氫或保護(hù)基團(tuán)；R8獨(dú)立地為氫、鹵素、-OR9、-SR9、-N(R9)2、-CZ3、-CHZ2、-CH2Z，其中Z為F、Br、Cl、I、ORB’、NHRB’、N(RB’)2或SRB’；-(CV2)nOR9、-(CV2)nN(R9)2、-(CV2)nSR9、-(C＝O)R9、-O(C＝O)R9、-(C＝O)OR9、-O(C＝O)OR9；-NH(C＝O)R9、-NH(C＝O)OR9、-(C＝O)NHR9，或環(huán)狀或無環(huán)、直鏈或支鏈的脂肪族、雜脂肪族、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基部分，任選取代以一個(gè)或多個(gè)出現(xiàn)的如下基團(tuán)鹵素、-OR9、-SR9、-N(R9)2、-(CV2)nOR9、-(CV2)nN(R9)2、-(CV2)nSR9、-(C＝O)R9、-O(C＝O)R9、-(C＝O)OR9、-O(C＝O)OR9；-NH(C＝O)R9、-NH(C＝O)OR9、-(C＝O)NHR9，或環(huán)狀或無環(huán)、直鏈或支鏈、取代或未取代的脂肪族、雜脂肪族、芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基部分，其中每種情況下的R9獨(dú)立地為氫；保護(hù)基團(tuán)；環(huán)狀或無環(huán)、直鏈或支鏈、取代或未取代的脂肪族、雜脂肪族、芳基或雜芳基部分；或者是埃坡霉素、脫氧埃坡霉素或其類似物；聚合物；糖類；光親和性標(biāo)記物；或放射性標(biāo)記物；其中每種情況下的V獨(dú)立地為氫、鹵素、羥基、硫代、氨基、烷氨基或被保護(hù)的羥基、硫代或氨基；每種情況下的t獨(dú)立地為0、1或2；每種情況下的n獨(dú)立地為0-10；A-B代表CRA＝CRB-、C(RA)2-C(RB)2-或-C≡C-；C-D代表-CRC＝CRD-、C(RC)2-C(RD)2-或-C≡C-；其中每種情況下的RA獨(dú)立地為氫；鹵素；-ORA’；-SRA’；-N(RA’)2；-C(O)ORA’；-C(O)RA’；-CONHRA’；-O(C＝O)RA’；-O(C＝O)ORA’；-NRA’(C＝O)RA’；N3；N2RA’；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或無環(huán)、直鏈或支鏈的脂肪族、雜脂肪族、芳基或雜芳基，任選取代以一個(gè)或多個(gè)如下基團(tuán)氫；鹵素；-ORA’；-SRA’；-N(RA’)2；-C(O)ORA’；-C(O)RA’；-CONHRA’；-O(C＝O)RA’；-O(C＝O)ORA’；-NRA’(C＝O)RA’；N3；N2RA’；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或無環(huán)、直鏈或支鏈的取代或未取代的脂肪族、雜脂肪族、芳基或雜芳基部分；對于每種情況，RB獨(dú)立地為氫；鹵素；-ORB’；-SRB’；-N(RB’)2；-C(O)ORB’；-C(O)RB’；-CONHRB’；-O(C＝O)RB’；-O(C＝O)ORB’；-NRB’(C＝O)RB’；N3；N2RB’；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或無環(huán)、直鏈或支鏈的脂肪族、雜脂肪族、芳基或雜芳基、任選取代以一個(gè)或多個(gè)如下基團(tuán)氫；鹵素；-ORB’；-SRB’；-N(RB’)2；-C(O)ORB’；-C(O)RB’；-CONHRB’；-O(C＝O)RB’；-O(C＝O)ORB’；-NRB’(C＝O)RB’；N3；N2RB’；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或無環(huán)、直鏈或支鏈的取代或未取代的脂肪族、雜脂肪族、芳基，或雜芳基部分；對于每種情況，RC獨(dú)立地為氫；鹵素；-ORC’；-SRC’；-N(RC’)2；-C(O)ORC’；-C(O)RC’；-CONHRC’；-O(C＝O)RC’；-O(C＝O)ORC’；-NRC’(C＝O)RC’；N3；N2RC’；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或無環(huán)、直鏈或支鏈的脂肪族、雜脂肪族、芳基或雜芳基，任選取代以一個(gè)或多個(gè)如下基團(tuán)氫；鹵素；-ORC’；-SRC’；-N(RC’)2；-C(O)ORC’；-C(O)RC’；-CONHRC’；-O(C＝O)RC’；-O(C＝O)ORC’；-NRC’(C＝O)RC’；N3；N2RC’；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或無環(huán)、直鏈或支鏈的取代或未取代的脂肪族、雜脂肪族、芳基或雜芳基部分；對于每種情況，RD獨(dú)立地為氫；鹵素；-ORD’；-SRD’；-N(RD’)2；-C(O)ORD’；-C(O)RD’；-CONHRD’；-O(C＝O)RD’；-O(C＝O)ORD’；-NRD’(C＝O)RD’；N3；N2RD’；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或無環(huán)、直鏈或支鏈的脂肪族、雜脂肪族、芳基或雜芳基，任選取代以一個(gè)或多個(gè)如下基團(tuán)氫；鹵素；-ORD’；-SRD’；-N(RD’)2；-C(O)ORD’；-C(O)RD’；-CONHRD’；-O(C＝O)RD’；-O(C＝O)ORD’；-NRD’(C＝O)RD’；N3；N2RD’；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或無環(huán)、直鏈或支鏈的取代或未取代的脂肪族、雜脂肪族、芳基，或雜芳基部分；或者其中RA，RB，RC或RD中任意兩個(gè)合在一起可以形成環(huán)狀部分并可以通過氧、硫、碳或氮原子連接，或者任意兩個(gè)相鄰的RA，RB，RC或RD基團(tuán)合在一起，可以形成3-6元取代或未取代的脂肪族、雜脂肪族、芳基或雜芳基環(huán)；其中每種情況下的RA’，RB’，RC’或RD’獨(dú)立地為氫；保護(hù)基團(tuán)；直鏈或支鏈、取代或未取代、環(huán)狀或無環(huán)的、脂肪族、雜脂肪族、芳基、雜芳基、芳烷基、芳烯基、芳炔基、芳烯基、芳炔基或雜芳烷基、雜芳烯基或雜芳炔基部分。3.權(quán)利要求2的化合物，其中A-B為-CH＝C(RB)-。4.權(quán)利要求2的化合物，其中A-B為5.權(quán)利要求2的化合物，其中RB為甲基。6.權(quán)利要求2的化合物，其中RB為-CF3。7.權(quán)利要求2、3或4的化合物，其中R8為甲基。8.權(quán)利要求2、3或4的化合物，其中R8為-CH2OH。9.權(quán)利要求2、3或4的化合物，其中R8為-CH2NH2。10.權(quán)利要求2、3或4的化合物，其中C-D為其中Z為O、S、NRZ或C(RZ)2，其中RZ為氫、鹵素、低級酰基或低級烷基。11.權(quán)利要求10的化合物，其中Z為NH。12.權(quán)利要求10的化合物，其中Z為CH2。13.權(quán)利要求10的化合物，其中Z為O。14.權(quán)利要求10的化合物，其中Z為S。15.權(quán)利要求2、3或4的化合物，其中C-D為或其中Z為O、S、NRZ或C(RZ)2，其中RZ為氫、鹵素、低級?；虻图壨榛?。16.權(quán)利要求15的化合物，其中Z為NH。17.權(quán)利要求15的化合物，其中Z為CH2。18.權(quán)利要求2的化合物，其中Y為S。19.權(quán)利要求2的化合物，其中Y為O。20.權(quán)利要求2、3或4的化合物，其中C-D為-C(RC)2-C(RD)2-。21.權(quán)利要求20的化合物，其中每種情況下的RC和RD選自氫、低級烷基、羥基、鹵素和低級烷氧基。22.權(quán)利要求20的化合物，其中每種情況下的RC和RD選自氫和甲基。23.權(quán)利要求20的化合物，其中每個(gè)RC為甲基和每個(gè)RD為氫。24.權(quán)利要求20的化合物，其中每個(gè)RC為氫和每個(gè)RD為甲基。25.權(quán)利要求20的化合物，其中一個(gè)RC為氫和另一個(gè)RC為甲基。26.權(quán)利要求20的化合物，其中一個(gè)RD為氫和另一個(gè)RD為甲基。27.權(quán)利要求1的化合物，選自下式的化合物28.權(quán)利要求1的化合物，選自下式的化合物29.權(quán)利要求1的化合物，選自下式的化合物30.權(quán)利要求1的化合物，選自下式的化合物31.權(quán)利要求1的化合物，選自下式的化合物32.權(quán)利要求1的化合物，選自下式的化合物33.用于治療癌癥的藥物組合物，其包含權(quán)利要求1的化合物和藥學(xué)可接受的賦形劑。34.權(quán)利要求33的藥物組合物，進(jìn)一步包含可利摩福。35.權(quán)利要求33的藥物組合物，進(jìn)一步包含可利摩福和乙醇。36.權(quán)利要求33的藥物組合物，其中所述化合物懸浮于1∶1的可利摩福/乙醇。37.權(quán)利要求33的藥物組合物，進(jìn)一步包含另外的細(xì)胞毒性劑。38.用于治療癌癥的藥物組合物，其包含治療有效量的權(quán)利要求1化合物或其藥學(xué)可接受的鹽；和藥學(xué)可接受的載體或稀釋劑，其中所述化合物的治療有效量為這樣的量其足以遞送約0.001至約40mg的化合物每kg對象體重。39.用于治療癌癥的藥物組合物，其包含權(quán)利要求1化合物；和藥學(xué)可接受的賦形劑；其中所述藥物組合物適合于對對象口服給藥。40.用于治療癌癥的藥物組合物，其包含權(quán)利要求2化合物；和藥學(xué)可接受的賦形劑；其中所述藥物組合物適合于對對象口服給藥。41.權(quán)利要求40的藥物組合物，其中R8為-CH2OH。42.權(quán)利要求40的藥物組合物，其中RB為-CHF2、-CH2F或-CF3。43.權(quán)利要求40的藥物組合物，其中C-D為-CH＝CH-，其中該雙鍵為反式構(gòu)型。44.權(quán)利要求40的藥物組合物，其中所述化合物如下式45.權(quán)利要求40的藥物組合物，其中所述組合物為固體形式。46.權(quán)利要求40的藥物組合物，其中所述組合物為液體形式。47.治療癌癥的方法，其包括將治療有效量的權(quán)利要求1的化合物向需要其的對象給藥。48.權(quán)利要求47的方法，其中化合物的治療有效量為這樣的量，其足以遞送約0.001mg至約40mg的化合物每kg體重。49.權(quán)利要求47的方法，其中化合物的治療有效量為這樣的量，其足以遞送約0.1mg至約25mg的化合物每kg體重。50.治療癌癥的方法，其包括將治療有效量的下式化合物向需要其的對象口服給藥51.制備下式化合物的方法其中R1為氫或低級烷基；R2為取代或未取代的芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基部分；R5和R6各自獨(dú)立地為氫或保護(hù)基團(tuán)；X為O、S、C(R7)2或NR7，其中每種情況下的R7獨(dú)立地為氫或低級烷基；和對于每種情況，RB獨(dú)立地為氫；鹵素；-ORB’；-SRB’；-N(RB’)2；-CY3、-CHY2、-CH2Y，其中Y為F、Br、Cl、I、ORB’、NHRB’、N(RB’)2或SRB’；-C(O)ORB’；-C(O)RB’；-CONHRB’；-O(C＝O)RB’；-O(C＝O)ORB’；-NRB’(C＝O)RB’；N3；N2RB’；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或無環(huán)、直鏈或支鏈的脂肪族、雜脂肪族、芳基或雜芳基，任選取代以一個(gè)或多個(gè)如下基團(tuán)氫；鹵素；-ORB’；-SRB’；-N(RB’)2；-C(O)ORB’；-C(O)RB’；-CONHRB’；-O(C＝O)RB’；-O(C＝O)ORB’；-NRB’(C＝O)RB’；N3；N2RB’；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或無環(huán)、直鏈或支鏈的取代或未取代的脂肪族、雜脂肪族、芳基或雜芳基部分；或?yàn)榘Ｆ旅顾?、脫氧埃坡霉素或其類似物；或?yàn)榫酆衔铮惶穷?；光親和性標(biāo)記物或放射性標(biāo)記物；其中每種情況下的RB’獨(dú)立地為氫；保護(hù)基團(tuán)；直鏈或支鏈、取代或未取代、環(huán)狀或無環(huán)的脂肪族、雜脂肪族、芳基，雜芳基、芳烷基、芳烯基、芳炔基、雜芳烷基、雜芳烯基或雜芳炔基部分；其為在金屬和還原劑的存在下將下式化合物異構(gòu)化52.權(quán)利要求51的方法，其中所述金屬為過渡金屬。53.權(quán)利要求51的方法，其中所述金屬為鈀。54.權(quán)利要求51的方法，其中所述還原劑選自LiAlH4、NaBH4和NaBH3CN。55.制備下式化合物的方法其中R1為氫或低級烷基；R2為取代或未取代的芳基、雜芳基、芳烷基或雜芳烷基部分；R5和R6各自獨(dú)立地為氫或保護(hù)基團(tuán)；X為O、S、C(R7)2或NR7，其中每種情況下的R7獨(dú)立地為氫或低級烷基；和對于每種情況，RB獨(dú)立地為氫；鹵素；-ORB’；-SRB’；-N(RB’)2；-CY3、-CHY2、-CH2Y，其中Y為F、Br、Cl、I、ORB’、NHRB’、N(RB’)2或SRB’；-C(O)ORB’；-C(O)RB’；-CONHRB’；-O(C＝O)RB’；-O(C＝O)ORB’；-NRB’(C＝O)RB’；N3；N2RB’；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或無環(huán)、直鏈或支鏈的脂肪族、雜脂肪族、芳基或雜芳基，任選取代以一個(gè)或多個(gè)如下基團(tuán)氫；鹵素；-ORB’；-SRB’；-N(RB’)2；-C(O)ORB’；-C(O)RB’；-CONHRB’；-O(C＝O)RB’；-O(C＝O)ORB’；-NRB’(C＝O)RB’；N3；N2RB’；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或無環(huán)、直鏈或支鏈的取代或未取代的脂肪族、雜脂肪族、芳基，或雜芳基部分；或?yàn)榘Ｆ旅顾?、脫氧埃坡霉素或其類似物；或?yàn)榫酆衔?；糖類、光親和性標(biāo)記物或放射性標(biāo)記物；其中每種情況下的RB’獨(dú)立地為氫；保護(hù)基團(tuán)；直鏈或支鏈、取代或未取代、環(huán)狀或無環(huán)的脂肪族、雜脂肪族、芳基，雜芳基、芳烷基、芳烯基、芳炔基、雜芳烷基、雜芳烯基或雜芳炔基部分；其為將下式化合物與卡賓或卡賓體試劑反應(yīng)56.權(quán)利要求55的方法，其中卡賓為CH2N2。全文摘要本發(fā)明提供式(I)的化合物如本發(fā)明中一般性描述的及以類和亞類描述的那樣。本發(fā)明另外還提供包含式(I)的化合物的藥物組合物，并提供治療癌癥的方法，該方法包括給藥式(I)的化合物。文檔編號C07D277/20GK1976699SQ200580013480公開日2007年6月6日申請日期2005年2月28日優(yōu)先權(quán)日2004年2月27日發(fā)明者塞繆爾·J·丹尼斯海弗斯凱,亞歷克謝·芮弗金,吉村文彥,周廷潮,安娜·埃斯特·加巴爾答歐特佳,董華進(jìn),吳開達(dá),馬爾科姆·A·S·摩爾,大衛(wèi)·杜恩申請人:斯?。瓌P特靈癌癥研究所