專(zhuān)利名稱(chēng)：有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白抑制劑的前體藥物的制作方法
背景技術(shù)：
本發(fā)明涉及為有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白，特別是有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白KSP的抑制劑的二氫吡唑化合物的前體藥物衍生物，其可用于治療細(xì)胞增殖性疾病，所述的細(xì)胞增殖性疾病例如癌癥、超常增生、再狹窄、心臟肥厚、免疫病變和炎癥。
在用于治療癌癥的治療劑中有紫杉烷類(lèi)和長(zhǎng)春花生物堿。紫杉烷類(lèi)和長(zhǎng)春花生物堿對(duì)存在于各種細(xì)胞結(jié)構(gòu)中的微管起作用。微管為有絲分裂紡錘體的主要結(jié)構(gòu)元件。有絲分裂紡錘體負(fù)責(zé)將基因組的復(fù)制拷貝分布至因細(xì)胞分裂產(chǎn)生的兩個(gè)子細(xì)胞中的每一個(gè)。據(jù)推定這些藥物使有絲分裂紡錘體破裂導(dǎo)致癌細(xì)胞分裂的抑制并且誘導(dǎo)癌細(xì)胞死亡。然而，微管形成其它類(lèi)型的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，包括神經(jīng)過(guò)程中胞內(nèi)運(yùn)輸?shù)能壍?。因?yàn)檫@些活性劑無(wú)法特異性靶向有絲分裂紡錘體，所以它們存在限制其有用性的副作用。
用于治療癌癥的活性劑的特異性的改善因治療有益性而相當(dāng)引人關(guān)注，如果與給予這些活性劑有關(guān)的副作用可以得到減少，那么就可以實(shí)現(xiàn)這些治療有益性。一般來(lái)說(shuō)，治療癌癥中的顯著性改善與鑒定通過(guò)新機(jī)制起作用的治療劑有關(guān)。其實(shí)例不僅包括紫杉烷類(lèi)，而且包括喜樹(shù)堿類(lèi)拓?fù)洚悩?gòu)酶I抑制劑。從這兩種觀點(diǎn)來(lái)看，有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白為新抗癌藥的有吸引力的靶標(biāo)。
有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白為有絲分裂紡錘體裝配和功能所必需的酶，但一般并非諸如神經(jīng)過(guò)程中的其它微管結(jié)構(gòu)的組成部分。有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白在有絲分裂所有階段過(guò)程中起必需的作用。這些酶為將ATP水解釋放的能量轉(zhuǎn)化成驅(qū)動(dòng)細(xì)胞貨物沿微管定向運(yùn)動(dòng)的機(jī)械力的″分子發(fā)動(dòng)蛋白″。足以進(jìn)行該過(guò)程的催化結(jié)構(gòu)域?yàn)榧s340個(gè)氨基酸的緊密結(jié)構(gòu)。在有絲分裂過(guò)程中，驅(qū)動(dòng)蛋白使微管組織為有絲分裂紡錘體的雙極結(jié)構(gòu)。驅(qū)動(dòng)蛋白介導(dǎo)染色體沿紡綞體微管運(yùn)動(dòng)以及與有絲分裂特定階段相關(guān)的有絲分裂紡錘體的結(jié)構(gòu)改變。有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白功能的實(shí)驗(yàn)性干擾導(dǎo)致有絲分裂紡錘體畸形或機(jī)能障礙，通常導(dǎo)致細(xì)胞周期停滯和細(xì)胞死亡。
在已經(jīng)鑒定的有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白中有KSP。KSP屬于正極定向的微管發(fā)動(dòng)蛋白的進(jìn)化保守的驅(qū)動(dòng)蛋白亞族，所述的正端定向的微管發(fā)動(dòng)蛋白裝配成由反向平行的同型二聚體組成的雙極同型四聚體。在有絲分裂過(guò)程中，KSP與有絲分裂紡錘體的微管結(jié)合。將針對(duì)KSP的抗體顯微注射入人體細(xì)胞可以防止前中期過(guò)程中的紡錘體極分離，從而產(chǎn)生單極紡錘體并且導(dǎo)致有絲分裂停滯且誘導(dǎo)程序性細(xì)胞死亡。KSP和在其它非人的生物體中的相關(guān)驅(qū)動(dòng)蛋白捆扎反向平行微管并且使它們可以彼此滑動(dòng)，由此促使兩個(gè)紡錘體極分開(kāi)。KSP還可以介導(dǎo)后期中的B紡錘體延長(zhǎng)和紡錘體極上的微管集中。
已經(jīng)描述了Human KSP(也稱(chēng)作HsEg5)[Blangy等，Cell，831159-69(1995)；Whitehead等，Arthritis Rheum.，391635-42(1996)；Galgio et al.，J.Cell Biol.，135339-414(1996)；Blangy等，J Biol.Chem.，27219418-24(1997)；Blangy等，Cell Motil Cytoskeleton，40174-82(1998)；Whitehead和Rattner，J.Cell Sci.，1112551-61(1998)；Kaiser等，JBC 27418925-31(1999)；GenBank accessionnumbersX85137，NM004523和U37426]，并且描述了KSP基因的片段(TRIP5)[Lee等，Mol Endocrinol.，9243-54(1995)；GenBankaccession number L40372]。已經(jīng)報(bào)導(dǎo)了Xenopus KSP同源物(Eg5)以及Drosophila K-LP61 F/KRP 130。
近來(lái)將某些喹唑酮類(lèi)描述為KSP抑制劑(PCT Publ.WO 01/30768，2001年5月3日)。
有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白為用于發(fā)現(xiàn)和開(kāi)發(fā)新有絲分裂化療劑的有吸引力的靶標(biāo)。因此，本發(fā)明的目的在于提供用于抑制有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白KSP的化合物、方法和組合物。
發(fā)明概述本發(fā)明涉及用于治療細(xì)胞增殖性疾病、用于治療與KSP驅(qū)動(dòng)蛋白活性相關(guān)的病癥和用于抑制KSP驅(qū)動(dòng)蛋白的二氫吡唑衍生物的前體藥物。本發(fā)明的化合物可以由通式I表示
發(fā)明詳述本發(fā)明的化合物用于抑制有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白并且由通式I的化合物或其藥物上可接受的鹽或立體異構(gòu)體表示 其中a獨(dú)立為0或1；b獨(dú)立為0或1；m獨(dú)立為0、1或2；n為0-8；p為1-6；u為1、2、3、4或5；R1選自1)(C＝O)C1-C10烷基；2)(C＝O)芳基；3)(C＝O)C2-C10鏈烯基；4)(C＝O)C2-C10炔基；5)(C＝O)C3-C8環(huán)烷基；6)(C＝O)雜環(huán)基；7)(C＝O)NR9R10；8)(C＝O)OC1-C10烷基；9)SO2NR9R10；
10)SO2C1-C10烷基；11)SO2C1-C10芳基；12)SO2C1-C10雜環(huán)基；13)C1-C10烷基；14)芳基；15)雜芳基；16)(CH2)u(C＝O)C1-C10烷基；17)(CH2)u(C＝O)NR9R10；18)3-吡咯烷酮基、3-哌啶酮基、2-環(huán)戊酮基、2-環(huán)己酮基；19)(C＝O)(C＝O)C1-C10烷基；20)(C＝O)(C＝O)NR9R10；21)(C＝O)(C＝O)OC1-C10烷基；所述的烷基、芳基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、雜芳基和雜環(huán)基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自R7的取代基取代；或R2選自1)C1-C10烷基；2)芳基；3)C2-C10鏈烯基；4)C2-C10炔基；5)C1-C6全氟烷基；6)C1-C6芳烷基；7)C1-C6雜芳烷基；8)C3-C8環(huán)烷基；和9)雜環(huán)基；所述的烷基、芳基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、芳烷基、雜芳烷基和雜環(huán)基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自R7的取代基取代；R3、R4和R5獨(dú)立地選自1)H；2)C1-C10烷基；3)芳基；
4)C2-C10鏈烯基；5)C2-C10炔基；6)C1-C6全氟烷基；7)C1-C6芳烷基；8)C3-C8環(huán)烷基；和9)雜環(huán)基；所述的烷基、芳基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、芳烷基和雜環(huán)基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自R7的取代基取代；或與同一碳原子連接的R3和R4合并成-(CH2)u-，其中碳原子之一任選地被選自O(shè)、S(O)m、-N(R9)C(O)-和-N(COR10)-的部分取代；R7為1)(C＝O)aObC1-C10烷基；2)(C＝O)aOb芳基；3)C2-C10鏈烯基；4)C2-C10炔基；5)(C＝O)aOb雜環(huán)基；6)CO2H；7)鹵素；8)CN；9)OH；10)ObC1-C6全氟烷基；11)Oa(C＝O)bNR9R10；12)S(O)mRa；13)S(O)2NR9R10；14)氧代；15)CHO；16)(N＝O)R9R10；或17)(C＝O)aObC3-C8環(huán)烷基；所述的烷基、芳基、鏈烯基、炔基、雜環(huán)基和環(huán)烷基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自R8的取代基取代；
R8選自1)(C＝O)aOb(C1-C10)烷基；2)Ob(C1-C3)全氟烷基；3)(C0-C6)亞烷基-S(O)mRa；4)氧代；5)OH；6)鹵素；7)CN；8)(C＝O)aOb(C2-C10)鏈烯基；9)(C＝O)aOb(C2-C10)炔基；10)(C＝O)aOb(C3-C6)環(huán)烷基；11)(C＝O)aOb(C0-C6)亞烷基-芳基；12)(C＝O)aOb(C0-C6)亞烷基-雜環(huán)基；13)(C＝O)aOb(C0-C6)亞烷基-N(Rb)2；14)C(O)Ra；15)(C0-C6)亞烷基-CO2Ra；16)C(O)H；17)(C0-C6)亞烷基-CO2H；18)C(O)N(Rb)2；19)S(O)mRa；20)S(O)2NR9R10；和21)C(NH)NH2；所述的烷基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基和雜環(huán)基任選地被至多三個(gè)取代基取代，所述的取代基選自Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、鹵素、CO2H、CN、O(C＝O)C1-C6烷基、氧代和N(Rb)2；R9和R10獨(dú)立地選自1)H；2)(C＝O)ObC1-C10烷基；3)(C＝O)ObC3-C8環(huán)烷基；4)(C＝O)Ob芳基；5)(C＝O)Ob雜環(huán)基；
6)C1-C10烷基；7)芳基；8)C2-C10鏈烯基；9)C2-C10炔基；10)雜環(huán)基；11)C3-C8環(huán)烷基；12)SO2Ra；和13)(C＝O)NRb2；所述的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)基、鏈烯基和炔基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自R8的取代基取代；或R9和R10可以與它們所連接的氮彼此結(jié)合成單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)，在每個(gè)環(huán)上帶有3-7個(gè)成員并且除氮外，任選地含有一個(gè)或兩個(gè)額外的選自N、O和S的雜原子，所述的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)任選地被一個(gè)或多個(gè)選自R8的取代基取代；Ra為(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、芳基、芐基或雜環(huán)基；Rb為H、(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C＝O)OC1-C6烷基、(C＝O)C1-C6烷基或S(O)2Ra；和Rc獨(dú)立地選自(C1-C6)烷氧基、新戊酰氧基甲氧基和NRb2；或兩個(gè)Rcs可以與它們所連接的磷彼此結(jié)合成5-7元的單環(huán)雜環(huán)，所述的單環(huán)雜環(huán)任選地被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自Rb的取代基取代；Rd獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、芳基、芐基或雜環(huán)基；Rp選自-PO(OH)2、-PO(Rc)2、-C(O)CH2CH2CH2OPO(OH)2、C(O)CH2CH2CH2OPO(Rc)2、-CH2OPO(OH)2、-CH2OPO(Rc)2、-C(O)(CHRd)pNRa2、-C(O)(CHRd)pNRa3+、-CH2OC(O)(CHRd)pNRa2、-CH2OC(O)(CHRa)pNRa3+和
本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案由通式II的化合物或其藥物上可接受的鹽或立體異構(gòu)體表示 其中a獨(dú)立為0或1；b獨(dú)立為0或1；m獨(dú)立為0、1或2；n為0-5；R1選自1)(C＝O)C1-C10烷基；2)(C＝O)芳基；3)(C＝O)C2-C10鏈烯基；4)(C＝O)C2-C10炔基；5)(C＝O)C3-C8環(huán)烷基；6)(C＝O)雜環(huán)基；7)(C＝O)OC1-C10烷基；8)(C＝O)NR9R10；9)SO2NR9R10；10)SO2C1-C10烷基；11)SO2C1-C10芳基；12)SO2C1-C10雜環(huán)基；所述的烷基、芳基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基和雜環(huán)基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自R7的取代基取代；或
R2選自1)C1-C10烷基；2)芳基；3)C2-C10鏈烯基；4)C2-C10炔基；5)C1-C6全氟烷基；6)C1-C6芳烷基；7)C3-C8環(huán)烷基；和8)雜環(huán)基；所述的烷基、芳基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、芳烷基和雜環(huán)基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自R7的取代基取代；R3、R4和R5獨(dú)立地選自1)H；2)C1-C10烷基；3)芳基；4)C2-C10鏈烯基；5)C2-C10炔基；6)C1-C6全氟烷基；7)C1-C6芳烷基；8)C3-C8環(huán)烷基；和9)雜環(huán)基；所述的烷基、芳基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、芳烷基和雜環(huán)基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自R7的取代基取代；R7為1)(C＝O)aObC1-C10烷基；2)(C＝O)aOb芳基；3)C2-C10鏈烯基；4)C2-C10炔基；5)(C＝O)aOb雜環(huán)基；6)CO2H；
7)鹵素；8)CN；9)OH；10)ObC1-C6全氟烷基；11)Oa(C＝O)bNR9R10；12)S(O)mRa；13)S(O)2NR9R10；14)氧代；15)CHO；16)(N＝O)R9R10；或17)(C＝O)aObC3-C8環(huán)烷基；所述的烷基、芳基、鏈烯基、炔基、雜環(huán)基和環(huán)烷基任選地被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R8的取代基取代；R8選自1)(C＝O)aOb(C1-C10)烷基；2)Ob(C1-C3)全氟烷基；3)氧代；4)OH；5)鹵素；6)CN；7)(C2-C10)鏈烯基；8)(C2-C10)炔基；9)(C＝O)aOb(C3-C6)環(huán)烷基；10)(C＝O)aOb(C0-C6)亞烷基-芳基；11)(C＝O)aOb(C0-C6)亞烷基-雜環(huán)基；12)(C＝O)aOb(C0-C6)亞烷基-N(Rb)2；13)C(O)Ra；14)(C0-C6)亞烷基-CO2Ra；15)C(O)H；16)(C0-C6)亞烷基-CO2H；和17)C(O)N(Rb)2；
18)S(O)mRa；和19)S(O)2NR9R10；所述的烷基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基和雜環(huán)基任選地被至多三個(gè)取代基取代，所述的取代基選自Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、鹵素、CO2H、CN、O(C＝O)C1-C6烷基、氧代和N(Rb)2；R9和R10獨(dú)立地選自1)H；2)(C＝O)ObC1-C10烷基；3)(C＝O)ObC3-C8環(huán)烷基；4)(C＝O)Ob芳基；5)(C＝O)Ob雜環(huán)基；6)C1-C10烷基；7)芳基；8)C2-C10鏈烯基；9)C2-C10炔基；10)雜環(huán)基；11)C3-C8環(huán)烷基；12)SO2Ra；和13)(C＝O)NRb2；所述的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)基、鏈烯基和炔基任選地被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R8的取代基取代；或R9和R10可以與它們所連接的氮彼此結(jié)合成單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)，在每個(gè)環(huán)上帶有5-7個(gè)成員并且除氮外，還任選地含有一個(gè)或兩個(gè)額外的選自N、O和S的雜原子，所述的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)任選地被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R8的取代基取代；Ra為(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、芳基或雜環(huán)基；Rb為H、(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C＝O)OC1-C6烷基、(C＝O)C1-C6烷基或S(O)2Ra；且Rc獨(dú)立地選自(C1-C6)烷氧基、新戊酰氧基甲氧基和NRb2；或兩個(gè)Rcs可以與它們所連接的磷彼此結(jié)合成5-7元的單環(huán)雜環(huán)，所述的單環(huán)雜環(huán)任選地被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自Rb的取代基取代；RP選自-PO(OH)2、-PO(Rc)2、-C(O)CH2CH2CH2OPO(OH)2、C(O)CH2CH2CH2OPO(Rc)2、-C(O)CH2NRa2、-C(O)CH2NRa3+、-CH2OC(O)CH2NRa2、-CH2OC(O)CH2NRa3+和 另一個(gè)實(shí)施方案為如上所述的通式II的化合物或其藥物上可接受的鹽或立體異構(gòu)體，其中R1選自1)(C＝O)C1-C10烷基；2)(C＝O)芳基；3)(C＝O)C3-C8環(huán)烷基；4)(C＝O)雜環(huán)基；5)(C＝O)OC1-C10烷基；6)SO2NR9R10；和7)SO2C1-C10烷基；所述的烷基、芳基、環(huán)烷基和雜環(huán)基任選地被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R7的取代基取代；R2選自1)C1-C10烷基；2)芳基；和3)雜芳基；所述的烷基、芳基和雜芳基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自R7的取代基取代；
R3和R4獨(dú)立地選自1)H；和2)C1-C10烷基；所述的烷基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自R7的取代基取代；且R5選自1)H；2)C1-C10烷基；3)芳基；和4)雜環(huán)基；所述的烷基、芳基和雜環(huán)基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自R7的取代基取代；Rp選自-PO(OH)2、-C(O)CH2CH2CH2OPO(OH)2、-CH2OPO(OH)2、-C(O)CH2NRa2、-C(O)CH2NRa3+、-CH2OC(O)CH2NRa2、-CH2OC(O)CH2NRa3+和 R7、R8、R9、R10、Ra和Rb如上所述。
本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案由通式III的化合物或其藥物上可接受的鹽或立體異構(gòu)體表示 其中a獨(dú)立為0或1；
b獨(dú)立為0或1；m獨(dú)立為0、1或2；n為0-5；R1選自1)(C＝O)C1-C10烷基；2)(C＝O)芳基；3)(C＝O)C2-C10鏈烯基；4)(C＝O)C2-C10炔基；5)(C＝O)C3-C8環(huán)烷基；6)(C＝O)雜環(huán)基；7)(C＝O)OC1-C10烷基；8)(C＝O)NR9R10；9)SO2NR9R10；10)SO2C1-C10烷基；11)SO2C1-C10芳基；12)SO2C1-C10雜環(huán)基；所述的烷基、芳基，鏈烯基，炔基，環(huán)烷基，和雜環(huán)基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自R7的取代基取代；或R7a和R7c獨(dú)立地選自1)H；2)ObC1-C10烷基；3)鹵素；4)CN；和5)OH；所述的烷基任選地被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R8的取代基取代；R7b為鹵素；R7為1)(C＝O)aObC1-C10烷基；2)(C＝O)aOb芳基；
3)C2-C10鏈烯基；4)C2-C10炔基；5)(C＝O)aOb雜環(huán)基；6)CO2H；7)鹵素；8)CN；9)OH；10)ObC1-C6全氟烷基；11)Oa(C＝O)bNR9R10；12)S(O)mRa；13)S(O)2NR9R10；14)氧代；15)CHO；16)(N＝O)R9R10；或17)(C＝O)aObC3-C8環(huán)烷基；所述的烷基、芳基、鏈烯基、炔基、雜環(huán)基和環(huán)烷基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自R8的取代基取代；R8選自1)(C＝O)aOb(C1-C10)烷基；2)Ob(C1-C3)全氟烷基；3)氧代；4)OH；5)鹵素；6)CN；7)(C2-C10)鏈烯基；8)(C2-C10)炔基；9)(C＝O)aOb(C3-C6)環(huán)烷基；10)(C＝O)aOb(C0-C6)亞烷基-芳基；11)(C＝O)aOb(C0-C6)亞烷基-雜環(huán)基；12)(C＝O)aOb(C0-C6)亞烷基-N(Rb)2；13)C(O)Ra；
14)(C0-C6)亞烷基-CO2Ra；15)C(O)H；16)(C0-C6)亞烷基-CO2H；和17)C(O)N(Rb)2；18)S(O)mRa；和19)S(O)2NR9R10；所述的烷基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基和雜環(huán)基任選地被至多三個(gè)取代基取代，所述的取代基選自Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、鹵素、CO2H、CN、O(C＝O)C1-C6烷基、氧代和N(Rb)2；R9和R10獨(dú)立地選自1)H；2)(C＝O)ObC1-C10烷基；3)(C＝O)ObC3-C8環(huán)烷基；4)(C＝O)Ob芳基；5)(C＝O)Ob雜環(huán)基；6)C1-C10烷基；7)芳基；8)C2-C10鏈烯基；9)C2-C10炔基；10)雜環(huán)基；11)C3-C8環(huán)烷基；12)SO2Ra；和13)(C＝O)NRb2；所述的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)基、鏈烯基和炔基任選地被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R8的取代基取代；或R9和R10可以與它們所連接的氮彼此結(jié)合成單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)，在每個(gè)環(huán)上帶有5-7個(gè)成員并且除氮外，還任選地含有一個(gè)或兩個(gè)額外的選自N、O和S的雜原子，所述的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)任選地被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R8的取代基取代；Ra獨(dú)立地選自(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、芳基和雜環(huán)基；Rb獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C＝O)OC1-C6烷基、(C＝O)C1-C6烷基或S(O)2Ra；和Rp選自-PO(OH)2、-C(O)CH2CH2CH2OPO(OH)2、-CH2OPO(OH)2、-C(O)CH2NRa2、-C(O)CH2NRa3+、-CH2OC(O)CH2NRa2、-CH2OC(O)CH2NRa3+和 本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案由通式IV的化合物或其藥物上可接受的鹽或立體異構(gòu)體表示 其中a獨(dú)立為0或1；b獨(dú)立為0或1；m獨(dú)立為0、1或2；n為0-5；R7a和R7c獨(dú)立地選自1)ObC1-C10烷基；2)鹵素；3)CN；和4)OH；所述的烷基任選地被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R8的取代基取代；R7b為鹵素；R7為
1)(C＝O)aObC1-C10烷基；2)(C＝O)aOb芳基；3)C2-C10鏈烯基；4)C2-C10炔基；5)(C＝O)aOb雜環(huán)基；6)CO2H；7)鹵素；8)CN；9)OH；10)ObC1-C6全氟烷基；11)Oa(C＝O)bNR9R10；12)S(O)mRa；13)S(O)2NR9R10；14)氧代；15)CHO；16)(N＝O)R9R10；或17)(C＝O)aObC3-C8環(huán)烷基；所述的烷基、芳基、鏈烯基、炔基、雜環(huán)基和環(huán)烷基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自R8的取代基取代；R8選自1)(C＝O)aOb(C1-C10)烷基；2)Ob(C1-C3)全氟烷基；3)氧代；4)OH；5)鹵素，6)CN；7)(C2-C10)鏈烯基；8)(C2-C10)炔基；9)(C＝O)aOb(C3-C6)環(huán)烷基；10)(C＝O)aOb(C0-C6)亞烷基-芳基；11)(C＝O)aOb(C0-C6)亞烷基-雜環(huán)基；
12)(C＝O)aOb(C0-C6)亞烷基-N(Rb)2；13)C(O)Ra；14)(C0-C6)亞烷基-CO2Ra；15)C(O)H；16)(C0-C6)亞烷基-CO2H；和17)C(O)N(Rb)2；18)S(O)mRa；和19)S(O)2NR9R10；所述的烷基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基和雜環(huán)基任選地被至多三個(gè)取代基取代，所述的取代基選自Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、鹵素、CO2H、CN、O(C＝O)C1-C6烷基、氧代和N(Rb)2；R9和R10獨(dú)立地選自1)H；2)(C＝O)ObC1-C10烷基；3)(C＝O)ObC3-C8環(huán)烷基；4)(C＝O)Ob芳基；5)(C＝O)Ob雜環(huán)基；6)C1-C10烷基；7)芳基；8)C2-C10鏈烯基；9)C2-C10炔基；10)雜環(huán)基；11)C3-C8環(huán)烷基；12)SO2Ra；和13)(C＝O)NRb2；所述的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)基、鏈烯基將炔基任選地被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R8的取代基取代；或R9和R10可以與它們所連接的氮彼此結(jié)合成單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)，在每個(gè)環(huán)上帶有5-7個(gè)成員并且除氮外，還任選地含有一個(gè)或兩個(gè)額外的選自N、O和S的雜原子，所述的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)任選地被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R8的取代基取代；
R11選自1)C1-C10烷基；2)芳基；3)C3-C8環(huán)烷基；4)雜環(huán)基；所述的烷基、芳基、環(huán)烷基和雜環(huán)基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自R10的取代基取代；或Ra獨(dú)立地選自(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、芳基和雜環(huán)基；且Rb獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C＝O)OC1-C6烷基、(C＝O)C1-C6烷基或S(O)2Ra。
本發(fā)明化合物的具體實(shí)例包括3-[(5S)-1-乙?；?3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氫-1H-吡唑-5-基]丙-1-醇；3-[(5S)-1-乙?；?3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氫-1H-吡唑-5-基]丙基二氫磷酸酯；2-[(5R)-1-乙?；?3-(2-氟-5-甲基苯基)-5-苯基-4，5-二氫-1H-吡唑-5-基]乙醇；2-[(5R)-1-乙?；?3-(2-氟-5-甲基苯基)-5-苯基-4，5-二氫-1H-吡唑-5-基]乙基二氫磷酸酯；2-[(5R)-1-乙?；?3-(2-氟-5-甲基苯基)-5-苯基-4，5-二氫-1H-吡唑-5-基]丙-1-醇；2-[(5R)-1-乙酰基-3-(2-氟-5-甲基苯基)-5-苯基-4，5-二氫-1H-吡唑-5-基]丙基二氫磷酸酯；2-[(5R)-1-乙酰基-3-(2-氟-5-甲基苯基)-5-苯基-4，5-二氫-1H-吡唑-5-基]丁-1-醇；2-[(5R)-1-乙?；?3-(2-氟-5-甲基苯基)-5-苯基-4，5-二氫-1H-吡唑-5-基]丁基二氫磷酸酯；3-[(5S)-1-乙酰基-3-(5-溴-2-氟苯基)-5-苯基-4，5-二氫-1H-吡唑-5-基]丙-1-醇；和
3-[(5S)-1-乙酰基-3-(5-溴-2-氟苯基)-5-苯基-4，5-二氫-1H-吡唑-5-基]丙基二氫磷酸酯；或其藥物上可接受的鹽或立體異構(gòu)體。
本發(fā)明的化合物可以帶有不對(duì)稱(chēng)中心、手性軸和手性平面(如E.L.Eliel和S.H.Wilen，Stereochemistry of Carbon Compounds，JohnWiley & Sons，New York，1994，1119-1190頁(yè)中所述)并且作為外消旋物、外消旋混合物和各非對(duì)映體出現(xiàn)，所有可能的異構(gòu)體及其混合物，包括旋光異構(gòu)體，所有這類(lèi)立體異構(gòu)體都包括在本發(fā)明中。此外，本文披露的化合物可以作為互變體存在并且兩種互變異構(gòu)形式均包括在本發(fā)明范圍內(nèi)，即使僅描述一種互變異構(gòu)體結(jié)構(gòu)。
當(dāng)任意的變量(例如R7、R8、Rb等)在任何成分上出現(xiàn)一次以上時(shí)，其在每次出現(xiàn)時(shí)的定義與另一次出現(xiàn)時(shí)的定義彼此獨(dú)立。此外，取代基和變量的組合是允許的，條件是這類(lèi)組合產(chǎn)生穩(wěn)定的化合物。從取代基上向下拉入環(huán)系的線(xiàn)表示所示的鍵可以與可取代的環(huán)原子中的任意一個(gè)連接。如果環(huán)系為多環(huán)，那么其含義是鍵僅與相鄰環(huán)上的合適的碳原子中的任意一個(gè)連接。
可以理解本發(fā)明化合物上的取代基和取代模式可以由本領(lǐng)域技術(shù)人員選擇，以便提供化學(xué)上穩(wěn)定的并且易于通過(guò)本領(lǐng)域中公知的技術(shù)以及下述方法由易于獲得的原料合成的化合物。如果取代基自身被一個(gè)以上基團(tuán)取代，那么應(yīng)理解這些多個(gè)基團(tuán)可以位于同一碳或不同的碳上，只要產(chǎn)生穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)。術(shù)語(yǔ)“任選地被一個(gè)或多個(gè)取代基取代”應(yīng)與術(shù)語(yǔ)“任選地被至少一個(gè)取代基取代”等同，并且在這類(lèi)情況中，優(yōu)選的實(shí)施方案為帶有0-3個(gè)取代基。
本文所用的″烷基″用以包括帶有給定數(shù)量的碳原子的支鏈和直鏈飽和脂族烴基。例如，將“C1-C10烷基”中的C1-C10定義為包括在直鏈或支鏈排列的帶有1、2、3、4、5、6、7、8、9或10個(gè)碳的基團(tuán)。例如，“C1-C10烷基”特別包括甲基、乙基、正-丙基、異-丙基、正-丁基、叔-丁基、異-丁基、戊基、己基、庚基、辛基、壬基、癸基等。術(shù)語(yǔ)“環(huán)烷基”指的是帶有給定數(shù)量碳原子的單環(huán)飽和脂族烴基。例如，“環(huán)烷基”包括環(huán)丙基、甲基-環(huán)丙基、2，2-二甲基-環(huán)丁基、2-乙基-環(huán)戊基、環(huán)己基等。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，術(shù)語(yǔ)“環(huán)烷基”包括上述基團(tuán)并且進(jìn)一步包括單環(huán)不飽和脂族烴基。例如，在該實(shí)施方案中定義的“環(huán)烷基”包括環(huán)丙基、甲基-環(huán)丙基，2，2-二甲基-環(huán)丁基、2-乙基-環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)戊烯基、環(huán)丁烯基等。
術(shù)語(yǔ)“亞烷基”指的是帶有指定數(shù)量碳原子的雙自由烴基。例如，“亞烷基”包括-CH2-、-CH2CH2-等。
當(dāng)在術(shù)語(yǔ)“C1-C6芳烷基”和“C1-C6雜芳烷基”中使用時(shí)，術(shù)語(yǔ)“C1-C6”指的是該部分中的烷基部分并且不描述該部分的芳基和雜芳基部分中的原子數(shù)量。
″烷氧基″表示通過(guò)氧橋連接的指明碳原子數(shù)的環(huán)或非-環(huán)烷基?！巴檠趸庇纱税ㄉ鲜鐾榛铜h(huán)烷基的定義。
如果未指定碳原子數(shù)，術(shù)語(yǔ)“鏈烯基”指的是含有2-10個(gè)碳原子和至少一個(gè)碳碳雙鍵的直鏈、支鏈或環(huán)狀的非-芳族烴基。優(yōu)選存在一個(gè)碳碳雙鍵并且可以存在至多四個(gè)非-芳族碳碳雙鍵。因此，“C2-C6鏈烯基”指的是帶有2-6個(gè)碳原子的鏈烯基。鏈烯基包括乙烯基、丙烯基、丁烯基、2-甲基丁烯基和環(huán)己烯基。鏈烯基的直鏈、支鏈或環(huán)狀部分可以含有雙鍵，并且如果指定取代的鏈烯基，那么可以被取代。
術(shù)語(yǔ)“炔基”指的是含有2-10個(gè)碳原子和至少一個(gè)碳碳三鍵的直鏈、支鏈或環(huán)狀烴基。至多可以存在三個(gè)碳-碳三鍵。因此，“C2-C6炔基”指的是帶有2-6個(gè)碳原子的炔基。炔基包括乙炔基、丙炔基、丁炔基、3-甲基丁炔基等。炔基的直鏈、支鏈或環(huán)狀部分可以含有三鍵，并且如果指定取代的炔基，那么可以被取代。
在某些情況中，使用包括0的碳范圍定義取代基，諸如(C0-C6)亞烷基-芳基。如果將芳基定為苯基，那么該定義包括苯基自身以及-CH2Ph、-CH2CH2Ph、CH(CH3)CH2CH(CH3)Ph等。
本文所用的″芳基″用以指各環(huán)上至多7個(gè)原子的任意穩(wěn)定的單環(huán)或雙環(huán)碳環(huán)，其中至少一個(gè)環(huán)為芳族環(huán)。這類(lèi)芳基要素的實(shí)例包括苯基、萘基、四氫萘基、茚滿(mǎn)基和聯(lián)苯基。在芳基取代基為雙環(huán)且一個(gè)環(huán)為非-芳族環(huán)的情況中，應(yīng)理解通過(guò)芳族環(huán)連接。
本文所用的術(shù)語(yǔ)雜芳基表示各環(huán)上至多7個(gè)原子的穩(wěn)定單環(huán)或雙環(huán)，其中至少一個(gè)環(huán)為芳族環(huán)且含有1-4個(gè)選自O(shè)、N和S組成的組的雜原子。該定義范圍內(nèi)的雜芳基包括，但不限于吖啶基、咔唑基、噌啉基、喹喔啉基、吡唑基、吲哚基、苯并三唑基、呋喃基、噻吩基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、喹啉基、異喹啉基、唑基、異唑基、吲哚基、吡嗪基、噠嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、四氫喹啉。類(lèi)似于下文的雜環(huán)的定義，還可以將“雜芳基”理解為包括任意含氮的雜芳基的N-氧化物衍生物。在雜芳基取代基為雙環(huán)且一個(gè)環(huán)為非-芳族環(huán)或不含雜原子的情況中，應(yīng)理解分別通過(guò)芳族環(huán)或通過(guò)含雜原子的環(huán)連接。
本文所用的術(shù)語(yǔ)″雜環(huán)″或“雜環(huán)基”用以指含有1-4個(gè)選自O(shè)、N和S組成的組的雜原子的3-至10-元芳族或非芳族雜環(huán)并且包括雙環(huán)基團(tuán)?！半s環(huán)基”由此包括上述雜芳基及其二氫和四氫類(lèi)似物。“雜環(huán)基”的額外的實(shí)例包括，但不限于如下基團(tuán)氮雜環(huán)丁烷基、苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并呋咱基、苯并吡唑基、苯并三唑基、苯并苯硫基、苯并唑基、咔唑基、咔啉基、噌啉基、呋喃基、咪唑基、二氫吲哚基、吲哚基、indolazinyl、吲唑基、異苯并呋喃基、異吲哚基、異喹啉基、異噻唑基、異唑基、萘啶基、二唑基、唑基、唑啉、異唑啉、氧雜環(huán)丁烷基、吡喃基、吡嗪基、吡唑基、噠嗪基、吡啶并吡啶基、噠嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、喹喔啉基、四氫吡喃基、四氫硫代吡喃基、四氫異喹啉基、四唑基、四唑并吡啶基、噻二唑基、噻唑基、噻吩基、噻唑基、1，4-二烷基、六氫吖庚因基、哌嗪基、哌啶基、吡啶-2-酮基、吡咯烷基、嗎啉基、硫代嗎啉基、二氫苯并咪唑基、二氫苯并呋喃基、二氫苯并苯硫基、二氫苯并唑基、二氫呋喃基、二氫咪唑基、二氫吲哚基、二氫異唑基、二氫異噻唑基、二氫二唑基、二氫唑基、二氫吡嗪基、二氫吡唑基、二氫吡啶基、二氫嘧啶基、二氫吡咯基、二氫喹啉基、二氫四唑基、二氫噻二唑基、二氫噻唑基、二氫噻吩基、二氫三唑基、二氫氮雜環(huán)丁烷基、亞甲基二氧基苯甲?；⑺臍溥秽退臍溧绶曰捌銷(xiāo)-氧化物?？梢酝ㄟ^(guò)碳原子或通過(guò)雜原子連接雜環(huán)基取代基。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本文所用的術(shù)語(yǔ)″雜環(huán)″或“雜環(huán)基”用以指含有1-4個(gè)選自O(shè)、N和S組成的組的雜原子的5-至10-元芳族或非芳族雜環(huán)，并且包括雙環(huán)基。在該實(shí)施方案中的“雜環(huán)基”由此包括上述雜芳基及其二氫和四氫類(lèi)似物?！半s環(huán)基”的額外的實(shí)例包括，但不限于如下基團(tuán)苯并咪唑基、苯并呋喃基、苯并呋咱基、苯并吡唑基、苯并三唑基、苯并苯硫基、苯并唑基、咔唑基、咔啉基、噌啉基、呋喃基、咪唑基、二氫吲哚基、吲哚基、indolazinyl、吲唑基、異苯并呋喃基、異吲哚基、異喹啉基、異噻唑基、異唑基、萘啶基、二唑基、唑基、唑啉、異唑啉、氧雜環(huán)丁烷基、吡喃基、吡嗪基、吡唑基、噠嗪基、吡啶并吡啶基、噠嗪基、吡啶基、嘧啶基、吡咯基、喹唑啉基、喹啉基、喹喔啉基、四氫吡喃基、四氫硫代吡喃基、四氫異喹啉基、四唑基、四唑并吡啶基、噻二唑基、噻唑基、噻吩基、噻唑基、氮雜環(huán)丁烷基、1，4-二烷基、六氫吖庚因基、哌嗪基、哌啶基、吡啶-2-酮基、吡咯烷基、嗎啉基、硫代嗎啉基、二氫苯并咪唑基、二氫苯并呋喃基、二氫苯并苯硫基、二氫苯并唑基、二氫呋喃基、二氫咪唑基、二氫吲哚基、二氫異唑基、二氫異噻唑基、二氫二唑基、二氫唑基、二氫吡嗪基、二氫吡唑基、二氫吡啶基、二氫嘧啶基、二氫吡咯基、二氫喹啉基、二氫四唑基、二氫噻二唑基、二氫噻唑基、二氫噻吩基、二氫三唑基、二氫氮雜環(huán)丁烷基、亞甲二氧基苯甲?；⑺臍溥秽退臍溧绶曰捌銷(xiāo)-氧化物?？梢酝ㄟ^(guò)碳原子或通過(guò)雜原子連接雜環(huán)基取代基。
在另一個(gè)實(shí)施方案中，雜環(huán)選自2-吖庚因酮、苯并咪唑基、2-二吖庚因酮、咪唑基、2-咪唑烷酮、吲哚基、異喹啉基、嗎啉基、哌啶基、哌嗪基、吡啶基、吡咯烷基、2-哌啶酮、2-嘧啶酮、2-吡咯烷酮、喹啉基、四氫呋喃基、四氫異喹啉基和噻吩基。
正如本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解的，本文所用的“鹵素(halo)”或“鹵素(halogen)”用以包括氯、氟、溴和碘。
除非另有說(shuō)明，所述的烷基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基、雜芳基和雜環(huán)基取代基可以被取代或未被取代。例如，(C1-C6)烷基可以被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)取代基取代，所述的取代基選自O(shè)H、氧代、鹵素、烷氧基、二烷基氨基或雜環(huán)基，諸如嗎啉基、哌啶基等。在這種情況中，如果一個(gè)取代基為氧代，而另一個(gè)為OH，那么定義中包括如下基團(tuán)-C＝O)CH2CH(OH)CH3、-(C＝O)OH，-CH2(OH)CH2CH(O)等。
在同一碳原子上的R3和R4定義中合并成-(CH2)u-時(shí)形成的部分表示如下
此外，這類(lèi)環(huán)狀部分可以任選地包括雜原子。這類(lèi)含雜原子的環(huán)狀部分的實(shí)例包括，但不限于 在某些情況中，定義了R9和R10，使得它們可以與它們所連接的氮彼此結(jié)合成在每個(gè)環(huán)上帶有5-7個(gè)成員并且除氮外，還可以任選地含有一個(gè)或兩個(gè)額外的選自N、O和S的雜原子的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)，所述的雜環(huán)任選地被一個(gè)或多個(gè)選自R11的取代基取代。由此可以形成的雜環(huán)的實(shí)例包括，但不限于如下基團(tuán)，謹(jǐn)記雜環(huán)任選地被一個(gè)或多個(gè)(且優(yōu)選一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè))選自R11的取代基取代
在某些情況中，定義了兩個(gè)Rcs，使得它們可以與它們所連接的磷彼此結(jié)合成在環(huán)上帶有5-7個(gè)成員的雜環(huán)，所述的雜環(huán)任選地被一個(gè)或多個(gè)選自Rb的取代基取代。由此可以形成的雜環(huán)的實(shí)例包括，但不限于如下基團(tuán)，謹(jǐn)記雜環(huán)任選地被一個(gè)或多個(gè)(且優(yōu)選一個(gè)或兩個(gè))選自Rb的取代基取代 在一個(gè)實(shí)施方案中，n為1、2或3。
在一個(gè)實(shí)施方案中，R1選自(C＝O)C1-C10烷基、(C＝O)芳基、(C＝O)C3-C8環(huán)烷基和-(C＝O)雜芳基，它們?nèi)芜x地被1-3個(gè)選自R7的取代基取代。在該實(shí)施方案的另一個(gè)方面中，R1為(C＝O)C1-C10烷基。
在一個(gè)實(shí)施方案中，R2選自芳基，它任選地被1-3個(gè)選自R7的取代基取代。在該實(shí)施方案的另一個(gè)方面中，R2為苯基，它任選地被1-3個(gè)選自鹵素和C1-C6烷基的取代基取代。
在一個(gè)實(shí)施方案中，R3和R4為H。
在一個(gè)實(shí)施方案中，R5選自芳基，它任選地被1-3個(gè)選自R10的取代基取代。在該實(shí)施方案的另一個(gè)方面中，R5為苯基，它任選地被1-3個(gè)選自鹵素和-OH的取代基取代。在該實(shí)施方案的另一個(gè)方面中，R5為苯基，它任選地被1-3個(gè)選自鹵素的取代基取代。
在一個(gè)實(shí)施方案中，Rp為-P(O)(OH)2。
在通式IV化合物的一個(gè)實(shí)施方案中，R11為C1-C6烷基。在通式IV化合物的另一個(gè)實(shí)施方案中，R11為甲基。
在通式IV化合物的一個(gè)實(shí)施方案中，R7a和R7c獨(dú)立地選自C1-C6烷基、鹵素和OH。
在通式IV化合物的一個(gè)實(shí)施方案中，R7b為F。
在通式IV化合物的一個(gè)實(shí)施方案中，n為1、2或3。
本發(fā)明包括通式I化合物的游離形式及其藥物上可接受的鹽和立體異構(gòu)體。本文中例舉的具體化合物中的某些為胺化合物的質(zhì)子化鹽。術(shù)語(yǔ)“游離形式”指的是非-鹽形式的胺化合物。包括的藥物上可接受的鹽不僅包括本文所述具體化合物的例舉的鹽，而且包括通式I化合物的游離形式的所有典型藥物上可接受的鹽?？梢允褂帽绢I(lǐng)域公知的技術(shù)分離所述具體鹽化合物的游離形式。例如，可以通過(guò)用合適的稀堿水溶液，諸如稀NaOH水溶液、碳酸鉀、氨和碳酸氫鈉處理以再生游離形式。游離形式在一定程度上在某些物理特性方面不同于其相應(yīng)的鹽形式，諸如在極性溶劑中的溶解度，但就本發(fā)明的目的而言，酸式和堿式鹽在其它方面與其相應(yīng)的游離形式等效。
可以通過(guò)常規(guī)化學(xué)方法，由含有堿性或酸性部分的本發(fā)明化合物合成本發(fā)明化合物的藥物上可接受的鹽。一般來(lái)說(shuō)，通過(guò)離子交換色譜法或通過(guò)使游離堿與化學(xué)計(jì)算量或過(guò)量的所希望的成鹽無(wú)機(jī)酸或有機(jī)酸在合適的溶劑或不同的溶劑組合中反應(yīng)來(lái)合成堿性化合物的鹽。類(lèi)似地，通過(guò)與合適的無(wú)機(jī)堿或有機(jī)堿反應(yīng)形成酸性化合物的鹽。
因此，本發(fā)明化合物的藥物上可接受的鹽包括通過(guò)使本發(fā)明堿性化合物與無(wú)機(jī)酸或有機(jī)酸反應(yīng)形成的本發(fā)明化合物的常用無(wú)毒性鹽。例如，常用的無(wú)毒性鹽包括那些來(lái)源于無(wú)機(jī)酸的鹽，所述的無(wú)機(jī)酸諸如鹽酸、氫溴酸、硫酸、氨基磺酸、磷酸、硝酸等，以及由有機(jī)酸制備的鹽，所述的有機(jī)酸諸如乙酸、丙酸、琥珀酸、乙醇酸、硬脂酸、乳酸、蘋(píng)果酸、酒石酸、檸檬酸、抗壞血酸、撲酸、馬來(lái)酸、羥基馬來(lái)酸、苯乙酸、谷氨酸、苯甲酸、水楊酸、對(duì)氨基苯磺酸、2-乙酰氧基-苯甲酸、富馬酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙二磺酸、草酸、羥乙磺酸、三氟乙酸等。
當(dāng)本發(fā)明的化合物為酸性時(shí)，合適的“藥物上可接受的鹽”指的是由藥物上可接受的無(wú)毒性的堿，包括無(wú)機(jī)堿和有機(jī)堿制備的鹽。本發(fā)明特別包括本發(fā)明化合物磷酸酯部分的一-和二取代鹽。來(lái)源于無(wú)機(jī)堿的鹽包括鋁、銨、鈣、銅、鐵、亞鐵、鋰、鎂、錳鹽、亞錳、鉀、鈉、鋅等。特別優(yōu)選鋁、鈣、鎂、鉀和鈉鹽。來(lái)源于藥物上可接受的有機(jī)無(wú)毒性堿的鹽包括如下化合物的鹽伯、仲和叔胺類(lèi)，取代的胺類(lèi)，包括天然存在的取代的胺類(lèi)，環(huán)狀胺類(lèi)和堿性離子交換樹(shù)脂，諸如精氨酸、甜菜堿、咖啡因、膽堿、N，N1-二芐基乙二胺、二乙胺、2-二乙氨基乙醇、2-二甲氨基乙醇、乙醇胺、乙二胺、N-乙基嗎啉、N-乙基哌啶、葡糖胺(glucamine)、葡糖胺(glucosamine)、組氨酸、海巴明(hydrabamine)、異丙胺、賴(lài)氨酸、甲基葡糖胺、嗎啉、哌嗪、哌啶、聚胺樹(shù)脂、普魯卡因、嘌呤類(lèi)、可可堿、三乙胺、三甲胺、三丙胺、氨丁三醇等。當(dāng)本發(fā)明的化合物為酸性時(shí)，術(shù)語(yǔ)“游離形式”指的是非-鹽形式的化合物，使得酸性官能基仍然質(zhì)子化。
Berg等在“藥用鹽”-J.Pharm.Sci.，1977661-19中更完整地描述了上述藥物上可接受的鹽和其它典型藥物上可接受的鹽的制備。
還注意到本發(fā)明的化合物可能為內(nèi)鹽或兩性離子，因?yàn)樵谏項(xiàng)l件下，化合物中的去質(zhì)子化酸性部分，諸如羧基可以為陰離子，并且這種電荷隨后可以在內(nèi)部與質(zhì)子化或烷基化堿性部分，諸如四價(jià)氮原子的陽(yáng)離子電荷平衡掉。帶有內(nèi)部平衡電荷且由此不與分子間抗衡離子結(jié)合的分離的化合物也可以被視為化合物的“游離形式”。
可以通過(guò)使用如下文方案中所示的反應(yīng)與其它文獻(xiàn)中公知或?qū)嶒?yàn)操作步驟中例舉的標(biāo)準(zhǔn)操作制備本發(fā)明的化合物。因此，下文的解釋性方案并不限于所列的化合物或任何用于解釋目的的特定的取代基。如方案中所示的取代基編號(hào)不一定與權(quán)利要求中使用的編號(hào)相關(guān)，并且通常為了清楚起見(jiàn)，在上文通式I的定義允許多個(gè)取代基時(shí)，顯示單一取代基與化合物連接。
方案正如方案A中所示，適當(dāng)取代的苯基異羥肟酸酯A-1與適當(dāng)取代的乙炔A-2反應(yīng)生成苯甲酰基炔中間體A-3。適當(dāng)取代的苯基的銅介導(dǎo)的偶聯(lián)生成中間體A-4。然后在有?；却嬖谙轮虚g體A-4可以與肼反應(yīng)而生成N-酰基二氫吡唑A-5。使末端羥基脫保護(hù)而得到本發(fā)明的化合物A-6。
方案B表示使用可選羥基保護(hù)基制備本發(fā)明化合物B-5的類(lèi)似系列反應(yīng)。該方案還解釋了磷酸酯前體藥物B-6的形成。
方案C-G解釋了本發(fā)明化合物的其它前體藥物部分的引入。
方案A
方案B
方案C
方案E 方案F
方案G 應(yīng)用本發(fā)明的化合物可應(yīng)用于各種用途。正如本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解的，可以按照各種方式改變有絲分裂；即可以通過(guò)增加或減少有絲分裂途徑中的成分的活性來(lái)影響有絲分裂。換句話(huà)說(shuō)，可以通過(guò)打破平衡，即通過(guò)抑制或活化某些成分影響(例如破壞)有絲分裂。類(lèi)似的手段可以用于改變減數(shù)分裂。
在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明的化合物用于調(diào)節(jié)有絲分裂紡錘體形成，由此導(dǎo)致有絲分裂中的細(xì)胞周期停滯延長(zhǎng)。本文中所謂的″調(diào)節(jié)″指的是改變有絲分裂紡錘體形成，包括增加和減少紡錘體形成。本文中所謂的″有絲分裂紡錘體形成″指的是有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白使微管組織為雙極結(jié)構(gòu)。本文中所謂的″有絲分裂紡錘體機(jī)能障礙″指的是有絲分裂停滯和單極紡錘體形成。
本發(fā)明的化合物用于結(jié)合和/或調(diào)節(jié)有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白活性。在一個(gè)實(shí)施方案中，有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白為有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白bimC亞家族中的成員(如美國(guó)專(zhuān)利US 6,284,480第5欄中所述)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白為人KSP，不過(guò)，還可以用本發(fā)明的化合物調(diào)節(jié)來(lái)自其它生物體的有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白活性。在該上下文中，調(diào)節(jié)指的是增加或減少紡錘體極分離，從而導(dǎo)致有絲分裂紡錘體極的畸形，即展開(kāi)，或者導(dǎo)致有絲分裂紡錘體形態(tài)紊亂。在用于這些目的的KSP定義內(nèi)還包括KSP的變體(avariants)和/或片段。此外，可以用本發(fā)明的化合物抑制其它有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白。
本發(fā)明的化合物用于治療細(xì)胞增殖性疾病。可以用本文提供的方法和組合物治療的疾病狀態(tài)包括，但不限于癌癥(如下所述)；自身免疫性疾病；關(guān)節(jié)炎；移植物排斥；炎癥性腸病；醫(yī)療操作，包括，但不限于手術(shù)、血管成形術(shù)等后誘導(dǎo)的增殖?？梢岳斫庠谀承┣闆r中，細(xì)胞可以不處于增殖過(guò)度或增殖低下?tīng)顟B(tài)(異常狀態(tài))，但仍然需要治療。例如，在創(chuàng)傷愈合過(guò)程中，細(xì)胞可以″正?！逶鲋?，但增殖促進(jìn)可以為理想的。類(lèi)似地，如上所述，在農(nóng)業(yè)領(lǐng)域中，細(xì)胞可以處于“正?！鍫顟B(tài)，但需要增殖調(diào)節(jié)以便通過(guò)直接促進(jìn)作物生長(zhǎng)或通過(guò)抑制對(duì)作物產(chǎn)生不良影響的植物或生物體的生長(zhǎng)來(lái)提高作物產(chǎn)量。因此，在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明包括在患有或可能最終患有這些病癥或狀態(tài)中的任意一種的細(xì)胞或個(gè)體中的應(yīng)用。
特別認(rèn)為本文提供的化合物、組合物和方法可用于治療癌癥，包括實(shí)體瘤，例如皮膚、乳腺、腦、宮頸癌、睪丸癌等。特別地，可以用本發(fā)明化合物、組合物和方法治療的癌癥包括，但不限于心臟肉瘤(血管肉瘤、纖維肉瘤、橫紋肌肉瘤、脂肉瘤)、粘液瘤、橫紋肌瘤、纖維瘤、脂肪瘤和畸胎瘤；肺支氣管癌(鱗狀上皮細(xì)胞、未分化的小細(xì)胞、未分化的大細(xì)胞、腺癌)、肺泡(細(xì)支氣管)癌、支氣管腺瘤、肉瘤、淋巴瘤、軟骨錯(cuò)構(gòu)瘤、間皮瘤；胃腸食道(鱗狀上皮細(xì)胞癌、腺癌、平滑肌肉瘤、淋巴瘤)、胃(癌、淋巴瘤、平滑肌肉瘤)、胰腺(導(dǎo)管腺癌、胰島素瘤、胰高血糖素瘤、胃泌素瘤、類(lèi)癌瘤、血管活性腸肽腫瘤)、小腸(腺癌、淋巴瘤、類(lèi)癌瘤、卡波西肉瘤、平滑肌瘤、血管瘤、脂肪瘤、神經(jīng)纖維瘤、纖維瘤)、大腸(腺癌、管狀腺瘤、絨毛狀腺瘤、錯(cuò)構(gòu)瘤、平滑肌瘤)；生殖泌尿道 腎(腺癌、腎母細(xì)胞瘤[腎胚細(xì)胞瘤]、淋巴瘤、白血病)、膀胱和尿道(鱗狀上皮細(xì)胞癌、移行細(xì)胞癌、腺癌)、前列腺(腺癌、肉瘤)、睪丸(精原細(xì)胞瘤、畸胎瘤、胚胎癌、畸胎癌、絨毛膜癌、肉瘤、間質(zhì)細(xì)胞癌、纖維瘤、纖維腺瘤、腺瘤樣瘤、脂肪瘤)；肝肝癌(肝細(xì)胞癌)、膽管癌、肝毒細(xì)胞瘤、血管肉瘤、肝細(xì)胞腺瘤、血管瘤；骨骨源性肉瘤(骨肉瘤)、纖維肉瘤、惡性纖維組織細(xì)胞瘤、軟骨肉瘤、尤因肉瘤、惡性淋巴瘤(網(wǎng)狀細(xì)胞肉瘤)、多發(fā)性骨髓瘤、惡性巨細(xì)胞瘤、脊索瘤、骨軟骨瘤(osteochronfroma)(骨軟骨外生骨疣)、良性軟骨瘤、成軟骨細(xì)胞瘤、軟骨粘液纖維瘤、骨樣骨瘤和巨細(xì)胞瘤；神經(jīng)系統(tǒng)顱骨(骨瘤、血管瘤、肉芽腫、黃色瘤、畸形性骨炎)、腦膜(腦膜瘤、腦膜肉瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤病)、腦(星形細(xì)胞瘤、成神經(jīng)管細(xì)胞瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、室管膜瘤、生殖細(xì)胞瘤[松果體瘤]、多形成膠質(zhì)細(xì)胞瘤(gioblastomas)、少突神經(jīng)膠質(zhì)瘤、神經(jīng)鞘瘤、視網(wǎng)膜成神經(jīng)細(xì)胞瘤、先天性腫瘤)、脊髓神經(jīng)纖維瘤、腦膜瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、肉瘤)；婦科子宮(子宮內(nèi)膜癌)、宮頸(宮頸癌、腫瘤前期宮頸非典型增生)、卵巢(卵巢癌[漿液性囊腺癌、粘液性囊腺癌、未分類(lèi)的癌]、粒層-鞘細(xì)胞瘤、塞爾托利-萊迪希細(xì)胞瘤、無(wú)性細(xì)胞瘤、惡性畸胎瘤)、女陰(鱗狀上皮細(xì)胞癌、上皮內(nèi)癌、腺癌、纖維肉瘤、黑素瘤)、陰道(透明細(xì)胞癌、鱗狀上皮細(xì)胞癌、葡萄狀肉瘤(胚胎性橫紋肌肉瘤)、輸卵管(癌)；血液血液(髓細(xì)胞性白血病[急性和慢性]、急性成淋巴細(xì)胞性白血病、慢性淋巴細(xì)胞性白血病、骨髓增生性疾病、多發(fā)性骨髓瘤、骨髓增生異常綜合征)、何杰金病、非何杰金淋巴瘤[惡性淋巴瘤]；皮膚惡性黑素瘤、基底細(xì)胞癌、鱗狀上皮細(xì)胞癌、卡波西肉瘤、發(fā)育不良痣、脂肪瘤、血管瘤、皮膚纖維瘤、瘢痕瘤、銀屑?。缓湍I上腺成神經(jīng)細(xì)胞瘤。因此，本文提供的術(shù)語(yǔ)″癌性細(xì)胞″包括患有上文所列的疾病中任意一種的細(xì)胞。
正如美國(guó)專(zhuān)利US6,284,480中所述，本發(fā)明的化合物還可以通過(guò)調(diào)節(jié)bimC驅(qū)動(dòng)蛋白亞群中的真菌成員的活性而用作抗真菌藥。
可以將本發(fā)明的化合物單獨(dú)或按照標(biāo)準(zhǔn)藥物實(shí)踐與藥物上可接受的載體、賦形劑或稀釋劑組合以藥物組合物的形式對(duì)哺乳動(dòng)物，優(yōu)選對(duì)人給藥?？梢酝ㄟ^(guò)口服或非腸道，包括靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、腹膜內(nèi)、皮下、直腸和局部給藥途徑給予所述的化合物。
含有活性組分的藥物組合物可以為適合于口服應(yīng)用的形式，例如，作為片劑、藥片、錠劑、水或油混懸液、可分散粉末或顆粒、乳劑、硬或軟膠囊或糖漿劑或酏劑?？梢园凑罩苽渌幬锝M合物領(lǐng)域中公知的任意方法制備用于口服應(yīng)用的組合物，并且這類(lèi)組合物可以含有一種或多種選自增甜劑、矯味劑、著色劑和防腐劑組成的組的試劑，以便制成藥學(xué)上優(yōu)雅和適口的藥物制劑。片劑含有活性組分與適合于制備片劑的無(wú)毒性藥物上可接受的賦形劑的混合物。這些賦形劑可以為例如，惰性稀釋劑，例如碳酸鈣、碳酸鈉、乳糖、磷酸鈣或磷酸鈉；成粒劑和崩解劑，例如，微晶纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、玉米淀粉或藻酸；粘合劑，例如淀粉、明膠、聚乙烯吡咯烷酮或阿拉伯膠；和潤(rùn)滑劑，例如，硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石粉。可以不給片劑包衣或可以通過(guò)公知技術(shù)給它們包衣，以便掩蔽藥物不適的味道或延緩在胃腸道中的崩解和吸收，由此在較長(zhǎng)時(shí)間期限內(nèi)提供持續(xù)作用。例如，可以使用水溶性掩蔽味道的物質(zhì)，諸如羥丙基甲基纖維素或羥丙基纖維素，或延時(shí)物質(zhì)，諸如乙基纖維素、乙酸丁酸纖維素。
還可以將口服使用的制劑制成硬明膠膠囊，其中將活性組分與惰性固體稀釋劑混合，例如，碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土，或制成軟明膠膠囊，其中將活性組分與水溶性載體混合，諸如聚乙二醇或油介質(zhì)，例如花生油、液體石蠟或橄欖油。
含水混懸液含有活性物質(zhì)與適合于制備含水混懸液的賦形劑的混合物。這類(lèi)賦形劑為懸浮劑，例如羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基-纖維素、藻酸鈉、聚乙烯吡咯烷酮、西黃蓍膠和阿拉伯樹(shù)膠；分散劑或濕潤(rùn)劑可以為天然存在的磷脂，例如卵磷脂；或烯化氧與脂肪酸的縮合產(chǎn)物，例如聚氧乙烯硬脂酸酯；或環(huán)氧乙烷與長(zhǎng)鏈脂族醇類(lèi)的縮合產(chǎn)物，例如十七乙烯氧基鯨蠟醇；或環(huán)氧乙烷與來(lái)源于脂肪酸和己糖醇的偏酯類(lèi)的縮合產(chǎn)物，例如聚氧乙烯山梨糖醇單油酸酯，或環(huán)氧乙烷與來(lái)源于脂肪酸和己糖醇酐的偏酯的縮合產(chǎn)物，例如聚乙烯失水山梨糖醇單油酸酯。含水混懸液還可以含有一種或多種防腐劑，例如對(duì)羥基苯甲酸乙酯或?qū)αu基苯甲酸正丙酯；一種或多種著色劑；或一種或多種矯味劑；和一種或多種增甜劑，諸如蔗糖、糖精或阿司帕坦。
可以通過(guò)將活性組分懸浮于植物油中，例如花生油、橄欖油、芝麻油或椰子油或礦物油，諸如液體石蠟來(lái)配制油混懸液。油混懸液可以含有增稠劑，例如蜂蠟、硬石蠟或鯨蠟醇?？梢约尤胫T如如上所述的增甜劑和矯味劑以便制成適口的口服制劑?？梢酝ㄟ^(guò)添加抗氧化劑，諸如丁羥茴醚或α生育酚給這些組合物防腐。
適合于通過(guò)添加水制備含水(aqueous)混懸液的可分散粉末和顆粒提供了活性組分與分散劑或濕潤(rùn)劑、懸浮劑和一種或多種防腐劑的混合物。合適的分散劑或濕潤(rùn)劑和懸浮劑以上述那些為典型。還可以存在額外的賦形劑，例如增甜劑、矯味劑和著色劑?？梢酝ㄟ^(guò)添加抗氧化劑，諸如抗壞血酸給這些組合物防腐。
本發(fā)明的藥物組合物還可以為水包油型乳劑形式。油相可以為植物油，例如橄欖油或花生油或礦物油，例如液體石蠟或這些物質(zhì)的混合物。合適的乳化劑可以為天然存在的磷脂類(lèi)，例如大豆卵磷脂和來(lái)源于脂肪酸和己糖醇酐類(lèi)的酯類(lèi)或偏酯類(lèi)，例如失水山梨糖醇單油酸酯和所述的偏酯類(lèi)與環(huán)氧乙烷的縮合產(chǎn)物，例如聚氧乙烯失水山梨糖醇單油酸酯。乳劑還可以含有增甜劑、矯味劑、防腐劑和抗氧化劑。
可以使用增甜劑，例如甘油、丙二醇、山梨醇或蔗糖配制糖漿劑和酏劑。這類(lèi)制劑還可以含有濕潤(rùn)劑、防腐劑、矯味劑和著色劑以及抗氧化劑。
藥物組合物可以為無(wú)菌可注射水溶液形式。在可以使用的可接受的媒介物和溶劑中有水、林格液、聚乙二醇/水溶液和等滲氯化鈉溶液。
無(wú)菌可注射制劑還可以為無(wú)菌可注射的水包油型微乳，其中活性組分溶于油相。例如，首先將活性組分溶于大豆油和卵磷脂的混合物。然后將該油溶液導(dǎo)入水和甘油混合物并且加工成微乳。
可以通過(guò)局部快速濃注將可注射溶液或微乳導(dǎo)入患者血流?；蛘撸赡苡欣氖且跃S持本發(fā)明化合物的恒定循環(huán)濃度的方式給予所述溶液或微乳。為了維持這類(lèi)恒定的濃度，可以使用連續(xù)靜脈內(nèi)遞送裝置。這類(lèi)裝置的實(shí)例為Deltec CADD-PLUSTM型5400靜脈注射泵。
藥物組合物可以為用于肌內(nèi)和皮下給藥的無(wú)菌可注射水或油混懸液形式?？梢园凑展夹g(shù)，使用上述那些合適的分散劑或濕潤(rùn)劑以及懸浮劑配制混懸液。無(wú)菌可注射制劑還可以為在無(wú)毒性的腸道外可接受稀釋劑或溶劑中的無(wú)菌可注射溶液或混懸液，例如作為在1，3-丁二醇中的溶液。此外，無(wú)菌的不揮發(fā)油通常用作溶劑或懸浮介質(zhì)。為了這一目的，可以使用任意溫和的不揮發(fā)油，包括合成的單酸甘油酯類(lèi)或二脂酰甘油酯類(lèi)。此外，脂肪酸，諸如油酸可應(yīng)用于制備注射劑。
還可以以用于直腸給藥的栓劑形式給予通式I的化合物?？梢酝ㄟ^(guò)將藥物與在常溫下為固體，而在直腸溫度下為液體且由此在直腸中熔化以釋放藥物的無(wú)-刺激性賦形劑混合制備這些組合物。這類(lèi)物質(zhì)包括可可脂、甘油膠、氫化植物油、不同分子量的聚乙二醇與聚乙二醇的脂肪酸酯類(lèi)的混合物。
就局部應(yīng)用而言，使用含有通式I化合物的霜?jiǎng)?、軟膏劑、凝膠劑、溶液或混懸液等(為了這一應(yīng)用的目的，局部應(yīng)用應(yīng)包括口腔洗劑和漱口劑)。
通過(guò)局部應(yīng)用合適的鼻內(nèi)載體和遞送裝置以鼻內(nèi)形式或通過(guò)使用那些本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的透皮貼劑劑型的透皮途徑給予本發(fā)明的化合物。當(dāng)然，為了以透皮遞送系統(tǒng)的形式給藥，在整個(gè)劑量方案中，劑量的給予為連續(xù)的，而非間斷的。還可以將本發(fā)明的化合物作為使用基質(zhì)，諸如可可脂、甘油膠、氫化植物油、不同分子量的聚乙二醇與聚乙二醇的脂肪酸酯類(lèi)的混合物的栓劑遞送。
當(dāng)將本發(fā)明的化合物給藥入人受試者時(shí)，每日劑量一般由開(kāi)據(jù)處方的臨床醫(yī)師決定，其中該劑量一般根據(jù)個(gè)體患者的年齡、體重、性別和反應(yīng)以及患者癥狀的嚴(yán)重程度的不同而改變。
在一種典型的應(yīng)用中，對(duì)進(jìn)行癌癥治療的哺乳動(dòng)物給予適量的化合物。給藥量約為0.1mg/kg體重-約60mg/kg體重/天，優(yōu)選0.5mg/kg體重-約40mg/kg體重/天。
還將本發(fā)明的化合物與公知的治療劑和抗癌藥聯(lián)用。例如，將本發(fā)明的化合物與公知的抗癌藥聯(lián)用。目前披露的化合物與其它抗癌藥或化療劑的聯(lián)合用藥屬于本發(fā)明的范圍。這類(lèi)活性劑的實(shí)例可以在Cancer Principles and Practice of Oncology by V.T.Devita和S.Hellman(editors)，6thedition(February 15，2001)，Lippincott Williams& Wilkins Publishers中找到。本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠基于涉及的藥物和癌癥的特定特征確定哪些活性劑的組合將是有用的。這類(lèi)抗癌藥包括，但不限于如下藥物雌激素受體調(diào)節(jié)劑、雄激素受體調(diào)節(jié)劑、類(lèi)視色素受體調(diào)節(jié)劑、細(xì)胞毒性/細(xì)胞抑制劑、抗增殖藥、異戊二烯基-蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑、HMG-CoA還原酶抑制劑和其它血管生成抑制劑、細(xì)胞增殖和存活信號(hào)傳導(dǎo)抑制劑、編程性細(xì)胞死亡誘導(dǎo)劑和干擾細(xì)胞周期關(guān)卡的活性劑。當(dāng)與放療共同施用時(shí)，本發(fā)明化合物是特別有用的。
在一個(gè)實(shí)施方案中，還將本發(fā)明的化合物與包括如下藥物的已知的抗癌藥聯(lián)用雌激素受體調(diào)節(jié)劑、雄激素受體調(diào)節(jié)劑、類(lèi)視色素受體調(diào)節(jié)劑、細(xì)胞毒性劑、抗增殖藥、異戊二烯基-蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑、HMG-CoA還原酶抑制劑、HIV蛋白酶抑制劑、逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑和其它血管生成抑制劑。
“雌激素受體調(diào)節(jié)劑”指的是干擾或抑制雌激素與受體結(jié)合的化合物，而與機(jī)理無(wú)關(guān)。雌激素受體調(diào)節(jié)劑的實(shí)例包括，但不限于他莫昔芬、雷洛昔芬、艾多昔芬、LY353381、LY117081、托瑞米芬、氟維司群、4-[7-(2，2-二甲基-1-氧代丙氧基-4-甲基-2-[4-[2-(1-哌啶基)乙氧基]苯基]-2H-1-苯并吡喃-3-基)-苯基-2，2-二甲基丙酸鹽、4，4’-二羥基二苯酮-2，4-二硝基苯基-腙和SH646。
“雄激素受體調(diào)節(jié)劑”指的是干擾或抑制雄激素與受體結(jié)合的化合物而與機(jī)理無(wú)關(guān)。雄激素受體調(diào)節(jié)劑的實(shí)例包括非那雄胺和其它5α-還原酶抑制劑、尼魯米特、氟他胺、比卡魯胺、利阿唑和醋酸阿比特龍。
“類(lèi)視色素受體調(diào)節(jié)劑”指的是干擾或抑制類(lèi)視色素與受體結(jié)合的化合物而與機(jī)理無(wú)關(guān)。這類(lèi)類(lèi)視色素受體調(diào)節(jié)劑的實(shí)例包括貝沙羅汀、維A酸、13-順式-維甲酸、9-順式維甲酸、α-二氟甲基鳥(niǎo)氨酸、ILX23-7553、反式-N-(4’-羥基苯基)維胺(retinamide)和N-4-羧基苯基維胺(retinamide)。
“細(xì)胞毒性/細(xì)胞抑制劑”指的是主要通過(guò)直接干擾細(xì)胞的功能作用而導(dǎo)致細(xì)胞死亡或抑制細(xì)胞增殖或抑制或干擾細(xì)胞有絲分裂的化合物，包括烷化劑、腫瘤壞死因子、嵌入劑、低氧可活化化合物、微管抑制劑/微管-穩(wěn)定劑、有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白抑制劑、涉及有絲分裂進(jìn)程的激酶的抑制劑、抗代謝物；生物反應(yīng)調(diào)節(jié)劑；激素/抗-激素治療劑、造血生長(zhǎng)因子、單克隆抗體靶向的治療劑、拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑、蛋白酶體抑制劑和泛蛋白連接酶抑制劑。
細(xì)胞毒性劑的實(shí)例包括，但不限于sertenef、惡液質(zhì)素、異環(huán)磷酰胺、他索納明、氯尼達(dá)明、卡鉑、六甲蜜胺、潑尼莫司汀、二溴衛(wèi)矛醇、雷莫司汀、福莫司汀、奈達(dá)鉑、奧沙利鉑、替莫唑胺、heptaplatin、雌莫司汀、甲苯磺酸英丙舒凡、曲磷胺、尼莫司汀、二溴螺氯銨、嘌嘧替派、洛鉑、沙鉑、甲基絲裂霉素、順鉑、伊羅夫文、dexifosfamide、順式-胺二氯(2-甲基-吡啶基)鉑、芐基鳥(niǎo)嘌呤、葡磷酰胺、GPX100(反式，反式，反式)-雙-mu-(己-1，6-二胺)-mu-[二胺-鉑(II)]雙[二胺(氯)鉑(II)]四氯化物、二氮丙啶基精胺、三氧化二砷、1-(11-十二烷氨基-10-羥基十一基)-3，7-二甲基黃嘌呤、佐柔比星、伊達(dá)比星、柔紅霉素、比生群、米托蒽醌、吡柔比星、吡萘非特、戊柔比星、氨柔比星、抗瘤酮、3’-脫氨基-3’-嗎啉代-13-脫氧-10-羥基去甲柔紅霉素、annamycin、加柔比星、依利奈法德、MEN10755和4-脫甲氧基-3-脫氨基-3-氮丙啶基-4-甲基磺酰基-柔紅霉素(參見(jiàn)WO 00/50032)。
低氧可活化化合物的實(shí)例為替拉扎明。
蛋白酶體抑制劑的實(shí)例包括，但不限于乳胞素和bortezomib。
微管抑制劑/微管-穩(wěn)定劑的實(shí)例包括紫杉醇、硫酸長(zhǎng)春地辛、3’，4’-雙脫氫-4’-脫氧-8’-norvincaleukoblastine、多西他賽、根霉素、多拉司他汀、羥乙基磺酸米伏布林、auristatin、西馬多丁、RPR109881、BMS184476、長(zhǎng)春氟寧、cryptophycin、2，3，4，5，6-五氟-N-(3-氟-4-甲氧基苯基)苯磺酰胺、脫水長(zhǎng)春堿(anhydrovinblastine)、N，N-二甲基-L-纈氨?；?L-纈氨?；?N-甲基-L-纈氨?；?L-脯氨?；?L-脯氨酸-叔-丁酰胺、TDX258、埃坡霉素(例如，參見(jiàn)美國(guó)專(zhuān)利US 6,284,781和6,288,237)和BMS188797。
拓?fù)洚悩?gòu)酶抑制劑的某些實(shí)例為托泊替康、hycaptamine、伊立替康、盧比替康、6-乙氧基丙?；?3’，4’-O-外-亞芐基-教酒菌素、9-甲氧基-N，N-二甲基-5-硝基吡唑并[3，4，5-kl]吖啶-2-(6H)丙胺、1-氨基-9-乙基-5-氟-2，3-二氫-9-羥基-4-甲基-1H，12H-苯并[de]吡喃并[3’，4’b，7]-吲嗪并[1，2b]喹啉-10，13(9H，15H)二酮、勒托替康、7-[2-(N-異丙氨基)乙基]-(20S)喜樹(shù)堿、BNP1350、BNPI1100、BN80915、BN80942、磷酸依托泊苷、替尼泊苷、索布佐生、2’-二甲氨基-2’-脫氧-依托泊苷、GL331、N-[2-(二甲氨基)乙基]-9-羥基-5，6-二甲基-6H-吡啶并[4，3-b]咔唑-1-甲酰胺、asulacrine、(5a，5aB，8aa，9b)-9-[2-[N-[2-(二甲氨基)乙基]-N-甲氨基]乙基]-5-[4-羥基-3，5-二甲氧基苯基]-5，5a，6，8，8a，9-六氫呋喃并(3’，4’6，7)萘并(2，3-d)-1，3-間二氧雜環(huán)戊烯-6-酮、2，3-(亞甲二氧基)-5-甲基-7-羥基-8-甲氧基苯并[c]-菲啶、6，9-雙[(2-氨基乙基)氨基]苯并[g]isoguinoline-5，10-二酮、5-(3-氨基丙基氨基)-7，10-二羥基-2-(2-羥乙基氨基甲基)-6H-吡唑并[4，5，1-de]吖啶-6-酮、N-[1-[2(二乙氨基)乙氨基]-7-甲氧基-9-氧代-9H-噻噸-4-基甲基]甲酰胺、N-(2-(二甲氨基)乙基)吖啶-4-甲酰胺、6-[[2-(二甲氨基)乙基]氨基]-3-羥基-7H-茚并[2，1-c]喹啉-7-酮和地美司鈉。
有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白且特別是人有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白KSP的抑制劑的實(shí)例，描述在PCT公開(kāi)號(hào)WO 01/30768、WO 01/98278、WO03/050,064、WO 03/050,122、WO 03/049,527、WO 03/049,679、WO03/049,678和WO 03/39460和待審PCT申請(qǐng)?zhí)朥S03/06403(2003年3月4日提交)、US03/15861(2003年5月19日提交)、US03/15810(19，2003年5月19日提交)、US03/18482(2003年6月12日提交)和US03/18694(2003年6月12日提交)中。在一個(gè)實(shí)施方案中，有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白的抑制劑包括，但不限于KSP抑制劑、MKLP1抑制劑、CENP-E抑制劑、MCAK抑制劑、Kif14抑制劑、Mphosph1抑制劑和Rab6-KIFL抑制劑。
“涉及有絲分裂進(jìn)程的激酶的抑制劑”包括，但不限于aurora激酶抑制劑、Polo-類(lèi)激酶(PLK)抑制劑(特別是PLK-1抑制劑)、bub-1抑制劑和bub-R1抑制劑。
“抗增殖劑”包括反義RNA和DNA寡核苷酸，諸如G3139、ODN698、RVASKRAS、GEM231和INX3001；和抗代謝物，諸如依諾他濱、卡莫氟、替加氟、噴司他丁、去氧氟尿苷、三甲曲沙、氟達(dá)拉濱、卡培他濱、加洛他濱、cytarabine ocfosfate、fosteabine sodiumhydrate、雷替曲塞、paltitrexid、乙嘧替氟、噻唑呋林、地西他濱、諾拉曲塞、培美曲塞、nelzarabine、2’-脫氧-2’-亞甲基胞苷、2’-氟亞甲基-2’-脫氧胞苷、N-[5-(2，3-二氫-苯并呋喃基)磺?；鵠-N’-(3，4-二氯苯基)脲、N6-[4-脫氧-4-[N2-[2(E)，4(E)-十四烯?；鵠甘氨酰氨基]-L-甘油基-B-L-甘露-庚吡喃糖基]腺嘌呤、aplidine、海鞘素、曲沙他濱、4-[2-氨基-4-氧代-4，6，7，8-四氫-3H-嘧啶并[5，4-b][1，4]噻嗪-6-基-(S)-乙基]-2，5-噻吩?；?L-谷氨酸、氨基蝶呤、5-氟尿嘧啶、阿拉諾新、11-乙?；?8-(氨基甲?；趸谆?-4-甲?；?-甲氧基-14-氧雜-1，11-二氮雜四環(huán)(7.4.1.0.0)-十四-2，4，6-三烯-9-基乙酸酯、苦馬豆堿、洛美曲索、右雷佐生、甲硫氨酸酶、2’-氰基-2’-脫氧-N4-棕櫚?；?1-B-D-阿拉伯呋喃糖基胞嘧啶和3-氨基吡啶基-2-甲醛縮氨基硫脲。
單克隆抗體靶向的治療劑的實(shí)例包括那些帶有與癌細(xì)胞特異性或靶細(xì)胞特異性單克隆抗體結(jié)合的細(xì)胞毒性劑或放射性同位素的治療劑。實(shí)例包括Bexxar。
“HMG-CoA還原酶抑制劑”指的是3-羥基-3-甲基戊二酰-CoA還原酶的抑制劑。可以使用的HMG-CoA還原酶抑制劑的實(shí)例包括，但不限于洛伐他汀(MEVACOR；參見(jiàn)美國(guó)專(zhuān)利US4,231,938、US4,294,926和US4,319,039)、辛伐他汀(ZOCOR；參見(jiàn)美國(guó)專(zhuān)利US4,444,784、US4,820,850和US4,916,239)、普伐他汀(PRAVACHOL；參見(jiàn)美國(guó)專(zhuān)利US 4,346,227、US4,537,859、US4,410,629、US5,030,447和US5,180,589)、氟伐他汀(LESCOL；參見(jiàn)美國(guó)專(zhuān)利US5,354,772、US4,911,165、US4,929,437、US5,189,164、US5,118,853、US5,290,946和US5,356,896)和阿托伐他汀(LIPITOR；參見(jiàn)美國(guó)專(zhuān)利US5,273,995、US4,681,893、US5,489,691和US5,342,952)。可以用于本發(fā)明方法的這些和其它HMG-CoA還原酶抑制劑的結(jié)構(gòu)通式描述在M.Yalpani的″降膽固醇藥″-Chemistry&Industry，pp.85-89的87頁(yè)(1996年2月5日)和美國(guó)專(zhuān)利US4,782,084和US4,885,314中。本文所用的術(shù)語(yǔ)HMG-CoA還原酶抑制劑包括具有HMG-CoA還原酶抑制活性的化合物的所有藥物上可接受的內(nèi)酯和開(kāi)環(huán)的酸形式(即其中內(nèi)酯環(huán)開(kāi)環(huán)而形成游離酸)以及鹽和酯形式，且由此這類(lèi)鹽、酯類(lèi)、開(kāi)環(huán)的酸和內(nèi)酯形式的應(yīng)用包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。
“異戊二烯基-蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑”指的是抑制異戊二烯基-蛋白轉(zhuǎn)移酶中任意一種或任意組合的化合物，所述的異戊二烯基-蛋白轉(zhuǎn)移酶包括法尼基-蛋白轉(zhuǎn)移酶(FPTase)、忙牛兒基忙牛兒基-蛋白轉(zhuǎn)移酶I型(GGPTase-I)和忙牛兒基忙牛兒基-蛋白轉(zhuǎn)移酶-II型(GGPTase-II，也稱(chēng)作Rab GGPTase)。
可以在下列公開(kāi)文獻(xiàn)和專(zhuān)利中找到異戊二烯基-蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑的實(shí)例WO96/30343；WO97/18813；WO97/21701；WO97/23478；WO97/38665；WO98/28980；WO98/29119；WO95/32987；美國(guó)專(zhuān)利US5,420,245；美國(guó)專(zhuān)利US5,523,430；美國(guó)專(zhuān)利US5,532,359；美國(guó)專(zhuān)利US5,510,510；美國(guó)專(zhuān)利US5,589,485；美國(guó)專(zhuān)利US5,602,098；歐洲專(zhuān)利公開(kāi)號(hào)EP0618221；歐洲專(zhuān)利公開(kāi)號(hào)EP0675112；歐洲專(zhuān)利公開(kāi)號(hào)EP0604181；歐洲專(zhuān)利公開(kāi)號(hào)EP0696593；WO94/19357；WO95/08542；WO95/11917；WO95/12612；WO95/12572；WO95/10514；美國(guó)專(zhuān)利US5,661,152；WO95/10515；WO95/10516；WO95/24612；WO95/34535；WO95/25086；WO 96/05529；WO96/06138；WO96/06193；WO96/16443；WO96/21701；WO96/21456；WO96/22278；WO96/24611；WO96/24612；WO96/05168；WO96/05169；WO96/00736；美國(guó)專(zhuān)利US5,571,792；WO96/17861；WO96/33159；WO96/34850；WO96/34851；WO96/30017；WO96/30018；WO96/30362；WO96/30363；WO96/31111；WO96/31477；WO96/31478；WO96/31501；WO97/00252；WO97/03047；WO97/03050；WO97/04785；WO97/02920；WO97/17070；WO97/23478；WO97/26246；WO97/30053；WO97/44350；WO98/02436；和美國(guó)專(zhuān)利US5,532,359。就異戊二烯基-蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑對(duì)血管發(fā)生的作用的實(shí)例而言，參見(jiàn)European J.of Cancer，Vol.35，No.9，pp.1394-1401(1999)。
“血管生成抑制劑”指的是抑制新血管形成的化合物而與機(jī)理無(wú)關(guān)。血管生成抑制劑的實(shí)例包括，但不限于酪氨酸激酶抑制劑，諸如酪氨酸激酶受體Flt-1(VEGFR1)和Flk-1/KDR(VEGFR2)的抑制劑；表皮-衍生的、成纖維細(xì)胞-衍生的或血小板衍生的生長(zhǎng)因子的抑制劑；MMP(基質(zhì)金屬蛋白酶)抑制劑；整聯(lián)蛋白阻滯劑；干擾素-α；白細(xì)胞介素-12；多硫酸戊聚糖；環(huán)加氧酶抑制劑，包括非類(lèi)固醇抗炎藥(NSAIDs)，如阿司匹林和布洛芬，以及選擇性環(huán)加氧酶-2抑制劑，如塞來(lái)考昔和羅非考昔(PNAS，Vol.89，p.7384(1992)；JNCI，Vol.69，p.475(1982)；Arch.Opthalmol.，Vol.108，p.573(1990)；Anat.Rec.，Vol.238，p.68(1994)；FEBS Letters，Vol.372，p.83(1995)；Clin，Orthop.Vol.313，p.76(1995)；J.Mol.Endocrinol.，Vol.16，p.107(1996)；Jpn.J.Pharmacol.，Vol.75，p.105(1997)；Cancer Res.，Vol.57，p.1625(1997)；Cell，Vol.93，p.705(1998)；Intl.J.Mol.Med.，Vol.2，p.715(1998)；J.Biol.Chem.，Vol.274，p.9116(1999))；類(lèi)固醇抗炎藥(諸如皮質(zhì)類(lèi)固醇、鹽皮質(zhì)激素、地塞米松、潑尼松、潑尼松龍、甲潑尼龍、倍他米松)、羧基酰氨基三唑、考布他汀A-4、角鯊胺、6-O-氯乙?；?羰基)-煙曲霉醇、沙利度胺、制管張素、肌鈣蛋白-1、血管緊張素II拮抗劑(參見(jiàn)Fernandez等，J.Lab.Clin.Med.105141-145(1985))；和針對(duì)VEGF的抗體(參見(jiàn)Nature Biotechnology，Vol.17，pp.963-968(October 1999)；Kim等，Nature，362，841-844(1993)；WO00/44777；和WO00/61186)。
調(diào)節(jié)或抑制血管發(fā)生并且還可以用于與本發(fā)明化合物聯(lián)用的其它治療劑包括調(diào)節(jié)或抑制凝血和纖維蛋白溶解系統(tǒng)的活性劑(參見(jiàn)Clin.Chem.La.Med.38679-692(2000)中的綜述)。調(diào)節(jié)或抑制凝血和纖維蛋白溶解途徑的這類(lèi)活性劑的實(shí)例包括，但不限于肝素(參見(jiàn)Thromb.Haemost.8010-23(1998))、低分子量肝素和羧肽酶U抑制劑(也稱(chēng)作活性凝血酶可活化的纖維蛋白溶解抑制劑[TAFIa])的抑制劑(參見(jiàn)Thrombosis Res.101329-354(2001))。PCT公開(kāi)號(hào)WO03/013,526和美國(guó)專(zhuān)利順序號(hào)US60/349,925(2002年1月18日提交)中已經(jīng)描述了TAFIa抑制劑。
“干擾細(xì)胞周期關(guān)卡的活性劑”指的是抑制轉(zhuǎn)導(dǎo)細(xì)胞周期關(guān)卡信號(hào)的蛋白激酶，由此使癌細(xì)胞對(duì)DNA損害劑敏感的化合物。這類(lèi)活性劑包括ATR、ATM，、Chk1和Chk2激酶的抑制劑以及cdk和cdc激酶抑制劑并且特別以7-羥基星形孢菌素、flavopiridol、CYC202(Cyclacel)和BMS-387032為典型。
“細(xì)胞增殖和存活信號(hào)傳導(dǎo)途徑的抑制劑”指的是抑制細(xì)胞表面受體和那些表面受體下游的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)級(jí)聯(lián)的藥物活性劑。這類(lèi)活性劑包括EGFR的抑制劑(例如gefitinib和erlotinib)、ERB-2的抑制劑(例如曲妥單抗)、IGFR的抑制劑、細(xì)胞因子受體的抑制劑、MET的抑制劑、PI3K的抑制劑(例如LY294002)、絲氨酸-蘇氨酸激酶的抑制劑(包括，但不限于諸如WO02/083064、WO02/083139、WO02/083140和WO02/083138中所述的Akt的抑制劑)、Raf激酶的抑制劑(例如BAY-43-9006)、MEK的抑制劑(例如CI-1040和PD-098059)和mTOR的抑制劑(例如Wyeth CCI-779)。這類(lèi)活性劑包括所有小分子抑制劑化合物和抗體拮抗劑。
“編程性細(xì)胞死亡誘導(dǎo)劑”包括TNF受體家族成員的激活物(包括TRAIL受體)。
本發(fā)明還包括與為選擇性COX-2抑制劑的NSAID’s的聯(lián)合用藥物。就本說(shuō)明書(shū)的目的而言，將為選擇性COX-2抑制劑的NSAID’s定義為那些具有對(duì)COX-2的抑制超過(guò)對(duì)COX-1的抑制至少100倍的特異性活性劑，正如根據(jù)通過(guò)細(xì)胞或微粒體試驗(yàn)評(píng)估的COX-2的IC50與COX-1的IC50之比所確定的。這類(lèi)化合物包括，但不限于如下文獻(xiàn)中披露的那些化合物美國(guó)專(zhuān)利US5,474,995；美國(guó)專(zhuān)利US5,861,419；美國(guó)專(zhuān)利US6,001,843；美國(guó)專(zhuān)利US6,020,343；美國(guó)專(zhuān)利US5,409,944；美國(guó)專(zhuān)利US5,436,265；美國(guó)專(zhuān)利US5,536,752；美國(guó)專(zhuān)利US5,550,142；美國(guó)專(zhuān)利US5,604,260；美國(guó)專(zhuān)利US5,698,584；美國(guó)專(zhuān)利US5,710,140；WO94/15932；美國(guó)專(zhuān)利US5,344,991；美國(guó)專(zhuān)利US5,134,142；美國(guó)專(zhuān)利US5,380,738；美國(guó)專(zhuān)利US5,393,790；美國(guó)專(zhuān)利US5,466,823；美國(guó)專(zhuān)利US5,633,272；和美國(guó)專(zhuān)利US5,932,598，將所有這些文獻(xiàn)引入本文作為參考。
特別用于本發(fā)明治療方法的COX-2抑制劑為3-苯基-4-(4-(甲基磺?；?苯基)-2-(5H)-呋喃酮；和5-氯-3-(4-甲基磺?；?苯基-2-(2-甲基-5-吡啶基)吡啶；或其藥物上可接受的鹽。
已經(jīng)描述為COX-2抑制劑且由此用于本發(fā)明的化合物包括，但不限于帕瑞考昔、CELEBREX和BEXTRA或其藥物上可接受的鹽。
血管生成抑制劑的其它實(shí)例包括，但不限于內(nèi)皮他丁、ukrain、豹蛙酶、IM862、5-甲氧基-4-[2-甲基-3-(3-甲基-2-丁烯基)環(huán)氧乙基]-1-氧雜螺[2，5]辛-6-基(氯乙?；?氨基甲酸酯、acetyldinanaline、5-氨基-1-[[3，5-二氯-4-(4-氯苯甲?；?苯基]甲基]-1H-1，2，3-三唑-4-甲酰胺、CM101、角鯊胺、考布他汀、RPI4610、NX31838、硫酸化甘露戊糖磷酸酯、7，7-(羰基-雙[亞氨基-N-甲基-4，2-吡咯羰基亞氨基[N-甲基-4，2-吡咯]-羰基亞氨基]-雙-(1，3-萘二磺酸酯)和3-[(2，4-二甲基吡咯-5-基)亞甲基]-2-二氫吲哚酮(SU5416)。
如上所述的“整聯(lián)蛋白阻滯劑”指的是選擇性拮抗、抑制或阻礙生理配體與αvβ3整聯(lián)蛋白結(jié)合的化合物；選擇性拮抗、抑制或阻礙生理配體與αvβ5整聯(lián)蛋白結(jié)合的化合物；選擇性拮抗、抑制或阻礙生理配體與αvβ3整聯(lián)蛋白和αvβ5整聯(lián)蛋白結(jié)合的化合物；和拮抗、抑制或阻礙在毛細(xì)管內(nèi)皮細(xì)胞上表達(dá)的特定整聯(lián)蛋白活性的化合物。該術(shù)語(yǔ)還指αvβ6、αvβ8、α1β1、α2β1、α5β1、α6β1和α6β4整聯(lián)蛋白的拮抗劑。該術(shù)語(yǔ)還指αvβ3、αvβ5、αvβ6、αvβ8、α1β1、α2β1、α5β1、α6β1和α6β4整聯(lián)蛋白的任意組合的拮抗劑。
酪氨酸激酶抑制劑的某些具體實(shí)例包括N-(三氟甲基苯基)-5-甲基異唑-4-甲酰胺、3-[(2，4-二甲基吡咯-5-基)亞甲基]二氫吲哚-2-酮、17-(烯丙基氨基)-17-脫甲氧基格爾德霉素、4-(3-氯-4-氟苯基氨基)-7-甲氧基-6-[3-(4-嗎啉基)丙氧基]喹唑啉、N-(3-乙炔基苯基)-6，7-雙(2-甲氧基乙氧基)-4-喹唑啉胺、BIBX1382、2，3，9，10，11，12-六氫-10-(羥甲基)-10-羥基-9-甲基-9，12-環(huán)氧-1H-二吲哚并[1，2，3-fg3’，2’，1’-kl]吡咯并[3，4-i][1，6]苯并二氮芳辛-1-酮、SH268、染料木黃酮、STI571、CEP2563、4-(3-氯苯基氨基)-5，6-二甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶甲磺酸酯、4-(3-溴-4-羥基苯基)氨基-6，7-二甲氧基喹唑啉、4-(4’-羥基苯基)氨基-6，7-二甲氧基喹唑啉、SU6668、STI571A、N-4-氯苯基-4-(4-吡啶基甲基)-1-酞嗪胺和EMD121974。
與非抗癌化合物的化合物的聯(lián)合用藥也包括在本發(fā)明的方法中。例如，本發(fā)明權(quán)利要求要求保護(hù)的化合物與PPAR-γ(即PPAR-gamma)激動(dòng)劑和PPAR-δ(即PPAR-delta)激動(dòng)劑的聯(lián)合用藥物用于治療某些惡性腫瘤(malingnancies)。PPAR-γ和PPAR-δ為核過(guò)氧化物酶體增生物激活的受體γ和δ。在文獻(xiàn)中已經(jīng)報(bào)導(dǎo)了PPAR-γ在內(nèi)皮細(xì)胞上的表達(dá)及其涉及血管發(fā)生(參見(jiàn)J.Cardiovasc.Pharmacol.1998；31909-913；J.Biol.Chem.1999；2749116-9121； Invest.OphthalmolVis.Sci.2000；412309-2317)。更近來(lái)，已經(jīng)證實(shí)PPAR-γ激動(dòng)劑在體外抑制對(duì)VEGF的生成血管反應(yīng)；曲格列酮和馬來(lái)酸羅西格列酮抑制小鼠的視網(wǎng)膜新生血管形成的發(fā)展(Arch.Ophthamol.2001；119709-717)。PPAR-γ激動(dòng)劑和PPAR-γ/α激動(dòng)劑的實(shí)例包括，但不限于噻唑烷二酮類(lèi)(諸如DRF2725、CS-011、曲格列酮、羅西格列酮和吡格列酮)、非諾貝特、吉非貝齊、氯貝丁酯、GW2570、SB219994、AR-H039242、JTT-501、MCC-555、GW2331、GW409544、NN2344、KRP297、NP0110、DRF4158、NN622、GI262570、PNU182716、DRF552926、2-[(5，7-二丙基-3-三氟甲基-1，2-苯并異唑-6-基)氧基]-2-甲基丙酸(USSN09/782,856中披露)和2(R)-7-(3-(2-氯-4-(4-氟苯氧基)苯氧基)丙氧基)-2-乙基色滿(mǎn)-2-羧酸(USSN60/235,708和60/244,697中披露)。
本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案為目前披露的化合物與基因療法的組合在治療癌癥中的應(yīng)用。就治療癌癥的基團(tuán)策略綜述而言，參見(jiàn)Hall等(Am J Hum Genet 61785-789，1997)和Kufe等(Cancer Medicine，5thEd，pp 876-889，BC Decker，Hamilton 2000)?；虔煼梢杂糜谶f送任意腫瘤抑制基因。這類(lèi)基因的實(shí)例包括，但不限于可以通過(guò)重組病毒-介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)移遞送的p53(參見(jiàn)，例如美國(guó)專(zhuān)利US6,069,134)；uPA/uPAR拮抗劑(″小鼠中uPA/uPAR拮抗劑的腺病毒-介導(dǎo)的遞送抑制血管發(fā)生-依賴(lài)性腫瘤生長(zhǎng)和傳播″-Gene Therapy，August1998；5(8)1105-13)；和干擾素γ(J Immunol 2000；164217-222)。
本發(fā)明的化合物還可以與二膦酸鹽(應(yīng)理解包括二膦酸鹽、雙膦酸鹽、二膦酸和雙膦酸)聯(lián)合用于治療或預(yù)防癌癥，包括骨癌。二膦酸鹽的實(shí)例包括，但不限于依替膦酸鹽(Didronel)、帕米膦酸鹽(Aredia)、阿侖膦酸鹽(Fosamax)、利塞膦酸鹽(Actonel)、zoledronate(Zometa)、伊班膦酸鹽(Boniva)、伊卡膦酸鹽或cimadronate、氯膦酸鹽、EB-1053、minodronate、neridronate、piridronate和替魯膦酸鹽，包括其任意和所有的藥物上可接受的鹽、衍生物、水合物和混合物。
還可以將本發(fā)明的化合物與內(nèi)在多藥物耐受性(MDR)，特別是與高水平轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白表達(dá)相關(guān)的MDR的抑制劑聯(lián)合給藥。這類(lèi)MDR抑制劑包括p-糖蛋白(P-gp)的抑制劑，諸如LY335979、XR9576、OC144-093、R101922、VX853和PSC833(伐司樸達(dá))。
可以將本發(fā)明的化合物與止吐藥聯(lián)用以便治療惡心或嘔吐，包括急性、延遲、晚期和可能因單獨(dú)或與放療聯(lián)用本發(fā)明的化合物產(chǎn)生的預(yù)想中的嘔吐。為了預(yù)防或治療嘔吐，可以將本發(fā)明的化合物與其它止吐藥聯(lián)用，尤其是神經(jīng)激肽-1受體拮抗劑；5HT3受體拮抗劑，諸如昂丹司瓊、格拉司瓊、托烷司瓊和扎托司瓊；GABAB受體激動(dòng)劑，諸如巴氯芬；皮質(zhì)類(lèi)固醇，諸如地卡特隆(地塞米松)、Kenalog、Aristocort、Nasalide、Preferid、Benecorten或其它藥物，諸如披露在美國(guó)專(zhuān)利US2,789,118、US2,990,401、US3,048,581、US3,126,375、US3,929,768、US3,996,359、US3,928,326和US3,749,712中；抗多巴胺能藥，諸如吩噻嗪類(lèi)(例如丙氯拉嗪、氟奮乃靜、硫利達(dá)嗪和美索達(dá)嗪)、甲氧氯普胺或屈大麻酚。在一個(gè)實(shí)施方案中，將選自神經(jīng)激肽-1受體拮抗劑、5HT3受體拮抗劑和皮質(zhì)類(lèi)固醇的止吐藥作為佐劑給予以便治療或預(yù)防可能在本發(fā)明化合物給藥時(shí)產(chǎn)生的嘔吐。
與本發(fā)明化合物聯(lián)用的神經(jīng)激肽-1受體拮抗劑完整地描述在如下文獻(xiàn)中例如，在美國(guó)專(zhuān)利US5,162,339、US5,232,929、US5,242,930、US5,373,003、US5,387,595、US5,459,270、US5,494,926、US5,496,833、US5,637,699、US5,719,147中；歐洲專(zhuān)利公開(kāi)號(hào)EP0360390、EP0394989、EP0428434、EP0429366、EP0430771、EP0436334、EP0443132、EP0482539、EP0498069、EP0499313、EP0512901、EP0512902、EP0514273、EP0514274、EP0514275、EP0514276、EP0515681、EP0517589、EP0520555、EP0522808、EP0528495、EP0532456、EP0533280、EP0536817、EP0545478、EP0558156、EP0577394、EP0585913、EP0590152、EP0599538、EP0610793、EP0634402、EP0686629、EP0693489、EP0694535、EP0699655、EP0699674、EP0707006、EP0708101、EP0709375、EP0709376、EP0714891、EP0723959、EP0733632和EP0776893；PCT國(guó)際專(zhuān)利公開(kāi)號(hào)WO90/05525、WO90/05729、WO91/09844、WO91/18899、WO92/01688、WO92/06079、WO92/12151、WO92/15585、WO92/17449、WO92/20661、WO92/20676、WO92/21677、WO92/22569、WO93/00330、WO93/00331、WO93/01159、WO93/01165、WO93/01169、WO93/01170、WO93/06099、WO93/09116、WO93/10073、WO93/14084、WO93/14113、WO93/18023、WO93/19064、WO93/21155、WO93/21181、WO93/23380、WO93/24465、WO94/00440、WO94/01402、WO94/02461、WO94/02595、WO94/03429、WO94/03445、WO94/04494、WO94/04496、WO94/05625、WO94/07843、WO94/08997、WO94/10165、WO94/10167、WO94/10168、WO94/10170、WO94/11368、WO94/13639、WO94/13663、WO94/14767、WO94/15903、WO94/19320、WO94/19323、WO94/20500、WO94/26735、WO94/26740、WO94/29309、WO95/02595、WO95/04040、WO95/04042、WO95/06645、WO95/07886、WO95/07908、WO95/08549、WO95/11880、WO95/14017、WO95/15311、WO95/16679、WO95/17382、WO95/18124、WO95/18129、WO95/19344、WO95/20575、WO95/21819、WO95/22525、WO95/23798、WO95/26338、WO95/28418、WO95/30674、WO95/30687、WO95/33744、WO96/05181、WO96/05193、WO96/05203、WO96/06094、WO96/07649、WO96/10562、WO96/16939、WO96/18643、WO96/20197、WO96/21661、WO96/29304、WO96/29317、WO96/29326、WO96/29328、WO96/31214、WO96/32385、WO96/37489、WO97/01553、WO97/01554、WO97/03066、WO97/08144、WO97/14671、WO97/17362、WO97/18206、WO97/19084、WO97/19942和WO97/21702；和在英國(guó)專(zhuān)利公開(kāi)號(hào)GB2266529、GB2268931、GB2269170、GB2269590、GB2271774、GB2292144、GB2293168、GB2293169和GB2302689中。這類(lèi)化合物的制備完整地描述在上述專(zhuān)利和公開(kāi)文獻(xiàn)中，將它們引入本文作為參考。
在一個(gè)實(shí)施方案中，與本發(fā)明化合物聯(lián)用的神經(jīng)激肽-1受體拮抗劑選自2-(R)-(1-(R)-(3，5-雙(三氟甲基)苯基)乙氧基)-3-(S)-(4-氟苯基)-4-(3-(5-氧代-1H，4H-1，2，4-三唑并)甲基)嗎啉或其藥物上可接受的鹽，其描述在美國(guó)專(zhuān)利US5,719,147中。
還可以將本發(fā)明的化合物與用于治療貧血的活性劑一起給藥。這類(lèi)貧血的治療劑例如為連續(xù)的紅細(xì)胞生成(eythropoiesis)受體激活物(諸如阿法依伯汀)。
還可以將本發(fā)明的化合物與用于治療中性白細(xì)胞減少的活性劑一起給藥。這類(lèi)中性白細(xì)胞減少治療劑例如為調(diào)節(jié)中性白細(xì)胞產(chǎn)生和功能的造血生長(zhǎng)因子，諸如人粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)。G-CSF的實(shí)例包括非格司亭。
還可以將本發(fā)明的化合物與免疫-增強(qiáng)藥物一起給藥，諸如左旋咪唑、異丙肌苷和日達(dá)仙。
因此，本發(fā)明的范圍包括本發(fā)明要求保護(hù)的化合物與第二種化合物的聯(lián)合應(yīng)用，所述的第二種化合物選自雌激素受體調(diào)節(jié)劑、雄激素受體調(diào)節(jié)劑、類(lèi)視色素受體調(diào)節(jié)劑、細(xì)胞毒性/細(xì)胞抑制劑、抗增殖藥、異戊二烯基-蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑、HMG-CoA還原酶抑制劑、HIV蛋白酶抑制劑、逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑、血管生成抑制劑、PPAR-γ激動(dòng)劑、PPAR-δ激動(dòng)劑、二膦酸鹽、內(nèi)在多藥物耐受性的抑制劑、止吐藥、用于治療貧血的活性劑、用于治療中性白細(xì)胞減少的活性劑、免疫-增強(qiáng)藥物、細(xì)胞增殖和存活信號(hào)傳導(dǎo)抑制劑、干擾細(xì)胞周期關(guān)卡的活性劑和編程性細(xì)胞死亡誘導(dǎo)劑。
在涉及本發(fā)明化合物中的術(shù)語(yǔ)″給藥″及其變化形式(例如″給予″化合物)指的是將化合物或化合物的前體藥物導(dǎo)入需要治療的動(dòng)物系統(tǒng)。當(dāng)將本發(fā)明的化合物或其前體藥物與一種或多種其它活性劑(例如細(xì)胞毒性劑等)聯(lián)合提供時(shí)，將″給藥″及其變化形式各自理解為包括化合物或其前體藥物和其它活性劑的同時(shí)和依次導(dǎo)入。
本文所用的術(shù)語(yǔ)″組合物″用以包括含有指定量的指定組分的產(chǎn)品以及直接或間接因指定量的指定組分的組合產(chǎn)生的任意產(chǎn)品。
本文所用的術(shù)語(yǔ)“治療有效量”指的是在組織、系統(tǒng)、動(dòng)物或人體內(nèi)引起研究人員、獸醫(yī)、醫(yī)務(wù)人員或其他臨床醫(yī)師尋找的生物或醫(yī)學(xué)反應(yīng)的活性化合物或藥物活性劑的量。
術(shù)語(yǔ)“治療癌癥(treating cancer)”或“癌癥的治療(treatment ofcancer)”指的是對(duì)患有癌性疾病的哺乳動(dòng)物給藥并且指的是通過(guò)殺傷癌細(xì)胞緩解癌性疾病(cancerous condition)的作用，還指的是導(dǎo)致癌生長(zhǎng)和/或轉(zhuǎn)移受到抑制的作用。
在一個(gè)實(shí)施方案中，用作第二種化合物的血管生成抑制劑選自酪氨酸激酶抑制劑、表皮-衍生的生長(zhǎng)因子抑制劑、成纖維細(xì)胞-衍生的生長(zhǎng)因子抑制劑、血小板衍生的生長(zhǎng)因子的抑制劑、MMP(基質(zhì)金屬蛋白酶)抑制劑、整聯(lián)蛋白阻滯劑、干擾素-α、白細(xì)胞介素-12、多硫酸戊聚糖、環(huán)加氧酶抑制劑、羧基酰氨基三唑、考布他汀A-4、角鯊胺、6-O-氯乙酰基-羰基)-煙曲霉醇、沙利度胺、制管張素、肌鈣蛋白-1或針對(duì)VEGF的抗體。在一個(gè)實(shí)施方案中，雌激素受體調(diào)節(jié)劑為他莫昔芬或雷洛昔芬。
權(quán)利要求的范圍內(nèi)還包括治療癌癥的方法，包括給予治療有效量的通式I的化合物與放療的組合和/或與選自如下化合物的化合物的組合雌激素受體調(diào)節(jié)劑、雄激素受體調(diào)節(jié)劑、類(lèi)視色素受體調(diào)節(jié)劑、細(xì)胞毒性/細(xì)胞抑制劑、抗增殖藥、異戊二烯基-蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑、HMG-CoA還原酶抑制劑、HIV蛋白酶抑制劑、逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑、血管生成抑制劑、PPAR-γ激動(dòng)劑、PPAR-δ激動(dòng)劑、二膦酸鹽、內(nèi)在多藥物耐受性的抑制劑、止吐藥、用于治療貧血的活性劑、用于治療中性白細(xì)胞減少的活性劑、免疫-增強(qiáng)藥物、細(xì)胞增殖和存活信號(hào)傳導(dǎo)抑制劑、干擾細(xì)胞周期關(guān)卡的活性劑和編程性細(xì)胞死亡誘導(dǎo)劑。
本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案為治療癌癥的方法，包括給予治療有效量的通式I的化合物與紫杉醇或曲妥單抗的組合。
本發(fā)明進(jìn)一步包括治療或預(yù)防癌癥的方法，包括給予治療有效量的通式I的化合物與COX-2抑制劑的組合。
本發(fā)明還包括用于治療或預(yù)防癌癥的藥物組合物，包括治療有效量的通式I的化合物和選自如下的化合物雌激素受體調(diào)節(jié)劑、雄激素受體調(diào)節(jié)劑、類(lèi)視色素受體調(diào)節(jié)劑、細(xì)胞毒性/細(xì)胞抑制劑、抗增殖藥、異戊二烯基-蛋白轉(zhuǎn)移酶抑制劑、HMG-CoA還原酶抑制劑、HIV蛋白酶抑制劑、逆轉(zhuǎn)錄酶抑制劑、血管生成抑制劑、PPAR-γ激動(dòng)劑、PPAR-δ激動(dòng)劑、細(xì)胞增殖和存活信號(hào)傳導(dǎo)抑制劑、干擾細(xì)胞周期關(guān)卡的活性劑、二膦酸鹽和編程性細(xì)胞死亡誘導(dǎo)劑。
本發(fā)明的這些和其它方面從其中包含的教導(dǎo)中顯而易見(jiàn)。
試驗(yàn)通過(guò)下述試驗(yàn)測(cè)試實(shí)施例中所述的本發(fā)明化合物并且發(fā)現(xiàn)它們具有驅(qū)動(dòng)蛋白抑制活性。在文獻(xiàn)中已知其它試驗(yàn)并且它們易于由本領(lǐng)域技術(shù)人員實(shí)施(例如，參見(jiàn)PCT公開(kāi)號(hào)WO01/30768，2001年5月3日，18-22頁(yè))。
I.驅(qū)動(dòng)蛋白ATPase體外試驗(yàn)人聚-組氨酸標(biāo)記的KSP發(fā)動(dòng)蛋白結(jié)構(gòu)域(KSP(367H))的克隆和表達(dá)通過(guò)PCR，使用p Bluescript全長(zhǎng)人KSP構(gòu)建體(Blangy等，Cell，vol.83，pp1159-1169，1995)作為模板克隆用于表達(dá)人KSP發(fā)動(dòng)蛋白結(jié)構(gòu)域構(gòu)建體的質(zhì)粒。N-末端引物5’-GCAACGATTAATATGGCGTCGCAGCCAAATTCGTCTGCGAAG(SEQ.ID.NO.1)和C-末端引物5’-GCAACGCTCGAGTCAGTGATGATGGTGGTGATGCTGATTCACTTCAGGCTTATTCAATAT(SEQ.ID.NO.2)用于擴(kuò)增發(fā)動(dòng)蛋白結(jié)構(gòu)域和頸連接區(qū)。用AseI和XhoI消化PCR產(chǎn)物，將其連入pRSETa(Invitrogen)的NdeI/XhoI消化產(chǎn)物并且轉(zhuǎn)化入大腸桿菌BL21(DE3)。
使細(xì)胞在37℃下生長(zhǎng)至OD600為0.5。在將培養(yǎng)物冷卻至室溫后，用100μM IPTG誘導(dǎo)KSP表達(dá)并且將溫育持續(xù)過(guò)夜。通過(guò)離心使細(xì)胞沉淀并且用冰冷的PBS洗滌一次。將沉淀快速冷凍并且貯存在-80℃下。
蛋白質(zhì)純化使細(xì)胞沉淀在冰上融化并且重新懸浮于裂解緩沖液(50mM K-HEPES，pH8.0，250mM KCl，0.1％Tween，10mM咪唑，0.5mM Mg-ATP，1mM PMSF，2mM benzimidine，1x完全蛋白酶抑制劑混合物(Roche))。將細(xì)胞混懸液與1mg/ml溶菌酶和5mM β-巰基乙醇一起在冰上孵育10分鐘，隨后進(jìn)行超聲處理(3x30秒)。在4℃下進(jìn)行所有隨后的操作步驟。將裂解物以40,000xg離心40分鐘。稀釋上清液并且上在緩沖液A(50mM K-HEPES，pH 6.8，1mM MgCl2，1mM EGTA，10μM Mg-ATP，1mM DTT)中的SP瓊脂糖柱(Pharmacia，5ml柱)且用緩沖液A中的0-750mM KCl梯度洗脫。收集含有KSP的級(jí)分并且與Ni-NTA樹(shù)脂(Qiagen)一起溫育1小時(shí)。用緩沖液B(除去PMSF和蛋白酶抑制劑混合物的裂解緩沖液)將樹(shù)脂洗滌三次，隨后進(jìn)行三次15分鐘-溫育并且用緩沖液B洗滌。最后，溫育樹(shù)脂并且用緩沖液C(與緩沖液B相同，但pH為6.0)洗滌三次15分鐘并且傾入柱。用洗脫緩沖液(與緩沖液B相同，但不包括150mM KCl和250mM咪唑)洗脫KSP。收集含有KSP的級(jí)分，在蔗糖中制成10％并且貯存在-80℃下。
由分離自牛腦的微管蛋白制備微管。在37℃下和在BRB80緩沖液(80mM K-PIPES，1mM EGTA，1mM MgCl2，pH 6.8下)中的10μM紫杉醇、1mM DTT、1mM GTP存在下聚合1mg/ml的純化的微管蛋白(＞97％不含MAP)。通過(guò)超離心并且除去上清液從未聚合的微管蛋白中分離所得微管。將含有微管的沉淀緩慢地重新懸浮于在BRB80中的10μM紫杉醇、1mM DTT、50μg/ml氨芐西林和5g/ml氯霉素中。
將驅(qū)動(dòng)蛋白發(fā)動(dòng)蛋白結(jié)構(gòu)域與微管、1mM ATP(1∶1 MgCl2∶Na-ATP)和化合物在23℃下和含有80mM K-HEPES(pH 7.0)、1mMEGTA、1mM DTT、1mM MgCl2和50mM KCl的緩沖液中一起溫育。通過(guò)用80mM HEPES和50mM EDTA的最終緩沖液組合物稀釋2-10倍(或備選地添加1∶1的反應(yīng)體積和終止緩沖液(1.8M KCl和50mM EDTA)中)終止反應(yīng)。通過(guò)喹哪啶紅/鉬酸銨試驗(yàn)，通過(guò)添加1.5倍體積的猝滅物C(例如向40μl反應(yīng)體積+40μl終止緩沖液混合物中加入120μl猝滅物C)測(cè)定來(lái)自ATP水解反應(yīng)的游離磷酸鹽。猝滅物A含有0.1mg/ml喹哪啶紅和0.14％聚乙烯醇；猝滅物B含有在1.15M硫酸中的12.3mM四水合鉬酸銨。猝滅物C為2∶1比例的猝滅物A猝滅物B。將該反應(yīng)體系在23℃下溫育5-10分鐘并且在540nm處測(cè)定磷酸-鉬酸鹽復(fù)合物的吸收度。
在上述試驗(yàn)中測(cè)試實(shí)施例中的化合物1-5、1-7、1-9、1-11和1-13并且發(fā)現(xiàn)它們具有的IC50≤50μM。
II.細(xì)胞增殖試驗(yàn)將細(xì)胞涂布在96-孔組織培養(yǎng)皿中，其密度允許細(xì)胞在24、48和72小時(shí)過(guò)程中成對(duì)數(shù)增長(zhǎng)并且使其粘附過(guò)夜。在第二天，以10-點(diǎn)二分之一log滴度(in a 10-point，one-half log titration)向所有平板加入化合物。每個(gè)滴度系列均按照一式三份進(jìn)行，并且在整個(gè)試驗(yàn)過(guò)程中維持0.1％的恒定DMSO濃度。還包括單獨(dú)的0.1％DMSO對(duì)照。在不含血清的培養(yǎng)基中制備每種化合物的稀釋系列。本試驗(yàn)中的血清終濃度為在200μL培養(yǎng)基體積中5％。在添加藥物后24、48或72小時(shí)時(shí)向滴定板上的每個(gè)樣品和對(duì)照孔中加入20微升Alamar藍(lán)染色試劑并且使該體系返回至37℃下溫育。在6-12小時(shí)后，在CytoFluor II平板讀出器上使用530-560納米的激發(fā)波長(zhǎng)、590納米的發(fā)射波長(zhǎng)分析Alamar藍(lán)熒光。
通過(guò)將x-軸上的化合物濃度與y-軸上的每一滴定點(diǎn)的細(xì)胞生長(zhǎng)抑制平均百分比繪圖來(lái)得到細(xì)胞毒性EC50。將已經(jīng)用單獨(dú)的載體處理的對(duì)照孔中的細(xì)胞生長(zhǎng)定義為在本試驗(yàn)中100％的生長(zhǎng)率，并且將用化合物處理的細(xì)胞生長(zhǎng)與該值進(jìn)行比較。將專(zhuān)賣(mài)的內(nèi)部軟件(proprietaryin-house software)用于計(jì)算細(xì)胞毒性值的百分比并且使用對(duì)數(shù)4-參數(shù)曲線(xiàn)擬合計(jì)算拐點(diǎn)。將細(xì)胞毒性百分比定義為％細(xì)胞毒性(熒光對(duì)照)-(熒光樣品)x100x(熒光對(duì)照)-1將拐點(diǎn)報(bào)導(dǎo)為細(xì)胞毒性EC50。
III.通過(guò)FACS評(píng)價(jià)有絲分裂停滯和編程性細(xì)胞死亡FACS分析用于通過(guò)測(cè)定處理的細(xì)胞群中的DNA含量評(píng)價(jià)化合物抑制有絲分裂中的細(xì)胞并且誘導(dǎo)編程性細(xì)胞死亡的能力。以1.4x106個(gè)細(xì)胞/6cm2組織培養(yǎng)皿的密度接種細(xì)胞并且使其粘附過(guò)夜。然后用載體(0.1％DMSO)或滴度系列(titration series)的化合物處理8-16小時(shí)。在處理后，通過(guò)在指定時(shí)間時(shí)進(jìn)行胰蛋白酶消化收集細(xì)胞并且通過(guò)離心沉淀。在PBS中沖洗細(xì)胞沉淀并且固定在70％ 醇中且貯存在4℃下過(guò)夜或更長(zhǎng)時(shí)間。
為了進(jìn)行FACS分析，沉淀至少500,000個(gè)固定的細(xì)胞并且通過(guò)抽吸除去70％ 醇。然后將細(xì)胞在4℃下與RNase A(50 Kunitz個(gè)單位/ml)和碘化丙啶(50μg/ml)一起孵育30分鐘并且使用BectonDickinson FACSCaliber分析。使用Modfit細(xì)胞周期分析模擬軟件(Verity Inc.)分析數(shù)據(jù)(來(lái)自10,000個(gè)細(xì)胞)。
通過(guò)x-軸上的化合物濃度和y-軸上每一滴度點(diǎn)的細(xì)胞周期的G2/M期中的細(xì)胞百分比(如通過(guò)碘化丙啶熒光測(cè)定的)繪圖來(lái)獲得有絲分裂停滯的EC50。使用SigmaPlot程序進(jìn)行數(shù)據(jù)分析以便使用對(duì)數(shù)4-參數(shù)曲線(xiàn)擬合計(jì)算拐點(diǎn)。拐點(diǎn)報(bào)導(dǎo)為有絲分裂停滯的EC50。類(lèi)似的方法用于測(cè)定編程性細(xì)胞死亡的化合物EC50。此處，將在每一滴度點(diǎn)(如通過(guò)碘化丙啶熒光測(cè)定的)處的凋亡細(xì)胞百分比繪制在y-軸上并且如上所述進(jìn)行類(lèi)似的分析。
IV.檢測(cè)單極紡錘體的免疫熒光顯微技術(shù)用于對(duì)DNA、微管蛋白和粒周蛋白進(jìn)行免疫熒光染色的方法基本上如Kapoor等(2000)在J.Cell Biol.150975-988中所述。為了進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)研究，將細(xì)胞涂布在組織培養(yǎng)物處理的玻璃室載玻片上并且使其粘附過(guò)夜。然后將細(xì)胞與所關(guān)注的化合物一起孵育4-16小時(shí)。在孵育完成后，抽吸培養(yǎng)基和藥物并且從載玻片上除去室(chamber)和墊片。然后按照參考的方案透化細(xì)胞，固定，洗滌并且封閉以便進(jìn)行非特異性抗體結(jié)合。用二甲苯將石蠟-包埋的腫瘤切片去石蠟化并且通過(guò)乙醇系列進(jìn)行在水化，此后進(jìn)行封閉。在4℃下在初級(jí)抗體(小鼠單克隆抗-α-微管抗體，來(lái)自Sigma的按照1∶500稀釋的克隆DM1A；來(lái)自Covance的按照1∶2000稀釋的兔多克隆抗-粒周蛋白抗體)中將載玻片溫育過(guò)夜。在洗滌后，在室溫下將載玻片與稀釋至15μg/ml的綴合的二級(jí)抗體(微管蛋白的FITC-綴合的驢抗-小鼠IgG；粒周蛋白的德克薩斯紅-綴合的驢抗-家兔IgG)一起溫育1小時(shí)。然后洗滌載玻片并且使用Hoechst 33342復(fù)染色以便使DNA顯影。在使用Metamorph去卷積和成像軟件的Nikon落射熒光顯微鏡上用100x油浸物鏡使免疫染色的樣品成像。
實(shí)施例提供的實(shí)施例用以有助于進(jìn)一步理解本發(fā)明。具體使用的物質(zhì)、種類(lèi)和條件用于解釋本發(fā)明，但并用非來(lái)限定本發(fā)明的合理范圍。
方案1
步驟11-1的合成向在0℃下24.9g(255mmol)N，O-二甲基羥胺鹽酸鹽在1.5LCH2Cl2中的混懸液中加入71.1mL(510mmol)三乙胺，隨后滴加100mLCH2Cl2中的25.0g(141.6mmol)2，5-二氟苯甲酰氯。在攪拌1小時(shí)后，用水洗滌該反應(yīng)體系，用1M HCl洗滌三次，用鹽水洗滌，用Na2SO4干燥并且濃縮至得到1-1為無(wú)色油狀物。1-1的數(shù)據(jù)1HNMR(500MHz，CDCl3)δ 7.2-7.0(m，3H)，3.6(bs，3H)，3.4(s，3H)ppm。
步驟21-(2，5-二氟苯基)-6-(四氫-2H-吡喃-2-基氧基)己-2-炔-1-酮(1-3)的合成向在-78℃下的15.0g(89.2mmol)THP-炔1-2(如Tetrahedron，2001，57，2597-2608中所述制備)在750mL THF中的溶液中加入35.7mL(89.2mmol)在己烷中的2.5M nBuLi。在該溫度下攪拌1小時(shí)后，通過(guò)注射器加入17.9g(89.2mmol)1-1在35mL THF中的溶液。將該溶液攪拌過(guò)夜，同時(shí)逐步升溫至室溫。用飽和NH4Cl水溶液使反應(yīng)猝滅并且用EtOAc萃取。用鹽水洗滌有機(jī)萃取物，用Na2SO4干燥，通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)進(jìn)行濃縮，并且通過(guò)使用EtOAc/己烷的柱色譜法純化而得到1-3，為無(wú)色油狀物。1-3的數(shù)據(jù)1HNMR(500MHz，CDCl3)δ7.7(m，1H)，7.3(m，1H)，7.15(m，1H)，4.6(m，1H)，3.9(m，2H)，3.55(m，2H)，2.65(m，2H)，1.95(m，2H)，1.85(m，1H)，1.75(m，1H)，1.6-1.5(m，4H)ppm。
步驟31-(2，5-二氟苯基)-3-苯基-6-(四氫-2H-吡喃-2-基氧基)己-2-烯-1-酮(1-4)的合成向在-78℃下的20.2g(98.1mmol)溴化亞銅(I)二甲硫復(fù)合物在75mL THF中的混懸液中加入98.1mL(196mmol)在二丁基醚中的2MPhLi溶液。在攪拌1.5小時(shí)后，通過(guò)套管加入在200mL THF中的25.2g(81.7mmol)炔1-3，并且將該反應(yīng)體系在-78℃下攪拌3小時(shí)。用飽和NH4Cl水溶液使反應(yīng)猝滅并且用EtOAc提取兩次。合并有機(jī)提取物，用鹽水洗滌，用Na2SO4干燥，通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮并且通過(guò)使用EtOAc/己烷的柱色譜法純化而得到1-4為黃色油狀物，為(E)和(Z)異構(gòu)體的混合物。1-4的數(shù)據(jù)C23H24F2O3的HRMS(ES)計(jì)算值M+Na409.1586.測(cè)定值409.1586。
步驟43-[1-乙?；?3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氫-1H-吡唑-5-基]丙-1-醇(1-5)的合成向16.0g(41.4mmol)1-4在150mL吡啶中的溶液中加入3.0mL(62.1mmol)肼水合物并且將所得混合物在90℃下加熱45分鐘。在冷卻至室溫后，將該反應(yīng)體系放入冰浴并且滴加14.7mL(207mmol)乙酰氯。除去冰浴并且將該反應(yīng)體系在室溫下攪拌過(guò)夜，此后放入含有EtOAc和鹽水的分液漏斗。分離各層并且有機(jī)相用1M HCl洗滌兩次，用鹽水洗滌一次，用Na2SO4干燥并且通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)進(jìn)行濃縮。將殘余物重新懸浮于甲苯中兩次并且濃縮至共沸出任何剩余的吡啶。將殘余物溶于200mL MeOH并且加入8.0g(42mmol)對(duì)-甲苯磺酸一水合物。在室溫下攪拌2小時(shí)后，通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去大部分溶劑并且使殘余物分配在飽和NaHCO3水溶液與EtOAc之間。在分離各層后，用碳酸氫鹽再次洗滌有機(jī)層，然后是鹽水，用Na2SO4干燥并且通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)進(jìn)行濃縮。將殘余物與Et2O一起研磨并且通過(guò)過(guò)濾收集固體物質(zhì)而得到外消旋物1-5，為白色固體。外消旋物1-5的數(shù)據(jù)1HNMR(500MHz，CDCl3)δ7.7(m，1H)，7.4-7.0(m，7H)，3.8-3.65(m，2H)，3.6(m，1H)，3.5(m，1H)，2.9(m，1H)，2.4(s，3H)，2.3(m，1H)，1.7-1.5(m，2H)ppm。C20H20F2N2O3的HRMS(ES)計(jì)算值M+H359.1566.測(cè)定值359.1557步驟53-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氫-1H-吡唑-5-基]丙-1-醇1-5的手性拆分通過(guò)制備型HPLC拆分對(duì)映體，其中使用10cm Chiralpak AD柱與92％己烷(含有0.1％二乙胺)、4％MeOH和4％EtOH的洗脫液，流速為150mL/分鐘。洗脫下的第一個(gè)峰為無(wú)活性的(R)異構(gòu)體，洗脫下的第二個(gè)峰為活性(S)異構(gòu)體。
步驟63-[(5S)-1-乙酰基-3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氫-1H-吡唑-5-基]丙基二氫磷酸酯1-6的合成向250mg(0.70 mmol)(S)-1-5在10mL CH2Cl2中的溶液中加入292μL(2.10mmol)三乙胺、151μL(1.40mmol)氯膦酸(clorophosponate)二甲酯和24mg(0.07mmol)叔丁醇鈦(IV)。在室溫下攪拌過(guò)夜后，使該反應(yīng)體系分配在EtOAc與飽和NaHCO3水溶液之間。分離各層，用水、鹽水洗滌有機(jī)層，用MgSO4干燥并且通過(guò)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)進(jìn)行濃縮。將殘余物溶于0.5mL二甲硫和1mL甲磺酸并且將該混合物在室溫下攪拌過(guò)夜。然后用少量CH3CN稀釋該反應(yīng)體系并且通過(guò)在Delta Pak C18柱上的使用CH3CN/H2O(+0.1％TFA)的制備型HPLC純化。凍干含有產(chǎn)物的級(jí)分而得到1-6，為松散的白色固體。1-6的數(shù)據(jù)1HNMR(500MHz，d6-DMSO)δ7.65(m，1H)，7.4(m，4H)，7.2(m，3H)，3.9(m，2H)，3.7(m，1H)，3.4(m，1H)，2.6(m，1H)，2.3(s，3H)，2.3(m，1H)，1.7(m，1H)，1.4(m，1H)ppm；C20H21F2N2O5P的HRMS(APCI)計(jì)算值M+H439.1229.測(cè)定值439.1231。
通過(guò)對(duì)上述操作步驟的簡(jiǎn)單修改制備下列化合物。將化合物1-13和1-14分離為外消旋混合物。除非另有說(shuō)明，將表中的化合物作為游離堿分離。

序列表<110>Merck&Co.，Inc.
Coleman，Paul J.
Cox，Christopher D.
Hartman，George D.
<120>有絲分裂驅(qū)動(dòng)蛋白抑制劑的前體藥物<130>21685Y<150>60/584,517<151>2004-07-01<150>60/605,840<151>2004-08-30<160>2<170>FastSEQ for Windows Version 4.0<210>1<211>42<212>DNA<213>人工序列<220>
<223>全合成核苷酸序列<400>1gcaacgatta atatggcgtc gcagccaaat tcgtctgcga ag42<210>2<211>60<212>DNA<213>人工序列<220>
<223>全合成核苷酸序列<400>2gcaacgctcg agtcagtgat gatggtggtg atgctgattc acttcaggct tattcaatat 60
權(quán)利要求
1.通式I的化合物 或其藥物上可接受的鹽或立體異構(gòu)體，其中a獨(dú)立為0或1；b獨(dú)立為0或1；m獨(dú)立為0、1或2；n為0-8；p為1-6；u為1、2、3、4或5；R1選自1)(C＝O)C1-C10烷基；2)(C＝O)芳基；3)(C＝O)C2-C10鏈烯基；4)(C＝O)C2-C10炔基；5)(C＝O)C3-C8環(huán)烷基；6)(C＝O)雜環(huán)基；7)(C＝O)NR9R10；8)(C＝O)OC1-C10烷基；9)SO2NR9R10；10)SO2C1-C10烷基；11)SO2C1-C10芳基；12)SO2C1-C10雜環(huán)基；13)C1-C10烷基；14)芳基；15)雜芳基；16)(CH2)u(C＝O)C1-C10烷基；17)(CH2)u(C＝O)NR9R10；18)3-吡咯烷酮基、3-哌啶酮基、2-環(huán)戊酮基、2-環(huán)己酮基；19)(C＝O)(C＝O)C1-C10烷基；20)(C＝O)(C＝O)NR9R10；21)(C＝O)(C＝O)O C1-C10烷基；所述的烷基、芳基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、雜芳基和雜環(huán)基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自R7的取代基取代；或R2選自1)C1-C10烷基；2)芳基；3)C2-C10鏈烯基；4)C2-C10炔基；5)C1-C6全氟烷基；6)C1-C6芳烷基；7)C1-C6雜芳烷基；8)C3-C8環(huán)烷基；和9)雜環(huán)基；所述的烷基、芳基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、芳烷基、雜芳烷基和雜環(huán)基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自R7的取代基取代；R3、R4和R5獨(dú)立地選自1)H；2)C1-C10烷基；3)芳基；4)C2-C10鏈烯基；5)C2-C10炔基；6)C1-C6全氟烷基；7)C1-C6芳烷基；8)C3-C8環(huán)烷基；和9)雜環(huán)基；所述的烷基、芳基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、芳烷基和雜環(huán)基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自R7的取代基取代；或與同一碳原子連接的R3和R4合并成-(CH2)u-，其中碳原子之一任選地被選自O(shè)、S(O)m、-N(R9)C(O)-和-N(COR10)-的部分取代；R7為1)(C＝O)aObC1-C10烷基；2)(C＝O)aOb芳基；3)C2-C10鏈烯基；4)C2-C10炔基；5)(C＝O)aOb雜環(huán)基；6)CO2H；7)鹵素；8)CN；9)OH；10)ObC1-C6全氟烷基；11)Oa(C＝O)bNR9R10；12)S(O)mRa；13)S(O)2NR9R10；14)氧代；15)CHO；16)(N＝O)R9R10；或17)(C＝O)aObC3-C8環(huán)烷基；所述的烷基、芳基、鏈烯基、炔基、雜環(huán)基和環(huán)烷基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自R8的取代基取代；R8選自1)(C＝O)aOb(C1-C10)烷基；2)Ob(C1-C3)全氟烷基；3)(C0-C6)亞烷基-S(O)mRa；4)氧代；5)OH；6)鹵素；7)CN；8)(C＝O)aOb(C2-C10)鏈烯基；9)(C＝O)aOb(C2-C10)炔基；10)(C＝O)aOb(C3-C6)環(huán)烷基；11)(C＝O)aOb(C0-C6)亞烷基-芳基；12)(C＝O)aOb(C0-C6)亞烷基-雜環(huán)基；13)(C＝O)aOb(C0-C6)亞烷基-N(Rb)2；14)C(O)Ra；15)(C0-C6)亞烷基-CO2Ra，16)C(O)H，17)(C0-C6)亞烷基-CO2H；18)C(O)N(Rb)2；19)S(O)mRa；20)S(O)2NR9R10；和21)C(NH)NH2；所述的烷基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基和雜環(huán)基任選地被至多三個(gè)取代基取代，所述的取代基選自Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、鹵素、CO2H、CN、O(C＝O)C1-C6烷基、氧代和N(Rb)2；R9和R10獨(dú)立地選自1)H；2)(C＝O)ObC1-C10烷基；3)(C＝O)ObC3-C8環(huán)烷基；4)(C＝O)Ob芳基；5)(C＝O)Ob雜環(huán)基；6)C1-C10烷基；7)芳基；8)C2-C10鏈烯基；9)C2-C10炔基；10)雜環(huán)基；11)C3-C8環(huán)烷基；12)SO2Ra；和13)(C＝O)NRb2；所述的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)基、鏈烯基和炔基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自R8的取代基取代；或R9和R10可以與它們所連接的氮彼此結(jié)合成單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)，在每個(gè)環(huán)上帶有3-7個(gè)成員并且除氮外，還任選地含有一個(gè)或兩個(gè)額外的選自N、O和S的雜原子，所述的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)任選地被一個(gè)或多個(gè)選自R8的取代基取代；Ra為(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、芳基、芐基或雜環(huán)基；Rb為H、(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C＝O)OC1-C6烷基、(C＝O)C1-C6烷基或S(O)2Ra；且Rc獨(dú)立地選自(C1-C6)烷氧基、新戊酰氧基甲氧基和NRb2；或兩個(gè)Rcs可以與它們所連接的磷彼此結(jié)合成5-7元的單環(huán)雜環(huán)，所述的單環(huán)雜環(huán)任選地被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自Rb的取代基取代；Rd獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、芳基、芐基或雜環(huán)基；Rp選自-PO(OH)2、-PO(Rc)2、-C(O)CH2CH2CH2OPO(OH)2、C(O)CH2CH2CH2OPO(Rc)2、-CH2OPO(OH)2、-CH2OPO(Rc)2、-C(O)(CHRd)pNRa2、-C(O)(CHRd)pNRa3+、-CH2OC(O)(CHRd)pNRa2、-CH2OC(O)(CHRa)pNRa3+和
2.權(quán)利要求1所述的通式II的化合物 或其藥物上可接受的鹽或立體異構(gòu)體，其中a獨(dú)立為0或1；b獨(dú)立為0或1；m獨(dú)立為0、1或2；n為0-5；R1選自1)(C＝O)C1-C10烷基；2)(C＝O)芳基；3)(C＝O)C2-C10鏈烯基；4)(C＝O)C2-C10炔基；5)(C＝O)C3-C8環(huán)烷基；6)(C＝O)雜環(huán)基；7)(C＝O)OC1-C10烷基；8)(C＝O)NR9R10；9)SO2NR9R10；10)SO2C1-C10烷基；11)SO2C1-C10芳基；12)SO2C1-C10雜環(huán)基；所述的烷基、芳基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基和雜環(huán)基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自R7的取代基取代；或R2選自1)C1-C10烷基；2)芳基；3)C2-C10鏈烯基；4)C2-C10炔基；5)C1-C6全氟烷基；6)C1-C6芳烷基；7)C3-C8環(huán)烷基；和8)雜環(huán)基；所述的烷基、芳基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、芳烷基和雜環(huán)基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自R7的取代基取代；R3、R4和R5獨(dú)立地選自1)H；2)C1-C10烷基；3)芳基；4)C2-C10鏈烯基；5)C2-C10炔基；6)C1-C6全氟烷基；7)C1-C6芳烷基；8)C3-C8環(huán)烷基；和9)雜環(huán)基；所述的烷基、芳基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、芳烷基和雜環(huán)基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自R7的取代基取代；R7為1)(C＝O)aObC1-C10烷基；2)(C＝O)aOb芳基；3)C2-C10鏈烯基；4)C2-C10炔基；5)(C＝O)aOb雜環(huán)基；6)CO2H；7)鹵素；8)CN；9)OH；10)ObC1-C6全氟烷基；11)Oa(C＝O)bNR9R10；12)S(O)mRa；13)S(O)2NR9R10；14)氧代；15)CHO；16)(N＝O)R9R10；或17)(C＝O)aObC3-C8環(huán)烷基；所述的烷基、芳基、鏈烯基、炔基、雜環(huán)基和環(huán)烷基任選地被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R8的取代基取代；R8選自1)(C＝O)aOb(C1-C10)烷基；2)Ob(C1-C3)全氟烷基；3)氧代；4)OH；5)鹵素；6)CN；7)(C2-C10)鏈烯基；8)(C2-C10)炔基；9)(C＝O)aOb(C3-C6)環(huán)烷基；10)(C＝O)aOb(C0-C6)亞烷基-芳基；11)(C＝O)aOb(C0-C6)亞烷基-雜環(huán)基；12)(C＝O)aOb(C0-C6)亞烷基-N(Rb)2；13)C(O)Ra；14)(C0-C6)亞烷基-CO2Ra；15)C(O)H；16)(C0-C6)亞烷基-CO2H；和17)C(O)N(Rb)2；18)S(O)mRa；和19)S(O)2NR9R10；所述的烷基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基和雜環(huán)基任選地被至多三個(gè)取代基取代，所述的取代基選自Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、鹵素、CO2H、CN、O(C＝O)C1-C6烷基、氧代和N(Rb)2；R9和R10獨(dú)立地選自1)H；2)(C＝O)ObC1-C10烷基；3)(C＝O)ObC3-C8環(huán)烷基；4)(C＝O)Ob芳基；5)(C＝O)Ob雜環(huán)基；6)C1-C10烷基；7)芳基；8)C2-C10鏈烯基；9)C2-C10炔基；10)雜環(huán)基；11)C3-C8環(huán)烷基；12)SO2Ra；和13)(C＝O)NRb2；所述的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)基、鏈烯基和炔基任選地被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R8的取代基取代；或R9和R10可以與它們所連接的氮彼此結(jié)合成單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)，在每個(gè)環(huán)上帶有5-7個(gè)成員并且除氮外，還任選地含有一個(gè)或兩個(gè)額外的選自N、O和S的雜原子，所述的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)任選地被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R8的取代基取代；Ra為(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、芳基或雜環(huán)基；Rb為H、(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C＝O)OC1-C6烷基、(C＝O)C1-C6烷基或S(O)2Ra；且Rc獨(dú)立地選自(C1-C6)烷氧基、新戊酰氧基甲氧基和NRb2或兩個(gè)Rcs可以與它們所連接的磷彼此結(jié)合成5-7元的單環(huán)雜環(huán)，所述的單環(huán)雜環(huán)任選地被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自Rb的取代基取代；Rp選自-PO(OH)2、-PO(Rc)2、-C(O)CH2CH2CH2OPO(OH)2、C(O)CH2CH2CH2OPO(Rc)2、-C(O)CH2NRa2、-C(O)CH2NRa3+、-CH2OC(O)CH2NRa2、-CH2OC(O)CH2NRa3+和
3.權(quán)利要求2所述的通式III的化合物 或其藥物上可接受的鹽或立體異構(gòu)體，其中a獨(dú)立為0或1；b獨(dú)立為0或1；m獨(dú)立為0，1，或2；n為0-5；R1選自1)(C＝O)C1-C10烷基；2)(C＝O)芳基；3)(C＝O)C2-C10鏈烯基；4)(C＝O)C2-C10炔基；5)(C＝O)C3-C8環(huán)烷基；6)(C＝O)雜環(huán)基；7)(C＝O)OC1-C10烷基；8)(C＝O)NR9R10；9)SO2NR9R10；10)SO2C1-C10烷基；11)SO2C1-C10芳基；12)SO2C1-C10雜環(huán)基；所述的烷基、芳基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基和雜環(huán)基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自R7的取代基取代；或R7a和R7c獨(dú)立地選自1)H；2)ObC1-C10烷基；3)鹵素；4)CN；和5)OH；所述的烷基任選地被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R8的取代基取代；R7b為鹵素；R7為1)(C＝O)aObC1-C10烷基；2)(C＝O)aOb芳基；3)C2-C10鏈烯基；4)C2-C10炔基；5)(C＝O)aOb雜環(huán)基；6)CO2H；7)鹵素；8)CN；9)OH；10)ObC1-C6全氟烷基；11)Oa(C＝O)bNR9R10；12)S(O)mRa；13)S(O)2NR9R10；14)氧代；15)CHO；16)(N＝O)R9R10；或17)(C＝O)aObC3-C8環(huán)烷基；所述的烷基、芳基、鏈烯基、炔基、雜環(huán)基和環(huán)烷基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自R8的取代基取代；R8選自1)(C＝O)aOb(C1-C10)烷基；2)Ob(C1-C3)全氟烷基；3)氧代；4)OH；5)鹵素；6)CN；7)(C2-C10)鏈烯基；8)(C2-C10)炔基；9)(C＝O)aOb(C3-C6)環(huán)烷基；10)(C＝O)aOb(C0-C6)亞烷基-芳基；11)(C＝O)aOb(C0-C6)亞烷基-雜環(huán)基；12)(C＝O)aOb(C0-C6)亞烷基-N(Rb)2；13)C(O)Ra；14)(C0-C6)亞烷基-CO2Ra；15)C(O)H；16)(C0-C6)亞烷基-CO2H；和17)C(O)N(Rb)2；18)S(O)mRa；和19)S(O)2NR9R10；所述的烷基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基和雜環(huán)基任選地被至多三個(gè)取代基取代基，所述的取代基選自Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、鹵素、CO2H、CN、O(C＝O)C1-C6烷基、氧代和N(Rb)2；R9和R10獨(dú)立地選自1)H；2)(C＝O)ObC1-C10烷基；3)(C＝O)ObC3-C8環(huán)烷基；4)(C＝O)Ob芳基；5)(C＝O)Ob雜環(huán)基；6)C1-C10烷基；7)芳基；8)C2-C10鏈烯基；9)C2-C10炔基；10)雜環(huán)基；11)C3-C8環(huán)烷基；12)SO2Ra；和13)(C＝O)NRb2；所述的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)基、鏈烯基和炔基任選地被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R8的取代基取代；或R9和R10可以與它們所連接的氮彼此結(jié)合成單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)，在每個(gè)環(huán)上帶有5-7個(gè)成員并且除氮外，還任選地含有一個(gè)或兩個(gè)額外的選自N、O和S的雜原子，所述的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)任選地被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R8的取代基取代；Ra獨(dú)立地選自(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、芳基和雜環(huán)基；Rb獨(dú)立地選自H、(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C＝O)OC1-C6烷基、(C＝O)C1-C6烷基或S(O)2Ra；和Rp選自-PO(OH)2、-C(O)CH2CH2CH2OPO(OH)2、-CH2OPO(OH)2、-C(O)CH2NRa2、-C(O)CH2NRa3+、-CH2OC(O)CH2NRa2、-CH2OC(O)CH2NRa3+和
4.權(quán)利要求3所述的通式III的化合物，其中Rp為-PO(OH)2，且所有剩余的取代基如權(quán)利要求3中所述。
5.通式IV的化合物 或其藥物上可接受的鹽或立體異構(gòu)體，其中a獨(dú)立為0或1；b獨(dú)立為0或1；m獨(dú)立為0、1或2；n為0-5；R7a和R7c獨(dú)立地選自1)H；2)ObC1-C10烷基；3)鹵素；4)CN；和5)OH；所述的烷基任選地被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R8的取代基取代；R7b為鹵素；R7為1)(C＝O)aObC1-C10烷基；2)(C＝O)aOb芳基；3)C2-C10鏈烯基；4)C2-C10炔基；5)(C＝O)aOb雜環(huán)基；6)CO2H；7)鹵素；8)CN；9)OH；10)ObC1-C6全氟烷基；11)Oa(C＝O)bNR9R10；12)S(O)mRa；13)S(O)2NR9R10；14)氧代；15)CHO；16)(N＝O)R9R10；或17)(C＝O)aObC3-C8環(huán)烷基；所述的烷基、芳基、鏈烯基、炔基、雜環(huán)基和環(huán)烷基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自R8的取代基取代；R8選自1)(C＝O)aOb(C1-C10)烷基；2)Ob(C1-C3)全氟烷基；3)氧代；4)OH；5)鹵素；6)CN；7)(C2-C10)鏈烯基；8)(C2-C10)炔基；9)(C＝O)aOb(C3-C6)環(huán)烷基；10)(C＝O)aOb(C0-C6)亞烷基-芳基；11)(C＝O)aOb(C0-C6)亞烷基-雜環(huán)基；12)(C＝O)aOb(C0-C6)亞烷基-N(Rb)2；13)C(O)Ra；14)(C0-C6)亞烷基-CO2Ra；15)C(O)H；16)(C0-C6)亞烷基-CO2H；和17)C(O)N(Rb)2；18)S(O)mRa；和19)S(O)2NR9R10；所述的烷基、鏈烯基、炔基、環(huán)烷基、芳基和雜環(huán)基任選地至多被三個(gè)取代基取代，所述的取代基選自Rb、OH、(C1-C6)烷氧基、鹵素、CO2H、CN、O(C＝O)C1-C6烷基、氧代和N(Rb)2；R9和R10獨(dú)立地選自1)H；2)(C＝O)ObC1-C10烷基；3)(C＝O)ObC3-C8環(huán)烷基；4)(C＝O)Ob芳基；5)(C＝O)Ob雜環(huán)基；6)C1-C10烷基；7)芳基；8)C2-C10鏈烯基；9)C2-C10炔基；10)雜環(huán)基；11)C3-C8環(huán)烷基；12)SO2Ra；和13)(C＝O)NRb2；所述的烷基、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)基、鏈烯基和炔基任選地被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R8的取代基取代；或R9和R10可以與它們所連接的氮彼此結(jié)合成單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)，在每個(gè)環(huán)上帶有5-7個(gè)成員并且除氮外，還任選地含有一個(gè)或兩個(gè)額外的選自N、O和S的雜原子，所述的單環(huán)或雙環(huán)雜環(huán)任選地被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)選自R8的取代基取代；R11選自1)C1-C10烷基；2)芳基；3)C3-C8環(huán)烷基；4)雜環(huán)基；所述的烷基、芳基、環(huán)烷基和雜環(huán)基任選地被一個(gè)或多個(gè)選自R10的取代基取代；或Ra獨(dú)立地選自(C1-C6)烷基、(C3-C6)環(huán)烷基、芳基和雜環(huán)基；且Rb獨(dú)立地選自H，(C1-C6)烷基、芳基、雜環(huán)基、(C3-C6)環(huán)烷基、(C＝O)OC1-C6烷基、(C＝O)C1-C6烷基或S(O)2Ra。
6.化合物，選自3-[(5S)-1-乙?；?3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氫-1H-吡唑-5-基]丙-1-醇；3-[(5S)-1-乙?；?3-(2，5-二氟苯基)-5-苯基-4，5-二氫-1H-吡唑-5-基]丙基二氫磷酸酯；2-[(5R)-1-乙?；?3-(2-氟-5-甲基苯基)-5-苯基-4，5-二氫-1H-吡唑-5-基]乙醇；2-[(5R)-1-乙?；?3-(2-氟-5-甲基苯基)-5-苯基-4，5-二氫-1H-吡唑-5-基]乙基二氫磷酸酯；2-[(5R)-1-乙?；?3-(2-氟-5-甲基苯基)-5-苯基-4，5-二氫-1H-吡唑-5-基]丙-1-醇；2-[(5R)-1-乙?；?3-(2-氟-5-甲基苯基)-5-苯基-4，5-二氫-1H-吡唑-5-基]丙基二氫磷酸酯；2-[(5R)-1-乙酰基-3-(2-氟-5-甲基苯基)-5-苯基-4，5-二氫-1H-吡唑-5-基]丁-1-醇；2-[(5R)-1-乙?；?3-(2-氟-5-甲基苯基)-5-苯基-4，5-二氫-1H-吡唑-5-基]丁基二氫磷酸酯；3-[(5S)-1-乙?；?3-(5-溴-2-氟苯基)-5-苯基-4，5-二氫-1H-吡唑-5-基]丙-1-醇；和3-[(5S)-1-乙酰基-3-(5-溴-2-氟苯基)-5-苯基-4，5-二氫-1H-吡唑-5-基]丙基二氫磷酸酯；或其藥物上可接受的鹽或立體異構(gòu)體。
7.藥物組合物，包含權(quán)利要求1的化合物與藥物上可接受的載體。
8.權(quán)利要求1的化合物的使用方法，用于制備用于治療或預(yù)防需要這類(lèi)治療的哺乳動(dòng)物癌癥的藥物。
9.權(quán)利要求1的化合物的使用方法，用于制備用于治療或預(yù)防需要這類(lèi)治療的哺乳動(dòng)物癌癥的藥物，其中所述的癌癥選自組織細(xì)胞性淋巴瘤、肺腺癌、小細(xì)胞肺癌、胰腺癌、成膠質(zhì)細(xì)胞瘤和乳腺癌。
10.權(quán)利要求1的化合物的使用方法，用于制備用于調(diào)節(jié)需要這類(lèi)治療的哺乳動(dòng)物的有絲分裂紡錘體形成的藥物。
全文摘要
本發(fā)明涉及用于治療細(xì)胞增殖性疾病、用于治療與KSP驅(qū)動(dòng)蛋白活性相關(guān)的病癥和用于抑制KSP驅(qū)動(dòng)蛋白的二氫吡唑化合物的前體藥物。本發(fā)明還涉及包括這些化合物的組合物和使用它們治療哺乳動(dòng)物癌癥的方法。
文檔編號(hào)C07D231/00GK1980663SQ200580022248
公開(kāi)日2007年6月13日 申請(qǐng)日期2005年6月27日 優(yōu)先權(quán)日2004年7月1日
發(fā)明者P·J·科爾曼, C·D·科克斯, G·D·哈特曼 申請(qǐng)人:默克公司