專利名稱：作為天冬氨酸蛋白酶ii抑制劑的新型4-胺基哌啶衍生物的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及下列式I的新的4-胺基哌啶衍生物。本發(fā)明還涉及包含一個或多個式I化合物的藥物組合物，特別是它們用作惡性瘧原蟲天冬氨酸蛋白酶(plasmepsin)II、惡性瘧原蟲天冬氨酸蛋白酶(plasmepsin)IV、天冬氨酸有關的蛋白酶，例如惡性瘧原蟲天冬氨酸蛋白酶I和HAP(組氨酸天門冬氨酸(Histoaspartic)蛋白酶)或其他原蟲或真菌的天冬氨酸蛋白酶的抑制劑。
背景技術：
瘧疾是21世紀影響人類最嚴重和最復雜的健康問題之一。該疾病影響全球約3億人口，每年導致100～150萬人死亡。瘧疾是由四種原蟲的寄生瘧原蟲引起的傳染病，惡性瘧原蟲是四者中最嚴重的。迄今為止，所有研制對抗惡性瘧原蟲的疫苗的努力均告失敗。因此，抗瘧疾的治療和預防措施局限于藥物。然而，許多現(xiàn)有的抗瘧疾藥物的抗藥性正迅速擴大，且急需新藥。
惡性瘧原蟲通過雌性按蚊叮咬進入人體。該瘧原蟲寄生蟲最初寄生在肝臟，隨后在傳染期復制到紅細胞中。在此階段，寄生蟲降解血紅蛋白，并使用降解產(chǎn)物作為生長之需的養(yǎng)分(Goldberg，D.E.，Slater，A.F.，Beavis，R.，Chait，B.，Cerami，A.，Henderson，G.B.，Hemoglobin degradation in the humanmalaria pathogen Plasmodium falciparuma catabolic pathway initiated by aspecific asparticprotease，J.Exp.Med.，1991，173，961-969)。絲氨酸蛋白酶和天冬氨酸蛋白酶調節(jié)血紅蛋白的降解。已經(jīng)證實天冬氨酸蛋白酶對寄生蟲生長是必不可少的。一種天冬氨酸蛋白酶的非選擇性抑制劑(抑胃肽)能夠在體外抑制惡性瘧原蟲在紅細胞中的生長。使用抑胃肽的類似物得到了相同的結果(Francis，S.E.，Gluzman，I.Y.，Oksman，A.，Knickerbocker，A.，Mueller，R.，Bryant，M.L.，Sherman，D.R.，Russell，D.G.，Goldberg，D.E.，Molecularcharacterization and inhibition of a Plasmodium falciparum aspartichemoglobinase，Embo.J.，1994，13，306-317；Moon，R.P.，Tyas，L.，Certa，U.，Rupp，K.，Bur，D.，Jaquet，H.，Matile，H.，Loetscher，H.，Grueninger-Leitch，F(xiàn).，Kay，J.，Dunn，B.M.，Berry，C.，Ridley，R.G.，Expression andcharacterization of plasmepsin I from Plasmodium falciparum，Eur.J.Biochem.，1997，244，552-560)。這些結果表明抑制寄生蟲天冬氨酸蛋白酶可干擾惡性瘧原蟲的生命周期。因此，天冬氨酸蛋白酶是抗瘧疾藥物發(fā)展的目標。
如今，天冬氨酸蛋白酶(plasmepsin)II抑制劑還沒有進入人體臨床試驗或臨床進展的高級階段?？茖W文獻報道了某些擬肽(peptidomimetic)或底物衍生的天冬氨酸蛋白酶(plasmepsin)II抑制劑(Ersmark，K.等，J.Med.Chem.，2004，47，110-122；Johannsson，P-O.等，J.Med.Chem.，2004，47，3353-3366；Hallberg，A.，Samuelsson，B.等，J.Med.Chem.，2003，46，734-746；ibid，Bioorg.Med.Chem.，2003，11，1235-1246；ibid，Bioorg.Med.Chem.，2003，11，827-841；
D.，Larhed，M.等，J.Comb.Chem.，2003，5，456-464；Nezami，A.，F(xiàn)reire，E.等，Biochemistry，2002，41，2273-2280；Haque，T.S.，Ellman，J.A.等，J.Med.Chem.，1999，42，1428-1440；Brinner，K.M.，Ellamn，J.A.等，Bioorg.Med.Chem.，2002，10，3649-3661；Dolle R.E.等；Bioorg.Med.Chem.Lett.，1998，8，2315-2320；Dolle R.E.等，Bioorg.Med.Chem.Lett.，1998，8，3203-3206；US Patent 5，734，054(Pharmacopeia Inc.，DolleR.E.等))，根據(jù)所報道的數(shù)據(jù)，它對于分離的酶表示出理想的抑制活性，但在瘧疾的細胞試驗或動物模型中經(jīng)常不能保持這種活性。眾所周知，擬肽藥物的有限的穩(wěn)定性具有潛在的代謝性、而且經(jīng)常顯示出不利的ADME特性，該特性阻止它們在體內環(huán)境下的活性。
在科學文獻中也報道了一些非肽或非擬肽天冬氨酸蛋白酶(plasmepsin)II抑制劑(Carcache，D.A.，Diederich F.等，ChemBioChem，2002，11，1137-1141；Carcache，D.A.，Diederich，F(xiàn).等，Helv.Chim.Acta，2003，86，2173-2191；Carcache，D.A.，Diederich，F(xiàn).等，Helv.Chim.Acta，2003，86，2192-2209)。但這些化合物在分離的酶活性測定中表示出相當?shù)偷幕钚裕虼瞬灰擞米魉幬铩?br>
WO 02/38534公開了天冬氨酸蛋白酶(plasmepsin)II的另一類非肽和非底物衍生抑制劑(Actelion Pharmaceuticals Ltd；Boss C.等)。
WO 02/24649、C.Boss等Curr.Med.Chem.，2003，10，883-907和R.Mueller，M.Huerzeler和C.Boss，Molecules，2003，8，556-564描述了另一組低分子非擬肽天冬氨酸蛋白酶(plasmepsin)II抑制劑(ActelionPharmaceuticals Ltd；Boss C.等)。盡管這些分子在分離的酶上顯示出高活性，但在它們的物理化學特性(例如在水溶液中或生理條件下的親油性和溶解度)，卻具有很大的缺陷，這阻礙了它們顯著的體外活性變成生理環(huán)境。
對于惡性瘧原蟲酶天冬氨酸蛋白酶(plasmepsin)II和天冬氨酸蛋白酶(plasmepsin)IV的抑制活性，本發(fā)明的化合物明顯優(yōu)于現(xiàn)有技術描述的化合物。例如，使用包含本專利的化合物與現(xiàn)有技術文獻描述的化合物比較，細胞實驗的結果能夠證明這一事實。
本發(fā)明化合物最重要的不僅包括天冬氨酸蛋白酶(plasmepsin)II抑制劑，而且還包括(plasmepsin)IV的抑制劑。
根據(jù)下文抗plasmepsin II、plasmepsin I、plasmepsin IV、人類組織蛋白酶D和人類組織蛋白酶E描述的試驗部分對式I化合物進行測試，以便測定它們的生物活性和其選擇特性。
發(fā)明內容
本發(fā)明涉及低分子有機化合物，特別是如式I的取代4-胺基哌啶式I
其中 R1表示氫；烷基，優(yōu)選2-甲基-丙基；烯基；炔基；環(huán)丙基；環(huán)戊基；環(huán)己基；環(huán)己烯基；可被單取代、二取代、三取代或四取代的苯基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基；可被單取代、二取代或三取代的吡啶基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；可被單取代或二取代的呋喃基，其中取代基獨立地選自甲基、羥基甲基和溴；可被甲基或氯單取代的噻吩基；苯并噻吩基；苯并呋喃基；喹啉基；異喹啉基；苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基；甲氧基-苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基；氯-苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基；2，2-聯(lián)苯乙基；2-苯基丙基；1-[2，6，6-三甲基-環(huán)己-1-丙烯基]-甲基；吡咯基；噻唑基或咪唑基； n表示整數(shù)1、2或3；
表示
R2表示丁基、戊基或己基；或
如果
表示
Y表示
如果
表示
或者，如果
表示
Y表示
或可被單取代、二取代、三取代或四取代的苯基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基，或下列自由基
或者，如果
表示
或者，如果
表示
Y也可以表示可被單取代、二取代或三取代的吡啶基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；可被單取代或二取代的呋喃基，其中取代基獨立地選自甲基、羥基甲基和溴；可被甲基或氯單取代的噻吩基；苯并噻吩基；苯并呋喃基；喹啉基；異喹啉基；苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯基；2，2-聯(lián)苯乙基；2-苯基丙基；1-[2，6，6-三甲基-環(huán)己-1-丙烯基]-甲基；3-甲基丁基；苯氧基，其中苯基環(huán)可以被單取代、二取代、三取代或四取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基-羰基和羧基；吡啶基氧基，其中吡啶基環(huán)可以被單取代、二取代或三取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；或下列自由基
R3表示烷基；環(huán)烷基；-CF3、-CF3-烷基、烷氧基-烷基；烷氧基-羰基；羧基；苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基；甲氧基-苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基；氯-苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基；苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基-烷基；可被單取代、二取代、三取代或四取代的苯基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基；苯基烷基，其中苯基環(huán)可以被單取代、二取代、三取代或四取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基；苯氧基-甲基；可被單取代、二取代或三取代的吡啶基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；吡啶基烷基，其中吡啶基環(huán)可以被單取代、二取代或三取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；可被單取代或二取代的呋喃基，其中取代基獨立地選自甲基、羥基甲基、-CF3和鹵素；可被單取代或二取代的噻吩基，其中取代基獨立地選自甲基和鹵素；噻吩基-烷基；可被單取代或二取代的吡唑基，其中取代基獨立地選自甲基和鹵素；苯并噻吩基；苯并呋喃基；苯并咪唑基；苯并吡唑基；吲哚基；吲哚-烷基或嗎啉基-烷基；或如果 Y表示
R3除了表示上述可能的基團之外，還可以表示硫代嗎啉基；可被單取代或二取代的哌啶基，其中取代基獨立地選自烷基、羥基-烷基和羥基；哌啶基-烷基；嗎啉基或1-哌嗪基，其4位的氮原子可以被烷基、苯甲基、吡啶基或苯基取代，其中苯基可以被單取代、二取代、三取代或四取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基； R4表示氫、甲基、乙基、異丙基、環(huán)丙基； R5和R6表示氫；烷基；環(huán)烷基；可被單取代、二取代、三取代或四取代的苯基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基；苯基烷基，其中苯基環(huán)可以被單取代、二取代、三取代或四取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基；吡咯烷基-烷基；可被單取代、二取代或三取代的吡啶基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；吡啶基-烷基，其中吡啶基環(huán)可以被單取代、二取代或三取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；哌啶基-烷基；嗎啉基-烷基；4-甲基-哌嗪基-烷基；4-苯甲基-哌嗪基-烷基；烷氧基-烷基或雙烷基胺基-烷基，且可以是相同的或不同的；或R5和R6可以共同形成嗎啉基環(huán)；硫代嗎啉基環(huán)；可被單取代或二取代的哌啶基環(huán)，其中取代基獨立地選自甲基或羥基；1-哌嗪基，其4位的氮原子可以被烷基、苯甲基、吡啶基或苯基取代，其中苯基可以被單取代、二取代、三取代或四取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基； 且
表示
以及光學純的對映異構體、對映異構體的混合物、外消旋體、非對映異構體、非對映異構體的混合物、非對映異構的外消旋體、非對映異構外消旋體的混合物、和內消旋體、以及該化合物的鹽、溶劑化物和多晶型。
這些取代的4-胺基哌啶是新化合物，且顯示出有用的藥效特性。
本發(fā)明的對象是上述式I的4-胺基哌啶，以及其光學純的對映異構體、對映異構體的混合物、外消旋體、非對映異構體、非對映異構體的混合物、非對映異構的外消旋體、非對映異構外消旋體的混合物、和內消旋體、以及該化合物的鹽、溶劑化物和多晶型，并用作治療的活性物質，包含該化合物的藥物組合物，以及制備該化合物和藥物組合物的方法，以及該化合物和組合物用于治療和/或預防需抑制寄生蟲天冬氨酸蛋白酶的疾病的用途。
本說明書上下文所使用的常用術語，除非另有陳述，優(yōu)選具有如下含義 其中對于化合物、鹽、藥物組合物、疾病等的復數(shù)形式也用于表示單個的化合物、鹽等。
任何涉及式I的化合物或其亞分子式應被理解為還涉及其光學純的對映異構體、對映異構體的混合物、外消旋體、非對映異構體、非對映異構體的混合物、非對映異構的外消旋體、非對映異構外消旋體的混合物、和內消旋體、以及該化合物的鹽(尤其藥學上可接受的鹽)和溶劑化物(包括水合物)和多晶型。
在本說明書中，術語烷基，在單獨使用或與其他基組合使用時，是指含1～7個，優(yōu)選3～6個，更優(yōu)選1～3個碳原子的直鏈或支鏈飽和烴基，例如甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、2-甲基-丙基、3，3-二甲基-丙基、正己基或正庚基。
術語烯基是指含2～7個，優(yōu)選3～6個碳原子的直鏈或支鏈烴基，且包含至少一個碳-碳雙鍵，例如乙烯基、烯丙基、2-丁烯基或3-丁烯基。
術語炔基是指含2～7個，優(yōu)選3～6個碳原子的直鏈或支鏈烴基，且含有碳-碳三鍵，例如乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基或己炔基。
術語烷氧基，在單獨使用或與其他基組合使用時，是指烷基醚，其中烷基具有上述定義，例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、異丁氧基、仲丁氧基或叔丁氧基。
術語環(huán)烷基是指具有3～6個碳原子的飽和環(huán)烴系，即環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基和環(huán)己基。
術語鹵素是指氟、氯、溴或碘，優(yōu)選氟、氯或溴。
術語“藥學上可接受的鹽”包括與無機酸或有機酸(諸如鹽酸或氫溴酸、硫酸、磷酸、檸檬酸、甲酸、乙酸、馬來酸、酒石酸、苯甲酸、甲磺酸、對甲苯磺酸等)所形成的對生物活體非毒性的鹽，并且當式I的化合物為酸性的化合物時，所述的鹽是指通過與堿例如氫氧化鈉、氫氧化鉀、氫氧化鈣等所形成的鹽。其他藥學上可接受的鹽的實例參考“Salt selection for basic drugs”，Int.J.Pharm.(1986)，33，201-217。
通式I的化合物還可以包含一個或多個不對稱碳原子，并且可以制備成光學純的對映異構體、對映異構體的混合物(例如外消旋體)、非對映異構體、非對映異構體的混合物、非對映異構的外消旋體、非對映異構的外消旋體的混合物或內消旋形式。本發(fā)明包含所有這些形式?？梢酝ㄟ^本身已知的方式，例如柱色譜法、薄層色譜法(TLC)、高壓液相色譜法(HPLC)或結晶法等對混合物進行分離。
優(yōu)選上述式I的化合物，其中R1表示氫；烷基；環(huán)丙基；環(huán)戊基；環(huán)己基；環(huán)己烯基；可被單取代、二取代、三取代或四取代的苯基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基；可被單取代、二取代或三取代的吡啶基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；可被單取代或二取代的呋喃基，其中取代基獨立地選自甲基、羥基甲基和溴；可被甲基或氯單取代的噻吩基；優(yōu)選表示氫；甲基；乙基；丙基；2-甲基-丙基；3，3-二甲基丙基；環(huán)丙基或咪唑基；更優(yōu)選乙基；丙基；2-甲基-丙基或3，3-二甲基丙基；最優(yōu)選2-甲基-丙基。優(yōu)選n為1。優(yōu)選R2為戊基或己基，優(yōu)選戊基。優(yōu)選R3為烷基；可被單取代、二取代、三取代或四取代的苯基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基；苯基烷基，其中苯基環(huán)可以被單取代、二取代、三取代或四取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基；可被單取代、二取代或三取代的吡啶基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；吡啶基烷基，其中吡啶基環(huán)可以被單取代、二取代或三取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；可被單取代或二取代的呋喃基，其中取代基獨立地選自甲基、羥基甲基、-CF3和鹵素；可被單取代或二取代的噻吩基，其中取代基獨立地選自甲基和氯；噻吩基-烷基；苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基；苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基-烷基。優(yōu)選R4為氫或甲基。優(yōu)選R5為烷基；可被單取代、二取代、三取代或四取代的苯基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基；苯基烷基，其中苯基環(huán)可以被單取代、二取代、三取代或四取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基；可被單取代、二取代或三取代的吡啶基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；吡啶基-烷基，其中吡啶基環(huán)可以被單取代、二取代或三取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；哌啶基-烷基；嗎啉基-烷基；4-甲基-哌嗪基-烷基；4-苯甲基-哌嗪基-烷基；烷氧基-烷基或雙烷基胺基-烷基。更優(yōu)選R5為哌啶基-烷基、嗎啉基-烷基、4-甲基-哌嗪基-烷基、苯甲基、吡啶基-乙基、苯基、2-吡啶基、3-吡啶基或4-吡啶基，其中苯基和吡啶基環(huán)可以被單取代、二取代或三取代，其中取代基獨立地選自甲基、甲氧基、氟、氯和三氟甲基。更優(yōu)選R5為苯甲基、吡啶基-乙基、2-吡啶基、3-吡啶基或4-吡啶基，其中苯基和吡啶基環(huán)可以被單取代或二取代，其中取代基獨立地選自甲基、甲氧基和氯。優(yōu)選R6為氫。另一個優(yōu)選的R5和R6共同形成嗎啉基環(huán)；硫代嗎啉基環(huán)；可被單取代或二取代的哌啶基環(huán)，其中取代基獨立地選自甲基或羥基；1-哌嗪基，其4位的氮原子可以被烷基、苯甲基、吡啶基或苯基取代，其中苯基可以被單取代、二取代、三取代或四取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基。較優(yōu)選的R5和R6共同形成1-哌嗪基，其4位的氮原子可以被烷基、苯甲基、吡啶基或苯基取代，其中苯基可以被單取代、二取代、三取代或四取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基。
優(yōu)選表示
更優(yōu)選
優(yōu)選表示
且Y 優(yōu)選表示
更優(yōu)選
式I化合物的一個優(yōu)選的亞組為其中基團如下定義的化合物
表示
且
表示
特別是
式I化合物的一個優(yōu)選的亞組為式II 式II
其中 R1和
如上式I的定義， Y表示
且R3和R4如上式I的定義。
特別的式II化合物中R1表示乙基；丙基；2-甲基-丙基；3，3-二甲基丙基；環(huán)丙基或咪唑基；R3表示烷基；環(huán)丙基；環(huán)戊基；環(huán)己基；可被單取代、二取代、三取代或四取代的苯基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基；苯基烷基，其中苯基環(huán)可以被單取代、二取代、三取代或四取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基；可被單取代、二取代或三取代的吡啶基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；吡啶基烷基，其中吡啶基環(huán)可以被單取代、二取代或三取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；可被單取代或二取代的呋喃基，其中取代基獨立地選自甲基、羥基甲基、-CF3和鹵素；可被單取代或二取代的噻吩基，其中取代基獨立地選自甲基和氯；噻吩基-烷基；可被單取代或二取代的吡唑基，其中取代基獨立地選自甲基和鹵素；苯并噻吩基；苯并呋喃基；苯并咪唑基；苯并吡唑基；吲哚基；吲哚-烷基或嗎啉基-烷基；苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基；苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基-烷基，且R4表示氫或甲基。
式II化合物的一個優(yōu)選組中，
表示
R1表示乙基；丙基；2-甲基-丙基；3，3-二甲基丙基；環(huán)丙基或咪唑基；R3表示烷基；可被單取代、二取代、三取代或四取代的苯基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基；苯基烷基，其中苯基環(huán)可以被單取代、二取代、三取代或四取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基；可被單取代、二取代或三取代的吡啶基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；吡啶基烷基，其中吡啶基環(huán)可以被單取代、二取代或三取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；可被單取代或二取代的呋喃基，其中取代基獨立地選自甲基、羥基甲基、-CF3和鹵素；可被單取代或二取代的噻吩基，其中取代基獨立地選自甲基和氯；噻吩基-烷基；可被單取代或二取代的吡唑基，其中取代基獨立地選自甲基和鹵素；苯并噻吩基；苯并呋喃基；苯并咪唑基；苯并吡唑基；吲哚基；吲哚-烷基或嗎啉基-烷基；苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基；苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基-烷基，且R4表示氫或甲基。
式I化合物的另一個優(yōu)選的亞組為式III化合物 式III
其中 R1和
如上式I的定義，且 Y表示
或可被單取代、二取代、三取代或四取代的苯基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基，或下列自由基
或Y表示可被單取代、二取代或三取代的吡啶基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；可被單取代或二取代的呋喃基，其中取代基獨立地選自甲基、羥基甲基和溴；可被甲基或氯單取代的噻吩基；苯并噻吩基；苯并呋喃基；喹啉基；異喹啉基；苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯基；2，2-聯(lián)苯乙基；2-苯基丙基；1-[2，6，6-三甲基-環(huán)己-1-丙烯基]-甲基；3-甲基丁基；苯氧基，其中苯基環(huán)可以被單取代、二取代、三取代或四取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基-羰基和羧基；吡啶基氧基，其中吡啶基環(huán)可以被單取代、二取代或三取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；或下列自由基
R3、R4、R5和R6如上式I的定義。
特別的式III化合物中
如上式I的定義，優(yōu)選
R1表示乙基；丙基；2-甲基-丙基；3，3-二甲基丙基；環(huán)丙基或咪唑基；R3表示烷基；可被單取代、二取代、三取代或四取代的苯基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基；苯基烷基，其中苯基環(huán)可以被單取代、二取代、三取代或四取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基；可被單取代、二取代或三取代的吡啶基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；吡啶基烷基，其中吡啶基環(huán)可以被單取代、二取代或三取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；可被單取代或二取代的呋喃基，其中取代基獨立地選自甲基、羥基甲基、-CF3和鹵素；可被單取代或二取代的噻吩基，其中取代基獨立地選自甲基和氯；噻吩基-烷基；可被單取代或二取代的吡唑基，其中取代基獨立地選自甲基和鹵素；苯并噻吩基；苯并呋喃基；苯并咪唑基；苯并吡唑基；吲哚基；吲哚-烷基或嗎啉基-烷基；苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基；苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基-烷基，且R4表示氫或甲基。
式III化合物的一個優(yōu)選的組為其中定義如下的化合物
表示
R1表示2-甲基-丙基；3，3-二甲基丙基或環(huán)丙基；R3表示烷基；可被單取代、二取代、三取代或四取代的苯基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基；苯基烷基，其中苯基環(huán)可以被單取代、二取代、三取代或四取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基；可被單取代、二取代或三取代的吡啶基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；吡啶基烷基，其中吡啶基環(huán)可以被單取代、二取代或三取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；可被單取代或二取代的呋喃基，其中取代基獨立地選自甲基、羥基甲基、-CF3和鹵素；可被單取代或二取代的噻吩基，其中取代基獨立地選自甲基和氯；噻吩基-烷基；可被單取代或二取代的吡唑基，其中取代基獨立地選自甲基和鹵素；苯并噻吩基；苯并呋喃基；苯并咪唑基；苯并吡唑基；吲哚基；吲哚-烷基或嗎啉基-烷基；苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基；苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基-烷基，且R4表示氫或甲基。
式I化合物另一個優(yōu)選的亞組為式IV化合物 式IV
其中 R1和
如上式I的定義，且 Y表示
或可被單取代、二取代、三取代或四取代的苯基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基，或下列自由基
或Y表示可被單取代、二取代或三取代的吡啶基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；可被單取代或二取代的呋喃基，其中取代基獨立地選自甲基、羥基甲基和溴；可被甲基或氯單取代的噻吩基；苯并噻吩基；苯并呋喃基；喹啉基；異喹啉基；苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯基；2，2-聯(lián)苯乙基；2-苯基丙基；1-[2，6，6-三甲基-環(huán)己-1-丙烯基]-甲基；3-甲基丁基；苯氧基，其中苯基環(huán)可以被單取代、二取代、三取代或四取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基-羰基和羧基；吡啶基氧基，其中吡啶基環(huán)可以被單取代、二取代或三取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；或下列自由基
R3、R4、R5和R6如上式I的定義。
特別的式IV化合物中R1表示乙基；丙基；2-甲基-丙基；3，3-二甲基丙基；環(huán)丙基或咪唑基；R3表示烷基；可被單取代、二取代、三取代或四取代的苯基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基；苯基烷基，其中苯基環(huán)可以被單取代、二取代、三取代或四取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基；可被單取代、二取代或三取代的吡啶基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；吡啶基烷基，其中吡啶基環(huán)可以被單取代、二取代或三取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；可被單取代或二取代的呋喃基，其中取代基獨立地選自甲基、羥基甲基、-CF3和鹵素；可被單取代或二取代的噻吩基，其中取代基獨立地選自甲基和氯；噻吩基-烷基；可被單取代或二取代的吡唑基，其中取代基獨立地選自甲基和鹵素；苯并噻吩基；苯并呋喃基；苯并咪唑基；苯并吡唑基；吲哚基；吲哚-烷基或嗎啉基-烷基；苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基；苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基-烷基，且R4表示氫或甲基。
優(yōu)選的式IV化合物中，
表示
R1表示2-甲基-丙基；3，3-二甲基丙基、環(huán)丙基或咪唑基；R3表示烷基；可被單取代、二取代、三取代或四取代的苯基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基；苯基烷基，其中苯基環(huán)可以被單取代、二取代、三取代或四取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基；可被單取代、二取代或三取代的吡啶基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；吡啶基烷基，其中吡啶基環(huán)可以被單取代、二取代或三取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；可被單取代或二取代的呋喃基，其中取代基獨立地選自甲基、羥基甲基、-CF3和鹵素；可被單取代或二取代的噻吩基，其中取代基獨立地選自甲基和氯；噻吩基-烷基；可被單取代或二取代的吡唑基，其中取代基獨立地選自甲基和鹵素；苯并噻吩基；苯并呋喃基；苯并咪唑基；苯并吡唑基；吲哚基；吲哚-烷基或嗎啉基-烷基；苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基；苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基-烷基，且R4表示氫或甲基。
式I化合物另一個優(yōu)選的亞組為式V化合物 式V
其中 R1和
如上式I的定義，且 Y表示
或可被單取代、二取代、三取代或四取代的苯基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基，或下列自由基
或Y表示可被單取代、二取代或三取代的吡啶基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；可被單取代或二取代的呋喃基，其中取代基獨立地選自甲基、羥基甲基和溴；可被甲基或氯單取代的噻吩基；苯并噻吩基；苯并呋喃基；喹啉基；異喹啉基；苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯基；2，2-聯(lián)苯乙基；2-苯基丙基；1-[2，6，6-三甲基-環(huán)己-1-丙烯基]-甲基；3-甲基丁基；苯氧基，其中苯基環(huán)可以被單取代、二取代、三取代或四取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基-羰基和羧基；吡啶基氧基，其中吡啶基環(huán)可以被單取代、二取代或三取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；或下列自由基
R3、R4、R5和R6如上式I的定義。
在優(yōu)選的式V化合物中，
如上式I的定義，優(yōu)選
R1表示2-甲基-丙基；3，3-二甲基丙基、環(huán)丙基或咪唑基；R3表示烷基；可被單取代、二取代、三取代或四取代的苯基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基；苯基烷基，其中苯基環(huán)可以被單取代、二取代、三取代或四取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基；可被單取代、二取代或三取代的吡啶基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；吡啶基烷基，其中吡啶基環(huán)可以被單取代、二取代或三取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；可被單取代或二取代的呋喃基，其中取代基獨立地選自甲基、羥基甲基、-CF3和鹵素；可被單取代或二取代的噻吩基，其中取代基獨立地選自甲基和氯；噻吩基-烷基；可被單取代或二取代的吡唑基，其中取代基獨立地選自甲基和鹵素；苯并噻吩基；苯并呋喃基；苯并咪唑基；苯并吡唑基；吲哚基；吲哚-烷基或嗎啉基-烷基；苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基；苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基-烷基，且R4表示氫或甲基。
式I化合物另一個優(yōu)選的亞組為式VI 式VI
其中 Y、
R3、R4、R5和R6如上式I的定義， 且R2表示戊基或己基，優(yōu)選戊基。
優(yōu)選的式VI化合物中
表示
優(yōu)選的式VI化合物的另一個基中
表示
表示
R2表示戊基；且 Y表示
優(yōu)選的式VI化合物的另一個基中
表示
表示
R2表示戊基；且 Y表示
優(yōu)選的式VI化合物的另一個基中
表示
表示
R2表示戊基；且 Y表示
優(yōu)選的式VI化合物的另一個基中
表示
表示
R2表示戊基；且 Y表示可被單取代、二取代、三取代或四取代的苯基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基，或下列自由基
或Y表示可被單取代、二取代或三取代的吡啶基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；可被單取代或二取代的呋喃基，其中取代基獨立地選自甲基、羥基甲基和溴；可被甲基或氯單取代的噻吩基；苯并噻吩基；苯并呋喃基；喹啉基；異喹啉基；苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯基；2，2-聯(lián)苯乙基；2-苯基丙基；1-[2，6，6-三甲基-環(huán)己-1-丙烯基]-甲基；3-甲基丁基；苯氧基，其中苯基環(huán)可以被單取代、二取代、三取代或四取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基-羰基和羧基；吡啶基氧基，其中吡啶基環(huán)可以被單取代、二取代或三取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基。
優(yōu)選的式VI化合物的另一個基中
表示
表示
優(yōu)選
R2表示戊基；且 Y表示可被單取代、二取代、三取代或四取代的苯基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基；可被單取代、二取代或三取代的吡啶基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；可被甲基單取代或二取代的呋喃基；可被甲基單取代的噻吩基；苯并噻吩基；苯并呋喃基；喹啉基或異喹啉基。
優(yōu)選的式VI化合物的另一個基中
表示
表示
R2表示戊基；且 Y表示可被單取代、二取代、三取代或四取代的苯基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基；可被單取代、二取代或三取代的吡啶基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、烷氧基-羰基和羧基。
式I化合物另一個優(yōu)選的亞組為式VII化合物 式VII
其中Y表示
R3和R4如上式I的定義。
在式VII化合物的另一個優(yōu)選的亞組中，Y表示
在式VII化合物的另一個優(yōu)選的亞組中，Y表示
在式VII化合物的另一個優(yōu)選的亞組中，Y表示
在式VII化合物的另一個優(yōu)選的亞組中，Y表示
且R3如上式I的定義。
在特別優(yōu)選的式I化合物的另一個亞組中
表示
表示
Y表示
R3表示烷基；甲氧基-烷基；三氟甲基-烷基；環(huán)丙基；苯基烷基，其中苯基環(huán)可以被單取代或二取代，其中取代基獨立地選自烷基、烷氧基和鹵素；可被單取代、二取代或三取代的苯基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷氧基、-CF3、-OCF3、-CN、-COOH和烷氧基-羰基；苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基；苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基-烷基；可被單取代或二取代的吡啶基，其中取代基獨立地選自烷基、羥基和烷氧基；吡啶基烷基；可被單取代或二取代的呋喃基，其中取代基獨立地選自甲基、鹵素和-CF3；可被單取代或二取代的噻吩基，其中取代基獨立地選自甲基和鹵素；噻吩基-烷基；苯并噻吩基；苯并咪唑基；吲哚-烷基；或可被單取代或二取代的吡唑基，其中取代基獨立地選自甲基和鹵素；且R4表示氫或甲基。
在特別優(yōu)選的式I化合物的另一個亞組中
表示
表示
Y表示
且 R3表示硫代嗎啉基；可被單取代或二取代的哌啶基，其中取代基獨立地選自烷基、羥基-烷基和羥基；哌啶基-烷基；嗎啉基或1-哌嗪基，其4位的氮原子可以被烷基、苯甲基、吡啶基或苯基取代，其中苯基可以被單取代、二取代、三取代或四取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基。
在特別優(yōu)選的式I化合物的另一個亞組中 R1表示烷基；環(huán)丙基；環(huán)己烯基；可被烷氧基或羥基單取代的苯基；吡啶基；可被羥基-甲基單取代的呋喃基；噻吩基；吡咯基；噻唑基或咪唑基； n表示1、2或3；
表示
R2表示戊基或
如果
表示
Y表示
如果
表示
或者如果
表示
Y表示
或可被單取代或二取代的苯基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、羥基、氰基和羧基，或下列自由基
或者如果
如果
或者如果
如果
Y也可以表示下列自由基
R3表示烷基；環(huán)烷基；-CF3；CF3-烷基-；烷氧基-烷基；烷氧基-羰基；可被單取代、二取代或三取代的苯基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基；苯基烷基，優(yōu)選苯甲基或苯基乙基，其中苯基環(huán)可以被單取代或二取代，其中取代基獨立地選自烷基、鹵素、烷氧基、-CF3；苯氧基甲基；可被烷基或烷氧基單取代的吡啶基；吡啶基烷基，優(yōu)選吡啶基甲基；二取代的呋喃基，其中取代基獨立地選自甲基和-CF3；可被單取代或二取代的噻吩基，其中取代基獨立地選自鹵素；噻吩基-烷基；二取代的吡唑基，其中取代基獨立地選自甲基和鹵素；苯并噻吩基；苯并咪唑基；苯并吡唑基；吲哚-烷基或嗎啉基-烷基；苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基；苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基-烷基； R4表示氫或甲基； R5和R6表示烷基；苯基烷基，優(yōu)選苯甲基；或吡啶基；或R5和R6共同形成嗎啉基環(huán)；硫代嗎啉基環(huán)；哌啶基環(huán)；1-哌嗪基，其4位的氮原子可以被烷基、苯甲基、吡啶基取代；
表示
本發(fā)明還涉及式I～VII的化合物，其中定義式I～VII的一個或多個取代基和符號的含義，被本文定義的優(yōu)選的含義所替代，例如上述給出的優(yōu)選化合物的定義。
本發(fā)明優(yōu)選的化合物包括
本發(fā)明更加特別優(yōu)選的化合物有
式I的化合物能夠用于治療和/或預防要求抑制寄生蟲丁氨二酸蛋白酶(例如，尤其是天冬氨酸蛋白酶(plasmepsin)II和/或天冬氨酸蛋白酶(plasmepsin)IV)的疾病。特別地，式I的化合物能夠用于治療和/或預防原蟲的感染，特別是治療和/或預防瘧疾，尤其惡性瘧原蟲瘧疾。
在一個具體實例中，本發(fā)明涉及一種治療和/或預防本文提及的疾病(尤其是瘧疾)的方法，所述的方法包括以式I的化合物的藥學活性量對患者給藥。
本發(fā)明另一方面涉及包含式I化合物和藥學上可接受的載體原料的藥物組合物。該藥物組合物用于治療和/或預防上述疾病。該藥物組合物可以腸內、腸外或局部給藥。這些藥劑可以是例如以片劑、糖衣片、糖錠劑、硬膠囊或軟膠囊、溶液、乳液或懸浮液的形式經(jīng)口給藥的，例如以鼻內噴霧劑的形式經(jīng)鼻給藥的，例如以栓劑形式直腸給藥的，例如以注射溶液或浸劑溶液形式非腸道給藥的，或例如以膏劑、乳膏或油類形式局部給藥的。
本發(fā)明還涉及了式I化合物用于制備治療上述疾病的藥物組合物的用途。
采取任何本領域熟練的技術人員所熟知的方法進行藥物組合物的制備(參考Mark Gibson，Editor，Pharmaceutical Preformulation and Formulation，IHSHealth Group，Englewood，CO，USA，2001；Remington，The Science and PracticeofPharmacy，20th Edition，Philadelphia College of Pharmacy and Science)。這些藥物組合物可以包含式I化合物或它們的藥學上可接受的鹽與制藥工業(yè)中常見的無機和/或有機賦形劑，例如乳糖、玉米或其衍生物、滑石、硬脂酸或這些材料的鹽的組合。
對于膠囊劑而言，可以使用植物油、蠟、脂肪、液體或半液體多元醇等。對于溶液和糖漿制劑而言，使用例如水、多元醇、蔗糖、葡萄糖等。使用例如水、多元醇、乙醇、甘油、植物油、卵磷脂、脂質體等制備注射劑。使用天然或氫化油、蠟、脂肪酸(脂肪)、液體或半液體多元醇等等制備栓劑。
該組合物另外還可包含防腐劑、穩(wěn)定性改性劑、粘度改善劑或調節(jié)劑、溶解度改善劑、甜味劑、染料、味道改善劑、用于改變該滲透壓的鹽、緩沖劑、抗氧化劑等。
式I的化合物或上述藥物組合物還可以與其他一個或多個治療有效的物質結合使用，例如與其他的抗瘧藥，像奎寧、氯奎、氨酚喹、甲氟喹、伯氨喹、他非諾喹、青蒿素和青蒿素衍生物，如蒿甲醚、青蒿乙醚或青蒿琥酯，乙胺嘧啶-磺胺多辛(泛西達)，米帕林，鹵泛曲林，羅苦亞呢，chloroproguanil，苯芴醇，咯萘啶，阿托喹酮等，和/或抗菌素，像利福平，強力霉素，氯林可霉素或阿奇霉素等。
式I化合物可以根據(jù)具體的情況在很大范圍內調整劑量。通常，對體重約70kg的成年人而言，日劑量應在大約3mg～大約3g的范圍內，優(yōu)選大約10mg～大約1g，特別優(yōu)選大約5mg～大約300mg。該劑量優(yōu)選應該是每天等量服用1～3劑。通常，兒童應當接受適應于他們的體重和年齡的較低劑量。
本發(fā)明還涉及式I化合物的前藥，其可以在體內轉化成式I化合物本身。因此，任何涉及式I化合物均酌情并適當?shù)睦斫鉃檫€涉及式I化合物相應的前藥。
本發(fā)明的式I化合物可以根據(jù)下列流程1～10的反應順序進行制備(為簡潔起見，僅僅對生成式I～VII化合物的合成的可能的部分進行了描述)。根據(jù)式I化合物的不同結構等級配置流程。全部的化學變化可以根據(jù)文獻描述的著名的標準方法或某些具體實例描述的制備方法進行。
流程5制備5-戊基-吡啶基-2-羧酸
a)C5H11MgBr，ZnCl2，Pd(PPh3)4，THF，rt，12h，36％；b)MeOH，2M NaOH，rt，3h，86％ 流程6
實施例166實施例192 a)i)68.MeOH.rflx.4h.ii)NaBH4.rt.15min.92％b)67.DCM.DIPEA.TBTU rt 90min86％；c)TFA，DCM，0℃，2h，quant.；d)異戊醛Na(OAc)3BH，CH3CN，rt，16h，quant.；e)73，甲苯，i-PrOH，2M K2CO3，Pd(PPh3)4，85℃，2h，66％；f)75，SK-CC02-A，NaOtBu，二氧己環(huán)110℃，1h，58％. 流程7
實施例223 a)67，DCM，DIPEA，TBTU，rt，90min，85％；b)TFA，DCM，0℃，2h，quant；c)異戊醛Na(OAc)3BH CH3CN rt 16h quantd)2M LiOH，MeOH，rt，6h，89％；e)2，6-二氟-苯甲基胺TBTU，DIPEA，CH3CN，rt，8h，50％. 流程8
實施例194 a)67，DCM，DIPEA，TBTU，rt，90min，84％；b)TFA，DCM，0℃，2h，quant.；c)異戊醛Na(OAc)3BH，CH3CN，rt，16h，quant.；d)H2N-OH x HCl，NaHCO3，EtOH，rflx，16h，45％；e)86，TBTU，HOBt，DIPEA，DMF，rt 12h然后90℃1h，45％. 流程9
a)異戊醛，Na(OAc)3BH，CH3CN，rt，16h，91％；b)4M HCl in二氧己環(huán)DCM，0℃，90min，82％；c)i)91，MeOH，TEA，rflx，8h，ii)NaBH4，0℃，15min，96％；d)4，CH3CN，DIPEA，rt，12h，75％ 流程10
實施例229 a)PyBOP，DlPEA，DMF，氯化銨rt，2h，quant；b)Lawesson′s試劑，THF，0℃to rt，12h，50％；c)i)KHCO3，DME，rt，15min，ii)3-溴-1，1，1-三氟丙酮rt，30min，iii)2，6-二甲基吡啶，TFAA，0℃，90min，62％ 流程1～10的注解 Boc-4-胺基哌啶(1)可以從Neosystems購得。
根據(jù)Mueller，R.等Molecules，2003，8，556-564的描述，使用氫化硼鈉作為還原劑的還原胺化，以及使用酰基氯的?；饔?。
通常在室溫下，在4M HCl溶于二氧己環(huán)中攪拌化合物1小時，隨后蒸干完成Boc-脫保護[T.W.Greene，P.G.M.Wuts，Protective groups in organicsynthesis，Wiley-Interscience，1991；P.J.Kocienski，Protecting Groups，Thieme，1994；Mueller，R.等Molecules，2003，8，556-564]。
如Mueller，R.等Molecules，2003，8，556-564；Abdel-Magid，A.F.等J.Org.Chem.，1996，61，3849-3862的描述，使用三乙酰氧基氫硼化鈉還原胺化。
磺酰氯的?；饔门c酰基氯的?；饔孟嗨?。
借助于冷凝劑(該試劑實例在Novabiochem 2004/05 Catalog，p.353-373給出，根據(jù)在此引用的各自試劑的參考方法)使得羧酸與胺冷凝。
根據(jù)流程1實施例2的詳細合成步驟，芳香硝基還原成苯胺官能團。
根據(jù)B.Chen等J.Org.Chem.，2003，68，4195-4205；J.H.Chan等，J.Med.Chem.，2004，47，1175-1182；F.A.David等，Org.Lett.，2003，5，3856-3857描述的方法，進行合成酮的Weinreb酰胺化學反應。
根據(jù)F.I.Carroll等J.Med.Chem.，2004，47，296-302；J.R.Malpass等J.Org.Chem.，2004，69，5328-5334；J.M.Malpass等，J.Org.Chem.，2003，68，9348-9355描述的方法，以羧酸酯為原料合成異噁唑。
根據(jù)下列文獻給出的方法，以腈為原料合成噁二唑A.Hamze等J.Org.Chem.，2003，68，7316-7321；E.Meyer等Synthesis，2003，899-905；Y.Huang等Bioorg.Med.Chem.，2001，9，3113-3122；G.-D.Zhu等J.Med.Chem.，2001，44，3469-3487。
根據(jù)類似B.Jaun等，LiebigsAnn./Recueil，1997，1697-1710描述的方法進行Esterhydrolysis。
根據(jù)S.Thorand等，J.Org.Chem.，1998，63，8551-8553；D.Trachsel，Helv.Chim.Acta，2003，86，2754-2759；G.Reginato等，J.Org.Chem.，1997，62，6187-6192；J.Dogan等，Heterocycles，1995，41，1659-1666；C.Dhih等，J.Med.Chem.，1992，35，1109-1116；U.Dahlmann等，Helv.Chim.Acta，1996，79，755-766；J.J.Song等，J.Org.Chem.，2001，66，605-608描述的方法進行sonogashira偶聯(lián)。
在乙醇中，以10％Pd-C作為催化劑，在2～5bar氫壓下反應2～6小時三鍵還原為單鍵。
根據(jù)C.Boss等，Curr.Med.Chem.，2003，10，886-907和引用[57]描述的方法，Suzuki偶聯(lián)成聯(lián)芳系。
芳基胺化反應通常在惰性氣體中(氬氣或N2氣體)用適當?shù)拇呋瘎┻M行，像SK-CC01-A或SK-CC02-A[可從Solvias AG或eventually Fluka購得，且特定用于芳基胺化，參閱Anita Schnyder等，Angew.Chem.Int.Ed.，2003，41，3668-3671；Ricci，A.(Editor)；Modern Amination Methods；Wiley-VCH，Germany，2000，特別是第7章，pp195-262和該處的引用]。
以2，5-二氯吡啶為原料，通過Solvias AG，Basel經(jīng)由Heterocycles，1999，51，11，p2589描述的方法制備5-氯-2-乙酯基-吡啶(65)。根據(jù)如WO03/093267描述的方法進行Negishi反應引入C5鏈。
根據(jù)Liebigs Ann./Recueil，1997，1697-1710描述的方法進行酯水解。
根據(jù)Tetrahedron，1997，53，8149-8154；Tetrahedron Lett.，1995，36，5057-5060，Angew.Chem.Int.Ed.Engl.，1996，35，1503-1506，and Synth.Commun.，1990，20，2235-2249描述的方法合成噻唑(見流程10)。
下列實施例用于解釋本發(fā)明但并非限制其范圍。所有給出的溫度的單位℃。
縮寫(本文使用的) aq. 含水 Boc或boc叔丁氧羰基 BSA 牛血清清蛋白 BuLi正丁基鋰 conc. 濃縮物 DCM 二氯甲烷 DIPEA 二異丙基乙胺(Hünigs堿) DME1，2-二甲氧基乙烷 DMF二甲基甲酰胺 DMSO 二甲亞砜 EDCN-(3-二甲氨基丙基)-N′-乙基碳二亞胺 ELSD 蒸發(fā)光散射檢測器 eq.當量 Et 乙基 EtOAc 乙酸乙酯 Ex.例如 h 小時 HOBt N-羥基苯并三唑單水合物 HPLC 高壓液相色譜 HV 高真空 i-Pr 異丙基 i-PrOH 異丙醇 LC-MS 液相色譜質譜聯(lián)用儀 MeOH 甲醇 min分鐘 N2 作為保護氣體/惰性氣氛的氮氣 NEt3 三乙胺 NMMN-甲基嗎啉 PBS磷酸鹽緩沖鹽水 Ph 苯基 PM plasmepsin(瘧原蟲天冬氨酸蛋白酶) PyBOP 六氟磷酸苯并三唑-1-基-氧基三吡咯烷基磷 quant. 定量的 rflx 回流 rt 室溫 (s) 固體 sat.飽和的 SK-CC02 氯(二-2-降冰片基膦基)(2-二甲基-胺-甲基二-A 茂鐵-1-基)鈀(III) Subst 取代基 TBTU2-(1H-苯并三唑-1-基)1，1，3，3-四甲基脲 四氟硼酸酯 t-Bu叔丁基 TEA 三乙胺 TFA 三氟乙酸 TFAA三氟乙酸酐 THF 四氫呋喃 TLC 薄層色譜法 Tol 甲苯 tR 保持時間(分鐘) UV 紫外線 wt％重量百分數(shù) 一般步驟和實施例 所有溶劑經(jīng)分子篩后儲備。所有試劑從市售購得無需進一步純化即可使用。
所有化合物通過1H-NMR(300MHz)并偶爾通過13C-NMR(75MHz)(Varian Oxford，300MHz；)，通過LC-MS(Finnigan AQA/HP 1100；色譜柱Develosil C30含水，50×4.6mm，5μm，梯度5-95％乙腈溶于水，1min，含0.03％TFA，流速4.5ml/min)，通過TLC(購自Merck的TLC板，硅膠60F254)進行表征。
制備HPLC-系統(tǒng)色譜柱Zorbax SB-AQ 5mM，21.2×50mm；流速40ml/min；梯度10-95％乙腈溶于水，3.5min，含0.5％甲酸；通過UV/ELSD檢測。
a)一般步驟 還原胺化的一般步驟A) 胺和醛(0.97eq.)(作為起始原料，為已知的化合物)在無水MeOH中混合并在回流下攪拌4小時。將反應混合物冷卻至室溫，隨后加入氫化硼鈉(1.5eq.)。繼續(xù)攪拌15分鐘。小心加入少量的水，并在減壓下除去甲醇。加入水，并用EtOAc萃取殘渣3次。用鹽水洗滌結合的有機層，在硫酸鈉上干燥、過濾并蒸發(fā)溶劑。通常得到高純度的第二胺，且無需純化即可用于下一步反應。如果有必要進行純化，可以進行硅膠與溶劑混合物層析純化，如DCM/MeOH＝9/1，或者HPLC純化。
酰化的一般步驟B) 向胺的無水EtOAc(或乙腈、DCM)溶液中加入堿，如NEt3(或DIPEA、NMM)，隨后加入羧酸氯化物(1.2eq.)。在室溫下攪拌反應混合物2～14小時，隨后進行標準水溶液處理并進行純化，通過在硅膠上和適當?shù)娜軇┗旌衔?通常EtOAc/己烷)層析純化，或者通過HPLC得到中間體酰胺。
以相應的羧酸為原料，根據(jù)文獻(即Devos，A.，Rémion，J.，F(xiàn)risque-Hesbain，A.-M.，Colens，A.，Ghosez，L.，J.Chem.Soc.，Chem.Commun.1979，1180)的描述原地得到羧酸氯化物{R1-(CO)-Cl}。
Boc-脫保護的一般步驟C) 在室溫下，將Boc-保護的中間體溶于二氧己環(huán)，隨后加入溶有4M HCl的二氧己環(huán)(可從Aldrich購得)。繼續(xù)攪拌1～2小時。蒸干該反應混合物。如果是高度感光性的中間體，將Boc-保護的化合物溶于DCM，隨后在室溫下加入TFA。通常繼續(xù)攪拌3～4小時，隨后蒸干[Kocienski，P.J.，ProtectingGroups，Thieme Verlag Stuttgart，1994；Greene，T.W.，Wuts，P.G.M.，ProtectiveGroups in Organic Synthesis，Wiley-Interscience，2ndEdition，1991]。
二次還原胺化的一般步驟D) 胺和醛(1.5eq.)在無水二氯甲烷(或THF、乙腈)中混合，并加入三乙酰氧基硼氫化鈉(1.3eq.)。攪拌溶液48小時后，加入甲醇，并用步驟A)描述的相同方法處理反應混合物。
芳基/雜芳基胺化反應的一般步驟E) [也可以參考Ricci，A.(Editor)，Modern Amination Methods，Wiley-VCH，Germany，2000，特別是第7章，pp195-262及其引用文獻] 在干燥的反應燒瓶中，甲苯用N2排氣30分鐘。加入芳基鹵化物或雜芳基鹵化物、胺和叔丁氧鈉。在100℃加熱混合物到30分鐘，隨后加入適當?shù)膽腋∮诩妆街械拟Z催化劑[例如SK-CC01A或SK-CC02-A，購自Solvias AG；M.Thommen等，sp2，2003年9月，p32-35以及該處的引用]。在10℃下繼續(xù)攪拌2～8小時，隨后通過預備的TLC或HPLC標準含水處理并純化該化合物。
全部化學變化可以根據(jù)文獻描述的熟知的標準方法，或上述一般步驟的描述，或根據(jù)如下制備實施例2、實施例70、實施例127、實施例144、實施例166、實施例192、實施例194、實施例220、實施例223、實施例231和某些前體的詳細說明的步驟得到。實施例所描述的全部化合物可以由本領域熟練的技術人員根據(jù)所描述的步驟和文獻步驟適當結合，并選擇適當?shù)钠鹗荚嫌袡C合成制得。
N-[1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基]-4-戊基-N-(4-(2，3-二氟-4-甲基-苯甲酰)-胺基-苯甲基)-苯甲酰胺的合成(實施例2)
a)i)2，MeOH，NEt3，回流，21小時ii)NaBH4，室溫，6小時，98％；b)4，DIPEA，CH2Cl2，室溫，12小時，98％；c)CF3COOH，CH2Cl2，室溫，12小時，定量d)7，Na(OAc)3BH，CH3CN，室溫，12小時，87％；e)H2/Pd-C，EtOAc，室溫，12小時，88％；f)10，DIPEA，CH2Cl2，室溫，12小時，80％。
4-(4-硝基-苯甲基胺基)-哌啶-1-羧酸叔丁酯(3)4-胺-N-Boc-哌啶鹽酸鹽(1)(5.0g，21.12mmol)、4-硝基苯甲醛(2)(3.19g，21.12mmol)和三乙胺(2.9ml，21.12mmol)的溶液在甲醇(100ml)中回流21小時，隨后在室溫下加入氫化硼鈉(1.28g，33.79mmol)。繼續(xù)攪拌6小時。向反應混合物中加入飽和的碳酸氫鈉溶液，并用乙酸乙酯(3次，100ml)萃取產(chǎn)物。用鹽水洗滌結合的有機層，在硫酸鎂上干燥、過濾并在減壓下濃縮得到7.2g(98％)橙色油狀的3。
4-[(4-硝基苯甲基)-(4-戊基-苯甲酰)-胺]-哌啶-1-羧酸叔丁酯(5)將化合物3(7.65g，22.81mmol)溶于二氯甲烷(530ml)，隨后加入Hünigs堿(DIPEA，8.84g，68.43mmol)并緩慢加入4-戊基苯甲酰氯(4)(4.81g；22.81mmol)。該反應混合物在室溫下攪拌12小時，并倒入飽和的碳酸氫鈉溶液上，有機層分離，用鹽水洗滌、在硫酸鎂上干燥、過濾并在減壓下濃縮得到12g(98％)橙色玻璃質的固體5。
N-(4-硝基-苯甲基)-4-戊基-N-哌啶-4-基-苯甲酰胺(6)將化合物5(12.09g，23.72mmol)溶于二氯甲烷(270ml)，并加入三氟乙酸(27g，237.2mmol)。繼續(xù)攪拌12小時。該反應混合物在真空中濃縮，產(chǎn)物使用層析純化(硅膠，二氯甲烷/甲醇＝7/1)純化得到10g(定量的)黃色泡沫的6。
N-[1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基]-N-(4-硝基-苯甲基)-4-戊基-苯甲酰胺(8)將化合物6(10g，24.8mmol)溶于乙腈(120ml)，隨后加入異戊醛(7)(2.57g，29.83mmol)和三乙酰氧基硼氫化鈉(8.43g，39.78mmol)。在室溫下攪拌反應混合物12小時。加入200ml水，并用二氯甲烷(3次，100ml)萃取產(chǎn)物。用鹽水洗滌結合的有機層，在硫酸鎂上干燥、過濾并在減壓下濃縮。產(chǎn)物使用層析純化(硅膠，二氯甲烷/甲醇＝95/5)純化得到10.34g(87％)橙色粉末的8。
N-(4-胺基-苯甲基)-N-[1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基]-4-戊基-苯甲酰胺(9)將化合物8(5g，10.42mmol)溶于乙酸乙酯(170ml)，并加入Pd/C(1.87g，10％含50wt％水)。將反應混合物置于氫壓下，并在室溫下用力攪拌12小時，隨后在硅藻土上過濾并在減壓下濃縮。產(chǎn)物使用層析純化(硅膠，二氯甲烷/甲醇＝9.25/0.75)純化得到4.1g(88％)微棕色固體的9。
N-[1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基]-4-戊基-N-(4-(2，3-二氟-4-甲基-苯甲酰)-胺基-苯甲基)-苯甲酰胺(11)下列反應在平行化學裝置中進行將化合物9(50mg，0.111mmol)溶于二氯甲烷(2ml)，隨后加入Hünigs堿(DIPEA，43mg，0.333mmol)和酰基氯10(2，3-二氟-4-甲基-苯甲酰氯，21.2mg，0.111mmol)。在室溫下振蕩反應混合物12小時。蒸發(fā)溶劑并將殘渣溶于乙腈/甲酸＝1/1(1ml)，用制備性HPLC純化得到35mg(52％)的白色固體11。
由并聯(lián)化學工藝制備的所有最終化合物通過LC-MS 5％分析。庫化合物通過1H-NMR分析。該前體通過LC-MS，1H-NMR并偶爾用13C-NMR分析。
N-[1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基]-4-戊基-N-[4-(5-苯基-[1，2，4]噁二唑-3-基)-苯甲基]-苯甲酰胺的合成(實施例127)
e)19，NaHCO3，EtOH，90℃，2h，90％；t)i)21，DMF，TBTU，HOBt，DIPEA，rt，12h，ii)110℃，4h，30-70％. 根據(jù)制備實施例2的合成步驟所描述的方法制備化合物18。
N-[4-(N-羥基脒基)-苯甲基]-N-[1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基]-4-戊基-苯甲酰胺(20)將化合物18(9g，19.58mmol)溶于乙醇(40ml)，隨后加入鹽酸羥胺(1.5g，21.6mmol)和碳酸氫鈉(1.81g，21.6mmol)。反應混合物加熱回流1小時。在減壓下除去乙醇。將殘渣倒入水(100ml)中并用乙酸乙酯(3×60ml)萃取。在硫酸鎂上干燥結合的有機層，過濾并蒸發(fā)得到產(chǎn)物20(5.8g，60％)，其無需進一步純化即可用于隨后的平行化學反應。
N-[1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基]-4-戊基-N-[4-(5-苯基-[1，2，4]噁二唑-3-基)-苯甲基]-苯甲酰胺(22)將苯甲酸(21，24.4mg，0.2mmol)溶于DMF(1ml)，并加入TBTU(64.2mg，0.2mmol)，HOBt(5.4mg，0.04mmol)和DIPEA(129mg，1mmol)。攪拌反應混合物5分鐘，隨后加入溶有化合物20(98.5mg，0.2mmol)的DMF(3ml)。繼續(xù)攪拌14小時。在110℃下加熱反應混合物4小時，然后倒入冰/水(20ml)上。用乙酸乙酯萃取產(chǎn)物(3×15ml)。用鹽水洗滌結合的有機層，在硫酸鎂上干燥、過濾并在減壓下蒸發(fā)溶劑。通過制備性HPLC純化殘渣得到化合物22(13mg，11％)。
合成N-[1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基]-N-[4-(3-甲基-異噁唑-5-基)-苯甲基]-4-戊基-苯甲酰胺(實施例144)
e)i)28，BuLi，THF，0℃to rt，2h，ii)加入27在THF，0℃ to rt，12h iii)conc. H2SO4，25-40％； 化合物27(4-{[[1-[1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基]-(4-戊基-苯甲酰)-胺]-甲基}-苯甲酸甲酯)可根據(jù)上述步驟制備，并作為化合物29和類似衍生物在平行化學裝置的起始原料。
N-[1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基]-N-[4-(3-甲基-異噁唑-5-基)-苯甲基]-4-戊基-苯甲酰胺(29)將丙酮肟(28，44mg，0.6mmol)溶于THF(1.2ml)并冷卻至0℃。加入BuLi(0.83ml的1.6M己烷溶液)，并將反應混合物升溫至室溫1小時，然后在0℃下加入化合物27(98.5mg，0.2mmol)的THF(2ml)溶液。在室溫下攪拌反應混合物14小時，隨后緩慢加入濃硫酸(0.08ml)并繼續(xù)攪拌15分鐘。然后將混合物倒入飽和的碳酸鈉溶液(4ml)，用乙酸乙酯萃取產(chǎn)物(3×4ml)。在硫酸鎂上干燥結合的有機層、過濾并蒸發(fā)溶劑。通過制備性HPLC純化殘渣得到化合物29(15.4mg，15％)。
N-(4-環(huán)戊烷羰基-苯甲基)-N-[1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基]-4-戊基-苯甲酰胺的合成(實施例70)
(實施例70) b)33，BuLi，THF，-78℃，83％；c)35，Et2O，-78℃to rt，12h，30-50％. 根據(jù)上述步驟制備前體27。
將化合物34N，O-二甲基羥基鹽酸胺(4.03g，41.28mmol)溶于THF67ml，并冷卻至-78℃，隨后加入BuLi(51.5ml的1.6M己烷溶液，82.53mmol)。無需冷卻攪拌反應混合物15分鐘，然后再次冷卻至-78℃，隨后加入27(2.26g，4.59mmol)的THF(25ml)溶液。所得反應混合物在-78℃下再次攪拌90分鐘，然后在該溫度下加入飽和的氯化銨溶液(250ml)猝滅反應。然后用乙酸乙酯(3×100ml)萃取產(chǎn)物。在硫酸鎂上干燥結合的有機層、過濾并在減壓下蒸發(fā)溶劑。通過層析純化法(硅膠；DCM/MeOH＝9.25/0.75)純化粗制殘渣得到黃色油狀的中間體34(4.0g，83％)。
N-(4-環(huán)戊烷羰基-苯甲基)-N-[1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基]-4-戊基-苯甲酰胺(36，實施例70)實施例70在平行化學裝置中制備。將中間體34(50mg，0.096mmol)溶于二乙醚(0.5ml)并冷卻至-78℃，隨后加入環(huán)戊基溴化鎂(35，過量)。在-78℃下繼續(xù)攪拌30分鐘。然后將反應混合物升溫至室溫，并繼續(xù)攪拌12小時，加入甲醇(1ml)，過濾混合物除去沉淀。在減壓下蒸發(fā)溶劑，通過制備性HPLC純化殘渣得到化合物36(14mg，27％)。
5-戊基-噻吩-2-羧酸(45)的合成
d)i)44，BuLi，Et2O，0℃to 35℃，1.5h ii)CO2(s)，0℃，30min； 在氮氣壓下將BuLi(1.6M溶于己烷，20.3ml，32.41mmol)冷卻至0℃。緩慢加入2-戊基噻吩(44)(5.0g，32.41mmol)的二乙醚(9.5ml)溶液并繼續(xù)攪拌20分鐘。反應混合物回流1小時并再次冷卻至0℃。在0℃下，將反應混合物倒入固體CO2和在二乙醚的混合物中，并繼續(xù)攪拌30分鐘，隨后加入水并再次攪拌1小時。加入濃HCl調節(jié)pH為2。用乙酸乙酯(3×60ml)萃取產(chǎn)物。在硫酸鎂上干燥結合的有機層、過濾并在減壓下蒸發(fā)溶劑。通過層析純化法(硅膠，庚烷/乙酸乙酯＝1/1)純化殘渣得到化合物45(4.99g，88％)。
4-[(4′-甲氧羰基-聯(lián)苯-4-基甲基)-(5-戊基-噻吩-2-羰基)-胺]-哌啶-1-羧酸叔丁酯(46)的合成 (表示胺與雜芳基羧酸?；饔玫囊话悴襟E)
e)i)45，(COCl)2，CH2Cl2，0℃，2h，ii)43，DIPEA，CH2Cl2，rt，12h，98％； 將化合物43(1.87g，9.422mmol)溶于二乙醚(50ml)并冷卻至0℃，隨后加入草酰氯(5.02ml，59.36mmol)和5滴DMF。在0℃下攪拌反應混合物3小時。在室溫下，在減壓下蒸發(fā)溶劑，加入CCl4(20ml)并在減壓下再次蒸發(fā)。該步驟重復3次充分除去草酰氯。將殘渣溶于DCM(50ml)隨后加入DIPEA(4.84ml，28.26mmol)和化合物45(4.0g，9.42mmol)。在室溫下攪拌反應混合物12小時，然后倒入2M HCl/DCM混合物中。分離有機層，用DCM(2x)萃取水相，用飽和的碳酸氫鈉溶液和鹽水洗滌結合的有機層，在硫酸鎂上干燥、過濾并在減壓下除去溶劑。通過層析純化法(硅膠，DCM/甲醇＝9.75/0.25)純化殘渣得到化合物46(5.78g，定量)。
4-[(4′-甲氧羰基-聯(lián)苯-4-基甲基)-(4-戊基-噻吩-2-羰基)-胺]-哌啶-1-羧酸叔丁酯(51)的合成 (表示雜芳基溴化物Sonogashira反應的一般方法，并隨后將三鍵還原為單鍵)
g)49，HN(i-Pr)2，PdCl2CN2，PPh3，Cul，rflx，4h，92％；h)1atm H2/Pd-C，MeOH，rt，12h，99％. 將化合物48(4.38g，7.14mmol)溶于二異丙胺(12ml)。加入二氯-雙-(苯氰)鈀(1.1g，2.86mmol)、三苯基膦(1.5g，2.86mmol)和碘化亞銅(0.544g，2.86mmol)，用氮氣排氣混合物10分鐘，然后加入戊炔(49)(1.4ml，14.277mmol)。反應混合物回流4小時，然后蒸干。通過層析純化法(硅膠，乙酸乙酯/庚烷＝3/7)純化殘渣得到化合物50(3.96g，92％)。
將化合物50(2.04g，3.4mmol)溶于甲醇(40ml)并置于氮氣壓中。加入催化劑Pd-C(10％負載在炭上，0.361g)，在室溫下，在氫壓下(1大氣壓)攪拌反應混合物40小時?；旌衔锿ㄟ^硅藻土過濾，在減壓下蒸發(fā)溶劑，通過層析純化法(硅膠，乙酸乙酯/庚烷＝4/6)純化殘渣得到化合物51(1.69g，83％)。
以適當?shù)钠鹗荚希凑障嗤姆磻襟E制備前體55。
5-戊基-吡啶-2-羧酸(67)的合成
化合物66在室溫下，向戊基溴化鎂溶液(1M溶于THF，64.6ml，64.6mmol)中加入氯化鋅溶液(1M溶于THF，70.5ml，70.5mmol)，并繼續(xù)攪拌15分鐘，隨后加入雙三苯基磷二氯化鈀(II)(1.32g，1.84mmol)和5-氯基-吡啶-2-羧酸乙酯(6g，32.3mmol)。并在室溫下繼續(xù)攪拌一整夜。加入鹽酸(1M水溶液)pH＝4。用DCM(3×220ml)萃取產(chǎn)物。在硫酸鎂上干燥結合的有機層、過濾并在減壓下蒸發(fā)溶劑。通過柱色譜法(硅膠，庚烷/EtOAc＝3/1)純化殘渣得到2.02g(28％)5-戊基-吡啶-2-羧酸乙酯(66)。
LC-MStR＝0.95min；[M+H]+＝222.25。
化合物67將乙酯(66)(7.37g，33.3mmol)溶于MeOH(150ml)，隨后加入NaOH水溶液(2M，53ml，106mmol)。在室溫下攪拌反應混合物2.5小時，并在減壓下濃縮。向含水殘渣中加入EtOAc(80ml)，隨后用NaOH(10％，2×80ml)萃取。通過加入鹽酸(1M水溶液)酸化結合的水層pH＝5。用EtOAc(2×250ml)萃取產(chǎn)物。在硫酸鎂上干燥結合的有機層、過濾并在減壓下濃縮得到5.53g(85％)5-戊基-吡啶-2-羧酸(67)。LC-MStR＝0.66min；[M+H]+＝194.16。
4-(4-溴-苯甲基胺)-哌啶-1-羧酸叔丁酯(69)的合成
根據(jù)一般步驟A)以4-溴基苯甲醛(68)(3.9g，0.021mol)和1-Boc-4-胺-哌啶(5g，0.021mol)為原料得到7.23g(92％)4-(4-溴-苯甲基胺)-哌啶-1-羧酸叔丁酯(69)。LC-MStR＝0.78min；[M+H]+＝370.28。
4-[(4-溴-苯甲基)-(5-戊基-吡啶-2-羰基)-胺]-哌啶-1-羧酸叔丁酯(70)的合成
將羧酸67(575mg，2.97mmol)溶于DCM(45ml)，隨后加入TBTU(956mg，2.98mmol)和DIPEA(1.05g，8.12mmol)。在室溫下繼續(xù)攪拌5分鐘，隨后加入胺69(1g，2.7mmol)。在室溫下繼續(xù)攪拌90分鐘。在減壓下除去有機溶劑，并加入水(60ml)隨后用EtOAc(3×60ml)萃取。用鹽水(2×70ml)洗滌結合的有機層，在硫酸鎂上干燥、過濾并在減壓下濃縮。通過柱色譜法(硅膠，EtOAc/庚烷＝1/1)純化殘渣得到1.27g(86％)4-[(4-溴-苯甲基)-(5-戊基-吡啶-2-羰基)-胺]-哌啶-1-羧酸叔丁酯(70)。LC-MStR＝1.13min；[M+H]+＝544.44。
5-戊基-吡啶-2-羧酸(4-溴-苯甲基)-哌啶-4-基-酰胺三氟醋酸鹽(71)的合成
將化合物70(1.27g，2.33mmol)溶于DCM(20ml)并冷卻至0℃，隨后緩慢加入TFA(3.9g，34.9mmol)。在0℃下攪拌反應混合物2小時，并在室溫下攪拌1小時。在減壓下除去溶劑，在高真空中干燥產(chǎn)物得到1.29g(定量的產(chǎn)量)5-戊基-吡啶-2-羧酸(4-溴-苯甲基)-哌啶-4-基-酰胺三氟醋酸鹽(71)。LC-MStR＝0.84min；[M+H]+＝446.35。
5-戊基-吡啶-2-羧酸(4-溴-苯甲基)-[1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基]-酰胺(72)的合成
根據(jù)一般步驟D)將化合物71(1.03g，2.33mmol)轉換成5-戊基-吡啶-2-羧酸(4-溴-苯甲基)-[1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基]-酰胺(72)(1.2g；定量的產(chǎn)量)。LC-MStR＝0.96min；[M+H]+＝516.48。
5-戊基-吡啶-2-羧酸(3′-甲基-聯(lián)苯-4-基甲基)-[1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基]-酰胺(74)的合成
實施例166 將芳基溴72(100mg，0.194mmol)溶于異丙醇/甲苯(1/1，2ml)的混合物中，隨后加入碳酸鉀水溶液(2M，0.5ml)和硼酸73(31mg，0.21mmol)。該混合物用氬氣排氣5分鐘，然后加熱至85℃，并加入四-三苯基膦鈀(6.7mg，0.006mmol)。繼續(xù)加熱2小時，隨后冷卻至室溫，并加入水(2ml)，用EtOAc(3×1.5ml)萃取。在硫酸鎂上干燥結合的有機層，在減壓下濃縮，并通過制備性HPLC純化殘渣得到62.2g(61％)5-戊基-吡啶-2-羧酸(3′-甲基-聯(lián)苯-4-基甲基)-[1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基]-酰胺(74，實施例166)。LC-MStR＝0.98min；[M+H]+＝526.24。
根據(jù)該步驟制備實施例165～183。
5-戊基-吡啶-2-羧酸[1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基]-[4-(3，4，5，6-四氫-2H-[4，4′]聯(lián)吡啶基-1-基)-苯甲基]-酰胺(76)的合成
將芳基溴72(45mg，0.087mmol)溶于二氧己環(huán)(1ml)，隨后加入叔丁氧鈉(12mg，0.122mmol)和哌嗪衍生物75(17.66mg，0.105mmol)。該混合物用氬氣排氣并加熱至110℃，隨后加入催化劑SK-CC02-A(1mg，0.002mol)。在110℃下攪拌混合物30分鐘，冷卻至室溫，加入水(2ml)隨后用EtOAc(3×1ml)萃取，在硫酸鎂上干燥結合的有機層，過濾、并在減壓下濃縮。通過制備性HPLC純化殘渣得到27mg(52％)5-戊基-吡啶-2-羧酸[1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基]-[4-(3，4，5，6-四氫-2H-[4，4′]聯(lián)吡啶基-1-基)-苯甲基]-酰胺(76，實施例192)。LC-MStR＝0.76min；[M+H]+＝597.28。
根據(jù)該步驟制備實施例184～193。
4-[(4-甲氧羰基-苯甲基)-(5-戊基-吡啶-2-羰基)-胺]-哌啶-1-羧酸叔丁酯(77)的合成
根據(jù)制備化合物70描述的步驟，胺24(1.5g，4.3mmol)與酸67(915mg，4.73mmol)反應得到1.93g(86％)4-[(4-甲氧羰基-苯甲基)-(5-戊基-吡啶-2-羰基)-胺]-哌啶-1-羧酸叔丁酯(77)。LC-MStR＝1.09min；[M+H]+＝524.3。
4-{[(5-戊基-吡啶-2-羰基)-哌啶-4-基-胺]-甲基}-苯甲酸三氟醋酸甲酯(78)的合成
根據(jù)制備化合物71描述的步驟，衍生物77(1.93g，3.69mmol)Boc-去保護得到1.95g(定量的產(chǎn)量)4-{[(5-戊基-吡啶-2-羰基)-哌啶-4-基-胺]-甲基}-苯甲酸三氟醋酸甲酯(78)。LC-MStR＝0.80min；[M+H]+＝424.39。
4-{[[1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基]-(5-戊基-吡啶-2-羰基)-胺]-甲基}-苯甲酸甲酯(79)的合成
根據(jù)制備化合物72描述的步驟，前體78(1.56g，3.69mmol)與異戊醛(318mg，3.69mmol)反應得到1.81g(定量的產(chǎn)量)4-{[[1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基]-(5-戊基-吡啶-2-羰基)-胺]-甲基}-苯甲酸甲酯(79)。LC-MStR＝0.93min；[M+H]+＝494.54。
4-{[[1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基]-(5-戊基-吡啶-2-羰基)-胺]-甲基}-苯甲酸(80)的合成
將甲酯79(1.17g，2.39mmol)溶于甲醇(30ml)，隨后加入氫氧化鋰溶液(2M，4.83ml)并在室溫下，攪拌反應混合物14小時。加入棕檬酸液(10％)調節(jié)混合物pH為5，并在減壓下蒸發(fā)甲醇。用EtOAc(2×60ml)萃取剩余的水層。在硫酸鎂上干燥結合的有機層，過濾、并在減壓下濃縮得到1.03g(89％)合成的白色粉末4-{[[1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基]-(5-戊基-吡啶-2-羰基)-胺]-甲基}-苯甲酸(80)。LC-MStR＝0.82min；[M+H]+＝480.38。
5-戊基-吡啶-2-羧酸[4-(2，6-二氟-苯甲基甲氨酰)-苯甲基]-[1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基]-酰胺(81)的合成
實施例223 將酸80(50mg，0.104mmol)溶于乙腈(1ml)，隨后加入TBTU(36.8mg，0.115mmol)和DIPEA(40.49mg，0.313mmol)。并繼續(xù)攪拌5分鐘。加入2，6-二氟-苯甲基胺(17mg，0.115mmol)并繼續(xù)攪拌16小時。過濾反應混合物，并直接用制備性HPLC純化得到31.5mg(50％)5-戊基-吡啶-2-羧酸[4-(2，6-二氟-苯甲基甲氨酰)-苯甲基]-[1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基]-酰胺(81，實施例223)。LC-MStR＝0.94min；[M+H]+＝605.54。
根據(jù)該步驟制備實施例199～209和222～225。
4-[(4-氰基-苯甲基)-(5-戊基-吡啶-2-羰基)-胺]-哌啶-1-羧酸叔丁酯(82)的合成
根據(jù)制備化合物77描述的步驟，衍生物15(200mg，0.634mmol)與酸67(135mg，0.698mmol)反應得到263mg(84％)4-[(4-氰基-苯甲基)-(5-戊基-吡啶-2-羰基)-胺]-哌啶-1-羧酸叔丁酯(82)。LC-MStR＝1.09min；[M+H]+＝491.65。
5-戊基-吡啶-2-羧酸(4-氰基-苯甲基)-哌啶-4-基-三氟醋酸酰胺(83)的合成
根據(jù)制備化合物78描述的步驟，衍生物82(2.0g，4.08mmol)去保護得到2g(定量的產(chǎn)量)合成的5-戊基-吡啶-2-羧酸(4-氰基-苯甲基)-哌啶-4-基-三氟醋酸酰胺(83)。LC-MStR＝0.81min；[M+H]+＝391.34。
5-戊基-吡啶-2-羧酸(4-氰基-苯甲基)-[1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基]-酰胺的合成(84)
根據(jù)制備化合物72描述的步驟，前體83(1.595g，4.084mmol)與異戊醛(351mg，4.084mmol)反應得到1.88g(定量的產(chǎn)量)5-戊基-吡啶-2-羧酸(4-氰基-苯甲基)-[1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基]-酰胺(84)。LC-MStR＝0.91min；[M+H]+＝461.51。
5-戊基-吡啶-2-羧酸[4-(N-羥基-脒基)-苯甲基]-[1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基]-酰胺(85)的合成。
將腈84(2.17g，4.71mmol)溶于乙醇(40ml)，隨后加入鹽酸羥胺(1.14g，16.48mmol)和碳酸氫鈉(1.38g，16.48mmol)。反應混合物回流16小時。
在減壓下蒸發(fā)乙醇并加入水(30ml)。用EtOAc(5×40ml)萃取產(chǎn)物。用鹽水洗滌結合的有機層(70ml)，在硫酸鎂上干燥，過濾并在減壓下濃縮。用柱色譜法純化殘渣(硅膠，甲醇/DCM＝1/9)得到1.05g(45.2％)5-戊基-吡啶-2-羧酸[4-(N-羥基-脒基)-苯甲基]-[1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基]-酰胺(85)。LC-MStR＝0.73min；[M+H]+＝494.50。
5-戊基-吡啶-2-羧酸[1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基]-[4-(5-吡啶-3-基-[1，2，4]噁二唑-3-基)-苯甲基]-酰胺(87)的合成
實施例194 將3-吡啶基羧酸(86)(18.7mg，0.152mmol)溶于DMF(1ml)。加入TBTU(65mg，0.203mmol)，HOBt(3.1mg，0.02mmol)和DIPEA(39mg，0.304mmol)并繼續(xù)攪拌10分鐘，隨后加入化合物85(50mg，0.101mmol)。在室溫下繼續(xù)攪拌16小時，隨后在90℃下加熱反應混合物1小時。加入水(2ml)并用EtOAc(3×2ml)萃取產(chǎn)物。在硫酸鎂上干燥結合的有機層、過濾并在真空中濃縮。用制備性HPLC純化粗制物質得到34mg(58％)5-戊基-吡啶-2-羧酸[1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基]-[4-(5-吡啶-3-基-[1，2，4]噁二唑-3-基)-苯甲基]-酰胺(87，實施例194)。LC-MStR＝0.97min；[M+H]+＝581.59。
根據(jù)該步驟制備實施例194～198。
[1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基]-氨基甲酸叔丁酯(91)的合成
根據(jù)一般步驟D)，化合物88(10g，50mmol)與異戊醛(4.3g，50mmol)反應得到12.39g(92％)[1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基]-氨基甲酸叔丁酯(91)。LC-MStR＝0.70min；[M+H]+＝271.32。
1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基鹽酸胺(90)的合成
將化合物89(12g，44.4mmol)溶于DCM(130ml)并冷卻至0℃，隨后加入溶有HCl的二氧己環(huán)(4M，130ml)。在0℃下攪拌反應混合物90分鐘，然后在減壓下濃縮得到9.61g(82％)白色固體的1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基鹽酸胺(90)。LC-MStR＝0.21min；[M+H]+＝?jīng)]有檢測到峰值。
[5-(3，4-二氯-苯基)-呋喃-2-基甲基]-[1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基]-胺(92)的合成
根據(jù)一般步驟A)，化合物90(500mg，2.06mmol)與醛91(511mg，2.06mmol)反應得到813mg(定量的產(chǎn)量)[5-(3，4-二氯-苯基)-呋喃-2-基甲基]-[1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基]-胺(92)。LC-MStR＝0.73min；[M+H]+＝395.35。
N-[5-(3，4-二氯-苯基)-呋喃-2-基甲基]-N-[1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基]-4-戊基-苯甲酰胺(93)的合成
根據(jù)一般步驟B)，化合物(92)(82.56mg，0.209mmol)與?；?(40mg，0.19mmol)反應得到73.5mg(68％)N-[5-(3，4-二氯-苯基)-呋喃-2-基甲基]-N-[1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基]-4-戊基-苯甲酰胺(93，實施例220)。LC-MStR＝1.03min；[M+H]+＝569.19。
根據(jù)該步驟制備實施例210～221。
4-{[[1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基]-(4-戊基-苯甲酰)-胺]-甲基}-苯甲酸酰胺(94)的合成
將化合物30(2.5g，5.26mmol)溶于DMF(100ml)，并加入PyBOP(3.01g，5.78mmol)。在室溫下攪拌混合物5分鐘，冷卻至0℃，隨后加入DIPEA(2.92g，22.6mmol)和氯化銨(563mg，10.52mmol)。在室溫下攪拌反應混合物2小時，加入水(100ml)并用EtOAc(3×100ml)萃取產(chǎn)物。用鹽水(100ml)洗滌結合的有機層，在硫酸鎂上干燥、過濾并在減壓下蒸發(fā)溶劑。通過柱色譜法純化殘渣(硅膠，甲醇/DCM＝1/9)得到2.6g(定量的產(chǎn)量)白色固體的4-{[[1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基]-(4-戊基-苯甲酰)-胺]-甲基}-苯甲酸酰胺(94)。LC-MStR＝0.88min；[M+H]+＝478.47。
N-[1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基]-4-戊基-N-(4-硫代-氨甲?；?苯甲基)-苯甲酰胺(95)的合成
將伯酰胺衍生物94(2.51g，5.26mmol)溶于干燥的THF(50ml)并冷卻至0℃，隨后加入Lawesson’s試劑(1.06g，2.63mmol)。在0℃下攪拌反應混合物2小時，并在室溫下攪拌16小時，然后在減壓下濃縮并用柱色譜法純化殘渣(硅膠，甲醇/DCM＝5/95)得到1.29g(49％)綠色固體的N-[1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基]-4-戊基-N-(4-硫代-氨甲?；?苯甲基)-苯甲酰胺(95)。LC-MStR＝0.91min；[M+H]+＝494.5。
N-[1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基]-4-戊基-N-[4-(4-三-氟代甲基-噻唑-2-基)-苯甲基]-苯甲酰胺(96)的合成
實施例229 將硫代酰胺95(50mg，0.101mmol)溶于1，2-二甲氧基乙烷(1ml)，并加入碳酸氫鉀(81mg，0.81mmol)，在室溫下繼續(xù)攪拌10分鐘，隨后加入3-溴-1，1，1-三氟丙酮(60mg，0.304mmol)并在室溫下繼續(xù)攪拌30分鐘。將反應混合物冷卻至0℃，加入預備的2，6-二甲基吡啶(86.8mg，0.81mmol)和TFAA(85mg，0.405mmol)的1，2-二甲氧基乙烷(0.5ml)溶液。在0℃下繼續(xù)攪拌75分鐘，加入HCl水溶液(1M，1.5ml)，并用DCM(3×2ml)蒸發(fā)產(chǎn)物。在硫酸鎂上干燥結合的有機層、過濾并在減壓下濃縮。通過制備性HPLC純化殘渣得到31mg(52％)N-[1-(3-甲基-丁基)-哌啶-4-基]-4-戊基-N-[4-(4-三-氟代甲基-噻唑-2-基)-苯甲基]-苯甲酰胺(96，實施例229)。LC-MStR＝1.01min；[M+H]+＝586.41。
根據(jù)該步驟制備實施例229～232。
在下文專利申請部分的實施例所提及的最終化合物可通過上述合成方案的適當組合或通過使用上述其他引用的文獻步驟來制備。
b)實施例 表1
表1
表1
表2
表3
表4
表5
表6
表7
表8
表9
表10
表11
表12
表13
表14
表15
表16
表17
表18
表20
plasmepsin II & IV和人類組織蛋白酶D & E的熒光能量共振轉移(FRET)試驗 根據(jù)文獻報道選擇試驗條件。
FRET試驗在37℃下，在最終容積80μL的白色polysorp板(Fluoronunc，cat n°264572)中進行。
評價緩沖液由50mM乙酸鈉pH 5，12.5％(w/v)甘油和0.1％(w/v)BSA組成。該反應包含以下組分60μL評價緩沖液、4μL抑制劑(溶于DMSO)、8μL底質(來自BACHEM的M-2120)對最終濃度1μM和8μL酶(plasmepsinII、plasmepsin IV或組織蛋白酶E對每試管最終量0.015μg/ml，組織蛋白酶D對每試管最終量0.05μg/ml)。在稀釋皿中，在DMSO中預先稀釋抑制劑，并制備雙份六濃度。通常化合物試驗的最終濃度在1nM～100μM之間。使用50％DMSO-50％評價緩沖液稀釋底質，并使用評價緩沖液稀釋酶。該混合物在37℃下培養(yǎng)3小時，在1小時和3小時時使用來自BMG的FluoroStar Galaxy測定熒光，使用激發(fā)和放射分別過濾355和520nm。
在評價緩沖液中，在不使用底質和酶的情況下測定所有試驗物質的自身熒光，并從最終信號中減去該值。該化合物的抑制活性用IC50表示，其表示抑制50％最高的(不限制)酶活性的化合物濃度。
表格選擇實施例的IC50值 體外抗瘧疾活性惡性瘧原蟲體外試驗 使用次黃嘌呤摻合試驗測定抗惡性瘧原蟲的紅細胞內期體外活性。抗氯奎和乙胺嘧啶(惡性瘧原蟲K1)的一個菌株用于該試驗，所有的測試化合物與標準藥物氯奎(σC6628)和青蒿素(σ-36，159-3)比較活性?；衔镌贒MSO中稀釋至1mM，并加入到寄生蟲培養(yǎng)，在不含次黃嘌呤的RPMI 1640培養(yǎng)基中培養(yǎng)，補充HEPES(5.94g/L)、NaHCO3(2.1g/L)、新霉素(100U/mL)、Albumax(5g/L)，并在2.5％血流比容計時洗滌人類紅血球(0.3％parasitaemia)。在96孔微孔板中制備七套每個藥物的二倍稀釋液，并在濕潤的37℃大氣中，在4％CO2，3％O2，93％N2下培養(yǎng)。
48小時后，向板的每個孔中加入50μL的[3H]次黃嘌呤(0.5μCi)。該板在相同的條件下再次培養(yǎng)24小時。然后用β板細胞收集器(Wallac)收集板，并用蒸餾水洗滌。用10ml閃爍流體將干燥的過濾器插入塑料薄膜，并在β板液體閃爍計數(shù)器中計算。利用Microsoft Excel根據(jù)S形抑制曲線計算IC50值。
體內抗瘧疾的功效研究 用P.berghei菌株GFP-ANKA在第0天靜脈傳染的若干組三只雌性NMRI小白鼠(20～22g)，以此評價體內抗瘧疾活性。在對照小白鼠中，寄生蟲血癥一般在感染后第三天達到約40％，且對照小白鼠在感染5～7天后死亡。對于化合物處理的小白鼠，化合物可以用3mg/ml化合物在含水膠質媒介物中配制，或者用5mg/ml在吐溫80/乙醇(7％/3％)中配制。
化合物腹腔或subcoutaneously給藥，每天連續(xù)兩次劑量(BID)(2x，75mg/kg BID，感染后24和48小時)，或者每天連續(xù)四劑量(4×10mg/kg或4×50mg/kg，感染后3、24、48和72小時)。用雙BID劑量服法，在最后一次藥物治療24小時后，取1μL尾部血液，再懸浮中1ml PBS緩沖劑中，并用FACScan(BectonDickinson)通過計算100000紅細胞測定寄生蟲血癥。在感染后第4天，對四倍劑量服法的尾部血樣進行處理。對照組和治療組平均值的區(qū)別計算活性，其表示為相對于對照組的百分數(shù)。對于寄生蟲血癥降低0.1％，在FACS閥存在的寄生蟲在視覺上檢驗到。記錄下對于每種化合物處理的感染小白鼠的存活期。對于寄生蟲血癥小白鼠檢驗存活30天，隨后euthanise。如果動物在感染后存活30天，且沒有檢測到寄生蟲，那么認為化合物是治療藥物。
權利要求
1.一種選自包含式I的4-胺基哌啶的組的化合物
式I
其中
R1表示氫；烷基；烯基；炔基；環(huán)丙基；環(huán)戊基；環(huán)己基；環(huán)己烯基；可被單取代、二取代、三取代或四取代的苯基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基；可被單取代、二取代或三取代的吡啶基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；可被單取代或二取代的呋喃基，其中取代基獨立地選自甲基、羥基甲基和溴；可被甲基或氯單取代的噻吩基；苯并噻吩基；苯并呋喃基；喹啉基；異喹啉基；苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基；甲氧基-苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基；氯-苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基；2，2-聯(lián)苯乙基；2-苯基丙基；1-[2，6，6-三甲基-環(huán)己-1-烯基]-甲基；吡咯基；噻唑基或咪唑基；
n表示整數(shù)1、2或3；
表示
R2表示丁基、戊基或己基；或
如果
表示
Y表示
如果
表示
或者，如果
表示
Y表示
或可被單取代、二取代、三取代或四取代的苯基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基，或下列自由基
或者，如果
表示
或者，如果
表示
Y也可以表示可被單取代、二取代或三取代的吡啶基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；可被單取代或二取代的呋喃基，其中取代基獨立地選自甲基、羥基甲基和溴；可被甲基或氯單取代的噻吩基；苯并噻吩基；苯并呋喃基；喹啉基；異喹啉基；苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯基；2，2-聯(lián)苯乙基；2-苯基丙基；1-[2，6，6-三甲基-環(huán)己-1-烯基]-甲基；3-甲基丁基；苯氧基，其中苯基環(huán)可以被單取代、二取代、三取代或四取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基-羰基和羧基；吡啶基氧基，其中吡啶基環(huán)可以被單取代、二取代或三取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；或下列自由基
R3表示烷基；環(huán)烷基；-CF3、-CF3-烷基、烷氧基-烷基；烷氧基-羰基；羧基；苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基；甲氧基-苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基；氯-苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基；苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基-烷基；可被單取代、二取代、三取代或四取代的苯基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基；苯基烷基，其中苯基環(huán)可以被單取代、二取代、三取代或四取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基；苯氧基-甲基；可被單取代、二取代或三取代的吡啶基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；吡啶基烷基，其中吡啶基環(huán)可以被單取代、二取代或三取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；可被單取代或二取代的呋喃基，其中取代基獨立地選自甲基、羥基甲基、-CF3和鹵素；可被單取代或二取代的噻吩基，其中取代基獨立地選自甲基和鹵素；噻吩基-烷基；可被單取代或二取代的吡唑基，其中取代基獨立地選自甲基和鹵素；苯并噻吩基；苯并呋喃基；苯并咪唑基；苯并吡唑基；吲哚基；吲哚-烷基或嗎啉基-烷基；或如果
Y表示
R3除了表示上述可能的基團之外，還可以表示硫代嗎啉基；可被單取代或二取代的哌啶基，其中取代基獨立地選自烷基、羥基-烷基和羥基；哌啶基-烷基；嗎啉基或1-哌嗪基，其4位的氮原子可以被烷基、苯甲基、吡啶基或苯基取代，其中苯基可以被單取代、二取代、三取代或四取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基；
R4表示氫、甲基、乙基、異丙基、環(huán)丙基；
R5和R6表示氫；烷基；環(huán)烷基；可被單取代、二取代、三取代或四取代的苯基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基；苯基烷基，其中苯基環(huán)可以被單取代、二取代、三取代或四取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基；吡咯烷基-烷基；可被單取代、二取代或三取代的吡啶基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；吡啶基-烷基，其中吡啶基環(huán)可以被單取代、二取代或三取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；哌啶基-烷基；嗎啉基-烷基；4-甲基-哌嗪基-烷基；4-苯甲基-哌嗪基-烷基；烷氧基-烷基或雙烷基胺基-烷基，且可以是相同的或不同的；或R5和R6可以共同形成嗎啉基環(huán)；硫代嗎啉基環(huán)；可被單取代或二取代的哌啶基環(huán)，其中取代基獨立地選自甲基或羥基；1-哌嗪基，其4位的氮原子可以被烷基、苯甲基、吡啶基或苯基取代，其中苯基可以被單取代、二取代、三取代或四取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基；
且
表示
以及光學純的對映異構體、對映異構體的混合物、外消旋體、非對映異構體、非對映異構體的混合物、非對映異構的外消旋體、非對映異構外消旋體的混合物、和內消旋體、以及該化合物的鹽、溶劑化物和多晶型。
2.一種根據(jù)權利要求1的式II化合物
式II
其中
R1和
如上式I的定義，
Y表示
3.一種根據(jù)權利要求1的式III化合物
式III
其中
R1和
如上式I的定義，且
Y表示
或可被單取代、二取代、三取代或四取代的苯基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基，或下列自由基
或Y表示可被單取代、二取代或三取代的吡啶基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；可被單取代或二取代的呋喃基，其中取代基獨立地選自甲基、羥基甲基和溴；可被甲基或氯單取代的噻吩基；苯并噻吩基；苯并呋喃基；喹啉基；異喹啉基；苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯基；2，2-聯(lián)苯乙基；2-苯基丙基；1-[2，6，6-三甲基-環(huán)己-1-烯基]-甲基；3-甲基丁基；苯氧基，其中苯基環(huán)可以被單取代、二取代、三取代或四取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基-羰基和羧基；吡啶基氧基，其中吡啶基環(huán)可以被單取代、二取代或三取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；或下列自由基
4.一種根據(jù)權利要求1的式IV化合物
式IV
其中
R1和
如上式I的定義，且
Y表示
或可被單取代、二取代、三取代或四取代的苯基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基，或下列自由基
或Y表示可被單取代、二取代或三取代的吡啶基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；可被單取代或二取代的呋喃基，其中取代基獨立地選自甲基、羥基甲基和溴；可被甲基或氯單取代的噻吩基；苯并噻吩基；苯并呋喃基；喹啉基；異喹啉基；苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯基；2，2-聯(lián)苯乙基；2-苯基丙基；1-[2，6，6-三甲基-環(huán)己-1-烯基]-甲基；3-甲基丁基；苯氧基，其中苯基環(huán)可以被單取代、二取代、三取代或四取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基-羰基和羧基；吡啶基氧基，其中吡啶基環(huán)可以被單取代、二取代或三取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；或下列自由基
5.一種根據(jù)權利要求1的式V化合物
式V
其中
R1和
如上式I的定義，且
Y表示
或可被單取代、二取代、三取代或四取代的苯基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基羰基和羧基，或下列自由基
或Y表示可被單取代、二取代或三取代的吡啶基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；可被單取代或二取代的呋喃基，其中取代基獨立地選自甲基、羥基甲基和溴；可被甲基或氯單取代的噻吩基；苯并噻吩基；苯并呋喃基；喹啉基；異喹啉基；苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯基；2，2-聯(lián)苯乙基；2-苯基丙基；1-[2，6，6-三甲基-環(huán)己-1-烯基]-甲基；3-甲基丁基；苯氧基，其中苯基環(huán)可以被單取代、二取代、三取代或四取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、氰基、烷氧基-羰基、烷基-羰基和羧基；吡啶基氧基，其中吡啶基環(huán)可以被單取代、二取代或三取代，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、羥基、烷氧基-羰基和羧基；或下列自由基
6.一種根據(jù)權利要求1的式VI化合物
式VI
其中
R2戊基或己基。
7.一種根據(jù)權利要求1的式VII化合物
式VII
其中Y表示
8.一種根據(jù)權利要求1的化合物，其中
R1表示烷基；環(huán)丙基；環(huán)己烯基；可被烷氧基或羥基單取代的苯基；吡啶基；可被羥基-甲基單取代的呋喃基；噻吩基；吡咯基；噻唑基或咪唑基；
n表示1、2或3；
表示
R2表示戊基或
如果
表示
Y表示
如果
表示
或者如果
表示
Y表示
或可被單取代或二取代的苯基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、羥基、氰基和羧基，或下列自由基
或者如果
表示
或者如果
表示
Y也可以表示下列自由基
R3表示烷基；環(huán)烷基；-CF3；CF3-烷基-；烷氧基-烷基；烷氧基-羰基；可被單取代、二取代或三取代的苯基，其中取代基獨立地選自鹵素、烷基、烷氧基、-CF3、-OCF3、氰基；苯基烷基，優(yōu)選苯甲基或苯基乙基，其中苯基環(huán)可以被單取代或二取代，其中取代基獨立地選自烷基、鹵素、烷氧基、-CF3；苯氧基甲基；可被烷基或烷氧基單取代的吡啶基；吡啶基烷基，二取代的呋喃基，其中取代基獨立地選自甲基和-CF3；可被單取代或二取代的噻吩基，其中取代基獨立地選自鹵素；噻吩基-烷基；二取代的吡唑基，其中取代基獨立地選自甲基和鹵素；苯并噻吩基；苯并咪唑基；苯并吡唑基；吲哚-烷基或嗎啉基-烷基；苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基；苯并[1，3]二氧雜環(huán)戊烯-5-基-烷基；
R4表示氫或甲基；
R5和R6表示烷基；苯基烷基，或吡啶基；或R5和R6共同形成嗎啉基環(huán)；硫代嗎啉基環(huán)；哌啶基環(huán)；1-哌嗪基，其4位的氮原子可以被烷基、苯甲基、吡啶基取代；
表示
9.一種根據(jù)權利要求1的化合物，其選自下述化合物所組成的組
10.一種根據(jù)權利要求1的化合物，其選自下述化合物所組成的組
11.藥物組合物，其包含如權利要求1～10任一項所述的化合物以及藥學上可接受的載體材料。
12.根據(jù)權利要求1～10任一項所述的化合物，或根據(jù)權利要求11的組合物用作藥物。
13.根據(jù)權利要求1～10任一項所述的化合物用于制備治療和/或預防原蟲感染的藥物組合物的用途。
14.根據(jù)權利要求13治療和/或預防瘧疾的用途。
全文摘要
新的式I的取代4-胺基哌啶衍生物，其中n、R1、Y，和如權利要求1定義，以及光學純的對映異構體、對映異構體的混合物、外消旋體、非對映異構體、非對映異構體的混合物、非對映異構的外消旋體、非對映異構外消旋體的混合物、和內消旋體、以及該化合物的鹽、溶劑化物和多晶型，其顯示出有效的寄生蟲天冬氨酸蛋白酶抑制特性，并因此可用于制備作為抗瘧疾藥品的藥物組合物。
文檔編號C07D211/58GK101208302SQ200580040599
公開日2008年6月25日 申請日期2005年11月21日 優(yōu)先權日2004年11月25日
發(fā)明者克里斯托夫·博斯, 奧利維爾·考民伯伊夫, 考里納·格里索斯托米, 托馬斯·韋勒, 丹尼爾·比爾, 拉斯·普雷 申請人:?？铺厝R茵藥品有限公司