專利名稱：作為ccr2受體拮抗劑的巰基咪唑化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及具有CCR2受體拮抗劑性質(zhì)的巰基咪唑衍生物。本發(fā)明還涉及其制備方法及含有它們的藥用組合物。本發(fā)明也涉及使用所述化合物制備用以預(yù)防或治療通過CCR2受體(特別是CCR2B受體)的激活所介導(dǎo)的疾病的藥物。
WO02/066458敘述對細(xì)胞因子(尤其是TNF-α與IL-β)的釋放具有免疫調(diào)節(jié)及/或抑制活性的2-硫基-取代的咪唑衍生物。
FR1,487,326涉及用作止痛劑的硫基-咪唑衍生物及其血管擴張活性。
FR6,751M敘述用作鎮(zhèn)靜劑及止痛劑的硫基-咪唑衍生物。
US3,850,944敘述具有抗炎活性的2-巰基-5-(3-吡啶基)-咪唑衍生物。
EP0,277,384敘述用于控制雜草的1H-咪唑-5-羧酸衍生物。
本發(fā)明化合物在結(jié)構(gòu)、其藥理學(xué)活性和/或藥理學(xué)效力上與現(xiàn)有技術(shù)的化合物不同。
本發(fā)明的一個方面是涉及下式化合物 其N-氧化物、藥學(xué)上可接受的加成鹽、季胺或立體化學(xué)異構(gòu)形式，式中
R1代表氫、C1-6烷基、C3-7環(huán)烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、芳基或雜芳基；各R2獨立地代表鹵代、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、多鹵代C1-6烷基、多鹵代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、氨基、單-或二(C1-4烷基)氨基、硝基、芳基或芳氧基；R3代表氫、氰基、任選被羥基或C1-6烷氧基取代的C1-6烷基、C(＝O)-O-R5、C(＝O)-NR6aR6b、C(＝S)-NR6aR6b、S(＝O)2-NR6aR6b或C(＝O)-R7；R4代表氫或C1-6烷基；R5代表氫、C1-6烷基、羥基C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、多鹵代C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、單-或二(C1-4烷基)氨基C1-6烷基、氨基羰基C1-6烷基、單-或二(C1-4烷基)氨基羰基C1-6烷基或芳基；R6a與R6b各自獨立地代表氫、C1-6烷基、氨基、單-或二(C1-4烷基)氨基、芳基NH-、氨基C1-6烷基、單-或二(C1-4烷基)氨基C1-6烷基、C1-6烷基羰基氨基、氨基羰基氨基、C1-6烷氧基、羰基氨基或羥基C1-6烷基；或R6a和R6b與其連接的氮一起形成吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、哌啶基、哌嗪基、嗎啉基、硫代嗎啉基或被C1-6烷基取代的哌嗪基；R7代表氫、C1-6烷基、羥基C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、多鹵代C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、單-或二(C1-4烷基)氨基C1-6烷基、氨基羰基C1-6烷基、單-或二(C1-4烷基)氨基羰基C1-6烷基、芳基或雜芳基；
Z代表選自以下的環(huán)狀環(huán)系 各R8獨立地代表氫、鹵代、C1-6烷基、C1-6烷氧基、多鹵代C1-6烷基、多鹵代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、單-或二(C1-4烷基)氨基羰基、氨基、單-或二(C1-4烷基)氨基、羥基C1-6烷氨基、芳基、芳氧基、哌啶基、哌啶基氨基、嗎啉基、哌嗪基或硝基；各R9獨立地代表氫、鹵代或C1-6烷基；n為1、2、3、4或5；芳基代表苯基或被各自獨立地選自鹵代、C1-6烷基、C1-6烷氧基、多鹵代C1-6烷基、多鹵代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、單-或二(C1-4烷基)氨基羰基、氨基、單-或二(C1-4烷基)氨基、苯氧基或硝基的一、二、三、四或五個取代基取代的苯基；雜芳基代表呋喃基、噻吩基、吡咯基、唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、異唑基、異噻唑基、二唑基、三唑基、噻二唑基、吡啶基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基，所述雜芳基各自任選被各自獨立地選自鹵代、C1-6烷基、C1-6烷氧基、多鹵代C1-6烷基、多鹵代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、單-或二(C1-4烷基)氨基羰基、氨基、單-或二(C1-4烷基)氨基或硝基的一或二個取代基取代。
本發(fā)明也涉及化合物在制備用以預(yù)防或治療通過CCR2受體激活所介導(dǎo)的疾病，特別是用于預(yù)防或治療炎性疾病的藥物中的用途，其中所述化合物為式(I)的化合物 其N-氧化物、藥學(xué)上可接受的加成鹽、季胺或立體化學(xué)異構(gòu)形式，式中R1代表氫、C1-6烷基、C3-7環(huán)烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、芳基或雜芳基；各R2獨立地代表鹵代、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、多鹵代C1-6烷基、多鹵代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、氨基、單-或二(C1-4烷基)氨基、硝基、芳基或芳氧基；R3代表氫、氰基、任選被羥基或C1-6烷氧基取代的C1-6烷基、C(＝O)-O-R5、C(＝O)-NR6aR6b、C(＝S)-NR6aR6b、S(＝O)2-NR6aR6b或C(＝O)-R7；R4代表氫或C1-6烷基；R5代表氫、C1-6烷基、羥基C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、多鹵代C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、單-或二(C1-4烷基)氨基C1-6烷基、氨基羰基C1-6烷基、單-或二(C1-4烷基)氨基羰基C1-6烷基或芳基；R6a與R6b各自獨立地代表氫、C1-6烷基、氨基、單-或二(C1-4烷基)氨基、芳基NH-、氨基C1-6烷基、單-或二(C1-4烷基)氨基C1-6烷基、C1-6烷基羰基氨基、氨基羰基氨基、C1-6烷氧基、羰基氨基或羥基C1-6烷基；或R6a與R6b與其連接的氮一起形成吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、哌啶基、哌嗪基、嗎啉基、硫代嗎啉基或被C1-6烷基取代的哌嗪基；R7代表氫、C1-6烷基、羥基C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、多鹵代C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、單-或二(C1-4烷基)氨基C1-6烷基、氨基羰基C1-6烷基、單-或二(C1-4烷基)氨基羰基C1-6烷基、芳基或雜芳基；
Z代表選自以下的環(huán)狀環(huán)系 各R8獨立地代表氫、鹵代、C1-6烷基、C1-6烷氧基、多鹵代C1-6烷基、多鹵代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、單-或二(C1-4烷基)氨基羰基、氨基、單-或二(C1-4烷基)氨基、羥基C1-6烷氨基、芳基、芳氧基、哌啶基、哌啶基氨基、嗎啉基、哌嗪基或硝基；各R9獨立地代表氫、鹵代或C1-6烷基；n為1、2、3、4或5；芳基代表苯基或被各自獨立地選自鹵代、C1-6烷基、C1-6烷氧基、多鹵代C1-6烷基、多鹵代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、單-或二(C1-4烷基)氨基羰基、氨基、單-或二(C1-4烷基)氨基、苯氧基或硝基的一、二、三、四或五個取代基取代的苯基；雜芳基代表呋喃基、噻吩基、吡咯基、唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、異唑基、異噻唑基、二唑基、三唑基、噻二唑基、吡啶基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基，所述雜芳基各自任選被各自獨立地選自鹵代、C1-6烷基、C1-6烷氧基、多鹵代C1-6烷基、多鹵代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、單-或二(C1-4烷基)氨基羰基、氨基、單-或二(C1-4烷基)氨基或硝基的一或二個取代基取代。
前文或后文所用的作為基團或基團一部分的C1-4烷基定義為具有1至4個碳原子的直鏈或支鏈飽和烴基，例如甲基、乙基、丙基、1-甲基乙基、丁基；為基團或基團一部分的C1-6烷基定義為具有1至6個碳原子的直鏈或支鏈飽和烴基，例如C1-4烷基限定的基團及戊基、己基、2-甲基丁基等；C3-7環(huán)烷基通稱環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基及環(huán)庚基；C2-6烯基被定義為具有2至6個碳原子的含雙鍵的直鏈與分支鏈烴基，例如乙烯基、丙烯基、丁烯基、戊烯基、己烯基等；C2-6炔基定義為具有2至6個碳原子的含三鍵的直鏈與分支鏈烴基，例如乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基、己炔基等。
前文所用術(shù)語(＝O)當(dāng)連接碳原子時，形成羰基基團；當(dāng)連接硫原子時，形成亞砜基團；當(dāng)兩個(＝O)連接硫原子時，形成磺?；鶊F。
術(shù)語鹵代通稱氟代、氯代、溴代與碘代。前文或后文所用的作為基團或基團一部分的多鹵代甲基被定義為單-或多鹵代取代的甲基，特別是具有一或多個氟原子的甲基，例如，二氟甲基或三氟甲基；作為基團或基團一部分的多鹵代C1-6烷基被定義為單-或多鹵代取代的C1-6烷基，例如，多鹵代甲基中限定的基團、1，1-二氟-乙基等。在多鹵代甲基或多鹵代C1-6烷基的定義中，在一個以上鹵原子連接于烷基的情形下，它們可相同或不同。
R1或R7的定義中的術(shù)語雜芳基意欲包含雜環(huán)的所有可能的異構(gòu)形式，例如，吡咯基包含1H-吡咯基和2H-吡咯基。
若未另行說明，則前文或后文所述的式(I)化合物的取代基定義中列出的雜環(huán)環(huán)系或環(huán)狀環(huán)系(參見例如R1、R5、R7和Z)，可通過任何適當(dāng)?shù)沫h(huán)碳或雜原子與式(I)分子的其它部分連接。因此，例如，當(dāng)雜芳基為咪唑基，其可為1-咪唑基、2-咪唑基、4-咪唑基等。
在任何構(gòu)成中，當(dāng)任何變量(例如R6a、R6b)出現(xiàn)一次以上時，各定義是獨立的。
從取代基引入環(huán)系內(nèi)的線條表示該鍵可連接于任何適當(dāng)?shù)沫h(huán)原子。當(dāng)線條被引入雙環(huán)系內(nèi)時，表示該鍵可連接于該雙環(huán)系兩個環(huán)中的任一個環(huán)的任何適當(dāng)環(huán)原子。
供治療用的式(I)化合物的鹽為其中相反離子為藥學(xué)上可接受的那些鹽。然而，非藥學(xué)上可接受的酸與堿的鹽也可例如用于藥學(xué)上可接受的化合物的制備或純化。所有的鹽，無論藥學(xué)上可接受與否，均涵蓋于本發(fā)明范圍之內(nèi)。
上文所述的藥學(xué)上可接受的加成鹽意欲包括式(I)化合物可形成的具治療活性的無毒酸加成鹽形式。后者可方便地通過用這樣的適當(dāng)酸例如無機酸如氫鹵酸，例如鹽酸、氫溴酸等；硫酸；硝酸；磷酸等；或有機酸，例如，乙酸、丙酸、羥基乙酸、2-羥基丙酸、2-氧代丙酸、草酸、丙二酸、琥珀酸、順丁烯二酸、反丁烯二酸、蘋果酸、酒石酸、2-羥基-1，2，3-丙烷三羧酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、4-甲基苯磺酸、環(huán)己烷氨基磺酸、2-羥基苯甲酸、4-氨基-2-羥基苯甲酸等酸處理堿形式而制得。相反地，通過用堿處理，可將所述鹽形式轉(zhuǎn)化為游離堿形式。
含酸性質(zhì)子的式(I)化合物可通過用適當(dāng)?shù)挠袡C及無機堿處理，轉(zhuǎn)化成其具治療活性的無毒金屬或胺加成鹽形式。適當(dāng)堿鹽形式包括，例如，銨鹽、堿金屬及堿土金屬鹽，例如，鋰、鈉、鉀、鎂、鈣鹽等；與有機堿形成的鹽例如脂族及芳族伯胺、仲胺和叔胺例如甲胺、乙胺、丙胺、異丙胺、四種丁胺異構(gòu)體、二甲胺、二乙胺、二乙醇胺、二丙胺、二異丙胺、二正丁胺、吡咯烷、哌啶、嗎啉、三甲胺、三乙胺、三丙胺、奎寧環(huán)、吡啶、喹啉與異喹啉、苯乍生(benzathine)、N-甲基-D-葡糖胺、2-氨基-2-(羥甲基)-1，3-丙二醇、海巴明(hydrabamine)鹽等鹽；及與氨基酸(例如精氨酸、賴氨酸等)形成的鹽。相反地，通過用酸處理，可將所述鹽形式轉(zhuǎn)化為游離酸形式。
術(shù)語加成鹽也包括式(I)化合物可形成的水合物及溶劑加成形式，這樣的形式為例如水合物、醇合物等。
本文所用的術(shù)語“季胺”定義為式(I)化合物通過式(I)化合物的堿性氮與適當(dāng)季堿化劑(例如，任選取代的烷基鹵化物、芳基鹵化物或芳烷基鹵化物，例如甲基碘或芐基碘)間的反應(yīng)能形成的季銨鹽。也可使用具有良好離去基團的其它反應(yīng)試劑，例如烷基三氟甲磺酸酯、烷基甲磺酸酯，及烷基對甲苯磺酸酯。季銨具有帶正電的氮。藥學(xué)上可接受的相反離子包括氯離子、溴離子、碘離子、三氟乙酸根與乙酸根。可使用離子交換樹脂將選擇的相反離子引入。
本發(fā)明化合物的N-氧化物形式意欲包括其中一或數(shù)個叔氮原子被氧化成所謂的N-氧化物的式(I)化合物。
應(yīng)該理解，有些式(I)化合物及其N-氧化物、加成鹽、季胺或立體化學(xué)異構(gòu)形式可含一或多個手性中心且作為立體化學(xué)異構(gòu)形式存在。
前文所用的術(shù)語“立體化學(xué)異構(gòu)形式”定義為式(I)化合物及其N-氧化物、加成鹽、季胺或具生理學(xué)功能的衍生物可具有的所有可能立體異構(gòu)形式。除非另外提及或指出，否則化合物的化學(xué)名稱代表所有可能立體化學(xué)異構(gòu)形式的混合物，所述混合物含有基礎(chǔ)分子結(jié)構(gòu)的所有非對映體與對映體以及各個式(I)化合物的異構(gòu)形式及其N-氧化物、鹽、溶劑合物或季胺，其基本上不含(也即含有小于10％，優(yōu)選小于5％，特別是小于2％，最優(yōu)選小于1％)其它異構(gòu)體。因此，例如，當(dāng)式(I)化合物被具體指明為(E)時，這意指該化合物實質(zhì)上不含(Z)異構(gòu)體。特別是，立體形成(stereogenic)中心可具有R-或S-構(gòu)型；二價環(huán)狀(部分)飽和基團上的取代基可具有順式-或反式-構(gòu)型。含有雙鍵的化合物在所述雙鍵處可具有E(entgegen)或Z(zusammen)-立體化學(xué)性。術(shù)語順式、反式、R、S、E與Z為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知。式(I)化合物的立體化學(xué)異構(gòu)形式明顯地意欲包含在本發(fā)明范圍之內(nèi)。
有些式(I)化合物也可呈其互變異構(gòu)形式存在，這樣的形式雖未于上述式(I)中明確示出，但意欲包含在本發(fā)明范圍內(nèi)。例如，式(I)意欲包括 的互變異構(gòu)形式 因此，本發(fā)明化合物包含下式的化合物 下文所用的術(shù)語“式(I)化合物”也意欲包括其N-氧化物型、其加成鹽、其季胺及其立體化學(xué)異構(gòu)形式。其中特別重要的為具有立體化學(xué)純的那些式(I)化合物。
前文或后文所用的取代基可各自獨立地從許多定義列表中選定，例如，對于R6a或R6b而言，意欲包含化學(xué)上可能的所有可能組合。
本發(fā)明第一個重要的實施方案涉及具有下式的化合物 式中R1代表氫、C1-6烷基、C3-7環(huán)烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、芳基或雜芳基；各R2獨立地代表鹵代、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、多鹵代C1-6烷基、多鹵代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、氨基、單-或二(C1-4烷基)氨基、硝基、芳基或芳氧基；R3代表氫、氰基、任選被羥基或C1-6烷氧基取代的C1-6烷基、C(＝O)-O-R5、C(＝O)-NR6aR6b、C(＝S)-NR6aR6b、S(＝O)2-NR6aR6b或C(＝O)-R7；R4代表氫或C1-6烷基；R5代表氫、C1-6烷基、羥基C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、多鹵代C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、單-或二(C1-4烷基)氨基C1-6烷基、氨基羰基C1-6烷基、單-或二(C1-4烷基)氨基羰基C1-6烷基或芳基；R6a與R6b各自獨立地代表氫、C1-6烷基、氨基、單-或二(C1-4烷基)氨基、芳基NH-、氨基C1-6烷基、單-或二(C1-4烷基)氨基C1-6烷基、C1-6烷基羰基氨基、氨基羰基氨基、C1-6烷氧基、羰基氨基或羥基C1-6烷基；或R6a與R6b與其連接的氮一起形成吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、哌啶基、哌嗪基、嗎啉基、硫代嗎啉基或被C1-6烷基取代的哌嗪基；R7代表氫、C1-6烷基、羥基C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、多鹵代C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、單-或二(C1-4烷基)氨基C1-6烷基、氨基羰基C1-6烷基、單-或二(C1-4烷基)氨基羰基C1-6烷基、芳基或雜芳基；
Z代表選自以下的環(huán)狀環(huán)系 各R8獨立地代表氫、鹵代、C1-6烷基、C1-6烷氧基、多鹵代C1-6烷基、多鹵代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、單-或二(C1-4烷基)氨基羰基、氨基、單-或二(C1-4烷基)氨基、羥基C1-6烷氨基、芳基、芳氧基、哌啶基、哌啶基氨基、嗎啉基、哌嗪基或硝基；各R9獨立地代表氫、鹵代或C1-6烷基；n為1、2、3、4或5；芳基代表苯基或被各自獨立地選自鹵代、C1-6烷基、C1-6烷氧基、多鹵代C1-6烷基、多鹵代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、單-或二(C1-4烷基)氨基羰基、氨基、單-或二(C1-4烷基)氨基、苯氧基或硝基的一、二、三、四或五個取代基取代的苯基；雜芳基代表呋喃基、噻吩基、吡咯基、唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、異唑基、異噻唑基、二唑基、三唑基、噻二唑基、吡啶基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基，所述雜芳基各自任選被各自獨立地選自鹵代、C1-6烷基、C1-6烷氧基、多鹵代C1-6烷基、多鹵代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、單-或二(C1-4烷基)氨基羰基、氨基、單-或二(C1-4烷基)氨基或硝基的一或二個取代基取代。
第二個重要的實施方案為前文所述的為重要實施方案的式(I)化合物或其任何亞組，其中R3代表氫、氰基、C(＝O)-O-R5、C(＝O)-NR6aR6b、C(＝S)-NR6aR6b、S(＝O)2-NR6aR6b或C(＝O)-R7。
第三個重要的實施方案為前文所述的為重的實施方案的式(I)化合物或其任何亞組，其中R3代表氰基、任選被羥基或C1-6烷氧基取代的C1-6烷基、C(＝O)-O-R5、C(＝O)-NR6aR6b、C(＝S)-NR6aR6b、S(＝O)2-NR6aR6b或C(＝O)-R7。
第四個重要的實施方案為前文所述的為重要實施方案的式(I)化合物或其任何亞組，其中R3代表氰基、C(＝O)-O-R5、C(＝O)-NR6aR6b、C(＝S)-NR6aR6b、S(＝O)2-NR6aR6b或C(＝O)-R7。
第五個重要的實施方案為前文所述重要的實施方案的式(I)化合物或其任何亞組，其中R3代表氫、氰基、C(＝O)-O-R5、C(＝O)-NR6aR6b或C(＝O)-R7；優(yōu)選為氫、任選被C1-6烷氧基取代的C1-6烷基，或C(＝O)-O-R5；更優(yōu)選為氫或C(＝O)-O-R5；甚至更優(yōu)選為C(＝O)-O-R5，特別是C(＝O)-O-C1-6烷基；最優(yōu)選為C(＝O)-O-CH3。
第六個重要的實施方案為前文所述的為重要實施方案的式(I)的那些化合物或其任何亞組，其中Z不為3-吡啶基。
第七個重要的實施方案為前文所述的為重要實施方案的式(I)的那些化合物或其任何亞組，其中n為2或3，特別是n為2。
第八個重要的實施方案為前文所述的為重要實施方案的式(I)的那些化合物或其任何亞組，其中Z為2且所述兩個取代基位于間位和對位。
第九個重要的實施方案為前文所述的為重要實施方案的式(I)的那些化合物或其任何亞組，其中Z為選自(a-1)、(a-2)、(a-3)、(a-4)、(a-5)、(a-6)、(a-7)、(a-9)、(a-10)、(a-11)、(a-12)、(a-13)、(a-14)、(a-15)、(a16-)或(a-18)的環(huán)狀環(huán)系；優(yōu)選為選自(a-2)、(a-3)、(a-4)、(a-5)、(a-6)、(a-7)、(a-11)、(a-12)、(a-13)、(a-14)或(a-15)的環(huán)狀環(huán)系；更優(yōu)選為選自(a-2)、(a-3)、(a-4)、(a-5)、(a-6)、(a-7)、(a-11)、(a-13)、(a-14)或(a-15)的環(huán)狀環(huán)系；甚至更優(yōu)選為選自(a-2)、(a-11)或(a-15)的環(huán)狀環(huán)系；最優(yōu)選為選自(a-2)或(a-15)的環(huán)狀環(huán)系。前文所述的為重要實施方案的式(I)的那些化合物或其任何亞組(其中Z為(a-9)環(huán)狀環(huán)系)也是重要的。
第十個重要的實施方案為前文所述的為重要實施方案的式(I)的那些化合物或其任何亞組，其中Z代表選自(a-2)或(a-15)的環(huán)狀環(huán)系及R3代表氫。
第十一個重要的實施方案為前文所述的為重要實施方案的式(I)的那些化合物或其任何亞組，其中R2代表鹵代、C1-6烷基、C1-6烷氧基、多鹵代C1-6烷基或芳氧基，優(yōu)選為鹵代、多鹵代C1-6烷基或芳氧基，更優(yōu)選為鹵代或多鹵代C1-6烷基，特別是氯代、氟代或三氟甲基，最優(yōu)選為鹵代，特別是氯賽或氟代。
第十二個重要的實施方案為前文所述的為重要實施方案的式(I)化合物或其任何亞組，其中R1為氫、甲基、乙基、正丙基、甲氧甲基、環(huán)己基、環(huán)丙基、二甲氨基甲基、2-噻吩基、3，4-二氯苯基；優(yōu)選R1為C1-6烷基或C1-6烷氧基C1-6烷基，特別是甲基、乙基、丙基、甲氧甲基，更特別是甲基、乙基、正丙基或甲氧甲基；更優(yōu)選R1為C1-6烷基，特別是甲基、乙基和丙基，更特別是甲基、乙基或正丙基；最優(yōu)選R1為乙基。
第十三個重要的實施方案為前文所述的為重要實施方案的式(I)的那些化合物或其任何亞組，其中R4為氫。
第十四個重要的實施方案為前文所述的為重要實施方案的式(I)的那些化合物或其任何亞組，所述化合物為立體化學(xué)純的。
本發(fā)明第十五個重要的實施方案為前文所述的為重要實施方案的式(I)的那些化合物或其任何亞組，其中攜帶R1與R4取代基的碳原子具有(S)構(gòu)型，即，式(I’)的化合物 其N-氧化物、藥學(xué)上可接受的加成鹽、季胺或立體化學(xué)異構(gòu)形式。
另外的重要化合物為那些式(I)化合物，其中下述一或多項限制條件適用，優(yōu)選下述全部限制條件適用a)R1代表C1-6烷基或C1-6烷氧基C1-6烷基，尤其是甲基、乙基、丙基或甲氧甲基；b)R2代表鹵代、多鹵代C1-6烷基或芳氧基，尤其是鹵代，例如氯代或氟代；c)R3代表氫、氰基、C(＝O)-O-R5、C(＝O)-NR6aR6b或C(＝O)-R7；d)Z代表選自(a-1)、(a-2)、(a-3)、(a-4)、(a-5)、(a-6)、(a-7)、(a-9)、(a-10)、(a-11)、(a-12)、(a-13)、(a-14)、(a-15)、(a16-)或(a-18)的環(huán)狀環(huán)系；e)R4代表氫；f)n為2或3。
另外的重要化合物由適用下述一或多項限制條件的那些式(I)化合物組成a)R1代表C1-6烷基，尤其是乙基或正丙基，更尤其是乙基；
b)R2代表鹵代、多鹵代C1-6烷基或芳氧基，尤其是鹵代，例如氯代或氟代；c)R3代表氫、被C1-6烷氧基取代的C1-6烷基，或C(＝O)-O-R5；d)Z代表選自(a-2)、(a-3)、(a-4)、(a-5)、(a-6)、(a-7)、(a-11)、(a-13)、(a-14)、(a-15)的環(huán)狀環(huán)系；e)R4代表氫；f)n為1、2或3，特別是2或3，更特別是2。
更重要的化合物由適用下述一或多項限制條件的那些式(I)化合物組成a)R1代表C1-6烷基，尤其是乙基；b)R2代表鹵代、多鹵代C1-6烷基或芳氧基；c)R3代表氫；d)Z代表選自(a-2)、(a-7)或(a-15)，或(a-2)、(a-11)或(a-15)的環(huán)狀環(huán)系；e)R4代表氫；f)n為2或3，特別是2。
更重要的化合物由適用下述一或多項限制條件的那些式(I)化合物組成a)R1代表C1-6烷基，尤其是乙基；b)R2代表鹵代、尤其是氯代或氟代；c)R3代表氫；d)Z代表選自(a-2)或(a-15)的環(huán)狀環(huán)系；e)R4代表氫；f)n為2或3，特別是2。
優(yōu)選的式(I)化合物為化合物5、26、1、20、21和9。
最優(yōu)選的式(I)化合物為化合物1、20、21和9。
一般而言，式(I)化合物可通過使式(II)中間體與適當(dāng)?shù)乃?例如鹽酸或乙酸)，任選在適當(dāng)溶劑(例如1，4-二烷)存在下反應(yīng)予來制備。
其中R3為氫的式(I)中間體(該化合物以式(I-a)表示)可通過使式(III)中間體與式(IV)中間體于適當(dāng)溶劑(例如1，4-二烷與水)存在下反應(yīng)來制備。
式(I)化合物也可通過使式(V)中間體與適當(dāng)酸(例如三氟乙酸)反應(yīng)來制備。
其中Z代表任選取代的1，3，4-二唑的式(I)化合物(該化合物以式(I-b)表示)可通過使式(VI)中間體與磷酰氯(POCl3)或Burgess’試劑于適當(dāng)溶劑(例如乙腈或四氫呋喃)存在下反應(yīng)來制備。
其中Z代表1，3，4-二唑的式(I)化合物(該化合物以式(I-b-1)表示)可通過使式(VII)中間體與SOCl2及HC(＝O)NH-NH2于適當(dāng)溶劑(例如四氫呋喃)存在下反應(yīng)來制備。
其中Z代表任選取代的1，2，4-二唑的式(I)化合物(該化合物以式(I-c)表示)可通過使式(VIII)中間體與式(IX)中間體于適當(dāng)堿(例如NaOCH3)及適當(dāng)溶劑(例如醇，如甲醇)存在下反應(yīng)來制備。
其中Z代表四唑基及其中R3代表氫的式(I)化合物(該化合物以式(I-a-1)表示)可通過使式(X)中間體與甲酸甲酯于適當(dāng)堿(例如t-BuOK、NaOCH3或NaOC(CH3)3、KSCN)的存在下，在適當(dāng)酸(例如鹽酸等)及適當(dāng)溶劑(例如四氫呋喃、醇例如甲醇，及水)存在下反應(yīng)，隨后于適當(dāng)溶劑(例如甲苯)存在下，使如此獲得的式(X-a)中間體與Bu3SnN3反應(yīng)來制備。
式(I’)化合物可根據(jù)上述反應(yīng)，但由其中攜帶R1與R4取代基的具有(S)構(gòu)型的中間體為起始原料來制備。
或者，其中攜帶R1與R4取代基的碳原子具有(R)構(gòu)型的式(I)化合物可根據(jù)上述反應(yīng)，但由其中攜帶R1與R4取代基的碳原子具有(R)構(gòu)型的中間體為起始原料來制備。
式(I)化合物也可進一步根據(jù)本領(lǐng)域已知的基團轉(zhuǎn)換反應(yīng)，通過將式(I)化合物彼此互相轉(zhuǎn)化來制備。
式(I)化合物可根據(jù)本領(lǐng)域已知的將三價氮轉(zhuǎn)化為其N-氧化物形式的程序，將其轉(zhuǎn)化為對應(yīng)的N-氧化物形式。該N-氧化反應(yīng)通?？赏ㄟ^使式(I)起始原料與適當(dāng)有機或無機過氧化物反應(yīng)進行。適當(dāng)?shù)臒o機過氧化物包括，例如，過氧化氫、堿金屬或堿土金屬過氧化物，例如過氧化鈉、過氧化鉀；適當(dāng)?shù)挠袡C過氧化物可包括過氧酸，例如，苯碳化過氧酸(benzenecarboperorganic acid)或鹵代取代的苯碳化過氧酸例如3-氯苯碳化過氧酸、過氧烷酸例如過氧乙酸、烷基氫過氧化物例如叔丁基氫過氧化物。適當(dāng)溶劑為，例如水、低級醇例如乙醇等、烴例如甲苯、酮例如2-丁酮、鹵化烴例如二氯甲烷，及所述溶劑的混合物。
其中R3代表C(＝O)-O-C1-6烷基的式(I)化合物可通過與適當(dāng)還原劑(例如，LiHBEt3)于適當(dāng)溶劑(例如，四氫呋喃)存在下反應(yīng)，轉(zhuǎn)化成其中R3代表CH2-OH的式(I)化合物。
其中R3代表C(＝O)-O-C1-6烷基的式(I)化合物也可通過與適當(dāng)堿(例如，NaOH)于適當(dāng)溶劑(例如，H2O、四氫呋喃或適當(dāng)醇例如甲醇等)存在下反應(yīng)，轉(zhuǎn)化成其中R3代表C(＝O)-OH的式(I)化合物。
其中R3代表C(＝O)-O-C1-6烷基的式(I)化合物也可通過與式NHR6aR6b的適當(dāng)堿，于適當(dāng)溶劑(例如，H2O)中反應(yīng)，轉(zhuǎn)化成其中R3代表C(＝O)-NR6aR6b的式(I)化合物。
其中R3代表C(＝O)-O-H的式(I)化合物可通過與具式NHR6aR6b的適當(dāng)堿，于N’-(乙基氨基甲亞氨酰基(ethylcarbonimidoyl))-N，N-二甲基-1，3-丙二胺、1-羥基-1H-苯并三唑存在下，在適當(dāng)溶劑(例如，N，N-二甲基甲酰基)中反應(yīng)，轉(zhuǎn)化成其中R3代表C(＝O)-NR6aR6b的式(I)化合物。
其中R3代表C(＝O)-O-H的式(I)化合物也可通過與NH4OH于SOCl2存在下反應(yīng)，轉(zhuǎn)化成其中R3代表C(＝O)-NH2的式(I)化合物。
其中R3代表C(＝O)-O-C1-6烷基的式(I)化合物也可通過與HO-C1-6烷基-O-C1-6烷基于NaBH4存在下反應(yīng)，轉(zhuǎn)化成其中R3代表C(＝O)-O-C1-6烷基-O-C1-6烷基的式(I)化合物。
其中R3代表氰基或C(＝O)-O-C1-6烷基的式(I)化合物可通過與NH4OH反應(yīng)，轉(zhuǎn)化成其中R3代表氨基羰基的式(I)化合物。
其中R3代表氰基的式(I)化合物也可通過與硫化氫，于N-乙基-N-(1-甲基乙基)-2-丙胺存在下，在適當(dāng)溶劑(例如吡啶)中反應(yīng)，轉(zhuǎn)化成其中R3代表C(＝S)NR6aR6b的式(I)化合物。
其中R3代表C(＝O)-NR6aR6b的式(I)化合物可通過與氯代C1-6烷基Mg于適當(dāng)溶劑(例如四氫呋喃)中反應(yīng)，轉(zhuǎn)化成其中R3代表C(＝O)-C1-6烷基的式(I)化合物。
其中R3代表C(＝O)-C1-6烷基的式(I)化合物可通過與適當(dāng)還原劑(例如NaBH4)，于適當(dāng)溶劑(例如甲醇)存在下反應(yīng)，轉(zhuǎn)化成其中R3代表羥基C1-6烷基的式(I)化合物。
本發(fā)明的一些式(I)化合物及一些中間體可能含有不對稱碳原子。所述化合物及所述中間體的純立體化學(xué)異構(gòu)形式可應(yīng)用本領(lǐng)域已知的程序制得。例如，非對映體可通過物理方法例如選擇結(jié)晶法或?qū)游黾夹g(shù)，例如逆流分布法、液相層析等方法分離。對映體可自外消旋混合物制取，其制法為先以適當(dāng)拆分劑(例如手性酸)將所述外消旋混合物轉(zhuǎn)化為非對映體鹽或化合物的混合物；然后通過例如選擇結(jié)晶法或?qū)游黾夹g(shù)，例如液相層析等方法對所述非對映體鹽或化合物的混合物進行物理性分離；最后再將所述分離的非對映體鹽或化合物轉(zhuǎn)化為對應(yīng)的對映體。也可自純立體化學(xué)異構(gòu)形式的適當(dāng)中間體與起始原料獲得純立體化學(xué)異構(gòu)形式，條件是中間反應(yīng)以立體專一性發(fā)生。
分離式(I)化合物及中間體的對映體形式的替代方法包括液相層析，特別是使用手性靜止相的液相層析。
一些中間體及起始原料為已知化合物，及可市售獲得或可根據(jù)本領(lǐng)域已知的程序制備。
式(II)中間體可通過使式(III)中間體與式(XI)中間體于適當(dāng)堿(例如碳酸二鉀)及適當(dāng)溶劑(例如二烷或四氫呋喃及水)存在下反應(yīng)來制備。
式(III)中間體可通過使式(XII)中間體與C(＝S)Cl2于適當(dāng)堿(例如N，N-二異丙基乙胺)及適當(dāng)溶劑(例如二氯甲烷)存在下反應(yīng)來制備。
其中R4代表氫的式(XII)中間體(該中間體以式(XII-a)表示)可通過使式(XIII)中間體與適當(dāng)還原劑(例如H2)，于適當(dāng)催化劑(例如阮內(nèi)鎳)、任選在適當(dāng)催化劑毒(例如噻吩溶液)、適當(dāng)堿(例如NH3)，及適當(dāng)溶劑(例如醇如甲醇)存在下反應(yīng)來制備。
式(XIII)中間體可通過使式(XIV)中間體與HO-NH2于適當(dāng)堿(例如Na2CO3或乙酸鈉)及適當(dāng)溶劑(例如醇如乙醇，及水)存在下反應(yīng)來制備。
式(XII)中間體可如上文所述來制備。取決于代表R1和R4的取代基，式(XII)中間體在攜帶R1與R4取代基的碳原子處可能具有手性中心。在所述碳原子代表手性中心的情形下，式(XII)的立體專一性中間體由式(XII-b)表示，可通過使式(XV)中間體與三苯膦于適當(dāng)溶劑(例如四氫呋喃與水)存在下反應(yīng)，或通過使式(XV)中間體與適當(dāng)還原劑(例如H2)于適當(dāng)催化劑(例如披Pt炭或披Pd炭)及適當(dāng)溶劑(例如醇如甲醇)存在下反應(yīng)來制備。
*表示手性中心，且根據(jù)R1與R4取代基而定，可為(R)或(S)當(dāng)式(XII-b)立體專一性中間體進一步根據(jù)上述方法反應(yīng)時，所得中間體也是立體專一性的，最后得到的最終化合物也是立體專一性的。
式(XV)中間體可通過使式(XVI)中間體與二苯基磷?；B氮化物于2，3，4，6，7，8，9，10-八氫嘧啶并[1，2-a]吖庚因存在下及于適當(dāng)溶劑(例如甲苯)存在下反應(yīng)來制備。
*表示手性中心，且根據(jù)R1與R4取代基而定，可為(R)或(S)其中R4為氫及R1為甲基、乙基，或正丙基的立體專一性式(XVI)中間體(該R1以Alk表示，該中間體以式(XVI-a)與式(XVI-b)表示)可通過使式(XVII)中間體與ZnAlk2(式中Alk代表甲基、乙基，或正丙基)于立體專一性催化劑(例如分別為N，N’-(1R，2R)-1，2-環(huán)己烷二基雙[1，1，1-三氟]-甲磺酰胺與N，N’-(1S，2S)-1，2-環(huán)己烷二基雙[1，1，1-三氟]-甲磺酰胺)、Ti(iPrO)4及適當(dāng)溶劑(例如甲苯)存在下反應(yīng)來制備。
其中Z代表任選取代的噻唑基的式(V)中間體(該中間體以式(V-a)表示)可通過使式(XVIII)中間體與式(XIX)中間體(其中W1代表適當(dāng)?shù)碾x去基團(例如，鹵代如氯代、溴代等))，于適當(dāng)溶劑(例如醇如乙醇)存在下反應(yīng)來制備。
式(XVIII)中間體可通過使式(XX)中間體與H2S于適當(dāng)堿(例如N，N-二異丙基乙胺)及適當(dāng)溶劑(例如吡啶)存在下反應(yīng)來制備。
式(XX)中間體可通過使式(XXI)中間體與4-甲氧基-苯甲醇于適當(dāng)酸(例如三氟乙酸)及適當(dāng)溶劑(例如二氯甲烷)存在下反應(yīng)來制備。
式(XXI)中間體可通過使式(X)中間體與CH3-CH(＝O)，在KSCN存在下、在適當(dāng)堿(例如甲醇鈉)及適當(dāng)溶劑(例如四氫呋喃)存在下反應(yīng)來制備。
式(X)中間體可通過使式(XXII)中間體與甲酸正丁酯反應(yīng)來制備。
式(XXII)中間體可通過使式(XII)中間體與式(XXIII)中間體(其中W2代表適當(dāng)?shù)碾x去基團(例如，鹵代如氯代等))，于適當(dāng)堿(例如N，N-二乙基乙胺)及適當(dāng)溶劑(例如N，N-二甲基甲酰胺或四氫呋喃)存在下反應(yīng)來制備。
其中Z代表吡唑基或任選取代的嘧啶的式(V)中間體(該中間體以式(V-b)或(V-c)表示)可通過使式(XXIV)中間體與NH2-NH2或R8-C(＝NH)NH2于Na及適當(dāng)溶劑(例如醇如乙醇)存在下反應(yīng)來制備。
式(XXIV)中間體可通過使式(XXV)中間體與N(CH3)2-CH(OCH3)2反應(yīng)來制備。
式(XXV)中間體可通過使式(XXVI)中間體與式(XXVII)中間體(其中W3代表適當(dāng)?shù)碾x去基團(例如，鹵代如氯代等))，于NaH及適當(dāng)溶劑(例如四氫呋喃)存在下反應(yīng)來制備。
式(XXVI)中間體可通過使式(XXVIII)中間體與CH3MgCl于適當(dāng)溶劑(例如四氫呋喃)存在下反應(yīng)來制備。
式(XXVIII)中間體可通過使式(XXIX)中間體(其中W4代表適當(dāng)?shù)碾x去基團(例如，鹵代如氯基等))與NH(CH3)(OCH3)于適當(dāng)堿(例如N，N-二乙基乙胺)及適當(dāng)溶劑(例如四氫呋喃)存在下反應(yīng)來制備。
其中W4代表氯代的式(XXIX)中間體(該中間體以式(XXIX-a)表示)可通過使式(VII)中間體與SOCl2反應(yīng)來制備。
式(VII)中間體可通過使式(VIII)中間體與適當(dāng)堿(例如氫氧化鈉)于適當(dāng)溶劑(例如醇如甲醇，或四氫呋喃)存在下反應(yīng)來制備。
其中R3為氫的式(VIII)中間體(該中間體以式(VIII-a)表示)可通過使式(XXX)中間體與甲酸甲酯或乙酸甲酯于KSCN、適當(dāng)堿(例如NaOCH3或t-BuONa)及適當(dāng)溶劑(例如四氫呋喃，或醇如甲醇)存在下反應(yīng)來制備。
式(XXX)中間體可于甲酸或甲酸酯(例如甲酸正丁酯)存在下及于適當(dāng)溶劑(例如二甲苯或乙醚)存在下，由式(XXXI)中間體為原料制備。
式(XXXI)中間體可通過使式(XII)中間體與式(XXXII)中間體(其中W5代表適當(dāng)?shù)碾x去基團(例如，鹵代如氯代或溴代))，于適當(dāng)溶劑(例如四氫呋喃或N，N-二甲基甲酰胺)存在下，及任選在適當(dāng)堿(例如N，N-二乙基乙胺及N，N-二甲基-4-吡啶胺)存在下反應(yīng)來制備。
其中Z代表三唑基的式(V)中間體(該中間體以式(V-d)表示)可通過使式(XXXIII)中間體與NH2-NH2于適當(dāng)酸(例如乙酸)存在下反應(yīng)來制備。
式(XXXIII)中間體可通過使式(XXXIV)中間體與N，N-二甲基甲酰胺/N，N-二甲基乙酰胺)反應(yīng)來制備。
式(XXXIV)中間體可通過使式(XXXV)中W6代表適當(dāng)?shù)碾x去基團(例如，鹵代如氯基)的中間體與NH3于適當(dāng)溶劑(例如四氫呋喃)存在下反應(yīng)來制備。
其中W6代表氯代的式(XXXV)中間體(該中間體以式(XXXV-a)表示)可通過使式(XXXVI)中間體與SOCl2反應(yīng)來制備。
式(XXXVI)中間體可通過對應(yīng)的酯(XXXVII)與適當(dāng)堿(例如氫氧化鈉)，于適當(dāng)溶劑(例如醇如甲醇)存在下的水解反應(yīng)來制備。
式(XXXVII)中間體可通過使式(XXXVIII)中間體與4-甲氧基-苯甲醇于適當(dāng)酸(例如三氟乙酸)及適當(dāng)溶劑(例如二氯甲烷)存在下反應(yīng)來制備。

式(VI)中間體可通過使式(XXIX)或(VII)中間體與式(XXXIX)中間體，于適當(dāng)堿(例如N，N-二異丙基乙胺)、適當(dāng)二亞胺[例如N’-(乙基氨基甲亞氨酰基)-N，N-二甲基-1，3-丙二胺或二環(huán)己基碳化二亞胺]、1-羥基-1H-苯并三唑及適當(dāng)溶劑(例如四氫呋喃或N，N-二甲基甲酰胺)存在下反應(yīng)來制備。
在本發(fā)明化合物的制備中，重要的中間體為式(XII)的中間體 其N-氧化物、藥學(xué)上可接受的加成鹽、季胺或立體化學(xué)異構(gòu)形式。
如上文已述，根據(jù)代表R1與R4的取代基而異，式(XII)中間體于攜帶R1與R4取代基的碳原子處可含有手性中心。在該碳原子代表手性中心的情況下，式(XII)中間體的優(yōu)選實施方案為其中中間體為立體專一性的那些中間體，即，在攜帶R1與R4取代基的碳原子處具有(R)或(S)構(gòu)型的中間體[式(XII-b)中間體]。特別優(yōu)選的為具有(S)構(gòu)型的那些式(XII-b)中間體[式(XII-b-1)中間體]。
因此，本發(fā)明也涉及具下式(XII-b-1)的中間體 其N-氧化物、藥學(xué)上可接受的加成鹽或季胺。
本發(fā)明也涉及式(XII-b-1)的中間體，前提是當(dāng)n＝2及各R2為氯代且所述兩個氯代取代基位于間位及對位時，則R1不為乙基。
另一優(yōu)選實施方案為其中各R2系獨立地選自鹵代、C1-6烷基、C1-6烷氧基或多鹵代C1-6烷基的式(XII-b-1)中間體，前提是當(dāng)n＝2及各R2為氯代且所述兩個氯代取代基位于間位及對位時，則R1不為乙基。
進一步的實施方案為其中n為1、2或3，特別是2的式(XII-b-1)中間體，前提是當(dāng)n＝2及各R2為氯代且所述兩個氯代取代基位于間位及對位時，則R1不為乙基。
又一實施方案為其中n為2且兩個R2取代基位于間位及對位的式(XII-b-1)中間體，前提是當(dāng)各R2為氯代時，則R1不為乙基。
另一實施方案為如上述的那些式(XII-b-1)中間體，其中R4為氫。
這樣的式(XII)與(XII-b-1)的中間體也是重要的，其中R1為氫、甲基、乙基、正丙基、甲氧甲基、環(huán)己基、環(huán)丙基、二甲氨基甲基、2-噻吩基、3，4-二氯苯基，特別是甲基、乙基、正丙基、甲氧甲基，更特別是甲基、乙基和正丙基；前提是當(dāng)n＝2及R2代表氯代且所述兩個氯代取代基位于間位與對位及R4為氫時，則R1不為乙基、環(huán)丙基、苯基；且前提是當(dāng)n＝2及R2代表氯代且所述兩個氯代取代基位于間位與對位及R4為甲基時，則R1不為甲基；及當(dāng)n＝2及且所述兩個R2取代基位于間位與對位，及位于間位的R2為三氟甲基，和位于對位的R2為氟及R4為氫時，則R1不為乙基。
如上所述的那些式(XII)與(XII-b-1)中間體(其中R2為氯代、氟代，或三氟甲基，特別是氯代)也是重要的。
特別重要的中間體為式(XII-a)或(XII-b-1)的那些中間體 其N-氧化物、藥學(xué)上可接受的加成鹽或季胺，其中Alk如上文所定義，即，Alk代表甲基、乙基和正丙基，及各R2a與R2b獨立地代表氯、氟、三氟甲基。
重要的實施方案為式(XII-a-1)的中間體，前提是當(dāng)R2a與R2b均為氯代或當(dāng)R2a為三氟甲基及R2b為氟代時，則Alk不為乙基。
更重要的式(XII-a-1)的中間體為重要的式(XII-a-1)的中間體，前提是當(dāng)R2a與R2b均為氯代時，則Alk不為甲基、乙基、正丙基；且前提是當(dāng)R2a與R2b均為氟代，或R2a為三氟甲基及R2b為氟代，或R2a為氟代及R2b為三氟甲基時，則Alk不為乙基。
更重要的為那些式(XII-b-1-1)的中間體，前提是當(dāng)R2a與R2b均為氯代時，則Alk不為乙基。
式(I)與(I’)的化合物顯示出CCR2受體拮抗性質(zhì)。
C-C趨化因子受體2(CCR2)及其配體單核細(xì)胞化學(xué)引誘物(趨化性的)蛋白(MCP-1；在新趨化因子命名法中也稱為CCL2)被認(rèn)為與急性及慢性發(fā)炎過程均有關(guān)。
趨化因子(“趨化性細(xì)胞因子”的縮寫)為運輸白血球最重要的調(diào)節(jié)劑。該生物角色通過發(fā)揮系—在靶細(xì)胞上—與連接于雜二聚體的G蛋白的七-跨膜-結(jié)構(gòu)域受體互相作用。根據(jù)靠近氨基末端的兩個保守半胱氨酸殘基(以C表示)之間氨基酸(以X表示)的存在與否，趨化因子主要分成兩大家族(C-C或C-X-C家族)。一般而言，得自C-C族的趨化因子吸引單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞與NK細(xì)胞。
通過CCR2受體而作用的趨化因子為示于上文的MCP-1。因此，CCR2受體也稱為MCP-1受體。MCP-2、MCP-3及MCP-4至少部分也通過此受體而作用。
一般認(rèn)知，CCR2受體與MCP-1在各種炎性病癥的疾病生理上扮演重要角色。因此，阻斷CCR2受體的CCR2受體拮抗劑具有作為藥劑以對抗炎性疾病例如關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、腎小球性腎炎、糖尿病性腎病、肺纖維變性、原發(fā)性肺部纖維變性、類肉瘤病、血管炎、肝炎、非酒精性脂肪性肝炎(steatohepatitis)、腦部炎性病癥例如老年癡呆癥、再狹窄、肺泡炎(alveolitis)、哮喘、過敏性鼻炎、過敏性結(jié)膜炎、動脈硬化、牛皮癬、皮膚的遲發(fā)型過敏反應(yīng)、炎性腸道疾病、急性或慢性腦部炎癥例如多發(fā)性硬化癥、自體免疫性腦脊髓炎、慢性阻塞性肺病(COPD)、葡萄膜炎、皮膚炎、異位性皮膚炎的效力。CCR2受體拮抗劑也可用于治療自體免疫疾病例如糖尿病或移植排斥反應(yīng)、中風(fēng)、再灌注損傷、局部缺血、癌癥、心肌梗塞、疼痛(特別是神經(jīng)痛)。
本發(fā)明化合物也可用于抑制人類免疫缺陷病毒(HIV)進入單核細(xì)胞及淋巴細(xì)胞內(nèi)，因而在AIDS(獲得性免疫缺陷綜合征)治療中具有重要作用。
CCR2受體以兩種同工型存在，即CCR2A及CCR2B受體。
由于式(I)化合物、其N-氧化物、藥學(xué)上可接受的加成鹽、季胺或立體化學(xué)異構(gòu)形式具有CCR2受體拮抗活性，特別是CCR2B受體拮抗活性，因此它們被用于治療或預(yù)防，特別是治療通過CCR2受體(特別是CCR2B受體)的激活所介導(dǎo)的疾病或病癥。與CCR2受體的激活相關(guān)的疾病或病癥包括炎性病癥例如關(guān)節(jié)炎、骨關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、腎小球性腎炎、糖尿病性腎病、肺纖維變性、原發(fā)性肺部纖維變性、類肉瘤病、血管炎、肝炎、非酒精性脂肪性肝炎、腦部炎性病癥例如老年癡呆癥、再狹窄、肺泡炎、哮喘、過敏性鼻炎、過敏性結(jié)膜炎、動脈硬化、牛皮癬、皮膚的遲發(fā)型過敏反應(yīng)、炎性腸道疾病、急性或慢性腦部炎癥例如多發(fā)性硬化癥、自體免疫性腦脊髓炎、慢性阻塞性肺病(COPD)、葡萄膜炎、皮膚炎、異位性皮膚炎、自體免疫疾病例如糖尿病或移植排斥反應(yīng)、中風(fēng)、再灌注損傷、局部缺血、癌癥、心肌梗塞、疼痛(特別是神經(jīng)痛)。特別是，式(I)化合物用于治療或預(yù)防炎性疾病及自體免疫疾病，尤其是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、動脈硬化、多發(fā)性硬化癥、炎性腸道疾病及慢性阻塞性肺病(COPD)。式(I)化合物在治療或預(yù)防牛皮癬、哮喘、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎或疼痛(神經(jīng)痛)，更特別是牛皮癬、哮喘或類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎中也具有特別的重要性。
鑒于上述藥理性質(zhì)，式(I)化合物、其N-氧化物、藥學(xué)上可接受的加成鹽、季胺及立體化學(xué)異構(gòu)形式可用作藥物。特別是，本發(fā)明化合物可用于制備治療或預(yù)防通過CCR2受體(特別是CCR2B受體)的激活所介導(dǎo)的疾病的藥物。更具體地說，本發(fā)明化合物可用于制備治療或預(yù)防炎性疾病，尤其是類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、動脈硬化、多發(fā)性硬化癥、炎性腸道疾病及慢性阻塞性肺病(COPD)的藥物。本發(fā)明化合物也可特別用于制備治療或預(yù)防牛皮癬、哮喘、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎或疼痛(神經(jīng)痛)，更特別是牛皮癬、哮喘或風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的藥物。
鑒于式(I)化合物的用途，本發(fā)明提供一種治療患有由CCR2受體的激活所介導(dǎo)(特別是由CCR2B受體的激活所介導(dǎo))的疾病的溫血動物(包括人)的方法，或提供一種預(yù)防溫血動物(包括人)罹患由CCR2受體的激活所介導(dǎo)(特別是由CCR2B受體的激活所介導(dǎo))的疾病的方法。所述方法包括給予溫血動物(包括人)有效量的式(I)化合物、其N-氧化物形式、藥學(xué)上可接受的加成鹽、季胺，或可能的立體化學(xué)異構(gòu)形式。
CCR2受體被本發(fā)明式(I)化合物阻斷后，將抑制MCP-1的正常功能。因此，本發(fā)明化合物也可被敘述為MCP-1抑制劑，因此可用于預(yù)防或治療通過MCP-1介導(dǎo)的疾病。
本發(fā)明也提供用于預(yù)防或治療由CCR2受體(特別是CCR2B受體)的激活所介導(dǎo)的疾病的組合物，該組合物包含治療有效量的式(I)化合物及藥學(xué)上可接受的載體或稀釋劑。
本發(fā)明化合物可配制為供給予目的的各種醫(yī)藥形式。可引用的適當(dāng)組合物為一般全身性給予藥物的所有組合物。制備本發(fā)明藥用組合物時，可將有效量的作為活性成分的具體化合物(任選以加成鹽形式)與藥學(xué)上可接受的載體密切混合，所述載體可根據(jù)給藥所需的制劑形式而采用多種形式。這些藥用組合物為適用于特別是經(jīng)口、直腸、經(jīng)皮，或經(jīng)非經(jīng)腸注射給予的單位劑型將是合乎需要的。例如，在制備口服劑型的組合物時，任何常規(guī)藥用介質(zhì)均可使用，例如，在口服液體制劑例如懸浮液、糖漿、酏劑、乳液及溶液的情形下的水、二醇類、油類、醇類等；或在散劑、丸劑、膠囊及片劑情形下的固體載體例如淀粉、糖、高嶺土、稀釋劑、潤滑劑、粘合劑、崩解劑等。片劑及膠囊由于容易給藥而為最有利的口服單位劑型，在這種情況下，應(yīng)明顯地使用固體藥用載體。對于非經(jīng)腸組合物，載體通常包括至少大部分的無菌水，但也可包含其它組分，例如，以幫助溶解。注射用溶液，例如，可使用包括鹽水溶液、葡萄糖溶液或鹽水與葡萄糖溶液混合物的載體而制備。也可制備注射用懸浮液，此時，可使用適當(dāng)?shù)囊后w載體、懸浮劑等。也包括于臨使用前才轉(zhuǎn)化為液體形式制劑的固體形式制劑。在適用于經(jīng)皮給予的組合物中，載體可任選包含滲透增進劑和/或適當(dāng)濕潤劑，任選以微小比例與任何性質(zhì)的適當(dāng)添加劑組合，所述添加劑不會對皮膚引發(fā)明顯有害的作用。所述添加劑可幫助對皮膚的給予和/或有助于所需組合物的制備。這些組合物可以多種方式給予，例如，呈皮膚貼劑、spot-on，或軟膏劑。
本發(fā)明化合物也可通過本領(lǐng)域中所用通過吸入或吹入給予的方法及制劑，通過吸入或吹入給予。因此，本發(fā)明化合物通常可以以溶液、懸浮液或干粉等形式給予至肺部。開發(fā)藥用經(jīng)口或鼻吸入或吹入傳遞的溶液、懸浮或干粉之任何系統(tǒng)均適用于本發(fā)明化合物的給予。
本發(fā)明化合物也可以以滴劑(特別是滴眼劑)的形式經(jīng)局部給予。所述滴眼劑可以為溶液或懸浮液形式。開發(fā)呈滴眼劑藥用傳遞溶液或懸浮液的任何系統(tǒng)均適用于本發(fā)明化合物的給予。
由于容易給予及劑量的均一性，將前述藥用組合物調(diào)配成單位劑型特別有利。本文所用的單位劑型是指呈單位劑量的物理分開的單位，各單位含有經(jīng)計算與所需藥用載體結(jié)合時可產(chǎn)生所需治療效果的預(yù)定量的活性成分。這樣的單位劑型的實例為片劑(包含劃痕片或包衣片)、膠囊、丸劑、包裝散劑、糯米紙囊劑、栓劑、注射溶液或懸浮液等，及其分離的多劑量。
如本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知，給予的精確劑量與頻率取決于所用的具體式(I)化合物、所治療的具體病癥、所治療病癥的嚴(yán)重性、具體患者的年齡、體重、性別、不適程度與一般身體狀況以及病患可能服用的其它藥物。再者，顯而易見，所述有效日劑量根據(jù)治療對象的反應(yīng)和/或根據(jù)開具包含本發(fā)明化合物的處方的醫(yī)師的評估而可增加或減少。
式(I)化合物也可與其它常規(guī)抗炎劑或免疫抑制劑聯(lián)合使用，例如，類固醇、環(huán)加氧酶(cyclooxygenase)-2-抑制劑、非類固醇抗炎藥物、TNF-α抗體例如乙?；畻钏?、丁苯羥酸、雙氯芬酸鉀、舒林酸、雙氯芬酸鈉、酮咯酸氨丁三醇、托關(guān)丁、布洛芬、萘普生、萘普生鈉、噻洛芬酸(tiaprofen acid)、氟比洛芬、甲芬那酸、尼氟酸(nifluminicacid)、甲氯芬那酸鹽、吲哚美辛、丙谷美辛、酮洛芬、萘丁美酮、對乙酰氨基酚、吡羅昔康、替諾昔康、尼美舒利、非尼丁宗(fenylbutazon)、曲馬多、二丙酸氯地米松、倍他米松、貝拉米松(beclamethasone)、布地奈德、氟替卡松、莫米松、地塞米松、氫化可的松、甲基氫化潑尼松、氫化潑尼松、潑尼松、曲安西龍、塞來考昔、羅非考昔、伐地考昔、英夫利昔單抗、來氟米特、依那西普、CPH 82、甲氨蝶呤、柳氮磺吡啶、抗淋巴細(xì)胞性免疫球蛋白、抗胸腺細(xì)胞性免疫球蛋白、硫唑嘌呤、環(huán)孢菌素(cyclosporine)、他克莫司物質(zhì)、子囊霉素、雷帕霉素、莫羅單抗(muromonab)-CD3。
因此，本發(fā)明也涉及式(I)化合物與另一種抗炎劑或免疫抑制劑的組合物，所述組合物可用作藥物。本發(fā)明也涉及含(a)式(I)化合物，及(b)另一種抗炎劑或免疫抑制劑化合物的產(chǎn)品，其為組合制劑供同時、分開或相繼使用，以治療通過CCR2受體的激活(特別是通過CCR2B受體的激活)所介導(dǎo)的疾病。所述產(chǎn)物中的不同藥物可與藥學(xué)上可接受的載體一起組合于單一制劑中。作為選擇，所述產(chǎn)品可包含，例如，一種藥劑盒，所述藥劑盒包含裝有含式(I)化合物的適當(dāng)組合物的容器及裝有含另一種抗炎劑或免疫抑制劑化合物的組合物的另一個容器。這樣的產(chǎn)品的優(yōu)點為，醫(yī)師可根據(jù)待治療患者的診斷結(jié)果，選擇適量的各成分及其給予順序與時間安排。
以下文的實施例說明本發(fā)明。
實驗部分下文中，”THF”指四氫呋喃，”DIPE”指二異丙醚，”DMF指N，N-二甲基甲酰胺及”DMA”指N，N-二甲基乙酰胺。
A.中間體化合物的制備實施例A1a.中間體1的制備 將Na2CO3(0.52mol的一部分)的H2O(150ml)溶液加入到1-(3，4-二氯苯基)-1-丙酮(0.345mol)的乙醇(p.a.，150ml)攪拌混合物中，接著加入其余Na2CO3，于劇烈攪拌下，分?jǐn)?shù)次添加羥胺單鹽酸鹽(0.345mol)。將反應(yīng)混合物加熱至回流溫度，添加另外的H2O(75ml)，然后攪拌所得混合物，回流加熱6小時。添加另外的羥胺單鹽酸鹽(2.4g)，進一步回流加熱混合物18小時。再次添加另外的羥胺單鹽酸鹽(3g)；回流反應(yīng)混合物24小時，于室溫攪拌2天。過濾除去固體，以EtOH/H2O(1/1)洗滌，于56℃干燥(真空下，空氣流)。得量71.8g中間體1(95.4％)。
b.中間體2和3的制備 中間體2 中間體3在噻吩(6ml)存在下，用阮內(nèi)鎳(催化量)為催化劑，于14℃，使中間體1(0.3mol)于CH3OH/NH3(7N)(500ml)中的混合物氫化。于吸收H2(2當(dāng)量)后，濾除催化劑，蒸發(fā)濾液，然后與甲苯一起共蒸發(fā)2次。于沸騰的2-丙醇(250ml)中攪拌殘留物，趁熱過濾分離該混合物。使濾液達到室溫，于劇烈攪拌下，緩緩添加HCl/2-丙醇(6N，150ml)。蒸發(fā)溶劑，使殘留物于DIPE中攪拌，然后過濾分離，洗滌，于60℃干燥(真空下)。得量53g中間體2(73.4％)。取部分轉(zhuǎn)化為其游離堿于CH2Cl2(200ml)中攪拌中間體2(18.0g)，添加15％ K2CO3水溶液，接著攪拌所得混合物1小時，添加50％ NaOH使pH增加。分離有機層，以H2O洗滌，干燥(MgSO4)，過濾分離及蒸發(fā)溶劑。得量12.4g中間體3。
c.中間體4的制備 于室溫、N2下，攪拌中間體2(根據(jù)A1.b制備)(0.0748mol)與氯乙酸甲酯(0.08mol)在DMF(p.a.，于分子篩上干燥過，150ml)中的溶液，緩緩添加Et3N(0.224mol)，接著于室溫攪拌反應(yīng)混合物20小時，添加另外的氯乙酸甲酯(3.3ml)。于室溫再攪拌混合物20小時，再次添加另外的氯乙酸甲酯(2ml)。攪拌所得混合物24小時，然后過濾除去固體，用DMF洗滌。添加Et2O(800ml)，此混合物以H2O(500ml)洗滌3次。分離有機層，干燥(MgSO4)，過濾離及蒸發(fā)溶劑，接著與甲苯一起共蒸發(fā)。殘留油(23.4g)通過硅膠(洗脫液CH2Cl2/CH3OH99/1)過濾。收集產(chǎn)物流分，蒸發(fā)溶劑，最后與甲苯一起共蒸發(fā)。得量20.6g中間體4(99.7％)。
d.中間體5的制備 攪拌甲酸(7.5ml)與中間體4(根據(jù)A1.c制備)(0.0746mol)的二甲苯(p.a.，225ml)的溶液，并回流4小時，然后使反應(yīng)混合物達到室溫。以H2O(2×200ml)、飽和NaHCO3水溶液(200ml)及鹽液(200ml)洗滌混合物2次，然后分離有機層，干燥(MgSO4)，過濾分離。最后，蒸發(fā)溶劑。得量21.3g中間體5(93.9％)。
e-1.中間體6的制備 在N2下，將NaOCH3(0.07mol)加入到中間體5(根據(jù)A1.d制備)(0.066mol)與甲酸甲酯(0.19mol)的THF(p.a.，100ml)的攪拌溶液中，于室溫攪拌反應(yīng)混合物40小時。蒸發(fā)溶劑，粗殘留物于水(90ml)中攪拌。水層以Et2O(50ml)洗滌2次，添加CH3OH(60ml)。添加HCl，36％(p.a.，15.7ml)，于油浴上加熱此溶液，并于45℃攪拌24小時，接著添加KSCN(0.11mol)。將該混合物于室溫攪拌40小時，于80℃攪拌5小時。使反應(yīng)混合液達到室溫，過濾除去固體，以H2O/CH3OH(2/1)洗滌，然后于60℃干燥(真空下)。得量19.35g流分，以CH3CN(200ml)再結(jié)晶，過濾分離，以CH3CN洗滌，于50℃干燥(真空下)。得量17.2g中間體6(75.5％)。
e-2.中間體44的制備 在氬氣氛圍中，將溶于250ml無水乙醚中的2-[[1-(3，4-二氟苯基)丁基](甲?；?氨基]乙酸甲酯(根據(jù)A1.d制備)(15.0g，53mmol)冷卻至-78℃，于-78℃，逐滴添加55ml二異丙基氨化鋰于THF/己烷中的2M溶液。在相同溫度下，再攪拌該混合物0.5小時。向混合物中逐滴添加溶于40ml無水THF中的甲氧基乙酰氯(Methoxyacetic acidchloroanhydride)(6.9g，63.6mmol)，以2小時使反應(yīng)混合物調(diào)至室溫。向混合物中添加甲醇(270ml)、水(135ml)、KCNS(13.43g)與67ml濃HCl的混合物。將所得混合物加熱至70℃，于此溫度攪拌18小時。然后，使其冷卻至室溫，以NaHCO3水溶液中和，以二氯甲烷萃取。萃取液以MgSO4干燥，真空濃縮。所得殘留物于硅膠60/100上(CH2Cl2)經(jīng)快速層析。濃縮含所需產(chǎn)物(根據(jù)LC/MS)的流分，以己烷/乙醚(1/1)混合物處理。得量2.46g中間體44(12.5％)。
f-1.中間體7的制備 于室溫下，攪拌中間體6(根據(jù)A1.e制備)(0.004mol)的NaOH(1N)(7.5ml)、甲醇(p.a.，10ml)與THF(p.a.，20ml)的溶液20小時，然后于75℃攪拌5天。添加另外的NaOH(1N)(7.5ml)，于75℃攪拌此反應(yīng)混合物1小時，接著使混合物達到室溫。添加H2O(45ml)，接著添加Et2O(50ml)，攪拌反應(yīng)混合物30分鐘。分離水層，以EtOAc/己烷(2×50ml，1/1)洗滌，并以HCl(1N)酸化至pH3。該混合物以CH2Cl2/CH3OH(95/5)萃取，然后分離有機層，干燥(MgSO4)，過濾，蒸發(fā)溶劑。使殘留物溶于Et2O/己烷/CH2Cl2(1/1/1)中，于60℃濃縮(非真空下)至開始結(jié)晶化，接著使混合物靜置30分鐘。過濾分離沉淀，以己烷/Et2O(3/1)洗滌，干燥(真空下，50℃)，隨后以真空泵干燥5小時。得量0.55g中間體7(41.5％)。
f-2.中間體42的制備 于60℃，攪拌中間體42(0.0045mol)與NaOH(1N)(0.025mol)在甲醇(25ml)中的混合物24小時，然后添加另外的NaOH(1N)(10ml)，于60℃攪拌反應(yīng)混合物20小時。蒸發(fā)部分溶劑，向濃縮液中添加1NHCl(36ml)。沉淀出油狀產(chǎn)物，以CH2Cl2萃取。分離有機層，干燥，過濾分離。蒸發(fā)溶劑，干燥殘留物。得量1.4g中間體42。
g.中間體8的制備 攪拌中間體7(根據(jù)A1.f制備)(0.001mol)在SOCl2(10ml)中的混合物，并回流2小時，然后蒸發(fā)溶劑。向殘留物中添加兩次甲苯(p.a.)，每次添加后均蒸發(fā)溶劑。得量0.35g中間體8。
h.中間體9的制備 于室溫下，攪拌N-甲氧甲胺.鹽酸鹽(0.0017mol)與Et3N(0.005mol)在THF(10ml)中的混合物，以15分鐘逐滴添加中間體8(根據(jù)A1.g制備)(0.0015mol)在THF(5ml)中的混合物，接著于室溫攪拌反應(yīng)混合物過夜，蒸發(fā)溶劑。殘留物于H2O中攪拌，以CH2Cl2萃取該混合物。分離有機層，干燥(MgSO4)，過濾分離及蒸發(fā)溶劑。使殘留物溶于2-丙酮(15ml，p.a.)中，使SO2流通過此溶液20分鐘。蒸發(fā)溶劑，殘留物通過硅膠(洗脫液CH2Cl2/CH3OH 95/5)進行過濾。收集產(chǎn)物流分，蒸發(fā)溶劑。得量0.310g中間體9。
i.中間體10的制備 于冰浴上，0-5℃，攪拌中間體9(根據(jù)A1.h制備)(0.0008mol)于THF(10ml)中的混合物，逐滴添加20％ CH3MgCl的THF溶液(0.002mol)，然后攪拌反應(yīng)混合物1小時，再逐滴添加另外的20％ CH3MgCl的THF溶液(0.0044mol)。攪拌該混合物1小時，再逐滴添加另外的20％ CH3MgCl的THF溶液(0.002mol)，接著攪拌反應(yīng)混合物1小時，以冰冷卻下，逐滴添加1N HCl(10ml)。添加H2O，以CH2Cl2萃取該混合物。分離有機層，干燥(MgSO4)，過濾分離及蒸發(fā)溶劑。使殘留物溶于2-丙酮(p.a.)中，使SO2流通過此溶液20分鐘。蒸發(fā)溶劑，殘留物經(jīng)快速柱層析(洗脫液EtOAc)進行純化。收集產(chǎn)物流分，使其溶于CH2Cl2/CH3OH(90/10)中，然后過濾該混合物，蒸發(fā)濾液的溶劑。得量0.060g中間體10。
i.中間體11的制備 于室溫下，攪拌中間體10(根據(jù)A1.i制備)(0.005mol)于無水THF(40ml)中的混合物，以10分鐘逐滴添加60％ NaH(0.0055mol)，攪拌該混合物30分鐘，然后一次添加1-(氯甲基)-4-甲氧苯(0.0055mol)于無水THF(10ml)中的混合物。于室溫攪拌反應(yīng)混合物6天，蒸發(fā)溶劑。于H2O中攪拌殘留物，并以CH2Cl2萃取。分離有機層，干燥(MgSO4)，過濾分離及蒸發(fā)溶劑。得量2.2g中間體11。
k. 中間體12的制備 于100℃，攪拌中間體11(根據(jù)A1.j制備)(0.00115mol)在1，1-二甲氧基-N，N-二甲基甲胺(10ml)中的混合物18小時，然后蒸發(fā)溶劑。使殘留物溶于甲苯中，再蒸發(fā)溶劑。得量0.580g中間體12。
1-1.中間體13和14的制備 中間體13 中間體14于室溫、N2下，攪拌Na(0.0008mol)在乙醇(4ml)中的混合物至完全溶解，添加胍(0.0004mol)，接著攪拌該混合物30分鐘，添加中間體12(根據(jù)A1.k制備)(0.00055mol)在乙醇(1ml)中的混合物。于100℃，在密閉容器中攪拌反應(yīng)混合物20小時并蒸發(fā)。粗化合物經(jīng)SiO2(洗脫液CH2Cl2/CH3OH 98/2)純化，蒸發(fā)溶劑，獲得中間體13。使殘留物溶于2-丙醇中，以HCl/2-丙醇將其轉(zhuǎn)化為鹽酸鹽(1∶1)。過濾分離結(jié)晶鹽，以DIPE洗滌，干燥。得量0.320g中間體14。
1-2.中間體15的制備 攪拌中間體12(根據(jù)A1.k制備)(0.00115mol)與肼單水合物(0.007mol)在乙醇(20ml)中的混合物，于油浴上回流3小時。蒸發(fā)溶劑，殘留物通過硅膠(洗脫液CH2Cl2/CH3OH 98/2)進行過濾。收集產(chǎn)物流分，于50℃、N2氣流下，蒸發(fā)溶劑。得量0.240g中間體15。
實施例A2a.中間體16的制備 使N，N-(1R，2R)-1，2-環(huán)己烷二基雙[1，1，1-三氟甲磺酰胺](0.005mol)與Ti(i-PrO)4(0.030mol)在甲苯(q.s.)中的混合物脫氣并置于Ar氣流下，然后于40℃攪拌反應(yīng)混合物20分鐘，冷卻至-78℃。逐滴添加Et2Zn(0.030mol)，20分鐘后，逐滴添加3，4-二氯苯甲醛(0.0250mol)于甲苯(q.s.)中的混合物。使此反應(yīng)混合物達到0℃。于室溫攪拌混合物過夜，然后以HCl(2N)猝滅。該混合物以CH2Cl2萃取。洗滌經(jīng)分離的有機層，干燥，過濾，蒸發(fā)溶劑。殘留物經(jīng)硅膠柱層析純化(洗脫液CH2Cl2/CH3OH 98/2)。收集產(chǎn)物流分，蒸發(fā)溶劑。得量5.1g中間體16。
利用上述反應(yīng)，通過使用N，N’-(1S，2S)-1，2-環(huán)己烷二基雙[1，1，1-三氟甲磺酰胺]作為催化劑，可制備R異構(gòu)體。
b.中間體17的制備 于0℃，攪拌中間體16(根據(jù)A2.a制備)(0.025mol)和二苯基磷?；B氮化物(0.030mol)在甲苯(50ml)中的混合物，添加2，3，4，6，7，8，9，10-八氫嘧啶并[1，2-a]吖庚因(0.030mol)。于0℃攪拌反應(yīng)混合物2小時，然后于室溫攪拌過夜。以水與甲苯稀釋混合物。分離有機層，以水洗滌一次，以5％ HCl洗滌一次，蒸發(fā)溶劑，獲得中間體17，用于下一反應(yīng)步驟。
c.中間體18的制備 于室溫下，攪拌中間體17(根據(jù)A2.b制備)(0.025mol)、三苯膦(0.027mol)在THF(70ml)與H2O(20ml)中的混合物過夜。蒸發(fā)溶劑，殘留物以10％ HCl處理。酸性層以DIPE洗滌，接著堿化，隨后以CH2Cl2萃取。將分離的有機層干燥，過濾，蒸發(fā)溶劑。殘留物經(jīng)硅膠柱層析純化。收集產(chǎn)物流分，蒸發(fā)溶劑。得量1.1g中間體18。
d.中間體19的制備 于冰浴上，攪拌中間體3(根據(jù)A1.b制備)(0.0116mol)在Et3N(0.013mol)和DMF(p.a.，于分子篩上干燥，20ml)中的溶液。逐滴添加氯乙腈(0.0128mol)在DMF(p.a.，于分子篩上干燥，2.5ml)中的溶液。于室溫攪拌反應(yīng)混合物6小時。逐滴添加另外的氯乙腈(0.0063mol)在DMF(p.a.，于分子篩上干燥，1ml)中的溶液。再攪拌反應(yīng)混合物24小時。逐滴添加另外的氯乙腈(0.0063mol)在DMF(p.a.，于分子篩上干燥，1ml)中的溶液，將反應(yīng)混合物再攪拌24小時。添加另外的Et3N(1ml)，接著逐滴添加另外的氯乙腈(0.0079mol)在DMF(p.a.，于分子篩上干燥，1ml)中的溶液。攪拌反應(yīng)混合物20小時。過濾除去沉淀。將濾液傾出至Et2O(200ml)中，以H2O/NaHCO3(10％；100ml)與H2O(2x)洗滌。將分離的有機層干燥(MgSO4)，過濾，蒸發(fā)溶劑，與甲苯一起蒸發(fā)。殘留物經(jīng)硅膠純化(洗脫液CH2Cl2/CH3OH 99∶1)。收集所需流分，蒸發(fā)溶劑，與甲苯一起共蒸發(fā)。得量2.3g中間體19(81.6％)。
e.中間體20的制備 攪拌中間體19(根據(jù)A2.d制備)(0.021mol)在甲酸正丁酯(25ml)中的混合物，回流48小時，然后冷卻。蒸發(fā)溶劑，殘留物以CH2Cl2稀釋。所得混合物以水洗滌，干燥，蒸發(fā)溶劑。得量5.25g中間體20。
f.中間體21的制備 將NaOMe(原位制備)(q.s.)逐滴添加至中間體20(根據(jù)A2.e制備)(0.022mol)與乙醛(0.022mol)的THF(100ml)混合物中。7小時后，蒸發(fā)溶劑，使殘留物分配于水與乙醚之間。水層以濃HCl酸化至pH2-3，并以CH2Cl2萃取。蒸發(fā)萃取液，使殘留物溶于CH3OH/H2O中。添加KSCN(0.050mol)，隨后添加濃HCl(5ml)，然后攪拌反應(yīng)混合物，回流整個周末。冷卻混合物，蒸發(fā)溶劑。使殘留物分配于水與CH2Cl2之間，接著分離有機層，干燥，蒸發(fā)溶劑。殘留物經(jīng)硅膠快速柱層析純化(洗脫液己烷/EtOAc 80/20)。收集產(chǎn)物流分，蒸發(fā)溶劑。得量2g中間體21。備注NaOMe系在THF中以NaH及CH3OH于原位產(chǎn)生。
g.中間體22的制備 于冰浴上，0-5℃，攪拌中間體21(根據(jù)A2.f制備)(0.0128mol)在三氟乙酸(5ml)和CH2Cl2(40ml)中的混合物，在0-5℃下，以30分鐘逐滴添加4-甲氧基苯甲醇(0.017mol)的CH2Cl2(10ml)溶液，接著于0-5℃攪拌反應(yīng)混合物2小時，蒸發(fā)溶劑(真空下)。使殘留物溶于CH2Cl2中，以H2O及NaHCO3洗滌。分離有機層，干燥(MgSO4)，過濾分離，蒸發(fā)溶劑。殘留物經(jīng)硅膠(洗脫液CH2Cl2/CH3OH 99/1)純化。收集產(chǎn)物流分，蒸發(fā)溶劑。得量4.3g中間體22。
h.中間體23的制備 于80℃，攪拌中間體22(根據(jù)A2.g制備)(0.01mol)與N-乙基-N-(1-甲基乙基)-2-丙胺(0.02mol)在吡啶(100ml)中的混合物，然后于溶液中通入H2S(氣體)5小時，接著，于80℃通入N22小時以去除該H2S。蒸發(fā)溶劑，使殘留物溶于CH2Cl2中。該溶液以H2O及1N HCl洗滌。分離有機層，干燥(MgSO4)，過濾分離，蒸發(fā)溶劑。殘留物經(jīng)硅膠(洗脫液CH2Cl2/CH3OH 99/1)純化。收集產(chǎn)物流分，蒸發(fā)溶劑。得量3g中間體23。
i-1.中間體24的制備 于80℃，攪拌中間體23(根據(jù)A2.h制備)(0.0005mol)與1-氯-2-丙酮(0.00055mol)在乙醇(4ml)中的混合物3小時，然后于室溫使該混合物靜置過夜，蒸發(fā)溶劑。殘留物經(jīng)硅膠(洗脫液CH2Cl2/CH3OH97/3)純化。收集產(chǎn)物流分，蒸發(fā)溶劑，得到流分(I)。收集含有中間體23的流分，蒸發(fā)溶劑。將乙醇(4ml)與另外的1-氯-2-丙酮(0.04ml)添加到殘留物中，攪拌此反應(yīng)混合物3小時。蒸發(fā)溶劑，殘留物經(jīng)硅膠(洗脫液CH2Cl2/CH3OH 97/3)過濾。收集產(chǎn)物流分，蒸發(fā)溶劑，得到流分(II)。最后，合并流分(I)與流分(II)。得量0.030g中間體24。
i-2.中間體25的制備 于室溫下，在密閉容器中攪拌中間體23(根據(jù)A2.h制備)(0.0005mol)和2-溴-1-(3，4-二氯苯基)乙酮(0.0007mol)在乙醇(4ml)中的混合物18小時，蒸發(fā)溶劑。將殘留物過濾2次(洗脫液CH2Cl2/CH3OH99/1、100/0)，然后收集產(chǎn)物流分，蒸發(fā)溶劑。得量0.120g中間體25。
實施例A3a.中間體26的制備 于冰浴上，0-5℃，攪拌中間體6(根據(jù)A1.e制備)(0.03mol)在三氟乙酸(20ml)與CH2Cl2(150ml)中的混合物，0-5℃下，以30分鐘逐滴添加4-甲氧基苯甲醇(0.033mol)的CH2Cl2(50ml)溶液，接著于0-5℃攪拌反應(yīng)混合物1小時，蒸發(fā)溶劑。使殘留物溶于CH2Cl2中，以H2O及NaHCO3洗滌。分離有機層，干燥(MgSO4)，過濾分離，蒸發(fā)溶劑，最后，干燥殘留物。得量13.9g中間體26。
b.中間體27的制備 于80℃，攪拌中間體26(根據(jù)A3.a制備)(0.03mol)在1N NaOH(150ml)和甲醇(150ml)中的混合物18小時，然后蒸發(fā)有機溶劑(甲醇)。將1N HCl(150ml)添加至該水性濃縮物中，過濾分離所得沉淀，干燥。得量12g中間體27。
c.中間體28的制備 攪拌中間體27(根據(jù)A3.b制備)(0.026mol)在SOCl2(100ml)中的混合物，回流2小時，然后蒸發(fā)溶劑，與甲苯一起共蒸發(fā)2次。得量12.5g中間體28。
d.中間體29的制備 于室溫下，將中間體28(根據(jù)A3.c制備)(0.026mol)的THF(200ml)溶液逐滴添加至攪拌的NH3/H2O(50ml)中，攪拌反應(yīng)混合物2小時。將溶劑部分(1/2)蒸發(fā)，以CH2Cl2萃取濃縮物。分離有機層，干燥(MgSO4)，過濾分離，蒸發(fā)溶劑。殘留物經(jīng)硅膠(洗脫液CH2Cl2/CH3OH95/5)純化。收集產(chǎn)物流分，蒸發(fā)溶劑。得量3.5g中間體29。
e.中間體30的制備 于100℃，攪拌中間體29(根據(jù)A3.d制備)(0.0022mol)在DMF/DMA(25ml)中的混合物18小時，然后蒸發(fā)溶劑。殘留物經(jīng)硅膠(洗脫液CH2Cl2/CH3OH 99/1)過濾2次，然后收集產(chǎn)物流分，蒸發(fā)溶劑。得量0.51g中間體30。
f.中間體31的制備 于90℃，在密閉容器中攪拌中間體30(根據(jù)A3.e制備)(0.001mol)與肼單水合物(0.0015mol)在乙酸(5ml)中的混合物2小時，然后蒸發(fā)溶劑。使殘留物溶于CH2Cl2中，以H2O與K2CO3洗滌。分離有機層，干燥(MgSO4)，過濾分離，蒸發(fā)溶劑。殘留物經(jīng)硅膠柱層析(洗脫液CH2Cl2/CH3OH 97/3)純化。收集產(chǎn)物流分，蒸發(fā)溶劑。得量0.200g中間體31。
實施例A4a.中間體32的制備 于室溫下，攪拌1-(3，4，5-三氟苯基)-1-丙酮(0.106mol)、羥胺(0.150mol)與NaOAc(0.150mol)在甲醇(q.s.)中的混合物過夜，然后過濾反應(yīng)混合物，蒸發(fā)濾液。得量21.5g中間體32。
b.中間體33的制備 用阮內(nèi)鎳(2g)為催化劑，使中間體32(根據(jù)A4.a制備)(0.11mol)在CH3OH/NH3(500ml)中的混合物進行氫化反應(yīng)。在吸收H2(2當(dāng)量)后，濾除催化劑，蒸發(fā)濾液。得量20g中間體33。
c.中間體34的制備 于室溫下，使中間體33(根據(jù)A4.b制備)(0.105mol)和溴乙酸甲酯(0.196mol)在Et3N(30ml)中反應(yīng)過夜，接著添加另外的溴乙酸甲酯(10g)。添加N，N-二甲基-4-吡啶胺(1g)，于室溫攪拌反應(yīng)混合物3天。蒸發(fā)溶劑，殘留物以CH2Cl2稀釋。過濾分離所得固體，于50℃干燥(真空下)。得量6.8g中間體34。
d.中間體35的制備 于室溫下，攪拌乙酰氯(0.1mol)與HCO2Na(10g)在Et2O(100ml)中的混合物6小時，然后過濾分離固體。添加中間體34(根據(jù)A4.c制備)(0.024mol)在Et2O(q.s.)中的混合物，于室溫攪拌此反應(yīng)混合物4小時。蒸發(fā)溶劑，殘留物以NaHCO3猝滅，然后以CH2Cl2萃取。分離有機層，干燥(MgSO4)，過濾分離，蒸發(fā)溶劑。得量4.4g中間體35。
e.中間體36的制備 于室溫下，將t-BuONa(2g)添加至中間體35(根據(jù)A4.d制備)(0.0052mol)在乙酸甲酯(3ml)和THF(80ml)中的混合物中，使該混合物反應(yīng)20分鐘，然后加水(20ml)，濃縮溶劑至剩下30ml體積。將水(20ml)和甲醇(40ml)添加至殘留物中，隨后添加KSCN(3g)與HCl(3ml)。加熱反應(yīng)混合物3小時，以Na2CO3(中和)猝滅。濃縮溶劑至剩下40ml體積，以CH2Cl2萃取濃縮物。分離有機層，干燥(MgSO4)，過濾，蒸發(fā)。得量1.5g中間體36(88％)。
f.中間體37的制備 攪拌中間體36(根據(jù)A4.e制備)(0.0015mol)在1M NaOH(5ml)和甲醇(3ml)中的混合物，并于l00℃回流24小時，然后冷卻反應(yīng)混合物，蒸發(fā)溶劑。殘留物以濃HCl猝滅，收集所需產(chǎn)物。得量360mg中間體37。
實施例A5a.中間體38的制備 在N2下，將N-乙基-N-(1-甲基乙基)-2-丙胺(0.1mol)添加至中間體3(根據(jù)A1.b制備)(0.0415mol)的CH2Cl2(p.a.，100ml)攪拌混合物中。攪拌15分鐘后，將反應(yīng)混合物置于冰浴上，于0℃，逐滴添加硫代碳酰氯(carbonothioic dichloride)(0.0457mol)的CH2Cl2(p.a.，15ml)溶液。該混合物于0℃攪拌30分鐘，于室溫攪拌18小時，然后添加另外的N-乙基-N-(1-甲基乙基)-2-丙胺(9ml)，攪拌所得混合物2小時。該混合物以H2O洗滌2次，以HCl(1N)洗滌一次，再以H2O洗滌。分離有機層，干燥(MgSO4)，過濾分離，蒸發(fā)溶劑，然后與甲苯一起共蒸發(fā)。殘留物經(jīng)硅膠柱層析(洗脫液CH2Cl2/己烷15/85)純化。收集產(chǎn)物流分，蒸發(fā)溶劑。得量7.4g中間體38(72.4％)。
b-1.中間體39的制備 向中間體38(根據(jù)A5.a制備)(0.00175mol)的THF(20ml)溶液中，添加β-氧代-苯基丙氨酸甲酯單鹽酸鹽(0.00175mol)，隨后添加K2CO3(0.00175mol)，接著添加H2O(5ml)，于室溫攪拌此反應(yīng)混合物18小時。將混合物傾入H2O(50ml)中，以CH2Cl2萃取。分離有機層，干燥(MgSO4)，過濾分離，蒸發(fā)溶劑。殘留物經(jīng)快速柱層析(洗脫液CH2Cl2/CH3OH)純化。收集產(chǎn)物流分，蒸發(fā)溶劑。得量0.095g中間體39(12.4％)。
b-2.中間體40的制備 向中間體38(根據(jù)A5.a制備)(0.00122mol)的1，4-二烷(p.a.，6ml)溶液中，添加2-氨基-1-(2-呋喃基)-乙酮單鹽酸鹽(0.00146mol)，接著添加H2O(0.5ml)，隨后添加K2CO3(0.00122mol)。于室溫攪拌此反應(yīng)混合物18小時，蒸發(fā)溶劑，得到中間體40。殘留物進一步于下一步驟中使用。
實施例A6中間體41的制備 在N2下，向中間體8(根據(jù)Al.g制備)(0.0052mol)的THF(p.a.，于分子篩上干燥，40ml)溶液中，添加肼甲酰胺單鹽酸鹽(0.0078mol)，接著添加N-乙基-N-(1-甲基乙基)-2-丙胺(0.016mol)，于室溫攪拌此反應(yīng)混合物18小時。蒸發(fā)溶劑，將殘留物在半飽和K2CO3水溶液中攪拌。所得混合物以CH2Cl2/CH3OH(95/5)洗滌，以濃HCl酸化。過濾分離形成的沉淀，以H2O及DIPE洗滌，然后于50℃干燥(真空下)。得量0.42g中間體41。
實施例A7中間體43的制備 于室溫下，攪拌中間體42(根據(jù)A1.f-2制備)(0.001mol)、N’-(乙基氨基甲亞氨?；?ethylcarbonimidoyl))-N，N-二甲基-1，3-丙二胺(0.001mol)和1-羥基-1H-苯并三唑(0.001mol)在DMF(5ml)中的混合物30分鐘，然后添加酰肼乙酸(0.003mol)，于室溫攪拌此反應(yīng)混合物過夜。蒸發(fā)溶劑，接著使殘留物于H2O中攪拌，該混合物以CH2Cl2/CH3OH(90/10)萃取。分離有機層，干燥，過濾分離，蒸發(fā)溶劑。所得殘留物于CH2Cl2中攪拌，固化后，過濾分離所需產(chǎn)物，干燥。得量0.170g中間體43。
B.最終化合物的制備實施例B1化合物1的制備 于80℃，在密閉容器中攪拌中間體14(根據(jù)A1.1-1制備)(0.00055mol)在三氟乙酸(3ml)中的混合物4小時，接著于N2氣流下，于80℃蒸發(fā)溶劑。在CH2Cl2中攪拌殘留物，并以H2O與K2CO3處理。分離有機層，干燥(MgSO4)，過濾分離，蒸發(fā)溶劑。于EtOAc(2ml)中攪拌殘留物，過濾后，干燥所需產(chǎn)物。得量0.020g化合物1。
實施例B2化合物2的制備 向中間體38(根據(jù)A5.a制備)(0.000154mol)的1，4-二烷(p.a.，2.5ml)溶液中，添加2-氨基-2-苯甲?；阴０穯嘻}酸鹽(0.000158mol)、H2O(0.5ml)和K2CO3(0.000154mol)，接著劇烈攪拌此反應(yīng)混合物20小時。添加36％ HCl(p.a.，0.5ml)，于75℃攪拌所得混合物4小時，然后使其達到室溫。添加H2O，用EtOAc萃取該混合物。分離有機層，干燥(MgSO4)，過濾分離，蒸發(fā)溶劑。殘留物經(jīng)反相高效液相層析純化。過濾收集所需產(chǎn)物流分，蒸發(fā)有機揮發(fā)物。產(chǎn)物以CH2Cl2萃取，蒸發(fā)分離的有機層。得量0.0076g化合物2。
實施例B3a.化合物3的制備 于100℃，在密封管中攪拌中間體39(根據(jù)A5.b-1制備)(0.0002mol)的乙酸(6ml)溶液18小時，然后使反應(yīng)混合物達到室溫，將其傾入H2O中。添加CH2Cl2，接著添加飽和K2CO3溶液至形成澄清的二相溶液。分離有機層，干燥(MgSO4)，過濾分離，蒸發(fā)溶劑，然后與甲苯一起蒸發(fā)。殘留物于RP-18上(洗脫液10％ NH4OAc水溶液/CH3OH/CH3CN)經(jīng)高效液相層析純化。收集產(chǎn)物流分，蒸發(fā)50％溶劑。濃縮物以CH2Cl2萃取，蒸發(fā)分離的有機層。得量0.011g化合物3。
b.化合物4的制備 向中間體40(根據(jù)A5.b-2制備)(0.0012mol)的1，4-二烷(p.a.，12ml)溶液中，添加36％ HCl(p.a.，2ml)，于65℃攪拌所得溶液18小時。添加H2O(10ml)，該混合物用EtOAc萃取。分離有機層，干燥(MgSO4)，過濾分離，蒸發(fā)溶劑。使殘留物溶于2-丙酮(p.a.，15ml)中，此溶液以SO2(氣體)處理15分鐘。蒸發(fā)溶劑，殘留物經(jīng)快速柱層析(梯度洗脫液CH2Cl2/CH3OH 99.8/0.2→99.6/0.4)純化。收集產(chǎn)物流分，蒸發(fā)溶劑。得量0.0134g化合物4。
實施例B4化合物5的制備 于100℃，使中間體6(根據(jù)A1.e制備)(0.00072mol)和N-羥基-乙烷imidamide(0.00181mol)在甲醇(3ml)和NaOCH3/CH3OH(30％)(1ml)中的混合物在密閉管中反應(yīng)18小時，然后以NH4Cl水溶液猝滅。蒸發(fā)溶劑，殘留物以CH2Cl2萃取。分離有機層，通過干燥筒進行過濾，蒸發(fā)溶劑。殘留物經(jīng)高效液相層析純化。收集產(chǎn)物流分，蒸發(fā)溶劑。得量0.110g化合物5。
實施例B5化合物6的制備 將tBuOK(10g)逐滴添加至中間體20(根據(jù)A2.e制備)(0.063mol)和甲酸甲酯(0.32mol)的THF(300ml)混合物中。7小時后，蒸發(fā)溶劑，使殘留物分配于水與乙醚之間。水層以濃HCl酸化至pH 2-3，并以CH2Cl2萃取。蒸發(fā)萃取液，使殘留物溶于CH3OH/H2O中。添加KSCN(15g)，隨后添加濃HCl(q.s.)，然后攪拌反應(yīng)混合物，回流過周末。冷卻混合物，蒸發(fā)溶劑。使殘留物分配于水與CH2Cl2之間，接著分離有機層，干燥，蒸發(fā)溶劑。殘留物經(jīng)硅膠快速柱層析(洗脫液己烷/EtOAc 80/20)純化。收集產(chǎn)物流分，蒸發(fā)溶劑，得到 于130℃，加熱0.200g該中間體、0.5g Bu3SnN3的0.5ml甲苯混合物過夜，該混合物經(jīng)反相高效液相層析純化，得到20mg化合物6。
實施例B6a.化合物7的制備 攪拌中間體44 (根據(jù)A1.f-1制備)(0.00037mol)在SOCl2(25ml)中的混合物，回流4小時，然后冷卻該反應(yīng)混合物，蒸發(fā)溶劑。其油狀殘留物以THF(10ml)稀釋，并以肼甲醛(0.0042mol)處理，然后于室溫攪拌該混合物30分鐘，蒸發(fā)溶劑。殘留物用CH2Cl2稀釋并用固相萃取法干燥。蒸發(fā)溶劑，殘留物以CH3CN稀釋。所得混合物以POCl3(10重量％)(1ml)的CH3CN(5ml)溶液處理，加熱5小時。冷卻該混合物，蒸發(fā)溶劑。殘留物以CH2Cl2稀釋并經(jīng)固相萃取法干燥，然后蒸發(fā)溶劑，殘留物經(jīng)反相高效液相層析純化。收集產(chǎn)物流分，蒸發(fā)溶劑。得量22mg化合物7。
b.化合物8的制備 于70℃，加熱中間體37(根據(jù)A4.f制備)(0.001mol)在SOCl2(5ml)中的混合物4小時，然后冷卻該混合物，蒸發(fā)溶劑。取其部分(1/3)混合于THF(4ml)中，并以肼甲醛(0.0025mol)處理，接著加熱此反應(yīng)混合物1小時。蒸發(fā)溶劑，使殘留物混合于水(0.5ml)和CH2Cl2中。所得混合物以固相萃取筒萃取，蒸發(fā)溶劑。使殘留物混合于CH3CN(5ml)中，所得混合物以1M POCl3溶液(0.0004mol)處理，于80℃加熱12小時。冷卻所得混合物，以NaHCO3水溶液猝滅。蒸發(fā)溶劑，殘留物經(jīng)反相高效液相層析純化。最后，收集產(chǎn)物流分，蒸發(fā)溶劑。得量20mg化合物8。
實施例B7化合物9的制備 于熱油浴中攪拌中間體41(根據(jù)A6制備)(0.0009mol)在CH3CN(15ml)中的混合物，于50℃，添加磷酰氯(0.00107mol)，然后于90℃進一步攪拌反應(yīng)混合物2小時。使混合物達到室溫，將其傾入至半飽和的NaHCO3水溶液中，以CH2Cl2/CH3OH 98/2萃取。分離有機層，干燥(MgSO4)，過濾分離，蒸發(fā)溶劑。殘留物(0.21g)經(jīng)反相高效液相層析(NH4HCO3-緩沖劑)純化。收集產(chǎn)物流分，蒸發(fā)溶劑。得量0.069g化合物9。
實施例B8化合物10的制備 于60℃，攪拌中間體43(根據(jù)A7制備)(0.0004mol)與Burgess’s試劑(0.0012mol)在THF(5ml)中的混合物3小時。添加CH2Cl2，以H2O洗滌反應(yīng)混合物。分離有機層，干燥，過濾分離，蒸發(fā)溶劑。殘留物于硅膠上過濾(洗脫液CH2Cl2/CH3OH 98/2)。收集純產(chǎn)物流分，蒸發(fā)溶劑。所得殘留物在DIPE中攪拌，然后過濾分離所需產(chǎn)物，干燥。得量0.044g化合物10(m.p.97.8-97.9℃)。
表1與2列出根據(jù)上述實施例(實施例編號)制備的式(I)化合物。
表1
表2
C.分析部分LCMS條件1HPLC梯度由裝備有設(shè)定于40℃的柱加熱器的Waters AllianceHT 2790系統(tǒng)供應(yīng)。柱內(nèi)的流體分流至光電二極管陣列(PDA)檢測器及具有以正負(fù)電離模式操作的電噴霧電離源的Waters-Micromass ZQ質(zhì)譜儀。反相HPLC在Xterra MS C18柱(3.5μm，4.6×100mm)(12分鐘柱)上進行，流速為1.6ml/分鐘。使用三個流動相(流動相A95％25mM乙酸銨+5％乙腈；流動相B乙腈；流動相C甲醇)進行梯度條件6.5分鐘內(nèi)從100％A至50％B和50％C、1分鐘內(nèi)至100％B、維持100％B 1分鐘及以100％A再平衡1.5分鐘。注射量為10μL。
使用0.1秒滯留時間，于1秒內(nèi)從100掃描至1000，以獲得質(zhì)譜光譜。毛細(xì)管針電壓為3kV，來源溫度維持于140℃。使用氮氣作為霧化氣體。正電離模式的錐電壓為10V，負(fù)電離模式為20V。數(shù)據(jù)采集用Waters-Micromass MassLynx-Openlynx數(shù)據(jù)系統(tǒng)進行。
表3LCMS母峰([M+]界定化合物質(zhì)量)與滯留時間(分鐘)
*[M+]限定化合物質(zhì)量D.藥理實施例人類THP-1細(xì)胞中由MCP-1誘導(dǎo)的Ca通量的抑制作用于數(shù)個細(xì)胞系中，與CCR2受體結(jié)合的MCP-1誘導(dǎo)Ca2+(第二信使)的迅速及短暫的細(xì)胞內(nèi)釋放(Charo et al，PNAS 1994)。可使用Ca2+靈敏的染料測定游離Ca2+水平。當(dāng)CCR2受體被CCR2受體拮抗劑阻斷時，由MCP-1誘導(dǎo)的Ca2+釋放受抑制。
在補充有10％胎牛血清(FCS)、1％ L-谷氨酰胺、青霉素(50單位/ml)與鏈霉素(50μg/ml)(全部GIBCO BRL，Gent)的RPMI 1640培養(yǎng)基中培養(yǎng)人THP-1細(xì)胞。離心后，細(xì)胞用Ca2+靈敏的熒光染料Fluo-3 AM(Molecular Probes，Leiden，Netherlands)裝填30分鐘(2百萬個細(xì)胞/ml含4μM Fluo-3 AM、20mM HEPES、0.1％牛血清蛋白(BSA)與5mM丙磺舒的RPMI培養(yǎng)基)。過量染料以3倍量緩沖液(5mMHEPES、140mM NaCl、1mM MgCl2、5mM KCl、10mM葡萄糖、2.5mM丙磺舒、1.25mM CaCl2、0.1％ BSA；所有進一步的培養(yǎng)均在此緩沖液中進行)洗滌去除。在暗色底的96孔板(Costar，Cambridge，MA)中，以150,000個細(xì)胞/孔的密度平鋪細(xì)胞，離心(1分鐘)使其沉淀。細(xì)胞以測試化合物預(yù)培養(yǎng)20分鐘。然后，添加10-7M hMCP-1(Bachem，Bubendorf，Switserland)。使用熒光成像平板讀出儀(Fluoresent Imaging Plate Reader)(FLIPR，Molecular Devices，Munchen，Germany)測定細(xì)胞內(nèi)游離Ca2+濃度的變化。從添加MCP-1之前10秒至添加后2分鐘，記錄每秒的熒光(第1分鐘間隔1秒記錄1次，共有60個記錄；第二分鐘間隔3秒記錄1次，共有20個記錄)。在此時間架構(gòu)期間獲得的最大熒光值供進一步計算用。
表4報告對式(I)化合物進行上述試驗獲得的pIC50值。pIC50限定-log IC50，其中IC50為抑制50％由特異性MCP-1誘導(dǎo)的Ca2+通量的測試化合物的摩爾濃度。
表4
放射性配體結(jié)合試驗在96孔板中進行125I-MCP-1結(jié)合試驗，每孔40μg蛋白質(zhì)。使化合物溶解于DMSO中并稀釋100倍。在結(jié)合緩沖液(10％ DMSO)中制備10倍濃度范圍的化合物。競爭結(jié)合試驗含有總?cè)莘e250μL之下述成分25μL適當(dāng)?shù)幕衔锵♂屢?最終濃度為1％ DMSO)、200μL得自溶于結(jié)合緩沖液中的經(jīng)CCR2B轉(zhuǎn)染的CHO細(xì)胞的膜，及25μL125I-MCP-1(Bolton and Hnuter labeled，Amersham，比活性＝2000Ci/mmol，最終濃度0.15nM)。結(jié)合緩沖液由25mM HEPES、5mMMgCl2、1mM CaCl2、0.5％不含蛋白酶的牛血清蛋白(pH 7.4)組成。于25℃培養(yǎng)90分鐘后，于GF/B濾器[在0.5％聚乙烯亞胺中預(yù)浸泡，隨后以含25mM HEPES、5mM MgCl2、1mM CaCl2、5mM NaCl的緩沖液(pH 7.4)洗滌]上收獲膜。利用液體閃爍計數(shù)法測定濾器的結(jié)合放射性。計算EC50值(μM)與Ki值(μM)。EC50值表示與MCP-1競爭一半特異性結(jié)合位點的測試化合物的濃度；Ki值表示平衡解離常數(shù)，也即于放射性配體或其它競爭劑不存在下，于平衡時，與一半結(jié)合位點結(jié)合的測試化合物的濃度。于Graphpad Prism(實驗數(shù)據(jù)繪制軟件)中，使用非線性回歸計算EC50值與Ki值。Prism使用Cheng andPrusoff(Biochem.Pharmacol.1973，223099-3108)等式計算Ki或受體對競爭性藥物的親和力。低Ki值表示受體對測試化合物具高親和力。
式中Kd敘述放射性配體對受體的親和力，即在競爭劑不存在下，于平衡時，與一半結(jié)合位點結(jié)合的放射性配體的濃度。
化合物1具有0.17的Ki(μM)。
趨化性反應(yīng)本發(fā)明化合物的CCR2拮抗活性也可通過在趨化因子(例如MCP-1)存在下，測量該化合物對細(xì)胞趨化性反應(yīng)的影響測定。
使用Ficoll-Paque梯度離心法(Amersham Biosciences)分離得自人的肝素化外周血液(PBMC)的單核細(xì)胞。趨化性反應(yīng)試驗使用具有5μm孔徑聚碳酸酯(不含PVP)濾膜的一次性96孔趨化性室(ChemoTX，Neuro Probe)進行。于37℃，以5μg/ml鈣黃綠素-AM(Molecular Probes，Eugene，OR)使單核細(xì)胞進行熒光標(biāo)記30分鐘。以補充有0.2％牛血清蛋白的Hank’s平衡鹽溶液(Gibco BRL)洗滌經(jīng)標(biāo)記的細(xì)胞兩次并以每ml 5×106個細(xì)胞的濃度使細(xì)胞再懸浮。接著，以化合物于DMSO(二甲亞砜)中的系列稀釋液(最終DMSO濃度為0.2％)于室溫使細(xì)胞預(yù)培養(yǎng)10分鐘。趨化室底孔裝填含有30ng/ml重組hMCP-1(R&D)的28微升培養(yǎng)基或僅裝填緩沖液。將預(yù)先處理的細(xì)胞(100,000個細(xì)胞)按一式三份添加至濾器上部(20μL)，于37℃，含5％CO2的潮濕空氣下，進行培養(yǎng)。培養(yǎng)105分鐘后，未遷移的細(xì)胞以棉紙輕拭濾器上部予以去除。遷移的細(xì)胞使用熒光平板讀出儀(λ激發(fā)＝485nm；λ發(fā)射＝538nm)測量。趨化性反應(yīng)可以表示為趨化指數(shù)(C.I.)，其為MCP-1存在下遷移細(xì)胞的平均數(shù)與趨化阻子不存在下遷移細(xì)胞的平均數(shù)之比率。抑制百分比可利用下式計算
F樣品為用10、1、0.1、0.01或0.001μM化合物預(yù)培養(yǎng)并遷移至底孔30ng/ml MCP-1的細(xì)胞的熒光度；FMCP-1為以緩沖液-0.2％DMSO預(yù)培養(yǎng)并遷移至30 ng/ml MCP-1的細(xì)胞的熒光度；而F緩沖液為以緩沖液-0.2％DMSO預(yù)培養(yǎng)并自然遷移至底孔緩沖液的細(xì)胞的熒光度。
權(quán)利要求
1.一種式(I)的化合物 其N-氧化物、藥學(xué)上可接受的加成鹽、季胺或立體化學(xué)異構(gòu)形式，式中R1代表氫、C1-6烷基、C3-7環(huán)烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、芳基或雜芳基；各R2獨立地代表鹵代、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6烷硫基、多鹵代C1-6烷基、多鹵代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、氨基、單-或二(C1-4烷基)氨基、硝基、芳基或芳氧基；R3代表氫、氰基、任選被羥基或C1-6烷氧基取代的C1-6烷基、C(＝O)-O-R5、C(＝O)-NR6aR6b、C(＝S)-N6aR6b、S(＝O)2-N6aR6b或C(＝O)-R7；R4代表氫或C1-6烷基；R5代表氫、C1-6烷基、羥基C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、多鹵代C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、單-或二(C1-4烷基)氨基C1-6烷基、氨基羰基C1-6烷基、單-或二(C1-4烷基)氨基羰基C1-6烷基或芳基；R6a與R6b各自獨立地代表氫、C1-6烷基、氨基、單-或二(C1-4烷基)氨基、芳基NH-、氨基C1-6烷基、單-或二(C1-4烷基)氨基C1-6烷基、C1-6烷基羰基氨基、氨基羰基氨基、C1-6烷氧基、羰基氨基或羥基C1-6烷基；或R6a和R6b與它們連接的氮一起形成吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、哌啶基、哌嗪基、嗎啉基、硫代嗎啉基或被C1-6烷基取代的哌嗪基；R7代表氫、C1-6烷基、羥基C1-6烷基、C2-6烯基、C2-6炔基、多鹵代C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、單-或二(C1-4烷基)氨基C1-6烷基、氨基羰基C1-6烷基、單-或二(C1-4烷基)氨基羰基C1-6烷基、芳基或雜芳基；Z代表選自以下的環(huán)狀環(huán)系 各R8獨立地代表氫、鹵代、C1-6烷基、C1-6烷氧基、多鹵代C1-6烷基、多鹵代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、單-或二(C1-4烷基)氨基羰基、氨基、單-或二(C1-4烷基)氨基、羥基C1-6烷氨基、芳基、芳氧基、哌啶基、哌啶基氨基、嗎啉基、哌嗪基或硝基；各R9獨立地代表氫、鹵代或C1-6烷基；n為1、2、3、4或5；芳基代表苯基或被各自獨立地選自鹵代、C1-6烷基、C1-6烷氧基、多鹵代C1-6烷基、多鹵代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、單-或二(C1-4烷基)氨基羰基、氨基、單-或二(C1-4烷基)氨基、苯氧基或硝基的一、二、三、四或五個取代基取代的苯基；雜芳基代表呋喃基、噻吩基、吡咯基、唑基、噻唑基、咪唑基、吡唑基、異唑基、異噻唑基、二唑基、三唑基、噻二唑基、吡啶基、噠嗪基、嘧啶基、吡嗪基，所述雜芳基各自任選被各自獨立地選自鹵代、C1-6烷基、C1-6烷氧基、多鹵代C1-6烷基、多鹵代C1-6烷氧基、氰基、氨基羰基、單-或二(C1-4烷基)氨基羰基、氨基、單-或二(C1-4烷基)氨基或硝基的一或二個取代基取代。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R2代表鹵代、多鹵代C1-6烷基或芳氧基。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的化合物，其中R2代表鹵代。
4.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項的化合物，其中Z代表選自(a-2)、(a-3)、(a-4)、(a-5)、(a-6)、(a-7)、(a-11)、(a-13)、(a-14)或(a-15)的環(huán)狀環(huán)系。
5.根據(jù)權(quán)利要求4的化合物，其中Z代表選自(a-2)或(a-15)的環(huán)狀環(huán)系。
6.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項的化合物，其中R3代表氫、氰基、C(＝O)-O-R5、C(＝O)-NR6aR6b、C(＝S)-NR6aR6b、S(＝O)2-NR6aR6b或C(＝O)-R7。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-5中任一項的化合物，其中R3代表氫、被C1-6烷氧基取代的C1-6烷基或C(＝O)-O-R5。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的化合物，其中R3代表氫或C(＝O)-O-R5。
9.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項的化合物，其中R1代表C1-6烷基。
10.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項的化合物，其中R4代表氫。
11.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項的化合物，其中n為2。
12.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R1代表C1-6烷基；R2代表鹵代、多鹵代C1-6烷基或芳氧基；R3代表氫、被C1-6烷氧基取代的C1-6烷基，或C(＝O)-O-R5；Z代表選自(a-2)、(a-3)、(a-4)、(a-5)、(a-6)、(a-7)、(a-11)、(a-13)、(a-14)或(a-15)的環(huán)狀環(huán)系；R4代表氫；n代表1、2或3。
13.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項的化合物，其中所述化合物為立體化學(xué)純的。
14.前述權(quán)利要求中任一項的化合物，所述化合物用作藥物。
15.權(quán)利要求1-13中任一項要求的化合物在制備用于預(yù)防或治療通過CCR2受體激活所介導(dǎo)的疾病的藥物中的用途。
16.根據(jù)權(quán)利要求15的用途，其中所述疾病為炎性疾病。
17.一種藥用組合物，它包含藥學(xué)上可接受的載體及有效治療量的作為活性成分的權(quán)利要求1-13中任一項要求的化合物。
18.一種制備權(quán)利要求17要求的藥用組合物的方法，其特征在于，使藥學(xué)上可接受的載體與有效治療量的權(quán)利要求1-13中任一項要求的化合物緊密混合。
19.一種制備如在權(quán)利要求1中所定義的化合物的方法，其特征在于a)使式(II)中間體與適當(dāng)?shù)乃崛芜x在適當(dāng)溶劑存在下反應(yīng) 其中R1、R2、R3、R4、Z與n如在權(quán)利要求1中所定義；b)使式(III)中間體與式(IV)中間體在適當(dāng)溶劑存在下反應(yīng) 其中R1、R2、R4、Z與n如在權(quán)利要求1中所定義；c)使式(V)中間體與適當(dāng)酸反應(yīng) 其中R1、R2、R3、R4、Z與n如在權(quán)利要求1中所定義；d)使式(VI)中間體與磷酰氯(POCl3)或Burgess’試劑在適當(dāng)溶劑存在下反應(yīng) 其中R1、R2、R3、R4、R8與n如在權(quán)利要求1中所定義；e)使式(VII)中間體與SOCl2和HC(＝O)NH-NH2在適當(dāng)溶劑存在下反應(yīng) 其中R1、R2、R3、R4與n如在權(quán)利要求1中所定義；f)在適當(dāng)?shù)膲A及適當(dāng)?shù)娜軇┐嬖谙拢故?VIII)中間體與式(IX)中間體反應(yīng) 其中R1、R2、R3、R4、R8與n如在權(quán)利要求1中所定義；g)在適當(dāng)堿、適當(dāng)酸及適當(dāng)溶劑存在下，使式(X)中間體與甲酸甲酯、KSCN反應(yīng)，隨后于適當(dāng)溶劑存在下，使如此獲得的式(X-a)中間體與Bu3SnN3反應(yīng) 其中R1、R2、R4與n如在權(quán)利要求1中所定義；或，如果需要，可根據(jù)本領(lǐng)域已知的轉(zhuǎn)換反應(yīng)使式(I)化合物互相轉(zhuǎn)化；及進一步地，如果需要，可通過用酸處理，將式(I)化合物轉(zhuǎn)化成具治療活性的無毒的酸加成鹽，或通過用堿處理，轉(zhuǎn)化成具治療活性的無毒的堿加成鹽；或相反地，通過用堿處理將酸加成鹽形式轉(zhuǎn)化成游離堿，或通過用酸處理將堿加成鹽轉(zhuǎn)化成游離酸；及，如果需要，制備其立體化學(xué)異構(gòu)形式、季胺或N-氧化物形式。
全文摘要
本發(fā)明涉及具下式(I)的化合物，其N－氧化物、藥學(xué)上可接受的加成鹽、季胺或立體化學(xué)異構(gòu)形式，其中R
文檔編號C07D401/04GK1956976SQ200580016545
公開日2007年5月2日 申請日期2005年5月24日 優(yōu)先權(quán)日2004年5月26日
發(fā)明者G·M·博克克斯, G·R·E·范龍門, J·G·P·－O·多揚, E·科塞曼斯 申請人:詹森藥業(yè)有限公司