專利名稱：磺酰胺類及其用途的制作方法
優(yōu)先權(quán)的要求按照35USC§119(e)，本申請要求2004年9月27日提交的、序號為60/613,700的美國專利申請的優(yōu)先權(quán)，其全部內(nèi)容引入本文作為參考。
概要生長激素促分泌素受體(GHS-R)可調(diào)節(jié)很多生理學(xué)過程，包括生長激素(GH)釋放、代謝和食欲。生長素釋放肽是一種28個氨基酸肽，其是也被稱作生長素釋放肽受體的生長激素促分泌素受體(GHS-R)的內(nèi)源性配體。生長素釋放肽可刺激人類進食。除了調(diào)節(jié)進食外，生長素釋放肽可通過激活GHS-R，特別是在促生長素組織中，而刺激GH分泌。因此，調(diào)節(jié)GHS-R活性的化合物，尤其適用于控制與GHS-R生理學(xué)有關(guān)的病癥。
本發(fā)明涉及，尤其是，調(diào)節(jié)GHS-R的有效化合物和組合物，以及使用和制備該化合物的方法。該化合物的一些例子包括磺酰胺化合物，例如，雜芳基磺酰胺化合物如，聯(lián)芳基、三芳基、和螺磺酰胺化合物，和具有多環(huán)部分的其它化合物。雜芳基化合物的例子包括三唑并-吡啶基化合物(例如，取代或未取代的[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡啶基化合物)。該化合物可用于治療性應(yīng)用，包括受治療者(例如，哺乳動物、人、狗、貓、馬)中病癥、疾病或疾病癥狀的調(diào)節(jié)。該化合物包括有效的GHS-R拮抗劑。這類拮抗劑可用于，例如，減少受治療者進食。
化合物，包括其立體異構(gòu)體，可以小簇方式單獨制備，或以組合方式產(chǎn)生結(jié)構(gòu)多樣的化合物庫。
一方面，本發(fā)明特征在于式(I)的化合物
式(I)R1是氫、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、環(huán)基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)烷基、烷基、烯基、炔基，或R1可與R2或R3共同形成環(huán)；其各自任選被1至4個R6取代；k是鍵、O、C(O)、C(O)O、OC(O)、C(O)NR3、NR3C(O)、S、SO、SO2、CR2＝CR2或C≡C；n是0-6，優(yōu)選1-3；R2是氫、C1-C6烷基、C2-C6烯基或C2-C6炔基；R3是氫、C1-C6烷基、C2-C6烯基或C2-C6炔基，或R3可與R2、R4或R5共同形成環(huán)；其各自可任選被1-2個R6’取代；A是 x和y各自獨立地是0-6；M是芳基、雜芳基、環(huán)基或雜環(huán)基，其各自任選被1至4個R9取代；R4和R5各自獨立地是氫、烷基、烯基、鹵代烷基、環(huán)基或雜環(huán)基，或R4和R5可共同形成雜環(huán)，或R4和R5可共同形成疊氮基部分，或R4和R5中的一個或兩個可獨立與R7a和R7b中的一個或兩個連接，從而在與R4和R5相連的氮與R7a和R7b之間形成一個或多個橋，其中各橋含有1至5個碳；或R4和R5中的一個或兩個可獨立與R7a和R7b中的一個或兩個連接，從而形成一個或多個包括與R4和R5相連的氮的雜環(huán)，或R4和R5中的一個或兩個可獨立與R3連接形成環(huán)，或R4和R5中的一個或兩個可獨立與R8連接形成環(huán)；其中各R4和R5任選獨立地被1-5個鹵素、1-3個羥基、1-3個烷基、1-3個烷氧基、1-3個氧代、1-3個氨基、1-3個烷基氨基、1-3個二烷基氨基、1-3個腈或1-3個鹵代烷基取代。
Xa是2至4個稠合的或螺環(huán)基、雜環(huán)基、芳基或雜芳基環(huán)；其各自任選被1至4個R10取代；各R6和R6’獨立地是鹵素、烷基、烯基、炔基、環(huán)基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、烷氧基、鹵代烷基、鹵代烷氧基、鹵代烷硫基、乙?；?、氰基、硝基、羥基、氧代、C(O)OR2、OC(O)R2、N(R3)2、C(O)N(R3)2、NR3C(O)R2或SR2；R7a和R7b各自獨立地是氫、烷基、烯基、鹵代烷基、環(huán)基、環(huán)烷基或雜環(huán)基；或R7a和R7b中的一個或兩個可獨立與R4和R5中的一個或兩個連接，從而在與R4和R5相連的氮與R7a和R7b之間形成一個或多個橋，其中各橋含有1至5個碳；或R7a和R7b中的一個或兩個可獨立與R4和R5中的一個或兩個連接，從而形成一個或多個包括與R4和R5相連的氮的雜環(huán)，或R7a和R7b中的一個或兩個可獨立與R8連接形成環(huán)；其中各R7a和R7b可獨立地任選被1-5個鹵素、1-3個羥基、1-3個烷基、1-3個烷氧基、1-3個氨基、1-3個烷基氨基、1-3個二烷基氨基、1-3個腈或1-3個鹵代烷基取代；R8是氫或C1-C6烷基，或R8可與R4、R5、R7a或R7b連接形成環(huán)；R9是鹵素、烷基、環(huán)基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、烷氧基、鹵代烷基、鹵代烷氧基、鹵代烷硫基、乙?；⑶杌?、硝基、羥基、氧代、C(O)OR2、OC(O)R2、N(R2)2、C(O)N(R2)2、NR2C(O)R2、SR2；各R10獨立地是烷基、烯基、炔基、鹵素、氰基、羰基、芳基、芳基烷基、芳基烯基、芳基炔基、環(huán)基、環(huán)烷基、烷氧基、烷氧基烷基、芳基氧基、芳基氧基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)烷基、雜芳基、雜芳基烷基、-OR11、-NR11R11′、-CF3、-SOR12、-SO2R12、-OC(O)R11、-SO2NR12R12′、-(CH2)mR14或R15；其各自任選獨立地被1-3個R16取代；R11和R11′各自獨立地是氫、烷基、烯基、炔基、環(huán)基、雜環(huán)基、芳基或雜芳基；R12和R12′各自獨立地是氫、烷基、烯基、炔基、烷基硫代烷基、烷氧基烷基、芳基、芳基烷基、雜環(huán)基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環(huán)烷基或環(huán)基、環(huán)烷基，或R12和R12′可共同被環(huán)化形成-(CH2)qX(CH2)s-；其中各R12和R12′可獨立地任選被1至3個選自鹵素、OR11、烷氧基、雜環(huán)烷基、-NR11C(O)NR11R11′、-C(O)NR11R11′、-NR11C(O)R11′、-CN、氧代、-NR11SO2R11′、-OC(O)R11、-SO2NR11R11′、-SOR13、-S(O)2R13、-COOH和-C(O)OR13的取代基取代；各R13獨立地是烷基、芳基、芳基烷基、雜芳基或雜芳基烷基，其各自可任選被-(CH2)wOH取代；各R14獨立地是烷氧基、烷氧羰基、-C(O)NR12R12′、-NR11R11′、-C(O)R12、-NR11C(O)NR11R11′或-N-雜芳基；各R15獨立地是-(CH2)pN(R12)C(O)R12′、-(CH2)pCN、-(CH2)pN(R12)C(O)OR12′、-(CH2)pN(R12)C(O)NR12R12′、-(CH2)pN(R12)SO2R12、-(CH2)pSO2NR12R12′、-(CH2)pC(O)NR12R12′、-(CH2)pC(O)OR12、-(CH2)pOC(O)OR12、-(CH2)pOC(O)R12、-(CH2)pOC(O)NR12R12′、-(CH2)pN(R12)SO2NR12R12′、-(CH2)pOR12、-(CH2)pOC(O)N(R12)(CH2)mOH、-(CH2)pSOR12、-(CH2)pSO2R12、-(CH2)pNR11R11或-(CH2)pOCH2C(O)N(R12)(CH2)mOH；各R16獨立地是鹵素、烷基、烯基、炔基、烷氧基、-(CH2)pNR11C(O)NR11R11′、-(CH2)pC(O)NR11R11′、-(CH2)pNR11C(O)R11′、-CN、-(CH2)pNR11SO2R11′、-(CH2)pOC(O)R11、-(CH2)pSO2NR11R11′、-(CH2)pSOR13、-(CH2)pCOOH或-(CH2)pC(O)OR13；X是CR11R11’、O、S、S(O)、S(O)2或NR11；m是1至6的整數(shù)；p是0至5的整數(shù)；
q和s各自獨立地是1至3的整數(shù)；并且w是0至5的整數(shù)。
在一些例子中，Xa包括下面式(II)中描述的部分； 式(II)其中Q1和Q2各自獨立地是環(huán)基、雜環(huán)、芳基或雜芳基環(huán)，其中Q1可被1至4個R10取代且Q2可被1-4個選自R10和Q3的取代基取代；Q3是3-8元稠合的或螺環(huán)烷基、雜環(huán)、芳基或雜芳基環(huán)，其中Q3可任選被1-5個選自R10和Q4的取代基取代；并且Q4是3-8元稠合的或螺環(huán)烷基、雜環(huán)、芳基或雜芳基環(huán)，其中Q4可任選被1-5個R10取代；B是N或CR17；D是N或CR17；并且R17是H或鍵。
在一些例子中，Xa包括下面描述的結(jié)構(gòu)



在各例子中，Xa任選被1至4個R10取代，其中該取代不限于碳原子，還可位于雜原子上，包括被描述為與氫結(jié)合的那些氮原子。
在一些例子中，Xa是 在各例子中，Xa任選被1至4個R10取代，其中該取代不限于碳原子，還可位于雜原子上，包括被描述為與氫結(jié)合的那些氮原子。
在一些實施方案中，R10是R15。
在一些實施方案中，R10是R15；并且R12是雜環(huán)基或烷基，任選被羥基或鹵素取代。
在一些例子中，R15是(CH2)pC(O)OR12、(CH2)pOC(O)R12或(CH2)pOC(O)N(R12)(CH2)mOH。
在一些例子中，R10是R15，并且R12和R12′獨立地是氫、烷基或環(huán)烷基，其中該烷基或環(huán)烷基任選被-C(O)OR13或-C(O)NR11R11′取代，或R12和R12′可共同被環(huán)化形成-(CH2)qX(CH2)s-。
在一些例子中，R15是-(CH2)pN(R12)C(O)OR12′、-(CH2)pN(R12)C(O)NR12R12′或(CH2)pOC(O)NR12R12′，其中R12和R12′獨立地是氫或烷基，其中該烷基任選被-C(O)NR11R11′取代，其中R11和R511′獨立地是氫或烷基。
在一些實施方案中，n是1；k是鍵或O；并且R1是芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基。
在一些實施方案中，n是1；k是O；并且
R1是芳基烷基。
例如，R1可以是苯甲基。
在一些實施方案中，n是2；k是鍵；并且R1是芳基。
在一些實施方案中，R1和R3共同形成雜環(huán)。該雜環(huán)可被，例如，1-2個R6取代。
在一些實施方案中，R1和R2共同形成環(huán)。
在一些例子中；A是 例如，A可以是 或A可以是 其中R7a和R7b是H；x是1；并且y是0或1。
在一些實施方案中，A是CH2CH2或CH2CH2CH2；并且各R4和R5獨立地是烷基，或R4和R5，結(jié)合在一起時，形成雜環(huán)。在一些實施方案中，R7a和R7b可各自是H。
在一些實施方案中，R7a或R7b中的至少一個與R4或R5中的至少一個形成包括與R4和R5相連的氮的雜環(huán)。
在一些實施方案中，R7a和R7b各自獨立地是烷基；R4和R5各自獨立地是氫或烷基；并且x和y各自獨立地是0或1。
在一些實施方案中， 結(jié)合在一起是 在一些實施方案中， 結(jié)合在一起是 在一些實施方案中， 結(jié)合在一起是
在一些實施方案中， 結(jié)合在一起是 在一些實施方案中， 結(jié)合在一起是 在一些例子中，A是起適當(dāng)定位氨基位置作用的間隔基。在一些例子中，A是環(huán)狀烷基或直鏈烷基鏈。在其它例子中，A是芳基部分。
在一些例子中R1是芳基烷基、雜芳基烷基或芳烷氧基。
在一些例子中R2是H或CH3。
一方面，本發(fā)明特征在于具有式(I)結(jié)構(gòu)或本文所述其它結(jié)構(gòu)的化合物，并且該化合物與生長素釋放肽競爭結(jié)合GHS-R。
另一方面，本發(fā)明特征在于具有式(I)的結(jié)構(gòu)或本文所述其它結(jié)構(gòu)的化合物，并且該化合物用于改變受治療者的食欲或改變受治療者的進食行為是有效的。
另一方面，本發(fā)明特征在于具有式(I)的結(jié)構(gòu)或本文所述其它結(jié)構(gòu)的化合物，并且該化合物用于調(diào)節(jié)白脂肪組織(WAT)中的抗性蛋白，瘦蛋白或脂連蛋白mRNA或調(diào)節(jié)血液中胰島素、IGF-1、GH、皮質(zhì)醇、甘油三酯、游離脂肪酸、膽固醇(例如，VLDL或HLDL粒子)或葡萄糖的水平是有效的。
另一方面，本發(fā)明特征在于具有式(I)的結(jié)構(gòu)或本文所述其它結(jié)構(gòu)的化合物，并且該化合物用于抑制贅生性細胞，例如，對生長素釋放肽-敏感的贅生性病癥或?qū)HS-R拮抗劑-敏感的贅生性病癥的細胞的生長是有效的。
另一方面，本發(fā)明特征在于表1中所列的化合物。
另一方面，本發(fā)明特征在于調(diào)節(jié)(例如，拮抗、激動或逆向激動)GHS-R活性的有機化合物，該化合物具有小于700道爾頓的分子量，并且具有少于4個L-或D-氨基酸(例如，及其任意的鹽)。例如，該化合物可以，在特定實施方案中，結(jié)合或以其它方式包括金屬陽離子。
在一個實施方案中，該有機化合物包括雜芳基磺酰胺部分。在一個實施方案中，該化合物包括多環(huán)雜芳基(例如，聯(lián)芳基或三芳基)磺酰胺部分。在一個實施方案中，該化合物所具有的分子量小于[D-Lys-3]-GHRP-6或H(2)N-D-arg-Pro-Lys-Pro-d-Phe-Gln-d-Trp-Phe-d-Trp-Leu-Leu-NH(2)(L-756,867)或在[D-Lys-3]-GHRP-6或L-756,867的2、1.5、1.4、1.2、1.1、0.8、0.6或0.5倍之內(nèi)。
另一方面，本發(fā)明特征在于一種藥物組合物，它包含本文所述化合物，例如，表1中所列的或上面所述的化合物，和藥學(xué)上可接受的載體。
另一方面，本發(fā)明特征在于一種降低受治療者中GHS-R活性的方法。該方法包括給予受治療者有效降低受治療者中GHS-R活性的量的本文所述化合物。在一個實施方案中，該受治療者是哺乳動物，例如，人、靈長類動物、狗、貓、賽馬、純種動物或農(nóng)業(yè)哺乳動物。在一個實施方案中，受治療者超重或肥胖。
在一個實施方案中，調(diào)節(jié)下列組織一個或多個中的GHS-R活性垂體、腦、脊髓、子宮、脾、胰腺、腎、腎上腺、骨骼肌、甲狀腺、肝、下丘腦、心臟、肺、胰腺、腸和脂肪組織。
另一方面，本發(fā)明特征在于一種方法，該方法包括使用已經(jīng)確立的臨床標準(例如，NIH Clinical Guidelines on the Identification andEvaluation，and Treatment of Overweight and Obesity inAdults”(1998))，鑒定受治療者肥胖、有肥胖的危險、耐胰島素或超重；并給予受治療者有效減少重量或防止重量增加、減少脂肪含量、增加代謝活性、降低血液葡萄糖濃度、降低血液胰島素濃度或增加胰島素敏感性的量的本文所述化合物。
肥胖還可通過受治療者的體重指數(shù)(BMI)定義，其是用于指示體重狀態(tài)的工具，并且是身高與體重的度量。(見Garrow JS and WebsterJ.Quetelet′s index(W/H2)as a measure of fatness.InternationalJournal of Obesity 1985；9147-153.)。18.5或以下的BMI被認為體重過輕，18.5-24.9之間的BMI被認為是標準的，25.0-29.9之間的BMI被認為超重，30.0或更高的BMI被認為肥胖。BMI范圍基于體重對疾病和死亡的影響。(見，World Health Organization.Physical statusThe use and interpretation of anthropometry.Geneva，SwitzerlandWorld Health Organization 1995.WHO Technical Report Series.)。隨著BMI增加，某些疾病的危險也增加。
另一方面，本發(fā)明特征在于一種治療患有與飲食過多和肥胖有關(guān)的Prader-Willi綜合征的受治療者的方法。Prader-Willi綜合征是一種局限于染色體15的遺傳疾病，其特征在于飲食過多、肥胖、張力減退、和輕度精神發(fā)育遲緩。(見，例如，Growth Hormone & IGFReseareh 13(2003)322-327；Growth Hormone & IGF Research 14(2004)1-15；The Journal of Clinical Endrocrinology & Metabolism88(1)174-178；The Journal of Clinical Endrocrinology & Metabolism88(5)2206-2212；The Journal of Clinical Endrocrinology &Metabolism 88(5)3573-3576；The Journal of Clinical Endrocrinology& Metabolism 87(12)5461-5464.)。該方法包括給予受治療者本文所述的化合物，其量為有效維持或減少受治療者體重、和/或減少受治療者食欲、控制飲食過多繼發(fā)的行為性失調(diào)、并降低與這些個體過度肥胖有關(guān)的發(fā)病和死亡的危險的量。與肥胖有關(guān)的死亡包括II型糖尿病、心血管疾病、和中風(fēng)。在一些例子中，可通過DNA甲基化試驗、微衛(wèi)星試驗、和/或患者的臨床表型分析，鑒定患有與肥胖有關(guān)的Prader-Willi綜合征的受治療者。
另一方面，本發(fā)明特征在于一種治療或預(yù)防與胰島素有關(guān)的病癥，例如，糖尿病、視網(wǎng)膜病、神經(jīng)病、腎病、和終末器官損害的方法。該方法包括給予受治療者有效治療或預(yù)防受治療者耐胰島素的量的本文所述化合物。
另一方面，本發(fā)明特征在于一種方法，該方法包括給予受治療者有效降低受治療者中GHS-R活性的量的本文所述化合物(例如，給予拮抗劑或逆激動劑)。在一個實施方案中，受治療者被診斷患有選自癌癥、糖尿病、神經(jīng)學(xué)障礙、肥胖、與年齡-有關(guān)的病、贅生性病、非-贅生性病、心血管病、代謝病或皮膚病的疾病。
例如，口服或腸胃外，例如，通過注射等給予該化合物。在一個實施方案中，以多個時間間隔，例如，定期時間間隔給予該化合物。在一個實施方案中，該方法還包括監(jiān)測受治療者的GH或IGF-1活性、監(jiān)測受治療者由GHS-R調(diào)節(jié)的基因或蛋白(例如，抗性蛋白、瘦蛋白或脂連蛋白)或監(jiān)測受治療者的生長素釋放肽、胰島素、瘦蛋白和/或IGF-1的血液或血漿水平。
另一方面，本發(fā)明特征在于一種治療或預(yù)防疾病的方法，該疾病的特征在于超過需要或正常水平的生長素釋放肽水平(例如，生長素釋放肽水平升高，如Prader-Willi綜合征)或GHS-R介導(dǎo)的信號水平。該方法包括給予受治療者有效減弱、抑制或阻斷受治療者中GHS-R介導(dǎo)信號的量的本文所述化合物。
另一方面，本發(fā)明特征在于一種治療或預(yù)防疾病的方法，該疾病的特征在于低于需要或正常水平的生長素釋放肽水平或GHS-R介導(dǎo)的信號水平。該方法包括給予受治療者有效增加受治療者中GHS-R介導(dǎo)信號的量的本文所述化合物，例如，在下列組織一個或多個中垂體、腦、脊髓、子宮、脾、胰腺、腎、腎上腺、骨骼肌、甲狀腺、肝、小腸、和心臟。
另一方面，本發(fā)明特征在于一種治療或預(yù)防GHS-R敏感的贅生性疾病的方法。該方法包括給予受治療者有效改善受治療者中贅生性疾病(例如，抑制增殖、殺死細胞或降低或抑制贅生性細胞的生長或活性)的量的本文所述化合物。
另一方面，本發(fā)明特征在于一種調(diào)節(jié)受治療者進食行為的方法。該方法包括給予受治療者有效調(diào)節(jié)受治療者進食行為，例如增加受治療者食欲的量的本文所述化合物。在一個實施方案中，在進餐時間或可獲得食物的時間之前(例如，之前至少0.5、1、2或4小時)給予該化合物。在相關(guān)方面，該方法包括給予受治療者有效調(diào)節(jié)受治療者進食行為，例如，減少受治療者食欲的量的化合物。在一個實施方案中，在進餐時間或可獲得食物的時間之前(例如，之前至少0.5、1、2或4小時)給予該化合物。
另一方面，本發(fā)明特征在于一種治療或預(yù)防受治療者贅生性疾病的方法。該方法包括確定該贅生性疾病是否由對生長素釋放肽或GHS-R激動劑或?qū)HS-R拮抗劑敏感的細胞所介導(dǎo)，并選擇本文所述GHS-R相互作用化合物；并給予受治療者所選擇的化合物。
另一方面，本發(fā)明特征在于一種治療或預(yù)防神經(jīng)變性障礙的方法。該方法包括給予受治療者有效改善受治療者神經(jīng)變性障礙的量的本文所述化合物。
另一方面，本發(fā)明特征在于一種治療或預(yù)防代謝紊亂的方法。該方法包括給予受治療者有效改善受治療者代謝紊亂的量的本文所述化合物。
另一方面，本發(fā)明特征在于一種治療或預(yù)防心血管障礙的方法。該方法包括給予受治療者有效改善受治療者心血管病的量的本文所述化合物。
一方面，本發(fā)明包括一種治療胃、腸(例如小腸或大腸)或十二指腸的障礙，或通常是通過消化系統(tǒng)(例如，胃或小腸)的轉(zhuǎn)運受損的障礙的方法。該障礙可由，例如，對導(dǎo)致胃或小腸收縮的神經(jīng)，如迷走神經(jīng)的損害引起。此外，該障礙可以是慢性的或急性的。該障礙的治療不受其原因的限制。在一些實施方案中，在手術(shù)后的患者中出現(xiàn)機能障礙，例如，其中手術(shù)介入導(dǎo)致胃或結(jié)腸運動性失調(diào)。在其它實施方案中，機能障礙與腹膜內(nèi)或腹膜后感染、腸系膜局部缺血、動脈或靜脈損傷、腹膜后或腹內(nèi)血腫、腹內(nèi)手術(shù)、腎或胸病或代謝紊亂(例如，血鉀過少)有關(guān)。在一些實施方案中，機能障礙由于慢性病，如糖尿病而出現(xiàn)，其可導(dǎo)致對胃或腸的神經(jīng)損害。障礙的代表性例子包括腸梗阻(例如，手術(shù)后腸梗阻)和胃輕癱(例如在患有1型或2型糖尿病的受治療者中出現(xiàn)的糖尿病性胃輕癱)。
在其它實施方案中，式(I)化合物可用于治療惡病質(zhì)，特別是與癌癥有關(guān)的惡病質(zhì)。可將本文所述或所稱的有效量的化合物給予遭受惡病質(zhì)危險的受治療者，用于惡病質(zhì)的治療或預(yù)防。
另一方面，本發(fā)明特征在于一種試劑盒，它包含本文所述化合物；和給予該化合物治療本文所述障礙，例如進食障礙、特征在于過量或不期望的GHS-R活性的代謝紊亂、心血管病、神經(jīng)變性障礙、和與GH/IGF-1活性改變有關(guān)的障礙的用法說明。
另一方面，本發(fā)明特征在于一種試劑盒，它包含(1)本文所述化合物；和(2)一種或多種用于監(jiān)測由GHS-R調(diào)節(jié)的一種或多種基因，例如抗性蛋白、瘦蛋白或脂連蛋白表達的試劑，或一種或多種用于監(jiān)測代謝調(diào)節(jié)劑如生長素釋放肽、胰島素、IGF-1或瘦蛋白的血漿水平的試劑。
一方面，本發(fā)明特征在于一種調(diào)節(jié)受治療者中IGF-1水平(例如循環(huán)IGF-1水平)的方法。該方法包括給予本文所述化合物。在一個實施方案中，以有效調(diào)節(jié)IGF-1水平(例如，增加或降低IGF-1水平)的量給予受治療者本文所述的化合物。具體而言，認為拮抗劑用于降低IGF-1水平是有效的，而認為激動劑用于增加IGF-1水平是有效的。
一方面，本發(fā)明特征在于一種調(diào)節(jié)受治療者中胰島素水平(例如，循環(huán)胰島素水平)的方法。該方法包括給予本文所述化合物。在一個實施方案中，以有效調(diào)節(jié)胰島素水平(例如，增加或降低胰島素水平)的量給予受治療者本文所述的化合物。具體而言，認為拮抗劑用于降低胰島素水平是有效的，而認為激動劑用于增加胰島素水平是的效的。
一方面，本發(fā)明特征在于一種調(diào)節(jié)受治療者中葡萄糖水平(例如，循環(huán)或血液葡萄糖水平)的方法。該方法包括給予本文所述的化合物。在一個實施方案中，以有效調(diào)節(jié)葡萄糖水平(例如，增加或降低葡萄糖水平)的量給予受治療者本文所述的化合物。具體而言，認為激動劑用于增加葡萄糖水平是有效的，而認為拮抗劑用于降低葡萄糖水平是有效的。
術(shù)語“鹵素”是指氟、氯、溴或碘的任意基團。術(shù)語“烷基”是指烴鏈，其可以是直連或支鏈，含有所示數(shù)目的碳原子。例如，C1-C10表示該基團中可具有1-10(含)個碳原子。術(shù)語“低級烷基”是指C1-C8烷基鏈。在沒有任何數(shù)字標示的情況下，“烷基”是其中具有1至10(含端值)個碳原子的鏈(直鏈或支鏈)。術(shù)語“烷氧基”是指-O-烷基。術(shù)語“亞烷基”是指二價烷基(即，-R-)。術(shù)語“氨烷基”是指被氨基取代的烷基。術(shù)語“巰基”是指-SH基團。術(shù)語“硫代烷氧基”是指-S-烷基。
術(shù)語“烯基”是指具有一個或多個碳-碳雙鍵的可以是直連或支鏈的烴鏈。烯基部分含有所示數(shù)目的碳原子。例如，C2-C10表示其中可具有2-10(含)個碳原子的基團。術(shù)語“低級烯基”是指C2-C8烯基鏈。在沒有任何數(shù)字表示的情況下，“烯基”是其中具有2-10(含)個碳原子的鏈(直連或支鏈)。
術(shù)語“炔基”是指具有一個或多個碳-碳三鍵的可以是直連或支鏈的烴鏈。烯基部分含有所示數(shù)目的碳原子。例如，C2-C10表示其中可具有2-10(含)個碳原子的基團。術(shù)語“低級炔基”是指C2-C8炔基鏈。在沒有任何數(shù)字表示的情況下，“炔基”是其中具有2-10(含)個碳原子的鏈(直連或支鏈)。
術(shù)語“芳基”是指6-碳單環(huán)的、10-碳雙環(huán)的或14-碳三環(huán)的芳香環(huán)系統(tǒng)，其中各環(huán)的0、1、2、3或4個原子可被取代基取代。芳基的例子包括苯基、萘基等。術(shù)語“芳基烷基”或“芳烷基”是指被芳基取代的烷基。術(shù)語“芳基烯基”是指被芳基取代的烯基。術(shù)語“芳基炔基”是指被芳基取代的炔基。術(shù)語“芳基烷氧基”是指被芳基取代的烷氧基。
本文所用術(shù)語“環(huán)烷基”或“環(huán)基”包括具有3-12個碳，優(yōu)選3-8個碳，并且更優(yōu)選3-6個碳的飽和和部分不飽和的環(huán)狀烴基，其中該環(huán)烷基可任選被取代。優(yōu)選的環(huán)烷基包括，不限于，環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)戊烯基、環(huán)己基、環(huán)己烯基、環(huán)庚基、和環(huán)辛基。
術(shù)語“雜芳基”是指芳香的5-8元單環(huán)的、8-12元雙環(huán)的或11-14元三環(huán)的環(huán)系統(tǒng)，如果是單環(huán)的則具有1-3個雜原子，如果是雙環(huán)的則具有1-6個雜原子，或如果是三環(huán)的則具有1-9個雜原子，所述雜原子選自O(shè)、N或S(例如，如果是單環(huán)的、雙環(huán)的或三環(huán)的，則分別是碳原子和1-3、1-6或1-9個N、O或S雜原子)，其中各環(huán)的0、1、2、3或4個原子可被取代基取代。雜芳基的例子包括吡啶基、呋喃基或呋喃基、咪唑基、苯并咪唑基、嘧啶基、苯硫基或噻吩基、喹啉基、吲哚基、噻唑基等。術(shù)語“雜芳基烷基”或術(shù)語“雜芳烷基”是指被雜芳基取代的烷基。術(shù)語“雜芳基烯基”是指被雜芳基取代的烯基。術(shù)語“雜芳基炔基”是指被雜芳基取代的炔基。術(shù)語“雜芳基烷氧基”是指被雜芳基取代的烷氧基。
術(shù)語“雜環(huán)基”是指非芳香的5-8元單環(huán)的、8-12元雙環(huán)的或11-14元三環(huán)的環(huán)系統(tǒng)，如果是單環(huán)的則具有1-3個雜原子，如果是雙環(huán)的則具有1-6個雜原子，或如果是三環(huán)的則具有1-9個雜原子，所述雜原子選自O(shè)、N或S(例如，如果是單環(huán)的、雙環(huán)的或三環(huán)的，則分別是碳原子和1-3、1-6或1-9個N、O或S雜原子)，其中各環(huán)的0、1、2或3個原子可被取代基取代。雜環(huán)基的例子包括哌嗪基、吡咯烷基、二烷基、嗎啉基、四氫呋喃基等。術(shù)語“雜環(huán)烷基”是指被雜環(huán)基取代的烷基。
術(shù)語“磺?；笔峭ㄟ^雙鍵與兩個氧原子相連的硫。“烷基磺?；笔侵副换酋；〈耐榛?。
術(shù)語“氨基酸”是指既含有氨基又含有羧基的分子。適宜的氨基酸包括，不限于，肽中發(fā)現(xiàn)的20種天然存在的氨基酸(例如，A、R、N、C、D、Q、E、G、H、I、L、K、M、F、P、S、T、W、Y、V(由一個字母的縮寫詞表示))以及通過有機合成或其它代謝途徑制備的非天然存在的氨基酸的D-和L-異構(gòu)體。
術(shù)語“氨基酸側(cè)鏈”是指與天然存在氨基酸中的α-碳相連的二十個基團中的任意一個。例如，丙氨酸的氨基酸側(cè)鏈是甲基，苯丙氨酸的氨基酸側(cè)鏈是苯甲基，半胱氨酸的氨基酸側(cè)鏈是硫代甲基，天門冬氨酸的氨基酸側(cè)鏈是羧甲基，酪氨酸的氨基酸側(cè)鏈是4-羥苯甲基等。
術(shù)語“取代基”是指在烷基、環(huán)烷基、芳基、雜環(huán)基或雜芳基的任意原子上“被取代的”基團。本文所述任意部分均可被取代基進一步取代。適宜的取代基包括，不限于，鹵素、羥基、巰基、氧代、硝基、鹵代烷基、烷基、芳基、芳烷基、烷氧基、硫代烷氧基、芳基氧基、氨基、烷氧羰基、酰氨基、羧基、烷磺酰基、烷基羰基、和氰基。
GHS-R可調(diào)節(jié)GH的分泌。GH本身是IGF-1產(chǎn)生的調(diào)節(jié)劑。因此，調(diào)節(jié)GHS-R活性的化合物，例如，本文所述化合物，可用于調(diào)節(jié)(例如，增加或降低)GH/IGF-1軸的活性。例如，GHS-R的激動劑可用于增加GH活性和/或IGF-1活性。GHS-R的拮抗劑可用于降低GH活性和/或IGF-1活性。本申請還參考USSN 10/656,530，其內(nèi)容包括用途，本文所述化合物可用作，例如，GH/IGF-1軸的調(diào)節(jié)劑。
GH/IGF-1軸包括一系列胞外和胞內(nèi)、具有作為下游靶的轉(zhuǎn)錄因子Forkhead信號組分。GH/IGF-1軸的主要組分可分為三類前-IGF-1、IGF-1、和后-IGF-1組分?！扒?IGF-1組分”包括GH、GH-R、生長素釋放肽、GHS-R、GHRH、GHRH-R、SST、和SST-R?！昂?IGF-1組分”包括IGF-1-R和胞內(nèi)的包括PI(3)激酶、PTEN磷酸酶、PI(3，4)P2、14-3-3蛋白、和PI(3，4，5)P3磷脂酰肌醇激酶、AKT絲氨酸/蘇氨酸激酶(例如，AKT-1、AKT-2或AKT-3)或Forkhead轉(zhuǎn)錄因子(如FOXO-1、FOXO-3或FOXO-4)的信號組分。“促生長素細胞軸信號途徑組分”是指下列之一的蛋白(i)位于促生長素細胞中并調(diào)節(jié)由促生長素細胞引起的GH釋放的蛋白，或(ii)直接與(i)類中蛋白結(jié)合的蛋白。(i)類的舉例性促生長素細胞軸信號途徑組分包括細胞表面受體如GHS-R、GHRH-R、和SST-R。(ii)類的舉例性促生長素細胞軸信號途徑組分包括GHRH、生長素釋放肽、和SST。
通過改變GHS-R活性而調(diào)節(jié)GH水平的化合物可具有下游作用。例如，該化合物可改變(例如，增加或降低)IGF-1受體信號途徑效應(yīng)子的水平或活性?！癐GF-1受體信號途徑效應(yīng)子”是指它的水平應(yīng)IGF-1而直接被Forkhead轉(zhuǎn)錄因子調(diào)節(jié)的蛋白或其它生物分子。例如，編碼該蛋白的基因的表達可由Forkhead轉(zhuǎn)錄因子如FOXO-1、FOXO-3a或FOXO-4直接調(diào)節(jié)。舉例的IGF-1受體信號途徑效應(yīng)子可包括GADD45、PA26、含硒蛋白P、Whip1、細胞周期蛋白G2、和NIP3。
本文所用“GH/IGF-1軸的活性”是指該軸組分關(guān)于刺激GH分泌、增加IGF-1水平或增加IGF-1受體信號能力的凈效果。因此，“向下調(diào)節(jié)GH/IGF-1軸”是指調(diào)節(jié)一種或多種組分，以致減少下列中的一種或多種，例如，降低的GH、降低的IGF-1或降低的IGF-1受體信號。例如，在一些情況下，維持了GH水平但抑制了其作用；因此IGF-1水平降低，而沒有降低GH水平。在一些情況下，GH和IGF-1水平均降低。
特定蛋白的“拮抗劑”包括在蛋白水平上，直接結(jié)合或修飾目標組分，從而例如通過競爭性或非-競爭性抑制、去穩(wěn)定、破壞、清除或其它方式降低目標組分活性的化合物。例如，降低的活性可包括應(yīng)答內(nèi)源性配體的能力降低。例如，GHS-R拮抗劑可降低GHS-R應(yīng)答生長素釋放肽的能力。
特定蛋白的“激動劑”包括在蛋白水平上，直接結(jié)合或修飾目標組分，從而例如通過活化、穩(wěn)定化、改變分布或其它方式增加目標組分活性的化合物。
特定蛋白的“逆激動劑”包括在蛋白水平上，通過結(jié)合該蛋白的非活性形式(其可推動平衡遠離該蛋白活性構(gòu)象的形成)，和/或使其穩(wěn)定而引起該蛋白(例如，受體)的構(gòu)成活性，以及消極的固有活性被抑制的化合物。
通常，受體以活性(Ra)和非活性(Ri)構(gòu)象存在。影響該受體的特定化合物可改變Ra與Ri的比(Ra/Ri)。例如，完全激動劑可增加Ra/Ri比并可引起“最大的”，飽和作用。部分激動劑，當(dāng)與該受體結(jié)合時，產(chǎn)生低于由完全激動劑(例如，內(nèi)源性激動劑)所引起的應(yīng)答。因此，部分激動劑的Ra/Ri低于完全激動劑的Ra/Ri。然而，部分激動劑的效價可能高于或低于完全激動劑的效價。
比生長素釋放肽更低程度地激動GHS-R的特定化合物可作為拮抗劑以及激動劑在測定中發(fā)揮作用。這些化合物拮抗生長素釋放肽所致GHS-R的活化，這是因為它們可防止生長素釋放肽-受體相互作用的完全作用。然而，該化合物還，獨立地，激活一些受體活性，通常低于相應(yīng)量的生長素釋放肽。這類化合物可被稱作“GHS-R的部分激動劑”。
具有“正?！盙H水平的受治療者是使用葡萄糖耐受性試驗回到正常結(jié)果的受治療者，在該試驗中攝取葡萄糖并通過酶聯(lián)-免疫吸附測定法(ELISA)、放射性免疫測定法(RIA)或多克隆免疫測定法測量GH的血液水平。該試驗的正常結(jié)果的特征是口服葡萄糖負荷的1-2小時內(nèi)，低于1ng/mL的GH。然而，具有過量GH的受治療者的GH水平，就像在患有肢端肥大癥的受治療者中，在攝取葡萄糖之后，可不降至低于1ng/mL。因為GH水平每隔20-30分鐘發(fā)生振動且水平根據(jù)一天的時間、應(yīng)激水平、運動等而變化，所以測定GH水平是否過量的標準方法是給予葡萄糖。該方法使GH標準化且不太受GH波動、年齡、性別或其它因素影響。可選擇性地或作為證明，因為在肢端肥大個體中IGF-1水平恒定增加，因此可測量IGF-1水平并與年齡和性別相匹配的正常對照進行比較。
術(shù)語“GH/IGF-1軸活性的指示器”是指GH/IGF-1軸的可檢測性質(zhì)，其是該軸活性的表示。舉例性質(zhì)包括循環(huán)GH濃度、循環(huán)IGF-1濃度、GH脈沖頻率、GH脈沖幅度、應(yīng)答葡萄糖的GH濃度、IGF-1受體磷酸化、和IGF-1受體底物磷酸化。調(diào)節(jié)GHS-R活性的化合物可改變GH/IGF-1軸活性的一個或多個指示器。
縮寫詞GH，生長激素；GH-R，生長激素受體；IGF，胰島素-樣生長因子；GHRH，GH釋放激素；GHRH-R，GH釋放激素受體；GHS，GH促分泌素；GHS-R，GH促分泌素受體；SST，促生長素抑制素；SST-R，促生長素抑制素受體；PI，磷酸肌醇；AGRP，野灰蛋白相關(guān)蛋白；ARC，弓形核；ICV，第三腦室內(nèi)(ly)；NPY，神經(jīng)肽Y；WAT，白脂肪組織；Bn，芐基；Boc，t丁氧羰基；Cbz，芐氧羰基；DCM，二氯甲烷；DIPEA，二異丙基乙胺；DMF，二甲基甲酰胺；EDC，1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亞胺鹽酸鹽；EtOAc，乙酸乙酯；h，小時；HOBT，羥基苯并三唑；Ms，甲磺?；?；Prep LC，制備型高壓液相色譜法；RT，室溫；TFA，三氟乙酸；THF，四氫呋喃。
在下面的描述中提供本發(fā)明一個或多個實施方案的詳細內(nèi)容。根據(jù)說明書和權(quán)利要求，本發(fā)明的其它特征、目的、和優(yōu)點是顯而易見的。
詳細描述本文所述化合物可用于多種目的，例如，治療性目的。許多化合物均可拮抗GHS-R活性并可用于降低受治療者中的GHS-R活性。還有其它化合物可激動GHS-R并可用于增加受治療者中的GHS-R活性。一些已經(jīng)公開的化合物還可通過調(diào)節(jié)細胞組分，而不是GHS-R的活性而提供有效的生物學(xué)作用。
本發(fā)明的代表性化合物在下面的表1中描述。其它舉例的化合物落在概述中或本文別處描述的范圍之內(nèi)。
表1舉例的GHS-R調(diào)節(jié)性化合物
調(diào)節(jié)GHS-R的代表性化合物包括式(I)的化合物，其中所有變量如本文中所描述。
式(I)可選擇A和R4和R5從而改變與GHS-R相互作用的化合物的類型。例如，在一些情況中，R4和R5都是氫，該化合物是GHS-R的激動劑。在其它情況中，R4和R5獨立都是烷基，該化合物是GHS-R拮抗劑。
本發(fā)明的其它方面涉及一種組合物，它含有本文所述任意式的化合物和藥學(xué)上可接受的載體；或含有本文所述任意式的化合物、其它治療性化合物(例如，抗-高血壓的化合物或降低膽固醇的化合物)、和藥學(xué)上可接受的載體；或含有本文所述任意式的化合物、其它治療性化合物、和藥學(xué)上可接受的載體。
本發(fā)明預(yù)想的取代基和變量的組合僅僅是導(dǎo)致穩(wěn)定化合物形成的那些。本文所用術(shù)語“穩(wěn)定的”涉及所具有的穩(wěn)定性足以允許制備且其可使化合物完整性維持一段足夠長的時間，從而可用于本文所述目的(例如，治療性或預(yù)防性給予受治療者)的化合物。
生長素釋放肽受體-調(diào)節(jié)性化合物的合成正如本領(lǐng)域技術(shù)人員可以認識到的，合成本文所述式的化合物的方法對本領(lǐng)域普通技術(shù)人員而言是顯而易見的。例如，可使用WO2004/021984、2004年4月2日提交的美國專利申請No.60/559,166和2003年11月4日提交的美國專利申請No.60/517,058中描述的方法，合成本文所述的化合物，其中每篇的內(nèi)容均整體引入本文作為參考?？捎糜诤铣杀疚乃龌衔锏暮铣苫瘜W(xué)轉(zhuǎn)化和保護基團方法學(xué)(保護和脫保護)是本領(lǐng)域已知的且包括，例如，R.Larock，ComprehensiveOrganic Transformations，VCH Publishers(1989)；T.W.Greene和P.G.M.Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis，2d.Ed.，JohnWiley and Sons(1991)；L.Fieser和M.Fieser，F(xiàn)ieser and Fieser′sReagents for Organic Synthesis，John Wiley and Sons(1994)；和L.Paquette，ed.，Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis，JohnWiley and Sons(1995)，及其后來版本中描述的那些。
此外，本文公開的化合物可在固體支持物上或使用固相肽合成制備。
術(shù)語“固體支持物”是指化合物與其相連，從而有助于化合物的鑒定、分離、純化或化學(xué)反應(yīng)選擇性的材料。這類材料是本領(lǐng)域已知的且包括，例如，珠子、小丸、圓盤、纖維、凝膠或粒子如纖維素珠、帶孔-玻璃珠、硅膠、任選與二乙烯基苯交聯(lián)且任選與聚乙二醇接枝的聚苯乙烯珠、聚-丙烯酰胺珠、乳膠珠、任選與N，N′-雙-丙烯酰基乙二胺交聯(lián)的二甲基丙烯酰胺珠、涂覆疏水聚合物的玻璃粒子、和具有剛性或半-剛性表面的材料。該固體支持物任選具有官能團如氨基、羥基、羧基或鹵素基團，(見，Obrecht，D.和Villalgrodo，J.M.，Solid-SupportedCombinatorial and Parallel Synthesis of Small-Molecular-WeightCompound Libraries，Pergamon-Elsevier Science Limited(1998))，并且包括可用于技術(shù)如“分離和混合”或“平行”合成技術(shù)、固相和液相技術(shù)、和編碼技術(shù)(見，例如，Czarnik，A.W.，Curr.Opin.Chem.Bio.，(1997)1，60)中的那些。
術(shù)語“固相肽”是指與樹脂(例如，固體支持物)化學(xué)鍵合的氨基酸。樹脂通常可商購(例如，從SigmaAldrich)。樹脂的一些例子包括Rink-樹脂、Tentagel S RAM、MBHA、和BHA-樹脂。
本發(fā)明的化合物可含有一個或多個不對稱中心且因此以外消旋體和外消旋混合物、單一的對映異構(gòu)體、單獨的非對映異構(gòu)體和非對映異構(gòu)混合物的形式存在。這些化合物的所有這類異構(gòu)體形式均清楚地包括在本發(fā)明中。本發(fā)明的化合物還可以多種互變異構(gòu)的形式提出，在這種情況下，本發(fā)明清楚地包括本文所述化合物的所有互變異構(gòu)形式(例如，環(huán)系統(tǒng)的烷基化可導(dǎo)致在多個位點烷基化，本發(fā)明清楚地包括所有這類反應(yīng)產(chǎn)物)。這類化合物的所有這種異構(gòu)體形式均清楚地包括在本發(fā)明中。本文所述化合物的所有晶形均包括在本發(fā)明中。
如本文所用，本發(fā)明的化合物，包括本文所述式的化合物，被定義為包括其藥學(xué)上可接受的衍生物或前體藥物?！八帉W(xué)上可接受的衍生物或前體藥物”是指本發(fā)明化合物的任何藥學(xué)上可接受的鹽、酯、酯的鹽或其它衍生物(例如，酰胺的酰胺化物酯)，其，在給予接受者后，能夠(直接或間接)提供本發(fā)明的化合物。特別有利的衍生物和前體藥物是當(dāng)把這類化合物給予哺乳動物時，可增加本發(fā)明化合物的生物利用度(例如，通過使口服給藥的化合物更容易地被吸收到血液中)或其相對于母種類而提高母化合物向生物隔室(例如，腦或淋巴系統(tǒng))的遞送的那些。優(yōu)選的前體藥物包括其中可提高水溶性或通過腸膜主動轉(zhuǎn)運的基團懸掛于本文所述式結(jié)構(gòu)上的衍生物。
本發(fā)明的化合物可通過附加適宜的官能度而被修飾，從而提高選擇性生物性質(zhì)。這類修飾是本領(lǐng)域已知的且包括增加向特定生物隔室(例如，血液、淋巴系統(tǒng)、中樞神經(jīng)系統(tǒng))中的生物滲透、增加口服利用度、增加溶解度以允許注射給藥、改變代謝和改變排泄速率的那些。
本發(fā)明化合物藥學(xué)上可接受的鹽包括從藥學(xué)上可接受的無機和有機酸和堿衍生的那些。適宜酸鹽的例子包括乙酸鹽、己二酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、丁酸鹽、檸檬酸鹽、二葡萄糖酸鹽、十二烷基硫酸鹽、甲酸鹽、延胡索酸鹽、羥乙酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽、乳酸鹽、馬來酸鹽、丙二酸鹽、甲磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、煙酸鹽、硝酸鹽、棕櫚酸鹽(palmoate)、磷酸鹽、苦味酸鹽、新戊酸鹽、丙酸鹽、水楊酸鹽、丁二酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、甲苯磺酸鹽和十一烷酸鹽。從適宜堿衍生的鹽包括堿金屬(例如，鈉)、堿土金屬(例如，鎂)、銨和N-(烷基)4+鹽。本發(fā)明還預(yù)期了本文公開化合物的任何堿性含氮基團的季銨化。水溶性或油溶性或可分散產(chǎn)物可通過這類季銨化獲得。
評價化合物各種方法均可用于評價化合物調(diào)節(jié)GHS-R活性的能力。評價方法包括體外結(jié)合測定法、體外基于細胞的信號測定法，和體內(nèi)方法。該評價方法可評價結(jié)合活性或GHS-R的活性下游，例如，GHS-R的信號活性下游如磷酸肌醇產(chǎn)生、Ca2+活動化或基因轉(zhuǎn)錄(例如，CREB-介導(dǎo)的基因轉(zhuǎn)錄)。
結(jié)合測定法。通常，可對化合物進行評價以確定它們是否結(jié)合GHS-R和它們是否與和GHS-R相互作用的一種或多種已知化合物競爭、和這種相互作用的程度。例如，可對化合物進行評價以確定它們是否與生長素釋放肽、ipamorelin、L-692,400或L-692,492競爭。
一個舉例的結(jié)合測定法如下以1×105個細胞/孔的密度培養(yǎng)表達GHS-R的COS-7細胞，從而在放射性配體約5-8％結(jié)合的范圍內(nèi)測定結(jié)合。例如，該細胞可表達編碼GHS-R的內(nèi)源性核酸或編碼GHS-R的外源性核酸?？稍谵D(zhuǎn)染后例如2天使用被編碼GHS-R的外源性核酸轉(zhuǎn)染的細胞。競爭結(jié)合實驗在4℃下進行3小時，其中使用含25pM125I-生長素釋放肽的0.5ml 50mM HEPES緩沖液，pH 7.4，其補充了1mM CaCl2，5mM MgCl2，和0.1％(w/v)牛血清白蛋白、40mg/ml桿菌肽?？筛鶕?jù)在有1mM未標記的生長素釋放肽存在條件下的結(jié)合，測定非-特異性結(jié)合。在0.5ml冰冷緩沖液中洗滌細胞兩次，然后使用0.5-1ml溶解緩沖液(含8M尿素，2％NP40的3M乙酸)溶解。洗滌和溶解之后，計數(shù)結(jié)合放射性。測定可一式兩份或一式三份進行，例如，提供統(tǒng)計學(xué)冪。
離解和抑制常數(shù)(Kd和Ki)的值可根據(jù)競爭結(jié)合實驗，使用下列公式估計Kd＝IC50-L和Ki＝IC50/(1+L/Kd)，其中L是放射性配體的濃度。Bmax值可根據(jù)競爭結(jié)合實驗，使用公式Bmax＝B0IC50/[配體]估計，其中B0是特異性結(jié)合的放射性配體。
基于細胞的活性測定法。例如，可評價化合物調(diào)節(jié)GHS-R的第二信使信號組分下游的蓄積的能力。例如，磷酸肌醇(IP)，作為哺乳動物細胞，例如，Cos-7細胞中Gq信號的結(jié)果。還可使用其它組織培養(yǎng)細胞、非洲蟾蜍卵母細胞和初級細胞。
磷脂酰肌醇轉(zhuǎn)換測定法。轉(zhuǎn)染后一天，使用含5μCi[3H]-肌-肌醇的1ml補充了10％胎牛血清、2mM谷氨酰胺和0.01mg/ml慶大霉素/孔的培養(yǎng)基培養(yǎng)COS-7細胞24小時。然后在補充了140mM NaCl、5mM KCl、1mM MgSO4、1mM CaCl2、10mM葡萄糖、0.05％(w/v)牛血清的緩沖液20mM HEPES，pH 7.4中洗滌細胞兩次；并在37℃下，在補充了10mM LiCl的0.5ml緩沖液中培養(yǎng)30分鐘。就一些測定而言，以1U/ml濃度培養(yǎng)細胞與腺苷脫氨酶ADA(200U/mg，Boehringer Mannheim，德國)30分鐘也是有用的。
37℃培養(yǎng)目標化合物45分鐘之后，用10％冰冷高氯酸提取細胞并放置在冰上30分鐘。用含KOH的HEPES緩沖液中和所得上清液，并按照所描述的在Bio-Rad AG 1-X8陰離子交換樹脂上純化[3H]-磷酸肌醇。測定可一式兩份、一式三份等進行。
其它第二信使測定法?？蛇M行評價的另一第二信使是Ca2+。Ca2+活動化可使用鈣敏感性檢測器，如水母發(fā)光蛋白或染料，例如FURA-2評價。在舉例的測定法中，在表達GHS-R和水母發(fā)光蛋白的重組細胞中評價鈣活動化。
基因表達測定法。使用pFA2-CREB和pFR-Luc報道質(zhì)粒(PathDetectTMCREB trans-Reporting System，Stratagene)和編碼GHS的核酸的混合物瞬時轉(zhuǎn)染接種在96-孔平板中的HEK293細胞(30000個細胞/孔)。轉(zhuǎn)染后一天，用目標化合物在100μl測定體積培養(yǎng)基中處理細胞5小時。處理之后，在低血清(2.5％)中培養(yǎng)細胞。培養(yǎng)期后，通過用PBS洗滌細胞兩次并加入100μl螢光素酶測定試劑(LucLiteTM，Packard Bioscience)而終止測定。使用發(fā)光計如TopCounterTM(Packard Bioscience)測量發(fā)光(例如，作為相對光單位(RLU))達5秒。
其它基于轉(zhuǎn)錄的測定法可包括評價GHS-R調(diào)節(jié)的基因在表達GHS-R的初級細胞(例如，源于垂體、腦、脊髓、子宮、脾、胰腺、腎、腎上腺、骨骼肌、甲狀腺、肝、小腸和心臟的細胞)或表達GHS-R的重組細胞中的轉(zhuǎn)錄。mRNA水平可通過任意方法，例如微陣列分析、RNA印跡或RT-PCR評價。由GHS-R活性直接或間接調(diào)節(jié)的舉例基因包括瘦蛋白、抗性蛋白、和脂連蛋白。GHS-R活性還可影響循環(huán)中的胰島素、IGF-1和瘦蛋白水平。
IC50和EC50值可通過非線性回歸，例如，使用Prism 3.0軟件(GraphPad Software，San Diego)測定。
體內(nèi)測定法。舉例的體內(nèi)測定法包括實施例1和下面描述的禁食-再次進食測定法。
在給予化合物之前，將小鼠稱重并根據(jù)可比較的體重分到各組中。在6pm撤去食物并禁食一整夜(～16小時)。在第二天早上10am開始，給予小鼠載體(例如，鹽水+乙酸，pH＝5)或目標化合物。然后讓小鼠返回到它們的籠子中，并將預(yù)先-稱重的食物(約90克)立即放回到各籠子中的食物料斗中。在給予化合物/載體后30分鐘、1小時、2小時和4小時的時候測量食物料斗中剩余食物的重量。然后記錄小鼠的最終體重。
還可在其它實驗中評價目標化合物。例如，將該化合物給予瘦弱或肥胖的小鼠(例如，(ob/ob)C57BL/6J小鼠)，或其它實驗動物?；衔锟筛鼓?nèi)或腦室內(nèi)給藥。給藥后，評價動物的，例如，進食行為、焦慮或一種或多種生理學(xué)參數(shù)，例如，代謝參數(shù)。
ICV給藥。關(guān)于第三腦室內(nèi)(ICV)給藥，可在4μl人造腦脊液中稀釋各藥物用于注射。對于ICV注射，用戊巴比妥鈉(80-85mg/kg，腹膜內(nèi))麻醉小鼠，并在實驗前，放在立體定位器中7天。使用插入到中縫側(cè)面0.9mm和前囟后部0.9mm的針，在每個頭顱中制造一個洞。將一端傾斜超過3mm距離的24計量套管植入到第三腦室中用于ICV注射。
胃排空評價。目標化合物給藥后食物消耗的另一試驗是胃排空評價。在胃排空評價前，使小鼠禁食16小時，但其間可隨意喝水。使禁食的小鼠隨意接觸預(yù)先稱重的顆粒食物1小時，然后給予目標化合物。給予化合物后，小鼠再次禁食一或兩小時。通過將沒有吃掉的顆粒食物稱重而測量食物攝取?；衔锝o藥后2或3小時，通過頸部脫臼處死小鼠。通過剖腹手術(shù)使胃部暴露之后，立即快速在幽門和賁門處結(jié)扎，切除，并將干燥內(nèi)含物內(nèi)稱重。胃排空是根據(jù)下列公式計算的胃排空(％)＝(1-(從胃中回收的食物干重/食物攝取的重量))×100。
焦慮試驗。可在高于地面50cm的標準高位正迷宮中評價焦慮。四個臂可制成27cm長和6cm寬。兩個相反的臂由15cm高的壁圍繞(閉合的臂)，而其它臂沒有壁(開放的臂)。注射該化合物后10分鐘，將各小鼠放在迷宮的中心，面向其中一個閉合的臂。在5分鐘的試驗期間，記錄下在各臂中花費的累積時間和進入到開放或閉合的臂中的次數(shù)。在開放的臂中花費的時間以總進入時間的百分比(100開放的/開放的+閉合的)表示，進入到開放的臂中的次數(shù)以進入總數(shù)的百分比(100開放的/總進入數(shù))表示。
參數(shù)分析。可分析供給試驗化合物的小鼠或其它動物的一個或多個生理學(xué)參數(shù)，例如，代謝參數(shù)。就小鼠而言，治療結(jié)束時(例如，撤去食物和最終腹膜內(nèi)注射后8小時)，在乙醚麻醉條件下，從來自眼竇的血液中獲得血清。通過頸部脫臼處死小鼠。之后立即在白脂肪組織(WAT)和腓腸肌的切除和稱重的基礎(chǔ)上，可評價附睪脂肪墊的質(zhì)量。血液葡萄糖可通過葡萄糖氧化酶方法測量。血清胰島素和游離脂肪酸(FFA)可分別通過酶免疫測定法和酶方法測量(Eiken Chemical Co.，Ltd，Tokyo，Japan)。血清甘油三酯和總膽固醇可通過酶方法測量(Wako Pure Chemical Industries，Ltd，Tokyo，Japan)。
mRNA分析。使用RNeasy Mini試劑盒(Qiagen，Tokyo，Japan)從胃、附睪脂肪或其它相關(guān)組織中分離出RNA。使用甲醛使總RNA變性、在1％瓊脂糖凝膠上進行電泳，并印跡在Hybond N+膜上。使該膜與用于目標基因的標記(例如，放射性、化學(xué)或熒光標記的)cDNA探針雜交。通過測光密度術(shù)測定雜交信號的總積分密度。數(shù)據(jù)可被標準化為甘油醛3-磷酸脫氫酶mRNA豐度或肌動蛋白mRNA豐度并以對照的百分比表示?？杀辉u價的舉例基因包括生長素釋放肽、瘦蛋白、抗性蛋白、和脂連蛋白。還可能使用包括具有目標基因調(diào)節(jié)區(qū)的報道構(gòu)建體的轉(zhuǎn)基因動物或使用具有這類構(gòu)建體的重組細胞。
在所述一種或多種測定法中，本文所述化合物可具有低于200、100、80、70、60或50nM的Ki(作為拮抗劑)。在所述一種或多種測定法中，本文所述化合物作為激動劑可具有大于20、40、50、100、200、300或500nM的KD。
本文所述化合物還可相對于其它細胞表面受體，特異性地與GHS-R相互作用。促胃動素受體，例如，是GHS-R的同系物。已公開的化合物可相對于促胃動素受體，優(yōu)先與GHS-R相互作用，例如，至少2、5、10、20、50或100倍優(yōu)先。在另一實施方案中，已公開的化合物還可與促胃動素受體相互作用，并且，例如，改變促胃動素受體活性。
在一個實施方案中，該化合物可改變GHS-R的胞內(nèi)信號活性下游，例如，Gq信號、磷脂酶C信號，和cAMP反應(yīng)元件(CRE)驅(qū)動的基因轉(zhuǎn)錄。
還可評價化合物關(guān)于任何障礙，例如本文所述障礙的治療活性。許多障礙的動物模型是本領(lǐng)域熟知的。
用于評價化合物對ALS狀態(tài)作用的細胞和動物包括具有改變的SOD基因的小鼠，例如SOD1-G93A轉(zhuǎn)基因小鼠，其攜帶可變數(shù)目拷貝的由內(nèi)源性啟動子驅(qū)動的人G93A SOD突變；SOD1-G37R轉(zhuǎn)基因小鼠(Wong等人Neuron，14(6)1105-16(1995))；SOD1-G85R轉(zhuǎn)基因小鼠(Bruijn等人，Neuron，18(2)327-38(1997))；表達突變體人SOD1的C.elegans株(Oeda等人，Hum Mol Genet.，102013-23(2001))；和表達Cu/Zn超氧化物歧化酶(SOD)突變的果蠅(Phillips等人，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.，928574-78(1995)和McCabe，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.，928533-34(1995))。
用于評價化合物對阿爾茨海默氏病作用的細胞和動物在，例如，US 6,509,515和US 5,387,742；5,877,399；6,358,752；和6,187,992中描述。在US 6,509,515中，動物在腦組織中以一定的水平表達淀粉樣前體蛋白(APP)序列，這樣動物就可發(fā)展成進行性神經(jīng)障礙。用于評價基于聚谷氨酰胺的聚集的舉例動物模型是轉(zhuǎn)基因小鼠品系R6/2系(Mangiarini等人，Cell 87493-506(1996))。
用于評價試驗化合物對肌萎縮癥作用的模型包括，例如1)由于去神經(jīng)所致大鼠內(nèi)側(cè)腓腸肌質(zhì)量損失，例如，通過在大腿中部切斷右坐骨神經(jīng)；2)由于固定所致大鼠內(nèi)側(cè)腓腸肌質(zhì)量損失，例如，通過以90度彎曲固定右踝關(guān)節(jié)；3)由于后肢懸掛所致大鼠內(nèi)側(cè)腓腸肌質(zhì)量損失(見，例如，U.S.2003-0129686)；4)由于使用惡病質(zhì)細胞因子、白介素-1(IL-1)處理所致骨骼肌萎縮(R.N.Cooney，S.R.Kimball，T.C.Vary，Shock 7，1-16(1997))；和5)由于使用糖皮質(zhì)激素、地塞米松處理所致骨骼肌萎縮(A.L.Goldberg，J Biol Chem 244，3223-9(1969))。模型1、2、和3通過改變神經(jīng)活性和/或肌肉經(jīng)歷各種程度的外部負荷而誘導(dǎo)肌肉萎縮。模型4和5在不直接影響那些參數(shù)的條件下誘導(dǎo)萎縮。
AMD(與年齡有關(guān)的黃斑變性)的舉例動物模型包括模擬滲出性(濕潤的)黃斑變性的激光-誘導(dǎo)的小鼠模型Bora等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA.，1002679-84(2003)；表達組織蛋白酶D突變形式的轉(zhuǎn)基因小鼠，其可導(dǎo)致與AMD“地域萎縮”形式有關(guān)的特征(Rakoczy等人Am.J.Pathol.，1611515-24(2002))；和在視網(wǎng)膜色素上皮中過量表達VEGF的轉(zhuǎn)基因小鼠，其可導(dǎo)致CNV。Schwesinger等人，Am.J.Pathol.1581161-72(2001)。
帕金森氏病的舉例動物模型包括通過使用多巴胺能神經(jīng)毒素1-甲基-4苯基1，2，3，6-四氫吡啶(MPTP)處理，導(dǎo)致成為帕金森氏病患者的靈長類動物(見，例如美國申請20030055231和Wichmann等人，Ann.N.Y.Acad.Sci.，991199-213(2003)；6-羥基多巴胺-受損的大鼠(例如，Lab.Anim.Sci.，49363-71(1999))；和轉(zhuǎn)基因無脊椎動物模型(例如，Lakso等人，J.Neurochem.，86165-72(2003)和Link，Mech.AgeingDev.，1221639-49(2001))。
II型糖尿病的舉例分子模型包括具有缺損Nkx-2.2或Nkx-6.1的轉(zhuǎn)基因小鼠(US 6,127,598)；Zucker糖尿病性肥胖fa/fa(ZDF)大鼠(US 6569832)；和恒河猴，其自發(fā)地發(fā)展肥胖且隨后經(jīng)常發(fā)展成明顯的2型糖尿病(Hotta等人，Diabetes，501126-33(2001)；和包含具有2型糖尿病-樣胰島素抗性的顯性-陰性IGF-1受體(KR-IGF-IR)的轉(zhuǎn)基因小鼠。
神經(jīng)病的舉例動物和細胞模型包括小鼠(美國申請5420112)或兔(Ogawa等人，Neurotoxicology，21501-11(2000))中長春新堿-誘導(dǎo)的感覺-運動神經(jīng)?。挥糜谧灾魃窠?jīng)病研究的鏈脲霉素(STZ)-糖尿病性大鼠(Schmidt等人，Am.J.Pathol.，16321-8(2003))；和進行性運動神經(jīng)病(pmn)小鼠(Martin等人，Genomics，759-16(2001))。
再有，關(guān)于贅生性疾病，已經(jīng)描述了許多動物和細胞模型。用于評價化合物限制原發(fā)性腫瘤擴散的能力的舉例體內(nèi)系統(tǒng)由Crowley等人，Proc.Natl.Acad.Sci.，905021-5025(1993)描述。給裸鼠注射被工程改造以表達CAT(氯霉素乙?；D(zhuǎn)移酶)的腫瘤細胞(PC3)。將被試驗它們降低腫瘤大小和/或轉(zhuǎn)移瘤能力的化合物給予動物，隨后測量腫瘤大小和/或轉(zhuǎn)移瘤生長。在不同器官中檢測到的CAT水平提供了化合物抑制轉(zhuǎn)移能力的指示；相對于對照動物，在治療動物的組織中檢測到較少的CAT表明，較少CAT-表達性細胞已經(jīng)遷移到該組織或已經(jīng)在該組織內(nèi)繁殖。
化合物及其制劑的給藥本文所述式的化合物可以，例如，通過注射，靜脈內(nèi)、動脈內(nèi)、皮下、腹膜內(nèi)、肌內(nèi)或皮下注射；或口服、口腔、鼻、透粘膜、局部、以眼用制劑形式或通過吸入給藥，劑量為約0.001-約100mg/kg體重，例如，0.001-1mg/kg、1-100mg/kg或0.01-5mg/kg，每隔4-120小時，例如約每隔6、8、12、24、48或72小時，或根據(jù)具體化合物的要求。本文的方法預(yù)期了給予有效量的化合物或化合物組合物以獲得所需或規(guī)定作用(例如，受治療者進食減少)。通常，每天約1-約6次給予本發(fā)明的藥物組合物，例如，在進餐時間之前約1-約4(例如，1、2、3或4)小時給予該化合物。可選擇性地，可以連續(xù)輸注的方式給予該化合物。這類給藥可用作慢性或急性治療?？膳c載體材料結(jié)合產(chǎn)生單劑量形式的活性成分的量將根據(jù)所治療的宿主和特定的給藥模式而變化。典型的制劑含有約5％-約95％活性化合物(w/w)?？蛇x擇性地，這類制劑含有約20％-約80％活性化合物。
可能需要較之上面列舉的那些更低或更高的劑量。對于任何特定患者的具體劑量和治療方案將取決于多種因素，包括所用具體化合物的活性、年齡、體重、一般健康狀況、性別、飲食、給藥時間、排泄速率、藥物組合、疾病、病癥或癥狀的嚴重程度和過程、患者對疾病、病癥或癥狀的處置、和治療醫(yī)師的判斷。
患者的病癥改善后，如果需要，可給予維持劑量的本發(fā)明化合物、組合物或組合。隨后，可根據(jù)癥狀的變化，減少給藥劑量或頻率或兩者均減少，達到保持改善的病癥的水平。然而，基于疾病癥狀的任何復(fù)發(fā)，患者可能需要長期間歇治療。
本發(fā)明的藥物組合物包含本文所述式的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽；附加的化合物包括例如，類固醇或止痛劑；和任意藥學(xué)上可接受的載體、助劑或賦形劑。本發(fā)明的可選擇組合物包含本文所述式的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽；和藥學(xué)上可接受的載體、助劑或賦形劑。本文描述的組合物包含本文所述式的化合物、以及如果存在，有效達到調(diào)節(jié)疾病或疾病癥狀，包括激酶介導(dǎo)的疾病或其癥狀的量的附加治療性化合物。該組合物可通過包括將一種或多種本文所述化合物與一種活多種載體和，任選地，本文所述一種或多種附加治療性化合物混合的步驟的方法制備。
術(shù)語“藥學(xué)上可接受的載體或助劑”是指可連同本發(fā)明化合物一起給予患者，并且不會破壞其藥理學(xué)活性，以及當(dāng)以足以遞送治療量化合物的劑量給藥時無毒的載體或助劑。
本發(fā)明的藥物組合物可以任何口服可接受的劑型包括，但不限于膠囊劑、片劑、乳液和含水混懸液、分散體和溶液口服給藥。在用于口服使用的片劑情況下，一般使用的載體包括乳糖和玉米淀粉。一般還加入潤滑劑，如硬脂酸鎂。對于以膠囊劑形式口服給藥，有效的稀釋劑包括乳糖和干玉米淀粉。當(dāng)口服給予含水混懸液和/或乳液時，可將活性成分混懸于或溶解于可與乳化和/或懸浮劑混合的油相中。如果需要，可加入特定的甜味劑和/或調(diào)味劑和/或著色劑。
該藥物組合物可以是無菌可注射制劑的形式，例如，無菌可注射的含水或含油混懸液。該混懸液可按照本領(lǐng)域已知的技術(shù)，使用適宜的分散或濕潤劑(如，吐溫80)和懸浮劑配制。該無菌可注射制劑還可以是在無毒的腸胃外可接受的稀釋劑或溶劑中的無菌可注射溶液或混懸液，例如，溶于1，3-丁二醇中的溶液。可被使的用可接受的賦形劑和溶劑是甘露糖醇、水、林格氏溶液和等滲氯化鈉溶液。此外，無菌的不揮發(fā)油通常用作溶劑或懸浮介質(zhì)。就該目的而言，可使用任何溫和的不揮發(fā)油，包括合成的甘油單酯或甘油二酯。脂肪酸，如油酸及其甘油酯衍生物可用于制備注射劑，如天然的藥學(xué)上可接受的油，如橄欖油或蓖麻油，特別是它們的聚氧乙烯化變型。這些油溶液或混懸液還可含有長鏈醇稀釋劑或分散劑或羧甲基纖維素或通常用于配制藥學(xué)上可接受的劑型如乳液和/或混懸液的類似分散劑。其它常用的表面活性劑如吐溫類或司盤類和/或常用于制備藥學(xué)上可接受的固體、液體或其它劑型的其它類似的乳化劑或生物利用度增強劑也可用于該配制的目的。
本發(fā)明的藥物組合物還可以栓劑形式用于直腸給藥。這些組合物可通過將本發(fā)明化合物與適宜的非-刺激性賦形劑混合制備，該賦形劑在室溫時為固體，但在直腸溫度下為液體，并且因此在直腸中融化釋放活性組分。這類物質(zhì)包括，但不限于，椰子油、蜂蠟和聚乙二醇類。
可用于本發(fā)明藥物組合物中的藥學(xué)上可接受的載體、助劑和賦形劑包括，但不限于，離子交換劑、氧化鋁、硬脂酸鋁、卵磷脂、自我-乳化給藥系統(tǒng)(SEDDS)如d-α-生育酚聚乙二醇1000琥珀酸鹽、用于藥物劑型中的表面活性劑如吐溫類和其它類似的聚合遞送基質(zhì)，血清蛋白，如人血清白蛋白、緩沖物質(zhì)如磷酸鹽、甘氨酸、山梨酸、山梨酸鉀、飽和植物脂肪酸的偏甘油酯混合物、水、鹽或電解質(zhì)如硫酸魚精蛋白、磷酸氫二鈉、磷酸氫二鉀、氯化鈉、鋅鹽、膠態(tài)二氧化硅、三硅酸鎂、聚乙烯吡咯烷酮、基于纖維素的物質(zhì)、聚乙二醇、羧甲基纖維素鈉、聚丙烯酸酯、蠟、聚乙烯-聚氧丙烯-嵌段聚合物、聚乙二醇和羊毛脂。環(huán)糊精如α-、β-、和γ-環(huán)糊精還可有利地用于提高本文所述式的化合物的遞送。
在一些情況下，制劑的pH可使用藥學(xué)上可接受的酸、堿或緩沖液調(diào)節(jié)，從而提高所配制化合物或其遞送形式的穩(wěn)定性。
本文所用腸胃外包括皮下、皮內(nèi)、靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)、動脈內(nèi)、滑膜內(nèi)、胸骨內(nèi)、鞘內(nèi)、病變內(nèi)和顱內(nèi)注射或輸注技術(shù)。
本發(fā)明的藥物組合物可通過鼻氣溶膠或吸入給藥。這類組合物按照藥物制劑領(lǐng)域熟知的技術(shù)制備且可制備成溶于鹽水中的溶液，其中使用苯甲醇或其它適宜的防腐劑、提高生物利用度的吸收促進劑、氟碳化合物、和/或本領(lǐng)域已知的其它加增溶或分散劑。
當(dāng)本發(fā)明的組合物包含本文所述式的化合物與一種或多種附加治療性或預(yù)防性藥劑的組合時，該化合物和附加化合物應(yīng)當(dāng)以占在單一治療方案中通常所給予劑量的約1-100％，并且更優(yōu)選約5-95％的劑量水平存在。此外，還預(yù)期了本文所述多種化合物的組合。附加化合物可作為多劑量方案的一部分，與本發(fā)明化合物分開給藥。可選擇性地，那些化合物可是單個劑型的一部分，其與本發(fā)明化合物在單個組合物中共同混合。
治療可將本文所述化合物給予培養(yǎng)物中的細胞，例如體外或離體，或給予受治療者，例如體內(nèi)，從而治療、預(yù)防和/或診斷各種疾病，包括本文下面所述那些。
本文所用術(shù)語“治療”或“治療”被定義為化合物，單獨或與第二種化合物結(jié)合，對受治療者，例如，患者的應(yīng)用或給藥，或該化合物向從受治療者，例如，患者中分離出來的組織或細胞，例如，細胞系的應(yīng)用或給藥，所述患者具有疾病(例如，本文所述疾病)、疾病的癥狀或患疾病的傾向，所述應(yīng)用或給藥目的是治療、治愈、減輕、緩解、改變、醫(yī)治、改進、改善或影響該疾病的一種或多種癥狀或患該疾病的傾向(例如，阻止該疾病的至少一個癥狀或延遲該疾病至少一個癥狀的發(fā)作)。
本文所用有效治療疾病的化合物的量，或“治療有效量”是指化合物的量，在單次或多次劑量給予受治療者后，該量在處理細胞或治療、緩解、減輕或改善患有疾病的受治療者中有效的，其超出在沒有這種治療下所預(yù)料的效果。
本文所用有效預(yù)防疾病的化合物的量，或化合物的“預(yù)防有效量”是指單次或多次劑量給予受治療者后，有效預(yù)防或延遲疾病或疾病的癥狀發(fā)作或復(fù)發(fā)的量。
本文所用術(shù)語“受治療者”打算包括人類和非人類的動物。舉例的人類受治療者包括患有疾病，例如本文所述疾病的人類患者或正常受治療者。本發(fā)明術(shù)語“非人類的動物”包括所有脊椎動物，例如，非-哺乳動物(如雞、兩棲動物、爬行動物)和哺乳動物，如非-人類靈長類動物、馴養(yǎng)和/或農(nóng)業(yè)上有用的動物，例如，羊、狗、貓、牛、豬等。
本文所述許多化合物可用于治療或預(yù)防代謝紊亂?！按x紊亂”是特征在于代謝異?；蛘系K的疾病或障礙。一類代謝紊亂是葡萄糖或胰島素代謝紊亂。例如，受治療者可以是胰島素抗性的，例如，患有胰島素-抗性糖尿病。在一個實施方案中，本文所述化合物可用于降低受治療者中胰島素或葡萄糖水平。在另一實施方案中，本文所述化合物可用于改變(例如增加)受治療者中胰島素或葡萄糖水平。使用化合物治療可以用有效改善代謝紊亂中一個或多個癥狀的量。
在一些例子中，本發(fā)明提供一種治療代謝綜合征的方法，該方法包括給予受治療者有效量的本文所述化合物。
代謝綜合征(例如，綜合征X)的特征在于一個人中的一組代謝危險因子。它們包括中央性肥胖(腹部中和腹部周圍的過量脂肪組織)、致動脈粥樣化血脂異常(血液脂肪疾病-主要是高甘油三酯和低HDL膽固醇-其促進血小板在動脈壁中集結(jié))；胰島素抗性或葡萄糖不耐受性(肌體不能適當(dāng)?shù)乩靡葝u素或血糖)；促血栓形成狀態(tài)(例如，血液中高血纖蛋白原或纖溶酶原活化劑抑制劑[-1])；血壓升高(即高血壓)(130/85mmHg或更高)；和促炎狀態(tài)(例如，血液中的高-靈敏度C-反應(yīng)蛋白升高)。
該綜合征的潛在原因是超重/肥胖、身體不活動和遺傳因素?；加写x綜合征的患者患冠心病、與動脈壁中血小板集結(jié)有關(guān)的其它疾病(例如，中風(fēng)和外周血管疾病)和2型糖尿病的危險增加。代謝綜合征與被稱作胰島素抗性的廣義代謝紊亂緊密相關(guān)，在后者中肌體不能有效利用胰島素。
本文所述許多化合物均可用于治療或預(yù)防人類受治療者，例如，兒童或成年受治療者肥胖?！胺逝帧笔侵甘苤委熣呔哂写笥诨虻扔?0的體重指數(shù)的狀況。本文所述許多化合物均可用于治療或預(yù)防超重狀況?！俺亍笔侵甘苤委熣呔哂写笥诨虻扔?5.0的體重指數(shù)的狀況。體重指數(shù)(BMI)和其它定義符合“NIH Clinical Guidelines on theIdentification and Evaluation，and Treatment of Overweight andObesity in Adults”(1998)。使用該化合物治療可以使用有效改變受治療者的體重例如至少2、5、7、10、12、15、20、25、30、35、40、45、50或55％的量。使用該化合物治療可以使用有效降低受治療者的體重指數(shù)至，例如，低于30、28、27、25、22、20或18的量。該化合物可用于治療或預(yù)防異?；虿贿m當(dāng)?shù)捏w重增加、代謝速率或脂肪沉積，例如，食欲缺乏、食欲過盛、肥胖、糖尿病或高血脂、以及脂肪或脂類代謝的紊亂。
例如，GHS-R激動劑可用于增加食物攝取或治療與體重減輕有關(guān)的疾病，例如，食欲缺乏、食欲過盛等。
GHS-R的拮抗劑或逆激動劑可用于治療異常或不適當(dāng)?shù)捏w重增加、代謝速率或脂肪沉積，例如，肥胖、糖尿病或高血脂、以及導(dǎo)致體重增加的脂肪或脂類代謝的紊亂。在一個實施方案中，本文所述化合物用于治療下丘腦性肥胖。例如，可將該化合物給予被確定有下丘腦性肥胖危險的受治療者或給予對葡萄糖具有異常(例如，極度)胰島素反應(yīng)的受治療者。
在另一實施方案中，可給予本文所述化合物(例如，GHS-R拮抗劑或逆激動劑)用于治療與Prader-Willi綜合征(PWS)有關(guān)的肥胖。PWS是一種與肥胖(例如，病態(tài)肥胖)有關(guān)的遺傳病癥。大多數(shù)而言，患有PWS的個體還具有缺陷性GH分泌。與患有普通肥胖的個體相反，那些患有與肥胖有關(guān)的PWS的那些個體具有高的禁食-生長素釋放肽濃度，其可導(dǎo)致飲食過多。因此，在一些例子中，患有與肥胖有關(guān)的PWS的受治療者可使用遺傳標記、GH水平的測定、禁食-生長素釋放肽濃度、細心的表型分析或本領(lǐng)域已知的其它方法確定。GHS-R拮抗劑如本文所述化合物之一的給藥可用于在患有與肥胖有關(guān)的PWS的個體中減少肌體脂肪、防止肌體脂肪增加、和/或減少食欲，和/或減少共同發(fā)病如糖尿病、心血管疾病和中風(fēng)。
本文所述許多化合物可用于治療神經(jīng)學(xué)障礙。“神經(jīng)學(xué)障礙”是特征在于神經(jīng)元細胞或神經(jīng)元支持細胞(例如，神經(jīng)膠質(zhì)或肌肉)異常或機能障礙的疾病或障礙。該疾病或障礙可影響中樞和/或外周神經(jīng)系統(tǒng)。舉例的神經(jīng)學(xué)障礙包括神經(jīng)病、骨骼肌萎縮、和神經(jīng)變性疾病，例如，至少部分由聚谷氨酰胺聚集引起的神經(jīng)變性疾病以外的神經(jīng)變性疾病。舉例的神經(jīng)變性疾病包括阿爾茨海默氏病、肌萎縮性側(cè)索硬化(ALS)、和帕金森氏病。另一類神經(jīng)變性疾病包括至少部分由聚-谷氨酰胺聚集引起的疾病。這類疾病包括亨廷頓氏舞蹈病、脊髓延髓性(Spinalbulbar)肌肉萎縮(SBMA或肯尼迪氏病)、齒狀核紅核蒼白球(Dentatorubropallidoluysian)萎縮(DRPLA)、脊髓小腦性共濟失調(diào)1(SCA1)、脊髓小腦性共濟失調(diào)2(SCA2)、Machado-Joseph病(MJD；SCA3)、脊髓小腦性共濟失調(diào)6(SCA6)、脊髓小腦性共濟失調(diào)7(SCA7)、和脊髓小腦性共濟失調(diào)12(SCA12)。使用化合物治療可以用有效改善神經(jīng)學(xué)障礙至少一個癥狀的量。在一個實施方案中，具有GHS-R拮抗劑活性的化合物可用于治療神經(jīng)學(xué)障礙。
本文所述許多化合物可用于調(diào)節(jié)受治療者的焦慮。在一個實施方案中，具有例如GHS-R拮抗劑或逆激動劑活性的化合物可用于減少焦慮。
本文所述許多化合物可用于調(diào)節(jié)受治療者的記憶停留。在一個實施方案中，具有GHS-R拮抗劑或逆激動劑活性的化合物可用于減少記憶停留。例如，減少記憶停留可幫助從創(chuàng)傷性應(yīng)激中恢復(fù)。在一個實施方案中，具有GHS-R激動劑活性的化合物用于增加記憶停留。
本文所述許多化合物均可用于調(diào)節(jié)受治療者睡眠、睡眠周期(例如，REM睡眠)或覺醒。在一個實施方案中，具有GHS-R激動劑活性的化合物用于促進受治療者睡眠或治療睡眠呼吸暫停。
在一個實施方案中，GHS-R激動劑、逆激動劑或拮抗劑(例如本文所述化合物)用于改變受治療者的晝夜節(jié)律。例如，可在每天特定的時間，例如，規(guī)則地，例如，在晚上和/或早上遞送該化合物，從而重新設(shè)定晝夜節(jié)律，例如在各時區(qū)之間旅游之前、過程中或之后，或給予患有晝夜小時生理節(jié)奏紊亂的受治療者。該化合物能夠，例如，調(diào)節(jié)GH分泌的脈沖性。
本文所述許多化合物可用于治療心血管病。“心血管病”是特征在于心血管系統(tǒng)，例如，心、肺或血管異常或機能障礙的疾病或障礙。舉例的心血管病包括心臟節(jié)律紊亂、慢性充血性心力衰竭、局部缺血性中風(fēng)、冠狀動脈疾病和心肌病。使用化合物治療可以用有效改善心血管病至少一個癥狀的量。在一個實施方案中，具有GHS-R拮抗劑或逆激動劑活性的化合物可用于治療心血管病。
本文所述許多化合物均可用于治療皮膚病或皮膚組織狀況?！捌つw病”是特征在于皮膚異?；驒C能障礙的疾病或障礙。“皮膚組織狀況”是指皮膚和任何下面組織(例如，支持組織)，其貢獻皮膚的功能和/或外觀，例如，美容外觀。使用化合物治療可以用有效改善皮膚病或皮膚組織狀況至少一個癥狀的量。在一個實施方案中，具有GHS-R拮抗劑或逆激動劑活性的化合物可用于治療皮膚病或皮膚組織狀況。
本文所述許多化合物可用于治療老年病?！袄夏瓴　笔窃诒旧暾?zhí)峤坏臅r候，在所選擇的超過100,000個體的群體中，在大于70歲的人類個體中至少70％發(fā)生的疾病或障礙。在一個實施方案中，老年病是癌癥或心-肺病以外的疾病。優(yōu)選人群是美國人。該人群可由性別和/或種族限制。
本文所述許多化合物均可用于治療或預(yù)防特征在于過度的生長激素活性的疾病。例如，該化合物可用于降低受治療者中GH水平。在一個實施方案中，受治療者是人，例如，兒童(例如3-11歲)、青少年(例如12-19歲)、年輕的成年人(例如20-25歲)或成年人。在一個實施方案中，具有GHS-R拮抗劑或逆激動劑活性的化合物用于治療特征在于過度的生長激素活性的疾病。
本文所述許多化合物可用于調(diào)節(jié)迷走神經(jīng)緊張。例如，可將本文所述化合物或其它GHS-R調(diào)節(jié)劑給予迷走神經(jīng)切斷或其它疾病的受治療者，其改變了迷走神經(jīng)輸入或輸出活性。在一個實施方案中，監(jiān)測受治療者的迷走神經(jīng)功能是否異常，并且，如果檢測到機能障礙，則使用本文所述化合物或其它GHS-R調(diào)節(jié)劑治療受治療者。
與特定實施有關(guān)的舉例疾病和障礙包括癌癥(例如，乳腺癌、結(jié)腸直腸癌、CCL、CML、前列腺癌)；骨骼肌萎縮；成年-發(fā)作的糖尿病；糖尿病性腎病、神經(jīng)病(例如，感覺神經(jīng)病、自主神經(jīng)病、運動神經(jīng)病、視網(wǎng)膜病)；肥胖；骨吸收；神經(jīng)變性障礙(帕金森氏病、ALS、阿爾茨海默氏病、短程和長程記憶喪失)和與蛋白聚集(例如，聚谷氨酰胺聚集以外)或蛋白錯誤折疊有關(guān)的障礙、與年齡有關(guān)的黃斑變性、貝耳氏麻痹；心血管病(例如，動脈粥樣硬化、心臟節(jié)律紊亂、慢性充血性心力衰竭、局部缺血性中風(fēng)、冠狀動脈疾病和心肌病)、慢性腎衰竭、2型糖尿病、潰瘍、白內(nèi)障、老視(presbiopia)、腎小球性腎炎、急性感染性多神經(jīng)炎、出血性中風(fēng)、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、炎性腸病、多發(fā)性硬化、SLE、克羅恩氏病、骨關(guān)節(jié)炎、肺炎、和尿失禁。疾病的癥狀和診斷是醫(yī)師熟知的。
在特定的實施方案中，將化合物直接局部導(dǎo)向到生物體靶組織中的GHS-R。GHS-R在下丘腦、心臟、肺、胰腺、腸、腦(特別是弓形核(ARC))、和脂肪組織中表達。本文所述化合物可被靶向至上述一個或多個組織。例如，該化合物可被配制用于吸入靶向肺部。該化合物可被配制用于攝取，并且通過腸，用于靶向腸。在其它實施方案中，治療被全身導(dǎo)向，并且化合物向靶組織分布。
根據(jù)疾病和化合物，除了使用在上面規(guī)定種類的化合物外，治療可包括使用其它種類的化合物。例如，在內(nèi)源性生長素釋放肽水平通常低于正常水平或低于患病區(qū)域正常水平的受治療者中，治療可包括使用具有GHS-R激動劑活性的化合物。在內(nèi)源性生長素釋放肽水平通常高于正常水平或高于患病區(qū)域正常水平的其它受治療者中，治療可包括使用具有GHS-R拮抗劑活性的化合物?？稍诨趧游锏臏y定法中或通過監(jiān)測受治療者而評價特定化合物的適合性。
本文所述許多化合物均可用于調(diào)節(jié)控制能量平衡的生物信號的活性。這類信號包括肽信號，如NPY、AGRP、食欲肽、MCH、beacon(見，例如，Collier等人(2000)Diabetes 491766)、mealoncyte-刺激激素、神經(jīng)調(diào)節(jié)肽U、促腎上腺皮質(zhì)激素-釋放因子、和瘦蛋白。例如，NPY是一種36-氨基酸肽，其可刺激食物完整并抑制代謝速率。本文所述許多化合物均可用于降低NPY活性。本文所述許多化合物均可用于增加使食欲不振分子，例如鈴蟾肽、IL-1β、瘦蛋白、和胃泌素-釋放肽的活性或可利用度。因此，該化合物可增加胃迷走神經(jīng)輸入的排出速率。
我們還發(fā)現(xiàn)P物質(zhì)及其衍生物可調(diào)節(jié)GHS-R活性。具體而言，我們發(fā)現(xiàn)P物質(zhì)可改變禁食-再次進食測定法中小鼠的進食活動。因此，P物質(zhì)及其衍生物可用于調(diào)節(jié)進食或代謝紊亂以及本文所述其它疾病。
我們關(guān)于GHS-R在人類組織中表達的研究已經(jīng)證實，GHS-R在垂體細胞、腦、脊髓、子宮、脾、胰腺、腎、腎上腺、骨骼肌、甲狀腺、肝、小腸和心臟中表達。因此，本文所述化合物可用于治療那些組織中與生長素釋放肽或生長素釋放肽-介導(dǎo)的信號活性不期望水平有關(guān)的疾病和障礙。例如，如果生長素釋放肽或生長素釋放肽-介導(dǎo)的信號活性水平不期望地低，則具有GHS-R激動劑活性的化合物可用于治療。如果生長素釋放肽或生長素釋放肽-介導(dǎo)的信號活性水平不期望地高，則具有GHS-R拮抗劑活性的化合物可用于治療。例如，組織之間期望的生長素釋放肽活性水平不同。生長素釋放肽是由胃分泌的且在胃中或胃附近較高，但在正常胰腺組織中低得多。
贅生性疾病本文所述許多化合物均可用于治療贅生性疾病?！百樕约膊　笔翘卣髟谟诰哂凶灾魃L或復(fù)制能力的細胞的疾病或障礙，例如，特征在于增殖性細胞生長的異常狀態(tài)或狀況。舉例的贅生性疾病包括癌、肉瘤、轉(zhuǎn)移性疾病(例如，由前列腺、結(jié)腸、肺、乳腺和肝起源產(chǎn)生的腫瘤)、造血贅生性疾病，例如，白血病、轉(zhuǎn)移腫瘤。普遍的癌癥包括乳腺、前列腺、結(jié)腸、肺、肝和胰腺癌。使用化合物治療可以用有效改善贅生性疾病至少一個癥狀，如減少細胞增殖、減少腫瘤質(zhì)量等的量。
贅生性疾病是否應(yīng)當(dāng)使用GHS-R激動劑或拮抗劑治療可取決于瘤形成的類型。例如，Duxbury等人(2003)Biochem.Biophys.Res.Comm.309464-468報道特定的贅生性疾病可由GHS-R拮抗劑抑制。這些疾病包括，例如，胰腺癌、和其中表達GHS-R或GHS-R1b的瘤形成，例如，前列腺腺癌、胰腺內(nèi)分泌腫瘤、促生長素細胞腫瘤和中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤。被GHS-R拮抗劑減弱、抑制或殺死的瘤形成本文被稱作“GHS-R拮抗劑-敏感性贅生性疾病”且可使用具有GHS-R拮抗劑活性的化合物治療。
Duxbury等人還報道，特定的其它類型的瘤形成，例如，乳腺、肺和甲狀腺腺癌可被高水平生長素釋放肽(＞10nM)抑制且，因此，可用GHS-R激動劑，例如，本文所述GHS-R激動劑或其它已知的GHS-R激動劑治療。被生長素釋放肽或GHS-R激動劑減弱、抑制或殺死的瘤形成本文被稱作“生長素釋放肽-敏感性贅生性疾病”且可使用具有GHS-R激動劑活性的化合物治療。
無論贅生性細胞是否對生長素釋放肽激動劑或拮抗劑敏感(即，無論贅生性細胞是生長素釋放肽-敏感的還是GHS-R拮抗劑敏感的贅生性疾病)，均可在有GHS-R激動劑如生長素釋放肽，或拮抗劑如D-Lys-GHRP6存在的條件下，通過增殖測定法測定。Duxbury等人公開了舉例的增殖測定法。在其中一個這類測定法中，將細胞接種在96孔平板中，約104個細胞/孔。在培養(yǎng)基中培養(yǎng)該細胞3天，然后與生長素釋放肽或D-Lys-GHRP6或?qū)φ张囵B(yǎng)基接觸。然后使用MTT測定劑(3-(4，5-二甲基噻唑基-2基)-2，5-二苯基四唑)(源于Trevigen，Gaithersburg，MD)評價細胞的存活力?？蛇M行的其它測定法是侵入和遷移測定法。具體化合物的作用還可取決于濃度，其在測定法中也可發(fā)生變化。
除了上述贅生性疾病外，本文所述化合物還可用于治療其它瘤形成和過度增殖包括“腫瘤”，其可以是良性的、惡化前的或惡性的。
癌性疾病的其它例子包括，但不限于，實體腫瘤、軟組織腫瘤、和轉(zhuǎn)移性病變。實體腫瘤的例子包括各器官系統(tǒng)的惡性腫瘤，例如，肉瘤、腺癌、和癌，如影響肺、乳腺、淋巴、胃腸(例如，結(jié)腸)、和泌尿生殖道(例如，腎、尿道上皮細胞)、咽、前列腺、卵巢的那些以及腺癌，其包括惡性腫瘤如最多的結(jié)腸癌、直腸癌、腎-細胞癌、肝癌、肺的非-小細胞癌、小腸癌等。前述癌的轉(zhuǎn)移性病變也可使用本發(fā)明的方法和組合物治療或預(yù)防。
本文所述化合物可用于治療各器官系統(tǒng)的惡性腫瘤，如影響肺、乳腺、淋巴、胃腸(例如，結(jié)腸)、和泌尿生殖道、前列腺、卵巢、咽的那些，以及腺癌，其包括惡性腫瘤如最多的結(jié)腸癌、腎-細胞癌、前列腺癌、和/或睪丸腫瘤、肺的非-小細胞癌、小腸癌和/或食道癌?？芍委煹呐e例實體腫瘤包括纖維肉瘤、粘液肉瘤、脂肉瘤、軟骨肉瘤、骨原性肉瘤、脊索瘤、血管肉瘤、內(nèi)皮肉瘤、淋巴管肉瘤、淋巴管內(nèi)皮肉瘤、滑膜瘤、間皮瘤、尤因氏瘤、平滑肌肉瘤、橫紋肌肉瘤、結(jié)腸癌、胰腺癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、鱗狀上皮細胞癌、基底細胞癌、腺癌、汗腺癌、皮脂腺癌、乳頭狀癌、乳頭狀腺癌、囊腺癌、髓樣癌、支氣管癌、腎細胞癌、肝細胞癌、膽管癌、絨毛膜癌、精原細胞癌、胚胎性癌、維耳姆斯氏瘤、宮頸癌、睪丸瘤、肺癌、小細胞肺癌、非-小細胞肺癌、膀胱癌、上皮癌、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、星形細胞瘤、成神經(jīng)管細胞瘤、顱咽管瘤、室管膜瘤、松果體瘤、成血管細胞瘤、聽神經(jīng)瘤、少突神經(jīng)膠質(zhì)瘤、腦膜瘤、黑素瘤、成神經(jīng)細胞瘤、和成視網(wǎng)膜細胞瘤。
術(shù)語“癌”可由本領(lǐng)域技術(shù)人員識別且是指上皮或內(nèi)分泌組織的惡性腫瘤，包括呼吸系統(tǒng)癌、胃腸系統(tǒng)癌、泌尿生殖系統(tǒng)癌、睪丸癌、乳腺癌、前列腺癌、內(nèi)分泌系統(tǒng)癌、和黑素瘤。舉例的癌包括從宮頸、肺、前列腺、乳腺、頭和頸、結(jié)腸和卵巢組織形成的那些。該術(shù)語還包括癌肉瘤，例如，其包括由癌和肉瘤組織構(gòu)成的惡性腫瘤。“腺癌”是指來源于腺組織或其中腫瘤細胞形成可識別的腺結(jié)構(gòu)的癌。
術(shù)語“肉瘤”可由本領(lǐng)域技術(shù)人員識別且是指間質(zhì)衍化的惡性腫瘤。
主題方法還可用于抑制造血起源的過度增生/贅生細胞的增殖，例如由骨髓、淋巴或紅細胞譜系，或其前體細胞產(chǎn)生。例如，本發(fā)明預(yù)期了各種骨髓疾病的治療，包括，但不限于，急性前骨髓(promyeloid)白血病(APML)、急性髓細胞白血病(AML)和慢性髓細胞白血病(CML)(綜述在Vaickus，L.(1991)Crit Rev.in Oncol./Hemotol.11267-97中)?？赏ㄟ^主題方法治療的淋巴惡性腫瘤，包括，但不限于急性成淋巴細胞白血病(ALL)，其包括B-譜系A(chǔ)LL和T-譜系A(chǔ)LL、慢性淋巴細胞白血病(CLL)、前淋巴細胞白血病(PLL、毛細胞白血病(HLL)和瓦爾登斯特倫氏巨球蛋白血癥(WM)。由本發(fā)明治療方法治療預(yù)期的惡性淋巴瘤的其它形式包括，但不限于，非-何杰金氏淋巴瘤及其變體、外周T-細胞淋巴瘤、成人T-細胞白血病/淋巴瘤(ATL)、皮膚T-細胞淋巴瘤(CTCL)、大顆粒淋巴細胞白血病(LGF)和何杰金氏病。
激動GHS-RB類(例如，GHS-R激動劑)或D類化合物可用于治療受治療者特定組織中具有低于所需或低于正常水平的GHS-R活性的疾病。這類化合物可用于治療下列疾病的一種或多種惡病質(zhì)、消瘦、刺激老年人的生長激素釋放、患有癌癥、心力衰竭或AIDS的患者；治療生長激素缺乏的成年人；糖皮質(zhì)激素分解代謝副作用的預(yù)防；骨質(zhì)疏松癥的治療；免疫系統(tǒng)的刺激、創(chuàng)傷愈合的加速；加速骨折修復(fù)；生長遲緩的治療；治療急性或慢性腎衰竭或機能不全；生理性身材矮小，包括生長激素缺乏的兒童的治療；治療與慢性病有關(guān)的身材矮小；治療肥胖和與肥胖有關(guān)的生長遲緩；治療與Prader-Willi綜合征和特納氏綜合征有關(guān)的生長遲緩；加速燒傷患者或重大手術(shù)如胃腸手術(shù)后患者的恢復(fù)和減少住院；子宮內(nèi)生長遲緩、和骨骼發(fā)育異常的治療；腎上腺皮質(zhì)機能亢進和庫興氏綜合征的治療；外周神經(jīng)病的治療；骨軟骨發(fā)育不良、Noonans綜合征、睡眠障礙、精神分裂癥、抑郁癥、阿爾茨海默氏病、創(chuàng)傷愈合延遲、和社會心理剝奪的治療；肺機能障礙和呼吸器依賴的治療；充血性心力衰竭的預(yù)防或治療、提高肺功能、恢復(fù)收縮和心臟舒張功能、增加心肌收縮力、降低外周總血管阻力、減少或防止體重損失并增強充血性心力衰竭后的恢復(fù)；增加食欲；重大手術(shù)后蛋白分解代謝反應(yīng)的減弱；治療吸收障礙綜合征；減少由于慢性病如癌癥或AIDS所致蛋白損失；促進依靠TPN(全腸胃外營養(yǎng))的患者體重增加和蛋白增加；血胰島素增多的治療；胃和十二指腸潰瘍的治療；胸腺發(fā)育的刺激；依靠慢性血液透析的患者的輔助治療；免疫抑制患者的治療；例如接種后抗體反應(yīng)的提高；增加人的總淋巴細胞數(shù)；表現(xiàn)為非-恢復(fù)性睡眠和肌與骨骼疼痛的綜合征，包括纖維肌痛綜合征或慢性疲勞綜合征的治療；肌肉強度、運動性、皮膚厚度維持、代謝內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)、虛弱老年人的腎內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)的改善；成骨細胞、骨重塑、和軟骨生長的刺激；充血性心力衰竭的預(yù)防和治療；心臟結(jié)構(gòu)和/或心臟功能的保護；提高哺乳動物充血性心力衰竭后的恢復(fù)；提高和/或改善睡眠質(zhì)量以及睡眠障礙的預(yù)防和治療；通過增加睡眠效率和增加睡眠維護而提高或改進睡眠質(zhì)量；心境障礙，特別是抑郁癥的預(yù)防和治療；改善患有抑郁癥的受治療者的心情和主觀感受；降低胰島素抗性；免疫系統(tǒng)的刺激；刺激并促進手術(shù)后患者或變性病癥如II型糖尿病繼發(fā)的胃輕癱的胃運動性；和增加生長。該化合物可用于治療人類或動物，例如，家畜、寵物等。
本文方法預(yù)期了有效量化合物或化合物組合物的給藥，從而對腸病的治療或預(yù)防獲得治療性或預(yù)防性作用(例如，阻止或減少手術(shù)后腸梗阻的嚴重程度)。在一些情況下，在手術(shù)過程之前給予患者該化合物。該化合物可以，在一些情況下，提供預(yù)防性作用并減少手術(shù)后障礙如手術(shù)后腸梗阻的發(fā)生率或嚴重程度。在給予化合物治療急性障礙的情況下，劑量方案通?？蓴U展障礙的長度。例如，治療患者手術(shù)后腸梗阻時，可在手術(shù)操作后給予該化合物約24小時-約4天。如上所述，在一些例子中，還可在手術(shù)操作前給予該化合物，為患者提供預(yù)防性益處。
在一些例子中，該化合物對手術(shù)或化療前重量不足的患者特別有益。因此，誘導(dǎo)手術(shù)前GH產(chǎn)生或釋放的化合物給藥還可提高患者對手術(shù)操作的耐受性并提高從手術(shù)操作中的恢復(fù)。
在一些情況下，在慢性病如糖尿病性胃輕癱的治療中給予該化合物。該化合物可以，例如，使用模擬生長素釋放肽餐前升高的劑量和制劑給藥。例如，可在餐前，例如餐前約3小時-約5分鐘，如約2.5小時、2小時、約1.5小時、1小時、45分鐘、30分鐘、15分鐘等，給予患者誘導(dǎo)GH產(chǎn)生或分泌的化合物。
在一些實施方案中，將化合物配制和/或給藥，從而相對于腸吸收，增加胃吸收。例如，可給予患有惡病質(zhì)(例如，與癌癥有關(guān)的惡病質(zhì))的患者該化合物，與腸吸收相比，增加了胃吸收。在一些實施方案中，給藥途徑和/或劑量方案還可影響胃吸收和腸吸收的相對量。
在一些實施方案中，本文所述激動生長素釋放肽的化合物或組合物可用于治療患有HIV脂肪營養(yǎng)不良(HALS)的受治療者。例如，可將化合物給予患者，其量為足以減少或減緩患者的脂肪營養(yǎng)不良的量。隨著對HIV患者使用HAART療法，HALS越來越普遍，例如，約50％患者在HAART療法中發(fā)生HALS。核苷類抑制劑和蛋白酶抑制劑已經(jīng)涉及該綜合征。然而，HIV病毒感染本身不涉及HALS。
HALS特征在于中央脂肪增加和四肢脂肪萎縮。還有伴發(fā)的血脂異常和胰島素抗性，它們可能是大和小血管疾病的危險因素。
患者的鑒定在一些情況下，可以鑒定使用調(diào)節(jié)GH產(chǎn)生或釋放的化合物治療受益的患者或受治療者。例如，可以鑒定使用誘導(dǎo)GH產(chǎn)生或釋放的化合物治療受益的患者或受治療者。例如，可測定和評價受治療者中生長素釋放肽和/或GH的內(nèi)源性水平，以確定治療過程。如果患者被確定具有較之預(yù)定標準，例如，相同年齡和性別的健康患者中內(nèi)源性生長素釋放肽或GH水平更低的生長素釋放肽或GH水平，那么可確定該患者是對使用誘導(dǎo)GH產(chǎn)生或釋放的化合物治療的反應(yīng)增加的候選人。
在一些情況下，老年受治療者，如至少55歲的受治療者(例如，至少60歲、至少65歲、至少70歲、至少75歲、至少80歲、至少85歲、至少90歲、至少95歲或至少100歲)可以，在一些情況下，對手術(shù)后腸梗阻和惡病質(zhì)具有更高敏感性。因此，這類患者可被確定用于使用誘導(dǎo)GH產(chǎn)生或釋放的化合物，如表1所述化合物的治療。除了分析受治療者的年齡之外，還可評價內(nèi)源性GH水平以進一步證實受治療者是否從使用誘導(dǎo)GH產(chǎn)生或分泌的化合物的治療中受益。
試劑盒本文所述化合物可以試劑盒的形式提供。該試劑盒包括(a)含有本文所述化合物的組合物，和任選地(b)信息材料。該信息材料可以是涉及本文所述方法和/或本文所述化合物用于本文所述方法的應(yīng)用的描述、用法說明、上市或其它材料。
試劑盒的信息材料其形式不受限制。在一個實施方案中，信息材料可包括關(guān)于化合物生產(chǎn)、化合物分子量、濃度、失效期、批次或生產(chǎn)地點的信息等。在一個實施方案中，信息材料涉及本文所述化合物用于治療本文所述疾病的用途。
在一個實施方案中，信息材料可包括以適宜方式給予本文所述化合物，從而進行本文所述方法的說明，例如，適宜劑量、劑型或給藥方式(例如，本文所述劑量、劑型或給藥方式)。優(yōu)選的劑量、劑型或給藥方式是腸胃外的，例如，靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、皮下、腹膜內(nèi)(intraparenteral)、口腔(bucosal)、舌下、眼內(nèi)和局部。在另一實施方案中，信息材料可包括將本文所述化合物給予適宜受治療者，例如，人，例如患有本文所述疾病或有患上本文所述疾病危險的人的說明。例如，該材料可包括將本文所述化合物給予這類受治療者的說明。
試劑盒的信息材料其形式不受限制。在許多情況下，信息材料，例如，說明書以印刷件形式提供，例如，印刷文本、附圖
、和/或照片，例如標簽或印刷紙張。然而，信息材料還可以其它形式提供，如計算機可讀材料、視頻記錄或音頻記錄。在另一實施方案中，試劑盒的信息材料是聯(lián)系信息，例如，實際地址、電子郵件地址、網(wǎng)站或電話號碼，其中試劑盒的使用者可獲得關(guān)于本文所述化合物和/或其在本文所述方法中使用的大量信息。當(dāng)然信息材料還可以形式的任意組合提供。
除了本文所述化合物，試劑盒的組合物可含有其它成分，如溶劑或緩沖液、穩(wěn)定劑、防腐劑和/或用于治療本文所述狀況或疾病的第二種化合物?？蛇x擇性地，其它成分可包括在試劑盒中，但包括在較之本文所述化合物不同的組合物或容器中。在這類實施方案中，試劑盒可包括用于將本文所述化合物和其它成分混合，或用于使用本文所述化合物以及其它成分的說明。
本文所述化合物可以任何形式提供，例如，液體、干燥或凍干形式。優(yōu)選本文所述化合物基本上是純的和/或無菌的。當(dāng)以液體溶液形式提供本文所述化合物時，該液體溶液優(yōu)選是水溶液，其中無菌水溶液是優(yōu)選的。當(dāng)以干燥形式提供本文所述化合物時，重構(gòu)通常是通過加入適宜溶劑進行的?？扇芜x在試劑盒中提供溶劑，例如無菌水或緩沖液。
該試劑盒可包括用于含有本文所述化合物的組合物的一個或多個容器。在一些實施方案中，該試劑盒包含用于組合物和信息材料的分開的容器、分隔物或隔室。例如，該組合物可包含在瓶子、小瓶或注射器中，并且信息材料可包含在塑料套管或包內(nèi)。在其它實施方案中，試劑盒的獨立部件包含在單一的、未分開的容器內(nèi)。例如，組合物包含在其上貼有標簽形式的信息材料的瓶子、小瓶或注射器中。在一些實施方案中，試劑盒包括許多(一包)獨立容器，各自含有一個或多個單位劑量形式(例如，本文所述劑型)的本文所述化合物。例如，該試劑盒包括許多注射器、安瓿、箔包或泡眼包裝，各自含有單一單位劑量的本文所述化合物。試劑盒的容器可以是氣密的、防水的(例如，水份或蒸發(fā)的改變不能滲透)和/或避光的。
試劑盒任選包括適于組合物給藥的裝置，例如，注射器、吸入器、吸量管、鑷子、測量匙、滴管(例如，眼用滴管)、藥簽(例如，棉簽或木簽)或任意這類遞送裝置。在優(yōu)選實施方案中，該裝置是可植入的遞送裝置。
其它實施方案落在下列權(quán)利要求范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求
1.式(I)的化合物 式(I)其中，R1是氫、芳基、雜芳基、芳基烷基、雜芳基烷基、環(huán)基、環(huán)烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)烷基、烷基、烯基、炔基，或R1可與R2或R3共同形成環(huán)；其各自任選被1至4個R6取代；K是鍵、O、C(O)、C(O)O、OC(O)、C(O)NR3、NR3C(O)、S、SO、SO2、CR2＝CR2或C≡C；n是0-6，優(yōu)選1-3；R2是氫、C1-C6烷基、C2-C6烯基或C2-C6炔基；R3是氫、C1-C6烷基、C2-C6烯基或C2-C6炔基，或R3可與R2、R4或R5共同形成環(huán)；其各自可任選被1-2個R6’取代；A是 x和y各自獨立地是0-6；M是芳基、雜芳基、環(huán)基或雜環(huán)基，其各自任選被1至4個R9取代；R4和R5各自獨立地是氫、烷基、烯基、鹵代烷基、環(huán)基或雜環(huán)基，或R4和R5可共同形成雜環(huán)，或R4和R5可共同形成疊氮基部分，或R4和R5中的一個或兩個可獨立與R7a和R7b中的一個或兩個連接，從而在與R4和R5相連的氮與R7a和R7b之間形成一個或多個橋，其中各橋含有1至5個碳；或R4和R5中的一個或兩個可獨立與R7a和R7b中的一個或兩個連接，從而形成一個或多個包括與R4和R5相連的氮的雜環(huán)，或R4和R5中的一個或兩個可獨立與R3連接形成環(huán)，或R4和R5中的一個或兩個可獨立與R8連接形成環(huán)；其中各R4和R5任選獨立地被1-5個鹵素、1-3個羥基、1-3個烷基、1-3個烷氧基、1-3個氧代、1-3個氨基、1-3個烷基氨基、1-3個二烷基氨基、1-3個腈或1-3個鹵代烷基取代；Xa是2至4個稠合的或螺環(huán)基、雜環(huán)基、芳基或雜芳基環(huán)；其各自任選被1至4個R10取代；各R6和R6’獨立地是鹵素、烷基、烯基、炔基、環(huán)基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、烷氧基、鹵代烷基、鹵代烷氧基、鹵代烷硫基、乙?；⑶杌?、硝基、羥基、氧代、C(O)OR2、OC(O)R2、N(R3)2、C(O)N(R3)2、NR3C(O)R2或SR2；R7a和R7b各自獨立地是氫、烷基、烯基、鹵代烷基、環(huán)基、環(huán)烷基或雜環(huán)基；或R7a和R7b中的一個或兩個可獨立與R4和R5中的一個或兩個連接，從而在與R4和R5相連的氮與R7a和R7b之間形成一個或多個橋，其中各橋含有1至5個碳；或R7a和R7b中的一個或兩個可獨立與R4和R5中的一個或兩個連接，從而形成一個或多個包括與R4和R5相連的氮的雜環(huán)，或R7a和R7b中的一個或兩個可獨立與R8連接形成環(huán)；其中各R7a和R7b可獨立地任選被1-5個鹵素、1-3個羥基、1-3個烷基、1-3個烷氧基、1-3個氨基、1-3個烷基氨基、1-3個二烷基氨基、1-3個腈或1-3個鹵代烷基取代；R8是氫或C1-C6烷基，或R8可與R4、R5、R7a或R7b連接形成環(huán)；R9是鹵素、烷基、環(huán)基、雜環(huán)基、芳基、雜芳基、烷氧基、鹵代烷基、鹵代烷氧基、鹵代烷硫基、乙酰基、氰基、硝基、羥基、氧代、C(O)OR2、OC(O)R2、N(R2)2、C(O)N(R2)2、NR2C(O)R2、SR2；各R10獨立地是烷基、烯基、炔基、鹵素、氰基、羰基、芳基、芳基烷基、芳基烯基、芳基炔基、環(huán)基、環(huán)烷基、烷氧基、烷氧基烷基、芳基氧基、芳基氧基烷基、雜環(huán)基、雜環(huán)烷基、雜芳基、雜芳基烷基、-OR11、-NR11R11′、-CF3、-SOR12、-SO2R12、-OC(O)R11、-SO2NR12R12′、-(CH2)mR14或R15；其各自任選獨立地被1-3個R16取代；R11和R11′各自獨立地是氫、烷基、烯基、炔基、環(huán)基、雜環(huán)基、芳基或雜芳基；R12和R12′各自獨立地是氫、烷基、烯基、炔基、烷基硫代烷基、烷氧基烷基、芳基、芳基烷基、雜環(huán)基、雜芳基、雜芳基烷基、雜環(huán)烷基或環(huán)基、環(huán)烷基，或R12和R12′可共同被環(huán)化形成-(CH2)qX(CH2)s-；其中各R12和R12′可獨立地任選被1至3個選自鹵素、OR11、烷氧基、雜環(huán)烷基、-NR11C(O)NR11R11′、-C(O)NR11R11′、-NR11C(O)R11′、-CN、氧代、-NR11SO2R11′、-OC(O)R11、-SO2NR11R11′、-SOR13、-S(O)2R13、-COOH和-C(O)OR13的取代基取代；各R13獨立地是烷基、芳基、芳基烷基、雜芳基或雜芳基烷基，其各自可任選被-(CH2)wOH取代；各R14獨立地是烷氧基、烷氧羰基、-C(O)NR12R12′、-NR11R11′、-C(O)R12、-NR11C(O)NR11R11′或-N-雜芳基；各R15獨立地是-(CH2)pN(R12)C(O)R12′、-(CH2)pCN、-(CH2)pN(R12)C(O)OR12′、-(CH2)pN(R12)C(O)NR12R12′、-(CH2)pN(R12)SO2R12、-(CH2)pSO2NR12R12’、-(CH2)pC(O)NR12R12′、-(CH2)pC(O)OR12、-(CH2)pOC(O)OR12、-(CH2)pOC(O)R12、-(CH2)pOC(O)NR12R12′、-(CH2)pN(R12)SO2NR12R12′、-(CH2)pOR12、-(CH2)pOC(O)N(R12)(CH2)mOH、-(CH2)pSOR12、-(CH2)pSO2R12、-(CH2)pNR11R11或-(CH2)pOCH2C(O)N(R12)(CH2)mOH；各R16獨立地是鹵素、烷基、烯基、炔基、烷氧基、-(CH2)pNR11C(O)NR11R11′、-(CH2)pC(O)NR11R11′、-(CH2)pNR11C(O)R11′、-CN、-(CH2)pNR11SO2R11′、-(CH2)pOC(O)R11、-(CH2)pSO2NR11R11′、-(CH2)pSOR13、-(CH2)pCOOH或-(CH2)pC(O)OR13；X是CR11R11’、O、S、S(O)、S(O)2或NR11；m是1至6的整數(shù)；p是0至5的整數(shù)；q和s各自獨立地是1至3的整數(shù)；并且w是0至5的整數(shù)。
2.權(quán)利要求1的式(I)的化合物，其中Xa含有下面式(II)描述的部分； 式(II)其中Q1和Q2各自獨立地是環(huán)基、雜環(huán)的、芳基或雜芳基環(huán)，其中Q1可被1至4個R10取代且Q2可被1-4個選自R10和Q3的取代基取代；Q3是3-8元稠合的或螺環(huán)烷基、雜環(huán)的、芳基或雜芳基環(huán)，其中Q3可任選被1-5個選自R10和Q4的取代基取代；并且Q4是3-8元稠合的或螺環(huán)烷基、雜環(huán)的、芳基或雜芳基環(huán)，其中Q4可任選被1-5個R10取代；B是N或CR17；D是N或CR17；并且R17是H或鍵。
3.權(quán)利要求1的式(I)的化合物，其中，Xa含有下面描述的結(jié)構(gòu) 并且其中Xa任選被1至4個R10取代，其中該取代不限于碳原子，還可以位于雜原子上，包括被描述為與氫結(jié)合的那些氮原子。
4.權(quán)利要求1的式(I)的化合物，其中Xa是 并且其中Xa任選被1至4個R10取代，其中該取代不限于碳原子，還可位于雜原子上，包括被描述為與氫結(jié)合的那些氮原子。
5.權(quán)利要求1的式(I)的化合物，其中R10是R15。
6.權(quán)利要求5的式(I)的化合物，其中R10是R15；并且R12是雜環(huán)基或烷基，任選被羥基或鹵素取代。
7.權(quán)利要求6的式(I)的化合物，其中R15是(CH2)pC(O)OR12、(CH2)pOC(O)R12或(CH2)pOC(O)N(R12)(CH2)mOH。
8.權(quán)利要求1的式(I)的化合物，其中R10是R15，并且R12和R12′獨立地是氫、烷基或環(huán)烷基，其中烷基或環(huán)烷基任選被-C(O)OR13或-C(O)NR11R11′取代，或R12和R12′可共同被環(huán)化形成-(CH2)qX(CH2)s-。
9.權(quán)利要求8的式(I)的化合物，其中R15是-(CH2)pN(R12)C(O)OR12′、-(CH2)pN(R12)C(O)NR12R12′或(CH2)pOC(O)NR12R12′，其中R12和R12′獨立地是氫或烷基，其中該烷基任選被-C(O)NR11R11′取代，其中R11和R511′獨立地是氫或烷基。
10.權(quán)利要求1的式(I)的化合物，其中n是1；k是鍵或O；并且R1是芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基。
11.權(quán)利要求1的式(I)的化合物，其中n是1；k是O；并且R1是芳基烷基。
12.權(quán)利要求1的式(I)的化合物，其中A是
13.權(quán)利要求12的式(I)的化合物，其中A是
14.權(quán)利要求13的式(I)的化合物，其中R7a和R7b是H；x是1；并且y是0或1。
15.權(quán)利要求1的式(I)的化合物，其中A是CH2CH2或CH2CH2CH2；并且各R4和R5獨立地是烷基，或R4和R5，結(jié)合在一起時，形成雜環(huán)。
16.權(quán)利要求1的式(I)的化合物，其中R1是芳基烷基、雜芳基烷基或芳烷氧基。
17.權(quán)利要求1的式(I)的化合物，其中R2是H或CH3。
18.一種治療代謝綜合征的方法，該方法包括給予受治療者權(quán)利要求1的式(I)的化合物。
19.一種治療糖尿病的方法，該方法包括給予受治療者權(quán)利要求1的式(I)的化合物。
20.一種治療肥胖的方法，該方法包括給予受治療者權(quán)利要求1的式(I)的化合物。
全文摘要
描述了式(I)的化合物，包括制備方法和使用方法。
文檔編號C07D471/00GK101039942SQ200580034477
公開日2007年9月19日 申請日期2005年9月27日 優(yōu)先權(quán)日2004年9月27日
發(fā)明者J·O·桑德斯, A·納珀 申請人:伊利舍醫(yī)藥品公司