專利名稱：Mdm2及p53間相互作用的抑制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用作MDM2和p53間相互作用抑制劑的化合物及包含該化合物的組合物。另外，本發(fā)明提供制備所公開的抑制劑的方法、包含其組合物及使用其方法，例如作為藥物。
p53為腫瘤抑制蛋白質(zhì)，其在調(diào)節(jié)介于細(xì)胞增殖和細(xì)胞生長(zhǎng)停止/凋亡之間的平衡方面扮演重要的角色。在正常情況下，p53的半衰期很短，因此在細(xì)胞中p53的濃度很低。然而，在響應(yīng)細(xì)胞DNA傷害或細(xì)胞應(yīng)力(例如致癌基因活化、染色體端粒侵蝕、缺氧)時(shí)，p53的濃度增加。此種p53濃度增加導(dǎo)致許多基因的轉(zhuǎn)錄活化，此驅(qū)動(dòng)細(xì)胞生長(zhǎng)停止或進(jìn)入凋亡過(guò)程。因此，p53的一個(gè)重要功能是避免受損細(xì)胞未受控制的增殖，并因此保護(hù)有機(jī)體免于癌癥的發(fā)展。
MDM2是一種p53功能的關(guān)鍵負(fù)向調(diào)節(jié)劑。其通過(guò)結(jié)合至p53的氨基終端轉(zhuǎn)活化區(qū)而形成一種負(fù)向自動(dòng)調(diào)節(jié)回路，并且因此MDM2同時(shí)抑制p53得到活化轉(zhuǎn)錄能力并以p53為目標(biāo)進(jìn)行蛋白質(zhì)降解。在一般情況下，此調(diào)節(jié)回路負(fù)責(zé)維持p53的低濃度。然而，在具有野生型p53的腫瘤中，活性p53的平衡濃度可通過(guò)拮抗MDM2和p53間的相互作用而增加。此將導(dǎo)致在這種腫瘤細(xì)胞中p53-媒介的前凋亡和抗增殖效果的恢復(fù)。
MDM2為一種細(xì)胞原癌基因。MDM2的過(guò)量表達(dá)已在癌癥區(qū)中被觀察到。MDM2在各種腫瘤中被過(guò)量表達(dá)是因?yàn)榛驍U(kuò)增或增加的轉(zhuǎn)錄或轉(zhuǎn)譯所致。MDM2擴(kuò)增促進(jìn)腫瘤發(fā)生的機(jī)制至少部分與其和p53的相互作用有關(guān)。在過(guò)量表達(dá)MDM2的細(xì)胞中，p53的保護(hù)功能受阻，因此細(xì)胞無(wú)法通過(guò)增加p53濃度而響應(yīng)DNA傷害或細(xì)胞應(yīng)力，導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)停止和/或凋亡。因此，在DNA傷害和/或細(xì)胞應(yīng)力之后，過(guò)量表達(dá)MDM2的細(xì)胞自由地持續(xù)增殖并采取腫瘤發(fā)生顯型。在這些情況下，p53和MDM2的相互作用的瓦解將釋放p53并因此使生長(zhǎng)停止和/或凋亡的正常信號(hào)發(fā)生作用。
MDM2除了抑制p53的外，也可有不同功能，例如，現(xiàn)已證實(shí)，MDM2直接與pRb-調(diào)節(jié)的轉(zhuǎn)錄因子E2F1/DP1相互作用。此相互作用對(duì)MDM2的非p53依賴性致癌基因的活性很重要。E2F1區(qū)顯示對(duì)MDM2-結(jié)合的p53區(qū)有顯著的類似性。因?yàn)镸DM2與p53和E2F1的相互作用均位于MDM2的相同結(jié)合部位，可預(yù)期MDM2/p53拮抗劑將不僅活化細(xì)胞的p53，而且也調(diào)整E2F1的活性，其在腫瘤細(xì)胞中通常是不受調(diào)節(jié)的。
同樣近來(lái)所使用的DNA傷害劑(化學(xué)療法及放射性療法)的治療效力可能經(jīng)由MDM2對(duì)p53的負(fù)向調(diào)節(jié)而受到限制。因此，如果p53的MDM2回饋抑制受阻，則功能性p53濃度的增加將通過(guò)恢復(fù)導(dǎo)致凋亡的野生型p53的功能和/或逆轉(zhuǎn)與p53相關(guān)的藥物抗性來(lái)增加此種藥劑的治療效力。經(jīng)證實(shí)組合MDM2抑制和體內(nèi)DNA-傷害治療可導(dǎo)致協(xié)同的抗腫瘤效果(Vousden K.H.，Cell，第103卷，691-694，2000)。
因此，MDM2和p53的相互作用的瓦解提供一種以野生型p53治療性干預(yù)腫瘤的方法，甚至在缺乏功能性p53的腫瘤細(xì)胞中顯示抗增殖效果，且另外可使發(fā)生腫瘤的細(xì)胞對(duì)化學(xué)治療及放射性治療敏感。
背景技術(shù)：
JP11130750，公開于1999年5月18日，特別描述了取代的苯基氨基羰基吲哚基衍生物作為5-HT受體拮抗劑。
EP1129074，公開于2000年5月18日，描述了鄰氨基苯甲酸酰胺類作為血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體(VEGFR)的抑制劑，且可用于治療血管生成障礙。
EP1317443，公開于2002年3月21日，公開了三環(huán)的叔胺衍生物，可用作趨化因子受體CXCR4或CCR5調(diào)節(jié)劑，用于治療人類免疫缺陷病毒及貓免疫缺陷病毒。
EP1379329，公開于2002年10月10日，公開了N-(2-芳基乙基)芐胺作為5-HT6受體的拮抗劑。更具體地公開了以下物質(zhì)6-氯-N-[[3-(4-吡啶基氨基)苯基]甲基]-1H-吲哚-3-乙胺，
N-[[3(4-吡啶基氨基)苯基]甲基]-1H-吲哚-3-乙胺，及 5-甲氧基-N-[[3(4-吡啶基氨基)苯基]甲基]-1H-吲哚-3-乙胺。
WO00/15357，公開于2000年3月23日，提供了哌嗪-4-苯基衍生物作為MDM2和p53間相互作用的抑制劑。EP1137418，公開于2000年6月8日，提供了三環(huán)化合物，用于恢復(fù)p53家族蛋白質(zhì)的構(gòu)形穩(wěn)定性。
WO03/041715，公開于2003年5月22日，描述了取代的1，4-苯并二氮雜_及其作為MDM2-p53相互作用抑制劑的用途。
WO03/51359，公開于2003年6月26日，提供了順式-2，4，5-三苯基-咪唑酮，其抑制MDM2蛋白質(zhì)與類p53肽的相互作用且具有抗增殖活性。
WO04/05278，公開于2004年1月15日，公開了雙芳基磺酰胺化合物，其結(jié)合MDM2且可用于治療癌癥。
仍持續(xù)需要抑制MDM2和p53間相互作用的有效且強(qiáng)力的小分子。
本發(fā)明的化合物在結(jié)構(gòu)、其藥理活性和/或藥理效力上不同于現(xiàn)有技術(shù)。
發(fā)明描述本發(fā)明提供抑制MDM2和p53間相互作用的化合物、組合物及方法，用以治療癌癥。另外，本發(fā)明的化合物及組合物可用于提高化學(xué)療法及放射性療法的效果。
本發(fā)明涉及式(I)的化合物。
一種式(I)的化合物， 其N-氧化物形式、加成鹽或立體化學(xué)異構(gòu)體形式，其中m為0、1或2，且當(dāng)m為0時(shí)，意指直接鍵；n為0、1、2或3，且當(dāng)n為0時(shí)，意指直接鍵；p為0或1，且當(dāng)p為0時(shí)，意指直接鍵；s為0或1，且當(dāng)s為0時(shí)，意指直接鍵t為0或1，且當(dāng)t為0時(shí)，意指直接鍵；X為C(＝O)或CHR8；其中R8為氫、C1-6烷基、C3-7環(huán)烷基、-C(＝O)-NR17R18、羥基羰基、芳基C1-6烷氧基羰基、雜芳基、雜芳基羰基、雜芳基C1-6烷氧基羰基、哌嗪基羰基、吡咯烷基、哌啶基羰基、C1-6烷氧基羰基、被選自羥基、氨基、芳基及雜芳基的取代基所取代的C1-6烷基；被選自羥基、氨基、芳基及雜芳基的取代基所取代的C3-7環(huán)烷基；被羥基、羥基C1-6烷基、羥基C1-6烷氧基C1-6烷基取代的哌嗪羰基；被羥基C1-6烷基取代的吡咯烷基；或被一個(gè)或兩個(gè)選自羥基、C1-6烷基、羥基C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷基(二羥基)C1-6烷基或C1-6烷氧基(羥基)C1-6烷基的取代基所取代的哌啶基羰基；R17及R18各自獨(dú)立地選自氫、C1-6烷基、二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、芳基C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、羥基C1-6烷基、羥基C1-6烷基(C1-6烷基)或羥基C1-6烷基(芳基C1-6烷基)； 為-CR9＝C＜且虛線為一個(gè)鍵，-C(＝O)-CH＜，-C(＝O)-N＜， -CHR9-CH＜或-CHR9-N＜；其中每個(gè)R9獨(dú)立地為氫或C1-6烷基；R1為氫、芳基、雜芳基、C1-6烷氧基羰基、C1-12烷基或被一個(gè)或兩個(gè)獨(dú)立選自羥基、芳基、雜芳基、氨基、C1-6烷氧基、單-或二(C1-6烷基)氨基、嗎啉基、哌啶基、吡咯烷基、哌嗪基、C1-6烷基哌嗪基、芳基C1-6烷基哌嗪基、雜芳基C1-6烷基哌嗪基、C3-7環(huán)烷基哌嗪基及C3-7環(huán)烷基C1-6烷基哌嗪基的取代基所取代的C1-12烷基；R2為氫、鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、芳基C1-6烷氧基、雜芳基C1-6烷氧基、苯硫基、羥基C1-6烷基羰基、被選自氨基、芳基及雜芳基的取代基所取代的C1-6烷基；或被選自氨基、芳基及雜芳基的取代基所取代的C3-7環(huán)烷基；R3為氫、C1-6烷基、雜芳基、C3-7環(huán)烷基、被選自羥基、氨基、芳基及雜芳基的取代基所取代的C1-6烷基；或被選自羥基、氨基、芳基及雜芳基的取代基所取代的C3-7環(huán)烷基；R4及R5各自獨(dú)立地為氫、鹵素、C1-6烷基、多鹵C1-6烷基、氰基、氰基C1-6烷基、羥基、氨基或C1-6烷氧基；或R4及R5一起可任選地形成一種選自亞甲基二氧或亞乙基二氧的二價(jià)基團(tuán)；R6為氫、C1-6烷氧基羰基或C1-6烷基；當(dāng)p為1時(shí)，則R7為氫、芳基C1-6烷基、羥基或雜芳基C1-6烷基；Z為選自下列的基團(tuán)
其中每個(gè)R10或R11各自獨(dú)立地選自氫、鹵素、羥基、氨基、C1-6烷基、硝基、多鹵C1-6烷基、氰基、氰基C1-6烷基、四唑C1-6烷基、芳基、雜芳基、芳基C1-6烷基、雜芳基C1-6烷基、芳基(羥基)C1-6烷基、雜芳基(羥基)C1-6烷基、芳基羰基、雜芳基羰基、C1-6烷基羰基、芳基C1-6烷基羰基、雜芳基C1-6烷基羰基、C1-6烷氧基、C3-7環(huán)烷基羰基、C3-7環(huán)烷基(羥基)C1-6烷基、芳基C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷基羰基氧基C1-6烷基、C1-6烷氧基羰基C1-6烷氧基C1-6烷基、羥基C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷氧基羰基C2-6鏈烯基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷氧基羰基、C1-6烷基羰基氧基、氨基羰基、羥基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、羥基羰基、羥基羰基C1-6烷基及-(CH2)v-(C(＝O)r)-(CHR19)u-NR13R14；其中v為0、1、2、3、4、5或6，且當(dāng)v為0時(shí)，意指直接鍵；r為0或1，且當(dāng)r為0時(shí)，意指直接鍵；u為0、1、2、3、4、5或6，且當(dāng)u為0時(shí)，意指直接鍵；R19為氫或C1-6烷基；R12為氫、C1-6烷基、C3-7環(huán)烷基、被選自羥基、氨基、C1-6烷氧基及芳基的取代基所取代的C1-6烷基；或被選自羥基、氨基、芳基及C1-6烷氧基的取代基所取代的C3-7環(huán)烷基；R13及R14各自獨(dú)立地選自氫、C1-12烷基、C1-6烷基羰基、C1-6烷基磺?；⒎蓟鵆1-6烷基羰基、C3-7環(huán)烷基、C3-7環(huán)烷基羰基、-(CH2)k-NR15R16、被選自羥基、羥基羰基、氰基、C1-6烷氧基羰基、C1-6烷氧基、芳基或雜芳基的取代基所取代的C1-12烷基；或被選自羥基、C1-6烷氧基、芳基、氨基、芳基C1-6烷基、雜芳基或雜芳基C1-6烷基的取代基所取代的C3-7環(huán)烷基；或R13及R14與其所連的氮一起可任選地形成嗎啉基、哌啶基、吡咯烷基、哌嗪基或被選自C1-6烷基、芳基C1-6烷基、芳基C1-6烷氧基羰基、雜芳基C1-6烷基、C3-7環(huán)烷基及C3-7環(huán)烷基C1-6烷基的取代基所取代的哌嗪基；其中k為0、1、2、3、4、5或6，且當(dāng)k為0時(shí)，意指直接鍵；R15及R16各自獨(dú)立地選自氫、C1-6烷基、芳基C1-6烷氧基羰基、C3-7環(huán)烷基、被選自羥基、C1-6烷氧基、芳基及雜芳基的取代基所取代的C1-12烷基；及被選自羥基、C1-6烷氧基、芳基、芳基C1-6烷基、雜芳基及雜芳基C1-6烷基的取代基所取代的C3-7環(huán)烷基；或R15及R16與其所連的氮一起可任選地形成嗎啉基、哌嗪基或被選自C1-6烷氧基羰基所取代的哌嗪基；芳基為苯基或萘基；每個(gè)苯基或萘基可任選地被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)取代基所取代，所述取代基各自獨(dú)立地選自鹵素、羥基、C1-6烷基、氨基、多鹵C1-6烷基及C1-6烷氧基；及每個(gè)苯基或萘基可任選地被一種選自亞甲基二氧或亞乙基二氧的二價(jià)基團(tuán)所取代；雜芳基為吡啶基、吲哚基、喹啉基、咪唑基、呋喃基、噻吩基、_二唑基、四唑基、苯并呋喃基或四氫呋喃基；每個(gè)吡啶基、吲哚基、喹啉基、咪唑基、呋喃基、噻吩基、_二唑基、四唑基、苯并呋喃基或四氫呋喃基可任選地被一、二或三個(gè)取代基所取代，所述取代基各自獨(dú)立地選自鹵素、羥基、C1-6烷基、氨基、多鹵C1-6烷基、芳基、芳基C1-6烷基或C1-6烷氧基；及每個(gè)吡啶基、吲哚基、喹啉基、咪唑基、呋喃基、噻吩基、苯并呋喃基或四氫呋喃基可任選地被一種選自亞甲基二氧或亞乙基二氧的二價(jià)基團(tuán)所取代；條件是當(dāng)m為1；在苯環(huán)上除R2外的取代基在間位；s為0；及t為0時(shí)，則Z為選自(a-1)、(a-3)、(a-4)、(a-5)、(a-6)、(a-7)、(a-8)或(a-9)的基團(tuán)。
式(I)的化合物也以其互變異構(gòu)體形式存在。這種形式雖然未明示于上述式中，但意欲被含括于本發(fā)明的范圍中。
許多用于上述定義及后文的術(shù)語(yǔ)解釋于下文中。這些術(shù)語(yǔ)有時(shí)以原詞或以復(fù)合術(shù)語(yǔ)使用。
當(dāng)用于上述定義及后文時(shí)，鹵素泛指氟、氯、溴及碘；C1-6烷基定義具有由1至6個(gè)碳原子的直鏈及支鏈飽和烴基，例如甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、1-甲基乙基、2-甲基丙基、2-甲基-丁基、2-甲基戊基等；C1-6烷二基定義具有由1至6個(gè)碳原子的二價(jià)直鏈及支鏈飽和烴基，例如亞甲基、1，2-乙二基、1，3-丙二基、1，4-丁二基、1，5-戊二基、1，6-己二基及其支鏈異構(gòu)體，例如2-甲基戊二基、3-甲基戊二基、2，2-二甲基丁二基、2，3-二甲基丁二基等；C1-12烷基包括C1-6烷基及其具有7至12個(gè)碳原子的高級(jí)同系物，例如庚基、辛基、壬基、癸基、十一烷基及十二烷基；羥基C1-6烷基定義在具有1至6個(gè)碳原子的直鏈及支鏈飽和烴基上的羥基取代基；三鹵甲基定義包含三個(gè)相同或不同的鹵素取代基的甲基，例如三氟甲基；C2-6鏈烯基定義包含一個(gè)雙鍵且具有2至6個(gè)碳原子的直鏈及支鏈烴基，例如乙烯基、2-丙烯基、3-丁烯基、2-戊烯基、3-戊烯基、3-甲基-2-丁烯基等；C3-7炔基定義包含一個(gè)三鍵且具有3至6個(gè)碳原子的直鏈及支鏈烴基，例如2-丙炔基、3-丁炔基、2-丁炔基、2-戊炔基、3-戊炔基、3-己炔基等；C3-7環(huán)烷基包括具有3至10個(gè)碳的環(huán)狀烴基，例如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)戊烯基、環(huán)己基、環(huán)己烯基、環(huán)庚基等。
術(shù)語(yǔ)“加成鹽”包含式(I)化合物能與有機(jī)或無(wú)機(jī)堿，例如胺、堿金屬堿及堿土金屬堿或季銨堿，或與有機(jī)或無(wú)機(jī)酸，例如無(wú)機(jī)酸、磺酸、羧酸或含磷的酸形成的鹽類。
術(shù)語(yǔ)“加成鹽”進(jìn)一步包含式(I)化合物能形成的藥學(xué)上可接受的鹽、金屬絡(luò)合物以及其溶劑化物和鹽類。
術(shù)語(yǔ)“藥學(xué)上可接受的鹽”意指藥學(xué)上可接受的酸或堿加成鹽。如前文所提及的藥學(xué)上可接受的酸或堿加成鹽意指包含式(I)化合物能形成的治療活性的非毒性酸和非毒性堿加成鹽形式。具有堿性特性的式(I)化合物可通過(guò)以一種適當(dāng)?shù)乃崽幚碓搲A形式而轉(zhuǎn)變成其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽。適當(dāng)?shù)乃岚鐭o(wú)機(jī)酸，如氫鹵酸，例如氫氯酸或氫溴酸；硫酸；硝酸；磷酸及類似的酸；或有機(jī)酸，例如乙酸、丙酸、羥基乙酸、乳酸、丙酮酸、草酸、丙二酸、琥珀酸(即丁二酸)、馬來(lái)酸、富馬酸、蘋果酸、酒石酸、檸檬酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、對(duì)甲苯磺酸、環(huán)己烷氨基磺酸、水楊酸、對(duì)-氨基水楊酸、雙羥基萘酸及類似的酸。
具有酸性特性的式(I)化合物可通過(guò)以一種適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)或無(wú)機(jī)堿處理該酸形式而轉(zhuǎn)變成其藥學(xué)上可接受的堿加成鹽。適當(dāng)?shù)膲A鹽形式包含例如銨鹽、堿金屬及堿土金屬鹽，例如鋰、鈉、鉀、鎂、鈣鹽等，具有有機(jī)堿的鹽，例如芐星(benzathine)、N-甲基-D-葡萄糖胺、海德巴胺(hydrabamine)鹽、及具有氨基酸，例如精氨酸、賴氨酸等的鹽。
術(shù)語(yǔ)酸或堿加成鹽也包含式(I)化合物能形成的水合物及溶劑加成形式。此種形式的實(shí)例為例如水合物、醇合物等。
術(shù)語(yǔ)“金屬絡(luò)合物”意指在式(I)化合物和一種或多種有機(jī)或無(wú)機(jī)金屬鹽之間所形成的絡(luò)合物。該有機(jī)或無(wú)機(jī)鹽的實(shí)例包含鹵化物、硝酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、乙酸鹽、三氟乙酸鹽、三氯乙酸鹽、丙酸鹽、酒石酸鹽、磺酸鹽(例如甲基磺酸鹽、4-甲基苯基磺酸鹽)、水楊酸鹽、苯甲酸鹽及周期表第二主族金屬(例如鎂或鈣鹽)、第三或四主族(例如鋁、錫、鉛)及周期表第一至第八過(guò)渡族(例如鉻、錳、鐵、鈷、鎳、銅、鋅等)的鹽。
如前文所用，術(shù)語(yǔ)“式(I)化合物的立體化學(xué)異構(gòu)體形式”定義為式(I)化合物可具有的由通過(guò)相同順序的鍵鍵合的相同原子構(gòu)成但具有不同三維結(jié)構(gòu)(其不可相互轉(zhuǎn)變)的所有可能的化合物。除非另外提及或指明，化合物的化學(xué)命名包含該化合物可能具有的所有可能的立體化學(xué)異構(gòu)體形式的混合物。該混合物可包含該化合物基本分子結(jié)構(gòu)的所有非對(duì)映立體異構(gòu)體和/或旋光異構(gòu)體。純形式或?yàn)楸舜嘶旌衔镄问降氖?I)化合物的所有立體化學(xué)異構(gòu)體形式擬包含于本發(fā)明的范圍中。
式(I)化合物的N-氧化物形式意指包含那些式(I)的化合物，其中一個(gè)或數(shù)個(gè)氮原子被氧化成所謂的N-氧化物，特別是那些其中一個(gè)或多個(gè)哌啶-、哌嗪-或噠嗪基-氮被N-氧化的N-氧化物。
當(dāng)在下文使用時(shí)，術(shù)語(yǔ)“式(I)化合物”意指也包括N-氧化物形式、藥學(xué)上可接受的酸或堿加成鹽及所有的立體異構(gòu)體形式。
第一組令人感興趣的化合物由其中適用一種或多種下列限制的式(I)的那些化合物組成a)X為C(＝O)或CHR8；其中R8為氫、C1-6烷基、C3-7環(huán)烷基、氨基羰基、單-或二(C1-6烷基)氨基羰基、羥基羰基、芳基C1-6烷氧基羰基、雜芳基C1-6烷氧基羰基、C1-6烷氧基羰基、被選自羥基、氨基、芳基及雜芳基的取代基所取代的C1-6烷基或被選自羥基、氨基、芳基及雜芳基的取代基所取代的C3-7環(huán)烷基；b)R1為氫、芳基、雜芳基、C1-12烷基或被一個(gè)或兩個(gè)獨(dú)立選自羥基、芳基、雜芳基、氨基、C1-6烷氧基、單-或二(C1-6烷基)氨基、嗎啉基、哌啶基、吡咯烷基、哌嗪基、C1-6烷基哌嗪基、芳基C1-6烷基哌嗪基、雜芳基C1-6烷基哌嗪基、C3-7環(huán)烷基哌嗪基及C3-7環(huán)烷基C1-6烷基哌嗪基的取代基所取代的C1-12烷基；c)R3為氫、C1-6烷基、C3-7環(huán)烷基、被選自羥基、氨基、芳基及雜芳基的取代基所取代的C1-6烷基；或被選自羥基、氨基、芳基及雜芳基的取代基所取代的C3-7環(huán)烷基；d)R4及R5各自獨(dú)立地為氫、鹵素、C1-6烷基、多鹵C1-6烷基、羥基、氨基或C1-6烷氧基；e)R4及R5一起可任選地形成選自亞甲基二氧或亞乙基二氧的二價(jià)基團(tuán)；f)R6為氫或C1-6烷基；g)當(dāng)p為1時(shí)，則R7為氫、芳基C1-6烷基或雜芳基C1-6烷基；h)Z為選自(a-1)、(a-2)、(a-3)、(a-4)、(a-5)及(a-6)的基團(tuán)；i)每個(gè)R10或R11各自獨(dú)立地選自氫、羥基、氨基、C1-6烷基、硝基、多鹵C1-6烷基、氰基、氰基C1-6烷基、四唑C1-6烷基、芳基、雜芳基、芳基C1-6烷基、雜芳基C1-6烷基、芳基(羥基)C1-6烷基、雜芳基(羥基)C1-6烷基、芳基羰基、雜芳基羰基、芳基C1-6烷基羰基、雜芳基C1-6烷基羰基、C1-6烷氧基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷氧基羰基、C1-6烷基羰基氧基、氨基羰基、羥基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、羥基羰基、羥基羰基C1-6烷基及-(CH2)v-(C(＝O)r)-(CH2)u-NR13R14；j)R13及R14各自獨(dú)立地選自氫、C1-12烷基、C3-7環(huán)烷基、-(CH2)k-NR15R16、被選自羥基、C1-6烷氧基、芳基及雜芳基的取代基所取代C1-12烷基；或被選自羥基、C1-6烷氧基、芳基、芳基C1-6烷基、雜芳基及雜芳基C1-6烷基的取代基所取代的C3-7環(huán)烷基；k)R13及R14與其所連的氮一起可任選地形成嗎啉基、哌啶基、吡咯烷基、哌嗪基或被選自C1-6烷基、芳基C1-6烷基、雜芳基C1-6烷基、C3-7環(huán)烷基及C3-7環(huán)烷基C1-6烷基的取代基所取代的哌嗪基；l)R15及R16各自獨(dú)立地選自氫、C1-6烷基、C3-7環(huán)烷基、被選自羥基、C1-6烷氧基、芳基及雜芳基的取代基所取代的C1-12烷基；及被選自羥基、C1-6烷氧基、芳基、芳基C1-6烷基、雜芳基及雜芳基C1-6烷基的取代基所取代的C3-7環(huán)烷基；
m)雜芳基為吡啶基、吲哚基、喹啉基、咪唑基、呋喃基、噻吩基、苯并呋喃基或四氫呋喃基；并且每個(gè)吡啶基、吲哚基、喹啉基、咪唑基、呋喃基、噻吩基、苯并呋喃基或四氫呋喃基可任選地被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)取代基所取代，所述取代基各自獨(dú)立地選自鹵素、羥基、C1-6烷基、氨基、多鹵C1-6烷基及C1-6烷氧基；及n)每個(gè)吡啶基、吲哚基、喹啉基、咪唑基、呋喃基、噻吩基、苯并呋喃基或四氫呋喃基可任選地被選自亞甲基二氧或亞乙基二氧的二價(jià)基團(tuán)所取代；第二組令人感興趣的化合物由其中適用一種或多種下列限制的式(I)的那些化合物組成a)n為0、1或2；b)p為0；c)R8為氫、氨基羰基、芳基C1-6烷氧基羰基或被羥基取代的C1-6烷基； 為-CR9＝C＜或-CHR9-CH＜；e)R1為氫、C1-12烷基或被雜芳基取代的C1-12烷基；f)R2為氫、鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、芳基C1-6烷氧基或苯硫基；g)R3為氫或C1-6烷基；h)R4及R5各自獨(dú)立地為氫、鹵素或C1-6烷氧基；i)Z為選自(a-1)、(a-2)、(a-3)、(a-4)或(a-6)的基團(tuán)；j)每個(gè)R10或R11各自獨(dú)立地選自氫、羥基、氨基、C1-6烷基、硝基、多鹵C1-6烷基、氰基、芳基、芳基C1-6烷基、芳基(羥基)C1-6烷基、芳基羰基、C1-6烷氧基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷氧基羰基、氨基羰基、羥基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、羥基羰基及-(CH2)v-(C(＝O)r)-(CH2)u-NR13R14；k)v為0或1；l)r為0或1；m)u為0；n)R13及R14各自獨(dú)立地選自氫、C1-6烷基、-(CH2)k-NR15R16及被羥基取代的C1-12烷基；o)R13及R14與其所連的氮一起可形成吡咯烷基；
p)k為2；q)R15及R16各自獨(dú)立地為C1-6烷基；r)芳基為苯基或被鹵素取代的苯基；及s)雜芳基為吡啶基或吲哚基。
第三組令人感興趣的化合物由其中適用一種或多種下列限制的式(I)的那些化合物組成a)m為0或2；b)n為0、2或3；c)p為1；d)s為1；e)t為1；f)X為C(＝O)； 為-C(＝O)-CH＜，-C(＝O)-N＜，-CHR9-CH＜或-CHR9-N＜；h)R1為芳基、雜芳基、C1-6烷氧基羰基、C1-12烷基或被一個(gè)或兩個(gè)獨(dú)立選自羥基、芳基、雜芳基、氨基、C1-6烷氧基、單-或二(C1-6烷基)氨基、嗎啉基、哌啶基、吡咯烷基、哌嗪基、C1-6烷基哌嗪基、芳基C1-6烷基哌嗪基、雜芳基C1-6烷基哌嗪基、C3-7環(huán)烷基哌嗪基及C3-7環(huán)烷基C1-6烷基哌嗪基的取代基所取代的C1-12烷基；i)R2為鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、芳基C1-6烷氧基、雜芳基C1-6烷氧基、苯硫基、羥基C1-6烷基羰基、被選自氨基、芳基及雜芳基的取代基所取代的C1-6烷基；或被選自氨基、芳基及雜芳基的取代基所取代的C3-7環(huán)烷基；j)R3為C1-6烷基、C3-7環(huán)烷基、被選自羥基、氨基、芳基及雜芳基的取代基所取代的C1-6烷基；或被選自羥基、氨基、芳基及雜芳基的取代基所取代的C3-7環(huán)烷基；k)R4及R5各自獨(dú)立地為C1-6烷基、多鹵C1-6烷基、氰基、氰基C1-6烷基、羥基或氨基；1)R4及R5一起可任選地形成選自亞甲基二氧或亞乙基二氧的二價(jià)基團(tuán)；m)R6為C1-6烷氧基羰基或C1-6烷基；n)R7為氫、芳基C1-6烷基、羥基或雜芳基C1-6烷基；及
o)Z為選自(a-1)、(a-3)、(a-4)、(a-5)、(a-6)、(a-7)、(a-8)或(a-9)的基團(tuán)。
第四組令人感興趣的化合物由其中適用一種或多種下列限制的式(I)的那些化合物組成a)R8為氫、-C(＝O)-NR17R18、芳基C1-6烷氧基羰基、被羥基取代的C1-6烷基、被羥基、羥基C1-6烷基、羥基C1-6烷氧基C1-6烷基取代的哌嗪羰基、被羥基C1-6烷基取代的吡咯烷基或被一個(gè)或兩個(gè)選自羥基、C1-6烷基、羥基C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷基(二羥基)C1-6烷基或C1-6烷氧基(羥基)C1-6烷基的取代基所取代的哌啶基羰基；b)R17及R18各自獨(dú)立地選自氫、C1-6烷基、二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、芳基C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基或羥基C1-6烷基； 為-CR9＝C＜且虛線為一個(gè)鍵、-CHR9-CH＜或-CHR9-N＜；d)R1為氫、雜芳基、C1-6烷氧基羰基、C1-12烷基或被雜芳基取代的C1-12烷基；e)R2為氫、鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、芳基C1-6烷氧基或苯硫基；f)R3為氫、C1-6烷基或雜芳基；g)R4及R5各自獨(dú)立地為氫、鹵素、C1-6烷基、氰基、氰基C1-6烷基、羥基或C1-6烷氧基；h)當(dāng)p為1時(shí)，則R7為芳基C1-6烷基或羥基；i)Z為選自(a-1)、(a-2)、(a-3)、(a-4)、(a-5)、(a-6)、(a-8)、(a-9)、(a-10)及(a-11)的基團(tuán)；j)每個(gè)R10或R11各自獨(dú)立地選自氫、鹵素、羥基、氨基、C1-6烷基、硝基、多鹵C1-6烷基、氰基、氰基C1-6烷基、四唑C1-6烷基、芳基、雜芳基、雜芳基C1-6烷基、芳基(羥基)C1-6烷基、芳基羰基、C1-6烷基羰基、C3-7環(huán)烷基羰基、C3-7環(huán)烷基(羥基)C1-6烷基、芳基C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷基羰基氧基C1-6烷基、C1-6烷氧基羰基C1-6烷氧基C1-6烷基、羥基C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷氧基羰基C2-6鏈烯基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷氧基羰基、氨基羰基、羥基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、羥基羰基、羥基羰基C1-6烷基及-(CH2)v-(C(＝O)r)-(CHR19)u-NR13R14；k)v為0或1；l)u為0或1m)R12為氫或C1-6烷基；n)R13及R14各自獨(dú)立地選自氫、C1-12烷基、C1-6烷基羰基、C1-6烷基磺?；?、芳基C1-6烷基羰基、C3-7環(huán)烷基羰基、-(CH2)k-NR15R16、被選自羥基、羥基羰基、氰基、C1-6烷氧基羰基或芳基的取代基所取代的C1-12烷基；o)R13及R14與其所連的氮一起可任選地形成嗎啉基、吡咯烷基、哌嗪基或被選自C1-6烷基或芳基C1-6烷氧基羰基的取代基所取代的哌嗪基；p)k為2；q)R15及R16各自獨(dú)立地選自氫、C1-6烷基或芳基C1-6烷氧基羰基；r)R15及R16與其所連的氮一起可任選地形成嗎啉基、哌嗪基或被C1-6烷氧基羰基取代的哌嗪基；s)芳基為苯基或被鹵素取代的苯基；t)雜芳基為吡啶基、吲哚基、_二唑基或四唑基；及u)每個(gè)吡啶基、吲哚基、_二唑基或四唑基可任選地被一個(gè)選自C1-6烷基、芳基或芳基C1-6烷基的取代基所取代。
第五組令人感興趣的化合物由其中適用一種或多種下列限制的式(I)的那些化合物組成a)m為0；b)n為1；c)p為0；d)s為0；e)t為0；f)X為CHR8；g)R8為氫； 為-CR9＝C＜；i)每個(gè)R9為氫；j)R1為氫；k)R2為氫或C1-6烷氧基；
l)R3為氫；m)R4及R5各自獨(dú)立地為氫、C1-6烷基或C1-6烷氧基；n)R6為氫；o)Z為選自(a-1)、(a-2)、(a-3)或(a-4)的基團(tuán)；p)R10或R11各自獨(dú)立地選自氫、羥基或羥基C1-6烷基。
一組優(yōu)選化合物由式(I)的那些化合物或其任何亞組所組成，其中R8為氫、-C(＝O)-NR17R18、芳基C1-6烷氧基羰基、被羥基取代的C1-6烷基、被羥基、羥基C1-6烷基、羥基C1-6烷氧基C1-6烷基取代的哌嗪羰基、被羥基C1-6烷基取代的吡咯烷基或被一個(gè)或兩個(gè)選自羥基、C1-6烷基、羥基C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷基(二羥基)C1-6烷基或C1-6烷氧基(羥基)C1-6烷基的取代基所取代的哌啶基羰基；R17及R18各自獨(dú)立地選自氫、C1-6烷基、二(C1-6烷基)氨基C1-3烷基、芳基C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基或羥基C1-6烷基； 為-CR9＝C＜且虛線為一個(gè)鍵、-CHR9-CH＜或-CHR9-N＜；R1為氫、雜芳基、C1-6烷氧基羰基、C1-12烷基或被雜芳基取代的C1-12烷基；R2為氫、鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、芳基C1-6烷氧基或苯硫基；R3為氫、C1-6烷基或雜芳基；R4及R5各自獨(dú)立地為氫、鹵素、C1-6烷基、氰基、氰基C1-6烷基、羥基或C1-6烷氧基；當(dāng)p為1時(shí)，則R7為芳基C1-6烷基或羥基；Z為選自(a-1)、(a-2)、(a-3)、(a-4)、(a-5)、(a-6)、(a-8)、(a-9)、(a-10)及(a-11)的基團(tuán)；每個(gè)R10或R11各自獨(dú)立地選自氫、鹵素、羥基、氨基、C1-6烷基、硝基、多鹵C1-6烷基、氰基、氰基C1-6烷基、四唑C1-6烷基、芳基、雜芳基、雜芳基C1-6烷基、芳基(羥基)C1-6烷基、芳基羰基、C1-6烷基羰基、C3-7環(huán)烷基羰基、C3-7環(huán)烷基(羥基)C1-6烷基、芳基C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷基羰基氧基C1-6烷基、C1-6烷氧基羰基C1-6烷氧基C1-6烷基、羥基C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷氧基羰基C2-6鏈烯基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷氧基羰基、氨基羰基、羥基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、羥基羰基、羥基羰基C1-6烷基及-(CH2)v-(C(＝O)r)-(CHR19)u-NR13R14；v為0或1；u為0或1；R12為氫或C1-6烷基；R13及R14各自獨(dú)立地選自氫、C1-12烷基、C1-6烷基羰基、C1-6烷基磺?；?、芳基C1-6烷基羰基、C3-7環(huán)烷基羰基、-(CH2)k-NR15R16、被選自羥基、羥基羰基、氰基、C1-6烷氧基羰基或芳基的取代基所取代的C1-12烷基；R13及R14與其所連的氮一起可任選地形成嗎啉基、吡咯烷基、哌嗪基或被選自C1-6烷基或芳基C1-6烷氧基羰基的取代基所取代的哌嗪基；k為2；R15及R16各自獨(dú)立地選自氫、C1-6烷基或芳基C1-6烷氧基羰基；k為2；R15及R16各自獨(dú)立地選自氫、C1-6烷基或芳基C1-6烷氧基羰基；R15及R16與其所連的氮一起可任選地形成嗎啉基或哌嗪基或被C1-6烷氧基羰基取代的哌嗪基；芳基為苯基或被鹵素取代的苯基；雜芳基為吡啶基、吲哚基、_二唑基或四唑基；并且每個(gè)吡啶基、吲哚基、_二唑基或四唑基可任選地被一個(gè)選自C1-6烷基、芳基或芳基C1-6烷基的取代基所取代。
一組更優(yōu)選的化合物由式(I)的那些化合物或其任何亞組所組成，其中m為0；n為1；p為0；s為0；t為0；X為CHR8；R8為氫；

為-CR9＝C＜；每個(gè)R9為氫；R1為氫；R2為氫或C1-6烷氧基；R2為氫或C1-6烷氧基；R3為氫；R4及R5各自獨(dú)立地為氫、C1-6烷基或C1-6烷氧基；R6為氫；Z為選自(a-1)、(a-2)、(a-3)或(a-4)的基團(tuán)；及R10或R11各自獨(dú)立地選自氫、羥基或羥基C1-6烷基。
最優(yōu)選的化合物為1號(hào)化合物、21號(hào)化合物、4號(hào)化合物、5號(hào)化合物、36號(hào)化合物、69號(hào)化合物、110號(hào)化合物、111號(hào)化合物、112號(hào)化合物、229號(hào)化合物及37號(hào)化合物。


式(I)化合物、其藥學(xué)上可接受的鹽及N-氧化物及其立體化學(xué)異構(gòu)體形式可以傳統(tǒng)方法制備。原料及一些中間體為已知化合物且可商購(gòu)或可根據(jù)本領(lǐng)域公知的傳統(tǒng)反應(yīng)程序制備。
許多這種制備方法將更詳細(xì)地描述于下文中。獲得最終式(I)化合物的其它方法在實(shí)施例中描述。
式(I)化合物可通過(guò)使式(II)的中間體與式(III)的中間體反應(yīng)而制備，其中W為適當(dāng)離去基團(tuán)，例如鹵素，例如氟、氯、溴或碘；或磺酰氧基，例如甲基磺酰氧基、4-甲基苯基磺酰氧基等。反應(yīng)可在反應(yīng)惰性溶劑中進(jìn)行，該溶劑例如為醇，例如甲醇、乙醇、2-甲氧基-乙醇、丙醇、丁醇等；醚，例如4，4-二_烷、1，1′-氧雙丙烷等；酮，例如4-甲基-2-戊酮；或N，N-二甲基甲酰胺、硝基苯、乙腈、乙酸等。添加適當(dāng)?shù)膲A，例如堿金屬或堿土金屬碳酸鹽或碳酸氫鹽，例如三乙胺或碳酸鈉，可用來(lái)吸收在反應(yīng)過(guò)程中所釋放的酸?？商砑有×康倪m當(dāng)?shù)慕饘俚饣?，例如碘化鈉或鉀以促進(jìn)反應(yīng)。攪拌可提高反應(yīng)速率。反應(yīng)可方便地在室溫至反應(yīng)混合物的回流溫度范圍間的溫度進(jìn)行，且視需要反應(yīng)可在增壓下進(jìn)行。
其中X為CH2的式(I)化合物(本文中指的是式(I-a)化合物)可通過(guò)轉(zhuǎn)變其中X為C(＝O)的式(I)化合物(本文中指的是式(I-b)化合物)，通過(guò)使式(I-b)化合物與氫化鋁鋰在適當(dāng)?shù)娜軇┤缢臍溥秽蟹磻?yīng)制備。
式(I-a)化合物也可通過(guò)在適當(dāng)試劑，例如硼氫化鈉，如四氫硼酸鈉或聚合物負(fù)載的氰基三氫硼酸鹽的存在下，在適當(dāng)?shù)娜軇?，例如醇，如甲醇中，使適當(dāng)?shù)氖?IV)的甲醛化合物與式(V)的中間體反應(yīng)制備。
以相同的方式，其中t為1的式(I)化合物(本文中指的是式(I-c)化合物)可通過(guò)使式(II)的中間體與適當(dāng)?shù)氖?VI)的甲醛化合物反應(yīng)制備。
其中s為1的式(I)化合物(本文中指的是式(I-d)化合物)可通過(guò)使式(VII)的中間體與氫化鋁鋰在適當(dāng)?shù)娜軇┤缢臍溥秽蟹磻?yīng)制備。
式(I)化合物與式(III)的中間體也可通過(guò)本領(lǐng)域已知的反應(yīng)或官能基轉(zhuǎn)換互相轉(zhuǎn)變。許多這種轉(zhuǎn)換已描述于前文。其它實(shí)例為羧酸酯水解成對(duì)應(yīng)的羧酸或醇；酰胺水解成對(duì)應(yīng)的羧酸或胺；腈水解成對(duì)應(yīng)的酰胺；在咪唑或苯基上的氨基可通過(guò)本領(lǐng)域已知的重氮化反應(yīng)及隨后以氫置換重氮基而被氫取代；醇可被轉(zhuǎn)變成酯和醚；伯胺可被轉(zhuǎn)變成仲胺或叔胺；雙鍵可被氫化成對(duì)應(yīng)的單鍵；在苯基上的碘基可通過(guò)在適當(dāng)?shù)拟Z催化劑的存在下插入一氧化碳而轉(zhuǎn)變成酯基。
其中X為CH2，m為0，s為0且R3為氫的式(II)中間體(本文中指的是式(II-a)的中間體)可在金屬催化劑如阮內(nèi)鎳及適當(dāng)還原劑如氫的存在下，在適當(dāng)?shù)娜軇┤缂状蓟蛞掖贾?，通過(guò)以式(VIII)的中間體起始由硝基還原成胺的反應(yīng)制備。

其中X為C(＝O)，s為0且R3為氫的式(II)中間體(本文中指的是式(II-b)的中間體)可在適當(dāng)試劑如N′-(乙基羰亞胺酰基(ethylcarbonimidoyl))-N，N-二甲基-1，3-丙二胺，一氫氯化物(EDC)及1-羥基-1H-苯并三唑(HOBT)的存在下，通過(guò)使式(IX)的中間體與式(X)的中間體反應(yīng)制備。此反應(yīng)可在堿如三乙胺的存在下，在適當(dāng)?shù)娜軇┤缍燃淄榕c四氫呋喃的混合物中進(jìn)行。
式(IV)的中間體可通過(guò)在適當(dāng)?shù)娜軇┤缢臍溥秽惺故?XI)的中間體與氫化鋁鋰反應(yīng)制備。
式(VII)的中間體可通過(guò)在2-氯-1-甲基碘化吡啶_及三乙胺的存在下，在適當(dāng)?shù)娜軇┤缫译嬷?，使?XII)的中間體與式(XIII)的中間體反應(yīng)制備。
式(VIII)的中間體可在二異丙基乙基胺中，通過(guò)使式(XIV)的中間體與式(XV)的中間體(其中A為適當(dāng)?shù)碾x去基團(tuán)，例如鹵素，如氟、氯、溴或碘；或C1-6烷氧基，如甲氧基)反應(yīng)制備。
式(XII)的中間體可通過(guò)在氫氧化鈉和水的存在下，在適當(dāng)?shù)娜軇┤缫掖贾?，轉(zhuǎn)變式(XVI)的中間體制備。
式(XVI)的中間體可在適當(dāng)?shù)娜軇┤缍惐一分校ㄟ^(guò)使式(XVIII)的中間體(其中A如上述所定義)與式(XIV)的中間體反應(yīng)制備。

式(I)化合物及一些中間體可在其結(jié)構(gòu)中具有至少一個(gè)立體生成中心。這種立體生成中心可存在于R或S構(gòu)形中。
如上述方法制備的式(I)化合物通常為對(duì)映異構(gòu)體的外消旋混合物，其可按照本領(lǐng)域公知得的拆分方法相互分離。式(I)的外消旋化合物可通過(guò)與適當(dāng)?shù)氖中运岱磻?yīng)而被轉(zhuǎn)變成對(duì)應(yīng)的非對(duì)映異構(gòu)體鹽形式。該非對(duì)映異構(gòu)體鹽形式隨后被分離，例如通過(guò)選擇性或分級(jí)結(jié)晶，而對(duì)映異構(gòu)體則通過(guò)堿由其釋放。分離式(I)化合物的對(duì)映異構(gòu)體形式的另一種方法涉及利用手性固定相的液相色譜。該純的立體化學(xué)異構(gòu)體形式也可衍生自適當(dāng)原料的對(duì)應(yīng)純的立體化學(xué)異構(gòu)體形式，條件是反應(yīng)立體定向地發(fā)生。優(yōu)選地，若期望有特定的立體異構(gòu)體，則該化合物將通過(guò)立體專一性的制備方法合成。這種方法將有利地使用對(duì)映異構(gòu)純的原料。
式(I)化合物，其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽及立體異構(gòu)體形式在抑制p53和MDM2間相互作用上具有價(jià)值的藥理性質(zhì)。
術(shù)語(yǔ)“MDM2”用于本文時(shí)意指因MDM2基因的表達(dá)結(jié)果所獲得的蛋白質(zhì)。在此術(shù)語(yǔ)的意義中，MDM2包含所有被MDM2編碼的蛋白質(zhì)、其變異物、其選擇性的切斷蛋白質(zhì)，及其磷酸化蛋白質(zhì)。另外，當(dāng)用于本文時(shí)，術(shù)語(yǔ)“MDM2”包括MDM2類似物，例如MDMX(也稱為MDM4)及MDM2同系物及其它動(dòng)物的類似物，例如人類同系物HDm2或人類類似物HDMX。
術(shù)語(yǔ)“抑制相互作用”或“相互作用的抑制劑”用于本文時(shí)意指避免或降低一種或多種分子、肽、蛋白質(zhì)、酶或受體的直接或間接結(jié)合；或避免或降低一種或多種分子、肽、蛋白質(zhì)、酶或受體的正?；钚浴?br> 術(shù)語(yǔ)“p53與MDM2的相互作用的抑制劑”或“p53-MDM2抑制劑”用于本文時(shí)為描述在如C.1中所述的分析中增加p53表達(dá)的藥劑。此種增加可由(但不限于)一種或多種下列作用機(jī)制所引起-抑制p53與MDM2間的相互作用，-與MDM2或p53蛋白質(zhì)的任一者直接結(jié)合，-與上游或下游靶，例如激酶，或涉及泛蛋白化或SUMO修飾的酶活性的相互作用，-MDM2與p53在不同細(xì)胞區(qū)間的隔離或傳輸，-與MDM2結(jié)合的蛋白質(zhì)的調(diào)節(jié)，例如(但不限于)p73、E2F-1、Rb、p21waf1或cip1，-向下調(diào)節(jié)或干擾MDM2表達(dá)和/或MDM2活性，例如通過(guò)(但不限于)影響其細(xì)胞局部化、后轉(zhuǎn)譯修飾、核輸出或泛蛋白連接酶活性，-p53蛋白質(zhì)的直接或間接穩(wěn)定化，例如通過(guò)保持其為其結(jié)構(gòu)形式或通過(guò)避免錯(cuò)折疊，-促進(jìn)p53表達(dá)或p53家族成員(例如p63及p73)的表達(dá)，-增加p53活性，例如通過(guò)(但不限于)增強(qiáng)其轉(zhuǎn)錄活性和/或-增加p53-信號(hào)傳輸路徑的基因及蛋白質(zhì)的表達(dá)，例如(但不限于)p21waf1、cip1、MIC-1(GDF-15)、PIG-3及ATF-3。
因此，本發(fā)明公開式(I)化合物作為藥物的用途。
另外，本發(fā)明也涉及用于制造治療經(jīng)由p53-MDM2相互作用所介導(dǎo)的障礙的藥物的化合物的用途，其中所述化合物為式(I)化合物。
術(shù)語(yǔ)“治療”用于本文時(shí)涵蓋對(duì)動(dòng)物，特別是人的疾病和/或癥狀的治療，且包括(i)防止疾病和/或癥狀發(fā)生于可能易感染疾病和/或癥狀但尚未被診斷為患有它的個(gè)體；(ii)抑制疾病和/或癥狀，即遏止其發(fā)展；(iii)舒緩疾病和/或癥狀，即引起疾病和/或癥狀逆轉(zhuǎn)。
術(shù)語(yǔ)“經(jīng)由p53-MDM2相互作用所介導(dǎo)的障礙”意指任何不希望或有害的癥狀，其導(dǎo)致或來(lái)自MDM2蛋白質(zhì)與p53或誘導(dǎo)凋亡、誘導(dǎo)細(xì)胞死亡或調(diào)節(jié)細(xì)胞循環(huán)的其它細(xì)胞蛋白質(zhì)間的相互作用的抑制。
本發(fā)明也提供一種通過(guò)給藥有效量的本發(fā)明的化合物至需要此種治療的個(gè)體，例如哺乳動(dòng)物(且尤其是人)而治療經(jīng)由p53-MDM2相互作用所介導(dǎo)的障礙的方法。
本發(fā)明的化合物可具有在腫瘤細(xì)胞中的抗增殖作用，即使這種細(xì)胞沒有功能性p53。更特別地，本發(fā)明的化合物可在具野生型p53的腫瘤中和/或于過(guò)量表達(dá)MDM2的腫瘤中具有抗增殖作用。
因此，本發(fā)明也提供一種通過(guò)給藥有效量的本發(fā)明的化合物至需要此種治療的個(gè)體，例如哺乳動(dòng)物(且尤其是人)而抑制腫瘤生長(zhǎng)的方法。
可被抑制的腫瘤的實(shí)例為(但不限于)肺癌(例如腺癌且包括非小細(xì)胞肺癌)、胰臟癌(例如胰臟癌，例如外分泌胰臟癌)、結(jié)腸癌(例如結(jié)腸直腸癌，例如結(jié)腸腺癌及結(jié)腸腺腫)、食道癌、口腔鱗狀癌、舌癌、胃癌、鼻咽癌、淋巴系的造血腫瘤(例如急性淋巴細(xì)胞白血病、B-細(xì)胞淋巴瘤、Burkitt氏淋巴瘤)、骨髓白血病(例如急性源生骨髓白血病(AML))、甲狀腺囊癌、骨髓衰竭異常綜合癥(MDS)、間葉源的腫瘤(例如肌纖維惡性腫瘤及橫紋肌肉瘤)、黑色素瘤、畸形瘤、神經(jīng)母細(xì)胞瘤、腦腫瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、皮膚的良性腫瘤(例如大角化棘皮瘤)、乳房癌(例如晚期乳房癌)、腎臟癌、卵巢癌、子宮頸癌、子宮內(nèi)膜癌、膀胱癌、前列腺癌(包括末期疾病)、睪丸癌、骨肉瘤、頭和頸癌及表皮癌。
本發(fā)明的化合物也可用于發(fā)炎癥狀的治療及預(yù)防。
因此，本發(fā)明也提供一種通過(guò)給藥有效量的本發(fā)明的化合物至需要此種治療的個(gè)體，例如哺乳動(dòng)物(且尤其是人)而治療及預(yù)防發(fā)炎癥狀的方法。
本發(fā)明的化合物也可用于治療自身免疫疾病及癥狀。術(shù)語(yǔ)“自身免疫疾病”意指其中動(dòng)物的免疫系統(tǒng)對(duì)自身抗原有不利反應(yīng)的疾病。術(shù)語(yǔ)“自身抗原”意指在動(dòng)物體內(nèi)正常發(fā)現(xiàn)的任何抗原。代表性的自身免疫疾病包括但不限于橋本氏甲狀腺炎、格雷夫斯病、多發(fā)性硬化、致命貧血、阿迪生氏病、胰島素依賴型糖尿病、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、全身性紅斑狼瘡(SLE或狼瘡)、皮膚肌炎、克隆氏癥、萬(wàn)格內(nèi)(Wegener)氏肉芽腫、腎絲球基底膜病、抗磷脂綜合癥、25泡疹樣皮膚炎、變應(yīng)性腦脊髓炎、腎絲球腎炎、膜狀腎絲球腎炎、古巴斯德氏綜合癥、肌無(wú)力樣綜合癥(Lambert-Eaton)、肌無(wú)力綜合癥、重癥肌無(wú)力、類天皰瘡、多內(nèi)分泌腺病、賴特耳氏病及史蒂夫曼(Stiff-Man)綜合癥。
因此，本發(fā)明也提供一種通過(guò)給藥有效量的本發(fā)明的化合物至需要此種治療的個(gè)體，例如哺乳動(dòng)物(且尤其是人)而治療自身免疫疾病和癥狀及治療與構(gòu)形上不穩(wěn)定或錯(cuò)折疊蛋白質(zhì)有關(guān)的疾病的方法。
本發(fā)明的化合物也可用于治療與構(gòu)形上不穩(wěn)定或錯(cuò)折疊蛋白質(zhì)有關(guān)的疾病的方法。與構(gòu)形上不穩(wěn)定或錯(cuò)折疊蛋白質(zhì)有關(guān)的疾病的實(shí)例包括但不限于囊腫纖維癥(CFTR)、馬凡氏綜合癥(Marfansyndrome)(肌原纖維蛋白)、肌萎縮側(cè)索硬化癥(超氧化歧化酶)、壞血病(膠原蛋白)、楓糖尿癥(α-酮酸去氫酶復(fù)合體)、成骨不全癥(前-α型膠原蛋白元)、克-雅氏病(Creutzfeldt-Jakob disease)(朊病毒)、 阿茲海默癥(β-類淀粉蛋白纖維)、家族性淀粉樣變性病(溶菌酶)、白內(nèi)障(晶狀體蛋白)、家族性高膽固醇血癥(LDL受體)、α-I-抗胰蛋白酶缺乏、泰-薩氏病(Tay-Sachs disease)(β-己糖胺酶)、色素性視網(wǎng)膜炎(視紫質(zhì))及矮妖精貌綜合癥(胰島素受體)。
因此，本發(fā)明也提供一種通過(guò)給藥有效量的本發(fā)明的化合物至需要此種治療的個(gè)體，例如哺乳動(dòng)物(且尤其是人)而治療與構(gòu)形上不穩(wěn)定或錯(cuò)折疊蛋白質(zhì)有關(guān)的疾病的方法。
鑒于其有用的藥理特性，主題化合物可被配制成各種供給藥目的的藥物形式。
為制備本發(fā)明的藥物組合物，有效量的作為活性成分的特殊化合物以堿或酸加成鹽形式與藥學(xué)上可接受的載體混合成均質(zhì)混合物，該載體可采取廣泛的形式，依賴于給藥所需的制劑形式。這種藥物組合物理想地為優(yōu)選適合供經(jīng)口、經(jīng)腸、經(jīng)皮或非經(jīng)腸注射給藥的單一劑型。例如，在制備口服劑型的組合物時(shí)，可使用任何通常的藥物介質(zhì)，例如在口服液體制劑(如懸浮液、糖漿、酏劑及溶液)的情況下，為水、二醇類、油類、醇類等；或在粉末、丸劑、膠囊及片劑的情況下，為固體載體，如淀粉、糖、高嶺土、潤(rùn)滑劑、粘合劑、崩解劑等。
因?yàn)槠湟子诮o藥，片劑及膠囊代表最有利的口服劑量單位形式，在這種情況下顯然使用固體藥物載體。對(duì)于非經(jīng)腸組合物，載體通常包含無(wú)菌水(至少大部分)以例如幫助溶解，雖然可含括其它的成分。可注射溶液例如可被制備，其中載體包含鹽水溶液、葡萄糖溶液或鹽水和葡萄糖溶液的混合物?？勺⑸鋺腋∫阂部杀恢苽?，在這種情況下，可使用適當(dāng)?shù)囊后w載體、懸浮劑等。在適合供經(jīng)皮給藥的組合物中，載體任選地包含滲透促進(jìn)劑和/或適當(dāng)?shù)臐駶?rùn)劑，任選地與小比例的任何性質(zhì)的合適添加劑組合，該添加劑不會(huì)對(duì)皮膚造成顯著有害的影響。該添加劑可促進(jìn)對(duì)皮膚的給藥和/或可幫助制備所需的組合物。這種組合物可以各種方式給藥，例如作為透皮貼劑、作為滴劑、作為乳膏。尤其有利地是以劑量單位形式配制上述藥物組合物以易于給藥與劑量的均一性。本說(shuō)明書及權(quán)利要求中所用的劑量單位形式指的是物理上不連續(xù)單位，適合作為單一劑量，每個(gè)單位包含預(yù)定量的活性成分，其經(jīng)計(jì)算以結(jié)合所需要的藥物載體產(chǎn)生期望的治療效果。這種劑量單位形式的實(shí)例為片劑(包括刻痕或涂覆的片劑)、膠囊、丸劑、粉末袋、糯米紙囊劑、可注射溶液或懸浮液、茶匙量、湯匙量等及其分隔的復(fù)合包等。
尤其有利地是以劑量單位形式配制上述藥物組合物以易于給藥與劑量的均一性。本說(shuō)明書及權(quán)利要求中所用的劑量單位形式指的是物理上不連續(xù)單位，適合作為單一劑量，每個(gè)單位包含預(yù)定量的活性成分，其經(jīng)計(jì)算以結(jié)合所需要的藥物載體產(chǎn)生期望的治療效果。這種劑量單位形式的實(shí)例為片劑(包括刻痕或涂覆的片劑)、膠囊、丸劑、粉末袋、糯米紙囊劑、可注射溶液或懸浮液、茶匙量、湯匙量等及其分隔的復(fù)合包等。
本發(fā)明的化合物以足以抑制MDM2和p53或其它誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡、誘導(dǎo)細(xì)胞死亡或調(diào)節(jié)細(xì)胞循環(huán)的細(xì)胞蛋白質(zhì)間的相互作用的量給藥。
MDM2的致癌基因的潛能不僅通過(guò)其抑制p53的能力，也可通過(guò)其調(diào)節(jié)其它腫瘤抑制蛋白質(zhì)，例如視網(wǎng)膜神經(jīng)膠質(zhì)瘤蛋白質(zhì)pRb及密切關(guān)連的E2F1轉(zhuǎn)錄因子的能力測(cè)量。
因此，本發(fā)明的化合物以足以調(diào)控MDM2和E2F轉(zhuǎn)錄因子間的相互作用的量給藥。
本領(lǐng)域技術(shù)人員可容易地由后文所呈現(xiàn)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果測(cè)定有效量。通常認(rèn)為治療有效量為0.005mg/kg至100mg/kg體重，特別為0.005mg/kg至10mg/kg體重。可能適當(dāng)?shù)氖窃谝惶熘?，在適當(dāng)之間隔下，以一次、兩次、三次、四次或更多次亞劑量給予所需要的劑量。該亞劑量可配制成單位劑量形式，例如包含0.5至500mg，特別是每單位劑量形式含10mg至500mg的活性成分。
作為本發(fā)明的另一方面，設(shè)想p53-MDM2抑制劑與另一種抗癌劑的組合，特別是用作藥物，更特別地用于癌癥或相關(guān)疾病的治療。
為治療上述疾病，本發(fā)明的化合物可有利地與一種或多種其它藥劑，更特別地與其它抗癌劑組合使用。抗癌劑的實(shí)例為-鉑配位化合物，例如順鉑、卡鉑或奧瑟里鉑帝(oxalyplatin)；-紫杉醇化合物，例如太平洋紫杉醇或歐洲紫杉醇；-拓樸異構(gòu)酶I抑制劑，例如喜樹堿化合物，例如伊立替康或托泊替康；-拓樸異構(gòu)酶II抑制劑，例如抗腫瘤鬼臼毒素衍生物，例如依托泊苷或替尼泊苷；-抗腫瘤長(zhǎng)春花生物堿，例如長(zhǎng)春堿、長(zhǎng)春新堿或長(zhǎng)春瑞濱；-抗腫瘤核苷衍生物，例如5-氟尿嘧啶、吉西他濱或卡培他濱；-烷基化試劑，例如氮芥子氣或亞硝基脲，例如環(huán)磷酰胺、苯丁酸氮芥、卡莫司汀或洛莫司汀；-抗腫瘤蒽環(huán)類衍生物，例如柔紅霉素、多柔比星、伊達(dá)比星或米托蒽醌；-HER2抗體，例如曲妥單抗；-雌激素受體拮抗劑或選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑，例如他莫昔芬、托瑞米芬、屈洛昔芬、費(fèi)司羅迪司(faslodex)或雷洛昔芬；-芳香酶抑制劑，例如依西美坦、阿那曲唑、雷特唑(letrazole)及伏氯唑；-分化試劑，例如類視色素、維生素D及視黃酸代謝阻斷劑(RAMBA)，例如阿克特恩(accutane)；-DNA甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑，例如氮胞苷；-激酶抑制劑，例如黃酮吡立(flavoperidol)、甲磺酸伊馬替尼或吉夫提尼伯(gefitinib)；-金合歡醇(farnesyl)轉(zhuǎn)移酶抑制劑；-HDAC抑制劑；-其它泛蛋白-蛋白酶體路徑的抑制劑，例如Velcade；或-Yondelis。
術(shù)語(yǔ)“鉑配位化合物”用于本文代表任何腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)抑制鉑配位化合物，其提供離子形式的鉑。
術(shù)語(yǔ)“紫杉醇化合物”表示一類具有紫杉醇環(huán)系的化合物，且涉及或衍生自某些紫杉(水松)物種的萃取物；術(shù)語(yǔ)“拓樸異構(gòu)酶抑制劑”用來(lái)表示能改變真核細(xì)胞中DNA拓樸的酶。其對(duì)重要的細(xì)胞功能及細(xì)胞增殖是關(guān)鍵的。在真核細(xì)胞中有兩類拓樸異構(gòu)酶，即I型及II型。拓樸異構(gòu)酶I為約100,000分子量的單體酶。該酶結(jié)合至DNA并產(chǎn)生短暫的單股斷裂，松開雙螺旋(或使其松開)，并隨后在與DNA股分離前再密合該斷裂。拓樸異構(gòu)酶II具有類似的作用機(jī)制，其涉及引起DNA股的斷裂或自由基的形成。
術(shù)語(yǔ)“喜樹堿化合物”用來(lái)表示有關(guān)或衍生自母系喜樹堿化合物的化合物，其是衍生自中國(guó)的喜樹及印度的青脆枝的水不溶性生物堿。
術(shù)語(yǔ)“鬼臼毒素化合物”用來(lái)表示有關(guān)或衍生自母系鬼臼毒素的化合物，其萃取自曼陀羅草植物。
術(shù)語(yǔ)“抗腫瘤長(zhǎng)春花生物堿”用來(lái)表示有關(guān)或衍生自長(zhǎng)春花植物(日日春)的萃取物。
術(shù)語(yǔ)“烷基化試劑”包含多組具有共同特性的化學(xué)品，其具有在生理?xiàng)l件下貢獻(xiàn)烷基給生物上維持生命所必需的大分子如DNA的能力。對(duì)于大部分較重要的試劑，例如氮芥子氣及亞硝基脲，活性烷基化部分在絡(luò)合物降解反應(yīng)后在體內(nèi)產(chǎn)生，其部分為酶性的。烷基化試劑最重要的藥理作用為那些擾亂與細(xì)胞增殖(特別是DNA合成及細(xì)胞分裂)有關(guān)的基本機(jī)制者。在快速增殖組織中，烷基化試劑干擾DNA功能及完整性的能力提供其在治療應(yīng)用及許多其毒性特性的基礎(chǔ)。
術(shù)語(yǔ)“抗腫瘤蒽環(huán)類衍生物”包含由霉菌Strep.Peuticus var.caesius所獲得的抗生素及其衍生物，其特征在于具有四環(huán)素環(huán)結(jié)構(gòu)，帶有被糖苷鍵所連的不常見的糖，六碳氨糖。
人體表皮生長(zhǎng)因子受體2蛋白質(zhì)(HER 2)在初期乳房癌中的擴(kuò)大業(yè)經(jīng)證明與某些病患的不良臨床預(yù)后有關(guān)。曲妥單抗為高度純化的重組DNA-衍生的人源化單株IgG1κ抗體，其高親和性及專一性地結(jié)合至HER 2受體的細(xì)胞外區(qū)域。
許多乳房癌具有雌激素受體且這種腫瘤的生長(zhǎng)可受雌激素的刺激。術(shù)語(yǔ)“雌激素受體拮抗劑”及“選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑”用來(lái)表示結(jié)合至雌激素受體(ER)的雌二醇的競(jìng)爭(zhēng)性抑制劑。選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑，當(dāng)被結(jié)合至ER時(shí)，引起受體三維形狀的變化，調(diào)節(jié)其在DNA上對(duì)雌激素響應(yīng)性元素(ERE)的結(jié)合。
在更年期婦女中，循環(huán)的雌激素的主要來(lái)源通過(guò)在周邊組織中的芳香酶將腎上腺及卵巢男性荷爾蒙(雄甾烯二酮及睪酮)轉(zhuǎn)變成雌激素(雌酮及雌二醇)而來(lái)。經(jīng)由芳香酶抑制或滅活的雌激素?fù)p失對(duì)某些患有荷爾蒙依賴性乳房癌的更年期患者而言為有效及可選擇的治療。
術(shù)語(yǔ)“抗雌激素劑”用來(lái)包括不僅是雌激素受體拮抗劑及選擇性雌激素受體調(diào)節(jié)劑，也包括如上述的芳香酶抑制劑。
術(shù)語(yǔ)“分化試劑”包含以各種方式可抑制細(xì)胞增殖及引起分化的化合物。維生素D及類視色素已知在調(diào)節(jié)各種正常及惡性細(xì)胞類型的生長(zhǎng)及分化扮演主要角色。視黃酸代謝阻斷劑(RAMBA′s)通過(guò)抑制視黃酸的細(xì)胞色素P450-介導(dǎo)的分解代謝來(lái)增加內(nèi)生性視黃酸的濃度。
DNA甲基化變化為人體瘤形成中最普遍的異常。在所選擇基因的啟動(dòng)子內(nèi)的高甲基化通常與有關(guān)基因的失活有關(guān)。術(shù)語(yǔ)“DNA甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑”用來(lái)表示經(jīng)由DNA甲基轉(zhuǎn)移酶的藥理性抑制及腫瘤抑制劑基因表達(dá)的再生而作用的化合物。
術(shù)語(yǔ)“激酶抑制劑”包含與細(xì)胞周期發(fā)展及程序性細(xì)胞死亡(凋亡)有關(guān)的激酶的有效抑制劑。
術(shù)語(yǔ)“金合歡醇轉(zhuǎn)移酶抑制劑”用來(lái)表示設(shè)計(jì)以防止Ras及其它細(xì)胞內(nèi)蛋白質(zhì)的金合歡醇化的化合物。其業(yè)經(jīng)證實(shí)對(duì)惡性細(xì)胞增殖及存活具有影響。
術(shù)語(yǔ)“組蛋白去酰基酶抑制劑”或“組蛋白去?；傅囊种苿庇脕?lái)識(shí)別能夠與組蛋白去?；赶嗷プ饔貌⒁种破浠钚?，尤其是其酶活性的化合物。抑制組蛋白去?；该富钚砸庵附档徒M蛋白去酰基酶由組蛋白去除?；哪芰Α?br> 術(shù)語(yǔ)“其它泛蛋白-蛋白酶體路徑的抑制劑”用來(lái)識(shí)別抑制蛋白質(zhì)體中細(xì)胞蛋白質(zhì)(包括細(xì)胞周期調(diào)節(jié)蛋白質(zhì))的定向破壞的化合物。
如上所述，本發(fā)明的化合物在敏化用于化學(xué)治療及放射性治療的腫瘤細(xì)胞方面也具有治療性應(yīng)用。
因此，本發(fā)明的化合物可用作“放射敏感劑”和/或“化學(xué)敏感劑”或可與另一種“放射敏感劑”和/或“化學(xué)敏感劑”組合使用。
本文所用術(shù)語(yǔ)“放射敏感劑”被定義為一種分子，優(yōu)選為低分子量分子，以治療有效量給藥于動(dòng)物以增加細(xì)胞對(duì)離子輻射的敏感性和/或促進(jìn)可用離子輻射治療的疾病的治療。
本文所用術(shù)語(yǔ)“化學(xué)敏感劑”被定義為一種分子，優(yōu)選為低分子量分子，以治療有效量給藥于動(dòng)物以增加細(xì)胞對(duì)化學(xué)治療的敏感性和/或促進(jìn)可用化學(xué)治療法治療的疾病的治療。
放射敏感劑的作用模式的幾種機(jī)制已于文獻(xiàn)中公開，包括缺氧細(xì)胞放射敏感劑(例如2-硝基咪唑化合物及苯并三嗪二氧化物化合物)模擬氧或者在缺氧下以另一種方式作用類似生物還原劑；非缺氧細(xì)胞放射敏感劑(例如鹵化嘧啶)可為DNA堿的類似物，且優(yōu)選引入到癌細(xì)胞的DNA中，由此促進(jìn)輻射誘導(dǎo)的DNA分子的斷裂和/或防止正常DNA修復(fù)機(jī)制；及各種在疾病的治療中已被假設(shè)為放射敏感劑的作用的其它可能機(jī)制。
目前許多癌癥治療方案使用放射敏感劑結(jié)合x-射線的輻射。x-射線活化的放射敏感劑的實(shí)例包括但不限于以下化合物甲硝唑、米索硝唑、去甲米索硝唑、哌莫硝唑、依他硝唑、尼莫唑、絲裂霉素C、RSU 1069、SR 4233、EO9、RB 6145、煙酰胺、5-溴脫氧尿苷(BUdR)、5-碘脫氧尿苷(IUdR)、溴脫氧胞苷、氟脫氧尿苷(FudR)、羥基脲、順鉑及其治療有效的類似物及衍生物。
癌癥的光動(dòng)力療法(PDT)采用可見光作為敏感劑的輻射活化劑。光動(dòng)力放射敏感劑的實(shí)例包括但不限于下列化合物血卟啉衍生物、光伏靈(Photofrin)、苯并卟啉衍生物、錫卟啉、褐伯拜-a(pheoborbide-a)、細(xì)菌葉綠素-a、萘菁、酞菁、鋅酞菁及其治療有效的類似物及衍生物。
放射敏感劑可與治療有效量的一種或多種其它化合物結(jié)合給藥，所述其它化合物包括但不限于促進(jìn)放射敏感劑結(jié)合入目標(biāo)細(xì)胞的化合物；控制治療物、營(yíng)養(yǎng)劑和/或氧流動(dòng)至目標(biāo)細(xì)胞的化合物；在有或無(wú)額外的輻射下作用于腫瘤上的化學(xué)治療劑；或其它供治療癌癥或其它疾病的治療有效化合物。
化學(xué)敏感劑可與治療有效量的一種或多種其它化合物結(jié)合給藥，所述其它化合物包括但不限于促進(jìn)化學(xué)敏感劑結(jié)合入目標(biāo)細(xì)胞的化合物；控制治療物、營(yíng)養(yǎng)劑和/或氧流動(dòng)至目標(biāo)細(xì)胞的化合物；作用于腫瘤上或其它供治療癌癥或其它疾病的治療有效化合物的化學(xué)治療劑。
鑒于其有用的藥理特性，根據(jù)本發(fā)明的組合的組分，即其它藥劑及p53-MDM抑制劑可被配制成各種供給藥目的的藥物形式。所述組分可在各藥物組合物中分別配制或在包含兩種組分的單一藥物組合物中配制。
因此本發(fā)明也涉及一種藥物組合物，其包含其它藥及p53-MDM抑制劑以及一種或多種藥物載體。
本發(fā)明進(jìn)一步涉及根據(jù)本發(fā)明的組合在制造用于抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的藥物組合物中的用途。
本發(fā)明進(jìn)一步涉及一種包含根據(jù)本發(fā)明的p53-MDM2抑制劑作為第一活性成分及一種抗癌劑作為第二活性成分的產(chǎn)品，作為用于同時(shí)、分開或依序用于治療患有癌癥病患的組合制劑。
其它藥劑及p53-MDM2抑制劑可同時(shí)(例如在分開或在單一組合物中)或以任何順序依序給藥。在后者情況中，兩種化合物將在一期間內(nèi)以足以確保達(dá)成有利或協(xié)同作用的用量及方式給藥。應(yīng)理解對(duì)組合中各組分的給藥的優(yōu)選方法和順序及各自的劑量和療法將依賴于被給予的特殊的其它藥劑及p53-MDM2抑制劑、其其給藥途徑、待治療的特殊腫瘤及待治療的特殊宿主而定。給藥的最適方法和順序及劑量和療法可容易地由本領(lǐng)域技術(shù)人員利用傳統(tǒng)方法及參考本文所列出的信息決定。
鉑配位化合物有利的給藥劑量為每平方米體表面積1至500mg(mg/m2)，例如50至400mg/m2，特別是對(duì)順鉑而言每療程劑量為約75mg/m2，而對(duì)卡鉑而言每療程劑量為約300mg/m2。
紫杉醇化合物有利的給藥劑量為每平方米體表面積50至400mg(mg/m2)，例如75至250mg/m2，特別是對(duì)太平洋紫杉醇而言每療程劑量為約175至250mg/m2，而對(duì)歐洲紫杉醇而言每療程劑量為約75至150mg/m2。
喜樹堿化合物有利的給藥劑量為每平方米體表面積0.1至400mg(mg/m2)，例如1至300mg/m2，特別是對(duì)伊立替康而言每療程劑量為約100至350mg/m2，而對(duì)托泊替康而言每療程劑量為約1至2mg/m2。
抗腫瘤鬼臼毒素衍生物有利的給藥劑量為每平方米體表面積30至300mg(mg/m2)，例如50至250mg/m2，特別是對(duì)依托泊苷而言每療程劑量為約35至100mg/m2，而對(duì)替尼泊苷而言每療程劑量為約50至250mg/m2。
抗腫瘤長(zhǎng)春花生物堿有利的給藥劑量為每平方米體表面積2至30mg(mg/m2)，特別是對(duì)長(zhǎng)春堿而言每療程劑量為約3至12mg/m2，對(duì)長(zhǎng)春新堿而言每療程劑量為約1至2mg/m2，而對(duì)長(zhǎng)春瑞濱而言每療程劑量為約10至30mg/m2。
抗腫瘤核苷衍生物有利的給藥劑量為每平方米體表面積200至2500mg(mg/m2)，例如700至1500mg/m2，特別是對(duì)5-FU而言每療程劑量為約200至500mg/m2，對(duì)吉西他濱而言每療程劑量為約800至1200mg/m2及對(duì)卡培他濱而言每療程劑量為約1000至2500mg/m2。
烷基化試劑如氮芥子氣或亞硝基尿脲有利的給藥劑量為每平方米體表面積100至500mg(mg/m2)，例如120至200mg/m2，特別是對(duì)環(huán)磷酰胺而言每療程劑量為約100至500mg/m2，對(duì)苯丁酸氮芥而言每療程劑量為約0.1至0.2mg/kg，對(duì)卡莫司汀而言每療程劑量為約150至200mg/m2，及對(duì)洛莫司汀而言每療程劑量為約100至150mg/m2。
抗腫瘤蒽環(huán)類衍生物有利的給藥劑量為每平方米體表面積10至75mg(mg/m2)，例如15至60mg/m2，特別是對(duì)多柔比星而言每療程劑量為約40至75mg/m2，對(duì)柔紅霉素而言每療程劑量為約25至45mg/m2，及對(duì)伊達(dá)比星而言每療程劑量為約10至15mg/m2。
曲妥單抗有利的給藥劑量為每平方米體表面積1至5mg(mg/m2)，特別是每療程2至4mg/m2。
抗雌激素劑有利的給藥劑量為每日約1至100mg，依賴于特殊的藥劑及欲治療的癥狀而定。他莫昔芬有利地以5至50mg，優(yōu)選10至20mg的劑量一天兩次地經(jīng)口給藥，持續(xù)治療足夠的時(shí)間以達(dá)到并維持治療效果。托瑞米芬有利地以約60mg的劑量一天一次地經(jīng)口給藥。阿那曲唑有利地以約1mg的劑量一天一次地經(jīng)口給藥。屈洛昔芬有利地以約20-100mg的劑量一天一次地經(jīng)口給藥。雷洛昔芬有利地以約60mg的劑量一天一次地經(jīng)口給藥。依西美坦有利地以約25mg的劑量一天一次地經(jīng)口給藥。
這些劑量可以每療程給藥例如一次、二次或多次，其例如可每隔7、14、21或28天重復(fù)。
式(I)化合物、其藥學(xué)上可接受的酸加成鹽及立體異構(gòu)體形式可具有有價(jià)值的診斷特性，因?yàn)槠淇捎脕?lái)檢測(cè)或識(shí)別生物樣品中的p53-MDM2相互作用，包含檢測(cè)或測(cè)量標(biāo)記化合物和/或p53和/或MDM2和/或其它分子、肽、蛋白質(zhì)、酶或受體間的絡(luò)合物的形成。
檢測(cè)或識(shí)別方法可使用用標(biāo)記劑如放射性同位素、酶、螢光物質(zhì)、發(fā)光物質(zhì)等標(biāo)記的化合物。放射性同位素的實(shí)例包括125I、131I、3H及14C。酶通常通過(guò)結(jié)合適當(dāng)?shù)幕|(zhì)(其反過(guò)來(lái)催化可檢測(cè)的反應(yīng))而使成為可檢測(cè)的。其實(shí)例包括例如β-半乳糖苷酶、β-葡萄糖苷酶、堿性磷酸酶、過(guò)氧化酶及蘋果酸鹽去氫酶，優(yōu)選為辣根過(guò)氧化酶。發(fā)光物質(zhì)包括例如魯米諾、魯米諾衍生物、螢光素、水母素及螢光素酶。生物樣品可被限定為體組織或體液。體液的實(shí)例為腦脊髓液、血液、血漿、血清、尿液、痰、唾液等。
下列實(shí)施例舉例說(shuō)明本發(fā)明。
實(shí)驗(yàn)部分下文中，“DMF”被定義為N，N-二甲基甲酰胺，“DCM”被定義為二氯甲烷，“DIPE”被定義為二異丙醚，“EtOAc”被定義為乙酸乙酯，“EtOH”被定義為乙醇，“EDC”被定義為N′-(乙基羰亞胺?；?-N，N-二甲基-1，3-丙二胺，一氫氯化物，“MeOH”被定義為甲醇，“THF”被定義為四氫呋喃，“HOBT”被定義為1-羥基苯并三唑。
A.中間體化合物的制備實(shí)施例A1a)中間體1的制備 在210℃攪拌1-氟-4-硝基-苯(0.0142mol)、1H-吲哚-3-乙胺(0.0129mol)及N-乙基-N-(1-甲基乙基)-2-丙胺(0.032mol)的混合物18小時(shí)，然后使其回到室溫并傾析。殘余物被吸收在乙腈/水中。過(guò)濾沉淀物，以乙醚清洗并干燥，產(chǎn)生2.3g(64％)的中間體1。
b)中間體2的制備
在室溫將中間體1(0.0078mol)和阮內(nèi)鎳(2.2g)在EtOH(50ml)中的混合物在3巴的壓力下氫化3小時(shí)，然后通過(guò)硅藻土(Celite)過(guò)濾。以DCM/MeOH清洗硅藻土。蒸發(fā)濾液。殘余物被吸收在DCM中，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑，產(chǎn)生1.88g(95％)的中間體2。
實(shí)施例A2a)中間體3的制備 在210℃攪拌2-乙氧基-1-甲氧基-1-硝基-苯(0.009mol)、1H-吲哚-3-乙胺(0.009mol)及N-乙基-N-(1-甲基乙基)-2-丙胺(0.0228mol)的混合物24小時(shí)，然后使其回到室溫，在DCM/MeOH中吸收并干燥。殘余物被吸收在DCM(少量)中并通過(guò)經(jīng)硅膠(35-70微米)的柱色譜純化(洗脫液環(huán)己烷/DCM 30/70)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生0.6g(20％)的中間體3。
b)中間體4的制備 在室溫將中間體3(0.002mol)和H2/阮內(nèi)鎳(0.6g)在MeOH(100ml)中的混合物在3巴的壓力下氫化1小時(shí)30分鐘，然后通過(guò)硅藻土過(guò)濾。以DCM/MeOH清洗硅藻土。蒸發(fā)濾液。殘余物被吸收在DCM/MeOH(少量)中，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑，產(chǎn)生0.45g(83％)的中間體4。
實(shí)施例A3
a)中間體5的制備 在回流下攪拌N-3-吡啶基-乙酰胺(0.038mol)、1-氟-4-硝基-苯(0.05mol)、氯化銅(I)(0.0038mol)及碳酸鉀(0.076mol)在二甲苯中的混合物18小時(shí)，然后使其回到室溫。加入水。使混合物通過(guò)硅藻土過(guò)濾。以DCM清洗硅藻土。蒸發(fā)濾液。殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(35-70微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH/NH4OH 97/3/0.1)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生6.4g(65％)的中間體5。
b)中間體6的制備 添加氫氧化鈉(濃縮的)(10ml)至中間體5(0.025mol)在EtOH(80ml)中的混合物中。攪拌混合物并回流2小時(shí)，然后使其回到室溫。加入水。攪拌混合物15分鐘，然后過(guò)濾。殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(70-200微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH 100/0至95/5)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生1.5g(28％)的中間體6。
c)中間體7的制備 在室溫將中間體6(0.007mol)和阮內(nèi)鎳(1.5g)在MeOH(30ml)和THF(10ml)中的混合物在3巴的壓力下氫化1小時(shí)，然后通過(guò)硅藻土過(guò)濾。以DCM/MeOH清洗硅藻土。蒸發(fā)濾液。殘余物被吸收在DCM中。分離有機(jī)層，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑，產(chǎn)生1.2g(92％)的中間體7。
實(shí)施例A4中間體8的制備 于氮?dú)饬飨?，?H-吲哚-3-丙酸(0.0264mol)，然后是1-羥基苯并三唑(0.0344mol)，然后是N′-(乙基羰亞胺?；?-N，N-二甲基-1，3-丙二胺，一氫氯化物(＝EDCI)(0.0344mol)添加至1，4-苯二胺(0.137mol)在THF(200ml)和DCM(200ml)中的混合物中。在室溫下攪拌混合物24小時(shí)，倒入水中并以DCM萃取。分離有機(jī)層，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(20-45微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH/NH4OH 97/3/0.5)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生1.75g(24％)的中間體8。
實(shí)施例A5a)中間體9的制備 在200℃攪拌1-氟-4-硝基-苯(0.0025mol)、1-甲基-1H-吲哚-3-乙胺(0.0023mol)及N-乙基-N-(1-甲基乙基)-2-丙胺(0.0057mol)的混合物2小時(shí)，然后使其回到室溫。添加水及DCM。分離有機(jī)層，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。殘余物(0.8g)通過(guò)經(jīng)硅膠(35-70微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM 100)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)。殘余物(0.45g)被吸收在DIPE中。過(guò)濾沉淀物并干燥，產(chǎn)生0.33g(66％)的中間體9。
b)中間體10的制備
在室溫將中間體9(0.0011mol)和阮內(nèi)鎳(0.4g)在MeOH(20ml)中的混合物在3巴的壓力下氫化1小時(shí)，然后通過(guò)硅藻土過(guò)濾。以DCM/MeOH清洗硅藻土。蒸發(fā)濾液。殘余物被吸收在DCM中。分離有機(jī)層，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑，產(chǎn)生0.305g(97％)的中間體10。
實(shí)施例A6a)中間體11的制備 在210℃攪拌4-氟-苯腈(0.071mol)、1H-吲哚-3-乙胺(0.071mol)及N-乙基-N-(1-甲基乙基)-2-丙胺(0.1775mol)的混合物16小時(shí)，然后使其回到室溫并吸收在DCM/MeOH中。以3N的HCl清洗有機(jī)層，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。收集殘余物于乙醚/乙腈中。過(guò)濾沉淀物并干燥，產(chǎn)生8.07g(43％)的中間體11，熔點(diǎn)144℃。
b)中間體12的制備 攪拌中間體11(0.0115mol)和氫氧化鈉(0.17mol)在EtOH(50ml)和水(50ml)中的混合物并回流18小時(shí)，然后使其回到室溫。將溶劑蒸發(fā)。殘余物被吸收在3N氫氧化鈉中。以DCM清洗水層并酸化直到獲得pH5為止。過(guò)濾沉淀物并干燥，產(chǎn)生1.06g(35％)的中間體12，熔點(diǎn)225℃。
c)中間體13的制備
攪拌中間體12(0.0037mol)、4-吡啶胺(0.0037mol)、2-氯-1-甲基-吡啶_碘化物(0.0113mol)及三乙胺(0.015mol)在乙腈(100ml)中的混合物并回流90分鐘，然后使其回到室溫。蒸發(fā)溶劑。殘余物被吸收在DCM/MeOH中。以碳酸鉀10％清洗有機(jī)層，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑直到干燥為止。殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(35-70微米)的閃蒸柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH/NH4OH 95/5/0.1)。收集兩個(gè)級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生0.06g F1和0.08g F2。F1由乙醚/乙腈結(jié)晶。過(guò)濾沉淀物并干燥，產(chǎn)生第一批0.032g(24％)的中間體13。將F2及母液層合并，并由乙醚/乙腈結(jié)晶。過(guò)濾沉淀物并干燥，產(chǎn)生第二批0.105g(10％)的中間體13，熔點(diǎn)200℃。
實(shí)施例A7中間體14的制備 按照與方法6(見實(shí)施例A13)類似的程序，由1-(4-氯-2-吡啶基)-乙酮(227mg，0.0015mol)起始并添加三乙胺(0.22ml)。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液EtOAc)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生256mg(52％)的中間體14，為淡黃色油。
實(shí)施例A8中間體15的制備
按照與方法4(見實(shí)施例A22/22)類似的程序，由1-哌嗪甲酸芐基酯(1.3ml，0.0069mol)及4-氯-2-吡啶甲醇(500mg，0.0034mol)起始。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH 95/5)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生840mg(70％)的中間體15，為橙色油。
實(shí)施例A9中間體16的制備 按照與方法4(見實(shí)施例A22/22)類似的程序，由4-氨基-丁-1-醇(310mg，0.0021mol)和4-氯-2-吡啶甲醇(300mg，0.0021mol)起始。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH 85/15)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生55mg(17％)的中間體16，為黃色油。
實(shí)施例A10中間體17的制備 按照與方法5(見實(shí)施例A22/34)類似的程序，由4-(2-氨基-乙基)-哌嗪-1-甲酸叔丁基酯(579mg，0.0025mol)和4-氯-2-吡啶甲醛(325mg，0.0023mol)起始。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH 90/10)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生425mg(53％)的中間體17，為黃色油。
實(shí)施例A11中間體18的制備 按照與方法5(見實(shí)施例A22/34)類似的程序，由3-氨基-丙酸甲酯氫氯化物(351mg，0.0025mol)和4-氯-2-吡啶甲醛(325mg，0.0023mol)起始并添加三乙胺(0.35ml，0.0025mol)。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH 95/5)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生160mg(30％)的中間體18，為黃色油。
實(shí)施例A12中間體19的制備 按照與方法3(見實(shí)施例A22/20)類似的程序，由溴-乙酸甲酯(0.26ml，0.0021mol)和4-氯-2-吡啶甲醇(300mg，0.0021mol)起始。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液AcOEt/環(huán)己烷60/40)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生170mg(38％)的中間體19，為黃色油。
實(shí)施例A13中間體20的制備
方法6在室溫下將4-氨基-1-丁醇(0.13ml，0.0014mol)添加至1-(4-氯-2-吡啶基)-乙酮(200mg，0.0013mol)、對(duì)-甲苯磺酸(123mg，0.00065mol)及3_分子篩在MeOH(4ml)中的混合物中。在室溫下攪拌混合物6小時(shí)，冷卻至0℃，并緩慢添加硼氫化鈉(98mg，0.0026mol)。在室溫下攪拌混合物18小時(shí)。過(guò)濾掉分子篩，將混合物倒入水中并蒸發(fā)溶劑。以碳酸氫鈉的飽和溶液堿化水層，并以DCM萃取3次。分離有機(jī)層，以鹽水清洗，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH95/5)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生269mg(91％)的中間體20，為黃色油。
實(shí)施例A14中間體21的制備 于氬氣下，在室溫中將α-(苯基甲基)-1H-吲哚-3-乙酸(94mg，0.00035mol)和1，1-羰基二咪唑(59mg，0.00036mol，逐份添加)在DCM(1ml)中的混合物攪拌3小時(shí)。添加N，O-二甲基羥基胺氫氯化物(36mg，0.00037mol)，并在室溫下再攪拌混合物3個(gè)小時(shí)，冷卻至0℃，并倒入水中。以氫氧化鈉的4N溶液調(diào)整pH至10，并以EtOAc萃取水層。分離有機(jī)層、以3N鹽酸溶液清洗，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液EtOAc/環(huán)己烷50/50)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生52mg(47％)的中間體21。
實(shí)施例A15a)中間體22的制備 將4-二甲基氨基吡啶(261mg，0.0021mol)和二碳酸二叔丁基酯(di-tert-butyldicarbonate)(14.0g，0.064mol)添加至中間體1(3.0g，0.011mol)在DCM(130ml)中的溶液中。在室溫下攪拌混合物5小時(shí)。通過(guò)添加水使反應(yīng)結(jié)束，并以DCM萃取2次。連續(xù)以碳酸氫鈉的飽和溶液及以鹽水清洗有機(jī)層，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液EtOAc/環(huán)己烷10/90至20/80)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生4.65g(90％)的中間體22，為黃色油。
b)中間體23的制備 將阮內(nèi)鎳(3g)添加至中間體22(4.7g，0.0097mol)在乙醇(15ml)和THF(15ml)中的溶液中。在1個(gè)大氣壓的氫中攪拌反應(yīng)混合物16小時(shí)。為完成反應(yīng)，添加阮內(nèi)鎳(1g)并在1個(gè)大氣壓的氫中再攪拌混合物4個(gè)小時(shí)。使混合物通過(guò)硅藻土墊過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液EtOAc/環(huán)己烷10/90至20/80)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生4.0g(92％)的中間體23，為黃色泡沫。
實(shí)施例A16
a)中間體24的制備 將溴(0.0104mol)，然后是亞硝酸鈉(0.0362mol)在水(3ml)中的溶液在-10℃滴加至6，7-二氫-5H-1-吡啶-4-胺(0.0112mol)在含水溴化氫(48％)(5ml)中的混合物中。使混合物回到20℃。添加冰。以濃氫氧化鈉堿化混合物并以EtOAc萃取。分離有機(jī)層，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑，產(chǎn)生2g(90％)的中間體24。
b)中間體25的制備 將間氯過(guò)苯甲酸(0.012mol)添加至中間體24(0.01mol)在DCM(15ml)中的混合物中。在室溫下攪拌混合物12小時(shí)。添加3N氫氧化鈉和水。以DCM萃取混合物3次。以水清洗有機(jī)層，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑，產(chǎn)生1.85g(86％)的中間體25。
c)中間體26的制備 在100℃攪拌中間體25(0.0086mol)在乙酸酐(18ml)中的混合物30分鐘，然后冷卻至室溫并蒸發(fā)。殘余物被吸收在NaHCO3及EtOAc中并通過(guò)硅藻土過(guò)濾。以EtOAc清洗硅藻土。分離有機(jī)層，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑，產(chǎn)生1.63g(73％)的中間體26。
d)中間體27的制備
在室溫下攪拌中間體26(0.0074mol)在MeOH(10ml)和3N氫氧化鈉(80ml)中的混合物30分鐘，然后在80℃攪拌10分鐘，然后使回到室溫。蒸發(fā)MeOH。以DCM萃取混合物2次，然后以飽和NaCl清洗。分離有機(jī)層，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑，產(chǎn)生1.02g(64％)的中間體27。
實(shí)施例A17a)中間體28的制備 將溴(1.3ml)，然后是亞硝酸鈉(3.3g)在水(4ml)中的溶液在-10℃滴加至5，6，7，8-四氫-4-喹啉胺(0.0135mol)在含水溴化氫(48％)(6.7ml)中的溶液中。使混合物回到20℃。倒出于冰上，以濃氫氧化鈉堿化并以EtOAc萃取。分離有機(jī)層，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑，產(chǎn)生2.2g(77％)的中間體28。
b)中間體29的制備 將間氯過(guò)苯甲酸(0.0125mol)添加至中間體28(0.0104mol)在DCM(20ml)中的混合物中。在室溫下攪拌混合物12小時(shí)。添加3N氫氧化鈉和冰。以DCM萃取混合物2次。將有機(jī)層干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑，產(chǎn)生3g(100％)的中間體29。
c)中間體30的制備
在100℃攪拌中間體29(0.0086mol)在乙酸酐(22ml)中的混合物30分鐘，然后冷卻至室溫并蒸發(fā)。殘余物被吸收在飽和NaHCO3及EtOAc中。攪拌混合物30分鐘。分離有機(jī)層，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑，產(chǎn)生3.4g(100％)的中間體30。
d)中間體31的制備 在室溫下攪拌中間體30(0.0104mol)在MeOH(18ml)和3N氫氧化鈉(150ml)中的混合物30分鐘，然后在80℃攪拌10分鐘。蒸發(fā)MeOH。以DCM萃取混合物2次。以飽和NaCl清洗有機(jī)層，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑，產(chǎn)生1.84g(77％)的中間體31。
實(shí)施例A18a)中間體32的制備 在210℃攪拌2-乙氧基-4-硝基茴香醚(0.0107mol)、6-甲氧基色胺(0.0107mol)及二異丙基乙胺(0.0268mol)的混合物5小時(shí)，然后倒出于冰上并以DCM萃取。分離有機(jī)層，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(15-40微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM100％)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生0.85g(22％)的中間體32。
b)中間體33的制備
在室溫將中間體32(0.0023mol)和阮內(nèi)鎳(0.85g)在MeOH(42ml)和THF(42ml)中的混合物在3巴壓力下氫化2小時(shí)，然后通過(guò)硅藻土過(guò)濾。蒸發(fā)濾液，產(chǎn)生0.74g(95％)的中間體33。
實(shí)施例A19a)中間體34的制備 在0℃將草酰氯(0.012mol)滴加至5-氰基吲哚(0.007mol)在乙醚(21ml)中的溶液中。將混合物于0℃攪拌5小時(shí)，然后在室溫下攪拌過(guò)夜。過(guò)濾沉淀物、以乙醚清洗并干燥，產(chǎn)生1.454g(73％)的中間體34。
b)中間體35的制備 在5℃將中間體34(0.0027mol)在DCM(12ml)中的溶液滴加至N-吡啶-4-基-苯-1，4-二胺(0.022mol)和N，N-二異丙基乙胺(0.0034mol)在DCM(4ml)中的溶液中。攪拌混合物并回流一個(gè)周末，然后冷卻至室溫。過(guò)濾沉淀物并干燥。由iPrOH結(jié)晶殘余物。過(guò)濾沉淀物并干燥，產(chǎn)生0.756g的粗產(chǎn)物。此級(jí)分通過(guò)經(jīng)kromasil(5微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH/NH4OH 97/3/0.3至87/13/1.3)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)。殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(15-40微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH/NH4OH 90/10/0.1至87/13/0.1)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生0.098g(20％)的中間體35，熔點(diǎn)＞264℃。
實(shí)施例A20a)中間體36的制備 在210℃攪拌1H-苯并咪唑-1-乙胺(0.011mol)、1-氟-4-硝基-苯(0.011mol)及二異丙基乙胺(0.034mol)的混合物30分鐘。蒸發(fā)二異丙基乙胺。將沉淀物溶解在DCM/MeOH中。以10％碳酸鉀清洗有機(jī)層，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物(3.2g)通過(guò)經(jīng)硅膠(15-40微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH/NH4OH 98/2/0.5)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)。由乙腈結(jié)晶殘余物(2.1g，77％)。過(guò)濾沉淀物并干燥，產(chǎn)生1.3g(47％)的中間體36，熔點(diǎn)144℃。
b)中間體37的制備 在室溫將中間體36(0.006mol)和阮內(nèi)鎳(2g)在MeOH(20ml)中的混合物在3巴的壓力下氫化，然后通過(guò)硅藻土過(guò)濾。以DCM/MeOH清洗硅藻土。蒸發(fā)濾液，產(chǎn)生1.7g(100％)的中間體37。
實(shí)施例A21a)中間體38的制備 在210℃攪拌DL-色胺酸甲酯(0.0078mol)、1-氟-4-硝基-苯(0.0078mol)及二異丙基乙胺(0.0353mol)的混合物4小時(shí)，然后吸收在DCM/MeOH中并添加3N HCl。攪拌混合物15分鐘。以飽和NaHCO3清洗有機(jī)層，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(35-70微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM 100％，然后是DCM/MeOH99/1)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生0.75g(28％)的中間體38。
b)中間體39的制備 在室溫將中間體38(0.0022mol)和阮內(nèi)鎳(0.75g)在MeOH(100ml)中的混合物在3巴的壓力下氫化1小時(shí)，然后通過(guò)硅藻土過(guò)濾。蒸發(fā)濾液，產(chǎn)生0.65g(96％)的中間體39。
c)中間體40的制備 在120℃攪拌中間體39(0.139mol)和4-溴吡啶氫氯化物(0.139mol)在乙酸(450ml)中的混合物3小時(shí)，倒出于冰上，以濃氫氧化鈉堿化并以DCM/MeOH(少量)萃取。分離有機(jī)層，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。殘余物(62.7g)通過(guò)經(jīng)kromasil(20-45微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH/NH4OH 93/7/0.5)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生22g(41％)的中間體40。
d)中間體41的制備 在氮?dú)饬飨?，將氫氧化鋰單水合?0.112mol)于0℃逐份添加至中間體40(0.056mol)在MeOH(86ml)和水(34.4ml)中的溶液中。在室溫下攪拌混合物過(guò)夜，然后蒸發(fā)直到干燥，產(chǎn)生22g(定量產(chǎn)率)的中間體41。
實(shí)施例A22
1)中間體42的制備 在-78℃于氬氣下，將丁基鋰在己烷(3.4ml，0.0081mol)中的2.5N溶液添加至二異丙基胺(0.85ml，0.0088mol)在THF(6ml)中的溶液中。在-78℃攪拌混合物30分鐘。逐份地添加4-氯-3-甲基吡啶氫氯化物(630mg，0.0038mol)并將混合物在-78℃攪拌1小時(shí)。滴加碳酸二乙酯(1.0ml，0.0096mol)并將混合物在-78℃再攪拌1小時(shí)，然后升溫至室溫并攪拌2.5小時(shí)。通過(guò)緩慢添加水使反應(yīng)結(jié)束，并以EtOAc萃取2次。分離有機(jī)層，以鹽水清洗，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液EtOAc/MeOH 100/0，然后90/10)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生74mg(9％)的中間體42。
2)中間體43的制備 在室溫于氬氣下，將磷基乙酸三乙酯(0.075ml，0.00038mol)滴加至氫化鈉(10.6mg，0.00044mol)在THF(5ml)中的混合物中。在室溫下攪拌混合物20分鐘，然后滴加4-氯-3-吡啶甲醛(50mg，0.00035mol)在THF(3ml)中的溶液。將混合物在室溫下攪拌16小時(shí)，然后倒入在水中，以EtOAc萃取2次。分離有機(jī)層，以鹽水清洗，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑，產(chǎn)生77mg(88％)的中間體43。
3)中間體44的制備 在-78℃于氬氣下，將丁基鋰在己烷(0.80ml，0.0020mol)中的2.5N溶液添加至二異丙基胺(0.28ml，0.0020mol)在THF(2ml)中的溶液中。在-78℃攪拌混合物10分鐘，然后滴加4-氯吡啶(219mg，0.0019mol)在THF(1ml)中的溶液。將混合物在-78℃攪拌1.25小時(shí)，然后滴加丙醛(0.14ml，0.0019mol)。將混合物在-78℃攪拌30分鐘，最后在室溫下攪拌4小時(shí)，倒入水中，并以EtOAc萃取。分離有機(jī)層，以鹽水清洗，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液EtOAc/環(huán)己烷90/10)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生147mg(44％)的中間體44。
4)中間體45的制備 方法2在-30℃于氬氣下，將3M的乙基溴化鎂在乙醚中的溶液(1.1ml，0.0032mol)添加至在THF(4ml)中的4-氯-2-吡啶甲酸甲酯溶液(200mg，0.0012mol)中。在75℃攪拌混合物2小時(shí)30分鐘，冷卻至0℃并以水淬火。以碳酸氫鈉的飽和溶液使所得混合物成為堿性并以EtOAc萃取2次。以鹽水清洗有機(jī)層，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液EtOAc/環(huán)己烷10/90)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生54mg(23％)的中間體45，為褐色油。
5)中間體46的制備 在0℃于氬氣下，將甲烷磺酰氯(98μl，0.0013mol)滴加至4-氯-2-吡啶甲胺(150mg，0.0011mol)和三乙胺(177μl，0.0013mol)在DCM(4ml)中的溶液中。在室溫下攪拌混合物30分鐘。以碳酸氫鈉的飽和溶液結(jié)束反應(yīng)并以DCM萃取2次。將有機(jī)相干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液EtOAc)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生82mg(35％)的中間體46，為橙色油。
6)中間體47的制備 方法7在0℃于氬氣下，將環(huán)丙烷甲酰氯(115μl，0.0013mol)滴加至4-氯-2-吡啶甲胺(150mg，0.0011mol)和三乙胺(177μl，0.0013mol)在DCM(4ml)中的溶液中。在室溫下攪拌混合物15分鐘。以碳酸氫鈉的飽和溶液結(jié)束反應(yīng)并以DCM萃取2次。有機(jī)相經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液EtOAc)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生85mg(38％)的中間體47，為白色固體。
7)中間體48的制備 按照與方法7(見實(shí)施例A22/6)類似的程序，由4-氯-2-吡啶甲胺(150mg，0.0011mol)和氫肉桂酰氯(187μl，0.0013mol)起始。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液EtOAc)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生191mg(66％)的中間體48，為黃色固體。
8)中間體49的制備 按照與方法7(見實(shí)施例A22/6)類似的程序，由4-氯-2-吡啶甲胺(200mg，0.0014mol)和丙酰氯(146μl，0.0017mol)起始。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液EtOAc)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生126mg(45％)的中間體49，為無(wú)色油。
9)中間體50的制備 按照與方法7(見實(shí)施例A22/6)類似的程序，由4-氯-2-吡啶甲胺(150mg，0.0011mol)和苯基乙酰氯(168μl，0.0013mol)起始。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液EtOAc)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生124mg(45％)的中間體50，為白色固體。
10)中間體51及52的制備 方法1在0℃于氬氣下，將1.4M的環(huán)丙基溴化鎂在甲苯/THF(75/25)中的溶液滴加至4-氯-2-吡啶甲醛(377mg，0.0027mol)在THF(4ml)中的溶液中。在0℃攪拌反應(yīng)混合物1小時(shí)，去除干冰浴并在室溫下攪拌混合物1小時(shí)。通過(guò)添加水使反應(yīng)混合物淬火并以EtOAc萃取2次。將有機(jī)層以鹽水清洗，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液環(huán)己烷/EtOAc 80/20)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生193mg(39％)的中間體51及29mg的中間體52。
11)中間體53的制備
按照與方法1(見實(shí)施例A22/10)類似的程序，由4-氯-2-吡啶甲醛(300mg，0.0021mol)和2.0M的異丙基氯化鎂在THF中的溶液(2.12ml，0.0042mol)起始。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液環(huán)己烷/EtOAc 80/20)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生165mg(42％)的中間體53，為褐色油。
12)中間體54的制備 按照與方法6(見實(shí)施例A13)類似的程序，由1-(4-氯-2-吡啶)-乙酮(298mg，0.0019mol)起始。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液環(huán)己烷/EtOAc 90/10)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生293mg(62％)的中間體54，為黃色油。
13)中間體55的制備 按照與方法6(見實(shí)施例A13)類似的程序，由1-(4-氯-2-吡啶)-乙酮(100mg，0.00064mol)起始。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH 85/15)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生50mg(45％)的中間體55，為黃色油。
14)中間體56的制備 按照與方法6(見實(shí)施例A13)類似的程序，由1-(4-氯-2-吡啶)-乙酮(100mg，0.00064mol)起始。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH 90/10)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生30mg(25％)的中間體56，為黃色油。
15)中間體57的制備 按照與方法6(見實(shí)施例A13)類似的程序，由1-(4-氯-2-吡啶)-乙酮(157mg，0.0010mol)起始。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH 95/5)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生134mg(49％)的中間體57，為黃色油。
16)中間體58的制備 按照與方法6(見實(shí)施例A13)類似的程序，由1-(4-氯-2-吡啶基)-乙酮(200mg，0.0013mol)起始。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH 95/5)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生281mg(66％)的中間體58，為黃色油。
17)中間體59的制備 按照與方法6(見實(shí)施例A13)類似的程序，由1-(4-氯-2-吡啶基)-乙酮(200mg，0.0013mol)起始并添加三乙胺(0.2ml)。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液EtOAc)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生80mg(25％)的中間體59，為黃色油。
18)中間體60的制備 按照與方法6(見實(shí)施例A13)類似的程序，由1-(4-氯-2-吡啶基)-乙酮(200mg，0.0013mol)起始。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH 95/5)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生176mg(68％)的中間體60，為淡黃色油。
19)中間體61的制備 按照與方法6(見實(shí)施例A13)類似的程序，由1-(4-氯-2-吡啶基)-乙酮(200mg，0.0013mol)起始。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液EtOAc)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生274mg(77％)的中間體61，為黃色油。
20)中間體62的制備 方法3在0℃于氬氣下，將在THF(3ml)中的4-氯-α-甲基-2-吡啶甲醇(200mg，0.0013mol)滴加至氫化鈉(60重量％于礦物油中)(56mg，0.0014mol)在THF(1ml)中的混合物中。將混合物加熱至70℃并攪拌3小時(shí)，然后冷卻至0℃，并滴加碘乙烷(0.102ml，0.0013mol)。將混合物加熱至70℃達(dá)2小時(shí)，冷卻至0℃，倒出于冰水上，以DCM萃取2次及以EtOAc萃取1次。將有機(jī)層分離，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液環(huán)己烷/EtOAc 90/10)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生106mg(45％)的中間體62，為褐色油。
21)中間體63的制備 按照與方法3(見實(shí)施例A22/20)類似的程序，由4-氯-α-甲基-2-吡啶甲醇(200mg，0.0013mol)起始。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液環(huán)己烷/EtOAc 90/10)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生85mg(39％)的中間體63，為淡黃色油。
22)中間體64的制備 方法4將4-氯-2-吡啶甲醇(400mg，0.0028mol)溶解于氯仿(24ml)中。添加硫酰氯(0.40ml，0.0056mol)和DMF(2滴)。在80℃攪拌混合物4小時(shí)。蒸發(fā)去除溶劑。將殘余物吸收回到MeOH(18ml)中并添加乙醇胺(1.38ml，0.014mol)。在80℃攪拌混合物4小時(shí)。蒸發(fā)去除溶劑。將殘余物倒入水中并以EtOAc萃取。分離有機(jī)層，以碳酸氫鈉的飽和溶液清洗，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH 85/15)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生310mg(60％)的中間體64，為橙色油。
23)中間體65的制備 按照與方法4(見實(shí)施例A22/22)類似的程序，由2-嗎啉-4-基-乙胺(0.45ml，0.0034mol)及4-氯-2-吡啶甲醇(200mg，0.0014mol)起始。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH 95/5)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生39mg(23％)的中間體65，為黃色油。
24)中間體66的制備 按照與方法4(見實(shí)施例A22/22)類似的程序，由33％的在EtOH(10ml)中的甲胺溶液和4-氯-2-吡啶甲醇(300mg，0.0021mol)起始。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/NH4OH 85/15/1)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生130mg(40％)的中間體66，為橙色油。
25)中間體67的制備 按照與方法4(見實(shí)施例A22/22)類似的程序，由2.0M的乙胺在THF中的溶液(3.5ml，0.0069mol)及4-氯-2-吡啶甲醇(200mg，0.014mol)起始。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH 85/15)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生45mg(19％)的中間體67，為橙色油。
26)中間體68的制備 按照與方法4(見實(shí)施例A22/22)類似的程序，由3-氨基-丙酸乙酯(2.45g，0.020mol)及4-氯-2-吡啶甲醇(600mg，0.0042mol)起始。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH 85/15)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生730mg(71％)的中間體68，為橙色液體。
27)中間體69的制備 將中間體68(350mg，0.0015mol)溶解在MeOH(5ml)中并冷卻至0℃。緩慢添加硼氫化鈉(300mg，0.0078mol)。在80℃攪拌混合物9小時(shí)。以水結(jié)束反應(yīng)并蒸發(fā)溶劑。將殘余物以EtOAc萃取。分離有機(jī)層，以碳酸氫鈉的飽和溶液清洗，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH85/15)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生70mg(23％)的中間體69，為無(wú)色油。
28)中間體70的制備 按照與方法4(見實(shí)施例A22/22)類似的程序，由氨基-乙腈(1.2g，0.013mol)及4-氯-2-吡啶甲醇(500mg，0.0034mol)起始。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH 95/5)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生160mg(25％)的中間體70，為橙色液體。
29)中間體71的制備 按照與方法4(見實(shí)施例A22/22)類似的程序，由N-甲基哌嗪(1.16ml，0.010mol)及4-氯-2-吡啶甲醇(300mg，0.0021mol)起始。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH 95/5)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生325mg(69％)的中間體71，為黃色油。
30)中間體72的制備
按照與方法4(見實(shí)施例A22/22)類似的程序，由二乙胺(1.45ml，0.014mol)及4-氯-2-吡啶甲醇(300mg，0.0021mol)起始。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH 95/5)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生300mg(43％)的中間體72，為黃色液體。
31)中間體73的制備 按照與方法4(見實(shí)施例A22/22)類似的程序，由3-氨基丙腈(1.02ml，0.014mol)及4-氯-2-吡啶甲醇(500mg，0.0034mol)起始。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH 95/5)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生180mg(27％)的中間體73，為黃色油。
32)中間體74的制備 按照與方法4(見實(shí)施例A22/22)類似的程序，由苯乙胺(0.52ml，0.0042mol)及4-氯-2-吡啶甲醇(300mg，0.0021mol)起始。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液EtOAc)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生110mg(22％)的中間體74，為無(wú)色油。
33)中間體75的制備
按照與方法4(見實(shí)施例A22/22)類似的程序，由3-苯基-丙胺(470mg，0.0035mol)及4-氯-2-吡啶甲醇(300mg，0.0021mol)起始。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH 85/15)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生90mg(17％)的中間體75，為橙色油。
34)中間體76的制備 方法5將4-氯-2-吡啶甲醛(200mg，0.0014mol)、N-(3-氨基丙基)嗎啉(224 mg，0.0015mol)、對(duì)甲苯磺酸(134mg，0.00070mol)及3_分子篩在室溫于氬氣下攪拌7小時(shí)。過(guò)濾掉分子篩，冷卻反應(yīng)混合物至0℃，并緩慢添加硼氫化鈉(107mg，0.0028mol)。在室溫下攪拌混合物17小時(shí)，倒入水中并以DCM萃取。分離有機(jī)層，以碳酸氫鈉的飽和溶液清洗，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH/NH385/15/3)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生230mg(60％)的中間體76，為黃色油。
35)中間體77的制備 按照與方法4(見實(shí)施例A22/22)類似的程序，由芐基胺(0.46ml，0.0042mol)及4-氯-2-吡啶甲醇(300mg，0.0021mol)起始。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液EtOAc/環(huán)己烷50/50)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生240mg(50％)的中間體77，為無(wú)色油。
36)中間體78的制備
按照與方法3(見實(shí)施例A22/20)類似的程序，由溴乙基甲基醚(0.13ml，0.0014mol)及4-氯-2-吡啶甲醇(200mg，0.0014mol)起始。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液AcOEt/環(huán)己烷30/70)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生67mg(24％)的中間體78，為黃色油。
37)中間體79的制備 按照與方法4(見實(shí)施例A22/22)類似的程序，由4-苯基-丁胺(0.55ml，0.0035mol)及4-氯-2-吡啶甲醇(250mg，0.0017mol)起始。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH 95/5)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生260mg(55％)的中間體79，為黃色油。
38)中間體80的制備 按照與方法3(見實(shí)施例A22/20)類似的程序，由(3-溴-丙基)-苯(0.27ml，0.0018mol)及4-氯-2-吡啶甲醇(200mg，0.0014mol)起始。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液AcOEt/環(huán)己烷10/90)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生57mg(16％)的中間體80，為無(wú)色油。
39)中間體81的制備
按照與方法3(cA22/20)類似的程序，由1-溴-2-乙氧基-乙烷(589mg，0.0052mol)及4-氯-2-吡啶甲醇(500mg，0.0034mol)起始。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液EtOAc/環(huán)己烷10/90)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生270mg(36％)的中間體81，為無(wú)色油。
40)中間體82的制備 按照與方法1(見實(shí)施例A22/10)類似的程序，由4-氯-2-吡啶甲醛(500mg，0.0035mol)起始。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液EtOAc/環(huán)己烷50/50)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生136mg(22％)的中間體82，為黃色油。
實(shí)施例A23a)中間體83的制備 將37％鹽酸溶液(14.3ml)添加至2-乙氧基-4-硝基-苯胺(10.5g，0.0577mol)在乙酸(210ml)的溶液中，并于室溫下攪拌混合物30分鐘。然后滴加亞硝酸鈉(4.4g，0.0635mol)在水(15ml)中的溶液，并在0℃攪拌混合物30分鐘。在0℃滴加碘化鉀(19.2g，0.1157mol)及碘(7.3g，0.0288mol)在水(70ml)中的冷溶液。在0℃攪拌混合物30分鐘及在室溫下攪拌16小時(shí)。過(guò)濾掉形成的沉淀物，以水清洗，然后溶解在DCM中。以碳酸氫鈉的飽和溶液清洗有機(jī)溶液，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑，產(chǎn)生13.7g(81％)的中間體83，為黃色固體。
b)中間體84的制備 將中間體83(700mg，0.0024mol)、6-甲氧基色胺(505mg，0.0026mol)、二氯[1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵]鈀(II)二氯甲烷加合物(78mg，0.00011mol)、1，1′-雙(二苯基膦基)二茂鐵(177mg，0.00032mol)及叔丁醇鈉(255mg，0.0026mol)在THF(95ml)中的混合物在100℃加熱3小時(shí)及在120℃1.5小時(shí)。在經(jīng)硅藻土墊過(guò)濾后，蒸發(fā)溶劑及將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生464mg(55％)的中間體84，為黃色固體。
c)中間體85的制備 在室溫將中間體84(見實(shí)施例A23/b)(773mg，0.0022mol)和阮內(nèi)鎳(50％水中料漿)在乙醇(8.5ml)和THF(6.8ml)中的混合物在1個(gè)大氣壓的氫中攪拌24小時(shí)。在經(jīng)硅藻土墊過(guò)濾后，蒸發(fā)溶劑，產(chǎn)生697mg(98％)的中間體85，為紫色泡沫。
實(shí)施例A24中間體86及87的制備
在80℃將3，4，5-三氯-噠嗪(200mg，0.0011mol)、中間體2(見實(shí)施例A1/b)(273mg，0.0011mol)及二異丙胺(0.38ml，0.0011mol)的混合物在2-丙醇(4.0ml)中攪拌1小時(shí)。蒸發(fā)溶劑，并將粗混合物吸收回到EtOAc。以碳酸氫鈉的飽和溶液及鹽水清洗有機(jī)層，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液EtOAc/環(huán)己烷50/50)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生179mg(41％)的中間體86及中間體87，為兩種噠嗪化合物的1/1混合物。
實(shí)施例A25a)中間體88的制備 攪拌4-環(huán)氧乙烷基-1-(苯基甲基)-哌啶(0.069mol)在MeOH(300ml)及NaOCH3(0.069mol)中的混合物并回流6小時(shí)。蒸發(fā)溶劑，然后將殘余物吸收在水中并以DCM萃取。分離有機(jī)層，經(jīng)干燥、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH98/2、90/10、85/15)。收集產(chǎn)物級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生5.0g(29％)的中間體88。
b)中間體89的制備
將中間體88(見實(shí)施例A25/a)(0.02mol)在MeOH(100ml)中的混合物以Pd/C 10％(1g)作為催化劑氫化。在吸收H2(1當(dāng)量)之后，過(guò)濾掉催化劑并蒸發(fā)濾液，產(chǎn)生3.18g(100％)的中間體89。
實(shí)施例A26a)中間體90的制備 按照與方法5(見實(shí)施例A22/34)類似的程序，由N-(2-氨基乙基)氨基甲酸芐基酯氫氯化物(475ml，0.0020mol)及4-氯-2-吡啶甲醛(265mg，0.0019mol)起始并添加三乙胺(0.29ml，0.0021mol)。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH 95/5)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生150mg(25％)的中間體90，為無(wú)色油。
B.最終化合物的制備實(shí)施例B1化合物1的制備 攪拌4-氯-喹啉(0.0009mol)及中間體2(0.001mol)在2-丙醇(5ml)中的混合物并回流6小時(shí)，然后使其回到室溫。蒸發(fā)溶劑。以10％碳酸鉀堿化殘余物，并以DCM萃取。分離有機(jī)層，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。殘余物(0.38g)通過(guò)經(jīng)硅膠(10微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH/NH4OH 97/3/0.5)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)。添加2-丙醇及HCl/2-丙醇。攪拌混合物30分鐘，并使其回到室溫。過(guò)濾沉淀物并以乙醚干燥，產(chǎn)生0.09g(23％)的化合物1，熔點(diǎn)170℃。
實(shí)施例B2化合物2的制備 在110℃，攪拌4-溴-吡啶氫氯化物(0.0044mol)及中間體4(0.0044mol)在乙酸(13ml)中的混合物45分鐘，然后冷卻至室溫，倒入于冰水上，以碳酸鉀堿化并以DCM萃取。分離有機(jī)層，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。殘余物(1.4g)通過(guò)經(jīng)硅膠(15-40微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH/NH4OH 93/7/0.5)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)。將殘余物(0.38g)溶解于2-丙醇/乙醚并轉(zhuǎn)變成鹽酸鹽。過(guò)濾沉淀物并干燥，產(chǎn)生0.385g(20％)的化合物2，熔點(diǎn)150℃。
實(shí)施例B3化合物3的制備 在130℃攪拌4-氯-2(1H)-喹啉酮(0.0011mol)及中間體2(0.0016mol)的混合物5小時(shí)，然后在160℃攪拌過(guò)夜并使其回到室溫。殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(35-70微米)(的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH/NH4OH 95/5/0.1)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)。將殘余物(0.12g)吸收在乙腈中。過(guò)濾沉淀物并干燥，產(chǎn)生0.045g(10％)的化合物3，熔點(diǎn)238℃。
實(shí)施例B4化合物4的制備 在100℃攪拌4-氯-6，7-二氫-5H-環(huán)戊烷[b]吡啶(0.0006mol)及中間體2(0.0006mol)在乙酸(2ml)中的混合物30分鐘，然后使其回到室溫。添加水，然后是氫氧化鈉(3N)并以DCM萃取形成的混合物。分離有機(jī)層，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。所獲得的殘余物(0.233g)通過(guò)經(jīng)硅膠(10微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH/NH4OH97/3/0.3)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生0.025g(11％)的化合物4。
實(shí)施例B5化合物5的制備 在100℃攪拌4-氯-5，6，7，8-四氫-喹啉(0.0009mol)及中間體2(0.0009mol)在DMF(3ml)中的混合物3小時(shí)，然后使其回到室溫。將混合物倒入冰水及氫氧化鈉(3N)中，然后以DCM萃取。分離有機(jī)層，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。所獲得的殘余物(0.49g)通過(guò)經(jīng)硅膠(5微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH/NH4OH 99/1/0.05至80/20/0.5)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生0.054g(16％)的化合物5。
實(shí)施例B6
化合物6的制備 在0℃于N2氣流下，將氫化鋁鋰(0.0032mol)逐份添加至N-甲氧基-N-甲基-1H-吲哚-3-乙酰胺(0.0032mol)在THF(5ml)中的混合物中。攪拌混合物1小時(shí)。添加硫酸氫鉀(5％)。以乙醚萃取混合物。分離有機(jī)層，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。此混合物必須立即使用。將在MeOH(5ml)中的中間體7(0.0016mol)、在聚合物載體(Amberlite IRA-300 BH3CN形式-容量BH3CN-＝2.5/4.5mmol/g樹脂)上的氰基硼氫化物(0.0022mol)及乙酸(數(shù)滴)添加至所獲得的混合物中。攪拌混合物12小時(shí)。過(guò)濾沉淀物并干燥。殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(15-40微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH/NH4OH 97/3/0.3)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)。將殘余物(0.14g)吸收在HCl/2-丙醇中。過(guò)濾沉淀物并干燥，產(chǎn)生0.125g(29％)的化合物6，熔點(diǎn)160℃。
實(shí)施例B7化合物7的制備 攪拌N-4-吡啶基-1，4-苯二胺(0.0016mol)和6-甲氧基-1H-吲哚-3-甲醛(0.0016mol)在MeOH(20ml)中的混合物中并回流過(guò)夜。添加四氫硼酸鈉(0.0016mol)。在室溫下攪拌混合物4小時(shí)，倒入于冰上并以DCM萃取。分離有機(jī)層，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。殘余物通過(guò)經(jīng)kromasil(10微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH/NH4OH 92/8/0.5，然后是甲苯/2-丙醇/NH4OH 85/15/1)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)。由乙腈結(jié)晶殘余物。過(guò)濾沉淀物并干燥，產(chǎn)生0.131g(23％)的化合物7，熔點(diǎn)145℃。
實(shí)施例B8化合物8的制備 在120℃攪拌4-溴-吡啶氫氯化物(0.0069mol)及中間體8(0.008mol)在乙酸(7ml)中的混合物1小時(shí)，然后使其回到室溫。添加水。以碳酸鉀堿化混合物并以DCM/MeOH(95/5)萃取2次。分離有機(jī)層，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(35-70微米)的閃速柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH/NH4OH 92/8/0.5)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生1.6g(65％)的化合物8，熔點(diǎn)208℃。
實(shí)施例B9化合物9的制備 將4-吡啶甲醛(0.0005mol)，然后是在聚合物載體(Amberlite IRA-300 BH3CN形式-容量BH3CN-＝2.5/4.5mmol/g樹脂)上的氰基硼氫化物(0.0004mol)，然后是乙酸(3滴)添加至中間體2(0.0004mol)在MeOH(10ml)中的混合物中。在室溫下攪拌混合物3小時(shí)。過(guò)濾沉淀物并以MeOH清洗。蒸發(fā)濾液。將殘余物(0.17g)溶解在MeOH(20ml)中，該殘余物為目標(biāo)化合物9和相應(yīng)的未被還原的中間體亞胺的混合物。逐份地添加四氫硼酸鈉(0.02g)。攪拌混合物30分鐘。添加水。部分蒸發(fā)MeOH。以EtOAc萃取混合物。以水清洗有機(jī)層，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。殘余物(0.05g)通過(guò)經(jīng)硅膠(10微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH/NH4OH 98/2/0.4)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)。將殘余物(0.034g)溶解于2-丙酮中并轉(zhuǎn)變成乙二酸鹽。過(guò)濾沉淀物并干燥，產(chǎn)生0.036g(16％)的化合物9，熔點(diǎn)132℃。
實(shí)施例B10化合物10的制備 在120℃攪拌4-溴-吡啶氫氯化物(0.001mol)及中間體10(0.0005mol)在乙酸(2ml)中的混合物1小時(shí)，然后使其回到室溫。添加冰，然后是3N氫氧化鈉。以DCM萃取混合物2次。分離有機(jī)層，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(10微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH/NH4OH 96/4/0.5)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)。將殘余物(0.064g，29％)溶解于2-丙醇/乙醚中并轉(zhuǎn)變成鹽酸鹽。過(guò)濾沉淀物并干燥，產(chǎn)生0.082g(29％)的化合物10，熔點(diǎn)＞250℃。
實(shí)施例B11化合物11的制備 將氫化鋁鋰(0.0145mol)添加至中間體13(0.0036mol)在THF(100ml)中的混合物中。攪拌混合物并回流3小時(shí)，然后使其回到室溫。添加EtOAc。添加最小量的水。將混合物通過(guò)硅藻土過(guò)濾。以EtOAc清洗硅藻土。分離有機(jī)層，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。殘余物(1.1g)通過(guò)經(jīng)硅膠(15-40微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH/NH4OH 93/7/0.5)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)。由乙腈/乙醚中結(jié)晶殘余物(0.25g)。過(guò)濾沉淀物并干燥，產(chǎn)生0.11g(12％)的化合物11，熔點(diǎn)122℃。
實(shí)施例B12化合物86的制備 在100℃于氬氣下，攪拌4-氯-2-吡啶腈(154mg，0.0011mol)、中間體2(280mg，0.0011mol)和5N在2-丙醇中的鹽酸溶液(0.19ml，0.0011mol)在DMF(2ml)中的混合物24小時(shí)，然后冷卻至室溫并倒入水中。以飽和碳酸氫鈉使形成的混合物成為堿性，并以EtOAc萃取2次。連續(xù)以碳酸氫鈉的飽和溶液及以鹽水清洗有機(jī)層，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液EtOAc/環(huán)己烷50/50)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生130mg(33％)的化合物86，為米色泡沫。
實(shí)施例B13化合物87的制備 在105℃攪拌化合物86(110mg，0.00031mol)、疊氮化鈉(22mg，0.00034mol)和溴化鋅(70mg，0.00031mol)在水(1ml)和2-丙醇(0.25ml)中的混合物22小時(shí)，然后冷卻至室溫。添加0.25N的氫氧化鈉溶液(3ml)并在室溫下攪拌混合物1小時(shí)。過(guò)濾沉淀物，以MeOH、THF及1-丁醇清洗。蒸發(fā)有機(jī)層，并將形成的固體以MeOH清洗及干燥，產(chǎn)生26mg(21％)的化合物87，為米色固體，熔點(diǎn)210℃。
實(shí)施例B14化合物88的制備 按照與化合物86(方法B12)類似的程序，由中間體14(254mg，0.00076mol)及中間體2(191mg，0.00076mol)起始。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH/NH4OH 95/5/0.2)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生139mg(30％)的化合物88，為灰色泡沫。
實(shí)施例B15化合物89的制備 在室溫1個(gè)大氣壓氫下，攪拌化合物88(112mg，0.00020mol)和碳上鈀(10重量％)(43mg，0.000040mol)在MeOH(1ml)和EtOH(4ml)中的混合物26小時(shí)。在經(jīng)硅藻土過(guò)濾后，蒸發(fā)溶劑，將殘余物通過(guò)SCX柱色譜純化。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生27mg(33％)的化合物89，為灰色泡沫。
實(shí)施例B16化合物90的制備
按照與化合物86(方法B12)類似的程序，由中間體15(850mg，0.0024mol)及中間體2(561mg，0.0022mol)起始，在Biotage Initiator微波裝置中在120℃加熱混合物2小時(shí)。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH 95/5)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生680mg(56％)的化合物90，為褐色泡沫。
實(shí)施例B17化合物91的制備 將化合物90(200mg，0.00036mol)溶解在EtOH(10ml)及MeOH(10ml)中。添加碳上鈀(10重量％)(100mg)。在室溫下于氫中攪拌混合物24小時(shí)。在硅藻土上過(guò)濾混合物并以MeOH清洗。將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生140mg(92％)的化合物91，為綠色油。
實(shí)施例B18化合物92的制備
按照與化合物86類似的程序，由中間體90(150mg，0.00047mol)及中間體2(107mg，0.00042mol)起始，在Biotage Initiator微波裝置中在120℃加熱混合物80分鐘。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH 95/5)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生30mg(14％)的中間體90，為綠色油。
實(shí)施例B19化合物93的制備 將化合物92(23mg，0.000043mol)溶解在EtOH(1ml)及MeOH(1ml)中。添加碳上鈀(10重量％)(10mg)。在室溫下于氫中攪拌混合物20小時(shí)。在硅藻土上過(guò)濾混合物并以MeOH清洗。將溶劑蒸發(fā)。將殘余物通過(guò)SCX柱色譜純化，產(chǎn)生18mg(100％)的化合物93，為綠色油。
實(shí)施例B20化合物94的制備
按照與化合物86類似的程序，由中間體17(200mg，0.00056mol)及中間體2(142mg，0.00056mol)起始，在Biotage Initiator微波裝置中在120℃加熱混合物50分鐘。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)(洗脫液DCM/MeOH/NH4OH 85/15/1)的柱色譜純化。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生35mg(11％)的化合物94，為紅色油。
實(shí)施例B21化合物95的制備 將化合物94(50mg，0.000088mol)溶解在MeOH(3ml)中。添加在2-丙醇(5ml)中的5N鹽酸溶液。在室溫下攪拌混合物17小時(shí)。蒸發(fā)溶劑。將殘余物倒在水上，并以EtOAc萃取。分離有機(jī)層，以碳酸氫鈉的飽和溶液清洗，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑，產(chǎn)生15mg(36％)的化合物95，為黃色油。
實(shí)施例B22化合物96的制備 按照與化合物86類似的程序，由中間體18(160mg，0.00070mol)及中間體2(160mg，0.00064mol)起始，在Biotage Initiator微波裝置中在120℃加熱混合物1小時(shí)。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH/NH4OH 85/15/1)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生100mg(35％)的化合物96，為綠色油。
實(shí)施例B23化合物97的制備 將化合物96(50mg，0.00011mol)溶解在THF(3ml)中。添加氫氧化鋰(33mg，0.00079mol)及水(1滴)。在室溫下攪拌混合物24小時(shí)。將殘余物倒在水上，并以EtOAc萃取。分離有機(jī)層，以4N氫氧化鈉溶液清洗。分離有機(jī)層，以3N鹽酸溶液清洗，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物通過(guò)SCX柱色譜純化，產(chǎn)生20mg(41％)的化合物97，為綠色油。
實(shí)施例B24化合物98的制備 按照與化合物86類似的程序，由中間體19(170mg，0.00079mol)及中間體2(180mg，0.00071mol)起始，在Biotage Initiator微波裝置中在120℃加熱混合物80分鐘。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH 85/15)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生224mg(73％)的化合物98，為褐色油。
實(shí)施例B25化合物99的制備
將化合物98(100mg，0.00023mol)溶解在MeOH(5ml)中并在0℃冷卻。緩慢添加硼氫化鈉(27mg，0.00069mol)。在80℃攪拌混合物4小時(shí)。以水結(jié)束反應(yīng)并蒸發(fā)溶劑。以EtOAc萃取殘余物。分離有機(jī)層，以碳酸氫鈉的飽和溶液清洗，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH85/15)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生40mg(43％)的化合物99，為無(wú)色油。
實(shí)施例B26化合物100的制備 在120℃于氬氣下攪拌中間體20(107mg，0.00047mol)、中間體2(118mg，0.00047mol)及在2-丙醇中的5N鹽酸溶液(0.12ml，0.00072mol)在1-甲基-2-吡咯烷酮(2.3ml)中的混合物2小時(shí)，然后冷卻至室溫并倒入水中。以飽和碳酸氫鈉溶液堿化形成的混合物并以EtOAc萃取3次。分離有機(jī)層，以水及鹽水清洗，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH/NH4OH 90/10/0.5)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生61mg(26％)的化合物100，為米色泡沫。
實(shí)施例B27化合物101的制備
在0℃于氬氣下，將氫化鋁鋰(6.5mg，0.00017mol)添加至中間體21(53mg，0.00017mol)在THF(1ml)中的混合物中。在0℃攪拌混合物1小時(shí)，以5％硫酸氫鉀溶液淬火，并以EtOAc萃取。分離有機(jī)層，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物溶解在MeOH(1ml)中并滴加至N-4-吡啶-1，4-苯二胺(32mg，0.00017mol)、氰基硼氫化鈉(16mg，0.0025mol)和乙酸(1滴)在MeOH(0.5ml)中的混合物中。在室溫下攪拌混合物20小時(shí)，倒入在水中并以EtOAc萃取2次。分離有機(jī)層，以碳酸氫鈉的飽和溶液及以鹽水清洗，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液EtOAc/MeOH/NH4OH 90/10/0.3)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生25mg(34％)的化合物101，為米色泡沫。
實(shí)施例B28化合物102的制備 將中間體23(500mg，0.0011mol)、2-氯-4-溴吡啶(213mg，0.0011mol)、4，5-雙(二苯基膦基)-9，9-二甲基呫噸(83mg，0.00014mol)、叔丁醇鈉(264mg，0.0028mol)在甲苯(7.5ml)中的混合物在氬氣下脫氣15分鐘。添加三(二亞芐基丙酮)二鈀(0)-氯仿加合物(46mg，0.000044mol)。在Biotage Initiator微波裝置中在100℃加熱混合物90秒。冷卻混合物至室溫，然后倒入水中，并以EtOAc萃取2次。以水清洗有機(jī)層2次，以鹽水清洗1次，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液EtOAc/環(huán)己烷30/70)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生254mg(41％)的化合物102，為米色泡沫。
實(shí)施例B29化合物103的制備 將化合物102(70mg，0.00012mol)溶解于在2-丙醇(1.5ml)中的5N鹽酸溶液中。添加水(2滴)。在室溫下攪拌反應(yīng)混合物5小時(shí)。結(jié)束反應(yīng)并以飽和碳酸氫鈉溶液堿化及以EtOAc萃取3次。有機(jī)層經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液EtOAc/環(huán)己烷50/50)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生33mg(76％)的化合物103，為白色泡沫。
實(shí)施例B30化合物104的制備 在120℃于氬氣下攪拌4-氯-α-甲基-2-吡啶甲醇(170mg，0.0011mol)和中間體2(271mg，0.0011mol)在乙酸(2ml)中的混合物1小時(shí)，然后使冷卻至室溫并倒入水上。以4N氫氧化鈉溶液堿化形成的混合物并以EtOAc萃取2次。連續(xù)以飽和碳酸氫鈉溶液及鹽水清洗有機(jī)層，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液EtOAc/MeOH 80/20)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生190mg(47％)的化合物104，為米色泡沫。
實(shí)施例B31化合物105的制備 在室溫下攪拌化合物104(106mg，0.00029mol)和活性氧化錳(148mg，0.0017mol)在氯仿(4ml)中的混合物6小時(shí)。在經(jīng)硅藻土墊過(guò)濾后，蒸發(fā)溶劑并將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液EtOAc)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生4mg(3％)的化合物105，為橙色固體。
實(shí)施例B32化合物106的制備 在室溫下于氬氣下添加乙酰胺肟(11mg，0.00016mol)至活化的4_分子篩和氫化鈉(3.72mg，0.00016mol)在THF(0.6ml)中的混合物中。在70℃攪拌反應(yīng)混合物1.5小時(shí)，然后冷卻至室溫。添加化合物200(50mg，0.00013mol)在THF(0.6ml)中的溶液。在70℃攪拌反應(yīng)混合物1小時(shí)。通過(guò)添加水使反應(yīng)結(jié)束，并以EtOAc萃取2次。將有機(jī)層干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液EtOAc/環(huán)己烷70/30)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生16mg(30％)的化合物106，為黃色油。
實(shí)施例B33化合物107的制備 按照與化合物106類似的程序，由芐胺肟(38mg，0.00028mol)及化合物200(90mg，0.00023mol)起始，在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/EtOAc 90/10)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生13mg(12％)的化合物107，為黃色油，熔點(diǎn)170℃-174℃。
實(shí)施例B34化合物108的制備 按照與化合物106類似的程序，由N′-羥基-2-苯基乙酰亞胺酰胺(42mg，0.00028mol)及化合物200(90mg，0.00023mol)起始。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液EtOAc/環(huán)己烷50/50)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生50mg(45％)的化合物108，為黃色固體，熔點(diǎn)159℃-161℃。
實(shí)施例B35化合物109的制備 按照與化合物86類似的程序，由4-氯-2，6-吡啶二甲酸二甲酯(228mg，0.00099mol)及中間體2(250mg，0.00099mol)起始，在BiotageInitiator微波裝置中在120℃加熱混合物2小時(shí)。在后處理后，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)的柱色譜純化(洗脫液丙酮/環(huán)己烷30/70至60/40)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生30mg(7％)的化合物109，為黃色泡沫。
實(shí)施例B36化合物110的制備 于120℃在CEM Discover微波烘箱(P＝300W)中，攪拌中間體27(0.0016mol)及中間體2(0.0018mol)在乙酸(35ml)中的混合物5分鐘，然后使其回到室溫。添加冰及氫氧化鈉。使混合物通過(guò)硅藻土過(guò)濾。以DCM/MeOH(95/5)清洗硅藻土。分離有機(jī)層，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物(1g)通過(guò)經(jīng)kromasil(15-40微米)柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH/NH4OH 95/5/0.5)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)。由CH3CN/MeOH結(jié)晶殘余物(0.3g)。過(guò)濾沉淀物并干燥，產(chǎn)生0.182g(29％)的化合物110，熔點(diǎn)136℃。
實(shí)施例B37
化合物111的制備 于120℃在CEM Discover微波烘箱(P＝300W)中，攪拌中間體31(0.0016mol)及中間體2(0.0018mol)在乙酸(3.5ml)中的混合物5分鐘，然后使其回到室溫。添加冰及濃NaOH。以DCM萃取混合物2次。分離有機(jī)層，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物(0.9g)通過(guò)經(jīng)kromasil(10微米)柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH/NH4OH93/7/0.5)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)。由CH3CN/MeOH/丙酮結(jié)晶殘余物(0.2g)。過(guò)濾沉淀物并干燥，產(chǎn)生0.137g(21％)的化合物111，熔點(diǎn)104℃。
實(shí)施例B38化合物112的制備 于118℃在CEM Discover微波烘箱(P＝300W)中，攪拌中間體33(0.0025mol)及中間體27(0.0025mol)在乙酸(2.7ml)中的混合物10分鐘，然后使其回到室溫。添加水及3N氫氧化鈉。以DCM萃取混合物。分離有機(jī)層，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物(1.42g)通過(guò)經(jīng)硅膠(10微米)柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH/NH4OH 95/5/0.5)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)。將殘余物(0.56g)吸收在2-丙酮/CH3CN中。過(guò)濾沉淀物并干燥，產(chǎn)生0.506g(35％)的化合物112，熔點(diǎn)194℃。
實(shí)施例B39
化合物113的制備 在0℃于氮?dú)饬髦校瑢⑴饸浠?0.0026mol)，然后是MeOH(1ml)逐份添加至中間體35(0.0002mol)在THF(15ml)中的溶液中。在0℃攪拌混合物4小時(shí)，添加硼氫化鋰(15當(dāng)量)。在室溫下攪拌混合物過(guò)夜。添加硼氫化鋰(10當(dāng)量)。在室溫下攪拌混合物4小時(shí)又30分鐘。添加硼氫化鋰(15當(dāng)量)。在室溫下攪拌混合物24小時(shí)并倒入水中。蒸發(fā)MeOH及THF。添加DCM。過(guò)濾混合物，產(chǎn)生0.01g的第一批粗產(chǎn)物。以DCM萃取濾液。分離有機(jī)層，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑，產(chǎn)生0.035g的第二批粗產(chǎn)物。兩個(gè)級(jí)分通過(guò)經(jīng)kromasil(5微米)柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH/NH4OH 95/5/0.5至85/15/1.5)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生0.056g(28％)的化合物113，熔點(diǎn)154℃。
實(shí)施例B41化合物36的制備 在110℃攪拌4-溴-吡啶氫氯化物(0.034mol)及中間體2(0.0374mol)在乙酸(13ml)中的混合物40分鐘，然后使冷卻至室溫，倒入冰水中并以碳酸鉀堿化。添加DCM。攪拌混合物30分鐘，然后通過(guò)硅藻土過(guò)濾。傾析濾液。硅藻土被吸收在DCM/MeOH(95/5)中。攪拌混合物30分鐘，然后過(guò)濾。合并兩濾液，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。殘余物(16.8g)通過(guò)經(jīng)硅膠(20-45微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH/NH4OH 92/8/0.5)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)。將殘余物(4.2g)吸收在2-丙酮中。過(guò)濾沉淀物并干燥，產(chǎn)生3.6g(32％)的化合物36，熔點(diǎn)236℃。
實(shí)施例B42化合物115的制備 將N-(2-羥基乙基)哌嗪(0.0019mol)、EDC(0.0019mol)、HOBT(0.0019mol)及三乙胺(0.0019mol)添加至中間體41(0.0013mol)在DCM/DMF 75/25(20ml)中的溶液中。在室溫下攪拌混合物過(guò)夜。添加10％碳酸鉀。以DCM萃取混合物。分離有機(jī)層，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物(0.32g)通過(guò)經(jīng)kromasil(10微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH/NH4OH 90/10/1)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生0.027g(4％)的化合物115。
實(shí)施例B43化合物116的制備 將1-[2-(2-羥基乙氧基)乙基]哌嗪(0.0019mol)、EDCI(0.0019mol)、HOBT(0.0019mo1)及三乙胺(0.0019mol)添加至中間體41(0.0013mol)在DCM/DMF 75/25(20ml)中的溶液中。在室溫下攪拌混合物過(guò)夜。添加10％碳酸鉀。以DCM萃取混合物。分離有機(jī)層，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物(0.38g)通過(guò)經(jīng)kromasil(10微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH/NH4OH 90/10/1)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生0.108g(16％)的化合物116。
實(shí)施例B44化合物117的制備 在140℃于CEM Discover微波烘箱中，攪拌中間體2(0.002mol)及4-氯-1H-吡咯[2，3-d]嘧啶(0.002mol)在乙酸(5ml)中的混合物15分鐘。蒸發(fā)乙酸。將粗產(chǎn)物溶解在DCM中。分離有機(jī)層，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物(1g)通過(guò)經(jīng)硅膠(15-40微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH/NH4OH 93/7/0.5)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)。由乙腈結(jié)晶殘余物(0.27g)。過(guò)濾沉淀物并干燥，產(chǎn)生0.233g(31％)的化合物117，熔點(diǎn)211℃。
實(shí)施例B45化合物118的制備 將5-氨基-1-戊醇(0.0019mol)、EDC(0.0019mol)、HOBT(0.0019mol)及三乙胺(0.0019mol)添加至中間體41(0.0013mol)在DCM/DMF 75/25(10ml)中的溶液中。在室溫下攪拌混合物過(guò)夜。添加10％碳酸鉀。以DCM萃取混合物。分離有機(jī)層，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物(0.38g)通過(guò)經(jīng)kromasil(10微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH/NH4OH 90/10/1至80/20/2)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生0.128g的化合物118。
實(shí)施例B46化合物119的制備 在室溫下于1個(gè)大氣壓氫下，攪拌中間體86和87(179mg，0.00045mol)和10％碳上鈀(20mg)在EtOH中的混合物16小時(shí)。在經(jīng)硅藻土墊過(guò)濾后，蒸發(fā)溶劑，將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(40-63微米)柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH 9/1)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生70mg(47％)的化合物119，為黃色泡沫。
實(shí)施例B47化合物120的制備 攪拌中間體2(0.050mg，0.000199mol)、4-喹啉甲醛(31mg，0.000199mol)在MeOH中的混合物并回流過(guò)夜，然后使其冷卻至室溫。逐份地添加硼氫化鈉，將混合物在室溫下攪拌1小時(shí)，以水水解，以DCM萃取，通過(guò)MgSO4干燥并濃縮。將殘余物通過(guò)經(jīng)kromasil(10微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH/NH4OH 90/10/1至80/20/2)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)，產(chǎn)生0.045g(45％)的化合物120。
實(shí)施例B48化合物121的制備

攪拌3-吡啶甲醛(0.0028mol)及中間體2(0.0028mol)在MeOH(20ml)中的混合物并回流過(guò)夜，然后使其回到室溫。逐份地添加硼氫化鈉(0.0028mol)。在室溫下攪拌混合物5小時(shí)，添加冰和水。以DCM萃取混合物。分離有機(jī)層，經(jīng)干燥(MgSO4)、過(guò)濾并蒸發(fā)溶劑。將殘余物通過(guò)經(jīng)硅膠(15-40微米)的柱色譜純化(洗脫液DCM/MeOH/NH4OH97/3/0.2)。收集純的級(jí)分及蒸發(fā)溶劑。將殘余物(0.4g)吸收在HCl/異丙醇/乙醚中。過(guò)濾沉淀物并干燥。添加冰和水。以3N氫氧化鈉堿化混合物。以DCM萃取混合物。將殘余物(0.3g)通過(guò)經(jīng)硅膠(15-40微米)的柱色譜純化(洗脫液甲苯/異丙醇/NH4OH 90/10/0.5)。收集純的級(jí)分并將溶劑蒸發(fā)。將殘余物(0.24g)吸收在異丙醇/HCl/異丙醇/乙醚中。過(guò)濾沉淀物并干燥，產(chǎn)生0.23g(20％)的化合物121，其分離為鹽酸鹽，熔點(diǎn)130℃。
表F-1列出根據(jù)上述實(shí)施例之一所制備的化合物。下列縮寫用于表中.C2HF3O2代表三氟乙酸鹽，int.代表中間體，comp.代表化合物，.HCl代表鹽酸鹽，mp.代表熔點(diǎn)，ms.代表質(zhì)譜。
表F-1
























C.藥理實(shí)施例U87MG細(xì)胞為帶有野生型p53的人類成膠質(zhì)細(xì)胞瘤細(xì)胞。在此細(xì)胞系中，MDM2密切地控制p53表達(dá)。
化合物保存p53于U87MG細(xì)胞中的能力由p53酶連接的免疫吸附分析法測(cè)定。p53分析法是一種使用兩種多株抗體的“三明治”酶免疫分析法。對(duì)p53蛋白質(zhì)具有專一性的多株抗體被固定于塑料孔的表面。任何存在于待分析樣品中的p53將鍵合至捕捉抗體上。生物素化的檢測(cè)劑多株抗體也識(shí)別p53蛋白質(zhì)，并將結(jié)合至任何p53，其通過(guò)捕捉抗體被保持。反過(guò)來(lái)，檢測(cè)劑抗體被辣根過(guò)氧化酶結(jié)合的卵白素所鍵合。辣根過(guò)氧化酶催化發(fā)色基質(zhì)鄰苯二胺的轉(zhuǎn)變，其強(qiáng)度與被結(jié)合至板上的p53蛋白質(zhì)的量成正比。利用分光光度計(jì)定量有色的反應(yīng)產(chǎn)物。定量通過(guò)利用已知濃度的純化的重組HIS示蹤的p53蛋白質(zhì)構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行(見實(shí)施例C.1.)。
式(I)化合物的細(xì)胞活性在U87MG腫瘤細(xì)胞上利用比色分析法對(duì)細(xì)胞毒性或存活率測(cè)定(見實(shí)施例C.2)。
C.1.p53 ELISA于37℃，在潤(rùn)濕的含有5％CO2的培養(yǎng)器中，在由10％胎牛血清(FCS)、2mM L-谷氨酰胺、1mM丙酮酸鈉、1.5g/l碳酸氫鈉及慶大霉素補(bǔ)充的Dulbecco最低基本培養(yǎng)介質(zhì)(DMEM)中培養(yǎng)U87MG細(xì)胞(ATCC)。
在96孔平皿中以每孔30.000個(gè)細(xì)胞接種U87MG細(xì)胞，培養(yǎng)24小時(shí)，并在37℃于潤(rùn)濕的培養(yǎng)器中以化合物處理16小時(shí)。在培養(yǎng)后，以磷酸鹽緩沖的鹽水清洗細(xì)胞1次，且每孔添加30μl低鹽RIPA緩沖液(20mM tris，pH7.0，0.5mM EDTA，1％Nonidet P40，0.5％DOC，0.05％SDS，1mM PMSF，1μg/ml抑肽酶及0.5μ/ml的亮肽素)。將平皿放在冰上30分鐘以完成溶胞。通過(guò)使用下述的三明治ELISA檢測(cè)在溶胞液中的p53蛋白質(zhì)。
以在涂覆緩沖液(0.1M NaHCO3，pH8.2)中濃度為2μg/ml的捕捉抗體pAb122(Roche 1413147)涂覆高結(jié)合性聚苯乙烯EIA/RIA 96孔平皿(Costar 9018)，每孔50μl。使抗體在4℃粘附過(guò)夜。以磷酸鹽緩沖的鹽水(PBS)/0.05％Tween 20清洗涂覆平皿1次，并添加300μl的封閉緩沖液(PBS，1％小牛血清白蛋白(BSA))，在室溫培養(yǎng)2小時(shí)。在封閉緩沖液中制備純化的重組HIS示蹤的p53蛋白質(zhì)的稀釋液(范圍為3-200ng/ml)并用作標(biāo)準(zhǔn)品。
以PBS/0.05％Tween 20清洗平皿2次，并添加封閉緩沖液或標(biāo)準(zhǔn)品，每孔80μl。添加20μl的溶胞緩沖液至標(biāo)準(zhǔn)品中。添加樣品至其它孔中，每孔20μl溶胞液。在4℃過(guò)夜培養(yǎng)之后，以PBS/0.05％Tween20清洗平皿2次。將等分的100μl二次多株抗體p53(FL-393)(Tebubio，sc-6243)以在封閉緩沖液中為1μg/ml的濃度添加至各孔中，并允許在室溫粘附2小時(shí)。以PBS/0.05％Tween 20清洗平皿3次。添加0.04μg/ml于PBS/1％BSA中的檢測(cè)抗體抗兔子HRP(sc-2004，Tebubio)并在室溫培養(yǎng)1小時(shí)。以PBS/0.05％Tween 20清洗平皿3次，并添加100μl的基質(zhì)緩沖液(基質(zhì)緩沖液在使用前不久通過(guò)添加1片10mg來(lái)自Sigma的鄰苯二胺(OPD)及125μl的3％的H2O2至25ml OPD緩沖液35mM檸檬酸、132mM Na2HPO4，pH5.6中制備)。于5至10分鐘后，通過(guò)每孔添加50μl的終止緩沖液(1M H2SO4)終止顏色反應(yīng)。利用Biorad微量盤讀數(shù)器測(cè)量在雙波長(zhǎng)450/655nm的吸光度，然后分析結(jié)果。
對(duì)于每個(gè)實(shí)驗(yàn)，平行進(jìn)行對(duì)照組(不含藥物)及空白培養(yǎng)(不含細(xì)胞或藥物)。從所有的對(duì)照組及樣品值減去空白值。對(duì)于每個(gè)樣品，p53的值(吸光度單位)被表示為存在于對(duì)照組中的p53值的百分比。高于130％的百分比保留被定義為顯著的。此處，試驗(yàn)化合物的效果被表示為提供至少130％存在于對(duì)照組中的p53值的最低劑量(LAD)(見表F-2)。
C.2.增殖分析將所有試驗(yàn)的化合物溶解于DMSO中，并在培養(yǎng)介質(zhì)中制備另外的稀釋液。在細(xì)胞增殖分析中最終DMSO濃度絕不超過(guò)0.1％(v/v)。對(duì)照組包含U87MG細(xì)胞及DMSO，但無(wú)化合物，而空白組包含DMSO但無(wú)細(xì)胞。
將U87MG細(xì)胞以3000細(xì)胞/孔/100μl接種于96-孔細(xì)胞培養(yǎng)皿中。24小時(shí)后，替換介質(zhì)并添加化合物和/或溶劑至200μl的終體積。在4天培養(yǎng)之后，以200μl的新鮮介質(zhì)替換介質(zhì)，并利用以MTT為基礎(chǔ)的分析法評(píng)估細(xì)胞生長(zhǎng)。因此，添加25μl的MTT溶液(于磷酸鹽-緩沖的鹽水中的0.5％MTT，研究等級(jí)，來(lái)自Serva)至各孔并在37℃進(jìn)一步培養(yǎng)細(xì)胞2小時(shí)。然后小心吸出介質(zhì)，并通過(guò)添加至各孔25μl 0.1M甘胺酸及100μl DMSO溶解藍(lán)色MTT-甲 產(chǎn)物。在通過(guò)微量盤讀數(shù)器于540nm讀取吸光度前，將平皿在微量盤振蕩器上再振蕩10分鐘。
在實(shí)驗(yàn)中，每個(gè)實(shí)驗(yàn)條件的結(jié)果為3個(gè)重復(fù)孔的平均。對(duì)于初始篩選目的，以單一固定濃度10-5M試驗(yàn)化合物。對(duì)于活性化合物，重復(fù)實(shí)驗(yàn)以建立整個(gè)濃度-響應(yīng)曲線。對(duì)每個(gè)實(shí)驗(yàn)，平行進(jìn)行對(duì)照組(不含藥物)及空白培養(yǎng)(不含細(xì)胞或藥物)。從所有的對(duì)照組及樣品值減去空白值。對(duì)于每個(gè)樣品，細(xì)胞生長(zhǎng)的平均值(吸光度單位)被表示為對(duì)照組的細(xì)胞生長(zhǎng)的平均值的百分比。當(dāng)適當(dāng)時(shí)，利用分級(jí)數(shù)據(jù)的概率單位分析(probit analysis)計(jì)算IC50-值(降低細(xì)胞生長(zhǎng)至對(duì)照組的50％所需的藥物濃度)(Finney，D.J.，Probit Analyses，第2版，第10章，GradedResponses，Cambridge University Press，Cambridge 1962)。在此試驗(yàn)化合物的效果被表示為pIC50(IC50-值的負(fù)對(duì)數(shù)值)(見表F-2)。
表F-2表F-2列出根據(jù)實(shí)施例C.1及C.2所試驗(yàn)的化合物的結(jié)果






D.組合物實(shí)施例薄膜衣片劑片核的制備將100g式(I)的化合物、570g乳糖及200g淀粉的混合物充分混合，之后以5g十二烷基硫酸鈉及10g聚乙烯基吡咯烷酮在約200ml水中的溶液潤(rùn)濕。將濕潤(rùn)粉末過(guò)篩、干燥并再過(guò)篩。之后添加100g微晶纖維素及15g氫化植物油。將整體充分混合并壓成片劑，獲得10.000個(gè)片劑，每個(gè)包含10mg式(I)的化合物。
包衣將5g乙基纖維素于150ml二氯甲烷中的溶液添加至10g甲基纖維素于75ml變性乙醇中的溶液中。然后添加75ml二氯甲烷及2.5ml的1，2，3-丙三醇，熔化10g聚乙二醇并將其溶解于75ml二氯甲烷中。將后者溶液添加至前者中，然后添加2.5g十八酸鎂、5g聚乙烯基吡咯烷酮及30ml濃縮的有色懸浮液，并全部均質(zhì)。采用如此獲得的混合物在包衣裝置中包覆片核。
權(quán)利要求
1.一種式(I)的化合物， 其N-氧化物形式、加成鹽或立體化學(xué)異構(gòu)體形式，其中m為0、1或2，且當(dāng)m為0時(shí)，意指直接鍵；n為0、1、2或3，且當(dāng)n為0時(shí)，意指直接鍵；p為0或1，且當(dāng)p為0時(shí)，意指直接鍵；s為0或1，且當(dāng)s為0時(shí)，意指直接鍵；t為0或1，且當(dāng)t為0時(shí)，意指直接鍵；X為C＝O)或CHR8；其中R8為氫、C1-6烷基、C3-7環(huán)烷基、-C(＝O)-NR17R18、羥基羰基、芳基C1-6烷氧基羰基、雜芳基、雜芳基羰基、雜芳基C1-6烷氧基羰基、哌嗪基羰基、吡咯烷基、哌啶基羰基、C1-6烷氧基羰基、被選自羥基、氨基、芳基及雜芳基的取代基所取代的C1-6烷基；被選自羥基、氨基、芳基及雜芳基的取代基所取代的C3-7環(huán)烷基；被羥基、羥基C1-6烷基、羥基C1-6烷氧基C1-6烷基取代的哌嗪羰基；被羥基C1-6烷基取代的吡咯烷基；或被一個(gè)或兩個(gè)選自羥基、C1-6烷基、羥基C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷基(二羥基)C1-6烷基或C1-6烷氧基(羥基)C1-6烷基的取代基所取代的哌啶基羰基；R17及R18各自獨(dú)立地選自氫、C1-6烷基、二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、芳基C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、羥基C1-6烷基、羥基C1-6烷基(C1-6烷基)或羥基C1-6烷基(芳基C1-6烷基)； 為-CR9＝C＜且虛線為一個(gè)鍵，-C(＝O)-CH＜，-C(＝O)-N＜，-CHR9-CH＜或-CHR9-N＜；其中每個(gè)R9獨(dú)立地為氫或C1-6烷基；R1為氫、芳基、雜芳基、C1-6烷氧基羰基、C1-12烷基或被一個(gè)或兩個(gè)獨(dú)立選自羥基、芳基、雜芳基、氨基、C1-6烷氧基、單-或二(C1-6烷基)氨基、嗎啉基、哌啶基、吡咯烷基、哌嗪基、C1-6烷基哌嗪基、芳基C1-6烷基哌嗪基、雜芳基C1-6烷基哌嗪基、C3-7環(huán)烷基哌嗪基及C3-7環(huán)烷基C1-6烷基哌嗪基的取代基所取代的C1-12烷基；R2為氫、鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、芳基C1-6烷氧基、雜芳基C1-6烷氧基、苯硫基、羥基C1-6烷基羰基、被選自氨基、芳基及雜芳基的取代基所取代的C1-6烷基；或被選自氨基、芳基及雜芳基的取代基所取代的C3-7環(huán)烷基；R3為氫、C1-6烷基、雜芳基、C3-7環(huán)烷基、被選自羥基、氨基、芳基及雜芳基的取代基所取代的C1-6烷基；或被選自羥基、氨基、芳基及雜芳基的取代基所取代的C3-7環(huán)烷基；R4及R5各自獨(dú)立地為氫、鹵素、C1-6烷基、多鹵C1-6烷基、氰基、氰基C1-6烷基、羥基、氨基或C1-6烷氧基；或R4及R5一起可任選地形成一種選自亞甲基二氧或亞乙基二氧的二價(jià)基團(tuán)；R6為氫、C1-6烷氧基羰基或C1-6烷基；當(dāng)p為1時(shí)，則R7為氫、芳基C1-6烷基、羥基或雜芳基C1-6烷基；Z為選自下列的基團(tuán) 其中每個(gè)R10或R11各自獨(dú)立地選自氫、鹵素、羥基、氨基、C1-6烷基、硝基、多鹵C1-6烷基、氰基、氰基C1-6烷基、四唑C1-6烷基、芳基、雜芳基、芳基C1-6烷基、雜芳基C1-6烷基、芳基(羥基)C1-6烷基、雜芳基(羥基)C1-6烷基、芳基羰基、雜芳基羰基、C1-6烷基羰基、芳基C1-6烷基羰基、雜芳基C1-6烷基羰基、C1-6烷氧基、C3-7環(huán)烷基羰基、C3-7環(huán)烷基(羥基)C1-6烷基、芳基C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷基羰基氧基C1-6烷基、C1-6烷氧基羰基C1-6烷氧基C1-6烷基、羥基C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷氧基羰基C2-6鏈烯基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷氧基羰基、C1-6烷基羰基氧基、氨基羰基、羥基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、羥基羰基、羥基羰基C1-6烷基及-(CH2)v-(C(＝O)r)-(CHR19)u-NR13R14；其中v為0、1、2、3、4、5或6，且當(dāng)v為0時(shí)，意指直接鍵；r為0或1，且當(dāng)r為0時(shí)，意指直接鍵；u為0、1、2、3、4、5或6，且當(dāng)u為0時(shí)，意指直接鍵；R19為氫或C1-6烷基；R12為氫、C1-6烷基、C3-7環(huán)烷基、被選自羥基、氨基、C1-6烷氧基及芳基的取代基所取代的C1-6烷基；或被選自羥基、氨基、芳基及C1-6烷氧基的取代基所取代的C3-7環(huán)烷基；R13及R14各自獨(dú)立地選自氫、C1-12烷基、C1-6烷基羰基、C1-6烷基磺酰基、芳基C1-6烷基羰基、C3-7環(huán)烷基、C3-7環(huán)烷基羰基、-(CH2)k-NR15R16、被選自羥基、羥基羰基、氰基、C1-6烷氧基羰基、C1-6烷氧基、芳基或雜芳基的取代基所取代的C1-12烷基；或被選自羥基、C1-6烷氧基、芳基、氨基、芳基C1-6烷基、雜芳基或雜芳基C1-6烷基的取代基所取代的C3-7環(huán)烷基；或R13及R14與其所連的氮一起可任選地形成嗎啉基、哌啶基、吡咯烷基、哌嗪基或被選自C1-6烷基、芳基C1-6烷基、芳基C1-6烷氧基羰基、雜芳基C1-6烷基、C3-7環(huán)烷基及C3-7環(huán)烷基C1-6烷基的取代基所取代的哌嗪基；其中k為0、1、2、3、4、5或6，且當(dāng)k為0時(shí)，意指直接鍵；R15及R16各自獨(dú)立地選自氫、C1-6烷基、芳基C1-6烷氧基羰基、C3-7環(huán)烷基、被選自羥基、C1-6烷氧基、芳基及雜芳基的取代基所取代的C1-12烷基；及被選自羥基、C1-6烷氧基、芳基、芳基C1-6烷基、雜芳基及雜芳基C1-6烷基的取代基所取代的C3-7環(huán)烷基；或R15及R16與其所連的氮一起可任選地形成嗎啉基、哌嗪基或被選自C1-6烷氧基羰基所取代的哌嗪基；芳基為苯基或萘基；每個(gè)苯基或萘基可任選地被一個(gè)、兩個(gè)或三個(gè)取代基所取代，所述取代基各自獨(dú)立地選自鹵素、羥基、C1-6烷基、氨基、多鹵C1-6烷基及C1-6烷氧基；及每個(gè)苯基或萘基可任選地被一種選自亞甲基二氧或亞乙基二氧的二價(jià)基團(tuán)所取代；雜芳基為吡啶基、吲哚基、喹啉基、咪唑基、呋喃基、噻吩基、_二唑基、四唑基、苯并呋喃基或四氫呋喃基；每個(gè)吡啶基、吲哚基、喹啉基、咪唑基、呋喃基、噻吩基、_二唑基、四唑基、苯并呋喃基或四氫呋喃基可任選地被一、二或三個(gè)取代基所取代，所述取代基各自獨(dú)立地選自鹵素、羥基、C1-6烷基、氨基、多鹵C1-6烷基、芳基、芳基C1-6烷基或C1-6烷氧基；及每個(gè)吡啶基、吲哚基、喹啉基、咪唑基、呋喃基、噻吩基、苯并呋喃基或四氫呋喃基可任選地被一種選自亞甲基二氧或亞乙基二氧的二價(jià)基團(tuán)所取代；條件是當(dāng)m為1；在苯環(huán)上除R2外的取代基在間位；s為0；及t為0時(shí)，則Z為選自(a-1)、(a-3)、(a-4)、(a-5)、(a-6)、(a-7)、(a-8)或(a-9)的基團(tuán)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中R8為氫、-C(＝O)-NR17R18、芳基C1-6烷氧基羰基、被羥基取代的C1-6烷基、被羥基、羥基C1-6烷基、羥基C1-6烷氧基C1-6烷基取代的哌嗪羰基、被羥基C1-6烷基取代的吡咯烷基或被一個(gè)或兩個(gè)選自羥基、C1-6烷基、羥基C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷基(二羥基)C1-6烷基或C1-6烷氧基(羥基)C1-6烷基的取代基所取代的哌啶基羰基；R17及R18各自獨(dú)立地選自氫、C1-6烷基、二(C1-6烷基)氨基C1-6烷基、芳基C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷基或羥基C1-6烷基； 為-CR9＝C＜且虛線為一個(gè)鍵、-CHR9-CH＜或-CHR9-N＜；R1為氫、雜芳基、C1-6烷氧基羰基、C1-12烷基或被雜芳基取代的C1-12烷基；R2為氫、鹵素、C1-6烷基、C1-6烷氧基、芳基C1-6烷氧基或苯硫基；R3為氫、C1-6烷基或雜芳基；R4及R5各自獨(dú)立地為氫、鹵素、C1-6烷基、氰基、氰基C1-6烷基、羥基或C1-6烷氧基；當(dāng)p為1時(shí)，則R7為芳基C1-6烷基或羥基；Z為選自(a-1)、(a-2)、(a-3)、(a-4)、(a-5)、(a-6)、(a-8)、(a-9)、(a-10)及(a-11)的基團(tuán)；每個(gè)R10或R11各自獨(dú)立地選自氫、鹵素、羥基、氨基、C1-6烷基、硝基、多鹵C1-6烷基、氰基、氰基C1-6烷基、四唑C1-6烷基、芳基、雜芳基、雜芳基C1-6烷基、芳基(羥基)C1-6烷基、芳基羰基、C1-6烷基羰基、C3-7環(huán)烷基羰基、C3-7環(huán)烷基(羥基)C1-6烷基、芳基C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷氧基C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷基羰基氧基C1-6烷基、C1-6烷氧基羰基C1-6烷氧基C1-6烷基、羥基C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷氧基羰基C2-6鏈烯基、C1-6烷氧基C1-6烷基、C1-6烷氧基羰基、氨基羰基、羥基C1-6烷基、氨基C1-6烷基、羥基羰基、羥基羰基C1-6烷基及-(CH2)v-(C(＝O)r)-(CHR19)u-NR13R14；v為0或1；u為0或1；R12為氫或C1-6烷基；R13及R14各自獨(dú)立地選自氫、C1-12烷基、C1-6烷基羰基、C1-6烷基磺酰基、芳基C1-6烷基羰基、C3-7環(huán)烷基羰基、-(CH2)k-NR15R16、被選自羥基、羥基羰基、氰基、C1-6烷氧基羰基或芳基的取代基所取代的C1-12烷基；R13及R14與其所連的氮一起可任選地形成嗎啉基、吡咯烷基、哌嗪基或被選自C1-6烷基或芳基C1-6烷氧基羰基的取代基所取代的哌嗪基；k為2；R15及R16各自獨(dú)立地選自氫、C1-6烷基或芳基C1-6烷氧基羰基；k為2；R15及R16各自獨(dú)立地選自氫、C1-6烷基或芳基C1-6烷氧基羰基；R15及R16與其所連的氮一起可任選地形成嗎啉基或哌嗪基或被C1-6烷氧基羰基取代的哌嗪基；芳基為苯基或被鹵素取代的苯基；雜芳基為吡啶基、吲哚基、_二唑基或四唑基；并且每個(gè)吡啶基、吲哚基、_二唑基或四唑基可任選地被一個(gè)選自C1-6烷基、芳基或芳基C1-6烷基的取代基所取代。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的化合物，其中m為0；n為1；p為0；s為0；t為0；X為CHR8；R8為氫； 為-CR9＝C＜；每個(gè)R9為氫；R1為氫；R2為氫或C1-6烷氧基；R2為氫或C1-6烷氧基；R3為氫；R4及R5各自獨(dú)立地為氫、C1-6烷基或C1-6烷氧基；R6為氫；Z為選自(a-1)、(a-2)、(a-3)或(a-4)的基團(tuán)；及R10或R11各自獨(dú)立地選自氫、羥基或羥基C1-6烷基。
4.根據(jù)權(quán)利要求1、2或3的化合物，其中該化合物為1號(hào)化合物、21號(hào)化合物、4號(hào)化合物、5號(hào)化合物、36號(hào)化合物、69號(hào)化合物、110號(hào)化合物、111號(hào)化合物、112號(hào)化合物、229號(hào)化合物和37號(hào)化合物
5.根據(jù)權(quán)利要求1、2、3或4的化合物，用作藥物。
6.一種藥物組合物，包含藥學(xué)上可接受的載體及作為活性成分的治療有效量的權(quán)利要求1至4的化合物。
7.一種制備權(quán)利要求6的藥物組合物的方法，其中將藥學(xué)上可接受的載體與權(quán)利要求1至4的化合物緊密混合。
8.根據(jù)權(quán)利要求1、2、3或4的化合物用于制備治療由p53-MDM2相互作用所介導(dǎo)的病癥的藥物的用途。
9.抗癌劑和根據(jù)權(quán)利要求1、2、3或4的化合物的組合。
10.一種制備權(quán)利要求1的化合物的方法，其特征在于a)使式(II)的中間體與式(III)的中間體反應(yīng)，其中W為適當(dāng)?shù)碾x去基團(tuán)，例如鹵素， b)在氫化鋁鋰的存在下，在適當(dāng)?shù)娜軇┲校瑢⑵渲蠿為C(＝O)的式(I)化合物，即本文中所稱的式(I-b)化合物轉(zhuǎn)變?yōu)槠渲蠿為CH2的式(I)化合物，即本文中所稱的式(I-a)化合物， c)在適當(dāng)試劑的存在下，在適當(dāng)?shù)娜軇┲?，使?IV)的適當(dāng)甲醛化合物與式(V)的中間體反應(yīng)， d)使式(II)的中間體與式(VI)的適當(dāng)甲醛化合物反應(yīng)，形成其中t為1的式(I)化合物，即本文中所稱的式(I-c)化合物，或 e)在適當(dāng)?shù)娜軇┲?，使?VII)的中間體與氫化鋁鋰反應(yīng)，形成其中s為1的式(I)化合物，即本文中所稱的式(I-d)化合物
全文摘要
本發(fā)明提供式(I)化合物，其作為p53－MDM2相互作用的抑制劑的用途以及包含該式(I)化合物的藥物組合物，其中n，m，p，s，t，R
文檔編號(hào)C07D401/14GK101023074SQ200580031755
公開日2007年8月22日 申請(qǐng)日期2005年9月16日 優(yōu)先權(quán)日2004年9月22日
發(fā)明者J·F·A·拉克蘭佩, C·邁耶, Y·A·E·里格尼, I·C·F·克索卡, L·范希杰菲特, J·阿茨, B·肖恩特杰斯, C·G·沃穆思, B·吉思倫, J·-M·康特里拉斯, M·朱伯特 申請(qǐng)人:詹森藥業(yè)有限公司